CN109633009A

CN109633009A - 一种丹参及其提取物的质量控制方法

Info

Publication number: CN109633009A
Application number: CN201811625167.1A
Authority: CN
Inventors: 刘振杰; 唐红珍; 银胜高
Original assignee: Guangxi University of Chinese Medicine
Current assignee: Guangxi University of Chinese Medicine
Priority date: 2018-12-28
Filing date: 2018-12-28
Publication date: 2019-04-16

Abstract

本发明涉及一种丹参及其提取物的质量控制方法。所述质量控制所检测的有效成分至少包括丹酚酸A、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮2A、丹参素，其中，以丹酚酸B作为内标物。上述方法通过利用丹酚酸B作为内标物，用内标物与其他成分的校正因子进行多组分定量分析，以确定其他有效成分的含量。通过验证，该方法稳定，RSD均小于5％。本发明所提供的质量控制方法具有良好的精确度，稳定性和可靠性，可以很好为丹参药材的多组分含量测定提供方法。此外，本方法能够同时测定水溶性及脂溶性成分，解决对照品货源紧缺和检测成本昂贵的问题。因此，为了确保药物疗效和临床安全用药，本发明所提供的质量控制方法将成为的多组分中药及其制剂的质量控制的趋势。

Description

一种丹参及其提取物的质量控制方法

技术领域

本发明涉及中药成分分析领域，具体涉及一种丹参及其提取物的质量控制方法。

背景技术

中药具有多成分、多功效的作用特点，中药的质量难以通过单一成分表达，同步的多成分质量控制模式出现，迅速扩大到广泛应用阶段，在现实中，对照品供应与需求存在矛盾，在实际生产、科研、监督中，多指标质量控制模式的应用又受到检测成本高昂的限制，所以，既能实现多成分的质量控制，又能克服对照品紧缺和检测成本高的困难的一测多评的方法目前仍是空白。

丹参中有较多成分，单一的成分测定不能反应丹参质量，药典规定对丹参中丹酚酸B，丹参酮Ⅰ、二氢丹参酮Ⅰ、丹参酮ⅡA等多指标进行控制，也有一些研究对丹参中更多的成分进行了一测多评分析，然而，这些研究都是将水溶性成分(丹参素、丹酚酸等)与脂溶性成分(丹参酮)分开进行测定，没有完全实现丹参的“一测多评”。

2015年版《中国药典》以丹酚酸B为其水溶性成分的检测指标，虽然丹酚酸B的含量较高，可是却不一定能完全反映和控制丹参的质量，根据传统中医的整体观，现行标准要求对中药材进行指标性的多药效的成分的综合控制。另外，由于对照品价格高昂和货源不足等现象，如何在对照品提供不上来的情况下，能够对中药丹参脂溶性和水溶性成分的进行整体测定，是目前多成分中药，特别是丹参，质量控制亟待解决的技术困扰和关键难题。

因此，本研究以丹酚酸类中价格相对低廉，且含量最高的丹酚酸B作为内标，选取丹参药材或丹参制剂中常见指标性成分如：丹酚酸B、隐丹参酮、丹参素、丹参酮ⅡA等，进行一测多评的研究。

发明内容

本发明提供一种丹参及其提取物的质量控制方法，其中，质量控制所检测的有效成分至少包括丹酚酸A、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮2A、丹参素，其中，以丹酚酸B作为内标物。

进一步地，所述有效成分包括丹酚酸A、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、二氢丹参酮、丹参酮、丹参酮2A、隐丹参酮。

所述质量控制方法的步骤包括：

1)对照品的制备：所述对照品为含有所述有效成分的甲醇-水溶液；

2)高效液相色谱分析条件：

流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸；

或，流动相A为甲醇，流动相B为水；

或，流动相A为乙腈，流动相B为乙腈-水溶液；

或，流动相A为甲醇，流动相B为0.2％甲酸-水溶液；

梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1：0-20min，流动相A：B＝10％-28％；

梯度2：20-25min，流动相A：B＝28％-48％；

梯度3：25-40min，流动相A：B＝48％-60％；

梯度4：40-45min，流动相A：B＝60％-10％；

检测波长为270nm；

进样量为3-5μL；

流速为0.5-0.8ml/min；

3)绘制标准校正曲线：取不同体积的所述对照品连续进样，以所述高效液相色谱测定色谱图并绘制所述内标物丹酚酸B的浓度-峰面积标准校正曲线y＝ax+b，其中y为丹酚酸B峰面积，x为丹酚酸B浓度；

4)试供品的制备：取0.1-0.15g丹参粉末置于50ml甲醇-水混合溶液，称定重量，经提取后，再称定重量，并以所述甲醇-水混合溶液补足重量，再以所述甲醇-水混合溶液稀释一倍后，过滤取滤液即得试供品；

或，取0.01-0.03g丹参提取物充分溶解于50ml甲醇-水混合溶液，过滤取滤液即得试供品；

5)试供品中成分的测定：将所述试供品按照步骤3)相同的条件注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，以步骤3)所得标准校正曲线计算试供品中内标物丹酚酸B的浓度，再结合校正因子带入公式以计算其他有效成分的浓度；

所述公式中fs/i为化合物i的校正因子，As为丹酚酸B的峰面积，Cs为丹酚酸B的浓度，Ai为试供品中化合物i的峰面积，Ci为试供品中化合物i的浓度，其中化合物i为其他有效成分。

上述方法通过利用丹酚酸B作为内标物，用内标物与其他成分的相对校正因子进行多组分定量分析(QAMS)，以确定其他8个成分的含量。通过一定变化的条件下的适应性试验，该方法稳定，RSD均小于5％。通过方法学验证，本发明所提供的一测多评的方法具有良好的精确度，稳定性和可靠性，可以很好为丹参药材的多组分含量测定提供方法。此外，一测多评的方法能够同时测定水溶性及脂溶性成分，对《中国药典》的含量测定方法将是一个很好的补充，解决对照品货源紧缺和检测成本昂贵的问题。因此，为了确保药物疗效和临床安全用药，一测多评的质量控制方法将成为的多组分中药及其制剂的质量控制的趋势，格外适合工业化生产，适宜推广利用。

为进一步优化所述方法，以获得更为准确的检测结果，本发明还提出了如下改进：

关于步骤1)，对照品的制备，所述对照品为含有丹酚酸B0.10-0.15mg/mL、丹参素0.04-0.06mg/mL、原儿茶醛0.04-0.06mg/mL、迷迭香酸0.04-0.06mg/mL、丹酚酸A0.04-0.06mg/mL、二氢丹参酮0.01-0.02mg/mL、丹参酮0.01-0.02mg/mL、丹参酮2A0.01-0.02mg/mL、隐丹参酮0.01-0.02mg/mL的甲醇-水溶液；

选择上述对照品，能够使9个对照品溶解完全，且对照品的浓度大小范围够宽，以尽可能地获得准确的标准曲线和校正因子。

优选为含有丹酚酸B 0.1mg/mL、丹参素0.05mg/mL、原儿茶醛0.05mg/mL、迷迭香酸0.05mg/mL、丹酚酸A0.05mg/mL、二氢丹参酮0.02mg/mL、丹参酮0.02mg/mL、丹参酮2A0.02mg/mL、隐丹参酮0.02mg/mL的甲醇-水溶液；

优选地，所述甲醇-水溶液为70-80％甲醇的水溶液，更优选为70％甲醇-水溶液。

关于步骤2)，高效液相色谱分析条件，采用以下流动相体系：流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸-水溶液时能够具有良好的峰形和分离度；

流速控制在0.6ml/min为最佳。

关于步骤3)，取不同体积的所述对照品连续进样，其中对照品的体积分别优选为1μL，2μL，5μL，10μL，15μL，20μL；

优选对每个体积测定分析多个数据(以3-5个为优)，将多个数据的平均值以标准校正曲线的形式建立回归方程y＝ax+b，其中y为峰面积，x为浓度。

关于步骤4)，试供品的制备，所述试供品的配制过程采取精密配制，本领域技术人员应当理解其配制方法，不做特殊限定。在此以取0.15g丹参粉末为例，阐述其基本操作：精密称定0.15g丹参粉末加入甲醇-水混合溶液50ml，密塞，称定重量，经提取处理后，放冷，再称定重量，用甲醇-水混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，移至10ml量瓶中，加甲醇-水混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取续滤液，即得试供品。

所述提取为超声或回流提取方法，优选为超声提取。进一步地，所述超声提取为在功率14W，频率42kHz下超声0.5-2h，以1h为最佳。

所述甲醇-水混合溶液为50-80％甲醇的水溶液，优选为70％甲醇的水溶液。发明人经研究发现，以70％甲醇-水作为提取溶剂，同时配合超声提取，能够较为完全地提取丹参的有效成分，对丹参的脂溶性成分和水溶性成分都能够很好的提取较完全，从而使检测方法更为准确。

最优选，采用70％甲醇的水溶液，在功率14W，频率42kHz下超声1h丹参药材的提取最为完全。

所述丹参粉末优选过80目筛(250μm)。

作为本发明的优选技术方案，所述校正因子分别为：

丹参素0.77、原儿茶醛0.272、迷迭香酸0.527、丹酚酸A0.589、二氢丹参酮0.429、丹参酮I 0.321、丹参酮2A0.298、隐丹参酮0.320。

附图说明

图1为对照图谱(左)及试供品(右)HPLC液相色谱图；

上述图谱是在安捷伦1200高效液相色谱条件下检测的，各个峰所对应的化合物分别为图中：1为丹参素的峰；2为原儿茶醛的峰；3为迷迭香酸的峰；4为丹酚酸B的峰；5为丹酚酸A的峰；6为二氢丹参酮的峰；7为丹参酮1的峰；8为隐丹参酮的峰；9为丹参酮2A峰。

具体实施方式

以下实施例用于说明本发明，但不用来限制本发明的范围。

以下各实施例所采用的主要仪器为：Mettler Toldeo电子天平(XS–205型)，安捷伦高效液相色谱仪(Agilent 1200，USA)。Zorbax eclipse plus C-18反向色谱柱(3.5μm，2.1×100mm)，10～100μL移液枪(Pipeman)，超声仪，40KHz(南京新辰生物科技有限公司制造)，超纯水制备系统(Millipore,美国)。

丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、丹酚酸A、二氢丹参酮、丹参酮、丹参酮2A、隐丹参酮购买于成都德尔菲公司。甲醇、乙腈购买于sigema公司。

高效液相色谱分析条件为：进样量5μL，流速0.6mL·min-1，检测波长为270nm。流动相为0.1％的磷酸在水(A)和乙腈(B)，优化梯度程序如下：0-20min，10％-28％B；20-25min，28％-48％B；25-40min，48％-60％B；40-45min，60％-10％B

实施例1

本实施例提供一种丹参及其提取物的质量控制方法，其中，质量控制所检测的有效成分包括丹酚酸A、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、二氢丹参酮、丹参酮1、丹参酮2A、隐丹参酮。

其具体步骤如下：

1)高效液相色谱分析条件：

流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸

梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1：0-20min，流动相A：B＝10％-28％；

梯度2：20-25min，流动相A：B＝28％-48％；

梯度3：25-40min，流动相A：B＝48％-60％；

梯度4：40-45min，流动相A：B＝60％-10％；

检测波长为270nm；

进样量5μL；

流速0.6ml/min；

柱温为室温；

2)对照品的制备：

精密称定对照品丹酚酸B 10mg、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A各5mg、二氢丹参酮、丹参酮、丹参酮2A、隐丹参酮各2mg，分别加入10mL溶液(7份甲醇:3份水)溶解，储存于4℃待用。

将储备液分别吸取1mL加入10mL容量瓶中，加入溶液稀释至10mL溶液，制备成含有以下浓度的化合物的对照品溶液：丹酚酸B 0.1mg/mL、丹参素0.05mg/mL、原儿茶醛0.05mg/mL、迷迭香酸0.05mg/mL、丹酚酸A0.05mg/mL、二氢丹参酮0.02mg/mL、丹参酮0.02mg/mL、丹参酮2A 0.02mg/mL、隐丹参酮0.02mg/mL，所有的样品溶液都用棕色瓶子装。

3)绘制标准校正曲线：

通过连续进样对照品溶液(1μL，2μL，5μL，10μL，15μL，20μL)来制定标准校正曲线。每一个体积测定分析了一式三份，将平均值以校准曲线的形式建立回归方程y＝567.49x-0.4236，其中y为化合物峰面积，x为化合物浓度。

检测限为信号/噪音(S/N)比为3:1，定量限为信号/噪音(S/N)比为10:1。

其中校正因子如下：

通过不同的进样量以测定9个成分在进样量不同时的校正因子，按照公式以计算6个化合物的校正因子，取校正因子的平均值作为最终的校正因子。式中As为内标物的峰面积，Cs为内标物的浓度，Ai为化合物i的峰面积，Ci为化合物i的浓度，经计算，如表1所示：

表1.丹参中的8个成分相对丹酚酸B的校正因子

4)试供品的制备：

将丹参样品打粉并过80目筛(250μm)。取0.15g丹参药材粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水(8:2)混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率14W，频率42kHz)60分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-水(7份甲醇:3份水)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，移至10ml量瓶中，加甲醇-水(7份甲醇:3份水)混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得。

5)试供品中成分的测定：

将步骤4)所得的试供品按照步骤1)的条件注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，得到试供品中内标物的峰面积，带入步骤3)所得标准校正曲线，得到试供品中内标物的浓度。

再根据校正因子以公式计算丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A、二氢丹参酮、丹参酮、丹参酮2A、隐丹参酮的浓度。

实施例2

本实施例提供一种丹参及其提取物的质量控制方法，其中，质量控制所检测的有效成分包括丹酚酸A、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸B、二氢丹参酮、丹参酮、丹参酮2A、隐丹参酮。

其具体步骤如下：

1)高效液相色谱分析条件：

流动相A为0.1％的磷酸-水溶液，流动相B为乙腈；

梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1：0-20min，流动相A：B＝10％-28％；

梯度2：20-25min，流动相A：B＝28％-48％；

梯度3：25-40min，流动相A：B＝48％-60％；

梯度4：40-45min，流动相A：B＝60％-10％；

检测波长为270nm；

进样量5μL；

流速0.6ml/min；

柱温为室温；

2)对照品的制备：

将储备液分别吸取1mL加入10mL容量瓶中，加入溶液稀释至10mL溶液，制备成含有以下浓度的化合物的对照品溶液：丹酚酸B 0.1mg/mL、丹参素0.05mg/mL、原儿茶醛0.05mg/mL、迷迭香酸0.05mg/mL、丹酚酸A 0.05mg/mL、二氢丹参酮0.02mg/mL、丹参酮0.02mg/mL、丹参酮2A0.02mg/mL、隐丹参酮0.02mg/mL，所有的样品溶液都用棕色瓶子装。

3)绘制标准校正曲线：校正曲线通过连续进样不同体积的对照品溶液(1μL，2μL，5μL，10μL，15μL，20μL)来制定标准校正曲线。每一个体积测定分析了一式三份，将平均值以校准曲线的形式建立回归方程y＝567.49x-0.4236，其中y为化合物峰面积，x为化合物浓度。

其中校正因子如下：

丹参素3.41、原儿茶醛1.06、迷迭香酸3.7、丹酚酸A2.07、二氢丹参酮1.84、丹参酮1.31、丹参酮2A1、隐丹参酮1.18。

4)试供品的制备：

将丹参样品打粉并过80目筛(250μm)。取0.15g丹参药材粉末，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入甲醇-水(8:2)混合溶液50ml，密塞，称定重量，超声处理(功率14W，频率42kHz)30分钟，放冷，再称定重量，用甲醇-水(8:2)混合溶液补足减失的重量，摇匀，滤过，精密量取续滤液5ml，移至10ml量瓶中，加甲醇-水(8:2)混合溶液稀释至刻度，摇匀，滤过，取滤液，即得。

5)试供品中成分的测定：

实施例3

本实施例提供一种丹参及其提取物的质量控制方法，与实施例1的区别仅在于，

所述步骤2)中，流动相A为甲醇，流动相B为水。

实施例4

所述步骤4)中，所述超声提取的时间为1.5h。

实施例5

所述步骤4)中，所述超声提取的时间为2h。

试验例1

本试验例对本发明实施例1所述的丹参及其提取物的质量控制方法进行方法学验证：分别进行了线性、灵敏度、精密度、稳定性和适应性分析。

1、线性、检测范围的测定

按照实施例1步骤1)、2)、3)相同的步骤进行处理，所得结果见表2。对照品图谱及丹参试供品的图谱见图1。

如表2所示：

表2线性、检测范围的测定

在一样的范围内，标准曲线有很好的相关系数R＞0.9999。9个成分的检测限和定量限的范围在0.0526-1.102之间，具有较高的灵敏度。

2、日内/日间精密度考察

通过日内/日间精密度的测定考察方法的精密度。同一样品连续进样6次得到日内精密度，同一样品连续两天进样测定得到日间精密度。将同一样品室温下于0h,2h,4h,8h,10h,12h和24h测定得到稳定性。如表3所示，含量的变异系数用相关峰面积的RSD值表示。

日内/日间精密度考察，9个成分峰面积的RSD值分别少于1.85％和1.98％，重复性小于5％。

稳定性试验表明，样品在24小时内是稳定的(RSD小于5％)。平均回收率范围为94-98.5％，表明该测定方法同时具有高精确度。

3、重复性的测定

用同样方法分别制定6个丹参药材的样品(山东)，来确定方法的重复性。重复性的结果为9个峰的峰面积的RSD值，如表3所示。

以下试验例共采集共10批次样品，产地包括：甘肃(S1)、河南1(S2)、河南2(S3)、河北1(S4)、山东(S5)、山西(S6)、河北2(S7)、陕西(S8)、河北3(S9)、四川(S10)。所有样品经鉴定，样品为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥的根及根茎，是正品的药材。

4、回收率的测定

将已知含量的混合对照品加入一个批次的丹参药材中，重复6次。样品制备方法及测定方法同实施例1所记载。回收率计算公式为：回收率％＝(总测量-原来量)/加入量×100％，结果如表3所示。

表3精密度、稳定性、重复率及回收率测试数据

试验例2

本试验例提供实施例1提供的丹参及其提取物的质量控制方法(QAMS)以及由常规外标法(EMS)进行质量控制方法的测定对比。

本试验例中所述样品共10批次，产地包括：甘肃(S1)、河南1(S2)、河南2(S3)、河北1(S4)、山东(S5)、山西(S6)、河北2(S7)、陕西(S8)、河北3(S9)、四川(S10)。

所有样品经鉴定，样品为唇形科植物丹参Salvia miltiorrhiza Bge.的干燥的根及根茎，是正品的药材。

检测结果如表4所示。

虽然，上文中已经用一般性说明、具体实施方式及试验，对本发明作了详尽的描述，但在本发明基础上，可以对之作一些修改或改进，这对本领域技术人员而言是显而易见的。因此，在不偏离本发明精神的基础上所做的这些修改或改进，均属于本发明要求保护的范围。

Claims

1.一种丹参及其提取物的质量控制方法，其特征在于，质量控制所检测的有效成分至少包括丹酚酸A、丹酚酸B、迷迭香酸、丹参酮2A、丹参素，其中，以丹酚酸B作为内标物。

2.根据权利要求1所述的质量控制方法，其特征在于，所述质量控制所检测的有效成分包括丹酚酸B、丹参素、原儿茶醛、迷迭香酸、丹酚酸A、二氢丹参酮、丹参酮、丹参酮2A、隐丹参酮。

3.根据权利要求1或2所述的质量控制方法，其特征在于，步骤包括：

2)高效液相色谱分析条件：

流动相A为乙腈，流动相B为0.1％甲酸；

或，流动相A为甲醇，流动相B为水；

或，流动相A为乙腈，流动相B为乙腈-水溶液；

或，流动相A为甲醇，流动相B为0.2％甲酸-水溶液；

梯度洗脱的程序及流动相A、B的体积百分比如下：

梯度1：0-20min，流动相A：B＝10％-28％；

梯度2：20-25min，流动相A：B＝28％-48％；

梯度3：25-40min，流动相A：B＝48％-60％；

梯度4：40-45min，流动相A：B＝60％-10％；

检测波长为270nm；

进样量为3-5μL；

流速为0.5-0.8ml/min；

3)绘制标准校正曲线：取不同体积的所述对照品连续进样，以所述高效液相色谱测定色谱图并绘制所述内标物丹酚酸B的浓度-峰面积标准校正曲线y＝ax+b，其中y为峰面积，x为浓度；

或取0.01-0.03g丹参提取物充分溶解于50ml甲醇-水混合溶液，过滤取滤液即得试供品；

5)试供品中成分的测定：将所述试供品按照步骤3)相同的条件注入高效液相色谱仪进行测定，获得色谱图，以步骤3)所得标准校正曲线计算试供品中内标物丹酚酸B的浓度，再分别结合校正因子带入公式以计算其他有效成分的浓度；

所述公式中f^s/i为化合物i的校正因子，As为丹酚酸B的峰面积，Cs为丹酚酸B的浓度，Ai为试供品中化合物i的峰面积，Ci为试供品中化合物i的浓度，其中化合物i为除丹酚酸B以外的其他有效成分。

4.根据权利要求3所述的质量控制方法，其特征在于，步骤1)中，所述对照品为含有丹酚酸B 0.10-0.15mg/mL、丹参素0.04-0.06mg/mL、原儿茶醛0.04-0.06mg/mL、迷迭香酸0.04-0.06mg/mL、丹酚酸A 0.04-0.06mg/mL、二氢丹参酮0.01-0.02mg/mL、丹参酮0.01-0.02mg/mL、丹参酮2A 0.01-0.02mg/mL、隐丹参酮0.01-0.02mg/mL的甲醇-水溶液。

5.根据权利要求4所述的质量控制方法，其特征在于，所述对照品为含有丹酚酸B0.1mg/mL、丹参素0.05mg/mL、原儿茶醛0.05mg/mL、迷迭香酸0.05mg/mL、丹酚酸A 0.05mg/mL、二氢丹参酮0.02mg/mL、丹参酮0.02mg/mL、丹参酮2A 0.02mg/mL、隐丹参酮0.02mg/mL的甲醇-水溶液。

6.根据权利要求3-5任一项所述的质量控制方法，其特征在于，步骤2)中，所述高效液相色谱分析条件，采用以下流动相体系：流动相A为甲醇，流动相B为0.2％甲酸-水溶液。

7.根据权利要求6所述的质量控制方法，其特征在于，流速控制在0.6ml/min。

8.根据权利要求3-7任一项所述的质量控制方法，其特征在于，步骤3)，取不同体积的所述对照品连续进样，所述对照品的体积分别为1μL，2μL，5μL，10μL，15μL，20μL；

优选对每个体积测定分析3-5个数据，将所得数据的平均值以标准校正曲线的形式建立标准校正曲线。

9.根据权利要求3-8任一项所述的质量控制方法，其特征在于，步骤4)中，所述提取为超声或回流提取方法；

优选为超声提取，所述超声提取为在功率14W，频率42kHz下超声0.5-2h；

和/或，所述甲醇-水混合溶液为50-80％甲醇的水溶液，优选为70％甲醇的水溶液。

10.根据权利要求3-9任一项所述的质量控制方法，其特征在于，所述校正因子分别为：

丹参素0.77、原儿茶醛0.272、迷迭香酸0.527、丹酚酸A0.589、二氢丹参酮0.429、丹参酮I 0.321、丹参酮2A 0.298、隐丹参酮0.320。