CN103604898B - 益心舒制剂的指纹图谱检测方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种益心舒制剂的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，所述的指纹图谱检测方法是以五味子醇甲对照品为参照，采用高效液相色谱法测定其指纹图谱。本发明所提供的方法建立的益心舒制剂HPLC指纹图谱与对照图谱的相似度均大于0.9，能有效的表征其质量，有利于全面监控产品的质量；本发明建立了益心舒制剂HPLC特征指纹图谱共有模式，标定了15个共有峰，建立的指纹图谱技术含量高，避免了益心舒制剂质量控制的单一性和片面性，减少了人为处理产品质量达标的可能性。
Description
技术领域
本发明涉及一种益心舒制剂的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，属于中药检测技术领域。
背景技术
心脑血管疾病是严重危害人类的常见疾病。近年来，由于社会的发展、工作、生活、饮食结构及环境的变化，心脑血管疾病呈上升趋势。对于心血管疾病的治疗，虽然中药单靶点的作用强度低于西药，但其多途径、多靶点、动态整体治疗、毒副作用小的特点则远非西药所能企及，疗效确切的中成药的综合治疗效果要超过西药。益心舒制剂多用来治疗心血管疾病，例如益心舒胶囊、益心舒颗粒、益心舒片、益心舒丸、益心舒注射制剂等。这些益心舒制剂（均含有人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参等药材）因其配方不同，或者配方比例不同，或者提取精制方法不同，或者剂型不同，治疗效果也有所差异。另外由于这些益心舒制剂的质量控制方法不够全面，难以全面表征他们的物理化学特征。因此，对益心舒制剂的提取精制方法、质量控制方法进行改进成为人们积极研究的课题。
目前，对益心舒制剂的鉴定，往往是选取益心舒制剂的一两种中药成分进行鉴定，比如申请号为200910102647.4、名称为“益心舒中药制剂中麦冬的质量控制方法”，公开了一种对益心舒中药制剂中麦冬进行鉴定的方法；申请号为200910102648.9、名称为“益心舒中药制剂中五味子的质量控制方法”，公开了一种对益心舒中药制剂中五味子进行鉴定的方法；还有一些文献公开了对益心舒中药制剂中人参、丹参、川芎、黄芪、山楂中的一种或多种进行鉴别的方法。
中药指纹图谱是指某种中药材或中成药中所共有的、具有特征性的某类或数类成分的色谱或光谱的图谱。在现阶段，中药的有效成分绝大多数没有明确的情况下，中药指纹图谱对于有效控制中药材或中成药的质量具有重要的意义。日本汉方药主要生产企业在20世纪80年代就已经在企业内部采用高效液相指纹图谱控制质量。德国、法国在对银杏叶提取物联合开发的过程中，发现银杏叶提取物的医疗作用是提取物所得物质群的整体作用结果，而对这一个整体的质量控制，亦采用高效液相指纹图谱方法。美国最近几年也明确把指纹图谱作为混合物群的质量控制方法。随着研究的深入，人们发现，作为中医理论的实践产物，中药，尤其是复方中药，其中所含的任一种成分都不能代表其整体疗效。人们逐渐认识到，现行的参照西药（合成药）质量控制模式的质量标准不能恰当的反映中药内在的质量。从先行的质 量控制模式向一种综合的、宏观的、可量化的鉴别与主要有效成分含量测定结合已是发展的趋势。
益心舒制剂是由人参、麦冬、五味子等制成的，临床上用于治疗气阴两虚、心悸脉结代、胸闷不舒、胸痛及冠心病、心绞痛等症，其治疗效果已经得到临床的验证，而是否能够保证药物的质量以及益心舒制剂中有效成分含量，是决定益心舒制剂疗效的基础。如果用一两种人参或五味子等的活性成分来说明益心舒制剂的内在质量，具有一定的片面性，更不用说无药效的指标成分了。要控制益心舒制剂的功效，只针对其一两个化学成分进行表征和控制是不够的，必须对它的物质群整体予以控制。所以，除了“微观分析”外，还应该用某种“宏观分析”方法，从整体上有效的表征中药质量。指纹图谱作为中草药及其提取物的质量控制方法，目前已经成为国际共识。现在对五味子中活性成分如无五味子醇甲、五味子醇乙等的测定方法较多，对丹参中活性成分如丹参酮、丹参素等的测定方法较多，但如何能从更宏观的角度以益心舒制剂中化学成分为指标建立宏观指纹图谱的方法却未见报道。
发明内容
本发明的目的在于，提供一种益心舒制剂的指纹图谱检测方法及其指纹图谱，通过此方法可以保证益心舒制剂的质量稳定性、一致性和可控性，从而确保益心舒制剂的安全性和有效性。
本发明中所述的益心舒制剂由人参200g，麦冬200g，五味子133g，黄芪200g，丹参267g，川芎133g和山楂200g制备而成。具体的制备方法为：称取上述重量的人参，粉碎成细粉，备用；称取上述重量的五味子和丹参，用85%乙醇回流提取两次，第一次3小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，减压回收乙醇并浓缩为80℃的相对密度为1.25～1.30的浸膏；其余四味药材加水煎煮两次，第一次2.5小时，第二次1.5小时，滤过，合并滤液，滤液浓缩为80℃的相对密度为1.10～1.15的浸膏；加入一倍量的85%乙醇，混匀，静置，滤过，滤液回收乙醇并浓缩至适量，与上述的五味子和丹参的提取物合并同时加入上述的人参细粉，混匀，干燥，加入适量辅料，按照常规方法制备成相应的益心舒制剂。
为解决上述技术问题，本发明采用如下的技术方案：一种益心舒制剂的指纹图谱检测方法，以五味子醇甲对照品为参照，采用高效液相色谱法测定其指纹图谱。
具体的，所述的益心舒制剂的指纹图谱检测方法包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒制剂或其内容物2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇15～25ml，超声提取20～40min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；
（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒制剂的指纹图谱。
前述方法中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速0.5～1.5ml·min-1，柱温28～42℃，检测波长185～240nm；理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
优选的，所述的益心舒制剂的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒制剂或其内容物2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇20ml，超声提取30min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒制剂的指纹图谱。
所述高效液相色谱测定的色谱条件优选为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速1.0ml·min-1，柱温30，℃检测波长210nm，理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
前述的益心舒制剂的指纹图谱检测方法中，梯度洗脱过程中，流动相A、B的比例变化为：0～30min，A相20%，B相80%；30～60min，A相20%-43%，B相80%-57%；60～70min，A相43%-53%，B相57%-47%；70～85min，A相53%，B相47%；85～100min，A相53%-70%，B相47%-30%；100～120min，A相70%-90%，B相30%-10%；即梯度洗脱程序如下表：
表1
。
如前述益心舒制剂的指纹图谱检测方法得到的益心舒制剂指纹图谱，所述图谱中有15个共有峰。
与现有技术相比，本发明具有以下优点：
1.本发明所提供的方法建立的益心舒制剂HPLC指纹图谱与对照图谱的相似度均大于0.9，能有效的表征其质量，有利于全面监控产品的质量；
2.本发明建立了益心舒制剂HPLC特征指纹图谱共有模式，标定了15个共有峰，建立的指纹图谱技术含量高，避免了益心舒制剂质量控制的单一性和片面性，减少了人为处理产品质量达标的可能性；
3.由于指纹图谱不是为了测定某个成分的精确含量，而是要充分反映化学成分的信息，因此，本发明选择在210nm波长处进行测定，其出峰较多，反映的信息较完全；各个峰吸收值良好，基线平稳，也避免了近紫外杂质峰较大吸收情况；
4.本发明方法所得益心舒制剂指纹图谱的峰多，峰形好，易于鉴别，相似性高，准确可靠。
附图说明
图1是本发明测得的益心舒胶囊的共有模式图谱；
图2是14个批次益心舒胶囊指纹图谱叠加图；
图3是人参药材指纹图谱色谱图；
图4是五味子药材指纹图谱色谱图；
图5是丹参药材指纹图谱色谱图；
图6是川芎药材指纹图谱色谱图；
图7是益心舒胶囊与各药材指纹图谱共有峰归属图；
图8是不同批次益心舒胶囊HPLC指纹图谱共有峰相对保留时间表；
图9是不同批次益心舒胶囊HPLC指纹图谱共有峰相对峰面积表；
图10是不同批次益心舒胶囊样品指纹图谱相似度结果表。
下面结合附图和具体实施方式对本发明作进一步的说明。
具体实施方式
本发明的实施例1：益心舒胶囊的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒胶囊内容物2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇20ml，超声提取30min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm的微孔滤膜，取续 滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
（3）测定：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B，按下表梯度洗脱程序进行梯度洗脱；流速1.0ml·min-1，柱温30，℃检测波长210nm，理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒胶囊的指纹图谱。
表2
实施例2：益心舒颗粒的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒颗粒2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇25ml，超声提取40min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
（3）测定：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，A∶B=20%-90%8∶0%-10%；流速1.5ml·min-1，柱温42℃，检测波长240nm，理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒颗粒的指纹图谱。
实施例3：益心舒片的指纹图谱检测方法，包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒片2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇15ml，超声提取20min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于10ml容量瓶中， 加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液，过滤，取续滤液作为对照品溶液；
（3）测定：色谱条件：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B进行梯度洗脱，A∶B=20%-90%8∶0%-10%；流速0.5ml·min-1，柱温28℃，检测波长185nm，理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000；分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒片的指纹图谱。
实验例：
1.仪器与试药
1.1仪器
Agilent1260高效液相色谱仪（美国安捷伦公司）；G1311C1260Quat四元泵（美国安捷伦）；G1329B1260ALS进样器（美国安捷伦）；G1314B1260VWD VL检测器（美国安捷伦）；安捷伦Rev.B.04.03[52]液相色谱工作站（美国安捷伦）；BT125D天平（赛多利斯）；KH5200E型超声波清洗器（昆山禾创超声仪器有限公司）。
1.2试药
丹酚酸B对照品（批号：111562-201111，中国药品生物制品检定所制，含量以98.2%计，用于含量测定）；五味子醇甲对照品（批号：110857-201211，中国药品生物制品检定所制，含量以99.9%计，用于含量测定）；隐丹参酮对照品（批号：110852-200806，中国药品生物制品检定所制，用于含量测定）；丹参酮IIA对照品（批号：110766-200619，中国药品生物制品检定所制，用于含量测定）；齐墩果酸对照品（批号：110709-200505，中国药品生物制品检定所制，用于含量测定）；熊果酸对照品（批号：110742-201220，中国药品生物制品检定所制，用于含量测定）。
人参、麦冬、五味子、黄芪、丹参、川芎、山楂药材均购自北京同仁堂中药饮片有限公司，经测定符合中国药典2010年版一部项下的有关要求。
乙腈（Fisher公司，色谱纯）、甲醇（Fisher公司，色谱纯），磷酸（天津市光复科技发展有限公司，分析纯），水为哇哈哈纯净水。
益心舒胶囊（批号：20120801、20121002、20121101、20130105、20130111、20130407、20121107、20121203、20121214、20130102、20130301、20130410、20130604、20130605，按照顺序编号为P1～P14）。
2.益心舒胶囊指纹图谱的测定
2.1色谱条件：Venusil MP C18色谱柱(5μm×4.6mm×250mm)；流动相：乙腈(A)-0.005%磷酸水溶液（B）；按下表进行梯度洗脱；流速1mL·min-1；柱温30；℃检测波长210nm；进样量10μL。
表3流动相梯度洗脱程序
2.2对照品溶液的制备：
精密称取丹酚酸B对照品7.04mg，置于50ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.1408mg/mL的对照品溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
精密称取五味子醇甲对照品3.22mg，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.322mg/mL的对照品溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
精密称取隐丹参酮对照品5.15mg，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.515mg/mL的对照品溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
精密称取丹参酮IIA对照品0.08mg，置于5ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.016mg/mL的对照品溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
精密称取齐墩果酸对照品5.16mg，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.516mg/mL的对照品溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
精密称取熊果酸对照品4.25mg，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.425mg/mL的对照品溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备：取益心舒胶囊30粒内容物混匀，精密称取2g，置于25ml容量瓶中，加甲醇20ml，超声提取30min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液，即得供试品溶液.
2.4方法学考察
2.4.1精密度实验
取益心舒胶囊P3（批号：20121101）样品1份，按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备，分别准确吸取同一供试品溶液10μL，连续进样6次，按“2.1”项下色谱条件测定，记录指纹图谱，以五味子醇甲色谱峰（指纹图谱中为2号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，结果如表4所示：
表4各共有峰相对峰面积
由表4可知，所有共有峰的相对保留时间的RSD值小于3%，共有峰相对峰面积的RSD值在0.000-2.798%之间，也均小于3%，表明仪器精密度良好。
2.4.2重复性实验
取益心舒胶囊P3（批号：20121101）样品，按“2.3”项下供试品溶液的制备方法平行制备6份，各吸取10μL，按“2.1”项下色谱条件测定，记录指纹图谱，以五味子醇甲色谱峰（指纹图谱中为2号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，结果如表5所示：
表5各共有峰相对峰面积
由表5可知：所有共有峰相对保留时间的RSD值小于3%，共有峰相对峰面积的RSD值在0.000-2.992%之间，也均小于3%，表明重现性良好。
2.4.3稳定性实验
取益心舒胶囊P3（批号：20121101）样品1份，按“2.3”项下供试品溶液的制备方法制备，分别在0、3、6、9、12、24h，按“2.1”项下色谱条件测定，记录指纹图谱，以五味子醇甲色谱峰（指纹图谱中为2号峰）为内参比峰，计算指纹图谱中各共有峰的相对保留时间和相对峰面积，结果如表6所示：
表6各共有峰相对峰面积
由表6可知，所有共有峰相对保留时间的RSD值小于3%，共有峰相对峰面积的RSD值在0.000-2.075%之间，也均小于3%，表明样品在24h内稳定。
2.5指纹图谱的测定
2.5.1同一厂家不同批次益心舒胶囊指纹图谱的测定及共有峰的标定
分别准确吸取六种对照品溶液各20μL进样，14个批次益心舒胶囊供试品溶液各10μL，按“2.1”项下色谱条件进行测定，记录指纹图谱（见图2）。
将图谱数据导入指纹图谱相似性评价软件（中药色谱指纹图谱相似度评价系统，2004A版）分析，以S1批次样品图谱为参照图谱，匹配色谱峰，以中位数法生成对照图谱（见图1）。
经与对照品鉴定，40.011min、68.814min、92.405min、104.005min、117.598min、118.394min出峰分别为丹酚酸B（1号峰）、五味子醇甲（2号峰）、隐丹参酮（8号峰）、丹参酮IIA（10号峰）、齐墩果酸（14号峰）、熊果酸（15号峰）。其中，五味子醇甲峰的分离度良好，峰面积较大且稳定，故选其为参照峰（S）。以五味子醇甲为参照峰的HPLC指纹图谱共确定15个共有峰，计算各共有峰的相对保留时间和相对峰面积值（见图8～9）。
2.6指纹图谱相似度的计算
采用国家药典委员会“中药色谱指纹图谱相似度评价系统”（2004A版）评价益心舒胶囊的指纹图谱，以P1（批号：20120801）样品图谱为参照谱，以中位数法生成对照指纹图谱，采用夹角余弦作为量度，计算样品与共有模式之间的相似度（见图10）。
2.7益心舒胶囊样品与各原料药材指纹图谱相关性及共有峰归属分析：
依法测定益心舒胶囊中各药材的指纹图谱，并将其分别和益心舒胶囊对照图谱导入指纹图谱相似性评价软件（中药色谱指纹图谱相似度评价系统，2004A版）中，通过比较色谱峰保留时间标示其对共有峰的贡献，保留时间RSD值小于1%的峰即为益心舒胶囊样品指纹图谱在药材图谱上的归属峰。
2.7.1人参药材指纹图谱
人参药材指纹图谱色谱图见图3，共有峰归属见表7：
表7样品共有峰归属人参药材
2.7.2五味子药材指纹图谱
五味子药材指纹图谱色谱图见图4，共有峰归属见表8：
表8样品共有峰归属五味子药材
2.7.3丹参药材指纹图谱
丹参药材指纹图谱色谱图见图5，共有峰归属见表9：
表9样品共有峰归属丹参药材
2.7.4川芎药材指纹图谱
川芎药材指纹图谱色谱图见图6，共有峰归属见表10：
表10样品共有峰归属川芎药材
益心舒胶囊与各药材指纹图谱共有峰归属分析：
如图7所示，图中，▲人参●五味子★丹参■川芎，益心舒胶囊15个共有峰可以找到明确归属，处方中人参、五味子、丹参和川芎4味药材的特征峰均能在益心舒胶囊指纹图谱中体现；方中麦冬、黄芪和山楂3味药材在该色谱条件下基本检不出特征峰。
本发明人还以益心舒颗粒、益心舒片、益心舒丸等剂型为样品进行了实验，其指纹图谱的测定结果与上述胶囊剂一致。
Claims (3)
1. 一种益心舒制剂的指纹图谱检测方法，其特征在于，以五味子醇甲对照品为参照，采用高效液相色谱法测定其指纹图谱，具体包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒制剂或其内容物2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇15～25ml，超声提取20～40min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过滤，取续滤液，作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品适量，精密称定，加甲醇制成每lml含0.3mg的溶液，作为对照品溶液；
（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各5～15μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒制剂的指纹图谱；其中，所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，梯度洗脱过程中，流动相A、B的比例变化为：0～30min，A相20%，B相80%；30～60min，A相20%-43%，B相80%-57%；60～70min，A相43%-53%，B相57%-47%；70～85min，A 相53%，B相47%；85～100min，A 相53%-70%，B相47%-30%；100～120min，A相70%-90%，B相30%-10%；流速0.5～1.5ml·min-1，柱温28～42℃，检测波长185～240nm；理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
2. 根据权利要求1所述的益心舒制剂的指纹图谱检测方法，其特征在于：包括以下步骤：
（1）供试品溶液的制备：取益心舒制剂或其内容物2g，精密称定，置于25ml容量瓶中，加甲醇20ml，超声提取30min，放冷，加甲醇至刻度，摇匀，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为供试品溶液；
（2）对照品溶液的制备：取五味子醇甲对照品3mg，精密称定，置于10ml容量瓶中，加甲醇溶解并定容至刻度，制成浓度为0.3mg/mL的溶液，过0.22μm的微孔滤膜，取续滤液作为对照品溶液；
（3）测定：分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，记录120分钟内的色谱图，用指纹图谱软件对图谱进行处理，即得益心舒制剂的指纹图谱。
3. 根据权利要求1或2所述的益心舒制剂的指纹图谱检测方法，其特征在于：所述高效液相色谱测定的色谱条件为：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂，以乙腈为流动相A，以0.005%磷酸水溶液为流动相B，梯度洗脱，流速1.0ml·min-1，柱温30℃，检测波长210nm，理论塔板数按五味子醇甲峰计算应不低于2000。
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