CN109134686A - 一种德保黄精多糖的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于天然药物提取技术领域，具体公开了一种德保黄精多糖的提取方法。本发明德保黄精多糖的提取方法包括以下步骤：(1)德保黄精处理：粉碎后，用乙醇提取脱脂；(2)第一次提取：采用纤维素酶和微波结合进行提取；(3)第二次提取：以甲醇为溶剂，采用超声波进行提取；(4)第三次提取：以甲醇为溶剂，采用超声波进行提取；(5)浓缩干燥。本发明德保黄精多糖的提取方法通过结合不同的提取方法对德保黄精依次进行了三次提取，有效提升了德保黄精多糖的得率，提取效果好。
Description
【技术领域】
本发明涉及食品加工技术领域，具体涉及一种德保黄精多糖的提取方法。
【背景技术】
德保黄精(Polygonatum kingianum Coll.et Hemsl)是一种草本植物，以根状茎类型生长于土地里，为百合科黄精属。它的别名有靖西黄精、滇黄精等，其根状茎类似于日常生活中用于炒菜的姜，近连珠状或近圆柱形状，并且根状茎长有许多绣花针大小的须。
黄精作为一种名贵的中药材，具有宽中益气、益肾填精、滋阴润肺、生津补脾至功效。现代药理学研究表明其活性成分最主要为黄精多糖，其具有抗肿瘤、调节血糖血脂、调节免疫等生理功能。作为黄精主要药用成分的黄精多糖与其他多糖一样，具有抗肿瘤、抗衰老、免疫调节以及抗氧化损伤等作用，并且黄精中的多糖含量普遍在10％以上，因此，黄精多糖提取工艺的研究对黄精多糖的进一步开发利用具有重要意义。
【发明内容】
本发明的发明目的在于：针对上述存在的问题，提供一种德保黄精多糖的提取方法。本发明德保黄精多糖的提取方法通过结合不同的提取方法对德保黄精依次进行了三次提取，有效提升了德保黄精多糖的得率，提取效果好。
为了实现上述目的，本发明采用的技术方案如下：
一种德保黄精多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)德保黄精处理：将德保黄精粉碎至过30-40目筛，得黄精粉；将所述黄精粉和浓度为95％的乙醇按体积比1:4-8混合搅拌至均匀后，加热回流提取25-35min，过滤，干燥过滤得到的黄精粉，备用；该步骤对德保黄精进行脱脂，以避免后续提取得到的提取物中含有较多含有脂肪的粗皂苷，以提高提取物的纯度，经过该步骤处理，所述德保黄精提取物的纯度提升了2.5％以上；
(2)第一次提取：将上述干燥后的黄精粉和水按体积比1:10-15混合后，调节pH至4.2-4.5得提取底物，往所述提取底物中加入质量为所述提取底物质量0.5-1％的纤维素酶混合搅拌均匀后，于50-55℃和0.5-1MPa下浸渍15-20min后，采用微波处理70-80s，最后过滤，得第一提取液和第一滤渣；在本次提取中，以纤维素酶为媒介，在加压情况下，有效提升了纤维素酶的酶解效果，加大了对德保黄精细胞壁的破坏，有效促进了细胞内物质的溶出，然后再采用微波进行短时处理，一方面进一步促进了纤维素酶的渗透酶解作用和多糖的溶剂化，进而提升了提取效果，另一方面随着处理时间的延长，提取底物的温度逐渐升高至使纤维素酶失活，省略了后续的灭酶步骤；因此，以上纤维素酶-加压处理-微波处理结合产生协同作用，本发明的第一提取液的多糖得率比仅采用纤维素酶酶解提取、溶剂加压浸提或微波提取处理得到的第一提取也的多糖得率提高了10.3％以上；
(3)第二次提取：将上述第一滤渣和甲醇按体积比1：5-8混合搅拌至均匀后，采用第一超声波处理15-20min，过滤，得第二提取液和第二滤渣；在本次提取中，在第一次提取溶出了大量的多糖的情况，以甲醇为溶剂，采用超声波对黄精细胞进行破裂处理，进一步促进了第一滤渣中多糖物质的溶出，使得最终得到的德保黄精多糖提取物的量提升了18.7-21.8％；
(4)第三次提取：将上述第二滤渣和甲醇按体积比1:10-12混合搅拌至均匀后，采用第二超声波处理10-15min，过滤，得第三提取液和第三滤渣；最后，改变滤渣和甲醇的比例，继续采用超声波进行处理，使得最终得到的德保黄精多糖提取物的量提升了9.8-13.4％；在本发明三次提取的基础上，再对第三滤渣进行提取，最终得到的德保多糖黄精提取物的量增加不超过1％，反而会提升提取成本；
(5)浓缩干燥：合并上述第一提取液、第二提取液和第三提取液，将合并得到的提取液浓缩至呈膏状后，加入浓度为75％的乙醇搅拌至均匀后，静置沉淀，然后离心分离，将分离所述沉淀物进行真空冷冻干燥，即得所述德保黄精多糖提取物。
进一步的，步骤(2)中，所述微波处理的功率为200-250W。
进一步的，步骤(3)或(4)中，所述甲醇的浓度为60-65％。
进一步的，步骤(3)中，所述第一超声波的功率为60W、频率为25KHz。
进一步的，步骤(4)中，所述第二超声波的功率为40W、频率为40KHz。
进一步的，步骤(5)中，所述真空冷冻干燥的温度为-20～-30℃、压力为0.03-0.08MPa。
综上所述，由于采用了上述技术方案，本发明的有益效果是：
本发明的三次提取方法结合，可产生协同增效作用，有效提升了德保黄精多糖的提取效果，德保黄精多糖的得率在13.11％以上。
【具体实施方式】
下面将结合具体实施例来对本发明作进一步的说明。
实施例1
一种德保黄精多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)德保黄精处理：将德保黄精粉碎至过30目筛，得黄精粉；将所述黄精粉和浓度为95％的乙醇按体积比1:4混合搅拌至均匀后，加热回流提取25min，过滤，干燥过滤得到的黄精粉，备用；
(2)第一次提取：将上述干燥后的黄精粉和水按体积比1:10混合后，调节pH至4.2得提取底物，往所述提取底物中加入质量为所述提取底物质量0.5％的纤维素酶混合搅拌均匀后，于50℃和0.5MPa下浸渍15min后，采用功率为200W的微波处理70s，最后过滤，得第一提取液和第一滤渣；
(3)第二次提取：将上述第一滤渣和浓度为60％的甲醇按体积比1：5混合搅拌至均匀后，采用功率为60W、频率为25KHz的第一超声波处理15min，过滤，得第二提取液和第二滤渣；
(4)第三次提取：将上述第二滤渣和浓度为60％的甲醇按体积比1:10混合搅拌至均匀后，采用功率为40W、频率为40KHz的第二超声波处理10min，过滤，得第三提取液和第三滤渣；
(5)浓缩干燥：合并上述第一提取液、第二提取液和第三提取液，将合并得到的提取液浓缩至呈膏状后，加入浓度为75％的乙醇搅拌至均匀后，静置沉淀，然后离心分离，将分离所述沉淀物于-20℃和0.03MPa下进行真空冷冻干燥，即得所述德保黄精多糖提取物。
实施例2
一种德保黄精多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)德保黄精处理：将德保黄精粉碎至过35目筛，得黄精粉；将所述黄精粉和浓度为95％的乙醇按体积比1:6混合搅拌至均匀后，加热回流提取30min，过滤，干燥过滤得到的黄精粉，备用；
(2)第一次提取：将上述干燥后的黄精粉和水按体积比1:12混合后，调节pH至4.3得提取底物，往所述提取底物中加入质量为所述提取底物质量0.8％的纤维素酶混合搅拌均匀后，于52℃和0.8MPa下浸渍18min后，采用功率为230W的微波处理75s，最后过滤，得第一提取液和第一滤渣；
(3)第二次提取：将上述第一滤渣和浓度为63％的甲醇按体积比1：7混合搅拌至均匀后，采用功率为60W、频率为25KHz的第一超声波处理18min，过滤，得第二提取液和第二滤渣；
(4)第三次提取：将上述第二滤渣和浓度为62％的甲醇按体积比1:11混合搅拌至均匀后，采用功率为40W、频率为40KHz的第二超声波处理13min，过滤，得第三提取液和第三滤渣；
(5)浓缩干燥：合并上述第一提取液、第二提取液和第三提取液，将合并得到的提取液浓缩至呈膏状后，加入浓度为75％的乙醇搅拌至均匀后，静置沉淀，然后离心分离，将分离所述沉淀物于-25℃和0.05MPa下进行真空冷冻干燥，即得所述德保黄精多糖提取物。
实施例3
一种德保黄精多糖的提取方法，包括以下步骤：
(1)德保黄精处理：将德保黄精粉碎至过40目筛，得黄精粉；将所述黄精粉和浓度为95％的乙醇按体积比1:8混合搅拌至均匀后，加热回流提取35min，过滤，干燥过滤得到的黄精粉，备用；
(2)第一次提取：将上述干燥后的黄精粉和水按体积比1:15混合后，调节pH至4.5得提取底物，往所述提取底物中加入质量为所述提取底物质量1％的纤维素酶混合搅拌均匀后，于55℃和1MPa下浸渍20min后，采用功率为250W的微波处理80s，最后过滤，得第一提取液和第一滤渣；
(3)第二次提取：将上述第一滤渣和浓度为65％的甲醇按体积比1：8混合搅拌至均匀后，采用功率为60W、频率为25KHz的第一超声波处理20min，过滤，得第二提取液和第二滤渣；
(4)第三次提取：将上述第二滤渣和浓度为65％的甲醇按体积比1:12混合搅拌至均匀后，采用功率为40W、频率为40KHz的第二超声波处理15min，过滤，得第三提取液和第三滤渣；
(5)浓缩干燥：合并上述第一提取液、第二提取液和第三提取液，将合并得到的提取液浓缩至呈膏状后，加入浓度为75％的乙醇搅拌至均匀后，静置沉淀，然后离心分离，将分离所述沉淀物于-30℃和0.08MPa下进行真空冷冻干燥，即得所述德保黄精多糖提取物。
效果验证：
实验组1-3：本发明实施例1-3的提取方法提取得到的德保黄精多糖提取物；
对照组1：仅采用本发明第一次提取的方法重复进行3次提取得到的德保黄精多糖提取物；
对照组2：仅采用本发明第二次提取的方法重复进行3次提取得到的德保黄精多糖提取物；
对照组3：仅采用本发明第三次提取的方法重复进行3次提取得到的德保黄精多糖提取物。
本次实验所用的德保黄精粉末为同一批次的德保黄精粉末，经过采用苯酚-硫酸比色法对所用的德保黄精粉末的多糖含量进行测定，得德保黄精粉末原料的多糖含量为18.75％。
在其余条件均一致的情况下，同样采用苯酚-硫酸比色法对以上各组的德保黄精多糖提取物的多糖含量进行测定，结果见表1：
表1各组德保黄精多糖提取物的多糖含量
由表1可知，实验组1-3德保黄精多糖提取物的多糖含量明显高于对照组1-3，说明本发明的提取方法可有效提升德保黄精的多糖提取率，提取效果好。
上述说明是针对本发明较佳可行实施例的详细说明，但实施例并非用以限定本发明的专利申请范围，凡本发明所提示的技术精神下所完成的同等变化或修饰变更，均应属于本发明所涵盖专利范围。
Claims (6)
1.一种德保黄精多糖的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
(1)德保黄精处理：将德保黄精粉碎至过30-40目筛，得黄精粉；将所述黄精粉和浓度为95％的乙醇按体积比1:4-8混合搅拌至均匀后，加热回流提取25-35min，过滤，干燥过滤得到的黄精粉，备用；
(2)第一次提取：将上述干燥后的黄精粉和水按体积比1:10-15混合后，调节pH至4.2-4.5得提取底物，往所述提取底物中加入质量为所述提取底物质量0.5-1％的纤维素酶混合搅拌均匀后，于50-55℃和0.5-1MPa下浸渍15-20min后，采用微波处理70-80s，最后过滤，得第一提取液和第一滤渣；
(3)第二次提取：将上述第一滤渣和甲醇按体积比1：5-8混合搅拌至均匀后，采用第一超声波处理15-20min，过滤，得第二提取液和第二滤渣；
(4)第三次提取：将上述第二滤渣和甲醇按体积比1:10-12混合搅拌至均匀后，采用第二超声波处理10-15min，过滤，得第三提取液和第三滤渣；
(5)浓缩干燥：合并上述第一提取液、第二提取液和第三提取液，将合并得到的提取液浓缩至呈膏状后，加入浓度为75％的乙醇搅拌至均匀后，静置沉淀，然后离心分离，将分离所述沉淀物进行真空冷冻干燥，即得所述德保黄精多糖提取物。
2.根据权利要求1所述一种德保黄精多糖的提取方法，其特征在于，步骤(2)中，所述微波处理的功率为200-250W。
3.根据权利要求1所述一种德保黄精多糖的提取方法，其特征在于，步骤(3)或(4)中，所述甲醇的浓度为60-65％。
4.根据权利要求3所述一种德保黄精多糖的提取方法，其特征在于，步骤(3)中，所述第一超声波的功率为60W、频率为25KHz。
5.根据权利要求3所述一种德保黄精多糖的提取方法，其特征在于，步骤(4)中，所述第二超声波的功率为40W、频率为40KHz。
6.根据权利要求1所述一种德保黄精多糖的提取方法，其特征在于，步骤(5)中，所述真空冷冻干燥的温度为-20～-30℃、压力为0.03-0.08MPa。
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