CN108576819A - 一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用 - Google Patents

一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用 Download PDF

Info

Publication number
CN108576819A
CN108576819A CN201810369469.0A CN201810369469A CN108576819A CN 108576819 A CN108576819 A CN 108576819A CN 201810369469 A CN201810369469 A CN 201810369469A CN 108576819 A CN108576819 A CN 108576819A
Authority
CN
China
Prior art keywords
liver
parts
protecting
health food
sample
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN201810369469.0A
Other languages
English (en)
Inventor
洪玉梅
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Beijing Zhong He Hongye Medicine Technology Co Ltd
Original Assignee
Beijing Zhong He Hongye Medicine Technology Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Beijing Zhong He Hongye Medicine Technology Co Ltd filed Critical Beijing Zhong He Hongye Medicine Technology Co Ltd
Priority to CN201810369469.0A priority Critical patent/CN108576819A/zh
Publication of CN108576819A publication Critical patent/CN108576819A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Classifications

    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/105—Plant extracts, their artificial duplicates or their derivatives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L31/00—Edible extracts or preparations of fungi; Preparation or treatment thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23L—FOODS, FOODSTUFFS, OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES, NOT COVERED BY SUBCLASSES A21D OR A23B-A23J; THEIR PREPARATION OR TREATMENT, e.g. COOKING, MODIFICATION OF NUTRITIVE QUALITIES, PHYSICAL TREATMENT; PRESERVATION OF FOODS OR FOODSTUFFS, IN GENERAL
    • A23L33/00—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof
    • A23L33/10—Modifying nutritive qualities of foods; Dietetic products; Preparation or treatment thereof using additives
    • A23L33/15—Vitamins
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/335—Heterocyclic compounds having oxygen as the only ring hetero atom, e.g. fungichromin
    • A61K31/365—Lactones
    • A61K31/375—Ascorbic acid, i.e. vitamin C; Salts thereof
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/06—Fungi, e.g. yeasts
    • A61K36/07—Basidiomycota, e.g. Cryptococcus
    • A61K36/074—Ganoderma
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/87—Vitaceae or Ampelidaceae (Vine or Grape family), e.g. wine grapes, muscadine or peppervine
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/88—Liliopsida (monocotyledons)
    • A61K36/906—Zingiberaceae (Ginger family)
    • A61K36/9066—Curcuma, e.g. common turmeric, East Indian arrowroot or mango ginger
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/16—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for liver or gallbladder disorders, e.g. hepatoprotective agents, cholagogues, litholytics
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A23—FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23V—INDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2002/00—Food compositions, function of food ingredients or processes for food or foodstuffs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Food Science & Technology (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Nutrition Science (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Polymers & Plastics (AREA)
  • Gastroenterology & Hepatology (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Medicines Containing Plant Substances (AREA)

Abstract

本发明公开了一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用，其技术方案要点是，护肝组合物包括灵芝提取物50‑300份、葡萄籽提取物30‑240份、姜黄提取物20‑230份、维生素C 10‑150份，护肝保健食品包括上述护肝组合物和辅料，本发明制得的护肝保健食品对保护肝损伤，尤其是酒精性肝损伤效果显著，且采用科学合理的生产工艺加工而成，功能明确，质量可控，服用安全。

Description

一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用
技术领域
本发明涉及保健食品领域，特别涉及一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用。
背景技术
肝脏是人体中的重要的消化器官和解毒器官，对来自体内和体外的非营养性物质，如各种药物、毒物以及体内某些代谢产物，具有生物转化作用，通过新陈代谢将它们彻底分解或以原形排出体外。
现有的可参考申请公布号CN105311204A的中国专利申请，其公开了一种护肝保健品，包括丹参2.5-3.6g，黄豆10-15g，五味子1.2-3.2g，柴胡2.2-3.5g，灵芝1.5-2.3g，大枣5.2-6.8g，茵陈2.3-4.6g，黄茂3.2-5.2g，人参2.7-3.5g，还包括药学上可接受的辅料。
上述护肝保健品采用九种主要药物以及辅料制成，成分较多，除含有提高人体免疫力、益气和中、健脾护肝的成分以外，还含有多种滋补性成分。过多的药物成分和滋补成分均需经过肝脏的消化吸收，无疑会加重肝脏的运作负担。
发明内容
针对现有技术不足，本发明提供一种护肝组合物，采用原料少，对保护肝损伤，尤其是酒精性肝损伤效果显著。
本发明的上述技术目的是通过以下技术方案得以实现的：
一种护肝组合物，按重量份计，包括有以下组分：灵芝提取物50-300份、葡萄籽提取物30-240份、姜黄提取物20-230份、维生素C 10-150份。
较佳的，按重量份计，还包括有以下组分：灵芝提取物80-200份、葡萄籽提取物50-180份、姜黄提取物40-160份、维生素C 30-100份。
灵芝的主要活性成分包括灵芝多糖、三萜类化合物、蛋白质、多肽、核苷类、呋喃类、甾醇、生物碱和氨基酸，其中的灵芝多糖能够抑制自由基脂质过氧化、抑制炎性因子活化、抑制一氧化氮合酶活性，进而起到护肝的功效。
葡萄籽的主要活性成分包括各种矿物质、多种维生素、原花青素，其中，原花青素能够清除自由基、抑制炎症因子、保护维生素C和维生素E、抑制胶原合成、促进肝细胞增殖、抑制肝组织细胞凋亡和自噬，还可以通过增加细胞外钙离子从钙池内流来提高正常肝细胞的细胞内钙离子浓度,提高肝细胞的增殖活性,同时抑制细胞内钙离子浓度和乙醇损伤的肝细胞增殖活性的异常增加，从而保护肝脏。
姜黄的主要活性物质为姜黄素，姜黄素能够调节血脂、降低脂肪在肝脏中的沉积、清除氧自由基、抑制脂质过氧化产物、抑制炎症因子释放、改善胰岛素抵抗、调控过氧化物酶体增殖物、减少细胞外基质的沉积等。
维生素C是一种强力自由基清除剂，在细胞内外均具有重要的抗脂质过氧化作用，抑制急慢性肝炎、肝硬化、原发性肝癌、酒精性肝病及缺血性肝损伤时伴有的氧自由基增加、脂质过氧化反应增强等。
本发明的目的二：提供一种护肝保健食品，包括所述的护肝组合物，还包括药学上可接受的辅料。
较佳的，按重量份计，包括有以下组分：灵芝提取物50-300份、葡萄籽提取物30-240份、姜黄提取物20-230份、维生素C 10-150份、微晶纤维素25-180份、二氧化硅2-40份、硬脂酸镁1-30份。
较佳的，按重量份计，包括有以下组分：灵芝提取物80-200份、葡萄籽提取物50-180份、姜黄提取物40-160份、维生素C 30-100份、微晶纤维素35-130份、二氧化硅4-20份、硬脂酸镁3-15份。
辅料的加入能够提高护肝保健食品中的原料颗粒的分散均匀性、流动性、可压性、便于后续的进一步加工处理，还能提升口感，此外，其中的微晶纤维素含有的膳食纤维还能够促进消化和吸收。
本发明的目的三：一种所述的护肝保健食品的制备方法，包括有以下步骤：
S1灵芝提取物、葡萄籽提取物、姜黄提取物、微晶纤维素分别过40-200目筛，混合制得总混粉；
S2向总混粉中喷洒70％食用乙醇，然后过10-40目筛制粒，干燥至颗粒含水量≤5％，制得干颗粒；
S3干颗粒与维生素C、二氧化硅和硬脂酸镁混合，制得护肝保健食品。
较佳的，所述护肝保健食品为软胶囊、片剂、粉剂或硬胶囊中的一种。
混合前过筛便于产品的混合均匀性，喷洒食用乙醇便于质粒过程的进行，限定干燥颗粒的含水量，提高产品的质量均一性。通过控制抗氧化保健食品的生产过程，进一步提高产品的品质。
本发明的目的四：提供一种上述护肝组合物或护肝保健食品在护肝方面的应用。
综上所述，本发明具有以下有益效果：
1、护肝组合物中含有多种抗氧化物质，能够抑制自由基脂质过氧化、清除氧自由基，进而起到护肝功效；
2、护肝组合物中的原料种数较少，在达到护肝功效的前提下，减轻肝脏的负担；
3、配方中的维生素C参与胆固醇代谢，能够促进胆固醇转化为胆汁酸，降低肝脏和血浆中胆固醇水平；
4、原花青素能够保护维生素C，延长维生素C的存续期限；
5、各原料相互配伍，从整体上调节人体肝脏及相关脏腑功能；
6、辅料的加入能够提高护肝保健食品中的原料颗粒的分散均匀性、流动性、可压性、便于后续的进一步加工处理，还能提升口感；
7、辅料中的微晶纤维素含有的膳食纤维能够促进消化和吸收，进一步提高人体对护肝成分的利用率；
8、严格控制生产工艺，进一步提高产品的品质。
具体实施方式
以下对本发明作进一步详细说明。
实施例1
护肝保健食品的制备：
S1原料获取：灵芝提取物经提取(10倍量水煎煮提取2次，每次2h，温度95-100℃)、过滤、浓缩、喷雾干燥(进风温度160-180℃，出风温度80-90℃)、过筛、包装制成，标准如表1所示；葡萄籽提取物经乙醇提取(提取2次，每次2小时，提取温度不低于85℃)、过滤，食用乙醇分离洗脱、浓缩、喷雾干燥、过筛、包装制成，标准如表2所示；姜黄提取物符合1886.76食品安全国家标准食品添加剂姜黄素的标准要求；维生素C应符合GB14754食品安全国家标准食品添加剂维生素C(抗坏血酸)的标准要求；微晶纤维素应符合GB 1886.103食品安全国家标准食品添加剂微晶纤维素的质量要求；二氧化硅应符合GB 25576食品安全国家标准食品添加剂二氧化硅的质量要求；硬脂酸镁应符合GB 1886.91食品安全国家标准食品添加剂硬脂酸镁的质量要求。
S2过筛、混合：在十万级生产洁净区内，取50g灵芝提取物、30g葡萄籽提取物、20g姜黄提取物、25g微晶纤维素，分别过40目筛，混合15min后获得总混粉；
S3制粒、干燥、整粒：向上述混合粉中均匀喷洒70％食用乙醇，制得软材，软材以“手握成团，轻压即散”为度，然后过10目筛制粒，50℃干燥至颗粒含水量≤5％，得到干颗粒，食用乙醇符合GB 10343的规定；
S4总混：干颗粒与过60目筛的10g维生素C、2g二氧化硅和1g硬脂酸镁混合30mim，获得总混颗粒；
S5装胶囊：将总混颗粒置胶囊机中装囊，调整规格为0.45g/粒，检查，剔除不合格胶囊；
S6分装：将S5中获得的合格胶囊装瓶，60粒/瓶，转出洁净区；
S7外包装、成品检验入库：将上述半成品贴签，随机抽取样品检验，合格成品入库。
表1灵芝提取物的质量标准。
表2葡萄籽提取物的质量标准。
实施例2与实施例1的区别在于原料配比不同，S2中的过筛目数为200目，S3中过筛目数为40目。实施例3与实施例1的区别在于原料配比不同，S2中的过筛目数为120目，S3中过筛目数为20目。实施例4-5与实施例1的区别在于原料配比不同。实施例1-5的原料配比列于表3。
表3抗氧化组合物的原料。
测试
包括样品的功效成分检测、卫生学检测、稳定性试验、毒理学安全性评价试验、对化学性肝损伤有辅助保护作用实验，具体如下所示。
1功效成分检测、卫生学检测、稳定性试验
选取实施例2、3、4作为受检样品，样品的功效成分、卫生学和三个月加速试验的检测方法列于表4，样品的功效成分、卫生学的初始检测结果列于表5，样品的功效成分、卫生学的三个月加速试验结果列于表6。
表4样品的功效成分、卫生学和三个月加速试验的检测方法。
表5样品的功效成分、卫生学的初始检测结果。
表6样品的功效成分、卫生学的三个月加速试验结果。
2毒理学安全性评价试验
2.1材料和方法
2.1.1样品：选取实施例4，规格：0.45g/粒，置阴凉干燥处保存，人口服推荐用量为每人(成人)每日1次，每次2粒，成人体重按60Kg计算，折合剂量为5g/kg BW。取胶囊内容物进行试验。
2.1.2实验动物及环境：SPF级健康昆明种小鼠和SD种人鼠，由广西医科大学实验动物中心繁殖，生产许可证号：SCXK(桂)2014-0002,质量合格证号：45000300000390、45000300000391、45000300000419。动物实验室为屏障系统，使用许可证号：SYXK(桂)2011-0005。动物实验室温度：22-25℃，相对湿度：55-70％。
2.1.3小鼠急性毒性试验：采用最大耐受剂量(MTD)试验法，选体重18-22g的昆明种小鼠20只，雌雄各半。试验前动物禁食16小时，不限饮水。称取20.0g样品，加纯水至40mL,混匀，配成500mg/mL浓度混悬液，然后给动物灌胃2次(间隔6h)，每次灌胃量为4mL/20g BW，合计剂量为20000mg/kg BW。灌胃后观察、记录动物的中毒表现。每周称重一次，观察两周时间，试验结束解剖动物进行大体观察。按毒性分级标准评价受试物的急性毒性。
2.1.4 Ames试验：采用经鉴定符合要求的鼠伤寒沙门氏菌组氨酸缺陷型TA97a、TA98、TA100、TA102四种菌株进行试验。称取5Og样品，加纯水至1OOmL混匀，配成50mg/mL浓度溶液，再依次5倍稀释(取10mL加纯水至50mL)，分别配成I0、2、0.4、0.08mg/mL浓度溶液，受试溶液经高压灭菌(0.103MPa 20min)处理后供试验用。以多氯联苯诱导的大鼠肝微粒体酶S_9作为体外代谢活化系统。采用平板掺入法，在保温的顶层培养基中依次加入0.1mL试验菌株增菌液、0.1mL受试物溶液和0.5mL S_9混合液(当需要代谢活化时)，混匀后倒入底层培养基平板上。5个试验剂量分别为5000、1000、200、40、8μg/皿，同时设自发回变对照、溶剂对照和阳性突变剂对照。自发回变对照除不加样品外，其余条件与样品组相同。溶剂对照用灭菌纯水替代样品，其余条件与样品组相同。每个剂量组的各种菌株均做3个平行皿。在37℃下培养48小时，计数每皿的菌落数。整套试验在相同条件下重复做两次。如果受试物的回变菌落数增加超过自发回变菌落数的2倍以上，并具有剂量-反应关系者，即为诱变试验阳性。
2.1.5小鼠骨髓细胞微核试验:采用间隔24小时两次经口灌胃法进行试验。选体重为25-30g的昆明种小鼠50只，随机分成5组，每组10只，雌雄各半。试验组3个剂量分别设10000、5000、2500mg/kg BW，以纯水为阴性对照，40mg/kg BW剂量的环磷酞胺(cp)作阳性对照。分别称取20.0、10.0、5.0g样品，各加纯水至40mL,混匀，配成500、250、125mg/mL浓度混悬液，然后按4mL/20g BW的体积给动物灌胃，阴性对照组灌给等体积的纯水，阳性对照组灌给等体积的2mg/mL环磷酞胺溶液。第二次给样后6小时颈椎脱臼处死动物，取胸骨骨髓用小牛血清稀释涂片，甲醇固定，Giemsa染色。在光学显微镜下，每只动物计数1000个嗜多染红细胞(PCE)，观察含微核的PCE数，微核率以含微核的PCE千分率计，同时计数200个嗜多染红细胞，计算嗜多染红细胞与成熟红细胞的比值(PCE/NCE)。应用Spss软件中的泊松分布均数比较法统计处理。如试验组的微核率比阴性对照组增高，并有明显的剂量-反应关系和统计学意义，即为阳性结果。
2.1.6小鼠精子畸形试验：选体重为25-35g的昆明种雄性小鼠50只，随机分成5组，每组10只。试验组3个剂量分别设10000、5000、2500mg/kg BW，以纯水为阴性对照，40mg/kgBW剂量的环磷酞胺(cp)作阳性对照。分别称取20.0、10.0、5.0g样品，各加纯水至40mL,混匀，配成500、250、125mg/mL浓度混悬液，然后按0.4mL/20g BW的体积给动物灌胃，阴性对照组灌给等体积的纯水，阳性对照组灌给等体积的2mg/mL环磷酞胺溶液。每天灌胃一次，连续5天。末次给样后第30天处死动物，取副睾的精子涂片，甲醇固定，伊红染色。在光学显微镜下，每只动物计数完整精子1000个，计算精子畸形率。应用SPSS统计软件中的Wilcoxon秩和检验统计处理。如试验组的精子畸形率比阴性对照组增高，经统计有显著意义，并有剂量反应关系，即为阳性结果。
2.1.7大鼠30天喂养试验
2.1.7.1剂量选择与受试物给予方式：选SD种大鼠80只，雌、雄性各半，体重60-80g。将动物随机分为4组，即阴性对照组和3个试验组，每组20只，雌、雄各半。3个试验组剂量分别设为1500、750、375mg/kg BW，分别相当于人体推荐剂量的100、50、25倍。分别称取15.00、7.50、3.75g样品，各加纯水至1OOmL混匀，配成150.0、75.0、37.5mg/mL浓度混悬液，按1.OmL/100g BW的体积给相应剂量组动物灌胃，阴性对照组灌给等体积的纯水，每天灌胃一次，连续灌胃30天。
2.1.7.2实验方法：实验期间所有动物给予普通饲料，单笼饲养，自由摄食饮水。每天观察动物的活动和生长情况，每周加食2次，记录给食量和剩食量，每周称一次体重，计算每周进食量和食物利用率。实验结束动物隔夜禁食(禁食16h，不限饮水)，然后称动物空腹体重，处死大鼠，采2份血样，一份血抗凝用血球计数仪检测HB、RBC、WBC及其分类、PLT等；另一份血不抗凝分离血清，用试剂盒和全自动生化分析仪检测血清AST、ALT、BUN、Cr、TC、TG、Glu、TP、Alb等项目。采血后解剖动物，进行大体观察，取肝脏、肾脏、脾脏和睾丸等脏器进行称重，计算脏/体比值，取肝脏、肾脏、脾脏、胃、十二指肠、睾丸和卵巢等脏器进行病理组织学检查。在对各剂量组动物作大体检查未发现明显病变和生化指标改变时，只进行高剂量组和对照组动物的主要脏器的组织病理学检查，如发现病变则对中、低剂量组相应器官及组织进行检查。
2.1.7.3实验数据统计：应用SPSS统计软件进行单因素方差分析。在统计分析时，先对数据进行方差齐性检验，若方差齐，采用单因素方差分析进行总体比较，发现差异再用Dunnett检验进行多个剂量组与对照组均数间的两两比较。若方差不齐则对数据进行适当的变量转换，满足方差齐性检验后，用转换后的数据进行统计；若转换数据仍未达到方差齐要求，改用秩和检验进行统计分析。
2.2结果
2.2.1急性经口毒性试验
表7样品急性经口毒性试验结果(均值±标准差)。
从表7可见，以20000mg/kg BW剂量的样品给予小鼠灌胃后，动物生长良好，未见体重受到影响。受试小鼠均未见有中毒症状，观察14天无动物死亡。试验结束解剖动物、大体观察，肝、肾、脾、心、肺、胃、肠等主要脏器均未见明显异常改变。结果表明，该样品对小鼠的急性经口毒性MTD大于20g/kg BW,急性经口毒性属无毒级。
2.2.2 Ames试验
表8样品Ames试验结果(均值±标准差)。
表8中的结果(菌落数)均为3个平皿的均值±标准差。阳性对照：TA97a+S-9、TA98+S-9、TA100+S-9采用2-氨基芴(剂量为10μg/皿)；TA98-S-9采用柔毛霉素(剂量为6μg/皿)；TA97a-S-9、TA102-S-9采用敌克松(剂量为50μg/皿)；TA100-S-9采用叠氮钠(剂量为1.5μg/皿)；TA102+S-9采用1,8-二羟基蒽醌(剂量为50μg/皿)。
从表8可见，对TA97a、TA98、TA100、TA102四种试验菌株，无论是否加入S-9,样品各剂量组的回变菌落数均未超过自发回变菌落数的两倍，亦无剂量-反应关系，表明该受试物诱变试验结果为阴性。
2.2.3小鼠骨髓细胞微核试验
表9样品对小鼠的骨髓细胞微核发生率的影响(均值±标准差)。
从表9可见，样品各剂量组小鼠的骨髓细胞微核率与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，各剂量组PCE/NCE值均不少于阴性对照组的20％，与阴性对照组比较也无明显差异，而环磷酞胺阳性对照组的微核率与阴性对照组的差异有非常显著性(P<0.01)，提示未见该样品对小鼠的骨髓细胞有损伤和抑制作用。
2.2.4小鼠精子畸形试验：
表10样品对小鼠精子畸形发生率的影响(均值±标准差)。
从表10可见，样品对小鼠精子畸形发生率未产生明显改变，样品各剂量组的精了畸形率与阴性对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，而环磷酰胺阳性对照组与阴性对照组的差异有非常显著性(P<0.01)，提示未见该样品对雄性小鼠的精子产生畸变作用。
2.2.5大鼠30天喂养试验
2.2.5.1动物一般表现：实验期间，各组动物生长发育良好，未见动物有异常行为和中毒表现，各组动物均无死亡。
2.2.5.2样品对大鼠体重及食物利用率的影响
结果见表11-12，以I500、750、375mg/kg BW剂量的样品给大鼠灌胃30天，实验期间，样品各剂量组雌雄鼠每周的体重、增重量、每周进食量及总进食量、每周食物利用率及总食物利用率与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，表明该样品对大鼠的体重增长和食物利用率无明显影响。
表11样品对大鼠体重的影响(均值±标准差)。
表12样品对大鼠食物利用率的影响(均值±标准差)。
2.2.5.3样品对大鼠血常规指标的影响
表13样品30天喂养试验结束大鼠血常规指标检查结果(均值±标准差)。
表14样品30天喂养试验结束大鼠血常规指标检查结果(均值±标准差)。
从表14可见，以1500、750、375mg/Kg BW剂量的样品给大鼠灌胃30天，样品各剂量组雌、雄性大鼠的血红蛋白、红细胞总数、自细胞总数及其分类、血小板数与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，表明该样品对大鼠的血常规指标无明显影响。
2.2.5.4样品对大鼠血液生化指标的影响
结果见表15-16，以1500、750、375mg/Kg BW剂量的样品给大鼠灌胃30天，样品各剂量组雌、雄性大鼠的血清谷草转氨酶、谷丙转氨酶、尿素氮、肌酐、胆固醇、甘油三脂、总蛋自、白蛋白、血糖与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，表明该样品对大鼠的血液生化指标无明显影响。
表15样品30天喂养试验结束大鼠血液生化指标检查结果(均值±标准差)。
表16样品30天喂养试验结束大鼠血液生化指标检查结果(均值±标准差)。
2.2.5.5样品对大鼠脏器重量及脏器/体重比值的影响
结果见表17-18，以1500、750、75mg/kg BW剂量的样品给大鼠灌胃30天，样品各剂量组大鼠的肝肾、脾、雄鼠睾丸重量和肝/体、肾/体、脾/体、雄鼠睾丸体比值与对照组比较，差异均无显著性(P>0.05)，表明该样品对大鼠的脏器重量及脏器/体重比值无明显影响。
表17样品对大鼠脏器重量的影响(均值±标准差)。
表18样品对大鼠脏器/体重的影响(均值±标准差)。
2.2.5.6解剖大体观察及组织学检查结果
实验结束解剖动物，大体观察各组动物均未发现明显病变。故只选样品的高剂量组和阴性对照组动物的主要脏器进行组织病理切片检查，结果见表19。结果显示，高剂量组和对照组各有1只雌性大鼠的肝小叶组织可见肝细胞轻度脂肪变性，高剂量组有1只雌性、对照组有1只雄性和1只雌性大鼠的肝小叶可见肝细胞点状坏死，高剂量组和对照组均有2只雄性和1只雌性大鼠的肝脏汇管区可见少量炎细胞浸润；两组均有1只雄性和1只雌性大鼠的肾脏皮质部间质可见少量炎细胞浸润。以上组织病变属动物的自发轻型病变，且两组动物的组织病变程度相似，故可以排除是样品所致，其他脏器组织未见病理组织学改变，表明该样品对大鼠的上述脏器组织无损害作用。
表19样品30天喂养试验大鼠组织病理学检查结果。
2.3小结
以2000mg/kg BW剂量的样品给予小鼠灌胃后，未见动物有中毒症状和死亡，该样品对小鼠的急性经口毒性MTD大于20g/kg BW，急性经口毒性属无毒级。三项遗传毒性试验(Ames试验、小鼠骨髓细胞微核试验、小鼠精子畸形试验)结果均为阴性。30天喂养试验，以1500、750、375mg/kg BW 3个剂量(分别相当于人体推荐用量100、50、25倍)的样品连续给大鼠灌胃30天，实验期间动物生长发育良好，各剂量组大鼠的体重、增重量、进食量、食物利用率、血常规指标、血液生化指标、脏器重策及脏器/体重比值等均未受明显影响；大体解剖观察和组织病理学检查未见与样品有关的异常改变。在受试剂量范围内未见该样品对大鼠各项观察指标产生毒副作用。
3对化学性肝损伤有辅助保护作用实验
3.1材料和方法
3.1.1样品：实施例4，规格为0.45g/粒，置阴凉十燥处保存。人体推荐用量为每人(成人)每日1次，每次2粒，按60kg体重折算成15mg/kg BW。
3.1.2实验动物及环境：选用广西医科大学实验动物中心繁殖的SPF级SD种雄性大鼠50只，体重180-220g,实验动物生产许可证号：SCXK(桂)2014-0002，实验动物质量合格证号：45000300000521。动物实验室为屏障系统，使用许可证号：SYXK(桂)2016-0002。动物实验室温度：22-25℃，相对湿度：55-70％。
3.1.3剂量选择与受试物给予方式：根据样品的人体推荐用量，设300、150、75mglkg BW 3个剂量组(分别相当于推荐量的20、10、5倍)，另设一个酒精肝损伤模型组(模型对照组)和一个阴性对照组，每组10只动物。分别称取样品内容物6.0、3.0、1.5g，各加纯水至200mL,混匀，配成30.0、15.0、7.5mg/mL浓度的混悬液，分别给予相应剂量组动物灌胃，灌胃量为1.0mL/100g BW，模型对照组和阴性对照组给予等体积的纯水，每天灌胃一次，连续30天。
3.1.4主要仪器与试剂
仪器：半自动生化分析仪、冷冻切片机、电子分析天平、显微镜、离心机、组织匀浆器、旋涡混匀器、水浴锅及微量加样器等。
试剂：无水乙醇、还原型GSH、磺基水杨酸、5,5’-二硫对硝基甲酸、Na2HPO4、NaH2PO4、KH2PO4、NaN3、EDTA-Na2等；MDA、TG试剂盒。
3.1.5实验方法：依据《保健食品检验与评价技术规范》(2003年版)中对化学性肝损伤有辅助保护作用试验方法，采用酒精肝损伤模型方案。大鼠在SPF级动物实验室内饲养观察5天后，根据体重分层随机分为5组，即3个剂量组和2个对照组，每组10只雄性大鼠。开始试验后，各剂量组大鼠灌胃给予相应浓度的受试溶液，模型对照组和阴性对照组给予纯水，灌胃量为1.0mL/100g BW。每天灌胃一次，每周称重两次，连续30天。试验至第30天时，模型对照组及样品各剂量组动物一次灌胃给予50％乙醇溶液1.2mL/100g BW，制造肝损伤模型：阴性对照组灌给等体积的纯水。禁食16小时后处死大鼠，快速取出肝脏，其中一部分(左叶)用作冷冻切片，进行病理组织学检查，观察脂滴在肝脏中的分布、范围和面积并进行评分；另一部分用于制成肝匀浆分别测定丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)及甘油三醋(TG)含量。
3.1.6试验数据处理：采用SPSS统计软件进行方差分析统计处理
3.1.7结果判定：满足以下任一条件，可判定受试样品具有对化学性肝损伤有辅助保护作用。
3.1.7.1肝脏MDA、还原性GSH和TG三项检测指标阳性。
3.1.7.2肝脏MDA、还原型GSH和TG三项检测指标中任两项指标阳性和病理组织学检查结果阳性。
3.2.试验结果
3.2.1样品对大鼠体重的影响
表20试验前后各组大鼠体重变化(均值±标准差)。
从表20可见，试验前各组大鼠体重一致，试验过程各周各组大鼠的体重及试验结束时的增重量相互比较，差异均没有显著性(P>0.05)，表明该样品对大鼠的体重增长没有明显影响作用。
3.2.2样品对酒精性肝损伤大鼠的肝组织过氧化脂质降解产物丙二醛(MDA)含量的影响
表21各组大鼠肝组织匀浆丙二醛(MDA)含量(均值±标准差)。
从表21可见，肝损模型对照组大鼠肝组织的MDA含量明显高于阴性对照组，且两者的差异具有非常显著性(P<0,01)，说明肝损模型成立。样品各剂量组大鼠的肝组织MDA含量均低于肝损模型对照组，其中的高剂量组与模型对照组的差异有非常显著性(P<0.01)，表明该样品具有降低酒精性损伤的大鼠肝组织中过氧化脂质含量的作用。
3.2.3样品对酒精性肝损伤大鼠的肝组织甘油三酯(TG)含量的影响
表22各组大鼠肝组织匀浆TG含量(均值±标准差)。
从表22可见，肝损模型对照组的肝组织TG含量明显高于阴性对照组，两者差异具有非常显著性(P<0.01)，说明肝损模型成立。样品各剂量组人鼠的肝组织TG含量均低于肝损模型对照组，且高、中剂量组与肝损模型对照组的差异具有显著性(分别P<0.01和P<0.05)，表明该样.昆具有降低酒精性损伤的大鼠肝组织中甘油三脂(TG)含量的作用。
3.2.4样品对酒精性肝损伤大鼠的肝组织还原型谷胱甘肽(GSH)含量的影响
表23各组大鼠肝组织匀浆GSH含量(均值±标准差)。
从表23可见，肝损模型对照组的肝组织中GSH含量显著低于阴性对照组，两者差异有非常显著性(P<0.01)，表明肝损模型成立。样品各剂量组大鼠的肝组织GSH含量高于模型对照组，且各剂量与肝损模型对照组的差异具有显著性(P<0.01或P<0.05)，表明该样品具有提高酒精性肝损伤的大鼠肝组织中GSH含量的作用。
3.2.5样品对酒精性肝损伤大鼠的肝组织脂肪变性的影响
表24各组大鼠肝组织脂肪变性检查结果(均值±标准差)。
从表24可见，肝损模型对照组大鼠的肝组织脂肪变性评分值高护阴性对照组，两者差异具有非常显著性(P<0.01)，表明肝损模型成立。样品各剂量组大鼠的肝组织脂肪变性评分值均低于肝损模型对照组，但各剂量组与肝损模型对照组的差异均无显著性(P>0.05)表明该样品对酒精性肝损伤的大鼠肝组织脂肪变性无减轻作用。
3.3结果判定
分别以300、150、75mg/Kg BW(相当于人体推荐用量20、15、5倍)剂量的样品给大鼠连续灌胃30天，能降低酒精性肝损模型大鼠的肝组织中的丙二醛(MDA)及甘油三脂(TG)含量，提高其肝组织中还原型谷胱甘肽(GSH)含量，对大鼠的体重增长及酒精性肝损模型大鼠的肝组织脂肪变性无明显影响，提示该样品对酒精性肝损伤有辅助保护作用。
上述具体实施例仅仅是对本发明的解释，其并不是对本发明的限制，本领域技术人员在阅读完本说明书后可以根据需要对本实施例做出没有创造性贡献的修改，但只要在本发明的权利要求范围内都受到专利法的保护。

Claims (8)

1.一种护肝组合物，其特征在于，按重量份计，包括有以下组分：灵芝提取物50-300份、葡萄籽提取物30-240份、姜黄提取物20-230份、维生素C 10-150份。
2.根据权利要求1所述的护肝组合物，其特征在于，按重量份计，还包括有以下组分：灵芝提取物80-200份、葡萄籽提取物50-180份、姜黄提取物40-160份、维生素C 30-100份。
3.一种护肝保健食品，其特征在于：包括权利要求1-2任一项所述的护肝组合物，还包括药学上可接受的辅料。
4.根据权利要求3所述的护肝保健食品，其特征在于，按重量份计，包括有以下组分：灵芝提取物50-300份、葡萄籽提取物30-240份、姜黄提取物20-230份、维生素C 10-150份、微晶纤维素25-180份、二氧化硅2-40份、硬脂酸镁1-30份。
5.根据权利要求3所述的护肝保健食品，其特征在于，按重量份计，包括有以下组分：灵芝提取物80-200份、葡萄籽提取物50-180份、姜黄提取物40-160份、维生素C 30-100份、微晶纤维素35-130份、二氧化硅4-20份、硬脂酸镁3-15份。
6.一种如权利要求3-5任一项所述的护肝保健食品的制备方法，其特征在于，包括有以下步骤：
S1灵芝提取物、葡萄籽提取物、姜黄提取物、微晶纤维素分别过40-200目筛，混合制得总混粉；
S2向总混粉中喷洒70%食用乙醇，然后过10-40目筛制粒，干燥至颗粒含水量≤5%，制得干颗粒；
S3干颗粒与维生素C、二氧化硅和硬脂酸镁混合，制得护肝保健食品。
7.根据权利要求6所述的护肝保健食品的制备方法，其特征在于：所述护肝保健食品为软胶囊、片剂、粉剂或硬胶囊中的一种。
8.一种如权利要求1-2任一项所述的护肝组合物或权利要求3-5任一项所述的护肝保健食品的应用，其特征在于：用于护肝。
CN201810369469.0A 2018-04-24 2018-04-24 一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用 Pending CN108576819A (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810369469.0A CN108576819A (zh) 2018-04-24 2018-04-24 一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201810369469.0A CN108576819A (zh) 2018-04-24 2018-04-24 一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN108576819A true CN108576819A (zh) 2018-09-28

Family

ID=63614220

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201810369469.0A Pending CN108576819A (zh) 2018-04-24 2018-04-24 一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN108576819A (zh)

Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109287924A (zh) * 2018-11-26 2019-02-01 吴小东 一种解酒保肝的组合物及其制备方法
CN109349640A (zh) * 2018-12-10 2019-02-19 金木集团有限公司 一种改善化学性肝损伤的保健胶囊
CN109965072A (zh) * 2019-04-08 2019-07-05 杭州花姐食品有限公司 一种养护肝脏的压片糖果及其制备方法与应用
CN110354249A (zh) * 2019-07-26 2019-10-22 珠海宝德润生健康科技有限公司 一种保肝组合物及其制备方法
CN113876927A (zh) * 2021-11-04 2022-01-04 常州市第四制药厂有限公司 一种保肝组合物及其制剂
CN113908246A (zh) * 2021-11-19 2022-01-11 北京一品树源生物科技有限公司 一种治疗酒精性肝损伤的药物组合物及其制备方法与应用
CN115444894A (zh) * 2022-09-24 2022-12-09 北京东方红航天生物技术股份有限公司 早期干预肝纤维化的组合物及其制备方法、制剂
CN116058500A (zh) * 2023-02-02 2023-05-05 云南积大生物科技有限公司 一种营养护肝的组合物及其制备方法

Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1785054A (zh) * 2005-11-25 2006-06-14 南京中科集团有限公司 一种具有抗氧化功能的保健食品及其制备工艺
CN103110889A (zh) * 2013-02-01 2013-05-22 北京东方红航天生物技术股份有限公司 一种有助于增强免疫力的中药及其制备方法
CN103190616A (zh) * 2013-04-03 2013-07-10 上海春芝堂生物制品有限公司 一种三七葡萄籽胶囊及其制备方法
CN103372169A (zh) * 2012-04-13 2013-10-30 张立中 一种治疗酒精中毒与解酒的制剂
CN103800390A (zh) * 2014-01-20 2014-05-21 天津铸源健康科技集团有限公司 具有增强免疫力及保肝功能的保健品及其制备方法与应用
CN104548061A (zh) * 2014-12-31 2015-04-29 天津天狮生物发展有限公司 对化学性肝损伤有辅助保护功效的组合物及其制备方法
CN105902998A (zh) * 2016-06-15 2016-08-31 雷娟 保肝胶囊
WO2017011523A1 (en) * 2015-07-15 2017-01-19 Unigen, Inc. Compositions, methods, and medical compositions for treatment of and maintaining the health of the liver

Patent Citations (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN1785054A (zh) * 2005-11-25 2006-06-14 南京中科集团有限公司 一种具有抗氧化功能的保健食品及其制备工艺
CN103372169A (zh) * 2012-04-13 2013-10-30 张立中 一种治疗酒精中毒与解酒的制剂
CN103110889A (zh) * 2013-02-01 2013-05-22 北京东方红航天生物技术股份有限公司 一种有助于增强免疫力的中药及其制备方法
CN103190616A (zh) * 2013-04-03 2013-07-10 上海春芝堂生物制品有限公司 一种三七葡萄籽胶囊及其制备方法
CN103800390A (zh) * 2014-01-20 2014-05-21 天津铸源健康科技集团有限公司 具有增强免疫力及保肝功能的保健品及其制备方法与应用
CN104548061A (zh) * 2014-12-31 2015-04-29 天津天狮生物发展有限公司 对化学性肝损伤有辅助保护功效的组合物及其制备方法
WO2017011523A1 (en) * 2015-07-15 2017-01-19 Unigen, Inc. Compositions, methods, and medical compositions for treatment of and maintaining the health of the liver
CN105902998A (zh) * 2016-06-15 2016-08-31 雷娟 保肝胶囊

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
王敏 等: "姜黄素应用于肝脏疾病的研究进展", 《解放军医药杂志》 *
胡英 等: "《药物制剂》", 28 February 2013, 中国医药科技出版社 *
迟玉杰: "《普通高等教育"十三五"规划教材 保健食品学》", 31 May 2016, 中国轻工业出版社 *

Cited By (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN109287924A (zh) * 2018-11-26 2019-02-01 吴小东 一种解酒保肝的组合物及其制备方法
CN109349640A (zh) * 2018-12-10 2019-02-19 金木集团有限公司 一种改善化学性肝损伤的保健胶囊
CN109965072A (zh) * 2019-04-08 2019-07-05 杭州花姐食品有限公司 一种养护肝脏的压片糖果及其制备方法与应用
CN110354249A (zh) * 2019-07-26 2019-10-22 珠海宝德润生健康科技有限公司 一种保肝组合物及其制备方法
CN113876927A (zh) * 2021-11-04 2022-01-04 常州市第四制药厂有限公司 一种保肝组合物及其制剂
CN113908246A (zh) * 2021-11-19 2022-01-11 北京一品树源生物科技有限公司 一种治疗酒精性肝损伤的药物组合物及其制备方法与应用
CN115444894A (zh) * 2022-09-24 2022-12-09 北京东方红航天生物技术股份有限公司 早期干预肝纤维化的组合物及其制备方法、制剂
CN115444894B (zh) * 2022-09-24 2024-06-04 北京东方红航天生物技术股份有限公司 早期干预肝纤维化的组合物及其制备方法、制剂
CN116058500A (zh) * 2023-02-02 2023-05-05 云南积大生物科技有限公司 一种营养护肝的组合物及其制备方法

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN108576819A (zh) 一种护肝组合物、保健食品、制备方法及其应用
WO2015172608A1 (zh) 一种辅助降血脂的胶囊及其制备方法
CN102090630B (zh) 增强人体抗氧化的保健品及其制备方法
CN102885306A (zh) 一种辅助降血脂的保健食品组合物及其制备方法
CN102940733A (zh) 一种缓解体力疲劳的组合物及其制备方法和应用
CN103330194B (zh) 一种茶叶籽油茶多酚软胶囊及制备方法
CN109700011A (zh) 一种改善睡眠的保健食品及其制备方法
CN104548061A (zh) 对化学性肝损伤有辅助保护功效的组合物及其制备方法
CN104383447B (zh) 一种中药药物组合物及其制备方法与应用
CN101953469B (zh) 一种含有茶多酚的保健品组合物
CN101356972B (zh) 一种抗疲劳、耐缺氧的运动保健品
CN101856418B (zh) 防治肾炎的药物制剂及其制备方法
CN103550398B (zh) 一种缓解疲劳的组合物及其制备方法和医药用途
CN105902998A (zh) 保肝胶囊
CN108125231A (zh) 一种含有人参的保健食品及其制备方法
CN105639620A (zh) 一种增加骨密度的保健食品组合物及其制备方法
CN108066473A (zh) 对化学性肝损伤有保护作用的制剂及其制备方法
CN109007839A (zh) 一种具有辅助降血脂功效的保健食品胶囊及其制备方法
CN101057909A (zh) 一种具有多项保健功能的组合物及其配制方法
AU2016313671A1 (en) Health food and process for preparing the same
CN101637268A (zh) 一种具有祛斑、抗辐射功能的保健食品及其制备方法
Soji-Omoniwa et al. Toxicological Evaluation of Cod Liver Oil-Enriched Vernonia amygdalina Leaf-Based Diet in Wistar Rats
CN102920857B (zh) 用于缓解疲劳的组合物及其制备方法与应用
CN111480846A (zh) 一种辅助降血脂、提高免疫力的保健品
CN108741014A (zh) 一种抗氧化组合物、保健食品、制备方法及其应用

Legal Events

Date Code Title Description
PB01 Publication
PB01 Publication
SE01 Entry into force of request for substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination