CN106459039A

CN106459039A - 为jak抑制剂的5‑氯‑2‑二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物

Info

Publication number: CN106459039A
Application number: CN201580026680.7A
Authority: CN
Inventors: M·E·扎克; N·C·雷; S·C·古达克; R·蒙顿卡; T·凯勒; Y-X·成; W·李; P·源
Original assignee: F Hoffmann La Roche AG
Current assignee: F Hoffmann La Roche AG
Priority date: 2014-05-23
Filing date: 2015-05-22
Publication date: 2017-02-22
Also published as: WO2015177326A1; EP3145929A1; JP7041198B2; JP2020164542A; IL248661B; KR20170005870A; AU2015261812A1; AU2019257450A1; US20150336962A1; AU2015261812B2; MX2016015062A; CN109970743B; US20170145020A1; CL2016002877A1; EA201692338A1; IL248661A0; PH12016502099A1; CA2948589A1; SG11201609830RA; US20160237086A1

Abstract

本文描述了式(00A)化合物和作为Janus激酶抑制剂的应用方法。所要求保护的用途是治疗炎症和哮喘。

Description

为JAK抑制剂的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物

相关申请的交叉引用

本申请要求2014年5月23日提交的美国临时申请No.62/002,547、2015年1月8日提交的美国临时申请No.62/101,234、2015年3月9日提交的美国临时申请No.62/130,098和2015年4月22日提交的国际申请No.PCT/CN2015/077176的权益，将其每一个通过引用整体并入本文。

技术领域

本发明的领域涉及式(00A)及其子式的化合物，其是Janus激酶(例如JAK1)的抑制剂，以及含有这些化合物的组合物，以及应用方法，包括但不限于诊断或治疗患有对JAK激酶的抑制响应的疾患的患者。

发明背景

细胞因子通路介导广泛的生物学功能，包括炎症和免疫的许多方面。Janus激酶(JAK)，包括JAK1、JAK2、JAK3和TYK2，是与I型和II型细胞因子受体相关并调节细胞因子信号转导的细胞质蛋白激酶。与同源受体的细胞因子契合触发受体相关的JAK的激活，这导致信号转导子和转录激活子(STAT)蛋白的JAK介导的酪氨酸磷酸化，并且最终导致特定基因集的转录激活(Schindler等人，2007，J.Biol.Chem.282:20059-63)。JAK1、JAK2和TYK2表现出广泛的基因表达模式，而JAK3表达限于白细胞。细胞因子受体通常作为异源二聚体起作用，因此，多于一种类型的JAK激酶通常与细胞因子受体复合物相关联。已经在许多情况下通过遗传研究确定并通过其他实验证据证实了与不同细胞因子受体复合物相关联的特定JAK。抑制JAK酶的示例性治疗益处在例如国际申请No.WO 2013/014567中讨论。

最初在新激酶筛选中鉴定了JAK1(Wilks A.F.,1989,Proc.Natl.Acad.Sci.U.S.A.86:1603-1607)。遗传和生物化学研究已经显示JAK1在功能和物理上与I型干扰素(例如IFNα)、II型干扰素(例如IFNγ)和IL-2和IL-6细胞因子受体复合物相关(Kisseleva等人,2002,Gene 285:1-24；Levy等人,2005,Nat.Rev.Mol.CellBiol.3:651-662；O’Shea等人,2002,Cell,109(suppl.):S121-S131)。JAK1敲除小鼠由于LIF受体信号传导的缺陷而在围产期死亡(Kisseleva等人,2002,Gene 285:1-24；O’Shea等人,2002,Cell,109(suppl.):S121-S131)。来自JAK1敲除小鼠的组织的表征显示该激酶在IFN、IL-10、IL-2/IL-4和IL-6通路中的关键作用。靶向IL-6通路(Tocilizumab)的人源化单克隆抗体被欧洲委员会(European Commission)批准用于治疗中度至重度的类风湿性关节炎(Scheinecker等人,2009,Nat.Rev.Drug Discov.8:273-274)。

CD4T细胞通过在肺内产生TH2细胞因子包括IL-4、IL-9和IL-13在哮喘发病机理中起重要作用(Cohn等人,2004,Annu.Rev.Immunol.22:789-815)。IL-4和IL-13诱导增加的粘液产生、嗜酸性粒细胞向肺的募集和IgE的产生增加(Kasaian等人,2008,Biochem.Pharmacol.76(2):147-155)。IL-9导致肥大细胞活化，这加剧了哮喘症状(Kearley等人,2011,Am.J.Resp.Crit.Care Med.,183(7):865-875)。当与共同(common)γ链或IL-13Rα1链分别组合时，IL-4Rα链激活JAK1并与IL-4或IL-13结合(Pernis等人,2002,J.Clin.Invest.109(10):1279-1283)。共同γ链还可以与IL-9Rα组合以结合IL-9，并且IL-9Rα也激活JAK1(Demoulin等人,1996,Mol.Cell Biol.16(9):4710-4716)。虽然共同γ链激活JAK3，但是已经显示JAK1相对于JAK3是显性的，并且JAK1的抑制足以通过共同γ链失活信号传导，而不管JAK3活性(Haan等人,2011,Chem.Biol.18(3):314-323)。通过阻断JAK/STAT信号通路抑制IL-4、IL-13和IL-9信号传导可以减轻临床前肺炎症模型中的哮喘症状(Mathew等人,2001,J.Exp.Med.193(9):1087-1096；Kudlacz等人,2008,Eur.J.Pharmacol.582(1-3):154-161)。

生物化学和遗传研究已经显示JAK2与单链(例如EPO)、IL-3和干扰素γ细胞因子受体家族之间的关联(Kisseleva等人,2002,Gene 285:1-24；Levy等人,2005,Nat.Rev.Mol.Cell Biol.3:651-662；O’Shea等人,2002,Cell,109(suppl.):S121-S131)。与此一致，JAK2敲除小鼠死于贫血(O’Shea等人,2002,Cell,109(suppl.):S121-S131)。JAK2中的激酶活化突变(例如，JAK2V617F)与人的骨髓增殖性疾病相关。

JAK3仅与存在于IL-2、IL-4、IL-7、IL-9、IL-15和IL-21细胞因子受体复合物中的γ共同细胞因子受体链相关联。JAK3对于淋巴细胞发育和增殖是关键的，并且JAK3中的突变导致严重的联合免疫缺陷(SCID)(O’Shea等人,2002,Cell,109(suppl.):S121-S131)。基于其在调节淋巴细胞中的作用，JAK3和JAK3介导的通路已靶向于免疫抑制适应症(例如，移植排斥和类风湿性关节炎)(Baslund等人,2005,Arthritis&Rheumatism 52:2686-2692；Changelian等人,2003,Science 302:875-878)。

TYK2与I型干扰素(例如IFNα)、IL-6、IL-10、IL-12和IL-23细胞因子受体复合物相关(Kisseleva等人,2002,Gene 285:1-24；Watford,W.T.&O’Shea,J.J.,2006,Immunity25:695-697)。与此一致，源自TYK2缺陷型人的原代细胞在I型干扰素、IL-6、IL-10、IL-12和IL-23信号传导中是有缺陷的。靶向IL-12和IL-23细胞因子的共享p40亚基的完全人单克隆抗体(Ustekinumab)最近被欧洲委员会批准用于治疗中度至重度斑块性银屑病(Krueger等人,2007,N.Engl.J.Med.356:580-92；Reich等人,2009,Nat.Rev.Drug Discov.8:355-356)。此外，靶向IL-12和IL-23通路的抗体进行了用于治疗克罗恩病的临床试验(Mannon等人,2004,N.Engl.J.Med.351:2069-79)。

本领域存在对由JAK激酶介导的疾患(例如上述那些)的额外的或替代的治疗的需求。

发明内容

本文提供的是抑制一种或多种JAK激酶的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物。

因此，本发明的一个方面包括式(00A)化合物：

以及其立体异构体和盐，其中：R⁰⁰是H或CH₃；R⁰¹是H或NH₂；R⁰是H或NH₂；且环Q是(i)或(ii)：

其中：t¹和t²各自独立地是0或1；X^A和X^B独立地选自H、C₁-C₆烷基、C₂-C₄烯基、-NR^aR^b、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基；其中当X^A和X^B之一独立地是C₁-C₆烷基、C₂-C₄烯基、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基时，各X^A和X^B独立地任选被Y¹取代，其中Y¹选自：

(a)任选被T¹取代的C₁-C₆烷基，其中T¹选自OH、卤代、CN、亚氨基、3-6元环烷基、3-11元杂环烷基、3-11元杂环烯基、5-10元杂芳基、-O-(C₁-C₆烷基)、C(O)OH、氧杂环丁-3-基甲基、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-NR^aR^b、-N(+)R^aR^bR^c(其中R^c是甲基)、-C(O)NR^aR^b、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基和苯基，其中T¹的各烷基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、杂芳基和苯基任选被下列基团取代：OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、C₁-C₆烷基、卤代、CN、氧代、-(C₁-C₆烷基)CONR^aR^b、-NR^aR^b、苯基或-O-(C₁-C₆烷基)，其任选被OH取代；

(b)3-11元杂环烷基、-(C₁-C₆亚烷基)-3-11元杂环烷基、-C(O)-3-11元杂环烷基、-(C₁-C₆亚烷基)C(O)-3-11元杂环烷基或-OC(O)-4-6元杂环烷基；其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、C₁-C₆烷基、-(C₁-C₆亚烷基)-CF₃、氧代、-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b、-NR^aR^b、-(C₁-C₆亚烷基)-苯基或-C(O)-4-6元杂环烷基，其任选被-NR^aR^b取代；

(c)N(+)(AA)₃，其中各AA独立地是任选被苯基取代的C₁-C₆烷基；

(d)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、NR^aR^b或CN；

(e)CN、卤代或氧代；

(f)-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b，或者任选被–(C₁-C₆烷基)或-NR^aR^b取代的-C(O)-4-6元杂环烷基，或者-C(O)O-(C₁-C₆烷基)，其任选被OH、NR^aR^b或3-11元杂环烷基取代，其中所述杂环烷基任选被C₁-C₆烷基取代；

(g)OH、-O-苯基或-O-(C₁-C₆烷基)，其中所述烷基任选被下列基团取代：OH或-NR^aR^b；

(h)任选被下列基团取代的苯基：OH、卤代、C₁-C₆烷基、CF₃或CN；

(i)5-6元杂芳基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、C₁-C₆烷基、CF₃、CN或任选被C₁-C₆烷基或3-11元杂环烷基取代的3-11元杂环烷基；

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；

(k)-NR^aR^b，和

(l)–O-CH₂C(O)-3-11元杂环烷基；

其中R^a和R^b独立地选自：

(a)H，

(b)C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(3-11元杂环烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)-S-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、萘基(naphthylenyl)、-NR^azR^bz、-C(O)NR^azR^bz、氧代、-O-(C₁-C₆烷基)、任选被C₁-C₆烷基或卤代取代的5-6元杂芳基、或苯并[1,3]间二氧杂环戊烯-2-基、或任选被氧代取代的3-11元杂环烯基；

(c)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其中所述亚烷基任选被下列基团取代：OH、卤代或CN；

(d)-(C₁-C₆亚烷基)-苯基，其中亚烷基任选被卤代取代，且所述苯基任选被下列基团取代：OH、卤代、CF₃、C₁-C₆烷基、-O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基、或–O-苯基；

(e)-(C₁-C₆亚烷基)-4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：卤代、氧代或C₁-C₆烷基；

(f)-(C₁-C₆亚烷基)-O-苯基，其中所述苯基任选被下列基团取代：卤代、C₁-C₆烷基或-O-苯基；

(g)–(C₁-C₆烷基)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN或任选被OH或CN取代的C₁-C₆烷基；

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(b)C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(3-11元杂环烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)-S-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、萘基、-氧代、-O-(C₁-C₆烷基)、任选被C₁-C₆烷基或卤代取代的5-6元杂芳基、或苯并[1,3]间二氧杂环戊烯-2-基、或任选被氧代取代的3-11元杂环烯基；

(d)-(C₁-C₆亚烷基)-苯基，其中亚烷基任选被卤代取代，且所述苯基任选被下列基团取代：OH、卤代、CF₃、C₁-C₆烷基、-O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基或–O-苯基；

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是：当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

其中t¹是0时，则X^A不是甲基、2-甲基丙-2-醇或四氢吡喃基；且，在一些实施方案中，当环Q是(i)且t¹是0时，则X^A不能是-NR^aR^b。

此外，本发明的另一方面包括进一步限定为式(0A)化合物的式(00A)化合物：

以及其立体异构体和盐，其中：R⁰⁰是H或CH₃；R⁰¹是H或NH₂；R⁰是H或NH₂；且环Q是(i)或(ii):

其中：t¹和t²各自独立地是0或1；X^A和X^B独立地选自H、C₁-C₆烷基、C₂-C₄烯基、-NR^aR^b、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基；其中当X^A和X^B之一独立地是C₁-C₆烷基、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基时，X^A和X^B各自独立地任选被Y¹取代，其中Y¹选自：

(a)任选被T¹取代的C₁-C₆烷基，其中T¹选自OH、卤代、CN、亚氨基、3-6元环烷基、3-11元杂环烷基、3-11元杂环烯基、5-10元杂芳基、-O-(C₁-C₆烷基)、C(O)OH、氧杂环丁-3-基甲基、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-NR^aR^b、-N(+)R^aR^bR^c(其中R^c是甲基)、-C(O)NR^aR^b、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基和苯基，其中T¹的各烷基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、杂芳基和苯基任选被下列基团取代：OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、C₁-C₆烷基、卤代、CN、氧代、-NR^aR^b、苯基或-O-(C₁-C₆烷基)，其任选被OH取代；

(d)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代或CN；

(e)CN、卤代或氧代；

(f)-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b、或者任选被-NR^aR^b取代的-C(O)-4-6元杂环烷基，或者-C(O)O-(C₁-C₆烷基)，其任选被OH、NR^aR^b或3-11元杂环烷基取代，其中所述杂环烷基任选被C₁-C₆烷基取代；

(i)任选被下列基团取代的5-6元杂芳基：OH、卤代、C₁-C₆烷基、CF₃或CN；

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；和

(k)-NR^aR^b，

其中R^a和R^b独立地选自：

(a)H，

(b)C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(3-11元杂环烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)-S-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、萘基、-NR^azR^bz、-C(O)NR^azR^bz、氧代、-O-(C₁-C₆烷基)、任选被C₁-C₆烷基或卤代取代的5-6元杂芳基、或苯并[1,3]间二氧杂环戊烯-2-基、或任选被氧代取代的3-11元杂环烯基；

(g)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN或任选被OH取代的C₁-C₆烷基；

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是：当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

本发明的另一方面包括进一步限定为式(A)化合物的式(00A)化合物，

其中：t¹和t²各自独立地是0或1；X^A和X^B独立地选自H、C₁-C₆烷基、-NR^aR^b、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基；其中当X^A和X^B之一独立地是C₁-C₆烷基、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基时，X^A和X^B各自独立地任选被Y¹取代，其中Y¹选自：

(a)任选被T¹取代的C₁-C₆烷基，其中T¹选自OH、卤代、CN、亚氨基、3-6元环烷基、-O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-NR^aR^b、-N(+)R^aR^bR^c(其中R^c是甲基)、-C(O)NR^aR^b、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基和苯基，其中T¹的各烷基、环烷基和苯基任选被下列基团取代：OH、C₁-C₆烷基、卤代、CN、氧代、-NR^aR^b、苯基或任选被OH取代的-O-(C₁-C₆烷基)；

(d)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代或CN；

(e)CN、卤代或氧代；

(f)-C(O)-(C₁-C₆烷基)、任选被OH取代的-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b、或-C(O)-4-6元杂环烷基，其任选被-NR^aR^b取代，

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；和

(k)-NR^aR^b,

其中R^a和R^b独立地选自：

(a)H，

(b)C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、萘基、-NR^azR^bz、-C(O)NR^azR^bz、氧代、-O-(C₁-C₆烷基)、苯基、任选被C₁-C₆烷基或卤代取代的5-6元杂芳基、或苯并[1,3]间二氧杂环戊烯-2-基；

(d)-(C₁-C₆亚烷基)-苯基，其中亚烷基任选被卤代取代，且所述苯基任选被下列基团取代：OH、卤代、CF₃、C₁-C₆烷基、-O-(C₁-C₆烷基)或–O-苯基；

(e)-(C₁-C₆亚烷基)-4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：卤代或C₁-C₆烷基；

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是：当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

还提供了药物组合物，其包含如本文所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶例如式(00A)化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

在一些实施方案中，本发明还提供了本文所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物如式(00A)化合物在治疗中的用途，例如在治疗炎性疾病中的用途。还提供了本文所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物如式(00A)化合物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。还提供了预防、治疗对患者中Janus激酶活性抑制响应的疾病或疾患或减轻其严重性的方法，所述方法包括向所述患者施用治疗有效量的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物，例如式(00A)化合物。

附图说明

当结合附图，参考下面的详细描述，前述方面和许多伴随的优点将变得更容易认识并变得更容易理解，其中：

图1描述了在指定位置含有OMe(i)或OCHF₂(ii)基团的本发明的某些化合物的匹配对分析。

发明详述

定义

“卤素”或“卤代”是指F、Cl、Br或I。另外，术语例如“卤代烷基”意在包括单卤代烷基和多卤代烷基。

术语“烷基”是指饱和的直链或支链单价烃基，其中所述烷基可以任选被取代。在一个实例中，烷基是1至18个碳原子(C₁-C₁₈)。在其它实例中，烷基是C₀-C₆、C₀-C₅、C₀-C₃、C₁-C₁₂、C₁-C₁₀、C₁-C₈、C₁-C₆、C₁-C₅、C₁-C₄或C₁-C₃。C₀烷基是指键。烷基的实例包括甲基(Me、-CH₃)、乙基(Et、-CH₂CH₃)、1-丙基(n-Pr、正丙基、-CH₂CH₂CH₃)、2-丙基(i-Pr、异丙基、-CH(CH₃)₂)、1-丁基(n-Bu、正丁基、-CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-甲基-1-丙基(i-Bu、异丁基、-CH₂CH(CH₃)₂)、2-丁基(s-Bu、仲丁基、-CH(CH₃)CH₂CH₃)、2-甲基-2-丙基(t-Bu、叔丁基、-C(CH₃)₃)、1-戊基(正戊基、-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₃)、3-戊基(-CH(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-丁基(-CH(CH₃)CH(CH₃)₂)、3-甲基-1-丁基(-CH₂CH₂CH(CH₃)₂)、2-甲基-1-丁基(-CH₂CH(CH₃)CH₂CH₃)、1-己基(-CH₂CH₂CH₂CH₂CH₂CH₃)、2-己基(-CH(CH₃)CH₂CH₂CH₂CH₃)、3-己基(-CH(CH₂CH₃)(CH₂CH₂CH₃))、2-甲基-2-戊基(-C(CH₃)₂CH₂CH₂CH₃)、3-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH(CH₃)CH₂CH₃)、4-甲基-2-戊基(-CH(CH₃)CH₂CH(CH₃)₂)、3-甲基-3-戊基(-C(CH₃)(CH₂CH₃)₂)、2-甲基-3-戊基(-CH(CH₂CH₃)CH(CH₃)₂)、2,3-二甲基-2-丁基(-C(CH₃)₂CH(CH₃)₂)、3,3-二甲基-2-丁基(-CH(CH₃)C(CH₃)₃、1-庚基和1-辛基。在一些实施方案中，“任选取代的烷基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。

术语“烯基”是指具有至少一个不饱和位点(即碳-碳双键)的直链或支链单价烃基，其中烯基可任选被取代，并且包括具有“顺式”和“反式”取向，或者“E”和“Z”取向的基团。在一个实例中，烯基是2至18个碳原子(C₂-C₁₈)。在其它实例中，烯基是C₂-C₁₂、C₂-C₁₀、C₂-C₈、C₂-C₆或C₂-C₃。实例包括但不限于乙烯基(-CH＝CH₂)、丙-1-烯基(-CH＝CHCH₃)、丙-2-烯基(-CH₂CH＝CH₂)、2-甲基丙-1-烯基、丁-1-烯基、丁-2-烯基、丁-3-烯基、丁-1,3-二烯基、2-甲基丁-1,3-二烯、己-1-烯基、己-2-烯基、己-3-烯基、己-4-烯基和己-1,3-二烯基。在一些实施方案中，“任选取代的烯基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。

术语“炔基”是指具有至少一个不饱和位点(即碳-碳叁键)的直链或支链单价烃基，其中炔基可任选被取代。在一个实例中，炔基是2至18个碳原子(C₂-C₁₈)。在其它实例中，炔基是C₂-C₁₂、C₂-C₁₀、C₂-C₈、C₂-C₆或C₂-C₃。实例包括但不限于乙炔基(-C≡CH)、丙-1-炔基(-C≡CCH₃)、丙-2-炔基(炔丙基、-CH₂C≡CH)、丁-1-炔基、丁-2-炔基和丁-3-炔基。在一些实施方案中，“任选取代的炔基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。

“亚烷基”是指具有通过从母体烷烃的相同或两个不同的碳原子去除两个氢原子而衍生的两个一价基团中心的饱和、支链或直链烃基。在一个实例中，二价亚烷基是1至18个碳原子(C₁-C₁₈)。在其它实例中，二价亚烷基是C₀-C₆、C₀-C₅、C₀-C₃、C₁-C₁₂、C₁-C₁₀、C₁-C₈、C₁-C₆、C₁-C₅、C₁-C₄,或C₁-C₃。基团C₀亚烷基是指键。实例亚烷基基团包括亚甲基(-CH₂-)、1,1-乙基(-CH(CH₃)-)、(1,2-乙基(-CH₂CH₂-)、1,1-丙基(-CH(CH₂CH₃)-)、2,2-丙基(-C(CH₃)₂-)、1,2-丙基(-CH(CH₃)CH₂-)、1,3-丙基(-CH₂CH₂CH₂-)、1,1-二甲基乙-1,2-基(-C(CH₃)₂CH₂-)、1,4-丁基(-CH₂CH₂CH₂CH₂-)等。

术语“杂烷基”是指由指明数目的碳原子(或者如果没有指明，则至多18个碳原子)和1至5个选自O、N、Si和S的杂原子组成的直链或支链一价烃基，并且其中氮和硫原子可以任选地被氧化，并且氮杂原子可以任选地被季铵化。在一些实施方案中，杂原子选自O、N和S，其中氮和硫原子可任选被氧化，并且氮杂原子可任选被季铵化。杂原子可以位于杂烷基的任何内部位置，包括烷基连接至分子其余部分的位置(例如-O-CH₂-CH₃)。实例包括-CH₂-CH₂-O-CH₃、-CH₂-CH₂-NH-CH₃、-CH₂-CH₂-N(CH₃)-CH₃、-CH₂-S-CH₂-CH₃、-S(O)-CH₃、-CH₂-CH₂-S(O)₂-CH₃、-Si(CH₃)₃和-CH₂-CH＝N-OCH₃。至多两个杂原子可以是连续的，例如，-CH₂-NH-OCH₃和-CH₂-O-Si(CH₃)₃。杂烷基基团可以是任选被取代的。在一些实施方案中，“任选取代的杂烷基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。

“氨基”是指任选被取代的伯胺(即-NH₂)、仲胺(即-NRH)、叔胺(即-NRR)和季胺(即-N(+)RRR)，其中每个R相同或不同且选自烷基、环烷基、芳基和杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。特别的仲胺和叔胺是烷基胺、二烷基胺、芳基胺、二芳基胺、芳烷基胺和二芳烷基胺，其中烷基和芳基部分可以任选被取代。特别的仲胺和叔胺是甲胺、乙胺、丙胺、异丙胺、苯胺、苄胺、二甲胺、二乙胺、二丙胺和二异丙胺。在一些实施方案中，季胺的R基团各自独立地为任选取代的烷基。

“芳基”是指具有指定碳原子数(或如果没有指定数目，最多14个碳原子)的碳环芳基，无论是否与一个或多个基团稠合。一个实例包括具有6-14个碳原子的芳基。另一个实例包括具有6-10个碳原子的芳基。芳基的实例包括苯基、萘基、联苯基、菲基、并四苯基、1,2,3,4-四氢萘基、1H-茚基、2,3-二氢-1H-茚基等(参见例如Lang’s Handbook of Chemistry(Dean,J.A.,ed.)13^th ed.表 7-2[1985])。特定的芳基是苯基。取代的苯基或取代的芳基是指被一个、两个、三个、四个或五个取代基，例如1-2个、1-3个或1-4个取代基取代的苯基或芳基，所述取代基例如选自文中指明的基团(参见“任选取代的”定义)，例如F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。术语“取代的苯基”的实例包括单-或二(卤代)苯基基团例如2-氯苯基、2-溴苯基、4-氯苯基、2,6-二氯苯基、2,5-二氯苯基、3,4-二氯苯基、3-氯苯基、3-溴苯基、4-溴苯基、3,4-二溴苯基、3-氯-4-氟苯基、2-氟苯基、2,4-二氟苯基等；单-或二(羟基)苯基基团例如4-羟基苯基、3-羟基苯基、2,4-二羟基苯基、其保护的-羟基衍生物等；硝基苯基基团例如3-或4-硝基苯基；氰基苯基团例如4-氰基苯基；单-或二(烷基)苯基基团例如4-甲基苯基、2,4-二甲基苯基、2-甲基苯基、4-(异丙基)苯基、4-乙基苯基、3-(正丙基)苯基等；单或二(烷氧基)苯基团例如3,4-二甲氧基苯基、3-甲氧基-4-苄氧基苯基、3-乙氧基苯基、4-(异丙氧基)苯基、4-(叔丁氧基)苯基、3-乙氧基-4-甲氧基苯基等；3-或4-三氟甲基苯基；单-或二羧基苯基或(保护的羧基)苯基基团例如4-羧基苯基、单-或二(羟基甲基)苯基或(保护的羟基甲基)苯基例如3-(保护的羟基甲基)苯基或3,4-二(羟基甲基)苯基；单-或二(氨基甲基)苯基或(保护的氨基甲基)苯基例如2-(氨基甲基)苯基或2,4-(保护的氨基甲基)苯基；或单-或二(N-(甲基磺酰基氨基))苯基例如3-(N-甲基磺酰基氨基))苯基。而且，术语“取代的苯基”表示取代基不同的二取代的苯基，例如3-甲基-4-羟基苯基、3-氯-4-羟基苯基、2-甲氧基-4-溴苯基、4-乙基-2-羟基苯基、3-羟基-4-硝基苯基、2-羟基-4-氯苯基、2-氯-5-二氟甲氧基等，以及其中取代基不同的三取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄氧基-6-甲基磺酰基氨基、3-甲氧基-4-苄氧基-6-苯基磺酰基氨基，和其中取代基不同的四取代的苯基，例如3-甲氧基-4-苄氧基-5-甲基-6-苯基磺酰基氨基。在一些实施方案中，芳基(例如苯基)的取代基包含酰胺。例如，芳基(例如苯基)取代基可以是-(CH₂)_0- ₄CONR'R”，其中R'和R”各自独立地是指包括例如以下的基团：氢；未取代的C₁-C₆烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆烷基；未取代的C₁-C₆杂烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C_1-C₆杂烷基；未取代的C_6-C₁₀芳基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C_6-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；和被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；或R'和R”可以与氮原子组合以形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中环原子任选地被N、O或S取代，并且其中环任选被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代。

“环烷基”是指非芳族、饱和或部分不饱和的烃环基团，其中环烷基可以任选独立地被一个或多个本文所述的取代基取代。在一个实例中，环烷基是3至12个碳原子(C₃-C₁₂)。在其它实例中，环烷基是C₃-C₈、C₃-C₁₀或C₅-C₁₀。在其它实例中，作为单环的环烷基是C₃-C₈、C₃-C₆或C₅-C₆。在另一个实例中，作为二环的环烷基是C₇-C₁₂。在另一个实例中，作为螺系统的环烷基是C₅-C₁₂。单环环烷基的实例包括环丙基、环丁基、环戊基、1-环戊-1-烯基、1-环戊-2-烯基、1-环戊-3-烯基、环己基、全氘环己基、1-环己-1-烯基、1-环己-2-烯基、1-环己-3-烯基、环己二烯基、环庚基、环辛基、环壬基、环癸基、环十一烷基和环十二烷基。具有7至12个环原子的二环环烷基的示例性排列包括但不限于[4,4]、[4,5]、[5,5]、[5,6]或[6,6]环系统。示例性桥接二环环烷基包括但不限于二环[2.2.1]庚烷、二环[2.2.2]辛烷和二环[3.2.2]壬烷。螺环烷基的实例包括螺[2.2]戊烷、螺[2.3]己烷、螺[2.4]庚烷、螺[2.5]辛烷和螺[4.5]癸烷。在一些实施方案中，“任选取代的环烷基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、芳基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。在一些实施方案中，环烷基的取代基包括酰胺。例如，环烷基取代基可以是-(CH₂)_0-4CONR'R”，其中R'和R”各自独立地指包括以下的基团：例如，氢；未取代的C₁-C₆烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆烷基；未取代的C₁-C₆杂烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆杂烷基；未取代的C₆-C₁₀芳基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C₆-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；和被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；或R'和R”可以与氮原子组合以形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中环原子任选地被N、O或S取代，并且其中环任选被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代。

“胍”或“胍基”是指基团-NH-C(NH)-NHR，其中R是氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，其中烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。特定的胍是基团-NH-C(NH)-NH₂。

“杂环基团”、“杂环的”、“杂环”或“杂环基”可互换使用，是指任何单环、二环、三环或螺环、饱和或不饱和的、芳香的(杂芳基)或非芳香的(例如杂环烷基)环系统，其具有3至20个环原子，其中所述环原子是碳，并且环或环系中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。如果环系统的任何环原子是杂原子，则该系统是杂环，而不管环系统与分子其余部分的连接点。在一个实例中，杂环基包括3-11个环原子(“成员”)并且包括单环、二环、三环和螺环系统，其中环原子是碳，其中环或环系统中的至少一个原子是选自氮、硫或氧的杂原子。在一个实例中，杂环基包含1至4个杂原子。在一个实例中，杂环基包含1至3个杂原子。在另一个实例中，杂环基包括具有1-2个、1-3个或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的3-至7-元单环。在另一个实例中，杂环基包括具有1-2个、1-3个或1-4个选自氮、硫或氧的杂原子的4-至6-元单环。在另一个实例中，杂环基包括3元单环。在另一个实例中，杂环基包括4元单环。在另一个实例中，杂环基包括5-6元单环，例如5-6元杂芳基。在另一个实例中，杂环基包括3-11元杂环烷基，例如4-11元杂环烷基。在一些实施方案中，杂环烷基包含至少一个氮。在一个实例中，杂环基包括0至3个双键。任何氮或硫杂原子可任选地被氧化(例如，NO、SO、SO₂)，并且任何氮杂原子可任选地被季铵化(例如，[NR₄]⁺Cl^-、[NR₄]⁺OH^-)。实例杂环是环氧乙烷基、氮杂环丙烷基、硫杂环丙烷基、氮杂环丁烷基、氧杂环丁烷基、硫杂环丁烷基、1,2-二硫杂环丁烷基、1,3-二硫杂环丁基、吡咯烷基、二氢-1H-吡咯基、二氢呋喃基、四氢呋喃基、二氢噻吩基、四氢噻吩基、咪唑烷基、哌啶基、哌嗪基、异喹啉基、四氢异喹啉基、吗啉基、硫代吗啉基、1,1-二氧代-硫代吗啉基、二氢吡喃基、四氢吡喃基、六氢噻喃基、六氢嘧啶基、噁嗪烷基、噻嗪烷基、噻噁烷基、高哌嗪基、高哌啶基、氮杂环庚烷基、氧杂环庚烷基、硫杂环庚烷基、氧氮杂基、氧氮杂环庚烷基、二氮杂环庚烷基、1,4-二氮杂环庚烷基、二氮杂基、硫氮杂基、硫氮杂环庚烷基、四氢噻喃基、噁唑烷基、噻唑烷基、异噻唑烷基、1,1-二氧代异噻唑烷酮基、噁唑烷酮基、咪唑烷酮基、4,5,6,7-四氢[2H]吲唑基、四氢苯并咪唑基、4,5,6,7-四氢苯并[d]咪唑基、1,6-二氢咪唑并[4,5-d]吡咯并[2,3-b]吡啶基、噻嗪基、噁嗪基、噻二嗪基、噁二嗪基、二噻嗪基、二噁嗪基、噁噻嗪基、噻三嗪基、噁三嗪基、二噻二嗪基、咪唑啉基、二氢嘧啶基、四氢嘧啶基、1-吡咯啉基、2-吡咯啉基、3-吡咯啉基、吲哚啉基、噻喃基、2H-吡喃基、4H-吡喃基、二氧六环基、1,3-二氧戊环基、吡唑啉基、吡唑烷基、二噻烷基、二硫戊环基、嘧啶酮基、嘧啶二酮基、嘧啶-2,4-二酮基、哌嗪酮基、哌嗪二酮基、吡唑烷基咪唑啉基、3-氮杂二环[3.1.0]己基、3,6-二氮杂二环[3.1.1]庚烷基、6-氮杂二环[3.1.1]庚烷基、3-氮杂二环[3.1.1]庚烷基、3-氮杂二环[4.1.0]庚烷基、氮杂二环[2.2.2]己基、2-氮杂二环[3.2.1]辛基、8-氮杂二环[3.2.1]辛基、2-氮杂二环[2.2.2]辛基、8-氮杂二环[2.2.2]辛基、7-氧杂二环[2.2.1]庚烷、氮杂螺[3.5]壬基、氮杂螺[2.5]辛基、氮杂螺[4.5]癸基、1-氮杂螺[4.5]癸-2-酮基、氮杂螺[5.5]十一烷基、四氢吲哚基、八氢吲哚基、四氢异吲哚基、四氢吲唑基、1,1-二氧代六氢噻喃基。含有硫或氧原子和一至三个氮原子的5元杂环的实例是噻唑基包括噻唑-2-基和噻唑-2-基N-氧化物，噻二唑基包括1,3,4-噻二唑-5-基和1,2,4-噻二唑-5-基，噁唑基例如噁唑-2-基和噁二唑基如1,3,4-噁二唑-5-基和1,2,4-噁二唑-5-基。含有2至4个氮原子的实例5-元环杂环包括咪唑基例如咪唑-2-基；三唑基例如1,3,4-三唑-5-基；1,2,3-三唑-5-基、1,2,4-三唑-5-基，和四唑基例如1H-四唑-5-基。苯并稠合的5元杂环的实例是苯并噁唑-2-基、苯并噻唑-2-基和苯并咪唑-2-基。实例6-元杂环含有一至三个氮原子和任选的硫或氧原子，例如吡啶基例如吡啶-2-基、吡啶-3-基和吡啶-4-基；嘧啶基例如嘧啶-2-基和嘧啶-4-基；三嗪基如1,3,4-三嗪-2-基和1,3,5-三嗪-4-基；哒嗪基特别是哒嗪-3-基，和吡嗪基。吡啶N-氧化物和哒嗪N-氧化物和吡啶基、嘧啶-2-基、嘧啶-4-基、哒嗪基和1,3,4-三嗪-2-基是其它示例性杂环基。杂环可以任选被取代。例如，“任选取代的杂环”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、氧代、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、芳基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。在一些实施方案中，杂环例如杂芳基或杂环烷基的取代基包括酰胺。例如，杂环(例如，杂芳基或杂环烷基)取代基可以是-(CH₂)_0-4CONR'R”，其中R'和R”各自独立地指包括以下的基团：例如，氢；未取代的C₁-C₆烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆烷基；未取代的C₁-C₆杂烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆杂烷基；未取代的C₆-C₁₀芳基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C₆-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；和被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；或R'和R”可以与氮原子组合以形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中环原子任选地被N、O或S取代，并且其中环任选被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代。

“杂芳基”是指任何单环、二环或三环系统，其中至少一个环是含有1至4个选自氮、氧和硫的杂原子的5或6元芳环，在一个示例实施方案中，至少一个杂原子是氮。参见例如Lang’s Handbook of Chemistry(Dean,J.A.,编辑)第13版。表7-2[1985]。包括在定义中的是任何二环基团，其中任何上述杂芳基环与芳基环稠合，其中芳基环或杂芳基环与分子的其余部分连接。在一个实施方案中，杂芳基包括5-6元单环芳香基团，其中一个或多个环原子是氮、硫或氧。实例杂芳基包括噻吩基、呋喃基、咪唑基、吡唑基、噻唑基、异噻唑基、噁唑基、异噁唑基、三唑基、噻二唑基、噁二唑基、四唑基、噻三唑基、噁三唑基、吡啶基、嘧啶基、吡嗪基、哒嗪基、三嗪基、四嗪基、四唑并[1,5-b]哒嗪基、咪唑并[1,2-a]嘧啶基和嘌呤基、以及苯并稠合衍生物，例如苯并噁唑基、苯并呋喃基、苯并噻唑基、苯并噻二唑基、苯并三唑基、苯并咪唑基和吲哚基。杂芳基可以任选被取代。在一些实施方案中，“任选取代的杂芳基”的取代基包括F、Cl、Br、I、OH、SH、CN、NH₂、NHCH₃、N(CH₃)₂、NO₂、N₃、C(O)CH₃、COOH、CO₂CH₃、甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、环丙基、甲氧基、乙氧基、丙氧基、三氟甲基、二氟甲基、磺酰基氨基、甲磺酰基氨基、SO、SO₂、苯基、哌啶基、哌嗪基和嘧啶基中的1至4个实例，其中所述烷基、苯基和杂环部分可以任选被例如选自该同一列表的1至4个取代基取代。在一些实施方案中，杂芳基的取代基包括酰胺。例如，杂芳基取代基可以是-(CH₂)_0-4CONR'R”，其中R'和R”各自独立地指包括以下的基团：例如，氢；未取代的C₁-C₆烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆烷基；未取代的C₁-C₆杂烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆杂烷基；未取代的C₆-C₁₀芳基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C₆-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；和被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；或R'和R”可以与氮原子组合以形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中环原子任选地被N、O或S取代，并且其中环任选被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代。

在具体的实施方案中，杂环基在该杂环基的碳原子处连接。举例来说，碳键合的杂环基包括在下述位置的键合排布：吡啶环的2、3、4、5或6位，哒嗪环的3、4、5或6位，嘧啶环的2、4、5或6位，吡嗪环的2、3、5或6位，呋喃、四氢呋喃、噻吩、噻吩、吡咯或四氢吡咯环的2、3、4或5位，噁唑、咪唑或噻唑环的2、4或5位，异噁唑、吡唑或异噻唑环的3、4或5位，氮丙啶环的2或3位，氮杂环丁烷环的2、3或4位，喹啉环的2、3、4、5、6、7或8位或异喹啉环的1、3、4、5、6、7或8位。

在某些实施方案中，杂环基是N-连接的。例如，氮键合的杂环基或杂芳基包括在下述位置的键合排布：氮丙啶、氮杂环丁烷、吡咯、吡咯烷、2-吡咯啉、3-吡咯啉、咪唑、咪唑烷、2-咪唑啉、3-咪唑啉、吡唑、吡唑啉、2-吡唑啉、3-吡唑啉、哌啶、哌嗪、吲哚、吲哚啉、1H-吲唑的1位，异吲哚或异吲哚啉的2位，吗啉的4位、和咔唑或β-咔啉的9位。

术语“烷氧基”是指由式-OR表示的直链或支链一价基团，其中R是如本文所定义的烷基。烷氧基包括甲氧基、乙氧基、丙氧基、异丙氧基、单-、二-和三-氟甲氧基和环丙氧基。

“酰基”是指由式-C(O)-R表示的含羰基的取代基，其中R是氢、烷基、环烷基、芳基或杂环基，其中所述烷基、环烷基、芳基和杂环基如本文所定义。酰基包括烷酰基(例如乙酰基)、芳酰基(例如苯甲酰基)和杂芳酰基(例如吡啶基)。

除非另有说明，否则“任选取代的”意指基团可以是未取代的或被一个或多个(例如，0、1、2、3、4或5或更多个，或其中可衍生的任何范围)为该基团所列的取代基取代，其中所述取代基可以相同或不同。在一个实施方案中，任选取代的基团具有1个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有2个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有3个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有4个取代基。在另一个实施方案中，任选取代的基团具有5个取代基。

烷基(单独或作为另一取代基(例如烷氧基)的一部分)以及亚烷基、烯基、炔基、杂烷基、杂环烷基和环烷基(也各自单独或作为另一取代基的一部分)的任选的取代基可以是各种基团，例如本文所述的那些，以及选自卤素；氧代；CN；NO；N₃；-OR'；全氟-C₁-C₄烷氧基；未取代的C₃-C₇环烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₃-C₇环烷基；未取代的C₆-C₁₀芳基(例如，苯基)；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C₆-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；-NR'R”；-SR'；-SiR'R”R”'；-OC(O)R'；-C(O)R'；-CO₂R'；-CONR'R”；-OC(O)NR'R”；-NR”C(O)R'；-NR”'C(O)NR'R”；-NR”C(O)₂R'；-S(O)₂R'；-S(O)₂NR'R”；-NR'S(O)₂R”；-NR”'S(O)₂NR'R”；脒基；胍基；-(CH₂)_1-4-OR'；-(CH₂)_1-4-NR'R”；-(CH₂)_1-4-SR'；-(CH₂)_1-4-SiR'R”R”'；-(CH₂)_1-4-OC(O)R'；-(CH₂)_1-4-C(O)R'；-(CH₂)_1-4-CO₂R'；和-(CH₂)_1-4CONR'R”或其组合,其数目为0至(2m'+1)，其中m'是在所述基团中的碳原子的总数。R'、R”和R”'各自独立地指包括以下的基团：例如，氢；未取代的C₁-C₆烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆烷基；未取代的C₁-C₆杂烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₁-C₆杂烷基；未取代的C₆-C₁₀芳基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C₆-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；和被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)。当R'和R”连接到相同的氮原子时，它们可以与氮原子组合形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中环原子任选被N、O或S取代，且其中所述环任选被卤素、OH、CN、C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代。例如，-NR'R”意在包括1-吡咯烷基和4-吗啉基。

类似地，芳基和杂芳基的任选取代基是变化的。在一些实施方案中，芳基和杂芳基的取代基选自卤素；CN；NO；N₃；-OR'；全氟-C₁-C₄烷氧基；未取代的C₃-C₇环烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C₃-C₇环烷基；未取代的C₆-C₁₀芳基(例如，苯基)；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C₆-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；-NR'R”；-SR'；-SiR'R”R”'；-OC(O)R'；-C(O)R'；-CO₂R'；-CONR'R”；-OC(O)NR'R”；-NR”C(O)R'；-NR”'C(O)NR'R”；-NR”C(O)₂R'；-S(O)₂R'；-S(O)₂NR'R”；-NR'S(O)₂R”；-NR”'S(O)₂NR'R”；脒基；胍基；-(CH₂)_1-4-OR'；-(CH₂)_1-4-NR'R”；-(CH₂)_1-4-SR'；-(CH₂)_1-4-SiR'R”R”'；-(CH₂)_1-4-OC(O)R'；-(CH₂)_1-4-C(O)R'；-(CH₂)_1-4-CO₂R'；和-(CH₂)_1-4CONR'R”或其组合，其数目为0至(2m'+1)，其中m'是此类基团中的碳原子总数。R'、R”和R”'各自独立地指包括以下的基团：例如，氢；未取代的C_1-C₆烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C_1-C₆烷基；未取代的C_1-C₆杂烷基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的C_1-C₆杂烷基；未取代的C_6-C₁₀芳基；被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基或NR'R”取代的C_6-C₁₀芳基；未取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)；和被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代的3-11元杂环基(例如，含有1至4个选自O、N和S的杂原子的5-6元杂芳基或含有1至4个选自O、N和S的杂原子的4-11元杂环烷基)。当R'和R”连接到相同的氮原子时，它们可以与氮原子组合形成3-、4-、5-、6-或7-元环，其中环原子任选被N、O或S取代，并且其中环任选被卤素、OH、CN、未取代的C₁-C₆烷基、未取代的C₁-C₆烷氧基、氧代或NR'R”取代。例如，-NR'R”意在包括1-吡咯烷基和4-吗啉基。

术语“氧代”是指＝O或(＝O)₂。

如本文所用，与化学结构中的贯穿键的波浪线表示波浪键在化学结构中连接至分子的其余部分或连接至分子的片段的其余部分的原子的连接点。在一些实施方案中，箭头连同星号以波浪线的方式使用以指示连接点。

在某些实施方案中，没有具体的键合构型一般地描述二价基团。应当理解，除非另有说明，否则一般描述意在包括两种键合构型。例如，在基团R¹–R²–R³中，如果基团R²描述为–CH₂C(O)–时，则应当理解，该基团可以作为R¹–CH₂C(O)–R³和R¹–C(O)CH₂–R³键合，除非另有说明。

短语“药学上可接受的”是指当适当地施用于动物例如人类时不产生不利的、过敏的或其它不良反应的分子实体和组合物。

本发明的化合物可以是盐例如药学上可接受的盐的形式。“药学上可接受的盐”包括酸和碱加成盐。“药学上可接受的酸加成盐”是指与无机酸和有机酸形成的、保留游离碱的生物学有效性和性质且不是生物学上或其它方面不期望的的那些盐，所述无机酸例如盐酸、氢溴酸、硫酸、硝酸、碳酸、磷酸等，所述有机酸可以选自脂肪族、脂环族、芳族、芳脂族、杂环、羧酸和磺酸类的有机酸例如甲酸、乙酸、丙酸、乙醇酸、葡糖酸、乳酸、丙酮酸、草酸、苹果酸、马来酸、maloneic酸、琥珀酸、富马酸、酒石酸、柠檬酸、天冬氨酸、抗坏血酸、谷氨酸、邻氨基苯甲酸、苯甲酸、肉桂酸、扁桃酸、扑酸、苯乙酸、甲磺酸、乙磺酸、苯磺酸、对甲苯磺酸、水杨酸等。

“药学上可接受的碱加成盐”包括衍生自无机碱例如钠、钾、锂、铵、钙、镁、铁、锌、铜、锰、铝盐等的那些。特定的碱加成盐是铵、钾、钠、钙和镁盐。衍生自药学上可接受的有机无毒碱的盐包括伯胺、仲胺和叔胺、取代的胺(包括天然存在的取代的胺)、环胺和碱性离子交换树脂，例如异丙胺、三甲胺、二乙胺、三乙胺、三丙胺、乙醇胺、2-二乙氨基乙醇、氨丁三醇、二环己胺、赖氨酸、精氨酸、组氨酸、咖啡因、普鲁卡因、海巴明、胆碱、甜菜碱、乙二胺、葡糖胺、甲基葡萄糖胺、可可碱、嘌呤、哌嗪、哌啶、N-乙基哌啶、聚胺树脂等的盐。特定的有机无毒碱包括异丙胺、二乙胺、乙醇胺、氨基丁三醇、二环己胺、胆碱和咖啡因。

在一些实施方案中，盐选自盐酸盐、氢溴酸盐、三氟乙酸盐、硫酸盐、磷酸盐、乙酸盐、富马酸盐、马来酸盐、酒石酸盐、乳酸盐、柠檬酸盐、丙酮酸盐、琥珀酸盐、草酸盐、甲磺酸盐、对甲苯磺酸盐、硫酸氢盐、苯磺酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、昔萘酸盐、抗坏血酸盐、油酸盐、烟酸盐、糖精盐、己二酸盐、甲酸盐、乙醇酸盐、棕榈酸盐、L-乳酸盐、D-乳酸盐、天冬氨酸盐、苹果酸盐、L-酒石酸盐、D-酒石酸盐、硬脂酸盐、糠酸盐(例如，2-糠酸盐或3-糠酸盐)、萘二磺酸盐(萘-1,5-二磺酸盐或萘-1-(磺酸)-5-磺酸盐)、乙二磺酸盐(乙烷-1,2-二磺酸盐或乙烷-1-(磺酸)-2-磺酸盐)、羟乙基磺酸盐(2-羟乙基磺酸盐)、2-均三甲苯磺酸盐、2-萘磺酸盐、2,5-二氯苯磺酸盐、D-扁桃酸盐、L-扁桃酸盐、肉桂酸盐、苯甲酸盐、己二酸盐、乙磺酸盐、丙二酸盐、均三甲苯磺酸盐(2-均三甲苯磺酸盐)、萘磺酸盐(2-萘磺酸盐)、樟脑磺酸盐(樟脑-10-磺酸盐，例如(1S)-(+)-10-樟脑磺酸盐)、谷氨酸盐、戊二酸盐、马尿酸盐(2-(苯甲酰氨基)乙酸盐)、乳清酸盐(orotate)、二甲苯磺酸盐(对二甲苯-2-磺酸盐)和双羟萘酸(2,2'-二羟基-1,1'-二萘基甲烷-3,3'-二甲酸盐)。

“无菌”制剂是无菌的或不含所有活微生物及其孢子。

“立体异构体”是指具有相同化学组成但在空间中原子或基团的排列方面不同的化合物。立体异构体包括非对映异构体、对映异构体、构象异构体等。

“手性”是指具有镜像配偶体(partner)不可重叠性的分子，而术语“非手性”是指可重叠在其镜像配偶体上的分子。

“非对映异构体”是指具有两个或更多个手性中心并且其分子彼此不是镜像的立体异构体。非对映异构体具有不同的物理性质，例如熔点、沸点、光谱性质或生物活性。非对映异构体的混合物可以在高分辨率分析方法例如电泳和色谱例如HPLC下分离。

“对映异构体”是指化合物的两种立体异构体，它们是彼此不重叠的镜像。

本文使用的立体化学定义和惯例通常遵循S.P.Parker,Ed.,McGraw-HillDictionary of Chemical Terms(1984)McGraw-Hill Book Company,New York；和Eliel,E.和Wilen,S.,“Stereochemistry of Organic Compounds”,John Wiley&Sons,Inc.,NewYork,1994。许多有机化合物以光学活性形式存在，即它们具有旋转平面偏振光的平面的能力。在描述光学活性化合物时，前缀D和L或R和S用于表示分子关于其手性中心的绝对构型。前缀d和l或(+)和(-)用于表示化合物旋转平面偏振光的符号，其中(-)或1表示该化合物是左旋的。带有(+)或d的前缀的化合物是右旋的。对于给定的化学结构，这些立体异构体是相同的，除了它们是彼此的镜像。特定的立体异构体也可以称为对映异构体，并且这些异构体的混合物通常称为对映异构体混合物。对映异构体的50:50混合物被称为外消旋混合物或外消旋物，其可以在没有立体选择性或立体特异性的化学反应或过程中发生。术语“外消旋混合物”和“外消旋物”是指没有光学活性的两种对映异构体的等摩尔混合物。

术语“互变异构体”或“互变异构形式”是指不同能量的结构异构体，其可通过低能垒互相转化。例如，质子互变异构体(也称为质子移变互变异构体)包括通过质子迁移的相互转化，例如酮-烯醇和亚胺-烯胺异构化。价键互变异构体包括通过一些键合电子的重组的互变。

本发明的某些化合物可以以非溶剂化形式以及溶剂化形式包括水合形式存在。“溶剂合物”是指一个或多个溶剂分子和本发明化合物的缔合物或复合物。形成溶剂合物的溶剂的实例包括水、异丙醇、乙醇、甲醇、DMSO、乙酸乙酯、乙酸和乙醇胺。本发明的某些化合物可以以多种结晶或无定形形式存在。通常，所有物理形式都在本发明的范围内。术语“水合物”是指溶剂分子是水的复合物。

“代谢物”是指指明化合物或其盐通过在体内代谢产生的产物。这样的产物可以例如由所施用的化合物的氧化、还原、水解、酰胺化、脱酰胺化、酯化、脱酯化、酶裂解等导致。

代谢产物通常通过下述鉴定：制备本发明化合物的放射性标记(例如¹⁴C或³H)同位素，以可检测的剂量(例如，大于约0.5mg/kg)施用于动物例如大鼠、小鼠、豚鼠、猴或人，允许足够的时间发生代谢(通常约30秒至30小时)，并从尿、血液或其他生物样品中分离其转化产物。这些产物容易分离，因为它们被标记(其它的通过使用能够结合在代谢物中存活的表位的抗体来分离)。以常规方式例如通过MS、LC/MS或NMR分析测定代谢物结构。通常，代谢物的分析以与本领域技术人员公知的常规药物代谢研究相同的方式进行。代谢产物，只要它们不以其它方式见于体内，可用于本发明化合物的治疗剂量的诊断测定。

本文所用的“氨基-保护基”是指通常用于阻断或保护氨基同时反应在化合物的其它官能团上进行的基团的衍生物。这种保护基的实例包括氨基甲酸酯、酰胺、烷基和芳基以及亚胺、以及许多N-杂原子衍生物，其可以被除去以再生所需的胺基团。特别的氨基保护基是Pmb(对甲氧基苄基)、Boc(叔丁氧基羰基)、Fmoc(9-芴基甲氧基羰基)和Cbz(苄氧基羰基)。这些基团的其它实例见于T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“Protecting Groups inOrganic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons,Inc.,1999中。术语“保护的氨基”是指被上述氨基保护基之一取代的氨基。

如本文所用的“羧基-保护基”是指对分子其它位置的后续反应条件稳定的那些基团，其可在适当的点除去而不破坏分子的其余部分，得到未保护的羧基基团。羧基保护基的实例包括酯基和杂环基。羧酸基团的酯衍生物可用于封闭或保护羧酸基团，同时反应在化合物的其它官能团上进行。此类酯基的实例包括取代的芳基烷基，包括取代的苄基，例如4-硝基苄基、4-甲氧基苄基、3,4-二甲氧基苄基、2,4-二甲氧基苄基、2,4,6-三甲氧基苄基、2,4,6-三甲基苄基、五甲基苄基、3,4-亚甲二氧基苄基、二苯甲基、4,4’-二甲氧基二苯甲基、2,2’,4,4’-四甲氧基二苯甲基，烷基或取代的烷基酯例如甲基、乙基、叔丁基烯丙基或叔戊基、三苯基甲基(三苯甲基)、4-甲氧基三苯甲基、4,4’-二甲氧基三苯甲基、4,4’,4”-三甲氧基三苯甲基、2-苯基丙-2-基，硫酯例如叔丁基硫酯，硅烷基酯如三甲基硅烷基、叔丁基二甲基硅烷基酯、苯甲酰甲基(phenacyl)、2,2,2-三氯乙基、β-(三甲基硅烷基)乙基、β-(二(正丁基)甲基硅烷基)乙基、对甲苯基磺酰基乙基、4-硝基苄基磺酰基乙基、烯丙基、肉桂基、1-(三甲基硅烷基甲基)丙-1-烯-3-基和类似基团。羧基保护基的另一个实例是杂环基，例如1,3-噁唑啉基。这些基团的其它实例可见于T.W.Greene和P.G.M.Wuts，“ProtectingGroups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons，Inc.，1999中。术语“保护的羧基”是指被上述羧基保护基之一取代的羧基基团。

本文所用的“羟基-保护基”是指通常用于阻断或保护羟基而反应在化合物的其它官能团上进行的羟基衍生物。这种保护基团的实例包括四氢吡喃氧基、苯甲酰基、乙酰氧基、氨基甲酰氧基、苄基和硅烷基醚(例如TBS、TBDPS)基团。这些基团的其它实例在TWGreene和PGMWuts，“Protecting Groups in Organic Synthesis，第3版，John Wiley&Sons，Inc.，1999中找到。术语“保护的羟基”是指被上述羟基保护基之一取代的羟基基团。

“受试者”、“个体”或“患者”是脊椎动物。在某些实施方案中，脊椎动物是哺乳动物。哺乳动物包括但不限于农场动物(例如牛)、运动动物、宠物(例如豚鼠、猫、狗、兔和马)、灵长类动物、小鼠和大鼠。在某些实施方案中，哺乳动物是人。在包括向患者施用式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物的实施方案中，患者通常是有其需要的。

术语“Janus激酶”是指JAK1、JAK2、JAK3和TYK2蛋白激酶。在一些实施方案中，Janus激酶可以进一步限定为JAK1、JAK2、JAK3或TYK2之一。在任何实施方案中，JAK1、JAK2、JAK3和TYK2中任何一个可以被特别排除作为Janus激酶。在一些实施方案中，Janus激酶是JAK1。在一些实施方案中，Janus激酶是JAK1和JAK2的组合。

术语“抑制”和“减少”或这些术语的任何变形包括实现期望结果的任何可测量的减少或完全抑制。例如，与正常相比，可以减少约，至多约或至少约5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或可从其中衍生的任何范围的活性(例如，JAK1活性)减少。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物相对于JAK3和TYK2选择性抑制JAK1。在一些实施方案中，式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物相对于JAK2、JAK3或TYK2、或者JAK2、JAK3或TYK2的任何组合选择性抑制JAK1。在一些实施方案中，式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物相对于JAK3和TYK2选择性抑制JAK1和JAK2。在一些实施方案中，式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物相对于JAK3选择性抑制JAK1。“选择性抑制”是指，与另一特定Janus激酶(例如，JAK1)活性相比，该化合物是至少5％、10％、15％、20％、25％、30％、35％、40％、45％、50％、55％、60％、65％、70％、75％、80％、85％、90％、95％、99％或更多或可从其中衍生的任何范围的更好的特定Janus激酶(例如JAK1)活性的抑制剂，或与另一特定Janus激酶(例如，JAK1)活性相比，是至少2-、3-、4-、5-、10-、25-、50-、100-、250-或500-倍更好的特定Janus激酶(例如，JAK1)活性抑制剂。

“治疗有效量”是指本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物的如下的量：(i)治疗或预防特定疾病、疾患或病症，或(ii)减轻、改善或消除特定疾病、疾患或病症的一种或多种症状，和任选地(iii)预防或延迟文中所述的特定疾病、疾患或病症的一种或多种症状的发作。在一些实施方案中，治疗有效量是足以减少或减轻自身免疫性或炎性疾病(例如哮喘)的症状的量。在一些实施方案中，治疗有效量是文中描述的化学实体的足以显著降低B-细胞活性或数量的量。在癌症的情况下，治疗有效量的药物可以减少癌细胞的数量；减少肿瘤大小；抑制(即，在一定程度上减缓并且优选停止)癌细胞浸润到外周器官中；抑制(即，在一定程度上减缓并且优选停止)肿瘤转移；在一定程度上抑制肿瘤生长；或在一定程度上缓解与癌症相关的一种或多种症状。在药物可以预防生长或杀死现有癌细胞的程度上，其可以是细胞抑制性或细胞毒性的。对于癌症治疗，功效可以例如通过评估疾病进展时间(TTP)或确定响应速率(RR)来测量。

“治疗(treatment)”(和变体形式例如“治疗”(“treat”或“treating”))是指试图改变所治疗的个体或细胞的自然进程的临床干预，并且可以用于预防或在临床病理过程期间进行。治疗的期望效果包括预防疾病的发生或复发，减轻症状，减轻疾病的任何直接或间接病理学后果，稳定(即不恶化)疾病状态，降低疾病进展速率，改善或缓解疾病状态，与如果不接受治疗的预期存活相比延长存活和缓解或改善的预后。在一些实施方案中，本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物用于延迟疾病或病症的发展或延缓疾病或病症的进展。需要治疗的那些包括已经患有疾患或病症的那些以及倾向于具有疾患或病症(例如通过遗传突变)的那些或其中要预防所述疾患或病症的那些。

“炎性病症”是指其中过度或不受调节的炎症反应导致过度炎症症状、宿主组织损伤或组织功能丧失的任何疾病、病症或综合征。“炎性病症”还指由白细胞流入或嗜中性粒细胞趋化性介导的病理状态。

“炎症”是指由组织的损伤或破坏引起的局部的保护性反应，其用于破坏、稀释或隔离(隔绝)损伤剂和损伤的组织。炎症与白细胞流入或嗜中性粒细胞趋化性特别相关。炎症可以由病原生物体和病毒的感染和非感染性方式(例如创伤或心肌梗塞或中风后的再灌注、对外源抗原的免疫应答和自身免疫应答)引起。因此，适合用本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物治疗的炎性病症包括与特异性防御系统的反应以及非特异性防御系统的反应相关的病症。

“特异性防御系统”是指与特异性抗原的存在反应的免疫系统的组件。由特异性防御系统的应答引起的炎症的实例包括对外来抗原的经典应答、自身免疫性疾病和由T细胞介导的迟发型超敏反应。慢性炎性疾病、实体移植组织和器官(例如肾和骨髓移植物)的排斥和移植物抗宿主病(GVHD)是特异性防御系统的炎症反应的另外的实例。

术语“非特异性防御系统”是指由不能进行免疫记忆的白细胞(例如粒细胞和巨噬细胞)介导的炎性病症。至少部分地由非特异性防御系统的反应导致的炎症的实例包括与例如以下疾患相关的炎症：成人(急性)呼吸窘迫综合征(ARDS)或多器官损伤综合征等；再灌注损伤；急性肾小球肾炎；反应性关节炎；具有急性炎症成分的皮肤病；急性化脓性脑膜炎或其他中枢神经系统炎性病症如中风；热损伤；炎性肠病；粒细胞输注相关综合征；和细胞因子诱导的毒性。

“自身免疫性疾病”是指其中组织损伤与体液或细胞介导的对身体自身成分的反应相关的任何一组疾病。自身免疫性疾病的非限制性实例包括类风湿性关节炎、狼疮和多发性硬化。

本文使用的“过敏性疾病”是指由过敏引起的任何症状、组织损伤或组织功能的丧失。如本文所用的“关节炎疾病”是指以可归因于多种病因的关节的炎性损伤为特征的任何疾病。本文所用的“皮炎”是指特征在于归因于多种病因的皮肤炎症的皮肤疾病的大家族中的任何一种。本文所用的“移植排斥”是指针对移植组织例如器官或细胞(例如骨髓)的任何免疫反应，其特征在于移植的和周围组织的功能丧失、疼痛、肿胀、白细胞增多和血小板减少。本发明的治疗方法包括治疗与炎性细胞活化相关的病症的方法。

“炎性细胞活化”是指被在炎症细胞(包括但不限于单核细胞、巨噬细胞、T淋巴细胞、B淋巴细胞、粒细胞(即多形核白细胞如嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞和嗜酸性粒细胞)、肥大细胞、树突细胞、朗格汉斯细胞和内皮细胞)中的增殖性细胞反应的刺激物(包括但不限于细胞因子、抗原或自身抗体)、可溶性介体(包括但不限于细胞因子、氧自由基、酶、前列腺素类或血管活性胺)的产生或者新或增加数目介体(包括但不限于主要组织相容性抗原或细胞粘附分子)的细胞表面表达诱导。本领域技术人员应当理解，在这些细胞中这些表型中的一种或组合的激活可能有助于炎性病症的引发、持续或加重。

在一些实施方案中，可根据本发明的方法治疗的炎性病症包括但不限于哮喘、鼻炎(例如，过敏性鼻炎)、过敏性气道综合征、特应性皮炎、支气管炎、类风湿性关节炎、银屑病、接触性皮炎、慢性阻塞性肺病和迟发性超敏反应。

术语“癌症”和“癌性的”、“瘤”和“肿瘤”和相关术语是指或描述哺乳动物中的典型特征在于不受调节的细胞生长的生理状况。“肿瘤”包括一种或多种癌细胞。癌症的实例包括癌、胚细胞瘤、肉瘤、精原细胞瘤、成胶质细胞瘤、黑素瘤、白血病和骨髓或淋巴样恶性肿瘤。此类癌症的更具体的实例包括鳞状细胞癌(例如上皮鳞状细胞癌)和肺癌包括小细胞肺癌、非小细胞肺癌(“NSCLC”)、肺腺癌和肺鳞状细胞癌。其它癌症包括皮肤癌、角化棘皮瘤、滤泡癌、毛细胞白血病、颊腔癌、咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、食道癌、喉癌、肝细胞癌、胃癌(gastric)、胃部癌(stomach)、胃肠癌、小肠癌、大肠癌、胰腺癌、宫颈癌、卵巢癌、肝癌、膀胱癌、肝癌、乳腺癌、结肠癌、直肠癌、结肠直肠癌、泌尿生殖系统癌、胆道癌、甲状腺癌、乳头状癌、肝癌、子宫内膜癌、子宫癌、唾液腺癌、肾脏癌或肾癌、前列腺癌、睾丸癌、外阴癌、腹膜癌、肛门癌、阴茎癌、骨癌、多发性骨髓瘤、B细胞淋巴瘤、中枢神经系统癌、脑癌、头颈部癌、霍奇金癌和相关的转移。肿瘤性病症的实例包括骨髓增殖性疾病，例如真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化如原发性骨髓纤维化和慢性髓性白血病(CML)。

“化疗剂”是可用于治疗给定病症(例如癌症或炎性病症)的活性剂。化疗剂的实例是本领域公知的，并且包括实例，例如在美国Publ.Appl.No.2010/0048557中公开的那些，通过引用并入本文。另外，化疗剂包括任何化疗剂的药学上可接受的盐、酸或衍生物，以及它们中的两种或更多种的组合。

“包装说明书”用于指通常包括在治疗产品的商业包装中的说明书，其包含关于使用这种治疗产品的适应症、用法、剂量、施用、禁忌症或警告的信息。

除非另有说明，术语“本发明的化合物”和“本发明化合物”等包括式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物和其立体异构体(包括阻转异构体)、几何异构体、互变异构体、溶剂合物、代谢物、同位素、盐(例如，药学上可接受的盐)和前药。在一些实施方案中，排除溶剂合物、代谢物、同位素或前药或其任何组合。

除非另有说明，本文所述的结构也意味着包括仅在存在一个或多个同位素富集原子方面不同的化合物。可以引入到本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物中的示例性同位素包括氢、碳、氮、氧、磷、硫、氟、氯和碘的同位素，分别例如²H、³H、¹¹C、¹³C、¹⁴C、¹³N、¹⁵N、¹⁵O、¹⁷O、¹⁸O、³²P、³³P、³⁵S、¹⁸F、³⁶Cl、¹²³I和¹²⁵I。同位素标记的化合物(例如，用³H和¹⁴C标记的那些)可用于化合物或底物组织分布测定。氚化(即³H)和碳-14(即¹⁴C)同位素因其易于制备和可检测性而能够是有用的。此外，用较重的同位素例如氘(即²H)取代可以提供由更大的代谢稳定性产生的某些治疗优点(例如，增加的体内半衰期或降低的剂量需求)。在一些实施方案中，在式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物中，一个或多个氢原子被²H或³H替换，一个或多个碳原子被¹³C-或¹⁴C-富集的碳替换。正电子发射同位素例如¹⁵O、¹³N、¹¹C和¹⁸F可用于正电子发射断层摄影(PET)研究，以检查底物受体占据。同位素标记的化合物通常可以通过按照与本文流程或实施例中公开的那些类似的方法，通过用同位素标记的试剂代替非同位素标记的试剂来制备。

特别考虑的是，关于本发明的一个实施方案所讨论的任何限制可以应用于本发明的任何其它实施方案。此外，本发明的任何化合物或组合物可用于本发明的任何方法中，并且本发明的任何方法可用于产生或利用本发明的任何化合物或组合物。

术语“或”的使用用于表示“和/或”，除非明确指示仅涉及替代物或替代物是相互排斥的，尽管本公开支持仅指示替代物和“和/或”的定义。

在本申请中，术语“约”用于指示包括用于确定该值的装置或方法的误差的标准偏差的值。

如本文所使用的，“一个(a/an)”是指一个或多个，除非另有明确说明。如本文所用，“另一个”是指至少另一个或更多。

本文使用的标题仅用于组织目的。

JANUS激酶的抑制剂

因此，本发明的一个方面包括式(00A)化合物：

(a)任选被T¹取代的C₁-C₆烷基，其中T¹选自OH、卤代、CN、亚氨基、3-6元环烷基、3-11元杂环烷基、3-11元杂环烯基、5-10元杂芳基、-O-(C₁-C₆烷基)、C(O)OH、氧杂环丁-3-基甲基、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-NR^aR^b、-N(+)R^aR^bR^c其中R^c是甲基、-C(O)NR^aR^b、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基和苯基，其中T¹的各烷基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、杂芳基和苯基任选被下列基团取代：OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、C₁-C₆烷基、卤代、CN、氧代、-(C₁-C₆烷基)CONR^aR^b、-NR^aR^b、苯基或-O-(C₁-C₆烷基)，其任选被OH取代；

(e)CN、卤代或氧代；

(f)-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b或任选被–(C₁-C₆烷基)或-NR^aR^b取代的-C(O)-4-6元杂环烷基、或任选被OH、NR^aR^b或3-11元杂环烷基取代的-C(O)O-(C₁-C₆烷基)，其中所述杂环烷基任选被C₁-C₆烷基取代；

(i)任选被下列基团取代的5-6元杂芳基：OH、卤代、C₁-C₆烷基、CF₃、CN、或任选被C₁-C₆烷基或3-11元杂环烷基取代的3-11元杂环烷基；

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；

(k)-NR^aR^b，和

(l)–O-CH₂C(O)-3-11元杂环烷基；

其中R^a和R^b独立地选自：

(p)H，

(a)C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(3-11元杂环烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)-S-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、萘基、-NR^azR^bz、-C(O)NR^azR^bz、氧代、-O-(C₁-C₆烷基)、任选被C₁-C₆烷基或卤代取代的5-6元杂芳基、或苯并[1,3]间二氧杂环戊烯-2-基、或任选被氧代取代的3-11元杂环烯基；

(b)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其中所述亚烷基任选被下列基团取代：OH、卤代或CN；

(c)-(C₁-C₆亚烷基)-苯基，其中亚烷基任选被卤代取代，且所述苯基任选被下列基团取代：OH、卤代、CF₃、C₁-C₆烷基、-O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基或–O-苯基；

(d)-(C₁-C₆亚烷基)-4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：卤代、氧代或C₁-C₆烷基；

(e)-(C₁-C₆亚烷基)-O-苯基，其中所述苯基任选被下列基团取代：卤代、C₁-C₆烷基或-O-苯基；

(f)–(C₁-C₆烷基)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN或任选被OH或CN取代的C₁-C₆烷基；

(g)C₂-C₅烯基；

(h)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(i)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(j)苯基，

(k)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(l)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(n)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是：当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

(a)任选被T¹取代的C₁-C₆烷基，其中T¹选自OH、卤代、CN、亚氨基、3-6元环烷基、3-11元杂环烷基、3-11元杂环烯基、5-10元杂芳基、-O-(C₁-C₆烷基)、C(O)OH、氧杂环丁-3-基甲基、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-S-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-NR^aR^b、-N(+)R^aR^bR^c(其中R^c是甲基)、-C(O)NR^aR^b、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基和苯基，其中T¹的各烷基、环烷基、杂环烷基、杂环烯基、杂芳基和苯基任选被下列基团取代：OH、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、C₁-C₆烷基、卤代、CN、氧代、-NR^aR^b、苯基或任选被OH取代的-O-(C₁-C₆烷基)；

(d)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代或CN；

(e)CN、卤代或氧代；

(f)-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)OH、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b或任选被-NR^aR^b取代的-C(O)-4-6元杂环烷基或任选被OH、NR^aR^b或3-11元杂环烷基取代的-C(O)O-(C₁-C₆烷基)，其中所述杂环烷基任选被C₁-C₆烷基取代；

(h)任选被下列基团取代的苯基：OH、卤代、C₁-C₆烷基、CF₃或CN；(i)任选被下列基团取代的5-6元杂芳基：OH、卤代、C₁-C₆烷基、CF₃或CN；

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；和

(k)-NR^aR^b,

其中R^a和R^b独立地选自：

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是：当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

在文中任何式的一些实施方案中，当环Q是

且t¹是0，吡唑不是N-连接至X^A的氮的。

本发明的另一方面提供进一步限定为式(A)化合物的式(00A)化合物,

以及其立体异构体和盐，其中：

R⁰⁰是H或CH₃；

R⁰¹是H或NH₂；

R⁰是H或NH₂；且

环Q是(i)或(ii):

其中：

t¹和t²各自独立地是0或1；

X^A和X^B独立地选自H、C₁-C₆烷基、-NR^aR^b、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基；

其中当X^A和X^B之一独立地是C₁-C₆烷基、C₂-C₅炔基、3-6-元环烷基、6-10元芳基、3-11元杂环烷基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基时，X^A和X^B各自独立地任选被Y¹取代，其中Y¹选自：

(a)任选被T¹取代的C₁-C₆烷基，其中T¹选自OH、卤代、CN、亚氨基、3-6元环烷基、-O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-NR^aR^b、-N(+)R^aR^bR^c其中R^c是甲基、-C(O)NR^aR^b、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基和苯基，

其中T¹的各烷基、环烷基和苯基任选被下列基团取代：OH、C₁-C₆烷基、卤代、CN、氧代、-NR^aR^b、苯基或-O-(C₁-C₆烷基)，其任选被OH取代；

(b)3-11元杂环烷基、-(C₁-C₆亚烷基)-3-11元杂环烷基、-C(O)-3-11元杂环烷基、-(C₁-C₆亚烷基)C(O)-3-11元杂环烷基或-OC(O)-4-6元杂环烷基；

其中杂环烷基任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、C₁-C₆烷基、-(C₁-C₆亚烷基)-CF₃、氧代、-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b、-NR^aR^b、-(C₁-C₆亚烷基)-苯基或-C(O)-4-6元杂环烷基，其任选被-NR^aR^b取代；

(d)3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代或CN；

(e)CN、卤代或氧代；

(f)-C(O)-(C₁-C₆烷基)、任选被OH取代的-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)NR^aR^b、或-C(O)-4-6元杂环烷基，其任选被-NR^aR^b取代，

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；和

(k)-NR^aR^b，

其中R^a和R^b独立地选自：

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是:

当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

其中t¹是0时，

则X^A不是甲基、2-甲基丙-2-醇或四氢吡喃基；且，在一些实施方案中，当环Q是(i)且t¹是0时，则X^A不能是-NR^aR^b。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(II)化合物：

其中:

w是0或1；

R^0b是H或NH₂；

R^1b选自

a.H，

b.C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、-O-(C₁-C₆烷基)、萘基、5-6元杂芳基或-C(O)NR^vR^w，其中R^v和R^w独立地是H或任选被卤代取代的C₁-C₆烷基，

c.-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其中所述环烷基任选被CN取代，

d.-(C₁-C₆亚烷基)-苯基，其中所述烷基任选被卤代取代，且其中所述苯基任选被下列基团取代：OH、卤代、CF₃、C₁-C₆烷基、–O-(C₁-C₆烷基)或–O-苯基，

e.-(C₁-C₆亚烷基)-4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：卤代或C₁-C₆烷基，

f.-(C₁-C₆亚烷基)-O-苯基，其中所述苯基任选被下列基团取代：卤代或C₁-C₆烷基，或

g.3-6元环烷基；

R^2b选自H、任选被卤代取代的C₁-C₆烷基或C₂-C₅烯基；

或R^1b和R^2b一起形成3-11元杂环烷基，其任选被OH取代；

R^3b不存在或是甲基，其中当R^3b是甲基时，其所连接的氮是N+且w是1；

R^4b是键或C₁-C₆亚烷基；

R^5b选自H、OH和苯基；且

环F是3-7元杂环烷基，其中p^1b是0、1或2，且p^2b是0、1或2；

其中仅当R^3b是甲基时w等于1。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(Ia)或式(Ib)化合物：

其中：

R^0a是H或NH₂；

R^1a键合至(Ia)中环A的氮原子或键合至(Ib)中环B的碳原子，并且选自：

a.H，

b.C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、-O-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-(2-氧代吲哚啉-1-基)、-OC(O)-3-6元环烷基、-OC(O)-4-6元杂环烷基或苯基；

c.-(C₁-C₆亚烷基)-O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基，其中所述苯基任选被卤代取代；

d.-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其中所述环烷基任选被下列基团取代：卤代、OH或CN；

e.-(C₁-C₆亚烷基)-4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：氧代、C₁-C₆烷基、-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)-4-6元杂环烷基或-C(O)N(C₁-C₆烷基)(C₁-C₆烷基)；

f.4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被下列基团取代：氧代、C₁-C₆烷基、-C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)O-(C₁-C₆烷基)、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、-C(O)-4-6元杂环烷基或-C(O)N(C₁-C₆烷基)(C₁-C₆烷基)；

g.-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-OH；和

h.-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基；

i.-NR^aR^b，其中R^a和R^b独立地选自H和C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、-C(O)OH、苯基和3-7元杂环烷基；

R^2a选自H、任选被OH取代的C₁-C₆烷基和苯基；

R^3a选自H、任选被OH取代的C₁-C₆烷基和苯基；

环A是3-7元杂环烷基；且

环B是3-7元杂环烷基或3-7元杂环烯基，其中p^1a是0、1或2且p^2a是0、1或2，

前提是环A且环B一起形成6-11元二环杂环烷基。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(III)化合物：

其中:

R^0c是H或NH₂；

R³是(i)或(ii):

其中：

R^1c选自H、C₁-C₆烷基、-(C₁-C₆烷基)-苯基、–C(O)-(C₁-C₆烷基)、-C(O)-苯基和4-6元杂环烷基；

R^2c是H或C₁-C₆烷基；且

R^3c是键或任选被氧代取代的C₁-C₆亚烷基；或

R^1c和R^2c一起形成3-11元杂环烷基，其任选被下列基团取代：C₁-C₆烷基、氧代或-(C₁-C₆亚烷基)-苯基；或

R^1c和R^3c一起形成3-7元杂环烷基；

(ii)H；C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、-SO₂-(C₁-C₆烷基)、苯基或-O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基；-(C₁-C₆亚烷基)-C(O)O(C₁-C₆烷基)；或4-6元杂环烷基，其任选被–C(O)(C₁-C₆烷基)取代；且

环G是3-7元杂环烷基，其中p^1c是0、1或2且p^2c是0、1或2。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(IV)化合物：

其中：

R^0d是H或NH₂；

R^1d是3-11元杂环烷基或-C(O)-3-11元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被C₁-C₆烷基、CF₃或氟取代，或R^1d是–(C₁-C₆亚烷基)-NR^vR^w，其中R^v和R^w独立地是H或任选被卤代取代的C₁-C₆烷基。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(V)化合物：

其中：

R^0e是H或NH₂；

R^1e选自

a.H，

b.C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：卤代、CN或苯基，

d.-(C₁-C₆亚烷基)-4-6元杂环烷基，其中所述杂环烷基任选被C₁-C₆烷基取代；

R^2e是H或C₁-C₆烷基；

或R^1e和R^2e一起形成3-11元杂环烷基，其任选被下列基团取代：卤代或-NR^vR^w，其中R^v和R^w独立地是H或任选被卤代取代的C₁-C₆烷基；

R^3e是键或C₁-C₆亚烷基，其任选被氧代取代；且

环H是3-7元杂环烷基，其中p^1e是0、1或2，且p^2e是0、1或2。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(VI)化合物：

其中：

R^0f是H或NH₂；

R^1f选自C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：卤代、-C(O)OH、氧杂环丁-3-基甲基、3-6元环烷基、3-11元杂环烷基、-S-(C₁-C₆烷基)、5-10元杂芳基或苯基、或任选被氧代取代的3-11元杂环烯基；且

环J是6-7元杂环烷基，其中p^1f是1或2且p^2f是1或2。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(VII)化合物：

其中：

R^0g是H或NH₂；

R^1g选自C₁-C₆烷基；

R^2g选自C₁-C₆烷基。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(VIII)化合物：

其中：

R^0h是H或NH₂；

R^1h选自H和C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：CN、3-6元环烷基或4-6元亚杂环烷基-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基；

环C是3-7元环烷基或3-7元杂环烷基；且

环D是在唯一的氮处被R^1h取代的3-7元杂环烷基；且

前提是环C和D一起形成3-11元螺杂环烷基。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(IX)化合物：

其中：

R^0j是H或NH₂；

R^3j选自H和C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、3-6元环烷基、-O-(C₁-C₆烷基)、-O-(C₁-C₆烷基)-OH、-SO₂-(C₁-C₆烷基)和苯基，其中所述苯基任选被CN取代；

R^4j选自H和任选被OH取代的C₁-C₆烷基；

或R^3j和R^4j一起形成4-6-元杂环烷基；

R^5j选自H和C₁-C₆烷基；且

环K是6-7元杂环烷基，其中p^1j是1或2且p^2j是1或2。

在一些实施方案中，式(00A)、(0A)或(A)化合物进一步限定为式(X)化合物：

其中：

R^0k是H或NH₂；

R^1k选自

a.H，

b.C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：卤代、CN或苯基，

R^2k选自H和C₁-C₆烷基；

或R^1k和R^2k一起形成3-11元杂环烷基，其任选被卤代取代；任选被OH取代的C₁-C₆烷基；或-NR^vR^w，其中R^v和R^w独立地是H或任选被卤代取代的C₁-C₆烷基；且

R^3k是键、亚甲基或–C(＝O)-。

在一些实施方案中，X^A和X^B独立地选自3-6-元环烷基、6-10元芳基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基，其中X^A和X^B各自独立地任选被Y¹取代。

在一些实施方案中，X^A或X^B之一是3-11元杂环烷基，其任选被Y¹取代。

在一些实施方案中，环Q是(i)。在一些实施方案中，环Q是(ii)。

在一些实施方案中，t¹是0。在一些实施方案中，t¹是1。

在一些实施方案中，R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H。

在一些实施方案中，R⁰是NH₂。

在一些实施方案中，环Q是(i)，t¹是0或1，且R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H。

在一些实施方案中，环Q是(ii)，t²是0或1，且R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H。

在一些实施方案中，环Q是(i)，t¹是1，且X^A是NR^aR^b，其中R^a和R^b各自独立地是H、任选被5-6元杂芳基取代的C₁-C₆烷基、或3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、或任选被OH取代的C₁-C₆烷基。

在一些实施方案中，环Q是(i)，t¹是0，且X^A是C₁-C₆烷基或3-6元环烷基，其中X^A任选被-NR^aR^b取代，其中R^a和R^b独立地是H或C₁-C₆烷基。

在一些实施方案中，化合物选自表1或实施例1-468。

还提供了药物组合物，其包含如文中所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物例如式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

还提供了如文中所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物例如式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物在治疗中的用途。

还提供了如文中所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物例如式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物在治疗炎性疾病例如哮喘中的用途。

还提供了如文中所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物例如式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物用于制备用于治疗炎性疾病例如哮喘的药物中的用途。

还提供了如文中所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物例如式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物，其用于治疗炎性疾病例如哮喘。

还提供了预防、治疗患者的对Janus激酶活性的抑制响应的疾病或疾患或减轻其严重性的方法，其包括向患者施用治疗有效量的如文中所述的5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶化合物例如式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物。在一些实施方案中，所述疾病或疾患是哮喘。在一些实施方案中，Janus激酶是JAK1。在一些实施方案中，通过吸入施用化合物。

在一些实施方案例如式(00A)、(0A)或(A)化合物中，R⁰⁰是H或CH₃；R⁰¹是H或NH₂；R⁰是H或NH₂；且环Q是(i)或(ii):

其中t¹和t²各自独立地是0或1，且X^A和X^B各自独立地选自：

在本文的任何实施方案中，排除WO 2011/003065的一种或多种化合物。

还提供了选自实施例1-468或表1的化合物或其任何组合。如果结构与其化学名称之间存在任何差异，则以结构为准。

表1：本发明的示例性化合物

本发明的化合物可以含有一个或多个不对称碳原子。因此，化合物可以作为非对映异构体、对映异构体或其混合物存在。化合物的合成可以使用外消旋物、非对映异构体或对映异构体作为起始原料或作为中间体。特定非对映异构化合物的混合物可以通过色谱法或结晶方法分离或富集为一种或多种特定的非对映异构体。类似地，可使用相同技术或本领域已知的其它方法分离或对映异构地富集体对映异构体混合物。每个不对称碳原子或氮原子可以是R或S构型，并且这两种构型都在本发明的范围内。

在本文所示的结构中，当没有指定任何特定手性原子的立体化学时，则所有立体异构体都被考虑并作为本发明的化合物包括在内。当立体化学由代表特定构型的实心楔形或虚线指定时，则该立体异构体是如此指定和定义的。除非另有说明，如果使用实心楔形或虚线，则意指相对立体化学。

另一方面包括本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物的前药，包括已知的氨基保护基和羧基保护基，其被释放例如水解，以在生理条件下产生本发明的化合物。

术语“前药”是指药物活性物质的前体或衍生物形式，其与母体药物相比对患者有效性低，并且能够被酶促或水解活化或转化成更活性的母体形式。参见例如Wilman,“Prodrugs in Cancer Chemotherapy”Biochemical Society Transactions,14,pp.375-382,615th Meeting Belfast(1986)和Stella等人,“Prodrugs:A Chemical Approach toTargeted Drug Delivery,”Directed Drug Delivery,Borchardt等人,(ed.),pp.247-267,Humana Press(1985)。前药包括但不限于含磷酸酯的前药、含硫代磷酸酯的前药、含硫酸酯的前药、含肽的前药、D-氨基酸修饰的前药、糖基化前药、含β-内酰胺的前药、含任选取代的苯氧基乙酰胺的前药或含任选取代的苯乙酰胺的前药、以及5-氟胞嘧啶和5-氟尿苷前药。

特定类型的前药是其中氨基、脒基、氨基亚烷基氨基、亚氨基亚烷基氨基或胍基中的氮原子被以下基团取代的化合物：羟基、烷基羰基(-CO-R)基团、烷氧基羰基(-CO-OR)或酰氧基烷基-烷氧基羰基(-CO-O-R-O-CO-R)基团，其中R是一价或二价基团，例如烷基、亚烷基或芳基，或具有式-C(O)-O-CP1P2-卤代烷基的基团，其中P1和P2相同或不同，且为氢、烷基、烷氧基、氰基、卤素、烷基或芳基。在一个具体的实施方案中，所述氮原子是式(00A)、(0A)或(A)或其子式化合物的脒基的氮原子之一。前药可以通过使本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物与活化基团例如酰基反应以使例如所述化合物中的氮原子与活化的酰基的示例性羰基键合来制备。活化的羰基化合物的实例是含有与羰基键合的离去基团的那些，包括例如酰卤、酰胺、酰基吡啶盐、酰基烷氧化物、酰基酚氧化物如对硝基苯氧基酰基、二硝基苯氧基酰基、氟苯氧基酰基和二氟苯氧基酰基。反应通常在惰性溶剂中在降低的温度如-78至约50℃下进行。反应也可以在无机碱例如碳酸钾或碳酸氢钠或有机碱例如胺包括吡啶、三甲胺、三乙胺、三乙醇胺等存在下进行。

还包括其它类型的前药。例如，本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或含有适当游离羧基的表1或实施例1-468化合物的游离羧基可以被衍生为酰胺或烷基酯。作为另一个实例，包含游离羟基的本发明化合物可通过将羟基转化为例如但不限于如下基团衍生化为前药：磷酸酯、半琥珀酸酯、二甲基氨基乙酸酯或磷酰氧基甲氧基羰基，如Fleisher,D.等人,(1996)Improved oral drug delivery:solubility limitations overcome by the use ofprodrugs Advanced Drug Delivery Reviews,19:115中所述。还包括羟基和氨基的氨基甲酸酯前药，以及羟基的碳酸酯、磺酸酯和硫酸酯前药。也考虑羟基衍生为(酰氧基)甲基和(酰氧基)乙基醚，其中酰基可以是烷基酯，其任选被包括但不限于醚、胺和羧酸官能团的基团取代，或其中酰基是如上所述的氨基酸酯。这种类型的前药描述于J.Med.Chem.,(1996),39:10中。更具体的实例包括用以下基团替换醇基团的氢原子：例如(C₁-C₆)烷酰基氧基甲基、1-((C₁-C₆)烷酰基氧基)乙基、1-甲基-1-((C₁-C₆)烷酰基氧基)乙基、(C₁-C₆)烷氧基羰基氧基甲基、N-(C₁-C₆)烷氧基羰基氨基甲基、琥珀酰基、(C₁-C₆)烷酰基、α-氨基(C₁-C₄)烷酰基、芳基酰基和α-氨基酰基或α-氨基酰基-α-氨基酰基，其中每个α-氨基酰基独立地选自天然存在的L-氨基酸、P(O)(OH)₂、-P(O)(O(C₁-C₆)烷基)₂或糖基(由去除半缩醛形式的碳水化合物的羟基得到的基团)。

“离去基团”是指化学反应中的第一反应物的一部分，其在化学反应中被从第一反应物中置换。离去基团的实例包括但不限于卤素原子、烷氧基和磺酰基氧基。实例磺酰基氧基包括但不限于烷基磺酰基氧基(例如甲基磺酰氧基(甲磺酸酯基团)和三氟甲基磺酰氧基(三氟甲磺酸酯基团))和芳基磺酰氧基(例如对甲苯磺酰氧基(甲苯磺酸酯基团)和对硝基磺酰氧基(硝基磺酸酯基(nosylate)))。

JANUS激酶抑制剂化合物的合成

本发明的化合物可以通过本文所述的合成路线合成。在某些实施方案中，除了本文所包含的描述之外或根据本文所包含的描述，可以使用化学领域中公知的方法。原料通常可从商业来源例如Aldrich Chemicals(Milwaukee,Wis.)获得，或者使用本领域技术人员熟知的方法容易地制备(例如，通过一般描述于Louis F.Fieser和Mary Fieser,Reagents for Organic Synthesis,v.1-19,Wiley,N.Y.(1967-1999ed.),BeilsteinsHandbuch der organischen Chemie,4,Aufl.ed.Springer-Verlag,Berlin,包括增补(也可通过Beilstein在线数据库获得)),或Comprehensive Heterocyclic Chemistry,Editors Katrizky和Rees,Pergamon Press,1984中的方法制备的。

化合物可以单独制备或作为包含至少2种例如5至1,000种化合物或10至100种化合物的化合物库来制备。化合物库可以通过组合的“拆分和混合”方法或通过使用溶液相或固相化学的多个平行合成，经由本领域技术人员已知的方法制备。因此，根据本发明的另一方面，提供了包含至少2种本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物的化合物库。

为了说明的目的，下面描述的反应流程1-26提供了用于合成本发明化合物以及关键中间体的路线。对于各个反应步骤的更详细描述，参见下面的实施例部分。本领域技术人员将理解，可以使用其它合成路线。尽管一些具体的原料和试剂在流程中描述并在下面讨论，但是其它原料和试剂可以被取代以提供多种衍生物或反应条件。此外，根据本公开，可以使用本领域技术人员公知的常规化学，进一步修饰通过下述方法制备的许多化合物。

在本发明化合物的制备中，可能需要保护中间体的远距官能团(例如伯胺或仲胺)。对这种保护的需要将根据远距官能团的性质和制备方法的条件而变化。合适的氨基保护基包括乙酰基、三氟乙酰基、苄基、苯基磺酰基、叔丁氧基羰基(BOC)、苄氧基羰基(CBz)和9-芴基亚甲基氧基羰基(Fmoc)。对于这种保护的需要由本领域技术人员容易地确定。关于保护基及其用途的一般描述，参见T.W.Greene,Protective Groups in OrganicSynthesis,John Wiley&Sons,New York,1991。

在本发明化合物的合成中常用的并且可以使用多种试剂和条件进行的其它转化包括以下：

(1)羧酸与胺反应形成酰胺。这种转化可以使用本领域技术人员已知的各种试剂来实现，但是综合评论可见于Tetrahedron,2005,61,10827-10852。

(2)伯胺或仲胺与芳基卤或拟卤化物例如三氟甲磺酸酯的反应，通常称为“Buchwald-Hartwig交叉偶联”，可以使用各种催化剂、配体和碱实现。这些方法的综述提供在Comprehensive Organic Name Reactions and Reagents,2010,575–581中。

(3)芳基卤和乙烯基硼酸或硼酸酯之间的钯交叉偶联反应。这种转化是一种类型的“Suzuki-Miyaura交叉偶联”，已经在Chemical Reviews,1995,95(7),2457-2483中彻底综述的一类反应。

(4)酯的水解得到相应的羧酸是本领域技术人员熟知的，条件包括：对于甲酯和乙酯，使用强碱水溶液例如氢氧化锂、氢氧化钠或氢氧化钾或强无机酸水溶液如HCl；对于叔丁酯，使用酸例如在二氧六环中的HCl或在二氯甲烷(DCM)中的三氟乙酸(TFA)进行水解。

其它示例性转化在下面的流程中讨论。

反应流程1

式6化合物可以如反应流程1所示合成。三氯乙腈可以与氰基乙酸乙酯反应，得到化合物34。化合物1可以与肼缩合，得到化合物2，然后其可以与1,1,3,3-四甲氧基丙烷缩合得到化合物3。胺3可以双重Boc-保护，得到化合物4，然后其可以用氢氧化锂水解得到羧酸5。然后可以在PyAOP、DIEA和DMAP存在下使羧酸5与各种胺偶联，得到式6的化合物。

反应流程2

反应流程2中图示说明合成式5化合物的方法。可以用试剂例如溴从化合物1产生α-溴酮。用氢化钠和各种α-溴酮2烷基化亚氨基二碳酸二叔丁酯产生化合物3。化合物3可与DMFDMA一起加热，得到化合物4。化合物4与肼在乙醇中环化提供吡唑化合物5。化合物5与吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸在PyAOP、DIEA和DMAP存在下反应，得到式6的化合物。

反应流程3

合成式6化合物的替代方法描述于反应流程3中。用α-溴酮1烷基化邻苯二甲酰亚氨钾产生化合物2。与DMFDMA缩合得到化合物3。化合物3可用肼环化，得到化合物4，其然后可以使用HATU在酰胺形成条件下与吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸偶联，得到式5的化合物。在碳酸铯的存在下用烷基卤对化合物5进行烷基化，得到式6化合物。

反应流程4

反应流程4图示说明了式5化合物的备选合成。如在反应流程5中制备的硝基-SEM吡唑化合物1可以在低温下用六甲基二硅烷氨基锂进行区域选择性去质子化并用碘猝灭，得到2。化合物2的硝基基团可以在铁和氯化铵的存在下还原，接着进行Boc保护以产生化合物3。化合物3可以在Suzuki条件下与芳基硼酸或芳基硼酸酯偶联，得到化合物4。在用四氯化锡裂解Boc基团后，得到式5的化合物。

反应流程5

用于合成式6a和6b化合物的备选方法示于反应流程5中。可以通过用氢化钠和(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷处理，将市售的4-硝基-1H-吡唑用[β-(三甲基硅烷基)乙氧基]甲基(SEM)保护。得到的化合物1可以在钯催化条件下用芳基溴化物或碘化物进行芳基化，生成式2的4-硝基-5-芳基-吡唑。化合物2的硝基可以在铁和氯化铵的存在下还原，产生氨基吡唑3。在PyAOP、DIEA和DMAP存在下，用市售的吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸进行酰胺键偶联，得到化合物4。用HCl水溶液在乙醇中除去SEM保护基，产生化合物5，其可以在合适的碱例如碳酸铯的存在下用烷基卤烷基化或用迈克尔(Michael)受体烷基化，提供式6a和6b的化合物。

反应流程6

用于合成式4a和4b化合物的备选方法显示于反应流程6中。可以使市售的4-硝基-1H-吡唑与烷基溴在碳酸铯存在下在55℃下反应12小时，得到化合物1。可以在乙酸钯(II)、二(1-金刚烷基)-正丁基膦、碳酸钾和三甲基乙酸存在下，使化合物1与芳基溴在N,N-二甲基乙酰胺中反应，得到化合物2a和2b。产物2a：2b的比例根据取代基R1而变化，但是该反应通常有利于产物2b的形成。化合物32a和32b可以在铁和氯化铵存在下在乙醇和水中还原为化合物3a和3b。化合物3a和3b与吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸在PyAOP、DIEA和DMAP存在下的偶联可以提供式4a和4b化合物。

反应流程7

在三乙胺存在下，1与5-氯-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(根据Journal ofMedicinal Chemistry,55(22),10090-10107；2012制备的)的酰胺键偶联提供式2的化合物。用氨水处理2产生式3的化合物。通过HCl水溶液在甲醇中除去SEM保护基产生式4的化合物，其可以在合适的碱如碳酸铯存在下用烷基卤烷基化或用迈克尔受体烷基化，得到式5a和5b的化合物。

反应流程8

用于合成式4a和4b的化合物的方法显示于反应流程8中。化合物1与市售6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸在HATU和DIPEA存在下的酰胺键偶联提供化合物2。通过HCl水溶液在乙醇中除去SEM保护基产生化合物3，其可以在合适的碱例如碳酸铯的存在下用烷基卤烷基化或或用迈克尔受体烷基化，以提供式4a和4b的化合物。

反应流程9

可以如反应流程9所示合成式4的化合物。可以在碳酸铯的存在下用溴乙酸叔丁酯烷基化吡唑化合物1(如本文所述制备的)，得到中间体2。2可以用三氟乙酸处理，得到酸3，然后其可以在偶联试剂例如N,N,N',N'-四甲基-O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)脲六氟磷酸盐(HATU)存在下与伯胺或仲胺反应，得到式4的化合物。

反应流程10

根据流程10，化合物1可以在碱例如碳酸铯存在下与α-卤代酰胺反应，随后在酸性水溶液条件下脱保护，得到2型的化合物。2型的化合物可以与伯胺或仲胺使用还原剂例如三乙酰氧基硼氢化钠在还原条件下反应，分别得到4和3型的化合物。中间体3可以通过在适当的还原剂如三乙酰氧基硼氢化钠存在下与醛反应进一步修饰，得到化合物4。

反应流程11

式1的吡唑化合物可以通过与例如含有苯基碘的仲胺或叔胺侧链的铜催化偶联来修饰，得到化合物2。

反应流程12

在合适的溶剂如乙醇中，在加热下用硫脲处理化合物3，得到噻唑化合物4。通过在合适的溶剂例如乙腈中用tBuONO、CuBr₂处理，可以将氨基噻唑4转化为溴化物5。随后使用碱如氢氧化钾水溶液在相容溶剂如乙醇中水解化合物5，得到酸(6)。化合物7可以通过在叔丁醇中用叠氮磷酸二苯酯(DPPA)处理化合物6，随后在酸性条件下脱保护来制备。在溶剂例如THF中，在碱如DIPEA存在下，用亚硫酰氯活化吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸，并随后与7进行反应，得到化合物8。芳基甲基醚8用例如在DCM中的BBr₃脱甲基化，随后用氯二氟乙酸钠和合适的碱和溶剂组合如在DMF中的碳酸铯烷基化，得到化合物10。

反应流程13

或者，可以如反应流程13所示合成式6的化合物。例如，化合物1可以通过用碳酸二乙酯处理可商购的取代的苯乙酮并随后使用例如在二氧六环中的溴进行溴化来制备。用适当取代的硫代酰胺或硫脲处理化合物1得到噻唑化合物2。化合物2可以使用碱如氢氧化钾水溶液在相容的溶剂例如THF中水解，得到酸化合物35。化合物4可以通过将化合物3与叠氮磷酸二苯酯(DPPA)在叔丁醇中反应来制备。在酸性条件下使化合物4脱保护，得到氨基化合物5。式6化合物可以通过用吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯在吡啶中处理化合物5来制备。

反应流程14

1型化合物可以与合适的亲核试剂例如适当单取代的环状二胺、含环状胺的缩醛和含有取代的第二个氨基的环状胺反应，可以在溶剂例如DMA中在加热下来实现，分别得到化合物7、2和6。2型的化合物可以在酸性水溶液条件下脱保护以提供3型的结构。化合物3可以用单取代或二取代的胺还原胺化，对于单取代的氨基产物，它们可以通过与合适的醛在还原剂例如氰基硼氢化钠的存在下经还原烷基化进一步修饰，得到5型的化合物。

反应流程15

化合物1可以在钯源、卤化铜(i)和碱的存在下、在合适的溶剂中加热下，与N-取代的炔丙基胺或炔丙醇进行Sonogashria反应，分别得到化合物2和3。例如，这可以是Pd(PPh₃)₂Cl₂、Cu(I)I、Et₃N在THF中的组合。醇3可以在合适的溶剂如DCM中用CBr₄、PPh₃转化为溴化物4。然后可以用伯胺和仲胺置换所述溴化物，提供5型的结构。

反应流程16

如流程16所示，1型的化合物可以与1,2-二溴乙烷反应，得到烷基溴2。2与胺亲核试剂的反应可以产生4型的结构。

反应流程17

如流程17所示，1型的化合物可以用含胺的亲电试剂烷基化以产生化合物2。在悬挂的胺上的官能团处理可以产生3和4型的结构。

反应流程18

如流程18所示，1型的化合物可以与烯丙基二卤化物反应以产生化合物2。悬挂的烯丙基卤化物与胺亲核试剂的进一步反应可以产生4型的结构。

反应流程19

如流程19所示，1型的化合物可以与取代的哌嗪和合适的脱水剂(例如HATU)反应以产生4型的结构。或者，1型的化合物可以与合适的单保护的哌嗪偶联，以产生化合物2。然后可以将化合物2脱保护并进一步与适当的亲电试剂反应以产生4型的结构。

反应流程20

如流程20所示，1型的化合物可以在路易斯酸例如Yb(OTf)₃的存在下与环氧化物反应以产生诸如2和3的结构。然后脱保护可以产生4和5型的结构。

反应流程21

如流程21所示，1型的化合物可以在路易斯酸例如Yb(OTf)₃的存在下与环氧化物反应以产生例如2的结构。所得的醇然后可以被氧化以产生3型的结构。

反应流程22

如流程22所示，在碱存在下，1型的化合物与合适的亲电试剂反应，然后脱保护可以产生如2的结构。反应性胺的进一步处理然后可以产生3型的结构。

反应流程23

如流程23所示，1型的化合物与炔丙基溴或炔丙基氯在碱存在下的反应可以产生2型的化合物。在卤化铜和有机碱的存在下，2与叠氮化合物例如3反应，随后脱保护，可以得到4型的三唑化合物。然后反应性胺的进一步处理可以产生5型的结构。

反应流程24

如流程24所示，1型的化合物与2-(卤代甲基)环氧乙烷的反应可以产生2型的化合物。2型的化合物与亲核胺的反应可以得到3型的化合物。氧化3得到4型的化合物。

反应流程25

如流程25所示，在碱存在下，1型的化合物与适当的烯丙基型烷基化试剂的反应产生2型的化合物。在酸性条件下氨基保护基的脱保护，随后反应性胺的还原胺化或烷基化得到3型的化合物。

反应流程26

如流程26所示，1型的化合物与合适的烯丙基型烷基化试剂的反应产生2型的化合物。在酸性条件下除去缩酮保护基，随后在还原胺化条件下使释放的酮与胺反应，得到3型的化合物。随后的还原胺化或烷基化步骤产生3型的结构。

应当理解，在存在合适的官能团的情况下，各式化合物或其制备中使用的任何中间体可以通过一种或多种标准合成方法使用缩合、取代、氧化、还原或裂解反应进一步衍生化。具体的取代方法包括常规烷基化、芳基化、杂芳基化、酰化、磺酰化、卤化、硝化、甲酰化和偶联方法。

在另一个实例中，伯胺或仲胺基团可以通过酰化转化为酰胺基团(-NHCOR’或–NRCOR’)。酰化可以通过在合适的溶剂例如二氯甲烷中，在碱例如三乙胺的存在下与合适的酰氯反应，或者通过在合适的溶剂如二氯甲烷中在合适的偶联剂例如HATU(O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟磷酸盐)存在下与适当的羧酸反应。类似地，通过在合适的碱例如三乙胺存在下，在合适的溶剂例如二氯甲烷中，与适当的磺酰氯反应，可将胺基团转化为磺酰胺基团(-NHSO₂R’或–NR”SO₂R’)。通过在合适的碱例如三乙胺存在下，在合适的溶剂例如二氯甲烷中，与合适的异氰酸酯反应，伯或仲胺基团可以转化成脲基团(-NHCONR’R”或–NRCONR’R”)。

例如通过催化氢化，在溶剂例如乙酸乙酯或醇例如甲醇中在金属催化剂例如载体例如碳上的钯的存在下使用例如氢，经还原硝基(-NO₂)基团，可以获得胺(-NH₂)。或者，转化可以通过使用例如金属例如锡或铁在酸例如盐酸存在下的化学还原进行。

在另一个实例中，胺(-CH₂NH₂)基团可以例如通过如下的催化氢化还原腈(-CN)获得：在金属催化剂例如在载体如碳上的钯或兰尼(Raney)镍存在下，在溶剂例如醚例如环醚例如四氢呋喃中，在合适的温度例如约-78℃至溶剂的回流温度下使用例如氢进行。

在另一实例中，可通过转化为相应的酰基叠氮化物(-CON₃)、Curtius重排和水解所得的异氰酸酯(-N＝C＝O)，从羧酸基团(-CO₂H)获得胺(-NH₂)基团。

使用胺和硼氢化物例如三乙酰氧基硼氢化钠或氰基硼氢化钠，在溶剂例如卤代烃例如二氯甲烷或醇如乙醇中，必要时在酸如乙酸存在下，在环境温度下，通过还原胺化，可以将醛基团(-CHO)转化成胺基团(-CH₂NR’R”))，。

在另一个实例中，可以通过使用Wittig或Wadsworth-Emmons反应，在本领域技术人员已知的标准条件下使用合适的正膦或膦酸酯将醛基转化为烯基(-CH＝CHR’)。

醛基可以通过在合适的溶剂例如甲苯中使用二异丁基氢化铝还原酯基(例如–CO₂Et)或腈(-CN)而获得。或者，醛基可以通过使用本领域技术人员已知的任何合适的氧化剂氧化醇基团获得。

根据R的性质，酯基(-CO₂R’)可以通过酸或碱催化水解转化成相应的酸基(-CO₂H)。如果R是叔丁基，则可以例如通过在水性溶剂中用有机酸如三氟乙酸处理，或通过在水性溶剂中用无机酸如盐酸处理实现酸催化水解。

羧酸基团(-CO₂H)可以通过在合适的偶联剂例如HATU存在下，在合适的溶剂例如二氯甲烷中与合适的胺反应而转化为酰胺(CONHR’或–CONR’R”)。

在另一个实例中，羧酸可以通过转化成相应的酰氯(-COCl)，然后通过Arndt-Eistert合成，通过一个碳同系化(即–CO₂H至–CH₂CO₂H)。

在另一个实例中，可以通过使用例如复合金属氢化物例如氢化铝锂在乙醚或四氢呋喃中，或硼氢化钠在溶剂如甲醇中，经还原由相应的酯(例如-CO₂R’)或醛(-CHO)产生-OH基团。或者，可以通过在溶剂例如四氢呋喃中使用例如氢化铝锂，或通过在溶剂例如四氢呋喃中使用硼烷，经还原相应的酸(-CO₂H)来制备醇。

使用本领域技术人员已知的条件，醇基可以转化为离去基团，例如卤素原子或磺酰氧基例如烷基磺酰氧基，例如三氟甲基磺酰氧基或芳基磺酰氧基例如对甲苯基磺酰基氧基。例如，醇可以在卤代烃(例如二氯甲烷)中与硫酰氯反应，得到相应的氯化物。在反应中也可以使用碱(例如三乙胺)。

在另一个实例中，醇、苯酚或酰胺基团可以通过在溶剂例如四氢呋喃中，在膦例如三苯基膦和活化剂如偶氮二甲酸二乙酯、偶氮二甲酸二异丙酯或偶氮二甲酸二甲酯存在下，使酚或酰胺与醇偶联而烷基化。或者，烷基化可以通过使用合适的碱例如氢化钠进行去质子化随后加入烷基化剂如烷基卤来实现。

化合物中的芳族卤素取代基可以通过用碱例如锂碱如正丁基锂或叔丁基锂，任选在低温例如约-78℃下，在溶剂如四氢呋喃中处理，进行卤素-金属交换，然后用亲电试剂猝灭，引入所需的取代基。因此，例如，可以通过使用N,N-二甲基甲酰胺作为亲电试剂引入甲酰基。芳族卤素取代基可以备选地进行金属(例如钯或铜)催化的反应，以引入例如酸、酯、氰基、酰胺、芳基、杂芳基、烯基、炔基、硫基或氨基取代基。可以采用的合适的方法包括由Heck、Suzuki、Stille、Buchwald或Hartwig描述的那些。

芳族卤素取代基也可以在与合适的亲核试剂如胺或醇反应之后进行亲核置换。有利地，这种反应可以在升高温度下在微波辐射存在下进行。

分离方法

在每个示例性流程中，将反应产物彼此分离或与原料分离可能是有利的。通过本领域常用的技术将每个步骤或系列步骤的所需产物分离或纯化(下文称为分离)至所需的均匀度。通常，这样的分离包括多相萃取、从溶剂或溶剂混合物中结晶或研磨、蒸馏、升华或色谱法。色谱可以包括任何数量的方法，包括例如：反相和正相；尺寸排阻；离子交换；超临界流体；高、中和低压液相色谱方法和装置；小规模分析；模拟移动床(SMB)和制备薄层或厚层色谱，以及小规模薄层和快速色谱技术。

另一类分离方法包括用选择的试剂处理混合物以结合所需产物、未反应的起始材料、反应副产物等或者可以其它方式使其可分离。这些试剂包括吸附剂或吸附剂例如活性炭、分子筛、离子交换介质等。或者，试剂可以是酸(在碱性材料的情况下)、碱(在酸性材料的情况下)、结合试剂例如抗体、结合蛋白、选择性螯合剂例如冠醚、液/液离子萃取试剂(LIX)等。

合适的分离方法的选择取决于所涉及材料的性质。实例分离方法包括蒸馏和升华中的沸点和分子量、色谱中极性官能团的存在或不存在、在多相萃取中在酸性和碱性介质中的材料稳定性等。本领域技术人员将应用最可能实现所需分离的技术。

非对映异构体混合物可以基于它们的物理化学差异通过本领域技术人员熟知的方法例如通过色谱法或分级结晶，分离成它们各自的非对映异构体。对映异构体可以通过下述分离：通过与适当的光活性化合物(例如，手性助剂如手性醇或Mosher酰氯)反应，将对映异构体混合物转化成非对映异构体混合物，分离非对映异构体并转化(例如水解)单独的非对映异构体至相应的纯对映体。此外，本发明的一些化合物可以是阻转异构体(例如，取代的联芳基)，并且被认为是本发明的一部分。对映异构体也可以通过使用手性HPLC柱或超临界流体色谱法分离。

基本上不含其立体异构体的单一立体异构体例如对映异构体，可以通过使用例如使用光学活性拆分试剂形成非对映异构体的方法拆分外消旋混合物来获得(Eliel,E.和Wilen,S.,Stereochemistry of Organic Compounds,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994；Lochmuller,C.H.,J.Chromatogr.,113(3):283-302(1975))。本发明的手性化合物的外消旋混合物可以通过任何合适的方法分离和分得，包括：(1)与手性化合物形成离子的非对映体盐，并通过分步结晶或其它方法分离，(2)与手性衍生化试剂形成非对映异构化合物，分离非对映异构体，并转化成纯的立体异构体，和(3)在手性条件下直接分离基本上纯的或富集的立体异构体。参见：Drug Stereochemistry,Analytical Methods andPharmacology,Irving W.Wainer,Ed.,Marcel Dekker,Inc.,New York(1993)。

非对映体盐可以通过对映体纯手性碱如马钱子碱、奎宁、麻黄碱、士的宁、α-甲基-β-苯基乙胺(安非他明)等与具有酸性官能团如羧酸和磺酸的不对称化合物反应来形成。可通过分步结晶或离子色谱法诱导非对映体盐分离。为了分离氨基化合物的光学异构体，加入手性羧酸或磺酸如樟脑磺酸、酒石酸、扁桃酸或乳酸可导致形成非对映体盐。

或者，待拆分的底物与手性化合物的一种对映异构体反应形成非对映异构体对(Eliel,E.和Wilen,S.,Stereochemistry of Organic Compounds,John Wiley&Sons,Inc.,New York,1994,p.322)。非对映异构化合物可以通过使不对称化合物与对映异构体纯的手性衍生试剂(例如薄荷基衍生物)反应来形成，然后分离非对映异构体并水解，得到纯的或富集的对映异构体。确定光学纯度的方法包括在碱的存在下，制备外消旋混合物的手性酯，例如薄荷基酯，例如(-)薄荷基氯甲酸酯或Mosher酯，α-甲氧基-α-(三氟甲基)苯基乙酸酯(Jacob,J.Org.Chem.47:4165(1982))，并分析NMR波谱中两种阻转异构对映体或非对映体的存在。按照分离阻转异构的萘基-异喹啉的方法(WO 96/15111，通过引用并入本文)，可以通过正相和反相色谱分离和分得阻转异构化合物的稳定的非对映异构体。对于方法(3)，可以使用手性固定相通过色谱法分离两种对映异构体的外消旋混合物(ChiralLiquid Chromatography W.J.Lough,Ed.,Chapman和Hall,New York,(1989)；Okamoto,J.of Chromatogr.513:375-378(1990))。富集的或纯化的对映异构体可以通过用于区分具有不对称碳原子的其它手性分子的方法例如旋光和圆二色性来区分。手性中心和对映异构体的绝对立体化学可以通过x射线晶体学确定。

式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物和合成它们的中间体的位置异构体例如E和Z形式可以通过鉴定方法例如NMR和分析型HPLC观察。对于其中互变能垒足够高的某些化合物，可以例如通过制备型HPLC分离E和Z异构体。

药物组合物和施用

本发明涉及的化合物是JAK激酶抑制剂，例如JAK1抑制剂，并且可用于治疗数种疾病，例如炎性疾病，例如哮喘。

因此，另一个实施方案提供了含有本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂的药物组合物或药物，以及使用本发明的化合物制备这样的组合物和药物的方法。

在一个实例中，式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以通过在环境温度下在合适的pH和所需的纯度下与生理学上可接受的载体(即在应用的剂量和浓度下对接受者无毒的载体)配制为盖仑施用形式。制剂的pH主要取决于化合物的具体用途和浓度，但通常在约3至约8的范围内。在一个实例中，式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物被配制在pH 5的乙酸盐缓冲液中。在另一实施方案中，本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物是无菌的。化合物可以例如作为固体或无定形组合物、作为冻干制剂或作为水溶液储存。

以与良好医学实践一致的方式配制、给药和施用组合物。在本文中考虑的因素包括所治疗的特定疾病、所治疗的特定哺乳动物、个体患者的临床状况、疾病的原因、活性剂递送位点、施用方法、施用安排，和医生已知的其他因素。

应当理解，任何特定患者的具体剂量水平将取决于多种因素，包括所用具体化合物的活性、年龄、体重、一般健康状况、性别、饮食、施用时间、施用途径、排泄速率、药物组合和正在治疗的特定疾病的严重性。最佳剂量水平和给药频率将通过临床试验确定，如制药领域中所需要的。通常，口服施用的日剂量范围将在如下范围内：约0.001mg至约100mg/kg人体重，通常为每kg体重0.01mg至约50mg，例如每kg体重0.1至10mg，以单剂量或分份剂量进行。一般来说，吸入施用的每日剂量范围将将在如下范围内：约0.1μg至约1mg/kg人体重，优选0.1μg至50μg/kg，以单剂量或分份剂量进行。另一方面，在一些情况下可能需要使用超出这些限制的剂量。

本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以通过任何合适的方式施用，包括口服、局部(包括颊和舌下)、直肠、阴道、透皮、肠胃外、皮下、腹膜内、肺内、皮内、鞘内、吸入和硬膜外和鼻内，且如果需要对于局部治疗，病灶内施用。肠胃外输注包括肌内、静脉内、动脉内、腹膜内或皮下施用。在一些实施方案中，使用吸入施用。

本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以任何方便的施用形式施用，所述施用形式例如片剂、散剂、胶囊、锭剂、颗粒剂、溶液剂、分散剂、混悬剂、糖浆剂、喷雾剂、气体剂(vapors)、栓剂、凝胶剂、乳剂、贴剂等。这样的组合物可以含有药物制剂中常规的组分，例如稀释剂(例如葡萄糖、乳糖或甘露醇)、载体、pH调节剂、缓冲剂、甜味剂、填充剂、稳定剂、表面活性剂、润湿剂、润滑剂、乳化剂、助悬剂、防腐剂、抗氧化剂、遮光剂、助流剂、加工助剂、着色剂、芳香剂、矫味剂、其它已知的添加剂以及其它活性剂。

合适的载体和赋形剂是本领域技术人员熟知的，并且在例如Ansel,Howard C.,等人,Ansel’s Drug Dosage Forms and Drug Delivery Systems.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2004；Gennaro,Alfonso R.,等人Remington:The Scienceand Practice of Pharmacy.Philadelphia:Lippincott,Williams&Wilkins,2000；和Rowe,Raymond C.Handbook of Pharmaceutical Excipients.Chicago,PharmaceuticalPress,2005中有详细描述。例如，载体包括溶剂、分散介质、包衣材料、表面活性剂、抗氧化剂、防腐剂(例如抗菌剂、抗真菌剂)、等渗剂、吸收延迟剂、盐、防腐剂、药物、药物稳定剂、凝胶剂、粘合剂、赋形剂、崩解剂、润滑剂、甜味剂、矫味剂、染料、类似材料及其组合，如本领域普通技术人员已知的(参见例如，Remington's Pharmaceutical Sciences,pp 1289-1329,1990)。除非任何常规载体与活性成分不相容，否则考虑其在治疗或药物组合物中的应用。示例性赋形剂包括磷酸二钙、甘露醇、乳糖、淀粉、硬脂酸镁、糖精钠、纤维素、碳酸镁或其组合。药物组合物可包含不同类型的载体或赋形剂，这取决于其是以固体、液体还是气雾剂形式施用，以及对于这些施用途径其是否需要是无菌的。

例如，用于口服施用的片剂和胶囊剂可以是单位剂量呈递形式，并且可以含有常规赋形剂例如粘合剂，例如糖浆、阿拉伯胶、明胶、山梨醇、黄蓍胶或聚乙烯吡咯烷酮；填充剂，例如乳糖、糖、玉米淀粉、磷酸钙、山梨醇或甘氨酸；压片润滑剂，例如硬脂酸镁、滑石粉、聚乙二醇或二氧化硅；崩解剂，例如马铃薯淀粉，或可接受的润湿剂如十二烷基硫酸钠。片剂可以根据正常药物实践中熟知的方法包衣。口服液体制剂可以是例如水性或油性混悬液、溶液、乳剂、糖浆或酏剂的形式，或者可以作为用于在使用前用水或其它合适的溶媒重构的干燥产品。此类液体制剂可以含有常规的添加剂，例如助悬剂，例如山梨醇、糖浆、甲基纤维素、葡萄糖浆、明胶氢化食用脂肪；乳化剂，例如卵磷脂、脱水山梨糖醇单油酸酯或阿拉伯胶；非水性溶媒(其可以包括食用油)，例如杏仁油、分馏的椰子油、油性酯如甘油、丙二醇或乙醇；防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯或对羟基苯甲酸丙酯或山梨酸，以及如果需要常规的矫味剂或着色剂。

对于局部施用于皮肤，化合物可以制成乳膏剂、洗剂或软膏剂。可用于药物的乳膏或软膏制剂是本领域熟知的常规制剂，例如在如British Pharmacopoeia的标准药学教科书中所描述的。

本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物也可以配制用于吸入，例如作为鼻喷雾剂或干粉或气雾剂吸入器。对于通过吸入递送，化合物通常是微粒的形式，其可以通过多种技术包括喷雾干燥、冷冻干燥和微粉化制备。可以使用例如压力驱动的喷射雾化器或超声雾化器实现气雾产生，例如通过使用抛射剂驱动的计量气雾剂或例如来自吸入胶囊或其它“干粉”输送系统的微粉化化合物的无抛射剂施用。

作为实例，本发明的组合物可以制备为用于从喷雾器递送的混悬液或作为液体抛射剂中的气雾剂，例如在加压计量剂量吸入器(PMDI)中使用。适用于PMDI的抛射剂是本领域技术人员已知的，并且包括CFC-12、HFA-134a、HFA-227、HCFC-22(CCl₂F₂)和HFA-152(CH₄F₂和异丁烷)。

在一些实施方案中，本发明的组合物为干粉形式，用于使用干粉吸入器(DPI)递送。许多类型的DPI是已知的。

用于通过施用递送的微粒可以用有助于递送和释放的赋形剂配制。例如，在干粉制剂中，微粒可以用有助于从DPI流入肺的大载体颗粒配制。合适的载体颗粒是已知的，包括乳糖颗粒；它们可以具有例如大于90μm的质量中值气动直径。

在基于气雾剂的制剂的情况下，一个实例是：

*例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、

(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物。

根据所使用的吸入系统，化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以如所述进行给药。除了化合物之外，施用形式可另外含有如上所述的赋形剂，或例如抛射剂(例如在计量气雾剂的情况下的Frigen)、表面活性物质、乳化剂、稳定剂、防腐剂、矫味剂、填充剂(例如在粉末吸入器的情况下为乳糖)或合适的话其它活性化合物。

为了吸入的目的，可以使用大量系统，使用适合于患者的吸入技术可以由其产生和施用最佳粒度的气雾剂。除了使用适配器(间隔件，膨胀器)和梨形容器(例如，)以及发射吹气喷雾的自动装置用于计量气雾剂，特别是在粉末吸入器的情况下，多种技术方案是可用的(例如或如在美国专利No.5,263,475中所述的吸入器，其通过引用并入本文)。另外，本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以在多室装置中递送，从而允许递送组合活性剂。

化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物也可以在无菌介质中肠胃外施用。根据所使用的溶媒和浓度，化合物可以悬浮或溶解在溶媒中。有利地，辅助剂例如局部麻醉剂、防腐剂或缓冲剂可以溶解在溶媒中。

靶向吸入的药物递送

最近已经综述了用于通过局部(吸入)施用递送至肺的药物的优化(Cooper,A.E.等人Curr.Drug Metab.2012,13,457-473)。由于递送装置的限制，吸入药物的剂量在人类中可能是低的(约<1mg/天)，这需要高度有效的分子。对于预定通过干粉吸入递送的化合物，还需要能够产生可微粉化至1-5μm大小的化合物的结晶形式。另外，化合物需要在给定时间段内在肺中保持足够的浓度，以便能够发挥所需持续时间的药理作用，对于其全身抑制是不希望的药理学靶标，具有低全身暴露。肺对大分子(蛋白质、肽)以及具有伴随的短肺半衰期的小分子具有固有的高渗透性，因此有必要通过修饰化合物的一个或多个特征来减弱肺吸收速率：使膜渗透性最小化，降低溶解速率或向化合物中引入一定程度的碱性以增强与富含磷脂的肺组织的结合或通过捕获在酸性亚细胞区室如溶酶体(pH 5)中。因此，在一些实施方案中，本发明的化合物表现出这些特征中的一种或多种。

匹配对分析

图1描述了在指定位置含有OMe(i)或OCHF₂(ii)基团的本发明的某些化合物的匹配对分析。通过线连接的任何两个点表示具有相同的R₁和R₂基团并且仅在指定位置处通过OMe或OCHF₂取代不同的两种化合物。图1表明OCHF₂取代的类似物(ii)在JAK1生化测定(下文描述)中比相应的OMe类似物(i)一致地更有效。

采用JANUS激酶抑制剂的治疗方法和JANUS激酶抑制剂的用途

本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物抑制Janus激酶例如JAK1激酶的活性。例如，本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物抑制经由JAK1激酶的信号转导物的磷酸化和转录激活物(STATs)以及STAT介导的细胞因子产生。本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可用于通过细胞因子途径例如IL-6、IL-15、IL-7、IL-2、IL-4、IL-9、IL-10、IL-13、IL-21、G-CSF、IFNα、IFNβ或IFNγ途径抑制细胞中JAK1激酶活性。因此，在一个实施方案中提供了使细胞与本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物接触，抑制细胞中的Janus激酶活性(例如，JAK1活性)的方法。

本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可用于治疗由异常IL-6、IL-15、IL-7、IL-2、IL-4、IL9、IL-10、IL-13、IL-21、G-CSF、IFNα、IFNβ或IFNγ细胞因子信号驱动的免疫学病症。

因此，一个实施方案包括本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物，其用于治疗。

在一些实施方案中，提供了本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物在治疗炎性疾病中的用途。还提供了本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物在制备用于治疗炎性疾病如哮喘的药物中的用途。还提供了本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物，其用于治疗炎性疾病如哮喘。

另一个实施方案包括预防、治疗或减轻患者中的对Janus激酶活性(例如JAK1激酶活性)的抑制响应的疾病或疾患(例如哮喘)的严重性的方法。该方法可以包括向患者施用治疗有效量的本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物的步骤。在一个实施方案中，对Janus激酶例如JAK1激酶的抑制响应的疾病或疾患是哮喘。

在一个实施方案中，所述疾病或疾患是癌症、中风、糖尿病、肝肿大、心血管疾病、多发性硬化、阿尔茨海默病、囊性纤维化、病毒性疾病、自身免疫性疾病、动脉粥样硬化、再狭窄、银屑病、类风湿性关节炎、炎性肠病、哮喘、过敏性疾病、炎症、神经疾病、激素相关疾病、与器官移植(例如移植排斥)相关的疾患、免疫缺陷病症、破坏性骨病、增殖性疾病、感染性疾病、与细胞死亡相关的疾病、凝血酶诱导的血小板聚集、肝病、涉及T细胞活化的病理性免疫病症、CNS病症或骨髓增殖性病症。

在一个实施方案中，炎性疾病是类风湿性关节炎、银屑病、哮喘、炎性肠疾病、接触性皮炎或迟发性超敏反应。在一个实施方案中，自身免疫性疾病是类风湿性关节炎、狼疮或多发性硬化。

在一个实施方案中，癌症是乳腺癌、卵巢癌、子宫颈癌、前列腺癌、睾丸癌、阴茎癌、泌尿生殖道癌、精原细胞瘤、食管癌、喉癌、胃癌、胃部癌、胃肠癌、皮肤癌、角化棘皮瘤、滤泡癌、黑素瘤、肺癌、小细胞肺癌、非小细胞肺癌(NSCLC)、肺腺癌、肺鳞癌、结肠癌、胰腺癌、甲状腺癌、乳头状癌、膀胱癌、肝癌、胆道癌、肾癌、骨癌、骨髓疾病、淋巴病、毛细胞癌、颊腔和咽(口腔)癌、唇癌、舌癌、口癌、唾液腺癌、咽癌、小肠癌、结肠癌、直肠癌、肛门癌、肾癌、前列腺癌、外阴癌、甲状腺癌、大肠癌、子宫内膜癌、子宫癌、脑癌、中枢神经系统癌、腹膜癌、肝细胞癌、头癌、颈癌、霍奇金癌或白血病。

在一个实施方案中，所述疾病是骨髓增殖性病症。在一个实施方案中，骨髓增殖性病症是真性红细胞增多症、原发性血小板增多症、骨髓纤维化和慢性髓性白血病(CML)。

另一个实施方案包括本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物在制备用于治疗文中所述的疾病(例如，炎性病症、免疫性病症或癌症)的药物中的用途。在一个实施方案中，本发明提供了通过JAK激酶例如JAK1的靶向抑制来治疗本文所述的疾病或疾患(例如炎性病症、免疫性病症或癌症)的方法。

组合治疗

本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以单独使用或与其它用于治疗的活性剂组合使用。药物组合物或给药方案的第二种化合物通常具有与本发明化合物互补的活性，使得它们彼此不产生不利影响。这些活性剂以对预期目的有效的量合适地以组合存在。所述化合物可以在单一药物组合物中一起施用或分别地施用，并且当分别施用时，这可以同时或顺序发生。这种顺序施用在时间上可以是接近或远离的。

例如，其它化合物可以与本发明关注的化合物组合用于预防或治疗炎性疾病，例如哮喘。因此，本发明还涉及包含治疗有效量的本发明化合物和一种或多种其它治疗剂的药物组合物。用于与本发明化合物组合治疗的合适的治疗剂包括但不限于：腺苷A2A受体拮抗剂；抗感染药；非甾体糖皮质激素受体(GR受体)激动剂；抗氧化剂；β2肾上腺素受体激动剂；CCR1拮抗剂；趋化因子拮抗剂(不是CCR1)；皮质类固醇；CRTh2拮抗剂；DP1拮抗剂；甲酰基肽受体拮抗剂；组蛋白脱乙酰酶激活剂；氯通道hCLCA1阻滞剂；上皮钠通道阻滞剂(ENAC阻滞剂；细胞间粘附分子1阻滞剂(ICAM阻滞剂)；IKK2抑制剂；JNK抑制剂；环加氧酶抑制剂(COX抑制剂)；脂氧合酶抑制剂；白三烯受体拮抗剂；双重β2肾上腺素受体激动剂/M3受体拮抗剂(MABA化合物)；MEK-1抑制剂；髓过氧化物酶抑制剂(MPO抑制剂)；毒蕈碱拮抗剂；p38MAPK抑制剂；磷酸二酯酶PDE4抑制剂；磷脂酰肌醇3-激酶δ抑制剂(PI3-激酶δ抑制剂)；磷脂酰肌醇3-激酶γ抑制剂(PI3-激酶γ抑制剂)；过氧化物酶体增殖物激活受体激动剂(PPARγ激动剂)；蛋白酶抑制剂；视黄酸受体调节剂(RARγ调节剂)；他汀类；血栓素拮抗剂；TLR7受体激动剂；或血管扩张剂。

此外，本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以与以下活性剂组合：(1)皮质类固醇，例如二丙酸阿氯米松、阿洛米松(amelometasone)、丙酸倍氯米松、布地奈德、丙酸布替可特、biclesonide、blobetasol propionate、desisobutyrylciclesonide、地塞米松、dtiprednol dicloacetate、氟轻松、糠酸氟替卡松、丙酸氟替卡松、氯替泼诺碳酸乙酯(局部用)或糠酸莫米松；(2)β2-肾上腺素受体激动剂例如舒喘灵(salbutamol)、沙丁胺醇(albuterol)、特布他林、非诺特罗、比托特罗、卡布特罗、克仑特罗、吡布特罗、rimoterol、特布他林、曲托喹酚、妥洛特罗和长效β2-肾上腺素受体激动剂如奥西那林(metaproterenol)、异丙肾上腺素(isoproterenol)、异丙肾上腺素(isoprenaline)、沙美特罗、indacaterol、福莫特罗(包括富马酸福莫特罗)、阿福特罗(arformoterol)、卡莫特罗(carmoterol)、abediterol、三氟拉酸维兰特罗(vilanteroltrifenate)、olodaterol；(3)皮质类固醇/长效β2激动剂组合产品如沙美特罗/丙酸氟替卡松(也以销售)、福莫特罗/布地奈德福莫特罗/丙酸氟替卡松福莫特罗/环索奈德、福莫特罗/糠酸莫米松、茚达特罗(indacaterol)/糠酸莫米松、三氟拉酸维兰特(vilanterol trifenate)/糠酸氟替卡松或阿福特罗(arformoterol)/环索奈德；(4)抗胆碱能剂，例如毒蕈碱-3(M3)受体拮抗剂如异丙托溴铵、噻托溴铵、阿地铵(aclidinium)(LAS-34273)、格隆溴铵、芜地溴铵(umeclidinium bromide)；(5)M3-抗胆碱能/β2-肾上腺素受体激动剂组合产品，例如维兰特罗(vilanterol)/umeclidinium奥托特罗(olodaterol)/噻托溴铵、格隆溴铵/茚达特罗(indacaterol)(也以出售)、氢溴酸非诺特罗/异丙托溴铵硫酸沙丁胺醇/异丙托溴铵富马酸福莫特罗/格隆溴铵或阿地溴铵(aclidinium bromide)/福莫特罗；(6)双重药理学M3-抗胆碱能/β2-肾上腺素受体激动剂例如琥珀酸batefenterol、AZD-2115或LAS-190792；(7)白三烯调节剂，例如白三烯拮抗剂例如孟鲁司特、扎鲁司特(zafirulast)或普仑司特或白三烯生物合成抑制剂例如齐留通或LTB4拮抗剂例如amelubant，或FLAP抑制剂例如氟非隆(fiboflapon)、GSK-2190915；(8)磷酸二酯酶-IV(PDE-IV)抑制剂(口服或吸入)，例如罗氟司特、西洛司特、奥格司特(oglemilast)、咯利普兰、替托司特(tetomilast)、AVE-8112、revamilast、CHF 6001；(9)抗组胺药，例如选择性组胺-1(H1)受体拮抗剂例如非索非那定、西吡替林(citirizine)、氯雷他定或阿司咪唑或双重H1/H3受体拮抗剂例如GSK 835726或GSK 1004723；(10)镇咳剂，例如可待因或右美沙芬(dextramorphan)；(11)粘液溶解剂，例如N-乙酰半胱氨酸或福多斯汀(fudostein)；(12)祛痰剂/粘弹性调节剂，例如氨溴索、高渗溶液(例如盐水或甘露醇)或表面活性剂；(13)粘液溶解肽，例如重组人脱氧核糖核酸酶I(脱氧核糖核酸酶-α和rhDNase)或螺杀菌素；(14)抗生素，例如阿奇霉素、妥布霉素或氨曲南；(15)非选择性COX-1/COX-2抑制剂，例如布洛芬或酮洛芬；(16)COX-2抑制剂，例如塞来考昔和罗非昔布；(17)VLA-4拮抗剂，例如在WO97/03094和WO97/02289中描述的那些，各自通过引用并入本文；(18)TACE抑制剂和TNF-α抑制剂，例如抗-TNF单克隆抗体例如和CDP-870和TNF受体免疫球蛋白分子，例如(19)基质金属蛋白酶抑制剂，例如MMP-12；(20)人嗜中性粒细胞弹性蛋白酶抑制剂，例如BAY-85-8501或在WO2005/026124、WO2003/053930和WO06/082412中描述的那些，各自通过引用并入本文；(21)A2b拮抗剂，例如在WO2002/42298中描述的那些，通过引用并入本文；(22)趋化因子受体功能调节剂，例如CCR3和CCR8的拮抗剂；(23)调节其它前列腺素受体的作用的化合物例如血栓烷A₂拮抗剂；DP1拮抗剂，例如laropiprant或asapiprant CRTH2拮抗剂如OC000459、fevipiprant、ADC 3680或ARRY 502；(24)PPAR激动剂，包括PPARα激动剂(例如非诺贝特)，PPARδ激动剂，PPARγ激动剂例如吡格列酮、罗格列酮和巴拉格列酮(balaglitazone)；(25)甲基黄嘌呤如茶碱或氨茶碱和甲基黄嘌呤/皮质类固醇组合如茶碱/布地奈德、茶碱/丙酸氟替卡松、茶碱/环索奈德、茶碱/糠酸莫米松和茶碱/丙酸倍氯米松；(26)A2a激动剂，例如EP1052264和EP1241176中所述的那些；(27)CXCR2或IL-8拮抗剂，例如AZD-5069、AZD-4721、danirixin；(28)IL-R信号传导调节剂，例如kineret和ACZ 885；(29)MCP-1拮抗剂，例如ABN-912；(30)p38MAPK抑制剂，例如BCT197、JNJ49095397、洛沙莫德(losmapimod)或PH-797804；(31)TLR7受体激动剂如AZD 8848；(32)PI3-激酶抑制剂，例如RV1729或GSK2269557。

在一些实施方案中，本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物可以与一种或多种另外的药物组合使用，所述另外的药物例如抗过度增殖剂、抗癌剂、细胞抑制剂、细胞毒性剂、抗炎剂或化疗剂，例如在美国专利申请公开2010/0048557中公开的那些活性剂，通过引用并入本文。本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物也可以与放射疗法或手术联合使用，正如本领域已知的。

制品

另一个实施方案包括用于治疗对Janus激酶例如JAK1激酶的抑制响应的疾病或病症的制品(例如药盒)。药盒可以包含：

(a)第一药物组合物，其包含本发明化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物；和

(b)使用说明书。

在另一个实施方案中，药盒还包含：

(c)第二药物组合物，例如包含如上所述用于治疗的活性剂例如用于治疗炎性病症的活性剂或化疗剂的药物组合物。

在一个实施方案中，说明书描述了将所述第一和第二药物组合物同时、顺序或分开给予有需要的患者。

在一个实施方案中，第一和第二组合物包含在分开的容器中。在另一个实施方案中，第一和第二组合物包含在同一容器中。

使用的容器包括例如瓶、小瓶、注射器、泡罩包装等。容器可以由各种材料例如玻璃或塑料形成。容器包含本发明的化合物例如式(00A)、(0A)、(A)、(Ia)、(Ib)、(II)、(III)、(IV)、(V)、(VI)、(VII)、(VIII)、(IX)或(X)化合物或表1或实施例1-468化合物或其组合物，其对于治疗疾患是有效的，并且可以具有无菌入口(例如，容器可以是静脉内溶液袋或具有可被皮下注射针头刺穿的塞子的小瓶)。标签或包装说明书表明化合物或组合物用于治疗选择的疾患，例如哮喘或癌症。在一个实施方案中，标签或包装说明书指示化合物或组合物可用于治疗病症。此外，标签或包装说明书可以指示待治疗的患者是具有特征在于过度活跃或不规则的Janus激酶活性(例如过度活跃或不规则的JAK1活性)的病症的患者。标签或包装说明书也可指示化合物或组合物可用于治疗其它病症。

替代地或另外地，药盒可以进一步包含包含药学上可接受的缓冲液(例如抑菌注射用水(BWFI)、磷酸盐缓冲盐水、林格氏溶液或葡萄糖溶液)的第二(或第三)容器。其还可包括从商业和用户角度所需的其它材料，包括其它缓冲液、稀释剂、过滤器、针和注射器。

为了说明本发明，包括以下实施例。然而，应当理解，这些实施例不限制本发明，并且仅意在提出实施本发明的方法。本领域技术人员将认识到，所述的化学反应可以容易地适于制备本发明的其它化合物，并且制备所述化合物的替代方法在本发明的范围内。例如，通过对本领域技术人员而言显而易见的修饰，例如通过适当保护干扰基团，通过利用本领域已知的除了所述的那些之外的其它合适的试剂，或通过对反应条件进行常规修改，可以成功地进行本发明的非示例性化合物的合成。或者，本文公开的或本领域已知的其它反应将被认为适用于制备本发明的其它化合物。

实施例

尽管已经以一定的具体程度描述和示出了本发明，但是应当理解，本公开仅仅通过示例的方式进行，并且部分的组合和排布的许多变化可以由本领域技术人员确定，而不偏离由权利要求限定的本发明的精神和范围。

一般实验细节：

除非另有说明，所有溶剂和商业试剂均按原样使用。当产物通过硅胶色谱法纯化时，使用手动填充有硅胶(Kieselgel 60,220-440目,35-75μm)的玻璃柱或SPE SiII柱进行。‘Isolute SPE Si柱’是指预包装的聚丙烯柱，其含有具有平均尺寸为50μm和标称孔隙度的不规则颗粒的未键合的活化二氧化硅。当使用SCX-2柱时，“SCX-2柱”是指含有非封端的丙基磺酸官能化的二氧化硅强阳离子交换吸附剂的预填装的聚丙烯柱。

制备型HPLC条件

HPLC系统1：C18-反相柱(250×21.2mm Gemini柱，5μm粒径)，梯度洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：乙腈+0.1％甲酸，流速典型地为20mL/min，且B梯度增加。在254nm处UV检测。在述及时，得到为甲酸盐的化合物。

HPLC系统2：苯基己基反相柱(250×21.2mm Gemini柱，5μm粒径)，梯度洗脱：A：水+0.1％甲酸；B：乙腈+0.1％甲酸，流速典型地为20mL/min，且B以1％/min梯度增加。在254nm处UV检测。在述及时，得到为甲酸盐的化合物。

HPLC系统3：C18-反相封端的柱(250×21.2mm Gemini柱，5μm粒径)，梯度洗脱：A：水+0.1％氨；B：乙腈+0.1％氨，流速典型地为20mL/min，且B梯度增加。在254nm处UV检测。得到作为游离碱的化合物。

NMR分析方法

在环境温度下使用下列之一记录¹H NMR光谱：

i.具有400 4NUC 5mm探针的Varian Unity Inova(400MHz)波谱仪。

ii.具有PABBO 5mm探针的Bruker Avance DRX400(400MHz)波谱仪。

iii.具有5mm反向检测三重共振探针的Varian Unity Inova(400MHz)波谱仪。

iv.具有5mm反向检测三重共振TXI探针的Bruker Avance DRX(400MHz)波谱仪。

化学位移以相对于四甲基硅烷的ppm表示。

LC-MS分析方法

LC-MS信息提供在表2中。

LC-MS方法1:具有C18-反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna 3μm粒度)的WatersPlatform LC，用A:水+0.1％甲酸；B:乙腈+0.1％甲酸洗脱。梯度:

检测-MS、ELS、UV(100μl分流至MS，具有在线UV检测器)

MS电离方法-电喷雾(正离子和负离子)

LC-MS方法2:具有C18-反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna 3μm粒度)的WatersMicromass ZMD，用A:水+0.1％甲酸；B:乙腈+0.1％甲酸洗脱。梯度:

检测-MS、ELS、UV(100μl分流至MS，具有在线UV检测器)

MS电离方法-电喷雾(正离子和负离子)

LC-MS方法3:具有C18-反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna 3μm粒度)的VGPlatform II四极杆波谱仪，用A:水+0.1％甲酸；B:乙腈+0.1％甲酸洗脱。梯度:

检测-MS、ELS、UV(200μl/min分流至ESI源，具有在线HP1050 DAD检测)

MS电离方法-电喷雾(正离子和负离子)

LC-MS方法4:具有C18-反相柱(30×4.6mm Phenomenex Luna 3μm粒度)的Finnigan AQA，用A:水+0.1％甲酸；B:乙腈+0.1％甲酸洗脱。梯度:

检测-MS、ELS、UV

MS电离方法-电喷雾(正离子)

LC-MS方法5:具有C18-反相柱(100×2.1mm Acquity BEH C18 1.7μ,Acquity BEHShield RP18 1.7μ,或Acquity HSST3 1.8μ)的Waters Micromass ZQ2000四极杆质谱仪，保持在40℃，用A:水+0.1％甲酸；B:乙腈+0.1％甲酸洗脱。梯度:

检测–MS、UV PDA

MS电离方法-电喷雾(正离子)

LC-MS方法6:具有C18-反相柱(100x2.1mm Acquity BEH C18,1.7μm粒度)的Waters Acquity UPLC，用溶剂A:水+0.1％甲酸；溶剂B:乙腈+0.1％甲酸在40℃洗脱。梯度:

检测-UV(220nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法7:具有C18-反相柱(30x2.1mm Xtimate TM-C18,3μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.038％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法8:具有C18-反相柱(30x2.1mm Xtimate TM-C18,3μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.038％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法9:具有C18-反相柱(30x2.1mm Xtimate TM-C18,3μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.038％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法10:具有C18-反相柱(30x2.1mm Xtimate TM-C18,3μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.038％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法11:具有Xtimate C18柱(3um,30×2.1mm)的Agilent 1200 HPLC，用A:水+0.038％三氟乙酸；B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。

检测–MS、UV(PDA检测器)

MS电离方法-电喷雾(正离子)

LC-MS方法12:具有Xtimate C18柱(3um,30×2.1mm)的Agilent 1200 HPLC,用A:水+0.038％三氟乙酸；B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。

检测–MS、UV(PDA检测器)

MS电离方法-电喷雾(正离子)

LC-MS方法13:具有Xtimate C18柱(3um,30×2.1mm)的Agilent 1200 HPLC,用A:水+0.038％三氟乙酸；B:乙腈+0.02％三氟乙酸洗脱。

检测–MS、UV(PDA检测器)

MS电离方法-电喷雾(正离子)

LC-MS方法14:具有C18-反相柱(50x2.0mm Shim-pack XR-ODS,1.6μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(254nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法15:具有C18-反相柱(50x3.0mm Shim-pack XR-ODS,1.6μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(254nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法16:具有C18-反相柱(50x3.0mm Shim-pack XR-ODS,2.2μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(254nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法17:具有C18-反相柱(50x3.0mm Shim-pack XR-ODS,2.2μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(254nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法18:SHIMADZU LCMS-2020HPLC柱(150x4.6mm Venusil XBP Silica,5.0μm粒度)，用溶剂A:己烷；溶剂B:乙醇洗脱。

检测-UV(254nm)

MS电离方法-ESI⁺

LC-MS方法19:具有C18-反相柱(50x3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法20:具有C18-反相柱(50x3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法21:具有C18-反相柱(50x3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法22:具有C18-反相柱(50x3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％甲酸；溶剂B:乙腈+0.05％甲酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法23:具有C18-反相柱(50x3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.1％甲酸；溶剂B:乙腈+0.05％甲酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法24:具有C18-反相柱(50x3mm Xtimate TM-C18,2.2μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.04％氢氧化铵；溶剂B:乙腈洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法25:具有C18-反相柱(30x2.1mm Xtimate TM-C18,3μm粒度)的SHIMADZU20A HPLC，用溶剂A:水+0.05％三氟乙酸；溶剂B:乙腈+0.05％三氟乙酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法26:具有C18-反相柱(50x3.0mm Xtimate TM-C18,2.6μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水/0.1％甲酸；溶剂B:乙腈/0.1％甲酸洗脱。梯度:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法27:具有C18-反相柱(50x2.1mm Xtimate TM-C18,2.7μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水/0.05％甲酸；溶剂B:乙腈/0.1％甲酸洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法28:具有C18-反相柱(50x3.0mm Xtimate TM-C18,2.5μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水/5mM NH₄HCO₃；溶剂B:乙腈洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法29:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x3.0mm,Shim-pack XR-ODS,2.5μm粒度)，用溶剂A:水/0.05％TFA₃；溶剂B:乙腈/0.05％TFA洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法30:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x2.1mm,Shiseido CAPCELLCORE C18,2.7μm粒度)，用溶剂A:水/0.05％TFA₃；溶剂B:乙腈/0.05％TFA洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法31:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x2.1mm,Waters BEH C18,1.7μm粒度)，用溶剂A:水/0.1％TFA₃；溶剂B:乙腈/0.1％TFA洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法32:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x3.0mm,Gemini-NX 3μ C18110A,3.0μm粒度)，用溶剂A:水/6.5mM NH₄HCO₃pH10；溶剂B:乙腈洗脱

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法33:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x2.1mm,Waters BEH C18,1.7μm粒度)，用溶剂A:水/0.05％TFA₃；溶剂B:乙腈/0.05％TFA洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法34:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x2.1mm,Waters BEH C18,1.7μm粒度)，用溶剂A:水/0.05％TFA₃；溶剂B:乙腈/0.05％TFA洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法35:SHIMADZU LCMS-2020 C18反相柱(50x3.0mm,Shim-pack XR-ODS,2.2μm粒度)，用溶剂A:水/0.05％TFA₃；溶剂B:乙腈/0.05％TFA洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC-MS方法36:具有C18-反相柱(50x3.0mm,Gemini-NX 3μC18 110A,3.0μm粒度)的SHIMADZU 20A HPLC，用溶剂A:水/5mM NH₄HCO₃；溶剂B:乙腈洗脱:

检测-UV(220和254nm)

MS电离方法–电喷雾(正离子)

LC/MS方法37：Agilent 10-min LCMS方法：

在与使用ESI作为电离源的Agilent MSD质谱仪耦联的Agilent 1100 HPLC上进行实验。LC分离使用Phenomenex XB-C18,1.7um,50×2.1mm柱，流速为0.4ml/min。溶剂A是具有0.1％FA的水，溶剂B是具有0.1％FA的乙腈。梯度由下述构成：经7分钟2％至98％溶剂B，并在平衡1.5分钟后保持97％B 1.5分钟。LC柱温为40℃。在220nm和254nm采集UV吸光度，并将质谱全扫描应用于所有实验。

LC/MS方法38：Waters 10-min LCMS方法：

在具有使用ESI作为电离源的Waters LCT Premier XE质谱仪的Waters AcquityUPLC上进行实验。LC分离使用Acquity UPLC BEH C18,1.7um,2.1×50mm柱和0.6ml/分钟流速。溶剂A是具有0.05％TFA的水，溶剂B是具有0.05％TFA的乙腈。梯度由以下构成：7分钟内2-98％溶剂B，并在平衡1.5分钟后保持98％B 1.5分钟。LC柱温为40℃。在220nm和254nm采集UV吸光度，并将质谱全扫描应用于所有实验。

LC/MS方法39：Shimadzu 5-min LCMS方法：

在具有LC-30AD溶剂泵、SPD-M30A UV检测器和使用ESI和APCI作为电离源的2020MS的Shimadzu LC上进行实验。LC分离使用Waters UPLC BEH C18,1.7mm,2.1×50mm柱和0.7ml/分钟流速。溶剂A是具有0.1％FA的水，溶剂B是具有0.1％FA的乙腈。梯度由以下构成：在4.5分钟内2-98％溶剂B，并在平衡0.5分钟后保持98％B 0.5分钟。LC柱温为40℃。在254nm采集UV吸光度，并将质谱全扫描应用于所有实验。

制备质量导向的自动纯化条件

MDAP方法1：Agilent 1260无限纯化系统。Agilent 6100系列单四极杆LC/MS。XSEELECT CSH Prep C18 5μm OBD,30X150mm,RT。用溶剂A:0.1％甲酸水溶液；溶剂B:0.1％甲酸的乙腈溶液以60ml/min洗脱，10％-95％，22min，围绕特定的聚焦梯度。进样20-60mg/ml的DMSO溶液(+任选的甲酸和水)

MDAP方法2：Agilent 1260无限纯化系统。Agilent 6100系列单四极杆LC/MS。XBridge Prep C18 5μm OBD,30X150mm,RT。用溶剂A：0.1％氨水；溶剂B：0.1％氨水的乙腈溶液以60ml/min洗脱，10％-95％，22min，围绕特定的聚焦梯度。进样20-60mg/ml的DMSO溶液(+任选的甲酸和水)

缩写

CH₃OD 氘代甲醇

CDCl₃ 氘代氯仿

DCM 二氯甲烷

DIPEA 二异丙基乙胺

DMAP 4-二甲基氨基吡啶

DMF 二甲基甲酰胺

DMSO 二甲基亚砜

DMSO-d6 氘代二甲基亚砜

EtOAc 乙酸乙酯

EtOH 乙醇

HOAc 乙酸

g 克

HATU (O-(7-氮杂苯并三唑-1-基)-N,N,N’,N’-四甲基脲六氟

磷酸盐)

HCl 盐酸

IMS 工业甲基化酒精(Industrial methylated spirits)

L 升

MDAP 质量导向的自动纯化

MeOH 甲醇

mg 毫克

mL 毫升

SCX-2 强阳离子交换

THF 四氢呋喃

TFA 三氟乙酸

实施例A

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基]酰胺向2-溴-4-氯苯酚(4.98g,24.0mmol)的DMF(25mL)溶液中加入氯二氟乙酸钠(8.42g,55.2mmol)、碳酸铯(10.97g,33.67mmol)和水(2.5mL)。将反应在100℃搅拌16小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，将有机部分用盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，并蒸发。将粗产物通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-20％EtOAc的庚烷溶液洗脱，得到2-溴-4-氯-1-(二氟甲氧基)苯，为澄清、无色油状物(2.98g,48％).LCMS(ESI)无m/z信号；¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)7.90(d,1H),7.54(dd,1H),7.38(d,1H),7.28(t,1H).

向4-硝基-1-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑(如WO2011003065所述制备)(46.5g,191mmol)的DMA(350mL)溶液中加入2-溴-4-氯-1-二氟甲氧基苯(64.0g,248mmol)、乙酸钯(II)(2.15g,9.6mmol)、二-(金刚烷基)-正丁基膦(5.0g,13.4mmol)、碳酸钾(79.2g,573mmol)和三甲基乙酸(5.27g,51.6mmol)。将混合物用氮气脱气10分钟，然后在130℃下加热8小时。将反应混合物冷却至室温，用乙酸乙酯稀释并用水和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)，滤过并蒸发。将得到的粗物质通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-10％EtOAc的环己烷溶液洗脱，获得5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-硝基-1-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑(62.4g,78％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)8.24(s,1H),7.52-7.53(m,2H),6.39(t,1H),5.29-5.30(m,2H),3.63-3.64(m,2H),0.90(s,9H).

向5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-硝基-1-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑(62g,148mmol)的乙醇(600mL)溶液中加入水(200mL)、氯化铵(32g,590mmol)和铁粉(41g,740mmol)。将混合物在80℃下加热2小时，然后冷却至室温。将残留的固体通过过滤除去。将滤液在减压下蒸发，用水稀释并用DCM萃取两次。将合并的有机萃取液用水和盐水洗涤，干燥(MgSO₄)并蒸发，获得黑色油状物。将该油状物通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-25％EtOAc的DCM洗脱。收集合适的级分并将溶剂在真空中除去，获得5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基胺，为棕色油状物(30.8g,54％)。¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)7.56(d,1H),7.44(dd,1H),7.34(s,1H),7.30-7.25(m,1H),6.37(t,1H),5.29(s,2H),3.56(t,2H),0.88(dd,2H),0.00(s,9H).

历经30分钟，将5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基胺(60.0g,154mmol)的THF(100mL)溶液滴加到冰/水冷却的吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(27.8g,153mmol)和DIPEA(49.5g,383mmol)的THF(300mL)混合物中。加入完成后，将混合物在室温中搅拌1小时。将溶剂蒸发并将残留物用0.5N HCl水溶液稀释并用乙酸乙酯萃取。将合并的有机萃取物通过除去残留的固体并将滤液用1M K₂CO₃水溶液、水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)并蒸发得到红色固体。将固体用10％乙醚的环己烷溶液研磨。过滤收集固体，并用1:1乙醚的环己烷溶液洗涤，并风干，获得吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]酰胺，为类白色固体(59.2g,73％)。¹H NMR(300MHz,CDCl₃):δ(ppm)9.61(s,1H),8.77-8.78(m,1H),8.51(dd,1H),8.36(s,1H),7.65(d,1H),7.52(dd,1H),7.36(d,1H),7.29(s,1H),7.01(dd,1H),6.42(t,1H),5.39-5.41(m,2H),3.60-3.64(m,2H),0.87-0.89(m,2H),0.09(s,9H).

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-(2-三甲基硅烷基乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]酰胺(59.0g,110mmol)的甲醇(420mL)混悬液用6N HCl(80mL)处理，并将混合物在60℃下加热4小时。将溶剂蒸发并将残留物用水研磨。过滤收集固体，用水洗涤并风干。将固体用最小体积的乙腈研磨，过滤收集，用乙醚洗涤并在高真空、60℃下干燥，获得标题化合物，为黄色固体(42.9g,96％)。¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.71(s,1H),9.34(dd,1H),8.68-8.69(m,1H),8.66(s,1H),8.25(s,1H),7.62(dd,2H),7.43-7.46(m,1H),7.29(dd,1H),7.23(d,1H).

实施例B

(3-((3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯

向化合物2-叔丁氧基羰基氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(2.78g,0.01mol)的DMF(40mL)溶液中加入DIPEA(3.9g,0.03mol)、HATU(3.8g,0.01mol)和5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基胺(2.6g,0.01mmol)，并将反应混合物在室温下搅拌过夜。将反应混合物倾入水中并将沉淀物收集，得到目标化合物，为固体(4g,77％)。LCMS(方法7)[M+Na]⁺＝541.9,R_T＝1.20min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)13.13(s,1H),9.58(s,2H),9.2(dd,1H,J＝7.2,1.6Hz),8.58(d,1H,J＝2),8.27(s,1H),7.60(m,2H),7.23-7.04(m,3H),1.48(s,9H).

实施例C

{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基]酰胺(42.0g,104mmol)的DMF(400mL)溶液用碳酸铯(37.2g,114mmol)和溴乙酸叔丁酯(22.3g,114mmol)处理，并放置在室温下搅拌18小时。将反应混合物用水稀释并用乙酸乙酯萃取两次。将合并的有机萃取物用水和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发，获得橙色固体。将得到的固体用乙醚研磨，然后从丙酮中重结晶，获得白色固体(33.2g,62％)。将母液合并并蒸发，获得橙色油状物。将残留的油状物通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-50％EtOAc的DCM溶液洗脱。合并合适的级分(fractions)并蒸发，获得白色固体(12.3g,23％)。合并得到{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸叔丁酯(45.2g,85％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝519.1,R_T＝3.72min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.86(s,1H),8.75-8.76(m,2H),8.56(dd,1H),8.40(s,1H),7.70(d,1H),7.42(dd,1H),6.99(dd,1H),6.47(t,1H),4.86(s,2H),1.49(s,9H).

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸叔丁酯(45.0g,86.7mmol)的二氯甲烷(350mL)溶液中加入TFA(100mL)，并将混合物放置室温下搅拌18小时。将溶剂蒸发，并将得到的残留物用乙醚研磨。将得到的固体通过过滤收集，用乙醚洗涤并风干，获得标题化合物，为白色固体(40.0g,99％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝463.1,R_T＝2.89min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.86(s,1H),8.78(dd,1H),8.71(s,1H),8.56(dd,1H),8.40(s,1H),7.70(d,1H),7.42(dd,1H),7.30(s,1H),6.99(dd,1H),6.47(t,1H),4.86(s,2H),1.49(s,9H).

实施例D

[4-[(2-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)-氨基]-3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-吡唑-1-基]-乙酸

将(3-((3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯(1.0g,1.92mmol)的DMF(10mL)溶液用碳酸铯(0.69g,2.12mmol)和溴乙酸叔丁酯(0.43g,2.12mmol)处理，并放置室温下搅拌2.5小时。将反应混合物用水稀释，并通过过滤收集得到的沉淀物。将得到的固体通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-70％EtOAc的环己烷溶液洗脱。将合适的级分合并并蒸发，获得[4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)-氨基]-3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-吡唑-1-基]-乙酸叔丁酯，白色固体(0.91g,74％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝633.9,R_T＝4.46min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.78(s,1H),9.70(s,1H),8.76(dd,1H,J＝1.8,6.8Hz),8.47(dd,1H,J＝1.8,4.3Hz),8.34(s,1H),7.69(d,1H,J＝2.5Hz),7.41(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.28(d,1H,J＝8.8Hz),6.92(dd,1H,J＝4.4,6.9Hz),6.47(t,1H,J＝74.0Hz),4.85(s,2H),1.56(s,9H),1.49(s,9H).

向[4-[(2-叔丁氧基羰基氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)-氨基]-3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-吡唑-1-基]-乙酸叔丁酯(0.91g,1.43mmol)的二氯甲烷(7mL)溶液中加入TFA(15mL)，并将混合物放置室温下搅拌6小时。将溶剂蒸发，并使得到的残留物与二氯甲烷/甲醇共沸，获得标题化合物，为淡黄色固体(0.66g,97％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝477.8,R_T＝2.95min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)13.15(br s,1H),9.56(s,1H),8.93(dd,1H,J＝1.5,6.8Hz),8.37-8.34(m,1H),8.35(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.9Hz),7.26(t,1H,J＝73.4Hz),7.00(dd,1H,J＝4.5,6.8Hz),6.58(br s,2H),5.05(s,2H).

实施例E

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺

在0℃，将氢化钠(60％分散在矿物油中,2.17g,54.2mmol)分份加至搅拌的1-(5-氯-2-甲氧基-苯基)-乙酮(10.0g,54.2mmol)的THF(100mL)溶液中。然后将混合物搅拌10分钟，然后加入碳酸二乙酯(7.68g,65.0mmol)，然后再搅拌1小时。将混合物升温至室温反应2小时，然后加热至65℃反应2小时。加入乙醚，将有机物用水和盐水洗涤，然后蒸发至干。将得到的残留物通过硅胶快速色谱法(50至100％二氯甲烷的环己烷溶液)纯化，得到3.41g3-(5-氯-2-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯。LCMS(方法1)[M+H]⁺＝257.2,R_T＝3.55min.¹HNMR(400MHz,CDCl₃):δ(ppm)7.59(d,1H),7.38(dd,1H),6.89(d,1H),4.18(q,2H),3.95(s,2H),3.88(s,3H),1.24(t,3H).

将溴(0.70mL,13.6mmol)加至3-(5-氯-2-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯(3.39g,13.2mmol)的二氧六环(25mL)溶液中，并搅拌1小时。将反应倾入冰水中，用乙酸乙酯萃取，将有机物用水和盐水洗涤，并蒸发至干，得到2-溴-3-(5-氯-2-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯。LCMS(方法1)[M+H]⁺＝337.2,R_T＝3.84min.

将2-溴-3-(5-氯-2-甲氧基苯基)-3-氧代丙酸乙酯(假定为13.2mmol)和硫脲(1.01g,13.3mmol)的乙醇(25mL)混合物加热回流3小时，然后冷却至室温反应18小时。将得到的固体通过过滤除去并将滤液真空下蒸发。将DCM加入到残留物中，将有机物用碳酸氢钠(饱和水溶液)、水和盐水洗涤，并蒸发至干。将残留物研磨(DCM)，得到2-氨基-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-甲酸乙酯(1.30g,31％)，为黄色固体.LCMS(方法1)[M+H]⁺＝313.2,R_T＝3.15min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ(ppm)7.77(s,br,2H),7.39(dd,1H),7.22(d,1H),7.05(d,1H),4.00(q,2H),3.70(s,3H),1.04(t,3H).

将溴化铜(1.07g,4.79mmol)的乙腈(20mL)混合物用氮气脱气并冷却至0℃，然后加入叔丁腈(0.80mL,6.00mmol)，然后加入2-氨基-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-甲酸乙酯(1.25g,3.99mmol)的乙腈(20mL)混悬液，并在室温下搅拌18小时。将反应在真空下浓缩，加入乙酸乙酯，将有机物用碳酸氢钠(饱和水溶液)和盐水洗涤，然后蒸发至干，得到2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-甲酸乙酯(1.40g,93％).LCMS(方法1)[M+H]⁺＝378.1,R_T＝4.26min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ(ppm)7.50(dd,1H),7.42(d,1H),7.14(d,1H),4.16(q,2H),3.73(s,3H),1.12(t,3H).

将2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-甲酸乙酯(1.40g,3.72mmol)、氢氧化钾(278mg)的THF(40mL)和水(10mL)混合物在环境温度搅拌20小时。将混合物用1M HCl aq.(ca.8mL,2eq.)处理，加入DCM，并将有机物分离并蒸发至干，得到2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-甲酸(1.23g,95％)，为黄色固体。LCMS(方法2)[M+H]⁺＝350.1,R_T＝3.28min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ(ppm)7.47(dd,1H),7.39(d,1H),7.13(d,1H),3.73(s,3H).

将2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-甲酸(1.22g,3.50mmol)、叠氮磷酸二苯酯(963mg,3.50mmol)和三乙胺(354mg,3.50mmol)的叔丁醇(30mL)溶液在85℃搅拌4小时。冷却后，将反应在乙酸乙酯和水之间分配，将有机物分离，然后用盐水洗涤，并蒸发至干。将得到的残留物通过硅胶快速色谱法纯化(50至100％二氯甲烷的环己烷溶液)，得到2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-基氨基甲酸叔丁酯(970mg,66％).LCMS(方法1)[M+H-^tBu]⁺＝364.8,R_T＝4.61min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ(ppm)7.43(dd,1H),7.30(d,1H),7.11(d,1H),3.77(s,3H),1.45(s,9H).

将TFA(4.0mL)加至2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-基氨基甲酸叔丁酯(360mg,0.86mmol)的DCM(10mL)和水(3滴)溶液中。将反应混合物在室温下搅拌1.5小时，然后蒸发至干。将残留物溶取在DCM中，并用碳酸氢钠(饱和水溶液)、水和盐水洗涤，并在真空下浓缩，得到2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-胺，为橙色残留物。LCMS(方法1)[M+H]⁺＝321.3,R_T＝3.63min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ(ppm)7.36(d,1H),7.34-7.32(m,1H),7.10(d,1H),3.83(s,3H).

采用2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-胺和吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯，按照对吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基]酰胺描述的合成方法制备标题化合物，通过硅胶快速色谱法进一步纯化(0至40％乙酸乙酯的DCM溶液)，得到N-(2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基苯基)噻唑-5-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。LCMS(方法1)[M+H]⁺＝465.8,R_T＝4.01min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆):δ10.68(s,br,1H),9.41(dd,1H),8.78(s,1H),8.76(dd,1H),7.57(dd,1H),7.50(d,1H),7.37-7.34(m,2H),3.81(s,3H).

在-78℃、在N₂气氛下，向吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(4.3g,9.3mmol)的DCM(90mL)溶液中滴加三溴化硼(1M的DCM溶液,45mL,45mmol)。将混合物在-78℃搅拌1小时，然后缓慢升至室温并再搅拌16小时。将混合物小心地倒在碳酸氢钠水溶液中，搅拌15mins,过滤并将固体收集并干燥，获得吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-羟基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺，为浅褐色固体(6g,>100％)。LCMS(方法3)[M+H]⁺＝450.1,R_T＝3.71min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:15.96(s,1H),9.18(dd,1H,J＝1.6,6.9Hz),8.70(dd,1H,J＝1.8,4.0Hz),8.59(s,1H),7.80(d,1H,J＝2.8Hz),7.15(dd,1H,J＝4.0,7.1Hz),7.05(dd,1H,J＝2.8,8.6Hz),6.77(d,1H,J＝8.6Hz).

向吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-羟基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(1.1g,2.4mmol)的DMF(20mL)和水(2mL)溶液中加入碳酸铯(1.1g,3.4mmol)，然后加入氯二氟乙酸钠(839mg,5.5mmol)。将混合物在100℃搅拌16小时，然后再加入碳酸铯(2.2g,6.8mmol)和氯二氟乙酸钠(1.7g,11mmol)，并在100℃继续搅拌6小时。将混合物冷却至室温，并在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将有机层用盐水洗涤。一旦将合并的水层用乙酸乙酯萃取，将合并的有机层干燥(Na₂SO₄)，过滤和蒸发。将得到的残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用50％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色固体(710mg,59％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝500.1,R_T＝3.97min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:10.84(s,1H),9.42(dd,1H,J＝1.6,6.9Hz),8.79(s,1H),8.66(dd,1H,J＝1.6,4.3Hz),7.76(d,1H,J＝2.8Hz),7.51(d,1H,J＝8.8Hz),7.36(dd,1H,J＝4.2,7.0Hz),7.22(t,1H,J＝73.1Hz).

实施例1

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]酰胺盐酸盐

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基]酰胺(200mg,0.49mmol)溶解在DMF(5mL)中，加入4-(甲苯基-4-磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(263mg,0.74mmol)和碳酸铯(240mg,0.74mmol)，并将混合物在90℃加热2小时。将混合物冷却至室温，用水稀释并用DCM(x3)萃取。将合并的有机萃取物用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并蒸发。将得到的黄色油状物通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-2％MeOH的DCM溶液洗脱。收集适当的级分并蒸发，得到4-{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。没有进一步纯化便使粗产物进入下一步骤。LCMS(方法4)[M+Na]⁺＝610.0；R_T＝4.30min.

将4-{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}哌啶-1-甲酸叔丁酯(600mg,0.97mmol)溶解在DCM(3mL)并加入TFA(3mL)。将混合物在室温搅拌30分钟。蒸发溶剂，并将残留物溶解在MeOH并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发得到玻璃状物，将其通过HPLC(方法3)纯化。合并适当的级分并蒸发，得到类白色固体。将固体溶解在MeOH中，加入1.25M HCl甲醇溶液(1mL)。蒸发溶剂，与甲醇共沸三次，并用乙酸乙酯研磨，得到标题化合物，为类白色固体(144mg,28％)。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝488.0,R_T＝2.93min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.98(d,1H,J＝9.9Hz),8.69(dd,1H,J＝1.7,4.3Hz),8.67(s,1H),8.38(s,1H),7.65-7.62(m,2H),7.30(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.26(t,1H,J＝73.6Hz),4.66-4.57(m,1H),3.47-3.42(m,2H),3.17-3.03(m,2H),2.32-2.18(m,4H).

实施例2

2-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]-酰胺

按照实施例1中所述的方法由(3-((3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯制备标题化合物，得到琥珀色固体。LCMS(方法3)[M+H]⁺＝503.3,R_T＝2.32min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.55(s,1H),8.93(dd,1H,J＝1.5,6.8Hz),8.37(dd,1H,J＝1.5,4.5Hz),8.29(s,1H),7.64-7.58(m,2H),7.44(d,1H,J＝8.7Hz),7.25(t,1H,J＝73.5Hz),7.00(dd,1H,J＝4.5,6.7Hz),6.57(s,2H),4.33-4.22(m,1H),3.07(d,2H,J＝12.6Hz),2.66-2.57(m,2H),2.06-1.96(m,2H),1.89-1.75(m,2H).

实施例3

顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)1-[2-(5-甲基六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺

将{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(20.0g,43.2mmol)的DMF(150mL)溶液用DIPEA(6.7g,5.2mmol)、顺式-2-甲基八氢吡咯并[3,4-c]吡咯(6.27g,49.7mmol)和HATU(18.9g,49.7mmol)处理，并将混合物在室温搅拌1小时。将反应混合物用0.5M K₂CO₃水溶液稀释，并用乙酸乙酯(x2)萃取。将合并的有机萃取物用水(x2)和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和蒸发，得到固体。将得到的固体通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-10％2M NH₃/MeOH的DCM溶液洗脱。收集适当的级分，随后蒸发得到标题化合物，为乳膏状固体(17.1g,69％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝570.9,R_T＝2.82.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.70(s,1H),9.30(dd,1H,J＝7.0,1.6Hz),8.62-8.63(m,2H),8.27(s,1H),7.59(dd,1H,J＝8.8,2.7Hz),7.52(d,1H,J＝2.7Hz),7.42(d,1H,J＝8.8Hz),7.25(dd,1H,J＝7.0,4.2Hz),7.11(t,1H,J＝73.3Hz),5.07(d,2H,J＝5.9Hz),3.69(dd,1H,J＝10.8,8.6Hz),3.56(dd,1H,J＝12.2,8.8Hz),3.36(dd,1H,J＝10.8,4.4Hz),3.22(dd,1H,J＝12.3,4.5Hz),2.45-2.46(m,3H),2.37-2.39(m,3H),2.17(s,3H).

实施例4

顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺

将{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(3.35g,7.25mmol)溶解在DMF(30mL)中，加入HATU(2.85g,9.42mmol)。加入顺式-六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-甲酸叔丁酯(2.0g,9.42mmol)和DIPEA(1.63mL,9.42mmol)，并将混合物在室温搅拌17小时。蒸发挥发物，并将得到的残留物与甲苯共沸。将固体在水和DCM之间分配。并分离有机层，干燥(Na₂SO₄)和蒸发。将残留物溶解在DCM(10mL)中并加入TFA(10mL)。将溶液在室温搅拌4小时，然后蒸发。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发溶剂，并将产物从MeOH/Et₂O中结晶。获得所需要的产物，为类白色固体(3.7g,90％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝556.9,R_T＝2.83min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),9.38-9.22(m,2H),8.69(dd,2H,J＝1.7,4.2Hz),8.67(s,1H),8.31(s,1H),7.64(dd,1H,J＝2.7,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.6Hz),7.47(d,1H,J＝8.8Hz),7.30(dd,2H,J＝4.3,7.0Hz),7.27(t,1H,J＝73.4Hz),5.15(s,2H),3.80-3.67(m,2H),3.65-3.53(m,2H),3.49-3.32(m,3H),3.16-2.94(m,4H).

实施例5

顺式吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(5乙基-六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺盐酸盐

向顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺(100mg,0.18mmol)的乙腈(4mL)溶液中加入碳酸钾(37mg,0.27mmol)和溴乙烷(20μL,0.27mmol)。将反应在50℃加热2小时，然后冷却至室温。将混合物直接施用至SCX-2柱。用2M氨的MeOH溶液洗脱，得到需要的产物。将产物通过HPLC(方法1)纯化，并将纯的级分合并通过SCX-2柱。用2M氨的MeOH溶液洗脱，蒸发溶剂后得到游离碱。将固体溶解在1.25M HCl甲醇溶液中，然后蒸发挥发物。将HCl盐从MeOH/Et₂O中结晶，获得白色固体(32mg,40％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝585.0,R_T＝2.88min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.44(d,1H,J＝35.0Hz),9.79-9.74(m,1H),9.35(dd,1H,J＝1.3,7.0Hz),8.69(dd,1H,J＝1.5,4.2Hz),8.67(s,1H),8.31(d,1H,J＝3.8Hz),7.64(dd,1H,J＝2.5,8.8Hz),7.57(d,1H,J＝2.6Hz),7.47(d,1H,J＝8.9Hz),7.30(dd,1H,J＝4.3,7.0Hz),7.27(t,1H,J＝73.6Hz),5.22-5.10(m,2H),3.43(s,12H),3.84-2.77(m,12H),1.29-1.19(m,3H).

实施例6

顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(5-环丙基甲基六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺

向顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺(100mg,0.18mmol)的2,2,2-三氟乙醇(3mL)溶液中加入环丙烷甲醛(67μL,0.90mmol)。在室温搅拌15分钟，加入硼氢化钠(21mg,0.54mmol)，并将反应在90℃加热2小时。加入MeOH猝灭反应，并将混合物上载到SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发得到粗产物，其通过HPLC(方法1)纯化。将纯的级分上载到SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将纯品蒸发得到为游离碱的标题化合物，从MeOH/Et₂O中结晶并获得它，为黄色固体(55mg,50％)。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝611.1,R_T＝3.02min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.94-10.88(m,1H),9.57-9.55(m,1H),8.95-8.92(m,1H),8.38-8.35(m,1H),8.29-8.28(m,1H),7.65-7.61(m,1H),7.56-7.54(m,1H),7.47(d,1H,J＝8.9Hz),7.45-7.07(m,1H),7.08(d,1H,J＝1.9Hz),7.02-6.99(m,1H),5.24-5.07(m,2H),3.86-3.52(m,5H),3.52-3.22(m,2H),3.17-3.11(m,1H),3.07-3.00(m,2H),3.00-2.79(m,1H),1.27-1.01(m,1H),0.63-0.56(m,2H),0.42-0.34(m,2H).(存在阻转异构体)

实施例7

5-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-((3aR,6aS)-5-甲基-六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺盐酸盐

将5-氯-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基氯(500mg,2.3mmol)(根据Journal ofMedicinal Chemistry,55(22),10090-10107；2012中的方法制备的)和5-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基胺(868mg,2.3mmol)的混合物混悬在三乙胺(0.35mL,2.5mmol)和DCM(10mL)中，并将混合物在室温搅拌2小时。将反应混合物用二氯甲烷稀释，并将得到的有机层用饱和碳酸氢钠水溶液和盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和蒸发，得到油状物。将得到的油状物通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-2％MeOH的DCM溶液洗脱。收集适当的级分，然后蒸发得到5-氯-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[5-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺，为棕色油状物(1.19g,91％).¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.07(s,1H),8.72(s,1H),8.67(d,1H,J＝7.3Hz),8.38(s,1H),7.60(d,1H,J＝2.3Hz),7.51(dd,1H,J＝2.6,8.8Hz),7.38(d,1H,J＝8.9Hz),6.95(d,1H,J＝7.2Hz),6.43(t,1H,J＝72.8Hz),5.41(d,1H,J＝10.9Hz),5.31(d,1H,J＝11.0Hz),3.76-3.49(m,2H),1.27(s,1H),0.94-0.84(m,2H),0.00(s,9H).

将5-氯-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[5-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺(756mg,1.32mmol)溶解在THF(10mL)中并加入浓氨水溶液(10mL)。将混合物在50℃加热3小时，然后冷却至环境温度。蒸发溶剂，并使残留物与甲醇(x2)共沸，得到5-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[5-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺，为白色固体(724mg,99％).LCMS(方法4)[M+H]⁺＝549.9,R_T＝4.11min.

将5-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[5-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-(2-三甲基硅烷基-乙氧基甲基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺(720mg,1.31mmol)的甲醇(20mL)混悬液用浓HCl水溶液(3mL)处理，并将混合物在80℃加热1小时。蒸发溶剂，并使残留物与甲醇(x3)共沸，将得到的固体用乙酸乙酯研磨，通过过滤收集，并用乙酸乙酯和乙醚洗涤，并风干。将残留固体通过硅胶快速色谱法纯化，采用0-12％2M NH₃/MeOH的DCM溶液洗脱。收集适当的级分，随后蒸发得到5-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺，为棕色固体(378mg,69％).LCMS(方法4)[M+H]⁺＝419.9,R_T＝2.93

按照实施例C和实施例1中所述的方法，将5-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺转化为标题化合物，得到白色固体。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝586.0,R_T＝2.58min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.6,7.1Hz),9.38-9.21(m,2H),8.69(dd,1H,J＝1.7,4.3Hz),8.67(s,1H),8.31(s,1H),7.64(dd,1H,J＝2.7,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.6Hz),7.48(d,1H,J＝8.6Hz),7.30(dd,1H,J＝4.3,6.9Hz),7.27(t,1H,J＝73.3Hz),5.15(s,2H),3.93-3.67(m,3H),3.65-3.32(m,6H),3.19-2.94(m,4H).

实施例8

6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-((3aR,6aS)-5-甲基-六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺盐酸盐

按照对实施例B和实施例1所述的方法由可商购的6-甲基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸制备标题化合物，得到白色固体。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝585.0,R_T＝3.03min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.74-10.49(m,1H),9.70(s,1H),9.21(dd,1H,J＝1.1,2.0Hz),8.60(d,1H,J＝2.0Hz),8.58(s,1H),8.31(s,1H),7.65(dd,1H,J＝2.7,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.49(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(t,1H,J＝73.3Hz),5.19(d,1H,J＝16.8Hz),5.13(d,1H,J＝16.8Hz),3.94-2.88(m,10H),2.82(s,3H),2.39(s,3H).

实施例63

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-(2-{4-[(2-氰基-乙基)-甲基-氨基]-哌啶-1-基}-2-氧代-乙基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺(32.0g,79.1mmol)的DMF(400mL)溶液用2-氯-1-(1,4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-乙酮(20.8g,94.9mmol)和Cs₂CO₃(51.5g,158.1mmol)处理并将混合物在室温搅拌19小时。将反应用水(～1.6L)稀释并将得到的沉淀通过过滤收集。将固体用水洗涤，在减压下干燥，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-(1,4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-2-氧代-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺，为浅褐色固体(33.3g,72％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝588.2,R_T＝3.02min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.85(s,1H),8.78(dd,1H,J＝1.6,6.9Hz),8.71(s,1H),8.56(dd,1H,J＝1.8,4.0Hz),8.42(s,1H),7.69(d,1H,J＝2.5Hz),7.41(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.30-7.26(m,1H),7.00(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),6.48(t,1H,J＝74.0Hz),5.06(s,2H),4.00-3.95(m,4H),3.74(dd,2H,J＝5.8,5.8Hz),3.61(dd,2H,J＝5.8,5.8Hz),1.74-1.64(m,4H).

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-(1,4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-2-氧代-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺(46.7g,79.5mmol)的二氧六环(280mL)混悬液在冰浴中冷却，然后以保持内温低于22℃的速率用浓盐酸(210mL)处理。一旦加入完成后，使反应升温至室温并搅拌4小时。使反应在冰浴中冷却，用乙酸乙酯和水稀释，并通过分份加入固体Na₂CO₃将水相的pH调节至～8。将混合物用乙酸乙酯(x4)萃取并将合并的有机萃取物干燥(Na₂CO₃)和蒸发，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-氧代-2-(4-氧代-哌啶-1-基)-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺.二氧六环，为浅褐色固体(48.8g,97％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝544.2,R_T＝2.85min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.87(s,1H),8.79(dd,1H,J＝1.8,7.0Hz),8.70(s,1H),8.57(dd,1H,J＝1.8,4.0Hz),8.47(s,1H),7.67(d,1H,J＝2.8Hz),7.43(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.29(d,1H,J＝8.8Hz),7.01(dd,1H,J＝4.3,7.0Hz),6.48(t,1H,J＝74.0Hz),5.14(s,2H),3.93(t,2H,J＝6.2Hz),3.85(t,2H,J＝6.2Hz),3.70(s,8H),2.50(t,2H,J＝6.2Hz),2.42(t,2H,J＝6.1Hz).

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-氧代-2-(4-氧代-哌啶-1-基)-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺.二氧六环(36g,57.0mmol)的DCM(500mL)溶液用3-氨基-丙腈(5.0mL,68.4mmol)和乙酸(50mL)处理。将混合物在冰浴中冷却，然后分份加入三乙酰氧基硼氢化钠(18.1g,85.4mmol)。将反应升温至室温并搅拌1.5小时。将混合物甲醇用稀释并上载至SCX-2垫层上，其已被MeOH处理。在用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将碱性级分合并并蒸发，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-{2-[4-(2-氰基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-2-氧代-乙基}-1H-吡唑-4-基)-酰胺，为淡棕色固体(31.1g,91％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝598.2,R_T＝2.25min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.84(s,1H),8.78(dd,1H,J＝1.6,6.9Hz),8.69(s,1H),8.58-8.55(m,1H),8.40(s,1H),7.68(d,1H,J＝2.5Hz),7.41(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.28(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(s,1H),7.00(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),6.50(t,1H,J＝74.1Hz),5.08(d,1H,J＝15.4Hz),5.02(d,1H,J＝15.5Hz),4.37(d,1H,J＝13.4Hz),3.88(d,1H,J＝13.4Hz),3.22-3.12(m,1H),3.02(t,1H,J＝6.4Hz),2.98-2.86(m,2H),2.82-2.72(m,1H),2.52-2.46(m,2H),1.96-1.83(m,2H),1.36-1.20(m,2H).

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-{2-[4-(2-氰基-乙基氨基)-哌啶-1-基]-2-氧代-乙基}-1H-吡唑-4-基)-酰胺(31.1g,52.0mmol)的DCM(500mL)溶液用37％甲醛水溶液(21.3mL,286.2mmol)处理。一旦加入完成，使反应在冰浴中冷却，然后分份加入三乙酰氧基硼氢化钠(44.1g,208.2mmol)。将反应混合物升温至室温并搅拌1.5小时，然后，将反应过滤并将滤液用甲醇稀释。将混合物用甲醇稀释并上载至SCX-2垫层，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将碱性级分合并并蒸发。将得到的残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用0-10％2M NH₃/MeOH的DCM溶液洗脱。合并适当的级分并蒸发。将得到的残留物从乙酸乙酯中重结晶，得到标题化合物，为淡棕色固体(30.7g,96％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝612.2,R_T＝2.84min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝7.0,1.6Hz),8.70-8.67(m,1H),8.68(s,1H),8.32(s,1H),7.63(dd,1H,J＝8.8,2.7Hz),7.56(d,1H,J＝2.7Hz),7.47(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝7.0,4.2Hz),7.26(t,1H,J＝73.4Hz),5.22-5.24(m,2H),4.38(d,1H,J＝12.9Hz),3.96(d,1H,J＝13.5Hz),3.06(t,1H,J＝12.7Hz),2.62-2.65(m,6H),2.22(s,3H),1.72(d,2H,J＝11.9Hz),1.34-1.40(m,2H).

实施例142

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[1-[1-(3-乙酰基氨基丙基)哌啶-4-基]-3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1H-吡唑-4-基]酰胺盐酸盐

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]酰胺(100mg,0.20mmol)、(3-溴-丙基)-氨基甲酸叔丁酯(71mg,0.3mmol)和碳酸钾(45mg,0.32mmol)的DMF(2mL)混合物在60℃加热1.5小时。将反应混合物冷却至环境温度，用水稀释并用二氯甲烷萃取。分离有机层，用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和蒸发。将得到的残留物在硅胶上色谱分离，用2M氨的甲醇梯度的二氯甲烷(0-6％)洗脱，得到[3-(4-{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}哌啶-1-基)丙基]氨基甲酸叔丁酯，为黄色油状物(131mg,100％).LCMS(方法4)[M+H]⁺＝675.0,R_T＝2.86min.

将[3-(4-{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}哌啶-1-基)丙基]氨基甲酸叔丁酯(129mg,0.20mmol)溶解在DCM(2mL)中并加入TFA(2mL)。将反应在室温搅拌1小时，然后蒸发至干。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发碱性级分，得到残留物，其被溶解在吡啶(2mL)中。加入乙酰氯(21μL,0.30mmol)并将溶液在室温静置5天。蒸发挥发物，与甲苯共沸。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发得到玻璃状固体，将其通过HPLC(方法3)纯化。将所述纯胺溶解在MeOH中，加入1.25M HCl甲醇溶液。蒸发挥发物，并将固体产物用EtOAc/Et₂O研磨，得到标题化合物，为白色固体(40mg,32％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝587.0,R_T＝2.91min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.89(s,1H),9.76(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.5,7.0Hz),8.69(dd,1H,J＝1.6,4.2Hz),8.67(s,1H),8.39(s,1H),8.04(t,1H,J＝5.8Hz),7.67-7.61(m,2H),7.46(d,2H,J＝8.4Hz),7.31(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.26(t,1H,J＝73.4Hz),4.64-4.54(m,1H),3.64(d,2H,J＝12.2Hz),3.21-3.01(m,6H),2.40-2.29(m,4H),1.84(m,5H).

实施例302

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[4-(4-二甲基氨基-哌啶-1-羰基)-苯基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺盐酸盐

在0℃将4-碘-苯甲酰氯(4.72g,17.71mmol)的DCM(70mL)溶液用二甲基-哌啶-4-基-胺(2.27g,17.71mmol)处理。将得到的混悬液升温至室温并搅拌2.5小时。将反应混合物用1M Na₂CO₃水溶液稀释分离各相。将水相用DCM萃取两次并将合并的有机相干燥(Na₂SO₄)并蒸发，得到(4-二甲基氨基-哌啶-1-基)-(4-碘-苯基)-甲酮，为白色固体(6.2g,98％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝359.2,R_T＝1.82min.

将微波管填装吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺(100mg,0.25mmol)、(4-二甲基氨基-哌啶-1-基)-(4-碘-苯基)-甲酮(107mg,0.30mmol)、碘化铜(I)(15mg,0.08mmol)、碳酸钾(73mg,0.53mmol)、反式-N,N’-二甲基-1,2-环己烷二胺(24μL,0.15mmol)。将管密封并用氩气冲洗，然后加入甲苯(1.0mL)。将反应混合物在110℃搅拌18小时。将反应冷却至室温，用水稀释，并将得到的沉淀通过过滤收集，用乙酸乙酯洗涤并在减压下干燥。将得到的固体通过MDAP(方法1)纯化，将固体溶取到MeOH/DCM混合物中，并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。将柱用MeOH洗涤，然后用2M NH₃/MeOH洗脱。合并碱性级分，蒸发，并将得到的固体混悬在MeOH中，然后用1.25MHCl的MeOH溶液处理。使混悬液蒸发，并将固体用乙酸乙酯研磨，在减压下干燥，得到标题化合物，为黄色固体(67mg,40％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝635.2,R_T＝3.27min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.88(s,1H),9.38(dd,1H,J＝7.1,1.8Hz),9.04(s,1H),8.71(s,1H),8.70(dd,1H,J＝4.3,1.7Hz),8.04-7.99(m,2H),7.79(d,1H,J＝2.7Hz),7.72(dd,1H,J＝8.8,2.6Hz),7.63-7.57(m,2H),7.53(d,1H,J＝8.8Hz),7.33(dd,1H,J＝7.0,4.3Hz),7.31(t,1H,J＝73.1Hz),4.65(brs,1H),2.98(s,2H),2.67(s,6H),2.14-1.82(m,2H),1.69-1.54(m,2H).

实施例188

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(4-二甲基氨基-哌啶-1-基)-噻唑-5-基]-酰胺

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(100mg,0.2mmol)和4-二甲基氨基哌啶(128mg,1mmol)溶解在DMA(1ml)中，并在160℃在微波中加热1小时。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将得到的黄色玻璃状物通过MDAP(方法1)纯化。合并适当的级分并蒸发，得到黄色固体。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱，得到标题化合物，为橙黄色固体(43mg,39％)。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝548.1,R_T＝3.20min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.23(s,1H),9.36(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.68(s,1H),8.63(dd,1H,J＝1.6,4.2Hz),7.66(d,1H,J＝2.7Hz),7.59(dd,1H,J＝2.6,8.8Hz),7.41(d,1H,J＝9.0Hz),7.31(dd,1H,J＝4.2,6.7Hz),7.18(t,1H,J＝73.5Hz),3.93(d,2H,J＝12.7Hz),3.02(dd,2H,J＝10.3,12.3Hz),3.05-2.95(m,1H),2.40-2.26(m,6H),1.92-1.89(m,2H),1.58-1.47(m,2H).

实施例189

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸(4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-{4-[(2-氰基-乙基)-甲基-氨基]-哌啶-1-基}-噻唑-5-基)-酰胺

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(820mg,1.64mmol)和1,4二氧杂-8-氮杂螺[4.5]癸烷(1.05ml,8.2mmol)溶解在DMA(10ml)中，并在165℃在微波中加热1小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将有机层用盐水洗涤。一旦将合并的水层用乙酸乙酯萃取，并合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并除去溶剂。将粗产物在硅胶上色谱分离，用50-60％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱。合并适当的级分并蒸发，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(1,4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-噻唑-5-基]-酰胺，为黄色固体(541mg,59％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝563.3,R_T＝3.68min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.26(s,1H),9.37(dd,1H,J＝1.6,6.9Hz),8.69(s,1H),8.64(dd,1H,J＝1.5,4.4Hz),7.68(d,1H,J＝2.5Hz),7.59(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.42(d,1H,J＝8.5Hz),7.31(dd,1H,J＝4.3,7.0Hz),7.18(t,1H,J＝73.8Hz),3.94(s,4H),3.52(dd,4H,J＝5.7,5.7Hz),1.75(dd,4H,J＝5.7,5.7Hz).

将[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(1,4-二氧杂-8-氮杂-螺[4.5]癸-8-基)-噻唑-5-基]-酰胺(536mg,0.95mmol)溶解在二氧六环(10ml)和浓盐酸(10ml)中并在室温搅拌3小时。将混合物冷却至0℃并用50％氢氧化钠水溶液碱化至约pH 13，然后在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将有机层用盐水洗涤。一旦将合并的水层用乙酸乙酯萃取，并合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并除去溶剂，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(4-氧代-哌啶-1-基)-噻唑-5-基]-酰胺，为橙黄色固体(465mg,94％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝519.3,R_T＝3.39min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.30(s,1H),9.38(dd,1H,J＝1.5,7.1Hz),8.70(s,1H),8.65(dd,1H,J＝1.4,4.3Hz),7.70(d,1H,J＝2.5Hz),7.61(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.43(d,1H,J＝9.2Hz),7.32(dd,1H,J＝4.2,7.1Hz),7.20(t,1H,J＝74.0Hz),3.81(dd,4H,J＝6.2,6.2Hz),2.54(d,4H,J＝6.1Hz).

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(4-氧代-哌啶-1-基)-噻唑-5-基]-酰胺(90mg,0.17mmol)溶解在DCM(2ml)中，并连续加入N-甲基-β-丙氨酸腈(20μl,0.21mmol)、乙酸(200μl)和大孔聚合物支持的氰基硼氢化物(166mg,0.36mmol)，并在室温搅拌16小时。将混合物用MeOH稀释，并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将得到的黄色玻璃状物通过MDAP(方法1)纯化。合并适当的级分并蒸发，得到黄色玻璃状物。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱，得到标题化合物，为黄色固体(46mg,46％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝587.2,R_T＝3.19min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.23(s,1H),9.36(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.68(s,1H),8.64(dd,1H,J＝1.6,4.3Hz),7.67(d,1H,J＝2.6Hz),7.59(dd,1H,J＝2.7,8.9Hz),7.41(d,1H,J＝8.6Hz),7.31(dd,1H,J＝4.3,7.1Hz),7.18(t,1H,J＝73.9Hz),3.94(d,2H,J＝12.8Hz),3.04-2.96(m,2H),2.72-2.60(m,5H),2.24(s,3H),1.79(d,2H,J＝10.9Hz),1.59-1.47(m,2H).

实施例205

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(4-甲基-哌嗪-1-基)-噻唑-5-基]-酰胺

标题化合物以类似于吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(4-二甲基氨基-哌啶-1-基)-噻唑-5-基]-酰胺的方法制备，得到为橙黄色固体的标题化合物。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝520.2,R_T＝3.02min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.25(s,1H),9.37(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.69(s,1H),8.64(dd,1H,J＝1.6,4.3Hz),7.67(d,1H,J＝2.6Hz),7.59(dd,1H,J＝2.7,8.8Hz),7.42(d,1H,J＝9.2Hz),7.31(dd,1H,J＝4.2,7.3Hz),7.18(t,1H,J＝73.7Hz),3.41(dd,4H,J＝4.9,4.9Hz),2.48-2.42(m,4H),2.24(s,3H).

实施例209

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(3-二甲基氨基-丙-1-炔基)-噻唑-5-基]-酰胺

在氮气气氛下，向吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(150mg,0.3mmol)、双(三苯基膦)二氯化钯(II)(11mg,0.015mmol)、碘化铜(I)(5mg,0.024mmol)的THF(1mL)溶液中加入炔丙醇(35μL,0.6mmol)，然后加入三乙胺(1mL)。将得到的混合物在50℃搅拌3小时，然后冷却至室温。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相，并将有机相用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)和蒸发。将得到的残留物通过快速硅胶柱色谱法纯化，用80％乙酸乙酯的环己烷溶液洗脱，得到吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(3-羟基-丙-1-炔基)-噻唑-5-基]-酰胺，为黄色固体(112mg,78％).LCMS(方法3)[M+H]⁺＝476.2,R_T＝3.19min.

向吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(3-羟基-丙-1-炔基)-噻唑-5-基]-酰胺(110mg,0.23mmol)和三苯基膦(105mg,0.4mmol)的DCM(3mL)混悬液中分份加入四溴化碳(132mg,0.4mmol)。将反应在室温搅拌，然后加入2M甲胺的THF(1mL)溶液。将得到的混合物在室温搅拌3小时。将混合物蒸发，并将残留物溶取在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。将柱用MeOH洗涤，然后用2M NH₃的MeOH溶液洗脱。将碱性级分合并并蒸发。使残留物通过MDAP(方法1)纯化，蒸发后将物质溶取在MeCN中并上载至SCX-2柱，其已经用MeCN处理。将柱用MeCN洗涤，然后用2M NH₃的MeOH溶液洗脱。将碱性级分合并并蒸发，得到标题化合物，为橙色固体(18mg,15％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝503.0,R_T＝3.16min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.85(s,1H),9.41(dd,1H,J＝7.1,1.3Hz),8.79(s,1H),8.63(dd,1H,J＝4.4,1.5Hz),7.76(d,1H,J＝2.6Hz),7.72(dd,1H,J＝8.8,2.6Hz),7.52(d,1H,J＝8.8Hz),7.36(dd,1H,J＝7.0,4.3Hz),7.19(t,1H,J＝73.2Hz),3.61(s,2H),2.29(s,6H).

实施例211

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(6-甲基-2,6-二氮杂螺[3.4]辛-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺

采用与合成吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-(六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺所用的相似的方法制备吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-(2,6-二氮杂螺[3.4]辛-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝556.9,R_T＝2.84min.

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-(2,6-二氮杂-螺[3.4]辛-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺(70mg,0.13mmol)和多聚甲醛(19mg,0.63mmol)在2,2,2-三氟乙醇中搅拌15分钟。加入硼氢化钠(14mg,0.38mmol)，并将反应混合物在90℃加热2小时。将反应混合物冷却至室温并用MeOH猝灭。将混合物上载到SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发得到粗产物，将其通过HPLC(方法1)纯化。将纯级分上载到SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。蒸发得到游离碱，将其从MeOH/Et₂O中结晶。获得标题化合物，为白色固体(28mg,39％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝570.9,R_T＝2.86min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,7.0Hz),8.69-8.66(m,2H),8.34(s,1H),8.15(s,1H),7.64(dd,1H,J＝2.7,8.9Hz),7.57(d,1H,J＝2.7Hz),7.47(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,2H,J＝4.3,7.1Hz),7.25(t,1H,J＝73.5Hz),4.94(s,2H),4.04(q,2H,J＝8.8Hz),3.90-3.81(m,2H),2.69(s,2H),2.27(s,3H),2.03(dd,2H,J＝6.8,6.8Hz).

实施例227

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-1-[2-(4-甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺

标题化合物以类似于顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)1-[2-(5-甲基六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺的方法采用{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸和甲基哌嗪制备，得到标题化合物，为淡黄色固体。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝545.1,R_T＝2.89min.¹H NMR(400MHz,CDCl₃)δ:(ppm)9.85(s,1H),8.78(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.71(s,1H),8.56(dd,1H,J＝1.7,4.1Hz),8.41(s,1H),7.69(d,1H,J＝2.6Hz),7.41(dd,1H,J＝2.6,8.7Hz),7.28(d,1H,J＝9.1Hz),7.00(dd,1H,J＝4.2,7.0Hz),6.47(t,1H,J＝74.1Hz),5.04(s,2H),3.72-3.65(m,2H),3.57(dd,2H,J＝4.8,4.8Hz),2.47-2.39(m,4H),2.31(s,3H).

实施例233

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-[2-(4-乙基-哌嗪-1-基)-2-氧代-乙基]-1H-吡唑-4-基}-酰胺

标题化合物以类似于顺式-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)1-[2-(5-甲基六氢吡咯并[3,4-c]吡咯-2-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基}酰胺的方法采用{3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸和乙基哌嗪制备，得到标题化合物，为白色固体。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝559.1,R_T＝2.89min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.7,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.6Hz),7.46(d,1H,J＝9.0Hz),7.29(dd,1H,J＝4.2,7.1Hz),7.25(t,1H,J＝73.5Hz),5.23(s,2H),3.50-3.49(m,4H),2.41-2.32(m,6H),1.02(t,3H,J＝7.1Hz).

实施例253

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸{4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-[4-(4-二甲基氨基-哌啶-1-羰基)-苯基]-噻唑-5-基}-酰胺盐酸盐

在N₂气氛下，将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(100mg,0.2mmol)、4-羧基苯硼酸(40mg,0.24mmol)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(16mg,0.02mmol)和碳酸钾(110mg,0.8mmol)溶解在二氧六环(3.2ml)和水(0.8ml)中，并在120℃在微波中加热30mins。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将水层用1M HCl酸化，并将得到的沉淀过滤，收集固体并干燥。

将得到的残留物溶解在DMF(2ml)和DIPEA(52μl,0.3mmol)中，加入HATU(91mg,0.24mmol)，并在室温搅拌5mins，然后加入4-二甲基氨基哌啶(31mg,0.24mmol)。将得到的混合物在室温再搅拌16小时。将混合物用MeOH稀释并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将得到的黄色玻璃状物通过HPLC(MDAP,方法1)纯化。合并适当的级分并蒸发，得到类白色固体。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱，得到标题化合物，为类白色固体(27mg,21％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝652.3,R_T＝3.35min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.82(1H,s),9.42(1H,dd,J＝1.4,6.9Hz),8.80(1H,s),8.65(1H,dd,J＝1.4,4.3Hz),8.03(2H,d,J＝8.2Hz),7.85(1H,d,J＝2.6Hz),7.73(1H,dd,J＝2.7,8.8Hz),7.56-7.51(3H,m),7.37(1H,dd,J＝4.3,6.9Hz),7.25(1H,t,J＝73.5Hz),4.71-4.39(m,1H),3.73-3.65(1H,m),3.52-3.41(1H,m),3.13-3.11(1H,m),2.89-2.88(1H,m),2.51(s,6H),2.06-1.74(2H,m),1.49(2H,dd,J＝7.6,14.7Hz).

实施例260

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(4-二甲基氨基-

哌啶-1-基甲基)-噻唑-5-基]-酰胺

在N₂气氛下将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(600mg,1.2mmol)、乙烯基三氟硼酸钾(177mg,1.32mmol)、[1,1’-双(二苯基膦基)二茂铁]二氯化钯二氯甲烷络合物(48mg,0.06mmol)和DIPEA(627μl,3.6mmol)溶解在2-丙醇(9ml)和水(4.5ml)中，在100℃在微波中加热40mins。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将有机层用盐水洗涤，干燥(Na₂SO₄)，过滤并除去溶剂。

将得到的残留物混悬在丙酮(12ml)和水(1.2ml)中，然后加入锇酸钾二水合物(25mg,0.06mmol)和N-甲基吗啉N-氧化物(280mg,2.4mmol)，并将混合物在室温剧烈搅拌16小时。通过加入固体焦亚硫酸钠(2g)将反应猝灭，然后在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将有机层用盐水洗涤。将合并的水层用乙酸乙酯萃取一次，并合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并除去溶剂。

将得到的残留物溶解在THF(15ml)和水(15ml)中，加入高碘酸钠(514mg,2.4mmol)，并将混合物在室温剧烈搅拌1.5小时。将反应混合物在乙酸乙酯和水之间分配，分离各相。将有机层用盐水洗涤。将合并的水层用乙酸乙酯萃取一次，并合并有机层，干燥(Na₂SO₄)，过滤并除去溶剂，得到标题化合物，为橙色固体(509mg,94％)。

将一部分得到的固体(100mg,0.22mmol)溶解在DCM(2ml)中，并连续加入4-二甲基氨基哌啶(33mg,0.26mmol)、乙酸(200μl)和大孔聚合物支持的氰基硼氢化物(216mg,0.44mmol)，并在室温搅拌16小时。将混合物用MeOH稀释并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将得到的黄色玻璃状物通过HPLC(MDAP,方法1)纯化。合并适当的级分并蒸发，得到黄色玻璃状物。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱，得到标题化合物，为淡黄色固体(52mg,42％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝562.1,R_T＝2.56min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.59(s,1H),9.39(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.75(s,1H),8.62(dd,1H,J＝1.6,4.3Hz),7.48(d,1H,J＝8.8Hz),7.34(dd,1H,J＝4.2,7.0Hz),7.17(t,1H,J＝73.4Hz),3.78(s,2H),2.98(d,2H,J＝11.5Hz),2.19(s,6H),2.17-2.08(m,3H),1.79-1.72(m,2H),1.50-1.38(m,2H).

实施例264

吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-2-(5-甲基-六氢-吡咯并[3,4-c]吡咯-2-羰基)-噻唑-5-基]-酰胺

将吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[2-溴-4-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-噻唑-5-基]-酰胺(200mg,0.4mmol)、2-甲基-八氢-吡咯并[3,4-c]吡咯(70mg,0.56mmol)、Herrmann’s催化剂(4.5mg,0.0048mmol)、三-叔丁基膦氢氟硼酸盐(3.5mg,0.011mmol)、六羰基钼(53mg,0.2mmol)和DBU(40μl,0.27mmol)溶解在THF(2ml)中，并在125℃在微波中加热15mins。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱。将得到的黄色玻璃状物通过HPLC(MDAP,方法1)纯化。合并适当的级分并蒸发，得到黄色固体。将残留物溶解在MeOH中并上载至SCX-2柱，其已用MeOH处理。用MeOH冲洗后，将产物用2M氨的MeOH溶液洗脱，得到标题化合物，为淡黄色固体(18mg,8％).LCMS(方法5)[M+H]⁺＝574.1,R_T＝3.06min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)10.88(s,1H),9.42(dd,1H,J＝1.6,7.0Hz),8.81(s,1H),8.61(dd,1H,J＝1.5,4.3Hz),7.84(d,1H,J＝2.6Hz),7.73(dd,1H,J＝2.6,8.8Hz),7.54(d,1H,J＝8.8Hz),7.36(dd,1H,J＝4.3,7.0Hz),7.22(t,1H,J＝73.1Hz),4.24(dd,1H,J＝8.6,12.3Hz),4.09(dd,1H,J＝3.9,12.3Hz),3.80(dd,1H,J＝8.9,12.6Hz),3.59-3.47(m,1H),3.02-2.92(m,1H),2.88-2.80(m,1H),2.65-2.48(m,4H),2.29(s,3H).

实施例297

2-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[1-(3-氨基-环丁基)-3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1H-吡唑-4-基]-酰胺

标题化合物以类似于2-氨基-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酸[3-(5-氯-2-二氟甲氧基-苯基)-1-哌啶-4-基-1H-吡唑-4-基]-酰胺的方法采用(3-((3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1H-吡唑-4-基)氨基甲酰基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-2-基)氨基甲酸叔丁酯和反式-甲苯基-4-磺酸3-叔丁氧基羰基氨基-环丁基酯制备，得到标题化合物，为白色固体。LCMS(方法5)[M+H]⁺＝489.1,R_T＝2.87min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.53(s,1H),8.93(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.37-8.34(m,2H),7.63-7.60(m,2H),7.45(d,1H,J＝7.2Hz),7.25(t,1H,J＝72.6Hz),7.00(dd,1H,J＝4.5,6.5Hz),6.56(s,2H),4.51-4.41(m,1H),3.18-3.07(m,1H),2.75-2.67(m,2H),2.24-2.14(m,2H).

实施例304

N-[1-(2-甲脒基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(500mg,1.24mmol)、3-溴丙腈(412mg,3.08mmol)、Cs₂CO₃(1.21g,3.70mol)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)混合物用温和的氮气流冲洗。将得到的混合物在密封管中在65℃搅拌16，然后倒入水(200mL)中。将粗产物通过过滤收集，然后通过硅胶快速色谱法纯化，采用乙酸乙酯/石油醚(1:2)洗脱。收集适当的级分并蒸发，得到N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-氰基乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体(320mg,57％).LCMS(方法17)[M+H]⁺＝458.1,R_T＝1.67min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-氰基乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.44mmol)和甲醇(280mg,8.74mmol)的甲苯(10mL)溶液中滴加加入乙酰氯(341mg,4.34mmol)，在0℃搅拌。将得到的溶液在室温搅拌2小时。在0℃搅拌下，向其滴加加入浓氢氧化铵(459mg)的甲醇(3mL)溶液。将得到的溶液在室温搅拌过夜，并在减压下浓缩。使残留物通过硅胶快速色谱法纯化，采用二氯甲烷/甲醇(5/1)洗脱。收集适当的级分并浓缩，得到白色固体(130mg)，其通过高pHPrep-HPLC进一步纯化，得到N-[1-(2-甲脒基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)-苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体(36.8mg).LCMS(方法17)[M+H]⁺＝475.1(注意:在方法17下,观察到产物分解),LCMS(方法18)R_T＝6.52min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.72(s,1H),9.36(dd,J＝1.8,7.2Hz,1H),8.68-8.66(m,2H),8.35(s,1H),7.64-7.60(m,2H),7.48-7.24(m,3H),6.39(s,2H),4.44(t,J＝7.2Hz,2H),2.67(t,J＝7.2Hz,2H).

实施例306

2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基]乙酸乙酯

将N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(3.00g,7.41mmol)、Cs₂CO₃(9.90g,30.38mmol)、四氢呋喃(90mL)、1,2-二溴乙烷(7.00g,37.26mmol)混合物在油浴中在70℃搅拌3小时。将混合物冷却至环境温度，然后在减压下浓缩。使残留物通过硅胶快速色谱法纯化，采用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱，得到N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体(2.2g,58％).TLC:R_f＝0.6；乙酸乙酯/石油醚＝1:1；LCMS(方法14)[M+H]⁺＝513.2,R_T＝1.03min.

将N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)-苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.39mmol)、三乙胺(394mg,3.89mmol)、2-氨基乙酸乙酯盐酸盐(271mg,1.94mmol)的乙醇(20mL)混合物在80℃搅拌24小时，然后在减压下浓缩。将粗产物通过高pH Prep-HPLC纯化，得到标题化合物，为类白色固体(31.9mg,15％).LCMS(方法14)[M+H]⁺＝534.2,R_T＝1.13min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ：(ppm)9.11(dd,J＝1.5,7.0Hz,1H)，8.66-6.65(m,2H),8.36(s,1H),7.68(d,J＝2.4Hz,1H),7.58(dd,J＝2.7,8.7Hz,1H)，7.42(d,J＝8.7Hz,1H),7.39(dd,J＝4.5,7.2Hz,1H),6.55(t,J＝73.5Hz,1H),4.35(t,J＝5.7Hz,2H),4.17(q,J＝7.2Hz,2H),3.41(s,2H),3.15(t,J＝6.0Hz,2H),1.25(t,J＝7.2Hz,3H).

实施例310

2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸

将氢氧化钾(200mg,3.56mmol)的水(2mL)溶液加入到2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸乙酯(200mg,0.32mmol)的乙醇(20mL)溶液中。将得到的溶液在室温下搅拌2小时，用1MHCl水溶液中和至pH～7。将所得溶液真空浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，使用以下条件(Prep-HPLC-005)：柱，XBridge Prep C18 OBD柱，5um,19*150mm；流动相，含有10mmolNH4HCO3的水，和MeCN(10min内30.0％直到60.0％，1min内达到95.0％，保持95.0％1min，2min内降至30.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到20.6mg(11％)2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸，为白色固体。LCMS(方法26)[M+H]⁺＝589.2,R_T＝0.82min.¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.66(s,1H),8.65(d,1H,J＝2.8Hz),8.38(s,1H),7.69(d,1H,J＝2.4Hz),7.57(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.42(d,1H,J＝8.8Hz),7.21(J＝4.0,6.8Hz),6.63(t,1H,J＝73.6Hz),5.30(s,2H),3.93-3.86(m,4H),3.50(s,2H),3.32-3.13(m,4H).

实施例311

2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)哌啶-4-基]氨基]乙酸

将N-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(627mg,3.13mmol)和N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-甲酰胺(400mg,0.78mmol)的DMF(5mL)混合物在100℃搅拌5h，并冷却至室温。加入水(50mL)。通过过滤收集沉淀并干燥。这得到400mg(81％)N-[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体。LCMS(方法21)[M+H]⁺＝631.1,R_T＝1.21min.

将饱和HCl二氧六环溶液(15mL)加至N-[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯(400mg,0.63mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。用饱和Na₂CO₃水溶液将剩余溶液的pH值调节至8-9。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过硅胶快速色谱法纯化，采用MeOH/DCM(1:1)洗脱，得到330mg(98％)N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝531.1,R_T＝0.49min.

将碳酸钾(98mg,0.71mmol)加至N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(290mg,0.55mmol)和2-溴乙酸叔丁酯(96mg,0.49mmol)的DMF(5mL)溶液中。将得到的混合物在50℃搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过硅胶快速色谱法纯化，采用15％MeOH的DCM溶液洗脱，得到150mg(43％)2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)哌啶-4-基]氨基]-乙酸叔丁酯，为黄色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝645.2,R_T＝1.39min.

来自前面步骤的叔丁酯(150mg,0.23mmol)的DCM(2mL)和TFA(2mL)溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内20.0％直到27.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至20.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到63.5mg(43％)2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)哌啶-4-基]氨基]乙酸的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝589.1,R_T＝0.85min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.34(d,1H,J＝8.0Hz),8.79-8.65(m,2H),8.46-8.35(m,1H),7.64-6.98(m,5H),4.30(s,2H),3.10-2.82(m,5H),2.54-2.53(m,2H),2.17-1.93(m,4H),1.58-1.45(m,2H).

实施例312

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[2-(甲基硫烷基)乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

2-(甲基硫烷基)乙-1-胺(0.5mL,5.34mmol)加至N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(120mg,0.23mmol)的CH₃CN(3mL)溶液中。将得到的溶液在80℃搅拌2h并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内40.0％直到57.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至40.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到58.2mg(48％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[2-(甲基硫烷基)乙基]-氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝522.2,R_T＝2.50min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.67(dd,1H,J＝1.6,4.4Hz),8.67(s,1H),8.36(s,1H),7.68-7.61(m,2H),7.46-7.44(m,1H),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),4.23(t,2H,J＝6.4Hz),2.98(t,2H,J＝6.0Hz),2.71(t,2H,J＝6.8Hz),2.53(t,2H,J＝6.8Hz),2.03(s,3H).

实施例313

N-[1-[2-(苄基氨基)乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[2-(甲基硫烷基)乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的合成方法，由N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和苯甲胺制备标题化合物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝538.2,R_T＝2.70min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.84(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.67(dd,1H,J＝1.6,4.4Hz),8.67(s,1H),8.37(s,1H),7.64-7.59(m,2H),7.46-7.42(m,1H),7.32-7.19(m,6H),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),4.25(t,2H,J＝6.4Hz),3.73(s,2H),2.93(t,2H,J＝6.4Hz).

实施例314

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[(吡啶-2-基甲基)氨基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[2-(甲基硫烷基)乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的合成方法，由N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和吡啶-2-基甲胺制备标题化合物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝539.2,R_T＝2.53min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.68(dd,1H,J＝1.6,4.0Hz),8.67(s,1H),8.49(d,1H,J＝4.0Hz),8.37(s,1H),7.72(dd,1H,J＝1.6,7.6Hz),7.70-7.61(m,2H),7.46-7.06(m,5H),4.27(t,2H,J＝6.0Hz),3.83(s,2H),2.98(t,2H,J＝6.0Hz).

实施例315

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[(吡啶-4-基甲基)氨基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[2-(甲基硫烷基)乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的合成方法，由N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和吡啶-4-基甲胺制备标题化合物.LCMS(方法25)[M+H]⁺＝539.1,R_T＝1.45min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.68(dd,1H,J＝1.6,4.4Hz),8.45(d,2H,J＝6.0Hz),8.38(s,1H),7.64-7.59(m,2H),7.44(d,1H,J＝8.8Hz),7.32-7.28(m,3H),7.07(t,1H,J＝73.2Hz),4.26(t,2H,J＝6.0Hz),3.76(s,2H),2.93(t,2H,J＝6.0Hz)..

实施例316

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.00g,5.37mmol)和1-苯基乙-1-酮(774mg,6.44mmol)的甲醇(30mL)溶液中加入NaBH₃CN(511mg,8.13mmol)。将得到的溶液在50℃搅拌过夜。加入水(50mL)。在真空下除去甲醇。将剩余的溶液用乙酸乙酯(x2)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶柱色谱纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1:1)洗脱。这得到750mg(48％)4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝291.1,R_T＝1.14min.

将4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(750mg,2.58mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的溶液在室温搅拌3h。通过过滤收集固体并干燥。这得到320mg(55％)1-(1-苯基乙基)哌嗪盐酸盐，为白色固体。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(4mL)溶液中加入1-(1-苯基乙基)哌嗪盐酸盐(47mg,0.21mmol)、DIEA(67mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridgePrep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内40.0％直到65.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至40.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到31.3mg(28％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法21)[M+H]⁺＝635.0,R_T＝1.56min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.67(d,1H,J＝4.8Hz),8.28(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.53(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.35-7.26(m,6H),7.07(t,1H,J＝73.2Hz),5.19(s,2H),3.49-3.46(m,5H),2.49-2.33(m,4H),1.31(d,3H,J＝6.4Hz).

实施例317

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(2-甲基丙基)哌嗪-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(1-苯基乙基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的合成方法，由{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸和1-(2-甲基丙基)哌嗪制备标题化合物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝587.1,R_T＝1.80min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.8,6.9Hz),8.68(dd,1H,J＝1.5,3.9Hz),8.67(s,1H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝3.0,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝9.0Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.57-3.42(m,4H),2.40-2.21(m,4H),2.05(d,2H,J＝7.2Hz),1.81-1.76(m,1H),0.86(d,6H,J＝6.3Hz).

实施例318

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(3-甲基氧杂环丁-3-基)甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向3-甲基氧杂环丁烷-3-甲醛(17.2mg,0.17mmol)和N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(70mg,0.13mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入NaBH₃CN(12.5mg,0.20mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后通过加入5mL水将反应猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在乙酸乙酯(30mL)中，用盐水洗涤，干燥并浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmolNH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内55.0％直到65.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至55.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到39.8mg(49％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(3-甲基氧杂环丁-3-基)甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺.LCMS(方法25)[M+H]⁺＝615.2,R_T＝0.93min.¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.92(s,1H),9.36-9.27(m,1H),8.91-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.73-7.46(m,3H),7.37-7.06(m,2H),5.23(s,2H),4.52-4.20(m,4H),3.60-3.11(m,6H),2.43-2.20(m,4H),1.46(s,3H).

实施例319

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-丙基哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向1-丙基哌嗪二氢溴酸盐(60.4mg,0.21mmol)和{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(2mL)溶液中加入DIEA(112mg,0.866mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridgePrep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH4HCO3的水和MeCN(在10min内50.0％直到61.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至50.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到69.1mg(70％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-丙基哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝573.2,R_T＝2.86min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.68(dd,1H,J＝1.6,7.6Hz),8.67(s,1H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.6Hz),5.23(s,2H),3.48(t,4H,J＝6.0Hz),2.40-2.34(m,4H),2.24(t,2H,J＝7.2Hz),1.48-1.41(m,2H),0.85(t,3H,J＝7.2Hz).

实施例320

N-[1-[2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(100mg,0.17mmol)的DMF(4mL)和1-苄基哌嗪(33.6mg,0.19mmol)溶液中加入DIEA(44.8mg,0.35mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内37.0％MeCN直到50.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至37.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到53.8mg(50％)N-[1-[2-(4-苄基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法21)[M+H]⁺＝621.0,R_T＝1.53min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.65-7.24(m,6H),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(m,2H),3.52-3.46(m,6H),2.49-2.33(m,4H).

实施例321

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)和4-[2-(哌嗪-1-基)乙基]吗啉(41mg,0.21mmol)的DMF(5mL)溶液中加入DIEA(45mg,0.35mmol)、HATU(79mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌3h。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内37.0％MeCN直到52.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至37.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到62.0mg(56％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(吗啉-4-基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝644.2,R_T＝2.34min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.68-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.09(t,1H,J＝73.6Hz),5.23(s,2H),3.54(t,4H,J＝4.4Hz),3.50-3.46(m,4H),2.49-2.39(m,12H).

实施例322

2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸甲酯

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(5g,26.85mmol)的DMF(50mL)溶液中加入Cs₂CO₃(11g,33.76mmol)和2-溴乙酸甲酯(3.4g,22.2mmol)。将得到的混合物在室温搅拌6h。加入水(50mL)和DCM(100mL)。分离各相。将水相用DCM(100mL)萃取。将合并的有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到7.1g(粗品)4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法27)[M+H]⁺＝259.2,R_T＝1.08min.

将4-(2-甲氧基-2-氧代乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.50g,5.81mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的溶液在室温搅拌3h。通过过滤收集固体并干燥。这得到950mg(84％)2-(哌嗪-1-基)乙酸甲酯盐酸盐，为白色固体。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(2mL)溶液中加入2-(哌嗪-1-基)乙酸甲酯盐酸盐(41mg,0.21mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌2h并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用10％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内40.0％直到59.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至40.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到49.2mg(47％)2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸甲酯，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝603.2,R_T＝2.83min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),3.63(s,3H),3.52-3.48(m,4H),3.30(s,2H),2.67-2.51(m,4H).

实施例323

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)吡啶-3-基]-1-[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将8-mL微波管填装N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(150mg,0.37mmol)、5-(氯甲基)氧杂环戊-2-酮(74.6mg,0.55mmol)、Cs₂CO₃(242mg,0.74mmol)的DMF(2mL)混合物。将管在真空下抽真空再填充氮气3次。将终反应混合物在120℃用微波辐射30min。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用乙酸乙酯洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内39.0％直到53.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至39.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到35.8mg(19％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)吡啶-3-基]-1-[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝503.1,R_T＝1.65min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.68-8.66(m,2H),8.38(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.61(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.00(t,1H,J＝73.2Hz),4.98-4.94(m,1H),4.48(d,2H,J＝5.1Hz),2.46-2.23(m,3H),2.07-1.98(m,1H).

实施例324

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(200mg)的DMF(5mL)溶液中加入哌嗪-1-甲酸叔丁酯(77.5mg,0.42mmol)、DIEA(89.6mg,0.69mmol)、HATU(158.3mg,0.42mmol)。将得到的溶液在室温搅拌3h并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱，得到279mg 4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色固体。LCMS(方法22)[M+H]⁺＝631.4,R_T＝1.49min.

将4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(279mg,0.44mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(10mL)的溶液在室温搅拌过夜。将反应混合物在真空下浓缩。将残留物再溶解在甲醇中，并用DIEA中和。将中和的溶液在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmolNH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内35.0％MeCN直到48.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至35.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到95.6mg(41％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝531.2,R_T＝2.67min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.22(s,2H),3.47-3.41(m,4H),2.73-2.67(m,4H).

实施例325

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1g,5.37mmol)的DMF(15mL)溶液中加入Cs₂CO₃(3.5g,10.74mmol)、2-溴-N,N-二甲基乙酰胺(1.80g,10.84mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。加入水(40mL)和EtOAc(100mL)。分离各相。将水相用EtOAc萃取。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到880mg(60％)4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。TLC:R_f＝0.3；二氯甲烷/甲醇＝1/10.

将4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(880mg,3.24mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的溶液在室温搅拌过夜。通过过滤收集固体。这得到450mg(67％)N,N-二甲基-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐，为白色固体。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(4mL)溶液中加入N,N-二甲基-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐(72mg,0.35mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内27.0％直到36.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至27.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到73.4mg(64％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(二甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的甲酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝616.3,R_T＝2.41min.¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.09(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.66-8.64(m,2H),8.37(s,1H),8.11(s,1H),7.68(d,1H,J＝2.8Hz),7.57(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.42(d,1H,J＝8.8Hz),7.21(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),6.63(t,1H,J＝73.6Hz),5.29(s,2H),3.84-3.77(m,4H),3.75(s,2H),3.08(s,3H),3.06-2.96(m,7H).

实施例326

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(2-羟基苯基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将NaBH₃CN(112mg,1.78mmol)分份加至2-羟基苯甲醛(55mg,0.45mmol)和N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.45mmol)的甲醇(10mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后通过加入0.5mL水将反应猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内38.0％直到45.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至38.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到28.8mg(12％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(2-羟基苯基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝554.2,R_T＝2.79min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.37(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.4,8.0Hz),7.61(d,1H,J＝2.8Hz),7.44(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.09-7.04(m,2H),7.06(t,1H,J＝73.6Hz),6.73-6.69(m,2H),4.29(t,2H,J＝6.0Hz),3.82(s,2H),2.98(t,2H,J＝6.0Hz).

实施例327

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(3-羟基苯基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将NaBH₃CN(28mg,0.45mmol)加至N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.22mmol)的MeOH(10mL)和3-羟基苯甲醛(55mg,0.45mmol)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后通过加入0.2mL水将反应猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用2.5％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内32.0％直到36.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至32.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到25.7mg(19％)甲酸盐N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(3-羟基苯基)-甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺甲酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝554.2,R_T＝1.58min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.37(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.68-8.67(m,2H),8.37(s,1H),7.61(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.60(d,1H,J＝2.4Hz),7.44(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.05(t,1H,J＝73.2Hz),7.10-7.06(m,1H),6.74-6.72(m,2H),6.60(d,1H,J＝7.2Hz),4.25(t,2H,J＝6.0Hz),3.66(s,2H),2.94(t,2H,J＝6.0Hz).

实施例328

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(4-羟基苯基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将4-羟基苯甲醛(55mg,0.45mmol)和N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.22mmol)的THF(10mL)溶液在室温搅拌2h，然后加入NaBH₃CN(28mg,0.45mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后通过加入0.1mL水将反应猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内34.0％MeCN直到38.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至34.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到31.4mg(23％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(4-羟基苯基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝554.2,R_T＝1.58min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.37(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.60(d,1H,J＝2.4Hz),7.44(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.10(d,2H,J＝8.4Hz),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),6.68(d,2H,J＝8.4Hz),4.25(t,2H,J＝6.4Hz),3.63(s,2H),2.95(t,2H,J＝6.0Hz).

实施例329

2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基]乙酸甲酯甲酸盐

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(500mg)的DMF(10mL)溶液中加入N-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(208mg,1.04mmol)、DIEA(224mg,1.73mmol)、HATU(395.9mg,1.04mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)。通过过滤收集沉淀并干燥。这得到600mg N-[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯，为黄色粗固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝645.1,R_T＝1.02min.

将来自前面步骤的粗产物(600mg)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的溶液在室温搅拌过夜。将得到的溶液用100mL甲醇稀释，并用饱和Na₂CO₃水溶液中和并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用30％MeOH的DCM溶液洗脱。收集适当的级分并蒸发溶剂，得到N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(520mg)，为黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝545.1,R_T＝0.62min.

将2-溴乙酸甲酯(30.74mg,0.20mmol)加至N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.18mmol)的DMF(5mL)溶液和碳酸钾(38.1mg,0.28mmol)的混合物中。将得到的混合物在室温搅拌过夜。加入另外量的2-溴乙酸甲酯(30.74mg,0.20mmol)，并将得到的溶液在60℃搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内25.0％MeCN直到32.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至25.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到68.9mg(57％)2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基]-乙酸甲酯的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝617.2,R_T＝1.53min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.23-5.20(m,2H),4.11-4.07(m,1H),3.83-3.80(m,1H),3.63(s,3H),3.39-3.31(m,2H),3.15-3.12(m,1H),2.87-2.83(m,1H),2.71-2.67(m,1H),1.83-1.77(m,2H),1.29-1.14(m,2H).

实施例330

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(5-羟基-2-氧代哌啶-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺甲酸盐

将DIEA(71mg,0.55mmol)加至N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.18mmol)和三氟甲磺酸(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲酯(69mg,0.28mmol)的CH₃CN(30mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内38.0％直到46.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至38.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到41.6mg(33％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(5-羟基-2-氧代哌啶-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝643.2,R_T＝1.49min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.32(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),5.26-5.24(m,2H),4.89(br,1H),4.59-4.45(m,2H),4.08-3.90(m,2H),3.25-2.97(m,3H),2.68-2.58(m,1H),2.46-2.21(m,2H),1.86-1.65(m,3H),1.57-1.50(m,3H).

实施例331

3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸甲酯

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1g,5.37mmol)的DMF(20mL)溶液中加入Cs₂CO₃(589mg,1.81mmol)和3-溴丙酸甲酯(744mg,4.46mmol)。将得到的混合物在室温搅拌过夜。加入水(50m)和EtOAc(50mL)。分离各相。将水相用EtOAc(50mL)萃取。合并有机层，用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过硅胶快速色谱纯化，用3.5％MeOH的DCM溶液洗脱。收集适当的级分并蒸发溶剂，得到4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(895mg,74％)，为黄色油状物。TLC:R_f＝0.3；乙酸乙酯/石油醚＝1/2.

将4-(3-甲氧基-3-氧代丙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(895mg,3.29mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的溶液在室温搅拌过夜。通过过滤收集固体。这得到710mg 3-(哌嗪-1-基)丙酸甲酯盐酸盐，为白色粗固体。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(5mL)溶液中加入3-(哌嗪-1-基)丙酸甲酯盐酸盐(44mg,0.21mmol)、DIEA(90mg,0.70mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌4h并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内40.0％直到51.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至40.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到56.1mg(49％)3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸甲酯的甲酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝617.1,R_T＝1.51min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.68-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.60(s,3H),3.49-3.41(m,4H),2.59(t,2H,J＝6.4Hz),2.51(t,2H,J＝6.4Hz),2.39-2.33(m,4H).

实施例332

3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸酯

采用与3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸甲酯的合成方法类似的合成方法，由3-溴丙酸乙酯制备标题化合物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝631.2,R_T＝0.89min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(d,1H,J＝6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝9.0Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.07(t,1H,J＝72.9Hz),5.23(s,2H),4.03(q,2H,J＝7.2Hz),3.59-3.47(m,4H),2.61-2.59(m,2H),2.50-2.33(m,6H),1.16(t,3H,J＝7.2Hz).

实施例333

1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]哌啶-4-甲酸甲酯

在0℃向搅拌的4-(2-羟基乙基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.5g,6.51mmol)和DIEA(2.5g,19.34mmol)的DCM(50mL)溶液滴加加入MsCl(817mg,7.13mmol)。将得到的溶液在室温搅拌1h。加入水(100mL)。分离各相。将水相用二氯甲烷萃取，并合并有机层。将有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到1.8g(粗品)4-[2-(甲磺酰基氧基)乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为浅黄色油状物。

向4-[2-(甲磺酰基氧基)乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(431mg,1.39mmol)的DMF(5mL)溶液中加入哌啶-4-甲酸甲酯(300mg,2.095mmol)和DIEA(361mg,2.79mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到285mg(57％)4-[2-[4-(甲氧基羰基)哌啶-1-基]乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝356.2,R_T＝0.99min.

将4-[2-[4-(甲氧基羰基)哌啶-1-基]乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(285mg,0.80mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到205mg(88％)1-[2-(哌嗪-1-基)乙基]哌啶-4-甲酸甲酯盐酸盐，为黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝256.2,R_T＝0.44min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.32mmol)的DMF(10mL)溶液中加入1-[2-(哌嗪-1-基)乙基]哌啶-4-甲酸甲酯盐酸盐(190mg,0.65mmol)、DIEA(126mg,0.97mmol)、HATU(148mg,0.39mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge PrepC₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内22.0％直到31.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至22.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到96.5mg(40％)1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]哌啶-4-甲酸甲酯的甲酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝700.2,R_T＝2.21min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.59(s,3H),3.49-3.46(m,4H),2.84-2.81(m,2H),2.54-2.52(m,6H),2.50-2.40(m,2H),2.33-2.27(m,1H),2.04-1.99(m,2H),1.88-1.70(m,2H),1.55-1.50(m,2H).

实施例334

1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]哌啶-4-甲酸乙酯

向4-[2-(甲磺酰基氧基)乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(392mg,1.27mmol)的DMF(5mL)溶液中加入DIEA(329mg,2.55mmol)和哌啶-4-甲酸乙酯(300mg,1.91mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到310mg(66％)4-[2-[4-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝370.3,R_T＝0.50min.

将4-[2-[4-(乙氧基羰基)哌啶-1-基]乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(310mg,0.84mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到220mg(86％)1-[2-(哌嗪-1-基)乙基]哌啶-4-甲酸乙酯盐酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝270.3,R_T＝0.89min.

向2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(150mg,0.32mmol)的DMF(10mL)溶液中加入1-[2-(哌嗪-1-基)乙基]哌啶-4-甲酸乙酯盐酸盐(199mg,0.65mmol)、DIEA(126mg,0.97mmol)、HATU(148mg,0.39mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridgePrep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内18.0％MeCN直到27.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至18.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到66.1mg(27％)1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]哌啶-4-甲酸乙酯的甲酸盐。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝714.2,R_T＝2.42min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(m,2H),4.03(q,2H,J＝6.8Hz),3.50-3.47(m,4H),2.88-2.85(m,2H),2.52-2.51(m,6H),2.47-2.26(m,3H),2.12-2.07(m,2H),1.80-1.78(m,2H),1.60-1.55(m,2H),1.16(t,3H,J＝7.2Hz).

实施例335

1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]-4-甲基哌啶-4-甲酸甲酯甲酸盐

采用与1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]哌啶-4-甲酸乙酯的合成方法类似的方法，由4-甲基哌啶-4-甲酸甲酯盐酸盐制备标题化合物。

LCMS(方法24)[M+H]⁺＝714.2,R_T＝1.94min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.30(s,1H),7.65-7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.6Hz),5.22(s,2H),3.62(s,3H),3.48-3.45(m,4H),2.57-2.51(m,2H),2.49-2.39(m,8H),2.01-1.93(m,4H),1.41-1.35(m,2H),1.10(s,3H).

实施例336

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯

向1-[(叔丁氧基)羰基]哌啶-4-甲酸(1.00g,4.36mmol)的DCM(15mL)溶液中加入2-(吗啉-4-基)乙-1-醇(858mg,6.54mmol)、EDC.HCl(1.00g,5.22mmol)、4-二甲基氨基吡啶(53.3mg,0.44mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(30mL)和DCM(50mL)。分离各相。将水相用DCM萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(2:3)洗脱。这得到1.4g(粗品)哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-[2-(吗啉-4-基)乙基]酯，为黄色油状物。TLC:R_f＝0.3；乙酸乙酯.

将哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-[2-(吗啉-4-基)乙基]酯(1.4g,4.09mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到1.2g(粗品)哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯盐酸盐，为黄色油状物。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.26mmol)的DMF(2mL)溶液中加入哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯盐酸盐(140mg,0.50mmol)、DIEA(101mg,0.78mmol)、HATU(119mg,0.31mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用10％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内31.0％MeCN直到38.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至31.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到35.6mg(20％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝687.2,R_T＝0.86min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.32(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.27-5.22(m,2H),4.20-4.15(m,3H),3.89-3.82(m,1H),3.58-3.55(m,4H),3.26-3.17(m,1H),2.89-2.78(m,1H),2.69-2.59(m,1H),2.53-2.51(m,2H),2.40-2.32(m,4H),1.91-1.80(m,2H),1.69-1.41(m,2H).

实施例337

1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]-4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯甲酸盐

采用与1-[2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙基]哌啶-4-甲酸乙酯的合成方法类似的方法，由4-甲基哌啶-4-甲酸乙酯盐酸盐制备标题化合物。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝728.2,R_T＝1.87min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.2,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.22(s,2H),4.06(q,2H,J＝7.2Hz),2.67-2.60(m,2H),2.44-2.38(m,8H),2.09-2.04(m,2H),1.97-1.93(m,2H),1.42-1.41(m,2H),1.16(t,3H,J＝7.2Hz),1.10(s,3H).

实施例338

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯

采用与1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯的合成方法类似的方法，由2-(二甲基氨基)乙-1-醇制备标题化合物。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝645.2,R_T＝2.97min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.68-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.21(t,J＝73.1Hz,1H)5.30-5.14(m,2H),4.21-4.10(m,3H),3.89-3.78(m,1H),3.24-3.14(m,1H),2.89-2.60(m,2H),2.49-2.45(m,2H),2.16(s,6H),1.89-1.81(m,2H),1.68-1.37(m,2H).

实施例339

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯

向1-[(叔丁氧基)羰基]-4-甲基哌啶-4-甲酸(1.00g,4.11mmol)的DCM(10mL)溶液中加入2-(吗啉-4-基)乙-1-醇(1.08g,8.23mmol)、HOBt(667mg,4.94mmol)。将混合物在室温搅拌2hr，然后加入EDC.HCl(943mg,4.92mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜，并用30mLDCM稀释。将得到的混合物用水、盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到800mg(55％)4-甲基哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-[2-(吗啉-4-基)乙基]酯，为黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝357.2,R_T＝0.64min.

将4-甲基哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-[2-(吗啉-4-基)乙基]酯(800mg,2.24mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(30mL)的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到600mg(粗品)4-甲基哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯盐酸盐，为白色粗固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝257.0,R_T＝0.86min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(3mL)溶液中加入4-甲基哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯盐酸盐(76.2mg,0.26mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内34.0％直到38.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至34.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到43.0mg(33％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸2-(吗啉-4-基)乙酯的甲酸盐。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝701.2,R_T＝0.92min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6.)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝9.6Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),4.21(t,2H,J＝5.6Hz),4.02-3.98(m,1H),3.77-3.74(m,1H),3.53-3.51(m,4H),3.27-3.22(m,1H),3.00-2.94(m,1H),2.55-2.52(m,2H),2.49-2.39(m,4H),2.04-1.97(m,2H),1.18(s,3H).

实施例340

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯

向1-[(叔丁氧基)羰基]-4-甲基哌啶-4-甲酸(1g,4.11mmol)的DCM(10mL)溶液中加入2-(二甲基氨基)乙-1-醇(733mg,8.22mmol)、HOBt(667mg,4.94mmol)。将混合物在室温搅拌2h，然后加入EDC.HCl(943mg,4.92mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并加入水(30mL)。将得到的溶液用DCM(x2)萃取，并合并有机层。将有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到800mg(62％)4-甲基哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-[2-(二甲基氨基)乙基]酯，为黄色油状物。TLC:R_f＝0.3；二氯甲烷/甲醇＝10/1.

将4-甲基哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-[2-(二甲基氨基)乙基]酯(800mg,2.54mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到340mg(53％)4-甲基哌啶-4-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯盐酸盐，为白色固体。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(3mL)溶液中加入4-甲基哌啶-4-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯盐酸盐(87mg,0.35mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内38.0％MeCN直到42.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至38.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到49.7mg(41％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸2-(二甲基氨基)乙酯的甲酸盐。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝659.2,R_T＝1.23min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.2,7.2Hz),8.68-8.64(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝9.2Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),4.16(t,2H,J＝5.6Hz),3.97-3.93(m,1H),3.75-3.71(m,1H),3.25-3.20(m,1H),3.00-2.94(m,1H),2.48-2.47(m,2H),2.33(s,6H),2.16-1.95(m,2H),1.49-1.44(m,2H),1.18(s,3H).

实施例341

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸哌啶-4-基甲酯

向1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸(150mg,0.26mmol)的DMF(5mL)溶液中加入4-(羟基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(281mg,1.31mmol)、4-二甲基氨基吡啶(10mg,0.08mmol)、HATU(120mg,0.32mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后加入DIEA(68mg,0.53mmol)。将得到的溶液在室温再搅拌3h并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到150mg(74％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸[1-[(叔丁氧基)羰基]哌啶-4-基]甲酯，为黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝771.2,R_T＝1.10min.

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸[1-[(叔丁氧基)羰基]哌啶-4-基]甲酯(150mg,0.19mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(10mL)的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将得到的溶液用10mL甲醇稀释。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内30.0％直到33.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至30.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到82.3mg(59％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸哌啶-4-基甲酯的甲酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝671.3,R_T＝1.58min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.68-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.5,7.2Hz),7.01(t,1H,J＝73.5),5.25-5.23(m,2H),4.24-4.19(m,1H),3.93-3.85(m,3H),2.83-2.80(m,1H),2.72-2.64(m,3H),1.92-1.87(m,3H),1.71-1.67(m,3H),1.59-1.48(m,1H),1.44-1.23(m,2H).

实施例342

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(500mg,1.08mmol)的DMF(5mL)溶液中加入哌啶-4-甲酸甲酯(232.1mg,1.62mmol)、DIEA(279.2mg,2.16mmol)、HATU(493.5mg,1.30mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到500mg(79％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸甲酯，为黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝588.1,R_T＝0.87min.

将K₂CO₃(500mg,3.59mmol)的H₂O(5mL)溶液加至1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸甲酯(500mg,0.85mmol)的甲醇(10mL)溶液。将得到的溶液在50℃搅拌过夜并用1N HCl酸化至pH2。通过过滤收集固体。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内30.0％MeCN直到34.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至30.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到390mg(80％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-乙酰基)哌啶-4-甲酸，为浅黄色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝574.1,R_T＝1.11min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)12.34(s,1H),9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.29-5.19(m,2H),4.28-4.18(m,1H),3.87-3.84(m,1H),3.19-3.13(m,1H),2.83-2.77(m,1H),1.86-1.85(m,2H),1.60-1.57(m,1H),1.43-1.41(m,2H).

实施例343

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸

向2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(500mg,1.08mmol)的DMF(4mL)溶液中加入4-甲基哌啶-4-甲酸甲酯(275mg,1.75mmol)、DIEA(419mg,3.24mmol)、HATU(494mg,1.30mmol)。将得到的溶液在室温搅拌4h。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到500mg(77％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸甲酯，为黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝602.1,R_T＝0.92min.

向1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸甲酯(500mg,0.83mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入碳酸钾(700mg,5.06mmol)的水(5mL)溶液。将得到的溶液在60℃搅拌过夜，并用1N HCl酸化至pH 2。通过过滤收集固体。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内30.0％MeCN直到35.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至30.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到26.6mg 1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝588.2,R_T＝2.79min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)12.5(br,1H),9.76(s,1H),9.34(d,1H,J＝6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.32(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.28-5.18(m,2H),3.96-3.93(m,1H),3.74-3.70(m,1H),3.26-3.23(m,1H),3.01-2.95(m,1H),1.98-1.93(m,2H),1.46-1.30(m,2H),1.18(s,3H).

实施例344

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-[甲基[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]氨基]哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在0℃向冷的5-(羟基甲基)氧杂环戊-2-酮(100mg,0.86mmol)、DIEA(340mg,2.63mmol)的DCM(5mL)溶液中加入Tf₂O(247mg,0.88mmol)。将得到的溶液在室温搅拌3h，并用饱和Na₂CO₃溶液猝灭。将得到的溶液用二氯甲烷(x3)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤。用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到180mg(84％)三氟甲磺酸(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲酯，为黄色油状物。

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.18mmol)的CH₃CN(5mL)溶液中加入DIEA(70mg,0.54mmol)和三氟甲磺酸(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲酯(66.5mg,0.27mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内30.0％直到36.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至30.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到37mg(31％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-[甲基[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]氨基]哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝657.2,R_T＝1.68min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.2,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),5.24-5.17(m,2H),4.58-4.54(m,1H),4.41-4.38(m,1H),3.98-3.95(m,1H),3.16-3.03(m,1H),2.69-2.55(m,4H),2.46-2.44(m,2H),2.26(s,3H),2.24-2.16(m,1H),1.88-1.83(m,1H),1.79-1.71(m,2H),1.48-1.44(m,1H),1.29-1.21(m,1H).

实施例345

3-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基](甲基)氨基]丙酸甲酯

向4-氨基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g,4.99mmol)的CH₃CN(20mL)溶液中加入碳酸钾(1.38g,9.99mmol)和3-溴丙酸甲酯(3.34g,20.00mmol)。将得到的溶液加热至回流反应20h，并冷却至室温。加入水(100mL)和DCM(100mL)。分离各相。将水相用DCM萃取。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到300mg(21％)4-[(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝287.0,R_T＝1.06min.

向4-[(3-甲氧基-3-氧代丙基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.05mmol)的甲醇(10mL)溶液中加入多聚甲醛(HCHO)n(90mg,3.00mmol)。将反应混合物在室温搅拌6hr，然后加入NaBH₃CN(130mg,2.07mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜，并用水(0.5mL)猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到300mg(粗品)4-[(3-甲氧基-3-氧代丙基)(甲基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝301.0,R_T＝1.08min.

将4-[(3-甲氧基-3-氧代丙基)(甲基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.00mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(10mL)的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到300mg(粗品)3-[甲基(哌啶-4-基)氨基]丙酸甲酯盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝201.0,R_T＝0.31min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸三氟乙酸盐(100mg,0.17mmol)的DMF(3mL)溶液中加入3-[甲基(哌啶-4-基)氨基]丙酸甲酯盐酸盐(62mg,0.26mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用乙酸乙酯/石油醚(10:1)洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内37.0％直到43.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至37.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到45.2mg(38％)3-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基](甲基)氨基]丙酸甲酯的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝645.2,R_T＝1.64min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.46(d,1H,J＝8.7Hz),7.29(dd,1H,J＝4.5,7.2Hz),7.04(t,1H,J＝73.2Hz),5.33-5.27(m,2H),4.52-4.48(m,1H),4.10-4.06(m,1H),3.66(s,3H),3.51-3.34(m,2H),3.16-3.08(m,2H),2.86-2.51(m,6H),2.28-1.99(m,2H),1.73-1.70(m,1H),1.55-1.45(m,1H).

实施例346

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-([[4-(甲基硫烷基)苯基]甲基]氨基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺甲酸盐

向N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(130mg,0.29mmol)的甲醇(5mL)溶液中加入4-(甲基硫烷基)苯甲醛(66.3mg,0.44mmol)。将混合物搅拌2hr，然后加入NaBH₃CN(27.5mg,0.44mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜，并用水(1mL)猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内30.0％直到37.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至30.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到39.6mg(23％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-([[4-(甲基硫烷基)苯基]甲基]氨基)-乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的甲酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝584.2,R_T＝2.23min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.37(s,1H),7.61(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.59(d,1H,J＝2.8Hz),7.44(d,1H,J＝8.8Hz),7.31-7.27(m,3H),7.18(d,2H,J＝8.0Hz),7.07(t,1H,J＝73.6Hz),4.25(t,2H,J＝5.2Hz),3.70(s,2H),2.95-2.92(m,2H),2.50(s,3H).

实施例347

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(2-氧代氧杂环己-4-基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg,2.68mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入5,6-二氢-2H-吡喃-2-酮(530mg,5.40mmol)。将得到的溶液在室温搅拌20h。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到550mg(72％)4-(2-氧代氧杂环己-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝285.0,R_T＝0.53min.

将4-(2-氧代氧杂环己-4-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(550mg,1.93mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(10mL)的混合物在室温搅拌过夜。通过过滤收集固体。这得到335mg(78％)4-(哌嗪-1-基)氧杂环己-2-酮盐酸盐，为白色固体。

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸三氟乙酸盐(100mg,0.17mmol)的DMF(3mL)溶液中加入4-(哌嗪-1-基)氧杂环己-2-酮盐酸盐(76mg,0.34mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内35.0％直到39.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至35.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到14.5mg(13％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(2-氧代氧杂环己-4-基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝629.1,R_T＝1.44min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝2.0,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),4.35-4.29(m,1H),4.19-4.16(m,1H),3.50-3.32(m,6H),3.02-2.99(m,1H),2.69-2.51(m,4H),2.08-1.98(m,1H),1.77-1.75(m,1H).

实施例348

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基甲基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g,4.69mmol)的MeOH(10mL)溶液中加入吗啉(613mg,7.04mmol)。将得到的混合物搅拌6hr，然后加入NaBH₃CN(444mg,7.07mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜，并用H₂O(1mL)猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到1.0g(75％)4-(吗啉-4-基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝285.0,R_T＝0.59min.

将4-(吗啉-4-基甲基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.0g,3.52mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的溶液在室温搅拌过夜。这得到660mg(85％)4-(哌啶-4-基甲基)吗啉盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝185.0,R_T＝0.30min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.26mmol)的DMF(2mL)溶液中加入4-(哌啶-4-基甲基)吗啉盐酸盐(69mg,0.31mmol)、DIEA(101.2mg,0.78mmol)、HATU(119.2mg,0.31mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmolNH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内25.0％MeCN直到36.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至25.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到61mg(37％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基甲基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝629.2,R_T＝1.55min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.27-5.16(m,2H),4.34-4.30(m,1H),3.92-3.89(m,1H),3.56(t,4H,J＝4.2Hz),3.17-3.06(m,1H),2.67-2.59(m,1H),2.39-2.25(m,4H),2.13-2.12(m,2H),1.90-1.71(m,3H),1.20-1.08(m,1H),0.97-0.95(m,1H).

实施例349

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向4-氧代哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g,5.02mmol)的MeOH(50mL)溶液中加入1-甲基哌嗪(1.0g,9.98mmol)和AcOH(0.1mL,1.75mmol)。将反应搅拌3h，加入NaBH₃CN(378mg,6.02mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h。然后将反应用饱和NH₄Cl(2mL)猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用8％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到800mg(39％)4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝284.0,R_T＝0.97min.

4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(800mg,1.97mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的溶液在室温搅拌3h。通过过滤收集固体并干燥。这得到600mg(83％)1-甲基-4-(哌嗪-1-基)哌嗪盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝184.0,R_T＝0.32min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(200mg,0.35mmol)的DMF(4mL)溶液中加入1-甲基-4-(哌啶-4-基)哌嗪盐酸盐(170mg,0.77mmol)、DIEA(134.4mg,1.04mmol)、HATU(160mg,0.42mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内25.0％直到34.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至25.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到74.3mg(32％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(4-甲基哌嗪-1-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝628.2,R_T＝2.20min.¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.36-9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝9.2Hz),7.29(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),5.25-5.21(m,2H),4.36-4.29(m,1H),3.98-3.79(m,1H),3.10-3.00(m,1H),2.69-2.51(m,1H),2.49-2.32(m,8H),2.18(s,3H),1.91-1.86(m,2H),1.47-1.41(m,1H),1.39-1.25(m,1H).

实施例350

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将4-甲酰基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g,4.69mmol)和1-甲基哌嗪(703mg,7.02mmol)的甲醇(10mL)溶液搅拌6h，然后加入NaBH₃CN(444mg,7.07mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并用水(1mL)猝灭。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到1.1g(79％)4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝298.0,R_T＝0.46min.

将4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g,3.70mmol,)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的混合物在室温搅拌过夜。通过过滤收集固体。这得到560mg(65％)1-甲基-4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝198.0,R_T＝0.32min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(2mL)溶液中加入1-甲基-4-(哌啶-4-基甲基)哌嗪盐酸盐(49mg,0.21mmol)、DIEA(67.2mg,0.52mmol)、HATU(79.2mg,0.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在10min内20.0％MeCN直到30.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至20.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到52.7mg(47％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(4-甲基哌嗪-1-基)甲基]哌啶-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝642.2,R_T＝1.55min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.54(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.26-5.16(m,2H),4.37-4.30(m,1H),3.93-3.87(m,1H),3.11-3.05(m,1H),2.67-2.59(m,1H),2.49-2.23(m,8H),2.16-2.12(m,5H),1.83-1.71(m,3H),1.10-1.07(m,1H),0.97-0.88(m,1H).

实施例351

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-氧代-2-[4-[(5-氧代-2,5-二氢呋喃-3-基)甲基]哌嗪-1-基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.19mmol)的DMF(3mL)溶液中加入DIEA(48.8mg,0.38mmol)、4-(溴甲基)-2,5-二氢呋喃-2-酮(66.4mg,0.38mmol)。将得到的溶液在室温搅拌4h并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内34.0％直到39.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至34.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到53.4mg(45％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-氧代-2-[4-[(5-氧代-2,5-二氢呋喃-3-基)甲基]哌嗪-1-基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝627.1,R_T＝1.55min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.35(d,1H,J＝6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝9.2Hz),7.29(dd,1H,J＝4.2,7.0Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),6.12(s,1H),5.25(s,2H),4.91(s,2H),3.51(t,4H,J＝5.4Hz),3.41(s,2H),2.50-2.40(m,4H).

实施例352

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-[甲基[(5-氧代-2,5-二氢呋喃-3-基)甲基]氨基]哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(甲基氨基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.18mmol)的DMF(4mL)溶液中加入DIEA(46mg,0.36mmol)、4-(溴甲基)-2,5-二氢呋喃-2-酮(63mg,0.36mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内40.0％直到48.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至40.0％)；检测器,UV254/220nm。这得到15.5mg(13％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-[甲基[(5-氧代-2,5-二氢呋喃-3-基)甲基]氨基]哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝655.2,R_T＝1.91min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝9.2Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.09(t,1H,J＝73.2Hz),6.04(s,1H),5.24-5.22(m,2H),4.86(d,2H,J＝1.2Hz),4.39-3.37(m,1H),4.01-3.93(m,1H),3.47(s,2H),3.10-3.01(m,1H),2.67-2.62(m,2H),2.20(s,3H),1.76-1.73(m,2H),1.56-1.42(m,1H),1.40-1.29(m,1H).

实施例353

3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(200mg,0.35mmol)的DMF(4mL)溶液中加入3-(哌嗪-1-基)丙酸乙酯盐酸盐(90mg,0.40mmol)、DIEA(179.25mg,1.39mmol)、HATU(158.20mg,0.42mmol)。将得到的溶液在室温搅拌6h。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用10％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到270mg(粗品)3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸乙酯，为黄色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝631.2,R_T＝0.66min.

向3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸乙酯(270mg,0.43mmol)的乙醇(10mL)溶液中加入KOH(200mg,3.56mmol)和水(4mL)。将得到的溶液在室温搅拌1h，并用1N HCl溶液中和。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(Prep-HPLC-005):柱,XBridge Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内27.0％直到35.0％,1min内直到95.0％,保持95.0％1min,在2min内下降至27.0％)；检测器,UV 254/220nm。这得到31.5mg(11％)3-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-乙酰基)哌嗪-1-基]丙酸的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝603.1,R_T＝0.81min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.4,7.0Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.0Hz),7.08(t,1H,J＝73.6Hz),5.24(s,1H),3.50-3.47(m,4H),2.57(t,2H,J＝7.2Hz),2.49-2.39(m,6H).

实施例354

(3R,4R)-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(600mg,1.482mmol)的1,2-二氯乙烷(15mL)溶液中加入Yb(OTf)₃(300mg,0.484mmol)、7-氧杂-3-氮杂二环[4.1.0]庚烷-3-甲酸叔丁酯(1.20g,6.02mmol)。将得到的混合物在65℃搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(4/1)洗脱。将区域异构体/立体异构体混合物(500mg)用Chiral-Prep-HPLC采用下列条件分离:柱,Phenomenex Lux 5u Cellulose-AXIA Packed 250*21.2mm,5um；；流动相，流动相A:己烷,流动相B:乙醇；流速:20mL/min；梯度:在28min内35B至35B；RT 1:10；RT 2:13；检测器,254/220nm.获得30mg产物，Alpha(25degree C,Hex:EtOH＝60:40)，得到31.3mg(3.5％)(3R,4R)-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯，为固体。(该单一异构体是采用上述条件的Chiral-HPLC中的第一个峰)。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝604.3,R_T＝2.08min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(dd,1H,J＝1.4,6.9Hz),8.69-8.66(m,2H),8.40(s,1H),7.70(d,1H,J＝2.4Hz),7.55(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.40(d,1H,J＝8.7Hz),7.21(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),6.59(t,1H,J＝73.7Hz),4.37-4.03(m,4H),3.03(m,1H),2.15(m,1H),1.59(m,2H),1.52(m,9H).

实施例355

(3S,4S)-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯

(该单一异构体是采用上述条件的Chiral-HPLC中的第二个峰)，得到30.5mg(3.5％)(3S,4S)-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-3-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯，为固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝604.3,R_T＝2.08min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.69-8.66(m,2H),8.40(s,1H),7.71(s,1H),7.55(d,1H,J＝8.4Hz),7.40(d,1H,J＝8.4Hz),7.26-7.22(m,1H),6.59(t,1H,J＝73.5Hz),4.37-4.03(m,4H),3.03(m,1H),2.15(m,1H),1.59(m,2H),1.52(m,9H).

实施例356

(3R,4R)-3-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯

(该单一异构体是采用上述条件的Chiral-HPLC中的第三个峰)，得到24.8mg(2.8％)(3R,4R)-3-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯，为固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝604.3,R_T＝2.08min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.69-8.65(m,2H),8.38(s,1H),7.69(s,1H),7.55(d,1H,J＝7.8Hz),7.39(d,1H,J＝8.7Hz),7.25-7.22(m,1H),6.83(t,1H,J＝73.5Hz),4.38-4.35(m,1H),4.25-4.15(m,2H),4.01-3.93(m,1H),2.97(m,1H),2.77(m,1H),2.17-2.13(m,2H),1.53(m,9H).

实施例357

(3S,4S)-3-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯

(该单一异构体是采用上述条件的Chiral-HPLC中的第四个峰)，得到24.9mg(2.8％)(3S,4S)-3-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯，为固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝604.3,R_T＝2.08min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.69-8.65(m,2H),8.38(s,1H),7.69(s,1H),7.55(d,1H,J＝8.4Hz),7.42-7.39(d,1H,J＝8.1Hz),7.25-7.22(m,1H),6.58(t,1H,J＝73.5Hz),4.38-4.35(m,1H),4.25-4.15(m,2H),4.01-3.93(m,1H),2.97(m,1H),2.77(m,1H),2.15-2.14(m,2H),1.53(m,9H).

实施例358

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3R,4R)-3-羟基哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(假定的)

将来自实施例357手性分离的第一峰(20mg,0.033mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(4m)的混合物在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到18mg(100％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3R,4R)-3-羟基哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐(假定的)，为固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝504.2,R_T＝1.38min.¹HNMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.67-8.65(m,2H),8.44(s,1H),7.71(d,1H,J＝2.4Hz),7.56(dd,1H,J＝2.5,8.8Hz),7.40(d,1H,J＝9Hz),7.21(dd,1H,J＝4.4,7.1Hz),6.85(t,1H,J＝73.4Hz),4.45-4.43(m,1H),4.28-4.23(m,1H),3.77-3.50(m,4H),2.32-2.27(m,1H),1.91-1.86(m,1H).

实施例359

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3S,4S)-3-羟基哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(假定的)

将来自实施例357手性分离的第二峰(实施例358)和饱和HCl二氧六环溶液(4mL)的混合物在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到20mg(86％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3S,4S)-3-羟基哌啶-4-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐(假定的)，为黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝504.2,R_T＝1.71min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.10(d,1H,J＝6.9Hz),8.66-8.64(m,2H),8.43(s,1H),7.71(d,1H,J＝2.7Hz),7.55(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.39(d,1H,J＝9.0Hz),7.21(dd,1H,J＝4.1,6.9Hz),6.60(t,1H,J＝73.4Hz),4.47-4.44(m,1H),4.28-4.21(m,1H),3.77-3.50(m,4H),2.31-2.26(m,1H),1.93-1.82(m,1H).

实施例360

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3R,4R)-4-羟基哌啶-3-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(假定的绝对的)

将来自实施例357手性分离的第三峰(实施例359)(20mg,0.033mmol)和饱和HCl二氧六环溶液的混合物在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到11.3mg(63％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3R,4R)-4-羟基哌啶-3-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐，为固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝504.2,R_T＝1.38min.¹HNMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.12(d,1H,J＝6.0Hz),8.73-8.66(m,2H),8.41(s,1H),7.69(d,1H,J＝1.5Hz),7.57(dd,1H,J＝2.4,8.7Hz),7.42(d,1H,J＝5.7Hz),7.23(dd,1H,J＝4.4,7.1Hz),6.62(t,1H,J＝73.4Hz),4.46-4.4.28(m,2H),3.69-3.61(m,2H),3.26(m,1H),3.11-3.04(m,1H),2.72-2.24(m,2H).

实施例361

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3S,4S)-4-羟基哌啶-3-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将来自实施例357的第四峰(实施例360)(26mg)和饱和HCl二氧六环溶液(4mL)的混合物在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到22.4mg(96％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(3S,4S)-4-羟基哌啶-3-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐，为黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝504.2,R_T＝1.73min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.08(d,1H,J＝7.2Hz),8.64-8.63(m,2H),8.37(s,1H),7.65(d,1H,J＝2.1Hz),7.53(dd,1H,J＝2.1,9.0Hz),7.37(d,1H,J＝8.7Hz),7.19(dd,1H,J＝4.8,6.3Hz),6.58(t,1H,J＝73.5Hz),4.39-4.4.27(m,2H),3.74-3.40(m,2H),3.31(m,1H),3.07-3.00(m,1H),2.44-2.43(m,2H).

实施例362

2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)(吡啶-3-基甲基)氨基]乙酸乙酯

向N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(510mg,1.00mmol)的EtOH(30mL)溶液中加入三乙胺(1.01g,9.98mmol)和2-氨基乙酸乙酯盐酸盐(681mg,4.88mmol)。将得到的溶液在80℃搅拌24h。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到420mg(79％)2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基]乙酸乙酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝534.0,R_T＝1.18min.

向2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基]乙酸乙酯(420mg,0.79mmol)的EtOH(30mL)溶液中加入AcOH(0.1mL,1.75mmol)、吡啶-3-甲醛(126mg,1.18mmol)。将混合物在室温搅拌3h，加入NaBH₃CN(99mg,1.58mmol)。将得到的溶液在60℃搅拌12h。将固体滤除。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用3％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(100mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-2):柱，C₁₈硅胶；流动相，在12min内CH₃CN:H₂O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝24:40；检测器,UV 254nm.获得26mg产物。这得到25.6mg(5％)2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-乙基)(吡啶-3-基甲基)氨基]乙酸乙酯，为类白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝625.3,R_T＝1.68min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.35(d,1H,J＝6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.39-8.37(m,3H),7.63-7.61(m,2H),7.51(s,1H),7.43(d,1H,J＝8.8Hz),7.31-7.25(m,2H),7.04(t,1H,J＝73.6Hz),4.30-4.27(m,2H),4.07(q,2H,J＝6.8Hz),3.82(s,2H),3.44(s,2H),3.15-3.11(m,2H),1.17(t,3H,J＝7.2Hz).

实施例363

2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)(吡啶-3-基甲基)氨基]乙酸

将2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)(吡啶-3-基甲基)氨基]乙酸乙酯(180mg,0.29mmol)、乙醇(10mL)和1N氢氧化钠(2mL)混合物在室温搅拌30min。将混合物用1HCl酸化至pH 5。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物(200mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱，C18硅胶；流动相，在12min内CH3CN:H2O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝24:40；检测器,UV254nm.获得8.6mg产物。这得到8.6mg(5％)2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)(吡啶-3-基甲基)氨基]乙酸甲酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝597.2,R_T＝2.72min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.72(s,1H),9.34(d,1H,J＝7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.39-8.37(m,3H),7.63-7.60(m,2H),7.51(d,1H,J＝2.1Hz),7.43(d,1H,J＝9.0Hz),7.32-7.22(m,2H),6.99(t,1H,J＝73.2Hz),4.33-4.22(m,2H),3.83(s,2H),3.334(s,2H),3.15-3.07(m,2H).

实施例364

2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基]乙酸乙酯

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(665mg,1.44mmol)的DMF(7mL)溶液中加入N-(哌啶-4-基)氨基甲酸叔丁酯(300mg,1.50mmol)、三乙胺(700mg,6.92mmol)、HATU(670g,2.78mol)。将得到的溶液在室温搅拌1.5h。加入EtOAc(100mL)和水(50mL)。分离各相。将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷(1/1)洗脱。这得到600mg(65％)N-[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯，为黄色固体。TLC:R_f＝0.3；乙酸乙酯/石油醚＝1/1.

将TFA(2.0mL,26.93mmol)加至N-[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基甲酸叔丁酯(600mg,0.93mmol)的二氯甲烷(8mL)溶液中。将得到的溶液室温搅拌2h并在真空下浓缩。将残留物溶解在乙酸乙酯(100mL)中，并加入饱和NaHCO₃(50mL)。分离各相。将有机层用饱和NaHCO₃、盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到450mg(89％)N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。TLC:R_f＝0.3；MeOH/DCM＝1/5.

向N-[1-[2-(4-氨基哌啶-1-基)-2-氧代乙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(126mg,0.24mmol)的DMF(3mL)溶液中加入碳酸钾(76mg,0.55mmol)、2-溴乙酸乙酯(0.03mL,0.27mmol)。将得到的混合物在25℃搅拌1h，并用100mL乙酸乙酯稀释。加入水(50mL)。分离各相。将有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗产物通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱:Xbridge C18,19*150mm,5um；流动相A:水/0.05％NH₄HCO₃,流动相B:ACN；流速:30mL/min；梯度:在10min内20％B至85％B；254nm。这得到29.3mg(98％)2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基]乙酸乙酯，为白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝631.2,R_T＝1.89min.¹H NMR(400MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)8.98(d,1H,J＝6.8Hz),8.53-8.52(m,2H),8.25(s,1H),7.58(d,1H,J＝2.4Hz),7.44(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.29(d,1H,J＝8.8Hz),7.09(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),6.51(t,1H,J＝73.6Hz),5.20-5.13(m,2H),4.32(d,1H,J＝13.2Hz),4.07(q,2H,J＝7.2Hz),3.91(d,1H,J＝13.2Hz),3.36(s,2H),3.21-3.09(m,1H),2.78-2.68(m,2H),1.94-1.83(m,2H),1.34-1.22(m,2H),1.16(t,3H,J＝7.2Hz).

实施例365

2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基]乙酸

将2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基]氨基]--乙酸乙酯(200mg,0.32mmol)、KOH(100mg,1.78mmol)的甲醇(5mL)混合物在25℃搅拌12h。将粗产物通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱:Xbridge C₁₈,19*150mm,5um；流动相A:水/0.05％NH₄HCO₃,流动相B:ACN；流速:30mL/min；梯度:在10min内20％B至85％B；254nm。这得到28.5mg(15％)2-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-乙酰基)哌啶-4-基]氨基]乙酸，为白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝603.1,R_T＝1.39min.¹H NMR(400MHz,CD3OD-d₄)δ:(ppm)8.98(dd,1H,J＝1.2,6.8Hz),8.54-8.53(m,2H),8.24(s,1H),7.57(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.30(d,1H,J＝8.8Hz),7.09(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),6.70(t,1H,J＝73.4Hz),5.23-5.10(m,2H),4.54(d,1H,J＝13.2Hz),4.05(d,1H,J＝13.6Hz),3.45(s,2H),3.30-3.11(m,4H),2.71-2.65(m,1H),2.11-2.05(m,1H),1.58-1.43(m,2H).

实施例366

2-(4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-基)乙酸乙酯

向4-羟基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g,4.97mmol)的DCM(50mL)溶液中加入DIEA(2.00g,15.47mmol)、4-二甲基氨基吡啶(10mg,0.08mmol)和MsCl(862mg,7.53mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h，用水和盐水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1/1)洗脱。这得到860mg(62％)4-(甲磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝224.0,R_T＝1.42min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(500mg,1.24mmol)的MeCN(50mL)溶液中加入Cs₂CO₃(1.21g,3.71mmol)、4-(甲磺酰基氧基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(828mg,2.96mmol)。将得到的溶液在80℃搅拌18h。滤除固体。将滤液在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用2％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到1.1g(粗品)4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝588.0,R_T＝1.17min.

将来自前面步骤的粗产物4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.1g)和饱和HCl二氧六环溶液(20mL)的混合物在室温搅拌8h。将得到的混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在乙醇(20mL)中，并用2N NaOH中和至pH～8。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用15％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到320mg(35％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(哌啶-4-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(320mg,0.66mmol)的乙醇(20mL)溶液中加入50％2-氧代乙酸乙酯水合物(268mg,1.31mmol)、AcOH(0.1mL,1.75mmol)和NaBH₃CN(83mg,1.32mmol)。将得到的溶液在60℃搅拌12h并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用2％MeOH的DCM溶液洗脱。使粗产物(100mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱,硅胶；流动相，在12min内CH₃CN:H₂O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝55:75；检测器,UV 254nm。获得25.3mg产物。这得到25.3mg(7％)2-(4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]哌啶-1-基)乙酸乙酯，为类白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝574.2,R_T＝2.70min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.36(s,1H),8.69-8.67(m,2H),8.36(s,1H),7.63-7.25(m,5H),4.25-4.23(m,1H),4.13-4.10(m,2H),3.28-3.27(m,2H),3.01-2.98(m,2H),2.42-2.40(m,2H),2.12-1.98(m,4H),1.25-1.20(m,3H).

实施例367

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[(1,3-噁唑-2-基甲基)氨基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.22mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入1,3-噁唑-2-甲醛(21.7mg,0.22mmol)，随后加入NaBH₃CN(16mg,0.25mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(2#-AnalyseHPLC-SHIMADZU(HPLC-10)):柱,XBridge BEH130 Prep C18 OBD柱,19&#65533；100mm 5um 13nm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和ACN(在6min内20％ACN直到50％)；检测器,UV 254/220nm。获得52.7mg产物。这得到52.7mg(45％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[(1,3-噁唑-2-基甲基)氨基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝529.2,R_T＝2.42min.¹H NMR(300MHz,CD₃OD-d₄)δ:(ppm)9.08(dd,1H,J＝1.7,7.1Hz),8.66-8.63(m,2H),8.34(s,1H),7.87(d,1H,J＝0.6Hz),7.67(d,1H,J＝2.7Hz),7.53(dd,1H,J＝2.4,8.7Hz),7.38(d,1H,J＝8.7Hz),7.19(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.13(d,1H,J＝0.6Hz),6.55(t,1H,J＝73.5Hz),4.33(t,2H,J＝6.0Hz),3.95(s,2H),3.14(t,2H,J＝6.0Hz).

实施例368

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[(吡啶-3-基甲基)氨基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(150mg,0.29mmol)和吡啶-3-基甲胺(158mg,1.46mmol)的MeCN(3mL)混合物在70℃搅拌12h。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-2):柱，C₁₈硅胶；流动相，在12min内CH₃CN:H₂O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝30:42；检测器,UV 254nm。这得到57.7mg(37％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[(吡啶-3-基甲基)氨基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝539.1,R_T＝0.87min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.50(d,1H,J＝1.8Hz),8.41(dd,1H,J＝1.5,4.8Hz),8.38(s,1H),7.73-7.70(m,1H),7.61(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.59(d,1H,J＝2.4Hz),7.43(d,1H,J＝8.7Hz),7.33-7.28(m,2H),6.99(t,1H,J＝73.2Hz),4.24(t,2H,J＝6.0Hz),3.75-3.72(m,2H),3.01-2.94(m,2H),2.27(br,1H).

实施例369

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-(甲基氨基)丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向(2S)-2-氨基丙-1-醇(1.0g,13.31mmol)的MeOH(30mL)溶液中加入4-甲氧基苯甲醛(1.8g,13.22mmol)。然后加入NaBH₃CN(600mg)。将得到的溶液在室温搅拌12h。滤除固体。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到2.1g(粗品)(2S)-2-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]丙-1-醇，为浅黄色油状物。LCMS(方法27)[M+H]⁺＝196.0,R_T＝0.95min.

向(2S)-2-[[(4-甲氧基苯基)甲基]氨基]丙-1-醇(2.1g,10.75mmol)和37％甲醛(900mg)的甲醇(50mL)溶液中加入AcOH(0.1mL,1.75mmol)和NaBH₃CN(1.8g,28.64mmol)。将得到的溶液在室温搅拌5h，用水(10mL)猝灭并在真空下浓缩。将残留物溶解在二氯甲烷(100mL)中，用水和盐水洗涤。将有机相用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用10％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到1.0g(44％)(2S)-2-[[(4-甲氧基苯基)甲基](甲基)氨基]丙-1-醇，为无色油状物。LCMS(方法21)[M+H]⁺＝210.0,R_T＝0.92min.

在0℃将MsCl(250mg,2.18mmol)滴加加至搅拌的(2S)-2-[[(4-甲氧基苯基)甲基](甲基)氨基]丙-1-醇(400mg,1.91mmol)和DIEA(516mg,3.99mmol)的DCM(15mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌5h并用水(50mL)猝灭。分离各相。将水相用DCM(x2)萃取，并合并有机层。将有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到510mg(粗品)[(2S)-1-氯丙-2-基][(4-甲氧基苯基)甲基]甲基胺，为浅红色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝228.0,R_T＝0.55min.

将20-mL微波管填装N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-甲酰胺(400mg,0.99mmol)、Cs₂CO₃(652mg,2.00mmol)、DMF(10mL)和[(2S)-1-氯丙-2-基][(4-甲氧基苯基)甲基]甲基胺(454mg,1.99mmol)。将管抽真空并再填充氮气3次。将终反应混合物用微波在120℃辐射30min。然后通过加入50mL水将反应猝灭。将得到的溶液用二氯甲烷(x2)萃取，并合并有机层。并将有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(1:1)洗脱。这得到420m N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-[[(4-甲氧基苯基)甲基](甲基)氨基]丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺和N-[5-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-[[(4-甲氧基苯基)甲基](甲基)氨基]丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺混合物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝596.0,R_T＝0.81min.

向来自前面步骤的区域异构体混合物(200mg)的CH₃CN(20mL)溶液中加入氯(1-氯乙氧基)甲酮(240mg,1.68mmol)。将得到的溶液在80℃搅拌5h。将得到的混合物在真空下浓缩并用20mL甲醇溶解。将得到的溶液在80℃搅拌12h并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(120mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(3#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在8min内26.0％MeCN直到40.0％)；检测器,254/220.获得含有主要异构体的两份级分(36.3mg)，为标题化合物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝476.2,R_T＝2.53min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.68-8.66(m,2H),8.33(s,1H),7.65-7.61(m,2H),7.43(d,1H,J＝7.2Hz),7.27(dd,1H,J＝4.5,7.2Hz),6.97(t,1H,J＝73.5Hz),4.11(dd,1H,J＝6.3,13.5Hz),4.01(dd,1H,J＝6.0,13.5Hz),2.97-2.91(m,1H),2.29(s,3H),1.76(br,1H),0.95(d,3H,J＝6.3Hz).

实施例370

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-(二甲基氨基)丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[1-[(2S)-2-氨基丙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(170mg,0.37mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入37％甲醛溶液(16.6mg,0.55mmol)、NaBH₃CN(23.3mg,0.37mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用10％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(80mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH PrepC18OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和MeCN(在8min内20.0％MeCN直到35.0％)；检测器,254/220。这得到29mg(16％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-(二甲基氨基)丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法10)[M+H]⁺＝490.1,R_T＝0.84min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.66(m,2H),8.34(s,1H),7.61(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.60(d,1H,J＝2.1Hz),7.44(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.5,7.2Hz),6.99(t,1H,J＝73.5Hz),4.22(dd,1H,J＝7.2,13.8Hz),4.02(dd,1H,J＝6.9,13.8Hz),3.20-3.18(m,1H),2.22(s,6H),0.88(d,3H,J＝6.6Hz).

实施例371

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-(乙基氨基)丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[1-[(2S)-2-氨基丙基]-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.43mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入乙醛(48mg,40％水溶液)和NaBH₃CN(32.7mg,0.52mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(60mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(3#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和MeCN(在8min内26.0％MeCN直到40.0％)；检测器,254/220。获得24.2mg产物。这得到24.2mg(11％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2S)-2-(乙基氨基)丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝490.1,R_T＝0.86min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.68-8.67(m,2H),8.34(s,1H),7.64(d,1H,J＝2.1Hz),7.60(dd,1H,J＝2.8,8.4Hz),7.44(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.0,7.2Hz),7.04(t,1H,J＝73.2Hz),4.11(dd,1H,J＝6.0,13.6Hz),4.01(dd,1H,J＝6.2,13.6Hz),3.08-3.00(m,1H),2.68-2.50(m,2H),1.52(br,1H),0.97(t,3H,J＝7.0Hz),0.95(d,3H,J＝6.4Hz).

实施例372

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(甲基硫烷基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.00g,5.37mmol)的DMF(30mL)溶液中加入1-氯-2-(甲基硫烷基)乙烷(710mg,6.42mmol)、Cs₂CO₃(2.6g,7.98mmol)。将得到的混合物在50℃搅拌12h。加入水(50mL)和EtOAc(30mL)。分离各相。将水相用乙酸乙酯(x2)萃取，并合并有机层。将有机相用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1:2)洗脱。这得到180mg(13％)4-[2-(甲基硫烷基)乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝261,R_T＝0.63min.

将4-[2-(甲基硫烷基)乙基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(180mg,0.69mmol)的DCM(5mL)和三氟乙酸(10mL)的混合物在室温搅拌12h。将得到的混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在5mL二氧六环-HCl中。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到120mg(88％)1-[2-(甲基硫烷基)乙基]哌嗪盐酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝161.1,R_T＝0.21min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(120mg,0.26mmol)的DMF(10mL)溶液中加入1-[2-(甲基硫烷基)乙基]哌嗪盐酸盐(102mg,0.52mmol)、HATU(119mg,0.31mmol)、DIEA(168mg,1.30mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h。加入水(50mL)。将得到的溶液用DCM(x3)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗产物(150mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mmol NH₄HCO₃的水和MeCN(在8min内20.0％MeCN直到35.0％)；检测器,254/220。这得到44.2mg(28％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(甲基硫烷基)乙基]-哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]-吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝605.2,R_T＝1.61min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.50-3.47(m,4H),2.67-2.56(m,4H),2.2.47-2.33(m,4H),2.08(s,3H).

实施例373

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(丙-2-基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.32mmol)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(126mg,0.97mmol)、1-(丙-2-基)哌嗪(126mg,0.98mmol)和HATU(185mg,0.49mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物(200mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱，C18硅胶；流动相，在14min内CH3CN:H2O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝40:60；检测器,UV254nm。这得到51.6mg(28％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(丙-2-基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝573.2,R_T＝1.80min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,9.0Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.52-3.48(m,4H),2.78-2.65(m,1H),2.46-2.39(m,4H),1.09-0.97(d,6H,J＝6.6Hz).

实施例374

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(83mg,0.64mmol)、1-(环丙基甲基)哌嗪(60.6mg,0.43mmol)和HATU。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物(120mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱，C₁₈硅胶；流动相，在14min内CH₃CN:H₂O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝24:40；检测器,UV 254nm。这得到47.6mg(38％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(环丙基甲基)哌嗪-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝585.2,R_T＝2.40min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.51-3.49(m,4H),2.49-2.41(m,4H),2.23-2.21(m,2H),0.87-0.82(m,1H),0.50-0.44(m,2H),0.13-0.08(m,2H).

实施例375

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg,2.50mmol)的EtOH(20mL)溶液中加入37％甲醛水溶液(405mg)和AcOH(0.02mL,0.35mmol)。将混合物搅拌2h，并加入NaBH₃CN(315mg,5.01mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到430mg(80％)2,4-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为无色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝215.0,R_T＝1.45min.

将2-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯(430mg,2.15mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的混合物在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到520mg(粗品)1,3-二甲基哌嗪盐酸盐，为浅黄色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝115.0,R_T＝0.25min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.32mmol)的DMF(10mL)溶液中加入DIEA(209mg,1.62mmol)、1,3-二甲基哌嗪盐酸盐(146mg,0.97mmol)和HATU(16mg,0.04mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)和DCM(30mL)。分离各相。将水相用DCM萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-2):柱，C18硅胶；流动相，在12min内CH₃CN:H₂O＝5:95增加至CH₃CN:H₂O＝24:40；检测器,UV 254nm。这得到59.1mg(33％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝559.2,R_T＝1.63min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.34-8.31(m,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.31-5.11(m,2H),4.52-4.47(m,0.5H),4.20-4.11(m,1H),3.78-3.69(m,0.5H),3.32-3.21(m,0.5H),2.97-2.83(m,0.5H),2.75(d,1H,J＝11.1Hz),2.63(d,1H,J＝11.4Hz),2.20-1.71(m,5H),1.38-1.12(m,3H).

实施例376

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(3,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的方法，由3-甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯制备标题化合物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝559.2,R_T＝2.23min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5Hz,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.35-5.13(m,2H),4.18-4.02(m,1H),3.86-3.78(m,1H),3.26-3.10(m,1H),2.84-2.73(m,2H),2.26-1.91(m,5H),1.01(d,3H,J＝6.0Hz).

实施例377

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(2,2,4-三甲基哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的方法，由2,2-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯制备标题化合物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝573.2,R_T＝0.97min.¹HNMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.2,6.9Hz),8.69-8.68(m,2H),8.27(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.56(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.5,6.9Hz),7.03(t,1H,73.1Hz),5.17(s,2H),3.48-3.42(m,2H),2.28-2.22(m,2H),2.17(s,3H),2.08(s,2H),1.39(s,6H).

实施例378

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(3,3,4-三甲基哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(2,4-二甲基哌嗪-1-基)-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的方法，由3,3-二甲基哌嗪-1-甲酸叔丁酯制备标题化合物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝573.2,R_T＝2.51min.¹HNMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.33(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.1Hz),7.45(d,1H,J＝9.0Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.26(s,1H),5.17(s,1H),3.51-3.48(m,2H),3.22(d,2H,J＝11.4Hz),2.45-2.36(m,2H),2.13(s,3H),0.99(s,3H),0.92(s,3H).

实施例379

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(100mg,0.22mmol)的DMF(10mL)溶液中加入二甲基[2-(哌嗪-1-基)乙基]胺(68mg,0.43mmol)、DIEA(125mg,0.97mmol)和HATU(123mg,0.32mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜，并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(2#-AnalyseHPLC-SHIMADZU(HPLC-10)):柱,XBridge BEH130 Prep C18 OBD柱,19&#65533；100mm 5um 13nm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和ACN(在6min内15％ACN直到40％)；检测器,UV 254/220nm。这得到79.1mg(61％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[2-(二甲基氨基)乙基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝602.2,R_T＝0.89min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.7,7.1Hz),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝9.0Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.48-3.42(m,4H),2.45-2.32(m,8H),2.13(s,6H).

实施例380

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(1,3-噁唑-2-基甲基)哌嗪-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg,1.61mmol)的MeOH(15mL)溶液中加入1,3-噁唑-2-甲醛(172mg,1.77mmol)、AcOH(0.01mL,0.17mmol)和NaBH₃CN(152mg,2.42mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到480mg(89％)4-(1,3-噁唑-2-基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为无色油状物。TLC:R_f＝0.4；MeOH/DCM＝1/10.

将4-(1,3-噁唑-2-基甲基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(480mg,1.44mmol)饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的混合物在室温搅拌3h。这得到300mg(82％)1-(1,3-噁唑-2-基甲基)哌嗪盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝168.0,R_T＝0.32min.

向2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酸(100mg,0.22mmol)的DMF(10mL)溶液中加入1-(1,3-噁唑-2-基甲基)哌嗪盐酸盐(132mg,0.65mmol)、HATU(123mg,0.32mmol)、DIEA(139mg,1.08mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)和DCM(30mL)。分离各相。将水相用DCM(x2)萃取，并合并有机层。将有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。将粗产物(150mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(2#-AnalyseHPLC-SHIMADZU(HPLC-10)):柱,XBridge BEH130Prep C18 OBD柱,19&#65533；100mm 5um 13nm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和ACN(在6min内28％ACN直到38％)；检测器,UV 254/220nm。这得到68.2mg(52％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(1,3-噁唑-2-基甲基)哌嗪-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝612.1,R_T＝1.70min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.7,7.1Hz),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),8.09(d,1H,J＝0.6Hz),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝9.0Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.18(d,1H,J＝0.6Hz),7.01(t,1H,J＝73.2Hz),5.23(s,2H),3.76(s,2H),3.54-3.48(m,4H),2.45-2.42(m,4H).

实施例381

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在0℃将甲磺酰氯(2.5g,21.8mmol)滴加至搅拌的N-(2-羟基乙基)氨基甲酸叔丁酯(3.0g,18.61mmol)和DIEA(7.2g,55.71mmol)的DCM(50mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌8h。然后通过加入100mL碳酸氢钠将反应猝灭。分离各相。将水相用DCM(x2)萃取，并合并有机层。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1:2)洗脱。这得到3.4g(76％)N-[2-(甲磺酰基氧基)-乙基]氨基甲酸叔丁酯，为红色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝225.0,R_T＝0.77min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.00g,2.47mmol)的CH₃CN(30mL)溶液中加入Cs₂CO₃(2.00g,6.14mmol)和N-[2-(甲磺酰基氧基)-乙基]氨基甲酸叔丁酯(1.20g,5.01mmol)。将得到的溶液在70℃搅拌过夜。滤除固体。将滤液在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用DCM/EtOAc(3:1)洗脱。这得到680mg(50％)N-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)吡啶-3-基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝548.0,R_T＝1.33min

将N-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基甲酸叔丁酯(420mg,0.77mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(10mL)的混合物在室温搅拌3h。将得到的混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在15mL乙醇中。用氢氧化钠(2mol/L)将溶液的pH值调节至8。将得到的混合物在真空下浓缩。用二氯甲烷/甲醇(85/15)将残留物施用至硅胶柱。这得到260mg(76％)N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝448.0,R_T＝0.76min.

向N-[1-(2-氨基乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.45mmol)的CH3CN(20mL)溶液中加入三氟甲磺酸(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲酯(166mg,0.67mmol)和DIEA(173mg,1.34mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(100mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSHPrep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在8min内24.0％MeCN直到40.0％)；检测器,254/220。获得31.6mg产物。这得到32mg(12％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]-氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝546.1,R_T＝0.82min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.68-8.66(m,2H),8.31(s,1H),7.64-7.62(m,2H),7.44(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),4.56-4.53(m,1H),4.23(t,2H,J＝6.4Hz),3.01(t,2H,J＝6.0Hz),2.77-2.75(m,2H),2.48-2.44(m,2H),2.19-2.16(m,1H),1.92-1.88(m,1H).

实施例382

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-氧代-2-[4-[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]哌嗪-1-基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在搅拌下、-5℃，将纯净的三氟甲磺酸酐Tf₂O(486mg,1.72mmol)滴加加入5-(羟基甲基)氧杂环戊-2-酮(200mg,1.72mmol)和DIEA(665mg,5.15mmol)的DCM(20mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌3h，并用饱和NaHCO₃溶液(50mL)猝灭。将得到的溶液用DCM(x2)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到280mg(粗品)三氟甲磺酸(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲酯，为黄色液体。TLC:R_f＝0.5；乙酸乙酯/石油醚＝1/2.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(哌嗪-1-基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.19mmol)的CH₃CN(15mL)溶液中加入DIEA(73.03mg,0.57mmol)和三氟甲磺酸(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲酯(93.49mg,0.38mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h，搅拌3h并在真空下浓缩。将粗产物(180mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(2#-AnalyseHPLC-SHIMADZU(HPLC-10)):柱,XBridge BEH130 Prep C18OBD柱,19&#65533；100mm 5um 13nm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和ACN(在6min内30％ACN直到40％)；检测器,UV 254/220nm。获得65mg产物。用5％MeOH的DCM溶液将残留物施用至硅胶柱。这得到29.5mg N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-氧代-2-[4-[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]哌嗪-1-基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]-嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝629.1,R_T＝0.81min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝9.0Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),4.71-4.66(m,1H),3.50-3.33(m,4H),2.58(d,2H,J＝5.4Hz),2.60-2.46(m,6H),2.48-2.42(m,4H),2.30-2.21(m,1H),1.90-1.83(m,1H).

实施例383

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向2-[4-[(叔丁氧基)羰基]哌嗪-1-基]乙酸(500mg,2.05mmol)的DMF(20mL)溶液中加入甲胺盐酸盐(406mg,6.01mmol)、DIEA(793mg,6.14mmol)和HATU(1.17g,3.08mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h，搅拌12h。加入水(50mL)。将得到的溶液用DCM(x3)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用5％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到500mg4-[(甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝258.0,R_T＝0.52min.

将4-[(甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-甲酸叔丁酯(500mg,1.94mmol)和饱和HCl二氧六环溶液的混合物在室温搅拌3h。将得到的溶液在真空下浓缩。这得到300mg(粗品)N-甲基-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝158.0,R_T＝0.37min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.32mmol)的DMF(10mL)溶液中加入N-甲基-2-(哌嗪-1-基)乙酰胺盐酸盐(125mg,0.65mmol)、HATU(185mg,0.49mmol)、DIEA(126mg,0.97mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用8％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(180mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(3#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelectCSH Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和MeCN(在8min内26.0％MeCN直到40.0％)；检测器,254/220。这得到73.9mg(38％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(甲基氨基甲酰基)甲基]哌嗪-1-基]-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝602.2,R_T＝3.66min.¹HNMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.32(s,1H),7.75(q,1H,J＝4.8Hz),7.63(dd,1H,J＝2.6,8.6Hz),7.56(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),3.54(t,4H,J＝5.0Hz),2.95(s,2H),2.63(d,3H,J＝4.8Hz),2.48-2.45(m,2H),2.44-2.41(m,2H).

实施例384

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(1R)-1-苯基乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(100mg,0.20mmol)和(1R)-1-苯基乙-1-胺(242mg,2.00mmol)的MeCN(3mL,57.07mmol)混合物在80℃搅拌12h。将粗产物(120mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(2#-Analyse HPLC-SHIMADZU(HPLC-10)):柱,XBridge BEH130 Prep C18 OBD柱,19&#65533；100mm 5um 13nm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和ACN(在6min内40％ACN直到58％)；检测器,UV 254/220nm。这得到38mg N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(1R)-1-苯基乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝552.1,R_T＝1.16min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.72(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.34(s,1H),7.60(dd,1H,J＝2.7,9.0Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.43(d,1H,J＝8.7Hz),7.31-7.17(m,6H),6.98(t,1H,J＝73.2Hz),4.18(t,2H,J＝6.0Hz),3.70(q,1H,J＝6.6Hz),2.83-2.73(m,2H),1.22(d,3H,J＝6.6Hz).

实施例385

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(1S)-1-苯基乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(1R)-1-苯基乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的方法，由(1S)-1-苯基乙-1-胺制备标题化合物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝552.1,R_T＝1.15min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.72(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.34(s,1H),7.60(dd,1H,J＝2.9,8.9Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.43(d,1H,J＝8.7Hz),7.31-7.16(m,6H),6.98(t,1H,J＝73.2Hz),4.18(t,2H,J＝6.0Hz),3.70(q,1H,J＝6.6Hz),2.83-2.73(m,2H),1.22(d,3H,J＝6.6Hz).

实施例386

2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基]乙酸甲酯

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(1R)-1-苯基乙基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的方法，由2-氨基乙酸甲酯盐酸盐和DIEA制备标题化合物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝520.1,R_T＝0.85min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.8,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.36(s,1H),7.65-7.61(m,2H),7.44(d,1H,J＝9.3Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.00(t,1H,J＝73.5Hz),4.22(t,2H,J＝6.0Hz),3.62(s,3H),3.37(s,2H),2.98(t,2H,J＝6.0Hz),2.27(br,1H).

实施例387

(2S)-2-氨基-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]丁酸甲酯

向(2S)-2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-羟基丁酸(2.20g,10.03mmol)的DCM(80mL)溶液中加入DIEA(2.58g,19.96mmol)，随后在0℃分批加入TBDMS-Cl(1.65g,10.95mmol)。将得到的溶液在室温搅拌12h。加入水(100mL)。分离各相。将水相用DCM(x2)萃取，并合并有机层。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(4:1)洗脱。这得到800mg(2S)-2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]丁酸，为浅黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝275.0,R_T＝1.16min.

向(2S)-2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]丁酸(800mg,2.40mmol)的DCM(30mL)溶液中加入4-二甲基氨基吡啶(29mg,0.24mmol)、EDC.HCl(550mg,2.87mmol)和甲醇(5mL)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1:4)洗脱。这得到600mg(72％)(2S)-2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]丁酸甲酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝348.0,R_T＝1.21min.

将2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[(叔丁基二甲基硅烷基)氧基]丁酸甲酯(600mg,1.73mmol)的THF(2mL)、水(2mL)和AcOH(8mL,139.61mmol,80.90equiv)溶液搅拌2h。将反应混合物用饱和碳酸氢钠溶液中和，用DCM(x3)萃取，并合并有机层。合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到400mg 2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-羟基丁酸甲酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝175,R_T＝0.65min.

向搅拌的粗2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-羟基丁酸甲酯(400mg,)的DCM(20mL)溶液中加入DIEA(387mg,2.99mmol)，随后在0℃搅拌下滴加MsCl(114mg,1.00mmol)。将得到的溶液在室温搅拌3h。加入饱和NaHCO₃(50mL)。将得到的溶液用DCM(x2)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。这得到510mg(80％)2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-(甲磺酰基氧基)丁酸甲酯，为黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝212.0,R_T＝0.76min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(200mg,0.49mmol)的CH₃CN(30mL)溶液中加入Cs₂CO₃(326mg,1.00mmol)和(2S)-2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-(甲磺酰基氧基)丁酸甲酯(400mg,粗品)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。滤除固体。将滤液在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用二氯甲烷/乙酸乙酯(70/30)洗脱。这得到280mg(73％)2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]丁酸甲酯，为类白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝620.0,R_T＝0.98min.

将(2S)-2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]-丁酸甲酯(280mg)的DCM/TFA(15mL,2:1)混合物在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物(200mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在8min内24.0％MeCN直到40.0％)；检测器,254/220。获得150mg产物。这得到148.4mg(73％)(2S)-2-氨基-4-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]丁酸甲酯甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝520.1,R_T＝0.82min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.68(m,2H),8.36(s,1H),7.65-7.61(m,2H),7.45(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.01(t,1H,J＝73.2Hz),4.40-4.26(m,2H),3.64(s,3H),3.50-3.43(m,1H),2.32-2.18(m,1H),2.11-1.99(m,1H).

实施例388

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸(1-甲基哌啶-4-基)甲酯

向1-[(叔丁氧基)羰基]哌啶-4-甲酸(1.00g,4.36mmol)的DCM(50mL)溶液中加入(1-甲基哌啶-4-基)甲醇(1.13g,8.75mmol)、EDC.HCl(1.0g,5.22mmol)、4-二甲基氨基吡啶(54mg,0.44mmol)，将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)。分离各相。将水相用DCM(x2)萃取，并合并有机层。将有机层用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用6％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到1.2g哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-(1-甲基哌啶-4-基)甲酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝341.0,R_T＝0.58min.

将哌啶-1,4-二甲酸1-叔丁酯4-(1-甲基哌啶-4-基)甲酯(1.2g,3.52mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的混合物在室温搅拌过夜。将得到的溶液在真空下浓缩。这得到1.5g(粗品)哌啶-4-甲酸(1-甲基哌啶-4-基)甲酯盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝241.0,R_T＝0.19min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(150mg,0.32mmol)的DMF(10mL)溶液中加入哌啶-4-甲酸(1-甲基哌啶-4-基)甲酯盐酸盐(178mg,0.64mmol)、DIEA(126mg,0.97mmol)、HATU(160mg,0.42mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)。将得到的溶液用DCM(x3)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用8％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(80mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(3#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C₁₈ OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在8min内32.0％MeCN直到50.0％)；检测器,254/220。这得到37mg(16％)1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸(1-甲基哌啶-4-基)甲酯的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝685.2,R_T＝1.05min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d6)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.35(dd,1H,J＝1.2,6.8Hz),8.69-8.68(m,2H),8.32(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.4,7.2Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.36-5.18(m,2H),4.28-4.21(m,1H),3.96-3.88(m,3H),3.25-3.12(m,1H),2.86-2.74(m,3H),2.73-2.66(m,1H),2.15(s,3H),1.92-1.83(m,4H),1.65-1.52(m,4H),1.48-1.38(m,1H),1.29-1.16(m,2H).

实施例389

1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)-4-甲基哌啶-4-甲酸(1-甲基哌啶-4-基)甲酯

采用与1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-甲酸(1-甲基哌啶-4-基)甲酯的合成方法类似的方法，由1-[(叔丁氧基)羰基]-4-甲基哌啶-4-甲酸制备标题化合物。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝699.2,R_T＝0.95min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.68(m,2H),8.31(s,1H),7.63(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.55(d,1H,J＝2.8Hz),7.46(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),3.99-3.96(m,2H),3.94-3.88(m,1H),3.78-3.71(m,1H),3.26-3.20(m,1H),3.08-3.00(m,1H),2.85-2.80(m,2H),2.20(s,3H),2.02-1.94(m,4H),1.68-1.59(m,4H),1.54-1.48(m,1H),1.41-1.34(m,1H),1.28-1.23(m,2H),1.18(s,3H).

实施例390

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[甲基[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(140mg,0.26mmol)的MeOH(20mL)溶液中加入37％甲醛的水溶液(23mg)，随后加入NaBH₃CN(24.6mg,0.39mmol)。将得到的溶液在室温搅拌3h。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用8％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(60mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在8min内18.0％MeCN直到36.0％)；检测器,254/220。这得到22.4mg N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[甲基[(5-氧代氧杂环戊-2-基)甲基]氨基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的甲酸盐，为白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝560.2,R_T＝0.94min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.69-8.67(m,2H),8.38(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.60(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.29(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.08(t,1H,J＝73.2Hz),4.59-4.55(m,1H),4.30-4.27(m,2H),2.94-2.88(m,2H),2.62(d,2H,J＝5.6Hz),2.44-2.41(m,2H),2.32(s,3H),2.14-2.11(m,1H),1.83-1.77(m,1H).

实施例391

3-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基](甲基)氨基]丙酸乙酯

向4-(甲基氨基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g,4.67mmol)的乙醇(50mL)溶液中加入AcOH(0.1mL,1.75mmol)和3-氧代丙酸乙酯(1.63g,14.04mmol)。将混合物在室温搅拌5h，并加入NaBH₃CN(882mg,14.04mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用4％MeOH的DCM溶液洗脱。这得到580mg 4-[(3-乙氧基-3-氧代丙基)(甲基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为无色油状物。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝315.0,R_T＝1.14min.

将4-[(3-乙氧基-3-氧代丙基)(甲基)氨基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(580mg,1.84mmol)和饱和HCl二氧六环溶液的混合物在室温搅拌3h。将得到的混合物在真空下浓缩。将残留物用EtOAc研磨。通过过滤收集固体。这得到200mg(粗品)3-[甲基(哌啶-4-基)氨基]丙酸乙酯盐酸盐，为类白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝215.0,R_T＝0.45min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg,0.22mmol)的DMF(10mL)溶液中加入HATU(123mg,0.32mmol)、DIEA(83mg,0.64mmol)和3-[甲基(哌啶-4-基)氨基]丙酸乙酯盐酸盐(200mg)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)。将得到的混合物用DCM(x3)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗产物(82mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(18.0％在8min内MeCN直到36.0％)；检测器,254/220。获得20.3mg产物。这得到20.3mg(13％)3-[[1-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌啶-4-基](甲基)氨基]丙酸乙酯的甲酸盐，为类白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝659.2,R_T＝0.90min.¹HNMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,7.2Hz),8.68-8.66(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.4Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),7.03(t,1H,J＝73.2Hz),5.36-5.15(m,2H),4.48-4.33(m,1H),4.02(q,2H,J＝7.2Hz),4.00-3.96(m,1H),3.18-3.00(m,1H),2.89-2.80(m,3H),2.68-2.54(m,3H),2.31(s,3H),1.85-1.76(m,2H),1.61-1.25(m,2H),1.19(t,3H,J＝6.9Hz).

实施例392

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(5-氧代氧杂环戊-3-基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将哌嗪-1-甲酸叔丁酯(1.0g,5.37mmol)、氧杂环戊-2,4-二酮(1.07g,10.69mmol)和AcOH(0.2mL)的THF(50mL)混合物在室温搅拌3h。加入NaBH₃CN(508mg,8.08mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将得到的混合物在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用二氯甲烷/乙酸乙酯(1/4)洗脱。这得到400mg(28％)4-(5-氧代氧杂环戊-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法10)[M+H]⁺＝271.0,R_T＝0.56min.

将4-(5-氧代氧杂环戊-3-基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(400mg,1.48mmol)和饱和HCl二氧六环溶液(15mL)的混合物在室温搅拌3h。通过过滤收集固体。这得到380mg(粗品)4-(哌嗪-1-基)氧杂环戊-2-酮盐酸盐，为白色固体。LCMS(方法22)[M+H]⁺＝171.0,R_T＝0.38min.

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(200mg,0.43mmol)的DMF(10mL)溶液中加入4-(哌嗪-1-基)氧杂环戊-2-酮盐酸盐(250mg,1.21mmol)、HATU(247mg,0.65mmol)、DIEA(167mg,1.29mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。加入水(50mL)。将得到的溶液用DCM(x3)萃取，并合并有机层。将合并的有机层用盐水洗涤，用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过短的硅胶垫层，用8％MeOH的DCM溶液洗脱。将粗产物(80mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSH Prep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有0.05％FA的水和MeCN(在10min内32.0％MeCN直到60.0％)；检测器,254/220。获得37mg产物。这得到36.7mg(14％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-[4-(5-氧代氧杂环戊-3-基)哌嗪-1-基]乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法28)[M+H]⁺＝615.0,R_T＝0.99min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.76(s,1H),9.34(d,1H,J＝6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.30(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,9.0Hz),7.56(s,1H),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),4.44-4.38(m,1H),4.26-4.18(m,1H),3.49(t,4H,J＝5.1Hz),3.40-3.37(m,1H),2.78-2.68(m,1H),2.60-2.55(m,1H),2.47-2.35(m,4H).

实施例393

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(100mg)的DMF(2mL)溶液中加入HATU(100mg,0.26mmol)、DIEA(85mg,0.66mmol)和4-(哌啶-4-基)吗啉盐酸盐(67mg,0.32mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将粗产物(60mg)通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(1#-Pre-HPLC-006(Waters)):柱,XSelect CSHPrep C18 OBD柱,5um,19*150mm；流动相，含有10mM NH4CO3的水和MeCN(在8min内20.0％MeCN直到35.0％)；检测器,254/220。这得到28.3mg(21％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-[4-(吗啉-4-基)哌啶-1-基]-2-氧代乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝615.2,R_T＝1.84min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.7,8.7Hz),7.55(d,1H,J＝2.7Hz),7.45(d,1H,J＝8.7Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.02(t,1H,J＝73.2Hz),5.24-5.21(m,2H),4.42-4.31(m,1H),4.02-3.95(m,1H),3.55(t,4H,J＝4.5Hz),3.16-3.02(m,1H),2.78-2.64(m,1H),2.49-2.45(m,5H),1.90-1.76(m,2H),1.54-1.21(m,2H).

实施例394

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2E)-4-(吗啉-4-基)丁-2-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

将N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(400mg,0.99mmol)、(2E)-1,4-二氯丁-2-烯(370mg,2.96mmol)和碳酸铯(1g,3.07mmol)的混合物在65℃搅拌20h。将反应混合物冷却。将得到的溶液用乙酸乙酯(100mL)稀释，并用H₂O(x3)洗涤。将有机层用硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/己烷(1:1)洗脱。合并适当的级分并在真空下浓缩。这得到320mg(66％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2E)-4-氯丁-2-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。TLC:R_f＝0.4；乙酸乙酯/石油醚＝1:1.

将N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2E)-4-氯丁-2-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(160mg,0.324mmol)和吗啉(0.5mL)的DMF(4mL)溶液在室温搅拌2h。将得到的混合物在真空下浓缩。将粗产物(200mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱,硅胶；流动相，在20min内CH₃CN/H₂O＝20％增加至CH₃CN/H₂O＝50％；检测器,UV 254nm。获得35.4mg产物。这得到35.4mg(20％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2E)-4-(吗啉-4-基)丁-2-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法23)[M+H]⁺＝544.0,R_T＝2.37min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.68-8.66(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.8,8.8Hz),7.58(d,1H,J＝2.8Hz),7.44(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),5.94-5.84(m,1H),5.79-5.69(m,1H),4.82(d,2H,J＝6.0Hz),3.56(t,4H,J＝4.6Hz),2.96(d,2H,J＝6.4Hz),2.40-2.30(m,4H).

实施例395

N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2E)-4-(4-甲基哌嗪-1-基)丁-2-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

采用与N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[(2E)-4-(吗啉-4-基)丁-2-烯-1-基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺的合成方法类似的方法，由1-甲基哌嗪制备标题化合物。LCMS(方法23)[M+H]⁺＝557.1,R_T＝1.76min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.74(s,1H),9.34(d,1H,J＝5.2Hz),8.68-8.66(m,2H),8.31(s,1H),7.62(d,1H,J＝8.8Hz),7.58(d,1H,J＝2.4Hz),7.47(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),5.92-5.80(m,1H),5.78-5.66(m,1H),4.81(d,2H,J＝6.0Hz),2.94(d,2H,J＝6.4Hz),2.45-2.20(m,8H),2.13(s,3H).

实施例396

2-(2-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-4-(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰氨基)-1H-吡唑-1-基)乙基氨基)乙酸2-(甲硫基)乙酯

向2-(甲基硫烷基)乙-1-醇(2.40g,26.04mmol)的DMF(15mL)溶液中加入2-[(叔丁氧基)羰基]氨基乙酸(3.19g,18.21mmol)、HOBt(2.82g,20.87mmol)、EDC.HCl(3.99g,20.81mmol)和DIEA(2mL)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。将混合物在乙酸乙酯和水之间分配。将有机层用盐水洗涤，用Na₂SO₄干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(3/1)洗脱。这得到2.00g(31％)2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙酸2-(甲基硫烷基)乙酯，为浅黄色油状物。LCMS(方法21):[M+H]⁺＝250,R_T＝1.37min.

在室温向2-[[(叔丁氧基)羰基]氨基]乙酸2-(甲基硫烷基)乙酯(2.00g,8.02mmol)的二氧六环(5mL)溶液中加入饱和HCl二氧六环溶液(10mL)。将得到的溶液在室温搅拌2h。通过过滤收集固体。这得到1.2g 2-氨基乙酸2-(甲基硫烷基)乙酯HCl盐，为白色固体。LCMS(方法25):[M+H]⁺＝150,R_T＝0.28min.

向2-氨基乙酸2-(甲基硫烷基)乙酯HCl盐(792mg,3.57mmol)的CH₃CN溶液中加入N-[1-(2-溴乙基)-3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(364mg,0.71mmol)和DIEA(1.57g,12.15mmol)。将得到的溶液在75℃搅拌过夜并在真空下浓缩。将粗产物通过Prep-HPLC纯化，采用以下条件(2#-Waters 2767-2(HPLC-08)):柱,Xbridge Prep Phenyl,5um,19x150mm；流动相，含有50mmol碳酸氢铵的水和乙腈(在2min内10.0％乙腈直到33.0％，在8min内直到53.0％，在1min内直到100.0％,在1min内下降至10.0％)；检测器,UV 220nm。这得到53.1mg(2％)2-[(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙基)氨基]乙酸2-(甲基硫烷基)乙酯的甲酸盐，为浅黄色油状物。LCMS(方法20):[M+H]⁺＝580.15,R_T＝2.76min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.67(dd,1H,J＝1.5,4.2Hz),8.66(s,1H),8.36(s,1H),7.65-7.61(m,2H),7.44(d,1H,J＝9.3Hz),7.23(dd,1H,J＝4.5,7.2Hz),6.99(t,1H,J＝73.5Hz),4.27-4.18(m,4H),3.38(s,2H),2.99(t,2H,J＝6.0Hz),2.67(t,2H,J＝6.6Hz),2.07(s,3H).

实施例397

2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸乙酯

向2-(哌嗪-1-基)乙酸乙酯盐酸盐(400mg,1.92mmol)的DMF(10mL)溶液中加入{3-(5-氯-2-二氟甲氧基苯基)-4-[(吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-羰基)氨基]吡唑-1-基}乙酸(500mg)、DIEA(440mg,3.40mmol)、HATU(460mg,1.21mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过硅胶快速色谱法纯化，采用4.5％MeOH的DCM溶液洗脱，得到59.4mg(11％)2-[4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙酰基)哌嗪-1-基]乙酸乙酯，为白色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝617.2,R_T＝2.68min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.75(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.69-8.67(m,2H),8.31(s,1H),7.62(dd,1H,J＝2.4,8.8Hz),7.56(d,1H,J＝2.8Hz),7.45(d,1H,J＝8.8Hz),7.28(dd,1H,J＝4.4,6.8Hz),7.07(t,1H,J＝73.2Hz),5.24(s,2H),4.07(q,2H,J＝7.2Hz),3.52-3.49(m,4H),3.28(s,2H),3.17-3.16(m,1H),2.59-2.50(m,4H),1.18(t,3H,J＝7.2Hz).

实施例403

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-羟基-3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.00g,2.47mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(10mL)溶液中，加入Cs₂CO₃(970mg,2.977mmol)，并在室温搅拌10分钟。然后在室温滴加2-(氯甲基)环氧乙烷(2.28g,24.64mmol)。将得到的混合物在室温搅拌14小时，并用乙酸乙酯(100mL)稀释，用水和盐水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(60/40)洗脱，得到500mg(44％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(环氧乙烷-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法24),[M+H]⁺＝461.1,R_T＝1.30min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(环氧乙烷-2-基甲基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(50mg,0.11mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(1mL)溶液中，在室温加入DIEA(67mg,0.518mmol)和吗啉(14mg,0.161mmol)。将得到的溶液在60℃搅拌过夜，冷却，用30mL乙酸乙酯稀释，用2x10mL水和2x10mL盐水洗涤。将有机层用无水硫酸钠干燥并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用二氯甲烷/甲醇(95/5)洗脱。这得到50mg粗产物，其通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱:X BridgeC18,19*150mm,5um；流动相A:水/0.05％NH₄HCO₃,流动相B:ACN；流速:20mL/min；梯度:在10min内30％B至70％B；254nm，获得40mg(67％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-羟基-3-(吗啉-4-基)丙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法35)[M+H]⁺＝548.2,R_T＝2.28min.¹H-NMR(300MHz,DMSO-d₆):δ(ppm)9.73(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.5,7.2Hz),8.68-8.67(m,2H),8.34(s,1H),7.65(d,1H,J＝2.7Hz),7.61(s,1H),7.44(d,1H,J＝8.7Hz),7.27(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.00(t,1H,J＝73.5Hz),4.99(d,1H,J＝4.5Hz),4.31-4.28(m,1H),4.13-4.07(m,2H),3.56(t,4H,J＝4.5Hz),2.42(t,4H,J＝4.5Hz),2.32(d,2H,J＝4.8Hz).

实施例414

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-氧代-3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在–78℃，在10min内向搅拌的草酰氯(0.46mL,0.923mmol,2M)的二氯甲烷(6mL)溶液中，滴加加入DMSO(144mg)的二氯甲烷(1mL)溶液。将混合物在该温度下再搅拌10分钟，在该温度下滴加加入N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-羟基-3-吗啉代丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(253mg,0.461mmol)的2mL二氯甲烷溶液。将混合物在该温度下再搅拌30min。然后在该温度下滴加DIEA(476mg,3.683mmol)。将得到的溶液在-78℃搅拌0.5h，然后升温至室温并再搅拌30min。将得到的溶液用50mL乙酸乙酯稀释，用2x20mL水和2x20mL盐水洗涤。将有机层用硫酸钠干燥并在真空下浓缩。将粗产物(200mg)通过采用下列条件的Flash-Prep-HPLC纯化:柱:X Bridge RP,19*150mm,5um；流动相A:水/0.05％NH₄HCO₃,流动相B:ACN；流速:30mL/min；梯度:在10min内25％B至44％B；254nm，得到108.6mg(43％)-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-氧代-3-(哌啶-1-基)丙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为白色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝546.2,R_T＝1.68min.¹H-NMR(300MHz,CDCl₃-d):δ(ppm)9.89(s,1H),8.77(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.72(s,1H),8.55(dd,1H,J＝1.5,4.2Hz),8.40(s,1H),7.68(d,1H,J＝2.4Hz),7.42(dd,1H,J＝2.4,8.7Hz),7.28(d,1H,J＝8.7Hz),6.99(dd,1H,J＝4.2,7.2Hz),6.47(t,1H,J＝73.8Hz),5.07(s,1H),3.76(t,4H,J＝4.5Hz),3.26(s,2H),2.56(t,4H,J＝4.8Hz).

实施例415

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-(1-甲基哌啶-4-亚基)乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(215.20mg,0.532mmol)、Cs₂CO₃(694.8mg,2.132mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(15mL)混合物中加入4-[2-(甲磺酰基氧基)乙亚基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(650mg,2.128mmol)。将得到的混合物在60℃搅拌过夜，并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(9/1)洗脱。这得到310mg(95％)4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙亚基)哌啶-1-甲酸叔丁酯，为黄色油状物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝614.2,R_T＝1.11min.

在室温向4-(2-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]乙亚基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(310mg,0.505mmol)的二氯甲烷(10mL)溶液中加入三氟乙酸(6mL)。将得到的溶液在室温搅拌5h并在真空下浓缩。没有进一步纯化即使用粗产物。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝514.1,R_T＝0.91min.

将40％甲醛水溶液(210mg)加至N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(哌啶-4-亚基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(360.00mg,0.700mmol)的甲醇(30mL)溶液中。将得到的溶液在环境温度搅拌2.5h，加入NaBH₃CN(44.02mg,0.700mmol)。将得到的溶液在该温度下搅拌3h并在真空下浓缩。将残留物施用到短的硅胶垫层上，用二氯甲烷/MeOH(10/1)洗脱。将粗产物(60mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱,硅胶；流动相，在6min内ACN/10mmolNH₄HCO₃＝40％增加至ACN/10mmolNH₄HCO₃＝75％；检测器,UV 254nm，获得4.3mg(1％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(1-甲基哌啶-4-亚基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法32):[M+H]⁺＝528.1,R_T＝2.21min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,6.8Hz),8.68-8.66(m,2H),8.32(s,1H),7.67-7.61(m,2H),7.45(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.06(t,1H,J＝73.2Hz),5.44(t,1H,J＝6.8Hz),4.27(d,2H,J＝6.8Hz),2.81-2.68(m,2H),2.52-2.50(m,2H),2.50-2.42(m,2H),2.19(s,3H),2.12-2.04(m,2H).

实施例421

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-(4-(2-氰基乙基氨基)环己亚基)乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在室温将甲磺酰氯(1.87g,16.325mmol)滴加加入2-[1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基]乙-1-醇(2.00g,10.86mmol)和DIEA(4.21g,32.57mmol)的二氯甲烷(100mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(1/9)洗脱。这得到1.95g(68％)甲磺酸2-[1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基]乙酯，为类白色油状物。TLC:R_f＝0.6；乙酸乙酯/石油醚＝1/2。

在室温向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.50g,3.71mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(120mL)溶液中加入Cs₂CO₃(3.62g,11.11mmol)和甲磺酸2-[1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基]乙酯(1.94g,7.39mmol)。将得到的溶液在室温搅拌4h并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(3/2)洗脱，得到1.59g(75％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法31)[M+H]⁺＝571.4,R_T＝1.21min.

将浓HCl水溶液(16mL)加至N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[1,4-二氧杂螺[4.5]癸-8-亚基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.59g,2.785mmol)的1,4-二氧六环(160mL)溶液中。将得到的溶液在室温搅拌3h，并用饱和碳酸氢钠溶液中和。将得到的混合物在真空下浓缩。将残留物溶解在二氯甲烷中，用水、盐水洗涤。将有机层干燥，并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯/石油醚(3/2)洗脱。这得到930mg(63％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-氧代环己亚基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法25)[M+H]⁺＝527.1,R_T＝0.94min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(4-氧代环己亚基)乙基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(300.0mg,0.569mmol)的甲醇(30mL)溶液中加入3-氨基丙腈(199.5mg,2.85mmol)。将得到的溶液在室温搅拌3。然后加入NaBH₃CN(71.56mg,1.14mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜并在真空下浓缩。将残留物施用至短的硅胶垫层，用乙酸乙酯洗脱。将粗产物(60mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱,硅胶；流动相，在8min内ACN/0.05％NH₄HCO₃＝30％增加至ACN/0.05％NH₄HCO₃＝55％；检测器,UV 254nm。获得6.7mg产物。这得到6.7mg(2％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(2-氰基乙基)氨基]环己亚基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为类白色固体。LCMS(方法34)[M+H]⁺＝581.4,R_T＝2.44min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.68-8.66(m,2H),8.27(s,1H),7.64-7.60(m,2H),7.43(d,1H,J＝8.1Hz),7.27(dd,1H,J＝4.2,6.9Hz),7.00(t,1H,J＝73.5Hz),5.45(t,1H,J＝6.9Hz),4.80(d,2H,J＝7.2Hz),2.79-2.72(m,3H),2.71-2.57(m,5H),2.10-1.97(m,2H),1.94-1.86(m,2H),1.23-1.16(m,2H).

实施例420

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-(4-((2-氰基乙基)(甲基)氨基)环己亚基)乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(2-氰基乙基)氨基]环己亚基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(140.0mg,0.241mmol)的甲醇(20mL,)溶液中加入40％HCHO水溶液(75mg,0.96mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后加入NaBH₃CN(15.14mg,0.241mmol)。将得到的溶液在室温搅拌4h并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用二氯甲烷/MeOH(10/1)洗脱。这得到34.7mg(24％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(2-[4-[(2-氰基乙基)(甲基)氨基]环己亚基]乙基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法33)[M+H]⁺＝595.4,R_T＝1.43min.¹H NMR(300MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.33(dd,1H,J＝1.5,6.9Hz),8.69-8.66(m,2H),8.28(s,1H),7.64-7.60(m,2H),7.43(d,1H,J＝8.4Hz),7.27(dd,1H,J＝4.5,7.5Hz),7.00(t,1H,J＝73.5Hz),5.43(t,1H,J＝7.2Hz),4.81(d,2H,J＝6.9Hz),2.88-2.82(m,1H),2.66-2.59(m,5H),2.33-2.29(m,1H),2.22(s,3H),2.10-2.05(m,1H),1.93-1.80(m,3H),1.37-1.25(m,2H).

实施例452

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-((1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在室温将叠氮化钠(246mg,2.79mmol)加至4-溴哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.00g,3.79mmol)和碘化钠(113mg,0.753mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(20mL)溶液中。将得到的溶液在60℃搅拌过夜，冷却至室温。注意：反应应在防爆屏蔽后进行。然后通过加入10mL饱和碳酸氢钠水溶液将反应猝灭。将得到的溶液用2x50mL乙酸乙酯萃取，并合并有机层并在真空下浓缩。用乙酸乙酯/石油醚(1/4)将残留物施用至硅胶柱上。这得到800mg(93％)4-叠氮基哌啶-1-甲酸叔丁酯，为无色油状物。TLC:R_f＝0.6；乙酸乙酯/石油醚＝1/4。

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(2g,4.941mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(50mL)溶液中加入Cs₂CO₃(3.23g,9.913mmo)和3-氯丙-1-炔(720mg,9.663mmol)。将得到的混合物在50℃搅拌5h并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱。这得到1.74g(80％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(丙-2-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法23)[M+H]⁺＝443.0,R_T＝1.45min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-(丙-2-炔-1-基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.68g,3.794mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(40mL)溶液中加入DIEA(980.6mg,7.587mmol)、CuI(143.7mg,0.755mmol)、4-叠氮基哌啶-1-甲酸叔丁酯(858.8mg,3.795mmol)。将得到的溶液在室温搅拌7h并在真空下浓缩。使残留物通过快速硅胶色谱法纯化，用乙酸乙酯洗脱。这得到1.98g(78％)4-[4-([3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯，为浅黄色固体。LCMS(方法24)[M+H]⁺＝669.2,R_T＝1.34min.

向4-[4-([3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-4-[吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-酰氨基]-1H-吡唑-1-基]甲基)-1H-1,2,3-三唑-1-基]哌啶-1-甲酸叔丁酯(1.98g,2.96mmol)的甲醇(30mL)溶液中加入浓HCl水溶液(15mL)。将得到的溶液在室温搅拌5h。将得到的混合物在真空下浓缩。这得到1.85g粗产物，其无需进一步纯化即足以用于下一步骤。将一小部分进行纯化，用于鉴定和生物学提交。将粗产物(100mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱,硅胶；流动相，在9min内ACN/H₂O(10mmolNH₄HCO₃)＝18％增加至ACN/H₂O(10mmolNH₄HCO₃)＝49％；检测器,UV 254nm.获得42.1mg产物。这得到42.0mg N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法36)[M+H]⁺＝569.2,R_T＝2.59min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.69(s,1H),9.34(d,1H,J＝6.4Hz),8.68-8.64(m,2H),8.40(s,1H),8.22(s,1H),7.67-7.61(m,2H),7.45(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.2,7.0Hz),7.06(t,1H,J＝73.4Hz),5.49(s,2H),4.58-4.51(m,1H),3.05-3.02(m,2H),2.62-2.57(m,1H),2.30-2.25(br,1H),2.01-1.98(m,2H),1.87-1.73(m,2H).

实施例457

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-((1-(1-(四氢-2H-吡喃-4-基)哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基)甲基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[[1-(哌啶-4-基)-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺盐酸盐(200mg,0.330mmol)的二氯甲烷(30mL)溶液中加入氧杂环己-4-酮(264.9mg,2.646mmol)。将得到的溶液在室温搅拌过夜。然后加入NaBH(OAc)₃(280.8mg,1.325mmol)。将得到的溶液在室温搅拌6h并在真空下浓缩。将残留物施用至硅胶柱上，用DCM/MeOH(80:20)洗脱。将粗产物(150mg)通过Flash-Prep-HPLC纯化，采用以下条件(IntelFlash-1):柱,硅胶；流动相，在8min内ACN/H₂O(10mmol NH₄HCO₃)＝20％增加至ACN/H₂O(10mmolNH₄HCO₃)＝49％；检测器,UV 254nm。获得56.9mg产物。这得到56.9mg(26％)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-([1-[1-(氧杂环己-4-基)哌啶-4-基]-1H-1,2,3-三唑-4-基]甲基)-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为浅黄色固体。LCMS(方法20)[M+H]⁺＝653.3,R_T＝1.74min.¹H NMR(400MHz,DMSO-d₆)δ:(ppm)9.73(s,1H),9.34(dd,1H,J＝1.6,7.2Hz),8.67-8.66(m,2H),8.39(s,1H),8.26(s,1H),7.65-7.62(m,2H),7.44(d,1H,J＝8.4Hz),7.28(dd,1H,J＝4.0,6.8Hz),7.06(t,1H,J＝73.4Hz),5.48(s,2H),4.58-4.45(m,1H),3.90-3.87(m,2H),3.32-3.25(m,2H),3.04-2.98(m,2H),2.51-2.33(m,1H),2.30-2.24(m,2H),2.09-2.06(m,2H),1.99-1.91(m,2H),1.70-1.67((m,2H),1.49-1.40(m,2H).

实施例468

N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-(4-(((1-氰基环丙基)甲基)氨基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺

在氮气下，向1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4,5]癸烷(9.80g,67.1mmol)的二氯甲烷(150mL)溶液中加入三乙胺(11.2mL,80.5mmol。然后将其冷却至0℃，历经1个半小时在搅拌下向其滴加2-氯乙酰氯(6.53mL,80.5mmol)的二氯甲烷(50mL)溶液。然后将其搅拌过夜，期间升温至室温。然后通过加入1N HCl(100mL)将反应猝灭。然后将其用乙酸乙酯萃取，用固体无水硫酸镁粉末干燥乙酸乙酯层，过滤并浓缩，得到2-氯-1-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4,5]癸-8-基)乙-1-酮，为棕色油状物(15.44g)。其没有进一步纯化即用于下一步骤。

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1H-吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(4.65g,11.5mmol)和碳酸铯(10.08g,30.94mmol)中，加入N,N-二甲基甲酰胺(40mL)，并在室温搅拌5分钟。向其加入2-氯-1-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4,5]癸-8-基)乙-1-酮(5.34g,20.2mmol)的N,N-二甲基甲酰胺(4.5mL)溶液，并在室温搅拌3.5小时。LC/MS(方法31)显示反应完全。然后将反应过滤并将滤液在减压下浓缩，得到红色油状物。然后将其溶解在30mL二氯甲烷中，并通过ISCO纯化，采用硅胶柱并在5分钟用0-100％乙酸乙酯的庚烷溶液洗脱，随后用0-15％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到5.16g(8.78mmol)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4,5]癸-8-基)-2-氧代-乙基]吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为黄色泡沫状固体。LC/MS(方法39)[M+H]⁺＝589.2,R_T＝1.91min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-(1,4-二氧杂-8-氮杂螺[4,5]癸-8-基)-2-氧代-乙基]吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(1.01g,1.72mmol)的丙酮(20mL)溶液中加入对甲苯磺酸(359mg,2.06mmol)，并回流6小时。LC/MS(方法31)显示产物，并存在小量的原料。将反应冷却至室温并用水猝灭。然后将其用乙酸乙酯萃取，用固体硫酸镁粉末干燥并过滤，得到红色油状物。然后将其通过ISCO纯化，采用硅胶柱并用0-15％甲醇的二氯甲烷溶液洗脱，得到0.43g(0.78mmol)N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代-1-哌啶基)乙基]吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺，为泡沫状类白色固体。LC/MS(方法39)[M+H]⁺＝544.1,R_T＝1.91min.

向N-[3-[5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基]-1-[2-氧代-2-(4-氧代-1-哌啶基)乙基]吡唑-4-基]吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺(201.7mg 0.38mmol)的二氯甲烷(1.0mL)溶液中加入乙酸(0.3mL,5.24mmol)。然后向其中加入1-(氨基甲基)环丙烷甲腈(47.2mg,0.466mmol)。然后将其在室温搅拌5分钟。然后将反应冷却至0℃，并向其中加入三乙酰氧基硼氢化钠(124.1mg,0.56mmol)并搅拌3小时，期间温度升至室温。LC/MS(方法31)显示作为主要峰的产物。通过加入2mL水，随后加入10mL饱和碳酸氢钠溶液将反应猝灭。将其用二氯甲烷萃取，并将有机层用固体无水硫酸镁粉末干燥，过滤并浓缩，得到白色固体。然后将20.6mg通过反相HPLC纯化，得到10.2mg N-(3-(5-氯-2-(二氟甲氧基)苯基)-1-(2-(4-(((1-氰基环丙基)甲基)氨基)哌啶-1-基)-2-氧代乙基)-1H-吡唑-4-基)吡唑并[1,5-a]嘧啶-3-甲酰胺。LC/MS(方法38)[M+H]⁺＝624.2,R_T＝2.80min.1H NMR(400MHz,DMSO-d6)9.75(s,1H),9.34(dd,J＝7.0,1.7Hz,1H),8.68(dd,J＝4.3,1.6Hz,1H),8.67(s,1H),8.30(s,1H),7.63(dd,J＝8.8,2.7Hz,1H),7.56(d,J＝2.7Hz,1H),7.46(d,J＝8.8Hz,1H),7.29(dd,J＝7.0,4.2Hz,1H),7.25(t,J＝73.0Hz,1H),5.23(d,J＝4.7Hz,2H),4.12(d,J＝12.7Hz,1H),3.84(d,J＝13.7Hz,1H),3.14(t,J＝11.9Hz,1H),2.85(t,J＝11.9Hz,1H),2.71-2.65(m,3H),2.02(s,1H),1.83(t,J＝16.2Hz,2H),1.33 1.12(m,4H),0.94(m,2H).

酶测定

JAK酶测定如下进行：

使用Caliper技术(Caliper Life Sciences,Hopkinton,MA)，通过监测来源于JAK3的肽(Val-Ala-Leu-Val-Asp-Gly-Tyr-Phe-Arg-Leu-Thr-Thr，在N-末端用5-羧基荧光素荧光标记的)的磷酸化来测定分离的重组JAK1和JAK2激酶结构域的活性。为了测定抑制常数(K_i)，将化合物在DMSO中连续稀释并加入到含有纯化的酶(1.5nM JAK1或0.2nM JAK2)、100mM HEPES缓冲液(pH7.2)、0.015％Brij-35、1.5μM肽底物、ATP(25μM)、10mM MgCl₂、4mM DTT 50μL激酶反应物中，DMSO终浓度2％。反应在22℃下在384孔聚丙烯微量滴定板中温育30分钟，然后通过加入25μL含EDTA溶液(100mM HEPES缓冲液(pH 7.2)、0.015％Brij-35、50mM EDTA)终止反应，导致最终EDTA浓度为50mM。在激酶反应终止后，使用Caliper3000根据制造商的说明书将磷酸化产物的比例确定为总肽底物的分数。然后使用对于ATP-竞争性抑制修饰的Morrison紧密结合模型(Morrison,J.F.,Biochim.Biophys.Acta.185:269-296(1969)；William,J.W.和Morrison,J.F.,Meth.Enzymol.,63:437-467(1979))测定K_i值[K_i＝K_i,app/(1+[ATP]/K_m,app)]。

细胞系中的JAK1通路测定如下进行：

在设计用于测量JAK1依赖性STAT磷酸化的基于细胞的测定中测定抑制剂效力(EC₅₀)。如上所述，通过阻断Jak/Stat信号通路的IL-4、IL-13和IL-9信号传导的抑制可以减轻临床前肺炎症模型中的哮喘症状(Mathew等人,2001,J Exp Med 193(9):1087-1096；Kudlacz等人,2008,Eur J.Pharmacol 582(1-3):154-161)。

在一种测定方法中，使用获自美国典型培养物保藏中心(ATCC；Manassas,VA)的TF-1人红白血病细胞来测量IL-13刺激的JAK1依赖性STAT6磷酸化下游。在用于测定之前，将TF-1细胞在补充有0.5％炭/葡聚糖剥离的胎牛血清(FBS)、0.1mM非必需氨基酸(NEAA)和1mM丙酮酸钠的OptiMEM培养基(Life Technologies,Grand Island,NY)缺乏GM-CSF过夜。在384孔板中在无血清OptiMEM培养基中采用每孔300,000个细胞进行测定。在第二种测定方法中，在实验前一天，从ATCC获得的BEAS-2B人支气管上皮细胞在96孔板的每孔中以100,000细胞铺板。BEAS-2B测定在完全生长培养基(支气管上皮基础培养基加bulletkit；Lonza；Basel，瑞士)中进行。

将测试化合物在DMSO中以1:2连续稀释，然后在即将使用之前在培养基中以1:50稀释。将稀释的化合物加入到细胞中，最终DMSO浓度为0.2％，并在37℃下孵育30分钟(对于TF-1测定)或1小时(对于BEAS-2B测定)。然后，如先前对于每个单独的批次所确定的，用在其各自的EC₉₀浓度的人重组细胞因子刺激细胞。细胞用IL-13(R&D Systems,Minneapolis,MN)在37℃下刺激15分钟。通过直接加入10x裂解缓冲液(Cell Signaling Technologies,Danvers,MA)停止TF-1细胞反应，然而通过除去培养基和加入1x裂解缓冲液来停止BEAS-2B细胞孵育。将所得样品在板中在-80℃下冷冻。使用MesoScale Discovery(MSD)技术(Gaithersburg,MD)在细胞裂解物中测量化合物介导的STAT6磷酸化的抑制。EC₅₀值被确定为，相对于DMSO对照所测量的，STAT磷酸化的50％抑制所需的化合物浓度。

表2提供了指定表格的指明实施例的JAK1 K_i、JAK2 K_i和IL-13-pSTAT6 IC₅₀信息以及LCMS(ESI)信息。

表2:

空白：未测定

清除率测定

在某些情况下，药物物质的高系统清除可能是有益的。例如，在肺疾病的治疗中，在肺中具有高药物浓度、在血流或外周器官中具有较低浓度可能是有益的。在这种情况下，可能有利的是通过吸入递送途径施用具有高系统清除率的药物。这种方法可以最大化药物在肺中的药理活性，同时最小化在体内别处的靶点毒性的可能性。附加到5-氯-2-二氟甲氧基苯基吡唑并嘧啶骨架的官能团影响全身清除率。例如，化合物i表现出5.3mL/min/kg的小鼠静脉内(IV)清除率值，或6％的小鼠肝脏血流量。本发明实施例的代表性小鼠IV清除率值示于表3中。

表3.本发明化合物的小鼠IV清除率值。

雌性BALB/c小鼠获自Charles River Labs(Hollister，CA USA)。通过尾静脉向12只动物给予1mg/kg化合物的单次IV剂量。代表性剂量溶液如下制备：将化合物分别溶于5％二甲基亚砜(DMSO)、35％聚乙二醇(PEG400)和60％水(v/v/v)的混合物中，施用体积为5mL/kg。在研究开始时，小鼠体重约20-25g。静脉内施用化合物后，每只动物通过后眼窝和心脏穿刺放血两次。在给药后2分钟、5分钟、15分钟、30分钟、1小时、2小时、4小时和8小时收集PK时间点。将血浆样品储存在约-80℃，直到解冻用于LC-MS/MS分析。对平均血浆浓度-时间数据进行PK数据分析，并且使用Enterprise,5.2.1版(PharsightCorporation；Mountain View,CA)通过非区室方法测定PK参数。

Claims

1.式(00A)化合物：

(i)

(ii)

(e)CN、卤代或氧代；

(j)任选被卤代取代的异吲哚啉-2-基；

(k)-NR^aR^b，和

(l)–O-CH₂C(O)-3-11元杂环烷基；

其中R^a和R^b独立地选自：

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

其中R^az和R^bz各自独立地选自

(a)H，

(h)C₂-C₅烯基；

(i)4-6元杂环烷基，其任选被卤代取代，

(j)-(C₁-C₆亚烷基)-3-6元环烷基，其被羟基甲基取代，

(k)苯基，

(l)-C(O)(C₁-C₆烷基)，

(m)-C(O)O(C₁-C₆烷基)，

(n)-C(O)O(3-6元环烷基)，和

(o)-C(O)-苯基，

前提是：当R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H且环Q是

其中t¹是0时，则X^A不是甲基、2-甲基丙-2-醇或四氢吡喃基。

2.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(II)化合物：

其中：

w是0或1；

R^0b是H或NH₂；

R^1b选自

a.H，

g.3-6元环烷基；

R^2b选自H、任选被卤代取代的C₁-C₆烷基或C₂-C₅烯基；

或R^1b和R^2b一起形成任选被OH取代的3-11元杂环烷基；

R^4b是键或C₁-C₆亚烷基；

R^5b选自H、OH和苯基；且

环F是3-7元杂环烷基，其中p^1b是0、1或2且p^2b是0、1或2；

其中仅当R^3b是甲基时w等于1。

3.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(Ia)或式(Ib)化合物：

其中：

R^0a是H或NH₂；

a.H，

f.-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-OH；和

g.-C(O)O-(C₁-C₆亚烷基)-苯基；

h.-NR^aR^b，其中R^a和R^b独立地选自H和C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN、苯基和3-7元杂环烷基；

R^2a选自H、任选被OH取代的C₁-C₆烷基和苯基；

R^3a选自H、任选被OH取代的C₁-C₆烷基和苯基；

环A是3-7元杂环烷基；且

前提是环A且环B一起形成6-11元二环杂环烷基。

4.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(III)化合物：

其中：

R^0c是H或NH₂；

R³是(i)或(ii)：

(i)

其中：

R^2c是H或C₁-C₆烷基；且

R^3c是键或任选被氧代取代的C₁-C₆亚烷基；或

R^1c和R^2c一起形成3-11元杂环烷基，其任选被下列基团取代：

C₁-C₆烷基、氧代或-(C₁-C₆亚烷基)-苯基；或

R^1c和R^3c一起形成3-7元杂环烷基；

环G是3-7元杂环烷基，其中p^1c是0、1或2且p^2c是0、1或2。

5.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(IV)化合物：

其中：

R^0d是H或NH₂；

6.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(V)化合物：

其中：

R^0e是H或NH₂；

R^1e选自

a.H，

b.C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：卤代、CN或苯基，

R^2e是H或C₁-C₆烷基；

R^3e是键或任选被氧代取代的C₁-C₆亚烷基；且

环H是3-7元杂环烷基，其中p^1e是0、1或2且p^2e是0、1或2。

7.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(VI)化合物：

其中：

R^0f是H或NH₂；

R^1f选自C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：卤代、3-6元环烷基或苯基；且

环J是6-7元杂环烷基，其中p^1f是1或2且p^2f是1或2。

8.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(VII)化合物：

其中：

R^0g是H或NH₂；

R^1g选自C₁-C₆烷基；

R^2g选自C₁-C₆烷基。

9.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(VIII)化合物：

其中：

R^0h是H或NH₂；

环C是3-7元环烷基或3-7元杂环烷基；且

环D是在唯一的氮处被R^1h取代的3-7元杂环烷基；且

前提是环C和D一起形成3-11元螺杂环烷基。

10.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(IX)化合物：

其中：

R^0j是H或NH₂；

R^4j选自H和C₁-C₆烷基，其任选被OH取代；

或R^3j和R^4j一起形成4-6-元杂环烷基；

R^5j选自H和C₁-C₆烷基；且

环K是6-7元杂环烷基，其中p^1j是1或2且p^2j是1或2。

11.权利要求1的化合物，其被进一步限定为式(X)化合物：

其中：

R^0k是H或NH₂；

R^1k选自

a.H，

b.C₁-C₆烷基，其任选被下列基团取代：卤代、CN或苯基，

R^2k选自H和C₁-C₆烷基；

或R^1k和R^2k一起形成任选被卤代取代的3-11元杂环烷基；任选被OH取代的C₁-C₆烷基；或-NR^vR^w，其中R^v和R^w独立地是H或C₁-C₆烷基，其任选被卤代取代；且

R^3k是键、亚甲基或–C(＝O)-。

12.权利要求1的化合物，其中X^A和X^B独立地选自3-6-元环烷基、6-10元芳基、5-6元杂环烯基和5-10元杂芳基，其中X^A和X^B各自独立地任选被Y¹取代。

13.权利要求1的化合物，其中X^A或X^B是3-11元杂环烷基，其任选被Y¹取代。

14.权利要求1的化合物，其中环Q是(i)。

15.权利要求1或14的化合物，其中t¹是0。

16.权利要求1或14的化合物，其中t¹是1。

17.权利要求1的化合物，其中环Q是(ii)。

18.权利要求1或17的化合物，其中t²是0。

19.权利要求1或17的化合物，其中t²是1。

20.权利要求1-19中任何一项的化合物，其中R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H。

21.权利要求1-19中任何一项的化合物，其中R⁰是NH₂。

22.权利要求1的化合物，其中环Q是(i)，t¹是0或1，且R⁰、R⁰⁰和R⁰¹各自是H。

23.权利要求1的化合物，其中环Q是(i)，t¹是1，且X^A是NR^aR^b，其中R^a和R^b各自独立地是H、任选被5-6元杂芳基取代的C₁-C₆烷基、或3-6元环烷基，其任选被下列基团取代：OH、卤代、CN或任选被OH取代的C₁-C₆烷基。

24.权利要求1的化合物，其中环Q是(i)，t¹是0，且X^A是C₁-C₆烷基或3-6元环烷基，其中X^A任选被-NR^aR^b取代，其中R^a和R^b独立地是H或C₁-C₆烷基。

25.权利要求1的化合物，其选自表1。

26.药物组合物，其包含权利要求1-25中任何一项的化合物和药学上可接受的载体、稀释剂或赋形剂。

27.权利要求1-25中任何一项的化合物在治疗中的用途。

28.权利要求1-25中任何一项的化合物在治疗炎性疾病中的用途。

29.权利要求1-25中任何一项的化合物在制备用于治疗炎性疾病的药物中的用途。

30.权利要求1-25中任何一项的化合物，其用于治疗炎性疾病。

31.权利要求28-30中任何一项的用途或化合物，其中所述炎性疾病是哮喘。

32.预防、治疗或减轻患者的对Janus激酶活性的抑制响应的疾病或疾患的严重性的方法，其包括向患者施用治疗有效量的权利要求1-25中任何一项的化合物。

33.权利要求32的方法，其中所述疾病或疾患是哮喘。

34.权利要求32的方法，其中Janus激酶是JAK1。

35.如上所述的发明。