CN106265807A - 一种太行菊总黄酮的提取方法 - Google Patents
一种太行菊总黄酮的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN106265807A CN106265807A CN201610615814.5A CN201610615814A CN106265807A CN 106265807 A CN106265807 A CN 106265807A CN 201610615814 A CN201610615814 A CN 201610615814A CN 106265807 A CN106265807 A CN 106265807A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- total flavones
- taihang chrysanthemum
- taihang
- mass fraction
- extracting method
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Granted
Links
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/28—Asteraceae or Compositae (Aster or Sunflower family), e.g. chamomile, feverfew, yarrow or echinacea
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/331—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using water, e.g. cold water, infusion, tea, steam distillation, decoction
Abstract
本发明涉及一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:(1)将太行菊进行粉碎,在碱性条件下,向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒,保持温度在35‑50℃之间搅拌0.5‑6h;(2)用NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11‑12,取滤液,用酸调pH至5.5‑6.5,向溶液中加入丙酮萃取,收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;(3)双水相萃取,减压干燥得到太行菊总黄酮,本发明提供的方法根据太行菊以及所含黄酮类物质的性质设计,有利于促进太行菊总黄酮的溶出,有效提高了总黄酮得提取率,并减少了在提取过程中太行菊总黄酮的氧化。
Description
技术领域
本发明涉及一种太行菊总黄酮的提取方法。
背景技术
太行菊(Opisthopappus taihangensis )为菊科植物太行菊属的头状花序,太行菊为草本植物。太行菊一般高为10-15厘米,太行菊的茎部的颜色为血色,四周被覆浓厚或稀少的短毛。基生叶片一般呈椭圆形或卵形,长2.5-3.5,二回羽状割裂对照规则,一、二回全数全裂。一回侧裂片一般为1-2对。
太行菊中化学成分比较复杂,其主要成分为黄酮类化合物、挥发油和萜类、棕榈酸和野菊花黄色素类等化学成分。其中黄酮的药理作用主要有:改善血液循环、降低胆固醇的含量、抑制炎性生物酶的渗出、促进伤口的快速愈合,并且具有降血压、抗肿瘤、抗糖尿病和抑菌的作用。并且黄酮类具备很强的抗氧化活性,对体内的氧基具备很好的扫除作用。
目前太行菊总黄酮的提取方法一般有如下几种:1. 传统溶剂提取法,即用热水进行提取。2. 醇提取法,根据相似相溶的原则,极性比较大的苷元及苷类易溶于极性较大的丙酮、乙醇、甲醇或混合溶剂,黄酮类物质提取经常使用的溶剂是丙酮、甲醇和乙醇。3. 超声波辅助提取法,工作原理是超声波可以使植物的细胞壁、细胞膜等结构遭到破坏,有利于细胞中的活性成分溶出;另外,超声过程中不断地震荡,更能增加溶质的运动能力;因为超声波辅助提取法用时较短、能源消耗比较低、尽量不破坏植物中有效成分的特点,较常规浸泡提取法具有较大的优势。4. 酶浸渍萃取法,是指在提取黄酮类物质的过程当中,人为地采用适当的酶加入反应过程中,使其产生转糖和酶解反应,使得产品黄酮得率和浓度大幅度增加的新兴实验手段。采用合适的酶掺入反应中,不但通过发生的酶解反应使得植物组织得到分解,并且还使油溶性的总黄酮变为较易溶于水的糖苷类,加速提取过程。5. 超临界萃取法是应用一些溶剂在临界点附近时具备差异的特性,对混合物中的可溶解性成分进行提取的一种先进的生物分离技术。与传统方法相比,超临界萃取法具有无味、无毒、安全,易分离、污染小等各种优点。在超临界萃取方法中通常选取CO2为超临界溶剂,因为CO2无毒、操作温度低、临界压力低等各种性质比较稳定、具有不易燃易爆等优点。
由于黄酮类结构中存在酚羟基,稳定性差,所以在用以上方法进行直接提取的时候很容易发生氧化,提取效果并不理想。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种总黄酮得率高,减少氧化的太行菊总黄酮的提取方法。
为了实现上述目的,本发明采取的技术方案如下:
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将太行菊进行粉碎,过60目筛,加入相当于太行菊重量两倍的水,用5wt%NaOH调pH值至8.5-9.5,搅拌10-20min,向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒,保持温度在35-50℃之间搅拌0.5-6h,其中太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒的质量比为:100:0.3-0.5:0.1-0.3:3.5-9.6:6-14:4-7:5-12:100-150,所述氧化铝颗粒的粒径为150-250μm;
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11-12,过滤,取滤液,用酸调pH至5.5-6.5,向溶液中加入丙酮萃取,收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到C2H5OH-(NH4)2SO4形成的双水相体系中,所述C2H5OH的质量分数为20%-28%,所述(NH4)2SO4的质量分数为16%-21%,加入质量分数为1.5%-3%的NaCl,调节pH值为6-8,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
作为本发明进一步的改进, 所述步骤(2)中的酸为0.1mol/L的HCl。
作为本发明进一步的改进,所述步骤(3)中总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为15%-20%。
作为本发明进一步的改进,所述太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒的质量比为:100:0.4:0.2:6.5:10:5.5:8:120。
作为本发明进一步的改进,所述步骤(3)中,C2H5OH的质量分数为23%,所述(NH4)2SO4的质量分数为17%,加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
与现有技术相比,本发明所取得的有益效果如下:
本发明所提供的方法通过研究太行菊独特的性能,在碱性条件下进行细胞壁的破壁和总黄酮的提取,减少了氧化,并且通过酶与亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠和椰子油脂肪酸二乙醇胺共同作用,并在破壁萃取的过程中加入粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,可以增加物料之间的碰撞、接触和融合,有利于促进太行菊总黄酮的溶出,有效提高了总黄酮得提取率,并减少了在提取过程中太行菊总黄酮的氧化。
具体实施方式
为使本发明的目的、技术方案和优点更加清楚,下面结合具体实施例对发明进行清楚、完整的描述。
实施例1
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺、5.5g氟化钠、8g椰子油脂肪酸二乙醇胺和120g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮12.34g,UV检测含量为97.89%。
实施例2
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9.5,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺、5.5g氟化钠、8g椰子油脂肪酸二乙醇胺和120g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮11.27g,UV检测含量为96.29%。
实施例3
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至8.5,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺、5.5g氟化钠、8g椰子油脂肪酸二乙醇胺和120g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮11.63g,UV检测含量为97.04%。
实施例4
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.3g碱性纤维素酶、0.1g碱性果胶酶、3.5g亚硝酸钠、6g三乙醇胺、4g氟化钠、5g椰子油脂肪酸二乙醇胺和100g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至12,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮10.92g,UV检测含量为96.94%。
实施例5
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至8.5,搅拌15min,向其中依次加入0.5g碱性纤维素酶、0.3g碱性果胶酶、9.6g亚硝酸钠、14g三乙醇胺、7g氟化钠、12g椰子油脂肪酸二乙醇胺和150g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮11.23g,UV检测含量为97.16%。
对比例1
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶和0.2g碱性果胶酶,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例2
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶和120g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例3
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶和6.5g亚硝酸钠,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例4
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠和10g三乙醇胺,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例5
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠和8g椰子油脂肪酸二乙醇胺,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例6
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠和5.5g氟化钠,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例7
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺和5.5g氟化钠,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例8
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺和8g椰子油脂肪酸二乙醇胺,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例9
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、5.5g氟化钠和8g椰子油脂肪酸二乙醇胺,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例10
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺、5.5g氟化钠和8g椰子油脂肪酸二乙醇胺,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例11
一种太行菊总黄酮的提取方法,其具备包括如下步骤:
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用5wt%NaOH调pH值至9,搅拌15min,向其中依次加入0.4g碱性纤维素酶、0.2g碱性果胶酶、10g三乙醇胺、5.5g氟化钠、8g椰子油脂肪酸二乙醇胺和120g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例12
(1)将100g太行菊进行粉碎,过60目筛,加入200g的水,用30%柠檬酸调pH值至6,向其中依次加入0.4g纤维素酶、0.2g果胶酶、6.5g亚硝酸钠、10g三乙醇胺、5.5g氟化钠、8g椰子油脂肪酸二乙醇胺和120g粒径为150-250μm的氧化铝颗粒,保持温度在40±2℃的条件下搅拌2h。
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11,过滤,取滤液,用0.1mol/L的HCl调pH至6,向溶液中加入丙酮萃取(50ml/次,3次),收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
对比例13
(1)准确称取粉碎的太行菊粉末5g,以1:50(g:ml)料液比加入体积分数70%乙醇中,超声60℃,提取40min,抽滤,收集获得的太行菊总黄酮粗提液,减压蒸馏,得到总黄酮提取物;
(2) 将步骤(1)得到的总黄酮物提液加入到23%C2H5OH-17%(NH4)2SO4形成的双水相体系中,总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为17%,然后加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
效果例1
1 破壁率检测:用低倍显微镜进行观测,以每个视野为单位,读取100个视野取平均值后按下式进行计算:
破壁率(%)=(1-A/B)×100%
式中:A为破碎后的完整细胞数;
B为原始细胞数。
2 总黄酮含量的检测,对实施例1、对比例1-5得到的总黄酮进行含量检测,具体方法如下:
2.1 标准曲线的制备
准确称取120℃干燥至恒重的芦丁标准品5.00 mg,60%乙醇超声溶解,定容于50 ml容量瓶得0.1 mg/ml的标准溶液。准确量取0.00、1.00、2.00、3.00、4.00、5.00 ml的标准溶液,分别置于10 ml容量瓶,加0.5 mol/L NaNO2溶液0.50 ml摇匀,静置6 min后加入0.3 mol/LAlCl3溶液0.50 ml摇匀,放置6 min;然后再加入1.0mol/L NaOH溶液4.00 ml,用60%乙醇定容,静置15 min后,于505 nm处测吸光度。以芦丁标品浓度C为横坐标、吸光度A为纵坐标,绘制标准曲线并得出标准曲线方程:y=10.749x-0.00705,相关系数 R2=0.99922。
2.2总黄酮含量的测定
量取样品溶液 1 ml 于 10 ml 试管,加0.5 mol/L NaNO2溶液0.50 ml摇匀,静置6min后加入0.3 mol/L AlCl3溶液0.50 ml摇匀,放置6 min;然后再加入1.0mol/L NaOH溶液4.00 ml,用60%乙醇定容,静置15min后,于505 nm处测吸光度。利用标准回归方程计算样品溶液中总黄酮的浓度,再进一步计算其含量和得率,具体计算方法如下:
。
3总黄酮得率的测定:
对实施例1、对比例1-12步骤(1)得到的溶液按上述方法1检测破壁率,对实施例1、对比例1-12得到的总黄酮按上述方法2和3分别进行含量检测和提取率测定,结果见表1:
表1
破壁率(%) | 总黄酮质量(g) | 总黄酮的提取率(%) | 总黄酮的含量(%) | |
实施例1 | 99.36 | 12.34 | 12.34 | 97.89 |
对比例1 | 64.32 | 5.87 | 5.87 | 96.21 |
对比例2 | 67.59 | 5.95 | 5.95 | 96.34 |
对比例3 | 57.64 | 5.72 | 5.72 | 95.97 |
对比例4 | 62.78 | 5.86 | 5.86 | 96.61 |
对比例5 | 63.03 | 5.77 | 5.77 | 96.58 |
对比例6 | 70.24 | 6.16 | 6.16 | 96.91 |
对比例7 | 72.45 | 6.33 | 6.33 | 97.01 |
对比例8 | 63.67 | 5.91 | 5.91 | 96.83 |
对比例9 | 71.29 | 6.13 | 6.13 | 96.98 |
对比例10 | 77.84 | 7.91 | 7.91 | 97.37 |
对比例11 | 99.21 | 10.06 | 10.06 | 97.09 |
对比例12 | 53.27 | 4.95 | 4.95 | 96.21 |
对比例13 | 55.38 | 9.87 | 9.87 | 97.53 |
由上表所示,单纯的加入三乙醇胺、氟化钠和椰子油脂肪酸二乙醇胺,破壁效果和溶出效果并不理想,氧化铝颗粒、三乙醇胺、氟化钠和椰子油脂肪酸二乙醇胺同时加入会对破壁以及溶出有较为有利的促进作用,亚硝酸钠的加入可以有效降低太行菊总黄酮在提取过程中的不稳定性。非碱性条件下的酶解破壁,效果并不理想,本发明方法较常规的醇提工艺,总黄酮的提取率可提高25%以上。
本发明中的碱性纤维素酶可为短小芽孢杆菌AC-4所产的酶,也可为现有技术中其他已经分离获得的碱性纤维素酶。碱性果胶酶可选用现有技术中的分离获得的碱性果胶酶。
以上所述实施方式仅为本发明的优选实施例,而并非本发明可行实施的穷举。对于本领域一般技术人员而言,在不背离本发明原理和精神的前提下对其所作出的任何显而易见的改动,都应当被认为包含在本发明的权利要求保护范围之内。
Claims (5)
1.一种太行菊总黄酮的提取方法,其特征在于,其具备包括如下步骤:
(1)将太行菊进行粉碎,过60目筛,加入相当于太行菊重量两倍的水,用5wt%NaOH调pH值至8.5-9.5,搅拌10-20min,向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒,保持温度在35-50℃之间搅拌0.5-6h,其中太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒的质量比为:100:0.3-0.5:0.1-0.3:3.5-9.6:6-14:4-7:5-12:100-150,所述氧化铝颗粒的粒径为150-250μm;
(2)用10wt%NaOH溶液调节步骤(1)所得溶液的pH至11-12,过滤,取滤液,用酸调pH至5.5-6.5,向溶液中加入丙酮萃取,收集有机相,蒸干得到总黄酮粗提物;
(3)将步骤(2)得到的总黄酮粗提物加入到C2H5OH-(NH4)2SO4形成的双水相体系中,所述C2H5OH的质量分数为20%-28%,所述(NH4)2SO4的质量分数为16%-21%,加入质量分数为1.5%-3%的NaCl,调节pH值为6-8,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
2.根据权利要求1所述的一种太行菊总黄酮的提取方法,其特征在于,所述步骤(2)中的酸为0.1mol/L的HCl。
3.根据权利要求1所述的一种太行菊总黄酮的提取方法,其特征在于,所述步骤(3)中总黄酮粗提物在双水相体系中的质量分数为15%-20%。
4.根据权利要求1所述的一种太行菊总黄酮的提取方法,其特征在于,所述太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶、亚硝酸钠、三乙醇胺、氟化钠、椰子油脂肪酸二乙醇胺和氧化铝颗粒的质量比为:100:0.4:0.2:6.5:10:5.5:8:120。
5.根据权利要求1所述的一种太行菊总黄酮的提取方法,其特征在于,所述步骤(3)中,C2H5OH的质量分数为23%,所述(NH4)2SO4的质量分数为17%,加入质量分数为2.5%的NaCl,调节pH值为7,混匀,分相,减压干燥得到太行菊总黄酮。
Priority Applications (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610615814.5A CN106265807B (zh) | 2016-08-01 | 2016-08-01 | 一种太行菊总黄酮的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
---|---|---|---|
CN201610615814.5A CN106265807B (zh) | 2016-08-01 | 2016-08-01 | 一种太行菊总黄酮的提取方法 |
Publications (2)
Publication Number | Publication Date |
---|---|
CN106265807A true CN106265807A (zh) | 2017-01-04 |
CN106265807B CN106265807B (zh) | 2017-06-06 |
Family
ID=57663031
Family Applications (1)
Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
---|---|---|---|
CN201610615814.5A Expired - Fee Related CN106265807B (zh) | 2016-08-01 | 2016-08-01 | 一种太行菊总黄酮的提取方法 |
Country Status (1)
Country | Link |
---|---|
CN (1) | CN106265807B (zh) |
Cited By (2)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108159100A (zh) * | 2018-02-22 | 2018-06-15 | 温州瑞思生物科技有限公司 | 一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法 |
CN109122842A (zh) * | 2018-08-15 | 2019-01-04 | 邯郸学院 | 一种菠萝蜜抑菌保鲜喷雾剂及其制备方法 |
Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101167775A (zh) * | 2006-10-27 | 2008-04-30 | 郭颂 | 菊花总黄酮提取方法 |
CN101507742A (zh) * | 2009-03-26 | 2009-08-19 | 浙江林学院 | 一种羽芒菊总黄酮的制备方法及其用途 |
CN102631392A (zh) * | 2012-05-04 | 2012-08-15 | 浙江大学 | 一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法 |
CN104644715A (zh) * | 2013-11-22 | 2015-05-27 | 房世平 | 野菊花黄酮类化合物的复合酶法提取工艺 |
CN105326876A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-02-17 | 南阳师范学院 | 一种菊花总黄酮的提取方法 |
-
2016
- 2016-08-01 CN CN201610615814.5A patent/CN106265807B/zh not_active Expired - Fee Related
Patent Citations (5)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN101167775A (zh) * | 2006-10-27 | 2008-04-30 | 郭颂 | 菊花总黄酮提取方法 |
CN101507742A (zh) * | 2009-03-26 | 2009-08-19 | 浙江林学院 | 一种羽芒菊总黄酮的制备方法及其用途 |
CN102631392A (zh) * | 2012-05-04 | 2012-08-15 | 浙江大学 | 一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法 |
CN104644715A (zh) * | 2013-11-22 | 2015-05-27 | 房世平 | 野菊花黄酮类化合物的复合酶法提取工艺 |
CN105326876A (zh) * | 2015-11-11 | 2016-02-17 | 南阳师范学院 | 一种菊花总黄酮的提取方法 |
Cited By (3)
Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
---|---|---|---|---|
CN108159100A (zh) * | 2018-02-22 | 2018-06-15 | 温州瑞思生物科技有限公司 | 一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法 |
CN109122842A (zh) * | 2018-08-15 | 2019-01-04 | 邯郸学院 | 一种菠萝蜜抑菌保鲜喷雾剂及其制备方法 |
CN109122842B (zh) * | 2018-08-15 | 2023-08-29 | 邯郸学院 | 一种菠萝蜜抑菌保鲜喷雾剂及其制备方法 |
Also Published As
Publication number | Publication date |
---|---|
CN106265807B (zh) | 2017-06-06 |
Similar Documents
Publication | Publication Date | Title |
---|---|---|
CN104311688B (zh) | 一种金钗石斛多糖和总碱的提取分离方法 | |
CN107259565B (zh) | 一种柚子皮提取物及其提取方法 | |
CN104673497B (zh) | 一种植物精油、多糖和黄酮的提取工艺 | |
CN110464682A (zh) | 一种桃胶组合物、制备方法及应用 | |
CN105998109A (zh) | 一种芒果核多酚提取物及其制备方法 | |
CN101612243A (zh) | 一种天然植物花椒提取物的应用方法 | |
CN104987427B (zh) | 利用响应曲面法优化黑果枸杞多糖的复合酶微波提取方法 | |
CN110151813A (zh) | 一种党参提取物及其制备方法和应用 | |
CN107669774A (zh) | 柑橘皮中柑橘精油和黄酮类化合物的提取方法以及柑橘皮提取物及其应用 | |
CN106265807A (zh) | 一种太行菊总黄酮的提取方法 | |
US20020041904A1 (en) | Compound with alpha-glucosidase inhibiting action and method for producing the same | |
CN111249338A (zh) | 一种苁蓉提取物及其工业化制备方法和用途 | |
CN113398622A (zh) | 一种超临界co2萃取和分子蒸馏工艺制备艾草原浆的方法 | |
CN104644715A (zh) | 野菊花黄酮类化合物的复合酶法提取工艺 | |
CN110343730A (zh) | 一种洋甘菊多糖成分的高效提取方法 | |
CN106166164B (zh) | 一种银杏叶提取物的制备方法及其制品 | |
CN112675066A (zh) | 一种藜麦皂苷洗手液及制备方法 | |
CN106214799B (zh) | 一种橘皮总黄酮的提取方法 | |
CN106109620B (zh) | 一种红枣加工废弃物的深加工方法 | |
CN109730946A (zh) | 活性祛痘液以及含有活性祛痘液的乳液、精华液和面霜 | |
WO2016110216A1 (zh) | 一种提取茋类化合物的方法 | |
CN109810149A (zh) | 一种木槿花中原花青素的提取工艺 | |
CN108392506A (zh) | 一种刺五加活性提取物的提取方法和药物组合物及其应用 | |
CN104004038B (zh) | 一种从江南星蕨中提取黄酮单体的方法 | |
CN104262448B (zh) | 一种从甘草中提取甘草酸的方法 |
Legal Events
Date | Code | Title | Description |
---|---|---|---|
C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
GR01 | Patent grant | ||
GR01 | Patent grant | ||
TR01 | Transfer of patent right |
Effective date of registration: 20180717 Address after: The 201606 Shanghai Songjiang areas towns the Mao Gang roads Zhong She 161 Room 814 Patentee after: Shanghai Yi hang Bio Technology Co., Ltd. Address before: No. 530 North Road, Handan City College, Hebei Province, Hebei Patentee before: HANDAN COLLEGE |
|
TR01 | Transfer of patent right | ||
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |
Granted publication date: 20170606 Termination date: 20190801 |
|
CF01 | Termination of patent right due to non-payment of annual fee |