CN102631392A - 一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法，该方法用乙醇水溶液从野菊花中提取得到浸膏，再用液-液萃取法对浸膏进行多次萃取得到总黄酮萃取物，其技术关键是在多次液-液萃取时，取第2、3次萃取物作为野菊花总黄酮产品，其纯度可达60%以上。

Description

一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法

技术领域

    本发明属植物有效成分分离技术领域，尤其涉及一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法。

背景技术

野菊花是菊科植物野菊（Chrysanthemum indicum L）的干燥头状花序，为常用清热解毒中药。黄酮类化合物是一系列具有2-苯基色原酮结构的化合物，是野菊花中主要的活性成分，具有广谱抗菌消炎、抗病毒、清除氧自由基、增加冠脉血流量、抗氧化、降血压等多种生物活性。由野菊花膏粉（主要成分为黄酮类化合物）、珍珠层、槐米、盐酸可乐定等中西药制成的珍菊降压片，在高血压诊疗中得到较广泛的应用。以黄酮类化合物为主要成分的野菊花栓、野菊花注射液、颗粒剂等也已经投入使用。因此研究从野菊花中提取和精制黄酮类化合物有利于提高野菊花利用率，也有利于为黄酮单体的制备提供较高纯度的原料。

目前野菊花黄酮的提取方法主要有水提法、甲醇提取法和乙醇提取法，在此基础上还可以结合超声、微波等外加物理场强化效果。水提法工艺成本低、无毒，但提取液中杂质多，且易霉变；甲醇提取法毒性较大；微波法、超声法对设备要求较高；乙醇提取法具有毒性低、提取液不易霉变、溶剂易回收等特点，是较为合适的提取方法。

一般野菊花提取物得到的浸膏中总黄酮含量较低，需要进一步精制。野菊花浸膏精制总黄酮的方法主要有醇沉法、液-液萃取法、大孔树脂吸附法和制备型高效液相色谱法等。在工业上，醇沉法较为常见，但黄酮损失严重；大孔树脂吸附法和制备型高效液相色谱法是实验室分离纯化黄酮的主要方法，但不利于工业化生产；液-液萃取法具有生产能力大、效率较高、便于连续和安全操作、易于实现自动控制等一系列特点，是较为常用的精制方法。目前野菊花浸膏精制总黄酮的工艺中，液-液萃取法多用于提纯前的预处理，没有将其作为主要的精制手段来研究，因此研究液-液萃取法精制总黄酮具有较高的工业价值，也有利于为黄酮单体的制备提供较高纯度的原料。

发明内容

本发明的目的是提供一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法。

本发明的目的是这样实现的：一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法，它包括如下步骤：

（1）取40-100目的野菊花粉，加入体积百分比为40-90％的乙醇水溶液，固液比为1:5-20g/mL，在40-70                                               下搅拌提取0.5-2h，将提取液蒸干，得野菊花浸膏；

（2）将野菊花浸膏重新溶解制成5-15g/L的水溶液作为原料液；

（3）加入水饱和的正丁醇萃取，水饱和的正丁醇与原料液的相比为1-5，在25-60

下搅拌萃取0.5-2h，静置分层，取上相，得萃取物；

（4）重复2次步骤3，合并第2、3次的萃取物，蒸干，得野菊花总黄酮产品，其纯度可达60%以上。 

本发明的有益效果是：本发明从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法，用乙醇水溶液从野菊花中提取总黄酮，再用液-液萃取法进行精制，产品总黄酮的纯度高，达到60%以上。

附图说明

图1萃取率和纯度随萃取次数的变化；

图2萃取率和纯度随萃取次数的变化。

具体实施方式

本发明从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法的具体步骤如下：

1、取40-100目的野菊花粉，加入体积百分比为40-90％的乙醇水溶液，固液比为1:5-20g/mL，在40-70

下搅拌提取0.5-2h，将提取液蒸干，得野菊花浸膏。

2、将野菊花浸膏重新溶解制成5-15g/L的水溶液作为原料液。

3、加入水饱和的正丁醇萃取，水饱和的正丁醇与原料液的相比为1-5，在25-60

下搅拌萃取0.5-2h，静置分层，取上相，得萃取物。

4、重复2次步骤3，合并第2、3次的萃取物，蒸干，得野菊花总黄酮产品，其纯度（重量百分比）可达60%以上（由NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH比色法测定）。

本发明中所述的NaNO₂-Al(NO₃)₃-NaOH比色法如下：

野菊花总黄酮采用NaNO₂-Al(NO3)₃-NaOH比色法测定。以芦丁为标准品，测定标准曲线：精确称取芦丁粉末，于容量瓶定容作为母液，精确量取母液（浓度为0.213 g/L）0.5、4.0、6.0、8.0、10.0、12.0 mL于25 mL容量瓶中，加入5% NaNO₂溶液1.0 mL，放置6 min，加入10% Al(NO₃)₃溶液1.0 mL，放置6 min，再加入4% NaOH溶液10.0 mL，放置15 min后加蒸馏水定容，摇匀，以不加显色剂的空白组作对比，测定其在508 nm处的吸光度。经测定，标准曲线为y=14.692x+0.0014（R₂=0.9996），其中x为吸光度，y为测试液浓度（g/L）。芦丁在4.3-102.2 mg/L范围内呈良好线性关系。待测样品在同等条件下显色并测定吸光度，由标准曲线计算样品中总黄酮含量（以芦丁计）。

为进一步阐述发明内容，以下结合具体实施例说明发明的内容，本发明的内容包括以下实施例，但不局限于实施例。

实施例1

将50g（40-50目）的野菊花粉导入三口烧瓶中，加入1000mL 70％的乙醇水溶液，在70下搅拌回流提取1h，趁热抽滤得提取液，将提取液蒸干即得野菊花浸膏，纯度为21%。将提取获得的野菊花浸膏重新溶解，配制成15g/L的水溶液作为原料液，加入水饱和的正丁醇作为萃取剂，相比为1，在25

下振荡萃取1h，萃取3次，萃取结果如图1所示。第1次萃取的萃取相中总黄酮纯度约为25%，而第2、3次萃取的萃取相中总黄酮的纯度均高于60%，因此本发明的技术关键是在多次液-液萃取时，取第2、3次萃取的萃取相作为野菊花总黄酮产品。合并第2、3次萃取相，蒸干，得野菊花总黄酮产品，其纯度为63%。

实施例2

将50g（40-100目）的野菊花粉导入三口烧瓶中，加入500mL 80％的乙醇水溶液，在40下搅拌回流提取2h，趁热抽滤得提取液，将提取液蒸干即得野菊花浸膏，总黄酮纯度为22%。将提取获得的野菊花浸膏重新溶解，配制成5g/L的水溶液作为原料液，加入水饱和的正丁醇作为萃取剂，相比为4，在25下振荡萃取0.5h，萃取3次，萃取结果如图2所示。第1次萃取的萃取相中总黄酮纯度约为25%，而第2、3次萃取的萃取相中总黄酮的纯度均高于60%，因此本发明的技术关键是在多次液-液萃取时，取第2、3次萃取的萃取相作为野菊花总黄酮产品。合并第2、3次萃取相，蒸干，得野菊花总黄酮产品，其纯度为65%。

上述实施例用来解释说明本发明，而不是对本发明进行限制，在本发明的精神和权利要求的保护范围内，对本发明作出的任何修改和改变，都落入本发明的保护范围。

Claims (1)

1.一种从野菊花中提取精制高纯度总黄酮的方法，其特征在于，它包括如下步骤：

（1）取40-100目的野菊花粉，加入体积百分比为40-90％的乙醇水溶液，固液比为1:5-20g/mL，在40-70                                               

下搅拌提取约0.5-2h，将提取液蒸干，得野菊花浸膏；

（2）将野菊花浸膏重新溶解制成5-15g/L的水溶液作为原料液；

（3）加入水饱和的正丁醇萃取，水饱和的正丁醇与原料液的相比为1-5，在25-60

下搅拌萃取约0.5-2h，静置分层，取上相，得萃取物；

（4）重复2次步骤3，合并第2、3次的萃取物，蒸干，得野菊花总黄酮产品，其纯度可达60%以上。

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