CN108159100A - 一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法 - Google Patents
一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明公开了一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法,包括采用高压匀浆方法从太行菊中提取黄酮获得粗提液,然后使用所制备的磁性分子印迹聚合物吸附粗提液中的黄酮,从而简单高效地实现黄酮的分离。采用本发明方法从太行菊中提取太行菊黄酮,对环境友好、提取率高,产品质量好,生产周期短、操作方便、成本较低、适合工业化生产。
Description
技术领域
本发明涉及一种提取工艺,特别涉及一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法。
背景技术
黄酮具有多方面的功效,它是一种很强的抗氧剂,可有效清除体内的氧自由基,如花青素可以抑制油脂性过氧化物的全阶段溢出,这种阻止氧化的能力是维生素 E 的 10倍以上,这种抗氧化作用可以阻止细胞的退化、衰老,也可阻止癌症的发生。黄酮可以改善血液循环,降低胆固醇,向天果中的黄酮还含有一种 PAF 抗凝因子,这些作用大大降低了心脑血管疾病的发病率,也可改善心脑血管疾病的症状。来自南太平洋岛国的向天果,富含33 种类黄酮,可以帮助人体改善血液循环,提高免疫力,是糖尿病、高血脂、高血压患者的福音。蜂胶是蜂蜜从植物新生枝芽或树皮上采集的树胶,混以自身分泌加工而成的芳香胶状体。4~5万只蜜蜂,一年仅能采到40~60g左右的蜂胶,被誉为“紫色黄金”。蜂胶皇是蜂胶中的极品,其总黄酮含量高达 9300mg 以上,且其余成份黄金配比,协同作用。 科学家们给予蜂胶皇许多美称 :血管清道夫、血糖守护神、抗癌勇士、天然免疫增强剂。
太行菊(Opisthopappus taihangensis )为菊科植物太行菊属的头状花序,太行菊为草本植物。太行菊一般高为10-15厘米,太行菊的茎部的颜色为血色,四周被覆浓厚或稀少的短毛。基生叶片一般呈椭圆形或卵形,长2.5-3.5,太行菊中化学成分比较复杂,其主要成分为黄酮类化合物、挥发油和萜类、棕榈酸和野菊花黄色素类等化学成分。其中黄酮的药理作用主要有:改善血液循环、降低胆固醇的含量、抑制炎性生物酶的渗出、促进伤口的快速愈合,并且具有降血压、抗肿瘤、抗糖尿病和抑菌的作用,并且黄酮类具备很强的抗氧化活性,对体内的氧基具备很好的扫除作用。
目前太行菊总黄酮的提取方法一般有如下几种:1. 传统溶剂提取法,即用热水进行提取。2. 醇提取法,根据相似相溶的原则,极性比较大的苷元及苷类易溶于极性较大的丙酮、乙醇、甲醇或混合溶剂,黄酮类物质提取经常使用的溶剂是丙酮、甲醇和乙醇。3. 超声波辅助提取法,工作原理是超声波可以使植物的细胞壁、细胞膜等结构遭到破坏,有利于细胞中的活性成分溶出;另外,超声过程中不断地震荡,更能增加溶质的运动能力;因为超声波辅助提取法用时较短、能源消耗比较低、尽量不破坏植物中有效成分的特点,较常规浸泡提取法具有较大的优势。4. 酶浸渍萃取法,是指在提取黄酮类物质的过程当中,人为地采用适当的酶加入反应过程中,使其产生转糖和酶解反应,使得产品黄酮得率和浓度大幅度增加的新兴实验手段。采用合适的酶掺入反应中,不但通过发生的酶解反应使得植物组织得到分解,并且还使油溶性的总黄酮变为较易溶于水的糖苷类,加速提取过程。5. 超临界萃取法是应用一些溶剂在临界点附近时具备差异的特性,对混合物中的可溶解性成分进行提取的一种先进的生物分离技术。与传统方法相比,超临界萃取法具有无味、无毒、安全,易分离、污染小等各种优点。在超临界萃取方法中通常选取CO2为超临界溶剂,因为CO2无毒、操作温度低、临界压力低等各种性质比较稳定、具有不易燃易爆等优点。
总之,关于黄酮的提取纯化报道已有很多,但是至今仍没有发现一种能耗低、时间短、过程清洁、工艺简单且分离效果好的方法,故开发一种新型高效的黄酮提取与纯化技术非常有必要。
发明内容
本发明的目的在于克服现有技术的缺陷,提供一种总黄酮得率高,减少氧化的太行菊总黄酮的提取方法,利用磁性分子印迹模板提取是一种操作简便、经济实惠、适合于工业化大生产使用的分离技术。
为了解决上述技术问题,本发明提供一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法,其步骤如下:
1)制备太行菊总黄酮提取液:将太行菊进行粉碎,过60目筛,加水搅拌30~60分钟,超声分散10~20分钟,得到固含量为5~10%的水分散液;在压力60~100MPa的条件下,将所述水分散液进行高压匀浆处理20~60分钟,得到匀浆液;将所述匀浆液用5wt%NaOH调pH值至8.5-9.5,搅拌10-20min,再向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶,在25℃~40℃条件下酶解2.5小时,升温至100℃灭酶20min,然后在输出功率为600 W的微波条件下处理1~3分钟,用乙醇在温度为70-90℃条件下提取2-5次,合并提取液;
2)磁性分子印迹聚合物:采用悬浮聚合法,以芦丁、槲皮素、木犀草素或芹菜素为模板分子,油酸改性的纳米Fe3O4粒子为磁性组分,四乙烯基吡啶为功能单体,羧乙基纤维素水溶液为分散剂,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂制备太行菊黄酮磁性分子印迹聚合物。
3)将步骤2)得到的所述磁性分子印迹聚合物与步骤1)得到的提取液按照一定计量比混合,超声分散5~10分钟,振荡吸附1~3小时;然后通过磁分离将吸附有太行菊黄酮的磁性分子印迹聚合物从液相分离出来,用质量浓度为5~15%的乙醇水溶液清洗吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂,再次磁分离,弃去清洗液,得到吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂;向清洗后的磁性吸附剂中加入含乙酸体积百分比为1~3%的乙醇和乙酸混合液,振荡洗脱30~60分钟,磁分离后,收集洗脱液;重复洗脱1~5次,所述乙醇和乙酸混合液的总用量为取用的所述上层液体的体积的2~5倍,合并所有洗脱液,经浓缩和减压干燥,得到太行菊总黄酮。
优选的,所述高压匀浆处理的压力为60MPa,时间为2小时。
优选的,所述太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶的质量比为:100 :0.3-0.5 :0.1-0.3。
优选的,所述乙醇和乙酸混合液中,乙酸的体积百分比为1%。
本发明的优点如下 :
本发明中,采取高压匀浆提取太行菊黄酮,在短时间内使得太行菊中的有效成分在高压下从水中快速充分溶出,反应条件温和,有利于对活性物质的结构保护,而且不会引入新的有机杂质,保证最终产品的安全性,也减少环境污染;同时,采取磁性模板分子对黄酮进行选择性吸附,简单高效地实现太行菊黄酮的分离。
总之,采用本发明方法从太行菊中提取太行菊黄酮,简单高效、对环境友好、提取率高,产品质量好,生产周期短、操作方便、成本较低、易于产业化,具有良好的推广应用前景。
具体实施方式
下面对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动的前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
【实施例1】
1)制备太行菊总黄酮提取液:将太行菊进行粉碎,过60目筛,加水搅拌60分钟,超声分散20分钟,得到固含量为10%的水分散液;在压力100MPa的条件下,将所述水分散液下进行高压匀浆处理30分钟,得到匀浆液;将所述匀浆液用5wt%NaOH调pH值至8.5-9.5,搅拌20min,再向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶,在25℃条件下酶解2.5小时,升温至100℃灭酶 20min,然后在输出功率为 600 W 的微波条件下处理 3 分钟,用乙醇在温度为70-90℃条件下提取4次,合并提取液;
2)磁性分子印迹聚合物:采用悬浮聚合法,以芦丁、槲皮素、木犀草素或芹菜素为模板分子,油酸改性的纳米Fe3O4粒子为磁性组分,四乙烯基吡啶为功能单体,羧乙基纤维素水溶液为分散剂,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂制备太行菊黄酮磁性分子印迹聚合物。
3)、将步骤2)得到的所述磁性分子印迹聚合物与步骤1)得到的提取液按照一定计量比混合,超声分散5分钟,振荡吸附1小时;然后通过磁分离将吸附有太行菊黄酮的磁性分子印迹聚合物从液相分离出来,用质量浓度为15%的乙醇水溶液清洗吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂,再次磁分离,弃去清洗液,得到吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂;向清洗后的磁性吸附剂中加入含乙酸体积百分比为1%的乙醇和乙酸混合液,振荡洗脱30分钟,磁分离后,收集洗脱液;重复洗脱5次,所述乙醇和乙酸混合液的总用量为取用的所述上层液体的体积的5倍,合并所有洗脱液,经浓缩和减压干燥,得到太行菊总黄酮。经HPLC检测,产品纯度为黄酮含量93.5%。
【实施例2】
1)制备太行菊总黄酮提取液:将太行菊进行粉碎,过60目筛,加水搅拌60分钟,超声分散10分钟,得到固含量为5%的水分散液;在压力60MPa的条件下,将所述水分散液进行高压匀浆处理60分钟,得到匀浆液;将所述匀浆液用5wt%NaOH调pH值至8.5-9.5,搅拌10-20min,再按太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶的质量比为:100:0.3:0.3向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶,在40℃条件下酶解2.5小时,升温至100℃灭酶 20min,然后在输出功率为600 W的微波条件下处理3分钟,用乙醇在温度为 90℃条件下提取5次,合并提取液;
2)磁性分子印迹聚合物:采用悬浮聚合法,以芦丁、槲皮素、木犀草素或芹菜素为模板分子,油酸改性的纳米Fe3O4粒子为磁性组分,四乙烯基吡啶为功能单体,羧乙基纤维素水溶液为分散剂,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂制备太行菊黄酮磁性分子印迹聚合物。
3)将步骤2)得到的所述磁性分子印迹聚合物与步骤1)得到的提取液按照一定计量比混合,超声分散10分钟,振荡吸附3小时;然后通过磁分离将吸附有太行菊黄酮的磁性分子印迹聚合物从液相分离出来,用质量浓度为5%的乙醇水溶液清洗吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂,再次磁分离,弃去清洗液,得到吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂;向清洗后的磁性吸附剂中加入含乙酸体积百分比为3%的乙醇和乙酸混合液,振荡洗脱30分钟,磁分离后,收集洗脱液;重复洗脱3次,所述乙醇和乙酸混合液的总用量为取用的所述上层液体的体积的3倍,合并所有洗脱液,经浓缩和减压干燥,得到太行菊总黄酮。经HPLC检测,产品纯度为黄酮含量93.0%。
本发明具有如下有益效果 :
本发明采取高压匀浆提取太行菊黄酮,在短时间内使得太行菊中的有效成分在高压下从水中快速充分溶出,反应条件温和,有利于对活性物质的结构保护,而且不会引入新的有机杂质,保证最终产品的安全性,也减少环境污染;同时,采取磁性模板分子对黄酮进行选择性吸附,简单高效地实现太行菊黄酮的分离。
总之,采用本发明方法从太行菊中提取太行菊黄酮,简单高效、对环境友好、提取率高,产品质量好,生产周期短、操作方便、成本较低、易于产业化,具有良好的推广应用前景。
上述说明已经充分揭露了本发明的具体实施方式。需要指出的是,熟悉该领域的技术人员对本发明的具体实施方式所做的任何改动均不脱离本发明的权利要求书的范围。相应地,本发明的权利要求的范围也并不仅仅局限于前述具体实施方式。
Claims (4)
1.一种从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法,其步骤如下:
1)制备太行菊总黄酮提取液:将太行菊进行粉碎,过60目筛,加水搅拌30~60分钟,超声分散10~20分钟,得到固含量为5~10%的水分散液;在压力60~100MPa的条件下,将所述水分散液进行高压匀浆处理20~60分钟,得到匀浆液;将所述匀浆液用5wt%NaOH调pH值至8.5-9.5,搅拌10-20min,再向其中依次加入碱性纤维素酶、碱性果胶酶,在25℃~40℃条件下酶解2.5小时,升温至100℃灭酶 20min,然后在输出功率为600 W 的微波条件下处理1~3 分钟,用乙醇在温度为70-90℃条件下提取2-5次,合并提取液;
2)磁性分子印迹聚合物:采用悬浮聚合法,以芦丁、槲皮素、木犀草素或芹菜素为模板分子,油酸改性的纳米Fe3O4粒子为磁性组分,四乙烯基吡啶为功能单体,羧乙基纤维素水溶液为分散剂,二甲基丙烯酸乙二醇酯为交联剂制备太行菊黄酮磁性分子印迹聚合物;
3)将步骤2)得到的所述磁性分子印迹聚合物与步骤1)得到提取液按照一定计量比混合,超声分散5~10分钟,振荡吸附1~3小时;然后通过磁分离将吸附有太行菊黄酮的磁性分子印迹聚合物从液相分离出来,用质量浓度为5~15%的乙醇水溶液清洗吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂,再次磁分离,弃去清洗液,得到吸附有太行菊黄酮的磁性吸附剂;向清洗后的磁性吸附剂中加入含乙酸体积百分比为1~3%的乙醇和乙酸混合液,振荡洗脱30~60分钟,磁分离后,收集洗脱液;重复洗脱1~5次,所述乙醇和乙酸混合液的总用量为取用的所述上层液体的体积的2~5倍,合并所有洗脱液,经浓缩和减压干燥,得到太行菊总黄酮。
2.根据权利要求1所述的从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法,所述高压匀浆处理的压力为60MPa,时间为1小时。
3.根据权利要求1所述的从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法,所述太行菊与碱性纤维素酶、碱性果胶酶的质量比为:100 :0.3-0.5 : 0.1-0.3。
4.根据权利要求1所述的从太行菊中提取太行菊总黄酮的方法,所述乙醇和乙酸混合液中,乙酸的体积百分比为1%。
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