CN105219826A - 一种具有提升性功能的牡蛎肽及其制备方法和应用 - Google Patents
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Abstract
本发明涉及生物技术领域,公开了一种具有提升性功能的牡蛎肽及其制备方法和应用。该方法将牡蛎肉、钙盐和水研磨得到牡蛎肉浆液;牡蛎肉浆液酶解,酶解后离心取上清,获得牡蛎酶解粗液;将牡蛎酶解粗液脱色除杂,获得牡蛎肽精制液;牡蛎肽精制液浓缩、喷雾干燥获得所述牡蛎肽。本发明在对牡蛎肉进行酶解前先用钙盐进行预处理,用以激活释放牡蛎内源性酶,减少后续酶解消耗的酶制剂,同时协同牡蛎内源性酶,采用特定的酶制剂组合分两步进行酶解,制备出具有较强的抗氧化活性、可显著提高性功能的牡蛎肽。
Description
技术领域
本发明涉及生物技术领域,具体涉及一种具有提升性功能的牡蛎肽及其制备方法和应用。
背景技术
男性性功能障碍是一个常见病,发病率约占成年男性的10%。随着现代生活节奏的加快,来自工作、家庭、经济等方面的压力增大,男性发生性功能障碍的概率越高。
牡蛎,又称蚝、蛎黄、海蛎子,是一种双壳类软体动物,属软体动物门,瓣鳃纲,牡蛎科。牡蛎是全球的第一大养殖贝类,主要分布在温带和热带的各大洋沿岸,同时也是我国四大养殖贝类之一。《本草拾遗》记载牡蛎肉具有“煮食,主虚损,……于姜醋中生食之,主丹毒,酒后烦热,止渴”的功效。但由于牡蛎的生产季节强,且有较强的鱼腥味,限制其应用领域;目前牡蛎主要以鲜吃或作为海产干货出售。因此,以牡蛎为原料,结合生物酶解技术制备蛋白肽产品,拓展其应用领域并提高其附加值,具有较大的经济价值和社会意义。但是在目前的以酶解技术制备牡蛎肽的过程中,酶的使用量偏多造成了生产成本高。同时,不同的酶解技术所获得的牡蛎肽也不太相同,这表现在这些多肽的功效作用及其强弱上,而通过不同的酶解技术获得高功效的活性多肽一直是技术人员研究的重点。
发明内容
有鉴于此,本发明的目的在于提供一种具有提升性功能的牡蛎肽及其制备方法和应用,使得所述制备方法能够减少酶的使用量,并且所制备的牡蛎肽具有效果更优的提高性功能和抗氧化的功效,可应用于相关保健品、食品以及药品的制备中。
为实现上述发明目的,本发明提供如下技术方案:
一种具有提升性功能的牡蛎肽的制备方法,包括:
步骤1、将牡蛎肉、钙盐和水研磨得到牡蛎肉浆液;
步骤2、牡蛎肉浆液酶解,酶解后离心取上清,获得牡蛎酶解粗液;
步骤3、将牡蛎酶解粗液脱色除杂,获得牡蛎肽精制液;
步骤4、牡蛎肽精制液浓缩、喷雾干燥获得所述牡蛎肽。
本发明针对现有酶解技术中使用酶制剂用量偏多以及目标功效不强、蛋白回收率不高的缺陷,在对牡蛎肉进行酶解提取多肽前,先采用钙盐对其进行预处理,以外加钙离子激活牡蛎肉内源性酶,释放的牡蛎肉内源性酶可高效专一水解牡蛎蛋白,进而减少商业蛋白酶的用量,降低生产成本。同时协同后面的酶解步骤,不仅提高了蛋白回收率,还使得所获得的牡蛎多肽具有更佳的功效作用。
其中,作为优选,所述钙盐为食品级氯化钙、乳酸钙、碳酸钙、磷酸氢钙或柠檬酸钙。
作为优选,所述钙盐为牡蛎肉质量的0.1-0.3%的钙盐。
在本发明的一些具体实施例中,所述钙盐可以为0.1%的氯化钙、0.3%的乳酸钙或0.2%的柠檬酸钙。
作为优选,步骤1中所述水为牡蛎肉质量的0.5-1.0倍的软化水。在本发明的一些具体实施例中,所述水可以为牡蛎肉质量的0.5倍的软化水、牡蛎肉质量的0.8倍的软化水或牡蛎肉质量的1.0倍的软化水。
在使用钙盐预处理牡蛎后,进行酶解时均可减少酶制剂的使用量,故常规的酶解均可,但是作为本发明优选,步骤2为:
将牡蛎肉浆液先用中性蛋白酶或碱性蛋白酶酶解,然后再用风味蛋白酶酶解,酶解后灭酶、离心,上清液即牡蛎酶解粗液。
进一步优选地,步骤2为:
将牡蛎肉浆液至于35~45℃下保温搅拌1-2小时,然后加入中性蛋白酶或碱性蛋白酶,调节pH升温至50~60℃继续水解5-8小时后,调节pH至5.0-5.5,加入风味蛋白酶在50~60℃下继续酶解,2-3小时后灭酶,离心,上清液即牡蛎酶解粗液。
进一步优选地,所述中性蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、动物蛋白水解酶、复合蛋白酶Protamex中的一种或多种;所述中性蛋白酶或碱性蛋白酶的加入量为牡蛎肉浆液质量的0.3~0.8‰;所述碱性蛋白酶为Alcalase碱性蛋白酶、FoodProAlkalineProtease碱性蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或多种;所述风味蛋白酶的加入量为牡蛎肉浆液质量的0.5~1.0‰。
其中,对于使用中性蛋白酶酶解时,pH值调整到6.0-7.0;对于使用碱性蛋白酶酶解时,pH值调整到7.5-8.5。
作为优选,步骤3为:
往牡蛎酶解粗液中添加活性炭搅拌脱色,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
进一步优选地,步骤3为:
往牡蛎酶解粗液中添加活性炭,45~55℃保温搅拌0.5~1.0小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
采用本发明方法制备的牡蛎肽,消耗的中性蛋白酶或碱性蛋白酶未超过0.8‰,风味蛋白酶未超过1.0‰,而没有采用钙盐预处理的相同酶解工艺,消耗的中性蛋白酶或碱性蛋白酶为1.0‰,风味蛋白酶也为1.0‰,酶制剂使用量较高。同时,采用本发明酶制剂分两步进行酶解,相比将其他酶制剂或和本发明相同酶制剂一步酶解的工艺,所获得的牡蛎肽在提升小鼠性功能以及体外抗氧化功能上效果更优。
基于上述技术效果,本发明提供了由本发明制备方法制备的牡蛎肽,以及所述牡蛎肽在制备提高性功能和/或抗氧化保健品、食品以及药品中的应用。其中,所述药品和保健品为丸剂、胶囊剂、片剂、粉剂、颗粒剂、口服液或膏剂。
由以上技术方案可知,本发明在对牡蛎肉进行酶解前先用钙盐进行预处理,用以激活释放牡蛎内源性酶,减少后续酶解消耗的酶制剂,同时协同牡蛎内源性酶,采用特定的酶制剂组合分两步进行酶解,制备出具有较强的抗氧化活性、可显著提高性功能的牡蛎肽。
具体实施方式
本发明公开了一种具有提升性功能的牡蛎肽的制备方法,本领域技术人员可以借鉴本文内容,适当改进工艺参数实现。特别需要指出的是,所有类似的替换和改动对本领域技术人员来说是显而易见的,它们都被视为包括在本发明。本发明所述牡蛎肽及其制备方法和应用已经通过实施例进行了描述,相关人员明显能在不脱离本发明内容、精神和范围内对本文所述的方法和应用进行改动或适当变更与组合,来实现和应用本发明技术。
在具体实施例中涉及到牡蛎肽体外抗氧化活性(还原力、DPPHIC50)的检测方法和牡蛎肽对雄性成熟小鼠提升性功能实验方法参照如下步骤。
1、采用铁氰化钾还原体系,700nm处测定样品的还原力。将制备的样品以蛋白浓度进行梯度稀释,取样品液2ml于试管中,加0.2mol/L磷酸盐缓冲液(PBS,pH6.6)2ml和1%(m/V)六合铁氰化钾溶液2ml,混合均匀于50℃恒温水浴锅中保温20min,加10%TCA2ml,充分混匀。取上清液2ml于试管中,加蒸馏水2ml及0.1%的FeCl3溶液0.4ml,充分混匀后静置10min,在波长为700nm处测定其吸光度。每个样品按上述步骤操作,平行测定三次(还原力IC50值指当A700nm=0.5时,样品的蛋白浓度,单位为mg/ml)。
2、选择雄性成熟小鼠,体重18~22g,随机分为空白对照组、样品组、对比样品组,每组12只,连续给药28d。
实验前48h,每只雌鼠皮下注射苯甲酸雌二醇(0.02mg/只),使雌鼠动情期相同,试验于晚上7-11时进行。末次给药30min后,将雄性小鼠单独放入笼中5min,使其适应环境,然后每笼加入1只雌鼠,观察记录下列指标:
①雌鼠投入至雄鼠第1次扑捉雌鼠的时间(捕捉潜伏期);
②20min内雄鼠扑捉雌鼠或爬背的动作次数(扑捉次数);
③20min内雄鼠扑捉雌鼠或爬背成功后出现舔阴茎的次数(射精次数);
④自爬背成功出现舔阴茎的时间(射精潜伏期)。
⑤20min内各组的扑捉百分率和射精百分率。
捕捉百分率=捕捉动物数/动物总数
射精百分率=射精动物数/动物总数
数据处理:采用SPSS19.0软件对实验数据进行分析,每组实验数据均以均值表示,各组总体方差满足方差齐性条件时,多组间比较采用单因素方差分析;当各组总体方差不满足方差齐性条件时,多组间比较采用Welch法分析,以p<0.05判断差异具有显著性。
以下就本发明所提供的一种具有提升性功能的牡蛎肽的制备方法做进一步说明。
实施例1:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.1%的氯化钙和1.0倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于45℃下保温搅拌1小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.3‰的木瓜蛋白酶,体系pH值调至6.5,在55℃下保温水解6小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.5,加入牡蛎肉质量1.0‰的风味蛋白酶继续水解2小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.6%的活性炭,在50℃下保温搅拌1.0小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物35%以上,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品1。
实施例2:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.3%的乳酸钙和0.5倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于35℃下保温搅拌2小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.8‰的Alcalase,体系pH值调至8.0,在60℃下保温水解5小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.0,加入牡蛎肉质量0.7‰的风味蛋白酶继续水解2.5小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.3%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.5小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物45%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品2。
实施例3:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.2%的柠檬酸钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于40℃下保温搅拌1.5小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.6‰的木瓜蛋白酶,体系pH调至7.0,在50℃下保温水解8小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.3,加入牡蛎肉质量0.5‰的风味蛋白酶继续水解3.0小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品3。
实施例4:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.2%的柠檬酸钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于40℃下保温搅拌1小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.4‰的菠萝蛋白酶,体系pH调至6.0,在52℃下保温水解7小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.1,加入牡蛎肉质量0.9‰的风味蛋白酶继续水解2.0小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品4。
实施例5:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.2%的柠檬酸钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于35℃下保温搅拌2小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.5‰的动物蛋白水解酶,体系pH调至6.5,在50℃下保温水解8小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.2,加入牡蛎肉质量0.8‰的风味蛋白酶继续水解2.5小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品5。
实施例6:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.2%的柠檬酸钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于45℃下保温搅拌1小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.7‰的复合蛋白酶Protamex(诺维信),体系pH调至7.0,在57℃下保温水解6小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.4,加入牡蛎肉质量0.5‰的风味蛋白酶继续水解3.0小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品6。
实施例7:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.2%的柠檬酸钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于38℃下保温搅拌1.5小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.5‰的胰蛋白酶,体系pH调至8.5,在55℃下保温水解7小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.5,加入牡蛎肉质量0.6‰的风味蛋白酶继续水解2.0小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品7。
实施例8:本发明所述牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.2%的柠檬酸钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于42℃下保温搅拌2小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量0.3‰的FoodProAlkalineProtease碱性蛋白酶,体系pH调至7.5,在53℃下保温水解6小时,再用0.1mol/L的HCl溶液将体系pH值调至5.3,加入牡蛎肉质量0.5‰的风味蛋白酶继续水解2.5小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得牡蛎肽样品8。
对比例1:对比牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉1.0倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)往牡蛎肉浆液内加入其量1.0‰的木瓜蛋白酶和1.0‰的风味蛋白酶,体系pH调至6.5,在55℃下保温水解8小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.6%的活性炭,在50℃下保温搅拌1.0小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得对比样品1。
对比例2:对比牡蛎肽的制备方法
(1)将牡蛎去壳,取肉清洗干净,过绞肉机绞碎,加入牡蛎肉碎肉质量0.1%的氯化钙和0.8倍的水,然后过胶体磨得到牡蛎肉浆液。
(2)将牡蛎肉浆液至于40℃下保温搅拌1.5小时后,往牡蛎肉浆液内加入其量1.0‰的Alcalase和1.0‰的风味蛋白酶,体系pH调至8.0,在50℃下保温水解11小时,然后在95℃下加热15min进行灭酶,最后离心,取上清液,得到牡蛎酶解粗液;
(3)往牡蛎酶解粗液加入其质量0.5%的活性炭,在55℃下保温搅拌0.7小时,过滤,所得滤液为牡蛎肽精制液。
(4)采用真空浓缩法将牡蛎肽精制液浓缩至固形物40%,进行喷雾干燥,得对比样品2。
实施例9:不同肽样品的酶解蛋白回收率和体外抗氧化活性
试验样品:实施例1-3制备的牡蛎肽样品1-3,对比例1-2制备的对比样品1-2。
结果见下表。
表1不同肽样品的酶解蛋白回收率和体外抗氧化活性
样品 | 蛋白回收率/% | 还原力※ | DPPH IC50mg/ml |
牡蛎肽样品1 | 79.95 | 0.52 | 3.12 |
牡蛎肽样品2 | 82.41 | 0.56 | 3.64 |
牡蛎肽样品3 | 80.43 | 0.51 | 3.05 |
对比样品1 | 71.24 | 0.40 | 5.61 |
对比样品2 | 83.01 | 0.38 | 4.99 |
※当样品固形物浓度为1mg/ml时在A700nm下的吸收值。
由表1数据分析可知,采用本发明的方法对牡蛎肉进行水解,可得到较高的蛋白回收率(79.95-82.41%),而对比例1加入更大量的酶制剂,蛋白回收率仅为71.24%,主要是因为本专利首先通过添加酶制剂激活剂(钙盐)激活牡蛎肉的内源酶,并在内源酶的最适温度下(35-45℃)水解一段时间,促进牡蛎肉的自溶,从而减少商业酶制剂用量仍可得到较好的水解效率;对比例2中的蛋白回收率高达83.01%,验证了内源酶在水解中的重要性。
同时,采用本发明方法制备的牡蛎肽的体外抗氧化值(还原力和DDPH清除率)均优于对比例样;牡蛎肽样品具有更高还原力和更低的DPPHIC50值,
这主要是因为本发明选择的特定的酶制剂组合以及两步酶解水解更有利于抗氧化活性的释放。
对比例2虽然具有较高的蛋白回收率,但其体外抗氧化值(还原力和DPPH)较低,由此可证明本专利选择的酶制剂是水解牡蛎获取抗氧化活性最佳酶制剂组合。
依据本实施例的方法,对牡蛎肽样品4-8进行检测,结果显示,牡蛎肽样品4-8的蛋白回收率在82%左右,显著高于对比样品1,与对比样品2差别不明显,但是牡蛎肽样品4-8的还原力在0.55左右,高于对比样品1和2;DDPH清除率,不高于3.5mg/ml,比对比样品1和2更低;综合试验结果可知,本发明所提供的牡蛎肽样品在具有较高的蛋白回收率的同时,具有更高还原力和更低的DPPHIC50值。
实施例10:不同牡蛎肽样品对雄性小鼠交配能力的影响
试验样品:实施例1-3制备的牡蛎肽样品1-3,对比例1-2制备的对比样品1-2。
结果见表2和表3。
表2不同牡蛎肽样品对雄性小鼠交配能力的影响
注:**示与对照组比较,P<0.01,*示与对照组比较,P<0.05,a示与对比1比较,P<0.01,b示与对比样2比较,P<0.01
表3不同牡蛎肽样品对雄性小鼠交配能力的影响
注:**示与对照组比较,P<0.01,*示与对照组比较,P<0.05,a示与对比1比较,P<0.01,b示与对比样2比较,P<0.01
由表2、表3数据分析可知:
与空白对照组相比,采用本专利制备的牡蛎肽样品(牡蛎肽样品1、2、3)在捕捉次数、射精次数的提升上与空白对照相比有极其显著性差异(P<0.01);
与空白对照组相比,采用本专利制备的牡蛎肽样品(牡蛎肽样品1、2、3),在捕捉潜伏期、射精潜伏期时间的间隔上与空白对照相比有极其显著性差异(P<0.01),并明显提高扑捉百分率和射精百分率;且捕捉百分率、射精百分率高于空白对照组。
与对比样品相对,采用本专利制备的牡蛎肽样品(牡蛎肽样品1、2、3)在捕捉次数、射精次数与对照样品(对比样品1和对比样品2)相比有显著性的提升(P<0.01)。并显著(P<0.01)提高扑捉百分率和射精百分率;且捕捉百分率、射精百分率高于对照样品组。
依照本实施例的方法,将牡蛎肽样品4-8检测,各牡蛎肽样品检测结果与上述对比样品以及空白对照组相比,均在捕捉次数、射精次数上有明显提升(P<0.01),并显著(P<0.01)提高扑捉百分率和射精百分率,在捕捉潜伏期、射精潜伏期时间的间隔上也均具有显著性差异(P<0.01)。
目前,虽然还未见文献直接证明抗氧化与提升性功能具有直接关系,但本发明从抗氧化及提升性功能的两个角度对牡蛎肽活性进行研究,发现二者有一定的相关性,即依本专利方法制备的牡蛎肽样品既具有良好的体外抗氧化功效,同时对小鼠的性功能有良好的改善作用。
以上所述仅是本发明的优选实施方式,应当指出,对于本技术领域的普通技术人员来说,在不脱离本发明原理的前提下,还可以做出若干改进和润饰,这些改进和润饰也应视为本发明的保护范围。
Claims (10)
1.一种具有提升性功能的牡蛎肽的制备方法,其特征在于,包括:
步骤1、将牡蛎肉、钙盐和水研磨得到牡蛎肉浆液;
步骤2、牡蛎肉浆液酶解,酶解后离心取上清,获得牡蛎酶解粗液;
步骤3、将牡蛎酶解粗液脱色除杂,获得牡蛎肽精制液;
步骤4、牡蛎肽精制液浓缩、喷雾干燥获得所述牡蛎肽。
2.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,所述钙盐为食品级氯化钙、乳酸钙、碳酸钙、磷酸氢钙或柠檬酸钙。
3.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤1所述钙盐为牡蛎肉质量的0.1-0.3%的钙盐。
4.根据权利要求1所述制备方法,其特征在于,步骤2为:
将牡蛎肉浆液先用中性蛋白酶或碱性蛋白酶酶解,然后再用风味蛋白酶酶解,酶解后灭酶、离心,上清液即牡蛎酶解粗液。
5.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,步骤2为:
将牡蛎肉浆液至于35~45℃下保温搅拌1-2小时,然后加入中性蛋白酶或碱性蛋白酶,调节pH升温至50~60℃继续水解5-8小时后,调节pH至5.0-5.5,加入风味蛋白酶在50~60℃下继续酶解,2-3小时后灭酶,离心,上清液即牡蛎酶解粗液。
6.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,所述中性蛋白酶为木瓜蛋白酶、菠萝蛋白酶、动物蛋白水解酶、复合蛋白酶Protamex中的一种或多种;碱性蛋白酶为Alcalase碱性蛋白酶、FoodProAlkalineProtease碱性蛋白酶、胰蛋白酶中的一种或多种。
7.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,所述中性蛋白酶或碱性蛋白酶的加入量为牡蛎肉浆液质量的0.3~0.8‰。
8.根据权利要求4所述制备方法,其特征在于,所述风味蛋白酶的加入量为牡蛎肉浆液质量的0.5~1.0‰。
9.权利要求1-8任意一项所述制备方法制备的牡蛎肽。
10.权利要求9所述牡蛎肽在制备提高性功能和/或抗氧化保健品、食品以及药品中的应用。
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Date | Code | Title | Description |
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C06 | Publication | ||
PB01 | Publication | ||
C10 | Entry into substantive examination | ||
SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |
Application publication date: 20160106 |
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WW01 | Invention patent application withdrawn after publication |