CN114350733B - 一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，涉及酶解技术领域。该生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，包括以下步骤；S1，原料准备，准备新出水剥取的生蚝肉；S2，预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液；S3，物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎，然后使用胶体磨按物料与水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液；S4，初级水解，将S3研磨好的浆液加3～5倍的水，搅拌均匀，用磷酸三钾调节浆液pH值到8.5～9.0，持续搅拌，物料加热到65～90℃，恒温蒸煮1～2小时。本发明不使用酸碱处理法，蛋白破坏和流失小，环境污染小，适宜推广使用。
Description
技术领域
本发明涉及酶解技术领域，特别涉及一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺。
背景技术
生蚝，学名“牡蛎”(ostrea gigas tnunb)俗称海蛎子、蚝等,隶属软体动物门，双壳纲，珍珠贝目，是世界上第一大养殖贝类，是人类可利用的重要海洋生物资源之一，为全球性分布种类。生蚝不仅肉鲜味美、营养丰富, 而且具有独特的保健功能和药用价值，是一种营养价值很高的海产珍品。生蚝的含锌量居人类食物之首。古今中外均认为生蚝有治虚弱、解丹毒、降血压、滋阴壮阳的功能。生蚝作为一种优质的海产养殖贝类，不仅具有肉味鲜美的食用价值，而且其肉与壳均可入药，具有较高的药用价值。
日本学者早在1987年就对生蚝的干品所含营养成分进行了深入的研究并与其他海产品进行了比较。结果表明,生蚝肉中富含多种矿物质及微量元素, 其含量仅次于薄壳乌蛤。而远高于蚶、蛤、鱿鱼、海参等其他海产品。
生蚝具有富含牛磺酸(50μmol/g)、锌、硒的特点；低脂肪、低胆固醇，含有一定量的高度不饱和脂肪酸(EPA+DHA占脂肪总量的20.4％)，无机盐、维生素含量也很丰富。我国东部沿海天然和养殖的多种生蚝牡蛎含有人体所有8 种必需氨基酸,其中含量最高的都是赖氨酸，对平衡国民膳食中氨基酸比例具有重要意义。我国养殖和流通最常见的三种生蚝(太平洋牡蛎、僧帽牡蛎和近江牡蛎)中牛磺酸的含量分别高达7.542，4.388和3.591mg/g，几乎超过其他游离氨基酸含量的总和。
生蚝肉中含大量糖原，糖原是细胞进行新陈代谢的能源，补充糖原可改善机体心脏及血液循环功能，并能增进肝脏的功能且具有保肝作用。生蚝中的糖原还可直接为机体吸收利用，从而能减轻胰腺负担，故对糖尿病十分有益。生蚝中高含量的牛磺酸，颇为营养学家及临床学者所重视。牛磺酸是一种含硫氨基酸，具有多种生理活性。其对婴儿的视网膜和中枢神经的正常发育具有重要的生理作用。
生蚝作为一种优质的海产养殖贝类，不仅具有肉味鲜美的食用价值，而且其肉与壳均可入药，具有较高的药用价值。生蚝的药用和食用价值早已被人们所认识，其味美肉细，易于消化。干肉中含有蛋白质45％～52％，脂肪7％～11％，总糖19％～38％，此外，还含有丰富的维生素A，B1，B2，D和G等，含碘量比牛乳或蛋黄高200倍。浓缩后称“蚝油”；肉可鲜吃或制成干品，即传统的名产品“蚝豉”。
生蚝肉还有“养血，补血，滋阴”之功效，《本草纲目》中记载了生蚝治虚弱、解丹毒、止渴等药用价值。我国最早的药用专著《神农本草经》始载生蚝等贝类中药7种，具有敛阴、潜阳、止汗、化痰、软坚的功用。主治惊痫、眩晕、自汗、盗汗、遗精、淋浊、崩漏、带下、瘿瘤等。根据文献报道，生蚝尚有制酸、降压、抗癌、防衰老的作用。因此，生蚝在中国已由卫生部批准列为第一批既是药材又可作食品的保健品之一。
近代生物医药科学研究，生蚝肉具有，保肝作用、增强免疫力作用、抗肿瘤作用、延缓衰老作用、降血糖作用等，其他药理作用，通过用牡蛎提取物牡蛎糖胺聚糖对过氧化氢诱导的血管内皮细胞氧化损伤模型的研究发现，牡蛎糖胺聚糖对过氧化氢诱导的血管内皮细胞氧化损伤有保护作用，能有效的防止因血管内皮损伤而引起的高血压、动脉硬化、脑卒中等多种心血管疾病的发生。此外，牡蛎肉提取物可以有效防治泼尼松引起的骨代谢紊乱，可提高大鼠骨钙、骨磷、骨锌、骨铁含量，使血钙降低恢复正常。
但是现有酶解工艺技术中一般都使用酸碱处理法，导致蛋白破坏、蛋白流失大、对环境污染较大；其加工生产效率也较低，产能低，生产节奏慢，同时还不利于发挥产品生物活性和生物学功能的效果。
发明内容
本发明的目的在于至少解决现有技术中存在的技术问题之一，提供一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，以解决上述背景技术中提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案，一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，包括以下步骤；
S1，原料准备，准备新出水剥取的生蚝肉；
S2，预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液；
S3，物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎，然后使用胶体磨按物料与水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液；
S4，初级水解，将S3研磨好的浆液加3～5倍的水，搅拌均匀，用磷酸三钾调节浆液pH值到8.5～9.0，持续搅拌，物料加热到65～90℃，恒温蒸煮1～2小时；
S5，合精准酶解，S4水解好的浆液，通过换热冷却，温度降低到50～60℃， pH值至8.0～8.5时，加入复合生物酶制剂，持续搅拌，持续生化反应2～4 小时，跟踪pH值变化曲线，根据pH值变化调控温度，进行精准酶解，当反应物料符合设计曲线变化至酶解反应终点，停止酶反应，其中复合酶添加量，按生蚝肉原料质量的0.2～0.55％比例加入；
S6，灭活，酶解反应结束后，升高物料温度到81℃，维持10分钟；
S7，脱色过滤，按照S6灭活好的料液降温至45℃，按照液体体积的0.15％添加竹材质活性炭，使用气液混合射流器，将活性炭粉末使用真空上料机和空气混匀，吸入射流器中，直接加入料液中，在脱色罐中搅拌脱色30分钟；加入液体体积0.2％的助滤硅藻土搅拌均匀，使用板框压滤循环压滤，直至液体澄清，得到初始生蚝活性蛋白肽原液；
S8，精密过滤，将步骤7的蛋白肽原液依次分别通过陶瓷过滤和保安过滤(碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米)，去除蛋白肽液中的可溶物和绝大部分微生物，防止在膜浓缩中造成严重污染；
S9，纳滤膜浓缩，使用150道尔顿截流的纳滤膜对步骤8过滤好的蛋白肽液进行膜浓缩，浓缩温度控制在10～20℃，不能超过20℃，以保障生蚝多肽提取物的活性；将蛋白肽液浓缩至折光计(糖度计)估算固体可溶物含量超过18％；
S10，干燥，采用冷冻干燥方式或喷雾干燥方案，将浓缩后的蛋白肽液干燥成蛋白肽粉末。
优选的，所述“微冻的情况下物理破碎搅碎”指在-10℃急冻20分钟，将冻结成冰块状态的原料使用碾压破碎和绞肉的方式破碎搅碎，使碎块达到平均直径40～80目。
优选的，所述pH值变化曲线是指复合酶解开始时pH值起始于8.0～8.5，在整个复合酶解过程中，pH值会随着复合反应的进程发生规律性的变化，从而可以判断哪种生物酶进入主酶反应阶段，通过控制相应的温度变化，发挥每种酶的最佳反应条件，达到精准控制酶解进程和深度的目的。对应的pH值和温度调控范围如下；
| 碱性蛋白酶 | 木瓜酶 | 菠萝酶 | 中性蛋白酶 | 酸性蛋白酶 | |
| pH值 | 7.8～8.5 | 7.0～8.0 | 6.0～7.0 | 6.5～7.2 | 5.5～6.5 |
| 温度 | 55～59 | 55～58℃ | 54～56℃ | 50～54℃ | 48～52℃ |
优选的，所述使用胶体磨按物料为水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液。
优选的，所述陶瓷过滤为200纳米孔径滤芯过滤。
优选的，所述保安过滤即碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米。
优选的，所述复合精准酶解中根据生物酶的特点，设计的关键控制点控制方法为，
与现有技术相比，本发明的有益效果是，
(1)该生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，不使用酸碱处理法，蛋白破坏和流失小，环境污染小，使用复合酶，通过对酶解过程的精细控制，避免过度酶解，得到分子量分布在450～1200之间为主的优质生蚝活性蛋白肽产品；
(2)采用复合酶解技术，多酶相互作用和抑制，避免酶解强度够大，产生过多氨基酸碎片；
(3)通过对精准酶解曲线的掌握，结合人工智能，可以实现半自动甚至全自动生产控制，节省人力的同时，大幅提高产品均一性和品质；
(4)通过比较分子量分布和平均分子量，可以看出，复合酶解产物中，功能性蛋白肽和小分子物质(生长因子、多糖、寡聚糖等)保留完好，在一定范围内的含量较高，更有利于产品生物活性和生物学功能的效果。
(5)处理时间比传统工艺时间更短，更容易安排生产节奏和提高产能。
具体实施方式
微生物控制是一个整体，从工艺上，可以分为预处理，前工段，中间段，后工段四个部分，包括微生物控制的方案方法。
实施例一，
发明提供一种技术方案，一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，选用从蚝厂采购的，28头生蚝肉500kg，新鲜剥壳3小时内运送到实验线。
步骤1、原料，28头生蚝肉500kg，新出水剥取的生蚝肉；
步骤2、预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液；
步骤3、物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎，然后使用胶体磨按物料，水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液；
步骤4、初级水解，将步骤3研磨好的浆液加3倍的水，搅拌均匀，用磷酸三钾调节浆液pH值到9.0，持续搅拌，物料加热到70℃，恒温蒸煮1小时；
步骤5、复合精准酶解，步骤4水解好的浆液，通过换热冷却，温度降低到58℃，pH值至8.4时，加入复合生物酶制剂，持续搅拌，持续生化反应4 小时，跟踪pH值变化曲线，根据pH值变化调控温度，进行精准酶解，当反应物料符合设计曲线变化至酶解反应终点，停止酶反应，其中复合酶添加量，按生蚝肉原料质量的0.4％比例加入；
步骤6、灭活，酶解反应结束后，升高物料温度到81℃，维持10分钟；
步骤7、脱色过滤，按照步骤6灭活好的料液降温至45℃，按照液体体积的0.15％添加竹材质活性炭，使用气液混合射流器，将活性炭粉末使用真空上料机和空气混匀，吸入射流器中，直接加入料液中，在脱色罐中搅拌脱色 30分钟；加入液体体积0.2％的助滤硅藻土搅拌均匀，使用板框压滤循环压滤，直至液体澄清，得到初始生蚝活性蛋白肽原液；
步骤8、精密过滤，将步骤7的蛋白肽原液依次分别通过陶瓷过滤(200 纳米孔径滤芯)和保安过滤(碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米)，去除蛋白肽液中的可溶物和绝大部分微生物，防止在膜浓缩中造成严重污染；
步骤9、纳滤膜浓缩，使用150道尔顿截流的纳滤膜对步骤8过滤好的蛋白肽液进行膜浓缩，浓缩温度控制在18℃，以保障生蚝多肽提取物的活性；将蛋白肽液浓缩至折光计(糖度计)估算固体可溶物含量超过18％；
步骤10、干燥，可以采用冷冻干燥方式将浓缩后的蛋白肽液干燥成蛋白肽粉末。
步骤11、本发明中“多种复合生物酶制剂”是由多种生物酶和细菌培养液胞外提取酶配置而成，其组成组分为，活性10万U/g菠萝酶4份、活性20 万U/g木瓜酶20份、活性10万U/g酸性蛋白酶10份、活性20万U/g碱性蛋白酶15份。
进一步地，本发明中所述“微冻情况下物理破碎搅碎”指在-10℃急冻20 分钟，将冻结成冰块状态的原料使用碾压破碎和绞肉的方式破碎搅碎，使碎块达到平均直径40～80目。
再进一步地，第5步中所述pH值变化曲线是指复合酶解开始时pH值起始于8.5，在整个复合酶解过程中，pH值会随着复合反应的进程发生规律性的变化，从而可以判断哪种生物酶进入主酶反应阶段，通过控制相应的温度变化，发挥每种酶的最佳反应条件，达到精准控制酶解进程和深度的目的。
根据各种生物酶的特点，设计的关键控制点控制方案为；
本发明提供的实施例二；该生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺包括；
选用从蚝厂采购的，28头生蚝肉500kg，新鲜剥壳3小时内运送到实验线。
步骤1、原料，28头生蚝肉500kg，新出水剥取的生蚝肉；
步骤2、预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液；
步骤3、物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎，然后使用胶体磨按物料，水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液；
步骤4、初级水解，将步骤3研磨好的浆液加4倍的水，搅拌均匀，用磷酸三钾调节浆液pH值到8.8，持续搅拌，物料加热到80℃，恒温蒸煮1.5小时；
步骤5、复合精准酶解，步骤4水解好的浆液，通过换热冷却，温度降低到59℃，pH值至8.6时，加入复合生物酶制剂，持续搅拌，持续生化反应3.5 小时，跟踪pH值变化曲线，根据pH值变化调控温度，进行精准酶解，当反应物料符合设计曲线变化至酶解反应终点，停止酶反应，其中复合酶添加量，按生蚝肉原料质量的0.35％比例加入；
步骤6、灭活，酶解反应结束后，升高物料温度到81℃，维持10分钟；
步骤7、脱色过滤，按照步骤6灭活好的料液降温至45℃，按照液体体积的0.15％添加竹材质活性炭，使用气液混合射流器，将活性炭粉末使用真空上料机和空气混匀，吸入射流器中，直接加入料液中，在脱色罐中搅拌脱色 30分钟；加入液体体积0.2％的助滤硅藻土搅拌均匀，使用板框压滤循环压滤，直至液体澄清，得到初始生蚝活性蛋白肽原液；
步骤8、精密过滤，将步骤7的蛋白肽原液依次分别通过陶瓷过滤(200 纳米孔径滤芯)和保安过滤(碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米)，去除蛋白肽液中的可溶物和绝大部分微生物，防止在膜浓缩中造成严重污染；
步骤9、纳滤膜浓缩，使用150道尔顿截流的纳滤膜对步骤8过滤好的蛋白肽液进行膜浓缩，浓缩温度控制在20℃，以保障生蚝多肽提取物的活性；将蛋白肽液浓缩至折光计(糖度计)估算固体可溶物含量超过18％；
步骤10、干燥，采用喷雾冻干燥方式将浓缩后的蛋白肽液干燥成蛋白肽粉末。
步骤11、本发明中“多种复合生物酶制剂”是由多种生物酶和细菌培养液胞外提取酶配置而成，其组成组分为，活性10万U/g菠萝酶5份、活性20 万U/g木瓜酶24份、活性10万U/g酸性蛋白酶12份、活性20万U/g碱性蛋白酶10份。
步骤12、本发明中所述“微冻情况下物理破碎搅碎”指在-10℃急冻20 分钟，将冻结成冰块状态的原料使用碾压破碎和绞肉的方式破碎搅碎，使碎块达到平均直径40～80目。
其次，第5步中所述pH值变化曲线是指复合酶解开始时pH值起始于8.8，在整个复合酶解过程中，pH值会随着复合反应的进程发生规律性的变化，从而可以判断哪种生物酶进入主酶反应阶段，通过控制相应的温度变化，发挥每种酶的最佳反应条件，达到精准控制酶解进程和深度的目的。
根据各种生物酶的特点，设计的关键控制点控制方案为
本发明提供的实施例三；该生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺包括；
选用从蚝厂采购的，28头生蚝肉500kg，新鲜剥壳3小时内运送到实验线。
步骤1、原料，28头生蚝肉500kg，新出水剥取的生蚝肉；
步骤2、预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液；
步骤3、物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎，然后使用胶体磨按物料，水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液；
步骤4、初级水解，将步骤3研磨好的浆液加5倍的水，搅拌均匀，用磷酸三钾调节浆液pH值到8.5，持续搅拌，物料加热到85℃，恒温蒸煮1小时；
步骤5、复合精准酶解，步骤4水解好的浆液，通过换热冷却，温度降低到58℃，pH值至8.5时，加入复合生物酶制剂，持续搅拌，持续生化反应3 小时，跟踪pH值变化曲线，根据pH值变化调控温度，进行精准酶解，当反应物料符合设计曲线变化至酶解反应终点，停止酶反应，其中复合酶添加量，按生蚝肉原料质量的0.5％比例加入；
步骤6、灭活，酶解反应结束后，升高物料温度到81℃，维持10分钟；
步骤7、脱色过滤，按照步骤6灭活好的料液降温至45℃，按照液体体积的0.15％添加竹材质活性炭，使用气液混合射流器，将活性炭粉末使用真空上料机和空气混匀，吸入射流器中，直接加入料液中，在脱色罐中搅拌脱色 30分钟；加入液体体积0.2％的助滤硅藻土搅拌均匀，使用板框压滤循环压滤，直至液体澄清，得到初始生蚝活性蛋白肽原液；
步骤8、精密过滤，将步骤7的蛋白肽原液依次分别通过陶瓷过滤(200 纳米孔径滤芯)和保安过滤(碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米)，去除蛋白肽液中的可溶物和绝大部分微生物，防止在膜浓缩中造成严重污染；
步骤9、纳滤膜浓缩，使用150道尔顿截流的纳滤膜对步骤8过滤好的蛋白肽液进行膜浓缩，浓缩温度控制在15℃，以保障生蚝多肽提取物的活性；将蛋白肽液浓缩至折光计(糖度计)估算固体可溶物含量超过19％；
步骤10、干燥，采用喷雾干燥方式将浓缩后的蛋白肽液干燥成蛋白肽粉末。
其次，本发明中“多种复合生物酶制剂”是由多种生物酶和细菌培养液胞外提取酶配置而成，其组成组分为，活性10万U/g菠萝酶5份、活性20 万U/g木瓜酶25份、活性10万U/g酸性蛋白酶10份、活性20万U/g碱性蛋白酶15份。
进一步地，本发明中所述“微冻情况下物理破碎搅碎”指在-10℃急冻20 分钟，将冻结成冰块状态的原料使用碾压破碎和绞肉的方式破碎搅碎，使碎块达到平均直径40～80目。
需要说明的是，第5步中所述pH值变化曲线是指复合酶解开始时pH值起始于8.8，在整个复合酶解过程中，pH值会随着复合反应的进程发生规律性的变化，从而可以判断哪种生物酶进入主酶反应阶段，通过控制相应的温度变化，发挥每种酶的最佳反应条件，达到精准控制酶解进程和深度的目的。
根据各种生物酶的特点，设计的关键控制点控制方案为
本发明提供的实施例四；该生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺包括；，选用从蚝厂采购的，28头生蚝肉500kg，新鲜剥壳3小时内运送到实验线。
步骤1、原料，28头生蚝肉500kg，新出水剥取的生蚝肉；
步骤2、预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液，通过氢氧化钠(质量分数0.05％)的快速清洗，脱去杂志；
步骤3、物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎；
步骤4、蒸煮水解，将步骤3研磨好的浆液加5倍的水，搅拌均匀，物料加热到95℃，恒温蒸煮2小时；
步骤5、生物酶解，步骤4水解好的浆液，通过换热冷却，温度降低到 55℃，pH值至7.3时，加入碱性蛋白酶，持续搅拌，持续生化反应4小时，检测pH值达到5.8时停止酶反应，其中碱性蛋白酶添加量，按生蚝肉原料质量的0.4％比例加入；
步骤6、灭活，酶解反应结束后，升高物料温度到81℃，维持10分钟；
步骤7、脱色过滤，按照步骤6灭活好的料液降温至45℃，按照液体体积的0.15％添加竹材质活性炭，使用气液混合射流器，将活性炭粉末使用真空上料机和空气混匀，吸入射流器中，直接加入料液中，在脱色罐中搅拌脱色 30分钟；加入液体体积0.2％的助滤硅藻土搅拌均匀，使用板框压滤循环压滤，直至液体澄清，得到初始生蚝活性蛋白肽原液；
步骤8、精密过滤，将步骤7的蛋白肽原液依次分别通过陶瓷过滤(200 纳米孔径滤芯)和保安过滤(碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米)，去除蛋白肽液中的可溶物和绝大部分微生物，防止在膜浓缩中造成严重污染；
步骤9、纳滤膜浓缩，使用150道尔顿截流的纳滤膜对步骤8过滤好的蛋白肽液进行膜浓缩，浓缩温度控制在18℃，以保障生蚝多肽提取物的活性；将蛋白肽液浓缩至折光计(糖度计)估算固体可溶物含量超过18％；
步骤10、干燥，采用喷雾干燥方式将浓缩后的蛋白肽液干燥成蛋白肽粉末。
其次，本发明中所述“微冻情况下物理破碎搅碎”指在-10℃急冻20分钟，将冻结成冰块状态的原料使用碾压破碎和绞肉的方式破碎搅碎，使碎块达到平均直径40～80目。
将实例1～4的产品各取50克标记为样品1～4，进行产品检测分析，结果对比如下，
Claims (5)
1.一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，其特征在于，包括以下步骤；
S1，原料准备，准备新出水剥取的生蚝肉；
S2，预处理，将生蚝肉过淋浴清洗或沸腾清洗池，清洗去表面粘液；
S3，物理破碎，将清洗后的原料在微冻的情况下使用绞肉机或斩拌机将原料进行物理破碎，然后使用胶体磨物料与水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液；
S4，初级水解，将S3研磨好的浆液加3～5倍的水，搅拌均匀，用磷酸三钾调节浆液pH值到8.5～9.0，持续搅拌，物料加热到65～90℃，恒温蒸煮1～2小时；
S5，复合精准酶解，S4水解好的浆液，通过换热冷却，温度降低到50～60℃，pH值至8.0～8.5时，加入复合生物酶制剂，持续搅拌，持续生化反应2～4小时，跟踪pH值变化曲线，根据pH值变化调控温度，进行精准酶解，当反应物料符合设计曲线变化至酶解反应终点，停止酶反应，其中复合酶添加量，按生蚝肉原料质量的0.2～0.55％比例加入；所述复合生物酶制剂是由多种生物酶和细菌培养液胞外提取酶配置而成，其组成组分为，活性10万U/g菠萝酶4份、活性20万U/g木瓜酶20份、活性10万U/g酸性蛋白酶10份、活性20万U/g碱性蛋白酶15份；
S6，灭活，酶解反应结束后，升高物料温度到81℃，维持10分钟；
S7，脱色过滤，按照S6灭活好的料液降温至45℃，按照液体体积的0.15％添加竹材质活性炭，使用气液混合射流器，将活性炭粉末使用真空上料机和空气混匀，吸入射流器中，直接加入料液中，在脱色罐中搅拌脱色30分钟；加入液体体积0.2％的助滤硅藻土搅拌均匀，使用板框压滤循环压滤，直至液体澄清，得到初始生蚝活性蛋白肽原液；
S8，精密过滤，将步骤S7的蛋白肽原液依次分别通过陶瓷过滤和保安过滤，去除蛋白肽液中的可溶物和绝大部分微生物，防止在膜浓缩中造成严重污染；
S9，纳滤膜浓缩，使用150道尔顿截流的纳滤膜对步骤S8过滤好的蛋白肽液进行膜浓缩，浓缩温度控制在10～20℃，不能超过20℃，以保障生蚝多肽提取物的活性；将蛋白肽液浓缩至折光计估算固体可溶物含量超过18％；
S10，干燥，采用冷冻干燥方式或喷雾干燥方案，将浓缩后的蛋白肽液干燥成蛋白肽粉末；
所述pH值变化曲线是指复合酶解开始时pH值起始于8.0～8.5，在整个复合酶解过程中，pH值会随着复合反应的进程发生规律性的变化，从而可以判断哪种生物酶进入主酶反应阶段，通过控制相应的温度变化，发挥每种酶的最佳反应条件，达到精准控制酶解进程和深度的目的，对应的pH值和温度调控范围如下：
，
所述复合精准酶解中根据生物酶的特点，设计的关键控制点控制方法为，
2.根据权利要求1所述的一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，其特征在于，所述“微冻的情况下物理破碎”指在-10℃急冻20分钟，将冻结成冰块状态的原料使用碾压破碎和绞肉的方式破碎，使碎块达到平均直径40～80目。
3.根据权利要求1所述的一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，其特征在于，所述使用胶体磨按物料与水质量比1：0.5的比例加水研磨成浆液。
4.根据权利要求1所述的一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，其特征在于，所述陶瓷过滤为200纳米孔径滤芯过滤。
5.根据权利要求1所述的一种生蚝活性蛋白肽复合精准酶解工艺，其特征在于，所述保安过滤即碟式精密过滤器滤膜采用0.22微米。
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