CN111334549A - 一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法 - Google Patents

一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法 Download PDF

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Abstract

本发明公开了一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,以新鲜无壳牡蛎为原料,经过鲜蛎肉专用蛋白酶酶解提取牡蛎肽,把牡蛎生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,产品小肽含量高,再经过活性炭去味,改进牡蛎肽的口感,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用。该牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势,易于工业化规模生产,得到的牡蛎肽的分子量分布均匀,通过生物酶解技术,把牡蛎通过生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,吸收完全而迅速,产品小肽含量高,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用;经过活性炭去味后牡蛎肽在口感上更易被接受。

Description

一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法
技术领域
本发明涉及生物活性提取技术领域,具体为一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法。
背景技术
牡蛎以其分布于淡水入海的河口而得名,在华南沿海一带广泛养殖己有700多年的历史,是南方沿海最主要的经济贝类凹,牡蛎是一种营养价值和药用价值很高的水产品,其含有丰富的蛋白质、糖原、牛磺酸、氨基酸、维生素和微量元素等营养成分,以蛋自质的含量高尤为突出网,牡蛎中含有丰富的内源性蛋白酶,内源酶对天然底物有着高度的催化性和专一性,在催化程度上有可能比工业酶制剂的效果更显著,牡蛎蛋白质进行水解后,经过特殊方法分离提取酶解液可得到牡蛎提取物,其具有增强机体免疫明、保护肝脏、降血糖、降血脂、抗肿瘤凹、抗氧化、抗疲劳、抑制ACE酶活性等医疗保健功能。
以水解液中的氨基酸态氮含量为响应值,利用响应面法对自溶水解工艺条件优化,得到牡蛎自溶过程的最佳工艺条件,旨在提高短肽和游离氨基酸的含量,为牡蛎内源性蛋白酶类的利用提供科学依据和指导,现有的牡蛎肽提取方法工艺简单,易于操作,酶解机械去壳,节省时间,缩短了生产周期,制备得到的蛋白肽为小分子肽,分子量小,活性高。
发明内容
本发明的目的就在于为了解决上述问题而提供一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势。
本发明通过以下技术方案来实现上述目的,一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,以新鲜无壳牡蛎为原料,经过鲜蛎肉专用蛋白酶酶解提取牡蛎肽,把牡蛎生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,产品小肽含量高,再经过活性炭去味,改进牡蛎肽的口感,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用,具体步骤如下:
步骤一:预处理:
对无壳牡蛎高压蒸煮,将牡蛎肉去除内脏后匀浆,先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β-环糊精进行处理,调节脱腥牡蛎肉匀浆pH 值;
步骤二:酶解:
加入复合蛋白酶进行恒温酶解,酶解结束后灭酶,充分搅拌后使得酶与蛋白酶进行接触反应;
步骤三:脱腥:
将匀浆中加入活性干酵母和阿拉伯糖,在38-43℃下脱腥20-30min,然后加入牡蛎肉重量5-8%的β-环糊精,在温度为60-70℃、超高压为,300-400MPa的条件下超高压脱腥处理10-20min,即得脱腥牡蛎肉匀浆,活性干酵母疏松的结构对腥臭物质有吸附作用,同时活性干酵母含有多种酶,该步骤中先用活性干酵母将腥臭物质转化为无腥臭物质,腥臭物质如醛、酮等大分子物质被细胞聚积,然后再利用β-环状糊精的包埋作用除去残留的酵母发酵味和发酵酸及残留的腥味,达到更优的除腥效果;
步骤四:过滤:
离心上清液过滤,将酶解液经截留分子量为8-12kDa的超滤膜进行超滤,获得8-12kDa以下的肽混合物,再经200-400Da的纳滤膜纳滤,获得 200-400Da以上的浓缩肽液,冷冻干燥即得牡蛎肽;
步骤五:浓缩:
浓缩的压力控制在-0.4--0.6MPa,浓缩温度控制在75℃-80℃,浓缩过程中测定波美度,使波美度控制在10,针对牡蛎提取液在浓缩过程中易产生浑浊现象,通过浓缩液过滤方式得以解决;
步骤六:干燥:
喷雾干燥设备喷粉干燥,水分含量降至5%;
步骤七:成品包装:
将浓缩液煮沸灭菌,由喷雾干燥设备喷粉干,成品包装,采用密封包装。
优选的,蛎肉整体蒸煮,采用温度120℃-130℃,压力0.13-0.15MPa,恒温恒压蒸煮2小时,牡蛎提取液排入汤罐,牡蛎肉渣排出。
优选的,酶解的具体步骤为:调节脱腥牡蛎肉匀浆的pH至7.5-8.5,按加酶量为3-4%加入复合蛋白酶,再加入复合蛋白酶重量2-2.6%的十八酸钠和0.3-0.5%的四丁基溴化铵,然后在30-40℃下酶解8-12h。
优选的,提高牡蛎蛋白在牡蛎肉匀浆中的分散性和稳定性,提高牡蛎蛋白和蛋白酶的接触机会,进而提高酶解速率和牡蛎肽得率,而且能切开糖蛋白的糖苷键,使糖原降解,进而使得蛋白酶快速识别得到除去糖原的蛋白进行酶解,最终提高牡蛎肽的得率。
优选的,复合蛋白为中性蛋白酶和味蛋白酶,其重量比为1:2.3-2.7。
优选的,牡蛎专用酶,其成分主要有内切酶、外切酶和风味酶组成。
本发明的技术效果和优点:该牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势,易于工业化规模生产,得到的牡蛎肽的分子量分布均匀,通过生物酶解技术,把牡蛎通过生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,吸收完全而迅速,产品小肽含量高,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用;经过活性炭去味后牡蛎肽在口感上更易被接受。
具体实施方式
下面将结合本发明的具体实施例,对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述,显然,所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例,而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例,本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例,都属于本发明保护的范围。
实施例一:
以新鲜无壳牡蛎为原料,经过鲜蛎肉专用蛋白酶酶解提取牡蛎肽,把牡蛎生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,产品小肽含量高,再经过活性炭去味,改进牡蛎肽的口感,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用,具体步骤如下:
步骤一:预处理:
对无壳牡蛎高压蒸煮,将牡蛎肉去除内脏后匀浆,先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β-环糊精进行处理,调节脱腥牡蛎肉匀浆pH 值;
步骤二:酶解:
加入复合蛋白酶进行恒温酶解,酶解结束后灭酶,充分搅拌后使得酶与蛋白酶进行接触反应,在温度40℃、原料占总质量比0.5的条件下水解12h,水解离心清液的氨基酸态氮含量随初始pH的不同发生明显的变化;
步骤三:脱腥:
将匀浆中加入活性干酵母和阿拉伯糖,在38-43℃下脱腥20-30min,然后加入牡蛎肉重量5-8%的β-环糊精,在温度为60-70℃、超高压为, 300-400MPa的条件下超高压脱腥处理10-20min,即得脱腥牡蛎肉匀浆,活性干酵母疏松的结构对腥臭物质有吸附作用,同时活性干酵母含有多种酶,该步骤中先用活性干酵母将腥臭物质转化为无腥臭物质,腥臭物质如醛、酮等大分子物质被细胞聚积,然后再利用β-环状糊精的包埋作用除去残留的酵母发酵味和发酵酸及残留的腥味,达到更优的除腥效果;
步骤四:过滤:
离心上清液过滤,将酶解液经截留分子量为8-12kDa的超滤膜进行超滤,获得8-12kDa以下的肽混合物,再经200-400Da的纳滤膜纳滤,获得 200-400Da以上的浓缩肽液,冷冻干燥即得牡蛎肽;
步骤五:浓缩:
浓缩的压力控制在-0.4--0.6MPa,浓缩温度控制在75℃-80℃,浓缩过程中测定波美度,使波美度控制在10,针对牡蛎提取液在浓缩过程中易产生浑浊现象,通过浓缩液过滤方式得以解决;
步骤六:干燥:
喷雾干燥设备喷粉干燥,水分含量降至5%;
步骤七:成品包装:
将浓缩液煮沸灭菌,由喷雾干燥设备喷粉干,成品包装,采用密封包装。
操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势,易于工业化规模生产,得到的牡蛎肽的分子量分布均匀,通过生物酶解技术,把牡蛎通过生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,吸收完全而迅速,产品小肽含量高。
实施例二;
进一步的,蛎肉整体蒸煮,采用温度120℃-130℃,压力0.13-0.15MPa,恒温恒压蒸煮2小时,牡蛎提取液排入汤罐,牡蛎肉渣排出。
进一步的,酶解的具体步骤为:调节脱腥牡蛎肉匀浆的pH至7.5-8.5,按加酶量为3-4%加入复合蛋白酶,再加入复合蛋白酶重量2-2.6%的十八酸钠和0.3-0.5%的四丁基溴化铵,然后在30-40℃下酶解8-12h。
进一步的,提高牡蛎蛋白在牡蛎肉匀浆中的分散性和稳定性,提高牡蛎蛋白和蛋白酶的接触机会,进而提高酶解速率和牡蛎肽得率,而且能切开糖蛋白的糖苷键,使糖原降解,进而使得蛋白酶快速识别得到除去糖原的蛋白进行酶解,最终提高牡蛎肽的得率。
进一步的,复合蛋白为中性蛋白酶和味蛋白酶,其重量比为1:2.3-2.7。
进一步的,牡蛎专用酶,其成分主要有内切酶、外切酶和风味酶组成
对于本领域技术人员而言,结合实施例1和实施例2:通过上述步骤进行检测时,操作简单、蛋白质降解效果好、牡蛎肽得率高、感官接受度较高的优势,易于工业化规模生产,得到的牡蛎肽的分子量分布均匀,通过生物酶解技术,把牡蛎通过生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,吸收完全而迅速,产品小肽含量高,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用,经过活性炭去味后牡蛎肽在口感上更易被接受。
此外,应当理解,虽然本说明书按照实施方式加以描述,但并非每个实施方式仅包含一个独立的技术方案,说明书的这种叙述方式仅仅是为清楚起见,本领域技术人员应当将说明书作为一个整体,各实施例中的技术方案也可以经适当组合,形成本领域技术人员可以理解的其他实施方式。

Claims (6)

1.一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,以新鲜无壳牡蛎为原料,经过鲜蛎肉专用蛋白酶酶解提取牡蛎肽,把牡蛎生物酶水解后变成全部可溶于水的活性成分,产品小肽含量高,再经过活性炭去味,改进牡蛎肽的口感,更有利于牡蛎活性成分的吸收和利用,具体步骤如下:
步骤一:预处理:
对无壳牡蛎高压蒸煮,将牡蛎肉去除内脏后匀浆,先加入活性干酵母和阿拉伯糖脱腥、然后加入β-环糊精进行处理,调节脱腥牡蛎肉匀浆pH值;
步骤二:酶解:
加入复合蛋白酶进行恒温酶解,酶解结束后灭酶,充分搅拌后使得酶与蛋白酶进行接触反应;
步骤三:脱腥:
将匀浆中加入活性干酵母和阿拉伯糖,在38-43℃下脱腥20-30min,然后加入牡蛎肉重量5-8%的β-环糊精,在温度为60-70℃、超高压为,300-400MPa的条件下超高压脱腥处理10-20min,即得脱腥牡蛎肉匀浆,活性干酵母疏松的结构对腥臭物质有吸附作用,同时活性干酵母含有多种酶,该步骤中先用活性干酵母将腥臭物质转化为无腥臭物质,腥臭物质如醛、酮等大分子物质被细胞聚积,然后再利用β-环状糊精的包埋作用除去残留的酵母发酵味和发酵酸及残留的腥味,达到更优的除腥效果;
步骤四:过滤:
离心上清液过滤,将酶解液经截留分子量为8-12kDa的超滤膜进行超滤,获得8-12kDa以下的肽混合物,再经200-400Da的纳滤膜纳滤,获得200-400Da以上的浓缩肽液,冷冻干燥即得牡蛎肽;
步骤五:浓缩:
浓缩的压力控制在-0.4--0.6MPa,浓缩温度控制在75℃-80℃,浓缩过程中测定波美度,使波美度控制在10,针对牡蛎提取液在浓缩过程中易产生浑浊现象,通过浓缩液过滤方式得以解决;
步骤六:干燥:
喷雾干燥设备喷粉干燥,水分含量降至5%;
步骤七:成品包装:
将浓缩液煮沸灭菌,由喷雾干燥设备喷粉干,成品包装,采用密封包装。
2.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,其特征在于:所述蛎肉整体蒸煮,采用温度120℃-130℃,压力0.13-0.15MPa,恒温恒压蒸煮2小时,牡蛎提取液排入汤罐,牡蛎肉渣排出。
3.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,其特征在于:酶解的具体步骤为:调节脱腥牡蛎肉匀浆的pH至7.5-8.5,按加酶量为3-4%加入复合蛋白酶,再加入复合蛋白酶重量2-2.6%的十八酸钠和0.3-0.5%的四丁基溴化铵,然后在30-40℃下酶解8-12h。
4.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,其特征在于:提高牡蛎蛋白在牡蛎肉匀浆中的分散性和稳定性,提高牡蛎蛋白和蛋白酶的接触机会,进而提高酶解速率和牡蛎肽得率,而且能切开糖蛋白的糖苷键,使糖原降解,进而使得蛋白酶快速识别得到除去糖原的蛋白进行酶解,最终提高牡蛎肽的得率。
5.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,其特征在于:复合蛋白为中性蛋白酶和味蛋白酶,其重量比为1:2.3-2.7。
6.根据权利要求1所述的一种牡蛎肽及牡蛎肽提取方法,其特征在于:牡蛎专用酶,其成分主要有内切酶、外切酶和风味酶组成。
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