CN113151383A - 一种酵母提取方法 - Google Patents

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刘玉山
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    • C12BIOCHEMISTRY; BEER; SPIRITS; WINE; VINEGAR; MICROBIOLOGY; ENZYMOLOGY; MUTATION OR GENETIC ENGINEERING
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    • C12P21/00Preparation of peptides or proteins
    • C12P21/06Preparation of peptides or proteins produced by the hydrolysis of a peptide bond, e.g. hydrolysate products
    • CCHEMISTRY; METALLURGY
    • C07ORGANIC CHEMISTRY
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    • C07K1/00General methods for the preparation of peptides, i.e. processes for the organic chemical preparation of peptides or proteins of any length
    • C07K1/14Extraction; Separation; Purification
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Abstract

本发明公开了一种酵母提取方法,涉及酵母提取领域,包括有酵母破壁:加入酶,将原料通过酶解破壁,提取酵母蛋白,所述原料为糖蜜酵母乳或啤酒酵母乳;酶解:向步骤(1)得到的酵母蛋白中加入蛋白酶进行酶解,离心分离酵母乳,获得上清液;将酶解后的上清液经30‑50分钟、75‑90℃热处理使酶失活;收集第一上清液得到酶解产物;分离:对酶解产物进一步分离,收集第二上清液,得酵母多肽。解决了提取得到的多肽产品纯度较低,核酸、多糖及盐分等杂质较多,且多肽的分子量范围不明确,颜色、气味和口感等感官性状较差的问题。

Description

一种酵母提取方法
技术领域
本发明涉及酵母提取领域,具体为一种酵母提取方法。
背景技术
目前市售的酵母多肽粉主要是酵母抽提物,一般的酵母抽提物是利用酵母生物自溶,再经酶解、喷雾干燥而成,呈淡黄色至黄色的粉末状。除多肽,还有大量未分解的蛋白质,酵母多糖,氨基酸、核苷酸及维生素等物质。多肽在其中的含量至多为50%左右,这种多肽粉主要用于动物饲料。高纯度的植物多肽广泛用于食品及保健品而酵母多肽用于人类食品的基本未见。其原因是由于酵母多肽这种产品多用于调味、直接食用口感较差,难以大量添加到蛋白粉等一些营养健康食品中。关于制备高纯度的酵母多肽这方面的文献和专利均发表很少,中国专利CN102550802 A公开了一种从啤酒废酵母中提取多肽和氨基酸的方法,用高压均质后抽提酶解的方案,最后得到多肽和氨基酸成品,但其存在抽提时间较长的问题。吴鑫颖等采用自溶法从啤酒酵母中酶解提取酵母多肽产品,得到了优化的酶解工艺。现有的从酵母中制备较高纯度的多肽的工艺为:酵母酶解、抽提、离心、纯化得到多肽,涉及酶解、离心、精制纯化、脱色等工艺。提取得到的多肽产品纯度较低,核酸、多糖及盐分等杂质较多,且多肽的分子量范围不明确,颜色、气味和口感等感官性状较差。并且,提取得到的多肽产品涉及高浓度碱提取工艺,反应条件剧烈,此条件下酵母蛋白容易变性,或者可能生成有害物质,用作食品原料有风险,过程较复杂,还须脱色。
发明内容
本发明目的在于提供一种酵母提取方法,以解决上述背景技术中提出的现有的提取得到的多肽产品纯度较低,核酸、多糖及盐分等杂质较多,且多肽的分子量范围不明确,颜色、气味和口感等感官性状较差的问题。
一种酵母提取方法,包括有
(1)酵母破壁:加入酶,将原料通过酶解破壁,提取酵母蛋白,原料为糖蜜酵母乳或啤酒酵母乳;
(2)酶解:向步骤(1)得到的酵母蛋白中加入蛋白酶进行酶解,离心分离所述酵母乳,获得上清液;将所述酶解后的上清液经30-50分钟、75-90℃热处理使酶失活;收集第一上清液得到酶解产物;
(3)分离:对酶解产物进一步分离,收集第二上清液,得到酵母多肽。
作为本发明的一个实施例,所述将原料通过酶解破壁包括有
将原料配制成溶液,其溶液的质量浓度为5%-20%,再进行酶解破壁;
对所述溶液调节温度至30-50℃。
作为本发明的一个实施例,所述将原料通过酶解破壁包括有
加入酶的质量分数占原料的0.5%-3%。
所述加入酶为β-葡聚糖酶、α-葡聚糖酶、α-甘露聚糖酶和纤维素酶中的一种或两种以上。
作为本发明的一个实施例,酶解时间为5-11h。
步骤(2)中将步骤(1)得到的酵母蛋白溶解,配制成浓度为7%-19%的溶液;
加入蛋白酶酶解前调节pH为7-9;
加入蛋白酶酶解前调节温度到30-50℃。
作为本发明的一个实施例,以步骤(1)中提取得到的酵母蛋白的质量计,加入蛋白酶占酵母蛋白的质量分数为0.5%-2%,酶解时间为1-16h。
作为本发明的一个实施例,所述加入的蛋白酶选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶、大豆多肽水解酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶中的一种或两种以上,大豆多肽水解酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。
作为本发明的一个实施例,酶解完成后还包括升温使酶失活的步骤,温度为70-90℃,时间为20-30分钟。
作为本发明的一个实施例,得到的第一上清液采用离心、膜分离和/或过滤进行分离;
所述过滤选自采用切向流过滤系统和/或硅藻土过滤。
作为本发明的一个实施例,采用切向流过滤系统进行分离;
采用截留分子量1000-7000D膜。
作为本发明的一个实施例,酵母多肽进一步浓缩、干燥处理,得到酵母多肽产品;
所述干燥选用喷雾干燥或冷冻干燥。
具体实施方式
为使本公开的目的、技术方案和优点更加清楚明白,以下结合具体实施例,对本公开进一步详细说明。
需要说明的是,除非另外定义,本说明书一个或多个实施例使用的技术术语或者科学术语应当为本公开所属领域内具有一般技能的人士所理解的通常意义。本说明书一个或多个实施例中使用的“第一”、“第二”以及类似的词语并不表示任何顺序、数量或者重要性,而只是用来区分不同的组成部分。“包括”或者“包含”等类似的词语意指出现该词前面的元件或者物件涵盖出现在该词后面列举的元件或者物件及其等同,而不排除其他元件或者物件。“连接”或者“相连”等类似的词语并非限定于物理的或者机械的连接,而是可以包括电性的连接,不管是直接的还是间接的。“上”、“下”、“左”、“右”等仅用于表示相对位置关系,当被描述对象的绝对位置改变后,则该相对位置关系也可能相应地改变。
一种酵母提取方法,包括有
(1)酵母破壁:加入酶,将原料通过酶解破壁,提取酵母蛋白,所述原料为糖蜜酵母乳或啤酒酵母乳;
(2)酶解:向步骤(1)得到的酵母蛋白中加入蛋白酶进行酶解,离心分离所述酵母乳,获得上清液;将所述酶解后的上清液经30-50分钟、75-90℃热处理使酶失活;收集第一上清液得到酶解产物;
(3)分离:对酶解产物进一步分离,收集第二上清液,得到酵母多肽。
所述将原料通过酶解破壁包括有
将原料配制成溶液,其溶液的质量浓度为5%-20%,再进行酶解破壁;
对所述溶液调节温度至30-50℃。
所述将原料通过酶解破壁包括有
加入酶的质量分数占原料的0.5%-3%。
所述加入酶为β-葡聚糖酶、α-葡聚糖酶、α-甘露聚糖酶和纤维素酶中的一种或两种以上。
酶解时间为5-11h。
步骤(2)中将步骤(1)得到的酵母蛋白溶解,配制成浓度为7%-19%的溶液;
加入蛋白酶酶解前调节pH为7-9;
加入蛋白酶酶解前调节温度到30-50℃。
步骤(2)中,以步骤(1)中提取得到的酵母蛋白的质量计,加入蛋白酶占酵母蛋白的质量分数为0.5%-2%,酶解时间为1-16h。
所述加入的蛋白酶选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶、大豆多肽水解酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶中的一种或两种以上,大豆多肽水解酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。
酶解完成后还包括升温使酶失活的步骤,温度为70-90℃,时间为20-30分钟。
得到的第一上清液采用离心、膜分离和/或过滤进行分离;
所述过滤选自采用切向流过滤系统和/或硅藻土过滤。
采用切向流过滤系统进行分离;
采用截留分子量1000-7000D膜。
酵母多肽进一步浓缩、干燥处理,得到酵母多肽产品;
所述干燥选用喷雾干燥或冷冻干燥。
总多肽中含有分子量在80%以上。
实施例
一种酵母提取方法,包括有
酵母破壁:加入酶,将原料通过酶解破壁,提取酵母蛋白,所述原料为糖蜜酵母乳或啤酒酵母乳;
酶解:向步骤得到的酵母蛋白中加入蛋白酶进行酶解,离心分离所述酵母乳,获得上清液;将所述酶解后的上清液经30分钟、75℃热处理使酶失活;收集第一上清液得到酶解产物;
分离:对酶解产物进一步分离,收集第二上清液,得到酵母多肽。
所述将原料通过酶解破壁包括有
将原料配制成溶液,其溶液的质量浓度为5%,再进行酶解破壁;
对所述溶液调节温度至30℃。
所述将原料通过酶解破壁包括有
加入酶的质量分数占原料的0.5%。
所述加入酶为β-葡聚糖酶、α-葡聚糖酶、α-甘露聚糖酶和纤维素酶中的一种或两种以上。
酶解时间为5h。
将步骤(1)得到的酵母蛋白溶解,配制成浓度为7%的溶液;
加入蛋白酶酶解前调节pH为7;
加入蛋白酶酶解前调节温度到30℃。
提取得到的酵母蛋白的质量计,加入蛋白酶占酵母蛋白的质量分数为0.5%,酶解时间为1h。
所述加入的蛋白酶选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶、大豆多肽水解酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶中的一种或两种以上,大豆多肽水解酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。
酶解完成后还包括升温使酶失活的步骤,温度为70℃,时间为20分钟。
得到的第一上清液采用离心、膜分离和/或过滤进行分离;
所述过滤选自采用切向流过滤系统和/或硅藻土过滤。
采用切向流过滤系统进行分离;
采用截留分子量1000D膜。
酵母多肽进一步浓缩、干燥处理,得到酵母多肽产品;
所述干燥选用喷雾干燥或冷冻干燥。
总多肽中含有分子量在80%以上。
本说明书一个或多个实施例旨在涵盖落入所附权利要求的宽泛范围之内的所有这样的替换、修改和变型。因此,凡在本说明书一个或多个实施例的精神和原则之内,所做的任何省略、修改、等同替换、改进等,均应包含在本公开的保护范围之内。

Claims (10)

1.一种酵母提取方法,其特征在于,包括有
(1)酵母破壁:加入酶,将原料通过酶解破壁,提取酵母蛋白,所述原料为糖蜜酵母乳或啤酒酵母乳;
(2)酶解:向步骤(1)得到的酵母蛋白中加入蛋白酶进行酶解,离心分离所述酵母乳,获得上清液;将所述酶解后的上清液经30-50分钟、75-90℃热处理使酶失活;收集第一上清液得到酶解产物;
(3)分离:对酶解产物进一步分离,收集第二上清液,得到酵母多肽。
2.根据权利要求1所述的一种酵母提取方法,其特征在于,所述将原料通过酶解破壁包括有
将原料配制成溶液,其溶液的质量浓度为5%-20%,再进行酶解破壁;
对所述溶液调节温度至30-50℃。
3.根据权利要求2所述的一种酵母提取方法,其特征在于,所述将原料通过酶解破壁包括有
加入酶的质量分数占原料的0.5%-3%。
所述加入酶为β-葡聚糖酶、α-葡聚糖酶、α-甘露聚糖酶和纤维素酶中的一种或两种以上。
4.根据权利要求3所述的一种酵母提取方法,其特征在于,酶解时间为5-11h。
步骤(2)中将步骤(1)得到的酵母蛋白溶解,配制成浓度为7%-19%的溶液;
加入蛋白酶酶解前调节pH为7-9;
加入蛋白酶酶解前调节温度到30-50℃。
5.根据权利要求1所述的一种酵母提取方法,其特征在于,以步骤(1)中提取得到的酵母蛋白的质量计,加入蛋白酶占酵母蛋白的质量分数为0.5%-2%,酶解时间为1-16h。
6.根据权利要求5所述的一种酵母提取方法,其特征在于,所述加入的蛋白酶选自碱性蛋白酶、中性蛋白酶、大豆多肽水解酶、木瓜蛋白酶和菠萝蛋白酶中的一种或两种以上,大豆多肽水解酶、菠萝蛋白酶和木瓜蛋白酶中的一种或两种以上。
7.根据权利要求6所述的一种酵母提取方法,其特征在于,酶解完成后还包括升温使酶失活的步骤,温度为70-90℃,时间为20-30分钟。
8.根据权利要求7所述的一种酵母提取方法,其特征在于,得到的第一上清液采用离心、膜分离和/或过滤进行分离;
所述过滤选自采用切向流过滤系统和/或硅藻土过滤。
9.根据权利要求8所述的一种酵母提取方法,其特征在于,采用切向流过滤系统进行分离;
采用截留分子量1000-7000D膜。
10.根据权利要求9所述的一种酵母提取方法,其特征在于,酵母多肽进一步浓缩、干燥处理,得到酵母多肽产品;
所述干燥选用喷雾干燥或冷冻干燥。
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