CN107227329A - 牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特点是：以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质，得到预处理液；利用生物酶技术对预处理液进行酶解得到酶解液；采用BP网络模型通过分级沉淀、超滤对酶解液粗分级；经离子交换层析纯化酶解终产物得到糖苷水解酶抑制剂。本发明优点是酶使用剂量少，无环境污染，制取产物纯度高、活性好，可成为一种制备降糖药的有效方法。

Description

牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法
技术领域
本发明属于生物技术领域，涉及一种糖苷水解酶抑制剂，具体涉及一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法。
背景技术
牡蛎是一种珍贵海洋贝类，具有很高的营养价值，牡蛎中含有丰富的蛋白质，必需氨基酸、糖原、牛磺酸、维生素、矿物质以及锌硒等具有特殊生理作用的微量元素，是天然的活性物质宝库，有“海洋牛奶”之称。其中，牡蛎蛋白质的含量高，活性优良，已有研究表明牡蛎蛋白具有促进免疫、调节激素、降血压、降血脂等功能。
近年来，美国、欧洲、日本等国家采用现代生物技术、食品加工高新技术、新型化学化工等技术手段，对牡蛎中功能活性成分进行研究开发，成功研制了以牡蛎为主要成分的保健食品或第三代功能性食品，已经生产出了胶囊型、液体型、片剂型等各种类型的产品。有研究表明在发酵的牡蛎调味料中分离出血管紧张素转化酶抑制剂，该物质可以有效降低小鼠的高血压，具有较好的降压作用。
发明内容
为克服现有技术的不足，本发明的目的在于提供一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，可以减少酶使用剂量，无环境污染，制取产物纯度高、活性好，可成为一种制备降糖药的有效方法。
本发明的目的是通过如下技术方案实现的：牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质，得到预处理液A；
（2）所述预处理液A经过生物酶技术进行酶解得到酶解液B；
（3）所述酶解液B采用BP网络模型经过灭酶、离心、超滤得到粗分级液C；
（4）所述粗分级液C进行纳滤纯化、浓缩冻干得到糖苷水解酶抑制剂。
对上述技术方案进一步的改进：所述生物酶技术所用酶为胰蛋白酶。
对上述技术方案进一步的改进：所述BP网络模型以连接权数2-10倍设定训练样本数。
对上述技术方案进一步的改进：所述酶解液离心1-3次。
对上述技术方案进一步的改进：所述粗分级液纳滤纯化，截留分子量采用150Dalton-300Dalton。
本发明的有益效果：以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质；经过生物酶技术进行酶解；经过灭酶、离心、超滤、纳滤纯化、浓缩冻干得到糖苷水解酶抑制剂。可以减少酶使用剂量，无环境污染，制取产物纯度高、活性好，可成为一种制备降糖药的有效方法。
具体实施方式
本发明牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法的具体实施方式，具体包括以下步骤：
（1）以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质，得到预处理液A；
（2）所述预处理液A经过生物酶技术进行酶解得到酶解液B；
（3）所述酶解液B采用BP网络模型经过灭酶、离心、超滤得到粗分级液C；
（4）所述粗分级液C进行纳滤纯化、浓缩冻干得到糖苷水解酶抑制剂。
下面结合具体实施例对本发明做进一步说明。
实施例1：
牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，通过以下步骤制备：
（1）以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质，得到预处理液；
（2）预处理液经过生物酶技术进行酶解，选用胰蛋白酶，水解温度45℃，加酶量2000U/g，水解时间1h，料液比1:1，得到酶解液；
（3）酶解液以BP网络模型连接权数6倍设定训练样本数，经过灭酶、离心（10000rpm，10min，两次）、超滤（截留分子量为10000超滤柱）得到粗分级液；
（4）粗分级液进行纳滤纯化（脱盐，截留分子量300Dalton）、浓缩冻干得到糖苷水解酶抑制剂。
实施例2：
牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，通过以下步骤制备：
（1）以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质，得到预处理液；
（2）预处理液经过生物酶技术进行酶解，选用胰蛋白酶，水解温度50℃，加酶量3000U/g，水解时间2h，料液比1:1，得到酶解液；
（3）酶解液以BP网络模型连接权数8倍设定训练样本数，经过灭酶、离心（10000rpm，10min，三次）、超滤（截留分子量为10000超滤柱）得到粗分级液；
（4）粗分级液进行纳滤纯化（脱盐，截留分子量150Dalton）、浓缩冻干得到糖苷水解酶抑制剂。

Claims (5)

1.一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特征在于，包括以下步骤：
（1）以新鲜牡蛎为原料，去壳后将牡蛎肉洗净，采用低温物理超微破碎技术对牡蛎肉进行预处理，并利用亚临界萃取技术脱除其中脂类、肝糖等物质，得到预处理液A；
（2）所述预处理液A经过生物酶技术进行酶解得到酶解液B；
（3）所述酶解液B采用BP网络模型经过灭酶、离心、超滤得到粗分级液C；
（4）所述粗分级液C进行纳滤纯化、浓缩冻干得到糖苷水解酶抑制剂。
2.按照权利要求1所述的一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特征在于，所述生物酶技术所用酶为胰蛋白酶。
3.按照权利要求1所述的一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特征在于，所述BP网络模型以连接权数2-10倍设定训练样本数。
4.按照权利要求1所述的一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特征在于，所述酶解液离心1-3次。
5.按照权利要求1所述的一种牡蛎蛋白定向制备糖苷水解酶抑制剂的方法，其特征在于，所述粗分级液纳滤纯化，截留分子量采用150Dalton-300Dalton。
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