CN105198803A

CN105198803A - 具有tnf调节活性的苯基-烷基哌嗪

Info

Publication number: CN105198803A
Application number: CN201510688427.XA
Authority: CN
Inventors: 马科.巴罗尼; 奥拉夫.里策勒; 马科.赞切特
Original assignee: Sanofi Aventis France
Current assignee: Sanofi Aventis France
Priority date: 2008-06-16
Filing date: 2009-06-16
Publication date: 2015-12-30
Also published as: JP2011524409A; US20110144120A1; CY1114823T1; SI2313384T1; KR20110028452A; AR072120A1; RU2011101396A; IL209944A; HRP20131183T1; JO2857B1; PL2313384T3; BRPI0914815A2; MY153051A; US8153637B2; CA2727911A1; TW201002687A; PT2313384E; RU2512567C2; MX2010013947A; WO2009153514A1

Abstract

本发明涉及具有TNF调节活性的新型苯基-烷基哌嗪，涉及含有所述新型苯基-烷基哌嗪的药物组合物并且涉及其制备方法。

Description

具有TNF调节活性的苯基-烷基哌嗪

本申请是中国申请号为200980131551.9、发明名称为“具有TNF调节活性的苯基-烷基哌嗪”且申请日为2009年6月16日的专利申请(PCT申请号为PCT/FR2009/051138)的分案申请。

技术领域

本发明涉及具有TNF调节活性的新型苯基-烷基哌嗪，涉及含有所述新型苯基-烷基哌嗪的药物组合物和涉及用于制备它们的方法。

背景技术

TNF-α是已经被鉴别为免疫、炎症、细胞增殖、纤维化等的介质(mediator)的细胞因子。这种介质大量存在于发炎的滑液组织中并且在自身免疫的发病机理中发挥重要的作用(Annu.Rep.Med.Chem.,1997,32:241-250)。

现在已经发现苯基-烷基哌嗪对TNF-α的调节具有强的活性，更具体地，具有抑制活性。

发明内容

因此，根据本发明的一个方面，本发明涉及式(I)的苯基-烷基-哌嗪：

在该式中：

-R1和R2各自独立地表示氢原子、卤原子、(C1-C5)烷基、(C1-C5)卤代烷基、(C1-C2)全氟烷基、(C1-C5)烷氧基或(C1-C2)全氟烷氧基；

-R3表示(C1-C5)烷基；

-A表示＝CH-或＝N-。

式(I)的化合物可包括一个或多个不对称碳原子。因此，它们可以对映异构体或非对映异构体的形式存在。这些对映异构体和非对映异构体及其混合物(包括外消旋混合物)构成本发明的一部分。

式(I)的化合物可以碱或酸加成盐的形式存在。这样的加成盐构成本发明的一部分。

这些盐可使用可药用的酸进行制备；然而，可使用其他酸的盐，例如，用于式(I)的化合物的纯化或分离，这也构成本发明的一部分。

式(I)的化合物可作为N-氧化物衍生物存在。实际上，式(I)的化合物可特别地在哌嗪上携带一个或两个N-氧化物基团。虽然在原理上上述两种氮均可被氧化，但是优选仅携带一个N-氧化物基团的化合物。

根据本发明的另一主题，可提及碱或酸加成盐的形式的式(I)的化合物，在该式中：

-R1表示(C1-C5)卤代烷基，更具体地，(C1-C5)氟烷基、(C1-C2)全氟烷基；和/或

-R2表示氢原子或(C1-C5)烷基。

根据本发明的另一主题，所述哌嗪通过苯基上位置3的乙基连接：

-R1表示(C1-C2)全氟烷基；和/或

-R2表示氢原子或(C1-C3)烷基。

根据本发明的另一主题，可提及以下碱或酸加成盐的形式的式(I)的化合物：

1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪。

根据本发明的另一主题，可提及选自以下的式(I)的化合物：

-化合物1：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪半双羟萘酸盐(hemipamoate)；

-化合物1-2：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪半双羟萘酸盐与0.5摩尔当量的游离双羟萘酸的混合物；

-化合物2：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲氧基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物3：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-丙基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物4：1-(3-氟苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物5：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-庚基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物6：1-(6-三氟甲基吡啶-2-基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物7：1-(3-氟苯基)-4-[2-(4-甲氧基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物8：1-(3-二氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物9：1-(苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物10：1-(3-甲氧基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物11：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-(2-甲基丁基)苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物12：1-(3-二氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲氧基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物13：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲氧基-3-庚基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物14：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-己基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物15：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲氧基-3-丙基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物16：1-(苯基)-4-[2-(4-甲氧基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物17：1-(4-氯苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物18：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物19：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪苯磺酸盐；

-化合物20：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪萘-2-磺酸盐；

-化合物21：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪对甲苯磺酸盐；

-化合物22：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪半萘-2,5-二磺酸盐；

-化合物23：1-(4-氟苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪二盐酸盐；

-化合物24：1-(4-甲氧基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪(碱)；

-化合物25：1-(5-溴吡啶-2-基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪二盐酸盐；

-化合物26：1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-(5-三氟甲基吡啶-2-基)哌嗪二盐酸盐；

-化合物27：1-(4-叔丁基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物28：1-(4-乙氧基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪二盐酸盐；

-化合物29：1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-间甲苯基哌嗪二盐酸盐；

-化合物30：1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-(吡啶-2-基)哌嗪二盐酸盐；

-化合物31：1-(6-溴吡啶-2-基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物32：1-(2-氯苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物33：1-(2-甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物34：1-(3-三氟甲氧基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物35：1-(5-氯吡啶-2-基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪盐酸盐；

-化合物36：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪草酸盐；

-化合物37：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪延胡索酸盐；

-化合物38：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪琥珀酸盐；

-化合物39：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪二马尿酸盐。

在本发明的内容中，适用以下定义：

-“卤原子”是指氟、氯、溴或碘；

-“烷基”是指直线或支化的饱和脂肪族基团。例如，(C1-C5)烷基包括1～5个碳原子。可提及的实例更具体地包括甲基、乙基、丙基、异丙基、丁基、异丁基、叔丁基、戊基、异戊基等基团。

-“卤代烷基”是指以上定义的烷基，其中一个或多个氢原子已经被卤原子所替代：例如，氟烷基可包含一个或多个氟原子；

-“全氟烷基”是指以上定义的烷基，其中所有的氢原子已经被氟原子所替代；

-“烷氧基”是指-O-烷基，其中所述烷基是如以上所定义的；

-“全氟烷氧基”是指其中所有的氢原子已经被氟原子所替代的烷氧基。

术语“离去基团”在下文中表示可通过破坏异裂键(heterolyticbond)失去一对电子对而容易地与分子分开的基团。因此，这种基团例如在取代反应期间可容易地被另一基团所替代。这样的离去基团为，例如，卤素或被活化的羟基如甲磺酸酯基团、苯磺酸酯基团、对甲苯磺酸酯基团、三氟甲磺酸酯基团(triflate)、乙酸酯基团等。离去基团的实例以及关于它们制备方法的参考文献可在AdvancesinOrganicChemistry,J.March,第三版,WileyInterscience,第310-316页中发现。

式(I)的化合物可根据方案1进行制备：

方案1

根据该方案，式(I)的化合物可通过式(II)的化合物与式(III)的化合物的缩合而合成，其中，式(II)为：

在该式(II)中R1和A是如下文中所定义的，

式(III)为：

在该式(III)中R2和R3如以上所定义的和Q为离去基团。

可使用的离去基团Q的实例包括卤原子或能够与胺缩合的任意基团。缩合反应是以常规的方式进行的，通过将起始化合物(II)与(III)在有机溶剂如醇类，例如甲醇或丁醇中，任选地在碱如碱金属碳酸盐、4-二甲基氨基吡啶或三乙胺的存在下，在室温至选择溶剂的回流点的温度之间混合而进行的。“室温”是指5℃至25℃的温度。

式(III)的化合物是根据本领域技术人员已知的常规方法通过将式(IV)的化合物的羟基转化为离去基团Q制备的。例如，可在溴酸、四溴化碳或亚硫酰溴的存在下将羟基转化为卤素如溴；或者例如在亚硫酰氯的存在下将羟基转化为氯。可通过使式(IV)的产物与甲磺酰氯或对甲苯磺酰氯反应而制备甲磺酰氧基(CH₃-SO₂-O-)或甲苯磺酰氧基(甲苯基-SO₂-O)作为离去基团。

化合物(IV)是通过式(V)化合物的双键的还原得到的。所述还原可根据本领域技术人员已知的常规方法进行，例如在氢气的存在下在20～40℃的温度在有机溶剂如乙醇中使用钯/活性炭催化进行。

式(V)的化合物可通过Suzuki反应进行制备(J.Org.Chem.,556184-1990)。根据该方法，在溶剂如四氢呋喃、二烷或二甲氧基乙烷中在催化剂如乙酸钯或四(三苯基膦)钯的存在下使式(VI)的化合物(其中X表示卤素，更具体地，表示溴或碘；或者三氟甲基磺酸酯基团)与乙烯基硼酸或乙烯基硼酸酯反应。

式(VI)的化合物可根据方案1所述的步骤在本领域技术人员公知的条件和类似的条件下由式(X)的化合物得到，或具体如实施例所述。

式(II)的化合物是可商业购得的或者可根据本领域技术人员公知的方法进行制备。

在所述方案中，当没有描述起始化合物和试剂的制备方法时，起始化合物和试剂是可商业购得的或者描述于文献中的，或者可根据本文中所述的或本领域技术人员已知的方法进行制备。

根据本发明的方法也可包括将由此得到的式(I)的化合物分离和/或纯化和/或任选地将其转化为其盐和/或其N-氧化物的步骤。

所需的化合物根据常规技术以其游离碱或盐的形式进行分离。可将游离的碱通过在有机溶剂如醇类(优选乙醇或异丙醇)，醚如1,2-二甲氧基乙烷，乙酸乙酯，丙酮或烃如己烷中进行简单的成盐作用转化为其盐。

在氮原子上具有N-氧化物基团的式(I)的化合物可通过相应的式(I)的化合物的氧化进行制备。在这种情况下，对通过以上合成得到的式(I)的化合物根据常规方法进行氧化反应，例如在合适的溶剂中进行与间氯过氧苯甲酸反应，并且根据本领域技术人员公知的常规方法进行分离。

具体实施方式

以下实施例描述根据本发明的化合物的制备。这些实施例不是限制性的，只是起到说明本发明的作用。实施例中所表示的化合物的编号是指下表中给出的编号，该表说明根据本发明的化合物的化学结构和物理性质。

物理化学测量如下进行：

使用BüchiB540机器测量熔点。

在装备有Avance仪表板的Brüker机器上以500MHz记录质子核磁共振谱(¹HNMR)。化学位移是相对于TMS频率以ppm报告的。

所有的波谱都是在40℃的温度记录的。

用于表征信号的缩写如下：s＝单峰，bs＝宽的单峰，m＝多重峰，bm＝宽的多重峰，d＝双峰，t＝三重峰，q＝四重峰。

·＝由于来自水的宽峰的干扰而不是可积的(integrable)。

对于LC/MS技术而言：

ThermoElectronLCQDecaXPMax系统同时装备有离子阱质谱检测器和二极管阵列检测器。

所用的色谱系统如下：

方法A)

-KromasilC18柱(2.1×50mm)3.5μm

-洗脱剂A＝H₂O乙酸铵5mMpH6.5

-洗脱剂B＝CH₃CN

-梯度：12分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时3分钟

-流速0.5ml/min

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

方法B)

-KromasilC18柱(2.1×50mm)3.5μm

-洗脱剂A＝H₂O+0.01％TFA

-洗脱剂B＝CH₃CN.

-梯度：15分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时5分钟

-流速0.5ml/min

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

方法C)

-VarianSunfireC18柱(2.0×100mm)3.5μm

-洗脱剂A＝H₂O+0.01％TFA

-洗脱剂B＝CH₃CN

-梯度：15分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时5分钟

-流速0.5ml/min

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

方法D)

-WatersAtlantisDBC18柱(2.0×50mm)3.0μm

-洗脱剂A＝H₂O+0.01％TFA

-洗脱剂B＝CH₃CN

-梯度：15分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时5分钟

-流速0.5ml/min

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

方法E)

-XTerraC18柱(2.1×50mm)3.5μmNo.186000400

-洗脱剂A＝H₂O+0.01％TFA

-洗脱剂B＝CH₃CN

-梯度：15分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时5分钟

-流速0.5ml/min

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

方法F)

-AscentisC18柱2×50mm3μm

-洗脱剂A＝H₂O+0.01％TFA

-洗脱剂B＝CH₃CN

-梯度：15分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时5分钟

-流速0.5ml/min；温度40℃

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

方法G)

-AscentisC18柱2×50mm3μm

-洗脱剂A＝H₂O+0.05％TFA

-洗脱剂B＝CH₃CN+0.035mlTFA

-梯度：12分钟内从98％A到95％B，然后以95％B洗脱，历时3分钟

-流速0.7ml/min；温度40℃

-注射2μL在9/1CH₃CN/H₂O混合物中的0.1mg/ml溶液

产物是通过220nm的UV检测的。

在质谱部分：

-电离模式：正电喷射(ESI⁺极性⁺)

-从100～1200amu扫描

快速柱色谱的硅胶是由Biotage出售的。

制备1

4-(2-溴乙基)-1-甲基-2-戊基苯

1a)(3-溴-4-甲基苯基)乙酸

将13g(0.061mol)3-溴-4-甲基苯乙酮、2.1g(0.065mol)硫磺、14ml吗啉和催化量的对甲苯磺酸一水合物混合在一起。将该混合物在130℃在氮气流下加热。在7小时之后，将该混合物冷却，加入35ml无水乙醇并将该混合物在室温下搅拌过夜。将由此形成的13.9g硫代酰胺溶解在110ml乙醇、70ml水和6gNaOH的溶液中，并将该混合物回流4小时。将溶剂蒸发除去，然后使用稀盐酸溶液将该混合物酸化。白色固体沉淀。将该沉淀物滤过，得到9.16g标题化合物。

1b)2-(3-溴-4-甲基苯基)乙醇

将制备1a)的化合物溶解在170ml乙醇中。将气态氯化氢鼓泡到该混合物中30分钟。将该混合物回流3小时。蒸发除去乙醇，残留物吸收在乙醚中。将该混合物用饱和碳酸氢钠溶液洗涤，在真空下蒸发。得到7.1g酯，并将其溶解在70mlTHF中。在氮气下逐滴加入7.6ml硼烷/二甲硫醚在110mlTHF中的溶液，并且将所得混合物回流3小时。将该混合物冷却至0℃并小心地加入120ml甲醇。将该混合物回流30分钟并在真空下蒸发。将残留物溶解在乙酸乙酯中，用稀氨水溶液进行洗涤，干燥并在真空下蒸发。

得到5.4g对应于标题化合物的油状物。

1c)2-[4-甲基-3-(戊-1-烯基)苯基]乙醇

将2.0g(0.0093mol)前一步骤中得到的产物、1.12g(0.01mol)戊烯基硼酸、2.1g(0.037mol)KOH、1.5g(0.0046mol)四丁基溴化铵和50mg四(三苯基膦)钯一起在50mlTHF中混合。将该混合物在氮气流下回流4小时。将该混合物倒入水中并用乙醚提取，将有机相干燥并蒸发除去溶剂。所述残留物通过硅胶柱色谱进行纯化，用9/1己烷/乙酸乙酯混合物洗脱。得到740mg油形式的标题产物。

1d)2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙醇

将0.74g(0.0036mol)前一步骤中得到的产物溶解在46ml乙醇中，加入0.12g的10％Pd/C并使该混合物在氢气流下在40℃的温度反应5小时。将反应混合物过滤，在真空下蒸发。得到0.65g油形式的标题化合物。

1e)4-(2-溴乙基)-1-甲基-2-戊基苯

将0.65g(0.0032mol)前一步骤中得到的产物置于具有8ml48％氢溴酸水溶液的圆底烧瓶中。将该混合物在130℃加热6小时、冷却并倒入饱和碳酸氢钠溶液中。所得混合物使用乙酸乙酯进行提取、干燥，在真空下蒸发。得到0.65g油形式的标题化合物。

制备2

4-(2-甲烷磺酰氧基乙基)-1-甲氧基-2-戊基苯

2a)(3-溴-4-甲氧基苯基)乙酸

如制备1a)所述进行操作，但是使用3-溴-4-甲氧基–苯乙酮代替3-溴-4-甲基苯乙酮，得到标题化合物。

2b)2-(3-溴-4-甲氧基苯基)乙醇

如制备1b)所述进行操作，但是使用前一步骤的化合物2a)代替化合物1a)，得到标题化合物。

2c)2-[4-甲氧基l-3-(戊-1-烯基)苯基]乙醇

如制备1c)所述进行操作，但是使用前一步骤的化合物2b)代替化合物1b)，得到标题化合物。

2d)2-(4-甲氧基-3-戊基苯基)乙醇

如制备1d)所述进行操作，但是使用前一步骤的化合物2c)代替化合物1c)，得到标题化合物。

2e)4-(2-甲烷磺酰氧基乙基)-1-甲氧基-2-戊基苯

在0～5℃将1.2g(0.0054mol)前一步骤的化合物2d)、20ml二氯甲烷、0.75ml(0.0054mol)三乙胺和0.42ml(0.0054mol)甲烷磺酰氯置于圆底烧瓶中。

将该混合物在室温下搅拌2小时，用水洗涤并干燥，并且将有机相在真空下蒸发。得到黄色油形式的标题产物。

实施例1：化合物1：1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪及其半双羟萘酸盐

将1.98g(0.00777mol)制备1的化合物、1.5g(0.0065mol)(3-三氟甲基苯基)-1-哌嗪、1.35g(0.00975mol)碳酸钾和40ml正丁醇置于圆底烧瓶中。将该混合物回流6小时。将正丁醇蒸发除去，残留物吸收在乙酸乙酯中提，并用水进行洗涤。将有机相干燥并蒸发除去溶剂。残留物通过硅胶柱色谱进行纯化并用95/5己烷/乙酸乙酯混合物进行洗脱。

将300mg所得的游离碱在THF中的溶液与180mg双羟萘酸在8/2THF/水的溶液混合。

将反应混合物在真空下浓缩，加入6ml乙醇，得到固体，然后将该固体滤出。所述固体通过使用乙醇加热进行结晶并且得到白色半双羟萘酸盐：450mg,m.p.＝156-157。乙醇中的进一步结晶提供157-158的m.p.。

熔点＝157-158℃；

M⁺H⁺(方法A)＝RT10.9minm/z419(MH⁺)

¹HNMR:δ(ppm,DMSO-d6)：0.88(m；3H)；1.27-1.39(m；4H)；1.45-1.59(m；2H)；2.23(s；3H)；2.50-2.58(m；2H**)；2.75-2.89(m；2H)；2.89-3.50(m；10H*)；4.74(s；1H)；6.97(dd；Ja＝7.7Hz；Jb＝1.4Hz；1H)；7.02(d；J＝1.4Hz；1H)；7.07(d；J＝7.7Hz；1H)；7.08-7.15(m；2H)；7.16-7.32(m；3H)；7.45(dd→t；J＝8Hz；1H)；7.74(d；J＝8Hz；1H)；8.17(d；J＝8Hz；1H)；8.30(s；1H)。

根据本发明的变化形式之一，根据以下方法制备化合物1-2(其为1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪半双羟萘酸盐与游离双羟萘酸(摩尔比1:0.5)的混合物)：

将600mg根据实施例1的方法得到的游离碱在THF中的溶液与540mg双羟萘酸在8/2THF/水中的溶液混合。将该混合物在真空下蒸发，然后残留物使用THF和异丙醚的混合物进行处理，加热并过滤。得到1g黄色固体。

熔点＝158-159℃；

M⁺H⁺(方法B)＝RT10.1minm/z419(MH⁺)

实施例2：化合物2：1-[2-(4-甲氧基-3-戊基苯基)乙基]-4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪及其盐酸盐

将0.336g(0.00112mol)制备2的化合物、20ml异丙醇、0.47ml三乙胺(0.0036mol)和0.21ml(0.00112mol)4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪置于圆底烧瓶中。将该混合物在回流温度下加热过夜。将溶剂在真空下蒸发除去，得到油状物，并且该油状物通过色谱进行纯化，使用8/2己烷/乙酸乙酯混合物进行洗脱。得到300mg游离碱，在异丙醇中使用用HCl饱和的异丙醇溶液制备该游离碱的盐酸盐。

在过滤之后，得到100mg白色固体。

熔点＝146-149℃

M⁺H⁺(方法B)＝RT7.0minm/z435(MH⁺)

¹HNMR:δ(ppm,DMSO-d6)：0.88(m；3H)；1.23-1.38(m；4H)；1.53(m；2H)；2.51-2.57(m；2H**)；2.95-3.05(m；2H)；3.11-3.28(m；4H)；3.30-3.41(m；2H)；3.60-3.70(m；2H*)；3.77(s；3H)；3.93-4.04(m；2H)；6.92(d；J＝8Hz；1H)；7.05(d；J＝2Hz；1H)；7.07(dd；Ja＝8Hz；Jb＝2Hz；1H)；7.17(bd；J＝7Hz；1H)；7.29(bs；1H)；7.31(bd；J＝8Hz；1H)；7.49(dd→t；J＝8Hz；1H)；10.59(bs；1H)。

实施例3：化合物38：1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪及其草酸盐

将0.24g(0.89mmol)制备1的化合物、0.24g(0.1mmol)(3-三氟甲基苯基)-1-哌嗪、0.22g(1.6mmol)碳酸钾和10ml正丁醇置于圆底烧瓶中。将该混合物回流6小时。将正丁醇蒸发除去，在乙酸乙酯中提取残留物并用水洗涤该残留物，将有机相干燥并蒸发除去溶剂。残留物通过硅胶柱色谱进行纯化，使用95/5己烷/乙酸乙酯混合物进行洗脱。由此得到130mg油状物形式的标题产物。将该产物溶解在2ml异丙醇中。加入草酸在异丙醇中的溶液以沉淀草酸盐，将该草酸盐通过过滤以白色固体(0.12g)的形式进行分离。

熔点＝193-194℃；

M⁺H⁺＝RT6.7minm/z419(MH⁺)

¹HNMRδ(ppm,DMSO-d6)：0.89(m；3H)；1.28-1.40(m；4H)；1.46-1.59(m；2H)；2.23(s；3H)；2.50-2.57(m；**)；2.78-2.89(m；2H)；2.91-3.08(m；*)；3.39(bs；4H)；6.97(dd；Ja＝7.7Hz；Jb＝1.6Hz；1H)；7.02(bs；1H)；7.07(d；J＝7.7Hz；1H)；7.12(d；J＝7.4Hz；1H)；7.22(bs；1H)；7.27(bd；J＝8.4Hz；1H)；7.45(m；1H)。

表

本发明的化合物作为TNF-α抑制剂具有有利的性质。

这些性质是使用目的在于测量分子对在Balb/c小鼠中通过来自大肠杆菌(055:B5,Sigma,StLouis,Mo)的脂多糖(LPS)诱导的TNF-α合成的作用的测试证明的。

将测试产物对五只7周～8周龄雌性Balb/c小鼠(CharlesRiver,France)的组进行口服给药。1小时之后，静脉注射LPS(10μg/小鼠)。在LPS静脉注射之后1.5小时收集每只动物的血液。将样品离心，回收血浆并在-80℃冷冻。TNF-α是使用商业化试剂盒(R&D,Abingdon,UK)测量的。

在这种测试中，化合物38显示是非常有效的，即使在非常低的剂量(IC50＝0.1mg/Kg)下也会抑制TNF-α的合成。

这些性质也被下述测试所证实，所述测试的目的在于测量分子对在Sprague-Dawley大鼠中通过来自大肠杆菌(055:B5,Sigma,StLouis,Mo)的脂多糖(LPS)诱导的TNF-α合成的作用的测试证明的。

将测试产物对十只重约200克的Sprague-Dawley大鼠的组进行口服给药。2小时之后，静脉注射LPS(0.1mg/Kg)。在LPS静脉注射之后1.5小时收集每只动物的血液。将样品离心，回收血清并在-80℃冷冻。TNF-α是使用商业化试剂盒(RPN2744Amersham,UK)测量的。

在这种测试中，化合物显示是非常有效的，即使在非常低的剂量(IC50＝0.3～0.1mg/Kg，特别是化合物1的IC50＝0.3mg/Kg以及化合物4和8的IC50＝1mg/Kg)下也会抑制TNF-α的合成。

将本发明的化合物在关节炎症的模型中进行测试。

在第一次将酵母聚糖()(见下)注射到仓鼠的关节中1小时之前，将根据本发明的化合物(1ng/关节，作为在10μL2％PVP(聚乙烯吡咯烷酮)/1％lutrolF68/0.9％NaCl溶液中的悬浮液)注射到仓鼠的关节中。

膝关节炎症的诱导：在使用异氟烷的轻度麻醉下，将剂量100μg在10μL盐水溶液中酵母聚糖的悬浮液注射到雄性仓鼠的膝关节中。酵母聚糖是当皮下注射时产生强的剂量依赖性炎症的酵母提取物。在本文所述的实验条件(膝关节中的注射)下，其诱导持续一周的痛觉过敏。为了延长这段时间，施用3次连续的酵母聚糖注射。使用包括小型摄像机的装置(PlantarTestUgoBasileBiologicalResearchApparatus,Comerio,Italy)测量在足底皮肤(plantarskin)曝露于确定的热刺激之后缩爪(pawwithdrawal)的滞后时间以确保所关注后肢以下红外线的正确位置。

继发痛觉过敏的测量：

研究者启动测量由后肢反射红外线的时间长度的计时器，并且一旦动物发抖或缩回其腿就自动停止。16秒之后如果动物没有缩回其腿，研究者就将红外线停止以防止烧伤。腿缩回的滞后时间(单位：秒)用作疼痛的测量。在第一次注射酵母聚糖之后4小时和随后3周期间进行测量。在这种测试中，本发明的典型化合物，特别是化合物1显示出在3周时间内有效的疼痛减少。

本发明的化合物也在神经性疼痛的模型中进行测试：测量保留性神经损伤(sparenerveinjury，SNI)中镇痛效应。

在这种患有慢性神经性疼痛的小鼠体内模型中，对触觉异常疼痛(tactileallodynia)(在通常不疼痛的机械刺激之后疼痛的感觉)的影响是在后肢中通过大坐骨神经的手术损伤所引起的。然后这是通过测量缩爪阈值(PWT)，即小鼠缩回其后肢所施加的力(用克表示)来确定的。

触觉异常疼痛是使用自动冯弗雷测试(vonFreytest)在两条后肢上确定的，即于手术后引起的损伤同侧和对侧，在自动冯弗雷测试中使后肢的足底皮肤暴露在使用放电针刺激(dischargeneedleprod)而不断提高强度(达到5克)的压力刺激下进行确定。动物通过缩回后肢反应的力(缩爪阈值(PWT)，单位：克)被用作触觉异常疼痛的测量。

使用用根据本发明的化合物的试验组和动物的对照组，每组均由四只雄性C57B6小鼠组成。在每组中，在手术前确定PWT值的基线(BL)。在一般麻醉下，为了诱导神经性疼痛，将大坐骨神经的两个主要分支结扎和横切，而不触碰腓肠神经(保留性神经损伤，SNI)。在这种神经性疼痛模型中，触觉异常疼痛在与损伤同侧的后肢中神经横切2天内完全发生，并且在实验观察期间在对照组中保持稳定。

在手术7天之后给药化合物之前(即在0h)，在所有的组中确定同侧后肢(受伤)和对侧后肢(未受伤)的PWT值。根据本发明的化合物或载体通过注射给药到尾静脉(i.v.)中。在试验组中，小鼠接受0.1ml/10g测试化合物在媒介物(1/1/18乙醇/Cremophor/磷酸盐缓冲盐水)的溶液，剂量为1mg/kg。在对照组中，小鼠类似地接受0.1ml/10g载体。在给药1h、2h、4h和6h之后确定PWT值。

对于统计分析，所测量的PWT值通过单因素方差分析(1-wayANOVA)和Bonferroni多重比较(BonferroniMultipleComparison)进行分析。在评价的剂量(1mg/kgi.v.)下，观察到实施例1的情况下从1h到6h疼痛在统计学上显著减小(通过测量镇痛效应)。

由于这种活性，式(I)的化合物和它们的盐可用于治疗与免疫和炎性病症相关的疾病或者作为治疗疼痛的镇痛药。

具体地，式(I)的化合物可用于治疗动脉粥样硬化、自身免疫疾病、导致神经脱髓鞘的疾病(例如多发性硬化症)、哮喘、关节疼痛或炎症(更具体地，肩膀、膝盖、手指等的那些关节疼痛或炎症)、类风湿性关节炎及其关节疼痛、骨关节炎及其关节疼痛，和其他关节炎性疼痛或者其他炎性疼痛(例如，水囊瘤、腱炎等)、纤维化疾病、特发性肺纤维化、粘液粘稠病(mucoviscidosis)、肾小球肾炎、类风湿性脊椎炎、痛风、骨和软骨再吸收、骨质疏松症、佩吉特氏病(Paget’sdisease)、多发性骨髓瘤、葡萄膜视网膜炎、脓毒性休克、败血病、内毒素休克、移植物抗宿主病、移植物排斥、成人呼吸窘迫综合症、硅肺病、石棉沉滞症、肺结节病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、肌萎缩性侧索硬化症、阿尔茨海默氏病、帕金森病、系统性红斑狼疮、血量减少性休克(haemodynamicshock)、缺血性病变(心肌梗死、心肌缺血、冠状动脉痉挛、心绞痛、心力衰竭、心脏病发作)、缺血后再灌注损伤、疟疾、分支杆菌感染、脑膜炎、麻风病、病毒感染(HIV、巨细胞病毒、疱疹病毒)、AIDS相关的机会性感染、肺结核、牛皮癣、特应性皮炎和接触性皮炎、糖尿病、恶病质(cachexia)、癌症和辐射诱导的损伤。

根据本发明的另一方面，本发明涉及用于治疗上述疾病的根据本发明的化合物或所述化合物可药用的盐。

根据本发明的另一方面，本发明涉及包含根据本发明的化合物作为有效成分的药物组合物。这些药物组合物含有有效剂量的至少一种根据本发明的化合物或者所述化合物的可药用的盐，还含有至少一种可药用的赋形剂。

根据药物形式和所需的给药模式，所述赋形剂选自本领域技术人员已知的常规赋形剂。

在用于口服、舌下、皮下、肌肉、静脉内、关节内、表面、局部、气管内、鼻内、经皮或直肠给药的本发明药物组合物中，以上式(I)或其盐的有效成分可作为与标准药物赋形剂的混合物以单位给药形式对人和动物给药，用于预防或治疗以上症状或疾病。

合适的单位给药形式包括口服形式如片剂、软或硬胶囊、粉剂、颗粒剂和口服溶液或悬浮液，舌下、含服、气管内、眼内、鼻内或吸入给药形式，局部、经皮、皮下、肌内或静脉注射给药形式，直肠给药形式和植入剂。对于局部应用，根据本发明的化合物可以乳剂、凝胶剂、软膏剂或洗剂使用。

作为实例，根据本发明的化合物在片剂形式中的单位给药形式包含以下组分：

通过口服途径，每天给定的有效成分的剂量可达到0.01～100mg/kg，优选0.02～50mg/kg，为一次或多次服用的剂量。

作为实例，根据本发明的化合物在关节内溶液或悬浮液形式中的单位给药形式可包含以下组分：

根据本发明的化合物

聚乙烯吡咯烷酮(PVP)K172％

LutrolF681％

NaCl0.9％

通过关节内途径，给定的有效成分的剂量可达到每个关节0.01～40mg/kg，各次注射之间的频率优选为至少一个月。

作为另一实例，根据本发明的化合物在关节内溶液或悬浮液形式中的单位给药形式可包含以下组分：

通过关节内途径，给定的有效成分的剂量可达到每个关节4ng～96mg，各次注射之间的频率优选为至少一个月。

可能存在较高或较低剂量是合适的特殊情况；这样的剂量并没有超出本发明的范围。根据常规实践，每个患者的合适剂量是医生根据给药模式以及所述患者的重量和反应确定的。

根据本发明的一个方面，本发明还涉及用于治疗上述病状的方法，包括对患者给予有效剂量的根据本发明的化合物或其可药用的盐。

根据本发明的另一方面，本发明涉及用于治疗与免疫和炎性病症相关的疾病的方法，以及用于治疗疼痛的方法，具体地，所述疾病为动脉粥样硬化、自身免疫疾病、导致神经脱髓鞘的疾病(例如多发性硬化症)、哮喘、类风湿性关节炎及其关节疼痛、骨关节炎及其关节疼痛，和其他关节炎性疼痛或者其他炎性疼痛(例如，水囊瘤、腱炎等)、纤维化疾病、特发性肺纤维化、粘液粘稠病、肾小球肾炎、类风湿性脊椎炎、痛风、骨和软骨再吸收、骨质疏松症、佩吉特氏病、多发性骨髓瘤、葡萄膜视网膜炎、脓毒性休克、败血病、内毒素休克、移植物抗宿主病、移植物排斥、成人呼吸窘迫综合症、硅肺病、石棉沉滞症、肺结节病、克罗恩病、溃疡性结肠炎、肌萎缩性侧索硬化症、阿尔茨海默氏病、帕金森病、系统性红斑狼疮、血量减少性休克、缺血性病变(心肌梗死、心肌缺血、冠状动脉痉挛、心绞痛、心力衰竭、心脏病发作)、缺血后再灌注损伤、疟疾、分支杆菌感染、脑膜炎、麻风病、病毒感染(HIV、巨细胞病毒、疱疹病毒)、AIDS相关的机会性感染、肺结核、牛皮癣、特应性皮炎和接触性皮炎、糖尿病、恶病质、癌症和辐射诱导的损伤，所述方法包括将式(I)的化合物或其可药用的盐单独地或与其他活性成分组合给药。

根据本发明的另一方面，本发明涉及用于治疗关节疼痛或炎症的方法，更具体地，涉及用于治疗肩膀、膝盖或手指的那些关节疼痛或炎症的方法，包括将式(I)的化合物或其可药用的盐单独地或与其他活性成分组合给药。本发明还涉及如上所述的治疗方法，其中式(I)的化合物或其可药用的盐单独地或与其他活性成分组合的给药是通过关节内注射进行的。

根据本发明的另一方面，本发明涉及式(I)的化合物或其可药用的盐用于制备治疗关节疼痛或炎症的药物的用途，更具体地，本发明涉及式(I)的化合物或其可药用的盐的用途，其特征在于将所述药物注射到关节中。

根据本发明的另一方面，本发明涉及式(I)的化合物或其可药用的盐用于治疗关节疼痛或炎症的用途，或者，更具体地，本发明涉及这样的治疗，其特征在于将所述药物注射到关节中。

Claims

1.碱或酸加成盐的形式的式(I)的化合物：

在该式中：

-R3表示(C1-C5)烷基；

-A表示＝CH-或＝N-。

2.权利要求1的碱或酸加成盐的形式的化合物，其中：

R1表示(C1-C5)卤代烷基或(C1-C2)全氟烷基。

3.权利要求2的碱或酸加成盐的形式的化合物，其中：

R1表示(C1-C5)氟烷基。

4.权利要求1、2或3的碱或酸加成盐的形式的化合物，其特征在于：

R2表示氢原子或(C1-C5)烷基。

5.权利要求1、2、3或4的碱或酸加成盐的形式的化合物，其中，所述哌嗪通过苯基上位置3的乙基连接：

6.碱或酸加成盐的形式的前述权利要求中任一项的化合物，其中：

R1表示(C1-C2)全氟烷基。

7.碱或酸加成盐的形式的前述权利要求中任一项的化合物，其中：

R2表示氢原子或(C1-C3)烷基。

8.前述权利要求中任一项的化合物，其特征在于，其为碱或酸加成盐的形式的1-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]-4-(3-三氟甲基苯基)哌嗪。

9.前述权利要求中任一项的化合物，其选自：

-化合物1：1-(3-三氟甲基苯基)-4-[2-(4-甲基-3-戊基苯基)乙基]哌嗪半双羟萘酸盐；

10.制备前述权利要求中任一项的化合物的方法，包括使式(II)的化合物与式(III)的化合物缩合并任选地将其转化为其盐的步骤，其中，式(II)为：

在该式(II)中R1和A如权利要求1所定义，

式(III)为：

在该式(III)中R2和R3如权利要求1所定义且Q表示离去基团。

11.药物组合物，其含有权利要求1～9中任一项的式(I)的化合物或者其可药用的盐作为有效成分。

12.药物，其包含权利要求1～9中任一项的式(I)的化合物或者其可药用的盐作为有效成分。

13.权利要求1～9中任一项的式(I)的化合物或者其可药用的盐用于制备治疗或防止疼痛和/与免疫和炎性病症有关的疾病的药物的用途。

14.权利要求13的的用途，其中所述式(I)的化合物或者其可药用的盐用于制备治疗关节疼痛或炎症的药物。

15.权利要求14的式(I)的化合物或者其可药用的盐的用途，其特征在于，将所述药物注射到关节中。