CN105154550A - 一种利用est-ssr分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法 - Google Patents

一种利用est-ssr分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法 Download PDF

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Abstract

本发明涉及分子标记领域，提供了一种利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法，该方法采用专门设计的EST-SSR引物，以珍甜1217基因组DNA为模板进行扩增，通过对扩增结果的特异谱带对待检测珍甜1217的品种纯度进行检测，采用这种方法可以在珍甜1217植株生长的任何时期进行鉴定，能够将杂交种与母本自交种、父本自交种区分开来；准确性高，应用推广前景广阔，为开展西瓜制种和良种的及时销售提供科学依据。

Description

一种利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法
技术领域
本发明涉及分子标记领域，具体提供了一种利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法。
背景技术
珍甜1217是山东省华盛农业股份有限公司最新培育的高品质西瓜品种，易座瓜，开花至成熟28天左右，瓜近圆形，单果重6kg左右。底色绿并覆盖有青黑色条斑，条斑细且清晰度好。皮厚1.0cm，果肉大红色，肉质松脆多汁，含糖量13％左右，品质好，耐热性强，适宜保护地及露地种植。该品种在杂交制种过程中,母本需要人工去雄，授以父本花粉来完成杂交过程，母本去雄不彻底或漏去雄，都将会极大地影响制种纯度。因此鉴定杂交西瓜种子纯度至关重要。
传统的西瓜杂交种子纯度鉴定工作仍然以田间种植鉴定为主，通过成株外观形状比较鉴定，该方法鉴定一般需要2个月，时间长、费用高、难度大且准确性差，需要鉴定人员具有丰富的经验，且易受栽培措施和环境条件的影响，严重影响品种鉴定的效率及准确性，越来越不能满足现代育种工作和生产经营的需要。
室内纯度检验通常采用分子标记技术，该技术从DNA水平上揭示子代与亲本间的遗传差异，不受环境条件和栽培措施的影响，无组织、器官及发育特异性，能够检测微小的变异，不受植株生长季节的限制，多态性丰富、稳定性高，可以大大缩短鉴定时间。EST-SSR(expressedsequencetag-simplesequencerepeat)标记，是根据EST序列中的简单串联重复序列开发的一种标记类型，是一类由几个核苷酸为重复单位组成的串联重复序列，根据串联重复单位数目的差异检测多态性。EST-SSR标记具有多态性丰富、共显性遗传、稳定性和重复性较好、对DNA质量要求不高、操作简单易行、不受环境因素影响等优点，与基因组SSR标记相比，EST-SSR标记不仅降低了开发成本、提高了开发效率，而且节省了开发时间，显著提高了其利用价值。因此如何利用该技术实现对珍甜1217纯度的鉴定成为亟待解决的问题之一。
发明内容
本发明的发明人针对上述现有技术的情况，提供了一种利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法，该方法采用专门设计的EST-SSR引物，以珍甜1217的基因组DNA为模板进行扩增，通过对扩增结果的特异谱带对待检测珍甜1217的品种纯度进行检测，采用这种方法可以在珍甜1217植株生长的任何时期进行鉴定，能够将杂交种与母本自交种、父本自交种区分开来；准确性高，应用推广前景广阔，为开展西瓜制种和良种的及时销售提供科学依据。
本发明所针对的西瓜品种为珍甜1217，为了对珍甜1217进行品种纯度的鉴定，获得母本和父本的优良杂交品种，本发明的发明人首先提供了一对EST-SSR引物，命名为ZT1217，其正向序列为5’-TCGGATCTAGGCGAAGGTGGTCG-3’，其核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；反向序列为5’-GCTCAGGAGGGAGTTTACGGTC-3’，其核苷酸序列如SEQIDNo.2所示，
在获得上述引物之后发明人利用其对待测品种珍甜1217的杂交种及其亲本的幼嫩组织基因组DNA进行了扩增，具体过程如下：
(1)提取珍甜1217杂交种及其亲本幼根基因组DNA；
(2)以第(1)步提取的基因组DNA为模板，用EST-SSR引物ZT1217进行PCR扩增：
PCR反应体系为10μL，其中包括10×PCRBuffer1μL，0.2mMdNTPs，DNA模板100ng，引物各5μM，0.5UTaqDNA聚合酶，无菌超纯水补齐至10μL；
扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸20s，35个循环；72℃终延伸5min；PCR产物保存于10℃；
发明人经过多次试验后发现，针对本发明的发明目的，以及专门设计的特异性引物，扩增程序中将退火温度设置为57℃时，扩增效果最好，最终检测的结果更加贴近与实际情况，故而将本发明的退火温度设定为57℃。
(3)扩增产物检测：5μL扩增产物与2μL上样缓冲液混合，之后经丙烯酰胺质量体积比为12％的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，180v恒定电压电泳1.5h，银染显色进行带型统计；
其中所采用的非变性聚丙烯酰胺凝胶中丙烯酰胺∶甲叉双丙烯酰胺的质量比为29∶1；
所采用的上样缓冲液选自10×甘油凝胶上样液；
(4)根据特异谱带的扩增结果鉴定“珍甜1217”杂交种的纯度，判定标准为：
母本具有159bp特异谱带,其核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；父本具有147bp特异谱带,其核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；杂交种具有159bp和147bp两条特异谱带；
根据上述鉴定结果，可以换算珍甜1217品种纯度(％)＝(1-n/N)×100％，其中N为待测西瓜种子数目，n为单独具有父本谱带特征或单独具有母本谱带特征或既不同于“珍甜1217”谱带特征也不同于父母本谱带特征的植株数目。
上述方法中发明人并没有采用常规的叶片提取基因组DNA的方式，而是选用了幼根提取，这是由于发明人经过多次试验后发现，针对本发明的发明目的，选取幼根也能提取出适合纯度鉴定的基因组DNA，与叶片无差别，但选取幼根会大大缩短材料准备时间，故而将本发明取材优先选取幼根，这样一来整体纯度鉴定时间可缩减为4天，较之采用叶片提取基因组DNA的方式缩短了3天。
且为了适应本发明的需要，发明人重新设计了用EST-SSR引物ZT1217进行PCR扩增时的扩增程序，使其具有明显的针对性，且可以保证扩增效果，为最终检测的准确性提供了可靠的保证。
利用上述方法，即可实现对珍甜1217品种纯度的快速检测，能够不受栽培措施和环境条件的影响；无器官、组织及发育特异性：该方法在植株生长的任何时期均可进行鉴定；多态性丰富、共显性遗传：能够将杂交种与母本自交种、父本自交种区分开来；对DNA质量要求不高且需要量少；成本较低、操作简单：该方法在苗期即可进行鉴定，节省大量人力、物力和土地资源；重复性和稳定性较好；快速高效：4天即可完成种子纯度鉴定工作；准确性高：该方法从基因组水平上揭示子代与亲本间的遗传差异，克服了田间表型鉴定带来的误差；应用推广前景广阔：可以快速、准确检测“珍甜1217”杂交种纯度，为开展西瓜制种和良种的及时销售提供科学依据。
附图说明
图1为本发明杂交种“珍甜1217”种子检测特征引物的PCR电泳图谱，
其中，P1为“珍甜1217”母本；F1为多组“珍甜1217”F1杂交种；P2为“珍甜1217”父本，
结果显示：“珍甜1217”F1杂交种拥有分别来自父、母本的147bp和159bp的两条带；
图2为不同PCR退火温度对“珍甜1217”商品种子样品的纯度检测结果的影响电泳图谱；
其中，P1为“珍甜1217”母本；F1为“珍甜1217”F1杂交种；P2为“珍甜1217”父本，
结果显示，最佳退火温度在57℃时，最易区分珍甜1217杂交种纯度；
图3为不同DNA模板量对“珍甜1217”商品种子样品的纯度检测结果的影响电泳图谱，
其中，P1为“珍甜1217”母本；F1为“珍甜1217”F1杂交种；P2为“珍甜1217”父本，
结果显示，DNA模板量从100ng至1000ng均可用于“珍甜1217”商品种子样品的纯度检测。
具体实施方式
以下实施例中进一步定义本发明，根据以上的描述和这些实施例，本领域技术人员可以确定本发明的基本特征，并且在不偏离本发明精神和范围的情况下，可以对本发明作出各种改变和修改，以使其适用各种用途和条件。除特殊注明外，本发明所采用的均为本领域现有技术；下数实施例中的百分比除特殊注明外，均为重量百分比。
实施例1珍甜1217品种叶片基因组DNA的获取
具体操作方法如下：
(1)将“珍甜1217”亲本与F1种子放入铺有潮湿滤纸的培养皿中，30℃黑暗培养3d后取幼根；
其中，该品种在杂交制种过程中,母本需要人工去雄，授以父本花粉来完成杂交过程，最后收获母本上的F1代种子；
(2)每个离心管中放入一个西瓜幼根，加入60-65℃预热的500μL提取缓冲液，放入钢珠4粒，于破碎机上将材料打碎，60-65℃水浴20-30min；
其中所述的提取缓冲液为2×CTAB提取液，其配比如下：
高温灭菌，冷却至室温，加2mL巯基乙醇，室温保存，
(3)上步获得的液体经10000rpm/min离心10min，取上清于另一离心管，加入等体积(500μL)苯酚：氯仿：异戊醇(体积比为25:24:1)混合液；
(4)上步混合液经10000rpm/min离心10min，取上清液于另一离心管中，加入等体积的氯仿：异戊醇(体积比为24:1)混合溶液；
(5)上步混合液经10000rpm/min离心10min，取上清溶液于另一离心管中，加入400μL异丙醇混匀；
(6)上步混合液经12000rpm/min离心15min，弃上清，固体物质用70％乙醇洗涤，晾干；
(7)向上述固体中加入200μLddH2O回溶，加入1μLRNA酶37℃水浴30min，-20℃备用。
实施例2PCR扩增
以上述获得的RNA酶解混合物为模板，利用ZT1217引物进行PCR扩增：
PCR反应体系为10μL，其中包括10×PCRBuffer1μL，0.2mMdNTPs，引物各5μM，0.5UTaqDNA聚合酶，模板100ng，无菌超纯水补齐至10μL；
根据本发明针对性设置扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸20s，35个循环；72℃终延伸5min；PCR产物保存于10℃。
实施例3扩增产物检测
5μL扩增产物与2μL上样缓冲液混合，之后经丙烯酰胺质量体积比为12％的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，180v恒定电压电泳1.5h，银染显色进行带型统计；
所采用的上样缓冲液选自10×甘油凝胶上样液；
其中所述的12％的非变性聚丙烯酰胺凝胶配方(100mL)如下：
其中所采用的30％丙烯酰胺/甲叉双丙烯酰胺配置过程如下：
丙烯酰胺29g甲叉双丙烯酰胺1g蒸馏水定容至100mL4℃避光保存，保质期一个月；
所采用的10╳TBE配置过程如下：
TrisBase27g，硼酸13.75g，0.5M/LEDTA10mL，蒸馏水定容至250mL，调pH至8.3；
所采用的10％过硫酸铵(APS)以过硫酸铵0.1g和蒸馏水1mL的比例现用现配。
电泳缓冲液为1×TBE，电泳结束后，凝胶显色采用银染方法，具体过程如下：
1.水洗：ddH2O水洗2次，每次1min；
2.染色：用1‰AgNO3浸泡，平行摇动10-15min；
3.水洗：倒掉显色液，ddH2O水洗2次，每次1min；
4.显影：在盘中加入显色液(每升显色液中含有16g氢氧化钠和8mL甲醛，余量为纯净水)，然后平行摇动直至显影清楚；
5.终止：用终止液(每升终止液中含有7.5g碳酸化钠，余量为纯净水)浸泡2min，后加入ddH2O水清洗1-2次；最后用相机照相保存。
实施例4鉴定“珍甜1217”杂交种的纯度
根据特异谱带的电泳结果鉴定“珍甜1217”杂交种的纯度，判定标准为：
母本具有159bp特异谱带；父本具有147bp特异谱带；杂交种具有159bp和147bp两条特异谱带；
根据上述鉴定结果，可以换算珍甜1217品种纯度(％)＝(1-n/N)×100％，其中N为待测西瓜种子数目，n为单独具有父本谱带特征或单独具有母本谱带特征或既不同于“珍甜1217”谱带特征也不同于父母本谱带特征的植株数目。
实验例
以2014年生产的珍甜1217种子为例，收获F1代种子后马上将F1代种子进行催芽萌发，大约3d后取幼根提取西瓜基因组DNA，利用本发明的ZT1217分子标记进行纯度鉴定，4d即可获得的种子纯度结果；
利用常规鉴定方法即田间种植形态鉴定：需到海南进行加代纯度鉴定，生长周期约为60天左右，且受到多种恶劣天气影响，可能需多次重复播种鉴定，鉴定时间不好估计。具体比较如下表：
可见与常规鉴定方法相比较，利用该分子标记法鉴定珍甜1217杂交种子纯度快速高效、操作简单、重复性好、成本较低。

Claims (3)

1.一种利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法,其特征在于：利用EST-SSR引物进行鉴定，所述的EST-SSR引物命名为ZT1217，其正向序列为5’-TCGGATCTAGGCGAAGGTGGTCG-3’，其核苷酸序列如SEQIDNo.1所示；反向序列为5’-GCTCAGGAGGGAGTTTACGGTC-3’，其核苷酸序列如SEQIDNo.2所示。
2.根据权利要求1所述的利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法,其特征在于：具体步骤如下：
(1)提取珍甜1217杂交种及其亲本幼根基因组DNA；
(2)以第(1)步提取的基因组DNA为模板，用EST-SSR引物ZT1217进行PCR扩增：
PCR反应体系为10μL，其中包括10×PCRBuffer1μL，0.2mMdNTPs，引物各5μM，0.5UTaqDNA聚合酶，DNA模板100ng，无菌超纯水补齐至10μL；
扩增程序为：94℃预变性3min；94℃变性30s，57℃退火30s，72℃延伸20s，35个循环；72℃终延伸5min；PCR产物保存于10℃；
(3)扩增产物检测：5μL扩增产物与2μL上样缓冲液混合，之后经丙烯酰胺质量体积比为12％的非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳，180v恒定电压电泳1.5h，银染显色进行带型统计；
其中所采用的非变性聚丙烯酰胺凝胶中丙烯酰胺∶甲叉双丙烯酰胺的质量比为29∶1；
(4)根据特异谱带的扩增结果鉴定“珍甜1217”杂交种的纯度，判定标准为：
母本具有159bp特异谱带,其核苷酸序列如SEQIDNo.3所示；父本具有147bp特异谱带,其核苷酸序列如SEQIDNo.4所示；杂交种具有159bp和147bp两条特异谱带；
根据上述鉴定结果，换算珍甜1217品种纯度＝(1-n/N)×100％，其中N为待测西瓜种子数目，n为单独具有父本谱带特征或单独具有母本谱带特征或既不同于珍甜1217谱带特征也不同于父母本谱带特征的植株数目。
3.根据权利要求2所述的利用EST-SSR分子标记快速鉴定西瓜品种珍甜1217纯度的方法,其特征在于：
步骤(3)中所采用的上样缓冲液选自10×甘油凝胶上样液。
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Cited By (8)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106148526A (zh) * 2016-07-11 2016-11-23 北京市农林科学院 一种与西瓜果肉硬度相关的分子标记Hf1‑Indel及其应用
CN106244683A (zh) * 2016-07-30 2016-12-21 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 用于检测“琼丽”小型西瓜杂交种纯度的引物组合及其方法和应用
CN107326083A (zh) * 2017-08-02 2017-11-07 北京市农林科学院 一种检测西瓜“京美”杂交种子纯度的方法
CN108103231A (zh) * 2018-02-07 2018-06-01 武汉蔬博农业科技有限公司 一种快速鉴定西瓜新品种‘武农8号’杂交种子纯度的方法
CN108384873A (zh) * 2018-02-27 2018-08-10 江苏绿港现代农业发展有限公司 用于西瓜绿凤凰杂交种子纯度鉴定的ssr标记及方法
CN108384879A (zh) * 2018-04-28 2018-08-10 江苏绿港现代农业发展有限公司 一种用于西瓜杂交品种纯度鉴定的ssr引物及方法
CN109868327A (zh) * 2017-12-05 2019-06-11 天津市农业质量标准与检测技术研究所 一种基于est-ssr标记的甜瓜杂交种甜9号种子纯度鉴定的方法
CN112961931A (zh) * 2021-03-02 2021-06-15 宁波市农业科学研究院 甬甜5号甜瓜种子纯度的快速鉴定方法

Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102220315A (zh) * 2011-04-15 2011-10-19 北京市农林科学院 基于西瓜全基因组序列信息开发分析的ssr核心引物组及其应用
CN102676504A (zh) * 2012-05-17 2012-09-19 沈阳农业大学 快速提取大量样品微量dna的方法及其在利用ssr标记鉴定作物杂交种纯度上的应用
CN104059992A (zh) * 2014-07-14 2014-09-24 天津科润农业科技股份有限公司 一种基于est-ssr标记的甜瓜杂交种种子纯度鉴定的方法
CN104480208A (zh) * 2014-12-17 2015-04-01 安徽荃银高科种业股份有限公司 一种快速检验杂交西瓜种子荃抗绿霸纯度的方法
CN104711361A (zh) * 2015-03-26 2015-06-17 浙江省农业科学院 快速鉴定西瓜新品种红和平杂交种子纯度的方法以及采用的引物和试剂盒

Patent Citations (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN102220315A (zh) * 2011-04-15 2011-10-19 北京市农林科学院 基于西瓜全基因组序列信息开发分析的ssr核心引物组及其应用
CN102676504A (zh) * 2012-05-17 2012-09-19 沈阳农业大学 快速提取大量样品微量dna的方法及其在利用ssr标记鉴定作物杂交种纯度上的应用
CN104059992A (zh) * 2014-07-14 2014-09-24 天津科润农业科技股份有限公司 一种基于est-ssr标记的甜瓜杂交种种子纯度鉴定的方法
CN104480208A (zh) * 2014-12-17 2015-04-01 安徽荃银高科种业股份有限公司 一种快速检验杂交西瓜种子荃抗绿霸纯度的方法
CN104711361A (zh) * 2015-03-26 2015-06-17 浙江省农业科学院 快速鉴定西瓜新品种红和平杂交种子纯度的方法以及采用的引物和试剂盒

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
李丽等: "SSR标记评价西瓜品种的一致性", 《农业生物技术学报》 *

Cited By (12)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN106148526A (zh) * 2016-07-11 2016-11-23 北京市农林科学院 一种与西瓜果肉硬度相关的分子标记Hf1‑Indel及其应用
CN106148526B (zh) * 2016-07-11 2019-11-12 北京市农林科学院 一种与西瓜果肉硬度相关的分子标记Hf1-Indel及其应用
CN106244683A (zh) * 2016-07-30 2016-12-21 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 用于检测“琼丽”小型西瓜杂交种纯度的引物组合及其方法和应用
CN106244683B (zh) * 2016-07-30 2019-12-03 中国热带农业科学院热带作物品种资源研究所 用于检测“琼丽”小型西瓜杂交种纯度的引物组合及其方法和应用
CN107326083A (zh) * 2017-08-02 2017-11-07 北京市农林科学院 一种检测西瓜“京美”杂交种子纯度的方法
CN107326083B (zh) * 2017-08-02 2020-06-30 北京市农林科学院 一种检测西瓜“京美”杂交种子纯度的方法
CN109868327A (zh) * 2017-12-05 2019-06-11 天津市农业质量标准与检测技术研究所 一种基于est-ssr标记的甜瓜杂交种甜9号种子纯度鉴定的方法
CN108103231A (zh) * 2018-02-07 2018-06-01 武汉蔬博农业科技有限公司 一种快速鉴定西瓜新品种‘武农8号’杂交种子纯度的方法
CN108384873A (zh) * 2018-02-27 2018-08-10 江苏绿港现代农业发展有限公司 用于西瓜绿凤凰杂交种子纯度鉴定的ssr标记及方法
CN108384879A (zh) * 2018-04-28 2018-08-10 江苏绿港现代农业发展有限公司 一种用于西瓜杂交品种纯度鉴定的ssr引物及方法
CN112961931A (zh) * 2021-03-02 2021-06-15 宁波市农业科学研究院 甬甜5号甜瓜种子纯度的快速鉴定方法
CN112961931B (zh) * 2021-03-02 2023-01-10 宁波市农业科学研究院 甬甜5号甜瓜种子纯度的快速鉴定方法

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