CN105085609A - 一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂的制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂的制备方法，属于产品精深加工及其副产物综合利用的技术领域。本发明以鲍鱼内脏为原料，通过脱脂、除蛋白处理后，用热水浸提高速离心和透析后得到鲍鱼内脏抗氧化钛粉末，之后将其与海藻酸钠充分混合溶解后逐滴加入到氯化钙中，形成凝胶小球将蛋白肽包覆，最后真空干燥得到一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。本实例证明，制得的抗氧化剂不仅安全无毒副作用，稳定性比较好，而且抗氧化活性强，在高温和潮湿的情况下也不会变性，用于肉类食品的保鲜方面，效果显著，可以提高肉类80％以上的货柜期。

Description

一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂的制备方法

技术领域

本发明公开了一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂的制备方法，属于产品精深加工及其副产物综合利用的技术领域。

背景技术

近年来，由于化学抗氧化添加剂的不安全性和食品安全的考虑，化学抗氧化添加剂如BHA、BHT和TBHQ等的应用受到了较大的限制。因此，高效、低毒的天然食品抗氧化剂的开发成为研究热点领域。

目前，已从各种植物、动物组织中提取得到了抗氧化活性显著的物质，如茶叶中的茶多酚、大豆中的异黄酮、枸杞中的多糖等物质，而已有的研究发现，生物体内天然多肽也具有显著的抗氧化活性，比如鲍鱼。鲍鱼，最常用的是指一种原始的海洋贝类，属于单壳软体动物，其只有半面外壳，壳坚厚、扁而宽，鲍鱼是中国传统的名贵食材，位居四大海味之首，它的内脏也是极其富有营养的，含有生物蛋白抗氧化肽，抗氧化肽稳定性比较差、在高温、潮湿等条件下极易发生变性反应，这使得性肽的应用受到了很大的影响。因此为了延长功能肽的作用时间和效果，并增加肽的稳定性，对肽进行微囊化可以起到缓释和提高其稳定性的作用。

海藻酸钠载体适合于有生物活性的蛋白质类食品，且其来源丰富，成本低廉，是很有前途的缓释载体，是一种极其适合的微胶囊壁材，而氯化钙的来源也非常广泛，价格低廉，且能与海藻酸钠能够很好的结合，从而增强其微囊的稳定性，加强其缓释放性能。因此，我们采用海藻酸钠和氯化钙结合法制备大豆抗氧化肽微胶囊。

发明内容

本发明主要解决的技术问题：针对目前化学抗氧化剂的应用受到了较大的限制，因而转为从各种植物和动物组织中提取抗氧化活性显著的物质，但是提取出来的抗氧化肽稳稳定性比较差、在高温和潮湿的条件下极易发生变性反应，影响应用的弊端，提供了一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂的制备方法，该方法以鲍鱼内脏为原料，通过脱脂、除蛋白处理后，用热水浸提高速离心和透析后得到鲍鱼内脏抗氧化钛粉末，之后将其与海藻酸钠充分混合溶解后逐滴加入到氯化钙中，形成凝胶小球将蛋白肽包覆，最后真空干燥得到一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。该方法制得的抗氧化剂不仅安全无毒副作用，稳定性比较好，而且抗氧化活性强，在高温和潮湿的情况下也不会变性。

为了解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

（1）取海鲜加工厂遗留的鲍鱼内脏，用去离子水浸泡冲洗3～5次，之后放入水浴锅中，升温至70～80℃，水热脱除内脏表皮脂肪，水浴时间为1～2h，再将初步脱脂的鲍鱼内脏移入组织粉碎机中进行粉碎；

（2）取50～100g粉碎后的鲍鱼内脏放入1L的烧杯中，加入300～400mL质量浓度为6～7％的碳酸钠溶液，用玻璃棒搅拌10～15min后过滤得鲍鱼内脏浆液，继续用体积比为1:1的异丙醇水溶液漂洗4～5h，以进一步脱除鲍鱼内脏组织间的脂肪；

（3）将上述脱脂后的鲍鱼内脏浆液用200～300mL质量浓度为4～6％的氯化钠溶液浸泡，摇床振荡反应12～24h，去除鲍鱼内脏中的杂蛋白；

（4）称取20～30g上述处理后的鲍鱼内脏浆液放入500mL烧杯中，加入200～300mL双蒸水，油浴升温至100～110℃，热水浸提10～12h后移入卧式离心机，以9000～10000r/min的转速离心处理15～20min，分离得到上清液；

（5）称取15～35g硫酸铵加入到上清液中，缓慢搅拌析出鲍鱼内脏蛋白肽，之后放入离心机，以4000～5000r/min的转速离心分离得到鲍鱼内脏蛋白肽，将蛋白肽沉淀重新溶解后装入透析袋，在流动水中透析20～30h，直至透析液不能让氯化钡溶液变浑浊为止，之后将透析袋中的鲍鱼内脏蛋白肽喷雾干燥，进风温度为180～200℃，出风温度为80～90℃，干燥后放入研钵研磨成粉，即得到具有强抗氧化性的鲍鱼内脏蛋白肽粉末；

（6）称取10～20g海藻酸钠放入500mL烧杯中，加入200～300mL蒸馏水，移入水浴锅，升温至40～50℃，用磁力搅拌机搅拌10～15min，搅拌转速为300～400r/min，使海藻酸钠充分溶解，之后降低搅拌转速至200～300r/min，在搅拌状态下加入20～40g上述制得的鲍鱼内脏蛋白肽粉末，继续搅拌10～20min，制得鲍鱼内脏蛋白肽海藻酸钠混合液；

（7）将上述制得的混合液一滴一滴的加入到质量浓度为90％的氯化钙溶液中，边滴加边晃动烧杯，使混合液滴凝聚成均匀小球，之后过滤分离得到蛋白肽凝胶小球，用去离子水冲洗3～5次后用真空冷冻干燥机干燥，即得一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。

本发明的应用方法是：将本发明所制得的一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂均匀放置在肉类柜台中，其中每隔80～120cm处放置10～15g抗氧化剂，1～2天即可发现放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉比没有放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉，颜色更加鲜艳，色泽更加诱人，大大延长了肉类货柜期。

本发明的有益效果是：

（1）本发明制得的抗氧化剂不仅安全无毒副作用，稳定性比较好，而且抗氧化活性强，在高温和潮湿的情况下也不会变性；

（2）将本发明制得的抗氧化剂用于肉类食品的保鲜方面，效果显著，可以提高肉类80％以上的货柜期。

具体实施方式

首先取海鲜加工厂遗留的鲍鱼内脏，用去离子水浸泡冲洗3～5次，之后放入水浴锅中，升温至70～80℃，水热脱除内脏表皮脂肪，水浴时间为1～2h，再将初步脱脂的鲍鱼内脏移入组织粉碎机中进行粉碎；然后取50～100g粉碎后的鲍鱼内脏放入1L的烧杯中，加入300～400mL质量浓度为6～7％的碳酸钠溶液，用玻璃棒搅拌10～15min后过滤得鲍鱼内脏浆液，继续用体积比为1:1的异丙醇水溶液漂洗4～5h，以进一步脱除鲍鱼内脏组织间的脂肪；之后将上述脱脂后的鲍鱼内脏浆液用200～300mL质量浓度为4～6％的氯化钠溶液浸泡，摇床振荡反应12～24h，去除鲍鱼内脏中的杂蛋白；随后称取20～30g上述处理后的鲍鱼内脏浆液放入500mL烧杯中，加入200～300mL双蒸水，油浴升温至100～110℃，热水浸提10～12h后移入卧式离心机，以9000～10000r/min的转速离心处理15～20min，分离得到上清液；接下来称取15～35g硫酸铵加入到上清液中，缓慢搅拌析出鲍鱼内脏蛋白肽，之后放入离心机，以4000～5000r/min的转速离心分离得到鲍鱼内脏蛋白肽，将蛋白肽沉淀重新溶解后装入透析袋，在流动水中透析20～30h，直至透析液不能让氯化钡溶液变浑浊为止，之后将透析袋中的鲍鱼内脏蛋白肽喷雾干燥，进风温度为180～200℃，出风温度为80～90℃，干燥后放入研钵研磨成粉，即得到具有强抗氧化性的鲍鱼内脏蛋白肽粉末；称取10～20g海藻酸钠放入500mL烧杯中，加入200～300mL蒸馏水，移入水浴锅，升温至40～50℃，用磁力搅拌机搅拌10～15min，搅拌转速为300～400r/min，使海藻酸钠充分溶解，之后降低搅拌转速至200～300r/min，在搅拌状态下加入20～40g上述制得的鲍鱼内脏蛋白肽粉末，继续搅拌10～20min，制得鲍鱼内脏蛋白肽海藻酸钠混合液；最后将上述制得的混合液一滴一滴的加入到质量浓度为90％的氯化钙溶液中，边滴加边晃动烧杯，使混合液滴凝聚成均匀小球，之后过滤分离得到蛋白肽凝胶小球，用去离子水冲洗3～5次后用真空冷冻干燥机干燥，即得一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。

实例1

首先取海鲜加工厂遗留的鲍鱼内脏，用去离子水浸泡冲洗3次，之后放入水浴锅中，升温至70℃，水热脱除内脏表皮脂肪，水浴时间为1h，再将初步脱脂的鲍鱼内脏移入组织粉碎机中进行粉碎；然后取50g粉碎后的鲍鱼内脏放入1L的烧杯中，加入300mL质量浓度为6％的碳酸钠溶液，用玻璃棒搅拌10min后过滤得鲍鱼内脏浆液，继续用体积比为1:1的异丙醇水溶液漂洗4h，以进一步脱除鲍鱼内脏组织间的脂肪；之后将上述脱脂后的鲍鱼内脏浆液用200mL质量浓度为4％的氯化钠溶液浸泡，摇床振荡反应12h，去除鲍鱼内脏中的杂蛋白；随后称取20g上述处理后的鲍鱼内脏浆液放入500mL烧杯中，加入200mL双蒸水，油浴升温至100℃，热水浸提10h后移入卧式离心机，以9000r/min的转速离心处理15min，分离得到上清液；接下来称取15g硫酸铵加入到上清液中，缓慢搅拌析出鲍鱼内脏蛋白肽，之后放入离心机，以4000r/min的转速离心分离得到鲍鱼内脏蛋白肽，将蛋白肽沉淀重新溶解后装入透析袋，在流动水中透析20h，直至透析液不能让氯化钡溶液变浑浊为止，之后将透析袋中的鲍鱼内脏蛋白肽喷雾干燥，进风温度为180℃，出风温度为80℃，干燥后放入研钵研磨成粉，即得到具有强抗氧化性的鲍鱼内脏蛋白肽粉末；称取10g海藻酸钠放入500mL烧杯中，加入200mL蒸馏水，移入水浴锅，升温至40℃，用磁力搅拌机搅拌10min，搅拌转速为300r/min，使海藻酸钠充分溶解，之后降低搅拌转速至200r/min，在搅拌状态下加入20g上述制得的鲍鱼内脏蛋白肽粉末，继续搅拌10min，制得鲍鱼内脏蛋白肽海藻酸钠混合液；最后将上述制得的混合液一滴一滴的加入到质量浓度为90％的氯化钙溶液中，边滴加边晃动烧杯，使混合液滴凝聚成均匀小球，之后过滤分离得到蛋白肽凝胶小球，用去离子水冲洗3次后用真空冷冻干燥机干燥，即得一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。

本实例操作时，将本发明所制得的一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂均匀放置在肉类柜台中，其中每80cm处放置10g抗氧化剂，1天即可发现放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉比没有放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉，颜色更加鲜艳，色泽更加诱人，大大延长了肉类货柜期。

实例2

首先取海鲜加工厂遗留的鲍鱼内脏，用去离子水浸泡冲洗4次，之后放入水浴锅中，升温至75℃，水热脱除内脏表皮脂肪，水浴时间为1.5h，再将初步脱脂的鲍鱼内脏移入组织粉碎机中进行粉碎；然后取80g粉碎后的鲍鱼内脏放入1L的烧杯中，加入350mL质量浓度为6.5％的碳酸钠溶液，用玻璃棒搅拌13min后过滤得鲍鱼内脏浆液，继续用体积比为1:1的异丙醇水溶液漂洗4.5h，以进一步脱除鲍鱼内脏组织间的脂肪；之后将上述脱脂后的鲍鱼内脏浆液用250mL质量浓度为5％的氯化钠溶液浸泡，摇床振荡反应20h，去除鲍鱼内脏中的杂蛋白；随后称取25g上述处理后的鲍鱼内脏浆液放入500mL烧杯中，加入250mL双蒸水，油浴升温至105℃，热水浸提11h后移入卧式离心机，以9500r/min的转速离心处理18min，分离得到上清液；接下来称取20g硫酸铵加入到上清液中，缓慢搅拌析出鲍鱼内脏蛋白肽，之后放入离心机，以4500r/min的转速离心分离得到鲍鱼内脏蛋白肽，将蛋白肽沉淀重新溶解后装入透析袋，在流动水中透析25h，直至透析液不能让氯化钡溶液变浑浊为止，之后将透析袋中的鲍鱼内脏蛋白肽喷雾干燥，进风温度为190℃，出风温度为85℃，干燥后放入研钵研磨成粉，即得到具有强抗氧化性的鲍鱼内脏蛋白肽粉末；称取15g海藻酸钠放入500mL烧杯中，加入250mL蒸馏水，移入水浴锅，升温至45℃，用磁力搅拌机搅拌13min，搅拌转速为350r/min，使海藻酸钠充分溶解，之后降低搅拌转速至250r/min，在搅拌状态下加入30g上述制得的鲍鱼内脏蛋白肽粉末，继续搅拌15min，制得鲍鱼内脏蛋白肽海藻酸钠混合液；最后将上述制得的混合液一滴一滴的加入到质量浓度为90％的氯化钙溶液中，边滴加边晃动烧杯，使混合液滴凝聚成均匀小球，之后过滤分离得到蛋白肽凝胶小球，用去离子水冲洗4次后用真空冷冻干燥机干燥，即得一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。

本实例操作时，将本发明所制得的一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂均匀放置在肉类柜台中，其中每100cm处放置12g抗氧化剂，1.5天即可发现放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉比没有放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉，颜色更加鲜艳，色泽更加诱人，大大延长了肉类的货柜期。

实例3

首先取海鲜加工厂遗留的鲍鱼内脏，用去离子水浸泡冲洗5次，之后放入水浴锅中，升温至80℃，水热脱除内脏表皮脂肪，水浴时间为2h，再将初步脱脂的鲍鱼内脏移入组织粉碎机中进行粉碎；然后取100g粉碎后的鲍鱼内脏放入1L的烧杯中，加入400mL质量浓度为7％的碳酸钠溶液，用玻璃棒搅拌15min后过滤得鲍鱼内脏浆液，继续用体积比为1:1的异丙醇水溶液漂洗5h，以进一步脱除鲍鱼内脏组织间的脂肪；之后将上述脱脂后的鲍鱼内脏浆液用300mL质量浓度为6％的氯化钠溶液浸泡，摇床振荡反应24h，去除鲍鱼内脏中的杂蛋白；随后称取30g上述处理后的鲍鱼内脏浆液放入500mL烧杯中，加入300mL双蒸水，油浴升温至110℃，热水浸提12h后移入卧式离心机，以10000r/min的转速离心处理20min，分离得到上清液；接下来称取35g硫酸铵加入到上清液中，缓慢搅拌析出鲍鱼内脏蛋白肽，之后放入离心机，以5000r/min的转速离心分离得到鲍鱼内脏蛋白肽，将蛋白肽沉淀重新溶解后装入透析袋，在流动水中透析30h，直至透析液不能让氯化钡溶液变浑浊为止，之后将透析袋中的鲍鱼内脏蛋白肽喷雾干燥，进风温度为200℃，出风温度为90℃，干燥后放入研钵研磨成粉，即得到具有强抗氧化性的鲍鱼内脏蛋白肽粉末；称取20g海藻酸钠放入500mL烧杯中，加入300mL蒸馏水，移入水浴锅，升温至50℃，用磁力搅拌机搅拌15min，搅拌转速为400r/min，使海藻酸钠充分溶解，之后降低搅拌转速至300r/min，在搅拌状态下加入40g上述制得的鲍鱼内脏蛋白肽粉末，继续搅拌20min，制得鲍鱼内脏蛋白肽海藻酸钠混合液；最后将上述制得的混合液一滴一滴的加入到质量浓度为90％的氯化钙溶液中，边滴加边晃动烧杯，使混合液滴凝聚成均匀小球，之后过滤分离得到蛋白肽凝胶小球，用去离子水冲洗5次后用真空冷冻干燥机干燥，即得一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。

本实例操作时，将本发明所制得的一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂均匀放置在肉类柜台中，其中每120cm处放置15g抗氧化剂，2天即可发现放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉比没有放置抗氧化剂的肉类柜台中的肉，颜色更加鲜艳，色泽更加诱人，大大延长了肉类的货柜期。

Claims (1)

1.一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂的制备方法，其特征在于具体制备步骤为：

（1）取海鲜加工厂遗留的鲍鱼内脏，用去离子水浸泡冲洗3～5次，之后放入水浴锅中，升温至70～80℃，水热脱除内脏表皮脂肪，水浴时间为1～2h，再将初步脱脂的鲍鱼内脏移入组织粉碎机中进行粉碎；

（2）取50～100g粉碎后的鲍鱼内脏放入1L的烧杯中，加入300～400mL质量浓度为6～7％的碳酸钠溶液，用玻璃棒搅拌10～15min后过滤得鲍鱼内脏浆液，继续用体积比为1:1的异丙醇水溶液漂洗4～5h，以进一步脱除鲍鱼内脏组织间的脂肪；

（3）将上述脱脂后的鲍鱼内脏浆液用200～300mL质量浓度为4～6％的氯化钠溶液浸泡，摇床振荡反应12～24h，去除鲍鱼内脏中的杂蛋白；

（4）称取20～30g上述处理后的鲍鱼内脏浆液放入500mL烧杯中，加入200～300mL双蒸水，油浴升温至100～110℃，热水浸提10～12h后移入卧式离心机，以9000～10000r/min的转速离心处理15～20min，分离得到上清液；

（5）称取15～35g硫酸铵加入到上清液中，缓慢搅拌析出鲍鱼内脏蛋白肽，之后放入离心机，以4000～5000r/min的转速离心分离得到鲍鱼内脏蛋白肽，将蛋白肽沉淀重新溶解后装入透析袋，在流动水中透析20～30h，直至透析液不能让氯化钡溶液变浑浊为止，之后将透析袋中的鲍鱼内脏蛋白肽喷雾干燥，进风温度为180～200℃，出风温度为80～90℃，干燥后放入研钵研磨成粉，即得到具有强抗氧化性的鲍鱼内脏蛋白肽粉末；

（6）称取10～20g海藻酸钠放入500mL烧杯中，加入200～300mL蒸馏水，移入水浴锅，升温至40～50℃，用磁力搅拌机搅拌10～15min，搅拌转速为300～400r/min，使海藻酸钠充分溶解，之后降低搅拌转速至200～300r/min，在搅拌状态下加入20～40g上述制得的鲍鱼内脏蛋白肽粉末，继续搅拌10～20min，制得鲍鱼内脏蛋白肽海藻酸钠混合液；

（7）将上述制得的混合液一滴一滴的加入到质量浓度为90％的氯化钙溶液中，边滴加边晃动烧杯，使混合液滴凝聚成均匀小球，之后过滤分离得到蛋白肽凝胶小球，用去离子水冲洗3～5次后用真空冷冻干燥机干燥，即得一种鲍鱼内脏蛋白肽抗氧化剂。