CN105001332A - 针对il-6的抗体及其用途 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及对IL-6具有结合特异性的抗体及其片段。本发明的另一实施方式涉及本文所述的抗体，及其结合片段，包括本文所述的VH，VL和CDR多肽的序列，以及编码其的多核苷酸。本发明还涉及与一种或多种功能性或可检测部分缀合的抗-IL-6抗体及其结合片段的缀合物。本发明还涉及制备所述抗-IL-6抗体及其结合片段的方法。本发明的实施方式还涉及抗-IL-6抗体及其结合片段用于诊断、评估和治疗与IL-6相关的疾病和障碍的用途。这些抗体可以结合可溶的IL-6、表达IL-6的细胞表面、IL-6/IL-6R的至少一种，或预防IL-6和IL-6R的结合、IL-6/IL-6R和gpl30的结合，和/或IL-6/IL-6R/gpl30多聚体的形成，以及由此抑制与上述任何有关的生物学效应。

Description

针对IL-6的抗体及其用途
本申请是申请日为2008年5月21日、申请号为200880025053.1、发明名称为“针对IL-6的抗体及其用途”的发明专利申请的分案申请。
本申请要求2007年5月21日提交的美国临时专利申请no.60/924,550的优先权，其内容在此通过参考将其全文引入。
技术领域
本发明涉及对IL-6具有结合特异性的抗体及其片段。本发明还涉及筛选与IL-6相关的疾病和障碍的方法，和通过给药所述抗体或其片段预防或治疗与IL-6相关的疾病或障碍的方法。
背景技术
白介素-6(下文称为"IL-6")(还称为干扰素-β2；B-细胞分化因子；B-细胞刺激因子-2；肝细胞刺激因子；杂交瘤生长因子；和浆细胞瘤生长因子)为多功能细胞因子，其涉及许多生物过程例如急性炎性反应的调控，特异性免疫应答的调节，包括B-和T-细胞分化、骨代谢、血小板生成、表皮增殖、月经、神经细胞分化、神经保护、老化、癌症和在阿尔茨海默病中出现的炎性反应。参见A.Papassotiropoulos，等，Neurobiology of Aging，22:863-871(2001)。
IL-6为通过受体复合物促进细胞应答的细胞因子的家族成员，所述受体复合物由信号-转导糖蛋白gpl30的至少一个亚单位和IL-6受体("IL-6R")(还称为gp80)构成。IL-6R还可以可溶形式("sIL-6R")存在。IL-6与IL-6R结合，其然后使信号-转导受体gpl30二聚化。参见Jones，SA，J.Immunology，175:3463-3468(2005)。
在人类中，编码IL-6的基因以5个外显子和4个内含子组织，并且映入7p21处的染色体7的短臂。IL-6RNA的翻译和翻译后加工导致其成熟形式的具有184个氨基酸的21至28kDa蛋白质的形成。参见A.Papassotiropoulos，等，Neurobiology of Aging，22:863-871(2001)。
如下更详细地陈述，认为IL-6在许多疾病和障碍的发育中起作用，所述疾病和障碍包括但不限于疲劳、恶病质、自体免疫疾病、骨骼系统的疾病、癌症、心脏病、肥胖症、糖尿病、哮喘、阿尔茨海默病和多发性硬化。由于IL-6在各种疾病和障碍中的感知的参与，在本领域仍然存在对于以下的需要：用于预防或治疗与IL-6相关的疾病的组合物和方法、以及用于筛选以鉴定患有与IL-6相关的疾病或障碍的患者的方法。特别优选的抗-IL-6组合物为当给药给患者时具有最小或极小副反应的那些。降低或抑制与IL-6相关的疾病或障碍的组合物或方法对于需要其的患者而言是有益的。
发明内容
本发明涉及对IL-6具有结合特异性的特异性抗体及其片段，特别是具有特定的表位特异性和/或功能性质的抗体。本发明的一个实施方式包括能够与IL-6和/或IL-6/IL-6R复合物结合的特异性人源化抗体及其片段。这些抗体可以结合可溶的IL-6或细胞表面表达的IL-6。同样地，这些抗体还抑制一种或多种IL-6，IL-6/IL-6R复合物，IL-6/IL-6R/gpl30复合物和/或IL-6/IL-6R/gpl30的多聚体的形成或生物学效应。
本发明的另一实施方式涉及本文所述的抗体，其包括本文所述的VH，VL和CDR多肽的序列，以及编码其的多核苷酸。在本发明更特别的实施方式中，这些抗体将阻断gpl30激活和/或拥有小于50皮摩尔的结合亲和性(Kds)和/或小于或等于10-4S-1的Koff值。
在本发明的另一实施方式中这些抗体及其人源化版本将衍生自兔免疫细胞(B淋巴细胞)，并且可以基于它们与人类种系序列的同源性(序列同一性)选择。这些抗体可能需要最少或没有序列修饰，从而便于人源化后功能性质的保持。
在本发明的另一实施方式中该抗体可以基于它们在功能检验例如IL-6驱动的T1165增殖检验、IL-6刺激的HepG2触珠蛋白产生检验等中的活性来选择。本发明的进一步实施方式涉及来自抗-IL-6抗体的片段，包括例如衍生自兔免疫细胞的VH，VL和CDR多肽和编码其的多核苷酸，以及这些抗体片段和编码其的多核苷酸在形成新的抗体和多肽组合物上的用途，所述新的抗体和多肽组合物能够识别IL-6和/或IL-6/IL-6R复合物或IL-6/IL-6R/gpl30复合物和/或其多聚体。
本发明还涉及与一种或多种功能性或可检测部分缀合的抗-IL-6抗体及其结合片段的缀合物。本发明还涉及制备所述人源化抗-IL-6或抗-IL-6/IL-6R复合物抗体及其结合片段的方法。在一个实施方式中，结合片段包括但不限于，Fab、Fab'、F(ab')2、Fv和scFv片段。
本发明的实施方式涉及抗-IL-6抗体用于诊断、评估和治疗与IL-6或其异常表达相关的疾病和障碍的用途。本发明还涉及抗-IL-6抗体的片段用于诊断、评估和治疗与IL-6或其异常表达相关的疾病和障碍的用途。该抗体的优选用途为治疗和预防与疲劳和/或恶病质和类风湿性关节炎相关的癌症。
本发明的其它方式涉及抗-IL-6抗体在重组宿主细胞，优选二倍体酵母例如二倍体毕赤酵母(Pichia)和其它酵母菌株中的生产。
附图说明
图1显示各种独特表位被通过抗体选择策略制备的抗-IL-6抗体的收集物(collection)识别。表位可变性(Epitope variability)通过抗体-IL-6结合竞争研究确认(ForteBio Octet)。
图2显示兔抗体可变轻和可变重序列和同源人序列以及最终的人源化序列之间的可变轻和可变重序列的比对。框架区鉴定为FR1-FR4。互补决定区鉴定为CDR1-CDR3。氨基酸残基如所示编号。起始兔序列分别被称为针对可变轻和可变重序列的RbtVL和RbtVH。从框架1穿过框架3的末端跨越的，最类似的人类种系抗体序列中的3个，在兔序列之下比对。首先显示认为与兔序列最类似的人序列。在该实例中，这些最类似的序列为针对轻链的L12A和针对重链的3-64-04。人CDR3序列未示出。最接近的人框架4序列在兔框架4序列之下比对。垂直虚线表示其中兔残基与一个或多个在同一位置的人残基相同的残基。粗体的残基表示在该位置的人残基与在同一位置的兔残基相同。最终的人源化序列分别被称为针对可变轻序列和可变重序列的VLh和VHh。下划线的残基表示在这三个比对的人序列中该残基与在该位置的兔残基相同，但与在该位置的人残基不同。
图3证明产生的IgG和用于示例性IL-6策略的抗原特异性之间的高相关性。11孔中的9个显示与抗原识别的特异IgG相关性。
图4提供在皮下给药(s.c.)100μg/kg的人IL-6后1小时α-2-巨球蛋白(A2M)对于以不同剂量静脉内给药的抗体Ab1的剂量应答曲线。
图5提供抗体Ab1进展组vs对照组的存活数据。
图6提供抗体Ab1消退组(regression group)vs对照组的另一存活数据。
图7提供每三天10mg/kg静脉内给药(i.v.)的多克隆人IgG(270-320mg肿瘤大小)vs每三天10mg/kg静脉内给药的抗体Ab1(270-320mg肿瘤大小)的存活数据。
图8提供每三天10mg/kg静脉内给药的多克隆人IgG(400-527mg肿瘤大小)vs每三天10mg/kg静脉内给药的抗体Ab1(400-527mg肿瘤大小)的存活数据。
图9提供抗体Ab1的药代动力学图。抗体Ab1的血浆水平通过抗原捕获ELISA定量。该蛋白显示与其它全长人源化抗体一致的12至17天的半衰期。
图10 A-D分别提供抗体Ab4，Ab3，Ab8和Ab2的结合数据。图10E提供抗体Ab1，Ab6和Ab7的结合数据。
图11以表格形式总结了图10 A-E的结合数据。
图12呈现了用于实施例14的肽映射试验中的15个氨基酸肽的序列。
图13呈现了在实施例14中制备的印迹的结果。
图14呈现了在实施例14中制备的印迹的结果。
具体实施方式
定义
应该理解本发明不限于特定的方法、策略、细胞系、动物物种或属、以及所述的试剂，因为它们可以变化。还应该理解本文所用的术语仅旨在描述具体实施方式，不旨在限制本发明的范围，本发明的范围仅由所附的权利要求限制。
如本文所用单数形式的″a″，″and″和″the″包括复数所指对象，除非上下文明确地指出例外。这样，例如，提到″a细胞″包括复数的此类细胞，提到″the蛋白质″包括提到一种或多种蛋白质及对本领域技术人员已知的其等效物，等等。本文所用的所有科技术语具有按照本发明所属领域技术人员通常理解相同的意义，除非明确地指出例外。
白介素-6(IL-6)：如本文所用，白介素-6(IL-6)不仅包括如GenBank蛋白质登录号NP_000591可获得的以下212个氨基酸序列：
MNSFSTSAFGPVAFSLGLLLVLPAAFPAPVPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAENNLNLPKMAEKDGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMSTKVLIQFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHLILRSFKEFLQSSLRALRQM(SEQ ID NO：1)，but
还包括该IL-6氨基酸序列的任何前-原(pre-pro)、原-(pro-)和成熟形式，以及该序列的突变体和包括等位变体的变体。
交配(mating)感受态酵母物种：在本发明中这旨在广泛地包括可以在培养物中生长的任何二倍体或四倍体酵母。酵母的此类物种可以以单倍体、二倍体或四倍体形式存在。在合适的条件下，给定倍性的细胞以该形式增殖不确定的代数。二倍体细胞还可以形成孢子以形成单倍体细胞。连续的交配可以通过二倍体菌株的进一步交配或融合产生四倍体菌株。在本发明中二倍体或多倍体酵母细胞优选通过交配或原生质球状体融合来产生。
在本发明的一个实施方式中，交配感受态酵母为酵母科(Saccharomycetaceae)科的成员，其包括以下属：Arxiozyma；Ascobotryozyma；固囊酵母属(Citeromyces)；德巴利氏酵母(Debaryomyces)；德克酵母属(Dekkera)；假囊酵母属(Eremothecium)；伊萨酵母属(Issatchenkia)；哈萨克酵母属(Kazachstania)；克鲁维酵母属(Kluyveromyces)；Kodamaea；路德酵母属(Lodderomyces)；管囊酵母属(Pachysolen)；毕赤酵母属(Pichia)；酿酒酵母属(Saccharomyces)；Saturnispora；Tetrapisispora；有孢圆酵母属(Torulaspora)；拟威尔酵母属(Williopsis)；和接合酵母属(Zygosaccharomyces)。可能用于本发明的其它类型酵母包括亚罗酵母属(Yarrowia)，红冬孢酵母属(Rhodosporidium)，假丝酵母属(Candida)，汉逊酵母属(Hansenula)，线黑粉酵母属(Filobasium)，Filobasidellla，锁掷孢酵母属(Sporidiobolus)，布勒掷孢酵母属(Bullera)，白冬孢酵母属(Leucosporidium)和Filobasidella。
在本发明的优选实施方式中，交配感受态酵母为毕赤酵母(Pichia)属的成员。在本发明的更优选实施方式中，毕赤酵母(Pichia)属的交配感受态酵母为以下物种之一：巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)和多形汉逊酵母(Hansenulapolymorpha)安格斯毕赤酵母(Pichia angusta))。在本发明的特别优选实施方式中，毕赤酵母(Pichia)属的交配感受态酵母为物种巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)。
单倍体酵母细胞：具有其正常基因组(染色体组)互补物(complement)的各基因的单拷贝的细胞。
多倍体酵母细胞：具有其正常基因组(染色体组)互补物的多于一个拷贝的细胞。
二倍体酵母细胞：具有其正常基因组互补物的基本上每个基因的两个拷贝(等位基因)的细胞，其典型地通过融合(交配)两个单倍体细胞形成。
四倍体酵母细胞：具有其正常基因组互补物的基本上每个基因的四个拷贝(等位基因)的细胞，其典型地通过融合(交配)两个单倍体细胞形成。四倍体细胞可以携带2、3、4或更多的不同表达盒。此类四倍体可以在酿酒酵母(S.cerevisiae)中通过选择性交配纯合基因的异宗交配a/a和α/α二倍体来获得和在毕赤酵母(Pichia)通过单倍体的连续交配以获得营养缺陷型二倍体。例如，[met his]单倍体可以与[ade his]单倍体交配来获得二倍体[his]；[met arg]单倍体可以与[ade arg]单倍体交配来获得二倍体[arg]；然后二倍体[his]x二倍体[arg]来获得四倍体原养型微生物。本领域技术人员应该理解提到二倍体细胞的优点和用途还可用于四倍体细胞。
酵母交配：通过其两个单倍体酵母细胞天然地融合以形成一个二倍体酵母细胞的方法。
减数分裂：通过其二倍体二倍体酵母细胞经受减少性的分裂以形成四个单倍体孢子产物的方法。每一孢子然后发芽并形成单倍体植物性的生长细胞系。
选择标记：选择标记为对例如通过转化事件接收该基因的细胞赋予生长表型(物理生长特征)的基因或基因片段。选择标记允许该细胞在选择生长培养基中在其中不接收该选择标记基因的细胞不能生长的条件下存活和生长。选择标记基因通常属于几种类型，包括阳性选择标记基因，例如对细胞赋予对抗生素或其它药物，当杂交两个ts突变体或转化ts突变体时的温度的抗性的基因；阴性选择标记基因，例如对细胞赋予在没有特定的营养的培养基中生长的能力的生物合成基因，所述特定的营养被不具有该生物合成基因的所有细胞需要，或对细胞赋予不能在不具有野生型基因的细胞旁生长的突变的生物合成基因；等等。合适的标记包括但不限于：ZEO；G418；LYS3；MET1；MET3a；ADE1；ADE3；URA3；等。
表达载体：这些DNA载体包括便于就外源蛋白质在靶宿主细胞内的表达操作的元件。方便起见，序列的操作和用于转化的DNA的产生首先在细菌宿主，例如大肠杆菌(E.coli)中进行，并且通常载体将包括便于此类操作的序列，包括细菌复制起点和合适的细菌选择标记。选择标记编码对在选择培养基中生长的转化的宿主细胞的存活或生长而言必需的蛋白。未用包含选择基因的载体转化的宿主细胞将不在该培养基中存活。典型的选择基因编码以下蛋白：(a)赋予对抗生素或其它毒素的抗性，(b)与营养缺陷型互补，或(c)补充不能从复合培养基中获得的关键营养物。用于转化酵母的示例性的载体和方法描述于，例如Burke，D.，Dawson，D.，&Stearns，T.(2000)。酵母遗传学中的方法：a Cold Spring Harbor Laboratory course manual.Plainview，N.Y.:Cold Spring Harbor Laboratory Press。
用于本发明方法的表达载体将进一步包括酵母特异性序列，包括可选择性营养缺陷型或药物标记以用于鉴定转化的酵母菌株。药物标记可以进一步用于扩增在酵母宿主细胞中的所述载体的拷贝数量。
编码多肽的目的序列可操作地与转录和翻译调控序列连接，所述调控序列在酵母细胞中规定多肽的表达。这些载体成分可以包括但不限于，以下的一种或多种：增强子元件、启动子和转录终止序列。用于分泌多肽的序列还可以包括，例如，信号序列等。酵母复制起点为任选的，因为表达载体通常整合入酵母基因组。
在本发明的一个实施方式中，目的多肽为可操作地连接，或融合至提供来自酵母二倍体细胞的多肽的优化分泌的序列。
当使与另一核酸序列发生功能性关系时核酸为"可操作地连接"。例如，如果其表达为参与多肽的分泌的前蛋白，用于信号序列的DNA与用于多肽的DNA可操作地连接；如果其影响序列的转录，启动子或增强子，则其与编码序列可操作地连接。通常，"可操作地连接"意味着连接的DNA序列为相邻的，并且，在分泌前导的情况下，为相邻的并且在阅读框中。然而，增强子不必需是相邻的。连接可以通过在方便的限制性位点结合或备选地通过本领域技术人员熟悉的PCR/重组方法来实现(GatewayR Technology；Invitrogen，CarlsbadCalifornia)。如果此类位点不存在，根据传统实践使用合成的寡核苷酸适配子或连接子。
启动子为不翻译的序列，位于结构基因(通常在约100至1000bp内)的起始密码子的上游(5')，所述结构基因控制与其可操作地连接的特定核酸序列的转录和翻译。此类启动子属于几类：诱导型、组成型和阻抑型启动子(其应答于阻遏子的缺失，增加转录水平)。诱导型启动子可以应答于培养条件上的某些变化，例如营养物的存在或不存在或温度上的变化，引发来自它们控制下的DNA的转录的增加的水平。
酵母启动子片段还可以用作用于同源重组和将表达载体整合入酵母基因组的相同位点的位点；作为选择，选择标记用作用于同源重组的位点。毕赤酵母(Pichia)转化描述于Cregg等.(1985)Mol.Cell. Biol.5:3376-3385。
来自毕赤酵母(Pichia)的合适启动子的实例包括AOX1和启动子(Cregg等.(1989)Mol.Cell.Biol.9:1316-1323)；ICL1启动子(Menendez等.(2003)Yeast 20(13):1097-108)；甘油醛-3-磷酸脱氢酶启动子(GAP)(Waterham等.(1997)Gene 186(l):37-44)；和FLD1启动子(Shen等.(1998)Gene 216(l):93-102)。GAP启动子为强组成型启动子，AOX和FLD1启动子为诱导型的。
其它酵母启动子包括ADH1，醇脱氢酶II，GAL4，PHO3，PHO5，Pyk，和从其衍生的嵌合启动子。此外，非酵母启动子可用于本发明，例如哺乳动物、昆虫、植物、爬行动物、两栖动物、病毒和鸟类启动子。最典型地该启动子包括哺乳动物启动子(可能对表达的基因而言是内源的)或将包括在酵母系统中提供有效转录的酵母或病毒启动子。
目的多肽不仅可以直接重组地生产，还可以作为与异源多肽，例如信号序列或在成熟蛋白或多肽的N-末端具有特定裂解位点的其它多肽的融合多肽来生产。通常，信号序列可以为载体的成分，或其可以为插入载体的多肽编码序列的部分。优选的异源信号序列为通过宿主细胞内可获得的标准途径之一识别和加工的一种。酿酒酵母(S.cerevisiae)α因子前-原信号(pre-pro signal)已经证明在各种来自巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)的重组蛋白的分泌中有效。其它酵母信号序列包括α交配因子信号序列，转化酶信号序列和衍生自其它分泌的酵母多肽的信号序列。此外，这些信号多肽序列可以被改造以提供在二倍体酵母表达系统中的增强的分泌。其它目的分泌信号还包括哺乳动物信号序列，其可以与分泌的蛋白是异源的，或可以为分泌的蛋白的天然序列。信号序列包括前肽(pre-peptide)序列，并且在某些情况下可以包括原肽(propeptide)序列。许多此类信号序列在本领域是已知的，包括在免疫球蛋白链中发现的信号序列，例如K28前原毒素(preprotoxin)序列，PHA-E，FACE,人MCP-1，人血清白蛋白信号序列，人Ig重链，人Ig轻链等。例如，参见Hashimoto等Protein Eng 11(2)75(1998)；和Kobayashi等TherapeuticApheresis 2(4)257(1998)。
转录可以通过将转录激活子序列插入载体来增强。这些激活子可以是DNA的顺式作用元件，通常约10至300bp，其作用在启动子上以增强其转录。转录增强子可以相对地和独立地定位和定向，已经在内含子内以及在编码序列本身内发现相对转录单元的5'和3'。增强子可以在编码序列的5'或3'位置剪接至表达载体，但是优选位于在从启动子起的5'位点。
用于真核宿主细胞的表达载体还可以包含对于转录终止和对于使mRNA稳定所需的序列。此类序列通常在真核或病毒DNA或cDNA的不翻译区中从翻译终止密码子的3'可以获得。这些区域包含转录为在mRNA的不翻译部分的多腺苷酸化片段的核苷酸片段。
包含一种或多种以上所列成分的合适载体的构建使用标准连接技术或PCR/重组方法。分离的质粒或DNA片段以需要产生所需质粒的形式或通过重组方法被裂解，修改和再连接。为了分析以确认构建的质粒中的正确序列，连接混合物用于转化宿主细胞，在合适的情况下，成功的转化体通过抗生素抗性(例如氨苄青霉素或博莱霉素(Zeocin))来选择。制备来自转化体的质粒，将其通过限制性核酸内切酶消化和/或测序来分析。
作为片段的限制和连接的另一选择，基于att位点和重组酶的重组方法可以用于将DNA序列插入载体。此类方法由Landy(1989)描述于Ann.Rev.Biochem.58:913-949，并且为本领域技术人员已知的。此类方法使用分子间DNA重组，其由λ和大肠杆菌(E.coli)编码的重组蛋白的混合物介导。重组出现在相互作用DNA分子上的特异性att位点之间。对于att位点的描述，参见Weisberg和Landy(1983)Site-Specific Recombination in Phage Lambda，in Lambda II，Weisberg，ed.(Cold Spring Harbor，NY:Cold Spring Harbor Press)，pp.211-250。使侧翼于重组位点的DNA片段交换，以使重组后，att位点为由各亲本载体捐献的序列组成的杂交序列。重组可以在任何拓扑学的DNA之间出现。
可以通过以下将Att位点引入目的序列：将目的序列连接入合适的载体，通过使用特定的引物产生包含att B位点的PCR产物；产生克隆入包含att位点的合适的载体的cDNA文库；等等。
折叠，如本文所用，是指多肽和蛋白质的三维结构，其中氨基酸残基之间的相互作用用于稳定该结构。尽管非共价相互作用在确定结构上是重要的，通常目的蛋白将具有由2个半胱氨酸残基形成的分子内和/或分子间共价二硫键。对于天然发生的蛋白质和多肽或其衍生物和变体，合适的折叠典型地为导致最佳生物学活性的排列，并且可以方便地通过用于活性的检验，例如连接结合、酶促活性等来监视。
在某些情况下，例如其中所需产品是合成来源时，基于生物学活性的检验将较无意义。此类分子的正确折叠将基于物理性质、能量考虑、建模研究等确定。
表达宿主将进一步通过导入编码一种或多种酶的序列来修饰，所述一种或多种酶将增强折叠和二硫键形成，即折叠酶、伴侣蛋白等。此类序列将使用本领域已知的载体、标记等在酵母宿主细胞中组成型或诱导型地表达。优选地包括对于所需表达模式充分的转录调控元件的该序列，通过靶向方法稳定地整合入酵母基因组。
例如，真核PDI不仅是蛋白质半胱氨酸氧化和二硫键异构化的有效催化剂，还显示伴侣蛋白活性。PDI的共表达可以促进具有多个二硫键的活性蛋白的产生。同样所关心的是BIP(免疫球蛋白重链结合蛋白)；亲环素(cyclophilin)；等的表达。在本发明的一个实施方式中，每一单倍体亲本菌株表达不同的折叠酶，例如一种菌株可以表达BIP，另一菌株可以表达PDI或其组合。
术语"所期望蛋白"或"靶蛋白"可相互交换地使用，并且通常指本文所述的人源化抗体或其结合部分。术语"抗体"旨在包括具有适合并且识别表位的特定形状的任何包含多肽链的分子结构，其中一种或多种非共价结合相互作用使分子结构和表位之间的复合物稳定。原型抗体分子为免疫球蛋白，认为来自所有来源，例如人类、啮齿动物、兔、牛、羊、猪、狗、其它哺乳动物、鸡、其它鸟类等的所有类型免疫球蛋白，IgG，IgM，IgA，IgE，IgD,等，为"抗体"。用于生产用作根据本发明的起始材料的抗体的优选来源为兔。已经描述了许多抗体编码序列；以及其它可以通过本领域已知的方法产生。其实例包括嵌合抗体、人类抗体和其它非人类哺乳动物抗体、人源化抗体、单链抗体例如scFvs，骆驼抗体(camelbodies)，纳米抗体(nanobodies)、IgNAR(衍生自鲨鱼的单链抗体)、小模块免疫药物(small-modularimmunopharmaceuticals)(SMIPs)、和抗体片段例如Fabs，Fab'，F(ab')2等。参见Streltsov VA，等，Structure of a shark IgNARantibody variable domain and modeling of an early-developmentalisotype，Protein Sci.2005 Nov；14(ll):2901-9.Epub 2005 Sep 30；Greenberg AS，等，A new antigen receptor gene family thatundergoes rearrangement and extensive somatic diversificationin sharks，Nature.1995 Mar 9；374(6518):168-73；Nuttall SD，et al，Isolation of the new antigen receptor from wobbegongsharks，and use as a scaffold for the display of protein looplibraries，Mol Immunol.2001 Aug；38(4):313-26；Hamers-Casterman C，等.，Naturally occurring antibodies devoidof light chains，Nature.1993 Jun 3；363(6428):446-8；Gill DS，等.，Biopharmaceutical drug discovery using novel proteinscaffolds，Curr Opin Biotechnol.2006 Dec；17(6):653-8.Epub2006 Oct 19。
例如，抗体或抗原结合片段可以通过基因工程产生。在此技术中，如其它方法一样，抗体-产生细胞对所需抗原或免疫原敏感。从抗体产生细胞细胞分离的信使RNA用作模板以使用PCR扩增制备cDNA。载体(各自包含保持起始抗原特异性的一个重链基因和一个轻链基因)的文库通过将扩增的免疫球蛋白cDNA的合适部分插入表达载体而产生。组合文库通过将重链基因文库与轻链基因文库组合来构建。这产生了共表达重链和轻链(类似于抗体分子的Fab片段或抗原结合片段)的克隆的文库。将携带这些基因的载体共转染入宿主细胞。当抗体基因在转染的宿主中诱导时，重链和轻链蛋白自体装配以产生活性抗体，所述活性抗体能够使用抗原或免疫原通过筛选来检测。
目的抗体编码序列包括被以下编码的那些：天然序列，以及借助于基因编码的简并性，在序列上与公开的核酸不相同的核酸，及其变体。变体多肽可以包括氨基酸(aa)取代、添加或缺失。氨基酸取代可以为保守性氨基酸取代或消除非必需氨基酸的取代，以例如改变糖基化位点，或通过取代或缺失一个或多个对于功能不必需的半胱氨酸残基使错误折叠最小化。变体可以设计成保持或具有蛋白质特定区域的增强生物学活性(例如，功能结构域，催化性氨基酸残基，等)。变体还包括本文公开的多肽的片段，特别是生物学活性片段和/或对应于功能结构域的片段。用于克隆的基因体外突变技术是已知的。本发明中还包括的是这样的多肽，其已经使用普通分子生物技术修饰以改进其对蛋白水解降解的抗性或以优化溶解度性质或以使其更适合作为治疗剂。
嵌合抗体可以通过重组手段通过将获自一个物种的抗体产生细胞的可变轻链区和重链区(VL和VH)与来自另一个的恒定轻链区和重链区组合来形成。典型地嵌合抗体使用啮齿动物或兔可变区和人恒定区，以产生具有主要人结构域的抗体。此类嵌合抗体的产生在本领域是已知的，并且可以用过标准手段(如例如，美国专利No.5,624,659所述，在此通过参考将其全文引入)实现。还涉及的是本发明的嵌合抗体的人恒定区可以选自IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，IgG5，IgG6，IgG7，IgG8，IgG9，IgG10，IgG11，IgG12，IgG13，IgG14，IgG15，IgG16，IgG17，IgG18或IgG19恒定区。
人源化抗体可以设计成甚至还包含更多类人免疫球蛋白结构域，并且仅引入动物源抗体的互补决定区。这通过仔细地检查单克隆抗体的可变区的高变环(hyper-variable loop)的序列，使它们适合人抗体链的结构来实现。尽管表面上复杂(facially complex)，实际上该过程是直观的(straightforward)。参见，例如，美国专利No.6,187,287，在此通过参考全部引入。
除了全免疫球蛋白(或其重组对应物(counterpart))之外，包括表位结合位点的免疫球蛋白片段(例如，Fab'，F(ab')2，或其它片段)可以合成。"片段"或最小免疫球蛋白可以使用重组免疫球蛋白技术设计。例如，用于本发明的"Fv"免疫球蛋白可以通过合成融合的可变轻链区和可变重链区来生产。抗体的组合也是令人关心的，例如双价抗体(diabodies)，其包括两个不同的Fv特异性。在本发明另一实施方式中，SMIPs(小分子免疫药物(small moleculeimmunopharmaceuticals))、骆驼抗体、纳米抗体和IgNAR被免疫球蛋白片段包括。
免疫球蛋白及其片段可以翻译后修饰，例如添加效应子部分例如化学连接子、可检测部分，例如荧光染料、酶、毒素、底物、生物发光材料、放射性材料、化学发光部分等，或特异性结合部分，例如链霉亲和素、亲和素或生物素等可用于本发明的方法和组合物。另外的效应子分子的实例在下文提供。
术语"长时间稳定地表达或表达所需的分泌异源多肽的多倍体酵母"指酵母培养物，其以阈值表达水平，典型地至少10-25mg/升和优选实质上更高分泌所述多肽至少几天至一个周，更优选一个月，更优选至少1-6个月，更优选超过一年。
术语"分泌所需量的重组多肽的多倍体酵母培养物"是指这样的培养物，其稳定地或长时间地分泌至少10-25mg/升的异源多肽，更优选至少50-500mg/升，最优选500-1000mg/升或以上。
如果按照遗传密码翻译多核苷酸序列产生多肽序列，多核苷酸序列"对应"多肽序列(即，多核苷酸序列"编码"多肽序列)，如果两个序列编码相同的多肽序列，一个多核苷酸序列与另一多核苷酸序列相"对应"。
DNA构建体的"异源"区域或结构域为较大DNA分子内可鉴定的DNA的片段，其在自然中未发现与所述较大分子相连。这样，当异源区域编码哺乳动物基因时，该基因将通常通过在来源有机体的基因组中不侧翼哺乳动物基因组DNA的DNA所侧翼。异源区域的另一实例为其中编码序列本身未在自然中发现的构建体(例如,其中基因组编码序列包含内含子的cDNA，或具有不同于天然基因的密码子的合成序列)。等位变异或天然发生的突变事件不产生如本文定义的DNA的异源区域。
"编码序列"为密码子的框内(in－frame)序列，其(考虑到遗传密码)对应于或编码蛋白质或肽序列。如果序列或其互补序列编码相同的氨基酸序列，两个编码序列相互相当。与合适的调控序列相连的编码序列可以转录和翻译成多肽。多腺苷酸信号和转录终止序列将通常位于编码序列的3'。"启动子序列"为DNA调控区域，其能够在细胞中结合RNA聚合酶并且启动下游(3'方向)编码序列的转录。启动子序列典型地包含用于结合影响编码序列的转录的调控分子(例如，转录因子)的另外的位点。当RNA聚合酶在细胞中结合启动子序列并且将编码序列转录成mRNA时，编码序列在启动子序列的"控制下"或"可操作地连接"至启动子，所述mRNA然后依次地翻译成由编码序列编码的蛋白质。
载体用于将外源物质，例如DNA，RNA或蛋白质引入有机体或宿主细胞。典型地载体包括重组病毒(用于多核苷酸)和脂质体(用于多肽)。"DNA载体"为复制子，例如质粒、噬菌体或粘粒，另一多核苷酸片段将连接至其以引起所连接的片段的复制。"表达载体"为DNA载体，其包含通过合适的宿主细胞指导多肽合成的调控序列。这通常意味着结合RNA聚合酶并启动mRNA的转录的启动子，以及核糖体结合位点和指导mRNA转录成多肽的起始信号。在合适的位点处和在正确的阅读框中将多核苷酸序列引入表达载体，然后通过载体转化合适的宿主细胞，能够产生由所述多核苷酸序列编码的多肽。
多核苷酸序列的"扩增"为体外生产多拷贝的特定核酸序列。扩增序列通常为DNA的形式。用于进行此类扩增的各种技术描述于VanBrunt的综述论文(1990，Bio/Technol.，8(4):291-294)。聚合酶链反应或PCR为核酸扩增的原型，并且本文的PCR的使用应该认为是其它合适扩增技术的示例。
现在已很好地理解脊椎动物中抗体的一般结构(Edelman，G.M.，Ann.N.Y.Acad.Sci.，190:5(1971))。抗体由分子量约23,000道尔顿的两条相同的轻多肽链("轻链")和分子量53,000-70,000的两条相同的重链("重链")组成。四条链通过二硫键以"Y"形构型结合，其中轻链在"Y"形构型的口处括住重链。"Y"形构型的"支链"部分称为Fab区域，"Y"形构型的茎部分称为Fc区域。氨基酸序列取向从"Y"形构型顶部的N末端至各链底部的C末端。N末端拥有对引发其的抗原具有特异性的可变区，长度约100氨基酸，在轻链和重链之间和从抗体和抗体存在轻微的变化。
在各链中可变区连接至恒定区，所述恒定区延伸链的剩余长度，并且在特定类的抗体内不随抗体的特异性而变化(即，引发其的抗原)。存在5个已知的主要类型的恒定区，其确定免疫球蛋白分子的类型(对应于γ，μ，α，δ，和ε重链恒定区的IgG，IgM，IgA，IgD，和IgE)。恒定区和类型确定抗体的随后效应子的功能，包括补体的激活(Kabat，E.A.，Structural Concepts in Immunology and Immunochemistry，2nd Ed.，p.413-436，Holt，Rinehart，Winston(1976))，和其它细胞应答(Andrews，D.W.，等.，Clinical Immunobiology，pp 1-18，W.B.Sanders(1980)；Kohl，S.，etal.，Immunology，48:187(1983))；而可变区确定将与其反应的抗原。轻链分类为Κ(kappa)或λ(lambda)。各重链类型可以与kappa或λ轻链配对。当免疫球蛋白通过杂交瘤或通过B细胞产生时，轻链和重链相互共价地键合，两个重链的"尾"部分相互地通过共价二硫键键合。
表述”可变区"或"VR"是指在抗体中各轻链和重链对内的结构域，其直接参与抗体与抗原的结合。各重链在一端具有可变结构域(VH)，随后为许多恒定结构域。各轻链在一端具有可变结构域(VL)，在另一端具有恒定结构域；轻链的恒定结构域与重链的第一个恒定结构域对齐，轻链可变结构域与重链的可变结构域对齐。
表述”互补决定区"、"高可变区"或"CDR"是指在抗体的轻链或重链的可变区中发现的一个或多个高可变或互补性决定区(CDRs)(参见Kabat，E.A.等.，Sequences of Proteins of ImmunologicalInterest，National Institutes of Health，Bethesda，Md.，(1987))。这些表述包括由Kabat等定义的高可变区("Sequences of Proteinsof Immunological Interest,"Kabat E.，等.，US Dept.of Healthand Human Services，1983)或在抗体的三维结构中的高可变环(Chothia and Lesk，J Mol.Biol.196 901-917(1987))。在各链中的CDR由框架区保持固定在近端(close proximity)，并且与来其他链的CDR一起形成抗原结合位点。在CDR内，存在选择氨基酸，其已经描述为代表在抗体-抗原相互作用中CDR所用的关键接触残基的选择性决定区(SDRs)(Kashmiri，S.，Methods，36:25-34(2005))。
表述”框架区"或"FR"是指抗体的轻链和重链的可变区内的一个或多个框架区(参见Kabat，E.A.等.，Sequences of Proteins ofImmunological Interest，National Institutes of Health，Bethesda，Md.，(1987))。这些表述包括置入抗体的轻链和重链的可变区内的CDR之间的氨基酸序列区域。
抗-IL-6抗体及其结合片段
本发明包括对IL-6具有结合特异性和拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASQSINNELSWYQQKPGQRPKLLIYRASTLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSLRNIDNAFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNN(SEQID NO：2).
本发明还包括对IL-6具有结合特异性和拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSNYYVTWVRQAPGKGLEWIGIIYGSDETAYATWAIGRFTISKTSTTVDLKMTSLTAADTATYFCARDDSSDWDAKFNLWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK(SEQ ID NO：3).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：2的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：5；和SEQ ID NO：6的多肽序列的一种或几种；和/或与SEQ ID NO：3的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：7；SEQ ID NO：8；和SEQ ID NO：9的多肽序列的一种或几种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：2的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：5；和SEQ ID NO：6的多肽序列的一种或几种；和/或与SEQ ID NO：3的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：7；SEQ ID NO：8；和SEQ ID NO：9的多肽序列的一种或几种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：2的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：3的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：2的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：5；和SEQID NO：6的多肽序列的一种或几种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：3的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：7；SEQ ID NO：8；和SEQID NO：9的多肽序列的一种或几种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：2的可变轻链区；SEQ ID NO：3的可变重链区；SEQ ID NO：2的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：4；SEQ ID NO：5；和SEQ ID NO：6)；和SEQ ID NO：3的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：7；SEQ ID NO：8；和SEQ ID NO：9)。
本发明还涉及其中以下任一的变体：SEQ ID NO：18或SEQ ID NO：19的重链多肽序列被SEQ ID NO：3的重链多肽序列取代；SEQ ID NO：20的轻链多肽序列被SEQ ID NO：2的轻链多肽序列取代；和SEQ ID NO：120的重链CDR序列被SEQ ID NO：8的重链CDR序列取代。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab1，包括SEQ ID NO：2和SEQ ID NO：3，或作为选择在上述段落[0083]中所示的SEQ ID NO，以及具有本文所示的至少一种生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTINCQASETIYSWLSWYQQKPGQPPKLLIYQASDLASGVPSRFSGSGAGTEYTLTISGVQCDDAATYYCQQGYSGSNVDNVFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFY(SEQ ID NO：21)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLKESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLNDHAMGWVRQAPGKGLEYIGFINSGGSARYASWAEGRFTISRTSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCVRGGAVWSIHSFDPWGPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK(SEQ ID NO：22).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：21的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：23；SEQ IDNO：24；和SEQ ID NO：25的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ IDNO：22的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQID NO：26；SEQ ID NO：27；和SEQ ID NO：28的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：21的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：24；和SEQ ID NO：25的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：22的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：26；SEQ ID NO：27；和SEQ ID NO：28的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：21的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：22的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：21的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：23；SEQ ID NO：24；和SEQ ID NO：25的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：22的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：26；SEQ ID NO：27；和SEQ ID NO：28的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：21的可变轻链区；SEQ ID NO：22的可变重链区；SEQ ID NO：21的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：23；SEQ IDNO：24；和SEQ ID NO：25)；和SEQ ID NO：22的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：26；SEQ ID NO：27；和SEQ ID NO：28)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab2，包括SEQ ID NO：21和SEQ ID NO：22，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQASQSVYDNNYLSWFQQKPGQPPKLLIYGASTLASGVPSRFVGSGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVYDDDSDNAFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNN(SEQ ID NO：37)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSVYYMNWVRQAPGKGLEWIGFITMSDNINYASWAKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARSRGWGTMGRLDLWGPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK(SEQ ID NO：38).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：37的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：39；SEQ IDNO：40；和SEQ ID NO：41的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ IDNO：38的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQID NO：42；SEQ ID NO：43；和SEQ ID NO：44的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:37的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:40；和SEQ ID NO:41的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:38的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43；和SEQ ID NO:44的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:37的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:38的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:37的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:39；SEQ ID NO:40；和SEQ ID NO:41的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:38的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43；和SEQ ID NO:44的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:37的可变轻链区；SEQ ID NO:38的可变重链区；SEQ ID NO:37的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:39；SEQ IDNO:40；和SEQ ID NO:41)；和SEQ ID NO:38的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:42；SEQ ID NO:43；和SEQ ID NO:44)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab3，包括SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGAICDPVLTQTPSPVSAPVGGTVSISCQASQSVYENNYLSWFQQKPGQPPKLLIYGASTLDSGVPSRFKGSGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVYDDDSDDAFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNN(SEQ ID NO：53)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLKESGGGLVTPGGTLTLTCTASGFSLNAYYMNWVRQAPGKGLEWIGFITLNNNVAYANWAKGRFTFSKTSTTVDLKMTSPTPEDTATYFCARSRGWGAMGRLDLWGHGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK(SEQ ID NO：54).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：53的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：55；SEQ IDNO：56；和SEQ ID NO：57的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ IDNO：54的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQID NO：58；SEQ ID NO：59；和SEQ ID NO：60的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：53的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：56；和SEQ ID NO：57的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：54的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：58；SEQ ID NO：59；和SEQ ID NO：60的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：53的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：54的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：53的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：56；和SEQ ID NO：57的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：54的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：58；SEQ ID NO：59；和SEQ ID NO：60的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：53的可变轻链区；SEQ ID NO：54的可变重链区；SEQ ID NO：53的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：55；SEQ ID NO：56；和SEQ ID NO：57)；和SEQ ID NO：54的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：58；SEQ ID NO：59；和SEQ ID NO：60)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab4，包括SEQ ID NO：53和SEQ ID NO：54，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTPSPVSAAVGGTVTINCQASQSVDDNNWLGWYQQKRGQPPKYLIYSASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCAGGFSGNIFAFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF(SEQ ID NO：69)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYAMSWVRQAPGKGLEWIGIIGGFGTTYYATWAKGRFTISKTSTTVDLRITSPTTEDTATYFCARGGPGNGGDIWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKD(SEQ ID NO：70).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：69的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:71；SEQ IDNO:72；和SEQ ID NO:73的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ IDNO:70的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQID NO:74；SEQ ID NO:75；和SEQ ID NO:76的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:69的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:71；SEQ ID NO:72；和SEQ ID NO:73的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:70的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:74；SEQ ID NO:75；和SEQ ID NO:76的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:69的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:70的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:69的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:71；SEQ ID NO:72；和SEQ ID NO:73的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:70的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:74；SEQ ID NO:75；和SEQ ID NO:76的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：69的可变轻链区；SEQ ID NO：70的可变重链区；SEQ ID NO：69的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：71；SEQ ID NO：72；和SEQ ID NO：73)；和SEQ ID NO：70的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：74；SEQ ID NO：75；和SEQ ID NO：76)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab5，包括SEQ ID NO：69和SEQ ID NO：70，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSVPVGGTVTIKCQSSQSVYNNFLSWYQQKPGQPPKLLIYQASKLASGVPDRFSGSGSGTQFTLTISGVQCDDAATYYCLGGYDDDADNAFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF(SEQ ID NO：85)
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSDYAMSWVRQAPGKGLEWIGIIYAGSGSTWYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARDGYDDYGDFDRLDLWGPGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKD(SEQ ID NO：86).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：85的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：87；SEQ IDNO：88；和SEQ ID NO：89的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ IDNO：86的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQID NO：90；SEQ ID NO：91；和SEQ ID NO：92的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：85的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：87；SEQ ID NO：88；和SEQ ID NO：89的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：86的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:90；SEQ ID NO:91；和SEQ ID NO:92的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:85的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:86的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:85的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:87；SEQ ID NO:88；和SEQ ID NO:89；的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:86的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:90；SEQ ID NO:91；和SEQ ID NO:92的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:85的可变轻链区；SEQ ID NO:86的可变重链区；SEQ ID NO:85的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:87；SEQ ID NO:88；和SEQ ID NO:89)；和SEQ ID NO:86的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:90；SEQ ID NO:91；和SEQ ID NO:92)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab6，包括SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASQSINNELSWYQQKSGQRPKLLIYRASTLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSLRNIDNAFGGGTEVVVKRTVAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNF(SEQ ID NO：101)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体
METGLRWLLLVAVLSGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSNYYMTWVRQAPGKGLEWIGMIYGSDETAYANWAIGRFTISKTSTTVDLKMTSLTAADTATYFCARDDSSDWDAKFNLWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVK(SEQ ID NO：102).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：101的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：103；SEQ IDNO：104；和SEQ ID NO：105的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：102的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：106；SEQ ID NO：107；和SEQ ID NO：108的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：101的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：104；和SEQ ID NO：105的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：102的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：106；SEQ ID NO：107；和SEQ ID NO：108的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：101的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：102的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：101的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：104；和SEQ ID NO：105的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：102的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：106；SEQ ID NO：107；和SEQ ID NO：108的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：101的可变轻链区；SEQ ID NO：102的可变重链区；SEQ ID NO：101的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：103；SEQ ID NO：104；和SEQ ID NO：105)；和SEQ ID NO：102的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：106；SEQ ID NO：107；和SEQ ID NO：108)。
本发明还涉及其中以下任一的变体：SEQ ID NO：117或SEQ IDNO：118的重链多肽序列被SEQ ID NO：102的重链多肽序列取代；SEQID NO：119的轻链多肽序列被SEQ ID NO：101的轻链多肽序列取代；以及SEQ ID NO：121的重链CDR被SEQ ID NO：107的重链CDR取代。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab7，包括SEQ ID NO：101和SEQ ID NO：102，或者在以上段落[0138]中所示的可选SEQ IDNO，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVTISCQSSQSVGNNQDLSWFQQRPGQPPKLLIYEISKLESGVPSRFSGSGSGTHFTLTISGVQCDDAATYYCLGGYDDDADNA(SEQ ID NO：122)
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCHSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSRTMSWVRQAPGKGLEWIGYIWSGGSTYYATWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARLGDTGGHAYATRLNL(SEQ ID NO：123).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：122的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：124；SEQ IDNO：125；和SEQ ID NO：126的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：123的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：127；SEQ ID NO：128；和SEQ ID NO：129的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：122的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：125；和SEQ ID NO：126的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：123的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：127；SEQ ID NO：128；和SEQ ID NO：129的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：122的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：123的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：122的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：125；和SEQ ID NO：126的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：123的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：127；SEQ ID NO：128；和SEQ ID NO：129的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：122的可变轻链区；SEQ ID NO：123的可变重链区；SEQ ID NO：122的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：124；SEQ ID NO：125；和SEQ ID NO：126)；和SEQ ID NO：123的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：127；SEQ ID NO：128；和SEQ IDNO：129)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab8，包括SEQ ID NO：122和SEQ ID NO：123，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSSVSAAVGGTVSISCQSSQSVYSNKYLAWYQQKPGQPPKLLIYWTSKLASGAPSRFSGSGSGTQFTLTISGVQCDDAATYYCLGAYDDDADNA(SEQ ID NO：138)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVKPDETLTLTCTASGFSLEGGYMTWVRQAPGKGLEWIGISYDSGSTYYASWAKGRFTISKTSSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCVRSLKYPTVTSDDL(SEQ ID NO：139).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：138的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：140；SEQ IDNO：141；和SEQ ID NO：142的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：139的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：143；SEQ ID NO：144；和SEQ ID NO：145的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:138的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:140；SEQ ID NO:141；和SEQ ID NO:142的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:139的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:143；SEQ ID NO:144；和SEQ ID NO:145的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:138的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:139的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:138的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:140；SEQ ID NO:141；和SEQ ID NO:142的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:139的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:143；SEQ ID NO:144；和SEQ ID NO:145的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:138的可变轻链区；SEQ ID NO:139的可变重链区；SEQ ID NO:138的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:140；SEQ ID NO:141；和SEQ ID NO:142)；和SEQ ID NO:139的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:143；SEQ ID NO:144；和SEQ IDNO:145)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab9，包括SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVTISCQSSQSVYNNNDLAWYQQKPGQPPKLLIYYASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISGVQCDDAAAYYCLGGYDDDADNA(SEQ ID NO：154)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGLSLSSNTINWVRQAPGKGLEWIGYIWSGGSTYYASWVNGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARGGYASGGYPYATRLDL(SEQ ID NO：155).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：154的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：156；SEQ IDNO：157；和SEQ ID NO：158的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：155的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：159；SEQ ID NO：160；和SEQ ID NO：161的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：154的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：156；SEQ ID NO：157；和SEQ ID NO：158的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：155的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：159；SEQ ID NO：160；和SEQ ID NO：161的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：154的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：155的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：154的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：156；SEQ ID NO：157；和SEQ ID NO：158的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：155的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：159；SEQ ID NO：160；和SEQ ID NO：161的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：154的可变轻链区；SEQ ID NO：155的可变重链区；SEQ ID NO：154的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：156；SEQ ID NO：157；和SEQ ID NO：158)；和SEQ ID NO：155的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：159；SEQ ID NO：160；和SEQ IDNO：161)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab10，包括SEQ IDNO：154和SEQ ID NO：155，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQSSQSVYNNDYLSWYQQRPGQRPKLLIYGASKLASGVPSRFKGSGSGKQFTLTISGVQCDDAATYYCLGDYDDDADNT(SEQ ID NO：170)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFTLSTNYYLSWVRQAPGKGLEWIGIIYPSGNTYCAKWAKGRFTISKTSSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARNYGGDESL(SEQ ID NO：171).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：170的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:172；SEQ IDNO:173；和SEQ ID NO:174的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO:171的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:175；SEQ ID NO:176；和SEQ ID NO:177的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:170的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:172；SEQ ID NO:173；和SEQ ID NO:174的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:171的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:175；SEQ ID NO:176；和SEQ ID NO:177的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:170的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:171的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:170的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:172；SEQ ID NO:173；和SEQ ID NO:174的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:171的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:175；SEQ ID NO:176；和SEQ ID NO:177的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：170的可变轻链区；SEQ ID NO：171的可变重链区；SEQ ID NO：170的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：172；SEQ ID NO：173；和SEQ ID NO：174)；和SEQ ID NO：171的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：175；SEQ ID NO：176；和SEQ IDNO：177)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab11，包括SEQ IDNO：170和SEQ ID NO：171，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASETIGNALAWYQQKSGQPPKLLIYKASKLASGVPSRFKGSGSGTEYTLTISDLECADAATYYCQWCYFGDSV(SEQ ID NO：186)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVTVLKGVQCQEQLVESGGGLVQPEGSLTLTCTASGFDFSSGYYMCWVRQAPGKGLEWIACIFTITTNTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYLCARGIYSDNNYYAL(SEQ ID NO：187).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：186的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：188；SEQ IDNO：189；和SEQ ID NO：190的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：187的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：191；SEQ ID NO：192；和SEQ ID NO：193的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：186的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：188；SEQ ID NO：189；和SEQ ID NO：190的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：187的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：191；SEQ ID NO：192；和SEQ ID NO:193的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:186的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:187的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:186的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:188；SEQ ID NO:189；和SEQ ID NO:190的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:187的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:191；SEQ ID NO:192；和SEQ ID NO:193的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:186的可变轻链区；SEQ ID NO:187的可变重链区；SEQ ID NO:186的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:188；SEQ ID NO:189；和SEQ ID NO:190)；和SEQ ID NO:187的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:191；SEQ ID NO:192；和SEQ IDNO:193)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab12，包括SEQ IDNO:186和SEQ ID NO:187，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASESIGNALAWYQQKPGQPPKLLIYKASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQCADAAAYYCQWCYFGDSV(SEQ ID NO：202)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQQQLVESGGGLVKPGASLTLTCKASGFSFSSGYYMCWVRQAPGKGLESIACIFTITDNTYYANWAKGRFTISKPSSPTVTLQMTSLTAADTATYFCARGIYSTDNYYAL(SEQ ID NO：203).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：202的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：204；SEQ IDNO：205；和SEQ ID NO：206的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：203的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：207；SEQ ID NO：208；和SEQ ID NO：209的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：202的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：205；和SEQ ID NO：206的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：203的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：207；SEQ ID NO：208；和SEQ ID NO：209的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：202的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：203的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：202的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：205；和SEQ ID NO：206的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：203的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：207；SEQ ID NO：208；和SEQ ID NO：209的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：202的可变轻链区；SEQ ID NO：203的可变重链区；SEQ ID NO：202的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：204；SEQ ID NO：205；和SEQ ID NO：206)；和SEQ ID NO：203的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：207；SEQ ID NO：208；和SEQ IDNO：209)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab13，包括SEQ IDNO：202和SEQ ID NO：203，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASQSVSSYLNWYQQKPGQPPKLLIYRASTLESGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQCTYGTSSSYGAA(SEQ ID NO：218)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGISLSSNAISWVRQAPGKGLEWIGIISYSGTTYYASWAKGRFTISKTSSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARDDPTTVMVMLIPFGAGMDL(SEQ ID NO：219).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：218的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：220；SEQ IDNO：221；和SEQ ID NO：222的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：219的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:223；SEQ ID NO:224；和SEQ ID NO:225的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:218的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:220；SEQ ID NO:221；和SEQ ID NO:222的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:219的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:223；SEQ ID NO:224；和SEQ ID NO:225的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:218的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:219的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:218的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:220；SEQ ID NO:221；和SEQ ID NO:222的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:219的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:223；SEQ ID NO:224；和SEQ ID NO:225的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:218的可变轻链区；SEQ ID NO:219的可变重链区；SEQ ID NO:218的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:220；SEQ ID NO:221；和SEQ ID NO:222)；和SEQ ID NO:219的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：223；SEQ ID NO：224；和SEQ IDNO：225)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab14，包括SEQ IDNO：218和SEQ ID NO：219，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTASPVSAAVGGTVTINCQASQSVYKNNYLSWYQQKPGQPPKGLIYSASTLDSGVPLRFSGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYYCLGSYDCSSGDCYA(SEQ ID NO：234)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPEGSLTLTCTASGFSFSSYWMCWVRQAPGKGLEWIACIVTGNGNTYYANWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAKAYDL(SEQ ID NO：235).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：234的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：236；SEQ IDNO：237；和SEQ ID NO：238的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：235的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：239；SEQ ID NO：240；和SEQ ID NO：241的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：234的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：236；SEQ ID NO：237；和SEQ ID NO：238的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：235的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：239；SEQ ID NO：240；和SEQ ID NO：241的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：234的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：235的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：234的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：236；SEQ ID NO：237；和SEQ ID NO：238的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：235的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：239；SEQ ID NO：240；和SEQ ID NO：241的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：234的可变轻链区；SEQ ID NO：235的可变重链区；SEQ ID NO：234的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：236；SEQ ID NO：237；和SEQ ID NO：238)；和SEQ ID NO：235的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：239；SEQ ID NO：240；和SEQ IDNO：241)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab15，包括SEQ IDNO：234和SEQ ID NO：235，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGSTFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQASQSVYDNNYLSWYQQKPGQPPKLLIYGASTLASGVPSRFKGTGSGTQFTLTITDVQCDDAATYYCAGVFNDDSDDA(SEQ ID NO：250)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVPKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTLSGFSLSAYYMSWVRQAPGKGLEWIGFITLSDHISYARWAKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARSRGWGAMGRLDL(SEQ ID NO：251).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：250的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：252；SEQ IDNO：253；和SEQ ID NO：254的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：251的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：256；和SEQ ID NO：257的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：250的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：252；SEQ ID NO：253；和SEQ ID NO：254的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：251的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：256；和SEQ ID NO：257的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：250的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：251的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：250的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：252；SEQ ID NO：253；和SEQ ID NO：254的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：251的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：256；和SEQ ID NO：257的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：250的可变轻链区；SEQ ID NO：251的可变重链区；SEQ ID NO：250的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：252；SEQ ID NO：253；和SEQ ID NO：254)；和SEQ ID NO：251的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：255；SEQ ID NO：256；和SEQ IDNO：257)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab16，包括SEQ IDNO：250和SEQ ID NO：251，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVTISCQASQSVYNNKNLAWYQQKSGQPPKLLIYWASTLASGVSSRFSGSGSGTQFTLTVSGVQCDDAATYYCLGVFDDDADNA(SEQ ID NO：266)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSSYSMTWVRQAPGKGLEYIGVIGTSGSTYYATWAKGRFTISRTSTTVALKITSPTTEDTATYFCVRSLSSITFL(SEQ ID NO：267).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：266的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：268；SEQ IDNO：269；和SEQ ID NO：270的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：267的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：271；SEQ ID NO：272；和SEQ ID NO：273的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：266的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:268；SEQ ID NO:269；和SEQ ID NO:270的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:267的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:271；SEQ ID NO:272；和SEQ ID NO:273的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:266的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:267的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:266的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:268；SEQ ID NO:269；和SEQ ID NO:270的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:267的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:271；SEQ ID NO:272；和SEQ ID NO:273的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:266的可变轻链区；SEQ ID NO:267的可变重链区；SEQ ID NO:266的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:268；SEQ ID NO:269；和SEQ ID NO:270)；和SEQ ID NO:267的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:271；SEQ ID NO:272；和SEQ IDNO:273)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab17，包括SEQ IDNO:266和SEQ ID NO:267，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAFELTQTPASVEAAVGGTVTINCQASQNIYRYLAWYQQKPGQPPKFLIYLASTLASGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQSYYSSNSVA(SEQ ID NO：282)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLVESGGDLVQPEGSLTLTCTASELDFSSGYWICWVRQVPGKGLEWIGCIYTGSSGSTFYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARGYSGFGYFKL(SEQ ID NO：283).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：282的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：284；SEQ IDNO：285；和SEQ ID NO：286的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：283的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：287；SEQ ID NO：288；和SEQ ID NO：289的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：282的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：285；和SEQ ID NO：286的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：283的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：287；SEQ ID NO：288；和SEQ ID NO：289的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：282的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：283的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：282的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：285；和SEQ ID NO：286的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：283的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：287；SEQ ID NO：288；和SEQ ID NO：289的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：282的可变轻链区；SEQ ID NO：283的可变重链区；SEQ ID NO：282的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：284；SEQ ID NO：285；和SEQ ID NO：286)；和SEQ ID NO：283的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：287；SEQ ID NO：288；和SEQ IDNO：289)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab18，包括SEQ IDNO：282和SEQ ID NO：283，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQASEDIYRLLAWYQQKPGQPPKLLIYDSSDLASGVPSRFKGSGSGTEFTLAISGVQCDDAATYYCQQAWSYSDIDNA(SEQ ID NO：298)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLSSYYMSWVRQAPGKGLEWIGIITTSGNTFYASWAKGRLTISRTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARTSDIFYYRNL(SEQ ID NO：299).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：298的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：300；SEQ IDNO:301；和SEQ ID NO:302的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO:299的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:303；SEQ ID NO:304；和SEQ ID NO:305的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:298的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:300；SEQ ID NO:301；和SEQ ID NO:302的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:299的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:303；SEQ ID NO:304；和SEQ ID NO:305的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:298的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:299的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:298的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:300；SEQ ID NO:301；和SEQ ID NO:302的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:299的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:303；SEQ ID NO:304；和SEQ ID NO:305的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:298的可变轻链区；SEQ ID NO:299的可变重链区；SEQ ID NO：298的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：300；SEQ ID NO：301；和SEQ ID NO：302)；和SEQ ID NO：299的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：303；SEQ ID NO：304；和SEQ IDNO：305)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab19，包括SEQ IDNO：298和SEQ ID NO：299，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTASPVSAAVGATVTINCQSSQSVYNDMDLAWFQQKPGQPPKLLIYSASTLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVQCDDAATYYCLGAFDDDADNT(SEQ ID NO：314)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLTRHAITWVRQAPGKGLEWIGCIWSGGSTYYATWAKGRFTISKTSTTVDLRITSPTTEDTATYFCARVIGDTAGYAYFTGLDL(SEQ ID NO：315).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：314的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：316；SEQ IDNO：317；和SEQ ID NO：318的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：315的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：319；SEQ ID NO：320；和SEQ ID NO：321的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：314的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：316；SEQ ID NO：317；和SEQ ID NO：318的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：315的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：319；SEQ ID NO：320；和SEQ ID NO：321的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:314的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:315的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:314的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:316；SEQ ID NO:317；和SEQ ID NO:318的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:315的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:319；SEQ ID NO:320；和SEQ ID NO:321的多肽序列的一种或多种。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:314的可变轻链区；SEQ ID NO:315的可变重链区；SEQ ID NO:314的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:316；SEQ ID NO:317；和SEQ ID NO:318)；和SEQ ID NO:315的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:319；SEQ ID NO:320；和SEQ IDNO:321)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab20，包括SEQ IDNO:314和SEQ ID NO:315，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQASQSVYNWLSWYQQKPGQPPKLLIYTASSLASGVPSRFSGSGSGTEFTLTISGVECADAATYYCQQGYTSDVDNV(SEQ ID NO：330)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEEAGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSSYAMGWVRQAPGKGLEYIGIISSSGSTYYATWAKGRFTISQASSTTVDLKITSPTTEDSATYFCARGGAGSGGVWLLDGFDP(SEQ ID NO：331).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：330的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：332；SEQ IDNO：333；和SEQ ID NO：334的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：331的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：336；和SEQ ID NO：337的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：330的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：332；SEQ ID NO：333；和SEQ ID NO：334的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：331的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：336；和SEQ ID NO：337的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：330的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：331的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：330的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：332；SEQ ID NO：333；和SEQ ID NO：334的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：331的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：336；和SEQ ID NO：337的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：330的可变轻链区；SEQ ID NO：331的可变重链区；SEQ ID NO：330的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：332；SEQ ID NO：333；和SEQ ID NO：334)；和SEQ ID NO：331的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：335；SEQ ID NO：336；和SEQ IDNO：337)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab21，包括SEQ IDNO：330和SEQ ID NO：331，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGAKCADVVMTQTPASVSAAVGGTVTINCQASENIYNWLAWYQQKPGQPPKLLIYTVGDLASGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQQGYSSSYVDNV(SEQ ID NO：346)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQEQLKESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLNDYAVGWFRQAPGKGLEWIGYIRSSGTTAYATWAKGRFTISATSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARGGAGSSGVWILDGFAP(SEQ ID NO：347).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：346的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：348；SEQ IDNO：349；和SEQ ID NO：350的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：347的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:351；SEQ ID NO:352；和SEQ ID NO:353的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:346的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:348；SEQ ID NO:349；和SEQ ID NO:350的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:347的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:351；SEQ ID NO:352；和SEQ ID NO:353的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:346的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:347的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:346的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:348；SEQ ID NO:349；和SEQ ID NO:350的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:347的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:351；SEQ ID NO:352；和SEQ ID NO:353的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:346的可变轻链区；SEQ ID NO:347的可变重链区；SEQ ID NO:346的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:348；SEQ ID NO:349；和SEQ ID NO:350)；和SEQ ID NO:347的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:351；SEQ ID NO:352；和SEQ IDNO:353)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab22，包括SEQ IDNO:346和SEQ ID NO:347，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASQSVYQNNYLSWFQQKPGQPPKLLIYGAATLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCAGAYRDVDS(SEQ ID NO：362)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPGASLTLTCTASGFSFTSTYYIYWVRQAPGKGLEWIACIDAGSSGSTYYATWVNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAKWDYGGNVGWGYDL(SEQ ID NO：363).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO:362的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:364；SEQ IDNO:365；和SEQ ID NO:366的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO:363的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:367；SEQ ID NO:368；和SEQ ID NO:369的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:362的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:364；SEQ ID NO:365；和SEQ ID NO:366的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:363的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:367；SEQ ID NO:368；和SEQ ID NO:369的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：362的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：363的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：362的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：365；和SEQ ID NO：366的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：363的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：367；SEQ ID NO：368；和SEQ ID NO：369的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：362的可变轻链区；SEQ ID NO：363的可变重链区；SEQ ID NO：362的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：364；SEQ ID NO：365；和SEQ ID NO：366)；和SEQ ID NO：363的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：367；SEQ ID NO：368；和SEQ IDNO：369)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab23，包括SEQ IDNO：362和SEQ ID NO：363，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAFELTQTPSSVEAAVGGTVTIKCQASQSISSYLAWYQQKPGQPPKFLIYRASTLASGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQSYYDSVSNP(SEQ ID NO：378)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPEGSLTLTCKASGLDLGTYWFMCWVRQAPGKGLEWIACIYTGSSGSTFYASWVNGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCARGYSGYGYFKL(SEQ ID NO：379).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：378的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：380；SEQ IDNO：381；和SEQ ID NO：382的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：379的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：384；和SEQ ID NO：385的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：378的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：380；SEQ ID NO：381；和SEQ ID NO：382的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：379的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：384；和SEQ ID NO：385的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：378的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：379的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：378的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：380；SEQ ID NO：381；和SEQ ID NO：382的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：379的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：384；和SEQ ID NO：385的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：378的可变轻链区；SEQ ID NO：379的可变重链区；SEQ ID NO：378的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：380；SEQ ID NO：381；和SEQ ID NO：382)；和SEQ ID NO：379的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：383；SEQ ID NO：384；和SEQ IDNO：385)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab24，包括SEQ IDNO：378和SEQ ID NO：379，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGVTFAIEMTQSPFSVSAAVGGTVSISCQASQSVYKNNQLSWYQQKSGQPPKLLIYGASALASGVPSRFKGSGSGTEFTLTISDVQCDDAATYYCAGAITGSIDTDG(SEQ ID NO：394)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGDLVKPGASLTLTCTTSGFSFSSSYFICWVRQAPGKGLEWIACIYGGDGSTYYASWAKGRFTISKTSSTTVTLQMTSLTAADTATYFCAREWAYSQGYFGAFDL(SEQ ID NO：395).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：394的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：396；SEQ IDNO：397；和SEQ ID NO：398的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：395的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：399；SEQ ID NO：400；和SEQ ID NO：401的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:394的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:396；SEQ ID NO:397；和SEQ ID NO:398的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:395的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:399；SEQ ID NO:400；和SEQ ID NO:401的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:394的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:395的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:394的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:396；SEQ ID NO:397；和SEQ ID NO:398的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:395的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:399；SEQ ID NO:400；和SEQ ID NO:401的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:394的可变轻链区；SEQ ID NO:395的可变重链区；SEQ ID NO:394的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:396；SEQ ID NO:397；和SEQ ID NO:398)；和SEQ ID NO:395的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:399；SEQ ID NO:400；和SEQ IDNO:401)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab25，包括SEQ IDNO:394和SEQ ID NO:395，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVEAAVGGTVTIKCQASEDISSYLAWYQQKPGQPPKLLIYAASNLESGVSSRFKGSGSGTEYTLTISDLECADAATYYCQCTYGTISISDGNA(SEQ ID NO：410)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMTWVRQAPGEGLEYIGFINPGGSAYYASWVKGRFTISKSSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARVLIVSYGAFTI(SEQ ID NO：411).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：410的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：412；SEQ IDNO：413；和SEQ ID NO：414的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：411的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：415；SEQ ID NO：416；和SEQ ID NO：417的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：410的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：412；SEQ ID NO：413；和SEQ ID NO：414的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：411的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：415；SEQ ID NO：416；和SEQ ID NO：417的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：410的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：411的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：410的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：412；SEQ ID NO：413；和SEQ ID NO：414的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：411的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：415；SEQ ID NO：416；和SEQ ID NO：417的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：410的可变轻链区；SEQ ID NO：411的可变重链区；SEQ ID NO：410的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：412；SEQ ID NO：413；和SEQ ID NO：414)；和SEQ ID NO：411的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：415；SEQ ID NO：416；和SEQ IDNO：417)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab26，包括SEQ IDNO：410和SEQ ID NO：411，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCDVVMTQTPASVSAAVGGTVTIKCQASEDIESYLAWYQQKPGQPPKLLIYGASNLESGVSSRFKGSGSGTEFTLTISDLECADAATYYCQCTYGIISISDGNA(SEQ ID NO：426)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMTWVRQAPGEGLEYIGFMNTGDNAYYASWAKGRFTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARVLVVAYGAFNI(SEQ ID NO：427).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：426的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:428；SEQ IDNO:429；和SEQ ID NO:430的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO:427的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:431；SEQ ID NO:432；和SEQ ID NO:433的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:426的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:428；SEQ ID NO:429；和SEQ ID NO:430的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:427的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:431；SEQ ID NO:432；和SEQ ID NO:433的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:426的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:427的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:426的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:428；SEQ ID NO:429；和SEQ ID NO:430的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:427的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:431；SEQ ID NO:432；和SEQ ID NO:433的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：426的可变轻链区；SEQ ID NO：427的可变重链区；SEQ ID NO：426的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：428；SEQ ID NO：429；和SEQ ID NO：43O)；和SEQ ID NO：427的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：431；SEQ ID NO：432；和SEQ IDNO：433)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab27，包括SEQ IDNO：426和SEQ ID NO：427，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSEPVGGTVSISCQSSKSVMNNNYLAWYQQKPGQPPKLLIYGASNLASGVPSRFSGSGSGTQFTLTISDVQCDDAATYYCQGGYTGYSDHGT(SEQ ID NO：442)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVKPDETLTLTCTVSGIDLSSYPMNWVRQAPGKGLEWIGFINTGGTIVYASWAKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARGSYVSSGYAYYFNV(SEQ ID NO：443).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：442的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：444；SEQ IDNO：445；和SEQ ID NO：446的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：443的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：447；SEQ ID NO：448；和SEQ ID NO：449的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：442的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：444；SEQ ID NO：445；和SEQ ID NO：446的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：443的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：447；SEQ ID NO：448；和SEQ ID NO:449的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:442的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:443的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:442的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:444；SEQ ID NO:445；和SEQ ID NO:446的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:443的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:447；SEQ ID NO:448；和SEQ ID NO:449的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:442的可变轻链区；SEQ ID NO:443的可变重链区；SEQ ID NO:442的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:444；SEQ ID NO:445；和SEQ ID NO:446)；和SEQ ID NO:443的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:447；SEQ ID NO:448；和SEQ IDNO:449)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab28，包括SEQ IDNO:442和SEQ ID NO:443，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAAVLTQTPSPVSAAVGGTVSISCQSSQSVYNNNWLSWFQQKPGQPPKLLIYKASTLASGVPSRFKGSGSGTQFILTISDVQCDDVATYYCAGGYLDSVI(SEQ ID NO：458)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSTYSINWVRQAPGKGLEWIGIIANSGTTFYANWAKGRFTVSKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARESGMYNEYGKFNI(SEQ ID NO：459).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：458的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：460；SEQ IDNO：461；和SEQ ID NO：462的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：459的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：464；和SEQ ID NO：465的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：458的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：460；SEQ ID NO：461；和SEQ ID NO：462的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：459的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：464；和SEQ ID NO：465的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：458的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：459的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：458的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：460；SEQ ID NO：461；和SEQ ID NO：462的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：459的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：464；和SEQ ID NO：465的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：458的可变轻链区；SEQ ID NO：459的可变重链区；SEQ ID NO：458的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：460；SEQ ID NO：461；和SEQ ID NO：462)；和SEQ ID NO：459的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：463；SEQ ID NO：464；和SEQ IDNO：465)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab29，包括SEQ IDNO：458和SEQ ID NO：459，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCASDMTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASENIYSFLAWYQQKPGQPPKLLIFKASTLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCQQGATVYDIDNN(SEQ ID NO：474)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSAYAMIWVRQAPGEGLEWITIIYPNGITYYANWAKGRFTVSKTSTAMDLKITSPTTEDTATYFCARDAESSKNAYWGYFNV(SEQ ID NO：475).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：474的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：476；SEQ IDNO：477；和SEQ ID NO：478的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：475的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:479；SEQ ID NO:480；和SEQ ID NO:481的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:474的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:476；SEQ ID NO:477；和SEQ ID NO:478的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:475的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:479；SEQ ID NO:480；和SEQ ID NO:481的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:474的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:475的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:474的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:476；SEQ ID NO:477；和SEQ ID NO:478的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:475的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:479；SEQ ID NO:480；和SEQ ID NO:481的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:474的可变轻链区；SEQ ID NO:475的可变重链区；SEQ ID NO:474的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:476；SEQ ID NO:477；和SEQ ID NO:478)；和SEQ ID NO:475的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：479；SEQ ID NO：480；和SEQ IDNO：481)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab30，包括SEQ IDNO：474和SEQ ID NO：475，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCASDMTQTPSSVSAAVGGTVTINCQASENIYSFLAWYQQKPGQPPKLLIFRASTLASGVSSRFKGSGSGTQFTLTISDLECDDAATYYCQQGATVYDIDNN(SEQ ID NO：490)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGIDLSAYAMIWVRQAPGEGLEWITIIYPNGITYYANWAKGRFTVSKTSTAMDLKITSPTTEDTATYFCARDAESSKNAYWGYFNV(SEQ ID NO：491).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：490的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：492；SEQ IDNO：493；和SEQ ID NO：494的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：491的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：496；和SEQ ID NO：497的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：490的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：492；SEQ ID NO：493；和SEQ ID NO：494的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：491的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：496；和SEQ ID NO：497的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：490的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：491的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：490的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：492；SEQ ID NO：493；和SEQ ID NO：494的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：491的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：496；和SEQ ID NO：497的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：490的可变轻链区；SEQ ID NO：491的可变重链区；SEQ ID NO：490的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：492；SEQ ID NO：493；和SEQ ID NO：494)；和SEQ ID NO：491的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：495；SEQ ID NO：496；和SEQ IDNO：497)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab31，包括SEQ IDNO：490和SEQ ID NO：491，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAIEMTQTPSPVSAAVGGTVTINCQASESVFNNMLSWYQQKPGHSPKLLIYDASDLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISGVECDDAATYYCAGYKSDSNDGDNV(SEQ ID NO：506)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLNRNSITWVRQAPGEGLEWIGIITGSGRTYYANWAKGRFTISKTSTTVDLKMTSPTTEDTATYFCARGHPGLGSGNI(SEQ ID NO：507).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：506的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：508；SEQ IDNO：509；和SEQ ID NO：510的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：507的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：511；SEQ ID NO：512；和SEQ ID NO：513的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：506的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：508；SEQ ID NO：509；和SEQ ID NO：510的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：507的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：511；SEQ ID NO：512；和SEQ ID NO：513的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：506的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：507的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：506的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：508；SEQ ID NO：509；和SEQ ID NO：510的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：507的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：511；SEQ ID NO：512；和SEQ ID NO：513的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：506的可变轻链区；SEQ ID NO：507的可变重链区；SEQ ID NO：506的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：508；SEQ ID NO：509；和SEQ ID NO：510)；和SEQ ID NO：507的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：511；SEQ ID NO：512；和SEQ IDNO：513)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab32，包括SEQ IDNO：506和SEQ ID NO：507，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTASSVSAAVGGTVTINCQSSQSVYNNYLSWYQQKPGQPPKLLIYTASSLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISEVQCDDAATYYCQGYYSGPIIT(SEQ ID NO：522)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTASGFSLNNYYIQWVRQAPGEGLEWIGIIYAGGSAYYATWANGRFTIAKTSSTTVDLKMTSLTTEDTATYFCARGTFDGYEL(SEQ ID NO：523).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：522的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：524；SEQ IDNO：525；和SEQ ID NO：526的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：523的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：527；SEQ ID NO：528；和SEQ ID NO：529的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:522的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:524；SEQ ID NO:525；和SEQ ID NO:526的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:523的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:527；SEQ ID NO:528；和SEQ ID NO:529的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:522的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:523的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:522的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:524；SEQ ID NO:525；和SEQ ID NO:526的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:523的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO:527；SEQ ID NO:528；和SEQ ID NO:529的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:522的可变轻链区；SEQ ID NO:523的可变重链区；SEQ ID NO:522的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:524；SEQ ID NO:525；和SEQ ID NO:526)；和SEQ ID NO:523的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:527；SEQ ID NO:528；和SEQ IDNO:529)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab33，包括SEQ IDNO:522和SEQ ID NO:523，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGATFAQVLTQTPSPVSVPVGDTVTISCQSSESVYSNNLLSWYQQKPGQPPKLLIYRASNLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTISGAQCDDAATYYCQGYYSGVINS(SEQ ID NO：538)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSVEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSSYFMSWVRQAPGEGLEYIGFINPGGSAYYASWASGRLTISKTSTTVDLKITSPTTEDTATYFCARILIVSYGAFTI(SEQ ID NO：539).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：538的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：540；SEQ IDNO：541；和SEQ ID NO：542的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：539的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：544；和SEQ ID NO：545的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：538的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：540；SEQ ID NO：541；和SEQ ID NO：542的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：539的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：544；和SEQ ID NO：545的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO：538的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO：539的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：538的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：540；SEQ ID NO：541；和SEQ ID NO：542的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO：539的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：544；和SEQ ID NO：545的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：538的可变轻链区；SEQ ID NO：539的可变重链区；SEQ ID NO：538的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：540；SEQ ID NO：541；和SEQ ID NO：542)；和SEQ ID NO：539的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：543；SEQ ID NO：544；和SEQ IDNO：545)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab34，包括SEQ IDNO：538和SEQ ID NO：539，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQATFSIGNELSWYQQKPGQAPKLLIYSASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTITGVECDDAATYYCQQGYSSANIDNA(SEQ ID NO：554)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSKYYMSWVRQAPEKGLKYIGYIDSTTVNTYYATWARGRFTISKTSTTVDLKITSPTSEDTATYFCARGSTYFTDGGHRLDL(SEQ ID NO：555).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO:554的可变轻链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:556；SEQ IDNO:557；和SEQ ID NO:558的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO:555的可变重链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:559；SEQ ID NO:560；和SEQ ID NO:561的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO:554的可变轻链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:556；SEQ ID NO:557；和SEQ ID NO:558的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO:555的可变重链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:559；SEQ ID NO:560；和SEQ ID NO:561的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:554的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:555的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:554的可变轻链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:556；SEQ ID NO:557；和SEQ ID NO:558的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:555的可变重链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:559；SEQ ID NO:560；和SEQ ID NO:561的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO：554的可变轻链区；SEQ ID NO：555的可变重链区；SEQ ID NO：554的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO：556；SEQ ID NO：557；和SEQ ID NO：558)；和SEQ ID NO：555的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO：559；SEQ ID NO：560；和SEQ IDNO：561)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab35，包括SEQ IDNO：554和SEQ ID NO：555，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
在另一实施方式中，本发明包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变轻链序列的抗体：
MDTRAPTQLLGLLLLWLPGARCAYDMTQTPASVEVAVGGTVTIKCQATESIGNELSWYQQKPGQAPKLLIYSASTLASGVPSRFKGSGSGTQFTLTITGVECDDAATYYCQQGYSSANIDNA(SEQ ID NO：570)
本发明还包括对IL-6具有结合特异性并且拥有包括以下所示序列的可变重链序列的抗体：
METGLRWLLLVAVLKGVQCQSLEESGGRLVTPGTPLTLTCTVSGFSLSTYNMGWVRQAPGKGLEWIGSITIDGRTYYASWAKGRFTVSKSSTTVDLKMTSLTTGDTATYFCARILIVSYGAFTI(SEQ ID NO：571).
本发明还涉及这样的抗体，其包括与SEQ ID NO：570的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：572；SEQ IDNO：573；和SEQ ID NO：574的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQID NO：571的可变重链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：575；SEQ ID NO：576；和SEQ ID NO：577的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
在另一实施方式中，本发明涉及其它抗体，例如比如嵌合抗体，其包括与SEQ ID NO：570的可变轻链序列的互补决定区(CDR，或高可变区)对应的SEQ ID NO：572；SEQ ID NO：573；和SEQ ID NO：574的多肽序列的一种或多种，和/或与SEQ ID NO：571的可变重链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:575；SEQ ID NO:576；和SEQ ID NO:577的多肽序列的一种或多种，或这些多肽序列的组合。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体包括以上所示CDR和可变重链和轻链序列的组合。
本发明还涉及对IL-6具有结合特异性的抗体的片段。在本发明的一个实施方式中，本发明的抗体片段包括，或作为选择由SEQ ID NO:570的多肽序列组成。在本发明的另一实施方式中，本发明的抗体片段包括或作为选择由SEQ ID NO:571的多肽序列组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:570的可变轻链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:572；SEQ ID NO:573；和SEQ ID NO:574的多肽序列的一种或多种组成。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由与SEQ ID NO:571的可变重链序列的互补决定区(CDR,或高可变区)对应的SEQ ID NO:575；SEQ ID NO:576；和SEQ ID NO:577的多肽序列的一种或多种组成。
本发明还涉及包括本文所述抗体片段的一种或多种的抗体片段。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的抗体的片段包括，或作为选择由以下抗体片段的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：SEQ ID NO:570的可变轻链区；SEQ ID NO:571的可变重链区；SEQ ID NO:570的可变轻链区的互补决定区(SEQ ID NO:572；SEQ ID NO:573；和SEQ ID NO:574)；和SEQ ID NO:571的可变重链区的互补决定区(SEQ ID NO:575；SEQ ID NO:576；和SEQ IDNO:577)。
在本发明的优选实施方式中，抗-IL-6抗体为Ab36，包括SEQ IDNO:570和SEQ ID NO:571，并且具有至少一种本文所述的生物学活性。
此类抗体片段可以以以下非限制性形式的一种或多种存在：Fab,Fab',F(ab')2,Fv和单链Fv抗体形式。在优选实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体进一步包括包含以下所示序列的κ恒定轻链序列：
VAAPSVFIFPPSDEQLKSGTASVVCLLNNFYPREAKVQWKVDNALQSGNSQESVTEQDSKDSTYSLSSTLTLSKADYEKHKVYACEVTHQGLSSPVTKSFNRGEC(SEQ ID NO：586).
在另一优选实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体进一步包括包含以下所示序列的γ-1恒定重链多肽序列：
ASTKGPSVFPLAPSSKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPSSSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKRVEPKSCDKTHTCPPCPAPELLGGPSVFLFPPKPKDTLMISRTPEVTCVVVDVSHEDPEVKFNWYVDGVEVHNAKTKPREEQYASTYRVVSVLTVLHQDWLNGKEYKCKVSNKALPAPIEKTISKAKGQPREPQVYTLPPSREEMTKNQVSLTCLVKGFYPSDIAVEWESNGQPENNYKTTPPVLDSDGSFFLYSKLTVDKSRWQQGNVFSCSVMHEALHNHYTQKSLSLSPGK(SEQ ID NO：588).
在另一实施方式中，本发明涉及分离的抗-IL-6抗体，包括选自以下的VH多肽序列：SEQ ID NO：3，18，19，22，38，54，70，86，102，117，118，123，139，155，171，187，203，219，235，251，267，283，299，315，331，347，363，379，395，411，427，443，459，475，491，507，523，539，555和SEQ ID NO：571；并且进一步包括选自以下的VL多肽序列：SEQ ID NO：2，20，21，37，53，69，85，101，119，122，138，154，170，186，202，218，234，250，266，282，298，314，330，346，362，378，394，410，426，442，458，474，490，506，522，538，554和SEQ ID NO：570或其变体，其中在所述VH或VL多肽中一个或多个框架残基(FR残基)已经被另一氨基酸残基取代，产生特异性结合IL-6的抗-IL-6抗体。本发明涉及人源化和嵌合形式的这些抗体。嵌合抗体可以包括衍生自以下的Fc：IgG1，IgG2，IgG3，IgG4，IgG5，IgG6，IgG7，IgG8，IgG9，IgG10，IgG11，IgG12，IgG13，IgG14，IgG15，IgG16，IgG17，IgG18或IgG19恒定区。
在本发明的一个实施方式中，所述抗体或VH或VL多肽源自或选自在本文所述人源化过程开始之前的一种或多种兔B细胞群体。
在本发明的另一实施方式中，抗-IL-6抗体及其片段对人IL-6蛋白的灵长类同源物具有结合特异性。人IL-6蛋白的灵长类同源物的非限制性实例为获自食蟹猴(Macaca fascicularis)(还称为食蟹猴(cynomolgus monkey))和恒河猴(Rhesus monkey)的IL-6。在本发明的另一实施方式中，抗-IL-6抗体及其片段抑制IL-6与IL-6R的结合，和/或IL-6/IL-6R/gpl30复合物的产生和/或IL-6/IL-6R/gpl30多聚体的产生和/或拮抗一种或多种上述的生物学效应。
如本文[0062]段所指出，抗体及其片段可以翻译后修饰以添加效应子部分例如化学连接子，可检测部分例如比如荧光染料，酶，底物，生物发光材料，放射性材料和化学发光部分，或功能性部分例如比如链霉亲和素，亲和素，生物素，细胞毒素，细胞毒性剂和放射性材料。
关于可检测部分，另外的示例性的酶包括但不限于，辣根过氧化物酶、乙酰胆碱酯酶、碱性磷酸酶、β-半乳糖苷酶和萤光素酶。进一步示例性的荧光材料包括但不限于，罗丹明、荧光素、异硫氰酸荧光素、散形酮、二氯三嗪胺(dichlorotriazinylamine)、藻红蛋白和丹磺酰氯。另外的示例性化学发光部分包括但不限于，鲁米诺(luminol)。另外的示例性生物发光部分包括但不限于，萤光素和水母发光蛋白(aequorin)。另外的示例性放射性材料包括但不限于，碘125(125I),碳14(14C),硫35(35S),氚(3H)和磷32(32P)。
关于功能性部分，示例性的细胞毒素剂包括但不限于，甲氨基蝶呤、氨基蝶呤、6-巯基嘌呤、6-硫鸟嘌呤、阿糖胞苷、5-氟尿嘧啶氮烯唑胺(5-fluorouracil decarbazine)；烷化剂例如氮芥、噻替派苯丁酸氮芥(thioepa chlorambucil)、美法仑、卡莫司订(BSNU)、丝裂霉素C、洛莫司汀(CCNU)、1-甲基亚硝基脲、环磷酰胺(cyclothosphamide)、氮芥、白消安、二溴甘露醇、链脲佐菌素、丝裂霉素C、顺铂(II)(cis-dichlorodiamine platinum(II)(DDP))顺铂(cisplatin)和卡波铂(伯尔定(paraplatin))；蒽环类包括柔红霉素(以前的道诺霉素)、阿霉素(亚德里亚霉素)、地托比星(detorubicin)、洋红霉素、伊达比星、表柔比星、米托蒽醌和比生群(bisantrene)；抗生素包括更生霉素(放线菌素D)、博来霉素、加里刹霉素、光神霉素和安曲霉素(AMC)；抗有丝分裂剂(antimytoticagent)例如长春碱(vinca alkaloids)、长春新碱和长春碱(vinblastine)。其它细胞毒性剂包括紫杉醇(paclitaxel)(紫杉醇(taxol))、蓖麻毒、假单胞菌外毒素、吉西他滨、细胞松弛素B、短杆菌肽D、溴化乙锭、依米丁、足叶乙甙、替尼泊苷(tenoposide)、秋水仙素、二羟基炭疽菌素二酮(dihydroxy anthracin dione)、1-去氢睾酮、糖皮质激素、普鲁卡因、丁卡因、利多卡因、普萘洛尔(propranolol)、嘌呤霉素、丙卡巴肼、羟基脲、天冬酰胺酶、皮质类甾醇、米托坦(mytotane)(O,P-(DDD))、干扰素，以及这些细胞毒性剂的混合物。
另外的细胞毒性剂包括但不限于，化疗剂例如卡波铂、顺铂、紫杉醇、吉西他滨、加里刹霉素、阿霉素、5-氟尿嘧啶、丝裂霉素C、放射菌素D、环磷酰胺、长春新碱和博来霉素。来自植物和细菌的毒性酶例如蓖麻毒、白喉毒素和假单胞菌(Pseudomonas)毒素可以缀合至人源化抗体，或其结合片段，以产生细胞类型特异性杀死试剂(Youle,等.,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 77:5483(1980)；Gilliland,等.,Proc.Nat'l Acad.Sci.USA 77:4539(1980)；Krolick,等.,Proc.Nat’l Acad.Sci.USA 77:5419(1980))。
其它细胞毒性剂包括由Goldenberg在美国专利No.6,653,104中所述的细胞毒性核糖核酸酶。本发明的实施方式还涉及放射免疫缀合物，其中使用或不使用复合物形成试剂，使发射α和β粒子的放射性核素稳定地偶合至抗体，或其结合片段。此类放射性核素包括β-发射体例如磷-32(32P),钪-47(47Sc),铜-67(67Cu),镓-67(67Ga),钇-88(88Y),钇-90(90Y),碘-125(125I),碘-131(131I),钐-153(153Sm),镥-177(177Lu),铼-186(186Re)或铼-188(188Re),和α-发射体例如砹-211(211At),铅-212(212Pb),铋-212(212Bi)或铋-213(213Bi)或锕-225(225Ac)。
用于将抗体或其结合片段缀合至可检测部分等的方法在本领域是已知的，例如比如由Hunter等描述的方法，Nature 144:945(1962)；David等,Biochemistry 13:1014(1974)；Pain等,J.Immunol.Meth.40:219(1981)；and Nygren,J.,Histochem.and Cytochem.30:407(1982)。
本文所述的实施方式还包括与以下基本上同源的变体和等效物：本文所示的抗体、抗体片段、双价抗体(diabodies)、SMIP、骆驼抗体(camelbody)、纳米抗体(nanobody)、IgNAR、多肽、可变区和CDR。这些可以包含，例如保守性取代突变(即一个或多个氨基酸被类似的氨基酸取代)。例如，保守性取代是指氨基酸被相同的通用类的另一氨基酸取代，例如一个酸性氨基酸被另一酸性氨基酸、一个碱性氨基酸被另一碱性氨基酸或一个中性氨基酸被另一中性氨基酸取代。保守性氨基酸取代所指的是本领域已知的。
在另一实施方式中，本发明涉及与本文所示的抗体片段、可变区和CDR的多肽序列的任何一种或多种具有至少90％或更高的序列同源性的多肽序列。更优选地，本发明涉及与本文所示的抗体片段、可变区和CDR的多肽序列的任何一种或多种具有至少95％或更高，更优选至少98％或更高，仍更优选至少99％或更高的序列同源性的多肽序列。用于确定核酸和氨基酸序列之间的同源性的方法对本领域技术人员而言是已知的。
在另一实施方式中，本发明进一步涉及仍具有抗-IL-6活性的本文所示的抗体片段、可变区和CDR的上述多肽同源物。抗-IL-6活性的非限制性实例在本文提出，例如在下文的[0731]-[0736]段。
在另一实施方式中,本发明还涉及结合任何上述序列的抗-独特型抗体(anti-idiotypic antibodies)的产生和使用。在示例性的实施方式中，此类抗-独特型抗体可以给药给接受抗-IL-6抗体的受试者以调节、降低或中和抗-IL-6抗体的效应。此类抗-独特型抗体还可以用于治疗特征在于存在抗-IL-6抗体的自体免疫疾病。此类抗-独特型抗体的示例性用途为用于检测本发明的抗-IL-6抗体，例如监视在受试者血液或其它体液中存在的抗-IL-6抗体的水平。
本发明还涉及抗-IL-6抗体，其包括用于取代本文所述的任何其它多核苷酸序列的本文所述的任何多肽或多核苷酸序列。例如，但不限于此，本发明涉及包括本文所述任何可变轻链和可变重链序列的组合的抗体，还涉及由本文所述任何CDR序列取代本文所述任何其他CDR产生的抗体。
本发明另外的示例性实施方式
在另一实施方式中,本发明涉及一种或多种抗-人IL-6抗体或抗体片段，其和与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位特异性地结合，和/或竞争结合在完整人IL-6多肽或其片段上的与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位结合而竞争：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。在优选实施方式中，抗-人IL-6抗体或片段和与Ab1相同的线性或构象表位特异性地结合，和/或竞争结合在完整人IL-6多肽或其片段上的与Ab1相同的线性或构象表位。
在本发明的另一实施方式中，与在被Ab1特异性结合的完整人IL-6多肽或其片段上的相同的线性或构象表位特异性结合的抗-人IL-6抗体，与使用使跨越天然人IL-6多肽的全长的线性肽片段重叠通过表位作图(epitopic mapping)确定的IL-6表位结合。在本发明的一个实施方式中，IL-6表位包括，或作为选择由包含于IL-6片段的一个或多个残基组成，所述IL-6片段选自分别包括以下的那些：氨基酸残基37-51,氨基酸残基70-84,氨基酸残基169-183,氨基酸残基31-45和/或氨基酸残基58-72。
本发明还涉及这样的抗-IL-6抗体，其和与本文公开的抗体或抗体片段相同的IL-6表位结合，和/或与用于结合IL-6的抗-IL-6抗体竞争，包括但不限于选自以下的抗-IL-6抗体：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
在另一实施方式中,本发明还涉及分离的抗-IL-6抗体或抗体片段，其包括在选自以下的VH多肽序列中包含的一种或多种CDR：SEQ IDNO:3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555和SEQID NO:571和/或在以下的VL多肽序列中包含的一种或多种CDR：2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570。
在本发明的一个实施方式中，在上两段中讨论的抗-人IL-6抗体包括在各可变轻链区和可变重链区中的至少2个互补决定区(CDR)，其中所述的可变轻链区和可变重链区与在选自以下的抗-人IL-6抗体中包含的那些相同：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
在优选实施方式中，上述讨论的抗-人IL-6抗体包括在每一可变轻链和可变重链区中的至少2个互补决定区(CDR)，其中所述的可变轻链区和可变重链区与在Ab1中包含的那些相同：。在另一实施方式中，上述讨论的抗-人IL-6抗体的所有CDR与在选自以下的抗-人IL-6抗体中包含的CDR相同：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。在本发明的优选实施方式中上述讨论的抗-人IL-6抗体的所有CDR与在Ab1中包含的CDR相同。
本发明还涉及上述讨论的抗-人IL-6抗体的一种或多种为非糖基化的(aglycosylated)；其包含已经修饰以改变效应子功能、半衰期、蛋白质水解和/或糖基化的Fc区域；为人、人源化、单链或嵌合的；为衍生自兔(亲本)抗-人IL-6抗体的人源化抗体。
本发明还涉及一种或多种抗-人IL-6抗体，其中在所述抗体的可变轻链区和可变重链区中的框架区(FR)分别为人FR，其未被修饰或已经通过将可变轻链区或重链区中的最多2或3个人FR残基用亲本兔抗体的相应FR残基取代而修饰，并且其中所述人FR衍生自人可变重链和轻链抗体序列，其基于它们与相应的兔可变重链或轻链区的高水平同源性(相对于在文库中包含的其它人种系抗体(germline antibody)序列)，选自人种系抗体序列的文库。
在本发明的一个实施方式中，抗-人IL-6抗体或片段特异性地与表达IL-6的人细胞和/或体内循环性可溶性IL-6分子结合，包括在患有与表达IL-6的细胞相关的疾病的患者中的人类细胞上表达或由所述人类细胞表达的IL-6。
在另一实施方式中，疾病选自四肢无力、运动性疲劳、癌症相关性疲劳、炎症疾病相关性疲劳、慢性疲劳综合症、癌症相关性恶病质、心脏相关性恶病质(cardiac-related cachexia)、呼吸性相关性恶病质(respiratory-related cachexia)、肾相关性恶病质、年龄相关性恶病质(age-related cachexia)、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、系统性幼年特发性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节病、强直性脊柱炎、炎性肠病(IBD)、风湿性多肌痛、巨细胞性动脉炎、自体免疫性血管炎、移植物抗宿主病(GVHD)、舍格伦综合症(Sjogren'ssyndrome)、成人型史笛儿氏症(adult onset Still's disease)、类风湿性关节炎、系统性幼年特发性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、骨骼柏杰氏疾病(Paget's disease of bone)、骨关节炎、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、白血病、肾细胞癌、多中心性巨大淋巴结增生症(multicentric Castleman's disease)、卵巢癌、癌症化疗中的药物抗性、癌症化疗毒性、缺血性心脏病、动脉粥样硬化、肥胖症、糖尿病、哮喘、多发性硬化、阿尔茨海默病、脑血管疾病、发烧、急性期反应、过敏、贫血、炎症性贫血(慢性病贫血)、高血压、抑郁症、慢性疾病相关抑郁症、血栓形成、血小板增多症、急性心力衰竭、代谢综合症、流产、肥胖症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎性疾病、再灌注损伤、移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)、禽流感、天花、大流行性感冒、成人呼吸窘迫综合症(ARDS)、严重急性呼吸道综合症(SARS)、败血症和全身炎症反应综合症(SIRS)。在优选实施方式中，疾病选自癌症、炎症疾病、病毒性疾病或自体免疫疾病。在特别优选的实施方式中，疾病为哮喘、恶病质和消耗综合症。
本发明进一步涉及直接或间接与可检测标记或治疗剂连接的抗-人IL-6抗体或片段。
本发明还涉及一种或多种核酸序列，其导致上述所示的抗-人IL-6抗体或抗体片段的表达，包括包含或作为选择由酵母或人类的优选密码子组成的那些。本发明还涉及包括所述核酸序列的载体(包括质粒或重组病毒载体)。本发明还涉及表达以上所示至少一种抗体的宿主细胞或重组宿主细胞，包括哺乳动物、酵母、细菌和昆虫细胞。在优选实施方式中，宿主细胞为酵母细胞。在进一步优选的实施方式中，酵母细胞为二倍体酵母细胞。在更优选的实施方式中，酵母细胞为毕赤(Pichia)酵母。
本发明还涉及治疗方法，包括给药给患有与IL-6表达细胞相关的疾病或状况的患者以治疗有效量的至少一种抗-人IL-6抗体或片段。可以治疗的疾病在以上提出的非限制性名单中提出。在优选实施方式中，疾病选自癌症、自体免疫疾病或炎症性疾病。在特别优选的实施方式中，疾病为癌症或病毒感染。在另一实施方式中治疗还包括给药另一治疗剂或选自化疗、放疗、细胞因子给药或基因治疗的方案。
本发明还涉及体内成像的方法，其检测表达IL-6的细胞的存在，包括给药诊断有效量的至少一种抗-人IL-6抗体。在一个实施方式中，所述给药进一步包括给药促进在表达IL-6的疾病部位处检测抗体的放射性核素或荧光团。在本发明的另一实施方式中，体内成像方法用于检测表达IL-6的肿瘤或转移瘤，或用于检测与IL-6表达细胞有关的自体免疫疾病的位置的存在。在进一步的实施方式中，所述体内成像方法的结果用于促进合适的治疗方案的设计，包括包含放疗、化疗或其组合的治疗方案。
编码抗-IL-6抗体多肽的多核苷酸
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：2的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCGGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCGTCCCAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTT(SEQ ID NO:10)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：3的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACGTGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAATCATTTATGGTAGTGATGAAACGGCCTACGCGACCTGGGCGATAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCAAAATTTAACTTGTGGGGCCAAGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGG(SEQ ID NO:11).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：12；SEQ ID NO：13；和SEQ ID NO：14的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：12；SEQ ID NO：13；和SEQ ID NO：14对应于编码SEQ ID NO：2的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：15；SEQ ID NO：16；和SEQ ID NO：17的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：15；SEQ ID NO：16；和SEQ ID NO：17对应于编码SEQ ID NO：3的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：2的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：10；编码SEQ ID NO：3的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：11；编码SEQ IDNO：10的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：12；SEQ ID NO：13；和SEQ ID NO：14)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：11的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：15；SEQ ID NO：16；和SEQ ID-NO：17)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：21的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGACCATTTACAGTTGGTTATCCTGGTATCAGCAGAAGCCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACCAGGCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGATTCAGCGGCAGTGGGGCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTGGTAGTAATGTTGATAATGTTTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAG(SEQ ID NO:29)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：22的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGGAGCAGCTGAAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTTACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATGACCATGCAATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATACATCGGATTCATTAATAGTGGTGGTAGCGCACGCTACGCGAGCTGGGCAGAAGGCCGATTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGTCAGAGGGGGTGCTGTTTGGAGTATTCATAGTTTTGATCCCTGGGGCCCAGGGACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAG(SEQ ID NO:30).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：31；SEQ ID NO：32；和SEQ ID NO：33的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：31；SEQ ID NO：32；和SEQ ID NO：33对应于编码SEQ ID NO：21的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：34；SEQ ID NO：35；和SEQ ID NO：36的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：34；SEQ ID NO：35；和SEQ ID NO：36对应于编码SEQ ID NO：22的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：21的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：29；编码SEQ ID NO：22的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：30；编码SEQ IDNO：29的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：31；SEQ ID NO：32；和SEQ ID NO：33)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：30的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：34；SEQ ID NO：35；和SEQ ID NO：36)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：37的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTG-GCTCCCAGGTGCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGACAACAACTACTTATCCTGGTTTCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCGTGGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACAGACGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGCGTTTATGATGATGATAGTGATAATGCCTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCT(SEQ ID NO:45)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：38的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTGGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACCCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTGTCTACTACATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGATTCATTACAATGAGTGATAATATAAATTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTACAATGGGTCGGTTGGATCTCTGGGGCCCAGGCACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGG(SEQ ID NO:46).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；和SEQ ID NO:49的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO:47；SEQ ID NO:48；和SEQ ID NO:49对应于编码SEQ ID NO:37的轻链可变序列的互补决定区(CDR,或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51；和SEQ ID NO:52的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO:50；SEQ ID NO:51；和SEQ ID NO:52对应于编码SEQ ID NO:38的重链可变序列的互补决定区(CDR,或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO:37的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO:45；编码SEQ ID NO:38的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO:46；编码SEQ IDNO:37的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO:47；SEQ ID NO:48；和SEQ ID NO:49)的多核苷酸；和编码SEQ ID NO:38的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO:50；SEQ ID NO:51；和SEQ ID NO:52)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO:53的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCATATGTGACCCTGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTATCTGCACCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGAGAACAACTATTTATCCTGGTTTCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCACTCTGGATTCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATTACAGACGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGCGTTTATGATGATGATAGTGATGATGCCTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTT(SEQ ID NO:61)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：54的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTGGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGGAGCAGCTGAAGGAGTCCGGAGGAGGCCTGGTAACGCCTGGAGGAACCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATGCCTACTACATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGATTCATTACTCTGAATAATAATGTAGCTTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCTTCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACACCCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTGCAATGGGTCGGTTGGATCTCTGGGGCCATGGCACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGG(SEQ ID NO:62).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：64；和SEQ ID NO：65的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：63；SEQ ID NO：64；和SEQ ID NO：65对应于编码SEQ ID NO：53的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：66；SEQ ID NO：67；和SEQ ID NO：68的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：66；SEQ ID NO：67；和SEQ ID NO：68对应于编码SEQ ID NO：54的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：53的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：61；编码SEQ ID NO：54的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：62；编码SEQ IDNO：53的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：63；SEQ ID NO：64；和SEQ ID NO：65)的多核苷酸；和编码SEQ ID NO：54的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：66；SEQ ID NO：67；和SEQ ID NO：68)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：69的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCCCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCGCCTGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAACTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTGATGATAACAACTGGTTAGGCTGGTATCAGCAGAAACGAGGGCAGCCTCCCAAGTACCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGGTTTTAGTGGTAATATCTTTGCTTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCT(SEQ ID NO:77)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：70的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGCTTCTCCCTCAGTAGCTATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGAAAGGGGCTGGAGTGGATCGGAATCATTGGTGGTTTTGGTACCACATACTACGCGACCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAGAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGTGGTCCTGGTAATGGTGGTGACATCTGGGGCCAAGGGACCCTGGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACT(SEQ ID NO:78).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：79；SEQ ID NO：80；和SEQ ID NO：81的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：79；SEQ ID NO：80；和SEQ ID NO：81对应于编码SEQ ID NO：69的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：82；SEQ ID NO：83；和SEQ ID NO：84的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：82；SEQ ID NO：83；和SEQ ID NO：84对应于编码SEQ ID NO：70的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：69的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：77；编码SEQ ID NO：70的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：78；编码SEQ IDNO：69的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：79；SEQ ID NO：80；和SEQ ID NO：81)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：70的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：82；SEQ ID NO：83；和SEQ ID NO：84)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：85的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCGCCCGTGTCTGTACCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAATTTCTTATCGTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACCAGGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCAGATAGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTC(SEQ ID NO:93)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：86的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACGCTCACCTGCACAGTCTCTGGAATCGACCTCAGTGACTATGCAATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAATCATTTATGCTGGTAGTGGTAGCACATGGTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGGATACGATGACTATGGTGATTTCGATCGATTGGATCTCTGGGGCCCAGGCACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACT(SEQ ID NO:94).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：95；SEQ ID NO：96；和SEQ ID NO：97的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：95；SEQ ID NO：96；和SEQ ID NO：97对应于编码SEQ ID NO：85的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：98；SEQ ID NO：99；和SEQ ID NO：100的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQID NO：98；SEQ ID NO：99；和SEQ ID NO：100对应于编码SEQ IDNO：86的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：85的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：93；编码SEQ ID NO：86的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：94；编码SEQ IDNO：85的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：95；SEQ ID NO：96；和SEQ ID NO：97)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：86的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：98；SEQ ID NO：99；和SEQ ID NO：100)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：101的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCGGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAATGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAACAATGAATTATCCTGGTATCAGCAGAAATCAGGGCAGCGTCCCAAGCTCCTGATCTATAGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTCTGAGGAATATTGATAATGCTTTCGGCGGAGGGACCGAGGTGGTGGTCAAACGTACGGTAGCGGCCCCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTC(SEQ ID NO:109)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：102的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCTCAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAACTACTACATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAATGATTTATGGTAGTGATGAAACAGCCTACGCGAACTGGGCGATAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGATAGTAGTGACTGGGATGCAAAATTTAACTTGTGGGGCCAAGGGACCCTCGTCACCGTCTCGAGCGCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGG(SEQ ID NO:110).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：111；SEQ ID NO：112；和SEQ ID NO：113的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：111；SEQ ID NO：112；和SEQ ID NO：113对应于编码SEQ ID NO：101的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：115；和SEQ ID NO：116的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：115；和SEQ ID NO：116对应于编码SEQ ID NO：102的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：101的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：109；编码SEQ ID NO：102的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：110；编码SEQ ID NO：101的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：111；SEQ IDNO：112；和SEQ ID NO：113)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：102的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：114；SEQ ID NO：115；和SEQID NO：116)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：122的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCACCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTGGTAATAACCAGGACTTATCCTGGTTTCAGCAGAGACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACGAAATATCCAAACTGGAATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACACTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTACAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCT(SEQ ID NO:130)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：123的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCACTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGTCGTACAATGTCCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGATACATTTGGAGTGGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGATTGGGCGATACTGGTGGTCACGCTTATGCTACTCGCTTAAATCTC(SEQ ID NO:131).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：132；SEQ ID NO：133；和SEQ ID NO：134的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO:132；SEQ ID NO:133；和SEQ ID NO:134对应于编码SEQ ID NO:122的轻链可变序列的互补决定区(CDR,或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO:135；SEQ ID NO:136；和SEQ ID NO:137的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO:135；SEQ ID NO:136；和SEQ ID NO:137对应于编码SEQ ID NO:123的重链可变序列的互补决定区(CDR,或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO:122的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO:130；编码SEQ ID NO:123的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO:131；编码SEQ ID NO:122的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO:132；SEQ IDNO:133；和SEQ ID NO:134)的多核苷酸；编码SEQ ID NO:123的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO:135；SEQ ID NO:136；和SEQID NO:137)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO:138的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCGTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAGTAATAAGTACCTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACTGGACATCCAAACTGGCATCTGGGGCCCCATCACGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAATTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGCTTATGATGATGATGCTGATAATGCT(SEQ ID NO:146)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：139的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAAGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCAAGCCTGACGAAACCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTGGAGGGCGGCTACATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAATCAGTTATGATAGTGGTAGCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAGACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGCGTCAGATCACTAAAATATCCTACTGTTACTTCTGATGACTTG(SEQ ID NO:147).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：148；SEQ ID NO：149；和SEQ ID NO：150的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：148；SEQ ID NO：149；和SEQ ID NO：150对应于编码SEQ ID NO：138的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：151；SEQ ID NO：152；和SEQ ID NO：153的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：151；SEQ ID NO：152；和SEQ ID NO：153对应于编码SEQ ID NO：139的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：138的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：146；编码SEQ ID NO：139的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：147；编码SEQ ID NO：138的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：148；SEQ IDNO：149；和SEQ ID NO：150)的多核苷酸；和编码SEQ ID NO：139的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：151；SEQ ID NO：152；和SEQ ID NO：153)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：154的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCACCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAATAACGACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCTAAACTCCTGATCTATTATGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCGCTTACTACTGTCTAGGCGGTTATGATGATGATGCTGATAATGCT(SEQ ID NO:162)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：155的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTATCTGGATTATCCCTCAGTAGCAATACAATAAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGATACATTTGGAGTGGTGGTAGTACATACTACGCGAGCTGGGTGAATGGTCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGGGGTTACGCTAGTGGTGGTTATCCTTATGCCACTCGGTTGGATCTC(SEQ ID NO:163).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：165；和SEQ ID NO：166的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：164；SEQ ID NO：165；和SEQ ID NO：166对应于编码SEQ ID NO：154的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：167；SEQ ID NO：168；和SEQ ID NO：169的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：167；SEQ ID NO：168；和SEQ ID NO：169对应于编码SEQ ID NO：155的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：154的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：162；编码SEQ ID NO：155的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：163；编码SEQ ID NO：154的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：164；SEQ IDNO：165；和SEQ ID NO：166)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：155的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：167；SEQ ID NO：168；和SEQID NO：169)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：170的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAACGACTACTTATCCTGGTATCAACAGAGGCCAGGGCAACGTCCCAAGCTCCTAATCTATGGTGCTTCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCGTCACGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGAAACAGTTTACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTGGGCGATTATGATGATGATGCTGATAATACT(SEQ ID NO:178)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：171的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACTTGCACAGTCTCTGGATTCACCCTCAGTACCAACTACTACCTGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTAGAATGGATCGGAATCATTTATCCTAGTGGTAACACATATTGCGCGAAGTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACCGAGGACACAGCCACGTATTTCTGTGCCAGAAATTATGGTGGTGATGAAAGTTTG(SEQ ID NO:179).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：180；SEQ ID NO：181；和SEQ ID NO：182的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：180；SEQ ID NO：181；和SEQ ID NO：182对应于编码SEQ ID NO：170的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：184；和SEQ ID NO：185的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：184；和SEQ ID NO：185对应于编码SEQ ID NO：171的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：170的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：178；编码SEQ ID NO：171的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：179；编码SEQ ID NO：170的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：180；SEQ IDNO：181；和SEQ ID NO：182)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：171的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：183；SEQ ID NO：184；和SEQID NO：185)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：186的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGACCATTGGCAATGCATTAGCCTGGTATCAGCAGAAATCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAAGGCATCCAAACTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAATGGTGTTATTTTGGTGATAGTGTT(SEQ ID NO:194)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：187的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCACTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGGAGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCCTGGTCCAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCGACTTCAGTAGCGGCTACTACATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCGTGTATTTTCACTATTACTACTAACACTTACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAGACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATCTCTGTGCGAGAGGGATTTATTCTGATAATAATTATTATGCCTTG(SEQ ID NO:195).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：196；SEQ ID NO：197；和SEQ ID NO：198的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：196；SEQ ID NO：197；和SEQ ID NO：198对应于编码SEQ ID NO：186的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：198；SEQ ID NO：200；和SEQ ID NO：201的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：199；SEQ ID NO：200；和SEQ ID NO：201对应于编码SEQ ID NO：187的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：186的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：194；编码SEQ ID NO：187的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：195；编码SEQ ID NO：186的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：196；SEQ IDNO：197；和SEQ ID NO：198)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：187的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：199；SEQ ID NO：200；和SEQID NO：201)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：202的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGAGCATTGGCAATGCATTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAAGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGCCGATGCTGCCGCTTACTACTGTCAATGGTGTTATTTTGGTGATAGTGTT(SEQ ID NO:210)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：203的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGCAGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGGCCTGGTCAAGCCGGGGGCATCCCTGACACTCACCTGCAAAGCCTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCGGCTACTACATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTCGATCGCATGCATTTTTACTATTACTGATAACACTTACTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAGCCCTCGTCGCCCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGGGGGATTTATTCTACTGATAATTATTATGCCTTG(SEQ ID NO:211).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：212；SEQ ID NO：213；和SEQ ID NO：214的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：212；SEQ ID NO：213；和SEQ ID NO：214对应于编码SEQ ID NO：202的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：216；和SEQ ID NO：217的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：216；和SEQ ID NO：217对应于编码SEQ ID NO：203的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：202的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：210；编码SEQ ID NO：203的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：211；编码SEQ ID NO：202的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：212；SEQ IDNO：213；和SEQ ID NO：214)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：203的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：215；SEQ ID NO：216；和SEQID NO：217)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：218的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCGTTAGTAGCTACTTAAACTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAGGGCATCCACTCTGGAATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAATGTACTTATGGTACTAGTAGTAGTTATGGTGCTGCT(SEQ ID NO:226)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：219的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACCGTCTCTGGTATCTCCCTCAGTAGCAATGCAATAAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAATCATTAGTTATAGTGGTACCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACTAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTACTTCTGTGCCAGAGATGACCCTACGACAGTTATGGTTATGTTGATACCTTTTGGAGCCGGCATGGACCTC(SEQ ID NO：227).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：228；SEQ ID NO：229；和SEQ ID NO：230的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：228；SEQ ID NO：229；和SEQ ID NO：230对应于编码SEQ ID NO：218的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：231；SEQ ID NO：232；和SEQ ID NO：233的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：231；SEQ ID NO：232；和SEQ ID NO：233对应于编码SEQ ID NO：219的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：218的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：226；编码SEQ ID NO：219的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：227；编码SEQ ID NO：218的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：228；SEQ IDNO：229；和SEQ ID NO：230)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：219的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：231；SEQ ID NO：232；和SEQID NO：233)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：234的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCCCAAGTGCTGACCCAGACTGCATCGCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAACTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAAGAACAACTACTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAAGGCCTGATCTATTCTGCATCGACTCTAGATTCTGGGGTCCCATTGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCAGTTATGATTGTAGTAGTGGTGATTGTTATGCT(SEQ ID NO：242)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：235的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCTACTGGATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGCATTGTTACTGGTAATGGTAACACTTACTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTTTGTGCGAAAGCCTATGACTTG(SEQ ID NO：243).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：245；和SEQ ID NO：246的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：244；SEQ ID NO：245；和SEQ ID NO：246对应于编码SEQ ID NO：234的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：247；SEQ ID NO：248；和SEQ ID NO：249的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：247；SEQ ID NO：248；和SEQ ID NO：249对应于编码SEQ ID NO：235的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：234的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：242；编码SEQ ID NO：235的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：243；编码SEQ ID NO：234的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：244；SEQ IDNO：245；和SEQ ID NO：246)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：235的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：247；SEQ ID NO：248；和SEQID NO：249)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：250的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTTCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATGACAACAACTATTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGACAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCACGGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACAGACGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGCGTTTTTAATGATGATAGTGATGATGCC(SEQ ID NO：258)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：251的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCCCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACACTCTCTGGATTCTCCCTCAGTGCATACTATATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGATTCATTACTCTGAGTGATCATATATCTTACGCGAGGTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGAGTCGTGGCTGGGGTGCAATGGGTCGGTTGGATCTC(SEQ ID NO：259).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：260；SEQ ID NO：261；和SEQ ID NO：262的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：260；SEQ ID NO：261；和SEQ ID NO：262对应于编码SEQ ID NO：250的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：264；和SEQ ID NO：265的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：264；和SEQ ID NO：265对应于编码SEQ ID NO：251的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：250的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：258；编码SEQ ID NO：251的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：259；编码SEQ ID NO：250的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：260；SEQ IDNO：261；和SEQ ID NO：262)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：251的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：263；SEQ ID NO：264；和SEQID NO：265)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：266的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTCGCAGCCGTGCTGACCCAGACACCATCGCCCGTGTCTGCGGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAACAACAAAAATTTAGCCTGGTATCAGCAGAAATCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACTGGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCGTCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGTTTTTGATGATGATGCTGATAATGCT(SEQ ID NO：274)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：267的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAATGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTCCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATATATCGGAGTCATTGGTACTAGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGCTCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGTCAGGAGTCTTTCTTCTATTACTTTCTTG(SEQID NO：275).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：276；SEQ ID NO：277；和SEQ ID NO：278的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：276；SEQ ID NO：277；和SEQ ID NO：278对应于编码SEQ ID NO：266的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：279；SEQ ID NO：280；和SEQ ID NO：281的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：279；SEQ ID NO：280；和SEQ ID NO：281对应于编码SEQ ID NO：267的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：266的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：274；编码SEQ ID NO：267的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：275；编码SEQ ID NO：266的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：276；SEQ IDNO：277；和SEQ ID NO：278)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：267的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：279；SEQ ID NO：280；和SEQID NO：281)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：282的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCATTCGAATTGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTCAGAACATTTATAGATACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGTTCCTGATCTATCTGGCATCTACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTTAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAAGTTATTATAGTAGTAATAGTGTCGCT(SEQ IDNO：290)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：283的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGGAGCAGCTGGTGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCCAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACCTGCACAGCTTCTGAGTTAGACTTCAGTAGCGGCTACTGGATATGCTGGGTCCGCCAGGTTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGGATGCATTTATACTGGTAGTAGTGGTAGCACTTTTTACGCGAGTTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGAGGTTATAGTGGCTTTGGTTACTTTAAGTTG(SEQ ID NO：291).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：292；SEQ ID NO：293；和SEQ ID NO：294的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：292；SEQ ID NO：293；和SEQ ID NO：294对应于编码SEQ ID NO：282的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：296；和SEQ ID NO：297的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：296；和SEQ ID NO：297对应于编码SEQ ID NO：283的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：282的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：290；编码SEQ ID NO：283的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：291；编码SEQ ID NO：282的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：292；SEQ IDNO：293；和SEQ ID NO：294)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：283的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：295；SEQ ID NO：296；和SEQID NO：297)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：298的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGACATTTATAGGTTATTGGCCTGGTATCAACAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGATTCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCGCCATCAGCGGTGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGCTTGGAGTTATAGTGATATTGATAATGCT(SEQ ID NO：306)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：299的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCGGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAATCATTACTACTAGTGGTAATACATTTTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGGCTCACCATCTCCAGAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAACTTCTGATATTTTTTATTATCGTAACTTG(SEQ ID NO：307).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：308；SEQ ID NO：309；和SEQ ID NO：310的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：308；SEQ ID NO：309；和SEQ ID NO：310对应于编码SEQ ID NO：298的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：311；SEQ ID NO：312；和SEQ ID NO：313的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：311；SEQ ID NO：312；和SEQ ID NO：313对应于编码SEQ ID NO：299的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：298的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：306；编码SEQ ID NO：299的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：307；编码SEQ ID NO：298的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：308；SEQ IDNO：309；和SEQ ID NO：310)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：299的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：311；SEQ ID NO：312；和SEQID NO：313)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：314的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACGTTTGCAGCCGTGCTGACCCAGACTGCATCACCCGTGTCTGCCGCTGTGGGAGCCACAGTCACCATCAACTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATGACATGGACTTAGCCTGGTTTCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCTAGGCGCTTTTGATGATGATGCTGATAATACT(SEQ ID NO：322)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：315的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCACTAGGCATGCAATAACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGATGCATTTGGAGTGGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTCAGAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTACTTCTGTGCCAGAGTCATTGGCGATACTGCTGGTTATGCTTATTTTACGGGGCTTGACTTG(SEQ ID NO：323).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：325；和SEQ ID NO：326的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：324；SEQ ID NO：325；和SEQ ID NO：326对应于编码SEQ ID NO：314的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：327；SEQ ID NO：328；和SEQ ID NO：329的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：327；SEQ ID NO：328；和SEQ ID NO：329对应于编码SEQ ID NO：315的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：314的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：322；编码SEQ ID NO：315的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：323；编码SEQ ID NO：314的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：324；SEQ IDNO：325；和SEQ ID NO：326)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：315的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：327；SEQ ID NO：328；和SEQID NO：329)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：330的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAATTGGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATACTGCATCCAGTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAGTGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATACTAGTGATGTTGATAATGTT(SEQID NO：338)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：331的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGGCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGAATCGACCTCAGTAGCTATGCAATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATACATCGGAATCATTAGTAGTAGTGGTAGCACATACTACGCGACCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCACAAGCCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAAATTACCAGTCCGACAACCGAGGACTCGGCCACATATTTCTGTGCCAGAGGGGGTGCTGGTAGTGGTGGTGTTTGGCTGCTTGATGGTTTTGATCCC(SEQ ID NO：339).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：340；SEQ ID NO：341；和SEQ ID NO：342的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：340；SEQ ID NO：341；和SEQ ID NO：342对应于编码SEQ ID NO：330的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：344；和SEQ ID NO：345的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：344；和SEQ ID NO：345对应于编码SEQ ID NO：331的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：330的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：338；编码SEQ ID NO：331的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：339；编码SEQ ID NO：330的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：340；SEQ IDNO：341；和SEQ ID NO：342)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：331的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：343；SEQ ID NO：344；和SEQID NO：345)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：346的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAAATGTGCCGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAACATTTATAATTGGTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATACTGTAGGCGATCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTATTGTCAACAGGGTTATAGTAGTAGTTATGTTGATAATGTT(SEQ ID NO：354)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：347的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGGAGCAGCTGAAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAATGACTATGCAGTGGGCTGGTTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGATACATTCGTAGTAGTGGTACCACAGCCTACGCGACCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCGCTACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGGGGTGCTGGTAGTAGTGGTGTGTGGATCCTTGATGGTTTTGCTCCC(SEQ ID NO：355).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：356；SEQ ID NO：357；和SEQ ID NO：358的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：356；SEQ ID NO：357；和SEQ ID NO：358对应于编码SEQ ID NO：346的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：359；SEQ ID NO：360；和SEQ ID NO：361的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：359；SEQ ID NO：360；和SEQ ID NO：361对应于编码SEQ ID NO：347的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：346的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：354；编码SEQ ID NO：347的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：355；编码SEQ ID NO：346的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：356；SEQ IDNO：357；和SEQ ID NO：358)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：347的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：359；SEQ ID NO：360；和SEQID NO：361)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：362的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCTCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATCAGAACAACTACTTATCCTGGTTTCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCGGCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGCTTATAGGGATGTGGATTCT(SEQID NO：370)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：363的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGGGGCATCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCTTTACTAGTACCTACTACATCTACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGTATTGATGCTGGTAGTAGTGGTAGCACTTACTACGCGACCTGGGTGAATGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAAATGGGATTATGGTGGTAATGTTGGTTGGGGTTATGACTTG(SEQ ID NO：371).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：372；SEQ ID NO：373；和SEQ ID NO：374的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：372；SEQ ID NO：373；和SEQ ID NO：374对应于编码SEQ ID NO：362的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：376；和SEQ ID NO：377的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：376；和SEQ ID NO：377对应于编码SEQ ID NO：363的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：362的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：370；编码SEQ ID NO：363的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：371；编码SEQ ID NO：362的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：372；SEQ IDNO：373；和SEQ ID NO：374)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：363的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：375；SEQ ID NO：376；和SEQID NO：377)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：378的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCATTCGAATTGACCCAGACTCCATCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTCAGAGCATTAGTAGTTACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGTTCCTGATCTACAGGGCGTCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGATTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAAGCTATTATGATAGTGTTTCAAATCCT(SEQ IDNO：386)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：379的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGAGGGATCCCTGACACTCACCTGCAAAGCCTCTGGACTCGACCTCGGTACCTACTGGTTCATGTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCTTGTATTTATACTGGTAGTAGTGGTTCCACTTTCTACGCGAGCTGGGTGAATGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACTCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACTTATTTTTGTGCGAGAGGTTATAGTGGTTATGGTTATTTTAAGTTG(SEQ ID NO：387).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：388；SEQ ID NO：389；和SEQ ID NO：390的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：388；SEQ ID NO：389；和SEQ ID NO：390对应于编码SEQ ID NO：378的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：391；SEQ ID NO：392；和SEQ ID NO：393的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：391；SEQ ID NO：392；和SEQ ID NO：393对应于编码SEQ ID NO：379的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：378的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：386；编码SEQ ID NO：379的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：387；编码SEQ ID NO：378的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：388；SEQ IDNO：389；和SEQ ID NO：390)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：379的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：391；SEQ ID NO：392；和SEQID NO：393)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：394的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGTCACATTTGCCATCGAAATGACCCAGAGTCCATTCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGGCCAGTCAGAGTGTTTATAAGAACAACCAATTATCCTGGTATCAGCAGAAATCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCGGCTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTGCAGGCGCTATTACTGGTAGTATTGATACGGATGGT(SEQ ID NO：402)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：395的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGTTGGAGGAGTCCGGGGGAGACCTGGTCAAGCCTGGGGCATCCCTGACACTCACCTGCACAACTTCTGGATTCTCCTTCAGTAGCAGCTACTTCATTTGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAGTGGATCGCATGCATTTATGGTGGTGATGGCAGCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGACGCTGCAAATGACCAGTCTGACAGCCGCGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCGAGAGAATGGGCATATAGTCAAGGTTATTTTGGTGCTTTTGATCTC(SEQ ID NO：403).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：404；SEQ ID NO：405；和SEQ ID NO：406的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：404；SEQ ID NO：405；和SEQ ID NO：406对应于编码SEQ ID NO：394的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：407；SEQ ID NO：408；和SEQ ID NO：409的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：407；SEQ ID NO：408；和SEQ ID NO：409对应于编码SEQ ID NO：395的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：394的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：402；编码SEQ ID NO：395的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：403；编码SEQ ID NO：394的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：404；SEQ IDNO：405；和SEQ ID NO：406)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：395的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：407；SEQ ID NO：408；和SEQID NO：409)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：410的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGGAGGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGATATTAGTAGCTACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGCTGCATCCAATCTGGAATCTGGGGTCTCATCGCGATTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTACACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACCTATTACTGTCAATGTACTTATGGTACTATTTCTATTAGTGATGGTAATGCT(SEQ ID NO：418)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：411的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAATGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTTCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATACATCGGATTCATTAATCCTGGTGGTAGCGCTTACTACGCGAGCTGGGTGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAGTCCTCGACCACGGTAGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGGTTCTGATTGTTTCTTATGGAGCCTTTACCATC(SEQ ID NO：419).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：420；SEQ ID NO：421；和SEQ ID NO：422的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：420；SEQ ID NO：421；和SEQ ID NO：422对应于编码SEQ ID NO：410的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：423；SEQ ID NO：424；和SEQ ID NO：425的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：423；SEQ ID NO：424；和SEQ ID NO：425对应于编码SEQ ID NO：411的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：410的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：418；编码SEQ ID NO：411的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：419；编码SEQ ID NO：410的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：420；SEQ IDNO：421；和SEQ ID NO：422)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：411的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：423；SEQ ID NO：424；和SEQID NO：425)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：426的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGATGTTGTGATGACCCAGACTCCAGCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCAGTGAGGACATTGAAAGCTATCTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAATCTGGAATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACAGAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGCCGATGCTGCCACTTACTATTGTCAATGCACTTATGGTATTATTAGTATTAGTGATGGTAATGCT(SEQ ID NO：434)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：427的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTGTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTTCATGACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATACATCGGATTCATGAATACTGGTGATAACGCATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGGTTCTTGTTGTTGCTTATGGAGCCTTTAACATC(SEQ ID NO：435).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：436；SEQ ID NO：437；和SEQ ID NO：438的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：436；SEQ ID NO：437；和SEQ ID NO：438对应于编码SEQ ID NO：426的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：439；SEQ ID NO：440；和SEQ ID NO：441的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：439；SEQ ID NO：440；和SEQ ID NO：441对应于编码SEQ ID NO：427的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：426的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：434；编码SEQ ID NO：427的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：435；编码SEQ ID NO：426的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：436；SEQ IDNO：437；和SEQ ID NO：438)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：427的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：439；SEQ ID NO：440；和SEQID NO：441)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：442的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGAACCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGTCCAGTAAGAGTGTTATGAATAACAACTACTTAGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATGGTGCATCCAATCTGGCATCTGGGGTCCCATCACGGTTCAGCGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAGGCGGTTATACTGGTTATAGTGATCATGGGACT(SEQ ID NO：450)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：443的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCAAGCCTGACGAAACCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGAATCGACCTCAGTAGCTATCCAATGAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGATTCATTAATACTGGTGGTACCATAGTCTACGCGAGCTGGGCAAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGCAGTTATGTTTCATCTGGTTATGCCTACTATTTTAATGTC(SEQ ID NO：451).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：452；SEQ ID NO：453；和SEQ ID NO：454的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：452；SEQ ID NO：453；和SEQ ID NO：454对应于编码SEQ ID NO：442的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：455；SEQ ID NO：456；和SEQ ID NO：457的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：455；SEQ ID NO：456；和SEQ ID NO：457对应于编码SEQ ID NO：443的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：442的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：450；编码SEQ ID NO：443的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：451；编码SEQ ID NO：442的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：452；SEQ IDNO：453；和SEQ ID NO：454)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：443的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：455；SEQ ID NO：456；和SEQID NO：457)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：458的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCCGCCGTGCTGACCCAGACTCCATCTCCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCAGCATCAGTTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAACAACTGGTTATCCTGGTTTCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAAGGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACGTGCAGTGTGACGATGTTGCCACTTACTACTGTGCGGGCGGTTATCTTGATAGTGTTATT(SEQ IDNO：466)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：459的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTACCTATTCAATAAACTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGCCTGGAATGGATCGGAATCATTGCTAATAGTGGTACCACATTCTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCGTCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGAGAGTGGAATGTACAATGAATATGGTAAATTTAACATC(SEQ ID NO：467).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：468；SEQ ID NO：469；和SEQ ID NO：470的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：468；SEQ ID NO：469；和SEQ ID NO：470对应于编码SEQ ID NO：458的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：471；SEQ ID NO：472；和SEQ ID NO：473的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：471；SEQ ID NO：472；和SEQ ID NO：473对应于编码SEQ ID NO：459的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：458的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：466；编码SEQ ID NO：459的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：467；编码SEQ ID NO：458的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：468；SEQ IDNO：469；和SEQ ID NO：470)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：459的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：471；SEQ ID NO：472；和SEQID NO：473)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：474的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTCTGATATGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAACATTTATAGCTTTTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTTCAAGGCTTCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTGCTACTGTGTATGATATTGATAATAAT(SEQ ID NO：482)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：475的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTTTCTGGAATCGACCTCAGTGCCTATGCAATGATCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATGGATCACAATCATTTATCCTAATGGTATCACATACTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCGTCTCCAAAACCTCGACCGCGATGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGCAGAAAGTAGTAAGAATGCTTATTGGGGCTACTTTAACGTC(SEQ ID NO：483).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：485；和SEQ ID NO：486的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：484；SEQ ID NO：485；和SEQ ID NO：486对应于编码SEQ ID NO：474的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：487；SEQ ID NO：488；和SEQ ID NO：489的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：487；SEQ ID NO：488；和SEQ ID NO：489对应于编码SEQ ID NO：475的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：474的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：482；编码SEQ ID NO：475的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：483；编码SEQ ID NO：474的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：484；SEQ IDNO：485；和SEQ ID NO：486)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：475的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：487；SEQ ID NO：488；和SEQID NO：489)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：490的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTCTGATATGACCCAGACTCCATCCTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAACATTTATAGCTTTTTGGCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTTCAGGGCTTCCACTCTGGCATCTGGGGTCTCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGACCTGGAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTGCTACTGTGTATGATATTGATAATAAT(SEQ ID NO：498)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：491的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTTTCTGGAATCGACCTCAGTGCCTATGCAATGATCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATGGATCACAATCATTTATCCTAATGGTATCACATACTACGCGAACTGGGCGAAAGGCCGATTCACCGTCTCCAAAACCTCGACCGCGATGGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGATGCAGAAAGTAGTAAGAATGCTTATTGGGGCTACTTTAACGTC(SEQ ID NO：499).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：500；SEQ ID NO：501；和SEQ ID NO：502的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：500；SEQ ID NO：501；和SEQ ID NO：502对应于编码SEQ ID NO：490的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：504；和SEQ ID NO：505的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：504；和SEQ ID NO：505对应于编码SEQ ID NO：491的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：490的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：498；编码SEQ ID NO：491的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：499；编码SEQ ID NO：490的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：500；SEQ IDNO：501；和SEQ ID NO：502)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：491的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：503；SEQ ID NO：504；和SEQID NO：505)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：506的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCCATTGAAATGACCCAGACTCCATCCCCCGTGTCTGCCGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGGCCAGTGAGAGTGTTTTTAATAATATGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCACTCTCCTAAGCTCCTGATCTATGATGCATCCGATCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGTGGCGTGGAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTATTGTGCAGGGTATAAAAGTGATAGTAATGATGGCGATAATGTT(SEQ ID NO：514)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：507的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAACAGGAATTCAATAACCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATGGATCGGAATCATTACTGGTAGTGGTAGAACGTACTACGCGAACTGGGCAAAAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGCCATCCTGGTCTTGGTAGTGGTAACATC(SEQ ID NO：515).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：516；SEQ ID NO：517；和SEQ ID NO：518的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：516；SEQ ID NO：517；和SEQ ID NO：518对应于编码SEQ ID NO：506的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：519；SEQ ID NO：520；和SEQ ID NO：521的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：519；SEQ ID NO：520；和SEQ ID NO：521对应于编码SEQ ID NO：507的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：506的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：514；编码SEQ ID NO：507的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：515；编码SEQ ID NO：506的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：516；SEQ IDNO：517；和SEQ ID NO：518)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：507的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：519；SEQ ID NO：520；和SEQID NO：521)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：522的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCGCAAGTGCTGACCCAGACTGCATCGTCCGTGTCTGCAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAATTGCCAGTCCAGTCAGAGTGTTTATAATAACTACTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTATACTGCATCCAGCCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGAAGTGCAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAGGCTATTATAGTGGTCCTATAATTACT(SEQ IDNO：530)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：523的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGCCTCTGGATTCTCCCTCAATAACTACTACATACAATGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATGGATCGGGATCATTTATGCTGGTGGTAGCGCATACTACGCGACCTGGGCAAACGGCCGATTCACCATCGCCAAAACCTCGTCGACCACGGTGGATCTGAAGATGACCAGTCTGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGGACATTTGATGGTTATGAGTTG(SEQ ID NO：531).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：532；SEQ ID NO：533；和SEQ ID NO：534的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：532；SEQ ID NO：533；和SEQ ID NO：534对应于编码SEQ ID NO：522的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：536；和SEQ ID NO：537的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：536；和SEQ ID NO：537对应于编码SEQ ID NO：523的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：522的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：530；编码SEQ ID NO：523的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：531；编码SEQ ID NO：522的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：532；SEQ IDNO：533；和SEQ ID NO：534)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：523的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：535；SEQ ID NO：536；和SEQID NO：537)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：538的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCACATTTGCCCAAGTGCTGACCCAGACTCCATCCCCTGTGTCTGTCCCTGTGGGAGACACAGTCACCATCAGTTGCCAGTCCAGTGAGAGCGTTTATAGTAATAACCTCTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGCCTCCCAAGCTCCTGATCTACAGGGCATCCAATCTGGCATCTGGTGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCAGCGGCGCACAGTGTGACGATGCTGCCACTTACTACTGTCAAGGCTATTATAGTGGTGTCATTAATAGT(SEQ ID NO：546)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：539的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGGTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTGTCTGGATTCTCCCTCAGTAGCTACTTCATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGGAGGGGCTGGAATACATCGGATTCATTAATCCTGGTGGTAGCGCATACTACGCGAGCTGGGCGAGTGGCCGACTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTAGATCTGAAAATCACCAGTCCGACAACCGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGATTCTTATTGTTTCTTATGGAGCCTTTACCATC(SEQ ID NO：547).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：548；SEQ ID NO：549；和SEQ ID NO：550的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：548；SEQ ID NO：549；和SEQ ID NO：550对应于编码SEQ ID NO：538的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：551；SEQ ID NO：552；和SEQ ID NO：553的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：551；SEQ ID NO：552；和SEQ ID NO：553对应于编码SEQ ID NO：539的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：538的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：546；编码SEQ ID NO：539的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：547；编码SEQ ID NO：538的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：548；SEQ IDNO：549；和SEQ ID NO：550)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：539的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：551；SEQ ID NO：552；和SEQID NO：553)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：554的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCACTGAGAGCATTGGCAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGGCTCCCAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACCGGCGTGGAGTGTGATGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTAGTGCTAATATTGATAATGCT(SEQ ID NO：562)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：555的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTCACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACCGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTAAGTACTACATGAGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGAGAAGGGGCTGAAATACATCGGATACATTGATAGTACTACTGTTAATACATACTACGCGACCTGGGCGAGAGGCCGATTCACCATCTCCAAAACCTCGACCACGGTGGATCTGAAGATCACCAGTCCGACAAGTGAGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGAGGAAGTACTTATTTTACTGATGGAGGCCATCGGTTGGATCTC(SEQ ID NO：563).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：565；和SEQ ID NO：566的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：564；SEQ ID NO：565；和SEQ ID NO：566对应于编码SEQ ID NO：554的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：567；SEQ ID NO：568；和SEQ ID NO：569的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：567；SEQ ID NO：568；和SEQ ID NO：569对应于编码SEQ ID NO：555的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：554的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：562；编码SEQ ID NO：555的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：563；编码SEQ ID NO：554的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：564；SEQ IDNO：565；和SEQ ID NO：566)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：555的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：567；SEQ ID NO：568；和SEQID NO：569)的多核苷酸。
本发明还涉及编码对IL-6具有结合特异性的抗体的多肽的多核苷酸。在本发明的一个实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：570的可变轻链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGACACGAGGGCCCCCACTCAGCTGCTGGGGCTCCTGCTGCTCTGGCTCCCAGGTGCCAGATGTGCCTATGATATGACCCAGACTCCAGCCTCTGTGGAGGTAGCTGTGGGAGGCACAGTCACCATCAAGTGCCAGGCCACTGAGAGCATTGGCAATGAGTTATCCTGGTATCAGCAGAAACCAGGGCAGGCTCCCAAGCTCCTGATCTATTCTGCATCCACTCTGGCATCTGGGGTCCCATCGCGGTTCAAAGGCAGTGGATCTGGGACACAGTTCACTCTCACCATCACCGGCGTGGAGTGTGATGATGCTGCCACTTACTACTGTCAACAGGGTTATAGTAGTGCTAATATTGATAATGCT(SEQ ID NO：578)
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸包括，或作为选择由编码SEQ ID NO：571的可变重链多肽序列的以下多核苷酸序列组成：
ATGGAGACTGGGCTGCGCTGGCTTCTCCTGGTCGCTGTGCTCAAAGGTGTCCAGTGTCAGTCGCTGGAGGAGTCCGGGGGTCGCCTGGTAACGCCTGGGACACCCCTGACACTCACCTGCACAGTCTCTGGATTCTCCCTCAGTACCTACAACATGGGCTGGGTCCGCCAGGCTCCAGGGAAGGGGCTGGAATGGATCGGAAGTATTACTATTGATGGTCGCACATACTACGCGAGCTGGGCGAAAGGCCGATTCACCGTCTCCAAAAGCTCGACCACGGTGGATCTGAAAATGACCAGTCTGACAACCGGGGACACGGCCACCTATTTCTGTGCCAGGATTCTTATTGTTTCTTATGGGGCCTTTACCATC(SEQ ID NO：579).
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：580；SEQ ID NO：581；和SEQ ID NO：582的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：580；SEQ ID NO：581；和SEQ ID NO：582对应于编码SEQ ID NO：570的轻链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
在本发明的进一步实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：584；和SEQ ID NO：585的多核苷酸序列的一种或多种组成，所述SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：584；和SEQ ID NO：585对应于编码SEQ ID NO：571的重链可变序列的互补决定区(CDR，或高可变区)的多核苷酸。
本发明还涉及包括编码本文所述抗体片段的多核苷酸序列的一种或多种的多核苷酸序列。在本发明的一个实施方式中，编码对IL-6具有结合特异性的抗体的片段的多核苷酸包括，或作为选择由以下编码抗体片段的多核苷酸的一种、两种、三种或多种，包括全部组成：编码SEQ ID NO：570的轻链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：578；编码SEQ ID NO：571的重链可变区的多核苷酸SEQ ID NO：579；编码SEQ ID NO：570的轻链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：580；SEQ IDNO：581；和SEQ ID NO：582)的多核苷酸；编码SEQ ID NO：571的重链可变区的互补决定区(SEQ ID NO：583；SEQ ID NO：584；和SEQID NO：585)的多核苷酸。
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸进一步包括，编码SEQ ID NO：586的κ恒定轻链序列的以下多核苷酸序列：
GTGGCTGCACCATCTGTCTTCATCTTCCCGCCATCTGATGAGCAGTTGAAATCTGGAACTGCCTCTGTTGTGTGCCTGCTGAATAACTTCTATCCCAGAGAGGCCAAAGTACAGTGGAAGGTGGATAACGCCCTCCAATCGGGTAACTCCCAGGAGAGTGTCACAGAGCAGGACAGCAAGGACAGCACCTACAGCCTCAGCAGCACCCTGACGCTGAGCAAAGCAGACTACGAGAAACACAAAGTCTACGCCTGCGAAGTCACCCATCAGGGCCTGAGCTCGCCCGTCACAAAGAGCTTCAACAGGGGAGAGTGT(SEQ ID NO：587).
在本发明的另一实施方式中，本发明的多核苷酸进一步包括，编码SEQ ID NO：588的γ-1恒定重链多肽序列的以下多核苷酸序列：
GCCTCCACCAAGGGCCCATCGGTCTTCCCCCTGGCACCCTCCTCCAAGAGCACCTCTGGGGGCACAGCGGCCCTGGGCTGCCTGGTCAAGGACTACTTCCCCGAACCGGTGACGGTGTCGTGGAACTCAGGCGCCCTGACCAGCGGCGTGCACACCTTCCCGGCTGTCCTACAGTCCTCAGGACTCTACTCCCTCAGCAGCGTGGTGACCGTGCCCTCCAGCAGCTTGGGCACCCAGACCTACATCTGCAACGTGAATCACAAGCCCAGCAACACCAAGGTGGACAAGAGAGTTGAGCCCAAATCTTGTGACAAAACTCACACATGCCCACCGTGCCCAGCACCTGAACTCCTGGGGGGACCGTCAGTCTTCCTCTTCCCCCCAAAACCCAAGGACACCCTCATGATCTCCCGGACCCCTGAGGTCACATGCGTGGTGGTGGACGTGAGCCACGAAGACCCTGAGGTCAAGTTCAACTGGTACGTGGACGGCGTGGAGGTGCATAATGCCAAGACAAAGCCGCGGGAGGAGCAGTACGCCAGCACGTACCGTGTGGTCAGCGTCCTCACCGTCCTGCACCAGGACTGGCTGAATGGCAAGGAGTACAAGTGCAAGGTCTCCAACAAAGCCCTCCCAGCCCCCATCGAGAAAACCATCTCCAAAGCCAAAGGGCAGCCCCGAGAACCACAGGTGTACACCCTGCCCCCATCCCGGGAGGAGATGACCAAGAACCAGGTCAGCCTGACCTGCCTGGTCAAAGGCTTCTATCCCAGCGACATCGCCGTGGAGTGGGAGAGCAATGGGCAGCCGGAGAACAACTACAAGACCACGCCTCCCGTGCTGGACTCCGACGGCTCCTTCTTCCTCTACAGCAAGCTCACCGTGGACAAGAGCAGGTGGCAGCAGGGGAACGTCTTCTCATGCTCCGTGATGCATGAGGCTCTGCACAACCACTACACGCAGAAGAGCCTCTCCCTGTCTCCGGGTAAA(SEQ ID NO：589).
在一个实施方式中，本发明涉及分离的多核苷酸，包括编码选自SEQ ID NO：3，18，19，22，38，54，70，86，102，117，118，123，139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555和SEQ ID NO:571的抗-IL-6VH抗体氨基酸序列或编码其变体的多核苷酸，其中至少一个框架残基(FR残基)已经被在兔抗-IL-6抗体VH多肽中的相应位置处存在的氨基酸或保守性氨基酸取代基(substitution)取代。
在另一实施方式中，本发明涉及分离的多核苷酸，包括编码抗-IL-6VL抗体氨基酸序列2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570或编码其变体的多核苷酸序列，其中至少一个框架残基(FR残基)已经被在兔抗-IL-6抗体VL多肽中的相应位置处存在的氨基酸取代或保守性氨基酸取代基(substitution)取代。
在另一实施方式中，本发明涉及一种或多种异源多核苷酸，其包括编码在以下中包含的多肽的序列：SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3；SEQID NO:2和SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:19；SEQ IDNO:20和SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:18；SEQ LD NO:20和SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70；SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102；SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:117；SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:118；SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:102；SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:117；SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:118；SEQ ID NO:122和SEQ ID NO:123；SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139；SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155；SEQ ID NO:170和SEQ ID N0:171；SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187；SEQ ID NO:202和SEQ ID NO:203；SEQ ID NO:218和SEQ ID NO:219；SEQ ID NO:234和SEQ ID NO:235；SEQ ID NO:250和SEQ ID NO:251；SEQ ID NO:266和SEQ ID NO:267；SEQ ID NO:282和SEQ ID NO:283；SEQ ID NO:298和SEQ ID NO:299；SEQ ID NO:314和SEQ ID NO:315；SEQ ID NO:330和SEQ ID NO:331；SEQ ID NO:346和SEQ ID NO:347；SEQ ID NO:362和SEQ ID NO:363；SEQ ID NO:378和SEQ ID NO:379；SEQ ID NO:394和SEQ ID NO:395；SEQ ID NO:410和SEQ ID NO:411；SEQ ID NO:426和SEQ ID NO:427；SEQ ID NO:442和SEQ ID NO:443；SEQ ID NO:458和SEQ ID NO:459；SEQ ID NO:474和SEQ ID NO:475；SEQ ID NO:490-和SEQ ID NO:491；SEQ ID NO:506和SEQ ID NO:507；SEQ ID NO:522和SEQ ID NO:523；SEQ ID NO:538和SEQ ID NO:539；SEQ ID NO:554和SEQ ID NO:555；或SEQ IDNO:570和SEQ ID NO:571。
在另一实施方式中,本发明涉及分离的多核苷酸，其表达包含至少一种衍生自抗-IL-6抗体的CDR多肽的多肽，其中所述表达多肽单独特异性地结合IL-6，或当与另一多核苷酸序列一起表达时特异性地结合IL-6，所述另一多核苷酸序列表达包含至少一种衍生自抗-IL-6抗体的CDR多肽的多肽，其中所述至少一种CDR选自在包含于以下中的VL或VH多肽中包含的那些：SEQ ID NO:3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555；571；2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570。
还涉及包括所述多核苷酸的宿主细胞和载体。
本发明进一步涉及包括编码可变重链和轻链多肽序列，以及本文所示的单独的互补决定区(CDR,或高可变区)的多核苷酸序列的载体，，以及包括所述序列的宿主细胞。在本发明的一个实施方式中，宿主细胞为酵母细胞。在本发明的另一实施方式中，酵母宿主细胞属于毕赤酵母(Pichia)属。
抗-IL-6活性
如上述指出，IL-6为通过受体复合物促进细胞应答的细胞因子家族的成员，所述受体复合物由信号转导糖蛋白gpl30的至少一个亚单位和IL-6受体(IL-6R)组成。IL-6R还可以以可溶形式(sIL-6R)存在。IL-6R与IL-6R结合，其然后使信号转导受体gp 130二聚化。
认为本发明的抗-IL-6抗体，或其IL-6结合片段，通过显示抗-IL-6活性是有用的。在本发明的一个非限制性实施方式中，本发明的抗-IL-6抗体，或其IL-6结合片段，通过与可以为可溶的IL-6或细胞表面表达的IL-6的IL-6结合显示抗-IL-6活性，和/或可以预防或抑制IL-6与IL-6R的结合和/或gpl30信号转导糖蛋白的激活(二聚化)和IL-6/IL-6R/gpl30多聚体的形成和前述任何的生物学效应。基于特定抗体在何处(即，表位)结合IL-6和/或其如何影响上述IL-6复合物和/或多聚体的形成和其生物学效应，该IL-6抗体可以拥有不同的拮抗活性。因此，根据本发明的不同IL-6抗体例如可以更好地适合预防或治疗涉及基本可溶IL-6的形成和累积的疾病，例如类风湿性关节炎，而其它抗体可以有利于其中IL-6/IL-6R/gpl30或IL-6/IL-6R/gpl30的预防为所期望的治疗结果的治疗。这可以在结合和其它检测中确定。
对IL-6具有结合特异性的本发明的抗-IL-6抗体及其片段的抗-IL-6活性，还可以通过对IL-6的其结合强度或其亲和性描述。这还可以影响其治疗性质。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的本发明的抗-IL-6抗体及其片段，与IL-6结合，离解常数(KD)小于或等于5×10-7,10-7,5×10-8,10-8,5×10-9,10-9,5×10-10,10-10,5×10-11,10-11,5×10-12,10-12,5×10-13,10-13,5×10-14，10-14,5×10-15或10-15。优选地，抗-IL-6抗体及其片段结合IL-6，离解常数(KD)小于或等于5×10-10。
在本发明的另一实施方式中，对IL-6具有结合特异性的本发明的抗-IL-6抗体及其片段的抗-IL-6活性，与IL-6结合，解离速率(off-rate)小于或等于10-4S-1,5×10-5S-1,10-5S-1,5×10-6S-1,10-6S-1,5×10-7S-1,或10-7S-1。在本发明的一个实施方式中，对IL-6具有结合特异性的本发明的抗-IL-6抗体及其片段，与线性或构象IL-6表位结合。
在本发明的进一步实施方式中，对IL-6具有结合特异性的本发明的抗-IL-6抗体及其片段的抗-IL-6活性，通过改善或降低与IL-6相关的疾病和障碍的症状或作为选择治疗或预防与IL-6相关的疾病和障碍来显示抗-IL-6活性。与IL-6相关的疾病和障碍的非限制性实例在下文提出。注意癌症相关性疲劳，恶病质和类风湿性关节炎为该IL-6抗体的优选适应症。
在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体，或其IL-6结合片段，对IL-6R或gp-130信号转导糖蛋白不具有结合特异性。
B-细胞筛选和分离
在一个实施方式中，本发明提供分离抗原特异性B细胞的克隆群体(clonal population)的方法，其可用于分离至少一种抗原特异性细胞。如下文所述和例举的，这些方法包含一系列的培养和选择步骤，其可以单独地、组合地、顺序地、重复地或周期性地使用。优选地，这些方法用于分离至少一种抗原特异性细胞，所述抗原特异性细胞可用于产生单克隆抗体，其对所期望的抗原，或对应于此类抗体的核酸序列是特异性的。
在一个实施方式中，本发明提供包括以下步骤的方法：
a.制备包括至少一种抗原特异性B细胞的细胞群体：
b.通过例如色谱富集所述细胞群体，以形成包括至少一种抗原特异性B细胞的富集的细胞群体；
c.从所述富集的B细胞群体分离单一(single)的B细胞；和
d.确定所述单一的B细胞是否产生对所述抗原特异的抗体。
在另一实施方式中，本发明提供分离单一的，抗体产生B细胞的方法的改进，所述改进包括富集从已经免疫或天然地暴露至抗原的宿主中获得的B细胞，其中所述富集步骤在任何选择步骤之前，包括至少一步培养步骤，并且产生B细胞的克隆群体(所述B细胞产生对所述抗原特异的单一的单克隆抗体)。
贯穿本申请，"B细胞的克隆群体"是指仅分泌对所期望抗原特异的单一的抗体的B细胞群体。也就是说这些细胞仅产生一种类型的对所期望的抗原特异的单克隆抗体。
在本申请中，"富集"细胞群体细胞意味着增加在混合的细胞群体，例如源自宿主的含B细胞分离物中包含的所期望细胞，典型地为抗原特异性细胞的频率，所述宿主针对所期望抗原免疫。这样，富集的细胞群体包括作为富集步骤的结果具有更高频率的抗原特异性细胞的群体，但是该细胞的群体可以包含和产生不同的抗体。
通用术语"细胞群体"包括富集前-和后-的细胞群体，注意当进行多个富集步骤时，细胞全体可以为富集前和后二者。例如,在一个实施方式中，本发明提供以下方法：
a.从免疫的宿主收获细胞群体以获得收获的细胞群体：
b.从所述收获的细胞群体形成至少一种单一的细胞悬浮液；
c.富集至少一种单一的细胞悬浮液以形成第一富集的细胞群体；
d.富集所述第一富集的细胞群体以形成第二富集的细胞群体；
e.富集所述第二富集的细胞群体以形成第三富集的细胞群体；和
f.选择由所述第三富集的细胞群体的抗原特异性细胞产生的抗体。
每一细胞群体可直接用于下一步骤，或其可部分或全部地冰冻以用于长期或短期贮存或用于稍后的步骤。同样地，来自细胞群体的细胞可以单独地悬浮以产生单一细胞悬浮液。单一细胞悬浮液可以被富集，以使单一细胞悬浮液充当富集前的细胞群体。然后，一种或多种抗原特异性单一细胞悬浮液一起形成富集的细胞群体；抗原特异性单一细胞悬浮液可以聚集在一起，例如再次铺平板以用于进一步的分析和/或抗体产生。
在一个实施方式中，本发明提供富集细胞群体的方法以产生具有约50％至约100％抗原特异性细胞频率的富集的细胞群体或其中的增量。优选地，所述富集的细胞群体具有大于或等于约50％,60％,70％,75％,80％,90％,95％,99％,或100％的抗原特异性细胞频率。
在另一实施方式中,本发明提供富集细胞群体的方法，由此抗原特异性细胞的频率增加至少2倍、,5倍,10倍,20倍,50倍,100倍或其中的增量(increments therein)。
贯穿本申请，术语"增量"用于以变化的精密度定义数值，例如至最接近的10,1,0.1,0.01等。增量可以在任何可测量的精密度附近，并且增量不需要在范围两端处在相同的精密度附近，例如1至100的范围或其中的增量包括例如20至80,5至50,和0.4至98的范围。当所述范围为开放式的(open-ended)时，例如小于100的范围，其中的增量是指100和可测量的限度之间的增量。例如，小于100或其中的增量是指0至100或其中的增量，除非特征，例如，温度不限于0。
抗原特异性可以相对于任何抗原测定。所述抗原可以为抗体能够与其结合的任何物质，包括，但不限于，肽，蛋白质或其片段；碳水化合物；有机和无机分子；由动物细胞产生的受体，细菌细胞和病毒；酶；生物途径的激动剂和拮抗剂；激素；和细胞因子。示例性的抗原包括但不限于，IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-12,IL-13,IL-18,IFN-α,IFN-γ,BAFF,CXCL13,IP-10,VEGF,EPO,EGF,HRG,肝细胞生长因子(HGF)和海帕西啶(Hepcidin)。优选的抗原包括IL-6、IL-13、TNF-α、VEGF-α、肝细胞生长因子(HGF)和海帕西啶(Hepcidin)。在使用多于一个富集步骤的方法中，用于各富集步骤的抗原可以相互相同或不同。使用相同抗原的多个富集步骤可以产生大量和/或不同的抗原特异性细胞的群体；使用不同抗原的多个富集步骤可以产生对不同抗原具有交叉特异性的富集的细胞群体。
富集细胞群体可以通过任何本领域已知的细胞选择手段来进行以用于分离抗原特异性细胞。例如细胞群体可以通过色谱技术，例如Miltenyi珠或磁珠技术富集。珠可以直接或间接连接至目的抗原。在优选实施方式中，富集细胞群体的方法包括至少一个色谱富集步骤。
细胞群体还通过本领域已知的任何抗原特异性检验技术来进行，例如ELISA检验或halo assay。ELISA检验包括但不限于选择性抗原固定(例如，通过链霉亲和素、亲和素或中性链亲和素(neutravidin)包被的板的生物素化的抗原捕获)、非特异抗原板包被、和通过抗原积累(antigen build-up)策略(例如，选择性抗原捕获，然后添加结合伴侣以产生异聚蛋白质-抗原复合物)。抗原可以直接或间接连接至固相基质或载体，例如柱。halo assay包括使所述细胞与负载抗原的珠和对宿主特异的标记的抗-宿主抗体接触，所述宿主用于收获B细胞。标记可以为例如荧光团。在一个实施方式中，至少一种检验富集步骤在至少一种单一的细胞悬浮液上进行。在另一实施方式中，富集细胞群体的方法包括至少一个色谱富集步骤和至少一个检验富集步骤。
通过大小或密度"富集"细胞群体的方法在本领域是已知的。参见,例如,美国专利5,627,052。除了通过抗原特异性富集细胞群体之外，这些步骤可用于本方法。
本发明的细胞群体包含至少一种能够识别抗原的细胞。抗原识别细胞包括但不限于B细胞、血浆细胞及其后代。在一个实施方式中，本发明提供包含单一类型的抗原特异性B细胞的克隆的细胞群体，即，该细胞群体产生对所期望抗原特异的单一单克隆抗体。
在此类实施方式中，认为B细胞的克隆的抗原特异性群体主要由抗原特异性的抗体分泌细胞组成，其通过本文提供的新培养和选择策略获得。因此，本发明还提供用于获得包含至少一种抗原特异性的抗体分泌细胞的富集的细胞群体，在一个实施方式中,本发明提供富集的细胞群体，其包含约50％至约100％，或其中的增量，或大于或等于约60％,70％,80％,90％,或100％抗原特异性的抗体分泌细胞。
在一个实施方式中，本发明提供通过例如从细胞群体选择特定B细胞和/或选择由特定细胞产生的抗体在任何选择步骤之前富集获自宿主的细胞群体，分离单一B细胞的方法。富集步骤可以作为一步、两步、三步或更多步进行，在一个实施方式中，单一B细胞在确认单一B细胞是否分泌具有抗原特异性和/或所期望性质的抗体之前分离自富集的细胞群体。
在一个实施方式中，将富集细胞群体的方法用于抗体产生和/或选择的方法。这样，本发明提供包括在选择抗体之前富集细胞群体的方法。该方法可以包括以下步骤：制备包括至少一种抗原特异性细胞的细胞群体，通过分离至少一种抗原特异性细胞富集所述细胞群体以形成富集的细胞群体，和从至少一种抗原特异性细胞诱导抗体产生。在优选实施方式中，富集的细胞群体包含超过一种的抗原特异性细胞。在一个实施方式中，富集的群体的每一抗原特异性细胞在分离来自其的抗体产生细胞和/或使用所述B细胞产生抗体，或对应于此类抗体的核酸序列之前，在产生克隆的抗原特异性B细胞群体的条件下培养。与其中抗体从具有低频率的抗原特异性细胞的细胞群体产生的现有技术相反，本发明允许从高频率的抗原特异性细胞中的抗体选择。因为在抗体选择步骤之前使用富集步骤，用于抗体产生的大多数细胞，优选实质上所有的细胞，为抗原特异性的。通过从具有增加频率的抗原特异性的细胞的群体产生抗体，抗体的数量和种类(variety)增加。
在本发明的抗体选择方法中，抗体优选在富集步骤和培养步骤之后选择，所述富集步骤和培养步骤产生抗原特异性B细胞的克隆群体。该方法可以进一步包括将来自一种或多种分离的抗原特异性细胞的选择抗体或其部分测序的步骤。用于测序的本领域已知的任何方法可以使用，并且可以包括将重链,轻链,可变区,和/或互补决定区(CDR)测序。
除了富集步骤之外，用于抗体选择的方法还包括一步或多步就抗原识别和/或抗体功能性(antibody functionality)筛选细胞群体的步骤。例如，所期望的抗体可以具有特异的结构特征，例如与特定结构的特定的表位或模拟物(mimicry)结合；拮抗或激动活性；或中和活性，例如抑制抗原和配体之间的结合。在一个实施方式中，抗体功能性筛选是配体依赖性的。用于抗体功能性的筛选包括，但不限于，重建抗原配体与重组受体蛋白的天然相互作用的体外蛋白质-蛋白质相互作用检验；和为配体依赖性且容易监视的基于细胞的应答(例如，增殖应答)。在一个实施方式中，用于抗体选择的方法包括通过测定抑制浓度(IC50)就抗体功能性筛选细胞群体的步骤。在一个实施方式中，至少一种分离的抗原特异性细胞产生IC50低于约100,50,30,25,10μg/mL，或其中的增量的抗体。
除了富集步骤之外，用于抗体选择的方法还包括一步或多步就抗体结合强度筛选细胞群体的步骤。抗体结合强度可以通过本领域已知的任何方法测定(例如,Biacore)。在一个实施方式中，至少一种分离的抗原特异性细胞产生具有高抗原亲和性的抗体，例如离解常数(Kd)小于约5x10-10M-1,优选约1x10-13至5x10-10,1x10-12至1x10-10,1x10-12至7.5x10-11,1x10-11至2x10-11,约1.5x10-11或更少，或其中的增量。在该实施方式中，据说抗体为亲和性成熟的(affinity mature)。在优选实施方式中，抗体的亲和性与以下任何之一的亲和性相当或更高：(依决洛单抗(edrecolomab)),(利妥昔单抗(rituximab)),(曲妥珠单抗(traztuzumab)),(吉妥珠单抗(gentuzumab)),(阿仑单抗(alemtuzumab)),ZevalinTM(替伊莫单抗(ibritumomab)),ErbituxTM(西妥昔单抗(cetuximab)),AvastinTM(贝伐单抗(bevicizumab)),RaptivaTM(依法珠单抗(efalizumab)),(英夫利西单抗(infliximab)),HumiraTM(阿达木单抗(adalimumab)),和XolairTM(奥马佐单抗(omalizumab))。优选地，抗体的亲和性与HumiraTM的亲和性相当或更高。抗体的亲和性还可以通过已知的亲和性成熟技术来增加。在一个实施方式中，至少一种细胞群体就抗体功能性和抗体结合强度的至少一种，优选两种进行筛选。
除了富集步骤之外，用于抗体选择的方法还包括一步或多步就抗体序列同源性，特别是人类同源性筛选细胞群体的步骤。在一个实施方式中，至少一种分离的抗原特异性细胞产生与人类抗体具有约50％至约100％，或其中的增量的同源性，或高于约60％,70％,80％,85％,90％,或95％同源性的抗体。可以通过本领域已知的技术例如CDR移植或选择性决定残基移植(selectivity determining residue grafting)(SDR)，将抗体人源化以增加与人类序列的同源性。
在另一实施方式中,本发明还提供在IC50,Kd,和/或同源性方面根据任何上述实施方式的抗体本身。
本文公开的B细胞选择策略与用于获得抗体分泌B细胞和对所期望的靶抗原特异的单克隆抗体的其它方法相比具有许多内在优点。这些优点包括但不限于以下：
首先，已经发现当这些选择过程与所期望的抗原例如IL-6或TNF-α一起使用时，该方法可再现地产生能够产生似乎为抗体的基本上全面互补物(complement)，即与所述抗原的各种不同表位结合的抗体的抗原特异性B细胞。不被理论限制，假设全面互补物归因于在起始B细胞回收之前进行的抗原富集步骤。此外，该优点允许具有不同性质的抗体的分离和选择，因为这些性质可以依赖于特定抗体的表位特异性而变化。
第二，已经发现B细胞选择策略可再现地产生克隆的B细胞培养物，其包含单一B细胞或其后代，分泌单一的通常以相对高的结合亲和性，即皮摩尔或更佳的抗原结合亲和性与所期望的抗原结合的单克隆抗体。相反，现有的抗体选择方法倾向于产生相对少的高亲和性抗体，并因此需要大量筛选过程以分离具有治疗潜力的抗体。不被理论限制，假设该策略产生宿主的体内B细胞免疫(初次免疫)，然后第二体外B细胞刺激(二次抗原引发步骤)，其可以增强回收的克隆B细胞分泌对靶抗原特异的单一的高亲和性的单克隆抗体的能力和倾向。
第三，已经观察到(如本文用IL-6特异性B细胞所示)B细胞选择策略可再现地产生富集的B细胞产生IgG，平均来说，所述B细胞产生IgG对所期望靶是高度选择性(抗原特异性)的。认为通过这些方法回收的抗原-富集的B细胞包含能够产生如上讨论的表位特异性的所期望的完全互补物的B细胞。
第四，已经观察到B细胞选择策略，甚至当与小抗原，即100氨基酸以下，例如5-50氨基酸长的肽一起使用时，可再现地产生克隆的B细胞培养物，其分泌针对小抗原，例如肽的单一的高度亲和性抗体。这是高度令人惊奇的，因为这对产生针对小肽的高亲和性抗体通常是非常困难的，劳动力密集的，并且有时甚至是不可行的。因此本发明可以用于产生针对所期望的肽靶，例如病毒，细菌或自身抗原肽的治疗性抗体，从而允许生产具有非常离散结合性质的单克隆抗体或甚至产生针对不同肽靶，例如不同病毒菌株的单克隆抗体的鸡尾酒(cocktai l)。该优点在产生具有所期望价(valency)的治疗性或预防性疫苗，例如HPV疫苗上特别有用，所述HPV疫苗诱导针对不同HPV菌株的保护免疫性。
第五，B细胞选择策略，特别当与衍生自兔的B细胞一起使用时，倾向于可再现地产生抗原特异性抗体序列，所述抗原特异性抗体序列与内源人类免疫球蛋白非常相似(在氨基酸水平约90％相似)，并且包含与人类免疫球蛋白非常相似并因此几乎不需要或不需要序列修饰的CDR(典型地在亲本抗体序列上最多仅少数CDR残基被修饰并且没有框架内源性残基被引入)，以消除潜在的免疫原性问题。具体地，优选重组抗体将仅包含对于抗原识别所需的宿主(兔)CDR1和CDR2残基和全部CDR3。由此，即使使用人源化，根据B细胞和抗体选择策略回收的抗体序列的高抗原结合亲和性保持完整或基本上完整。
总之，通过使用比之前已知的更有效的策略，这些方法可用于产生对更多不同表位显示更高结合亲和性的抗体。
在具体实施方式中，本发明提供通过包括以下步骤用于鉴定单一B细胞的方法，所述B细胞分泌对所期望抗原特异的抗体，并且任选地用于例如亲和性、亲合力(avidity)、细胞裂解活性等的至少一种所期望的功能性质：
a.使宿主针对抗原免疫；
b.从所述宿主收获B细胞；
c.富集收获的B细胞以增加抗原特异性细胞的频率；
d.形成至少一种单一细胞悬浮液；
e.在有利于每培养孔的单一抗原特异性B细胞的存活的条件下，培养来自单一细胞悬浮液的亚群(sub-population)；
f.从所述亚群分离B细胞；和
g.确定所述单一B细胞是否产生对所述抗原特异的抗体。
典型地，这些方法将进一步包括分离和测序多肽和编码所期望抗体的核酸序列(整体或部分)的额外步骤。这些序列或修饰的版本或其部分可以在所期望的宿主细胞中表达以产生针对所期望抗原的重组抗体。
如之前所指出的，认为B细胞的克隆群体主要包括产生针对所期望抗原的抗体的抗体-分泌B细胞。还认为基于使用几种抗原和使用不同的B细胞群体，根据本发明产生的克隆产生的B细胞和从其衍生的分离的抗原特异性B细胞，与从培养的抗原特异性B细胞衍生单克隆抗体的其它方法相比，分泌典型地具有相对高亲和性并且此外能够有效地和可再现地产生更大表位可变性的单克隆抗体。在示例性的实施方式中，用于此类B细胞选择方法的免疫细胞的群体将衍生自兔。然而，产生抗体的其它宿主，包括非人类和人类宿主，可以作为选择地用作免疫B细胞的来源。认为将兔用作B细胞的来源可以增强可以由本方法得到的单克隆抗体的多样性。同样地，根据本发明衍生自兔的抗体序列典型地拥有与人类抗体序列具有高度序列同一性的序列，使其有利于用于人类的序列，因为它们几乎不拥有免疫原性。在人源化的过程中，最终人源化的抗体包含低得多的外源/宿主残留内容物(content)，通常限制到由于它们的性质与用于移植的人类靶序列显著地不同的宿主CDR残基的亚组(subset)。这增强了在人源化抗体蛋白中完整活性恢复的可能性。
使用本文公开的富集步骤的抗体选择的方法包括从免疫的宿主获得包含免疫细胞的细胞群体的步骤。从免疫的宿主获得包含免疫细胞的细胞群体的方法在本领域是已知的，并且通常包括在宿主中诱导免疫应答，和从宿主收获细胞以获得一种或多种细胞群体。该应答可以通过使宿主针对所期望的抗原来引发。作为选择，用作此类免疫细胞来源的宿主可以天然地暴露到所期望的抗原，例如已经被特定病原体例如细菌或病毒感染或作为选择已经针对个体被其所苦的癌症建立特异性抗体应答的个体。
宿主动物在本领域是已知的，并且包括但不限于，豚鼠、兔、小鼠、大鼠、非人灵长类、人类以及其它哺乳动物和啮齿动物、鸡、牛、猪、山羊和绵羊。优选地所述宿主为哺乳动物，更优选兔、小鼠、大鼠或人类。当暴露至抗原时，所述宿主产生抗体作为针对抗原的天然免疫应答的部分。如所述，免疫应答可以天然地作为疾病的结果发生，或其可以通过使用抗原免疫来诱导。免疫可以通过本领域已知的任何方法进行，例如使用或不使用增强免疫应答的试剂，例如完全或不完全氟式佐剂(Freund's adjuvant)通过一次或多次注射抗原。在另一实施方式中,本发明还涉及脾内免疫。作为体内免疫宿主动物的选择，该方法可以包括在体外免疫宿主细胞培养物。
容许免疫应答的时间之后(例如，按照通过血清抗体检测测定)，收获宿主动物细胞以获得一种或多种细胞群体。在优选实施方式中，收获的细胞群体就抗体结合强度和/或抗体功能性筛选。收获的细胞群体优选来自脾、淋巴结、骨髓、和/或外周血单核细胞(PBMCs)的至少一种。该细胞可以从超过一种来源收获并且合并(pooled)。对于特定抗原可以优选特定来源。例如，脾，淋巴结和PBMCs对于IL-6是优选的；对于TNF淋巴结是优选的。在免疫后约20至约90天，或其中的增量，优选约50至约60天收获细胞群体。收获的细胞群体和/或来自其的单一细胞悬浮液可以富集，筛选和/或培养以用于抗体选择。在收获的细胞群体内的抗原特异性细胞的频率通常为约1％至约5％，或其中的增量。
在一个实施方式中，优选通过使用Miltenyi珠，富集来自收获的细胞群体的单一细胞悬浮液。从抗原特异性细胞的频率为约1％至约5％的收获的细胞群体，结果衍生了抗原特异性细胞的频率接近100％的富集的细胞群体。
使用富集步骤的抗体选择的方法包括从来自富集的细胞群体的至少一种抗原特异性细胞产生抗体的步骤。体外产生抗体的方法在本领域是已知的，并且可以使用任何合适的方法。在一个实施方式中，将富集的细胞群体，例如来自收获的细胞群体的抗原特异性单一细胞悬浮液，以各种细胞密度，例如50,100,250,500,或1至1000细胞每孔之间的其它增量铺平板。优选地，亚群包括不超过约10,000个抗原特异性的抗体-分泌细胞，更优选约50-10,000,约50-5,000,约50-1,000,约50-500,约50-250个抗原特异性的抗体-分泌细胞，或其中的增量。然后，这些亚群用合适的培养基(例如激活的T细胞条件培养基，特别是1-5％激活的兔T细胞条件培养基)在饲养层上，优选在有利于单一增殖抗体-分泌细胞(每培养孔)的存活的条件下培养。饲养层，通常由辐射(irradiated)的细胞物质，例如EL4B细胞组成，不组成细胞群体的部分。将细胞在合适的培养基下培养对于抗体产生充分的时间，例如约1天至约2周,约1天至约10天,至少约3天,约3至约5天,约5天至约7天,至少约7天,或其它其中的增量。在一个实施方式中，同时培养超过一个的亚群。优选地，单一的抗体-产生细胞和其后代在各孔中存活，由此在各孔中提供抗原特异性B细胞的克隆群体。在此阶段，通过克隆群体产生的免疫球蛋白G(IgG)与抗原特异性高度相关。在优选实施方式中，IgG显示大于约50％,更优选大于70％,85％,90％,95％,99％,或其中的增量的与抗原特异性相关。参见图3，对于IL-6其证明示例性的相关性。相关性通过在受限条件下构建B细胞培养来证明，以建立单一的抗原特异性抗体产物(每孔)。将抗原特异性与通常的IgG合成比较。观察到3个群体：识别抗原(生物素化的或直接包被)单一形式的IgG、可检测的IgG和与固定疫无关的抗原识别，以及单独的IgG产生。IgG产生与抗原特异性高度相关。
任选地收集包含抗体的上清液，其可以被富集、筛选和/或培养以用于根据上述步骤的抗体选择。在一个实施方式中，上清液就抗体功能性富集(优选通过抗原特异性检验,特别是ELISA检验)和/或筛选。
在另一实施方式中，将从其上述上清液被任选地筛选以检测所期望分泌的单克隆抗体的存在的富集的，优选克隆的抗原特异性B细胞群体用于分离少量B细胞，优选单一B细胞，其然后在适当的检验中测试以确认在克隆的B细胞群体中单一抗体-产生B细胞的存在。在一个实施方式中，约1至约20种细胞从克隆的B细胞群体分离，优选少于约15,12,10,5,或3种细胞,或其中的增量，最优选单一细胞。筛选优选受抗原特异性检验，特别是halo检验影响。halo检验可以使用全长蛋白或其片段进行。包含抗体的上清液也可就以下至少一种筛选：抗原结合亲和性；抗原-配体结合的激动性和拮抗性；特异性靶细胞类型的增殖的诱导或抑制；靶细胞的裂解的诱导或抑制，和涉及抗原的生物途径的诱导或抑制。
鉴定的抗原特异性细胞可用于衍生编码所期望单克隆抗体的相应的核酸序列。(AluI消化可以确认每孔产生仅单一单克隆抗体类型)。如上述所述，这些序列可以通过人源化突变，以使其适合于在人类药剂中使用。
如所述，用于该步骤的富集的B细胞群体还可以进一步富集、筛选和/或培养以用于根据上述步骤的抗体选择，其可以以不同的顺序重复或进行。在优选的实施方式中，富集的，优选克隆的抗原特异性细胞的至少一种细胞被分离、培养和用于抗体选择。
这样，在一个实施方式中，本发明提供包括以下的方法：
a.从免疫的宿主收获细胞群体以获得收获的细胞群体；
b.从收获的细胞群体形成至少一种单一的细胞悬浮液；
c.优选通过色谱富集至少一种单一的细胞悬浮液，以形成第一富集的细胞群体；
d.优选通过ELISA检验富集所述第一富集的细胞群体，以形成第二富集的细胞群体，其优选为克隆的，即，其仅包含单一类型的抗原特异性B细胞；
e.优选通过halo检验富集所述第二富集的细胞群体，以形成第三富集的细胞群体，其包含单一的或少量的产生对所期望抗原特异的抗体的B细胞；和
f.选择由从所述第三富集的细胞群体分离的抗原特异性细胞产生的抗体。
该方法可进一步包括就抗体结合强度(亲和性,亲和力)和/或抗体功能性筛选收获的细胞群体的一步或多步步骤。合适的筛选步骤包括但不限于检测以下的检验方法：由鉴定的抗原特异性B细胞产生的抗体是否产生拥有最小抗原结合亲和性的抗体，所述抗体是否激动或拮抗所期望抗原与配体的结合；所述抗体是否诱导或抑制特定细胞类型的增殖；所述抗体是否诱导或引发针对靶细胞的细胞裂解反应；所述抗体是否与特异性表位结合；以及所述抗体是否调节(抑制或激动)涉及抗原的特定生物途径。
类似地，该方法可以包括就抗体结合强度和/或抗体功能性筛选所述第二富集的细胞群体的一步或多步步骤。
该方法还可以包括将选择的抗体的多肽序列或相应的核酸序列测序的步骤。该方法还可以包括使用选择的抗体的序列，其片段或基因修饰版本产生重组抗体的步骤。用于使抗体序列突变以保留所期望性质的方法对本领域技术人员是已知的并且包括人源化、嵌合、产生单链抗体；这些突变方法可以产生拥有所期望效应子功能、免疫原性、稳定性、糖基化的除去或添加等的重组抗体。重组抗体可以通过任何合适的重组细胞产生，包括但不限于哺乳动物细胞例如CHO,COS,BHK,HEK-293，细菌细胞，酵母细胞，植物细胞，昆虫细胞和两栖类细胞。在一个实施方式中，所述抗体在多倍体酵母细胞，即二倍体酵母细胞，特别是毕赤酵母(Pichia)中表达。
在一个实施方式中，所述方法包括：
a.使宿主针对抗原免疫以产生宿主抗体；
b.就抗原特异性和中和性筛选所述宿主抗体；
c.从所述宿主收获B细胞；
d.富集所述收获的B细胞以形成具有增加频率的抗原特异性细胞的富集的细胞群体；
e.在有利于单一B细胞的存活的条件下培养来自所述富集的细胞群体的一种或多种亚群，以在至少一个培养孔中产生克隆的群体；
f.确定所述克隆的群体是否产生对所述抗原特异的抗体；
g.分离单一的B细胞；和
h.将由单一的B细胞产生的抗体的核酸序列测序。
使抗体人源化的方法
在本发明的另一实施方式中，提供用于使抗体重链和轻链人源化的方法。在该实施方式中，对于使重链和轻链的人源化遵循以下方法：
轻链
1.鉴定信号肽序列后第一个氨基酸的氨基酸。这是框架1的起点。信号肽在第一起始蛋氨酸处开始，并且对于兔轻链蛋白序列典型地，但不必需地长度上为22氨基酸。成熟多肽的起点还可以经验地通过N-末端蛋白测序确定，或可以使用预测算法预测。按照本领域技术人员经典地定义，其是框架1的起点。
实例：图2中的RbtVL氨基酸残基1，起点‘AYDM…’。
2.框架3末端的鉴定。其典型地为框架1的起点后的86-90氨基酸，并且典型地为在两个酪氨酸残基之前的半胱氨酸残基。按照本领域技术人员经典地定义，其是框架3的末端。
实例：图2中的RbtVL氨基酸残基88，以‘TYYC’结束
3.使用如上定义的从框架1的开端(beginning)开始至框架3的末端的多肽的兔轻链序列，并且对于最相似的人类抗体蛋白序列进行序列同源性搜索。这将典型地为在抗体成熟之前针对人类种系序列的搜索，以降低免疫原性的可能性，然而可以使用任何人类序列。典型地程序例如BLAST可用于就最高同源的搜索序列数据库。人类抗体序列的数据库可以从各种来源例如NCBI(国家生物技术信息中心)发现。
实例：将来自图2中编号1至88的残基的RbtVL氨基酸序列针对人类抗体种系数据库BLAST。上部三个独特返回的序列以L12A,V1和VxO2示于图2。
4.通常最高同源性的人类种系可变轻链序列然后用作用于人源化的基础。然而本领域技术人员可以决定使用另一序列，其不具有通过同源性算法所确定的最高同源性，而是基于其它因素包括序列空位和框架相似性。
实例:在图2中，L12A为最高同源性的人类种系可变轻链序列，并且用作RbtVL人源化的基础。
5.针对用于轻链人源化的人类同源物确定框架和CDR排列(FR1,FR2,FR3,CDR1&CDR2)。其按照本领域所述使用传统的规划(layout)。将兔可变轻链序列与人类同源物比对，同时保持框架和CDR区域的规划。
实例:在图2中，将RbtVL序列与人类同源性序列L12A比对，指出框架和CDR结构域。
6.将人类同源轻链序列CDR1和CDR2区域用来自兔序列的CDR1和CDR2序列代替。如果在兔和人CDR序列之间在长度上存在差异，则使用完整兔CDR序列和其长度。如果进行较小或较大的序列交换，或如果特异性残基改变，所得的人源化抗体的特异性、亲和性和/或免疫原性可以不改变，这是可行的，然而所述的交换已经成功地使用，但是不排除允许其它交换的可能性。
实例：在图2中，将人类同源可变轻链L12A的CDRl和CDR2氨基酸残基用来自RbtVL兔抗体轻链序列的CDR1和CDR2氨基酸序列代替。人类L12A框架1,2和3未改变。所得的人源化序列示于以下作为来自编号1至88的残基的VLh。注意与L12A人类序列不同的唯一残基加下划线，并且因而为兔-源氨基酸残基。在该实例中仅88个残基中的8个与人类序列不同。
7.在步骤6中形成的新杂交序列的框架3之后，连接兔轻链抗体序列的完整CDR3。CDR3序列可以具有各种长度，但是典型地长度上为9至15个基酸残基。CDR3区域和之后的框架4区域的开端由本领域技术人员经典地定义和鉴定。典型地框架4的开端，和从而在CDR3的末端之后由序列'FGGG...'构成，然而一些变化可以在这些残基中存在。
实例:在图2中，将RbtVL的CDR3(编号89-100的氨基酸残基)添加在作为VLh指出的人源化序列中的框架3的末端之后。
8.将兔轻链框架4用最接近的人轻链框架4同源物(通常来自于种系序列)代替，所述兔轻链框架4典型地为可变轻链的最后11个氨基酸残基，并且以上述步骤7中所述开始和典型地以氨基酸序列'...VVKR'终止。该人类轻链框架4常常具有序列'FGGGTKVEIKR'。可以使用不是最高同源性的或否则不同的其它人类轻链框架4序列而不影响所得的人源化抗体的特异性、亲和性和/或免疫原性，这是可行的。将该人类轻链框架4序列添加至紧接在来自上述步骤7的CDR3序列之后的可变轻链人源化序列的末端。其现在为可变轻链人源化氨基酸序列的末端。
实例:在图2中，RbtVL兔轻链序列的框架4(FR4)在同源人类FR4序列之上示出。将人类FR4序列添加至正好在上述步骤7中添加的CD3区域的末端之后的人源化的可变轻链序列(VLh)。
重链
1.为信号肽序列之后第一个氨基酸的氨基酸的鉴定。这是框架1的起点。信号肽在第一起始蛋氨酸处开始，并且对于兔重链蛋白序列典型地长度上为19氨基酸。典型地，但不总是必需地兔重链信号肽的最后3个氨基酸残基为‘...VQC’，在框架1的起点之后。成熟多肽的起点还可以经验地通过N-末端蛋白测序确定，或可以使用预测算法预测。按照本领域技术人员经典地定义，其还是框架1的起点。
实例：图2中的RbtVH氨基酸残基，起点‘QEQL…’。
2.框架3末端的鉴定。其典型地为框架1的起点后的95-100氨基酸，并且典型地具有'...CAR'的最终序列(虽然丙氨酸还可以为缬氨酸)。按照本领域技术人员经典地定义，其是框架3的末端。
实例:在图2中的RbtVH氨基酸残基98，以'...FCVR'终止。
3.使用如上定义的从框架1的开端开始至框架3的末端的多肽的兔轻链序列，并且对于最相似的人类抗体蛋白序列进行序列同源性搜索。这将典型地为在抗体成熟之前针对人类种系序列的搜索，以降低免疫原性的可能性，然而可以使用任何人类序列。典型地程序例如BLAST可用于就最高同源搜索序列数据库。人类抗体序列的数据库可以从各种来源例如NCBI(国家生物技术信息中心)发现。
实例：将来自图2中编号1至98的残基的RbtVH氨基酸序列针对人类抗体种系数据库进行BLAST。上部三个独特返回的序列以3-64-04,3-66-04,和3-53-02示于图2。
4.通常最高同源性的人类种系可变重链序列然后用作用于人源化的基础。然而本领域技术人员可以决定使用另一序列，其不具有通过同源性算法所确定的最高同源性，而基于其它因素包括序列空位和框架相似性。
实例:在图2中的3-64-04为最高同源性的人类种系可变轻链序列，并且用作RbtVH人源化的基础。
5.针对用于重链人源化的人类同源物确定框架和CDR排列(FR1,FR2,FR3,CDR1&CDR2)。其按照本领域所述使用传统的规划(layout)。将兔可变重链序列与人类同源物比对，同时保持框架和CDR区域的规划。
实例:在图2中，将RbtVH序列与人类同源序列3-64-04比对，指出框架和CDR结构域。
6.将人类同源重链序列CDR1和CDR2区域用来自兔序列的CDR1和CDR2序列代替。如果在兔和人CDR序列之间在长度上存在差异，则使用完整兔CDR序列和其长度。此外，可能必需用兔重链框架1的最后3个氨基酸代替人重链框架1的最后3个氨基酸。典型地但不是总是，在兔重链框架1中这三个残基在甘氨酸残基(丝氨酸残基之前)之后，。此外，可能必需用兔重链框架2的最后氨基酸代替人重链框架2的最后氨基酸。典型地但不是总是，其在兔重链框架2中为异亮氨酸残基之前的甘氨酸残基。如果进行较小或较大的序列交换，或如果特异性残基改变，所得的人源化抗体的特异性、亲和性和/或免疫原性可以不改变，这是可行的，然而所述的交换已经成功地使用，但是不排除允许其它交换的可能性。色氨酸氨基酸残基典型地出现在兔重链CDR2区域的末端之前的4个残基，而在人类重链CDR2中该残基典型地为丝氨酸氨基。在该位置将该兔色氨酸残基改变为人丝氨酸残基已经证明对人源化抗体的特异性或亲和性具有最小化影响至无影响，并且从而进一步最小化兔序列-衍生的氨基酸残基在人源化序列中的含量。
实例:在图2中，将人类同源可变重链的CDRl和CDR2氨基酸残基用来自RbtVH兔抗体轻链序列的CDR1和CDR2氨基酸序列代替，除了框起来(boxed)的残基之外，其在兔序列中为色氨酸(位置编号63)，在人序列中的相同位置处为色氨酸，并且保持为人丝氨酸残基。除了CDR1和CDR2变化之外，框架1的最后3个氨基酸(位置28-30)以及框架2的最后氨基酸(位置49)保留为兔氨基酸残基而不是人。所得的人源化序列示于以下作为来自编号1至98的残基的VHh。注意与3-64-04人类序列不同的唯一残基加下划线，并且因而为兔-源氨基酸残基。在该实例中仅98个残基中的15个与人类序列不同。
7.在步骤6中形成的新杂交序列的框架3之后，连接兔重链抗体序列的完整CDR3。CDR3序列可以具有各种长度，但是典型地长度上为5至19个基酸残基。CDR3区域和之后的框架4区域的开端由本领域技术人员经验地定义和鉴定。典型地框架4的开端，和从而在CDR3的末端之后由序列WGXG...构成(其中X通常为Q或P)，然而一些变化可以在这些残基中存在。
实例:将RbtVH的CDR3(编号99-110的氨基酸残基)添加在作为VHh指出的人源化序列中的框架3的末端之后。
8.将兔重链框架4用最接近的人重链框架4同源物(通常来自于种系序列)代替，所述兔重链框架4典型地为可变重链的最后11个氨基酸残基，并且如上述步骤7中所述开始和典型地以氨基酸序列'...TVSS'终止。该人类重链框架4常常具有序列'WGQGTLVTVSS'。可以使用不是最高同源性的或否则不同的其它人类重链框架4序列而不影响所得的人源化抗体的特异性、亲和性和/或免疫原性，这是可行的。将该人类重链框架4序列添加至紧接在来自上述步骤7的CDR3序列之后的可变重链人源化序列的末端。其现在为可变重链人源化氨基酸序列的末端。
实例:在图2中，RbtVH兔重链序列的框架4(FR4)在同源人类重链FR4序列之上示出。将人类FR4序列添加至正好在上述步骤7中添加的CD3区域的末端之后的人源化的可变重链序列(VHh)。
用于产生抗体及其片段的方法
本发明还涉及本文所述的抗体或其片段的产生。与本文所述的抗体或其片段相对应的重组多肽从交配的感受态酵母的多倍体，优选二倍体或四倍体菌株分泌。在示例性的实施方式中，本发明涉及用于使用包括多倍体酵母的培养物以分泌形式产生这些重组多肽延长的时间的方法，即，至少几天至一个周，更优选至少一个月或几个月，和更优选至少6个月至1年或更长。这些多倍体酵母培养物将表达至少10-25mg/升多肽，更优选至少50-250mg/升,仍更优选至少500-1000mg/升,和最优选1克每升或更多的重组多肽。
在本发明的一个实施方式中将基因标记的酵母单倍体细胞的对用包括所期望的异源多聚体蛋白的亚单位的表达载体转化。一种单倍体细胞包括第一表达载体，第二单倍体细胞包括第二表达载体。在另一实施方式中二倍体酵母细胞将用一种或多种表达载体转化，所述一种或多种表达载体提供一种或多种重组多肽的表达和分泌。在另一实施方式中单一单倍体细胞可以用一种或多种载体转化并用于通过融合或交配策略产生多倍体酵母。在另一实施方式中，二倍体酵母培养物可以用一种或多种载体转化，所述一种或多种载体提供所期望多肽的表达和分泌。这些载体可以包括这样载体，例如线性质粒或其它线性DNA产物，其通过同源重组，或使用重组酶例如Cre/Lox或Flp/Frt，随机地整合入酵母细胞的基因组。任选地，另外的表达载体可以导入单倍体或二倍体细胞；或第一或第二表达载体可以包括另外的编码序列；以用于异三聚体、异四聚体的合成；等等。不相同的(non-identical)的多肽的表达水平可以单独地校正，并且通过合适的选择、载体拷贝数、启动子强度和/或诱导等调整。将转化的单倍体细胞遗传上杂交或融合。所得的二倍体或四倍体菌株用于产生和分泌完全组装的和生物学上的功能蛋白、本文所述的人源化抗体或其片段。
将二倍体或四倍体细胞用于蛋白质产生提供意想不到的益处。该细胞可以在可以对单倍体细胞的生长是有害的条件下生长一段延长的时期以用于生产目，即扩增，所述条件可以包括高细胞密度；在基本培养基(minimal media)中生长；在低温下生长；在选择压力的缺失下稳定生长；并且其可以提供异源基因序列完整性的维持和长时间高水平表达的维持。不希望受此限制，发明人推理这些益处可以至少部分由从两个不同亲本单倍体菌株形成二倍体菌株引起。此类单倍体菌株可以包括许多小的自发突变(autotrophic mutation)，所述突变在二倍体或四倍体中互补(complement)，允许在高选择条件下生长和生产增加。
转化的交配感受态单倍体酵母细胞提供能够使所期望蛋白的亚单位配对的遗传方法。单倍体酵母菌株用两个表达载体中的每一种转化，第一载体指导一种多肽链的合成，第二载体指导第二、不相同的多肽链的合成。将两种单倍体菌株交配以提供二倍体宿主，其中可以获得优化的靶蛋白生产。
任选地，提供另外的非相同的编码序列。此类序列可以在另外的表达载体上或在第一或第二表达载体中呈递。如本领域已知，多种编码序列可以独立地从单独地启动子表达；或可以通过包括"内部核糖体进入位点"或"IRES"协同地表达，其为促进直接内部核糖体进入顺反子(蛋白质编码区域)的起始密码子，例如ATG的元件，由此导致基因的帽非依赖性翻译(cap-independent translation)。在酵母中的IRES元件功能由Thompson等.(2001)P.N.A.S.98:12866-12868描述。
在本发明的一个实施方式中，抗体序列与分泌J链协同产生，所述分泌J链提供IgA的增强的稳定性(参见美国专利Nos.5,959,177；和5,202,422)。
在优选实施方式中，两种单倍体酵母菌株各自是营养缺陷的，需要培养基的补充以用于单倍体细胞的生长。营养缺陷体的配对是互补的，以使二倍体产物将在单倍体所需的补充物的缺失下生长。在酵母中已知许多此类遗传标记，包括对于氨基酸(例如met,lys,his,arg,等),核苷(例如ura3,ade1,等)的要求；等等。对于本发明方法可以优化氨基酸标记。作为选择包含所期望载体的二倍体细胞可以通过其它手段，例如通过使用其它标记，例如绿色荧光蛋白、抗生素抗性基因、各种主要选择标记等选择。
两种转化的单倍体细胞可以遗传上杂交，并且由该交配事件产生的二倍体菌株通过其杂交营养要求和/或抗生素抗性谱选择。作为选择，将两种转化的单倍体菌株的群体原生质球化和融合，并且再产生和选择二倍体后代。通过任一种方法，二倍体菌株可以基于其在与其亲本不同的培养基上生长的能力来鉴定和选择性生长。例如，二倍体细胞可以在包括抗生素的基本培养基中生长。二倍体合成策略具有某些优点。二倍体菌株通过与内在的突变较广泛的互补具有产生增强水平的同源蛋白的潜力，所述内在的突变可以影响重组蛋白的产生和/或分泌。此外，一旦已经获得稳定的菌株，用于选择这些菌株的任何抗生素不必需地需要连续地存在于生长培养基中。
如上指出，在某些实施方式中单倍体酵母可以用单一的或多种载体转化，并且与未转化的细胞交配或融合，以产生包含载体的二倍体细胞。在其它实施方式中，二倍体酵母细胞可以用一种或多种载体转化，其通过二倍体酵母细胞提供所期望异源多肽的表达和分泌。
在本发明的一个实施方式中，两种单倍体菌株用多肽的文库，例如抗体重链或轻链的文库转化。合成所述多肽的转化的单倍体细胞与互补的单倍体细胞交配。所得的二倍体细胞就功能蛋白筛选。二倍体细胞提供快速、方便和便宜的聚集大量用于功能性测试的多肽的组合的手段。该技术特别适合于异二聚体蛋白产物的产生，其中优化的亚单位合成水平对于功能蛋白表达和分泌是关键的。
在本发明的另一实施方式中，调节两种亚单位的表达水平比以最大化产物产生。异二聚体亚单位蛋白水平之前已经显示影响终产物产生(Simmons LC,J Immunol Methods.2002 May l；263(l-2):133-47)。调节可以在交配步骤之前通过就在表达载体上呈递的标记选择来实现。通过稳定地增加载体的拷贝数，表达水平可以增加。在某些情况下，可能需要增加一条链相对于另一条链的水平，以实现多肽的亚单位之间的平衡比例。抗生素抗性标记对于此目的是有用的，例如Zeocin抗性标记，G418抗性等，并且提供通过就对更高水平的Zeocin或G418有抗性的转化体选择，富集在菌株中的包含表达载体的多个整合的拷贝的菌株的手段。亚单位基因的合适比，例如1:1；1:2；等对于有效的蛋白产生可以是重要的。即使当使用相同的启动子以转录两种亚单位时，许多其它因子影响表达的蛋白质的最终水平，并且因此，其可以用于增加一种编码基因相对于另一种的拷贝数。作为选择，相对于单一拷贝载体菌株产生更高水平的多肽的二倍体菌株，通过将两种单倍体菌株(两种菌株都具有多拷贝的表达载体)交配来形成。
将宿主细胞用上述表达载体转化，交配以形成二倍体菌株，并且在合适改性的传统营养培养基中培养以用于诱导启动子、选择转化体或扩增编码所期望序列的基因。许多适合酵母生长的基本培养基在本领域是已知的。任何这些培养基可以按需要补充有盐(例如氯化钠、钙、镁和磷酸盐)、缓冲液(例如磷酸盐,HEPES)、核苷(例如腺苷和胸腺嘧啶核苷)、抗生素、痕量元素和葡萄糖或等效的能源。任何其它需要的补充物也可以以对本领域技术人员为已知的合适的浓度包括。培养条件，例如温度、pH等，为就表达选择宿主细胞之前所使用的那些，并且对本领域技术人员而言是明显的。
将分泌蛋白从培养基中回收。蛋白酶抑制剂，例如苯甲基磺酰氟(PMSF)可用于抑制纯化期间的蛋白裂解降解，并且可以包括抗生素以防止偶然的污染物生长。组合物可以使用本领域已知的方法浓缩、过滤、透析等。
使本发明的二倍体细胞生长以用于生产目的。此类生长目的期望地包括在基本培养基中生长，所述培养基缺乏预形成的氨基酸和其它复合生物分子，例如包括氨作为氮源、葡萄糖作为能源和碳源，以及盐作为磷酸盐、钙等来源的盐的培养基。优选地此类生产培养基缺乏选择性试剂例如抗生素、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。二倍体细胞可以生长至高细胞密度，例如至少约50g/L；更通常至少约100g/L；以及可以为至少约300,约400,约500g/L或更多。
在本发明的一个实施方式中，用于生产目的的主题细胞的生长在低温下进行，所述温度可以在对数期期间、稳定期期间或二者同时降低。术语"低温"是指温度至少约15℃,更通常至少约17℃,以及可以为约20℃,并且通常不超过约25℃,更通常不超过约22℃。在本发明的另一实施方式中，低温通常不超过约28℃。生长温度可以影响在生长培养基中全长分泌蛋白的生产，并且降低培养生长温度可以强烈地增强完整产物产生。降低的温度似乎有助于通过宿主使用的折叠和翻译后加工途径的胞内运输，以产生靶产物，并伴随着细胞蛋白酶降解的降低。
本发明的方法提供分泌的活性蛋白，优选哺乳动物蛋白的表达。在一个实施方式中，如本文所用的分泌的"活性抗体"，是指正确折叠的至少两个合适配对链的多聚体，其精确地与其相应抗原结合。活性蛋白的表达水平通常至少约10-50mg/升培养物,更通常至少约100mg/升,优选至少约500mg/升,并且可以为1000mg/升或更多。
本发明的方法可以提供生产期间宿主和异源编码序列的增加的稳定性。稳定性是例如通过维持高水平的时间表达证明，其中表达的起始水平在约20次加倍(doublings),50次加倍,100次加倍,或更多上降低不超过约20％,通常不超过10％,以及可以降低不超过约5％。
菌株稳定性还提供长时间异源基因序列完整性的维持，其中活性编码序列和所需的转录调控元件的序列在约20次加倍(doublings),50次加倍,100次加倍,或更多上在至少约99％的二倍体细胞,通常在至少约99.9％的二倍体细胞,优选在至少约99.99％的二倍体细胞中维持。优选地，基本上所有的二倍体细胞维持活性编码序列以及所需转录调控元件的序列。
生产抗体的其它方法对于本领域技术人员而言是已知的。例如，生产嵌合抗体的方法现在在本领域是已知的(参见,例如,美国专利No.4,816,567 to Cabilly等.；Morrison等.,P.N.A.S.USA,81:8651-55(1984)；Neuberger,M.S.等.,Nature,314:268-270(1985)；Boulianne,G.L.等.,Nature,312:643-46(1984),此处将其各自的内容以其全文引入以作参考)。
同样地，生产人源化抗体的其它方法现在在本领域是已知的(参见,例如,美国专利Nos.5,530,101,5,585,089,5,693,762,and6,180,370to Queen等；美国专利Nos.5,225,539 and 6,548,640to Winter；美国专利Nos.6,054,297,6,407,213 and 6,639,055 toCarter等；美国专利No.6,632,927 to Adair；Jones,P.T.等,Nature,321:522-525(1986)；Reichmann,L.,等,Nature,332:323-327(1988)；Verhoeyen,M,等,Science,239:1534-36(1988),此处将其各自的内容以其全文引入以作参考)。
具有IL-6结合特异性的本发明的抗体多肽可以通过构建(使用本领域技术人员已知的传统技术)包含操纵子和编码抗体重链的DNA序列的表达载体，其中编码抗体特异性所需的CDR的所述DNA序列衍生自非人类细胞来源，优选兔B-细胞来源，而编码抗体链剩余部分的DNA序列衍生自人类细胞来源。
第二表达载体使用本领域技术人员已知的相同传统手段生产，包含操纵子和编码抗体轻链的DNA序列的表达载体衍生自非人类细胞来源，优选兔B-细胞来源，，其中所述DNA序列编码抗体特异性所需的CDR而编码抗体链剩余部分的DNA序列衍生自人类细胞来源。
将表达载体通过本领域技术人员已知的传统技术转染入宿主细胞，以产生转染的宿主细胞，通过本领域技术人员已知的传统技术培养的所述转染的宿主细胞产生抗体多肽。
宿主细胞可以用上述两种表达载体共转染，第一表达载体包含编码操纵子和轻链-衍生多肽的DNA，第二载体包含编码操纵子和重链-衍生多肽的DNA。两种载体包含不同的选择标记，但优选基本上实现重链和轻链多肽的相等表达。作为选择，单一载体可以使用，所述载体包括编码重链和轻链多肽二者的DNA。用于重链和轻链的编码序列可以包括cDNA。
用于表达抗体多肽的宿主细胞可以为细菌细胞例如大肠杆菌(E.coli)，或真核细胞。在本发明特别优选的实施方式中，为此目的良好定义类型的哺乳动物细胞，例如骨髓瘤细胞或中国仓鼠卵巢(CHO)细胞系可以使用。
可以构建载体的一般方法，产生宿主细胞所需的转染方法和从所述宿主细胞产生抗体多肽所需的培养方法都包括传统技术。尽管优选用于产生抗体的细胞系为哺乳动物细胞系，任何其它合适的细胞系，例如细菌细胞系，例如大肠杆菌-衍生的细菌菌株，或酵母细胞系，可以备选地使用。
类似地，一旦产生，抗体多肽可以根据本领域的标准方法纯化，例如错流过滤、硫酸铵沉淀、亲和柱色谱等。
本文所述的抗体多肽还可以用于设计和合成肽或非肽模拟物，其将用于与本发明的抗体多肽相同的治疗应用。参见,例如,Saragobi等,Science,253:792-795(1991)，将其内容以其全文引入本文以作参考。
筛选检验
本发明还包括筛选检验，其设计成有助于在显示IL-6相关疾病或障碍的症状的患者中鉴定与IL-6相关的疾病和障碍。
在本发明的一个实施方式中，本发明的抗-IL-6抗体或其IL-6结合片段，用于在获自患者的生物样品中检测IL-6的存在，所述患者显示与IL-6相关的疾病或障碍的症状。IL-6的存在，或当与在可比较的生物样品中IL-6的疾病前水平相比其升高的水平，可以有利于诊断与IL-6相关的疾病和障碍。
本发明的另一实施方式提供诊断或筛选检验以有助于诊断在显示与IL-6相关的疾病或障碍的症状的患者中的与IL-6相关的疾病或障碍，包括使用翻译后修饰的抗-IL-6抗体或其结合片段检验来自所述患者的生物样品中的IL-6表达水平。抗-IL-6抗体或其结合片段可以翻译后修饰以包括例如本说明书之前提出的可检测部分。
生物样品中的IL-6水平如下确定：使用本文提出的修饰的抗-IL-6抗体或其结合片段，并且将生物样品中的IL-6水平与IL-6的标准水平(例如，正常生物样品中的水平)比较。熟练的临床医生将理解在正常生物样品之间可以存在某些变化，并且当评价结果时可以考虑这个。
上述检验还可以用于监视疾病或障碍，其中将在来自认为具有与IL-6相关的疾病或障碍的患者的生物样品中获得的IL-6水平，与来自相同患者的之前生物样品中的IL-6水平相比，以确定在所述患者中的IL-6水平随着例如治疗方案已经改变。
本发明还涉及体内成像的方法，其检测表达IL-6的细胞的存在，包括给药诊断有效量的的诊断组合物。所述体内成像用于检测和成像表达IL-6的肿瘤和转移瘤以及表达IL-6的炎症位点，例如，可以用作设计方案的部分以用于设计有效的癌症或关节炎治疗策略。所述治疗策略可以包括，例如，放射、化疗、细胞因子治疗、基因治疗和抗体治疗的一种或多种，以及抗-IL-6抗体或其片段。
熟练的临床医生将理解生物样品包括但不限于，血清、血浆、尿、粘液、胸水、滑液和脊髓液。
改善或降低与IL-6相关的疾病或障碍的症状，或治疗，或预防与IL-6相关的疾病或障碍的方法
在本发明的另一实施方式中,本文所述的抗-IL-6抗体，或其片段，对于改善或降低与IL-6相关的疾病或障碍的症状，或治疗，或预防与IL-6相关的疾病或障碍是有用的。本文所述的抗-IL-6抗体，或其片段，还可以以以下更详细描述的药物组合物的形式，以治疗有效量给药给需要治疗与IL-6相关的疾病和障碍的患者。
在本发明的一个实施方式中,本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低与疲劳相关的疾病和障碍的症状，或治疗，或预防与疲劳相关的疾病和障碍是有用的。与疲劳相关的疾病和障碍包括但不限于，四肢无力、运动性疲劳、癌症相关性疲劳、炎症疾病相关性疲劳、慢性疲劳综合症。参见,例如,Esper DH,等,The cancercachexia syndrome:a review of metabolic and clinicalmanifestations,Nutr Clin Pract.,2005 Aug；20(4):369-76；Vgontzas AN,等,IL-6 and its circadian secretion in humans,Neuroimmunomodulation,2005；12(3):131-40；Robson-Ansley,PJ,等,Acute interleukin-6 administration impairs athleticperformance in healthy,trained male runners,Can J ApplPhysiol.,2004 Aug；29(4):411-8；Shephard RJ.,Cytokineresponses to physical activity,with particular reference toIL-6:sources,actions,and clinical implications,Crit RevImmunol.,2002；22(3):165-82；Arnold,MC,等,Using aninterleukin-6 challenge to evaluate neuropsychologicalperformance in chronic fatigue syndrome,Psychol Med.,2002Aug；32(6):1075-89；Kurzrock R.,The role of cytokines incancer-related fatigue,Cancer,2001 Sep 15；92(6Suppl):1684-8；Nishimoto N,等,Improvement in Castleman's disease byhumanized anti-interleukin-6 receptor antibody therapy,Blood,2000 Jan 1；95(1):56-61；Vgontzas AN,等,Orcadianinterleukin-6 secretion and quantity and depth of sleep,J ClinEndocrinol Metab.,1999 Aug；84(8):2603-7；and Spath-SchwalbeE,等,Acute effects of recombinant human interleukin 6 onendocrine and central nervous sleep functions in healthy men,J Clin Endocrinol Metab.,1998 May；83(5):1573-9；此处将其各自的内容以其全文引入以作参考。
在本发明的优选实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低与恶病质相关的疾病和障碍的症状，或治疗，或预防与恶病质相关的疾病和障碍是有用的。与恶病质相关的疾病和障碍包括但不限于，癌症相关性恶病质、心脏相关性恶病质(cardiac-relatedcachexia)、呼吸性相关性恶病质(respiratory-related cachexia)、肾相关性恶病质、年龄相关性恶病质(age-related cachexia)。参见,例如,Barton,BE.,Interleukin-6 and new strategies for thetreatment of cancer,hyperproliferative diseases andparaneoplastic syndromes,Expert Opin Ther Targets,2005Aug；9(4):737-52；Zaki MH,等,CNTO 328,a monoclonal antibodyto IL-6,inhibits human tumor-induced cachexia in nude mice,Int J Cancer,2004 Sep 10；lll(4):592-5；Trikha M,等,Targetedanti-interleukin-6 monoclonal antibody therapy for cancer:areview of the rationale and clinical evidence,Clin Cancer Res.,2003Oct 15；9(13):4653-65；Lelli G,等,Treatment of the canceranorexia-cachexia syndrome:a critical reappraisal,JChemother.,2003 Jun；15(3):220-5；Argiles JM,等,Cytokines inthe pathogenesis of cancer cachexia,Curr Opin Clin Nutr MetabCare,2003 Jul；6(4):401-6；Barton BE.,IL-6-like cytokines andcancer cachexia:consequences of chronic inflammation,ImmunolRes.,2001；23(l):41-58；Yamashita JI,等,Medroxyprogesteroneacetate and cancer cachexia:interleukin-6 involvement,BreastCancer,2000；7(2):130-5；Yeh SS,等,Geriatric cachexia:therole of cytokines,Am J Clin Nutr.,1999 Aug；70(2):183-97；Strassmann G,等,Inhibition of experimental cancer cachexiaby anti-cytokine and anti-cytokine-receptor therapy,CytokinesMol Ther.,1995 Jun；l(2):107-13；Fujita J,等,Anti-interleukin-6 receptor antibody prevents muscleatrophy in colon-26 adenocarcinoma-bearing mice withmodulation of lysosomal and ATP-ubiquitin-dependentproteolytic pathways,Int J Cancer,1996 Nov 27；68(5):637-43；Tsujinaka T,等,Interleukin 6 receptor antibody inhibitsmuscle atrophy and modulates proteolytic systems in interleukin6 transgenic mice,J Clin Invest.,1996 Jan 1；97(1):244-9；Emilie D,等,Administration of an anti-interleukin-6monoclonal antibody to patients with acquired immunodeficiencysyndrome and lymphoma:effect on lymphoma growth and on Bcl inical Symptoms,Blood,1994 Oct 15；84(8):2472-9；andStrassmann G,等,Evidence for the involvement of interleukin6 in experimental cancer cachexia,J Clin Invest.,1992May；89(5):1681-4；此处将其各自的内容以其全文引入以作参考。
在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低自体免疫疾病和障碍的症状，或治疗，或预防自体免疫疾病或障碍是有用的。与自体免疫相关的疾病和障碍包括但不限于，类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、系统性幼年特发性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节病、强直性脊柱炎、炎性肠病(IBD)、风湿性多肌痛、巨细胞性动脉炎、自体免疫性血管炎、移植物抗宿主病(GVHD)、舍格伦综合症(Sjogren's syndrome)、成人型史笛儿氏症(adultonset Still's disease)。在本发明的优选实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低类风湿性关节炎和系统性幼年特发性关节炎的症状，或治疗，或预防类风湿性关节炎和系统性幼年特发性关节炎是有用的。参加,例如,Nishimoto N.,Clinicalstudies in patients with Castleman's disease,Crohn's disease,and rheumatoid arthritis in Japan,Clin Rev Allergy Immunol.,2005 Jun；28(3):221-30；Nishimoto N,等,Treatment ofrheumatoid arthritis with humanized anti-interleukin-6receptor antibody:a multicenter,double-blind,placebo-controlled trial,Arthritis Rheum.,2004 Jun；50(6):1761-9；Choy E.,Interleukin 6 receptor as a target for thetreatment of rheumatoid arthritis,Ann Rheum Dis.,2003 Nov；62Suppl 2:ii68-9；Nishimoto N,等,Toxicity,pharmacokinetics,and dose-finding study of repetitive treatment with thehumanized anti-interleukin 6 receptor antibody MR A inrheumatoid arthritis.Phase I/II clinical study,J Rheumatol.,2003 Jul；30(7):1426-35；Mihara M,等,Humanized antibody tohuman interleukin-6 receptor inhibits the development ofcollagen arthritis in cynomolgus monkeys,Clin Immunol.,2001Mar；98(3):319-26；Nishimoto N,等,Anti-interleukin 6 receptorantibody treatment in rheumatic disease,Ann Rheum Dis.,2000Nov；59 Suppl l:i21-7；Tackey E,等,Rationale for interleukin-6blockade in systemic lupus erythematosus,Lupus,2004；13(5):339-43；Finck BK,等,Interleukin 6 promotes murinelupus in NZB/NZW Fl mice,J Clin Invest.,1994 Aug；94(2):585-91；Kitani A,等,Autostimulatory effects of EL-6 on excessive Bcell differentiation in patients with systemic lupuserythematosus:analysis of IL-6 production and IL-6R expression,Cl in Exp Immunol.,1992 Apr；88(l):75-83；Stuart RA,等,Elevated serum interleukin-6 levels associated with activedisease in systemic connective tissue disorders,Clin ExpRheumatol.,1995 Jan-Feb；13(1):17-22；Mihara M,等,IL-6receptor blockage inhibits the onset of autoimmune kidneydisease in NZB/W Fl mice,Clin Exp Immunol.,1998Jun；12(3):397-402；Woo P,等,Open label phase II trial ofsingle,ascending doses of MRA in Caucasian children with severesystemic juvenile idiopathic arthritis:proof of principle ofthe efficacy of IL-6 receptor blockade in this type of arthritisand demonstration of prolonged clinical improvement,ArthritisRes Ther.,2005；7(6):RI281-8.Epub 2005 Sep 15；Yokota S,等,Clinical study of tocilizumab in children with systemic-onsetjuvenile idiopathic arthritis,Clin Rev Allergy Immunol.,2005Jun；28(3):231-8；Yokota S,等,Therapeutic efficacy ofhumanized recombinant anti-interleukin-6 receptor antibody inchildren with systemic-onset juvenile idiopathic arthritis,Arthritis Rheum.,2005 Mar；52(3):818-25；de Benedetti F,等,Targeting the interleukin-6 receptor:a new treatment forsystemic juvenile idiopathic arthritis？,Arthritis Rheum.,2005 Mar；52(3):687-93；De Benedetti F,等,Is systemic juvenilerheumatoid arthritis an interleukin 6 mediated disease？,JRheumatol.,1998 Feb；25(2):203-7；Ishihara K,等,IL-6 inautoimmune disease and chronic inflammatory proliferativedisease,Cytokine Growth Factor Rev.,2002 Aug-Oct；13(4-5):357-68；Gilhar A,等,In vivo effects of cytokines onpsoriatic skin grafted on nude mice:involvement of the tumornecrosis factor(TNF)receptor,Clin Exp Immunol.,1996 Oct；106(1):134-42；Spadaro A,等,Interleukin-6 and solubleinterleukin-2 receptor in psoriatic arthritis:correlationswith clinical and laboratory parameters,Clin Exp Rheumatol.,1996 Jul-Aug；14(4):413-6；Ameglio F,etal,Interleukin-6 andtumor necrosis factor levels decrease in the suction blisterfluids of psoriatic patients during effective therapy,Dermatology,1994；189(4):359-63；Wendling D,等,Combinationtherapy of anti-CD4 and anti-IL-6 monoclonal antibodies in acase of severe spondylarthropathy,Br J Rheumatol.,1996Dec；35(12):1330；Gratacos J,等,Serum cytokines(IL-6,TNF-alpha,IL-1 beta and IFN-γ)in ankylosing spondylitis:aclose correlation between serum IL-6 and disease activity andseverity,Br J Rheumatol.,1994 Oct；33(10):927-31；Ito H.,Treatment of Crohn's disease with anti-IL-6 receptor antibody,J Gastroenterol.,2005 Mar；40 Suppl 16:32-4；Ito H,等,A pilotrandomized trial of a human anti-interleukin-6 receptormonoclonal antibody in active Crohn's disease,Gastroenterology,2004 Apr；126(4):989-96；discussion 947；ItoH.,IL-6 and Crohn's disease,Curr Drug Targets Inflamm Allergy,2003 Jun；2(2):12530；Ito H,等,Anti-EL-6 receptor monoclonalantibody inhibits leukocyte recruitment and promotes T-cellapoptosis in a murine model of Crohn's disease,J Gastroenterol.,2002 Nov；37 Suppl 14:56-61；Ito H.,Anti-interleukin-6 therapyfor Crohn's disease,Curr Pharm Des.,2003；9(4):295-305；Salvarani C,等,Acute-phase reactants and the risk ofrelapse/recurrence in polymyalgia rheumatica:a prospectivefollow-up study,Arthritis Rheum.,2005 Feb 15；53(l):33-8；Roche NE,等,Correlation of interleukin-6 production anddisease activity in polymyalgia rheumatica and giant cellarteritis,Arthritis Rheum.,1993 Sep；36(9):128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在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低与骨骼系统相关的疾病和障碍的症状，或治疗，或预防与骨骼系统相关的疾病或障碍是有用的。与骨骼系统相关的疾病或障碍包括但不限于骨关节炎、骨质疏松症和骨骼柏杰氏疾病(Paget'sdisease of bone)。在本发明的优选实施方式中，本文所述的人源化抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低骨关节炎的症状，或治疗，或预防骨关节炎是有用的。参见，例如，Malemud CJ.,Cytokines astherapeutic targets for osteoarthritis,BioDrugs,2004；18(l):23-35；Westacott CI,et al,Cytokines inosteoarthritis:mediators or markers of joint destruction？,Semin Arthritis Rheum.,1996 Feb；25(4):254-72；Sugiyama T.,Involvement of interleukin-6 and prostaglandin E2 in particularosteoporosis of postmenopausal women with rheumatoid arthritis,J Bone Miner Metab.,2001；19(2):89-96；Abrahamsen B,et al,Cytokines and bone loss in a 5-year longitudinal study-hormonereplacement therapy suppresses serum soluble interleukin-6receptor and increases interleukin-1-receptor antagonist:theDanish Osteoporosis Prevention Study,J Bone Miner Res.,2000Aug；15(8):1545-54；Straub RH,et al,Hormone replacementtherapy and interrelation between serum interleukin-6 and bodymass index in postmenopausal women:a population-based study,J Clin Endocrinol Metab.,2000 Mar；85(3):1340-4；Manolagas SC,The role of IL-6 type cytokines and their receptors in bone,Ann N Y Acad Sci.,1998 May l；840:194-204；Ershler WB,et al,Immunologic aspects of osteoporosis,Dev Comp Immunol.,1997Nov-Dec；21(6):487-99；Jilka RL,et al,Increased osteoclastdevelopment after estrogen loss:mediation by interleukin-6,Science,1992 Jul 3；257(5066):88-91；Kallen KJ,et al,Newdevelopments in IL-6 dependent biology and therapy:where dowe stand and what are the options？,Expert Opin Investig Drugs,1999 Sep；8(9):1327-49；Neale SD,et al,The influence of serumcytokines and growth factors on osteoclast formation in Paget'sdisease,QJM,2002 Apr；95(4):233-40；Roodman GD,Osteoclastfunction In Paget's disease and multiple myeloma,Bone,1995Aug；17(2Suppl):57S-61S；Hoyland JA,et al,Interleukin-6,IL-6receptor,and IL-6 nuclear factor gene expression in Paget'sdisease,J Bone Miner Res.,1994 Jan；9(l):75-80；and RoodmanGD,et al,Interleukin 6.A potential autocrine/paracrinefactor in Paget's disease of bone,J Clin Invest.,1992Jan；89(l):46-52；此处将其各自的内容以其全文引入以作参考。
在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低与癌症相关的疾病和障碍的症状，或治疗，或预防与癌症相关的疾病或障碍是有用的。与癌症相关的疾病或障碍包括但不限于多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、白血病、肾细胞癌、多中心性巨大淋巴结增生症(multicentricCastleman's disease)、卵巢癌、癌症化疗中的药物抗性和癌症化疗毒性。参见,例如，Hirata T,et al,Humanized anti-interleukin-6receptor monoclonal antibody induced apoptosis of fresh andcloned human myeloma cells in vitro,Leuk Res.,2003Apr；27(4):343-9,Bataille R,et al,Biologic effects ofanti-interleukin-6 murine monoclonal antibody in advancedmultiple myeloma,Blood,1995 Jul 15；86(2):685-91；Goto H,etal,Mouse anti-human interleukin-6 receptor monoclonalantibody inhibits proliferation of fresh human myeloma cellsin vitro,Jpn J Cancer Res.,1994 Sep；85(9):958-65；Klein B,et al,Murine anti-interleukin-6 monoclonal antibody therapyfor a patient with plasma cell leukemia,Blood,1991 Sep1；78(5):1198-204；Mauray S,et al,Epstein-Barrvirus-dependent lymphoproliferative disease:critical role ofIL-6,Eur J Immunol,2000 Jul；30(7):2065-73；Tsunenari T,etal,New xenograft model of multiple myeloma and efficacy of ahumanized antibody against human interleukin-6 receptor,Blood,1997 Sep 15；90(6):2437-44；Emilie D,et al,Interleukin-6production in high-grade B lymphomas:correlation with thepresence of malignant immunoblasts in acquiredimmunodeficiency syndrome and in human immunodeficiencyvirus-seronegative patient s,Blood,1992 Jul15；80(2):498-504；Emilie D,et al,Administration ofan anti-interleukin-6 monoclonal antibody to patients withacquired immunodeficiency syndrome and lymphoma:effect onlymphoma growth and on B clinical Symptoms,Blood,1994 Oct 15；84(8):2472-9；Smith PC,et al,Anti-interleukin-6 monoclonalantibody induces regression of human prostate cancer xenograftsin nude mice,Prostate,2001 Jun 15；48(l):47-53；Smith PC,etal,Interleukin-6 and prostate cancer progression,CytokineGrowth Factor Rev.,2001 Mar；12(l):33-40；Chung TD,et al,Characterization of the role of IL-6 in the progression ofprostate cancer,Prostate,1999 Feb 15；38(3):199-207；OkamotoM,et al,Interleukin-6 as a paracrine and autocrine growthfactor in human prostatic carcinoma cells in vitro,Cancer Res.,1997 Jan l；57(l):141-6；Reittie JE,et al,Interleukin-6inhibits apoptosis and tumor necrosis factor inducedproliferation of B-ehronic lymphocytic leukemia,Leuk Lymphoma,1996 Jun；22(l-2):83-90,follow 186,color plate VI；SugiyamaH,et al,The expression of IL-6 and its related genes in acuteleukemia,Leuk Lymphoma,1996 Mar；21(l-2):49-52；Bataille R,et al,Effects of an anti-interleukin-6(IL-6)murinemonoclonal antibody in a patient with acute monoblasticleukemia,Med Oncol Tumor Pharmacother.,1993；10(4):185-8；Kedar I,et al,Thalidomide reduces serum C-reactive proteinand interleukin-6 and induces response to IL-2 in a fractionof metastatic renal cell cancer patients who failed IL-2-basedtherapy,hit J Cancer,2004 Jun 10；110(2):260-5；Angelo LS,Talpaz M,Kurzrock R,Autocrine interleukin-6 production inrenal cell carcinoma:evidence for the involvement of p53,Cancer Res.,2002 Feb l；62(3):932-40；Nishimoto N,Humanizedanti-interleukin-6 receptor antibody treatment of multicentricCastleman disease,Blood,2005 Oct 15；106(8):2627-32,Epub 2005Jul 5；Katsume A,et al,Anti-interleukin 6(IL-6)receptorantibody suppresses Castleman's disease like symptoms emergedin IL-6 trans genie mice,Cytokine,2002 Dec 21；20(6):304-ll；Nishimoto N,et al,Improvement in Castleman's disease byhumanized anti-interleukin-6 receptor antibody therapy,Blood,2000 Jan 1；95(1):56-61；Screpanti I,Inactivation of the IL-6gene prevents development of multicentric Castleman's diseasein C/EBP beta-deficient mice,J Exp Med.,1996 Oct 1；184(4):1561-6；Hsu SM,et al,Expression of interleukin-6 inCastleman's disease,Hum Pathol.,1993 Aug；24(8):833-9；Yoshizaki K,etal,Pathogenic significance of interleukin-6(IL6/BSF-2)in Castleman's disease,Blood,1989 Sep；74(4):1360-7；Nilsson MB,et al,Interleukin-6,secreted by human ovariancarcinoma cells,is a potent proangiogenic cytokine,CancerRes.,2005 Dec 1；65(23):10794-800；Toutirais O,et al,Constitutive expression of TGF-betal,interleukin-6 andinterleukin-8 by tumor cells as a major component of immuneescape in human ovarian carcinoma,Eur Cytokine Netw.,2003Oct-Dec；14(4):246-55；Obata NH,et al,Effects of interleukin6 on in vitro cell attachment,migration and invasion of humanovarian carcinoma,Anticancer Res.,1997 Jan-Feb；17(lA):337-42；Dedoussis GV,et al,Endogenous interleukin 6conveys resistance to cis-diamminedichloroplatinum-mediatedapoptosis of the K562 human leukemic cell line,Exp Cell Res.,1999 Jun 15；249(2):269-78；Borsellino N,et al,Blockingsignaling through the Gpl30 receptor chain by interleukin-6 andoncostatin M inhibits PC-3 cell growth and sensitizes the tumorcells to etoposide and cisplatin-mediated cytotoxicity,Cancer,1999 Jan 1；85(1):134-44；Borsellino N,et al,Endogenousinterleukin 6 is a resistance factor forcis-diamminedichloroplatinum and etoposide-mediatedcytotoxicity of human prostate carcinoma cell lines,CancerRes.,1995 Oct 15；55(20):4633-9；Mizutani Y,et al,Sensitization of hu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在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低与以下疾病的症状，或治疗，或预防以下疾病是有用的：缺血性心脏病、动脉粥样硬化、肥胖症、糖尿病、哮喘、多发性硬化、阿尔茨海默病、脑血管疾病、发烧、急性期反应、过敏、贫血、炎症性贫血(慢性病贫血)、高血压、抑郁症、慢性疾病相关抑郁症、血栓形成、血小板增多症、急性心力衰竭、代谢综合症、流产、肥胖症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎性疾病、再灌注损伤和移植排斥。参见,例如,Tzoulaki I,et al,C-reactive protein,interleukin-6,and soluble adhesion molecules as predictors ofprogressive peripheral atherosclerosis in the generalpopulation:Edinburgh Artery Study,Circulation,2005 Aug16；112(7):976-83,Epub 2005 Aug 8；Rattazzi M,et al,C-reactiveprotein and interleukin-6 in vascular disease:culprits orpassive bystanders？,J Hypertens.,2003Oct；21(10):1787-803；Ito T,et al,HMG-CoA reductase inhibitors reduce interleukin-6synthesis in human vascular smooth muscle cells,CardiovascDrugs Ther.,2002 Mar；16(2):121-6；Stenvinkel P,et al,Mortality,malnutrition and atherosclerosis in ESRD:what isthe role of interleukin-6？,Kidney Int Suppl.,2002 May；(80):103-8；Yudkin JS,et al,Inflammation,obesity,stress andcoronary heart disease:is interleukin-6 the link？,Atherosclerosis,2000 Feb；148(2):209-14；Huber SA,et al,Interleukin-6 exacerbates early atherosclerosis in mice,Arterioscler Thromb Vase Biol.,1999 Oct；19(10):2364-7；KadoS,et al,Circulating levels of interleukin-6,its solublereceptor and interleukin-6/interleukin-6 receptor complexes inpatients with type 2 diabetes mellitus,Acta Diabetol.,1999Jun；36(l-2):67-72；Sukovich DA,et al,Expression ofinterleukin-6 in atherosclerotic lesions of male ApoE-knockoutmice:inhibition by 17beta-estradiol,Arterioscler Thromb VaseBiol.,1998 Sept；8(9):1498-505；Klover PJ,et al,Interleukin-6depletion selectively improves hepatic insulin action inobesity,Endocrinology,2005 Aug；146(8):3417-27,Epub 2005 Apr21；Lee YH,et al,The evolving role of inflammation in obesityand the metabolic syndrome,Curr Diab Rep.,2005 Feb；5(l):70-5；Diamant M,et al,The association between abdominal visceralfat and carotid stiffness is mediated by circulatinginflammatory markers in uncomplicated type 2 diabetes,J ClinEndocrinol Metab.,2005 Mar；90(3):1495-501,Epub 2004 Dec 21；Bray GA,Medical consequences of obesity,J Clin EndocrinolMetab.,2004 Jun；89(6):25839；Klover PJ,et al,Chronicexposure to interleukin-6 causes hepatic insulin resistance inmice,Diabetes,2003 Nov；52(ll):2784-9；Yudkin JS,et al,Inflammation,obesity,stress and coronary heart disease:isinterleukin-6 the link？,Atherosclerosis,2000Feb；148(2):209-14；Doganci A,et al,Pathological role of IL-6in the experimental allergic bronchial asthma in mice,Clin RevAllergy Immunol.,2005 Jun；28(3):257-70；Doganci A,et al,TheIL-6R alpha chain controls lung CD4+CD25+Treg development andfunction during allergic airway inflammation in vivo,J ClinInvest.,2005 Feb；115(2):31325,(Erratum in:J Clin Invest.,2005 May；115(5):1388,Lehr,Hans A[added])；Stelmasiak Z,etal,IL 6 and sIL-6R concentration in the cerebrospinal fluidand serum of MS patients,Med Sci Monit.,2001Sep-Oct；7(5):914-8；Tilgner J,et al,Continuous interleukin-6application in vivo via macroencapsulation ofinterleukin-6-expressing COS-7 cells induces massive gliosis,Glia,2001 Sep；35(3):234-45,Brunello AG et al,Astrocyticalterations in interleukin-6 Soluble interleukin-6 receptoralpha double-transgenic mice,Am J Pathol.,2000 Nov；157(5):1485-93；Hampel H,et al,Pattern of interleukin-6 receptorcomplex immunoreactivity between cortical regions of rapidautopsy normal and Alzheimer's disease brain,Eur ArchPsychiatry Clin Neurosci.,2005 Aug；255(4):269-78,Epub 2004Nov 26；Cacquevel M,et al,Cytokines in neuroinflammation andAlzheimer's disease,Curr Drug Targets,2004 Aug；5(6):529-34；Quintanilla RA,et al,Interleukin 6 induces Alzheimer-typephosphorylation of tau protein by deregulating the cdk5/p35pathway,Exp Cell Res.,2004 Apr 15；295(l):245-57；GadientRA,et al,Interleukin-6(IL-6)～a molecule with bothbeneficial and destructive potentials,Prog Neurobiol.,1997Aug；52(5):379-90；Hull M,et al,Occurrence of interleukin-6in cortical plaques of Alzheimer's disease patients may precedetransformation of diffuse into neuritic plaques,Ann N Y AcadSci.,1996 Jan 17；777:205-12；Rallidis LS,et al,Inflammatorymarkers and in-hospital mortality in acute ischaemic stroke,Atherosclerosis,2005 Dec 30；Emsley HC,et al,Interleukin-6and acute ischaemic stroke,Acta Neurol Scand.,2005Oct；112(4):273-4；Smith CJ,et al,Peak plasma interleukin-6and other peripheral markers of inflammation in the first weekof ischaemic stroke correlate with brain infarct volume,strokeseverity and long-term outcome,BMC Neurol.,2004 Jan 15；4:2；Vila N,et al,Proinflammatory cytokines and early neurologicalworsening in ischemic stroke,Stroke,2000Oct；31(10):2325-9；and Tarkowski E,et al,Early intrathecal production ofinterleukin-6 predicts the size of brain lesion in stroke,Stroke,1995Aug；26(8):1393-8；此处将其各自的内容以其全文引入以作参考。
在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，对于改善或降低与细胞因子风暴相关的疾病和障碍的症状，或治疗，或预防与细胞因子风暴相关的疾病或障碍是有用的。与细胞因子风暴相关的疾病或障碍包括但不限于，移植物抗宿主病(GVHD)、禽流感、天花、大流行性感冒、成人呼吸窘迫综合症(ARDS)、严重急性呼吸道综合症(SARS)、败血症和全身炎症反应综合症(SIRS)。参见，例如，Cecil,R.L.,Goldman,L.,&Bennett,J.C.(2000).Ceciltextbook of medicine.Philadelphia:W.B.Saunders；Ferrara JL,et al.,Cytokine storm of graft-versus-host disease:a criticaleffector role for interleukin-1,Transplant Proc.1993Feb；25(lPt 2):1216-7；Osterholm MT,Preparing for the Next Pandemic,N Engl J Med.2005 May 5；352(18):1839-42；Huang KJ,et al.,An interferon-gamma-related cytokine storm in SARS patients,J Med Virol.2005 Feb；75(2):185-94；and Cheung CY,et al.,Induction of proinflammatory cytokines in human macrophages byinfluenza A(H5N1)viruses:a mechanism for the unusual severityof human disease？Lancet.2002Dec 7；360(9348):1831-7。
在本发明的另一实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其片段，用作失眠援助(wakefulness aid)。
给药
在本发明的一个实施方式中，将本文所述的抗-IL-6抗体或其IL-6结合片段，以及所述抗体片段的组合以接受受试者体重的约0.1至20mg/kg,例如约0.4mg/kg,约0.8mg/kg,约1.6mg/kg,或约4mg/kg的浓度给药给受试者。在本发明的优选实施方式中，将本文所述的抗-IL-6抗体或其IL-6结合片段，以及所述抗体片段的组合以接受受试者体重的约0.4mg/kg的浓度给药给受试者。在本发明的优选实施方式中，将本文所述的抗-IL-6抗体或其IL-6结合片段，以及所述抗体片段的组合以每26周以下一次，例如每16周以下一次，每8周以下一次，每4周以下一次的频率给药给受试者。
将理解有效剂量可以依赖于接受受试者的属性，例如比如，年龄、性别、怀孕状况、体重指数、瘦体重、组合物给予的条件、可能影响组合物代谢或耐受性的接受受试者的其它健康条件、在接受受试者中的IL-6水平和组合物的抗性(例如由针对组合物发展抗体的患者产生)。本领域技术人员将能够通过例行试验，确定给药的有效剂量和频率，例如通过本文内容和以下的教导来指导：Goodman,L.S.,Gilman,A.,Brunton,L.L.,Lazo,J.S.,&Parker,K.L.(2006).Goodman&Gilman's the pharmacological basis of therapeutics.New York:McGraw-Hill；Howland,R.D.,Mycek,M.J.,Harvey,R.A.,Champe,P.C,&Mycek,M.J.(2006).Pharmacology.Lippincott'sillustrated reviews.Philadelphia:Lippincott Williams&Wilkins；and Golan,D.E.(2008).Principles of pharmacology:the pathophysiologic basis of drug therapy.Philadelphia,Pa.,[etc.]:Lippincott Williams&Wilkins。
在本发明的另一实施方式中，将本文所述的抗-IL-6抗体或其IL-6结合片段，以及所述抗体片段的组合以药物制剂的形式给药给受试者。
"药物组合物"是指适合给药给哺乳动物的化学或生物学组合物。此类组合物可以特别地配制以用于通过许多途径中的一种或多种给药，包括但不限于脸颊、表皮(epicutaneous)、硬膜外的、吸入、动脉内、心脏内、脑室内、皮内、肌肉内、鼻内、眼内、腹膜内、脊柱内、膜内、静脉内、经口、胃肠外、通过灌肠剂或栓剂直肠给药、皮下(subcutaneous)、皮下(subdermal)、舌下、透皮和透粘膜给药。此外，给药可以借助于注射、粉末、液体、凝胶、滴剂或其它给药手段发生。
在本发明的一个实施方式中，本文所述的抗-IL-6抗体或其IL-6结合片段，以及所述抗体片段的组合，可以任选地与一种或多种活性剂组合给药。此类活性剂包括止痛剂、退热剂、消炎剂、抗生素、抗病毒剂和抗细胞因子剂。活性剂包括以下的激动剂、拮抗剂和调节剂：TNF-α、IL-2,IL-4,IL-6,IL-10,IL-12,IL-13,IL-18,IFN-α,IFN-γ,BAFF,CXCL13,IP-10,VEGF,EPO,EGF,HRG，肝细胞生长因子(HGF)，海帕西啶(Hepcidin)、包括针对任何上述的反应性抗体，并且针对任何其受体的反应性抗体。活性剂还包括2-芳基丙酸、乙酰氯芬酸(Aceclofenac)、阿西美辛、乙酰水杨酸(阿司匹林)、阿氯芬酸、阿明洛芬、Amoxiprin、氨基安替比林、芳基链烷酸(Arylalkanoicacids)、阿扎丙酮、扑炎痛/贝诺酯、苯恶洛芬、溴芬酸、卡布洛芬、塞来考昔、三水杨酸胆碱镁、氯非宗、COX-2抑制剂、右布洛芬、右酮洛芬、双氯芬酸、双氟尼酸、屈噁昔康、乙柳酰胺、乙妥多来、艾托考昔、Faislamine、灭酸、芬布芬、非诺洛芬、氟灭酸、氟诺洛芬、氟比洛芬、布洛芬、异丁普生、吲哚美辛、吲哚洛芬、酮保泰松、酮洛芬、酮咯酸、氯诺昔康、氯索洛芬、罗美昔布(Lumiracoxib)、水杨酸镁、甲氯灭酸、甲灭酸、美洛昔康、安乃近(Metamizole)、水杨酸甲酯、莫非保松、萘普酮、纳普罗森、N-芳基邻氨基苯甲酸、奥沙美辛、奥沙普秦(Oxaprozin)、氧昔康、羟保松、帕瑞考昔、非那宗、苯基丁氮酮、苯基丁氮酮、吡罗昔康、吡洛芬、布洛芬(profens)、丙谷美辛、吡唑烷衍生物、罗非考昔、双水杨酸、水杨酰胺、水杨酸盐(酯)、苯磺唑酮、舒林酸、舒洛芬、替诺昔康、噻洛芬酸、托灭酸、托美汀和伐地考昔。抗生素包括丁胺卡那霉素、胺基糖甙、阿莫西林、氨苄青霉素、安沙霉素类、胂凡纳明、阿奇霉素、阿洛西林、噻肟单酰胺菌素、杆菌肽素、碳头孢烯、碳青霉烯类、羧苄青霉素、头孢氯、头孢羟氨苄、头孢氨苄、头孢噻吩(Cefalothin)、头孢噻吩(Cefalotin)、头孢孟多、头孢唑林、头孢地尼、头孢托仑、头孢吡肟、头孢克肟、头孢哌酮、头孢噻肟、头孢西丁、头孢泊肟、头孢丙烯、头孢噻甲羧肟、头孢布坦、头孢唑肟、头孢比普、头孢三氧酮、头孢呋新、头孢菌素、氯霉素、西司他丁、环丙沙星、克拉仙霉素、氯林可霉素、氯唑西林、黏菌素、复方新诺明(Co-trimoxazole)、达福普汀、地美环素、双氯青霉素、地红霉素、多利培南、强力霉素、依诺沙星、厄他培南(Ertapenem)、红霉素、乙胺丁醇、氟氯西林、磷霉素、呋喃唑酮、夫西地酸、加替沙星、格尔德霉素、庆大霉素、糖肽、除莠霉素、亚胺培南、异烟肼、卡那霉素、左氧氟沙星、林肯霉素、利奈唑胺、洛米沙星、氯拉卡比、大环内酯、磺胺米隆、美罗培南、甲氧西林、甲硝哒唑、美洛西林、二甲胺四环素、单环β-内酰胺类、莫西沙星、莫匹罗星、萘夫西林、新霉素、乙基西梭霉素、硝基呋喃妥英、诺氟沙星、氧氟沙星、苯唑西林(Oxacillin)、土霉素、巴龙霉素、青霉素、青霉素类、哌拉西林、平板霉素(Platensimycin)、多粘菌素B、多肽、百浪多息、吡嗪酰胺、喹诺酮、奎奴普丁、利福平(Rifampicin)、利福平(Rifampin)、罗红霉素、大观霉素、链霉素、磺胺醋酰、磺胺甲二唑、磺胺(Sulfanilimide)、柳氮磺胺吡啶、磺胺异恶唑(Sulfisoxazole)、磺胺类、替考拉宁、泰利霉素、四环素、四环素类、提卡西林、替硝唑、托普霉素、三甲氧下二氨嘧啶、三甲氧下二氨嘧啶-磺胺甲恶唑、醋竹桃霉素、曲伐沙星、和万古霉素。活性剂还包括醛固酮、倍氯米松、倍他米松、皮质激素类、氢化可的松、醋酸可的松、醋酸脱氧皮质酮、地塞米松、醋酸氟氢可的松、糖皮质激素类、氢化可的松(Hydrocortisone)、甲泼尼龙、氢化泼尼松、泼尼松、类固醇、和曲安西龙。抗病毒剂包括阿巴卡韦、阿昔洛维、阿昔洛韦、阿德福韦、金刚胺、安泼那韦、抗逆转录病毒固定剂量复合制剂(an antiretroviral fixed dose combination)、抗逆转录病毒协同增强剂(an antiretroviral synergistic enhancer)、阿比朵尔、阿扎那韦、atripla、溴夫定、西多福韦、可比韦(combivir)、地瑞纳韦、地拉夫定、地达诺新、二十二烷醇、依度尿苷、依法韦仑、恩曲西他平(emtricitabine)、恩夫韦地、恩替卡韦、进入抑制剂、泛西洛维、福米韦生、福沙那韦(fosamprenavir)、膦甲酸、膦乙醇、融合抑制剂、更昔洛韦、加德西(gardasil)、伊巴他滨、碘苷、咪喹莫特、异丙肌苷(imunovir)、印地那韦、肌苷、整合酶抑制剂、干扰素、干扰素型I、干扰素型II、干扰素型III、拉米夫定、洛匹那韦、洛韦胺、马拉维若(maraviroc)、MK-0518、吗啉胍、那非那韦、奈韦拉平、多吉美(nexavir)、核苷类似物、奥塞米韦、喷西洛维、帕拉米韦(peramivir)、普来可那立、足叶草毒素、蛋白酶抑制剂、逆转录酶抑制剂、三氮唑核苷、金刚乙胺、利托那韦、沙奎那韦、司他夫定、替诺福韦、替诺福韦二吡呋酯(tenofovir disoproxil)、替拉那韦(tipranavir)、三氟尿苷、三协韦(trizivir)、醋胺金刚烷、恩曲他滨和替诺福韦(truvada)、缬昔洛韦、缬更昔洛韦、CCR5突触拮抗剂(vicriviroc)、阿糖腺苷、viramidine、扎西他宾、扎那米韦、和齐多呋定。还可以涉及这些活性剂的任何合适的组合。
"药物赋形剂"或"药学上可接受的赋形剂"为载体，通常液体，在其中配置活性治疗剂。在本发明的一个实施方式中，活性治疗剂为本文所述的人源化抗体，或其一种或多种片段。赋形剂通常不提供任何药理学活性给制剂，尽管其可能提供化学和/或生物稳定性，以及释放特性。示例性的制剂可以例如在Remington's PharmaceuticalSciences,19th Ed.,Grennaro,A.,Ed.,1995中发现，将其引入以作参考。
如本文所用"药学上可接受的载体"或"赋形剂"包括任何和全部溶剂、分散介质、包衣、抗菌剂和抗真菌剂、等渗和吸收延迟剂，其为生理学上相容的。在一个实施方式中，载体适合胃肠外给药。作为选择，载体可以适合于静脉内、腹膜内、肌肉内或舌下给药。药学上可接受的载体包括无菌水溶液或分散液和无菌粉末以用于临时制备无菌注射液或分散液。对于药学上的活性物质此类介质和试剂的使用在本领域是已知的。除非任何传统介质或试剂与该活性化合物不相容，在本发明药物组合物中的其使用是预期的。补充的活性化合物也可以引入该组合物。
药物组合物典型地在制备和贮存条件下必需是无菌和稳定的。本发明涉及药物组合物以冻干形式存在。该组合物可以配制成溶液、微溶液、脂质体或适合高药物浓度的其它有序结构。载体可以为溶剂或分散介质，其包含例如水、乙醇、多元醇(例如，甘油、丙二醇和液体聚乙二醇)，及其合适的混合物。本发明进一步涉及在药物组合物中包括稳定剂。
在许多情况下，在组合物中优选包括等渗剂，例如糖、多元醇例如甘露醇、山梨醇或氯化钠。注射化合物的延长吸收可以通过在组合物中包括延迟吸收的试剂，例如单硬脂酸盐和凝胶引起。此外，碱性多肽可以配制在缓释制剂中，例如包括缓释聚合物的组合物中。活性化合物可以与将保护化合物免受快速释放的载体一起配制，例如受控释放的制剂，包括植入物和微胶囊递送系统。可以使用可生物降解的生物相容性聚合物，例如乙烯-醋酸乙烯、聚酐、聚乙醇酸、胶原、聚原酸酯、聚乳酸和聚乳酸、聚乙醇酸共聚物(PLG)。用于制备此类制剂的许多方法对本领域技术人员而言已知的。
对于各所述实施方式，化合物可以通过各种剂型给药。涉及对于本领域技术人员已知的任何生物学上-可接受的剂型，或其组合。此类剂型的实例不限制地包括，可复水粉末、酏剂、液体、溶液、悬浮液、乳剂、粉末、颗粒剂(granules)、颗粒剂(particles)、微粒剂、可分散颗粒剂、扁囊剂、吸入剂、气溶胶吸入剂、贴剂、颗粒吸入剂、移植物、补给移植物(depot implants)、注射剂(包括皮下、肌肉内、静脉内和皮内)、浸剂和其组合。
各种举例说明的本发明实施方式的上述描述不旨在为穷举的或限制本发明之描述的精确形式。尽管用于本发明的具体实施方式和实例此处描述以用于举例说明目的，各种等效的变形可以在本发明的范围内，这将被本领域技术人员承认。除了上述的实例之外，本发明的此处提供的教导可以用于其它目的。
根据上述详细描述，对于本发明可以形成这些和其它变化。通常，在以下权利要求中，所用术语不应该将本发明限制到本说明书和权利要求所述的具体实施方式。因此，本发明不受说明书限制，但是反而本发明的范围可以通过以下权利要求整体地确定。
本发明可以以除了特别在以上描述和实例中所述的那些之外的方式实施。根据上述教导本发明的许多变形和变化是可行的，并且因此在所附的权利要求的范围内。
与用于获得抗原特异性B细胞的克隆群体的方法相关的特定教导描述于2006年5月19日提交的美国临时专利申请号60/801,412，其内容此处将其全文引入以作参考。
与兔-衍生单克隆抗体和保持抗原结合亲和性的优选序列变形的人源化的特定教导公开于国际申请号________，对应于代理人案号(Attorney Docket No.)67858.701802，题目″Novel Rabbit AntibodyHumanization Method and Humanized Rabbit Antibodies″，2008年5月21日提交，其内容此处以其全文引入以作参考。
与使用交配感受态酵母和相应方法产生抗体或其片段的特定教导公开于2006年5月8日提交的美国专利申请号11/429,053美国专利申请公开号US2006/0270045)，其内容此处以其全文引入以作参考。
与IL-6抗体相关的特定教导，使用交配感受态酵母和相应方法产生抗体或其片段的方法公开于2007年5月21日提交的美国临时专利申请号60/924,550，其内容此处以其全文引入以作参考。
特定的抗-IL-6抗体多核苷酸和多肽记载于提交的本专利申请所附的序列表中，并且所述序列表的内容此处以其全文引入以作参考。
在本发明的背景技术、详细描述和实施例中引用的各文档(包括专利、专利申请、期刊文献、摘要、手册、书籍或其它内容)的全部内容此处以其全文引入以作参考。
提出以下实施例以提供本领域技术人员以如何制备和使用本发明的完整内容和描述，并且不旨在现在关于本发明的范围。关于所用数值(例如量、温度、浓度等)已经付出努力以确保精度，但是应该容许一些实验误差和偏差。除非另外指出，份为重量份，分子量为平均分子量，温度为摄氏度，以及压力为大气压或接近大气压。
实施例
实施例1富集的抗原特异性B细胞抗体培养物的生产
抗体板(Panels of antibodies)通过免疫传统的抗体宿主动物衍生来开发针对目的靶抗原的天然免疫应答。典型地，用于免疫的宿主为兔或使用类似的成熟方法产生抗体的其它宿主，并且提供抗原特异性B细胞的群体，所述抗原特异性B细胞产生可比较多样性的抗体，例如表位多样性。起始抗原免疫可以使用完全氟式佐剂(CFA)进行，随后的增强用不完全佐剂实现。在免疫后约50-60天，优选在第55天，测试抗体滴度，并且如果确定合适的滴度，则开始抗体选择(ABS)过程。用于ABS引发的两个关键标准为在多克隆血清中的有力的抗原识别和功能-修饰活性。
确立阳性抗体滴度时，将动物杀死并且分离B细胞源。这些来源包括：脾、淋巴结、骨髓和外周血单核细胞(PBMCs)。产生单一细胞悬浮液，将细胞悬浮液洗涤以使它们对低温长期贮存适应。然后将细胞典型地冷冻。
为了启动抗体鉴定过程，将冷冻细胞悬浮液的小片段解冻、洗涤并置于组织培养基。这些悬浮液然后与所述生物素化形式的抗原混合，其用于产生动物免疫应答，使用Miltenyi磁珠细胞选择方法回收抗原特异性细胞。使用链霉亲和素珠进行特异的富集。将富集的群体回收和在特异B细胞分离的下一阶段中处理(progressed)。
实施例2包含克隆的抗原特异性B细胞的培养物的产生
根据实施例1产生的富集的B细胞然后以变化的细胞密度每孔在96孔微量滴定板中铺平板。通常，其以50,100,250,或500细胞每孔，每组使用10个板。培养基补充有4％激活的兔T细胞条件培养基以及50K冷冻辐射的EL4B饲养细胞。这些培养物不受干扰地静置5-7天，此时将包含分泌抗体的上清液收集并就在分别的检验设置中评价目的性质。剩余的上清液保持原样，将板在-70℃下冷却。在这些条件下，培养过程典型地产生包含混合的细胞群体的孔，其包括抗原特异性B细胞的克隆群体，即，单一孔将仅包含对所期望抗原特异的单一的单克隆抗体。
实施例3用于所期望特异性和/或功能性质的单克隆抗体的抗体上清液的筛选
将根据实施例2产生的衍生自包含克隆的抗原特异性B细胞群体的孔的包含抗体的上清液使用ELISA方法就抗原识别最初筛选。这包括选择性抗原固定(例如，通过链霉亲和素包被的板的生物素化抗原的捕获)、非特异性抗原板包被，或作为选择，通过抗原积累(antigenbuild-up)策略(例如，选择性抗原捕获，然后添加结合伴侣以产生异聚蛋白质-抗原复合物)。抗原-阳性孔上清液然后任选地在严格地依赖于配体的功能-修饰检验中测试。一个此类实例为体外蛋白质-蛋白质相互作用检验，其重新形成抗原配体与重组受体蛋白的天然相互作用。作为选择，使用为配体依赖性并且容易监视(例如，增殖应答)的基于-细胞的应答。认为显示显著抗原识别和潜能的上清液为阳性孔。衍生自最初阳性孔的细胞然后转变到抗体回收阶段。
实施例4：所期望抗原特异性的单一的、抗体-产生B细胞的回收
将细胞从包含抗原特异性B细胞(根据实施例2或3产生)的克隆群体分离，所述抗原特异性B细胞分泌单一抗体序列。分离的细胞然后被检验以分离单一的抗体-分泌细胞。Dynal链霉亲和素珠用生物素化的靶抗原在缓冲介质下包被以制备包含抗原的微珠，其与细胞活力相容。接下来在37℃下孵育抗原-加载的珠、来自阳性孔的抗体-产生细胞和异硫氰酸荧光素(FITC)-标记的抗-宿主H&L IgG抗体(注意，宿主可以为任何哺乳动物宿主，例如兔、小鼠、大鼠等)。该混合物然后再移液成在载玻片上的等分试样，以使每一等分试样具有平均的单一的抗体-产生B细胞。抗原特异性的抗体-分泌细胞然后通过荧光显微镜检测。分泌的抗体由于结合抗原在相邻的珠上局部浓缩，并且基于强的荧光信号提供位置信息。抗体-分泌细胞通过与分泌细胞相邻形成的抗体-抗原复合物的FITC检测鉴定。在该复合物的中心发现的单一细胞然后使用显微操纵器回收。将该细胞在eppendorf PCR管中快速冷冻以在-80℃下贮存直到开始抗体序列回收。
实施例5来自抗原特异性B细胞的抗体序列的分离
抗体序列使用基于组合RT-PCR的方法从根据实施例4产生的单一分离的B细胞或分离自根据实施例2获得的克隆的B细胞群体的抗原特异性B细胞回收。引物设计成在靶免疫球蛋白基因(重或轻)，例如兔免疫球蛋白序列的保守且恒定区中退火，并且使用两步巢式PCR回收步骤以获得所述抗体序列。来自各孔的扩增子就回收和大小完整性进行分析。所得的片段然后用AluI消化以采集序列克隆性指纹(fingerprint)。相同的序列在其电泳分析中显示共同的片段模式。显著地，提供细胞克隆性的该共同的片段模式甚至在最初铺平板达1000细胞/孔的孔中也通常观察到。原始的重链和轻链扩增片段然后用HindIII和XhoI或HindIII和BsiWI限制酶消化以制备各段DNA以用于克隆。所得的消化物(digestions)然后连接入表达载体并转化入细菌以用于质粒增殖和生产。将克隆就序列特征选择。
实施例6所期望抗原特异性和/或功能性质的单克隆抗体的重组生产
确定用于包含单一的单克隆抗体的各孔的正确的全长抗体序列，并使用Qiagen固相法制备微量提取DNA(miniprep DNA)。该DNA然后用于转染哺乳动物细胞以产生重组的全长抗体。将粗抗体产物就抗原识别和功能性质测试以确认在重组抗体蛋白中发现最初的性质。在合适的情况下，完成大规模的瞬时哺乳动物转染，并且抗体通过蛋白A亲和色谱纯化。使用标准方法(例如,Biacore)评估Kd以及IC50在效价检验中评估。
实施例7结合人IL-6的抗体的制备
通过使用本文所述的抗体选择策略，可以产生大量的抗体的板。该抗体对IL-6具有高度亲和性(一位至双位数(single to doubledigit)的pM Kd)并且证明在基于多细胞的筛选系统(T1165和HepG2)中的IL-6的有效拮抗性。此外，抗体的收集显示对IL-6-驱动过程的拮抗性的不同模式。
免疫策略
将兔用huIL-6(R&R)免疫。免疫由以下组成：以完全氟式佐剂(CFA)(Sigma)第一皮下(sc)注射100μg，相隔两周后，两次增强50μg各不完全氟式佐剂(IFA)(Sigma)。使动物在第55天出血，通过ELISA(抗原识别)和非放射性增殖检验(Promega)使用T1165细胞系确定血清滴度。
抗体选择滴度评估
抗原识别通过用1μg/mL在磷酸盐缓冲生理盐水(PBS,Hyclone)中的huIL-6(50μl/孔)在4℃下包被Immulon 4板(Immulon 4plates)(Thermo)过夜来确定。在检验的那天，板用PBS/Tween 20(PBST tablets,Calbiochem)洗涤3次。板然后用200μl/孔的在PBS中的0.5％鱼皮凝胶(FSG,Sigma)在37℃下密封30分钟。除去密封溶液，并且将板吸干(blotted)。以1:100的起始稀释(所有稀释以FSG 50μl/孔进行)，然后以1:10稀释横越板(栏(column)12剩下空白以用于背景对照)制备(出血和出血前(pre-bleed))血清样品。将板在37℃下孵育30分钟。用PBS/Tween 20将板洗涤3次。将1:5000稀释羊抗兔FC-HRP(Pierce)添加至所有孔(50μl/孔)，并且将板在37℃下孵育30分钟。将板按照如上所述洗涤。50μl/孔的TMB-Stable stop(Fitzgerald Industries)添加至板，并且允许显色，通常3至5分钟。显色反应用50μl/孔的0.5M HCl停止。在450nm下将板读数。使用Graph Pad Prizm软件将光密度(OD)对稀释度绘图，并且确定滴度。
功能滴度评估
通过T1165增殖检验确定样品的功能活性。T1165细胞例行地维持在改性的RPMI培养基(Hyclone)中，所述培养基补充有Hepes、丙酮酸钠、碳酸氢钠、L-谷氨酰胺、高葡萄糖、青霉素/链霉素、10％热灭活的胎牛血清(FBS)(所有补充物来自Hyclone)、2-巯基乙醇(Sigma)和10ng/ml huIL-6(R&D)。在检验的那天，细胞活力通过台盼蓝(Invitrogen)确定，细胞以20,000细胞/孔的固定密度接种。接种前，在无人-IL-6的上述培养基中将细胞洗涤两次(通过在13000rpm下离心5分钟，并且弃去上清液)。最后一次洗涤后，将细胞以相当于50μl/孔的体积再悬浮于用于洗涤的相同培养基中。将细胞在室温下放置(set aside)。
在圆底的96孔板(Costar)中，横越板将血清样品在5个同样的试验(replicate)(行B至F：在无huIL-6的上述培养基中进行稀释)中以30μl/孔开始以1:100，然后以1:10的稀释添加(栏2至10)。栏11为仅用于IL-6对照的培养基。将30μl/孔的以最终EC50的4x浓度(之前确定的浓度)的huIL-6添加至所有孔(huIL-6稀释于如上所述的培养基中)。将孔在37℃下孵育1小时以允许抗体结合发生。1小时后，该板的图幅尺寸(map format)在圆底板中展开之后，50μl/孔的抗体-抗原(Ab-Ag)复合物转移至平底的96孔板(Costar)。在行G，将50μl/孔的培养基添加至所有孔(栏2至11)以用于背景对照。将50μl/孔的放置的细胞悬浮液添加至所有孔(栏2至11，行B至G)。在栏1和12和行A和H，添加200μl/孔的培养基以防止测试孔的蒸发和以最小化边缘效应。将板在37℃下在4％CO2中孵育72h。在第72h，20μl/孔的CellTiter96(Promega)试剂按照制造商策略添加至所有测试孔，并将板在37℃下孵育2h。在第2h，将板在轨道振荡器(orbital shaker)上轻轻地混合以分散细胞和以允许在测试孔中的均匀性。将板在490nm波长下读数。使用Graph Pad Prizm软件将光密度(OD)对稀释度绘图，并且确定最终滴度。阳性检验对照板使用MAB2061(R&D Systems)以1μg/mL(终浓度)的起始浓度然后1:3稀释在板上来如上所述进行。
组织收获
一旦确定可接受的滴度，将兔杀死。如下收获和加工脾、淋巴结和全血：
脾和淋巴结通过使组织分离(disassociating)，并挤过具有20cc注射器的活塞的无菌70μm金属丝网(Fisher)，来加工成单一的细胞悬浮液。细胞在无huIL-6，但具有低葡萄糖的上述改性RPMI培养基中收集。将细胞通过离心洗涤2次。最后一次洗涤后，细胞密度通过台盼蓝确定。细胞在1500rpm下离心10分钟，弃去上清液。将细胞再悬浮于在FBS(Hyclone)中的10％的二甲基亚砜(DMSO,Sigma)的合适体积中，并以1ml/瓶分散。在置于液氮(LN2)罐中长期贮存之前，将瓶然后贮存在-70℃下24h。
外周血单核细胞(PBMCs)通过将全血与等份的无FBS的上述低葡萄糖培养基混合来分离。35ml的全血混合物小心地在8ml LympholyteRabbit(Cedarlane)上分层进入45ml锥形管(Corning)，并不停止地在室温下在2500rpm下离心30分钟。离心后，PBMC层使用glassPasteur pipette(VWR)小心地除去，合并并置于干净的50ml瓶。用上述改性培养基通过在室温下在1500rpm下离心10分钟将细胞洗涤2次，通过台盼蓝染色确定细胞密度。最后洗涤后，将细胞再悬浮于合适体积的10％DMSO/FBS培养基中，并如上所述冷冻。
B细胞培养
在建立(setting up)B细胞培养物的那天，将PBMC,脾细胞,或淋巴结瓶解冻以使用。将瓶从LN2罐中取出并置于37℃水浴中直至解冻。瓶的内含物转移入15ml锥形离心管(Corning)，并将上述10ml改性RPMI缓慢地添加至管。细胞在1.5K rpm下离心5分钟，弃去上清液。将细胞再悬浮于10ml新鲜培养基中。细胞密度和活力通过台盼蓝确定。将细胞再次洗涤并以1E07细胞/80μl培养基再悬浮。生物素化的huIL-6(B huIL-6)以3μg/mL的终浓度添加至细胞悬浮液，并在4℃下孵育30分钟。未结合的B huIL-6用两次10ml的以下洗涤除去：磷酸盐-缓冲的(PBF):Ca/Mg无PBS(Hyclone)、2mM乙二胺四乙酸(EDTA)、0.5％胎牛血清白蛋白(BSA)(Sigma-无生物素)。第二次洗涤后，将细胞以1E07细胞/80μl PBF再悬浮。将20μl的链霉亲和素珠(Milteni)/10E7细胞添加至细胞悬浮液。细胞在4℃下孵育15分钟。将细胞用2ml的PBF/10E7细胞洗涤1次。洗涤后，细胞以1E08细胞/500μl PBF再悬浮，并放置。MS column(Milteni)用500ml PBF在磁性表架(magnetic stand)(Milteni)上预冲洗。通过预过滤器(pre-filter)将细胞悬浮液施涂至柱，并且收集未结合的级分。将柱用1.5ml PBF缓冲液洗涤。将柱从磁性表架取下并置于干净的无菌5ml聚丙烯离心管上。1ml PBF缓冲液添加至柱的顶部，并且收集阳性选择的细胞。阳性和阴性级分的产生和活力通过台盼蓝染色确定。阳性选择产生平均1％的起始细胞浓度。
建立试验细胞筛选以提供关于用于培养物接种水平的信息。三个10-板组(总共30个板)以50,100和200富集的B细胞/孔接种。此外，各孔以250μl/孔的终体积包含在高葡萄糖改性RPMI培养基中的50K细胞/孔的辐射的EL-4.B5细胞(5,000Rads)和合适水平的T细胞上清液(从1-5％，依赖于制剂)。将培养物在37℃下在4％CO2中孵育5至7天。
分泌选择抗体B细胞的鉴定
培养物就抗原识别和功能活性在5至7天之间测试。
抗原识别筛选
所用的ELISA形式如上所述，除了将50μl来自B细胞培养物(BCC)孔(所有30个板)的上清液用作抗体来源。将条件培养基转移到抗原包被的板。阳性孔鉴定后，将上清液除去并转移至96孔母板(masterplate)。最初的培养板然后通过除去所有的上清液冷冻，除了40μl/孔，并且添加60μl/孔的FBS中的16％DMSO。将板以纸巾包住以缓慢冷冻并放置于-70℃下。
功能活性筛选
母板然后就功能活性在如上所述T1165增殖检验中筛选，除了行B为仅用于背景对照的培养基，行C为用于阳性增殖对照的培养基+IL-6，并且行D-G和栏2-11为来自BCC(50μl/孔,单点)的孔。40μl的IL-6添加至所有孔，除了培养基行以2.5倍用于所述检验确定的EC50浓度之外。1h孵育后，将Ab/Ag复合物转移到组织培养物(TC)处理的、96孔、圆底板。20μl的在无huIL-6的改性RPMI培养基中的细胞悬浮液(T1165以20,000细胞/孔)添加至所有孔(100μl终体积每孔)。减去背景，并且观察的OD值转化成抑制％。
B细胞回收
将包含目的孔的板从-70℃取出，并且来自各孔的细胞用5-200μl洗涤物(washes)的培养基/孔回收。将洗涤物合并在1.5ml无菌离心管中，使细胞在1500rpm下成球团2分钟。
将管倒转，重复旋转，并且仔细地的除去上清液。将细胞再悬浮于100μl/管的培养基中。100μl生物素化的IL-6包被的链霉亲和素M280 dynabeads(Invitrogen)和在培养基中以1:100稀释的16μl的羊抗兔H&L IgG-FITC添加至细胞悬浮液中。
除去20μl细胞/珠/FITC悬浮液，并且在之前用Sigmacote(Sigma)处理的载玻片(Corning)上制备5μl小滴，35至40小滴/载玻片。加入不可渗透的石蜡油(JT Baker)屏障以浸没小滴，将载玻片在黑暗中在37℃,4％CO2下孵育90分钟。
产生抗体的特异性B细胞可以通过其周围的荧光环鉴定，所述其周围的荧光环由抗体分泌、珠-相连生物素化抗原的识别，以及通过荧光-IgG检测试剂的随后检测产生。一旦鉴定目的细胞，在荧光环中心的细胞经由显微操纵器(Eppendorf)回收。将合成和输出抗体的单一细胞转移入250μl微量离心管，并放在干冰中。回收所有目的细胞后，将这些转移至-70℃以长期贮存。
实施例8酵母细胞表达
抗体基因：克隆和构建基因，其指导嵌合的人源化兔单克隆抗体的合成。
表达载体:该载体包含以下功能组分：1)mutant ColEl的复制起点，其促进在细菌大肠杆菌(Escherichia coli)细胞中的质粒载体的复制；2)细菌Sh ble基因，其赋予对抗生素博莱霉素(Zeocin)的抗性和用作用于大肠杆菌(E.coli)和巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)二者转化的选择标记；3)表达盒，由以下组成：甘油醛脱氢酶基因(GAP基因)启动子，融合至编码酿酒酵母(Saccharomyces cerevisiae)α交配因子前原(pre pro)分泌前导序列，后面是来自巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)醇氧化酶I基因(AOX1)的编码巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)转录终止信号的序列。博莱霉素(Zeocin)抗性标记基因提供用于菌株的富集的手段，其通过就对更高水平的博莱霉素(Zeocin)有抗性的转化体选择在菌株中包含表达载体的多个整合的拷贝。
巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)菌株：可以使用巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)菌株met1,Lys3,ura3和ade1。尽管任何两套互补的营养缺陷型菌株可用于构建和维持二倍体菌株，这两种菌株由于两个原因特别适合于此方法。首先，它们比为它们交配或融合结果的二倍体菌株生长地更缓慢。这样，如果少量的单倍体ade1或ura3细胞仍然存在于培养物或通过减数分裂或其它机制引起，二倍体菌株应该在培养物中比它们长的快。
其次为容易监视这些菌株的性别状态，因为由于它们的交配产生的二倍体Ade+克隆为正常白或奶油色，而为单倍体ade1突变体的任何菌株的细胞将形成具有独特粉红色的克隆。此外，为单倍体ura3突变体的任何菌株对药物5-氟-乳清酸(FOA)有抗性，并且可以通过将培养物的样品在具有FOA的基本培养基+尿嘧啶板上铺平板敏感地鉴定。在这些板上，仅需要尿嘧啶的ura3突变体(推测为单倍体)菌株可以生长和形成克隆。这样，将单倍体亲本菌株用ade1和ura3标记，可以容易地监视所得抗体-产生二倍体菌株的性别状态(单倍体对二倍体)。
方法
用于轻链和重链抗体基因转录的pGAPZ-α表达载体的构建。将人源化轻链和重链片段通过PCR指导的方法克隆入pGAPZ表达载体。回收的人源化构建体在标准KOD聚合酶(Novagen)试剂盒条件下((1)94℃,2分钟；(2)94℃,30秒(3)55℃,30秒；(4)72℃,30秒-通过步骤2-4循环35次；(5)72℃ 2分钟)进行扩增，使用以下引物：(1)轻链正向AGCGCT GCTATCCAGATGACCCAGTC-AfeI位点为单下划线。HSA信号序列的末端为双下划线，后面是成熟可变轻链的序列(无下划线)；反向为CGTACGTTTGATTTCCACCTTG。
可变轻链反向引物。BsiWI位点加下划线，后面是可变轻链的3'末端的反向互补物。当用AfeI和BsiWI限制性酶消化时，这能够实现使用具有用于输出的人kapp轻链恒定区的框架内人类HAS前导序列使用pGAPZ载体的框架内(in-frame)插入。(2)对于重链进行类似的策略。所用的正向引物为AGCGCT GAGGTGCAGCTGGTGGAGTC。AfeI位点为单下划线。HSA信号序列的末端为双下划线，后面是成熟可变重链的序列(无下划线)。反向重链引物为CTCGAGACGGTGACGAGGGT。XhoI位点加下划线，后面是可变重链的3'末端的反向互补物。这能够使用相当的定向克隆策略使用之前在pGAPZ内插入的IgG-γlCH1-CH2-CH3区域克隆框架内重链。
将表达载体转化入巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)的单倍体ade1ura3,met1和lys3宿主菌株。用于转化单倍体巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)菌株和巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)性周期的遗传操作如在Higgins,D.R.,and Cregg,J.M.,Eds.1998.Pichia Protocols.Methods in Molecular Biology.Humana Press,Totowa,NJ中所述。
转化之前，各表达载体在具有AvrII的GAP启动子序列内线性化，以指导载体整合入巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)基因组的GAP启动子基因座(locus)。各载体的样品然后通过电穿孔单独地转化入ade1,ura3,met1和lys3菌株的电感受态的培养物，并且成功的转化体在YPD Zeocin板上通过它们对该抗生素的抗性选择。将所得的克隆就在YPD Zeocin板上的单一克隆选择、划线，并且然后就通过PCR检验抗体基因插入物在从用于合适的抗体基因插入的各菌株提取的基因组DNA上的存在检查，和/或通过各菌株通过克隆转移(colony lift)/免疫印迹法(Wung等.Biotechniques 21 808-812(1996)合成抗体链的能力。收集表达三种重链构建体之一的单倍体ade1,met1和lys3菌株以用于二倍体构建以及表达轻链基因的单倍体ura3菌株。表达重链基因的单倍体与合适的轻链单倍体ura3交配以产生二倍体分泌蛋白。
使合成单一抗体链的单倍体菌株交配并且选择合成四聚功能性抗体的二倍体衍生物。为了使巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)单倍体菌株交配，要杂交(crossed)的各ade1(或met1或Lys3)重链产生菌株横越富YPD板(rich YPD plate)画线，并且ura3轻链产生菌株横越第二YPD板(～10条线每板)画线。在30℃下孵育1或2天后，将来自包含重链菌株的一个板和包含ura3轻链菌株的一个板的细胞以交叉阴影线模式(in a cross hatched pattern)转移至在复制平板块(replica-plating block)上的无菌天鹅绒布，以使各重链菌株包含一块(a patch of)混合有各轻链菌株的细胞。交叉画线的复制平板细胞然后转移至交配板，并在25℃下孵育以刺激菌株之间交配的开始。两天后，在交配板上的细胞再次转移至在复制平板块上的无菌天鹅绒，并且然后转移至基本培养基板。这些板在30℃下孵育3天以允许原养二倍体菌株的克隆的选择性生长。挑选出现的克隆并在第二基本培养基板上划线以单一克隆分离和纯化各二倍体菌株。所得的二倍体细胞系然后就抗体生产检查。
测试假定的二倍体菌株以证明它们为二倍体并且包含用于抗体产生的二种表达载体。对于二倍体，菌株样品在交配板上平铺以刺激它们经受减数分裂并形成孢子。收集单倍体孢子产物并就表型测试。如果所得孢子产物的显著百分比为单或双营养缺陷型，可以推断出最初的菌株必需是二倍体。二倍体菌株通过从各自提取基因组DNA并将该DNA用于对各基因特异的PCR反应中，来就两种抗体基因的存在检测。
合成单一抗体链的单倍体菌株的融合并且选择合成四聚功能性抗体的二倍体衍生物。作为对上述交配方法的备选，将产生单链抗体的单倍体ade1和ura3菌株的个体培养物原生质球化，并将其所得的原生质球使用聚乙二醇/CaCl2融合。融合的单倍体菌株然后埋入包含1M山梨醇的琼脂和基本培养基以允许二倍体菌株再形成其细胞壁，并且成长成可见的克隆。所得的克隆从琼脂中拣出，在基本培养基板上划线，并将所述板在30℃下孵育2天以产生来自二倍体细胞系的单一细胞的克隆。所得的假定的二倍体细胞系然后就二倍性和如上所述的抗体生产检查。
抗体的纯化和分析。用于生产全长抗体的二倍体菌株通过使用上述方法将met1轻链和Lys3重链交配来衍生。收集来自摇瓶的培养基或二倍体巴斯德毕赤酵母(P.pastoris)表达菌株的发酵罐培养物，并通过SDS-PAGE和免疫印迹使用针对人IgG的重链和轻链，特别是针对IgG的重链的抗体，就抗体蛋白的存在检查。
为了纯化分泌抗体的酵母，使来自抗体产生培养物的澄清培养基通过蛋白A柱，并且用20mM磷酸钠，pH 7.0，结合缓冲液洗涤后，蛋白A结合蛋白使用pH3.0的0.1M甘氨酸HCl缓冲液洗脱。包含最全蛋白的级分通过考马斯亮蓝染色的SDS-PAGE和用于抗体蛋白的免疫印迹检查。抗体使用上述ELISA就IL-6识别进行表征。
用于抗体活性的检验。将重组酵母-衍生的人源化抗体通过IL-6驱动的T1165增殖检验和上述的IL-6刺激的HepG2触珠蛋白检验就功能活性来评价。
实施例9通过静脉内给药抗-IL-6抗体Ab1的急性期反应中和
人IL-6可以在大鼠中引起急性期反应，并且在大鼠中受刺激的主要急性期蛋白之一为α-2巨球蛋白(A2M)。研究设计成假设在静脉内给药不同剂量(0.03,0.1,0.3,1,and 3mg/kg)的抗体Ab1(n＝10只大鼠/剂量水平)或作为对照的多克隆人IgG1(n＝10只大鼠)后1小时，评估对于消除针对单次皮下注射100μg人IL-6的A2M应答所需的抗体Ab1的剂量。回收血浆并且通过商业三明治ELISA试剂盒(ICLInc.,Newberg OR；cat.no.-E-25A2M)将A2M定量。终点为A2M的血浆浓度在24小时时间点(后-Ab1(post-Ab1))处的差。结果呈现在图4。
抗体Ab1的ID50为0.1mg/kg，A2M应答的完全抑制为0.3mg/kg。人IL-6的该牢固的建立体内中和可以通过抗体Ab1实现。
实施例10 RXF393恶病质模型研究1
引入
当移植入裸鼠(athymic nude mice)时，人肾细胞癌细胞系,RXF393产生显著的失重。失重在移植后约第15天开始，所有动物的80％在移植后第18-20左右失去其总体重的至少30％。RXF393分泌人IL-6，并且在这些动物中的人IL-6的血浆浓度非常高，约10ng/ml。人IL-6可以结合小鼠可溶性IL-6受体并且在小鼠中激活IL-6应答。人IL-6比鼠IL-6在小鼠中在激活IL-6应答时效力低约10倍。该研究的目的在于确定在用人肾细胞癌细胞系,RXF393移植的裸鼠中，抗体Ab1对存活、体重、血清淀粉样A蛋白和血液学参数的影响。
方法
80只6周大的雄性裸鼠用RXF393肿瘤片段(30-40mg)皮下地移植在右胁腹中。动物然后分为10只小鼠的8组。在移植后第1天、8天、15天和22天每周一次静脉内地给予三组以3mg/kg,10mg/kg,或30mg/kg的抗体Ab1(进展组)。另一三组在移植后第8天、15天和22天每周一次静脉内地给予三组以3mg/kg,或10mg/kg,或30mg/kg的抗体Ab1(消退组(regression groups))。最后，一个对照组给予多克隆人IgG 30mg/kg，第二对照组在移植后第1天、8天、15天和22天每周一次静脉内地给予磷酸盐缓冲生理盐水。
当肿瘤达到4,000mm3或如果它们变得衰弱时(>30％的体重损失)，使动物在第28天安乐死。在第1、6天将动物称重，然后移植后从9-28天每天称重。平均百分数体重(Mean Percent Body Weight)(MPBW)用作主要参数以监视研究期间的失重。如下计算：(体重肿瘤重量)/基线体重×100。肿瘤重量在移植后第1,6,9,12,15,18,22,25和28天测定。从在第5和13天各组中的5只和当安乐死时(大多数情况下第28天)在各组中的所有10只小鼠在麻醉下取血液。将血液就血液学和血清淀粉样A蛋白(SAA)浓度分析。10只无肿瘤的6周大裸雄鼠的另外的组具有为血液学和SAA浓度评估而取的血液样品以用作值的基线设置。
结果-存活
在研究终止日的第28天之前，在任何抗体Ab1组中没有动物安乐死或死亡。在两个对照组中，发现15只动物(在多克隆人IgG组中7/9，在磷酸盐缓冲生理盐水组中8/10)死亡或安乐死，因为它们非常衰弱(>30％体重损失)。在两个对照组中平均存活时间为20天。
两个对照组和抗体Ab1进展(从研究第1天定量给药)组的存活曲线示于图5。
两个对照组和抗体Ab1消退(从研究第8天定量给药)组的存活曲线示于图6。
在多克隆人IgG(p＝0.0038)和磷酸盐缓冲生理盐水(p＝0.0003)对照组的存活曲线和6个抗体Ab1组的存活曲线之间存在统计学上的显著差异。在两个对照组之间没有统计学上的显著差异(p＝0.97)。
结果-血浆血清淀粉样A
两个对照组和抗体Ab1进展(从研究第1天定量给药)组以及消退(从研究第8天定量给药)组的平均(±SEM)血浆血清淀粉样A浓度对时间示于表1。
表1平均血浆SAA-抗体Ab1，所有组对对照组
SAA经由hIL-6的刺激上调，并且该应答与衍生自移植的肿瘤的hIL-6的循环水平直接相关。替代标记提供活性hIL-6的间接读出。这样在上述两个处理组中由于肿瘤-衍生hIL-6的中和存在SAA水平的显著降低。这进一步支持抗体Ab1显示体内功效的论点。
实施例11 RXF393恶病质模型研究2
引入
第二研究在RXF393恶病质模型中进行，其中使用抗体Ab1的治疗在更早期(移植后第10和13天)开始，并且具有更延长的处理期(移植后达(out to)49天)。使用抗体Ab1的定量给药间隔从第7天缩短至3天，并且还测定每日食物消耗。存在在使用抗体Ab1开始定量给药时使肿瘤大小标准化的尝试。
方法
80只6周大的雄性裸鼠用RXF393肿瘤片段(30-40mg)皮下地移植在右胁腹中。选择其肿瘤在大小上已经达到270-320mg的20只小鼠并且分为两组。从该时间点(移植后第10天)一组每3天静脉内地接受10mg/kg的抗体Ab1，另一组每3天接受10mg/kg的多克隆人IgG。当其肿瘤大小在大小上达到400-527mg时选择另一20只小鼠，并将其分为两组。从该时间点(移植后第13天)一组每3天静脉内地接受10mg/kg的抗体Ab1，另一组每3天接受10mg/kg的多克隆人IgG。剩下的40只小鼠不参与该研究并且在第49天，当肿瘤达到4,000mm3或如果它们变得非常衰弱(>30％体重损失)时被安乐死。
移植后从第1天至49天每3-4天将动物称重。平均百分数体重(MPBW)用作主要参数以监视研究期间的失重。如下计算：(体重肿瘤重量)/基线体重×100。肿瘤重量在移植后从5天至49天每3-4天测定。对于270-320mg肿瘤组从第10天，对于400-527mg肿瘤组从第13天每天测定食物消耗(在24小时中消耗的量每重量每各处理组)。
结果-存活
用于每3天静脉内地10mg/kg的抗体Ab1(270-320mg肿瘤大小)和用于每3天静脉内地10mg/kg的多克隆人IgG(270-320mg肿瘤大小)的存活曲线示于图7。
对于每3天静脉内地10mg/kg的抗体Ab1(270-320mg肿瘤大小)的平均存活为46天，对于每3天静脉内地10mg/kg的多克隆人IgG(270-320mg肿瘤大小)为32.5天(p＝0.0071)。
用于每3天静脉内地10mg/kg的抗体Ab1(400-527mg肿瘤大小)和用于每3天静脉内地10mg/kg的多克隆人IgG(400-527mg肿瘤大小)的存活曲线示于图8。对于每3天静脉内地10mg/kg的抗体Ab1(400-527mg肿瘤大小)的平均存活为46.5天，对于每3天静脉内地10mg/kg的多克隆人IgG(400-527mg肿瘤大小)为27天(p＝0.0481)。
实施例12在非人灵长类中抗体Ab1的多剂量药代动力学评价
抗体Ab1以单一推注(bolus infusion)形式在磷酸缓冲生理盐水中定量给药给单一雄性和单一雌性食蟹猴(cynomologus monkey)。以固定时间间隔取血浆样品，并且通过使用抗原捕获ELISA检验定量抗体Ab1的水平。生物素化的IL-6(3μg/mL,50μl)在链霉亲和素包被的96孔微量滴定板上捕获。将板洗涤并用0.5％鱼皮凝胶密封。添加合适稀释的血浆样品并在室温下孵育1小时。除去上清液，施涂抗-hFc-HRP缀合的二抗，并在室温下静置。
所述板然后吸出(aspirated)，并以使抗体可视化的量添加TMB。特定水平然后通过使用标准曲线确定。第二剂量的抗体Ab1在第35天给药给所述相同的两只食蟹猴，使用同样的取样计划重复试验。所得的浓度然后对时间作图，如图9所示。
表达纯化该人源化全长非糖基化抗体的和纯化的巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)显示与表达代表的哺乳动物的可比较性质。此外，该产物的多次定量给药显示可再现的半衰期推断，即该产生平台不产生显示增强免疫原性的产物。
实施例13抗体蛋白的八重态机械特性(Octet MechanisticCharacterization)
IL-6信号传导依赖于IL-6和两种受体，IL-6R1(CD126)和GP130(IL-6信号转导子)之间的相互作用。为了确定作用的抗体机制，使用生物薄膜干涉技术使用Octet QK instrument(ForteBio；Menlo Park,CA)进行机制研究。研究以两种不同构造进行，在第一取向中(in thefirst orientation)，生物素化的IL-6(R&D系统零件号206-IL-001MG/CF，根据制造商策略使用Pierce EZ-联磺基-NHS-LC-LC-生物素(Pierce EZ-link sulfo-NHS-LC-LC-biotin)产品号21338生物素化)最初与链霉亲和素包被的生物传感器(ForteBio零件号18-5006)结合。监视结合作为信号上的增加。
与传感器结合的IL-6然后用正被讨论的抗体或单独稀释溶液孵育。传感器然后用可溶的IL-6R1(R&D系统零件号227-SR-025/CF)分子孵育。如果IL-6R1分子不能结合，认为抗体阻断IL-6/IL-6R1相互作用。这些复合物用GP130(R&D系统228-GP-010/CF)在IL-6R1的存在下孵育以用于稳定目的。如果GP130不结合，推断出抗体阻断GP130与IL-6的相互作用。
在第二取向中，抗体与包被有抗-人IgG1Fc-特异性试剂(ForteBio part number 18-5001)的生物传感器结合。IL-6与固定的抗体结合，并且所述传感器用IL-6R1孵育。如果IL-6R1不与IL-6相互作用，然后推断出结合抗体的IL-6阻断IL-6/IL-6R1相互作用。在其中观察到抗体/IL-6/IL-6R1的情况下，该复合物用GP130在IL-6R1的存在下孵育。如果GP130不相互作用，然后推断出抗体阻断IL-6/GP130相互作用。所有研究以200μL终体积，在30C和1000rpms下进行。对于这些研究，所有蛋白使用ForteBio's样品稀释缓冲液(零件号18-5028)稀释。
结果示于图10A-E和11。
实施例14肽图谱(Peptide Mapping)
为了确定在人IL-6上被Ab1识别的表位，在基于western-印迹的检验中使用所述抗体。在此实施例中所用人IL-6的形式具有在长度上183氨基酸的序列(示于以下)。与15氨基酸肽重叠的包括此序列的57-成员的文库商业上合成，并与PepSpots硝酸纤维素膜(JPTPeptide technologies,柏林,德国)共价结合。与15氨基酸肽重叠的序列示于图12。根据制造商推荐制备和探索印迹。
简要的说，将印迹在甲醇中预湿，在PBS中冲洗，并以在PBS/0.05％Tween(阻断溶液)中的10％无脂奶阻断超过2小时。Ab1抗体以1mg/ml终稀释使用，并且以1:5000稀释使用HRP-缀合的鼠抗-人-κ二抗(Southern BioTech#9220-05)。抗体稀释/孵育在阻断溶液中进行。印迹使用Amersham ECL advance reagents(GE#RPN2135)显影并且化学发光信号使用CCD相机(AlphaInnotec)记录(documented)。印迹的结果示于图13和14。
列出用于产生肽文库的人IL-6的形式的序列：
VPPGEDSKDVAAPHRQPLTSSERIDKQIRYILDGISALRKETCNKSNMCESSKEALAENNLNLPKMAEKDGCFQSGFNEETCLVKIITGLLEFEVYLEYLQNRFESSEEQARAVQMSTKVLIQFLQKKAKNLDAITTPDPTTNASLLTKLQAQNQWLQDMTTHLILRSFKEFLQSSLRALRQM(SEQ ID NO:1).
优选的实施方式：
1.)抗-人IL-6抗体或抗体片段，其和与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位特异性地结合，和/或和在完整人IL-6多肽或其片段上的与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位竞争结合：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
2.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其和与Ab1相同的线性或构象表位特异性地结合，和/或和在完整人IL-6多肽或其片段上的与Ab1相同的线性或构象表位竞争结合。
3.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其和在完整人IL-6多肽或其片段上的与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位特异性地结合：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
4.)根据项目3所述的抗-人IL-6抗体或片段，其和在完整人IL-6多肽或其片段上的与Ab1相同的线性或构象表位特异性地结合。
5.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其与在被Ab1特异性结合的完整IL-6多肽或其片段上的相同的线性或构象表位特异性结合，并且当使用使跨越天然人IL-6多肽的全长的线性肽片段重叠通过表位作图确定时，所述表位包括包含于IL-6片段的一个或多个残基，所述IL-6片段选自分别包括以下的那些：氨基酸残基37-51,氨基酸残基70-84,氨基酸残基169-183,氨基酸残基31-45和/或氨基酸残基58-72。
6.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体，其包括在各可变轻链区和可变重链区中的至少2个互补决定区(CDR)，其中所述的可变轻链区和可变重链区与在选自以下的抗-人IL-6抗体中包含的相同：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
7.)根据项目6所述的抗-人IL-6抗体，其包括在各可变轻链和可变重链区中的至少2个互补决定区(CDR)，其中所述的可变轻链区和可变重链区与在Ab1中包含的相同。
8.)根据项目6所述的抗-人IL-6抗体，其中所有CDR与在选自以下的抗-人IL-6抗体中包含的CDR相同：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
9.)根据项目6所述的抗-人IL-6抗体，其中所有CDR与在Ab1中包含的CDR相同。
10.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其为非糖基化的。
11.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体，其包含已经修饰以改变效应子功能、半衰期、蛋白质水解和/或糖基化的Fc区域。
12.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其为人、人源化、单链或嵌合的抗体。
13.)根据项目12所述的抗-人IL-6抗体，其为衍生自兔(亲本)抗-人IL-6抗体的人源化抗体。
14.)根据项目13所述的抗-人IL-6抗体，其中在所述抗体的可变轻链区和可变重链区中的框架区(FR)分别为人FR，其未被修饰或已经通过将可变轻链区或重链区中的最多2或3个人FR残基用亲本兔抗体的相应FR残基取代而修饰，并且其中所述人FR衍生自人可变重链和轻链抗体序列，其基于它们与相应的兔可变重链或轻链区的相对于在人种系抗体序列的文库中包含的其它人种系抗体序列的高水平同源性，选自所述人种系抗体序列的文库。
15.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其特异性地与表达IL-6的人细胞结合和/或与体内的循环性可溶性IL-6分子结合。
16.)根据项目15所述的抗-人IL-6抗体或片段，其与IL-6特异性结合，所述IL-6在患有与表达IL-6的细胞相关的疾病的患者中的人类细胞上表达或由所述人类细胞表达。
17.)根据项目16所述的抗-人IL-6抗体或片段，其中所述疾病选自四肢无力、运动性疲劳、癌症相关性疲劳、炎症疾病相关性疲劳、慢性疲劳综合症、癌症相关性恶病质、心脏相关性恶病质、呼吸性相关性恶病质、肾相关性恶病质、年龄相关性恶病质、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、系统性幼年特发性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节病、强直性脊柱炎、炎性肠病(IBD)、风湿性多肌痛、巨细胞性动脉炎、自体免疫性血管炎、移植物抗宿主病(GVHD)、舍格伦综合症、成人型史笛儿氏症、类风湿性关节炎、系统性幼年特发性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、骨骼柏杰氏疾病、骨关节炎、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、白血病、肾细胞癌、多中心性巨大淋巴结增生症、卵巢癌、癌症化疗中的药物抗性、癌症化疗毒性、缺血性心脏病、动脉粥样硬化、肥胖症、糖尿病、哮喘、多发性硬化、阿尔茨海默病、脑血管疾病、发烧、急性期反应、过敏、贫血、炎症性贫血(慢性病贫血)、高血压、抑郁症、慢性疾病相关抑郁症、血栓形成、血小板增多症、急性心力衰竭、代谢综合症、流产、肥胖症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎性疾病、再灌注损伤、移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)、禽流感、天花、大流行性感冒、成人呼吸窘迫综合症(ARDS)、严重急性呼吸道综合症(SARS)、败血症和全身炎症反应综合症(SIRS)。
18.)根据项目16所述的抗-人IL-6抗体或片段，其中所述疾病选自癌症、炎症疾病、病毒性疾病或自体免疫疾病。
19.)根据项目16所述的抗-人IL-6抗体或片段，其中所述疾病选自哮喘、恶病质和消耗综合症。
20.)根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其直接或间接与可检测标记或治疗剂连接。
21.)一种或多种核酸序列，其导致根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或抗体片段的表达。
22.)根据项目21所述的核酸序列，其由酵母或人类优选密码子组成。
23.)载体，包括根据项目21所述的核酸序列。
24.)根据项目23所述的载体，其为质粒或重组病毒载体。
25.)重组细胞，其表达根据项目1所述的抗体或抗体片段。
26.)根据项目25所述的细胞，其选自哺乳动物、酵母、细菌和昆虫细胞。
27.)根据项目26所述的细胞，其为酵母细胞。
28.)根据项目27所述的细胞，其为二倍体酵母细胞。
29.)根据项目28所述的酵母细胞，其为毕赤酵母。
30.)治疗方法，包括给药给患有与IL-6表达细胞相关的疾病或状况的患者以治疗有效量的根据项目1所述的抗-人IL-6抗体或片段的至少一种。
31.)根据项目30所述的方法，其中所述疾病选自四肢无力、运动性疲劳、癌症相关性疲劳、炎症疾病相关性疲劳、慢性疲劳综合症、癌症相关性恶病质、心脏相关性恶病质(cardiac-relatedcachexia)、呼吸性相关性恶病质(respiratory-relatedcachexia)、肾相关性恶病质、年龄相关性恶病质(age-relatedcachexia)、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、系统性幼年特发性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节病、强直性脊柱炎、炎性肠病(IBD)、风湿性多肌痛、巨细胞性动脉炎、自体免疫性血管炎、移植物抗宿主病(GVHD)、舍格伦综合症(Sjogren's syndrome)、成人型史笛儿氏症(adult onset Still's disease)、类风湿性关节炎、系统性幼年特发性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、骨骼柏杰氏疾病(Paget's disease of bone)、骨关节炎、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、白血病、肾细胞癌、多中心性巨大淋巴结增生症(multicentric Castleman's disease)、卵巢癌、癌症化疗中的药物抗性、癌症化疗毒性、缺血性心脏病、动脉粥样硬化、肥胖症、糖尿病、哮喘、多发性硬化、阿尔茨海默病、脑血管疾病、发烧、急性期反应、过敏、贫血、炎症性贫血(慢性病贫血)、高血压、抑郁症、慢性疾病相关抑郁症、血栓形成、血小板增多症、急性心力衰竭、代谢综合症、流产、肥胖症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎性疾病、再灌注损伤、移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)、禽流感、天花、大流行性感冒、成人呼吸窘迫综合症(ARDS)、严重急性呼吸道综合症(SARS)、败血症和全身炎症反应综合症(SIRS)。
32.)根据项目30所述的方法，其中所述疾病或状况选自癌症、自体免疫疾病或炎症性疾病。
33.)根据项目30所述的方法，其中所述治疗进一步包括给药另一治疗剂或选自化疗、放疗、细胞因子给药或基因治疗的方案。
34.)根据项目30所述的方法，其用于治疗癌症或病毒感染的副作用。
35.)根据项目34所述的方法，其中所述副作用为疲劳或失重(消耗综合症)。
36.)体内成像的方法，其检测表达IL-6的细胞的存在，包括给药诊断有效量的根据项目1所述的抗-人IL-6抗体的至少一种。
37.)根据项目36所述的方法，其中所述给药进一步包括给药促进在表达IL-6的疾病部位处检测抗体的放射性核素或荧光团。
38.)根据项目36所述的方法，其用于检测IL-6表达肿瘤或转移瘤。
39.)根据项目36所述的方法，其用于检测与IL-6表达细胞有关的炎症的位置的存在。
40.)根据项目36所述的方法，其中所述结果用于促进合适的治疗方案的设计。
41.)根据项目40所述的方法，其中所述治疗方案包括放疗、化疗或其组合。
42.)分离的抗-IL-6抗体，包括选自以下的Vh多肽序列：SEQ IDNO:3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555和SEQ ID NO:571；并且进一步包括选自以下的VL多肽序列：SEQ ID NO:2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570或其变体，其中在所述VH或VL多肽中一个或多个框架残基(FR残基)已经被另一氨基酸残基取代，产生特异性结合IL-6的抗-IL-6抗体。
43.)根据项目42所述的分离的抗体，其中一个或多个所述FR残基被在亲本兔抗-IL-6抗体中的相应位点处存在的氨基酸取代或通过保守性氨基酸取代被取代，其中在所述Vh或VL多肽中包含的互补决定区(CDRs)衍生自所述亲本兔抗-IL-6抗体。
44.)根据项目42所述的抗体，其中所述抗体为人源化的。
45.)根据项目42所述的抗体，其中所述抗体为嵌合的。
46.)根据项目45所述的抗体，其中所述嵌合抗体包括人Fc。
47.)根据项目46所述的抗体，其中所述人Fc衍生自IgG1,IgG2,IgG3,IgG4,IgG5,IgG6,IgG7,IgG8,IgG9,IgG10,IgG11,IgG12,IgG13,IgG14,IgG15,IgG16,IgG17,IgG18或IgG19。
48.)根据项目42-46任一项所述的抗体，其中所述抗体结合可溶的IL-6、细胞表面表达的IL-6、IL-6/IL-6R、IL-6/IL-6R/gp130复合物或其多聚体的至少一种，和/或拮抗上述的一种或多种的生物学效应。
49.)分离的抗-IL-6抗体，包括与项目42所述的任何一种多肽序列具有至少90％或更高同源性的多肽序列。
50.)根据项目48所述的抗体，其中所述抗体与IL-6结合，且离解常数(KD)小于或等于5×10-7,10-7,5×10-8,10-8,5×10-9,10-9,5×10-10,10-10,5×10-11,10-11,5×10-12,10-12,5×10-13,或10-13。
51.)根据项目50所述的抗体，其中所述抗体与IL-6结合，且离解常数(KD)小于或等于5×10-10。
52.)根据项目48所述的抗体，其中所述抗体与IL-6结合，解离速率(koff)小于或等于10-4S-1,5×10-5S-1,10-5S-1,5×10-6S-1,10-6S-1,5×10-7S-1,或10-7S-1。
53.)根据项目42所述的抗体，其中在所述抗体中包含的Vh或Vl多肽源自一种或多种兔B细胞群体。
54.)根据项目42-45任一项所述的抗体，其中所述抗体对人IL-6的灵长类同源物具有结合特异性。
55.)根据项目54所述的抗体，其中所述灵长类为食蟹猴(Macaca fascicularis)。
56.)根据项目42-45任一项所述的抗体，其中所述抗体对IL-6R或gp130不具有结合特异性。
57.)根据项目42-45任一项所述的抗体，其中所述抗体抑制IL-6与IL-6R的结合，和/或IL-6/IL-6R/gpl30复合物的产生和/或IL-6/IL-6R/gp130多聚体的产生。
58.)根据项目56所述的抗体，其中所述IL-6R为可溶的IL-6R(sIL-6R)。
59.)根据项目57所述的抗体，其中所述IL-6R为可溶的IL-6R(sIL-6R)。
60.)根据项目42-45任一项所述的抗体的片段，其中所述片段选自Fab、Fab'、F(ab')2片段。
61.)根据项目42-45任一项所述的抗体，其中所述抗体进一步包括效应子部分。
62.)根据项目61所述的抗体，其中所述效应子部分为可检测部分或功能部分。
63.)根据项目62所述的抗体，其中所述可检测部分为荧光染料、酶、底物、生物发光材料、放射性材料或化学发光材料。
64.)根据项目62所述的抗体，其中所述功能部分为链霉亲和素、亲和素、生物素、细胞毒素、细胞毒性剂或放射性材料。
65.)改善或降低与IL-6相关的疾病或障碍的症状的方法，包括给药显示与IL-6相关的疾病或障碍的症状的患者以治疗有效量的根据项目42-47任一项所述的抗体。
66.)根据项目65所述的抗体，其中所述与IL-6相关的疾病和障碍为癌症相关性疲劳或恶病质或关节炎。
67.)根据项目65所述的抗体，其中所述与IL-6相关的疾病和障碍选自四肢无力、运动性疲劳、癌症相关性疲劳、炎症疾病相关性疲劳、慢性疲劳综合症、癌症相关性恶病质、心脏相关性恶病质、呼吸性相关性恶病质、肾相关性恶病质、年龄相关性恶病质、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、系统性幼年特发性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节病、强直性脊柱炎、炎性肠病(IBD)、风湿性多肌痛、巨细胞性动脉炎、自体免疫性血管炎、移植物抗宿主病(GVHD)、舍格伦综合症、成人型史笛儿氏症、类风湿性关节炎、系统性幼年特发性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、骨骼柏杰氏疾病、骨关节炎、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、白血病、肾细胞癌、多中心性巨大淋巴结增生症、卵巢癌、癌症化疗中的药物抗性、癌症化疗毒性、缺血性心脏病、动脉粥样硬化、肥胖症、糖尿病、哮喘、多发性硬化、阿尔茨海默病、脑血管疾病、发烧、急性期反应、过敏、贫血、炎症性贫血(慢性病贫血)、高血压、抑郁症、慢性疾病相关抑郁症、血栓形成、血小板增多症、急性心力衰竭、代谢综合症、流产、肥胖症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎性疾病、再灌注损伤、移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)、禽流感、天花、大流行性感冒、成人呼吸窘迫综合症(ARDS)、严重急性呼吸道综合症(SARS)、败血症和全身炎症反应综合症(SIRS)。
68.)在多倍体酵母培养物中制备项目42所述的抗体的方法，所述多倍体酵母培养物稳定地表达和分泌至少10-25mg/升的所述抗体至培养基，包括
(i)将至少一种表达载体引入单倍体酵母细胞，所述至少一种表达载体包含编码所述抗体的与启动子和信号序列可操作连接的一种或多种异源多核苷酸；
(ii)通过交配或原生质球融合从所述第一和/或第二单倍体酵母细胞产生多倍体酵母；
(iii)选择稳定表达所述抗体的多倍体酵母细胞；和
(iv)从所述多倍体酵母细胞产生稳定的多倍体酵母培养物，其稳定地表达至少10-25mg/升的所述抗体至培养基。
69.)根据项目68所述的方法，其中所述酵母选自以下属：Arxiozyma；Ascobotryozyma；固囊酵母属(Citeromyces)；德巴利氏酵母(Debaryomyces)；德克酵母属(Dekkera)；假囊酵母属(Eremothecium)；伊萨酵母属(Issatchenkia)；哈萨克酵母属(Kazachstania)；克鲁维酵母属(Kluyveromyces)；Kodamaea；路德酵母属(Lodderomyces)；管囊酵母属(Pachysolen)；毕赤酵母属(Pichia)；酿酒酵母属(Saccharomyces)；Saturnispora；Tetrapisispora；有孢圆酵母属(Torulaspora)；拟威尔酵母属(Williopsis)；和接合酵母属(Zygosaccharomyces)。
70.)根据项目69所述的方法，其中所述酵母属为毕赤酵母属(Pichia)。
71.)根据项目70所述的方法，其中所述毕赤酵母属(Pichia)的物种选自：巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)和多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)安格斯毕赤酵母(Pichia angusta。
72.)分离的多核苷酸，包括编码选自SEQ ID NO:3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555和SEQ ID NO:571的抗-IL-6Vh抗体氨基酸序列或编码其变体的多核苷酸，其中至少一个框架残基(FR残基)已经被在兔抗-IL-6抗体Vh多肽中的相应位置处存在的氨基酸取代或通过保守性氨基酸取代被取代。
73.)载体，包括项目72所述的多核苷酸序列。
74.)宿主细胞，包括项目73所述的载体。
75.)根据项目74所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为属于毕赤酵母属(Pichia)的酵母细胞。
76.)根据项目68所述的方法，其中所述异源多核苷酸进一步包括编码选自以下的VL氨基酸序列或编码其变体的多核苷酸序列：2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570，其中至少一个框架残基(FR残基)已经被在兔抗-IL-6抗体Vl多肽中的相应位置处存在的氨基酸取代或通过保守性氨基酸取代被取代。
77.)分离的多核苷酸，包括编码抗-IL-6Vl抗体氨基酸序列2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570或编码其变体的多核苷酸序列，其中至少一个框架残基(FR残基)已经被在兔抗-IL-6抗体VL多肽中的相应位置处存在的氨基酸取代或通过保守性氨基酸取代被取代。
78.)载体，包括项目77所述的多核苷酸序列。
79.)宿主细胞，包括项目78所述的载体。
80.)根据项目79所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为属于毕赤酵母属(Pichia)的酵母细胞。
81.)根据项目68所述的方法，其中异源多核苷酸包括编码在以下中包含的多肽的序列：SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:3；SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:18；SEQ ID NO:20和SEQ ID NO:19；SEQ ID NO:21和SEQ ID NO:22；SEQ ID NO:37和SEQ ID NO:38；SEQ ID NO:53和SEQ ID NO:54；SEQ ID NO:69和SEQ ID NO:70；SEQ ID NO:85和SEQ ID NO:86；SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:102；SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:117；SEQ ID NO:101和SEQ ID NO:118；SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:102；SEQID NO:119和SEQ ID NO:117；SEQ ID NO:119和SEQ ID NO:118；SEQ ID NO:122和SEQ ID NO:123；SEQ ID NO:138和SEQ ID NO:139；SEQ ID NO:154和SEQ ID NO:155；SEQ ID NO:170和SEQ ID NO:171；SEQ ID NO:186和SEQ ID NO:187；SEQ ID NO:202和SEQID NO:203；SEQ ID NO:218和SEQ ID NO:219；SEQ ID NO:234和SEQ ID NO:235；SEQ ID NO:250和SEQ ID NO:251；SEQ ID NO:266和SEQ ID NO:267；SEQ ID NO:282和SEQ ID NO:283；SEQ ID NO:298和SEQ ID NO:299；SEQ ID NO:314和SEQ ID NO:315；SEQ ID NO:330和SEQ ID NO:331；SEQ ID NO:346和SEQ ID NO:347；SEQ ID NO:362和SEQ ID NO:363；SEQ ID NO:378和SEQ ID NO:379；SEQ ID NO:394和SEQ ID NO:395；SEQ ID NO:410和SEQ ID NO:411；SEQ ID NO:426和SEQ ID NO:427；SEQ ID NO:442和SEQ ID NO:443；SEQ ID NO:458和SEQ ID NO:459；SEQ ID NO:474和SEQ ID NO:475；SEQ ID NO:490和SEQ ID NO:491；SEQ ID NO:506和SEQ ID NO:507；SEQ ID NO:522和SEQ ID NO:523；SEQ ID NO:538和SEQ ID NO:539；SEQ ID NO:554和SEQ ID NO:555；或SEQ ID NO:570和SEQ ID NO:571。
82.)抗-IL-6抗体，其和与由项目81所述的多核苷酸序列中的一种编码的抗体或抗体片段相同的IL-6表位结合和/或与抗-IL-6抗体竞争与IL-6的结合。
83.)根据项目82所述的抗-IL-6抗体，其和与选自以下的抗-IL-6抗体相同的IL-6表位结合：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35和Ab36。
84.)分离的抗-IL-6抗体或抗体片段，包括在选自以下的Vh多肽序列中包含的一种或多种CDR：SEQ ID NO：3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555和SEQ ID NO:571和/或在由以下组成的VL多肽序列中包含的一种或多种CDR：2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570。
85.)根据项目83或84所述的抗体，其中所述抗体为人源化的。
86.)根据项目83或84所述的抗体，其中所述抗体为嵌合的。
87.)根据项目86所述的抗体，其中所述嵌合抗体包括人Fc。
88.)根据项目83或84所述的抗体，其包括单链抗体。
89.)根据项目87所述的抗体，其中所述人Fc衍生自人IgG1,IgG2,IgG3,IgG4,IgG5,IgG6,IgG7,IgG8,IgG9,IgG10,IgG11,IgG12,IgG13,IgG14,IgG15,IgG16,IgG17,IgG18或IgG19。
90.)根据项目82-89任一项所述的抗体，其中所述抗体与可溶的IL-6、细胞表面表达的IL-6、IL-6/IL-6R、IL-6/IL-6R/gp130复合物和/或IL-6/IL-6R/gpl30复合物多聚体的至少一种结合。
91.)根据项目82-90任一项所述的抗体，其中所述抗体与线性或构象IL-6表位结合。
92.)分离的抗-IL-6抗体，包括与项目83所述的任何一种多肽序列具有至少90％或更高同源性的Vl或Vh多肽序列。
93.)根据项目92所述的抗体，其中所述抗体与IL-6结合，且离解常数(KD)小于或等于5×10-7,10-7,5×10-8,10-8,5×10-9,10-9,5×10-10,10-10,5×10-11,10-11,5×10-12,10-12,5×10-13,或10-13。
94.)根据项目90所述的抗体，其中所述抗体与IL-6结合，离解常数(KD)小于或等于5×10-10。
95.)根据项目91所述的抗体，其中所述抗体与IL-6结合，解离速率(koff)小于或等于10-4S-1,5×10-5S-1,10-5S-1,5×10-6S-1,10-6S-1,5×10-7S-1,或10-7S-1。
96.)根据项目83或84所述的抗体，其中所述抗体源自一种或多种兔B细胞群体。
97.)根据项目82-89任一项所述的抗体，其中所述抗体对人IL-6的灵长类同源物具有结合特异性。
98.)根据项目97所述的抗体，其中所述灵长类为食蟹猴(Macaca fascicularis)。
99.)根据项目82-89任一项所述的抗体，其中所述抗体对IL-6R或gp130不具有结合特异性。
100.)根据项目82-89任一项所述的抗体，其中所述抗体抑制IL-6与IL-6R的结合，和/或IL-6/IL-6R与gpl30的结合，和/或IL-6/IL-6R/gp130多聚体的形成，和/或抑制上述任一种的生物学效应。
101.)根据项目100所述的抗体，其中所述IL-6R为可溶的IL-6R(sIL-6R)。
102.)根据项目82-89任一项所述的抗体的片段，其中所述片段选自Fab片段、Fab'片段或F(ab')2片段。
103.)根据项目82-89任一项所述的抗体的片段，其中所述抗体进一步包括效应子部分。
104.)根据项目101所述的抗体的片段，其中所述效应子部分为可检测部分或功能部分。
105.)根据项目104所述的抗体，其中所述可检测部分为荧光染料、酶、底物、生物发光材料、放射性材料或化学发光材料。
106.)根据项目104所述的抗体，其中所述功能部分为链霉亲和素、亲和素、生物素、细胞毒素、细胞毒性剂或放射性材料。
107.)改善或降低与IL-6相关的疾病或障碍的症状的方法，包括给药显示与IL-6相关的疾病或障碍的症状的患者以治疗有效量的根据项目82-89任一项所述的抗体。
108.)根据项目107所述的方法，其中所述与IL-6相关的疾病和障碍为癌症相关性疲劳、恶病质或关节炎。
109.)根据项目107所述的抗体，其中所述与IL-6相关的疾病和障碍选自四肢无力、运动性疲劳、癌症相关性疲劳、炎症疾病相关性疲劳、慢性疲劳综合症、癌症相关性恶病质、心脏相关性恶病质、呼吸性相关性恶病质、肾相关性恶病质、年龄相关性恶病质、类风湿性关节炎、系统性红斑狼疮(SLE)、系统性幼年特发性关节炎、牛皮癣、牛皮癣性关节病、强直性脊柱炎、炎性肠病(IBD)、风湿性多肌痛、巨细胞性动脉炎、自体免疫性血管炎、移植物抗宿主病(GVHD)、舍格伦综合症、成人型史笛儿氏症、类风湿性关节炎、系统性幼年特发性关节炎、骨关节炎、骨质疏松症、骨骼柏杰氏疾病、骨关节炎、多发性骨髓瘤、霍奇金淋巴瘤、非霍奇金淋巴瘤、前列腺癌、白血病、肾细胞癌、多中心性巨大淋巴结增生症、卵巢癌、癌症化疗中的药物抗性、癌症化疗毒性、缺血性心脏病、动脉粥样硬化、肥胖症、糖尿病、哮喘、多发性硬化、阿尔茨海默病、脑血管疾病、发烧、急性期反应、过敏、贫血、炎症性贫血(慢性病贫血)、高血压、抑郁症、慢性疾病相关抑郁症、血栓形成、血小板增多症、急性心力衰竭、代谢综合症、流产、肥胖症、慢性前列腺炎、肾小球肾炎、盆腔炎性疾病、再灌注损伤、移植排斥、移植物抗宿主病(GVHD)、禽流感、天花、大流行性感冒、成人呼吸窘迫综合症(ARDS)、严重急性呼吸道综合症(SARS)、败血症和全身炎症反应综合症(SIRS)。
110.)在多倍体酵母培养物中制备项目82-89任一项所述的抗体的方法，所述多倍体酵母培养物稳定地表达和分泌至少10-25mg/升的所述抗体至培养基，包括：
(i)将至少一种表达载体引入单倍体酵母细胞，所述至少一种表达载体包含编码所述抗体的与启动子和信号序列可操作连接的一种或多种异源多核苷酸；
(ii)通过交配或原生质球融合从所述第一和/或第二单倍体酵母细胞产生多倍体酵母；
(iii)选择稳定表达所述抗体的多倍体酵母细胞；和
(iv)从所述多倍体酵母细胞产生稳定的多倍体酵母培养物，其稳定地表达至少10-25mg/升的所述抗体至培养基。
111.)根据项目110所述的方法，其中所述酵母选自以下属：Arxiozyma；Ascobotryozyma；固囊酵母属(Citeromyces)；德巴利氏酵母(Debaryomyces)；德克酵母属(Dekkera)；假囊酵母属(Eremothecium)；伊萨酵母属(Issatchenkia)；哈萨克酵母属(Kazachstania)；克鲁维酵母属(Kluyveromyces)；Kodamaea；路德酵母属(Lodderomyces)；管囊酵母属(Pachysolen)；毕赤酵母属(Pichia)；酿酒酵母属(Saccharomyces)；Saturnispora；Tetrapisispora；有孢圆酵母属(Torulaspora)；拟威尔酵母属(Williopsis)；和接合酵母属(Zygosaccharomyces)。
112.)根据项目111所述的方法，其中所述酵母属为毕赤酵母属(Pichia)。
113.)根据项目112所述的方法，其中所述毕赤酵母属(Pichia)的物种选自：巴斯德毕赤酵母(Pichia pastoris)、甲醇毕赤酵母(Pichia methanolica)和多形汉逊酵母(Hansenula polymorpha)安格斯毕赤酵母(Pichia angusta)。
114.)分离的多核苷酸，其表达包含衍生自抗-IL-6抗体的至少一种CDR多肽的多肽，其中所述表达的多肽单独与IL-6特异性结合，或当与另一多核苷酸序列联合表达时，特异性结合IL-6，所述另一多核苷酸序列表达包含衍生自抗-IL-6抗体的至少一种CDR多肽的多肽，其中所述至少一种CDR选自在以下中包含的VL或VH中包含的那些：SEQ ID NO:3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555；571；2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570。
115.)载体，包括至少一种项目114所述的多核苷酸序列。
116.)宿主细胞，包括项目115所述的载体。
117.)根据项目116所述的宿主细胞，其中所述宿主细胞为属于毕赤酵母属(Pichia)的酵母细胞。
118.)根据项目110所述的方法，其中所述异源多核苷酸包括一种或多种多核苷酸序列，所述多核苷酸序列编码在选自以下的Vl或VH多肽中包含的至少一种CDR：SEQ ID NO:3,18,19,22,38,54,70,86,102,117,118,123,139,155,171,187,203,219,235,251,267,283,299,315,331,347,363,379,395,411,427,443,459,475,491,507,523,539,555；571；2,20,21,37,53,69,85,101,119,122,138,154,170,186,202,218,234,250,266,282,298,314,330,346,362,378,394,410,426,442,458,474,490,506,522,538,554和SEQ ID NO:570。
119.)药物或诊断组合物，包括至少一种项目1或82-89任一项所述的IL-6抗体或片段以及药学上可接受的载体。
120.)根据项目119所述的药物或诊断组合物，其进一步包括至少一种稳定剂。
121.)根据项目119所述的药物或诊断组合物，其是冻干的。
122.)根据项目119所述的药物或诊断组合物，其包括选自Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab1l,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36的一种或多种抗-IL-6抗体，或从其衍生的嵌合、人源化抗体或片段。
123.)根据项目122所述的药物或诊断组合物，其中所述抗体包括Ab1或Ab7，或从其衍生的人源化或嵌合抗体或片段。
124.)治疗与IL-6相关疾病的方法，包括给药治疗有效量的根据项目120-123任一项所述的药物组合物。
125.)根据项目124所述的方法，其中所述疾病选自癌症状况、自体免疫状况和炎症疾病。
126.)根据项目125所述的方法，其中所述疾病为癌症相关性疲劳、恶病质或关节炎。
127.)体内成像的方法，其检测表达IL-6的细胞的存在，包括给药诊断有效量的根据项目120-123任一项所述的诊断组合物。
128.)根据项目127所述的方法，其用于检测或成像IL-6表达肿瘤或转移瘤。
129.)根据项目127所述的方法，其用于检测或成像表达IL-6的炎症位置。
130.)根据项目128或129所述的方法，其用作设计方案的部分以用于设计有效的癌症或关节炎治疗策略。
131.)根据项目130所述的方法，其中所述治疗策略包括放射、化疗、细胞因子治疗、基因治疗和抗体治疗的一种或多种。
132.)根据项目131所述的方法，其中所述抗体包括根据项目1或82-89任一项所述的抗-IL-6抗体或片段。
133.)根据项目88所述的抗体，其中所述单链抗体选自scFv，骆驼抗体，纳米抗体、IgNAR、SMIP，和其组合。

Claims (10)

1.抗-人IL-6抗体或抗体片段，其和与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位特异性地结合，和/或和在完整人IL-6多肽或其片段上的与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位竞争结合：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
2.根据权利要求1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其和与Ab1相同的线性或构象表位特异性地结合，和/或和在完整人IL-6多肽或其片段上的与Ab1相同的线性或构象表位竞争结合。
3.根据权利要求1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其和在完整人IL-6多肽或其片段上的与选自以下的抗-人IL-6抗体相同的线性或构象表位特异性地结合：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
4.根据权利要求3所述的抗-人IL-6抗体或片段，其和在完整人IL-6多肽或其片段上的与Ab1相同的线性或构象表位特异性地结合。
5.根据权利要求1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其与在被Ab1特异性结合的完整IL-6多肽或其片段上的相同的线性或构象表位特异性结合，并且当使用使跨越天然人IL-6多肽的全长的线性肽片段重叠通过表位作图确定时，所述表位包括包含于IL-6片段的一个或多个残基，所述IL-6片段选自分别包括以下的那些：氨基酸残基37-51,氨基酸残基70-84,氨基酸残基169-183,氨基酸残基31-45和/或氨基酸残基58-72。
6.根据权利要求1所述的抗-人IL-6抗体，其包括在各可变轻链区和可变重链区中的至少2个互补决定区(CDR)，其中所述的可变轻链区和可变重链区与在选自以下的抗-人IL-6抗体中包含的相同：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
7.根据权利要求6所述的抗-人IL-6抗体，其包括在各可变轻链和可变重链区中的至少2个互补决定区(CDR)，其中所述的可变轻链区和可变重链区与在Ab1中包含的相同。
8.根据权利要求6所述的抗-人IL-6抗体，其中所有CDR与在选自以下的抗-人IL-6抗体中包含的CDR相同：Ab1,Ab2,Ab3,Ab4,Ab5,Ab6,Ab7,Ab8,Ab9,Ab10,Ab11,Ab12,Ab13,Ab14,Ab15,Ab16,Ab17,Ab18,Ab19,Ab20,Ab21,Ab22,Ab23,Ab24,Ab25,Ab26,Ab27,Ab28,Ab29,Ab30,Ab31,Ab32,Ab33,Ab34,Ab35,和Ab36。
9.根据权利要求6所述的抗-人IL-6抗体，其中所有CDR与在Ab1中包含的CDR相同。
10.根据权利要求1所述的抗-人IL-6抗体或片段，其为非糖基化的。
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