CN104739921A - 一种用于缓解视疲劳的组方含片及其制备方法 - Google Patents
一种用于缓解视疲劳的组方含片及其制备方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及一种用于缓解视疲劳的组方含片及其制备方法，属于医药、保健品领域。本发明将小分子蓝莓花青素类成分载入氧化石墨烯或其衍生物中，其他大分子物质载入环糊精中，同时载有蓝莓花青素类的氧化石墨烯或其衍生物可以再次被环糊精包合，起到双重包合保护的效果，按重量份取蓝莓花青素类包合物干粉12～45份，决明子提取基料9～40份，叶黄素酯10～40份，薄荷脑8～25份，充分混合均匀，制片。本发明优点是保留了蓝莓中所含的丰富成分，保护了蓝莓中不稳定的抗氧化体系，其与决明子、叶黄素酯、薄荷脑相结合可以协调、完整、高效地发挥该含片的缓解视力的功能，提高视疲劳人群的生活质量。
Description
技术领域
本发明属于医药、保健品领域，具体涉及一种缓解视疲劳的组方含片，特别涉及运用氧化石墨烯或其衍生物载体材料对蓝莓花青素进行载药及组方含片制备方法。
背景技术
目前，随着电视、电脑等视频终端的设备普及和从事近距离用眼工作的人数不断上升，产生视疲劳的人群数量也越来越多，以及那些功课压力较大的学生、喜欢打游戏机儿童、专微工作者、长时间驾驶人员。视疲劳已经严重影响了人们正常的生活、工作和学习，视疲劳人群往往使用一些抗疲劳的视力眼药水，但该种方法只能缓解暂时性的眼疲劳，不能彻底根治眼疲劳，更不可能增加机体对视疲劳的抵抗能力。视疲劳是用眼不能长久，如果用眼时间过长，会出现眼部不适、头痛、视觉障碍、疲倦等症状。
蓝莓含有多种营养成分，例如维生素类、脂肪、蛋白质、Vc、矿物质、多糖、蓝莓花青素等等，其中蓝莓花青素成分具有很强的抗氧化性，可以缓解视疲劳、抗炎、抗肿瘤、降血脂、降血糖等等，被誉为“水果之王”，所以水果蓝莓的研究和开发已经成为各国科研人员的研究热点。花青素(anthocyanins)又称花色素，是一类多羟基黄酮类化合物，是自然界中广泛存在于植物中的水溶性色素，多以糖苷的形式存在，也称花色苷。
氧化石墨烯(grapheme oxide,GO)为石墨烯的氧化物，均具有单原子层结构，可以卷曲成为碳纳米管，比表面积大，无细胞毒性，因此非常适合于作为药物载体，大量研究表明强氧化剂会可以赋予氧化石墨烯更多的含氧活性基团，羧基化氧化石墨烯具有更高的载体活性。载体材料环糊精(β-CD)同样具有特殊的结构，被誉为“管状分子”，其分子空腔结构比氧化石墨烯要大得多，可以包合分子结构更大的物质。蓝莓营养成分丰富，其中蓝莓花青素类成分不稳定，长时间放置会被氧化变质，失去其抗氧化缓解视疲劳的功效。
决明子是我国早期就在使用的药用植物，是豆科植物决明或者小决明的干燥成熟种子，含有多种药效成分，例如萘骈-吡咯酮类、蒽醌类、氨基酸、脂肪酸、在《神农本草经》中决明子列为上品，味甘、苦、咸，性微寒，清肝明目，润肠通便，具有降血压、降血脂、抗衰老、抗氧化等作用，为我国药食同源植物之一。叶黄素酯是叶黄素与脂肪酸通过酯键相连接构成的一类物质，与叶黄素相比具有更好的稳定性，叶黄素酯在人机体内可以代谢转化为叶黄素。叶黄素能吸收对视网膜有损害作用的蓝光，同时具有抗氧化作用，因此,在白内障疾病和老年性黄斑退化病防治和保健方面具有重要的作用。
发明内容
本发明提供一种用于缓解视疲劳的组方含片及其制备方法，的目是缓解过度用眼而出现的眼部不适、头痛、视觉障碍、疲倦等症状。
本发明采取的技术方案是，由下列步骤得到的：
(1)取新鲜干净蓝莓，按料液体积比1:1向其加入柠檬酸酸化溶媒介质榨汁打浆，并在10℃～60℃、20W～100W条件下超声20～40min，使得蓝莓花青素成分溶解于介质中；再按照料液重量比1:0.5～2加入氧化石墨烯或其衍生物进行榨汁打浆，同样条件下超声20～40min，静置15～30min，使得蓝莓缓解、保护视力成分蓝莓花青素通过酯键或氢键充分载入氧化石墨烯或其衍生物中，所得上述混合液体按照重量比1:1～8加入环糊精或其衍生物，在条件为10℃～70℃、压力-0.1～-0.08Mp下经3～5h，制备得到混合液环糊精包合液，该环糊精包合液保留了蓝莓所有成分。所得包合液经冷冻干燥即得包合物干粉；
(2)取药材决明子向其加入3～20倍水，进行水溶液煎煮提取，将得到的提取液100目过滤，收集滤液和滤渣，将滤渣重复提取2～3次，合并滤液，减压浓缩干燥，将干燥后的提取物投入超微粉碎机中粉碎至100-120目，即得决明子提取基料；
(3)按重量份取由步骤(1)得到的包合物干粉12～45份，由步骤(2)得到的决明子提取基料9～40份，以及叶黄素酯10～40份，薄荷脑8～25份，充分混合均匀；
(4)制软材：向上述混合物中缓慢加入60％～70％乙醇润湿剂，按照紧握成团轻压即散的原则来制软材；
(5)制粒：将制好的软材通过20目筛进行制粒，并将制好的颗粒放于鼓风干燥箱55℃～70℃条件下干燥，20目筛整粒；
(6)压片：称取上述干燥颗粒的0.3％～0.6％的润滑剂硬脂酸镁及矫味剂木糖醇适量，将三者先后按照等量递加法混合均匀，经自动压片机压片；
(7)灭菌：将制好的片剂放于紫外线下经25～35min灭菌处理，再进行包装，得到含片成品。
本发明一种实施方式是所述氧化石墨烯选择羧基化氧化石墨烯。该磁性药物载体具有碳纳米管结构，对载入分子保护能力很强，与蓝莓花青素成分可通过酯键或氢键将其连接载入，无细胞毒性且具有较好的生物相容性，可以提高药物的溶解度及增加药物稳定性。
本发明一种实施方式是所述环糊精选择羟丙基-β-环糊精。基于羧基化氧化石墨烯的羧基，其易与羟丙基-β-环糊精通过酯键相连，使制得的包合物更加完美稳定，起到有效成分持续性释放的作用。
本发明一种实施方式是所述柠檬酸酸化的溶媒介质采取30～70％乙醇。
本发明一种实施方式是所述柠檬酸酸化溶媒介质的pH为2.5～6。酸性条件下蓝莓花青素的溶解度高，提取效果好，提取物分子结构更稳定性，最终羧基化氧化石墨烯载药量最大。
本发明的组方包括蓝莓整体成分、决明子水提物、叶黄素酯和薄荷脑。按照中医的“君臣佐使”组方原则，其中决明子为“君药”，具有清肝明目，抑制脂质过氧化而对肝细胞起到保护作用，并且激活眼组织中LDH的功能，从而达到防治近视及明目的作用；辅助君药清肝明目，作为“臣药”的是本发明利用氧化石炭烯或其衍生物的碳纳米管结构对蓝莓中促进视网膜毛细血管血液流通的进行装载后的花青素，再利用分子结构较大的环糊精将其及蓝莓的其他成分进行再次包合，对蓝莓整体进行保护，不仅保留了促进视网膜毛细血管血液流通的花青素类成分，并且使蓝莓花青素类抗氧化活性更加稳定，其对“君药”决明子的视力保护方面起到极强的辅佐作用；作为“佐药”的叶黄素酯在人机体内可以代谢转化为叶黄素，其能吸收对视网膜有损害作用的蓝光，因此，其与决明子、蓝莓整体成分相结合在白内障疾病和老年性黄斑退化病防治和保健方面具有重要意义；薄荷脑为“使药”，性辛、凉，归肺、肝经，并且清心明目，于组方含片中可以对黏膜产生清凉感并且可以促进药物的透皮吸收，由于该药具有挥发性，可对全方药物引药上行，直达病所。以上组方的构成使得各活性成分之间相互协调、补充及整体发挥高效的抗氧化作用，有效对抗自由基、促经血液循环、强化毛细血管弹性和维持正常的眼球压力，缓解视疲劳。
本发明将小分子蓝莓花青素类成分载入氧化石墨烯或其衍生物中，其他大分子物质载入环糊精中，同时载有蓝莓花青素类的氧化石墨烯或其衍生物可以再次被环糊精包合，起到双重包合保护的效果，上述的包合方法使得蓝莓各成分均不缺失，并且各活性成分之间相互协调、补充及整体发挥高效的抗氧化作用，缓解视疲劳的功效。
综上所述，本发明将蓝莓各成分通过氧化石墨烯(GO)和环糊精(β-CD)包合后再与对人体视力均有保护性作用的决明子、叶黄素酯相联合制备成具有缓解视疲劳的组方含片，迄今为止，国内外尚未见任何关于该方法和组方的的文献和专利报道。
本发明的有益效果在于：制备过程步骤合理、简便，易于操作；生物相容性较好的功能性氧化石墨烯与无毒、可降解的环糊精的结合利用使蓝莓各成分包裹的更加完全，有效成分更加稳定，使得整体系统效应加强，该方法保留了蓝莓中所含的丰富成分，保护了蓝莓中不稳定的抗氧化体系，其与决明子、叶黄素酯、薄荷脑相结合可以协调、完整、高效地发挥该含片的缓解视力的功能，提高视疲劳人群的生活质量。
具体实施方式
实施例1
(1)取新鲜干净蓝莓，按料液体积比1:1向其加入柠檬酸酸化溶媒介质榨汁打浆，并在10℃、20W条件下超声20，再按照料液重量比1:0.5加入氧化石墨烯或其衍生物进行榨汁打浆，同样条件下超声20min，静置15min，所得上述混合液体按照重量比1:1加入环糊精或其衍生物，在条件为10℃、压力-0.1Mp下经3h，制备得到混合液环糊精包合液，所得包合液经冷冻干燥即得包合物干粉；
(2)取药材决明子向其加入3倍水，进行水溶液煎煮提取，将得到的提取液100目过滤，收集滤液和滤渣，将滤渣重复提取2次，合并滤液，减压浓缩干燥，将干燥后的提取物投入超微粉碎机中粉碎至100目，即得决明子提取基料；
(3)按重量份取由步骤(1)得到的包合物干粉12份，由步骤(2)得到的决明子提取基料9份，以及叶黄素酯10份，薄荷脑8份，充分混合均匀；
(4)制软材：向上述混合物中缓慢加入60％乙醇润湿剂，制软材；
(5)制粒：将制好的软材通过20目筛进行制粒，并将制好的颗粒放于鼓风干燥箱55℃条件下干燥，20目筛整粒；
(6)压片：称取上述干燥颗粒的0.3％的润滑剂硬脂酸镁及矫味剂木糖醇适量，将三者先后按照等量递加法混合均匀，经自动压片机压片；
(7)灭菌：将制好的片剂放于紫外线下经25min灭菌处理，再进行包装，得到含片成品。
所述氧化石墨烯选择羧基化氧化石墨烯；
所述环糊精选择羟丙基-β-环糊精；
所述柠檬酸酸化的溶媒介质采取30％乙醇；
所述柠檬酸酸化溶媒介质的pH为2.5。
实施例2
(1)取新鲜干净蓝莓，按料液体积比1:1向其加入柠檬酸酸化溶媒介质榨汁打浆，并在35℃、60W条件下超声30min，再按照料液重量比1:1.25加入氧化石墨烯或其衍生物进行榨汁打浆，同样条件下超声30min，静置23min，所得上述混合液体按照重量比1:4.5加入环糊精或其衍生物，在条件为40℃、压力-0.09Mp下经4h，制备得到混合液环糊精包合液，所得包合液经冷冻干燥即得包合物干粉；
(2)取药材决明子向其加入12倍水，进行水溶液煎煮提取，将得到的提取液100目过滤，收集滤液和滤渣，将滤渣重复提取3次，合并滤液，减压浓缩干燥，将干燥后的提取物投入超微粉碎机中粉碎至100目，即得决明子提取基料；
(3)按重量份取由步骤(1)得到的包合物干粉28.5份，由步骤(2)得到的决明子提取基料24.5份，以及叶黄素酯25份，薄荷脑16.5份，充分混合均匀；
(4)制软材：向上述混合物中缓慢加入65％乙醇润湿剂，制软材；
(5)制粒：将制好的软材通过20目筛进行制粒，并将制好的颗粒放于鼓风干燥箱63℃条件下干燥，20目筛整粒；
(6)压片：称取上述干燥颗粒的0.45％的润滑剂硬脂酸镁及矫味剂木糖醇适量，将三者先后按照等量递加法混合均匀，经自动压片机压片；
(7)灭菌：将制好的片剂放于紫外线下经30min灭菌处理，再进行包装，得到含片成品；
所述氧化石墨烯选择羧基化氧化石墨烯；
所述环糊精选择羟丙基-β-环糊精；
所述柠檬酸酸化的溶媒介质采取50％乙醇；
所述柠檬酸酸化溶媒介质的pH为4.2。
实施例3
(1)取新鲜干净蓝莓，按料液体积比1:1向其加入柠檬酸酸化溶媒介质榨汁打浆，并在60℃、100W条件下超声40min，再按照料液重量比1:2加入氧化石墨烯或其衍生物进行榨汁打浆，同样条件下超声40min，静置30min，所得上述混合液体按照重量比1:8加入环糊精或其衍生物，在条件为70℃、压力-0.08Mp下经5h，制备得到混合液环糊精包合液，所得包合液经冷冻干燥即得包合物干粉；
(2)取药材决明子向其加入20倍水，进行水溶液煎煮提取，将得到的提取液100目过滤，收集滤液和滤渣，将滤渣重复提取3次，合并滤液，减压浓缩干燥，将干燥后的提取物投入超微粉碎机中粉碎至120目，即得决明子提取基料；
(3)按重量份取由步骤(1)得到的包合物干粉45份，由步骤(2)得到的决明子提取基料40份，以及叶黄素酯40份，薄荷脑25份，充分混合均匀；
(4)制软材：向上述混合物中缓慢加入70％乙醇润湿剂，制软材；
(5)制粒：将制好的软材通过20目筛进行制粒，并将制好的颗粒放于鼓风干燥箱70℃条件下干燥，20目筛整粒；
(6)压片：称取上述干燥颗粒的0.6％的润滑剂硬脂酸镁及矫味剂木糖醇适量，将三者先后按照等量递加法混合均匀，经自动压片机压片；
(7)灭菌：将制好的片剂放于紫外线下经35min灭菌处理，再进行包装，得到含片成品；
所述氧化石墨烯选择羧基化氧化石墨烯；
所述环糊精选择羟丙基-β-环糊精；
所述柠檬酸酸化的溶媒介质采取30～70％乙醇；
所述柠檬酸酸化溶媒介质的pH为2.5～6。
下边通过实验例来进一步说明本发明的效果。
实验例、缓解视疲劳功能性评价
目的：
通过人体试食试验密切观察在服用本发明的缓解视疲劳的组方含片前后受试者视力改善状况，来评价本发明缓解视疲劳的组方含片的缓解视疲劳效果。
选择受试者标准：
按照卫生部颁发的《保健食品检验与评价技术规范实施手册》选择受试者对象，选择长期用眼，容易视疲劳的儿童、少年及成年人，但要排除眼部本身存在过敏性疾病、患有眼部感染性疾病、患有眼底疾病合并心、脑、肝、肾并发症的受试者以及短期或长期内服用过改善视疲劳或者治疗眼部疾病药物的受试者。
观测项目：
为了保证受试者安全，定时对受试者进行血、尿常规检测，青少年和成人还要观测肝、肾功能，心电图，胸透检查；在试验的前后要察看并记录受试者的畏光、干涩、眼胀、眼痛、视物模糊的程度及明视持久度、远视力。
表1 视力疲劳判定法
注：“偶尔”指每2天出现该状态1～2次；“时有”指每天出现该状态1～3次；“经常”指每天出现该状态3次以上；
统计学处理
收集试验前后数据，计量资料为症状积分及明视持久度，计数资料为改善率及其总的有效率，对其利用t检验和X2检验，应用SPSS17.0数据处理软件，若P<0.05或P<0.01表示差异有显著性，有统计学意义。
分组
选择年龄在21～42岁之间长期用眼容易产生视疲劳受试对象294人，根据视力检查情况、症状及性别因素随机平均分为对照组、试验组①和试验组②，各98人。其中试验组①：服用本发明含片0.4g，每次2片，每日2次；试验组②：服用的含片采用无需氧化石墨烯或其衍生物进行包合，而直接利用羟丙基-β-环糊精进行包合，得到蓝莓环糊精干粉12～45份，其它的药材含量、制备方法不变，该含片0.4g，每次2片，每日2次；对照组：服用北京长城制药厂生产的杞菊地黄口服液，每次10mL，每天2次。经过35天后，观察并记录三组受试者视力情况。
评判标准
①眼科症状：畏光、干涩、眼胀、眼痛、视物模糊其中任何一个症状改善且其他症状没恶化即为改善；症状改善并且视持久度前后相差值≥0.1即为有效，经统计学分析差异有统计学意义；未达到有效标准即为无效。
②明视持久度：受试者平均明视持久度比试验前大于等于10％。
试验结果
通过密切观察受试者服用各组缓解视疲劳药物后，眼科症状畏光、干涩、眼胀、眼痛、视物模糊得到了不同程度的改善。
表2 视疲劳症状的影响情况
| 组别 | 例数 | 改善 | 有效 | 无效 | 有效率 |
| 对照组 | 98 | 21 | 39 | 38 | 61.22 |
| 试验组① | 98 | 27 | 53 | 18 | 81.63** |
| 试验组② | 98 | 23 | 38 | 37 | 62.24 |
注释：对照组和试验组相比P*<0.05，P**<0.01。
由表2表明：三组受试患者分别服用北京长城制药厂生产的杞菊地黄口服液、本发明含片和无氧化石墨烯包合的含片后，视疲劳状况均得到相应的改善，但试验组①服用本发明含片视疲劳缓解的有效率为81.63％比对照组61.22％更为明显，疗效更好，显著优于对照组(P<0.01)
表3 明视持久度的影响情况(n＝98)
| 组别 | 例数 | 服用前 | 服用后 |
| 对照组 | 98 | 0.66±0.11 | 0.75±0.14 |
| 试验组① | 98 | 0.65±0.12 | 0.87±0.13** |
| 试验组② | 98 | 0.66±0.09 | 0.80±0.11* |
注释：对照组和试验组相比P*<0.05，P**<0.01。
由表3表明：三组受试患者分别服用北京长城制药厂生产的杞菊地黄口服液、本发明含片和无氧化石墨烯包合的含片后，平均明视持久度均得到提高，均大于10％，但试验组①服用本发明含片后的明视持久度提到程度更为明显，疗效更好，差异具有统计学意义(P<0.01)由此可知本发明含片能够提高视疲劳患者的明视持久度，并且疗效显著。
表4 远视力的影响情况(n＝98)
| 组别 | 例数 | 服用前 | 服用后 |
| 对照组 | 98 | 4.66±0.13 | 4.68±0.15 |
| 试验组① | 98 | 4.67±0.15 | 4.78±0.18* |
| 试验组② | 98 | 4.65±0.17 | 4.69±0.18 |
注释：对照组和试验组相比P*<0.05
由表4表明：三组受试后，在远视力改善方面试验组①更为明显，与对照组进行统计学分析，差异具有显著性(P<0.05)。本发明含片可以有效改善受试者的远视力程度。
结论：由上述人体试食试验表明本发明的含片在对于患者视疲劳、明视持久度、远视力方面疗效明显，可以达到缓解视疲劳的功效。
Claims (10)
1.一种用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，是由下列步骤得到的：
(1)取新鲜干净蓝莓，按料液体积比1:1向其加入柠檬酸酸化溶媒介质榨汁打浆，并在10℃～60℃、20W～100W条件下超声20～40min，再按照料液重量比1:0.5～2加入氧化石墨烯或其衍生物进行榨汁打浆，同样条件下超声20～40min，静置15～30min，所得上述混合液体按照重量比1:1～8加入环糊精或其衍生物，在条件为10℃～70℃、压力-0.1～-0.08Mp下经3～5h，制备得到混合液环糊精包合液，所得包合液经冷冻干燥即得包合物干粉；
(2)取药材决明子向其加入3～20倍水，进行水溶液煎煮提取，将得到的提取液100目过滤，收集滤液和滤渣，将滤渣重复提取2～3次，合并滤液，减压浓缩干燥，将干燥后的提取物投入超微粉碎机中粉碎至100-120目，即得决明子提取基料；
(3)按重量份取由步骤(1)得到的包合物干粉12～45份，由步骤(2)得到的决明子提取基料9～40份，以及叶黄素酯10～40份，薄荷脑8～25份，充分混合均匀；
(4)制软材：向上述混合物中缓慢加入60％～70％乙醇润湿剂，制软材；
(5)制粒：将制好的软材通过20目筛进行制粒，并将制好的颗粒放于鼓风干燥箱55℃～70℃条件下干燥，20目筛整粒；
(6)压片：称取上述干燥颗粒的0.3％～0.6％的润滑剂硬脂酸镁及矫味剂木糖醇适量，将三者先后按照等量递加法混合均匀，经自动压片机压片；
(7)灭菌：将制好的片剂放于紫外线下经25～35min灭菌处理，再进行包装，得到含片成品。
2.根据权利要求1所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述氧化石墨烯选择羧基化氧化石墨烯。
3.根据权利要求1所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述环糊精选择羟丙基-β-环糊精。
4.根据权利要求1所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述柠檬酸酸化的溶媒介质采取30～70％乙醇。
5.根据权利要求1所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述柠檬酸酸化溶媒介质的pH为2.5～6。
6.如权利要求1所述的用于缓解视疲劳的组方含片的制备方法，其特征在于包括下列步骤：
(1)取新鲜干净蓝莓，按料液体积比1:1向其加入柠檬酸酸化溶媒介质榨汁打浆，并在10℃～60℃、20W～100W条件下超声20～40min，再按照料液重量比1:0.5～2加入氧化石墨烯或其衍生物进行榨汁打浆，同样条件下超声20～40min，静置15～30min，所得上述混合液体按照重量比1:1～8加入环糊精或其衍生物，在条件为10℃～70℃、压力-0.1～-0.08Mp下经3～5h，制备得到混合液环糊精包合液，所得包合液经冷冻干燥即得包合物干粉；
(2)取药材决明子向其加入3～20倍水，进行水溶液煎煮提取，将得到的提取液100目过滤，收集滤液和滤渣，将滤渣重复提取2～3次，合并滤液，减压浓缩干燥，将干燥后的提取物投入超微粉碎机中粉碎至100-120目，即得决明子提取基料；
(3)按重量份取由步骤(1)得到的包合物干粉12～45份，由步骤(2)得到的决明子提取基料9～40份，以及叶黄素酯10～40份，薄荷脑8～25份，充分混合均匀；
(4)制软材：向上述混合物中缓慢加入60％～70％乙醇润湿剂，制软材；
(5)制粒：将制好的软材通过20目筛进行制粒，并将制好的颗粒放于鼓风干燥箱55℃～70℃条件下干燥，20目筛整粒；
(6)压片：称取上述干燥颗粒的0.3％～0.6％的润滑剂硬脂酸镁及矫味剂木糖醇适量，将三者先后按照等量递加法混合均匀，经自动压片机压片；
(7)灭菌：将制好的片剂放于紫外线下经25～35min灭菌处理，再进行包装，得到含片成品。
7.根据权利要求6所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述氧化石墨烯选择羧基化氧化石墨烯。
8.根据权利要求6所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述环糊精选择羟丙基-β-环糊精。
9.根据权利要求6所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述柠檬酸酸化的溶媒介质采取30～70％乙醇。
10.根据权利要求6所述的用于缓解视疲劳的组方含片，其特征在于，所述柠檬酸酸化溶媒介质的pH为2.5～6。
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