CN103547254B - 含有来自胎盘的成分的皱纹改善用组合物 - Google Patents
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Abstract
本发明的课题是提供具有保湿作用且具有优异的皱纹改善效果的皱纹改善用组合物。本发明涉及含有胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的皱纹改善用组合物，特别是用于使皮肤湿润、使由干燥引起的皱纹不显著的皱纹改善用组合物。
Description
技术领域
本发明涉及含有来自猪等的胎盘的成分（特别是胎盘的高压处理物的液态分离成分）作为有效成分的皱纹改善用组合物。
背景技术
皱纹是随着年龄的增长而增加的老化现象之一。可是，作为皱纹的产生原因，除了由老化而引起以外，还有皮肤水分量的降低、由紫外线造成的皮肤组织的损伤等多种现象。由这些原因引起的皱纹在美容上是一个大课题。
因此，正在对改善皱纹的组合物进行大量研究。例如，已报告了通过使皮肤外用剂与口服组合物共同发挥作用来提供皱纹改善用的美容套装的方法（专利文献1）、以包含虾青素和具有真皮基质成分稳定作用的化合物或提取物为特征的皱纹改善组合物（专利文献2）等、由多种成分组成而构成的具有抗皱作用的组合物。关于在含有多种成分的组合物中配合胎盘提取物（胎盘素）的技术也有大量报告，但胎盘提取物是作为具有美白作用、代谢活化作用、细胞活化作用、活性氧去除作用、创伤修复作用等的有效成分而配合的，并不是将胎盘提取物作为用于改善皱纹的有效成分而使用的。
此外，尽管已经报告了下述方法：用将以酶等将猪或者马的胎盘水解而得到的水溶性成分与多酚配合而成的组合物，使照射过紫外线的模型动物的皱纹减轻的方法（专利文献3），以使人胎盘素成为纸状为特征的皱纹、色斑改善纸(专利文献4)，将以在细胞、组织、生长因子中配合有神经氨酸类和/或胎盘提取物成分为特征的美容组合物用于改善皱纹、松弛的目的的方法（专利文献5）等，但期待效果进一步明确的皱纹改善方法。
另一方面，作为用于制造食品组合物等的技术，已知有将原料进行高压处理的技术。在专利文献6中，公开了包含如下步骤的通过酶解法来制造调味料的方法：对于包含蛋白质分解酶的食品素材，通过在40～60℃的温度域负荷50～100MPa的压力而保持，抑制微生物的生长，同时促进酶的作用。
现有技术文献
专利文献
专利文献1：专利第4666537号公报
专利文献2：日本特开2011-63563号公报
专利文献3：日本特开2002-212046号公报
专利文献4：日本特开2004-182706号公报
专利文献5：日本特开2009-234980号公报
专利文献6：日本专利第3475328号公报
发明内容
发明要解决的课题
本发明的课题是提供具有保湿作用且具有优异的皱纹改善效果的皱纹改善用组合物。
用于解决课题的方法
本发明人等为了解决上述课题而深入研究，结果发现，通过将胎盘进行高压处理，能够获得含有作为保湿成分的透明质酸的液态分离成分（胎盘提取物），而且，该液态分离成分具有保湿作用且具有优异的皱纹改善效果，从而完成了本发明。
本发明包含以下的发明。
(1)一种皱纹改善用组合物，其含有胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物。
(2)根据(1)所述的组合物，其含有0.02w/w%以上来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸。
(3)根据(1)或(2)所述的组合物，所述高压处理的压力为50～150MPa。
(4)一种皱纹改善用组合物，其含有来自胎盘的成分，
所述成分为相对于固体成分重量1，氮重量为0.08以上的成分，并且，相对于所述组合物的总量，含有0.02w/w%以上来自所述成分的透明质酸、含有0.5w/w%以上所述成分的固体成分。
(5)根据(4)所述的组合物，所述来自胎盘的成分为胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物。
(6)根据(5)所述的组合物，所述高压处理的压力为50～150MPa。
(7)根据(1)～(6)中任一项的组合物，其为用于使皮肤湿润、使由干燥引起的皱纹不显著的皱纹改善用组合物。
(8)一种化妆品或药品（包括准药品），其包含(1)～(6)中任一项所述的组合物。
(9)胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的应用，其用于制造皱纹改善用组合物。
(10)胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的应用，其用于改善皱纹。
(11)一种改善皱纹的方法，其为了美容而将胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物适用于皮肤。
本申请主张基于在2011年5月18日申请的日本专利申请2011－111299号的优先权，包含该专利申请的说明书所记载的内容。
发明效果
本发明的皱纹改善用组合物具有通过保湿作用而使面部的皱纹不显著的效果，在美容上是有用的。
附图说明
图1表示涂布有本发明的皱纹改善用组合物（高压提取胎盘提取物）的组(n=21)和未涂布组(n=21)的眼角部位的角质水分量的经时变化。
图2表示涂布有本发明的皱纹改善用组合物（高压提取胎盘提取物）的组(n=21)和未涂布组(n=21)的通过目测评价的皱纹级别的经时变化。
具体实施方式
作为在本发明中可以作为原料而利用的胎盘，可以列举猪、马等的胎盘，优选为猪的胎盘。猪的品质没有特殊限定。胎盘在高压处理等处理之前被适当地洗涤和粉碎。
高压处理的压力没有特殊限定，典型的为50～150MPa，优选为50～100MPa，更优选为100MPa。高压处理时的温度没有特殊限定，根据胎盘的状态等适当选择即可，典型的为45～65℃的范围。高压处理的时间没有特殊限定，典型的为1～24小时的范围。实施高压处理的装置没有特殊限定，例如可以使用专利文献6所记载的装置等。
通过离心分离、过滤、压榨等通常的固液分离方法，将固态分离成分从胎盘的高压处理物分离除去，获得液态分离成分（提取物）。根据需要，液态分离成分也可以实施类固醇激素去除处理等处理。液态分离成分其本身可以作为胎盘提取物而利用，因此，在本说明书中，有时将从胎盘的高压处理物分离的液态分离成分称为“胎盘提取物”、“提取物”或“高压提取胎盘提取物”。作为原料而使用的胎盘的70～90%量可以作为液态分离成分而回收。
在本发明中，所谓“液态分离成分的处理物”，可以列举液态分离成分通过减压蒸馏等进行浓缩后的浓缩物，通过冻干法等干燥后的干燥物（还包括粉末化的干燥物），将液态分离成分、浓缩物或干燥物用水等溶剂稀释的稀释物。该分离成分的处理物也包含进一步将液态分离成分用水、有机溶剂等溶剂提取处理而得到的提取物。
与用精制水提取的提取物相比，胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的氮含量、游离氨基酸含量更高，含有透明质酸。可以认为这是由于通过高压处理抑制了微生物的生长，同时细胞由于压力而破碎，通常难以溶解于水的成分被可溶化。通过上述步骤进行的胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的制造方法不包含通过添加胃蛋白酶等蛋白质分解酶的酶分解、通过热、酸、碱等的水解，因此，有用的成分（例如有用的多肽（比蛋白质分子量小的结合有多个氨基酸的成分））分解或变性的可能性小，因而优选。通过上述步骤进行的胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的制造方法与通过将胎盘冻结、融化的冻融法进行的提取法不同，在提取效率高方面、能够减少臭味方面以及微生物等在提取物中进行繁殖的可能性低方面是有利的。
本发明的皱纹改善用组合物含有胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物作为有效成分，并且，可以以发挥保湿作用和皱纹改善作用的各种形态来提供。还可以将胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物本身作为皱纹改善用组合物而使用。本发明的皱纹改善用组合物优选作为皮肤外用剂而使用，可以以化妆品、准药品、药品等形态提供。
皮肤外用剂可以使用为了化妆品、准药品和药品的配方化而通常使用的成分来进行配方化。本发明的皱纹改善用组合物中还可以进一步包含其他有效成分。作为配方化用成分和其他有效成分，可以列举例如精制水、醇类、油性物质、保湿剂、增稠剂、防腐剂、乳化剂、生药成分、紫外线吸收剂、色素、美白剂、香料、乳化稳定剂、pH调节剂等。皮肤外用剂的剂型没有限定，液状、霜状、软膏状、乳液状、凝胶状、润肤膏状、棒状等哪一种形态均可，优选为液状。此外，作为皮肤外用剂的种类，可以列举例如化妆水、乳液、啫喱、美容液、通用霜、润肤膏、面膜、洁面材料、香皂、粉底、身体乳等，但不限定于此。此外，上述各种形态的制品中，本发明的皱纹改善用组合物的配合量只要是能够发挥皱纹改善效果的量即可，可以考虑目标产品的一般的使用量、产品的形态、功能/效果以及成本等而适当设定。
此外，本发明的皱纹改善用组合物不仅可以作为皮肤外用剂使用，也可以作为口服制剂而使用，可以配合于食品饮料、优选以改善皱纹为目的的美容饮品、美容用健康食品。
在本发明的皱纹改善用组合物中，作为有效成分而使用的胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物优选为相对于固体成分(蒸发残留物)重量1，氮重量为0.08以上、优选为0.10～0.15的成分。此外，相对于组合物的总量，本发明的皱纹改善用组合物优选含有下述成分：来自所述有效成分的透明质酸0.02w/w%以上、优选0.03～0.12w/w%，来自所述有效成分的固体成分0.5w/w%以上、优选0.55～1.0w/w%、更优选0.60～0.65w/w%。
而且，对于以胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物作为有效成分而使用的实施方式没有限定，具有与上述同样的组成的、含有来自胎盘的成分作为有效成分的皱纹改善用组合物也包含于本发明的范围内。所谓“来自胎盘的成分”，是指将胎盘进行处理而得到的组合物（胎盘处理物），可以含有多种物质。即，本发明提供皱纹改善用组合物，其以如下方式含有相对于固体成分(蒸发残留物)重量1的氮重量为0.08以上、优选为0.10～0.15的来自胎盘的成分：相对于组合物的总量，来自所述成分的透明质酸为0.02w/w%以上，优选为0.03～0.12w/w%，来自所述成分的固体成分为0.5w/w%以上，优选为0.55～1.0w/w%，更优选为0.60～0.65w/w%。
本发明的皱纹改善用组合物在皱纹改善作用中特别具有使皮肤湿润、使由干燥引起的皱纹不显著的作用。
以下基于实施例对本发明进行说明，但本发明的范围不限定于实施例。
实施例
（实施例1）高压提取胎盘提取物的制造和成分分析以及评价试验
实验1：高压提取胎盘提取物的制造法（本发明品）
将2770g从健康的妊娠3～4个月的种猪获得的胎盘解冻，用低温的精制水将血液等充分洗涤除去。将洗涤后的胎盘用韦林氏搅切器（Waringblender）进行粉碎。将粉碎的胎盘放入聚乙烯制袋中，使用高压处理装置（东洋高压社制）在50℃以100MPa处理16小时。
将高压处理猪胎盘在5℃以5000转/分钟离心处理30分钟，分离固体成分，回收2210g上清。将该上清以0.2μm的滤器（日本保罗社制）过滤，进行类固醇激素去除处理，回收1760g作为高压提取胎盘提取物。
实验2：水溶性胎盘提取物的制造法（比较品）
将100Kg从健康的妊娠3～4个月的种猪获得的胎盘解冻，用低温的精制水将血液等充分洗涤除去。将洗涤后的胎盘用韦林氏搅切器进行粉碎。在粉碎后的胎盘中加入10Kg精制水，在低温下搅拌提取。
将搅拌提取处理后的猪胎盘在5℃以5000转/分钟离心处理30分钟，分离固体成分，回收上清。将该上清以精制精密过滤滤器等精制至臭味减小，其后，进行类固醇激素去除处理，回收约80Kg作为水溶性胎盘提取物。
评价试验1：高压提取胎盘提取物与水溶性胎盘提取物的成分比较试验
作为高压提取胎盘提取物与水溶性胎盘提取物的成分，进行蒸发残留物（固体成分量）、总氮量(日本药典一般试验法氮定量法)、透明质酸量（ELISA法、透明质酸测定试剂盒、生物化学Biobusiness株式会社）的定量分析，示于表1。此外，还进行了游离氨基酸的分析，示于表2。
这些分析的结果表明，高压提取胎盘提取物固体成分中的氮量比率多，此外，游离氨基酸比率也高。此外，在高压提取胎盘提取物中大量检测到来自胎盘的透明质酸。从这些数据可以认为，高压提取胎盘提取物富含氨基酸，也含有透明质酸，是可以更加期待皮肤的保湿作用的胎盘提取物。
[表1]
成分比较表
| 高压提取胎盘提取物 | 水溶性胎盘提取物 | |
| 蒸发残留物(w/w%) | 0.62 | 0.31 |
| 氮量(w/w%) | 0.069 | 0.016 |
| (氮量/蒸发残留物)的比率(w/w) | 0.11 | 0.05 |
| 透明质酸量 | 0.393mg/mL | 0mg/mL |
[表2]
游离氨基酸分析结果
评价试验2：针对人的保湿性和抗皱试验
按照皱纹的级别标准照片（皱纹级别0～7的8级）（日本化妆品学会的抗皱制品评价指南日本化妆品学会杂志Vol.30,No.4，pp.316-332(2006)）进行目测评价，采用21名皱纹级别相当于2～3的被试验者的健康女性评审员。
试验按照日本化妆品学会的抗皱制品评价指南实施。在被试验者的眼角周围，将作为待检测物的本发明品的高压提取胎盘提取物涂布在半边脸上，1天3次（1次约220mg），持续8周。另半边脸未涂布待检测物。在第0、4、8周实施目测评价、眼角部位的角质水分量的测定。
＜皱纹的评价＞
在试验开始日、试验开始4周后和8周后（试验结束日），实施皱纹的目测评价。皱纹的级别评价将各级别之间作为0.5而进行判定。
皱纹的级别
级别0：无皱纹
级别1：略微确认到不明显的浅的皱纹
级别2：略微确认到明显的浅的皱纹
级别3：确认到明显的浅的皱纹
级别4：在明显的浅的皱纹中，略微确认到稍深的皱纹
级别5：确认到稍深的皱纹
级别6：确认到明显的深的皱纹
级别7：确认到显著的深的皱纹
＜保湿性的评价＞
在试验开始日、试验开始4周后和8周后（试验结束日），使用皮肤水分测试仪CorneometerCM825(Courage-Khazaka,德国)测定待检测物的涂布部位和未涂布部位的角质水分量，对待检测物的保湿性进行验证。结果以涂布部位与未涂布部位之差表示。数值越大，意味着越有保湿性。
＜评价结果＞
表3、图1和图2中记载了评价结果。在图1和图2的图表中，误差条（ErrorBar）表示标准误差。在试验开始4周后，确认到角质水分量在21名中的18名中比未涂布多，眼角周围的皱纹级别在21名中的12名中改善。该结果在Wilcoxon检验中为p＜0.01。可以判断，本发明品的高压提取胎盘提取物具有保湿作用，具有显著的抗皱改善作用。通常在4周并未显著确认到抗皱效果，因而可以认为本发明品具有非常高的效果。进一步在第8周确认到明确的效果。
[表3]
高压提取胎盘提取物的抗皱试验结果总结
（实施例2）高压提取处理条件的研究
(1)压力条件的研究
使用与实施例1同样地调制的胎盘，将提取温度设为50℃、提取时间设为16小时，以25～600MPa范围内的各压力进行提取。对得到的各提取液（胎盘提取物）的蒸发残留物（以下称为“固体成分浓度”）进行定量分析，将结果示于表4。此外，各提取液的透明质酸量、总氮量的定量分析也同时进行，将结果一并示于表4。结果用将在提取压力100Mpa、提取温度50℃、提取时间16小时下的提取液的固体成分浓度、透明质酸量、总氮量的值作为1的相对值来表示。
[表4]
以各压力进行的提取试验
| 压力(Mpa) | 25 | 50 | 75 | 100 | 150 | 300 | 600 |
| 固体成分浓度 | 0.882 | 0.945 | 0.968 | 1 | 0.997 | 0.954 | 0.632 |
| 透明质酸量 | 0.910 | 0.913 | 0.848 | 1 | 0.861 | 1.018 | 1.042 |
| 氮量 | 0.929 | 1 | 1 | 1 | 1 | 0.857 | 0.5 |
提取液中的固体成分浓度在100MPa为最高，在50～300MPa未确认到大的差别。确认到在任一个提取液中均含有透明质酸、氮。
此外，将得到的各提取胎盘提取物的pH示于表5。
[表5]
以各压力进行的提取液的pH
| 压力(MPa) | 25 | 50 | 75 | 100 | 150 | 300 | 600 |
| pH | 6.24 | 6.25 | 6.24 | 6.25 | 6.29 | 6.57 | 7.02 |
提取液的pH在25～150MPa时未确认到大的变化，但在300MPa以上时上升。
综合考虑以上的提取液的各分析结果与高压处理所用的装置，胎盘提取物的高压处理的压力条件宜为50～150MPa。
(2)温度条件的研究
使用与实施例1同样地调制的胎盘，将提取压力设为100MPa、提取时间设为16小时，以40～75℃范围内的各温度进行提取。将得到的各提取液的固体成分浓度示于表6。此外，将各提取液的透明质酸量、总氮量一并示于表6。结果用将在提取压力100Mpa、提取温度50℃、提取时间16小时下的提取液的固体成分浓度、透明质酸量、总氮量的值作为1的相对值来表示。
[表6]
以各温度进行的提取试验
| 提取温度(℃) | 40 | 45 | 50 | 55 | 60 | 65 | 70 | 75 |
| 固体成分浓度 | 0.9188 | 1.002 | 1 | 0.9873 | 1.2278 | 1.1565 | 0.9244 | 0.8817 |
| 透明质酸量 | 0.915 | 0.910 | 1 | 0.977 | 0.941 | 0.934 | 1.018 | 0.889 |
| 氮量 | 0.929 | 0.929 | 1 | 0.929 | 1.357 | 1.357 | 1 | 0.929 |
确认到在任一个提取液中均含有透明质酸、氮。提取液中的固体成分浓度在60℃为最高，可以认为胎盘提取物的高压处理的温度条件宜为45℃～65℃的范围。
(3)时间条件的研究
使用与实施例1同样地调制的胎盘，将提取压力设为100MPa、提取温度设为50℃，以2～48小时范围内的各时间进行提取。将得到的各提取液的固体成分浓度示于表7。此外，将各提取液的透明质酸量、总氮量一并示于表7。结果用将在提取压力100Mpa、提取温度50℃、提取时间16小时下的提取液的固体成分浓度、透明质酸量、总氮量的值作为1的相对值来表示。
[表7]
以各时间进行的提取试验
| 提取时间(小时) | 2 | 4 | 8 | 12 | 16 | 24 | 36 | 48 |
| 固体成分浓度 | 0.6606 | 0.7442 | 0.8447 | 0.9262 | 1 | 1.0357 | 1.0898 | 1.1267 |
| 单位时间提取效率 | 0.3303 | 0.186 | 0.1056 | 0.0772 | 0.0625 | 0.0432 | 0.0303 | 0.0235 |
| 透明质酸量 | 0.933 | 0.965 | 0.952 | 0.983 | 1 | 0.966 | 0.937 | 0.873 |
| 氮量 | 0.643 | 0.786 | 0.857 | 1 | 1 | 1.143 | 1.214 | 1.286 |
确认到在任一个提取液中均含有透明质酸、氮。确认到高压提取时的处理时间越长，提取液中的固体成分浓度越多。然而，如果处理时间变长，则单位时间的提取效率降低，因此可以认为，考虑到工作效率和作业时间，优选为24小时以内。
产业可利用性
本发明可以在以改善皱纹为目的的化妆品、药品、准药品的制造领域中利用。
本说明书所引用的全部刊物、专利和专利申请直接作为参考包含于本说明书中。
Claims (13)
1.一种皱纹改善用组合物，其含有胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物，所述胎盘的高压处理物是通过仅由将胎盘在压力50～150MPa、温度45～65℃的高压处理装置内静置构成的处理而得到的。
2.根据权利要求1所述的组合物，所述胎盘的高压处理物是通过仅由将所述胎盘放入聚乙烯制袋中而将胎盘在压力50～150MPa、温度45～65℃的高压处理装置内静置构成的处理而得到的。
3.根据权利要求1所述的组合物，所述胎盘的高压处理物的液态分离成分为以5000转/分钟离心分离处理30分钟而得到的。
4.根据权利要求2所述的组合物，所述胎盘的高压处理物的液态分离成分为以5000转/分钟离心分离处理30分钟而得到的。
5.根据权利要求1所述的组合物，其含有来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸0.02w/w％以上。
6.根据权利要求2所述的组合物，其含有来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸0.02w/w％以上。
7.根据权利要求3所述的组合物，其含有来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸0.02w/w％以上。
8.根据权利要求4所述的组合物，其含有来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸0.02w/w％以上。
9.根据权利要求1所述的组合物，所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物为相对于固体成分重量1，氮重量为0.08以上的成分，并且，
相对于所述组合物的总量，含有0.02w/w％以上来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸，含有0.5w/w％以上所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的固体成分。
10.根据权利要求2所述的组合物，所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物为相对于固体成分重量1，氮重量为0.08以上的成分，并且，
相对于所述组合物的总量，含有0.02w/w％以上来自所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的透明质酸，含有0.5w/w％以上所述胎盘的高压处理物的液态分离成分或该分离成分的处理物的固体成分。
11.根据权利要求9所述的组合物，所述胎盘的高压处理物的液态分离成分为以5000转/分钟离心分离处理30分钟而得到的。
12.根据权利要求10所述的组合物，所述胎盘的高压处理物的液态分离成分为以5000转/分钟离心分离处理30分钟而得到的。
13.根据权利要求1～12中任一项所述的组合物，其为用于使皮肤湿润、使由干燥引起的皱纹不显著的皱纹改善用组合物。
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| PB01 | Publication | ||
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| C14 | Grant of patent or utility model | ||
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Granted publication date: 20160413 |