JP3105664B2 - 皮膚外用剤 - Google Patents

Description

【発明の詳細な説明】

【０００１】

【産業上の利用分野】本発明は、皮膚外用剤に関し、さ
らに詳しくは、優れた活性酸素除去作用を有し、脂質の
過酸化防止効果、皮膚老化防止効果、肌荒れ改善効果等
を有する化粧品、医薬品等の皮膚外用剤に関する。

【０００２】

【従来の技術】皮膚の老化には、皮膚中での活性酸素の
生成が大きく関わっていることが明らかにされつつあ
る。そこで近年では、皮膚の老化防止の目的で、活性酸
素生成防止剤や活性酸素除去剤、酸化防止剤などが皮膚
外用剤に応用されることが多くなってきた。

【０００３】また一方、肌荒れ改善や、皮膚老化防止に
対する薬効成分としては、アラントイン、アロエ抽出
物、人参抽出物、胎盤抽出物、牛血液除蛋白物、発酵代
謝物等が知られている。

【０００４】

【発明が解決しようとする課題】しかしながら、これら
の薬効成分を配合した皮膚外用剤は、肌荒れ改善や皮膚
老化防止に対して充分な効果を発揮できず、より優れた
細胞賦活作用を有する皮膚外用剤の開発が望まれてい
た。

【０００５】

【課題を解決するための手段】このような実情におい
て、本発明者等は鋭意研究を行なった結果、アスパラガ
ス抽出物とスーパーオキサイドディスムターゼとを併用
することにより、肌荒れ改善作用及び皮膚老化防止作用
に対する効果が相乗的に発揮されることを見出し、本発
明を完成した。

【０００６】すなわち、本発明は、（Ａ）アスパラガス
抽出物及び（Ｂ）スーパーオキサイドディスムターゼを
含有することを特徴とする皮膚外用剤を提供するもので
ある。

【０００７】本発明の皮膚外用剤に用いるアスパラガス
抽出物とは、アスパラガス（Ａｓｐａｒａｇｕｓ ｏｆ
ｆｉｃｉｎａｌｉｓ Ｌ．）の茎、根茎、葉、花などか
ら抽出して得られるものであり、その調製法は特に限定
されないが、例えば種々の適当な溶媒を用いて室温〜加
温下で抽出される。抽出溶媒としては、例えば水；メチ
ルアルコール、エチルアルコール等の低級一価アルコー
ル；グリセリン、プロピレングリコール、１，３−ブチ
レングリコール等の液状多価アルコール；酢酸エチル等
の低級アルキルエステル；ベンゼン、ヘキサン等の炭化
水素；ジエチルエーテル等のエーテル等の一種又は二種
以上を用いることができる。特に水、エチルアルコー
ル、グリセリン、１，３−ブチレングリコールの一種又
は二種以上の混合溶媒が好ましい。また抽出条件として
は、アスパラガスに対し容量比で１〜１０００倍量、特
に５〜１００倍量の溶媒を用い、４℃以上、特に１５〜
３０℃の温度で１時間以上、特に１〜３日間行なうのが
好ましい。

【０００８】以上のような条件で得られる抽出物は、抽
出された溶液のまま用いても良いが、さらに必要により
濃縮、濾過等の処理をしたものを適宜使い分けて用いる
ことができる。

【０００９】本発明の皮膚外用剤におけるアスパラガス
抽出物の配合量は、好ましくは乾燥固形分として０．０
００１〜１０重量％（以下単に「％」で示す）であり、
好ましくは０．０１〜５％である。

【００１０】アスパラガス抽出物の含有量が０．０００
１％未満であると効果が充分発揮されず、１０．０％を
超えてもそれ以上の効果の増大は見られない。

【００１１】一方、本発明の他の必須成分である（Ｂ）
成分のスーパーオキサイドディスムターゼ（以下、「Ｓ
ＯＤ」という）は、動物、植物、微生物等の生体内に広
く分布するスーパーオキサイド消去酵素であり、その起
源や取得方法は特に限定されない。

【００１２】このＳＯＤの製造方法としては、ヒト、
牛、犬など動物組織から抽出したものでも、キャベツ、
キュウリ、レタスなど植物から抽出したものでも、微生
物が生産したものを抽出したものでもよく、また遺伝子
操作によって製造したものでもよい。さらにＳＯＤを主
成分とするものであれば必ずしも精製しなくてもよい。

【００１３】これらＳＯＤの本発明皮膚外用剤中の配合
量は、一般には０．００００１〜５％、好ましくは０．
００１〜３％である。ＳＯＤの含有量が０．００００１
％より少ない場合は、十分な効果が得られないことがあ
り、また、５％を超えて配合してもそれ以上の効果の増
大は見られず、かえって製剤面で悪影響が生じる場合が
ある。

【００１４】さらに、本発明の皮膚外用剤には、本発明
の効果を損なわない範囲で、前記必須成分の他、通常の
皮膚外用剤に用いられる水性成分、粉体、界面活性剤、
油剤、保湿剤、アルコール類、pH調整剤、防腐剤、色
素、酸化防止剤、紫外線吸収剤、増粘剤、香料、美容成
分等を必要に応じて適宜配合することができる。

【００１５】本発明の皮膚外用剤は、必須成分の（Ａ）
及び（Ｂ）成分を配合し、常法に従って製造することが
できる。そして、乳液、クリーム、化粧水、美容液、ク
レンジング、パック、洗浄料、ファンデーション等や、
その他分散状、顆粒状、軟膏状等の医薬用、医薬部外用
又は化粧用の皮膚外用剤として適用することができる。

【００１６】

【実施例】次に、試験例及び実施例を挙げ本発明をさら
に詳しく説明するが、本発明はこれらになんら制約され
るものではない。

【００１７】製造例１（アスパラガス抽出物） 原料として生ホワイトアスパラガス根本部分を２３６５
０ｇ（新鮮重量として）計量し、次いでアルコール濃度
が６０％となるように調整してエタノールを添加した。
これらを食品用ミキサー（ナショナルＭＸ−Ｍ３）を用
いて粉砕して、混合物を得た。次いでこれらの原料と溶
媒からなる混合物をポリバケツに入れて、室温下、一昼
夜静置して抽出を行なった後、吸引濾過により抽出液を
吸引濾過ビンに回収した。抽出残渣には再度６０％エタ
ノールを２５ｌ加え、前述の操作を繰り返した後、抽出
液約６６ｌをロータリーエバポレーターにより濃縮、溶
媒留去して褐色の濃縮抽出物を１０００ｇ（乾燥固形分
４％）得た（第１工程）。

【００１８】次いで該濃縮抽出物が全て溶解する迄、ｎ
−ブタノールと水（１：１）の混合溶媒を加え、よく振
とうした後、遠心分離機で約１万回転、３０分間の遠心
分離を行なって、サポニン成分等をｎ−ブタノール層に
抽出分離した（第２工程）。次いで該ｎ−ブタノール層
を、ロータリーエバポレーターにより濃縮、溶媒留去し
て約１１０ｇの抽出物を得た（第３工程）。

【００１９】次いで該エキスに水とベンゼンを当量ずつ
加えて懸濁させ、乳白色の溶液を得た。この溶液を遠心
分離機を用いて１万回転、３０分間の処理条件で遠心分
離し、分離したベンゼン層を遠心管を傾け上層のベンゼ
ンを捨てるか、或いはピペット管で上層だけを吸い取っ
て取り除くと共に抽出物中の脂質成分の除去を行ない、
さらに残った水層部に、新たなベンゼンを同量加えて同
様な操作を行なった。該脱脂工程は、ベンゼンだけの添
加だけでも良いが、クロロホルムやエーテルのような他
の溶媒を用いると効率良い脱脂が行なえることを確認し
ている（第４工程）。

【００２０】次いで得られた水層部分より、ロータリー
エバポレーターによって水分を濃縮、乾固した後、ｎ−
ブタノールと水（１：１）の混合溶媒約１ｌを添加して
抽出物を溶解させ、分液ロート内で一昼夜静置してサポ
ニン成分をブタノール層に抽出した。次いでブタノール
層を、ロータリーエバポレーターにより濃縮、乾固して
約１８ｇの抽出物（褐色エキス）を得た（第５工程）。

【００２１】次いで該褐色抽出物に３００mlのメタノー
ルを加えて溶解し、注射針を用いて７５mlずつ、別に用
意したエチルエーテル（２ｌ）の中にゆっくり滴下させ
て白色の沈殿を生成せしめ、しばらく静置させた後、傾
潟法によりエーテルを大部分除去し、さらに吸引濾過に
より沈殿を集め、その沈殿物の上から新しいエーテルで
数回洗って、夾雑物の溶けたエーテルを洗い流した。こ
のような操作で得られたほぼ白色の沈殿物を、真空デシ
ケータ中で乾燥した後、乳鉢で粉砕して、約１１ｇのア
スパラガスサボニン粉末を得た（第６工程）。

【００２２】試験例１ スーパーオキサイド除去活性測定試験：製造例１の第１
工程で得られたアスパラガス抽出物を試料として、下記
測定方法によりスーパーオキサイド除去活性を測定し
た。また、市販のＳＯＤ及びこれをアスパラガス抽出物
と組み合わせたものについてもあわせて活性を測定し
た。これらの結果を表１に示す。

【００２３】（測定方法）０．０５Ｍ炭酸ナトリウム緩
衝液（pH１０．２）２．４mlに基質溶液〔３．０mMキサ
ンチン（０．０５Ｍ炭酸ナトリウム緩衝液に溶解）〕
０．１ml、３．０mMＥＤＴＡ０．１ml、０．１５％（Ｗ
／Ｖ）ウシ血清アルブミン、０．７５mMニトロブル−テ
トラゾリウム０．１ml及び各試料０．１mlを混合し、２
５℃で１０分間放置した後、酵素溶液〔キサンチンオキ
シダーゼ溶液（精製水にて約０．０４units／ml希
釈）〕０．１mlを加えて反応を開始する。２５℃で２０
分間インキュベートした後、６mM ＣａＣｌ₂ ０．１m
lを加えて反応を停止する。次いで５６０nmにおける吸
光度（Ａ）を測定する。

【００２４】対照には検体のかわりに精製水を加えた試
料の吸光度（Ｂ）、また各試料のブランクには、６mM
ＣａＣｌ₂ ０．１mlを加えて反応停止後に、キサンチ
ンオキシダーゼ０．１mlを添加した試料の吸光度（Ｃ）
を測定し、次式より、スーパーオキサイド除去率を算出
した。

【００２５】

【数１】

【００２６】Ａ：試料の酵素反応による吸光度 Ｂ：対照の酵素反応による吸光度 Ｃ：試料の無酵素反応による吸光度

【００２７】

【表１】

【００２８】＊１：製造例１の第１工程で得られたアス
パラガス抽出物。 ＊２：シグマ社製；ウシ赤血球より得たもの、３．５７
０units／mg

【００２９】表１の結果より明らかな如く、アスパラガ
ス抽出物は単独でもＳＯＤ様作用を有していたが、ＳＯ
Ｄと併用することにより、相乗的な作用を発揮し、活性
酸素除去に極めて有効であることが示された。

【００３０】このことは、アスパラガス抽出物とＳＯＤ
を併用した本発明の皮膚外用剤が、紫外線による皮膚中
での活性酸素生成に起因する過酸化脂質の生成、炎症、
黒化、老化に対し、極めて高い予防効果を有することを
示すものである。

【００３１】実施例１ 乳液：表２に示す組成及び下記製法で乳液を調製し、そ
の美肌効果及び皮膚老化防止効果を調べた。この結果を
表５に示す。

【００３２】

【表２】

【００３３】（製法） Ａ．成分（６）、（７）、（９）及び（１３）を加熱混
合し、７０℃に保つ。 Ｂ．成分（１）〜（５）及び（１０）を加熱混合し、７
０℃に保つ。 Ｃ．ＢをＡに加えて混合し、成分（１２）を加えて均一
に乳化し、３０℃まで冷却して、成分（８）及び（１
１）を加え、均一に混合して乳液を得る。

【００３４】（試験方法）２８〜５８才の女性１５名を
パネルとし、毎日、朝と夜の２回、１２週間にわたって
洗顔後に被験乳液の適量を顔面に塗布した。塗布による
美肌及び皮膚老化防止効果を下の基準によって評価し
た。

【００３５】

【表３】 美肌効果： 〔評 価〕 〔内 容〕 有 効 肌のくすみが目立たなくなった。 やや有効 肌のくすみがあまり目立たなくなった。 無 効 使用前と変化なし。

【００３６】

【表４】 皮膚老化防止効果： 〔評 価〕 〔内 容〕 有 効 肌のはり、つやが改善された。 やや有効 肌のはり、つやがやや改善された。 無 効 使用前と変化なし。 （結果）

【００３７】

【表５】

【００３８】実施例２ クリーム：表６に示す組成及び下記製法でクリームを調
製し、その美肌効果及び皮膚老化防止効果を調べた。こ
の結果を表７に示す。

【００３９】

【表６】

【００４０】＊３：牛胎盤１０kgを細切し、２倍量の５
Ｖ／Ｖ％エチルアルコール水溶液を加え、３７℃で６時
間抽出した後、ゲル濾過、透析などにより精製したも
の。（収量約２kg）タンパク量 約１．０〜１．５％ ＊４：キャベツ１kgを細切し、同量の精製水を加え、ホ
モジナイズする。濾過した後に硫安分画を行ない、透析
処理を行ったもの。（収量約１０ｇ）タンパク量 約
２．０〜４．０％

【００４１】（製法） Ａ．成分（１）〜（７）、（１１）及び（１２）を混合
し、加熱して７０℃に保つ。 Ｂ．成分（８）及び（１３）を混合し、加熱して７０℃
に保つ。 Ｃ．ＡにＢを加え、混合した後、冷却して（９）及び
（１０）を加えて、均一に混合して、クリームを得た。 （試験方法）実施例１と同じ （評価基準）実施例１と同じ （結果）

【００４２】

【表７】

【００４３】表７の結果より明らかな如く、本発明品２
及び３のクリームは肌の「つや」や「はり」の喪失、
「くすみ」等の皮膚の老化現象の防止、改善に有効であ
った。

【００４４】

【表８】 実施例３ 化粧水： （処方） （％） （１）グリセリン ５．０ （２）１，３−ブチレングリコール ６．５ （３）ポリオキシエチレンソルビタン １．２ モノラウリン酸エステル（２０Ｅ．Ｏ．） （４）エチルアルコール ８．０ （５）アスパラガス抽出物^*1 １．０ （６）ＳＯＤ^*5 ０．５ （７）防腐剤 適量 （８）香料 適量 （９）精製水 残量 ＊５：シグマ社製；人赤血球より得たもの、５．２３０
units／mg

【００４５】（製法） Ａ．成分（３）、（４）、（７）及び（８）を混合溶解
する。 Ｂ．成分（１）、（２）、（５）、（６）及び（９）を
混合溶解する。 Ｃ．ＡとＢを混合して均一にし、化粧水を得た。

【００４６】

【表９】 実施例４ パック： （処方） （％） （１）ポリビニルアルコール ２０．０ （２）エチルアルコール ２０．０ （３）グリセリン ５．０ （４）カオリン ６．０ （５）アスパラガス抽出物^*1 ０．０５ （６）ＳＯＤ含有プラセンタエキス^*6 ０．０１ （７）防腐剤 ０．２ （８）香料 ０．１ （９）精製水 残量 ＊６：実施例２のものを凍結乾燥したもの

【００４７】（製法） Ａ．成分（１）、（３）〜（５）及び（９）を混合し、
７０℃に加熱し、撹拌する。 Ｂ．成分（２）、（７）及び（８）を混合する。 Ｃ．ＢをＡに加え、混合した後、冷却して（６）を均一
に分散してパックを得た。

【００４８】

【表１０】 実施例５ 洗浄料： （処方） （％） （１）ステアリン酸 １０．０ （２）パルミチン酸 ８．０ （３）ミリスチン酸 １２．０ （４）ラウリン酸 ４．０ （５）オレイルアルコール １．５ （６）精製ラノリン １．０ （７）香料 ０．１ （８）防腐剤 ０．２ （９）グリセリン １８．０ （１０）水酸化カリウム ６．０ （１１）アスパラガス抽出物^*1 ０．５ （１２）ＳＯＤ^*7 ０．０５ （１３）精製水 残量 ＊７：シグマ社製；ホースラデッシュより得たもの、
２．１５０units／mg

【００４９】（製法） Ａ．成分（９）、（１０）及び（１３）を混合し、７０
℃に加熱する。 Ｂ．成分（１）〜（６）及び（８）を混合し、７０℃に
加熱する。 Ｃ．上記Ｂを先のＡに加え、しばらく７０℃に保ち、け
ん化反応が終了後、５０℃まで冷却し、成分（７）、
（１１）及び（１２）を加え、冷却して洗浄料を得た。

【００５０】

【表１１】 実施例６ ゲル軟膏： （処方） （％） （１）カルボキシビニルポリマー １．０ （２）トリエタノールアミン １．０ （３）１，３−ブチレングリコール １０．０ （４）アスパラガス抽出物^*1 ０．０１ （５）ＳＯＤ^*7 ０．０２ （６）精製水 残量

【００５１】（製法） Ａ．成分（１）及び（３）〜（６）を混合溶解する。 Ｂ．Ａに成分（２）を加え、混合して均一にし、ゲル軟
膏を得た。

【００５２】

【発明の効果】本発明の皮膚外用剤は、優れた活性酸素
除去作用を有するので、肌荒れ改善や、皮膚老化防止等
に安定で且つ優れた効果を有する。従って、本発明の皮
膚外用剤は、紫外線による皮膚中での活性酸素生成に起
因する過酸化脂質の生成、炎症、黒化、老化等に対し、
極めて高い予防効果を有するもので、美容や医療におい
て極めて有用なものである。

───────────────────────────────────────────────────── フロントページの続き (58)調査した分野(Int.Cl.⁷，ＤＢ名) A61K 7/00 - 7/50

Claims (1)

(57)【特許請求の範囲】
1. 【請求項１】 （Ａ）アスパラガス抽出物及び（Ｂ）ス
   ーパーオキサイドディスムターゼを含有することを特徴
   とする皮膚外用剤。