JPH11255657A - 線維芽細胞増殖剤及びこれを配合した皮膚外用剤 - Google Patents
線維芽細胞増殖剤及びこれを配合した皮膚外用剤Info
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Abstract
する。 【解決手段】 フィトグリコーゲンを有効成分として含
有することを特徴とする。
Description
ンを有効成分とした新規な線維芽細胞増殖剤及びこれを
配合した皮膚外用剤に関する。
内、特に肝臓や筋肉に多く存在するグリコーゲンと基本
構造が同じである植物由来の冷水可溶な貯蔵多糖類であ
り、α−1,4結合からなるグルコース鎖がα−1,6
結合で高度に枝分かれした構造をしている。そのため、
皮膚外用剤において、その構造を活かし保湿剤として配
合することが従来より提案されている(特開昭62−1
78505、特開昭63−290809)。しかしなが
ら、フィトグリコーゲンの線維芽細胞増殖効果に関して
は未だ何ら報告されていない。
弾力線維、基質を産出し、皮膚の老化と密接な関係を有
している。そのため、近年、皮膚外用剤の分野におい
て、線維芽細胞の増殖効果を有する物質を配合し、皮膚
の機能そのものを活性化して、皮膚の老化症状の改善を
図る試みがなされている。このような物質としては、臓
器由来の水溶性蛋白や牛胎盤エキス等が知られている。
来の水溶性蛋白は、蛋白質であるため、感作性で問題が
あり、一方、牛胎盤エキスにおいては、牛由来のもので
あるため、「狂牛病」の問題から安全性で疑問視されお
り、安全性に優れた線維芽細胞増殖剤が切望されてい
る。そこで、本発明の目的は、安全性に優れた線維芽細
胞増殖剤を提供することを目的とする。
的を達成すべく安全性に優れた種々の多糖類について鋭
意研究を重ねた結果、フィトグリコーゲンに線維芽細胞
増殖効果を有することを見出し、本発明を完成するに至
った。 すなわち、本発明は、(1)フィトグリコーゲ
ンを有効成分として含有した線維芽細胞増殖剤、(2)
(1)の線維芽細胞増殖剤を配合した皮膚外用剤、を提
供するものである。
尚、本発明において「%」はすべて「重量%」である。
本発明において「フィトグリコーゲン」とは、前述した
とおり、動物の肝臓や筋肉に多く存在するグリコーゲン
と基本構造が同じである植物由来の冷水可溶な貯蔵多糖
類である。フィトグリコーゲンの供給源としては、植物
由来であれば特に限定するものでないが、例えば、トウ
モロコシ、大麦、米等の種子が挙げられる。その中で
も、スイートコーンの種実は他の植物に比較し、フィト
グリコーゲンを高濃度含有していることから、供給源と
して好ましい。
・精製方法は特に制限はなく、任意の方法を採用するこ
とができる。一般的な調製方法を示すと、フィトグリコ
ーゲンを含有する植物組織を粉砕等により抽出しやすい
状態とした後、植物組織の固形分に対し3〜20倍量の
清水を加え水抽出し、デンプン、蛋白質、その他の不溶
物を遠心分離等で除去する。得られた抽出液を加熱処理
および/またはトリクロロ酢酸等で処理し蛋白質を除去
した後、この処理液にメタノール、エタノール、アセト
ン等の有機溶剤を添加しフィトグリコーゲンを沈殿させ
る。尚、沈殿の際の有機溶剤の濃度は、溶剤により異な
るが、例えば、メタノールやエタノールのようなアルコ
ールの場合は60容量%以上、アセトンの場合は50容
量%以上とするのが好ましい。この濃度より低い場合
は、フィトグリコーゲンの一部あるいは全部が溶解した
状態となるため、収率が低減し好ましくない。次に、回
収した沈殿物をメタノール、エタノール、アセトン、ジ
エチルエーテル等の有機溶剤で洗浄した後、乾燥し粉末
状のフィトグリコーゲンを得る。
等により得られたフィトグリコーゲンをそのまま用いて
も良いし、さらに必要に応じ賦形剤等を加配しても良
い。
配合量は、皮膚外用剤中フィトグリコーゲンが0.00
1〜5%、特に、0.01〜2%配合することが好まし
い。その配合量が少な過ぎると皮膚の老化防止や改善効
果が発揮されにくく、一方、あまり多くし過ぎても一定
の効果以上は期待できないからである。
を含めた皮膚表面に用いるもので、例えば、化粧水、乳
液、クリーム、養毛剤、育毛剤、パック、口紅、リップ
クリーム、ファンデーション、ションプー、リンス、ト
リートメント、浴用剤等が挙げられる。
さらに詳細に説明する。尚、本発明は、これら実施例・
試験例に制約されるものではない。
BOT-COUPE CUTTING MIXER R-551 」、ティー・ケー・食
品機械(株)扱い)で粉砕し、この粉砕物に1kgの清
水を加え混合後、200メッシュストレーナーで濾過す
る。得られた濾液を遠心分離機(商品名「高速冷却遠心
機 KR-20000S」、(株)久保田製作所製)で8500r
pmで5分間遠心分離し、デンプン、蛋白質、その他の
不溶物を除去した。上清を濾紙で濾過後、95℃で20
分間加熱し、冷却後、5000rpmで5分間遠心分離
し凝固した蛋白質を除去した。上清を4℃に冷却して、
これに5%になるまでトリクロロ酢酸を加え、4℃で一
晩放置したのち、5000rpmで5分間遠心分離し沈
殿物を除去し、上清を3倍量のメタノールに注加して生
じた沈殿物を5000rpmで5分間の遠心分離で集
め、メタノール、エタノール、ジエチルエーテルで順次
洗浄したのち真空乾燥し線維芽細胞増殖剤を得た。得ら
れた線維芽細胞増殖剤には、乾物中でフィトグリコーゲ
ンを約95%含有していた。
一とし、75℃に加熱した。一方、(5) 〜(7) 及び(9)
の水相成分を混合・溶解して75℃に加熱した。次いで
上記水相成分に油相成分を添加して予備乳化した後、ホ
モミキサーにて均一に乳化した。その後冷却し、50℃
にて(8) を添加・混合し、実施例1の線維芽細胞増殖剤
を配合した皮膚用クリームを得た。
し、孔径0.22μmのメンブレンフィルターで濾過し
た後、浮遊培養用ウェル(商品名「浮遊培養用96穴マ
ルチプレート」、住友ベークライト(株)製)に線維芽
細胞増殖剤のコート量が固形物として100μg/cm2
となるように添加し、クリーンベンチ内で無菌的に風乾
させた。
o.4049」、三光純薬(株)製)を10%FBS(牛胎児
血清)含有D−MEM培地で1×104 セル/mlとな
るように分散し、線維芽細胞増殖剤をコートした各ウェ
ルに100μl添加した。次に、これを、37℃、5%
CO2 雰囲気下で培養し、3、5、6日目の細胞数を下
記のクリスタルバイオレット法により把握した。尚、線
維芽細胞増殖剤をコートしていないウェルを用い上記と
同様な方法で培養したものを対照とした。
(−)を添加し、30分間静置して細胞を固定した後、
培地を除去し、PBS(−)で1回洗浄した。次に、染
色液である0.4w/v%クリスタルバイオレット含有
メタノールを各ウェルに50μl添加し、30分間静置
して染色した後、染色液を除去し、蒸留水で洗浄し、2
時間程度風乾し、545nmにおける吸光度をウェルリ
ーダーSK−60((株)サイニクス製)で測定し、6
ウェルの平均値を求めたところ、表1の結果が得られ
た。尚、吸光度0.1当たり約2.5×103 の細胞数
に相当する。
細胞増殖効果を有していることが理解される。
20名を1群10名に分け、一方の群には実施例2の線
維芽細胞増殖剤を配合した皮膚用クリーム(本発明
品)、他方の群には線維芽細胞増殖剤を配合せず実施例
2と同様な方法で得た皮膚用クリーム(比較品)をブラ
インドにて3ヵ月間使用させ、使用前後の皮膚のしわ、
きめの変化を写真撮影及び皮膚表面のレプリカにより観
察し、改善効果を評価したところ、表2の結果が得られ
た。尚、改善効果は、「改善」、「やや改善」、「変化
なし」の三段階で評価した。
として含有した線維芽細胞増殖剤を配合した皮膚外用剤
は、皮膚の老化症状の改善に対して、良好な効果を有す
ることが理解される。
類であるフィトグリコーゲンに線維芽細胞増殖効果を有
することが認められる。これより、安全性に優れた線維
芽細胞増殖剤及び皮膚の老化症状の改善に有効な皮膚外
用剤を提供することができる。
数を把握するクリスタルバイオレット法による吸光度と
の関係を示したものである。
Claims (2)
- 【請求項1】 フィトグリコーゲンを有効成分として含
有することを特徴とする線維芽細胞増殖剤。 - 【請求項2】 請求項1記載の線維芽細胞増殖剤を配合
することを特徴とする皮膚外用剤。
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---|---|---|---|
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1998
- 1998-03-12 JP JP06128798A patent/JP4762383B2/ja not_active Expired - Fee Related
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US10172946B2 (en) | 2013-04-26 | 2019-01-08 | Mirexus Biotechnologies Inc. | Monodisperse glycogen and phytoglycogen nanoparticles and use thereof as additives in cosmetics, pharmaceuticals, and food products |
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