KR20150105721A - 구기자나무의 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제 화장료 조성물 - Google Patents

구기자나무의 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제 화장료 조성물 Download PDF

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Abstract

본 발명은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제 화장료 조성물에 관한 것이다.
본 발명의 피부 노화 억제 화장료 조성물은 임상적으로 안전성이 증명된 한방 약재 중에서 선별된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물을 함유함으로써, 피부에 자극이 없고 화장료 조성물의 배합 성분으로서 높은 안정성을 가지며 노화 억제 및 주름개선 효과를 제공함으로써, 다양한 제형의 피부 노화 완화의 기능성 화장품에 제공할 수 있다.

Description

구기자나무의 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제 화장료 조성물{SKIN-ANTIAGING COSMETICAL COMPOSITION CONTAINING MIXED EXTRACT OF LYCIUM CHINENSE MILL AS AN ACTIVE INGREDIENT}
본 발명은 구기자나무의 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제 화장료 조성물에 관한 것으로서, 더욱 상세하게는 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분에 대한 추출용매별, 추출비율에 따라 추출된 복합추출물을 유효성분으로 함유하되, 상기 복합추출물의 농도별 최적의 항산화 거동을 구현하는 피부 노화 억제용 화장료 조성물에 관한 것이다.
동서고금을 막론하고 아름답고 젊은 피부를 갖고자 하는 것은 모든 사람들의 소망이다. 특히, 안면피부는 외부 환경에 직접적으로 노출되어 각종 오염물질을 비롯해 온도, 습도, 인체 내외적 스트레스, 생활환경 등의 물리적, 화학적인 변화에 매우 민감하게 반응한다.
외부 환경으로는 자외선의 직, 간접적인 노출과 내부적으로는 신체 대사 과정 중에 발생하는 활성산소와 자유 라디칼에 의해 유발되는 다양한 원인에 의해 피부를 손상시키고 노화를 일으키는 주요 원인 중 하나로 꼽히고 있다.
또한 나이가 듦에 따라, 신체 신진대사의 능력저하와 피부를 구성하는 각종 탄력 섬유층이 무너지면서 피부의 노화 속도는 더욱 촉진되며, 피부내외의 구조적, 기능적인 손상을 입게 된다.
이에, 안면피부의 주름 생성을 억제시키고 각종 피부 노화반응을 억제하여 주름 현상을 개선시키기 위하여 다양한 소재들에 대한 연구가 활발히 진행되고 있다.
상기 주름 생성을 억제시키거나 주름 현상을 개선시키기 위하여, 비타민 A 유도체인 레티놀과 레티닐팔미테이트, 아데노신, 비타민 C 유도체 등이 대표적인 주름개선용 원료로서 사용되고 있다.
대한민국특허 제722955호에 개시된 피부노화방지 및 주름억제 기능을 갖는 생약재 조성물은 상엽을 메탄올로 추출한 상엽추출물과, 구기자를 물로 추출한 구기자추출물과, 도인을 메탄올로 추출한 도인추출물을 각각 40∼70: 5∼20: 10∼50의 중량비율로 혼합한 생약재 조성물을 보고하고 있다.
또한, 대한민국특허 제753186호 및 제981344호에는 하수오, 백복령, 우슬, 당귀, 구기자, 토사자 및 인삼 추출물로 이루어진 생약추출 혼합물을 유효성분으로 함유하는 피부 노화 방지용 화장료 조성물이 개시되어 있다. 이상의 생약추출 혼합물을 함유함으로써, 피부 세포의 증식 촉진, 항산화 효능, 콜라겐 합성의 촉진에 의한 피부 주름 개선과 피부 탄력 개선, 보습력 향상 및 피부 면역 증강을 통하여 피부 노화를 방지하고, 발효를 통해 생약의 독성이 제거되거나 완화되어 독성에 대한 피해를 최소화할 수 있다고 보고하고 있다.
대한민국특허 제1310980호에는 구기자 나무가지의 유기용매 추출물의 클로로포름 분획물 또는 에틸아세테이트 분획물 중에서 선택되는 어느 하나를 유효성분으로 함유하는 피부 항산화 및 주름 개선용 화장료 조성물이 개시되어 있다.
그러나 종래 주름개선용 원료들은 배합한 화장품의 변색/변취, 피부 자극성과 더불어 빠르게 진행되는 산화반응에 의해, 화장료 제형의 배합성분으로서 적용하기에 어려움이 지적되어 왔다.
이에, 본 발명자들은 천연식물로부터 유래된 식물추출물을 유효성분으로 함유한 화장료 조성물의 소재를 탐색한 결과, 예부터 사용되어 임상적으로 안전성이 증명된 한방 약재 중에서 구기자나무를 선별하고 각 부위별 추출물의 항산화 효과결과로부터, 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물이 피부에 자극이 없고 화장료 조성물의 배합 성분으로서 높은 안정성을 가지며 노화 억제 및 주름개선 효과를 확인함으로써, 본 발명을 완성하였다.
본 발명의 목적은 구기자나무로부터 유래된 복합추출물이 유효성분으로 함유된 피부 노화 억제 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
본 발명의 다른 목적은 구기자나무 혼합성분을 추출용매별, 추출비율에 따라 제조된 복합추출물의 항산화 효능을 최적화한 피부 노화 억제 화장료 조성물을 제공하는 것이다.
상기 목적을 달성하기 위하여, 본 발명은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물이 유효성분으로 함유된 피부 노화 억제 화장료 조성물을 제공한다.
더욱 바람직하게는 본 발명의 피부 노화 억제 화장료 조성물은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분이 추출된 복합추출물이 함유된 것이다.
본 발명에 있어서 복합추출물은 구기자나무 혼합성분 및 추출용매간 1:10 내지 1:200의 중량비율로 추출되는 것이며, 더욱 바람직하게는 상기 복합추출물이 구기자나무 혼합성분 및 에탄올, 부틸렌글리콜, 정제수 및 부탄올에서 선택된 어느 하나의 추출용매간 1:10 내지 1:40의 중량비율로 추출된 것이다.
본 발명의 구기자나무의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물은 그 농도가 0.1 내지 1% 농도일 때, DPPH 소거능 및 하이드록시 라디칼 소거능에 의한 우수한 항산화 효과를 구현한다.
이에, 본 발명의 구기자나무의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물은 유연화장수, 영양화장수, 에센스 및 영양크림으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형에 유효성분으로 함유되며, 이때, 복합추출물은 0.01 내지 30중량%로 함유된다.
본 발명에 의한 구기자나무로부터 유래된 복합추출물이 유효성분으로 함유된 피부 노화 억제 화장료 조성물은 임상적으로 안전성이 증명된 한방 약재 중에서 선별된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물로서 피부에 자극이 없고 우수한 항산화 효능을 확인함으로써, 노화 억제 효과뿐만 아니라, 화장료 조성물의 배합성분으로서 높은 안정성을 제공할 수 있다.
도 1 본 발명의 구기자나무 복합추출물과 단일추출물과의 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과를 비교한 결과이고,
도 2는 본 발명의 구기자나무 복합추출물의 농도별 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과를 도시한 결과이고,
도 3은 본 발명의 구기자나무 복합추출물의 농도별 하이드록시 라디칼 소거능에 의한 항산화 효과를 도시한 결과이고,
도 4는 본 발명의 구기자나무 복합추출물의 농도별 과산화수소 소거능에 의한 항산화 효과를 도시한 결과이다.
이하, 본 발명을 상세히 설명하고자 한다.
본 발명은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물이 유효성분으로 함유된 피부 노화 억제 화장료 조성물을 제공한다.
더욱 바람직하게는 본 발명의 피부 노화 억제 화장료 조성물은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분이 추출된 복합추출물이 함유된 것이다.
본 발명은 임상적으로 안전성이 증명된 한방 약재 중에서 식물소재를 선별함으로써, 피부 안정성 및 저자극성을 확보한다.
본 발명에서 사용한 한약 약재는 식품의약품안전청 공고 제2012 -110호「생약 등의 잔류ㆍ오염물질 기준 및 시험방법」(식품의약품안전청 고시 제2011-42호, 2011. 8. 22)에 준하는 시험을 진행하여 통과한 약재 중에서 선별한다.
그 중에서 본 발명은 구기자나무의 잎, 꽃, 열매, 뿌리를 유효성분으로 선정한다. 가지과 낙엽성 활엽관목 구기자나무의 학명은 Lycium chinense Miller이고, 한국, 중국, 일본에 분포하며 우리나라에는 충청남도 청양군이 집산지이다. 줄기는 가늘고 회백색이며 여름에 자색꽃이 피고 가을에 열매가 붉게 익는다.
상기 구기자나무의 잎은 털이 없고 어긋나며 여러 개가 모여나고, 톱니가 없는 난형 또는 나산 피침형이며, 끝이 뾰족하고 1cm 정도의 크기를 가진다. 본초경에서 구기자나무의 잎은 「간의 기능을 보완하고 눈을 맑게 하며 허한 기를 채워줄 뿐만 아니라 정력도 키워주며 또한 몸 속의 열을 내리고 갈증을 없애며 노화를 예방한다」라고 기록되어 있다. 주요성분으로는 단백질, 비타민A, C, 아미노산, 리신(lysine), 탄닌(tannin), 숙신산(succinic acid)등 다양한 유기산이 포함되어 있다.
구기자나무의 꽃은 6월에서 9월 사이에 연한 자색으로 핀다.
구기자나무의 열매는 원형 또는 타원형이며 길이는 10mm, 지름은 5mm 정도이다. 약성은 약간 달고 차며 맛은 처음에는 달콤하나 나중에는 쓴맛을 낸다. 본초경에서는 「오랫동안 복용하면 근골을 단단하게 하며 몸이 가벼워져서 늙지 않고 더위와 추위를 타지 않는다」고 기록되어 있다. 주요성분으로는 베타인(Betaine), 베아크산틴, 카로텐(carotene), 티아민(thiamin), 비타민 A, B1, B2, C등을 포함하고 있으며 만성간염, 간경변증, 강장제, 해열제로 허리요통에 사용한다.
또한, 구기자나무의 뿌리, 즉 지골피(地骨皮)는 구기자나무(Lycium chinense Miller)의 뿌리껍질이며 관산-반관산 또는 조각으로서 두께 1-3mm이다. 맛은 달면서 약간 떫으며 약성은 차갑다. 동의보감에서는 「지골피는 간과 신장의 허열을 제거시켜 준다. 즉 보신(補腎), 생정(生精), 증기(增氣)의 영약이다」라고 기록되어 있다. 주요성분으로는 타우린(Taurine), 베타인(Betaine), 라노스테롤(Lanosterol) 등을 포함하고 있으며 심혈관계통의 혈압강하작용, 혈당강하작용이 보고되었다.
본 발명은 상기 구기자나무의 잎, 꽃, 열매, 뿌리를 추출용매를 이용하여 상온에서 추출하고 상기 추출물을 여과포, 여과지 및 감압여과장치 중에서 선택된 하나 이상의 장치로 여과하고, 동결건조하는 단계를 포함하여 얻은 추출물을 유효성분으로 함유하는 화장료 조성물을 제공한다. 이때, 구기자나무의 잎, 꽃, 열매, 뿌리는 적당한 중량비(wt / wt / wt)로 혼합될 수 있다.
상기에서 추출은 상온에서 3일 내지 5일 동안 수행하며, 추출물을 여과하여 고형분을 제거함으로써 추출물을 얻을 수 있다. 상기 추출물을 제조하는 방법과 각 단계별 조건은 특별히 한정되지 않고 통상의 공지된 방법에 의해 실시한다.
이에, 본 발명은 추출물의 제조공정 중에서 구기자나무의 잎, 꽃, 열매, 뿌리의 각 부위별 추출물의 항산화 효과결과로부터, 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분, 더욱 바람직하게는 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물에서 노화 억제 및 주름개선 효과를 확인함으로써, 상기 복합추출물을 유효성분으로 함유하는 것을 특징으로 한다.
더욱 구체적으로, 본 발명의 복합추출물은 구기자나무 혼합성분 및 추출용매간 1:10 내지 1:200의 중량비율로 추출되는 것이며, 더욱 바람직하게는 상기 복합추출물이 구기자나무 혼합성분 및 에탄올, 부틸렌글리콜, 정제수 및 부탄올에서 선택된 어느 하나의 추출용매간 1:10 내지 1:40의 중량비율로 추출되는 것으로, 구기자나무 혼합성분에 대하여 추출용매별 및 추출비율에 따라 복합추출물을 얻을 수 있다.
상기에서 얻어진 복합추출물을 항산화 실험(DPPH assay, Hydroxyl radical scavenging assay, Hydrogen peroxide assay)을 통하여 노화 억제 효과를 확인한 결과, 각 농도별 최적의 항산화 효과를 구현하는 복합추출물을 선정하여, 그를 유효성분으로 함유하는 피부 노화 억제 화장료 조성물을 제공한다.
이때, 본 발명의 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물은 그 농도가 0.1 내지 1% 농도일 때, 양성대조군 대비 DPPH 소거능 및 하이드록시 라디칼 소거능에 의한 우수한 항산화 효과를 제공한다. 따라서, 구기자나무의 복합추출물로 이루어진 피부 노화 억제 화장료 조성물은 피부에 자극이 없고 화장료 조성물의 배합 성분으로서 높은 안정성을 가지며 노화 억제 및 주름개선 효과를 부연한다.
이에, 이상의 구기자나무의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물은 유연화장수, 영양화장수, 에센스 및 영양크림으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형에 유효성분으로 함유되며, 이에 한정되지 아니하고, 팩, 유액, 스틱, 분무형, 패취형의 화장료 제형에서 적용할 수 있다.
이때, 구기자나무의 복합추출물의 함량은 0.01 내지 30중량%, 더욱 바람직하게는 0.01 내지 10.0중량%로 함유되는 것이다. 상기에서 함량 0.001중량% 미만이면, 노화 억제 효과를 기대할 수 없고, 30중량%를 초과하면, 노화 억제 효과 증가를 기대하기 어렵다.
이하, 실시예를 통하여 본 발명을 보다 상세히 설명하고자 한다.
본 실시예는 본 발명을 보다 구체적으로 설명하기 위한 것이며, 본 발명의 범위가 이들 실시예에 한정되는 것은 아니다.
< 실시예 1> 한방 약재 복합 추출물 제조 1
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 70% 에탄올 120g(1:10 비율 wt/wt)을 넣고, 상온에서 3일 주기 3번 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 2> 한방 약재 복합 추출물 제조 2
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 부틸렌글리콜 120g(1:10 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 5일 방치하여 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 3> 한방 약재 복합 추출물 제조 3
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 정제수 120g(1:10 비율 wt/wt)를 넣고 80℃에서 5시간 열수추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 4> 한방 약재 복합 추출물 제조 4
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 부탄올 120g(1:10 비율 wt/wt)를 넣고 상온에서 3일 주기 3번 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 5> 한방 약재 복합 추출물 제조 5
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 70% 에탄올 240g(1:20 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 3일 주기 3번 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 6> 한방 약재 복합 추출물 제조 6
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 부틸렌글리콜 240g(1:20 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 5일 방치하여 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
<실시예 7> 한방 약재 복합 추출물 제조 7
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 정제수 240g(1:20 비율 wt/wt)를 넣고 80℃에서 5시간 열수추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 8> 한방 약재 복합 추출물 제조 8
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 부탄올 240g(1:20 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 5일 주기 3번 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 9> 한방 약재 복합 추출물 제조 9
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 70% 에탄올 480g(1:40 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 5일 주기 3번 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 10> 한방 약재 복합 추출물 제조 10
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 부틸렌글리콜 480g(1:40 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 10일 방치하여 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 11> 한방 약재 복합 추출물 제조 11
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 정제수 480g(1:40 비율 wt/wt)를 넣고 80℃에서 5시간 열수추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 실시예 12> 한방 약재 복합 추출물 제조 12
건조된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃, 뿌리를 적당량으로 혼합한 혼합물 12g에 부탄올 480g(1:40 비율 wt/wt)을 넣고 상온에서 5일 주기 3번 추출하였다.
추출이 끝난 후 380메시(mesh) 여과포로 약재를 거르고, 11㎛ 페이퍼 필터(Whatman paper No.1)로 여과한 후, 전체 여과물을 0.45㎛ 멤브레인 필터(TF-450, 60173, PALL Life Sciences)를 이용하여 감압 여과장치에서 여과하고 최종 추출물을 획득하였다.
< 비교예 1>
건조된 구기자나무의 줄기 12g에 70% 에탄올 240g(1:20 비율 wt/wt)로 추출하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
< 비교예 2>
건조된 구기자나무의 줄기 12g에 부틸렌글라이콜 240g(1:20 비율 wt/wt)로 추출하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
< 비교예 3>
건조된 구기자나무의 줄기 12g에 정제수 240g(1:20 비율 wt/wt)로 추출하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
< 비교예 4>
건조된 구기자나무의 줄기 12g에 부탄올 240g(1:20 비율 wt/wt)로 추출하는 것을 제외하고는, 상기 실시예 1과 동일하게 수행하였다.
< 실험예 1> DPPH 소거능에 의한 항산화 효과
상기 실시예 1∼12 및 비교예 1∼4의 방법으로 수득한 추출물에 대한 DPPH 소거능 효과를 측정하기 위하여, 각 실시예의 추출물을 정제수에 각각 0.01, 0.05, 0.1, 0.5, 1% 농도로 희석하여 농도별 항산화 효과를 측정하였다.
시료의 전자공여능 측정은 각각의 추출물의 농도별 용액 100㎕에 5×10-4M의 DPPH 100㎕를 투여하고 1분간 교반하였다. 이후에 25℃ 인큐베이터에서 30분 반응시킨 후 마이크로플레이트(Microplate) 계수기를 사용하여 540㎚에서 흡광도를 측정하여 결과값을 얻었고 하기 표 1에 그 결과를 기재하였다. 여기서, 대조구는 L-아스코르빈산(100㎍/㎖)을 사용하였다.
Figure pat00001
도 1은 본 발명의 구기자나무 복합추출물과 단일추출물과의 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과를 비교한 결과이고, 도 2는 본 발명의 구기자나무 복합추출물의 농도별 DPPH 소거능에 의한 항산화 효과를 도시한 결과이다.
이에, 상기 DPPH 소거능 효과를 통한 전자공여능 측정결과, 구기자나무 줄기에 대한 단일추출물 대비, 본원발명의 구기자나무 복합추출물의 경우, 우수한 항산화 효과를 확인하였다. 특히, 실시예 1, 2, 7의 복합추출물은 0.5% 이상의 농도에서 80% 이상의 DPPH 소거능력을 보였다.
< 실험예 2> 하이드록시 라디칼 소거능 실험
상기 실험예 1의 결과로부터, 구기자나무 줄기로부터 추출된 단일추출물 대비, 복합추출물의 우수한 DPPH 소거능력을 확인하고, 실시예 1∼12의 방법으로 수득한 복합추출물에 대한 하이드록시(Hydroxyl) 라디칼의 소거능을 측정하였다. 이때, 각 실시예의 복합추출물을 정제수에 각각 0.01, 0.1, 1% 농도로 희석하여 농도별 항산화 효과를 측정하였다.
구체적으로는, 15㎖ 튜브에 10 mM FeSO4·7H2O, 10 mM EDTA, 10 mM 2-디옥시 디리보스(2-deoxy-Diribose)를 각각 0.2㎖씩 넣고, 대조군(0.1M phosphate buffer(pH 7.4)), 양성대조군(ascorbic acid 1000㎍/㎖), 농도별로 희석한 실험군(각 실시예의 추출물) 0.2㎖씩 넣었다. 다시 여기에 0.1M 인산 완충용액(pH 7.4) 1.2㎖과 10 mM H2O2 0.2㎖을 넣어 잘 섞은 후 37℃에서 4시간 동안 반응시켰다. 반응 이후 2.8% 트리클로로아세트산(TCA)과 1% 티오바르비툴산(thiobarbituric acid, TBA)을 각각 1㎖씩 가하여 끓는 물에서 10분간 끓인 다음, 반응액이 식으면 원심분리(6000rpm, 5분) 후 540nm(dual 655)에서 흡광도를 측정하여 하이드록시 라디칼의 소거능에 대한 결과값을 얻었다. 그 결과를 하기 표 2도 3에 기재하였다.
Figure pat00002
상기 표 2의 하이드록시 라디칼 소거능 결과에서, 하이드록시 라디칼 소거능을 확인하였으며 특히, 실시예 1, 2, 7의 복합추출물의 경우, 0.1% 농도에서 30% 이상의 하이드록시 라디칼을 소거하는 효과를 보였다.
< 실험예 3> 과산화수소 소거능 실험
상기 실험예 1의 결과로부터, 구기자나무 줄기로부터 추출된 단일추출물 대비, 복합추출물의 우수한 DPPH 소거능력을 확인하고, 실시예 1∼12의 방법으로 수득한 복합추출물에 대한 과산화수소 소거능을 측정하였다. 이때, 걱 실시예의 복합추출물을 정제수에 각각 0.01, 0.1, 1% 농도로 희석하여 농도별 항산화 효과를 측정하였다.
96 웰 플레이트에 0.1M 인산 완충용액(pH5) 100㎕를 넣은 후 대조군(0.1M phosphate buffer, pH5), 양성대조군(ascorbic acid 500㎍/㎖)과 실험군(시료)를 각각 20㎕씩 넣고, 과산화수소 20㎕를 혼합하여 37℃ 배양기(incubator)에서 약 5분간 반응시켰다. 반응이 끝나면 1.25mM ABTS 용액 30㎕와 1unit/㎖ 과산화효소(peroxidase) 30㎕(실험군) 또는 0.1M 인산완충용액(pH 5)(대조군)을 각각 혼합하여 37℃ 배양기에서 약 10분간 반응시켜 405 nm (daul 655)에서 흡광도를 측정하였다. 과산화수소의 소거능을 측정 결과를 하기 표 3도 4에 기재하였다.
Figure pat00003
상기 표 3의 과산화수소 소거능 결과로부터, 실시예 1, 2, 4의 추출물은 1% 농도에서 20% 이상의 과산화수소를 소거하는 효과를 확인하였다.
< 처방예 1> 유연화장수의 제조
상기 실시예 2의 방법으로 수득된 추출물을 유효성분으로 함유하는 유연화장수 제형의 처방예는 하기 표 4와 같다. 이때, 실시예 2의 추출물 함량은 상기 표 2에서 나타난 바와 같이 1%농도 이상을 기준으로 한다.
더욱 구체적으로, 소듐히알루로네이트는 정제수에 프로펠러믹서 3000rpm으로 분산시켜 1중량% 농도로 준비하고 수상 용해조에 원료 1 내지 8을 프로펠러믹서 500rpm으로 균일화한 후, 75℃까지 가온하여 완전 용해시킨 후, 실온으로 냉각하였다. 별도의 용해조에 원료 9 내지 11을 완전 용해시켜 상기 수상 용해조에 투입한 후, 교반과 동시에 혼합하였다. 여기에 실시예 2를 투입하여 충분하게 교반 혼합하여 노화 억제 화장용 유연화장수를 제조하였다.
Figure pat00004
< 처방예 2> 영양화장수의 제조
상기 실시예 2의 방법으로 수득된 추출물을 유효성분으로 함유하는 영양화장수 제형의 처방예는 하기 표 5와 같다. 실시예 2의 추출물 함량은 상기 표 2에서 나타난 바와 같이 1%농도 이상을 기준으로 한다. 하기 표 5에서 카보머는 정제수에 프로펠러믹서 4000rpm으로 분산하여 2중량% 용액으로 준비하고 수상 용해조에 원료 1 내지 6을 투입하여 호모 2000rpm으로 교반분산 후, 75℃까지 가온하였다. 유상 용해조에 원료 7 내지 13을 투입한 후, 75℃까지 가온하며 용해하였다. 수상 용해조에 용해된 유상을 투입하고 유화(3000 rpm/5분)시킨 후 실온으로 냉각하였다. 여기에 실시예 2의 추출물을 투입하여 충분하게 교반 혼합하여 노화 억제 화장용 영양화장수를 제조하였다.
Figure pat00005
< 처방예 3> 에센스의 제조
상기 실시예 2의 방법으로 수득된 추출물을 유효성분으로 함유하는 에센스 제형의 처방예는 하기 표 6과 같다. 이때, 실시예 2의 추출물 함량은 상기 표 2에서 나타난 바와 같이 1%농도 이상을 기준으로 한다. 하기 표 6에서 소듐히아루로네이트, 히드록시에틸셀룰로이즈는 정제수에 프로펠러믹서 2000rpm으로 용해 분산하여 1중량%로 준비하고 카보머는 정제수에 프로펠러믹서 4000rpm으로 분산하여 2중량%로 준비하였다. 수상 용해조에 원료1 내지 12를 투입, 호모를 2000rpm으로 교반하여 분산한 후, 75℃까지 가온하고 가온된 수상을 실온으로 냉각하였다. 별도의 용해조에 원료 13 내지 15를 완전 용해시킨 후에 상기 수상 용해조에 서서히 투입하여 교반 혼합하였다. 여기에 실시예 2를 투입하여 충분하게 교반 혼합하여 노화 억제 화장용 에센스를 제조하였다.
Figure pat00006
< 처방예 4> 영양크림의 제조
상기 실시예 2의 방법으로 수득된 추출물을 유효성분으로 함유하는 영양크림 제형을 제조하였다. 구체적으로 표 7과 같이 수상 용해조에 원료 1 내지 8을 투입하여 호모 2000rpm으로 분산 후, 75℃까지 가온하였다. 유상 용해조에 원료 9 내지 16을 투입하여 80℃까지 가온 용해한 후, 수상 용해조에 용해된 유상조를 서서히 투입하여 유화(3000rpm/10분)시킨 후, 실온으로 냉각하였다. 여기에 실시예 2의 방법으로 수득된 추출물을 투입하여 충분하게 교반 및 혼합하여 노화 억제 화장용 영양크림을 제조하였다.
Figure pat00007
< 실험예 4> 화장료 조성물의 성능평가
1. 보습효과 측정
30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1 내지 4에서 제조된 각 화장 제형을 4주간 사용하게 한 후, 피부 보습 변화를 수분함유량 측정기(Corneometer, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 보습 변화를 측정하였다. 총 20명의 평균값을 통하여 산출하였으며, 보습 변화값이 높을수록 보습효과가 높음을 의미하며, 그 결과를 하기 표 8에 기재하였다.
2. 탄력효과 측정
30세 이상 60세 이하 여성 20명을 대상으로 상기 처방예 1 내지 4에서 제조된 각 화장 제형을 4주간 사용하게 한 후 피부 탄력의 변화를 탄력 측정기(Cutometer, Courage and Khazaka, Germany)를 이용하여 탄력 변화를 측정하였다. 총 20명의 평균값을 통하여 산출하였으며, 탄력 변화(R2)값이 높을수록 탄력 효과가 높음을 의미하며, 결과를 하기 표 8에 기재하였다.
Figure pat00008
상기 표 8의 결과, 본 발명의 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물을 유효성분으로 함유된 화장료 조성물에 대하여, 우수한 보습과 탄력효과를 확인하였다.
상기에서 살펴본 바와 같이, 본 발명에 의한 구기자나무로부터 유래된 복합추출물이 유효성분으로 함유된 피부 노화 억제 화장료 조성물은 임상적으로 안전성이 증명된 한방 약재 중에서 선별된 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물로서 피부에 자극이 없고 우수한 항산화 효능을 확인함으로써, 노화 억제 효과뿐만 아니라, 화장료 조성물의 배합성분으로서 높은 안정성을 제공하였다.
특히, 본 발명의 피부 노화 억제 화장료 조성물은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분에 대한 추출용매별, 추출비율에 따라 추출된 복합추출물의 농도별 항산화 효과를 최적화하였다.
나아가, 본 발명은 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분의 복합추출물을 유효성분으로 함유한 화장료 조성물을 이용하여 피부 노화 억제 효능을 제공할 다양한 제형에 적용한 기능성 화장품을 제공하였다.
이상에서 본 발명은 기재된 구체예에 대해서만 상세히 설명되었지만 본 발명의 범위 내에서 다양한 변형 및 수정이 가능함은 당업자에게 있어서 명백한 것이며, 이러한 변형 및 수정이 첨부된 특허청구범위에 속함은 당연한 것이다.

Claims (7)

  1. 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리 중에서 선택된 적어도 2종 이상의 혼합성분으로부터 추출된 복합추출물이 유효성분으로 함유된 피부 노화 억제 화장료 조성물.
  2. 제1항에 있어서, 상기 복합추출물이 구기자나무의 잎, 열매, 꽃 및 뿌리가 혼합된 혼합성분이 함유된 것을 특징으로 하는 피부 노화 억제 화장료 조성물.
  3. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 복합추출물이 구기자나무 혼합성분 및 추출용매간 1:10 내지 1:200의 중량비율로 추출된 것을 특징으로 하는 피부 노화 억제 화장료 조성물.
  4. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 복합추출물이 구기자나무 혼합성분 및 에탄올, 부틸렌글리콜, 정제수 및 부탄올에서 선택된 어느 하나의 추출용매간 1:10 내지 1:40의 중량비율로 추출된 것을 특징으로 하는 피부 노화 억제 화장료 조성물.
  5. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 복합추출물이 0.1 내지 1% 농도로 항산화 효과에 유효한 것을 특징으로 하는 피부 노화 억제 화장료 조성물.
  6. 제1항 또는 제2항에 있어서, 상기 복합추출물이 유연화장수, 영양화장수, 에센스 및 영양크림으로 이루어진 군에서 선택되는 어느 하나의 제형에 유효성분으로 함유된 것을 특징으로 하는 상기 피부 노화 억제 화장료 조성물.
  7. 제6항에 있어서, 상기 복합추출물이 0.01 내지 30중량% 함유된 것을 특징으로 하는 피부 노화 억제 화장료 조성물.
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