CN102917723A - 含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂及其用途 - Google Patents

含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂及其用途 Download PDF

Info

Publication number
CN102917723A
CN102917723A CN2011800268113A CN201180026811A CN102917723A CN 102917723 A CN102917723 A CN 102917723A CN 2011800268113 A CN2011800268113 A CN 2011800268113A CN 201180026811 A CN201180026811 A CN 201180026811A CN 102917723 A CN102917723 A CN 102917723A
Authority
CN
China
Prior art keywords
antioxidant
peptide
soybean protein
molecular weight
weight
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Pending
Application number
CN2011800268113A
Other languages
English (en)
Inventor
本山贵康
松林惠子
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
Fuji Oil Co Ltd
Original Assignee
Fuji Oil Co Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by Fuji Oil Co Ltd filed Critical Fuji Oil Co Ltd
Publication of CN102917723A publication Critical patent/CN102917723A/zh
Pending legal-status Critical Current

Links

Images

Classifications

    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K36/00Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
    • A61K36/18Magnoliophyta (angiosperms)
    • A61K36/185Magnoliopsida (dicotyledons)
    • A61K36/48Fabaceae or Leguminosae (Pea or Legume family); Caesalpiniaceae; Mimosaceae; Papilionaceae
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/01Hydrolysed proteins; Derivatives thereof
    • A61K38/011Hydrolysed proteins; Derivatives thereof from plants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61KPREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K38/00Medicinal preparations containing peptides
    • A61K38/16Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof
    • A61K38/168Peptides having more than 20 amino acids; Gastrins; Somatostatins; Melanotropins; Derivatives thereof from plants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P25/00Drugs for disorders of the nervous system
    • A61P25/28Drugs for disorders of the nervous system for treating neurodegenerative disorders of the central nervous system, e.g. nootropic agents, cognition enhancers, drugs for treating Alzheimer's disease or other forms of dementia
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P3/00Drugs for disorders of the metabolism
    • A61P3/08Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis
    • A61P3/10Drugs for disorders of the metabolism for glucose homeostasis for hyperglycaemia, e.g. antidiabetics
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00Antineoplastic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P37/00Drugs for immunological or allergic disorders
    • A61P37/08Antiallergic agents
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P39/00General protective or antinoxious agents
    • A61P39/06Free radical scavengers or antioxidants
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A61MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61PSPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P9/00Drugs for disorders of the cardiovascular system
    • A61P9/10Drugs for disorders of the cardiovascular system for treating ischaemic or atherosclerotic diseases, e.g. antianginal drugs, coronary vasodilators, drugs for myocardial infarction, retinopathy, cerebrovascula insufficiency, renal arteriosclerosis
    • AHUMAN NECESSITIES
    • A23FOODS OR FOODSTUFFS; TREATMENT THEREOF, NOT COVERED BY OTHER CLASSES
    • A23VINDEXING SCHEME RELATING TO FOODS, FOODSTUFFS OR NON-ALCOHOLIC BEVERAGES AND LACTIC OR PROPIONIC ACID BACTERIA USED IN FOODSTUFFS OR FOOD PREPARATION
    • A23V2200/00Function of food ingredients
    • A23V2200/02Antioxidant

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Botany (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Diabetes (AREA)
  • Immunology (AREA)
  • Microbiology (AREA)
  • Neurology (AREA)
  • Proteomics, Peptides & Aminoacids (AREA)
  • Mycology (AREA)
  • Medical Informatics (AREA)
  • Biotechnology (AREA)
  • Alternative & Traditional Medicine (AREA)
  • Neurosurgery (AREA)
  • Biomedical Technology (AREA)
  • Toxicology (AREA)
  • Urology & Nephrology (AREA)
  • Heart & Thoracic Surgery (AREA)
  • Psychiatry (AREA)
  • Cardiology (AREA)
  • Biochemistry (AREA)
  • Obesity (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Hospice & Palliative Care (AREA)
  • Endocrinology (AREA)

Abstract

本发明提供能用于饮食品或药品的、显示高的抗氧化活性的抗氧化剂。通过得到分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上的大豆蛋白水解物,能够得到显示高的抗氧化活性的抗氧化剂。

Description

含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂及其用途
技术领域
本发明涉及含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂、和大豆蛋白水解物作为抗氧化剂的用途方法。
背景技术
包括人在内的需氧型生物为了生存通过呼吸摄入氧,此时摄入体内的氧的一部分在能量代谢时转变为过氧化物自由基、过氧化氢、羟基自由基等活性氧。这样的活性氧本来与以细菌或病毒感染时的巨噬细胞的病原体除去机制为代表的生物体防御等相关,在维持健康方面发挥重要的功能。但是,由于大气污染、紫外线等环境因素、或吸烟等生活习惯、精神压力等,生物体内的平衡被破坏,活性氧一旦过剩,即会与生物体中的蛋白质、脂质、DNA等发生反应,引起蛋白质改性、过氧化脂质生成、遗传损伤等,从而导致发生生活习惯病、促进衰老。因此,逐渐认识到除了生物体所具有的机制以外,来自饮食的抗氧化活性成分的摄取对于维持健康也是非常重要的,并推荐积极地摄取抗氧化物质作为第7种营养素。
大豆据报告具有多种生理功能,关于抗氧化活性也有一些报告。例如,大豆异黄酮被确认具有与其他类黄酮类同样高的抗氧化活性。另外,关于大豆蛋白水解物的抗氧化活性,对显示抗氧化活性的肽序列进行了鉴定。但是,从大豆蛋白水解物中大量分离特定的肽以用作抗氧化剂在制造上存在困难。因此,如果能够将作为各种肽的混合物的大豆蛋白水解物本身用作抗氧化剂,则是有用的。
其中,专利文献1中记载了抗氧化能力增强了的大豆蛋白的水解物,并记载肽的平均分子量为3kDa~30kDa(3000~30000)。该文献为了避免出现由于过度水解所导致的苦味,得到的是较高分子量的肽。
另外,专利文献2和3中也记载了显示抗氧化能力的大豆蛋白的水解物,但专利文献2中记载的肽的平均分子量为500~5000,专利文献3的肽的平均氨基酸链长为10~100个,其分子量相当于约1200以上。
此外,专利文献4中作为具有抗氧化活性的大豆蛋白水解物,记载了使用来源于枯草杆菌或米曲霉等的各种蛋白酶而得到的水解物,并记载了滤取该水解物的分子量为2000以下的水解物、该水解物的游离氨基酸的含有比例为20~30重量%。
虽然认为这些大豆蛋白水解物具有一定的抗氧化活性,但该活性未必是能够作为抗氧化剂得到实用的水平,因此还需要显示更高的抗氧化活性的大豆蛋白水解物。
现有技术文献
专利文献
专利文献1:日本特开2005-80668号公报
专利文献2:日本特开平10-203994号公报
专利文献3:日本特开2000-4896号公报
专利文献4:日本特开2003-210138号公报
非专利文献
非专利文献1:J.Agric.Food.Chem.,52,4026-4037,2004
发明内容
发明所要解决的问题
本发明的课题在于提供能用于饮食品或药品的、显示高的抗氧化活性的抗氧化剂。
用于解决问题的方法
本发明人对该课题进行了深入研究,结果发现,通过得到蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上的大豆蛋白水解物,能够得到与以往相比显示更高的抗氧化活性的抗氧化剂,从而完成了本发明。
即,本发明提供以下的(1)~(13)。
(1)一种抗氧化物质,其特征在于,其在预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的方法中作为有效成分使用,其含有大豆蛋白水解物,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
(2)根据上述(1)所述的抗氧化物质,其中,生物体的氧化所导致的疾病为动脉硬化、心肌梗塞、癌、糖尿病、阿耳茨海默病、或花粉病。
(3)根据上述(1)所述的抗氧化物质,其中,所述大豆蛋白水解物是除去了水解后的不溶物的大豆蛋白水解物。
(4)根据上述(1)所述的抗氧化物质,其进一步含有选自维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类和大蒜素中的1种以上的抗氧化物质。
(5)一种用于预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的饮食品或药品的制造方法,其特征在于,添加有效成分即大豆蛋白水解物作为抗氧化物质,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
(6)根据上述(5)所述的饮食品或药品的制造方法,其中,并用选自维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类和大蒜素中的1种以上的抗氧化物质。
(7)一种预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的方法,其特征在于,使用含有大豆蛋白水解物的抗氧化物质作为有效成分,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
(8)一种抗氧化剂,其特征在于,含有大豆蛋白水解物,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
(9)根据上述(8)所述的抗氧化剂,其中,所述大豆蛋白水解物是除去了水解后的不溶物的大豆蛋白水解物。
(10)根据上述(8)所述的抗氧化剂,其进一步含有选自维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类和大蒜素中的1种以上的抗氧化物质。
(11)一种饮食品,其添加有上述(8)所述的抗氧化剂。
(12)一种药品,其以上述(8)所述的抗氧化剂为有效成分。
(13)大豆蛋白水解物在抗氧化剂的制造中的用途方法,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
发明的效果
通过本发明,可以提供不是使用了从大豆蛋白水解物中分离出的具有特定的抗氧化活性的肽、并是使用了该大豆蛋白水解物(肽混合物)本身的实用并且显示高的抗氧化活性的抗氧化剂,从而能够在生物体的氧化所导致的动脉硬化等疾病的预防或治疗中发挥作用。
附图说明
图1为表示蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量与ORAC值之间的相关关系的图表。
具体实施方式
本发明的抗氧化剂、本发明的在预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的方法中用作有效成分的抗氧化物质、本发明的用于预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的饮食品或药品的制造方法、或者本发明的预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的方法的特征在于,含有大豆蛋白水解物或将其用作有效成分,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。以下,对本发明具体地进行说明。
(大豆蛋白原料)
本发明中的大豆蛋白水解物是利用蛋白酶将大豆蛋白原料水解而得到的。这里,作为大豆蛋白原料的一个例子,可列举出用水从大豆、脱脂大豆等中提取蛋白质成分、并除去豆腐渣成分而得到的全脂豆浆或脱脂豆浆。作为大豆蛋白原料的另一个例子,可列举出通过利用超滤膜的处理或使用了酸的等电点沉淀等、从这些豆浆将蛋白质浓缩而得到的分离大豆蛋白。作为大豆蛋白原料的再一个例子,可列举出通过酸洗涤或乙醇洗涤从大豆除去乳清成分并将蛋白质浓缩而得到的浓缩大豆蛋白、或将大豆粉碎而得到的大豆粉。这些大豆蛋白原料也可以是经杀菌/干燥的物质。另外,最终得到的大豆蛋白原料优选以干燥重量计含有80重量%以上的蛋白质,例如优选分离大豆蛋白等。
分离大豆蛋白通常是如下制备的。即,在脱脂大豆中加入水,在中性附近进行提取,将豆腐渣分离而得到豆浆。接着,将豆浆调整到pH4.5附近,回收等电点沉淀物。在沉淀物中加入水和碱性剂,从而得到固体成分浓度为5~15重量%、pH为5.7~8.0、优选pH为6.8~7.5附近的水溶液。如此得到的分离大豆蛋白可以直接将溶液用于以下工序,也可以将未经杀菌的物质或经杀菌的物质在干燥后重新溶解使用。也可预先将还原糖制成水溶液,然后在其中溶解大豆蛋白原料。不过,分离大豆蛋白并不仅限定于上述制备方法,当然也可以是对该制备方法进行各种改变而获得的制备方法。
(大豆蛋白水解物)
本发明的大豆蛋白水解物是通过对上述大豆蛋白原料进行蛋白酶处理而得到的肽混合物。该蛋白水解物优选分解度更高,特别优选分子量低于500的肽在水解物中的肽与游离氨基酸的总量中所占的比例高。具体地,重要的是蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上、进一步优选为60重量%以上。
该分子量低于500的肽实质上是由2~3个分子的氨基酸结合而成的二肽和三肽构成的。
分子量低于500的肽的含量如下算出:通过肽用凝胶过滤色谱法测定蛋白水解物中的分子量低于500的肽和游离氨基酸级分的比例,然后减去通过氨基酸分析算出的蛋白水解物中的游离氨基酸含量。
如上特定的大豆蛋白水解物优选尽可能减少除分子量低于500的肽以外的肽和游离氨基酸的比例。即,蛋白水解物中的游离氨基酸含量相对于肽与游离氨基酸的总量优选为12重量%以下、更优选为5重量%以下、进一步优选为3重量%以下。此外,由于该蛋白水解物中的肽体优选为更低分子的肽,因此蛋白水解物中的分子量为500以上的级分比例相对于肽与游离氨基酸的总量优选为40重量%以下、更优选为38重量%以下、进一步优选为35重量%以下。
(蛋白酶)
用于获得本发明的大豆蛋白水解物的蛋白酶无论是动物来源、植物来源还是微生物来源均可,可以从蛋白酶的分类中被分类为“金属蛋白酶”、“酸性蛋白酶”、“硫醇蛋白酶”、“丝氨酸蛋白酶”的蛋白酶、优选从被分类为“金属蛋白酶”、“硫醇蛋白酶”、“丝氨酸蛋白酶”的蛋白酶中适当选择。由于使属于2种以上或3种以上的不同分类的酶依次或同时发挥作用的分解方法能够增加分子量低于500的肽的比例,因此特别优选。
该蛋白酶的分类为酶学领域中通常采用的根据活性中心的氨基酸的种类不同而进行的分类方法。作为各自的代表,“金属蛋白酶”中可列举出杆菌属(Bacillus)来源的中性蛋白酶、链霉菌属(Streptomyces)来源的中性蛋白酶、曲霉属(Aspergillus)来源的中性蛋白酶、“Termoase”等,“酸性蛋白酶”中可列举出胃蛋白酶、曲霉属(Aspergillus)来源的酸性蛋白酶、“Sumizyme FP”等,“硫醇蛋白酶”中可列举出菠萝蛋白酶、木瓜蛋白酶等,“丝氨酸蛋白酶”中可列举出胰蛋白酶、糜蛋白酶、枯草杆菌蛋白酶、链霉菌属(Streptomyces)来源的碱性蛋白酶、“Alcalase”、“Bioprase”等。即使是除这些酶以外的酶,根据作用pH或与抑制剂的反应性的不同,也能够确认其分类。活性中心不同的酶之间由于对基质的作用部位有很大不同,因此能够减少“剪切残留物”、高效地获得酶分解物。另外,通过并用不同来源的(来源生物)的酶,能够进一步高效地制造酶分解物。即使分类相同但只要来源不同,对基质蛋白质的作用部位也就会不同,结果能够增加分子量低于500的肽的比例。这些蛋白酶优选外切蛋白酶活性小的蛋白酶。
蛋白酶处理的反应pH或反应温度根据所使用的蛋白酶的特性进行设定即可,通常,反应pH在最适pH附近进行、反应温度在最适温度附近进行即可。大体是,反应温度为20~80℃、优选为40~60℃。反应后加热到足以使酶失活的温度(60~170℃左右),使残留酶活性失活。
蛋白酶处理后的反应液可以直接使用或浓缩后使用,但通常进行杀菌、并进行喷雾干燥、冷冻干燥等后以干燥粉末的状态使用。杀菌优选加热杀菌、加热温度优选为110~170℃、进一步优选为130~170℃。加热时间优选为3~20秒钟。另外,可以将反应液调整到任意的pH。可以将蛋白酶处理时或pH调整时产生的不溶物(沉淀物或悬浮物)通过离心分离或过滤等除去。除去不溶物能够提高大豆蛋白水解物的抗氧化活性,因此优选。还可以进一步利用活性炭或吸附树脂进行纯化。
(抗氧化作用)
本发明中的蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上的大豆蛋白水解物显示高的抗氧化活性,可用作用于预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的有效成分。对于该水解物所具有的抗氧化活性,可以以采用非专利文献1中记载的方法测定的“ORAC”(Oxygen Radical Absorbance Capacity:活性氧吸收能力)的值(单位:μmol TE/g)为指标。其中,单位中的“TE”为“Trolox equivalent(水溶性维生素E当量)”的略写,“Trolox”为标准物质“6-羟基-2,5,7,8-四甲基色满-2-羧酸”的注册商标。ORAC值越高,表示活性氧吸收能力即抗氧化活性越高,本发明中的蛋白水解物中的分子量低于500的肽多的大豆蛋白水解物的ORAC值优选为350μmol TE/g以上、更优选为450μmol TE/g以上、进一步优选为500μmol TE/g以上。
(与其他抗氧化物质的并用)
通过将本发明的大豆蛋白水解物与1种以上的其他显示抗氧化活性的物质或含有这些物质的提取物并用,能够协同地提高抗氧化活性,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。对于并用其他的抗氧化物质的形态没有特别限定,可以预先与本发明的大豆蛋白水解物混合,制成混合制剂来使用,也可以在本发明中在使用大豆蛋白水解物时,将其他抗氧化物质另外添加来使用。
作为其他的抗氧化物质,可列举出例如维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类、大蒜素等。作为维生素类,可列举出维生素C、维生素A、维生素E等。作为多酚类,除了异黄酮、槲皮素、杨梅素、山奈酚、橙皮甙、柚皮苷、花青素、儿茶素、白杨素、芹菜素、木犀草素等类黄酮类、芝麻素、芝麻素酚、芝麻素酚、细辛脂素、芝麻酚、芝麻酚林等木脂素类之外,还可列举出碧萝芷、姜黄素、绿原酸、没食子酸、迷迭香酸、鞣花酸、香豆素、阿魏酸、姜烯酚、可可多酚等。作为类胡萝卜素类,可列举出胡萝卜素(α-,β-,γ-,δ-)、番茄红素等胡萝卜素类、或者叶黄素、虾青素、玉米黄素、角黄素、岩藻黄素、花药黄质、紫黄质、辣椒素等叶黄素类等。作为皂苷类,可列举出皂树属皂苷等原料药来源的皂苷、大豆皂苷、茶皂苷等。当使用这些抗氧化物质时,可以替代地使用含有这些抗氧化物质的植物提取物,例如当使用花青素时,可以使用蓝莓提取物、黑醋栗提取物、巴西莓果提取物、接骨木果提取物等。上述显示抗氧化活性的物质或提取物中,特别是当将维生素C、碧萝芷、巴西莓果提取物、姜黄素或芝麻素并用时,协同效果更强,因此优选。
(饮食品中的利用)
本发明的蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上的大豆蛋白水解物可以以将其作为有效成分的抗氧化剂的形式用于各种饮食品中。例如,可以以防止饮食品自身的氧化为目的而添加到饮食品中。另外,通过添加本发明的蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上的大豆蛋白水解物,能够对摄取者发挥作为生理功能的抗氧化能力,从而得到可预防生物体的氧化所导致的下文所述的疾病的饮料、片剂、食品块(压成块的精加工食品)、沙拉用调味酱、肉制品、零食点心、甜点、点心类和营养助剂等。
(药品中的利用)
本发明的蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上的大豆蛋白水解物还可用作药品。作为生物体的氧化所导致的疾病,可列举出动脉硬化、心肌梗塞、癌、糖尿病、阿耳茨海默病、花粉病等,能够用作用于预防和治疗这些疾病的药品。当以药品的形态供给时,可以以液体、散药、片剂、胶囊等各种形态使用。
实施例
以下,通过实施例对本发明更具体地进行说明。
(测定方法)
首先,实施例中使用的各种测定方法整理如下。
<蛋白质含量>
将通过凯氏定氮法(Kjeldahl method)测定的蛋白质量的重量相对于105℃、12小时干燥得到的大豆蛋白级分的重量作为干燥物中的蛋白质含量,用“%”表示。其中,氮换算系数设为6.25。
<游离氨基酸和肽的含量>
通过使用了以下的凝胶过滤柱的HPLC法测定大豆蛋白水解物的分子量分布。
将使用了肽用凝胶过滤柱的HPLC体系组装,对作为分子量标记物已知的肽作图,在分子量与保持时间的关系中求出标准曲线。其中,分子量标记物使用:八肽[β-Asp]-血管紧张素II的β-Asp-Arg-Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe(分子量为1046)、六肽血管紧张素IV的Val-Tyr-Ile-His-Pro-Phe(分子量为775)、五肽Leu-Enkephalin的Tyr-Gly-Gly-Phe-Leu(分子量为555)、三肽Glu-Glu-Glu(分子量为405)、游离氨基酸Pro(分子量为115)。将蛋白水解物(1%)在10,000rpm下离心分离10分钟,将得到的上清用凝胶过滤用溶剂稀释至2倍,其中的5μl供于HPLC。
蛋白水解物中的游离氨基酸和分子量低于500的肽级分的比例(%)采用分子量低于500的范围(时间范围)的面积相对于总吸光度的图示面积的比例来求出(使用柱:Superdex Peptide 7.5/300GL(GE Healthcare Japan株式会社制)、溶剂:1%SDS/10mM磷酸缓冲液、pH为8.0、柱温度为25℃、流速为0.25ml/min、检测波长:220nm)。
另外,蛋白水解物中的分子量为500以上的肽级分的比例(%)与上述同样地采用分子量为500以上的范围的面积相对于总吸光度的图示面积的比例来求出。
接着,利用氨基酸分析进行蛋白水解物中的游离氨基酸含量的测定。将蛋白水解物(4mg/ml)加入到等量的3%磺基水杨酸中,在室温下振荡15分钟。在10,000rpm下离心分离10分钟,将得到的上清用0.45μm过滤器过滤,用氨基酸分析器“JLC500V”(日本电子株式会社制)测定游离氨基酸。蛋白水解物中的游离氨基酸含量是以相对于通过凯氏定氮法得到的蛋白质含量的比例的形式算出的。
将如上得到的从“游离氨基酸和分子量低于500的肽级分的比例”中减去“游离氨基酸含量”得到的值作为蛋白质分解物中的“分子量低于500的肽的含量”。
<ORAC值的测定>
将得到的样品分别称量100mg,使其溶解到50%乙醇中,定容到100ml,按照非专利文献1记载的方法进行测定。定量使用“Trolox”(注册商标、从Kishida化学株式会社购得)作为标准物质,用各测定值算出。
(制造例1)分离大豆蛋白的制备
从低改性脱脂大豆如下制备分离大豆蛋白。
(1)将低改性脱脂大豆的热水提取浆料用离心分离机除去豆腐渣级分,得到脱脂豆浆。
(2)将得到的脱脂豆浆的pH调整为4.5,进行等电点沉淀,用离心分离机得到酸沉淀酪状物,进行中和。
(3)中和得到的各级分,在120℃下进行10秒钟加热杀菌。
(制造例2)大豆蛋白水解物的制备(大豆蛋白水解物A、B)
制备制造例1中得到的分离大豆蛋白的10%溶液,添加0.2%或0.5%的“Alcalase“(Novozymes Japan株式会社制),在55℃下进行15分钟酶反应。酶反应后通过90℃、20分钟的加热处理使反应停止,然后进行冷冻干燥,制得试样(大豆蛋白水解物A、B)。
(制造例3)大豆蛋白水解物的制备(大豆蛋白水解物C、D)
制备制造例1中得到的分离大豆蛋白的3%溶液,相对于蛋白质添加1%或2%的金属蛋白酶“Termoase”(来源:Bacillus thermoproteolyticusRokko,大和化成株式会社),在pH为9.0、58℃下进行60分钟酶反应。
接着,相对于蛋白质加入0.5%或1%的丝氨酸蛋白酶“Bioprase”(来源:Bacillus sp.、Nagase ChemiteX株式会社),在pH为7.5、58℃下进行60分钟酶反应。
接着,相对于蛋白质加入0.5%或1%的金属蛋白酶“Sumizyme FP”(来源:Aspergillus oryzae,新日本化学工业株式会社),在pH为7.5、58℃下进行60分钟酶反应。
在以上的酶反应后,对酶反应液进行90℃、20分钟的加热处理使反应停止,然后进行冷冻干燥,制成试样(大豆蛋白水解物C、D)。
(制造例4)大豆蛋白水解物的制备(大豆蛋白水解物E、F、G)
制备制造例1中得到的分离大豆蛋白的3%溶液,相对于蛋白质加入1%、1.5%或2%的与制造例3相同的“Termoase”,在pH为9.0、58℃下进行60分钟酶反应。
接着,相对于蛋白质加入0.5%、0.75%或1%的与制造例3相同的“Bioprase”,在pH为7.5、58℃下进行60分钟酶反应。
接着,相对于蛋白质加入0.5%、0.75%或1%的与制造例3相同的“Sumizyme FP”,在pH为7.5、58℃下进行60分钟酶反应。
在以上的酶反应后,对酶反应液进行90℃、20分钟的加热处理使反应停止,进一步将通过酶反应生成的不溶物通过离心分离和利用孔径为1.0μm的膜滤器的过滤来除去,进行冷冻干燥,制成试样(大豆蛋白水解物E、F、G)。
(试验例1)
测定制造例2~4中得到的大豆蛋白水解物A~G的蛋白质含量(%)、分子量低于500的肽在肽与游离氨基酸的总量中所占的含量(%)、分子量为500以上的肽含量和游离氨基酸含量、以及ORAC值(μmol TE/g)(比较例1~4、实施例1~3)。各蛋白水解物的制备条件和分析结果整理于表1和图1。
表1
Figure BDA00002496732000111
如图1所示,可见分子量低于500的肽含量与ORAC值具有高的相关性,相关系数为0.92。将比较例3与比较例4进行比较,可知分子量低于500的肽含量在比较例4中尽管较高,为8%左右,但ORAC值几乎未见差异。另一方面,实施例1与比较例3的酶反应条件相同,但在酶反应后除去了不溶物的实施例1的ORAC值大幅提高。
(试验例2)并用大豆蛋白水解物与抗氧化成分的协同效果
接着,对于制造例4中得到的大豆蛋白水解物G与已知抗氧化活性高的抗氧化物质或含有该抗氧化物质的提取物的协同效果,通过测定ORAC值来进行验证。
样品使用维生素C和作为各种多酚的代表例子的大豆异黄酮、儿茶素、蓝莓提取物、黑醋栗提取物、碧萝芷、巴西莓果提取物、姜黄素、芝麻素。方法如下:以1∶1混合将各个样品100mg定容至100ml而得到的溶液与将大豆蛋白水解物G100mg定容至100ml而得到的溶液,然后以规定的稀释倍率进行测定。
ORAC值的测定结果示于下述表2中。由表1确认到,大豆蛋白水解物G单独时的ORAC值为551μmol TE/g,但通过与各种抗氧化成分并用,均协同地增强了(参照添加(+)数据)各成分单独时所具有的抗氧化性(参照无添加(-)数据)。此外,抗氧化性的协同效果由于是将大豆蛋白水解物G与食品成分以1∶1混合得到的混合物的值,因此即使将食品成分的添加量减半,抗氧化效果也显示比食品成分单独时更高的值。特别是当并用维生素C、碧萝芷、巴西莓果提取物、姜黄素、芝麻素时,确认到显示这些抗氧化剂单独时的抗氧化活性的2倍以上的增强效果,显示高的协同效果。
表2
※数值表示ORAC值(μmolTE/g)。

Claims (13)

1.一种抗氧化物质,其特征在于,其在预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的方法中作为有效成分使用,其含有大豆蛋白水解物,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
2.根据权利要求1所述的抗氧化物质,其中,生物体的氧化所导致的疾病为动脉硬化、心肌梗塞、癌、糖尿病、阿耳茨海默病、或花粉病。
3.根据权利要求1所述的抗氧化物质,其中,所述大豆蛋白水解物是除去了水解后的不溶物的大豆蛋白水解物。
4.根据权利要求1所述的抗氧化物质,其进一步含有选自维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类和大蒜素中的1种以上的抗氧化物质。
5.一种用于预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的饮食品或药品的制造方法,其特征在于,添加有效成分即大豆蛋白水解物作为抗氧化物质,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
6.根据权利要求5所述的饮食品或药品的制造方法,其中,并用选自维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类和大蒜素中的1种以上的抗氧化物质。
7.一种预防或治疗生物体的氧化所导致的疾病的方法,其特征在于,使用含有大豆蛋白水解物的抗氧化物质作为有效成分,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
8.一种抗氧化剂,其特征在于,含有大豆蛋白水解物,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
9.根据权利要求8所述的抗氧化剂,其中,所述大豆蛋白水解物是除去了水解后的不溶物的大豆蛋白水解物。
10.根据权利要求8所述的抗氧化剂,其进一步含有选自维生素类、多酚类、类胡萝卜素类、皂苷类和大蒜素中的1种以上的抗氧化物质。
11.一种饮食品,其添加有权利要求8所述的抗氧化剂。
12.一种药品,其以权利要求8所述的抗氧化剂为有效成分。
13.大豆蛋白水解物在抗氧化剂的制造中的用途方法,其中,蛋白水解物中的分子量低于500的肽的含量相对于肽与游离氨基酸的总量为50重量%以上。
CN2011800268113A 2010-05-31 2011-05-30 含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂及其用途 Pending CN102917723A (zh)

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
JP2010124430A JP2011246425A (ja) 2010-05-31 2010-05-31 大豆蛋白質加水分解物含有抗酸化剤
JP2010-124430 2010-05-31
PCT/JP2011/062321 WO2011152330A1 (ja) 2010-05-31 2011-05-30 大豆蛋白質加水分解物含有抗酸化剤及びその利用

Publications (1)

Publication Number Publication Date
CN102917723A true CN102917723A (zh) 2013-02-06

Family

ID=45066697

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN2011800268113A Pending CN102917723A (zh) 2010-05-31 2011-05-30 含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂及其用途

Country Status (5)

Country Link
JP (1) JP2011246425A (zh)
KR (1) KR20130081231A (zh)
CN (1) CN102917723A (zh)
TW (1) TW201204266A (zh)
WO (1) WO2011152330A1 (zh)

Cited By (4)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107296283A (zh) * 2017-06-07 2017-10-27 东北农业大学 一种大豆蛋白—花青素复合物的制备方法
CN107439899A (zh) * 2017-09-01 2017-12-08 苏州农业职业技术学院 一种含有芝麻素的食品用抗氧化剂组合物及具有其的食品
CN110547355A (zh) * 2019-06-06 2019-12-10 东北农业大学 一种利用水酶法大豆水解液制备功能性蛋白复合物的方法
CN111248327A (zh) * 2020-01-19 2020-06-09 北京工商大学 一种利用大豆提取物提高咖啡豆品质的加工方法及咖啡豆

Families Citing this family (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
KR101638551B1 (ko) * 2014-07-10 2016-07-12 (주)제니트리 피부미백 및 피부주름 개선용 조성물, 이를 이용한 피부미백 및 피부주름 개선제의 제조방법 및 이를 포함하는 피부 외용제
JP6709016B2 (ja) * 2014-12-25 2020-06-10 太陽化学株式会社 ラウリン酸系油脂含有食品の劣化臭抑制剤
TW201709924A (zh) * 2015-07-16 2017-03-16 Suntory Holdings Ltd 含有來自動植物之胜肽的血清肌肽分解酵素阻礙用組成物
CN109797183B (zh) * 2019-02-28 2020-12-29 江南大学 一种具有抗油脂氧化功能的活性肽及其制备方法和应用
CN114847478B (zh) * 2022-04-28 2023-08-22 江苏大学 一种提高大蒜素稳定性的方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1989006970A1 (en) * 1988-02-02 1989-08-10 Hankyu-Kyoei Bussan Co., Ltd. Lipid metabolism improving agent and method of its use
JP2009084197A (ja) * 2007-09-28 2009-04-23 Fuji Oil Co Ltd 内因性オピオイドペプチドの血中分泌促進用組成物
JP2009209080A (ja) * 2008-03-04 2009-09-17 Fuji Oil Co Ltd アディポネクチン分泌促進組成物

Family Cites Families (6)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JP4619730B2 (ja) * 2004-09-07 2011-01-26 イーエヌ大塚製薬株式会社 風味に優れたアミノ酸・ペプチド混合物及びその製造方法
JP2006347946A (ja) * 2005-06-15 2006-12-28 Fuji Oil Co Ltd 成長ホルモン分泌促進組成物
JPWO2006134752A1 (ja) * 2005-06-15 2009-01-08 不二製油株式会社 大豆ペプチド組成物
WO2007139128A1 (ja) * 2006-05-31 2007-12-06 Fuji Oil Company, Limited クレアチンホスホキナーゼ分泌抑制組成物
JP5130829B2 (ja) * 2007-08-24 2013-01-30 不二製油株式会社 クレアチンホスホキナーゼ分泌抑制組成物
JP2010248134A (ja) * 2009-04-16 2010-11-04 Rheology Kino Shokuhin Kenkyusho:Kk ペプチド組成物

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO1989006970A1 (en) * 1988-02-02 1989-08-10 Hankyu-Kyoei Bussan Co., Ltd. Lipid metabolism improving agent and method of its use
JP2009084197A (ja) * 2007-09-28 2009-04-23 Fuji Oil Co Ltd 内因性オピオイドペプチドの血中分泌促進用組成物
JP2009209080A (ja) * 2008-03-04 2009-09-17 Fuji Oil Co Ltd アディポネクチン分泌促進組成物

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
徐力 等: "大豆蛋白的小分子酶解产物抗氧化活性研究", 《吉林农业大学学报》 *

Cited By (5)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107296283A (zh) * 2017-06-07 2017-10-27 东北农业大学 一种大豆蛋白—花青素复合物的制备方法
CN107439899A (zh) * 2017-09-01 2017-12-08 苏州农业职业技术学院 一种含有芝麻素的食品用抗氧化剂组合物及具有其的食品
CN110547355A (zh) * 2019-06-06 2019-12-10 东北农业大学 一种利用水酶法大豆水解液制备功能性蛋白复合物的方法
CN111248327A (zh) * 2020-01-19 2020-06-09 北京工商大学 一种利用大豆提取物提高咖啡豆品质的加工方法及咖啡豆
CN111248327B (zh) * 2020-01-19 2022-09-20 北京工商大学 一种利用大豆提取物提高咖啡豆品质的加工方法及咖啡豆

Also Published As

Publication number Publication date
JP2011246425A (ja) 2011-12-08
WO2011152330A1 (ja) 2011-12-08
KR20130081231A (ko) 2013-07-16
TW201204266A (en) 2012-02-01

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102917723A (zh) 含有大豆蛋白水解物的抗氧化剂及其用途
Connolly et al. Characterisation of the in vitro bioactive properties of alkaline and enzyme extracted brewers' spent grain protein hydrolysates
Wu et al. Bioactive protein/peptides of flaxseed: A review
Shazly et al. Fractionation and identification of novel antioxidant peptides from buffalo and bovine casein hydrolysates
Najafian et al. Production of bioactive peptides using enzymatic hydrolysis and identification antioxidative peptides from patin (Pangasius sutchi) sarcoplasmic protein hydolysate
Segura Campos et al. Angiotensin I‐converting enzyme inhibitory peptides of chia (Salvia hispanica) produced by enzymatic hydrolysis
de Castro et al. A response surface approach on optimization of hydrolysis parameters for the production of egg white protein hydrolysates with antioxidant activities
Je et al. Purification and characterization of an antioxidant peptide obtained from tuna backbone protein by enzymatic hydrolysis
Zou et al. Antihypertensive and antioxidant activities of enzymatic wheat bran protein hydrolysates
Hayes et al. Boarfish protein recovery using the pH-shift process and generation of protein hydrolysates with ACE-I and antihypertensive bioactivities in spontaneously hypertensive rats
Puchalska et al. Isolation and identification of antioxidant peptides from commercial soybean-based infant formulas
CN101305017B (zh) 奶酪蛋白的酶水解产物中鉴定的生物活性肽及其生产方法
de Castro et al. Advantages of an acid protease from Aspergillus oryzae over commercial preparations for production of whey protein hydrolysates with antioxidant activities
Cermeño et al. Identification of peptides from edible silkworm pupae (Bombyx mori) protein hydrolysates with antioxidant activity
Bustamante et al. Bioactivity and peptide profile of whey protein hydrolysates obtained from Colombian double-cream cheese production and their products after gastrointestinal digestion
CN101171025A (zh) 新颖的营养药物性组合物
Tagliazucchi et al. Identification of ACE-inhibitory peptides from Phaseolus vulgaris after in vitro gastrointestinal digestion
Bravo et al. Identification of novel antihypertensive peptides from wine lees hydrolysate
Suwannapan et al. Angiotensin‐I‐converting enzyme (ACE)‐inhibitory peptides from Thai jasmine rice bran protein hydrolysates
Khongdetch et al. King Boletus mushroom‐derived bioactive protein hydrolysate: Characterisation, antioxidant, ACE inhibitory and cytotoxic activities
WO2018021471A1 (ja) 脳機能改善するための食品組成物
JPWO2006134752A1 (ja) 大豆ペプチド組成物
Gu et al. Isolation and identification of antioxidative peptides from frog (Hylarana guentheri) protein hydrolysate by consecutive chromatography and electrospray ionization mass spectrometry
CN101535494B (zh) 含有色氨酸的肽
Vaštag et al. In vitro study on digestion of pumpkin oil cake protein hydrolysate: Evaluation of impact on bioactive properties

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C12 Rejection of a patent application after its publication
RJ01 Rejection of invention patent application after publication

Application publication date: 20130206