CN102892766A - 激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法 - Google Patents

激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法 Download PDF

Info

Publication number
CN102892766A
CN102892766A CN2011800181482A CN201180018148A CN102892766A CN 102892766 A CN102892766 A CN 102892766A CN 2011800181482 A CN2011800181482 A CN 2011800181482A CN 201180018148 A CN201180018148 A CN 201180018148A CN 102892766 A CN102892766 A CN 102892766A
Authority
CN
China
Prior art keywords
cancer
indazole
title compound
ketone
compound
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Granted
Application number
CN2011800181482A
Other languages
English (en)
Other versions
CN102892766B (zh
Inventor
P·B·桑普森
刘勇
李诗韵
B·T·福利斯特
H·W·保尔斯
L·G·爱德华兹
M·费赫
N·K·B·帕特尔
R·劳弗
潘国华
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University of Health Network
Original Assignee
University of Health Network
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Priority claimed from PCT/CA2010/000518 external-priority patent/WO2010115279A1/en
Application filed by University of Health Network filed Critical University of Health Network
Publication of CN102892766A publication Critical patent/CN102892766A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN102892766B publication Critical patent/CN102892766B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/10—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings linked by a carbon chain containing aromatic rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/40—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil
    • A61K31/403—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with one nitrogen as the only ring hetero atom, e.g. sulpiride, succinimide, tolmetin, buflomedil condensed with carbocyclic rings, e.g. carbazole
    • A61K31/404—Indoles, e.g. pindolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/41—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having five-membered rings with two or more ring hetero atoms, at least one of which being nitrogen, e.g. tetrazole
    • A61K31/415—1,2-Diazoles
    • A61K31/416—1,2-Diazoles condensed with carbocyclic ring systems, e.g. indazole
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K45/00—Medicinal preparations containing active ingredients not provided for in groups A61K31/00 - A61K41/00
    • A61K45/06—Mixtures of active ingredients without chemical characterisation, e.g. antiphlogistics and cardiaca
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D231/00—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings
    • C07D231/54—Heterocyclic compounds containing 1,2-diazole or hydrogenated 1,2-diazole rings condensed with carbocyclic rings or ring systems
    • C07D231/56—Benzopyrazoles; Hydrogenated benzopyrazoles
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings
    • C07D403/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D403/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00
    • C07D403/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, having nitrogen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D401/00 containing three or more hetero rings
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K2300/00—Mixtures or combinations of active ingredients, wherein at least one active ingredient is fully defined in groups A61K31/00 - A61K41/00

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Nitrogen Condensed Heterocyclic Rings (AREA)
  • Indole Compounds (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)

Abstract

本发明涉及由以下结构式(I)代表的化合物和其药学可接受的盐：
Figure DPA00001624092900011
由该结构式所代表的化合物是激酶抑制剂，且因此在本发明中公开用于治疗癌症。该结构式中变量的定义在本发明中提供。

Description

激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法
相关专利申请的交叉引用
本申请要求2010年4月6日提交的美国临时申请61/321,332和2010年4月6日提交的美国临时申请61/321,329的权益。该申请也要求2010年4月6日提交的国际申请PCT/CA2010/000518的权益。这三个申请的全部教导以引用方式合并于此。
背景技术
蛋白激酶已经成为在寻找多种疾病例如癌症的新治疗剂中广泛研究的主题。蛋白激酶已知通过影响磷酰基从三磷酸核苷到参与信号传导途径的蛋白受体上的转移介导胞内信号转导。有许多细胞外及其他刺激物通过其引起在细胞内发生各种细胞反应的激酶和途径。
丝氨酸/苏氨酸激酶的polo样激酶(PLK)家族包含至少四个已知成员：PLK1、PLK2(也称为Snk)、PLK3(也称为Fnk或Prk)和PLK4(也称为Sak)。PLK4是PLK家族中了解最少且差异最大的成员。PLK4的N-末端催化结构域具有不同于PLK1-3的底物特异性。PLK4还具有差异的C-末端，其仅包含单个polo盒序列而不包含PLK1-3中的串联PB序列，这显然是作为均二聚结构域而不是定位结构域(Lowery等，(2005)Oncogene 24：248-259)。
已知PLK4参与控制有丝分裂进入和退出，且是中心体复制的调节剂(Habedanck等Nature Cell Biology 7：1140-1146，2005)。PLK4转录产物在从S到M期时增加，且蛋白被泛素化(ubiquitylated)并被后期促进复合物(APC)破坏(Hudson等Curr.Biol.11：441-446，2001；Fode等Mol.Cell.Biol.16：4665-4672，1996)。PLK4为晚期有丝分裂进程(Fode等PNAS.91：6388-6392，1994；Hudson等Curr.Biol.11：441-446，2001)、细胞存活和原肠胚形成后(postgastrulation)胚胎发育(Hudson等Curr.Biol.11：441-446，2001)所需要。PLK4基因敲除小鼠是胚胎致死的(E7.5)，其中有丝分裂和凋亡细胞明显增加(Hudson等Curr.Biol.11：441-446，2001)。PLK4受到p53的转录阻遏(Li等Neoplasia 7：312-323，2005)。这种阻遏很可能通过募集组蛋白脱乙酰基酶(HDAC)阻遏物来介导，且阻遏似乎有助于p53-诱导的细胞凋亡(Li等Neoplasia 7：312-323，2005)。
已有报道PLK4在结肠直肠肿瘤中过表达，而在相邻的正常肠粘膜中该表达被报告为低的(Macmillian等Ann.Surg.Oncol.8：729-740，2001)。此外，已有报道PLK4在一些肿瘤细胞系中过表达(Hitoshi等，美国专利申请No.US 2003/0027756)。此外，在2007年11月20日提交的共同未决美国临时申请61,003,825(其全部教导以引用方式合并于此)中，申请人描述了PLK4在基底样肿瘤中过表达。
已有报道PLK4在结肠直肠肿瘤中过表达，而在相邻的正常肠粘膜中该表达被报告为低的(Macmillian等Ann.Surg.Oncol.8：729-740，2001)。此外，已有报道PLK4在一些肿瘤细胞系中过表达(Hitoshi等，美国专利申请No.US 2003/0027756)。此外，在2007年11月20日提交的共同未决美国临时申请61,003,825(其全部教导以引用方式合并于此)中，申请人描述了PLK4在基底样肿瘤中过表达。
人乳头瘤病毒(HPV-16)E7癌蛋白在HPV相关的肛门与生殖器(anogenital)癌和口咽癌中过表达。E7癌蛋白通过涉及在单一母中心粒上的多个子体的同时形成的途径而触发中心体的过度复制。HPV-16E7癌蛋白已经用作剖析异常中心粒生物发生的工具，并且若干证据确认PLK4为该过程中的关键作用因素(Duensing等Environ.Mol.Mutagen.50：741-747，2009)。此外，在稳定表达HPV-16E7的角质形成细胞中发现PLK4转录水平增加。据发现HPV-16E7上调PLK4 mRNA的能力取决于其降解成视网膜细胞瘤(pRb)蛋白的能力，提示E2F-介导的基因转录在下调PLK4中的作用(Korzeniewski等，AACR Meeting，Washington，2010，Abstr.5354)。这些结果确认PLK4是用来防止HPV相关癌症中的中心粒异常、有丝分裂失真和恶性进程的小分子抑制的靶标。
因此，抑制蛋白激酶特别是PLK4的试剂具有治疗癌症的可能性。存在着对于可以作为蛋白激酶抑制剂特别是PLK4抑制剂发挥作用的的其它药剂的需求。
发明简述
申请人目前发现，某些螺环丙基吲哚啉酮(indolinone)化合物是强力的激酶抑制剂，例如polo样激酶4(PLK4)和极光激酶(AuroraKinase)(参见实施例B和F)。申请人目前也还发现，这些螺环丙基吲哚啉酮化合物具有强力的抗癌活性(参见实施例J)并显示出抗血管生成活性(实施例K)。基于这些发现，本发明公开了螺环丙基吲哚啉酮化合物、其药物组合物和用螺环丙基吲哚啉酮化合物治疗癌症的方法。
本发明的一个实施方式是由结构式(I)或(II)代表的化合物：
Figure BPA00001624093200031
结构式(I)和(II)的化合物的药学可接受的盐也包括在本发明中。这些结构式中的变量定义如下：
Ra是-F、甲氧基、甲基或乙基；
R4是-H、甲基、乙基、2-甲氧基乙基或-CH2CONH2；和
R6是-C＝C-(任选取代的苯基)。
结构式(I)和(II)中变量的可选的值提供如下：
Ra是-F、甲氧基、甲基或乙基；
R4是-H或甲基；和
R6是-C＝C-(苯基)，其中-CH＝CH-(苯基)中的苯基任选被一个或多个独立选自下组的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、(C1-6氨基烷基)、(C1-6烷基氨基)C1-6烷基、(C1-6二烷基氨基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、-(CH2)0-3-N-哌啶基、-(CH2)0-3-N-吗啉基、-(CH2)0-3-N-吡咯烷基、-(CH2)0-3-N-哌嗪基和-(CH2)0-3-N-氧杂氮杂环庚烷基，其中所述N-哌嗪基任选被C1-6烷基或C1-6酰基N’-取代。
在另一个实施方式中，本发明是作为中性化合物或其药学可接受的盐的在示例章节中公开的任何一个化合物。
在另一个实施方式中，本发明是药物组合物，包含：i)由结构式(I)代表的化合物、由结构式(II)代表的化合物、在示例中描述的化合物或上述任何化合物的药学可接受的盐；和ii)药学可接受的载体或稀释剂。
本发明的另一个实施方式是治疗患有癌症的受试者的方法，包括向受试者施用治疗有效量的由结构式(I)代表的化合物、由结构式(II)代表的化合物、在示例中描述的化合物或上述任何化合物的药学可接受的盐。
本发明的另一个实施方式是抑制在需要抑制极光B(Aurora B)和/或PLK-4的受试者中抑制极光B和/或PLK-4的方法，包括向受试者施用治疗有效量的由结构式(I)代表的化合物、由结构式(II)代表的化合物、在示例中描述的化合物或上述任何化合物的药学可接受的盐。
本发明的另一个实施方式是由结构式(I)代表的化合物、由结构式(II)代表的化合物、在示例中描述的化合物或上述任何化合物的药学可接受的盐的用途。或者，所述治疗是用于在需要抑制极光B和/或PLK-4的受试者中抑制极光B和/或PLK-4。
本发明的另一个实施方式是由结构式(I)代表的化合物、由结构式(II)代表的化合物、在示例中描述的化合物或上述任何化合物的药学可接受的盐的用途。
本发明的另一个实施方式是由结构式(I)代表的化合物、由结构式(II)代表的化合物、在示例中描述的化合物或上述任何化合物的药学可接受的盐在制备用于在需要抑制极光B和/或PLK-4的受试者中的抑制极光B和/或PLK-4的药物中的用途。
附图简要说明
附图显示化合物A23的抗血管生成效应。
发明详述
本发明化合物的具体实例包括在以下实施例中示例的那些化合物、其立体异构体及其药学可接受的盐。
在本发明描述的结构式中，当氢原子被描绘在结构式的芳环的特定位置时，该特定位置上不允许取代。
当化合物是处于快速平衡的两种或更多种结构上不同的化合物的混合物时，存在互变异构形式。本发明的某些化合物以互变异构形式存在。例如，结构式(I)中涵盖的以下化合物包括至少以下互变异构形式：
Figure BPA00001624093200051
应理解，当化合物的一个互变异构形式通过名称或结构描述时，包括该化合物的所有互变异构形式。
本发明化合物包含至少两个手性中心和一个环丙烷，且因此以立体异构体(例如关于环丙烷的异构体，即顺/反异构体)、对映体和/或非对映体存在。当本发明化合物以未指明立体化学的形式描绘或命名时，应理解其涵盖立体异构纯的形式(例如，纯的顺式或纯的反式、对映体纯或非对映体纯)且包括立体异构的混合物。例如，由结构式(I)代表的化合物具有显示如下的“顺式”和“反式”异构体：
Figure BPA00001624093200061
环A和环B是顺式的；和
Figure BPA00001624093200062
环A和环B是反式的。
这里的语句“环A和环B是顺式的”意思是环A和环B都在环丙烷的同一侧而语句“环A和环B是反式的”意思是环A和环B在环丙烷的不同侧。顺式/反式种类的立体异构体也被称作几何异构体。因此，由结构式(I)描绘的本发明化合物包括纯的顺式异构体、纯的反式异构体、及其混合物，包括富含顺式几何异构体的顺/反混合物和富含反式几何异构体的顺/反混合物。例如，结构式(II)描绘了环A和环B之间的顺式关系。应理解，关于环A和环B的结构式(I)的顺式和反式形式都涵盖在本发明中。
当几何异构体用名字或结构描述时，应理解所命名或描绘的几何异构体的几何异构纯度为按重量计至少60％、70％、80％、90％、99％或99.9％纯的。几何异构纯度通过混合物中所命名或描绘的几何异构体的重量除以混合物中两种几何异构体的总重量来确定。
外消旋混合物是指50％的一种对映体和50％的其相应的对映体。本发明涵盖所有对映体纯的、对映体富集的、非对映体纯的、非对映体富集的和外消旋的混合物、以及本发明化合物的非对映体混合物。
对映体和非对映体混合物可以通过公知方法拆分成其组成对映体或立体异构体，例如手性相气相色谱、手性相高效液相色谱、使所述化合物结晶为手性盐复合物或在手性溶剂中使所述化合物结晶。对映体和非对映体也可由非对映体纯或对映体纯的中间体、试剂和催化剂通过公知的非对称合成方法获得。
当化合物由指明单一对映体的名称或结构来指示时，除非另有说明，所述化合物为最小60％、70％、80％、90％、99％或99.9％光学纯的(也称为“对映体纯”)。光学纯度是所命名或描述的对映体的混合物的重量除以两个对映体的混合物的重量。
当所公开化合物的立体化学由结构进行命名或描绘，且所命名或描绘的结构涵盖超过一种立体异构体(例如，如在非对映体对中)时，应理解为包括所涵盖的立体异构体之一或所涵盖的立体异构体的任何混合物。还应进一步理解所命名或描述的立体异构体的立体异构纯度按重量计为至少60％、70％、80％、90％、99％或99.9％。在这种情况下所述立体异构纯度是通过用由名称或结构涵盖的立体异构体混合物的总重量去除所有立体异构体混合物的总重量来确定的。
本发明包括本文公开的化合物的药学可接受的盐。所公开化合物具有碱性胺基，且因此可以与药学可接受的酸形成药学可接受的盐。适当的本发明化合物的药学可接受的酸加成盐包括无机酸(例如盐酸、氢溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸和硫酸)的盐以及有机酸(例如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、柠檬酸、乙磺酸、富马酸、葡萄糖酸、乙醇酸、羟乙磺酸、乳酸、乳糖酸、马来酸、苹果酸、甲磺酸、琥珀酸、对甲基苯磺酸和酒石酸)的盐。带有酸性基团例如羧酸的本发明化合物可以与药学可接受的碱形成药学可接受的盐。适当的药学可接受的碱性盐包括铵盐、碱金属盐(例如钠盐和钾盐)和碱土金属盐(例如镁盐和钙盐)。带有季铵基团的化合物也包含平衡阴离子例如氯离子、溴离子、碘离子、醋酸根、高氯酸根等。这类盐的其他实例包括盐酸盐、氢溴酸盐、硫酸盐、甲磺酸盐、硝酸盐、马来酸盐、醋酸盐、柠檬酸盐、富马酸盐、酒石酸盐[例如(+)-酒石酸盐、(-)-酒石酸盐或其混合物，包括外消旋混合物]、琥珀酸盐、苯甲酸盐和与氨基酸(例如谷氨酸)的盐。
本发明所使用的术语“卤代”是指卤素并包括氯代、氟代、溴代和碘代。
“脂族基团”是非环状的、非芳族的，仅由碳和氢组成并可任选包含一个或多个不饱和单元，例如双键和/或三键。脂族基团可以是直链或支链的。通常脂族基团包含约1至约20个碳原子，通常为约1至约10个碳原子，更常见为约1至约6个碳原子。“取代的脂族基团”在任何一个或多个“可取代的碳原子”上被取代。脂族基团中的“可取代的碳原子”是脂族基团中与一个或多个氢原子键合的碳。一个或多个氢原子可任选被适当的取代基团替换。“卤代脂族基团”是被一个或多个卤素原子取代的如上定义的脂族基团。
单独使用或作为更大基团(例如“烷氧基”、“卤代烷基”、“芳基烷基”、“烷基胺”、“二烷基胺”、“烷基氨基”、“二烷基氨基”、“烷基羰基”、“烷氧基羰基”等)的一部分使用的术语“烷基”是指饱和的直链或支链脂族基团。如本发明所使用的，C1-C6烷基是指“低级烷基”。类似地，术语“低级烷氧基”、“低级卤代烷基”、“低级芳基烷基”、“低级烷基胺”、“低级二烷基胺”、“低级烷基氨基”、“低级二烷基氨基”、“低级烷基羰基”、“低级烷氧基羰基”包括含有1至6个碳原子的直链和支链的饱和链。
术语“烯基”是指具有至少一个双键的直链或支链脂族基团。
术语“炔基”是指具有至少一个三键的直链或支链脂族基团。
术语“烷氧基”是指-O-烷基；“羟基烷基”是指被羟基取代的烷基；“芳烷基”是指被芳基取代的烷基；“烷氧基烷基”是指被烷氧基取代的烷基；“烷基胺”是指被烷基取代的胺；“环烷基烷基”是指被环烷基取代的烷基；“二烷基胺”是指被两个烷基取代的胺；“烷基羰基”是指-C(O)-R，其中R是烷基；“烷氧基羰基”是指-C(O)-OR，其中R是烷基；且其中烷基如上定义。
术语“卤代烷基”和“卤代烷氧基”是指视情况而定被一个或多个卤素原子取代的烷基或烷氧基。术语“卤素”是指F、Cl、Br或I。优选地，卤代烷基或卤代烷氧基中的卤素是F。
术语“酰基”是指-C(O)R，其中R是任选取代的烷基或芳基(例如任选取代的苯基)。R优选是未取代的烷基或苯基。
“亚烷基”由-[CH2]z-代表，其中z是正整数，优选为1至8，更优选为1至4。
“亚烯基”是其中一个亚甲基被双键替换的亚烷基。
单独使用或作为更大基团的一部分(例如在“芳烷基”、“芳烷氧基”或“芳氧基烷基”中)使用的术语“芳基”是指碳环芳香环。术语“芳基”可与术语“芳基环”、“碳环芳香环”、“芳基基团”和“碳环芳族基团”互换使用。芳基通常具有6至14个环原子。实例包括苯基、萘基、蒽基、1，2-二氢萘基、1，2，3，4-四氢萘基、芴基、茚满基、茚基等。“取代芳基”是在一个或多个可取代的环原子上被取代，所述环原子与氢键合的环碳原子。
术语“环烷基”是指单环或多环饱和烃环体系。例如，C5-7环烷基包括但不限于环戊基、环己基或环戊基，其每一个任选被取代。
单独使用或作为更大基团如在“杂芳烷基”或“杂芳基烷氧基”中的一部分使用的术语“杂芳基”、“杂芳族的”、“杂芳基环”、“杂芳基基团”、“杂芳族环”和“杂芳族基团”是指具有5至14个环原子的芳环基团，所述环原子选自碳和至少一个(通常为1至4个，更常见为1或2个)杂原子(例如氧、氮或硫)。“杂芳基”包括单环和多环，其中单环杂芳族环与一个或多个其他碳环芳族或杂芳族环稠合。如此，“5-14元杂芳基”包括单环、二环或三环的环体系。
单环的5-6元杂芳基的实例包括呋喃基(例如2-呋喃基、3-呋喃基)、咪唑基(例如N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基)、异噁唑基(例如3-异噁唑基、4-异噁唑基、5-异噁唑基)、噁二唑基(例如2-噁二唑基、5-噁二唑基)、噁唑基(例如2-噁唑基、4-噁唑基、5-噁唑基)、吡唑基(例如3-吡唑基、4-吡唑基)、吡咯基(例如1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基)、吡啶基(例如2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、嘧啶基(例如2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基)、哒嗪基(例如3-哒嗪基)、噻唑基(例如2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、三唑基(例如2-三唑基、5-三唑基)、四唑基(例如四唑基)、噻吩基(例如2-噻吩基、3-噻吩基)、嘧啶基、吡啶基和哒嗪基。多环芳族杂芳基的实例包括咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并噁唑基、苯并咪唑基、异喹啉基、吲哚基、异吲哚基、吖啶基或苯并异噁唑基。“取代的杂芳基”在任何一个或多个可取代环原子上被取代，所述环原子是与氢键合的环碳或环氮原子。
术语“杂环基”或“杂环基团”是指包含1-3个环杂原子的3至10元的单环、非芳族环或具有7至20元且包含1至4个环杂原子的多环，其中该多环具有与一个或多个芳族或杂芳族环稠合的一个或多个单环非芳族杂环。在一个实施方式中，所述杂环基是具有与苯基稠合的单环非芳族杂环的双环。示例性的多环杂环基团包括四氢异喹啉基(例如1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基、1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基和2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基)、异二氢吲哚基(例如2-乙基异二氢吲哚-5-基、2-甲基异二氢吲哚-5-基)、二氢吲哚基、四氢苯并[f]氧氮杂
Figure BPA00001624093200101
基(oxazepinyl)(例如2，3，4，5-四氢苯并[f][1，4]氧氮杂
Figure BPA00001624093200102
-7-基)。
术语“非芳族杂环基”是指包含1-3个环杂原子的3至10元的单环的、非芳族环或具有7至20元且包含1至4个环杂原子的多环非芳族环。各个杂原子独立地选自氮、季氮、氧化态氮(例如NO)；氧和硫，包括亚砜和砜。该取代的非芳族杂环基团可以经由适当的杂原子或碳原子连接。代表性的非芳族杂环基团包括吗啉基、硫代吗啉基、吡咯烷酮基、吡咯烷基、哌啶基、哌嗪基、乙内酰脲基、戊内酰胺基、氧杂环丙烷基、氧杂环丁基、四氢呋喃基、四氢吡喃基、四氢吡啶基、四氢嘧啶基、四氢噻吩基、四氢噻喃基等。“取代的非芳族杂环基”为在任何一个或多个可取代的环原子上被取代，所述环原子是与氢键合的环碳或环氮原子。
除非另有说明，取代脂族基、芳基、杂芳基和非芳族杂芳基的适当的取代基包括：
i)卤素、-C(O)OR1、-C(O)R1、-C(S)R1、-OC(O)R1-、-C(O)NR1R2、-C(S)NR1R2、-OC(O)NR1R2、-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO3R1、-SO2NR1R2、-OR1、-SR1、-NR1R2、-NR2C(O)R1、-NR2S(O)R1、-NR2C(O)OR1、-NR2C(O)ONR1R2、-N(R2)C(O)NR1R2、-NR2SO2NR1R2、-NR2SO2R1、-NO2、-CN、-NCS；或两个邻位取代基一起形成-O-[CH2]p-O-、-S-[CH2]p-S-或-[CH2]q-；或
ii)C1-10脂族基，任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、硝基、氰基、-N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-NR21C(O)R21、-SO2R22、-SO2N(R21)2、-NR21SO2R22、-NR21C(O)OR21、-OC(O)N(R21)2、-NR21C(O)N(R21)2、-NRC(O)ON(R)2、-NR21SO2N(R21)2、-OR21、-SR21、C1-10卤代烷氧基、-C(O)R21、-C(O)OR21和-OC(O)R21；或
iii)(C0-10亚烷基)-Ar1、(C2-10亚烯基)-Ar1、其中Ar1是C6-14芳基或5-14元杂芳基，各任选且独立地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、硝基、氰基、C1-10烷基、C1-10卤代烷基、(C1-10卤代烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羟基烷基、C1-10氨基烷基、(C1-10烷基氨基)C1-10烷基、(C1-10二烷基氨基)C1-10烷基、-N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-NR21C(O)R21、-SO2R22、-SO2N(R21)2、-NR21SO2R22、-NR21C(O)N(R21)2、-NRC(O)ON(R)2、-NR21SO2N(R21)2、-OR21、-SR21、C1-10卤代烷氧基、-C(O)R21、-C(O)OR21、-OC(O)R21、苯基和5-6元杂芳基，其中所述苯基和所述5-6元杂芳基各自独立且任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
各R1独立地为：
i)氢；
ii)C6-14芳基或5-14元杂芳基，各任选且独立地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、-NO2、-CN、-NCS、C1-C10脂族基、(C1-10亚烷基)-Ar10、(C2-10亚烯基)-Ar10、-C(O)OR10、-C(O)R10、-C(S)R10、-OC(O)R10、-C(O)N(R11)2、-C(S)N(R11)2、-OC(O)N(R11)2、-S(O)R12、-S(O)2R12、-SO3R12、-SO2N(R11)2、-OR10、-SR10、-N(R11)2、-NR11C(O)R10、-NR11S(O)R12、-NR11C(O)OR12、-N(R11)C(O)N(R11)2、-NR11SO2N(R11)2和-NR11SO2R12；或
iii)C1-10脂族基，其任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、-NO2、-CN、-NCS、Ar10、-C(O)OR10、-C(O)R10、-C(S)R10、-OC(O)R10、-C(O)N(R11)2、-C(S)N(R11)2、-OC(O)N(R11)2、-S(O)R12、-S(O)2R12、-SO3R12、-SO2N(R11)2、-OR10、-SR10、-N(R11)2、-NR11C(O)R10、-NR11S(O)R12、-NR11C(O)OR12、-N(R11)C(O)N(R11)2、-NR11SO2N(R11)2和-NR11SO2R12，
前提是当所述取代基-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO3R1、-NR2S(O)R1或-NR2SO2R1时，R1不是卤素；以及
各R2独立地为-H或C1-C6烷基，或与NR1一起形成任选被一个或多个选自下组的取代基取代的非芳族杂环基：＝O、＝S、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、C1-6氨基烷基、(C1-6烷基氨基)C1-6烷基、(C1-6二烷基氨基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、(5-6元杂芳基)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基、苯基和5-6元杂芳基；
i)卤素；
ii)C6-14芳基或5-14元杂芳基，各任选且独立地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、硝基、氰基、羟基、C1-10烷基、C1-10卤代烷基、(C1-10卤代烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羟基烷基、C1-10氨基烷基、(C1-10烷基氨基)C1-10烷基、(C1-10二烷基氨基)C1-10烷基、(苯基)C1-10烷基、(5-6元杂芳基)C1-10烷基、氨基、C1-10烷基氨基、C1-10二烷基氨基、C1-10烷氧基、C1-10卤代烷氧基、C1-10烷基羰基氧基、C1-10烷氧基羰基和C1-10烷基羰基；或
iii)C1-10烷基，任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、硝基、氰基、羟基、C1-10卤代烷基、C1-10烷氧基、C1-10卤代烷氧基、氨基、C1-10烷基氨基、C1-10二烷基氨基、C1-10烷基羰基氧基、C1-10烷氧基羰基、C1-10烷基羰基和苯基，所述苯基任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
各R11独立地为R10、-CO2R10、-SO2R10或-C(O)R10，或
-N(R11)2合起来是非芳族杂环基，其任选被一个或多个选自下组的取代基取代：＝O、＝S、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、C1-6氨基烷基、(C1-6烷基氨基)C1-6烷基、(C1-6二烷基氨基)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷氧基羰基和C1-6烷基羰基；和
各R12独立地为R10，前提是R12不是氢；
各R21独立地为氢、C1-6烷基、苯基或5-6元杂芳基，其中由R21代表的苯基和杂芳基各自独立且任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基，且其中由R21代表的烷基任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；或
N(R21)2形成非芳族杂环基，其任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、＝O、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基、C1-3卤代烷氧基和氨基；以及
各R22独立地为C1-6烷基、苯基或5-6元杂芳基，其中由R22代表的苯基和杂芳基各自独立且任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基，且其中R22代表的烷基任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
各R独立地为氢、C1-10脂族基、苯基或5-6元杂芳基，其中由R代表的脂族基任选被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、苯基、5-6元杂芳基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基，且其中由R代表的苯基和杂芳基且由R代表的脂族基的苯基和杂芳基取代基任选且独立地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基，或
N(R)2形成非芳族杂环基，其任选被一个或多个选自下组的取代基取代：＝O、＝S、卤素、硝基、氰基、羟基、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、C1-6羟基烷基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、C1-6氨基烷基、(C1-6烷基氨基)C1-6烷基、(C1-6二烷基氨基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、(5-6元杂芳基)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6卤代烷氧基、C1-6烷基羰基氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基、苯基和5-6元杂芳基；
Ar1是C6-14芳基或5-14元杂芳基，各任选且独立地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、硝基、氰基、C1-10烷基、C1-10卤代烷基、(C1-10卤代烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羟基烷基、C1-10氨基烷基、(C1-10烷基氨基)C1-10烷基、(C1-10二烷基氨基)C1-10烷基、-N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-NR21C(O)R21、-SO2R22、-SO2N(R21)2、-NR21SO2R22、-NR21C(O)N(R21)2、-NRC(O)ON(R)2、-NR21SO2N(R21)2、-OR21、-SR21、C1-10卤代烷氧基、-C(O)R21、-C(O)OR21、-OC(O)R21、苯基和5-6元杂芳基，其中所述苯基和所述5-6元杂芳基各自独立且任选地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、羟基、硝基、氰基、氨基、C1-3烷基、C1-3卤代烷基、C1-3烷氧基和C1-3卤代烷氧基；
各Ar10独立地为C6-14芳基或5-14元杂芳基，各自任选且独立地被一个或多个选自下组的取代基取代：卤素、硝基、氰基、-OH、-SH、-O(C1-10烷基)、-S(C1-10烷基)、C1-10烷基、C1-10卤代烷基、(C1-10卤代烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羟基烷基、(C1-10氨基烷基、(C1-10烷基氨基)C1-10烷基、(C1-10二烷基氨基)C1-10烷基、(苯基)C1-10烷基、(5-6元杂芳基)C1-10烷基、氨基、C1-10烷基氨基、C1-10二烷基氨基、C1-10卤代烷氧基、C1-10烷基羰基氧基、C1-10烷氧基羰基和C1-10烷基羰基；
各p是1、2或3；和
各q是2、3、4或5。
用于脂族基、芳基、杂芳基和非芳族杂芳基的适合的取代基的其他实例包括卤素、硝基、氰基、羟基、C1-20烷基、C2-20烯基、C2-20炔基、氨基、C1-20烷基氨基、C1-20二烷基氨基、C1-20烷氧基、(C1-10烷氧基)C1-20烷基、C1-20卤代烷氧基、(C1-10卤代烷氧基)C1-20烷基和C1-20卤代烷基。
本发明的螺环丙基吲哚啉酮化合物可以抑制各种激酶，包括PLK4、PLK1、PLK2、极光A、极光B和FLT-3(参见实施例B-G)。因此，通常，本发明的螺环丙基吲哚啉酮化合物可用于治疗与这些激酶有关的疾病或病症。例如，PLK4、PLK1、极光A和极光B据信涉及细胞有丝分裂进程。因此，这些酶的小分子抑制剂可能是潜在的抗肿瘤剂。
在一个具体的实施方式中，本发明的化合物是PLK、极光A、极光B和/或FLT-3抑制剂，并可用于治疗与这种激酶有关的疾病，例如癌症。在另一个具体的实施方式中，本发明的化合物是PLK抑制剂并可用于治疗与PLK有关的疾病，例如癌症。通常，PLK是PLK4、PLK2和PLK1。在一个实施例中，PLK是PLK1和PLK4。在另一个实施例中，PLK是PLK4。在另一个具体的实施方式中，本发明的化合物是极光A和/或极光B抑制剂并可用于抑制极光A和/或极光B活性，从而治疗各种病症，例如癌症。在又另一个具体的实施方式中，本发明的化合物是FLT-3抑制剂并可用于抑制FLT-3活性，从而治疗各种病症，例如癌症。
本发明的另一方面涉及治疗患有癌症的受试者的方法，包括向所述受试者施用有效量的本发明化合物。在一个实施方式中，本发明的化合物抑制肿瘤的生长。具体地，本发明的化合物抑制过表达PLK、极光A、极光B和FLT-3中至少一种的肿瘤的生长。更具体地，本发明的化合物抑制过表达PLK，例如PLK1、PLK2和/或PLK4的肿瘤的生长。甚至更具体地，本发明的化合物抑制过表达PLK4的肿瘤的生长。在另一个实施方式中，本发明的化合物通过诱导肿瘤细胞的细胞凋亡或通过抑制肿瘤细胞的增殖来抑制肿瘤生长。
可通过本发明的方法治疗或预防的癌症包括肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌、神经母细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、黑素瘤、肉瘤、副肿瘤综合征(paraneoplasia)、骨肉瘤、生殖细胞瘤、神经胶质瘤和间皮瘤。在一个具体的实施方式中，所述癌症是肺癌、结肠癌、脑癌、神经母细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性胶质母细胞瘤或卵巢癌。在另一个具体的实施方式中，所述癌症是肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌、神经母细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性胶质母细胞瘤或卵巢癌。在又另一个具体的实施方式中，所述癌症是乳腺癌。在又另一个具体的实施方式中，所述癌症是基底亚型乳腺癌或管腔B亚型乳腺癌。在一个实施方式中，所述基底亚型乳腺癌是ER(雌激素受体)、HER2和PR(孕激素受体)阴性乳腺癌。在又另一个具体的实施方式中，所述癌症是软组织癌。“软组织癌”是本领域公认的术语，其涵盖源自机体任何软组织的肿瘤。这种软组织连接、支持或围绕机体的各种结构和器官，包括但不限于平滑肌、骨骼肌、腱、纤维组织、脂肪组织、血管和淋巴管、血管周围组织、神经、间质细胞和滑液组织。因此，软组织癌可以是脂肪组织的、肌肉组织的、神经组织的、关节组织的、血管的、淋巴管的和纤维组织的。软组织癌可以是良性或恶性的。通常，恶性软组织癌称为肉瘤或软组织肉瘤。有着许多类型的软组织肿瘤，包括脂肪瘤、脂母细胞瘤、蛰伏脂瘤、脂肪肉瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、神经纤维瘤、许旺氏细胞瘤(神经鞘瘤)、神经瘤、恶性神经鞘瘤、神经纤维肉瘤、神经原性肉瘤、结节性腱鞘炎、滑膜肉瘤、血管瘤、血管球瘤、血管外皮细胞瘤、血管内皮瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤、淋巴管瘤、纤维瘤、弹性纤维瘤、浅表性纤维瘤病、纤维组织细胞瘤、纤维肉瘤、纤维瘤病、隆凸性皮肤纤维肉瘤(DFSP)、恶性纤维组织细胞瘤(MFH)、粘液瘤、颗粒细胞肿瘤、恶性间叶瘤、软组织腺泡状肉瘤、上皮样肉瘤、透明细胞肉瘤和促结缔组织增生的小细胞肿瘤。在具体的实施方式中，所述软组织癌是选自下组的肉瘤：纤维肉瘤、胃肠道肉瘤、平滑肌肉瘤、去分化脂肪肉瘤、多形性脂肪肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、圆形细胞肉瘤和滑膜肉瘤。
本发明还涉及治疗带有肿瘤细胞的受试者的方法，包括向受试者施用有效降低受试者中的PLK活性，例如PLK2或PLK4活性的量的本发明公开的化合物。在具体的实施方式中，所述PLK是PLK4。
术语“有效量”是指当向受试者施用时获得有益或所期望的结果，包括临床结果的量，例如，与对照相比降低受试者发生癌症的可能性，阻止、抑制或减少癌症(例如，按照由临诊症状或癌细胞量确定的)。具体地，“治疗患有癌症的受试者”包括部分或基本上实现以下一种或多种结果：抑止癌症的生长或扩散、降低癌症的程度(例如，缩小肿瘤大小或减少受影响位点的数目)、抑制癌症的生长速率、以及改善或改进与癌症有关的临诊症状或指征。它也降低癌症复发的可能性。
通常，本发明化合物的有效量根据各种因素而变化，例如给予的药物或化合物、药物制剂、给药途径、疾病或紊乱的种类、接受治疗的受试者或寄主的身份等，然而，其可以由本领域技术人员常规地确定。本发明化合物的有效量可以由本领域技术人员通过本领域已知的常规方法来容易地确定。
在一个实施方式中，本发明化合物的有效量为约0.01到约1000mg/公斤体重，或约0.05到约500mg/公斤体重，或约0.1到约100mg/公斤体重，或约0.1到约15mg/公斤体重，或约1到约5mg/公斤体重，和在另一个可选方案中，为约2到约3mg/公斤体重。本领域技术人员应理解，某些因素可影响有效治疗患有癌症的受试者所需的剂量，且这些因素包括但不限于疾病或紊乱的严重程度、之前的治疗、受试者的总体健康和/或年龄和存在的其他疾病。
此外，采用有效量的本发明化合物“治疗”受试者的方案可能由单次施用组成，或包含一系列应用。例如，本发明化合物可一周施用至少一次。然而，在另一个实施方式中，所述化合物可在给定的治疗中以约每周一次至每日一次施用予受试者。治疗时间的长度取决于各种因素，例如疾病的严重程度、患者的年龄、本发明化合物的浓度和活性、或其组合。也应理解，用于治疗或预防的化合物有效剂量可在具体治疗或预防方案过程中提高或降低。剂量改变可通过本领域已知的标准诊断试验来得到和变得明显。在一些情况下，可能需要长期给药。
如本发明所使用的，“治疗”是用于获得有益或所期望结果，包括临床结果的途径。有益或所期望的临床结果可以包括但不限于减轻或改善一种或多种症状或病症、减少疾病程度、使疾病状态稳定化(即不恶化)、降低疾病扩散的可能性、延迟或减缓疾病发展、改善或减缓疾病状态、和缓解(无论是部分或完全)，不管可察觉还是不可察觉的。“治疗”也可以指与如果不接受治疗所预期的存活相比延长存活。“治疗”也包括降低发生疾病的可能性或降低疾病复发的可能性。
“受试者”是哺乳动物，优选人，但也可以是需要兽医治疗的动物，例如宠物(例如狗、猫等)、农畜(例如牛、绵羊、猪、马等)和实验动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠等)。
在一个实施方式中，本发明方法是单一疗法，其中本发明药物组合物单独施用。因此，在该实施方式中，本发明化合物是药物组合物中的唯一药理活性成分或给予受试者的唯一药理活性成分。
在另一个实施方式中，本发明方法是与一种或多种本领域已知用于治疗所需疾病或适应症的其他治疗活性药物或疗法一起的共同治疗。在一个实施例中，一种或多种其他抗增殖或抗癌疗法与本发明的化合物组合。在另一个实施例中，本发明公开的化合物与一种或多种本领域已知的其他抗癌药物一起施用。可用于与本发明化合物联合使用的抗癌疗法包括外科手术、放疗(包括但不限于γ-放射、中子束放疗、电子束放疗、质子疗法、近距放射治疗和全身放射性同位素)和内分泌疗法。可用于与本发明化合物联合使用的抗癌剂包括生物反应调节剂(包括但不限于干扰素、白细胞介素和肿瘤坏死因子(TNF))、热疗和冷疗、减少任何副作用的试剂(例如止吐剂)和其他批准的化疗药(例如紫杉醇及其类似物)。
当本发明化合物与其他抗癌药物联用时，它们可以同时给药。如本发明所使用，“同时给药”是指两种物质给药予受试者以使它们同时在受试者体内具有生物活性。给药的精确细节将取决于两种物质在彼此存在下的药代动力学，且可以包括在给药一种物质的一段时间内(例如24小时)给药另一种物质，如果药代动力学是合适的。合适的给药方案的设计对于本领域技术人员而言是常规的。在具体的实施方式中，两种物质将基本同时给药，即，彼此给药的几分钟内，或以包含两种物质的单一组合物给药。或者，这两种试剂可以单独给药，这样在受试者中相同时间内只有一种试剂是生物活性的。
取决于选定的给药途径，本发明化合物可以各种形式给予患者，如本领域技术人员应理解的。本发明化合物可例如通过口服、胃肠外、经颊、舌下、经鼻、直肠、贴片、泵或透皮施用给药，并且药物组合物相应地配制。肠胃外给药包括静脉内、腹膜内、皮下、肌内、透上皮、经鼻、肺内、鞘内、直肠和局部施用方式。肠胃外给药可以是在选定的一段时间内的连续输注。
本发明的化合物可以适当地配制成用于受试者施用的药物组合物。本发明药物组合物任选包括用于该组合物的一种或多种药学可接受的载体和/或稀释剂，例如乳糖、淀粉、纤维素和葡聚糖。也可包括其他的赋形剂，例如调味剂；增甜剂；和防腐剂，例如对羟基苯甲酸甲酯、乙酯、丙酯和丁酯。更加完整的适当赋形剂的清单可在药物赋形剂手册(Handbook of Pharmaceutical Excipients)(第5版，Pharmaceutical Press(2005))中发现。本领域技术人员应当了解如何制备适于各种类型的给药途径的制剂。用于选择和制备适当的制剂的常规过程和组分例如在Remington′s Pharmaceutical Sciences(2003-第20版)和美国药典：1999年出版的The National Formulary(USP 24NF19)中描述。载体、稀释剂和/或赋形剂是“可接受的”的，其含义是与药物组合物的其他成分相容并对其接受者无害的。
典型地，对于口服治疗给药，本发明化合物可与赋形剂组合并以可摄取的片剂、口含片、锭剂、胶囊、酏剂、悬浮液、糖浆、圆片等形式使用。
典型地，对于肠胃外给药，本发明化合物的溶液通常可在与表面活性剂例如羟丙基纤维素适当地混合的水中来制备。分散体也可在甘油、液体聚乙二醇、DMSO及其混合物(含或不含乙醇)以及在油中制备。在储存和使用的常规条件下，这些制剂包含防腐剂以阻止微生物的生长。
典型地，对于注射使用，本发明化合物的无菌水溶液或分散体和无菌粉末用于临时制备无菌可注射溶液或分散体。
对于经鼻给药，本发明化合物可配制成气雾剂、滴剂、凝胶和粉末。气雾剂通常包含在生理学可接受的水性或非水性溶剂中的活性物质的溶液或精细悬浮液，且通常以单剂量或多剂量的量以无菌形式存在于密封容器中，其可以采取药筒的形式或再充填以供喷雾装置使用。或者，所述密封容器可以是单一的分散装置，如单剂量经鼻吸入器或配备有用于使用后处置的计量阀的气雾剂分配器。当该剂型包含气雾剂分配器时，其将包含推进剂(其可以是压缩气体例如压缩空气，或有机推进剂例如氟氯烃)。所述气雾剂剂型也可采取泵式喷雾器形式。
对于口腔或舌下给药，本发明化合物可与载体例如糖、阿拉伯胶、黄芪胶或凝胶和甘油一起配制成片剂、糖锭或软锭剂。
对于直肠给药，本发明化合物可配制成含有常规栓剂基质例如可可脂的栓剂形式。
本发明化合物可单独配制或与其他用于治疗癌症的试剂同时给药。因此，另一方面，本发明的药物组合物包含药学可接受的载体或稀释剂、本发明公开的化合物或其药学可接受的盐和另一种抗癌剂，例如，但不限于，葡萄糖代谢作用抑制剂或紫杉醇。
根据本发明的另一方面，本发明化合物可以通过类似于本领域建立的那些方法的方法制备。作为举例，其中环A和B如本发明所定义的式(I)化合物可通过方案1中所列方法制备。适当取代的吲唑基亚甲基吲哚啉酮(其中环A如本发明所定义且环B和C一起是吲唑)在碱(例如氢化钠、LDA或NaHMDS)存在下，在极性溶剂(例如DMF、THF或DMSO)中与适当的亚甲基源(例如三甲基碘化锍或三甲基碘化亚砜(trimethylsulfoxonium iodide))反应。该反应在适当的温度(通常为20℃-60℃)下方便地完成。当Ar是本发明所定义的苯基和杂芳基和P1代表适当的吲唑保护基(例如Boc、乙酰基或SEM)和X是卤化物时，乙烯基连接可以在典型的Heck反应条件下装配。或者，当Ar是本发明所定义的苯基和杂芳基，且P1代表适当的吲唑保护基(例如Boc、乙酰基或SEM)和X是卤化物时，乙烯基连接可以在典型的Suzuki反应条件下采用硼酸或硼酸酯装配。该反应优选在微波辐射条件下，并有利地在例如100-150℃，或通常在约120℃下完成。保护基的去除可通过已知实现这种转化的任何过程完成。例如，当保护基P1是SEM时，所述转化可通过用极性溶剂例如THF中的四丁基氟化铵在回流下处理，或通过用三氟化硼醚合物和乙醇中的2N HCl逐步处理来完成。
方案1
Figure BPA00001624093200221
在本发明的另一方面(方案2)，当R6为如本发明所定义，P1是H或适当的吲唑保护基(例如Boc、乙酰基或SEM)和X是卤化物时，芳基连接可在典型的Suzuki反应条件下采用硼酸或硼酸酯装配。该反应优选在微波辐射条件下，有利地在例如100-150℃，或通常在约120℃下完成。保护基的去除可通过已知实现这种转化的任何过程完成。例如，当保护基P1是SEM时，所述转化可通过用极性溶剂例如THF中的四丁基氟化铵在回流下处理，或通过用三氟化硼醚合物和乙醇中的2N HCl逐步处理来完成。
方案2
Figure BPA00001624093200222
方案3(省略)
在本发明的另一方面(方案4)中，环丙烷化反应可通过使化合物例如(I)(其中R5为如本发明所定义和R6为如本发明所定义)在碱(例如氢化钠、LDA或NaHMDS)存在下，在极性溶剂(例如DMF、THF或DMSO)中与适当的亚甲基源(例如三甲基碘化锍或三甲基碘化亚砜)反应来完成。该反应在适当的温度(通常为20℃-60℃)下方便地完成。
方案4
Figure BPA00001624093200223
在本发明的另一方面，吲唑基-螺-环丙烷-吲哚啉酮3可由二价阴离子与双亲电子试剂2反应而获得(方案5)，所述二价阴离子通过在适当的溶剂例如THF中用强碱例如氢化钠处理取代的吲哚酮1而产生。当使用(S)二甲磺酸盐时，几乎专门形成所需的(1R，2S)对映体，几乎检测不到或检测不到不需要的(1S，2S)非对映体。
方案5
Figure BPA00001624093200231
包含Bn或PMB部分的吲唑基-螺-环丙烷-吲哚啉酮3可通过使用适当的反应条件来脱保护。包含一个以上这种保护基的化合物3可在一锅式反应中在两个位点上脱保护以生成化合物4(方案6)。包含PMB或Bn基团的化合物3可通过在适当的溶剂例如THF、DMSO或DMS中用强碱例如KOtBu或tBuLi和氧供体例如O2、MoOPH或MoOPD处理以减少在原位形成的氢过氧化物中间体来脱保护(A.A.Haddach，A.Kelleman和M.V.Deaton-Rewolinski，Tetrahedron Lett.，2002，43，399-402；R.M.Williams和E.Kwast，Tetrahedron Lett.，1989，30，451-454)。包含PMB基团的化合物3也可通过用酸例如TFA、TfOH或这些酸的混合物，在50-130℃的温度下处理来脱保护，以提供吲唑基-螺-环丙烷-吲哚啉酮4。
方案6
吲唑基-螺-环丙烷-吲哚啉酮4可通过在碱例如Na2CO3、K2CO3、NaOH或KOtBu存在下，在适当的溶剂例如丙酮、ACN、DMF、DMSO、二噁烷、NMP、THF中，在存在或不存在水的情况下用碘化剂例如碘或N-碘代琥珀酰亚胺处理而碘化以提供化合物5(方案7)。
方案7
Figure BPA00001624093200242
环丙烷环的相对立体化学可通过与外消旋基准标准品合成中产生的次要非对映体相比而指定为(1R*，2S*)，通过利用HCOSY NMR实验来指定1H NMR中各个质子的信号，继之以NOESY实验以确定环丙烷质子和下述的吲哚啉酮4位质子之间的通过空间相互作用(through space interaction)(I.Moldvai，E.Gacs-Baitz，M.Balazs，M.Incze和C.Szantay；Arch.Pharm.Pharm.Med.Chem.1996，329，541-549)。产物的绝对立体化学可基于应用Sharpless助记码指定为(1R，2S)以预测二醇构型为(S)并假设SN2偶合过程以形成环丙烷从而获得二醇的(S)立构中心的倒置而保持e.e。
本发明通过以下不意欲以任何方式限制本发明的实施例说明。应注意实施例并非顺序编号。
具体实施方式
示例
A.本发明化合物的合成
一般实验方法
可商购的起始物质、试剂和溶剂以原样使用，N，N-二甲基-1-(4-乙烯基苯基)甲胺除外，其在用于Heck反应之前通过硅胶色谱纯化。通常，无水反应在惰性气氛例如氮气或氩气下进行。微波反应用Biotage Initiator微波反应器进行。反应进程通常通过TLC采用Merck硅胶板监测而在254nm处由UV，通过分析型HPLC或通过LCMS(Bruker Exquire 4000)显现。中间体或最终产物的快速柱色谱纯化采用来自EMD chemicals的230-400目硅胶60来进行。有时最终产物通过制备型反相HPLC纯化。纯化在带有Varian Monochrom 10u C-18反相柱的Varian PrepStar型SD-1HPLC系统上进行，采用在20-40分钟时期内约5-30％乙腈/0.05％TFA水至70-100％乙腈/0.05％TFA水的梯度，流速为30-50mL/min。将包含所需材料的级分浓缩并冻干以获得最终产物。在Bruker 400MHz分光计上记录质子NMR，采用Bruker Esquire 4000分光计获得质谱。以给定的样品浓度(c，g/100mL单位)，采用来自OpticalActivity Ltd的具有2.5x100mm未套封的不锈钢管的AA-55旋光计，在钠D线(589.44nM)处测定旋光性。
化合物名称采用构建在ChemBioDraw Ultra 11.0版中的软件产生，具有以下例外。具有已知的相对立体化学的外消旋化合物采用R*/S*体系命名，如North所描述的(Principles and Applications of Stereochemistry，CRC Press，1998)，其中编号较低的原子任意定义为R*，而编号较高的原子相对于该中心定义。因此取决于已知相对立体化学，具有两个手性中心的化合物对映体的外消旋混合物称为(1R*，2S*)或(1R*，2R*)。标准的R和S命名法或代表绝对的“abs”用于描述单一对映体或大于95％e.e.的对映体富集化合物。
缩写
Figure BPA00001624093200251
Figure BPA00001624093200261
Figure BPA00001624093200271
起始物质的制备
5-甲氧基吲哚酮的合成
Figure BPA00001624093200272
在5min内向5-甲氧基靛红(10.62g，60mmol)的DMSO(30mL)溶液中逐滴添加N2H4·xH2O(水合肼，6mL，120mmol)(放热)。添加后，所得混合物在140℃(油温)加热2h，然后冷却至室温。用H2O(30mL)稀释后，添加6M HCl(12mL，72mmol)，且所得混合物在室温下搅拌1h。添加冰(30mL)且反应混合物在室温下搅拌过夜。通过吸滤收集形成的沉淀，用H2O冲洗，然后干燥以获得棕色固体状5-甲氧基吲哚酮(6.523g)。(纯度约为10％，为来自起始物质5-甲氧基靛红的肟)1H NMR(400MHz，d6-DMSO)6.78(s，1H)，6.85(s，1H)，6.72-6.79(m，2H)，3.39(s，3H)；ESI 164.0[M+H]+，计算值[C9H9NO2+H]+164.1。
(E和Z)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮 的合成
Figure BPA00001624093200281
向3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(1.360g，5mmol)和5-甲氧基吲哚酮(1.06g，6.5mmol)于甲醇(50mL)中的混合物添加哌啶(0.1mL，1mmol)。所得混合物回流(油温75℃)3h，然后冷却至室温并在室温下搅拌2h。通过吸滤收集所得沉淀并干燥以获得暗砖红色固体状(E/Z)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(E/Z＝2∶1)(1.966g，94％)。所述混合物不经异构体纯化用作中间体。
该中间体也采用这些条件制备：向圆底烧瓶中加入5-甲氧基吲哚酮(商购自Prime Organics的试剂，300mg，1.84mmol)、3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(500mg，1.84mmol)、哌啶(20uL，0.18mmol)和MeOH(7mL)。然后使反应物加热至60℃，维持4h。形成亮红色沉淀，其通过冷却至室温进一步沉淀。然后过滤红色粉末，并用MeOH洗涤，获得658mg，86％的标题化合物。获得(E)-和(Z)-异构体(84∶16，按照NMR)的混合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)13.78(br.s，1H)，10.50(s，1H)，9.01(s，1H)，8.00(s，1H)，8.00(d，J＝8.3Hz，1H)，7.48(d，J＝8.3Hz，1H)，7.45(d，J＝2.1Hz，1H)，6.81(dd，J＝4.1，2.2Hz，1H)，6.73(d，J＝8.4Hz，1H)，3.77(s，3H)；MS ESI 418.0[M+H]+，计算值[C17H12IN3O2+H]+418.00。
(E)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮的合成
Figure BPA00001624093200282
向3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(1.360g，5mmol)和2-吲哚酮(732g，5.5mmol)于MeOH(25mL)中的混合物添加哌啶(0.1mL，1mmol)。所得混合物回流(油温75℃)90min，然后冷却至室温。通过吸滤收集所得沉淀并干燥以获得黄色固体状(E/Z)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-吲哚啉-2-酮(E∶Z＝5∶1，1.86g)。所得混合物用作中间体而无需异构体的纯化，或纯的E异构体可通过在室温下溶于THF(1.57g于46.85mL中)来纯化。搅拌下加入己烷(146.8mL)至澄清溶液中以获得黄色沉淀。固体混悬物加热至70℃30min，且然后冷却至室温。将黄色固体过滤并用己烷(3.14mL)洗涤以获得标题化合物(1.22g，79％).1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.71(s，1H)，10.64(s，1H)，7.88(s，1H)，7.77(s，1H)，7.57-7.46(m，3H)，7.23(t，1H，J＝7.6Hz)，6.87(d，1H，J＝8.0Hz)，6.83(d，1H，J＝7.6Hz)；MS ESI 388.0[M+H]+，计算值[C16H10IN3O+H]+387.99。
(E)-3-((3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6- 基)亚甲基)-吲哚啉-2-酮的合成
将吲哚酮(665mg，5mmol)和3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基1)-1H-吲唑-6-甲醛(2g，5mmol)溶于乙醇(25mL)中。添加哌啶(0.1mL)并将溶液加热至70℃2h，冷却至室温并搅拌过夜。真空去除溶剂以获得橙色固体，其用乙醇研磨以获得定量产率的标题化合物。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.95(s，1H)，7.86(s，1H)，7.62-7.55(m，3H)，7.24(d，1H，J＝7.8Hz)，6.91(d，1H，J＝7.8Hz)，6.86(t，1H，J＝7.6Hz)，5.75(s，2H)，3.62-3.58(m，2H)，0.93-0.89(m，2H)，-0.04(s，9H)；MS ESI 518.0[M+H]+，计算值[C22H24IN3O2Sii+H]+518.4。
(1R * ，2S * )-2-(3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲 唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200301
0℃下向三甲基碘化亚砜(1.89g，8.6mmol)的无水DMF(40mL)溶液中添加氢化钠(油中的60％分散体)(1.03g，25.8mmol)。混合物搅拌15min，然后添加(E)-3-((3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮(2.2g，4.3mmol)。溶液在室温下搅拌过夜。用饱和NH4Cl溶液(50mL)终止反应，用EtOAc(4x100mL)萃取，经MgSO4干燥并浓缩至干。标题化合物通过硅胶色谱(CH2Cl2/MeOH 98∶2)分离为黄色固体(1.5g，66％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(s，1H)，7.39(d，1H J＝8.3Hz)，7.09(t，1H，J＝7.5Hz)，7.04(d，1H，J＝8.0Hz)，6.92(d，1H，J＝7.8Hz)，6.61(t，1H，J＝8.0Hz)，5.90(d，1H，8.0Hz)，5.70(s，2H)，3.57-3.53(m，2H)，3.49-3.44(m，1H)，2.31-2.28(m，1H)，2.12-2.09(m，1H)，0.89-0.84(m，2H)，-0.05(s，9H)；MS ESI 532.1[M+H]+，计算值[C23H26IN3O2Si+H]+532.4。
(E)-5-氟代-3-((3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H- 吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮的合成
Figure BPA00001624093200302
在圆底烧瓶中加入5-氟代吲哚啉-2-酮(100mg，0.661mmol)、3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(266.18mg，0.661mmol)、哌啶(13uL，0.013mmol)和甲醇(7.5mL)。然后将反应物加热至55℃4h，然后将反应物质冷却至室温。过滤并用甲醇(0.50mLx2)洗涤得到黄色固体状标题化合物(273mg，77％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.14(s，1H)，8.00(s，1H)，7.85(s，1H)，7.62(d，J＝8.4Hz，1H)，7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.34(dd，J＝8.0，2.4Hz，1H)，6.97(td，J＝6.4，2.4Hz，1H)，6.85(dd，J＝8.4，4.4Hz，1H)，5.80(s，2H)，3.58(t，J＝8.4Hz，2H)，0.92(t，J＝8.4Hz，2H)，0.03(s，9H)。
(1R * ，2S * )-5′-氟代-2-(3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200311
室温下将三甲基碘化亚砜(164.4mg，0.747mmol)添加至氢化钠(89.6mg，2.24mmol)(油中的60％分散体)于DMF(2.0mL)中的悬浮液中。混合物搅拌15min，然后添加(E)-5-氟代-3-((3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮(200mg，0.373mmol)的DMF(1.25ml)溶液。将溶液在55℃下搅拌7.0h，然后在室温下用25％NH4Cl溶液(10mL)使反应物终止反应。采用乙酸乙酯(15mLx2)萃取产物，有机层经MgSO4干燥并在真空下蒸发。粗产物采用硅胶柱色谱(己烷∶丙酮80∶20作为洗脱剂)纯化得到乳状半固体，然后其用己烷(2.0mL)研磨以得到灰白色粉末状标题化合物(94mg，46％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.48(s，1H)，7.46(s，1H)，7.41(d，J＝8.8Hz，1H)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H)，6.86(s，1H)，6.78(m，1H)，5.72(s，2H)，5.68(d，J＝8Hz，1H)，3.54-3.48(m，3H)，2.34(br s，1H)，2.13(br s，1H)，0.88(m，2H)，0.03(s，9H)。
3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛的合成
向1H-吲唑-6-甲醛(2.00g，13.7mmol)、K2CO3(3.79g，27.4mmol)于DMF(15mL)中的溶液逐滴添加I2(5.91g，23.3mmol)的DMF(15mL)溶液并将反应搅拌2h。然后加入由Na2S2O4(3.30g)/K2CO3(0.20g)/H2O(30mL)组成的水溶液，并将溶液搅拌1h。然后产物通过将溶液倒入冰水(300mL)上沉淀，并通过真空过滤收集以在干燥后获得3.02g，81％米色粉末。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ10.11(s，1H)，8.11(s，1H)，7.74(d，J＝8.34Hz，1H)，7.62(d，J＝8.34Hz，1H)；MS ESI 272.9[M+H]+，计算值[C8H5IN2O+H]+272.95。
3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛和 3-碘代-2-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑-6-甲醛的合成
向3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(3.01g，11.1mmol)于CH2Cl2(70mL)和50％KOH水溶液(20mL)中的悬浮液中添加四丁基溴化铵(36mg，0.111mmol)，并将溶液冷却至0℃。然后逐滴添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基硅烷(2.3mL，13.3mmol)并将反应物在0℃下搅拌3小时。然后将溶液转移至含CH2Cl2(200mL)的分液漏斗中，且将有机层用盐水(2x100mL)洗涤、干燥(MgSO4)并在真空下去除溶剂。所得残余物通过柱色谱(100％CH2Cl2)纯化以获得2.88g，65％的N-1异构体(较高洗脱斑点)和757mg，17％的N-2异构体(较低洗脱斑点)。N-1异构体：1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.18(s，1H)，8.11(s，1H)，7.81(d，J＝8.4Hz，1H)，7.65(d，J＝8.4Hz，1H)，5.82(s，2H)，3.60(m，2H)，0.91(m，2H)，-0.042(s，9H)；MS ESI 425.0[M+Na]+，计算值[C14H19IN2O2Si+Na]+425.02。
N-2异构体：1H NMR(400MHz，CD3OD)10.09(s，1H)，8.31(s，1H)，7.62(m，2H)，5.91(s，2H)，3.71(m，2H)，0.92(m，2H)，-0.039(s，9H)；MS ESI 425.0[M+Na]+，计算值[C14H19IN2O2Si+Na]+425.02。
3-甲酰基-1H-吲唑-6-腈的合成
Figure BPA00001624093200331
向NaNO2(11.04g，160mmol)的H2O(200mL)溶液中一次性缓慢地添加6-氰基吲哚(5.68g，40mmol)。所得悬浮液在室温下搅拌5min。通过滴液漏斗在30min内逐滴添加HCl(32mL，192mmol 6N)，且pH为约1。所得混悬液在室温下搅拌4.5h，然后添加EtOAc(400mL)。再搅拌10min以溶解沉淀后，分离两层，且水层用EtOAc(150mL)萃取。合并的萃取物经Na2SO4干燥。去除溶剂获得6.864g(100％)棕色(咖啡色)固体状标题化合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ14.70(s，1H，NH)，10.22(s，1H，CHO)，8.38(s，1H)，8.28(d，J＝8.4Hz，1H)，7.69(d，J＝8.4Hz，1H).MS ESI 172.0[M+H]+，计算值[C9H5N3O+H]+172.0.
(E)-3-((1H-吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮的合成
标题化合物根据对于(E)-3-((1H-吲唑-5-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮所述方法来合成，除了使吲哚酮(67mg，0.216mmol)与1H-吲唑-6-甲醛(73mg，0.238mmol)反应，以获得32mg，51％。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.14(s，1H)，7.91(d，J＝8.5Hz，1H)，7.89(s，2H)，7.65(d，J＝7.6Hz，1H)，7.47(d，J＝8.4Hz，1H)，7.25(t，J＝7.7Hz，1H)，6.93(d，J＝7.8Hz，1H)，6.87(t，J＝7.6Hz，1H)；MS ESI 262.0[M+H]+，计算值[C16H11N3O+H]+262.10.
(E和Z)-3-((3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)- 亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮2，2，2-三氟乙酸盐的合成
Figure BPA00001624093200341
A.(E)-3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛
标题化合物根据WO2010/115279中实施例A22A的方法来合成，采用N，N-二甲基-1-(4-乙烯基苯基)甲胺(42mg，0.26mmol)和3-碘代-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(70mg，0.17mmol)，在90℃下的密封管中加热过夜而不是用微波辐射。通过制备型TLC(SiO210％MeOH/DCM)纯化以获得浅橙色胶状标题化合物(33.4mg，44％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 10.13(s，1H)，8.27(m，2H)，7.81(d，J＝9.29Hz，1H)，7.69(d，J＝8.28Hz，2H)，7.61(d，J＝16.6Hz，1H)，7.50(d，J＝16.6Hz，1H)，7.43(d，J＝8.28Hz，2H)，5.86(s，2H)，3.82(s，2H)，3.62(t，J＝8.03Hz，1H)，2.50(s，6H)，0.87(t，J＝8.03Hz，2H)，-0.09(s，9H)；MS ESI 436.3[M+H]+，计算值[C25H33N3O2Si+H]+436.6。
B.(E)-3-((3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮
将哌啶(0.01mL，0.1mmol)加入5-甲氧基吲哚酮(52mg，0.32mmol)和(E)-3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)-甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(被来自之前的保护步骤的TBAF污染，95.5mg，0.22mmol)于EtOH(5mL)的溶液中。然后在75℃下加热反应物25小时。真空蒸发溶剂。层析(5g硅胶SPE管，Silicycle，5-10％MeOH于CH2Cl2中)获得棕色油(105mg，通过NMR确定含有产物和TBAF)。将残余物溶于EtOAc(100mL)中并用盐水(3x15mL)洗涤、经Na2SO4干燥并真空下蒸发溶剂以获得棕色油状标题化合物(110mg，不经进一步纯化而使用)。
C.(E&Z)-3-((3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮
根据WO2010/115279中实施例A22B的方法，将3-((3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(19mg，0.033mmol)用三氟化硼醚合物处理，接着用2N HCl(水/EtOH)处理。真空去除溶剂，采用额外的EtOH以共沸去除水。将残余物溶于MeOH/EtOAc中并过滤以去除固体，然后真空下蒸发溶剂。通过制备型HPLC纯化以获得橙色固体状标题化合物(E异构体，第一洗脱级分，经HPLC测定纯度为94％)(11mg，60％，)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 8.26(d，J＝8.5Hz，1H)，7.88(d，J＝9.3Hz，2H)，7.80(d，J＝8.3Hz，2H)，7.61(s，2H)，7.51-7.58(m，3H)，7.26(s，1H)，6.84(s，2H)，4.34(s，2H)，3.63(s，3H)，2.89(s，6H)；MS ESI 451.2[M+H]+，计算值[C28H26N4O2+H]+451.22.第二洗脱级分是Z-异构体(5mg，30％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δppm 8.89(s，1H)，8.15(d，J＝9.0Hz，1H)，7.99(dd，J＝9.0，1.3Hz，1H)，7.90(s，1H)，7.81(d，J＝8.3Hz，2H)，7.57-7.61(m，2H)，7.53(d，J＝8.3Hz，2H)，7.33(d，J＝2.0Hz，1H)，6.85(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，4.34(s，2H)，3.84(s，3H)，2.89(s，6H)；MS ESI 451.2[M+H]+，计算值[C28H26N4O2+H]+451.22。
1-(2-甲氧基乙基)吲哚啉-2-酮的合成
0℃下向靛红(2.94g，20mmol)的DMF(40mL)溶液中分批添加60％NaH(1.00g，25mmol)。添加后，所得混合物在0℃下搅拌15min，并在2min内逐滴添加1-溴-2-甲氧基乙烷(2.35mL，25mmol)。所得混合物在0℃下搅拌10min，升温至室温并搅拌过夜。然后将反应物冷却至0℃，用饱和NH4Cl、冰、H2O终止反应，用EtOAc(150mLx2)萃取，经Na2SO4干燥并浓缩以获得深橙红色液体，将其再溶解于DMSO(10mL)中。在7min内逐滴添加N2H4-xH2O(2mL)。添加后，反应混合物在室温下搅拌5min，然后在140℃(油温)搅拌2h，然后冷却至室温。添加冰/H2O(20mL)，然后添加6M HCl(7mL，42mmol)，且所得混合物在室温下搅拌30min。添加额外的冰/H2O(40mL)，混合物用EtOAc(50mLx3)萃取。粗品通过快速层析(梯度：EtOAc/己烷0至40％)纯化，以获得橙色液体状标题化合物(2.32g，2步61％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.26-7.20(m，2H)，7.03(d，J＝8.0Hz，1H)，6.98(t，J＝7.4Hz，1H)，3.82(t，J＝5.6Hz，2H)，3.55(s，2H)，3.52(t，J＝5.8Hz，2H)，3.22(s，3H)；MS ESI 191.8[M+H]+，计算值[C11H13NO2+H]+192.1。
2-(2-氧代吲哚啉-1-基)乙酰胺的合成
Figure BPA00001624093200362
向100mL烧瓶中的靛红(5.0g，35mmol)、K2CO3(5.5g，40mmol)和氯乙酰胺(3.74g，40mmol)的混合物添加DMF(25mL)。所得混合物加热至90℃(油温)2h。冷却至室温后，将其倒入冰/H2O(200mL)上并通过吸滤收集所得沉淀，以在干燥后获得2-(2，3-二氧代吲哚啉-1-基)乙酰胺(4.32g)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.72(s，1H)，7.65(t，J＝7.6Hz，1H)，7.58(d，J＝7.2Hz，1H)，7.30(s，1H)，7.14(t，J＝7.4Hz，1H)，7.02(d，J＝8.0Hz，1H)，4.25(s，2H)。
将上述2-(2，3-二氧代吲哚啉-1-基)乙酰胺(4.32g)再溶于DMSO(20mL)中并在10min内逐滴添加N2H4-xH2O(2.5mL)。添加后，所得混合物在室温下搅拌5min，然后在140℃搅拌2h，然后冷却至室温。用冰(20mL)和6M HCl(8mL)终止反应，然后在室温下搅拌30min。吸滤得到浅黄色固体状粗标题化合物(2.92g)。将产物悬浮于EtOAc(120mL)中并添加H2O(60mL)，然后添加2M HCl(30mL)。分离混合物并吸滤水层，干燥后获得浅米色固体状标题化合物(1.78g，2步27％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.59(s，1H，NH)，7.28-7.08(m，4H)，6.99(t，J＝7.4Hz，1H)，6.81(d，J＝8.0Hz，1H)，4.22(s，2H)，3.56(s，2H)；MS ESI 191.0[M+H]+，计算值[C10H10N2O2+H]+191.1；MS ESI 174.0[M-NH2]+，计算值[C10H10N2O2-NH2]+174.1；MS ESI146.0[M-CONH2]+，计算值[C10H10N2O2-CONH2]+146.1。
(1R * ，2S * )-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′- 酮的合成
向20mL微波小瓶中的(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(802mg，2mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(462mg，3mmol)的混合物中添加PhCH3/EtOH(8mL/4mL)，然后添加1M Na2CO3(3mL，3mmol)和Ph(PPh3)4(46mg，0.04mmol，2mol％)，所得混合物用氩气吹扫，然后在120℃下微波加热3h。水性处理(aqueous workup)后，溶液用EtOA萃取并通过快速色谱(己烷/EtOAc 1∶1)纯化以获得浅黄色泡沫状粗标题化合物(512mg)，其无需进一步纯化而使用。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.74(d，J＝8.4Hz，1H)，7.35(s，1H)，7.10-6.88(m，5H)，6.54(t，J＝7.4Hz，1H)，6.06(d，J＝18.0Hz，1H)，5.92(d，J＝7.6Hz，1H)，5.49(d，J＝7.6Hz，1H)，3.46(d，J＝8.2Hz，1H)，2.30-2.18(m，2H)；MS ESI 302.0[M+H]+，计算值[C19H15N3O+H]+302.1。
(1R * ，2S * )-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′- 吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200381
向20mL微波小瓶中的(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(1.00g，2.32mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(500mg，3.25mmol)的混合物中添加PhCH3/EtOH(7mL/3.5mL)，然后添加1M Na2CO3(3mL，3mmol)。室温下搅拌1min后，添加Ph(PPh3)4(50mg，0.043mmol，1.9mol％)，所得混合物用氩气吹扫，然后在120℃下微波加热3h。该反应以相同规模重复两次并合并所得混合物。水性处理获得暗橙色固体/泡沫状粗标题化合物(3.10g)，其无需进一步纯化而使用。纯化合物样品可通过快速色谱(Hex/EtOAc 1∶1)获得。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.89(d，J＝8.4Hz，1H)，7.45(s，1H)，7.01(dd，J＝18.2Hz，J＝11.4Hz，1H与d重叠，J＝6.8Hz，1H；总2H)，6.83(d，J＝8.4Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.4Hz，J＝2.4Hz，1H)，6.09(d，J＝18.0Hz，1H)，5.56(d，J＝1.6Hz，1H)，5.52(d，J＝11.6Hz，1H)，3.56(t，J＝7.6Hz，1H，与MeOH残基部分重叠)，3.26(s，3H)，2.24(dd，J＝7.8Hz，J＝5.0Hz，1H)，2.18(dd，J＝9.2Hz，J＝4.8Hz，1H)；MS ESI 332.0[M+H]+，计算值[C20H17N3O2+H]+332.1。
(1R * ，2S * )-5′-乙基-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200391
采用制备(1R*，2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，由5-乙基吲哚啉-2-酮(885mg，5.5mmol)和3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(1.36g，5mmol)获得作为单一非对映异构体的浅橙色固体状标题化合物(710g，2步33％，由己烷/MeOH研磨)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.44(s，1H)，10.51(s，1H)，7.44(s，1H)，7.30(d，J＝8.4Hz，1H)，6.99(d，J＝8.8Hz，1H)，6.80(d，J＝7.2Hz1H)，6.72(d，J＝7.6Hz，1H)，5.76(s，1H)，3.17(t，J＝7.8Hz，1H)，2.29(dd，J＝8.0Hz，J＝4.8Hz，1H)，2.18-2.04(m，2H)，1.98(dd，J＝8.6Hz，J＝4.8Hz，1H)，0.60(t，J＝7.4Hz，1H)；MS ESI 430.0[M+H]+，计算值[C19H16IN3O+H]+430.0。
(1R * ，2S * )-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200392
采用制备(1R*，2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，由5-甲基吲哚啉-2-酮(772mg，5.25mmol)和3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(1.36g，5mmol)获得黄色固体状粗标题化合物(2.06g，2步99％)。NMR显示6∶1的标题化合物和次要非对映体的混合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.43(s，1H)，10.51(s，1H)，7.47(s，1H)，7.32(d，J＝8.4Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，6.73(d，J＝7.6Hz，1H)，5.86(s，1H)，3.18(t，J＝8.2Hz，1H)，2.30-2.20(m 1H)，2.00-1.90(m，1H)，1.85(s，3H)；MS ESI 416.1[M+H]+，计算值[C18H14IN3O+H]+416.0。
2-((1R * ，2S * )-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲 哚啉]-1′-基)乙酰胺的合成
Figure BPA00001624093200401
向2-(2-氧代吲哚啉-1-基)乙酰胺(380mg，2mmol)和3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(544mg，2mmol)于MeOH(20mL)中的混合物添加哌啶(0.04mL)。所得混合物在75℃(油温)下加热90min。冷却至室温后，通过吸滤收集所得沉淀以获得黄色固体(850mg)。
向100mL烧瓶中的三甲基碘化亚砜(880mg，4mmol)和60％NaH(486mg，12mmol)的混合物添加DMF(5mL)。所得混合物在室温下搅拌5min，然后通过移液管添加于DMF(20mL)中的上述黄色固体的悬浮液。添加后，所得粉红色混合物在室温下搅拌2h并冷却至0℃。用冰/H2O、饱和NH4Cl(15mL)终止反应，然后用冰/H2O加至总体积100mL。室温下搅拌2min后，通过吸滤收集所得沉淀，干燥后获得粉红色固体状粗标题化合物(805mg，2步88％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.50(s，1H)，7.94(s，1H)，7.70(s，1H，NH)，7.49(s，1H)，7.31(d，J＝8.4Hz，1H)，7.26(s，1H)，7.06(t，J＝7.6Hz，1H，与7.03ppm处的峰部分重合)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H，与7.06ppm处的峰部分重合)，6.86(d，J＝7.6Hz，1H)，6.60(t，J＝7.6Hz，1H)，4.38(t，J＝18.4Hz，2H)，3.26(t，J＝8.8Hz，1H)，2.40-2.35(m，1H)，2.10-2.04(m，1H)；MS ESI 459.1[M+H]+，计算值[C19H15IN4O2+H]+459.0。
(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷 -1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200411
采用制备(1R*，2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，由1-(2-甲氧基乙基)吲哚啉-2-酮(382mg，2mmol)和3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(544mg，2mmol)获得浅米色固体状粗标题化合物(750mg，2步82％)。NMR显示6∶1的标题化合物和次要非对映体的混合物。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.48(s，1H)，7.47(s，1H)，7.30(d，J＝7.8Hz，1H)，7.10-7.05(m，2H)，6.98(d，J＝8.3Hz，1H)，6.64-6.56(m，1H)，6.01(d，J＝7.3Hz，1H)，3.98-3.92(m，2H)，3.63-3.57(m，2H)，3.25(s，3H和t，J＝8.6Hz，1H重叠；总共4H)，2.37(t，J＝6.1Hz，1H)，2.05(dd，J＝9.0Hz，J＝5.0Hz，1H)；MS ESI460.1[M+H]+，计算值[C20H18IN3O2+H]+460.0。
(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2- 基)乙烯基)苯基)甲胺的合成
Figure BPA00001624093200412
将冰醋酸(3滴)加入4-乙炔基苯甲醛(250.7mg，1.93mmol)、二甲胺(2M于THF中，1.5mL，3.0mmol)和NaBH(OAc)3(617mg，2.91mmol)于DCE(6.5mL)中的混合物中。所得混合物在室温下搅拌2.5h。用饱和NaHCO3水溶液(～40mL)终止反应。将产物萃取入CH2Cl2(100mL，然后2x50mL)中，合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，经(Na2SO4)干燥并真空蒸发。在Biotage Isolera(二氧化硅，0-3％2M NH3-甲醇/CH2Cl2)上纯化获得1-(4-乙炔基苯基)-N，N-二甲基甲胺(280.1mg，92％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8Hz，2H)，7.28(d，J＝8Hz，2H)，3.42(s，2H)，3.07(s，1H)，2.24(s，6H)。
将4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(1.20mL，8.23mmol)加入经氩气吹扫的1-(4-乙炔基苯基)-N，N-二甲基甲胺(262mg，1.65mmol)和HRuCl(CO)(PPh3)3(104.1mg，0.11mmol)的甲苯(9.0mL)溶液中。所得混合物在50℃下加热12h。将产物萃取入Et2O(250mL)，有机层依次用水(3x20mL)和盐水(20mL)洗涤，干燥(Na2SO4)并真空蒸发。通过柱色谱(硅胶，50-100％CH2Cl2于Et2O中)纯化获得(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(402mg，1H NMR确定含20％频哪醇杂质，产率68％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8Hz，2H)，7.4(d，1H)，7.28(d，2H)，6.16(d，1H)，3.42(s，2H)，2.24(s，6H)，1.32(s，12H)；MS ESI288.0[M+H]+，计算值[C17H26BNO2+H]+288.2。
((E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄 基)吡咯烷的合成
Figure BPA00001624093200421
将冰醋酸(0.2mL)加入4-乙炔基苯甲醛(1g，7.5mmol)、吡咯烷(1.2mL，15mmol)和NaBH(OAc)3(2.5g，11.5mmol)于DCE(35mL)的混合物中。所得混合物在室温下搅拌2h。用饱和NaHCO3水溶液(50mL)终止反应。将产物萃取入CH2Cl2(2x100mL)中，合并的有机层用盐水(25mL)洗涤，干燥(MgSO4)并真空蒸发以获得定量产率的1-(4-乙炔基苯基)吡咯烷。1H NMR(CDCl3)δ：7.45(d，J＝7.8Hz，2H)，7.30(d，J＝8.3Hz，2H)，3.62(s，2H)，3.06(s，1H)，2.51(bs，4H)，1.80(bs，4H)。
在氩气氛下向4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(1.9g，15mmol)的甲苯(20mL)溶液中添加1-(4-乙炔基苯基)吡咯烷(1g，5mmol)和HRuCl(CO)(PPh3)3(120mg，0.11mmol)。所得混合物在50℃加热4h。将产物萃取入EtOAc(250mL)中，且有机层依次用水(3x20mL)和盐水(20mL)洗涤，干燥(MgSO4)并真空蒸发。通过柱色谱(硅胶，0-20％MeOH/EtOAc)纯化获得标题化合物(1.2g，77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，J＝7.8Hz，2H)，7.39(d，J＝18.6Hz，1H)，7.33-7.29(m，2H)，6.15(d，J＝18.6Hz，1H)，3.61(s，2H)，2.51(bs，4H)，1.79(bs，4H)，1.32(s，12H)。
(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄 基)吗啉的合成
Figure BPA00001624093200431
采用制备实施例A51A的方法，由4-(4-溴苄基)吗啉(4.18g，16.3mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(3mL，17.7mmol，1.1eq.)获得白色至黄色固体状标题化合物(4.35g，71％)(PhCH3＝30mL，1mol％Pd(PtBu3)2，80℃，1h)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.45(d，J＝8.0Hz，2H)，7.40(d，J＝18.4Hz，1H)，7.31(d，J＝8.0Hz，2H)，6.16(d，J＝18.0Hz，1H)，3.72(t，J＝4.4Hz，4H)，3.50(s，2H)，2.47-2.42(m，4H)，1.32(s，12H)；MS ESI 330.1[M+H]+，计算值[C19H28BNO3+H]+330.2。
(E)-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲 醛的合成
采用制备实施例A51A的方法，由4-溴苯甲醛(500mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)获得浅黄色固体状标题化合物(498mg，71％)(PhCH3＝8mL，2mol％Pd(PtBu3)2，80℃，O/N)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.01(s，1H)，7.88(d，J＝8.0Hz，2H)，7.64(d，J＝8.4Hz，2H)，7.43(d，J＝18.4Hz，1H)，6.34(d，J＝18.4Hz，1H)，1.34(s，12H)；MS ESI 258.9[M+H]+，计算值[C15H19BO3+H]+259.1。
(E)-4-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄 基)吗啉的合成
Figure BPA00001624093200441
向3-乙炔基苯甲醛(650mg，5mmol)和吗啉(0.87mL，10mmol)于DCE(15mL)中的混合物添加NaBH(OAc)3(1.325g，6.25mmol)，然后添加AcOH(0.2mL)。所得混合物在室温下搅拌2h。水性处理，然后用EtOAc萃取获得浅棕色油状粗4-(3-乙炔基苄基)吗啉(0.98g)。采用制备实施例A42A的方法(PhCH3＝12mL，1mol％HRuCl(CO)(PPh3)3，50℃，2h)获得浅棕色油状标题化合物(1.75g，2步定量产率)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(s，1H)，7.46-7.37(m，2H)，7.35-7.27(m，2H)，6.19(d，J＝18.4Hz，1H)，3.78-3.68(m，4H)，3.52(s，2H)，2.52-2.42(m，4H)，1.32(s，12H)；MS ESI 330.1[M+H]+，计算值[C19H28BNO3+H]+330.2。
(E)-N，N-二甲基-1-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2- 基)乙烯基)苯基)甲胺的合成
Figure BPA00001624093200442
采用制备(E)-4-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉的方法(PhCH3＝12mL，2mol％HRuCl(CO)(PPh3)3，50℃，2h)，由3-乙炔基苯甲醛(520mg，4mmol)和Me2NH(2M于THF中，3mL，6mol)获得黄色油状标题化合物(1.36g，2步定量产率)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.47(s，1H)，7.45-7.38(m，2H)，7.35-7.27(m，2H)，6.19(d，J＝18.4Hz，1H)，3.68-3.58(m，4H)，3.52(s，2H)，2.53-2.43(m，4H)，1.32(s，12H)；MS ESI 288.1[M+H]+，计算值[C17H26BNO2+H]+288.2。
(E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯 基)哌嗪的合成
Figure BPA00001624093200451
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝12mL，2mol％Pd(PtBu3)2，80℃，2h)，由1-(4-溴苯基)哌嗪(653mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)获得黄色固体状标题化合物(267mg，68％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ7.41(d，J＝8.0Hz，2H)，7.09(d，J＝18.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.0Hz，2H)，5.86(d，J＝18.8Hz，1H)，3.17-3.11(m，4H)，2.90-2.84(m，4H)，1.22(s，12H)；MS ESI 315.0[M+H]+，计算值[C18H27BN2O2+H]+315.2。
顺式-2，6-二甲基-4-(4-((E)-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环 -2-基)乙烯基)苄基)吗啉的合成
Figure BPA00001624093200452
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝25mL，1mol％Pd(PtBu3)2，80℃，2h)，由4-(4-溴苄基)-顺式-2，6-二甲基吗啉(2.82g，10mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(1.85mL，11mmol，1.1eq.)获得白色固体状标题化合物(2.52g，71％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8.0Hz，2H)，7.40(d，J＝18.4Hz，1H)，7.30(d，J＝7.6Hz，2H)，6.16(d，J＝18.4Hz，1H)，3.75-3.65(m，2H)，3.47(s，2H)，2.70(d，J＝10.8Hz，2H)，1.75(t，J＝10.2Hz，2H)，1.32(s，12H)，1.14(d，J＝6.4Hz，6H)；MS ESI 358.2[M+H]+，计算值[C21H32BNO3+H]+358.2。
(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙 烯基)苯基)哌嗪的合成
Figure BPA00001624093200461
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝10mL，2mol％Pd(PtBu3)2，80℃，2h)，由1-(4-溴苯基)-4-甲基哌嗪(691mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)获得浅黄色固体状标题化合物(674mg，76％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.34(d，J＝18.4Hz，1H)，6.87(d，J＝8.4Hz，2H)，5.99(d，J＝18.4Hz，1H)，3.26-3.33(m，4H)，2.65-2.59(m，4H)，2.40(s，3H)，1.31(s，12H)；MS ESI 329.1[M+H]+，计算值[C19H29BN2O2+H]+329.2。
(E)-1-乙基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙 烯基)苯基)哌嗪的合成
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝12mL，2mol％Pd(PtBu3)2，80℃，2h)，由1-(4-溴苯基)-4-乙基哌嗪(729mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)获得浅黄色固体状标题化合物(601mg，65％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.34(d，J＝18.0Hz，1H)，6.88(d，J＝8.4Hz，1H)，6.99(d，J＝18.0Hz，1H)，3.28(t，J＝4.8Hz，4H)，2.61(t，J＝4.8Hz，4H)，2.48(q，J＝7.2Hz，2H)，1.32(s，12H)，1.14(t，J＝7.2Hz，3H)；MS ESI 343.1[M+H]+，计算值[C20H31BN2O2+H]+343.2。
(E)-1-异丙基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基) 乙烯基)苯基)哌嗪的合成
Figure BPA00001624093200471
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝10mL，2mol％Pd(PtBu3)2，80℃，O/N)，由1-(4-碘代苯基)-4-异丙基哌嗪(894mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)获得浅橙色固体状标题化合物(504mg，52％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.41(d，J＝8.4Hz，2H)，7.34(d，J＝18.4Hz，1H)，6.87(d，J＝8.4Hz，2H)，5.98(d，J＝18.4Hz，1H)，3.26(t，J＝4.8Hz，4H)，2.76-2.66(m，5H)，1.32(s，12H)，1.10(d，J＝6.4Hz，6H)；MS ESI357.2[M+H]+，计算值[C21H33BN2O2+H]+357.3。
(E)-4-(2-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基) 苯氧基)乙基)吗啉的合成
Figure BPA00001624093200472
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝12mL，2mol％Pd(PtBu3)2，80℃，O/N)，由4-(2-(4-溴苯氧基)乙基)吗啉(1g，3.50mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.6mL，3.58mmol，1.02eq.)获得白色固体状标题化合物(902g，72％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.28(d，J＝8.0Hz，2H)，7.22(d，J＝18.4Hz，1H)，6.70(d，J＝8.0Hz，2H)，5.88(d，J＝18.4Hz，1H)，3.90(t，J＝4.8Hz，2H)，3.60-3.50(m，4H)，2.59(t，J＝4.8Hz，2H)，2.42-2.32(m，4H)，1.15(s，12H)；MS ESI 360.2[M+H]+，计算值[C20H30BNO4+H]+360.2。
(E)-2-氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯 基)苯甲醛的合成
Figure BPA00001624093200481
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝10mL，1mol％Pd(PtBu3)2，80℃，1.5h)，由4-溴-2-氟苯甲醛(812mg，4mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.8mL，4.8mmol)获得黄色固体状标题化合物(610mg，55％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.34(s，1H)，7.85(t，J＝7.6Hz，1H)，7.36(d，J＝8.8Hz，1H，与7.35ppm处的峰部分重叠)，7.35(d，J＝17.2Hz，1H，与7.36ppm处的峰部分重叠)，7.26(d，J＝11.2Hz，1H，与CDCl3残基部分重叠)，6.32(d，J＝18.4Hz，1H)，1.33(s，12H)。
(E)-4-(2-氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙 烯基)苄基)吗啉的合成
Figure BPA00001624093200482
向(E)-2-氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲醛(0.61g，2.2mmol)和吗啉(0.3mL)于DCE(20mL)中的混合物添加NaBH(OAc)3(636mg，3mmol)，然后添加AcOH(0.5mL)。所得混合物在室温下搅拌2h。用饱和NaHCO3(10mL)、H2O(10mL)终止反应，用EtOAc(2x30mL)萃取。真空去除溶剂以获得白色固体状标题化合物(0.72g，94％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.20-7.12(m，2H)，7.04(d，J＝7.6Hz，1H)，6.99(d，J＝10.8Hz，1H)，5.98(d，J＝18.4Hz，1H)，3.55-3.45(m，4H)，3.36(s，2H)，2.33-2.23(m，4H)，1.14(s，12H)；MS ESI 348.2[M+H]+，计算值[C19H27BFNO3+H]+348.2。
顺式-2，6-二甲基-1-(4-((E)-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环 -2-基)乙烯基)苄基)哌啶的合成
Figure BPA00001624093200491
采用制备实施例A51A的方法(PhCH3＝10mL，2.5mol％Pd(PtBu3)2，80℃，75min)，由4-(4-溴苄基)-顺式-2，6-二甲基哌啶(0.60g，2.13mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.44mL，2.6mmol)获得浅黄色油状标题化合物(0.45g，55％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.43(d，J＝8.0Hz，2H，与7.40ppm处的峰部分重叠)，7.40(d，J＝18.8Hz，1H，与7.43ppm和7.36ppm处的峰部分重叠)，7.36(d，J＝8.4Hz，2H，与7.40ppm处的峰部分重叠)，6.14(d，J＝18.4Hz，1H)，3.78(s，2H)，2.53-2.44(m，2H)，1.68-1.55(m，3H)，1.40-1.28(m，3H)，1.05(d，J＝6.4Hz，6H)；MS ESI 356.2[M+H]+，计算值[C22H34BNO2+H]+356.3。
N-苄基-吲哚酮的合成
Figure BPA00001624093200492
根据文献方法(C.Martin和E.M.Carreira，J.Am.Chem.Soc.，2005，127，11505-11515)制备。将搅拌的靛红(10.0g，68mmol)的无水DMF(125mL)溶液在冰浴中冷却，然后分10批添加氢化钠(矿物油中的60wt％，2.86g，71.5mmol)，橙色溶液迅速转变为紫色。当观察不到气体的进一步析出时，通过注射器添加苄基溴(13.4g，78.0mmol)。在20min内观察到颜色变回橙色。在搅拌下添加水(300mL)，过滤收集所得橙色-红色沉淀并用水和少许冷乙醇洗涤。然后将固体从沸乙醇中重结晶以获得红色长针状N-苄基靛红(13.7g，85％)。
将N-苄基靛红(13.0g，55mmol)与水合肼(60mL)混合并置于油浴中。混合物分阶段加热至125℃，首先变成绿泥，然后变成黄色粘性固体块。在125℃下加热总共5h后，将混合物冷却并用EtOAc(2x100mL)萃取。合并的有机部分用1.0M aq.H2SO4洗涤两次，且各用半饱和盐水洗涤一次之后用盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以获得浅黄色固体。从乙醚/戊烷中再沉淀获得灰白色固体状标题化合物(9.6g，75％)。光谱数据与文献值匹配(C.Martin和E.M.Carreira，J.Am.Chem.Soc.，2005，127，11505-11515)。
1-苄基-5-氟吲哚啉-2-酮的合成
以类似于N-苄基靛红的方法，5-氟靛红(10.0g，60.5mmol)产生橙红色粉末状5-氟-N-苄基靛红(14.5g，93％)。粗产物不经纯化用于下一步。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.33-7.21(m，5H)，6.95(d，J＝7.6Hz，1H)，6.84(t，1H)，6.60(m，1H)，4.89(s，2H)；MS ESI 255.9[M+H]+，计算值[C15H10FNO2+H]+255.07。
采用5-氟-N-苄基靛红(14.5g，56.8mmol)以类似于N-苄基-吲哚酮的方式制备标题化合物(14.5g，56.8mmol)。采用Et2O∶己烷的研磨产生浅黄色固体状标题化合物(10.3g，75％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.30-7.26(m，5H)，7.00(d，J＝7.6Hz，1H)，6.87(t，1H)，6.63(m，1H)，4.91(s，2H)，3.63(s，2H)；MS ESI 241.9[M+H]+，计算值[C15H10FNO2+H]+241.09。
1-苄基-5-甲基吲哚啉-2-酮的合成
Figure BPA00001624093200502
在2min内向5-甲基靛红(8.05g，50mmol)和K2CO3(8.16g，60mmol)于DMF(100mL)中的混合物逐滴添加BnBr(6.5mL，55mmol)。添加后，所得混合物在75℃油浴中加热1.5h。冷却至室温后，将反应混合物倒在冰/冷水(250mL)上，用H2O(50mL)冲洗并搅拌5min。通过吸滤收集所得沉淀并晾干以获得暗红色固体状1-苄基-5-甲基靛红。MS ESI 252.0[M+H]+，计算值[C16H13NO2+H]+252.1。
将1-苄基-5-甲基靛红悬浮于DMSO(100mL)中并冷却至0℃。在5min内逐滴添加水合肼(5mL)。添加后，所得澄清的红色溶液在120℃加热2h，然后在140℃加热5h。冷却至室温后，将其倒入1L锥形瓶中用H2O(50mL)冲洗，添加冰直到总体积为约300mL。添加2M HCl(50mL)，用EtOAc(200mLx2，然后100mL)萃取混合物，干燥有机层(Na2SO4)。去除溶剂，然后在高度真空下干燥2天，获得暗红色固体状标题化合物(12.53g，2步的定量产率，含有一些DMSO残留)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.35-7.29(m，5H)，7.09(s，1H)，6.97(d，J＝7.6Hz，1H)，6.61(d，J＝8.0Hz，1H)，4.91(s，2H)，3.60(s，2H)，2.31(s，3H)；MS ESI 238.0[M+H]+，计算值[C16H15NO+H]+238.1。
1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2-酮的合成
Figure BPA00001624093200511
将搅拌的5-甲氧基靛红(5.0g，28mmol)的无水DMF(40mL)溶液在冰浴中冷却，然后缓慢添加氢化钠(矿物油中的60wt％，1.7g，42mmol)。暗红色溶液迅速转变为黑色。搅拌20min后，通过注射器向反应混合物中添加BnBr(3.7mL，31mmol)，所得混合物搅拌1h。搅拌下添加水(150mL)，通过过滤收集所得暗红色沉淀，并用水洗涤以获得暗红色固体状1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2，3-二酮(6.1g，81％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.39-7.31(m，5H)，7.17(s，1H)，7.03(d，J＝8.1Hz，1H)，6.68(d，J＝8.6Hz，1H)，4.92(s，2H)，3.79(s，3H).MSESI 268.1[M+H]+，计算值[C16H13NO3+H]+268.09。
将1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2，3-二酮(6.1g，23mmol)和水合肼(50-60％等级，2.9mL，约2eq)的DMSO(15mL)溶液在油浴中加热至140℃。3h后，混合物冷却，用水和EtOAc稀释，分层，水层用EtOAc萃取三次(30mL)。合并的有机部分用2M H2SO4、盐水洗涤，经MgSO4干燥，过滤并浓缩以获得粘性棕色油状粗产物。粗产物通过硅胶色谱(20-50％EtOAc于己烷中)纯化，以获得棕色油状标题化合物(5.0g，85％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.34-7.23(m，5H)，6.89(s，1H)，6.69(d，J＝8.3Hz，1H)，6.61(d，J＝8.5Hz，1H)，4.91(s，2H)，3.76(s，3H)，3.62(s，2H).MS ESI 254.0[M+H]+，计算值[C16H15NO2+H]+254.1。
N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑的合成
Figure BPA00001624093200521
方法1：N1-苄基-6-溴-1H-吲唑(10.2g，35.5mmol)和NaOH(4.3g，107mmol)于THF/水(9∶1，350mL)中的混合物用氮气吹扫。在单独的烧瓶中，将Pd(OAc)2(0.16g，0.7mmol，2mol％)和PPh3(0.37g，1.4mmol，4mol％)一起在经氮气吹扫的无水THF(35mL)中搅拌10min，形成含有一些悬浮固体的红色溶液。将乙烯基硼酸频哪醇酯(7.5mL，44.4mmol)和催化剂加入反应混合物中，所得溶液再用氮气吹扫一次。将混合物在设置为65℃的油浴中升温；TLC显示在7h内起始物质的消耗。减压下浓缩混合物以去除大部分THF，然后用水(50mL)、盐水(50mL)和EtOAc(250mL)稀释。分层，且水相再用EtOAc(4x50mL)萃取。合并的有机部分用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩(在70℃/20毫巴下)以获得粗产物。该产物在硅胶上采用环己烷中的10-20％EtOAc进行层析，以获得黄色油状标题化合物(7.5g，90％)，其在静置后凝固。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.98(s，1H)，7.63(d，J＝8.4Hz，1H)，7.29-7.19(m，5H)，7.18-7.13(m，J＝7.0Hz，，2H)，6.75(dd，J＝17.6，10.9Hz，1H)，5.76(d，J＝17.5Hz，1H)，5.53(s，2H)，5.26(d，J＝10.9Hz，1H).MS(ES+)：235([M+H]+)；计算值[C16H14N2+H]+235.1。
方法2：采用4，4，6-三甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼烷：N1-苄基-6-溴代-1H-吲唑(1.44g，5.0mmol)和NaOH(0.4g，10.0mmol)于THF/水(5∶1，15mL)中的混合物用氮气吹扫。在单独的烧瓶中，将Pd(OAc)2(11mg，0.05mmol，1mol％)和PPh3(26mg，0.1mmol，2mol％)一起在经氮气吹扫的THF(2.5mL)中搅拌10min，形成含有一些悬浮固体的红色溶液。所使用的THF是HPLC等级的且不含抑制剂；较低级别或稳定的THF的效应是未知的。将4，4，6-三甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼烷(1.12mL，6.5mmol)和催化剂溶液加入反应混合物中，所得溶液再用氮气吹扫一次。将混合物在设置为65℃的油浴中升温；加热持续24h，但反应可能在少于8h完成。然后将粗混合物与其中使用较高稀释度的相同规模的第二、平行反应物合并。减压下浓缩混合物以去除大部分THF，然后用水、盐水和环己烷稀释。分层，水相再用环己烷萃取，直到TLC显示已经萃取所有所需产物(萃取3-4次)。合并的有机部分用盐水洗涤，经MgSO4干燥，然后通过1cm二氧化硅垫以去除基线材料。残留在二氧化硅上的任何产物采用环己烷中的10％EtOAc洗脱(该洗出液中Rf.0.15)。浓缩合并的洗出液以获得黄色油状标题化合物(2.05g，88％)，其在静置时凝固并且纯度足够高以用于随后反应中。
方法3：N1-苄基-6-溴代-1H-吲唑(上述方法3获得的粗物质的一半)分两批按如下方法处理：粗N1-苄基-6-溴代-1H-吲唑(153g，最多含有0.5mol，假设苄基化/平衡中的产率为100％)和NaOH(40g，1.0mol)于THF/水(5∶1，1.5L；HPLC等级，不含抑制剂的THF)中的混合物用氮气吹扫。在单独的烧瓶中，将Pd(OAc)2(1.13g，5.0mmol，1mol％)和PPh3(2.6g，10.0mmol，2mol％)一起在经氮气吹扫的THF(250mL)中搅拌10min，形成含有一些悬浮固体的红色溶液。将4，4，6-三甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼烷(dioxaborinane)(112mL，0.65mol)和催化剂溶液加入反应混合物中，所得溶液再用氮气吹扫一次。将混合物在设置为60℃的油浴中加热过夜。样品的1H NMR显示残留一些起始物质，因此添加额外的乙烯基供体(30mL)以推动反应完成。合并两批混合物，减压浓缩混合物以去除大部分THF，然后用水、盐水和环己烷稀释。分层，水相再用环己烷萃取，直到TLC显示已经萃取所有所需产物(总共3.5L环己烷)。合并的有机部分用盐水洗涤，经MgSO4干燥，然后通过2cm二氧化硅垫以去除基线材料。残留在二氧化硅上的任何产物采用环己烷中的10％EtOAc洗脱(该洗出液中Rf.0.15)。浓缩合并的洗出液以获得309g含有标题化合物的粗制油、由乙烯基供体衍生的少许二醇和大量含苄基杂质。
方法4：采用蒸馏的N1-苄基-6-溴代-1H-吲唑(64.3g，0.144摩尔)进行进一步反应以实现完全转化而不需要另外部分的乙烯基供体，并获得半粗制N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(55.5g，定量)，其不需进一步纯化而使用。
(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1，2-二醇的合成
Figure BPA00001624093200541
方法1：将K3Fe(CN)6(16.7g，51.0mmol)、K2CO3(7.05g，51.0mmol)、(DHQ)2PHAL(0.13g，0.17mmol，1mol％)和K2OsO4.2H2O(12.8mg，0.034mmol，0.2mol％)置于圆底烧瓶中。添加tBuOH和水(1∶1，160mL)的混合物，搅拌下形成澄清的两相混合物。将混合物在冰浴中冷却，导致部分沉淀，然后添加粉末状N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(4.0g，17.1mmol)。所得混合物在冰浴中剧烈搅拌5h，在此时再看不到固体，且TLC显示起始物质的消耗。通过添加偏亚硫酸氢钠(40g)终止反应，所形成的起泡现象使得反应混合物溢出到冰浴中。将其余物质添加冰浴中，且所得混合物(含有约1L水和冰)搅拌过夜，缓慢升温。添加硅藻土和CH2Cl2(200mL)，彻底搅拌混合物然后过滤。再用CH2Cl2(2x50mL)彻底洗涤固体。分离两相滤液，水层用CHCl3(4x50mL)萃取。合并的有机部分用盐水洗涤，经MgSO4干燥、过滤并浓缩。将残余物溶于EtOAc中并通过二氧化硅垫(1cm深x8cm直径)过滤，再用EtOAc洗脱去除基线物质。浓缩洗脱液并用甲苯汽提以去除痕量tBuOH。最后，残余物从热甲苯(10mL/g)中重结晶以获得白色针状标题化合物(3.87g，84％，98.8％ee)，其中主要(S)对映体在16.8min洗脱出来(Daicel Chiralpak IB(250x4.6mm)；正庚烷中的10％EtOH等度洗脱；1mL/min；室温(约22℃)；检测：254，230，210nm)；由外消旋参考标准得知，采用该方法，(R)对映体的保留时间为14.8min，且N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑在5.4min洗脱出来。1H NMR和质谱数据与以上获得的外消旋1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1，2-二醇相同。旋光度：[α]22 D＝13°(c 1.018，MeOH)。
方法2：半粗制N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(上述方法4，55.5g)以类似方式二羟基化，以提供并在重结晶后获得2批固体后，纯的(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1，2-二醇(38g，定量)。
方法3：将K3Fe(CN)6(0.98kg，3mol)、K2CO3(0.55kg，3mol)、(DHQ)2PHAL(3.9g，5.0mmol)和K2OsO4.2H2O(0.37g，1mmol)置于配备有置顶式搅拌器的10L夹头式(clamp-top)反应容器中。添加tBuOH和水(1∶1，7.5L)的混合物，搅拌下形成澄清的两相混合物。采用Haake EK90冷却器冷却混合物，导致部分沉淀，然后添加粗制的N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(约0.7-0.8mol)。剧烈搅拌所得混合物，但是由于没有足够空间用于在冷却浴中适当循环且当放置过周末时的实际温度降至约-20℃，固体凝固。几乎没有证明转化。为使反应加速，再添加(DHQ)2PHAL(2.5mmol)和K2OsO4.2H2O(0.5mmol)，使混合物升温至约10℃；然后反应令人满意地进行。通过分批添加偏亚硫酸氢钠(1.5kg)来终止反应。混合物在室温下搅拌1h，变得几乎澄清，然后过滤通过硅藻土垫以去除沉淀的OsO2。滤液用CH2Cl2萃取(萃取4次，最终体积7L)，合并的有机部分经MgSO4干燥，过滤并浓缩。粗产物从热甲苯(10mL/g)中重结晶，收集两批标题化合物，为98.7％和98.0％e.e.，总共163.7g(55％来自6-溴代-1H-吲唑)。
甲磺酸(S)-2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲磺酰基氧基-乙基酯的 合成
Figure BPA00001624093200561
方法1：将(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1，2-二醇(3.75g，14.0mmol，98.8％ee)和Et3N(4.9mL，35.0mmol)的无水CH2Cl2(350mL)溶液在冰浴中冷却，然后在10min内逐滴添加MsCl(2.17mL，28.0mmol)。使所得混合物搅拌30min。在用CH2Cl2(250mL)稀释后，用冷的1.0M aq.HCl(2x50mL)、饱和aq.NaHCO3(50mL)和盐水(50mL)洗涤溶液，然后经Na2SO4干燥。抽吸下将溶液倒入短的二氧化硅垫(1cm深x8cm直径)上。初始滤液不含任何产物，其随后用1∶1Et2O/CH2Cl2洗脱。减压浓缩洗出液以获得白色固体状标题化合物(5.98g，～定量)。1H NMR和质谱数据与上述获得的外消旋甲磺酸2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲磺酰基氧基-乙基酯相同。该批物质的e.e.在该阶段没有测定，而是输送至下一步。旋光度：[α]22 D＝58°(c 0.73，CHCl3)。
方法2：将(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1，2-二醇(134g，0.5mol，～98％e.e.)和Et3N(174mL，1.25mol)的CH2Cl2(2.5L)溶液在冰浴中冷却，然后在约1h内缓慢添加MsCl(81.3mL，1.05mol)。内部温度升至最高11℃。使所得混合物搅拌30min。用冷的1.0M aq.HCl(400mL)终止反应，相分离，有机相再用冷的1.0M aq.HCl、aq.NaHCO3和盐水洗涤，然后经MgSO4干燥。抽吸下将溶液倒在短的二氧化硅垫上。在该过滤期间一些产物从二氧化硅洗脱出来，且用1∶1Et2O/CH2Cl2(2L)洗脱其余部分。减压浓缩洗出液以获得硬的白色固体。其用Et2O(800mL)研磨过夜。通过过滤收集白色细粉末，并再用Et2O(2x100mL)洗涤以获得标题化合物(184.2g，87％，99％e.e.)，其中主要(S)对映体在13.4min洗脱出来(Daicel Chiralpak IB(250x4.6mm)；以正庚烷中的30％EtOH等度洗脱；1mL/min；室温(约22℃)；检测：254，230，210nm)；由外消旋参考标准得知，采用该方法，(R)对映体的保留时间为14.4min。滤液仅含有少量低e.e.产物并被弃去。
(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200571
方法1：将N-苄基-吲哚酮(3.57g)的无水THF(120mL)溶液在冰浴中冷却，然后分四批添加NaH(60wt％于矿物油中，1.92g，48.0mmol)；溶液迅速变成深紫色。30min后，通过注射器泵在1h内添加甲磺酸(S)-2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲磺酰基氧基-乙基酯(6.79g，16.0mmol，～98.5％ee，之前用无水THF汽提两次)的无水THF(80mL)溶液。TLC显示快速转化为单一化合物，其Rf为0.45(环己烷中的25％EtOAc，洗脱两次，起始物质Rf 0.5&Rf 0.2)。搅拌2h后，将混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(50mL)中，用水(50mL)和EtOAc(100mL)稀释。相分离，水层用另外份的EtOAc(4x50mL)萃取。合并的有机部分用盐水洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩以获得粗产物，其通过1H NMR显示为几乎仅由标题化合物组成。将粗产物通过短的二氧化硅垫(1cm深x5cm直径)，用1∶1的环己烷中的EtOAc洗脱。残余物用正庚烷(3x50mL)研磨以去除矿物油，并用甲苯汽提以获得含有一些溶剂的玻璃样固体状标题化合物(7.0g，产率最高达90％)。HPLC显示光学纯度为98％e.e.，其中主要(1R，2S)对映体在13.3min洗脱出来(Daicel Chiralpak IA，250x4.6mm；以正庚烷中的10％EtOH等度洗脱，1mL/min；室温(约22℃)；检测：254，230，210nm)；由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为12.1min。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.36-7.20(m，8H)，7.19(s，1H)，7.15-7.10(m，J＝6.4Hz，2H)，6.99(td，J＝7.8，0.9Hz，1H)，6.92(d，J＝8.3Hz，1H)，6.74(d，J＝7.8Hz，1H)，6.50(t，J＝7.4Hz，1H)，5.76(d，J＝7.3Hz，1H)，5.61(d，J＝15.8Hz，1H)，5.53(d，J＝15.8Hz，1H)，5.08(d，J＝15.6Hz，1H)，4.97(d，J＝15.7Hz，1H)，3.48(t，J＝8.5Hz，1H)，2.28(dd，J＝9.0，4.5Hz，1H)，2.02(dd，J＝8.0，4.6Hz，1H).MS(ES+)：456([M+H]+)，计算值[C31H25N3O+H]+456.2。
方法2：在一套分开的单独实验中以类似于方法1的方式进行，但不进行任何柱色谱，每批使用20-45g的甲磺酸(S)-2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲磺酰基氧基-乙基酯，总共进行133.8g，315mmol。合并一些批次并在使用前通过二氧化硅塞以去除痕量基线物质，但这似乎在随后的反应中没有任何差异。分离泡沫状固体的粗产物(174.1g，含有来自氢化钠的矿物油，占各个粗产物的约10％；以及变化量的EtOAc，基于估计的单批纯度估计平均产率为＞80％)。该物质不进行进一步纯化而使用。
(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200581
方法1：将N-苄基-吲哚酮(3.57g)的无水THF(120mL)溶液在冰浴中冷却，然后分四批添加NaH(矿物油中的60wt％，1.92g，48.0mmol)；溶液迅速变成深紫色。30min后，通过注射器泵在1h内添加甲磺酸(S)-2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲磺酰基氧基-乙基酯(6.79g，16.0mmol，～98.5％ee，预先用无水THF汽提两次)的无水THF(80mL)溶液。TLC显示快速转化为单一化合物，其Rf为0.45(环己烷中的25％EtOAc，洗脱两次，起始物质Rf 0.5&Rf 0.2)。搅拌2h后，将混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(50mL)中，用水(50mL)和EtOAc(100mL)稀释。相分离，水层用另外份的EtOAc(4x50mL)萃取。合并的有机部分用盐水洗涤，经Na2SO4干燥、过滤并浓缩以获得粗产物，其通过1H NMR显示为几乎仅由标题化合物组成。将粗产物通过短的二氧化硅垫(1cm深x5cm直径)，用1∶1的环己烷中EtOAc洗脱。残余物用正庚烷(3x50mL)研磨以去除矿物油，并用甲苯汽提以获得玻璃样固体状标题化合物(7.0g，产率最高达90％)，其含有一些溶剂。HPLC显示光学纯度为98％e.e.，其中主要(1R，2S)对映体在13.3min洗脱出来(Daicel Chiralpak IA，250x4.6mm；以正庚烷中的10％EtOH等度洗脱；1mL/min；室温(约22℃)；检测：254，230，210nm)；由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为12.1min。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.99(s，1H)，7.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.36-7.20(m，8H)，7.19(s，1H)，7.15-7.10(m，J＝6.4Hz，2H)，6.99(td，J＝7.8，0.9Hz，1H)，6.92(d，J＝8.3Hz，1H)，6.74(d，J＝7.8Hz，1H)，6.50(t，J＝7.4Hz，1H)，5.76(d，J＝7.3Hz，1H)，5.61(d，J＝15.8Hz，1H)，5.53(d，J＝15.8Hz，1H)，5.08(d，J＝15.6Hz，1H)，4.97(d，J＝15.7Hz，1H)，3.48(t，J＝8.5Hz，1H)，2.28(dd，J＝9.0，4.5Hz，1H)，2.02(dd，J＝8.0，4.6Hz，1H).MS(ES+)：456([M+H]+)，计算值[C31H25N3O+H]+456.2。
(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-氟代螺[环丙烷-1，3′- 吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200591
标题化合物以类似于(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，采用(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1，2-二基二甲磺酸盐(501.4mg，1.181mmol)和1-苄基-5-氟吲哚啉-2-酮(285.0mg，1.181mmol)来制备。采用Biotage Isolera(SNAP25g柱，己烷中25-100％EtOAc)纯化产生乳膏状固体标题化合物(352mg，63％；97％ee)，其中主要(1R，2S)对映体在7.03min洗脱出来(Phenomenex Lux 5μCellulose-1(150x4.6mm)，1.0mL/min的速度以己烷中的80％EtOH等度洗脱1.0min，然后以己烷中的80-90％EtOH梯度洗脱10min)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为5.95min。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.04(s，1H)，7.67(d，J＝8.8Hz，1H)，7.40-7.27(m，8H)，7.17(s，1H)，7.11(d，J＝7.2Hz，2H)，6.92(d，J＝8.4Hz，1H)，6.67-6.62(m，2H)，5.62(d，J＝15.6Hz，1H)，5.55(d，J＝15.6Hz，1H)，5.51(t，J＝6.0Hz，1H)，5.10(d，J＝15.6Hz，1H)，4.94(d，J＝16.0Hz，1H)，3.53(t，J＝8.4Hz，1H)，2.32(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)，2.02(dd，J＝8.0，3.2Hz，1H)，MS ESI474.3[M+H]+，计算值[C31H24FN3O+H]+474.2。
(1R，2S)-5′-氟代-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的 合成
标题化合物以类似于实施例A4的手性合成方法采用(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-氟代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(560mg，1.18mmol)来制备。采用硅胶柱色谱用己烷中的5-95％EtOAc纯化以获得乳膏状固体标题化合物(179mg，52％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.03(s，1H)，7.71(d，J＝8.0Hz，1H)，7.62-7.46(m，2H)，6.94(d，J＝8.4Hz，1H)，6.88(t，J＝4.8Hz，1H)，5.69(d，J＝9.2Hz，1H)，3.39(t，J＝8.0Hz，1H)，2.30-2.71(m，1H)，2.23-2.18(m，1H)；MS ESI 294.1[M+H]+，计算值[C17H12FN3O+H]+294.10。
(1R，2S)-5′-氟代-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200611
标题化合物以类似于实施例A10的手性合成方法采用(1R，2S)-5′-氟代-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(240mg，0.818mmol)来合成。采用带有SNAP 25g柱的Biotage Isolera用己烷中的5-90％EtOAc纯化以获得乳膏状固体标题化合物(195mg，57％；97％ee)，其中主要(1R，2S)对映体在3.7min洗脱出来(Phenomenex Lux 5μCellulose-2(150x4.6mm)；以正己烷中的25％EtOH等度洗脱；1.5mL/min；24℃；检测：254nm)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为3.2min。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.47(s，1H)，7.38(d，J＝8.4Hz，1H)，7.01(d，J＝8.8Hz，1H)，6.88(dd，J＝8.8，4.4Hz，1H)，6.79(t，J＝8.8Hz，1H)，5.69(d，J＝8.4Hz，1H)，3.38(t，J＝8.8Hz，1H)，2.28(dd，J＝8.8，4.2Hz，1H)，2.21(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)；MS ESI 420.0[M+H]+，计算值[C17H11FIN3O+H]+420.0。
(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′- 吲哚]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200612
向装有60％NaH(1.20g，30mmol)的250mL圆底烧瓶中添加无水THF(20mL)，所得混合物冷却至0℃。在2min内添加1-苄基-5-甲基吲哚啉-2-酮(2.37g，10mmol)的无水THF(25mL)溶液，然后用THF(5mL)冲洗。在0℃搅拌20min后，在40min内通过滴液漏斗逐滴添加(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1，2-二基二甲磺酸盐(4.24g，10mmol)的无水THF(45mL)溶液，然后用THF(5mL)冲洗。添加后，所得混合物在0℃搅拌30min(TLC显示完全)，然后在室温下放置过夜。冷却至0℃后，将反应混合物倒入含有冰(100mL)和饱和NH4Cl(30mL)的锥形瓶中，用EtOAc(150mLx2)萃取，干燥(Na2SO4)。去除溶剂后，用30mL的EtOAc将残余物转移至100mLRBF中，并形成结晶。吸滤获得米色固体状标题化合物(1.537g)。浓缩滤液并通过Biotage Isolera(己烷中的20-30％EtOAc)纯化以及用EtOAc/己烷研磨以获得第二批灰白色固体(1.560g)。采用以上过程纯化滤液以获得第三批米色固体(115mg)。总共3.212g(68％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.02(s，1H)，7.63(d，J＝8.0Hz，1H)，7.36-7.20(m，9H)，7.14(d，J＝6.0Hz，2H)，6.94(d，J＝8.4Hz，1H)，6.80(d，J＝8.0Hz，1H)，6.64(d，J＝7.2Hz，1H)，5.62(d，J＝16.8Hz，1H，与5.59处的s部分重叠)，5.59(s，1H，与5.62处的d部分重叠)，5.55(d，J＝16.8Hz，1H)，5.08(d，J＝16.0Hz，1H)，4.97(d，J＝15.6Hz，1H)，3.48(t，J＝8.4Hz，1H)，2.30-2.25(m，1H)，2.02-1.96(m，1H)，1.85(s，3H)；MS ESI470.3[M+H]+，计算值[C32H27N3O+H]+470.2。
(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的 合成
Figure BPA00001624093200621
向装有(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(469mg，1mmol)的100mL烧瓶中添加无水THF(2mL)，所得混合物在0℃搅拌，然后在2min内加入KOtBu(1M于THF中，18mL，18mmol)。添加后，所得混合物在0℃搅拌15min并添加DMSO(1.85mL)。将氧气鼓泡通过1h，反应物从均质转为非均质的。在50min，LC-MS显示良好转化。用饱和NH4Cl终止反应。
以较大规模采用(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(1.41g，3mmol)重复上述反应。用饱和NH4Cl终止反应后，合并两部分反应物，用H2O稀释并用EtOAc(100mLx2)萃取。通过Biotage Isolera(己烷中的10-95％EtOAc)纯化获得浅色固体状标题化合物(680mg，53％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(s，1H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，7.46(s，1H)，6.94(d，J＝8.4Hz，1H)，6.85(d，J＝8.0Hz，1H)，6.81(d，J＝7.6Hz，1H)，5.78(s，1H)，3.32(t，与MeOH残留物重叠)，2.20-2.12(m，2H)，1.87(s，3H)；MS ESI 290.1[M+H]+，计算值[C18H15N3O+H]+290.1。
(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200631
向(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(680mg，2.35mmol)的DMF(16mL)溶液中添加K2CO3(544mg，4mmol)，然后添加碘(851mg，3.2mmol)。所得混合物在室温下搅拌3h，冷却至0℃，用饱和Na2S2O3终止反应，用H2O稀释，用EtOAc(50mLx3)萃取并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂并通过Biotage Isolera(EtOAc/己烷梯度：10-90％)纯化获得淡黄色固体状标题化合物(794mg，81％；＞98％e.e.)。主要(1R，2S)-对映体在9.6min洗脱出来(Phenomenex Lux5u Cellulose-2(150x4.6mm)；以正己烷中的10％EtOH等度洗脱，1.75L/min；室温；检测：254，214nm)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)-对映体的保留时间为7.7min。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.46(s，1H)，10.51(s，1H)，7.47(s，1H)，7.32(d，J＝8.8Hz，1H)，7.02(d，J＝8.0Hz，1H)，6.81(d，J＝7.6Hz，1H)，6.73(d，J＝7.6Hz，1H)，5.86(s，1H)，3.16(t，与痕量MeOH残留物重叠)，2.32-2.25(m，1H)，2.00-1.93(m，1H)，1.85(s，3H)；MS ESI 416.0[M+H]+，计算值[C18H14IN3O+H]+416.0。
(1R，2S)-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200641
标题化合物以类似于(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，采用(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1，2-二基二甲磺酸盐(6.70g，15.8mmol)和1-甲基吲哚啉-2-酮(2.33g，15.8mmol)来制备。经由柱色谱(硅胶，己烷中的25-50％EtOAc)纯化获得浅橙色结晶固体状标题化合物(5.01g，84％)；1HNMR(400MHz，CDCl3)δ8.00(s，1H)，7.60(d，J＝8.3Hz，1H)，7.30-7.25(m，3H)，7.18(s，1H)，7.13-7.10(m，3H)，6.92(d，J＝8.6Hz，1H)，6.85(d，J＝7.6Hz，1H)，6.55(t，J＝7.0Hz，1H)，5.76(d，J＝7.2Hz，1H)，5.63-5.49(m，2H)，3.41(t，J＝8.8Hz，1H)，3.33(s，3H)，2.22-2.18(m，1H)，2.00-1.96(m，1H)；MS ESI 380.2[M+H]+，计算值[C25H21N3O+H]+380.18。
(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的 合成
标题化合物以类似于实施例A4的手性合成方法，采用(1R，2S)-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(1.16g，3.06mmol)来制备。经由柱色谱(硅胶，CH2Cl2中的3-6％MeOH)纯化获得浅黄色固体状标题化合物(656mg，74％)；1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.06(br.s，1H)，8.05(s，1H)，7.64(d，1H，J＝7.6Hz)，7.36(s，1H)，7.14(t，J＝8.7Hz，1H)，6.97(d，J＝8.7Hz，1H)，6.87(d，J＝8.2Hz，1H)，6.62(t，J＝7.6Hz，1H)，5.91(d，J＝7.9Hz，1H)，3.46(t，J＝7.8Hz，1H)，3.34(s，3H)，2.26-2.23(m，1H)，2.08-2.04(m，1H)；MS ESI 290.1[M+H]+，计算值[C18H15N3O+H]+290.13。
(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200652
标题化合物以类似于实施例A10的手性合成方法，采用(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(930mg，3.21mmol)来制备。然后通过过滤用EtOAc沉淀和用EtOAc冲洗获得标题化合物(970mg，73％；＞98％ee)，其中主要对映体在2.4min洗脱出来(Phenomenex Lux 5μAmylose-2 150x4.6mm，2.5mL/min，以己烷中的20％EtOH等度洗脱0.5min，然后以己烷中的20-50％EtOH梯度洗脱2.5min，然后以50％等度洗脱1min)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为3.0min。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.96(br.s，1H)，7.43-7.39(m，2H)，7.16(t，J＝7.6Hz，1H)，7.05(d，J＝8.0Hz，1H)，6.89(d，J＝7.8Hz，1H)，6.66(t，J＝7.2Hz，1H)，5.91(d，J＝8.0Hz，1H)，3.47(t，J＝8.4Hz，1H)，3.35(s，3H)，2.30-2.26(m，1H)，2.08-2.04(m，1H)；MS ESI 416.0[M+H]+，计算值[C18H14IN3O+H]+416.03。旋光度：[α]23 D＝-210°(c0.4，MeOH)。
(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基-1′-甲基螺 [环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
标题化合物以类似于(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，采用(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1，2-二基二甲磺酸盐(1.44g，3.39mmol)和5-甲氧基-1-甲基吲哚啉-2-酮(0.601g，3.39mmol)来制备。采用Biotage Isolera(己烷中的1-50％EtOAc，SNAP 25g柱)纯化获得标题化合物(浅棕色固体，1.05g，76％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.03(s，1H)，7.67(d，J＝8.8Hz，1H)，7.50(s，1H)，7.26-7.23(m，3H)，7.11(d，J＝7.6Hz，2H)，6.95(d，J＝8.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.4Hz，1H)，6.67(d，J＝8.4Hz，1H)，5.63(d，J＝16.4Hz，1H)，5.58(d，J＝16.0Hz，1H)，5.41(s，1H)，3.37(t，J＝8.8Hz，1H)，3.15(s，3H)，2.23-2.19(m，1H)，2.18-2.14(m，1H)，-OCH3质子被甲醇峰掩盖。MS ESI 410.2[M+H]+，计算值[C26H23N3O2+H]+410.2。
(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200662
0℃下将叔丁醇钾溶液(1M，19.23mL，0.19mol)添加至(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(0.875g，2.1mmol)的无水THF(2.62mL)溶液中，混合物在相同温度下搅拌15min。然后在0℃下通过注射器将无水DMSO(1.97mL，27mmol)加入混合物中，继续搅拌5min。反应混合物用O2气清洗1.5hr。再在0℃搅拌15min后，反应混合物用25％aq.NH4Cl(20mL)终止反应。产物用EtOAc(40mLx2)萃取，合并的EtOAc层用水(10mL)洗涤，干燥(Na2SO4)，并在40℃/12毫巴下真空浓缩。所得的浅黄色残余物通过硅胶柱色谱采用己烷中的5-10％EtOAc纯化获得灰白色固体状标题化合物(445mg，65％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(s，1H)，7.67(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47(s，1H)，6.95-6.90(m，2H)，6.68(d，J＝8.8Hz，1H)，5.58(s，1H)，3.38(t，J＝8.4Hz，1H)，3.20(s，3H)，2.28(dd，J＝9.2，4.4Hz，1H)，2.06(dd，J＝8.4，4.8Hz，1H)，-OCH3质子并入甲醇峰。MS ESI 320.1[M+H]+，计算值[C19H17N3O2+H]+320.2。
(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基-1′-甲基螺[环丙烷 -1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200671
以类似于实施例A10的手性合成方法，采用(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(1.34g，4.19mmol)获得奶油色固体状标题化合物(1.71g，91％；98％ee)，其中主要(1R，2S)对映体在2.6min洗脱出来(Phenomenex Lux 5μAmylose-2150x4.6mm，2.5mL/min，以己烷中的20％EtOH等度洗脱0.5min，然后以己烷中的20-50％EtOH梯度洗脱2.5min然后以50％等度洗脱1min)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为3.25min。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.38(s，1H)，7.42(d，J＝8.4Hz，1H)，7.35(s，1H)，7.04(d，J＝8.8Hz，1H)，6.77(d，J＝8.4Hz，1H)，6.66(d，J＝8.4Hz，1H)，5.53(s，1H)，3.46(t，J＝8.0Hz，1H)，3.38(s，3H)，3.32(s，3H)，2.24(dd，J＝8.4，4.8Hz，1H)，2.04(dd，J＝12.4，4.8Hz，1H)；MS ESI 446.1[M+H]+，计算值[C19H16IN3O2+H]+446.0。旋光度：[α]22 D＝-134°(c 0.238，MeOH)。
(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺 [环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
Figure BPA00001624093200681
标题化合物通过类似于(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法，采用(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1，2-二基二甲磺酸盐(1.22g，2.87mmol)和1-(2-甲氧基乙基)吲哚啉-2-酮(550.0mg，2.87mmol)来制备。在Biotage Isolera(己烷中的0-60％EtOAc，SNAP 25g柱)上纯化获得浅棕色固体状标题化合物(774mg，64％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，7.60(d，J＝8.0Hz，1H)，7.29-7.27(m，3H)，7.19(s，1H)，7.14-7.09(m，3H)，6.98(d，J＝7.6Hz，1H)，6.92(d，J＝8.4Hz，1H)，6.54(t，J＝7.2Hz，1H)，5.75(d，J＝7.6Hz，1H)，5.60(t，J＝16.0Hz，1H)，5.51(d，J＝16.0Hz，1H)，4.08-4.03(m，1H)，4.00-3.95(m，1H)，3.69(t，J＝5.6Hz，2H)，3.43(t，J＝8.0Hz，1H)，3.38(s，3H)，2.24(dd，J＝9.2，4.8Hz，1H)，2.00(dd，J＝8.4，5.6Hz，1H)；MS ESI 424.2[M+H]+，计算值[C27H25N3O2+H]+424.2。
(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮的合成
0℃下将KOtBu的溶液(1M，11.97mL，11.9mmol)加入(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(390mg，0.92mmol)的无水THF(1.95mL)溶液中，且混合物在相同温度下搅拌15min。然后在0℃下通过注射器将无水DMSO(1.18mL，16.6mmol)一次性加入混合物中并继续搅拌5min。然后，反应混合物在0℃下用O2气清洗1.5h。再在0℃搅拌15min后，反应混合物用25％aq.NH4Cl(10mL)终止反应。采用EtOAc(20mLx2)萃取产物，且合并的EtOAc层用水(10mL)洗涤并经无水硫酸钠干燥，在40℃/125毫巴下真空浓缩。所得浅黄色残余物通过快速色谱在Biotage Isolera(采用己烷中的5-10％EtOAc，SNAP 25g柱)上纯化获得白色固体状标题化合物(205mg，67％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.08(s，1H)，7.65(d，J＝8.4Hz，1H)，7.42(s，1H)，7.12(t，J＝7.6Hz，1H)，7.00(t，J＝8.0Hz，2H)，6.60(t，J＝7.6Hz，1H)，5.90(d，J＝7.2Hz，1H)，4.10-3.97(m，2H)，3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，3.47(t，J＝8.4Hz，1H)，3.38(s，3H)，2.29(dd，J＝8.8，4.4Hz，1H)，2.08(dd，J＝6.8，4.4Hz，1H)；MS ESI 334.2[M+H]+，计算值[C20H19N3O2+H]+334.2。
(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷 -1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
标题化合物以类似于实施例A10的手性合成方法的方式采用(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(260mg，0.779mmol)来制备。采用己烷中的0-30％EtOAc，在带SNAP 25g柱的Biotage Isolera上纯化获得白色固体状标题化合物(235mg，66％；98％ee)，其中主要(1R，2S)对映体在2.6min洗脱出来(Phenomenex Lux 5μAmylose-2 150x4.6mm，2.5mL/min，以己烷中的20％EtOH等度洗脱0.5min，然后以己烷中的20-50％EtOH梯度洗脱2.5min，然后以50％等度洗脱1min)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为3.2min。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ10.39(s，1H)，7.40(d，J＝8.8Hz，1H)，7.34(s，1H)，7.14(t，J＝7.6Hz，1H)，7.06-7.01(m，2H)，6.63(t，J＝7.2Hz，1H)，5.87(d，J＝7.6Hz，1H)，4.14-3.97(bm，2H)，3.70(t，J＝5.6Hz，2H)，3.46(t，J＝7.6Hz，1H)，3.39(s，3H)，2.28-2.26(m，1H)，2.05-2.01(m，1H)；MS ESI 460.1[M+H]+，计算值[C20H18IN3O2+H]+460.0。旋光度：[α]22 D＝-239°(c 0.243，MeOH)。
本发明化合物的制备
实施例A1.(1R * ，2S * )-2-(1H-吲唑-5-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200701
0℃下向三甲基碘化亚砜(33mg，0.15mmol)的无水DMF(1mL)溶液中添加氢化钠(油中的60％分散体)(16mg，0.4mmol)。混合物搅拌15min，然后添加(E)-3-((1H-吲唑-5-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮(26mg，0.1mmol)。将溶液在室温下搅拌过夜。用饱和NH4Cl溶液(2mL)终止反应，用EtOAc(50mL)萃取，经MgSO4干燥并浓缩至干。通过制备型HPLC分离出白色固体状标题化合物(5mg，18％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ13.03(s，1H)，10.58(d，1H，J＝8.3Hz)，8.02(s，1H)，7.74(s，1H)，7.40(d，1H，J＝8.9Hz)，7.11(d，1H，J＝8.6Hz)，6.98(t，1H，J＝7.7Hz)，6.83(d，1H，J＝7.6Hz)，6.50(t，1H，J＝7.3Hz)，5.94(d，1H，7.5Hz)，3.17-3.13(m，1H)，2.27-2.23(m，1H)，1.98-1.95(m，1H)；MS ESI 276.1[M+H]+，计算值[C17H13N3O+H]+276.3。
实施例A2.(1R * ，2S * )-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200711
0℃下向三甲基碘化亚砜(264mg，1.2mmol)的无水DMF(40mL)溶液中添加氢化钠(油中的60％分散体)(140mg，3.48mmol)。混合物搅拌15min，然后添加(E)-3-((1H-吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮(151mg，0.58mmol)。将溶液在室温下搅拌过夜。用饱和NH4Cl溶液(10mL)终止反应，用EtOAc(4x50mL)萃取，经MgSO4干燥并浓缩至干。通过硅胶色谱(EtOAc/Hex 1∶1)分离米固体状的主要非对映体(44mg，28％)。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ13.01(s，1H)，10.61(d，1H J＝8.3Hz)，8.01(s，1H)，7.63(d，1H，J＝8.3Hz)，7.44(s，1H)，6.99(t，1H，J＝7.5Hz)，6.92(d，1H，J＝8.0Hz)，6.84(d，1H，J＝8.0Hz)，6.51(t，1H，J＝7.0Hz)，5.98(d，1H，8.0Hz)，3.20-3.17(m，1H)，2.30-2.26(m，1H)，2.00-1.95(m，1H)；MS ESI 276.1[M+H]+，计算值[C17H13N3O+H]+276.3。
实施例A3.(1S，2R)-2-(1H-吲唑-6-基)螺-[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′- 酮
Figure BPA00001624093200712
采用手性HPLC分离外消旋(1R*，2S*)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(25mg，实施例A2中制备)：Chiralpak 1A(3x15cm)，(30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，70mL/min)以获得白色固体(11.8mg)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15x0.46cm)，(40％甲醇(0.1％DEA)/CO2，3mL/min)98％e.e.，Rt＝2.7min
实施例A4.(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200721
HPLC拆分：
采用手性HPLC分离外消旋(1R*，2S*)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(25mg，实施例A2中制备)：Chiralpak 1A(3x15cm)，(30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，70mL/min)以获得白色固体(11.5mg)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15x0.46cm)，(40％甲醇(0.1％DEA)/CO2，3mL/min)97％e.e.，Rt＝5.2min)。
手性合成：
将(1R，2S)-2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺-[N-苄基-环丙烷-1，3-吲哚啉]-2’-酮(6.5g，最多14mmol；含有一些溶剂)于DMSO(20mL，286mmol)和THF(200mL)的混合物中的溶液在冰中冷却，然后添加KOtBu(10.0g，89mmol)。混合物迅速变黑。混合物用来自气球的氧气缓和清洗，缓慢升温至室温。5h后样品的NMR显示约30％的转化率，且如此使混合物在氧气球下(不清洗)搅拌过夜。没有进一步的转化发生，因此再添加KOtBu(20.0g，178mmol)。立即显示出氧的吸收，提示该大大过量的碱是有效脱保护所需的。再过5h后，将混合物倒入饱和NH4Cl水溶液(100mL)中。减压下去除大部分THF，且所得混合物用EtOAc(4x50mL)分次萃取。合并的有机部分用饱和的硫代硫酸钠水溶液(50mL)和盐水(50mL)洗涤，经Na2SO4干燥，过滤并浓缩。将残余物于CH2Cl2(100mL)中成浆并在抽吸下倒在短二氧化硅垫(2cm深x5cm直径)上。主要的副产物(1∶1EtOAc/环己烷中Rf为0.6，CH2Cl2中Rf为0.15)采用CH2Cl2(约1L)洗脱。产物(1∶1EtOAc/环己烷中Rf为0.25)采用2％然后5％的MeOH/EtOAc洗脱。因为产物严重“移动(streaked)”，杂质与产物共洗脱出来。浓缩含产物级分获得浅棕色固体状标题化合物(2.5g，64％)，其被第二含环丙烷化合物污染(＜10％；可能是单苄基化化合物)。HPLC显示光学纯度为94％e.e.(尽管怀疑存在共洗脱杂质)，其中主要(1R，2S)对映体在14.3min洗脱出来(Daicel Chiralpak AS-H(250x4.6mm)；以正庚烷中的40％EtOH等度洗脱，1mL/min；35℃；检测：254，230，210nm)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为9.9min。分析数据与实施例A2中得到的一致。
实施例A5.(1R * ，2R * )-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200731
将来自实施例A2的反应物的次要非对映体分离为米色固体(3.5mg，2％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ12.97(s，1H)，10.33(d，1H J＝8.3Hz)，7.99(s，1H)，7.59(d，1H，J＝8.2Hz)，7.41(s，1H)，7.18-7.12(m，2H)，6.99-6.94(m，2H)，6.86(d，1H，J＝7.8Hz)，3.32(t，1H，J＝8.3Hz)，2.27-2.23(m，1H)，2.18-2.15(m，1H)；MS ESI 276.1[M+H]+，计算值[C17H13N3O+H]+276.3。
实施例A6.(1R * ，2S * )-和(1R * ，2R * )-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′- 甲氧基螺-[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200741
0℃下向NaH(380mg，9.5mmol)的DMF(8mL)溶液中添加三甲基碘化亚砜(694mg，3.15mmol)。所得混合物在室温下搅拌30min，然后添加DMF(2mL)中的(E/Z)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(658mg，1.6mmol，E/Z比84∶16)。反应混合物在室温下搅拌18h。将反应物冷却至0℃并用饱和NH4Cl终止。混合物用EtOAc萃取，且合并的萃取物用盐水洗涤，经MgSO4干燥并浓缩以获得黄色粘性油。粗产物通过硅胶色谱(95∶5CH2Cl2/MeOH)纯化以获得黄色固体，其随后用己烷和EtOAc的1∶1混合物研磨，以获得白色粉末状标题化合物(471mg，69％)。获得非对映体混合物(通过NMR确定为7∶1)。在重复操作中，非对映体的比例在6∶1至10∶1之间变化，以利于1R*，2S*非对映体。该物质无需进一步纯化作为后续反应的中间体使用。或者该物质从甲醇中重结晶以生成标题化合物，其为有利于1R*，2S*非对映体的12∶1混合物。主要异构体的分析数据：1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ13.48(s，1H)，10.43(s，1H)，7.49(s，1H)，7.33(d，J＝8.4Hz，1H)，7.02(d，J＝8.4Hz，1H)，6.74(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(dd，J＝8.4Hz，J＝2.4Hz，1H)，5.62(d，J＝2.4Hz，1H)，3.29(s，3H)，3.18(t，J＝8.2Hz，1H)，2.34(dd，J＝7.8Hz，J＝4.6Hz，1H)，1.98(dd，J＝9.2Hz，J＝4.8Hz，1H)；MS ESI 432.1[M+H]+，计算值[C18H14IN3O2+H]+432.0。
实施例A7.(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙 烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200751
HPLC拆分：
采用手性HPLC分离外消旋(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(15g，实施例A6中制备)：Chiralcel OJ-H(3x15cm)，(30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，75mL/min)以获得白色固体(6.75g)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15x0.46cm)，(40％异丙醇(0.1％DEA)/CO2，3mL/min)99％e.e.，Rt＝2.1min).
手性合成：
A.(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物以类似于(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的方法的方式采用(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1，2-二基二甲磺酸盐(3.35g，7.90mmol)和1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(2.00g，7.90mmol)来制备。粗产物通过硅胶色谱(15-40％EtOAc于己烷中)纯化，然后通过研磨(EtOAc)以获得白色固体状标题化合物(1.97g，52％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ8.01(s，1H)，7.64(d，J＝8.2Hz，1H)，7.36-7.23(m，10H)，7.14(d，J＝7.2Hz，2H)，6.94(d，J＝8.3Hz，1H)，6.63(d，J＝8.3Hz，1H)，6.53(d，J＝8.4Hz，1H)，5.61(d，J＝15.1Hz，1H)，5.54(d，J＝15.4Hz，1H)，5.37(s，1H)，5.07(d，J＝15.4Hz，1H)，4.95(d，J＝15.7Hz，1H)，3.51(t，J＝8.1Hz，1H)，3.18(s，3H)，2.32-2.29(m，1H)，2.09-2.00(m，1H).MS ESI486.3[M+H]+，计算值[C32H27N3O2+H]+486.2。
B.(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物以类似于实施例A4的手性合成方法的方式采用(1R，2S)-1′-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(1.0g，2.1mmol)来制备。通过柱色谱(硅胶，己烷中的30-80％EtOAc)纯化获得白色固体状标题化合物(0.50g，80％)。1HNMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.02(br s，1H)，10.42(br s，1H)，8.02(s，1H)，7.64(d，J＝8.3Hz，1H)，7.45(s，1H)，6.94(d，J＝7.8Hz，1H)，6.73(d，J＝8.2Hz，1H)，6.55(d，J＝8.6Hz，1H)，5.62(s，1H)，3.20(s，3H)，3.18(t，J＝8.7Hz，1H)，2.34-2.28(m，1H)，1.98-1.95(m 1H).MS ESI306.1[M+H]+，计算值[C18H15N3O2+H]+306.12。旋光度：[α]23 D＝-225°(c 0.441，MeOH)。
C.(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物以类似于实施例A10的手性合成方法的方式，采用(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(0.40g，1.3mmol)来制备。粗产物用EtOAc(5mL)研磨以产生白色固体状标题化合物(0.52g，93％，＞98％e.e.)，其中主要(1R，2S)对映体在8.5min洗脱出来(Phenomenex Lux 5μCellulose-2(150x4.6mm)；1.0mL/min；以正己烷中的10％iPrOH等度洗脱1.0min，然后以正己烷中的10-90％iPrOH梯度洗脱10min，然后以正己烷中的90％iPrOH等度洗脱2.0min；1.0mL/min；24℃；检测：254nm)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为6.2min。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.48(br s，1H)，10.43(br s，1H)，7.49(s，1H)，7.31(d，J＝8.6Hz，1H)，7.02(d，J＝8.1Hz，1H)，6.73(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(d，J＝8.6Hz，1H)，5.62(s，1H)，3.29(s，3H)，3.19(t，J＝8.4Hz，1H)，2.36-2.32(m，1H)，1.99-1.96(m 1H).MS ESI 432.1[M+H]+，计算值[C18H14IN3O2+H]+432.0。旋光度：[α]22 D＝-143°(c 0.399，MeOH)。
实施例A8.(1S，2R)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙 烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
采用手性HPLC分离外消旋(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(15g，实施例A6中制备)：Chiralcel OJ-H(3x15cm)，(30％甲醇(0.1％DEA)/CO2，75mL/min)以获得白色固体(6.6g).
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15x0.46cm)，(40％异丙醇(0.1％DEA)/CO2，3mL/min)99％e.e.，Rt＝3.4min)。
实施例A9.(1R * ，2S * )-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲 哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200772
A.(1R*，2S*)-和(1R*，2R*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
该化合物不经进一步纯化用作中间体，或纯的非对映体通过以下过程获得。室温下将氢化钠(309.9mg，7.75mmol)(油中的60％分散体)加入无水DMF(2.5mL)。然后在相同温度下将三甲基碘化亚砜(568.4mg，2.58mmol)加入悬浮液中。将混合物搅拌15min，然后添加(E/Z)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-吲哚啉-2-酮(500mg，1.29mmol)的DMF(2.0ml)溶液。该溶液在55℃下搅拌5h，然后在室温下用甲醇溶液(1mL)终止反应15min，然后添加水(50mL)。产物用乙酸乙酯(2x50mL)萃取，经无水Na2SO4干燥并浓缩至干。将固体悬浮于甲苯(21mL)中并收集以获得标题化合物(331mg，64％)，其为有利于R*，S*对映体的9∶1混合物。该白色固体不经进一步纯化作为后续反应的中间体使用。1H NMR(400MHz，d6-DMSO)δ13.47(s，0.9H)，13.41(s，0.1H)，10.62(s，0.9H)，10.35(s，0.1H)，7.47(s，0.9H)，7.43(s，0.1H)，7.30(d，J＝8.0Hz，0.9H)，7.26(d，J＝8.0Hz，0.1H)，7.23(m，0.1H)，7.15(m，0.3H)，7.05-6.98(m，2H)，6.85(m，1H)，6.53(t，J＝7.6Hz，0.9H)，5.97(d，J＝7.6Hz，0.9H)，3.33(m，0.1H，被水信号部分弱化)，3.18(t，J＝8.4Hz，0.9H)，2.31(dd，J＝7.2，4.8Hz，0.9H)，2.26(m 0.1H)，2.16(dd，J＝8.8，4.0Hz，0.1H)，1.98(dd，J＝8.8，4.8Hz，0.9H)。
B.(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
在55℃下用THF(1mL)处理上述获得的非对映体混合物(100mg)15min，然后冷却至室温30min。通过过滤收集灰白色固体以获得标题化合物(32mg，32％).1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.47(s，1H)，10.62(s，1H)，7.47(s，1H)，7.30(d，J＝8.0Hz，1H)，7.02-6.98(m，2H)，6.84(d，J＝7.6Hz，1H)，6.53(t，J＝7.6Hz，1H)，5.97(d，J＝7.6Hz，1H)，3.18(t，J＝8.4Hz，1H)，2.31(dd，J＝7.2Hz，J＝4.8Hz，1H)，1.98(dd，J＝8.8Hz，J＝4.8Hz，1H)；MS ESI 402.0[M+H]+，计算值[C17H12IN3O+H]+402.0。
实施例A10.(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲 哚啉]-2′-酮
HPLC拆分：
采用手性HPLC分离外消旋(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(35mg，实施例A9中制备)：LuxCellulose AXIA(150x21.2mm)，(以10％异丙醇/己烷至90％异丙醇/己烷梯度洗脱，20mL/min)以获得白色固体(8.8mg).
分析型HPLC：Lux Cellulose AXIA(150x4.6mm)，以10％异丙醇/己烷至90％异丙醇/己烷梯度洗脱，1mL/min)98％e.e.，Rt＝7.8min)。
手性合成：
(1R，2S)-2-(1H-吲唑-6-基)螺-[环丙烷-1，3-吲哚啉]-2’-酮(2.20g，8.0mmol，约94％ee)和K2CO3(2.21g，16.0mmol)于无水DMF(20mL)中的混合物用I2(3.45g，13.6mmol)的无水DMF(15mL)溶液处理，后者通过注射器泵在45min内加入。混合物搅拌1.5h，然后倒入水(400mL)和饱和Na2S2O3水溶液的混合物中。所得混合物在超声浴中粉碎30min以打碎粘性的固体块，然后过滤。所述固体用水(2x50mL)洗涤，在抽吸下部分干燥，然后用丙酮汽提两次以去除残余的水。粗混合物的HPLC显示光学纯度为95％e.e.，其中主要(1R，2S)对映体在14.1min洗脱出来(Daicel Chiralpak AS-H(250x4.6mm)；以正庚烷中的40％EtOH等度洗脱，1mL/min；35℃；检测：254，230，210nm)。由外消旋参考标准得知，采用该方法，(1S，2R)对映体的保留时间为8.4min，且主要非对映体产物的两个对映体也在6.0min和6.9min被检测到。将产物的EtOAc溶液通过短的二氧化硅垫(2cm深x4cm直径)来去除基线物质，再用EtOAc洗脱。然后通过研磨尝试进一步纯化。Et2O和甲苯去除了一些杂质，但没有观察到光学纯度的增加。从THF/环己烷和EtOAc/环己烷中重结晶也未成功，因此该物质通过硅胶(20cm深x4cm直径)上的柱色谱采用1∶1EtOAc/环己烷纯化以获得灰白色粉末状标题化合物(1.47g，46％)。分析数据与实施例A9得到的一致。
实施例A11.(1S，2R)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′- 酮
Figure BPA00001624093200791
采用手性HPLC分离外消旋(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(35mg，实施例A9中制备)：LuxCellulose AXIA(150x21.2mm)，(以10％异丙醇/己烷至90％异丙醇/己烷梯度洗脱，20mL/min)以获得白色固体(7.7mg)。
分析型HPLC：Lux Cellulose AXIA(150x4.6mm)，(以10％异丙醇/己烷至90％异丙醇/己烷梯度洗脱，1mL/min)98％e.e.，Rt＝6.7min)。
实施例A23.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200801
A.(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A22的方法，方法1A，采用N，N-二甲基-1-(4-乙烯基苯基)甲胺(80mg，0.15mmol)来合成。标题化合物通过硅胶色谱(3∶1CH2Cl2/MeOH)分离以获得米色固体状标题化合物(38mg，45％)。MS ESI 565.4[M+H]+，计算值[C34H40N4O2SiH]+565.7。
B.(1R*，2S*)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A22的方法，方法1B，采用(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基甲硅烷基)-乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(38mg，0.052mmol)来合成。粗的反应混合物减压浓缩至干，通过反相制备型HPLC纯化以获得白色固体状标题化合物，其为TFA盐(11mg，31％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，7.78(d，2H，J＝8.3Hz)，7.56-7.48(m，5H)，7.08-7.04(m，2H)，6.94(d，1H，J＝8.3Hz)，6.59(t，1H，J＝7.8Hz)，6.00(d，1H，J＝8.0Hz)，4.38(s，2H)3.39-3.33(m，1H)，2.90(s，6H)，2.28-2.22(m，1H)，2.22-2.17(m，1H)；MS ESI 435.2[M+H]+，计算值[C28H26N4O+H]+435.5。
实施例A24.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
向(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(20mg，0.05mmol)于DMF(0.4mL)和水(0.1mL)中的溶液中添加(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(25mg，0.08mmol)、氟化钾(6mg，0.1mmol)和Pd(PPh3)4(3mg，0.002mmol)。微波辐射下将混合物加热至120℃保持2h。添加乙酸乙酯(50mL)并且溶液用水(2x5mL)、盐水(5mL)洗涤且经MgSO4干燥。通过反相制备型HPLC纯化获得黄色固体状标题化合物(12mg，44％)。
实施例A25.(1S，2R)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200812
向(1S，2R)-2-(3-碘代-1H-吲唑-螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(20mg，0.05mmol)于DMF(0.4mL)和水(0.1mL)中的溶液中添加(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(25mg，0.08mmol)、氟化钾(6mg，0.1mmol)和Pd(PPh3)4(3mg，0.002mmol)。微波辐射下将混合物加热至120℃保持2h。添加乙酸乙酯(50mL)并且溶液用水(2x5mL)、盐水(5mL)洗涤并经MgSO4干燥。通过反相制备型HPLC纯化获得黄色固体状标题化合物(4mg，15％)。
实施例A26.(1R * ，2R * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200821
在实施例A23的更大规模制备期间(以浅黄色固体获得，63mg)，通过反相制备型HPLC获得白色固体状的相应次要非对映体，即标题化合物(4.6mg)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 8.00(d，1H，J＝8.0Hz)，7.77(d，2H，J＝8.4Hz)，7.56-7.50(m，5H)，7.23(t，1H，J＝7.6Hz)，7.16-7.05(m，3H)，6.96(d，1H，J＝7.6Hz)，4.33(s，2H)3.44-3.38(m，1H)，2.88(s，6H)，2.43-2.40(m，1H)，2.25-2.23(m，1H)；MS ESI435.2[M+H]+，计算值[C28H26N4O+H]+435.5。
实施例A34.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200831
A，将DMF(3mL)加入NaH(60％，85.2mg，2.1mmol)和三甲基碘化亚砜(131.5mg，0.60mmol)的混合物中。所得混合物在室温下搅拌10min，然后添加(E)-3-((3-(4-((二甲基氨基)甲基)-苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮2，2，2-三氟乙酸盐(163mg，0.29mmol)的DMF(6mL，分开用于转移和小瓶冲洗)溶液。室温下搅拌24h后反应混合物未完全反应。混合物在55℃下加热1h，但仍未完全。冷却至室温后，添加NaH(60％，44mg，1.1mmol)和三甲基碘化亚砜(69.5mg，0.31mmol)，混合物在55℃加热1h，然后通过添加水(25mL)和盐水(25mL)终止反应。混合物用EtOAc(300mL)萃取，有机层用盐水(2x25mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩。粗产物通过硅胶色谱(5-7.5％2M NH3-MeOH于DCM中)纯化以获得黄色固体状标题化合物(42.8mg，32％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δppm13.11(s，1H)，10.43(s，1H)，8.07(d，J＝8.8Hz，1H)，7.64(d，J＝7.6Hz，2H)，7.47(m，3H)，7.29(d，J＝8.0Hz，2H)，7.03(d，J＝8.8Hz，1H)，6.74(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(dd，J＝8.4，2.4Hz，1H)，5.65(d，J＝2.4Hz，1H)，3.38(s，2H)，3.28(s，3H)，3.20(t，J＝7.6Hz，1H)，2.34(m，1H)，2.14(s，6H)，1.99(m，1H)；MS ESI[M+H]+465.2，计算值[C29H28N4O2+H]+465.2。
B.较大规模，TFA盐：分三次将NaH(60％，491mg，12.29mmol)添加至三甲基碘化亚砜(959.3mg，4.36mmol)于DMF(12mL)中的冰冷混合物中。所得混合物在0℃下搅拌10min，然后添加(E)-3-((3-(4-((二甲基氨基)甲基)-苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-5-甲氧基吲哚-2-酮盐酸盐(984.4mg，2.02mmol)，为于DMF(12mL，分开用于转移和小瓶冲洗)中的悬浮液。10min内将反应混合物升温至室温，然后在55℃加热17h，然后通过添加水(25mL)和盐水(25mL)来终止反应。混合物用～1∶1Et2O/DCM(250mL，提到的乳液)萃取，然后用DCM(2x50mL)萃取，有机层用盐水(25mL)洗涤，经Na2SO4干燥并真空浓缩，通过硅胶色谱(2-8％2M NH3-MeOH于DCM中)纯化。通过制备型HPLC进一步纯化以获得作为TFA盐的主要非对映体(黄色固体，168.4mg，18％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，7.78(d，J＝7.5Hz，2H)，7.37-7.65(m，5H)，7.07(d，J＝8.5Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.62(d，J＝8.3Hz，1H)，5.59(br.s.，1H)，4.33(s，2H)，3.37(m，1H)，3.27(s，3H)，2.89(s，6H)，2.26(m，1H)，2.19(m，1H)；MS ESI[M+H]+465.3，计算值[C29H28N4O2+H]+465.2。
实施例A35.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮盐酸盐
标题化合物以类似于实施例A51B的方式采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(251.3mg，0.58mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(191.5mg，0.67mmol)来制备。产物用EtOAc(40mL)以Varian 3mL ChemElut滤筒萃取。真空去除溶剂后，通过在Biotage(二氧化硅，SNAP-25g，5-20％MeOH于DCM中)上的色谱纯化标题化合物。用1∶1Et2O/DCM研磨生成标题化合物(92.1mg，34％)。以逐滴方式将HCl(1M于Et2O中，0.25mL，0.25mmol)添加至游离碱(92mg，0.20mmol)于THF(10mL)中的冰冷溶液中，使所得混合物在冰中搅拌40分钟，然后将Et2O(10mL)添加至混合物中。真空过滤生成作为盐酸盐的标题化合物(橙红色固体，79mg，79％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δppm 8.05(d，J＝8.5Hz，1H)，7.77(d，J＝8.0Hz，2H)，7.48-7.63(m，5H)，7.09(d，J＝8.3Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.3，2.3Hz，1H)，5.61(d，J＝2.3Hz，1H)，4.36(s，2H)，3.35(m，1H)，3.28(s，3H)，2.89(s，6H)，2.26(dd，J＝7.7，5.1Hz，1H)，2.18(dd，J＝8.8，4.8Hz，1H)；MS ESI[M+H]+465.3，计算值[C29H28N4O2+H]+465.2。旋光度：[α]24 D＝-70°(c 0.445，MeOH)。
实施例A36.(1S，2R)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093200851
标题化合物根据实施例A51B的方法，通过采用(1S，2R)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(40mg，0.092mmol)和(E)-N，N-二甲基-1(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)甲胺(33.3mg，0.115mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化以获得乳膏状固体的标题化合物(22mg，39％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.4Hz，1H)，7.75(d，J＝7.6Hz，2H)，7.54-7.49(m，5H)，7.04(d，J＝8.4Hz，1H)，6.83(d，J＝8.4Hz，1H)，6.60(d，J＝8.4Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.33(s，2H)，3.37(t，J＝8.4Hz，1H)，3.26(s，3H)，2.88(s，6H)，2.25-2.23(m，1H)，2.20-2.21(m，1H)；MS ESI 465.3[M+H]+，计算值[C29H28N4O2+H]+465.2.旋光度：[α]23 D＝85°(c 0.542，甲醇)。
实施例A40.(1R * ，2S * )-5′-氟代-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙 烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093200861
室温下将三甲基碘化亚砜(173.8mg，0.789mmol)加入氢化钠(94.76mg，4.12mmol)(油中的60％分散体)于THF(4.0mL)中的悬浮液。将混合物搅拌15min，然后添加(z)-5-氟代-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮(160mg，0.394mmol)的THF(2.4mL)溶液。将溶液在50℃搅拌7h，然后在室温下在10％NH4Cl溶液(15mL)中终止反应物。产物采用乙酸乙酯(15mLx2)萃取，有机层经Na2SO4干燥并真空蒸发。用己烷(5mL)研磨获得乳膏状固体的标题化合物(89mg，54％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ13.50(s，1H)，10.65(s，1H)，7.50(s，1H)，7.31(d，1H，J＝8.4Hz)，7.00(d，1H，J＝8.4Hz)，6.85-6.81(m，2H)，5.81(d，1H，J＝8.4Hz)，3.22(m，1H)，2.43(m，1H)，2.01(m，1H)；MS ESI 420.0[M+H]+，计算值[C17H11FIN3O+H]+420.0。
实施例A41.(1R * ，2S * )-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200862
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A45的方法合成，除了用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(30mg，0.070mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(30mg，0.091mmol)替换。通过柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH，95∶5至94∶6)纯化获得粗物质，其通过LC-MS测得的纯度为85％。该物质通过制备型HPLC进一步纯化以获得白色固体(18mg，51％)；光谱数据与实施例A42B获得的相同。
实施例A42.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮盐酸盐
Figure BPA00001624093200871
A.(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉
Figure BPA00001624093200872
微波炉干燥的圆底烧瓶在N2(g)下冷却，然后加入4-(4-乙炔基苄基)吗啉(120mg，0.596mmol)、甲苯(2.5mL)和4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.43mL，2.98mmol)。混合物搅拌15min，同时用N2(g).吹扫溶液。然后添加HRuCl(CO)(PPh3)3(29mg，0.030mmol)，并将反应物加热至50℃保持18h。用NaHCO3(饱和)(10mL)终止反应，用EtOAc萃取，且有机层用盐水(2X)洗涤，并经MgSO4干燥。去除溶剂，且所得残余物通过柱色谱(硅胶，己烷/EtOAc，2∶3至1∶2)纯化以获得白色固体(155mg，79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.44(d，2H，J＝8.0Hz)，7.38(d，1H，J＝18.8Hz)，7.30(m，2H)，6.15(d，1H，J＝18.5Hz)，3.72(bs，4H)，3.49(bs，2H)，2.45(bs，4H)，1.31(s，12H)；MSESI 330.1[M+H]+，计算值[C19H28BNO3+H]+330.22。
B.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮盐酸盐
Figure BPA00001624093200881
在圆底烧瓶中加入(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(255mg，0.592mmol)、(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(260mg，0.710mmol)、LiCl(75mg，1.78mmol)、二噁烷(6.0mL)和Na2CO3(3.0mL的1M水溶液)。混合物用Ar(g)气球吹扫15min，然后添加Pd(PPh3)4(21mg，0.0178mmol)并将反应物加热至100℃保持18h。将反应物冷却，添加EtOAc和NaHCO3(饱和)，并将混合物转移至分液漏斗中。有机层用NaHCO3(饱和)、盐水洗涤，然后经MgSO4干燥。去除溶剂，残余物通过柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH，9∶1)纯化以获得固体，其用Et2O超声处理并过滤获得183mg，61％的白色固体。HCl盐通过将游离碱(183mg，0.361mmol)溶于THF(2mL)中，然后添加HCl(0.72mL的1M Et2O溶液)来制备。立即形成沉淀，其用Et2O(10mL)进一步沉淀。快速过滤所述固体并用Et2O洗涤，以在干燥后获得灰白色固体(153mg，78％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.04(d，1H，J＝8.4Hz)，7.78(d，2H，J＝8.2Hz)，7.57-7.50(m，5H)，7.07(d，1H，J＝8.6Hz)，6.83(d，1H，J＝8.5Hz)，6.61(dd，1H，J1＝8.5Hz，J2＝2.2Hz)，5.58(d，1H，J＝2.2Hz)，4.39(s，2H)，4.09-4.04(m，2H)，3.78-3.72(m，2H)，3.43-3.33(m，3H)，3.27-3.20(m，5H)，2.27-2.23(m，1H)，2.21-2.16(m，1H)；MS ESI 507.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O3+H]+507.24。
实施例A51.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(2-吗啉代乙基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐 的合成
Figure BPA00001624093200891
A.(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯乙基)吗啉
向20mL微波小瓶中的4-(4-溴苯乙基)吗啉(731mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)和甲苯(10mL)混合物添加Et3N(0.76mL，5.4mmol，2eq.)，然后添加Pd(PtBu3)2(14mg，0.027mmol，1mol％)。所得混合物用氩气吹扫，加盖并在80℃(油温)下加热2h。冷却至室温后，用饱和NaHCO3(10mL)、H2O(10mL)终止反应，用EtOAc(30mLx2)萃取并干燥(Na2SO4)。蒸发溶剂后，残余物通过Biotage柱体系(EtOAc己烷，梯度：0-100％)纯化以获得白色固体状(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯乙基)吗啉(714mg，77％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.42(d，J＝8.0Hz，2H)，7.38(d，J＝19.0Hz，1H)，7.19(d，J＝7.8Hz，2H)，6.13(d，J＝18.3Hz，1H)，3.75(t，J＝4.4Hz，4H)，2.84-2.77(m，2H)，2.63-2.56(m，2H)，2.53(br，假s，4H)，1.32(s，12H)。
B.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(2-吗啉代乙基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮的合成
向20mL微波小瓶中的(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯乙基)吗啉(138mg，0.4mmol)于PhCH3/EtOH(8mL/4mL)中的混合物中添加1M Na2CO3(0.8mL，0.8mmol)，然后添加Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol，5mol％)。所得混合物用氩气吹扫，然后在125℃下微波处理2h。冷却至室温后，混合物用H2O(20mL)稀释，用EtOAc(30mLx2)萃取并干燥(Na2SO4)。去除溶剂后，将残余物再溶于DMF(4mL)中并通过制备型HPLC纯化以获得浅黄色固体状标题化合物(TFA盐，115mg，45％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.53(d，J＝7.2Hz，2H)，7.43(s，1H)，7.37(d，J＝6.4Hz，2H)，7.28(d，J＝7.2Hz，2H)，6.95(d，J＝7.6Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(d，J＝7.6Hz，1H)，5.57(s，1H)，4.06(d，J＝11.2Hz，2H)，3.80(t，J＝11.2Hz，2H)，3.56(d，J＝11.2Hz，2H)，3.38(t，J＝7.6Hz，2H)，3.27-3.12(m，5H)，3.07(t，2H)，2.20-2.10(m，2H)；MS ESI 521.4[M+H]+，计算值[C32H32N4O3+H]+521.2。
实施例A54.4-((E)-2-(6-((1R * ，2S * )-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚 啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯基腈
Figure BPA00001624093200901
A.6-甲酰基-1H-吲唑-3-腈
向3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(3g，10.8mmol)的DMF(25mL)溶液中添加氰化铜(1.9g，21mmol)。溶液通过在185℃下微波辐射处理10min。添加水(100mL)并收集白色沉淀。将沉淀溶于EtOAc(250mL)中，用水(2x25mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩以获得白色固体状标题化合物(1.1g，73％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ14.92(bs，1H)，10.17(s，1H)，8.39(s，1H)，8.06(d，J＝8.3Hz，1H)，7.83(d，J＝8.5Hz，1H)。
B.(E)-6-((2-吲哚酮-3-亚基)甲基)-1H-吲唑-3-腈
向6-甲酰基-1H-吲唑-3-腈(1.10g，6.4mmol)和2-吲哚酮(871mg，6.5mmol)于EtOH(25mL)中的混合物添加哌啶(0.1mL，1mmol)。所得混合物回流(油温75℃)90min，然后冷却至室温。所得沉淀通过吸滤收集并干燥以获得橙色固体状标题化合物(1.5g，82％)。1H NMR(400MHz，DMSO-d6)δ14.6(s，1H)，10.66(s，1H)，8.09(s，1H)，8.01(d，J＝8.5Hz，1H)7.78(s，1H)，7.67(d，J＝8.5Hz，1H)，7.48(d，1H，J＝7.8Hz)，7.24(t，J＝7.6Hz，1H)，6.88(d，J＝7.8Hz，1H)，6.83(t，J＝7.8Hz，1H)。
C.6-((1R*，2S*)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-腈
标题化合物按照实施例A1的方法，采用(E)-6-((2-氧代吲哚啉-3-亚基)甲基)-1H-吲唑-3-腈(1.5g，5.2mmol)来合成，以获得黄色固体状标题化合物(1.3g，83％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.73(d，J＝8.3Hz，1H)，7.61(s，1H)，7.18(d，J＝8.5Hz，1H)7.08-7.04(m，1H)，6.94(d，J＝8.0Hz，1H)，6.58(t，J＝7.6Hz，1H)，5.93(d，J＝7.8Hz，1H)，3.38-3.34(m，1H)，2.27-2.18(m，1H)。
D.6-((1R*，2S*)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-甲醛
向6-((1R*，2S*)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-腈(1g，3.3mmol)于吡啶(30mL)中的溶液添加醋酸(8mL)和水(8mL)及雷尼镍(1g)。将次磷酸钠(1.8g，21mmol)溶于水(10mL)中并逐滴添加，将反应物搅拌过夜。将产物萃取入乙酸乙酯(300mL)中，用盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩至干。残余物通过硅胶色谱(95∶5CH2Cl2/MeOH)纯化以获得黄色固体状标题化合物(300mg，30％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ10.17(s，1H)，8.10(d，J＝8.3Hz，1H)，7.55(s，1H)，7.17(d，J＝8.5Hz，1H)7.08-7.04(m，1H)，6.94(d，J＝8.3Hz，1H)，6.56(t，J＝7.6Hz，1H)，5.93(d，J＝7.5Hz，1H)，3.38-3.34(m，1H)，2.27-2.17(m，1H)。
E.4-((E)-2-(6-((1R*，2S*)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯腈
0℃下将4-氰基苄基膦酸二乙酯(600mg，2.4mmol)溶于DMF(5mL)中。添加叔丁醇钾(540mg，4.8mmol)，并将混合物搅拌5min。将化合物A54D(200mg，0.66mmol)溶于DMF(5mL)中并逐滴添加至该溶液中，将混合物搅拌90min。用HCl(0.1N)终止反应并收集所得沉淀。将沉淀溶于EtOAc(100mL)中并用H2O(2x10mL)、盐水(10mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩至干。残余物通过硅胶色谱纯化以获得白色固体状标题化合物(100mg，38％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.04(d，J＝8.5Hz，1H)，7.82(d，J＝8.6Hz，2H)，7.74(d，J＝8.6Hz，2H)，7.66-7.53(m，2H)，7.48(s，1H)，7.08-7.04(m，2H)，6.94(d，J＝8.3Hz，1H)，6.59(t，J＝7.6Hz，1H)，5.99(d，J＝7.5Hz，1H)，3.38-3.34(m，1H)，2.27-2.18(m，2H)；MS ESI 403.1[M+H]+，计算值[C26H18N4O+H]+403.1。
实施例A55.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H- 吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200921
A.4-((E)-2-(6-((1R*，2S*)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯甲醛
标题化合物按照实施例A54D的方法合成，除了用4-((E)-2-(6-((1R*，2S*)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯甲腈(100mg，0.25mmol)替换。通过硅胶色谱(99∶1CH2Cl2/MeOH)纯化获得橙色固体状标题化合物(95mg，94％)。MSESI 406.2[M+H]+，计算值[C26H19N3O2+H]+406.2。
B.(1R*，2S*)-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
向实施例A55A(40mg，0.1mmol)的THF(3mL)溶液中添加吗啉(43mg，0.5mmol)和异丙氧基钛(57mg，0.2mmol)，将反应物搅拌30min。添加硼氢化钠(13mg，0.2mmol)，将混合物加热至50℃过夜。用水(2mL)终止反应，并用乙酸乙酯(25mL)萃取，经MgSO4干燥并浓缩至干。残余物通过反相制备型HPLC纯化以获得标题化合物，为TFA盐(5mg，9％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.5Hz，1H)，7.78(d，J＝8.6Hz，2H)，7.75-7.48(m，5H)，7.08-7.05(m，2H)，6.94(d，J＝8.3Hz，1H)，6.59(t，J＝7.6Hz，1H)，5.99(d，J＝7.5Hz，1H)4.39(s，2H)4.12-4.04(m，2H)，3.79-3.68(m，2H)3.44-3.34(m，3H)，3.30-3.19(m，2H)2.28-2.16(m，2H)；MS ESI 477.3[M+H]+，计算值[C30H28N4O2+H]+477.2。
实施例A56.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H-吲 唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200931
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(150mg，0.37mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(160mg，0.48mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(122mg，58％)。[α]23.8° D＝-79°(c 0.33，甲醇)。光谱数据与实施例A55中获得的相同。
实施例A57.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A55，方法B的方法合成，除了用哌啶(43mg，0.5mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(8mg，28％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.8Hz，1H)，7.77(d，J＝8.6Hz，2H)，7.75-7.48(m，5H)，7.08-7.05(m，2H)，6.94(d，J＝7.5Hz，1H)，6.59(t，J＝7.7Hz，1H)，5.99(d，J＝7.3Hz，1H)4.31(s，2H)3.53-3.45(m，2H)，3.39-3.34(m，1H)，3.04-2.93(m，2H)2.27-2.17(m，2H)，2.02-1.95(m，2H)，1.88-1.71(m，3H)，1.57-1.45(m，1H)；MS ESI 475.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O+H]+475.2。
实施例A58.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H- 吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(50mg，0.12mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(59mg，0.18mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(13mg，20％).[α]23.6° D＝-109°(c 0.35，甲醇)。光谱数据与实施例A57中获得的相同。
实施例A59.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200951
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(59mg，0.18mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(17mg，23％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，7.75(d，J＝8.6Hz，2H)，7.53-7.49(m，5H)，7.05(d，J＝8.5Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.4，2.3Hz，1H)，5.58(d，J＝2.3Hz，1H)4.30(s，2H)，3.52-3.44(m，2H)，3.38-3.34(m，1H)，3.26(s，3H)，3.01-2.93(m，2H)，2.26-2.17(m，4H)，2.00-1.91(m，2H)，1.89-1.67(m，3H)，1.58-1.46(m，1H)；MS ESI 505.3[M+H]+，计算值[C32H32N4O2+H]+505.3.[α]22.6° D＝-69°(c 0.29，甲醇)。
实施例A60.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200952
标题化合物根据实施例A55的方法合成，除了用吡咯烷(71mg，0.86mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(34mg，35％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.6Hz，1H)，7.76(d，J＝8.6Hz，2H)，7.55-7.48(m，5H)，7.08-7.05(m，2H)，6.94(d，J＝7.8Hz，1H)，6.59(t，J＝7.5Hz，1H)，5.99(d，J＝7.5Hz，1H)4.40(s，2H)，3.55-3.46(m，2H)，3.38-3.34(m，1H)，3.27-3.16(m，2H)，2.27-2.17(m，4H)，2.06-1.98(m，2H)；MS ESI 461.3[M+H]+，计算值[C30H28N4O+H]+461.2。
实施例A61.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200961
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(175mg，0.43mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吡咯烷(225mg，0.64mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(123mg，51％)。光谱数据与实施例A60获得的相同。
实施例A64(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1，2，3，4-四氢 异喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093200962
A.7-溴-2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉
向7-溴-1，2，3，4-四氢异喹啉(1g，4.7mmol)的甲酸(20mL)溶液中添加福尔马林(1.2mL，15mmol)。反应物在微波辐射下加热至150℃保持5min。真空去除溶剂并将残余物溶于乙酸乙酯(100mL)中，用饱和碳酸氢钠(2x10mL)、盐水(10mL)洗涤并经MgSO4干燥。去除溶剂获得白色固体状标题化合物(800mg，78％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.73(d，J＝8.3Hz，1H)，7.70(s，1H)，7.50(d，J＝8.0Hz，1H)，4.11(s，2H)，3.37-3.34(m，2H)，3.27-3.24(m，2H)2.95(s，3H)；MS ESI225.9，227.9[M+H]+，计算值[C10H12BrN+H]+226.0，228.0。
B.(E)-2-甲基-7-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用7-溴-2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉(720mg，3.2mmol)替换。标题化合物作为橙色油分离(700mg，73％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.37(d，J＝18.6Hz，1H)，7.29-7.26(m，1H)，7.13(s，1H)，7.08(d，J＝7.3Hz，1H)，6.10(d，J＝18.6Hz，1H)，3.57(s，2H)，2.93-2.90(m，2H)，2.70-2.67(m，2H)，2.46(s，3H)，1.32(s，12H)；MS ESI 300.2[M+H]+，计算值[C18H26BNO2+H]+300.2。
C.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-2-甲基-7-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉(80mg，0.3mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(32mg，38％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.3Hz，1H)，7.64-7.60(m，1H)，7.49-7.45(m，4H)，7.32(d，J＝8.3Hz，1H)，7.05(d，J＝8.5Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.63-6.59(m，1H)，5.99-5.98(m，1H)，4.65-4.58(m，1H)4.42-4.34(m，1H)，3.84-3.75(m，1H)，3.49-3.40(m，1H)，3.39-3.33(m，1H)，3.27(s，3H)，3.24-3.17(m，2H)，3.09(s，3H)，2.27-2.18(m，2H)；MS ESI 477.3[M+H]+，计算值[C30H28N4O2+H]+477.2.[α]24.2° D＝-85°(c 0.40，甲醇)。
实施例A65.(1R，2S)-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-7- 基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(150mg，0.37mmol)和(E)-2-甲基-7-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉(150mg，0.55mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(35mg，17％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.97(d，J＝8.3Hz，1H)，7.60(d，J＝8.5Hz，1H)，7.45(bs，4H)，7.30(d，J＝8.0Hz，1H)，7.08-6.93(m，2H)，6.94(d，J＝7.8Hz，1H)，6.57(t，J＝7.40Hz，1H)，5.98(d，J＝7.3Hz，1H)，4.64-4.59(m.，1H)，4.39-4.32(m，1H)，3.82-3.77(m，1H)，3.49-3.37(m，1H)，3.37-3.33(m，1H)，3.30-3.20(m，2H)，3.08(s，3H)，2.27-2.17(m，2H)；MS ESI 447.3[M+H]+，计算值[C29H26N4O+H]+447.2.[α]23.4° D＝-124°(c 0.25，甲醇)。
实施例A66.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-((E)-2-(1，2，3，4-四氢异喹啉 -7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093200982
A.(E)-2，2，2-三氟代-1-(7-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酮(ethanone)
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用1-(7-溴-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2，2，2-三氟乙酮(415mg，1.32mmol)替换。标题化合物用硅胶色谱(3∶2己烷/EtOAC)纯化以获得白色固体状标题化合物(300mg，58％)。MS ESI 382.2[M+H]+，计算值[C19H23BF3NO3+H]+382.2。
B.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-((E)-2-(1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-2，2，2-三氟-1-(7-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酮(80mg，0.21mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(26mg，31％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.5Hz，1H)，7.60(d，J＝8.8Hz，1H)，7.48(bs，4H)，7.29(d，J＝8.0Hz，1H)，7.05(d，J＝8.8Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.62(d，J＝7.8Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.41(s，2H)，3.54(t，J＝6.0Hz，2H)，3.40-3.33(m，1H)，3.27(s，3H)，3.19-3.11(m，2H)，2.29-2.14(m，2H)；MS ESI 463.3[M+H]+，计算值[C29H26N4O2+H]+463.2。
实施例A70.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉 -7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
A.2-甲基-7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)-1，2，3，4-四氢异喹啉
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A69的方法A合成，除了用7-溴-2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉(450mg，2mmol)替换。用己烷研磨获得棕色固体状标题化合物(300mg，55％)。MS ESI 274.1.1[M+H]+，计算值[C16H26BNO3+H]+274.2。
B.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用2-甲基-7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)-1，2，3，4-四氢异喹啉(80mg，0.29mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(32mg，40％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.94(t，J＝8.9Hz，2H)，7.79(s，1H)，7.53(s，1H)，7.44(d，J＝8.0Hz，1H)，7.05(d，J＝9.0Hz，1H)，6.84(d，J＝9.3Hz，1H)，6.62(d，J＝7.0Hz，1H)，5.60(s，1H)，4.73-4.63(m，1H)，4.47-4.42(m，1H)，3.85-3.78(m，1H)，3.52-3.42(m，1H)，3.41-3.28(m，3H)，3.27(s，3H)，3.11(s，3H)，2.29-2.18(m，2H)；MS ESI 451.3[M+H]+，计算值[C28H26N4O2+H]+451.2。
实施例A71.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(1，2，3，4-四氢异喹啉-7- 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201001
A.2，2，2-三氟-1-(7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酮
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A69方法A中的方法合成，除了用1-(7-溴-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)-2，2，2-三氟乙酮(450mg，2mmol)替换。硅胶色谱(3∶2己烷/EtOAc)获得白色标题化合物(320mg，90％)。MS ESI 356.1[M+H]+，计算值[C17H21BF3NO3+H]+356.2。
B.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(1，2，3，4-四氢异喹啉-7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用2，2，2-三氟代-1-(7-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)-3，4-二氢异喹啉-2(1H)-基)乙酮(100mg，0.2mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(18mg，17％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.95(t，J＝8.3Hz，1H)，7.90(d，J＝6.78Hz，1H)，7.80(s，1H)，7.53(s，1H)，7.42(d，J＝8.0Hz，1H)，7.05(d，J＝8.0Hz，1H)，6.84(d，J＝8.3Hz，1H)，6.62(d，J＝8.3Hz，1H)，5.60(s，1H)，4.48(s，2H)，3.60-3.53(m，2H)，3.41-3.33(m，1H)，3.27(s，3H)，3.20(t，J＝6.6Hz，2H)，2.29-2.18(m，2H)；MS ESI 437.1[M+H]+，计算值[C27H24N4O2+H]+437.2。
实施例A72.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((1，4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)甲 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201011
A.4-(4-溴苄基)-1，4-氧杂氮杂环庚烷
向4-溴苯甲醛(616mg，3.3mmol)的二氯乙烷(50mL)溶液中添加盐酸高吗啉(548mg，4mmol)和醋酸(0.1mL)。添加三乙酰氧基硼氢化钠(3.4g，16mmol)，将反应物搅拌过夜。用饱和NH4Cl(30mL)终止反应。添加乙酸乙酯(250mL)，溶液用饱和NaHCO3(2x50mL)、盐水(50mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩至干。残余物通过二氧化硅塞(5％MeOH/CH2Cl2)冲洗获得白色固体(850mg，85％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.28(d，J＝7.3Hz，2H)，7.10(d，J＝7.3Hz，2H)，3.66-3.57(m，2H)，3.55-3.50(m，2H)，3.46-3.42(m，2H)，3.16-3.10(m，2H)，2.55-2.45(m，4H)，1.75-1.65(m，2H)。
B.(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)-1，4-氧杂氮杂环庚烷
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用4-(4-溴苄基)-1，4-氧杂氮杂环庚烷(500mg，1.86mmol)替换。标题化合物作为橙色油状物分离(560mg，88％)。MS ESI 344.2[M+H]+，计算值[C20H30BNO3+H]+344.2。
C.(1R，2S)-2-(3-(4-((1，4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.25mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)-1，4-氧杂氮杂环庚烷(103mg，0.30mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(38mg，26％)。
1H NMR(400MHz，MeOD)δ8.02(d，J＝9.0Hz，1H)，7.78(d，J＝8.3Hz，2H)，7.61-7.53(m，4H)，7.48(s，1H)，7.08-7.04(m，2H)，6.94(d，J＝7.5Hz，1H)，6.60-6.56(m，1H)，5.99(d，J＝7.8Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.02-3.80(m，4H)，3.65-3.60(m，1H)，3.57-3.35(m，4H)，2.29-2.12(m，4H)；MS ESI 491.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O2+H]+490.2.[α]23.4° D＝-146°(c 0.39，甲醇)。
实施例A73.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((1，4-氧杂氮杂环庚烷-4-基)甲 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201021
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)-1，4-氧杂氮杂环庚烷(103mg，0.30mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(48mg，31％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，7.76(d，J＝7.8Hz，2H)，7.57-7.49(m，5H)，7.05(d，J＝8.28Hz，1H)，6.84(d，J＝8.3Hz，1H)，6.61(d，J＝8.3Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.44(s，2H)，3.99-3.75(m，4H)，3.69-3.55(m，1H)，3.55-3.34(m，4H)，3.26(s，3H)2.28-2.11(m，4H)；MS ESI 521.3[M+H]+，计算值[C32H32N4O3+H]+520.2.[α]22.8° D＝-76°(c 0.33，甲醇)。
实施例A74.(1R，2S)-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-6- 基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
A.6-溴-2-甲基异喹啉氮鎓(methylisoquinolinium)三氟甲磺酸盐
在氩气氛下将6-溴异喹啉(618mg，3mmol)的CH2Cl2(35mL)溶液冷却至0℃。逐滴添加三氟甲磺酸甲酯(0.38mL，3.3mmol)并将混合物升温至室温。过滤沉淀，用乙醚研磨并干燥以获得黄色固体状标题化合物(1.03g，93％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ9.83(s，1H)，8.64-8.56(m，2H)，8.41(d，J＝7.0Hz，1H)，8.36(d，J＝8.8Hz，1H)，8.20(d，J＝9.03Hz，1H)，4.53(s，3H)。
B.6-溴-2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉
向6-溴-2-甲基异喹啉氮鎓三氟甲磺酸盐(371mg，1mmol)的甲醇(10mL)溶液中添加溴甲酚绿指示剂。添加硼氢化钠(93mg，2.5mmol)并将反应物在室温下搅拌。定期添加HCl的醋酸(1M)溶液以保持黄色。1h后，添加水(50mL)，将溶液用NaOH(1M)碱化，萃取入CH2Cl2(100mL)中，经MgSO4干燥并浓缩以获得白色固体状标题化合物(200mg，99％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.29-7，17(m，2H)，6.88(d，J＝8.0Hz，1H)，3.51(s，2H)，2.93-2.82(m，2H)，2.65(t，J＝5.8Hz，2H)，2.45(s，3H)。
C.(E)-2-甲基-6-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用6-溴-2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉(720mg，3.2mmol)替换。标题化合物作为棕色油状物分离(720mg，75％)。MS ESI 300.2[M+H]+，计算值[C18H26BNO2+H]+300.2。
D.(1R，2S)-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(122mg，0.3mmol)和(E)-2-甲基-6-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉(110mg，0.37mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(38mg，14％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.99(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(d，J＝7.8Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.50-7.43(m，3H)，7.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.10-6.99(m，2H)，6.94(d，J＝7.8Hz，1H)，6.58(t，J＝7.5Hz，1H)，5.99(d，J＝7.8Hz，1H)，4.64-4.53(m，1H)，4.41-4.27(m，1H)，3.82-3.75(m，1H)，3.51-3.33(m，2H)，3.28-3.16(m，2H)，3.08(s，3H)，2.28-2.16(m，2H)；MS ESI 447.3[M+H]+，计算值[C29H26N4O+H]+447.2.[α]23.6° D＝-147°(c 0.30，甲醇)。
实施例A75.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1，2，3，4-四氢 异喹啉-6-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201051
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-2-甲基-6-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-1，2，3，4-四氢异喹啉(134mg，0.45mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(42mg，25％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.3Hz，1H)，7.58(d，J＝8.3Hz，1H)，7.54(s，1H)，7.48(bs，3H)，7.23(d，J＝8.0Hz，1H)，7.05(d，J＝7.8Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.62(d，J＝8.8Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.60-4.51(m，1H)，4.37-4.33(m，1H)，3.82-3.75(m，1H)，3.51-3.33(m，2H)，3.28-3.16(m，2H)，3.27(s，3H)，3.08(s，3H)，2.28-2.15(m，2H)；MS ESI 477.3[M+H]+，计算值[C29H26N4O+H]+477.2。
实施例A76.(1R，2S)-2-(3-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基)-1H- 吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201052
A.2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)-1，2，3，4-四氢异喹啉
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A69方法A的方法合成，除了用6-溴-2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉(450mg，2mmol)替换。用己烷研磨获得棕色固体状标题化合物(265mg，49％)。MS ESI 274.1[M+H]+，计算值[C16H26BNO3+H]+274.2。
B.(1R，2S)-2-(3-(2-甲基-1，2，3，4-四氢异喹啉-6-基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(64mg，0.15mmol)和2-甲基-6-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)-1，2，3，4-四氢异喹啉(80mg，0.29mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(24mg，31％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.95-7.81(m，3H)，7.50(s，1H)，7.35(d，J＝8.3Hz，1H)，7.08-6.99(m，2H)，6.94(d，J＝7.5Hz，1H)，6.57(t，J＝7.5Hz，1H)，6.00(d，J＝7.5Hz，1H)，4.66-4.62(m，1H)，4.43-4.38(m，1H)，3.85-3.78(m，1H)，3.52-3.42(m，1H)，3.41-3.33(m，1H)，3.32-3.20(m，2H)，3.10(s，3H)，2.27-2.14(m，2H)；MS ESI 421.3[M+H]+，计算值[C27H24N4O+H]+421.2。
实施例A78.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(1-甲基哌啶-4-基氧基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201061
A.4-(4-溴苯氧基)-1-甲基哌啶
根据WO2010/115279的实施例A64方法A的方法制备，除了用4-(4-溴苯氧基)哌啶(256mg，1mmol)替换。标题化合物作为白色固体分离(270mg，99％)。1H NMR(CDCl3)δ：7.36(d，J＝8.3Hz，2H)，6.79(d，J＝8.3Hz，2H)，4.28(bs，1H)，2.73-2.65(m，2H)，2.32(s，3H)，2.32-2.25(m，2H)，2.05-1.95(m，2H)，1.86-1.80(m，2H)。
B.(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用4-(4-溴苯氧基)-1-甲基哌啶(270mg，1mmol)替换。标题化合物作为橙色油状物分离(340mg，99％)。MS ESI 344.2[M+H]+，计算值[C20H30BNO3+H]+344.2。
C.(1R，2S)-2-(3-(4-(1-甲基哌啶-4-基氧基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.25mmol)和(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶(105mg，0.3mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(35mg，25％)。1H NMR(CD3OD)δ：7.99-7.97(m，1H)，7.63-7.56(m，2H)，7.50-7.42(m，2H)，7.36-7.28(m，1H)，7.10-7.01(m，4H)，6.97-6.91(m，1H)，6.59(t，J＝7.7Hz，1H)，5.99(d，J＝7.8Hz，1H)，4.84-4.79(m，0.5H)，4.65-4.60(m，0.5H)，3.65-3.62(m，1H)，3.47-3.34(m，3H)，3.25-3.13(m，1H)，2.94(s，3H)，2.44-2.40(m，1H)，2.32-2.01(m，5H)，1.96-1.81(m，1H)；MS ESI 491.2[M+H]+，计算值[C31H30N4O2+H]+491.3。
[α]22 D＝-154°(c 0.43，MeOH)。
实施例A79.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(1-甲基哌啶-4-基氧 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201071
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶(105mg，0.3mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(36mg，25％)。1H NMR(CD3OD)δ：7.95(d，J＝8.8Hz，1H)，7.56-7.53(m，2H)，7.45-7.40(m，2H)，7.30-7.26(m，1H)，7.04-6.98(m，4H)，6.83(d，J＝8.3Hz，1H)，6.60(d，J＝8.3Hz，1H)，5.58(s，1H)，，4.81-4.54(m，1H)3.65-3.33(m，4H)，3.24(s，3H)，3.23-3.13(m，1H)2.92(s，3H)，2.44-2.37(m，1H)，2.32-2.01(m，5H)，1.96-1.81(m，1H)；MS ESI 521.3[M+H]+，计算值[C32H32N4O3+H]+521.2。
实施例A80.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(2-吗啉代丙烷-2-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201081
A.2-甲基-2-吗啉代丙腈
将丙酮氰醇(4.3g，50mmol)溶于丙酮(5mL)中。添加吗啉(4.3g，50mmol)并将溶液在室温下搅拌24h。真空去除挥发性溶剂，以定量产率获得澄清液体状标题化合物。MS ESI 155.0[M+H]+，计算值[C8H14N2O+H]+155.1。
B.4-(2-(4-溴苯基)丙烷-2-基)吗啉
氩气氛下将镁屑(190mg，7.4mmol)加入无水THF(15mL)中。添加1，4-二溴苯(2.43g，10.3mmol)并将溶液加热至回流30min。将2-甲基-2-吗啉代丙腈(1g，6.6mmol)溶于THF(30mL)中，并在回流下逐滴添加至溶液中。将混合物搅拌2h并冷却至室温。用饱和K2CO3溶液终止反应并用CH2Cl2(200mL)萃取，经MgSO4干燥并浓缩成橙色油状物。粗混合物在Biotage二氧化硅柱(2-15％MeOH于CH2Cl2中)上纯化以获得黄色油状标题化合物(204mg，10％)。MS ESI 284.0，286.0[M+H]+，计算值[C13H18BrNO+H]+284.1，286.1。
C.(E)-4-(2-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)丙烷-2-基)吗啉
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用4-(2-(4-溴苯基)丙烷-2-基)吗啉(200mg，0.7mmol)替换。标题化合物作为橙色油状物分离(140mg，40％)。MS ESI 358.1[M+H]+，计算值[C21H32BNO3+H]+358.2。
D.(1R，2S)-2-(3-(4-(2-吗啉代丙烷-2-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.25mmol)和(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶(140mg，0.4mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(51mg，34％)。1H NMR(CD3OD)δ：7.98(d，J＝8.5Hz，1H)，7.80-7.76(m，2H)，7.70(d，J＝8.3Hz，2H)，7.52-7.46(m，3H)，7.08-6.98(m，2H)，6.94(d，J＝7.8Hz，1H)，6.56(t，J＝7.7Hz，1H)，5.98(d，J＝7.5Hz，1H)，4.06-3.96(m，2H)，3.83-3.73(m，2H)，3.35-3.29(m，3H)，3.13-3.08(m，2H)，2.26-2.14(m，2H)，1.90(s，6H)；MS ESI 418.2[M-C4H8NO]+，计算值[C32H32N4O2-C4H8NO]+418.2.[α]22.8° D＝-109°(c 0.32，甲醇)。
实施例A81.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
A.4-(4-溴苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯
向4-亚甲基哌啶-1-甲酸叔丁酯(1g，5.1mmol)的溶液中添加9-BBN溶液(10.2mL的0.5M溶液，5.1mmol)，并在氩气氛下将混合物加热至回流1h。然后将溶液冷却至室温并添加1，4-碘代溴苯(1.3g，4.7mmol)，然后添加K2CO3(843mg，6.1mmol)、DMF(10mL)、水(1mL)和Pd(dppf)Cl2(114mg，0.15mmol)。在氩气氛下将溶液加热至60℃保持3h并冷却至室温。添加乙酸乙酯(250mL)，用水(2x50mL)、盐水(50mL)洗涤溶液，经MgSO4干燥并浓缩至干。粗产物通过Biotage硅胶柱(50∶50己烷/乙酸乙酯)纯化以获得黄色固体状标题化合物(1.2g，72％)。
B.4-(4-溴苄基)哌啶
向4-(4-溴苄基)哌啶-1-甲酸叔丁酯(780mg，2.2mmol)的CH2Cl2(15mmol)溶液中添加TFA(0.5mL)，并将混合物在室温下搅拌1h。真空去除溶剂并将残余物溶于CH2Cl2(50mL)，用NaOH(0.1M，10mL)、盐水(10mL)洗涤，经MgSO4干燥并浓缩至干以获得米色固体状标题化合物(520mg，93％)。
C.4-(4-溴苄基)-1-甲基哌啶
根据WO2010/115279的实施例A69方法A的方法制备，除了用4-(4-溴苄基)哌啶(520mg，2mmol)替换。标题化合物分离作为棕色固体分离(490mg，89％)。1H NMR(CDCl3)δ7.39(d，J＝7.5Hz，2H)，7.01(d，J＝7.8Hz，2H)，2.93(d，J＝11.0Hz，2H)，2.50(d，J＝6.8Hz，2H)，2.32(s，3H)，1.99-1.94(m，2H)，1.65-1.62(m，2H)，1.50-1.35(m，3H)。
D.(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用4-(4-溴苄基)-1-甲基哌啶(267mg，1mmol)替换。标题化合物作为橙色油状物分离(340mg，99％)。MS ESI 342.2[M+H]+，计算值[C21H32BNO2+H]+342.2。
E.(1R，2S)-2-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.25mmol)和(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(105mg，0.3mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(39mg，27％)。1H NMR(CD3OD)δ：7.97(d，J＝8.8Hz，1H)，7.56(d，J＝7.3Hz，2H)，7.51-7.37(m，3H)，7.22(d，J＝7.5Hz，2H)，7.08-7.01(m，2H)，6.94(d，J＝8.0Hz，1H)，6.57(t，J＝7.5Hz，1H)，5.99(d，J＝7.5Hz，1H)，3.50-3.47(m，2H)，3.37-3.31(m，1H)，2.97-2.92(m，2H)，2.83(s，3H)，2.63(d，J＝6.0Hz，2H)，2.26-2.14(m，2H)，1.96-1.81(m，3H)，1.56-1.41(m，2H)；MS ESI 489.4[M+H]+，计算值[C32H32N4O+H]+489.3.[α]22.8° D＝-96°(c 0.26，甲醇)。
实施例A82.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201111
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(105mg，0.3mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(24mg，17％)。1H NMR(CD3OD)δ：7.97(d，J＝8.3Hz，1H)，7.54(d，J＝7.8Hz，2H)，7.51-7.36(m，3H)，7.20(d，J＝7.5Hz，2H)，7.01(d，J＝8.3Hz，1H)，6.83(d，J＝8.8Hz，1H)，6.60(d，J＝8.3Hz，1H)，5.59(s，1H)，3.50-3.47(m，2H)，3.37-3.31(m，1H)，3.25(s，3H)，2.97-2.92(m，2H)，2.83(s，3H)，2.62(d，J＝6.0Hz，2H)，2.26-2.14(m，2H)，1.96-1.81(m，3H)，1.53-1.44(m，2H)；MS ESI 519.3[M+H]+，计算值[C33H34N4O2+H]+519.3.[α]22.8° D＝-100°(c 0.29，甲醇)。
实施例A83.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯 乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸 盐
Figure BPA00001624093201121
标题化合物根据实施例A51B的方法合成，除了用(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吡咯烷(50mg，0.16mmol)替换。通过反相制备型HPLC纯化获得标题化合物，为黄色TFA盐(19mg，21％)。1H NMR(CD3OD)δ：8.02(d，J＝8.3Hz，1H)，7.75(d，J＝7.8Hz，2H)，7.56-7.47(m，5H)，7.05(d，J＝8.5Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.61(d，J＝8.5Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.39(s，2H)，3.52(bs.，2H)，3.37(t，J＝8.5Hz，1H)，3.27(s，3H)，3.25-3.16(m，2H)，2.27-2.14(m，4H)，2.03(bs.，2H)；MS ESI 491.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O2+H]+491.2.[α]24.2° D＝-117°(c 0.52，甲醇)。
实施例A84.(1R * ，2R * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
Figure BPA00001624093201122
将来自实施例A34B反应的次要非对映体分离为黄-橙色固体薄膜(36mg，3％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δppm 7.99(d，J＝8.5Hz，1H)，7.75(d，J＝8.0Hz，2H)，7.56-7.46(m，5H)，7.15(d，J＝8.5Hz，1H)，6.87(d，J＝8.3Hz，1H)，6.82-6.72(m，2H)，4.31(s，2H)，3.81(s，3H)，3.39(t，J＝8.8Hz，1H)，2.87(s，6H)，2.41(dd，J＝8.4，4.9Hz，1H)，2.23(dd，J＝8.8，4.8Hz，1H)；MS ESI[M+H]+465.2，计算值[C29H28N4O2+H]+465.2。
实施例A87.(1R * ，2S * )-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201131
A.(E)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-1-甲基吲哚啉-2-酮
标题化合物根据(E)-3-((1H-吲唑-5-基)亚甲基)吲哚啉-2-酮所描述的方法合成，除了用3-碘代-1H-吲唑-6-甲醛(462mg，1.70mmol)和1-甲基吲哚啉-2-酮(250mg，1.70mmol)替换，标题化合物作为黄-橙色固体获得(545mg，80％)；MS ESI 402.2[M+H]+，计算值[C17H12IN3O+H]+402.01。
B.(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮
标题化合物根据实施例A6的方法合成，除了用(E)-3-((3-碘代-1H-吲唑-6-基)亚甲基)-1-甲基吲哚啉-2-酮(545mg，1.36mmol)替换以获得标题化合物，为非对映体的9∶1混合物(405mg，72％)；MS ESI416.0[M+H]+，计算值[C18H14IN3O+H]+416.03。
C.(1R*，2S*)-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A45的方法合成，除了用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(30mg，0.072mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(31mg，0.094mmol)替换。Suzuki偶联后，去除溶剂，残余物通过制备型-HPLC纯化以得到标题化合物(16mg，45％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.00(d，J＝8.4Hz，1H)，7.77(d，J＝8.2Hz，2H)，7.54-7.46(m，5H)，7.14(t，J＝7.8Hz，1H)，7.02(d，J＝8.1Hz，2H)，6.64(t，J＝7.3Hz，1H)，6.02(d，J＝7.2Hz，1H)，4.38(s，2H)，4.08-4.04(m，2H)，3.75-3.69(m，2H)，3.43-3.34(m，6H)，3.27-3.19(m，2H)，2.29-2.25(m，1H)，2.22-2.18(m，1H)；MS ESI[M+H]+491.3，计算值[C31H30N4O2+H]+491.24。
实施例A89.(1R * ，2S * )-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(哌嗪-1-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201141
A.4-(4-乙炔基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
向微波小瓶中加入4-(4-碘代苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(300mg，0.773mmol)、三甲基甲硅烷基乙炔(0.22mL，1.54mmol)、NEt3(3.0mL)、DMF(1.5mL)、CuI(15mg，0.080mmol)和PdCl2(PPh3)2(27mg，0.039mmol)。小瓶加盖并在100℃微波下加热1h。真空去除NEt3后，残余物用EtOAc(15mL)萃取。然后有机层用NaHCO3(sat.)(5mL)、H2O(5mL)、盐水(5mL)洗涤，然后经MgSO4干燥。去除溶剂，然后将物质溶于MeOH(4mL)和THF(2mL)中。添加K2CO3(1.0mL的1M溶液)并将反应物搅拌3h。去除溶剂，残余物用EtOAc(15mL)萃取。有机层用盐水(5mL)洗涤，然后经MgSO4干燥。去除溶剂，高真空下干燥产物以获得棕色固体状标题化合物(212mg，96％)；MSESI 287.0[M+H]+，计算值[C17H22N2O2+H]+287.18。
B.(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯
标题化合物根据实施例A42A的方法合成，除了用4-(4-乙炔基苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(212mg，0.740mmol)替换，以在柱色谱(硅胶，己烷/EtOAc，6∶1至5∶1)后获得淡黄色固体状标题化合物(137mg，45％)；MS ESI 415.3[M+H]+，计算值[C23H35BN2O4+H]+415.28。
C.(1R*，2S*)-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(哌嗪-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A45的方法合成，除了用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(37mg，0.090mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(45mg，0.109mmol)替换。去除溶剂，且Boc-保护的胺通过柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH，95∶5)纯化以获得不纯产物，其溶于CH2Cl2(2.0mL)中并添加TFA(200uL)。将反应物搅拌2h，去除溶剂，且残余物通过制备型-HPLC纯化以获得灰白色粉末状标题化合物(2.0mg，4.0％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.97(d，J＝8.5Hz，1H)，7.56(d，J＝8.4Hz，2H)，7.46-7.41(m，2H)，7.30(d，J＝17Hz，1H)，7.15(t，J＝7.2Hz，1H)，7.06-6.99(m，4H)，6.65(t，J＝8.0Hz，1H)，6.02(d，J＝7.7Hz，1H)，3.49-3.44(m，4H)，3.40-3.31(m，8H)，2.28-2.25(m，1H)，2.21-2.18(m，1H)；MS ESI[M+H]+476.2，计算值[C30H29N5O+H]+476.25。
实施例A90.(1R，2S)-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(哌嗪-1-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮盐酸盐
Figure BPA00001624093201151
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(218mg，0.526mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(261mg，0.631mmol)替换。Boc-保护的中间体通过柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH，97∶3至96∶4)纯化以获得218mg，72％。将该物质溶于CH2Cl2(6.0mL)和TFA(1.0mL)中并搅拌2h，去除溶剂，且残余物通过制备型HPLC纯化而获得TFA盐。该物质通过用NaHCO3(饱和)(10mL)洗涤来游离碱化(free-based)并用EtOAc(2x50mL)萃取。HCl盐根据A42B的方法制备，其在干燥后获得标题产物(48mg，15％)；光谱数据与实施例A89中获得的相同。旋光度：[α]22 D＝-100°(c 0.43，MeOH)。
实施例A91.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-(哌嗪-1-基)苯乙烯基)-1H-吲 唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201161
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A45的方法合成，除了用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(72mg，0.180mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪-1-甲酸叔丁酯(90mg，0.217mmol)替换。去除溶剂，残余物通过柱色谱(硅胶，己烷/EtOAc，2∶1)纯化以获得38mg Boc-保护的胺，将其溶于CH2Cl2(2.0mL)中并添加TFA(0.1mL)。将反应物搅拌3h，去除溶剂，且残余物通过制备型HPLC纯化以获得标题化合物(6.5mg，6.0％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.97(d，J＝8.1Hz，1H)，7.57(d，J＝8.6Hz，2H)，7.47-7.42(m，2H)，7.30(d，J＝17Hz，1H)，7.06-7.01(m，4H)，6.93(d，J＝7.6Hz，1H)，6.58(t，J＝7.6Hz，1H)，5.98(d，J＝8.0Hz，1H)，3.49-3.44(m，4H)，3.40-3.31(m，5H)，2.26-2.22(m，1H)，2.19-2.16(m，1H)；MS ESI[M+H]+462.2，计算值[C29H27N5O+H]+462.23。
实施例A92.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(哌嗪-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑 -6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201171
标题化合物根据实施例A91的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(40mg，0.1mmol)替换。标题化合物作为黄色固体分离(23mg，40％)。光谱数据与实施例A91中获得的相同。
实施例A94.(1R，2S)-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮盐酸盐
Figure BPA00001624093201172
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(594mg，1.43mmol)和(E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(563mg，1.72mmol)替换。通过柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH/7N NH3于MeOH中，91∶8∶1)纯化获得443mg，63％的浅橙色固体状游离碱。HCl盐根据A42B的方法制备，其在干燥后获得标题化合物(378mg，50％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.1Hz，1H)，7.76(d，J＝7.2Hz，2H)，7.54-7.47(m，5H)，7.15(t，J＝7.6Hz，1H)，7.05(d，J＝7.9Hz，2H)，6.64(t，J＝7.9Hz，1H)，6.02(d，J＝6.6Hz，1H)，4.31(s，2H)，3.48-3.45(m，2H)，3.39(t，J＝8.2Hz，1H)，3.36(s，3H)，3.01-2.95(m，2H)，2.29-2.26(m，1H)，2.22-2.19(m，1H)，1.99-1.72(m，5H)，1.57-1.50(m，1H)；MS ESI[M+H]+489.3，计算值[C32H32N4O+H]+489.27。旋光度：[α]22 D＝-122°(c 0.49，MeOH)。
实施例A95.(1R * ，2S * )-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201181
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A43的方法合成，除了用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(44mg，0.106mmol)和(E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(45mg，0.138mmol)替换。通过制备型HPLC纯化获得标题化合物(6.5mg，10％)；光谱数据与实施例A94中获得的相同。
实施例A102.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-1′-甲基-2-(3-(4-(吗啉代甲基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮盐酸盐
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(512mg，1.15mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(454mg，1.38mmol)替换。通过柱色谱(硅胶，CH2Cl2/MeOH，95∶5至92∶8)纯化获得黄色固体状游离碱。HCl盐根据A42B的方法制备，其在干燥后获得浅黄色固体状标题产物(346mg，54％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.6Hz，1H)，7.77(d，J＝8.0Hz，2H)，7.56-7.49(m，5H)，7.04(d，J＝8.4Hz，1H)，6.92(d，J＝7.8Hz，1H)，6.69(d，J＝8.6Hz，1H)，5.63(s，1H)，4.39(s，2H)，4.08-4.05(m，2H)，3.77-3.71(m，2H)，3.35-3.23(m，11H)，2.27-2.25(m，1H)，2.22-2.19(m，1H)；MS ESI[M+H]+521.3，计算值[C32H32N4O3+H]+521.26。旋光度：[α]22 D＝-85°(c 0.59，MeOH)。
实施例A106.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3-氟代吡咯烷-1-基)甲基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201191
A.(R)-1-(4-溴苄基)-3-氟代吡咯烷
标题化合物根据WO2010/115279的实施例A105B的方法合成，除了用(R)-3-氟代吡咯烷盐酸盐(576mg，4.59mmol)和4-溴苯甲醛(849mg，4.59mmol)替换，其产生1.09g，91％的澄清无色油状物；MS ESI[M+H]+258.0，计算值[C11H13BrFN+H]+258.03。
B.(3R)-3-氟代-1-(4-((E)-2-(4，4，6-三甲基-1，3，2-二氧杂硼烷-2-基)乙烯基)苄基)吡咯烷
标题化合物根据实施例A51A的方法合成，除了用(R)-1-(4-溴苄基)-3-氟代吡咯烷(1.07g，4.15mmol)和4，4，6-三甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼烷(0.77mL，4.57mmol)替换，其产生1.40g，91％的浅橙色固体；MS ESI[M+H]+332.3，计算值[C19H27BFNO2+H]+332.22。
C.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3-氟代吡咯烷-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(630mg，1.57mmol)和(3R)-3-氟代-1-(4-((E)-2-(4，4，6-三甲基-1，3，2-二氧杂硼烷-2-基)乙烯基)苄基)吡咯烷(622mg，1.88mmol)替换。制备型HPLC纯化后获得浅黄色固体状标题产物(338mg，48％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.98(d，1H，J＝8.3Hz)，7.73(d，2H，J＝7.80Hz)，7.55-7.45(m，5H)，7.06-7.00(m，2H)，6.93(d，1H，J＝7.7Hz)，6.56(t，1H，J＝7.5Hz)，5.97(d，1H，J＝7.5Hz)，5.46(d，1H，J＝52.4Hz)，4.46(s，2H)，3.73-3.31(m，5H)，2.65-2.44(m，2H)，2.26-2.15(m，2H)；MS ESI[M+H]+479.3，计算值[C30H27FN4O+H]+479.22。旋光度：[α]22 D＝-125°(c0.44，MeOH)。
实施例A109.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201201
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(134mg，0.322mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(111mg，0.386mmol)替换。通过制备型HPLC纯化获得浅黄色固体，其用Et2O超声处理并过滤以获得标题产物(42mg，23％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.00(d，1H，J＝8.0Hz)，7.76(d，2H，J＝7.6Hz)，7.54-7.47(m，5H)，7.15(t，1H，J＝8.2Hz)，7.03(d，2H，J＝7.8Hz)，6.64(t，1H，J＝7.5Hz)，6.02(d，1H，J＝7.0Hz)，4.33(s，2H)，3.41-3.35(m，4H)，2.88(s，6H)，2.29-2.26(m，1H)，2.22-2.19(m，1H)；MS ESI[M+H]+449.2，计算值[C29H28N4O+H]+449.23。旋光度：[α]22 D＝-152°(c 0.42，MeOH)。
实施例A112.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3-氟代吡咯烷-1-基)甲基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201211
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(125mg，0.290mmol)和(3R)-3-氟代-1-(4-((E)-2-(4，4，6-三甲基-1，3，2-二氧杂硼烷-2-基)乙烯基)苄基)吡咯烷(115mg，0.348mmol)替换。通过制备型HPLC纯化获得64mg，35％的米色固体状标题化合物；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，1H，J＝8.3Hz)，7.75(d，2H，J＝7.9Hz)，7.55-7.48(m，5H)，7.04(d，1H，J＝8.5Hz)，6.82(d，1H，J＝8.2Hz)，6.60(d，1H，J＝8.5Hz)，5.58(s，1H)，5.46(d，1H，J＝53.2Hz)，4.46(bs，2H)，3.80-3.48(m，4H)，3.36(t，1H，J＝8.8Hz)，3.26(s，3H)，2.54-2.33(m，2H)，2.27-2.24(m，1H)，2.22-2.17(m，1H)；MS ESI[M+H]+509.3，计算值[C31H29FN4O2+H]+509.24。旋光度：[α]22 D＝-91°(c 0.58，MeOH)。
实施例A113.(1R，2S)-2-(3-((E)-2-(2，3，4，5-四氢苯并[f][1，4]氧氮 杂
Figure BPA00001624093201212
-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2- 三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201221
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(105mg，0.27mmol)和(E)-7-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)-2，3-二氢苯并[f][1，4]氧氮杂
Figure BPA00001624093201222
-4(5H)-甲酸叔丁酯(130mg，0.32mmol)来合成。将来自反应物的残余物溶于CH2Cl2(5mL)中并添加TFA(0.2mL)，将混合物搅拌1h并浓缩至干。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(40mg，30％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.97(d，J＝8.2Hz，1H)，7.68-7.64(m，2H)，7.50-7.39(m，3H)，7.16(d，J＝8.2Hz，1H)，7.07-7.01(m，2H)，6.94(d，J＝7.8Hz，1H)，6.57(t，J＝7.6Hz，1H)，5.98(d，J＝7.4Hz，1H)，4.45(s，2H)，4.39(br.s，2H)，3.68(br.s，2H)，3.39-3.33(m，1H)2.25-2.16(m，2H)；MS ESI 449.3[M+H]+，计算值[C28H24N4O2+H]+449.2。
实施例A115.(1R，2S)-(E)-1′-甲基-2-(3-(4-(吡咯烷-1-基甲基)苯 乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸 盐
Figure BPA00001624093201223
标题化合物根据实施例A42B的方法合成，除了用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(147mg，0.353mmol)和(E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吡咯烷(133mg，0.424mmol)替换。通过制备型HPLC纯化获得浅黄色固体状标题化合物(46mg，22％)；1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.98(d，1H，J＝8.7Hz)，7.73(d，2H，J＝7.4Hz)，7.53-7.44(m，5H)，7.14(t，1H，J＝7.2Hz)，7.01(d，2H，J＝7.9Hz)，6.63(t，1H，J＝7.4Hz)，6.01(d，1H，J＝7.6Hz)，4.38(s，2H)，3.55-3.45(m，2H)，3.40-3.32(m，1H)，3.34(s，3H)，3.26-3.16(m，2H)，2.28-2.17(m，4H)，2.05-1.95(m，2H)；MS ESI[M+H]+475.4，计算值[C31H30N4O+H]+475.25。旋光度：[α]22 D＝-148°(c 0.40，MeOH)。
实施例A116.(1R，2S)-(E)-2-(3-(3，5-二氟-4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201231
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(125mg，0.311mmol)和(E)-4-(2，6-二氟-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(130.9mg，0.358mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(88mg，45％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.94(d，J＝8.4Hz，1H)，7.56(d，J＝16.8Hz，1H)，7.46-7.42(m，4H)，7.04-6.99(m，2H)，6.92(d，J＝7.6Hz，1H)，6.53(t，J＝7.6Hz，1H)，5.95(d，J＝7.6Hz，1H)，4.48(s，2H)，4.08-3.84(bm，4H)，3.49-3.35(bm，5H)，2.26-2.23(m，1H)，2.21-2.17(m，1H)；MS ESI513.3[M+H]+，计算值[C30H26F2N4O2+H]+513.21。
旋光度[α]23 D＝-121°(c 0.34，MeOH)
实施例A131.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201241
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1’-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(490mg，1.07mmol)和(E)-N，N-二甲基-1(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)甲胺(321.7mg，1.12mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得灰白色固体状标题化合物(297mg，46％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(d，J＝8.0Hz，1H)，7.68(d，J＝7.6Hz，2H)，7.50-7.42(m，5H)，7.08-7.03(m，2H)，6.93(d，J＝8.4Hz，1H)，6.55(t，J＝7.6Hz，1H)，5.96(d，J＝7.6Hz，1H)，4.30(s，2H)，4.01(t，J＝4.8Hz，2H)，3.67(t，J＝5.2Hz，2H)，3.35-3.31(m，4H)，2.86(s，6H)，2.21-2.20(m，1H)，2.17-2.14(m，1H)；MS ESI 493.4[M+H]+，计算值[C31H32N4O2+H]+493.26。
[α]23 D＝-169°(c 0.36，MeOH)。
实施例A132.(1R，2S)-5′-甲氧基-2-(3-(3-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201242
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和(E)-4-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(184mg，0.56mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝8mL/4mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得白色固体状标题化合物(163mg，67％，TFA盐)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.89(d，J＝8.4Hz，1H)，7.72(s，1H)，7.67(d，J＝7.6Hz，1H)，7.50-7.37(m，5H)，6.93(d，J＝8.4Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，6.56(dd，J＝8.4Hz，J＝2.4Hz，1H)，5.56(d，J＝2.0Hz，1H)，4.37(s，2H)，4.10-4.08(m，2H)，3.82-3.71(m，2H)，3.45-3.35(m，2H)，3.32(t，J＝8.2Hz，1H)，3.25-3.15(m，5H；s，3H于3.20ppm和m，2H重叠)，2.20-2.10(m，2H)；MS ESI 507.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O3+H]+507.2。
旋光度[α]22 D＝-89°(c 0.34，MeOH)。
实施例A133.(1R * ，2S * )-5′-甲氧基-2-(3-(3-(吗啉基甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201251
向(1R*，2S*)-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(66mg，0.2mmol)、4-(3-溴苄基)吗啉(56mg，0.22mmol)、Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)于DMF(2mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL，0.4mmol)。用氩气吹扫所得混合物，然后在150℃下微波处理30min。将粗混合物通过微过滤器，然后通过制备型HPLC纯化以获得浅黄色泡沫状标题化合物(50mg，40％)。NMR显示13％支链异构体。光谱数据与实施例A132中获得的相同。
实施例A134.(1R，2S)-2-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯基)-1H- 吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201261
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(161mg，0.56mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝8mL/4mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(89mg，38％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.73(s，1H，与7.70ppm处的峰部分重叠)，7.70(d，J＝8.0Hz，1H，与7.73ppm处的峰部分重叠)，7.52-7.45(m，4H)，7.40(d，J＝7.6Hz，1H)，7.96(d，J＝8.4Hz，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.58(dd，J＝8.4Hz，J＝2.4Hz，1H)，5.57(d，J＝2.4Hz，1H)，4.34(s，2H)，3.33(t，J＝8.8Hz，与MeOH残基部分重叠，1H)，3.23(s，3H)，2.89(s，6H)，2.22-2.12(m，2H)；MS ESI 465.3[M+H]+，计算值[C29H28N4O2+H]+465.2。
旋光度[α]22 D＝-82°(c 0.38，MeOH)。
实施例A135.(1R * ，2S * )-2-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201262
向粗(1R*，2S*)-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.2mmol)、1-(3-溴苯基)-N，N-二甲基甲胺(43mg，0.2mmol)、Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)于DMF(2mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL，0.4mmol)。用氩气吹扫所得混合物，然后在125℃下微波处于30min。将其通过微过滤器，然后通过制备型HPLC纯化以获得浅黄色固体状标题化合物。NMR显示7％的支链异构体(43mg，37％)。光谱数据与实施例A134中获得的相同。
实施例A146.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)-3，5-二氟代 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201271
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(125mg，0.289mmol)和(E)-N-(2，6-二氟代-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)N-乙基乙胺(122.2mg，0.347mmol)来制备。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(59mg，31.6％).1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.99(d，J＝8.0Hz，1H)，7.59(d，J＝16.8Hz，1H)，7.50-7.45(m，4H)，7.03(s，J＝8.4Hz，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.59(d，J＝8.8Hz，1H)，5.57(s，1H)，4.46(s，2H)，3.37-3.28(m，5H)，3.25(s，3H)，2.25-2.22(m，1H)，2.19-2.17(m，1H)，1.26(t，J＝11.2Hz，6H)；MS ESI 529.3[M+H]+，计算值[C31H30F2N4O2+H]+529.2。
旋光度：[α]23 D＝-80°(c 0.65，甲醇)。
实施例A147.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((4-甲基哌嗪-1-基)甲基)苯 乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮双-2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201281
向(1R*，2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(60.2mg，0.2mmol)和1-(4-溴苄基)-4-甲基哌嗪(53.8mg，0.2mmol)于DMF(2mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL)，然后添加Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)。用氩气吹扫所得混合物，然后在100℃下微波处理2h。LC-MS显示低的转化率。添加额外的Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)，用氩气吹扫反应混合物并在125℃下微波处理2h。通过制备型HPLC纯化获得白色固体状标题化合物(23mg，16％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.99(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(d，J＝8.0Hz，2H)，7.53-7.46(m，5H)，7.05(t，J＝7.6Hz，1H，与7.04ppm处的峰部分重叠)，7.04(d，J＝8.0Hz，1H，与7.05ppm处的峰部分重叠)，6.94(d，J＝7.6Hz，1H)，6.58(t，J＝7.4Hz，1H)，5.99(d，J＝8.0Hz，1H)，4.19(s，2H)，3.60-3.30(m，9H)，2.95(s，3H)，2.24(dd，J＝7.6Hz，4.8Hz，1H)，2.18(dd，J＝9.0Hz，J＝4.6Hz，1H)；MS ESI 490.3[M+H]+，计算值[C31H31N5O+H]+490.3。
实施例A151.(1R，2S)-(E)-2-(3-(3-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H-吲 唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201282
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(160mg，0.4mmol)和(E)-4-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(184mg，0.56mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝8mL/4mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得白色固体状标题化合物(158mg，67％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.11(s，1H)，7.88(d，J＝8.4Hz，1H)，7.73(s，1H)，7.67(d，J＝8.0Hz，1H)，7.50-7.38(m，5H)，6.98(t，J＝7.8Hz，1H)，6.91(d，J＝8.0Hz，2H)，6.48(t，J＝7.6Hz，1H)，5.92(d，J＝7.2Hz，1H)，4.36(s，2H)，4.03(d，J＝11.6Hz，2H)，3.76(t，J＝12.0Hz，2H)，3.45-3.14(m，5H)，2.17-2.08(m，2H)；MS ESI 477.3[M+H]+，计算值[C30H28N4O2+H]+477.2。
旋光度[α]23 D＝-144°(c 0.34，MeOH)。
实施例A152.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(3-(吗啉代甲基)苯乙烯基)-1H- 吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201291
向(1R*，2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(60.2mg，0.2mmol)和4-(3-溴苄基)吗啉(51.2mg，0.2mmol)于DMF(1.5mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL)，然后添加Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)。用氩气吹扫所得混合物并在125℃微波处理2h。通过制备型HPLC纯化获得白色固体状标题化合物(22mg，19％)。NMR显示3％的支链异构体。光谱数据与实施例A151中获得的相同。
实施例A160.2-((1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-1′-基)乙酰胺 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201292
由2-((1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-1′-基)乙酰胺(183mg，0.4mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(161mg，0.56mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝8mL/4mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(79mg，33％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)
Figure BPA00001624093201301
7.92(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68(d，J＝8.0Hz，2H)，7.50-7.43(m，5H)，7.07(t，J＝8.2Hz，1H，与7.04ppm处的峰部分重叠)，7.04(d，J＝9.2Hz，与7.07ppm处的峰部分重叠)，6.90(d，J＝8.0Hz，1H)，6.60(t，J＝7.6Hz，1H)，6.02(d，J＝7.6Hz，1H)，4.58-4.54(m，2H)，4.30(s，2H)，3.39(t，J＝8.4Hz，1H)，2.86(s，6H)，2.27-2.18(m，2H)；MS ESI 492.3[M+H]+，计算值[C30H29N5O2+H]+492.2。
实施例A162.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201302
向(1R*，2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(60.2mg，0.2mmol)和1-(3-溴苯基)-N，N-二甲基甲胺(42.8mg，0.2mmol)于DMF(2mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07mL)，然后添加Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)。用氩气吹扫所得混合物并在125℃下微波处理2h。通过制备型HPLC纯化获得白色固体状标题化合物(24mg，22％，TFA盐)。NMR显示5％的支链异构体。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.99(d，J＝8.4Hz，1H)，7.78-7.75(m，2H)，7.55-7.49(m，3H)，7.47(s，1H)，7.41(d，J＝7.6Hz，1H)，7.08-7.00(m，2H)，6.94(d，J＝7.6Hz，1H)，6.57(t，J＝7.4Hz，1H)，5.98(d，J＝8.4Hz，1H)，4.36(s，2H)，3.35(t，J＝8.4Hz，1H，与MeOH残基部分重叠)，2.90(s，6H)，2.23(dd，J＝8.0Hz，J＝4.8Hz，1H)，2.08(dd，J＝9.2Hz，J＝4.8Hz，1H)；MS ESI 435.2[M+H]+，计算值[C28H26N4O+H]+435.2。
实施例A164.2-((1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(3-((二甲基氨基)甲基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-1′-基)乙酰胺 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201311
由2-((1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-1′-基)乙酰胺(22.9mg，0.05mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(3-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(21.6mg，0.075mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝2mL/1mL，4mol％Pd(PPh3)4，120℃，2h)获得白色固体状标题化合物(6.9mg，23％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，7.80(s，1H，与7.79ppm处的峰部分重叠)，7.79(d，J＝9.2Hz，1H，与7.80ppm处的峰部分重叠)，7.57-7.52(m，4H)，7.42(d，J＝7.2Hz，1H)，7.15-7.08(m，2H)，6.93(d，J＝8.0Hz，1H)，6.64(t，J＝7.8Hz，1H)，6.03(d，J＝7.6Hz，1H)，4.60(d，J＝16.4Hz，1H)，4.55(d，J＝17.2Hz，1H)，4.37(s，2H)，3.44(t，J＝8.6Hz，1H)，2.91(s，6H)，2.33-2.24(m，2H)；MS ESI 492.3[M+H]+，计算值[C30H29N5O2+H]+492.2。
实施例A165.2-((1R * ，2S * )-(E)-2′-氧代-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-1′-基)乙酰胺2，2，2- 三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201321
由2-((1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-2′-氧代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-1′-基)乙酰胺(22.9mg，0.05mmol)和(E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(24.6mg，0.075mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝2mL/1mL，4mol％Pd(PPh3)4，120℃，2h)获得白色固体状标题化合物(12mg，37％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，7.76(d，J＝8.4Hz，2H)，7.57-7.50(m，5H)，7.15-7.08(m，2H)，6.93(d，J＝8.0Hz，1H)，6.64(t，J＝7.4Hz，1H)，6.03(d，J＝7.6Hz，1H)，4.60(d，J＝16.8Hz，1H)，4.55(d，J＝16.8Hz，1H)，4.30(s，2H)，3.52-3.40(m，3H)，2.98(t，J＝11.6Hz，2H)，2.32-2.22(m，2H)，2.00-1.68(m，5H)，1.60-1.46(m，1H)；MS ESI 532.4[M+H]+，计算值[C33H33N5O2+H]+532.3。
实施例A167.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-乙基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201322
由(1*R，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-乙基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(42.9mg，0.1mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(29mg，0.1mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝2mL/1mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，120℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(19.5mg，34％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.8Hz，1H)，7.76(d，J＝8.0Hz，2H)，7.54-7.50(m，4H)，7.44(s，1H)，7.04(d，J＝8.4Hz，1H)，6.86(d，J＝8.0Hz，1H)，6.82(d，J＝8.0Hz，1H)，5.77(s，1H)，4.33(s，2H)，3.34(t，J＝8.0Hz，1H，与MeOH残基部分重叠)，2.88(s，6H)，2.25-2.10(m，4H)，0.65(t，J＝7.6Hz，3H)；MS ESI 463.3[M+H]+，计算值[C30H30N4O+H]+463.2。
实施例A169.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201331
由(1*R，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(41.5mg，0.1mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(43mg，0.15mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝2mL/1mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，120℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(27mg，48％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.00(d，J＝8.4Hz，1H)，7.75(d，J＝8.0Hz，2H)，7.53(s，2H，与7.52ppm处的峰部分重叠)，7.52(d，J＝8.8Hz，2H，与7.53ppm处的峰部分重叠)，7.46(s，1H)，7.03(d，J＝8.4Hz，1H)，6.86(d，J＝8.0Hz，1H)，6.82(d，J＝7.6Hz，1H)，5.83(s，1H)，4.33(s，2H)，3.32(t，J＝8.4Hz，1H，与MeOH残基部分重叠)，2.88(s，6H)，2.22-2.13(m，2H)，1.88(s，3H)；MS ESI 449.2[M+H]+，计算值[C29H28N4O+H]+449.2。
实施例A174.(1R * ，2S * )-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(4-甲基哌嗪-1-基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201341
向粗(1R*，2S*)-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(97mg，0.2mmol)和1-(4-溴苯基)-4-甲基哌嗪(51mg，0.2mmol)于DMF(2mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL)，然后添加Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)。用氩气吹扫所得混合物并在125℃微波处理2h。通过制备型HPLC纯化，然后通过MeOH研磨获得白色固体状标题化合物(4mg，3％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.00(d，J＝8.0Hz，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，2H)，7.46(s，1H，与7.44ppm处的峰部分重叠)，7.44(d，J＝16.4Hz，1H，与7.46ppm处的峰部分重叠)，7.31(d，J＝16.8Hz，1H)，7.10-7.00(m，3H)，6.84(d，J＝8.4Hz，1H)，6.62(d，J＝7.2Hz，1H)，5.59(s，1H)，4.01-3.00(m，12H)，2.99(s，3H)，2.30-2.15(m，2H)；MS ESI 506.3[M+H]+，计算值[C31H31N5O2+H]+506.2。
实施例A175.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(4-甲基哌嗪-1-基)苯 乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸 盐
Figure BPA00001624093201342
标题化合物以类似于实施例A51B的方式，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(36.0mg，0.083mmol)和(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪(31.9mg，0.097mmol)来制备。用MeOH(3mL)稀释反应混合物，并倒在20cc PoraPak Rxn Cx滤筒上。用MeOH(20mL)冲洗后，用2M NH3∶MeOH(20mL)洗脱标题化合物。真空去除溶剂后，将标题化合物通过制备型HPLC纯化获得为TFA盐的标题化合物(黄色固体，23.3mg，45％)。1H NMR与实施例A174相同；MS ESI 506.3[M+H]+，计算值[C31H31N5O2+H]+506.3。
实施例A177.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(2-吗啉代乙基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201351
向20mL微波小瓶中的4-(4-溴代苯乙基)吗啉(731mg，2.71mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.5mL，2.95mmol，1.1eq.)的混合物添加Et3N(0.76mL，5.4mmol，2eq.)，然后添加Pd(ptBu3)2(14mg，0.027mmol，1mol％)。用氩气吹扫所得混合物，然后加盖并在80℃(油温)下加热2h。冷却至室温后，用饱和NaHCO3(10mL)、H2O(10mL)终止反应，用EtOAc(30mLx2)萃取并经Na2SO4干燥。蒸发溶剂后，残余物通过Biotage柱体系(EtOAc/己烷梯度：0-100％)纯化以获得白色固体状(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯乙基)吗啉(714mg，77％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.42(d，J＝8.0Hz，2H)，7.38(d，J＝19.0Hz，1H)，7.19(d，J＝7.8Hz，2H)，6.13(d，J＝18.3Hz，1H)，3.75(t，J＝4.4Hz，4H)，2.84-2.77(m，2H)，2.63-2.56(m，2H)，2.53(br，假s，4H)，1.32(s，12H)。
向在20mL微波小瓶中的(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯乙基)吗啉(138mg，0.4mmol)于PhCH3/EtOH(8mL/4mL)中的混合物添加1M Na2CO3(0.8mL，0.8mmol)，然后添加Pd(PPh3)4(23mg，0.02mmol，5mol％)。用氩气吹扫所得混合物并在125℃下微波处理2h。冷却至室温后，用H2O(20mL)稀释混合物，用EtOAc(30mLx2)萃取并经Na2SO4干燥。去除溶剂后，将残余物再溶于DMF(4mL)中并通过制备型HPLC纯化以获得浅黄色固体状标题化合物(115mg，45％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.53(d，J＝7.2Hz，2H)，7.43(s，1H)，7.37(d，J＝6.4Hz，2H)，7.28(d，J＝7.2Hz，2H)，6.95(d，J＝7.6Hz，1H)，6.81(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(d，J＝7.6Hz，1H)，5.57(s，1H)，4.06(d，J＝11.2Hz，2H)，3.80(t，J＝11.2Hz，2H)，3.56(d，J＝11.2Hz，2H)，3.38(t，J＝7.6Hz，2H)，3.27-3.12(m，5H)，3.09-3.05(m，2H)，，2.20-2.10(m，2H)；MS ESI 521.4[M+H]+，计算值[C32H32N4O3+H]+521.2
旋光度[α]23 D＝-90°(c 0.67，MeOH)。
实施例A178.(1R * ，2S * )-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(2-吗啉基乙基)苯 乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸 盐
Figure BPA00001624093201361
向(1R*，2S*)-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.2mmol)和4-(4-溴苯乙基)吗啉(54mg，0.2mmol)于DMF(2mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL)，然后添加Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)。用氩气吹扫所得混合物，然后在125℃下微波处理2h。混合物通过制备型HPLC纯化获得白色固体状标题化合物36mg，28％，TFA盐。光谱数据与实施例A177中获得的相同。
实施例A179.(1R * ，2S * )-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(4-甲基哌嗪-1-羰 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201371
向粗(1R*，2S*)-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(100mg，0.2mmol)和(4-溴苯基)(4-甲基哌嗪-1-基)甲酮(56.6mg，0.2mmol)于DMF(2mL)中的混合物添加iPr2NEt(0.07mL)，然后添加Pd(OAc)2(2.2mg，0.01mmol)和P(o-tol)3(6.7mg，0.022mmol)。用氩气吹扫所得混合物，然后在125℃下微波处理2h。LC-MS显示反应未完全，将其在130℃下再微波处理90min。通过制备型HPLC纯化获得浅黄色固体状标题化合物(32mg，25％)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.97(d，J＝8.4Hz，1H)，7.71(d，J＝8.4Hz，2H)，7.55-7.45(m，5H)，7.01(d，J＝8.4Hz，1H)，6.83(d，J＝8.4Hz，1H)，6.59(dd，J＝8.4Hz，2.4Hz，1H)，5.58(d，J＝2.4Hz，1H)，3.65-3.10(m，12H)，2.96(s，3H)，2.25-2.14(m，2H)；MS ESI 534.4[M+H]+，计算值[C32H31N5O3+H]+534.3。
实施例A180.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201372
由(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-1′-(2-甲氧基乙基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(92mg，0.2mmol)和(E)-N，N-二甲基-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(86mg，0.3mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝3mL/1.5mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，120℃，2h)获得无色粘性油状标题化合物(30mg，25％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.99(d，J＝8.4Hz，1H)，7.75(d，J＝8.0Hz，2H)，7.55-7.45(m，5H)，7.13-7.07(m，2H)，7.01(d，J＝8.4Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.0Hz，1H)，6.01(d，J＝7.2Hz，1H)，4.32(s，2H)，4.05(t，J＝5.4Hz，2H)，3.71(t，J＝5.6Hz，2H)，3.41-3.35(m，4H)，2.89(s，6H)，2.28-2.18(m，2H)；MS ESI 493.4[M+H]+，计算值[C31H32N4O2+H]+493.3。
实施例A182.(1R * ，2S * )-5′-甲氧基-2-(3-(4-(哌嗪-1-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201381
由(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(86.2mg，0.2mmol)和(E)-1-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪(62.8mg，0.2mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝3mL/1.5mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得黄色固体状标题化合物(42mg，35％，TFA盐)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.89(d，J＝8.8Hz，1H)，7.50(d，J＝8.8Hz，2H)，7.47(s，1H)，7.35(d，J＝16.8Hz，1H)，7.22(d，J＝16.8Hz，1H)，7.02(d，J＝8.8Hz，2H)，6.96(d，J＝8.4Hz，1H)，6.86(d，J＝8.8Hz，1H)，6.60(dd，J＝8.6Hz，J＝2.2Hz，1H)，5.58(s，1H)，3.49-3.43(m，4H)，3.40-3.30(m，5H)，3.23(s，3H)，2.25-2.15(m，2H)；MS ESI 492.3[M+H]+，计算值[C30H29N5O2+H]+492.2。
实施例A185.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-反式-2，6-二甲基吗啉代)甲基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201391
由相同的三批(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和顺式-2，6-二甲基-4-(4-((E)-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(150mg，0.42mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝9mL/4.5mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得浅黄白色固体状标题化合物(445mg，57％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.75(d，J＝8.4Hz，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，2H)，7.46(d，J＝8.0Hz，2H)，7.42(s，1H)，7.35(d，J＝16.8Hz，1H)，7.30(d，J＝16.4Hz，1H)，6.82(d，J＝9.2Hz，1H，与6.80ppm处的峰部分重叠)，6.80(d，J＝8.8Hz，与6.82ppm处的峰部分重叠)，6.51(d，J＝8.4Hz，1H)，5.19(s，1H)，4.28(s，2H)，3.92-3.80(m，2H)，3.40-3.30(m，2H)，3.27(t，J＝8.4Hz，1H)，3.15(s，3H)，2.70(t，J＝11.4Hz，2H)，2.15-2.05(m，2H)，1.18(d，J＝6.0Hz，6H)；MS ESI 535.3[M+H]+，计算值[C33H34N4O3+H]+535.3。
旋光度[α]23 D＝-91°(c 0.31，MeOH)。
实施例A186.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-反式-2，6-二甲基吗啉代)甲 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201392
向(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(431mg，1mmol)、(E)-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲醛(284mg，1.1mmol)于PhCH3/EtOH(8mL/4mL)中的混合物添加1M Na2CO3(2mL，2mmol)，然后添加Ph(PPh3)4(29mg，0.025mmol)。用氩气吹扫所得混合物，然后在125℃下微波处理2h。在水性处理(用EtOAc萃取)后去除溶剂，将残余物再溶于DCE/THF(45mL/15mL)中。添加顺式-2，6-二甲基吗啉(115mg，1mmol)和NaBH(OAc)3(254mg，1.2mmol)，然后添加AcOH(0.2mL)。将所得混合物在室温下搅拌3h并用饱和NaHCO3(20mL)、H2O(20mL)、饱和盐水(20mL)终止反应。用EtOAc(60mLx2)萃取溶液并经Na2SO4干燥。去除溶剂后，残余物通过制备型HPLC纯化以获得浅黄色固体状标题化合物(132mg，20％，2步骤)。光谱数据与实施例A185中获得的相同。
实施例A187.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
由相同的三批(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和(E)-1-乙基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪(不纯，205mg，0.6mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝6mL/6mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得白色固体状标题化合物(414mg，55％，TFA盐)(制备型-HPLC，然后由MeOH研磨)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.96(d，J＝8.4Hz，1H)，7.53(d，J＝8.4Hz，2H)，7.45(s，1H)，7.41(d，J＝16.8Hz，1H)，7.28(d，J＝16.8Hz，1H)，7.03-6.98(m，3H)，6.83(d，J＝8.4Hz，1H)，6.60(dd，J＝8.4Hz，2.0Hz，1H)，5.59(d，J＝2.0Hz，1H)，3.91(d，J＝12.8Hz，2H)，3.66(d，J＝11.6Hz，2H)，3.35(t，J＝8.4Hz，1H，与MeOH残基部分重叠)，3.29(q，J＝7.2Hz，2H，与3.25ppm处的峰部分重叠)，3.25(s，3H，与3.29ppm和3.20ppm处的峰部分重叠)，3.20(t，J＝11.8Hz，2H，与3.25ppm处的峰部分重叠)，3.08(t，J＝12.2Hz，2H)，2.25-2.15(m，2H)，1.39(t，J＝7.2Hz，3H)；MS ESI 520.4[M+H]+，计算值[C32H33N5O2+H]+520.3。
旋光度[α]23 D＝-108°(c 0.37，MeOH)。
实施例A188.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-(4-乙基哌嗪-1-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201411
由(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(86.2mg，0.2mmol)和(E)-1-乙基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪(75mg，0.22mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝3mL/1.5mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(53mg，42％，TFA盐)。光谱数据与实施例A187中获得的相同。
实施例A189.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-(4-异丙基哌嗪-1-基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
由(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(86.2mg，0.2mmol)和(E)-1-异丙基-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)哌嗪(78.3mg，0.22mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝3mL/1.5mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(85mg，66％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.99(d，J＝8.8Hz，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，2H)，7.46(s，1H，与7.44ppm处的峰部分重叠)，7.44(d，J＝16.4Hz，1H，与7.46ppm处的峰部分重叠)，7.31(d，J＝16.4Hz，1H)，7.08-7.00(m，3H)，6.84(d，J＝8.4Hz，1H)，6.61(d，J＝8.0Hz，1H)，5.59(s，1H)，3.96(d，J＝13.6Hz，2H)，3.65-3.55(m，3H)，3.40-3.30(m，6H)，3.08(t，J＝9.0Hz，2H)，2.26-2.15(m，2H)，1.43(d，J＝5.6Hz，6H)；MS ESI 534.4[M+H]+，计算值[C33H35N5O2+H]+534.3。
实施例A190.(1R * ，2S * )-2-(3-((E)-2-(2-乙基异吲哚啉-5-基)乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201422
由(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(86.2mg，0.2mmol)和粗(E)-2-甲基-5-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)异吲哚(73.0mg，0.24mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝3mL/1.5mL，5mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得浅黄色半固体状标题化合物(54mg，46％，TFA盐)。1HNMR(400MHz，CD3OD)δ7.93(d，J＝8.4Hz，1H)，7.61(s，1H，与7.60ppm处的峰部分重叠)，7.60(d，J＝8.0Hz，1H，与7.61ppm处的峰部分重叠)，7.48-7.37(m，4H)，6.90(d，J＝8.4Hz，1H)，6.83(d，J＝8.4Hz，1H)，6.59(dd，J＝8.4Hz，1.6Hz，1H)，5.58(d，J＝1.2Hz，1H)，4.95-4.80(m，2H)，4.60-4.54(m，2H)，3.50(q，J＝7.2Hz，2H)，3.31(t，1H，与MeOH残基部分重叠)，3.24(s，3H)，2.23-2.13(m，2H)，1.44(t，J＝7.2Hz，1H)；MS ESI 477.3[M+H]+，计算值[C30H28N4O2+H]+477.2。
实施例A194.(1R，2S)-(E)-5′-甲氧基-2-(3-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯 乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸 盐
Figure BPA00001624093201431
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(431mg，1mmol)和((E)-4-(2-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯氧基)乙基)吗啉(359mg，1mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝4.5mL/9mL，2mol％Pd(PPh3)4，125℃，2h)获得白色固体状标题化合物(431mg，66％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.72(d，J＝8.4Hz，1H)，7.40-7.34(m，3H)，7.22(d，J＝16.4Hz，1H)，7.10(d，J＝16.4Hz，1H)，6.89(d，J＝8.0Hz，2H)，6.80(d，J＝10.0Hz，1H，与6.78ppm处的峰部分重叠)，6.78(d，J＝9.2Hz，1H，与6.80ppm处的峰部分重叠)，6.49(d，J＝8.4Hz，1H)，5.55(s，1H)，4.31(s，2H)，4.05-3.97(m，4H)，3.62-3.50(m，4H)，3.30-3.15(m，3H；t，J＝8.2Hz，1H与m部分重叠，2H)，3.12(s，3H)，2.10-2.00(m，2H)；MS ESI 537.4[M+H]+，计算值[C32H32N4O4+H]+537.2。
旋光度[α]23 D＝-85°(c 0.24，MeOH)。
实施例A195.(1R，2S)-(E)-5′-甲基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201441
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(415mg，1mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(329mg，1mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝4.5mL/9mL，2mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得黄色固体状标题化合物(470mg，78％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.73(d，J＝8.4Hz，1H)，7.53(d，J＝8.0Hz，2H)，7.44(d，J＝8.0Hz，2H)，7.38(s，1H)，7.32(d，J＝16.8Hz，1H)，7.27(d，J＝16.8Hz，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.77(d，J＝8.0Hz，1H)，6.73(d，J＝8.0Hz，1H)，5.78(s，1H)，4.29(s，2H)，3.99(d，J＝11.2Hz，2H)，3.75(t，J＝11.6Hz，2H)，3.42-3.32(m，2H)，3.21(t，J＝8.4Hz，1H)，3.18-3.08(m，2H)，2.09-2.01(m，2H)，1.72(s，3H)；MS ESI 491.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O2+H]+491.2。
旋光度89°[α]23 D＝-89°(c 0.28，MeOH)。
实施例A196.(1R * ，2S * )-(E)-5′-甲基-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201442
由(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(83mg，0.2mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(66mg，0.2mmol)采用制备实施例A51B的方法获得黄色固体状标题化合物(27mg，22％，TFA盐)。光谱数据与实施例A195中获得的相同。
实施例A198.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-顺式-2，6-二甲基吗啉代)甲基) 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201451
由两批(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(160mg，0.4mmol)和顺式-2，6-二甲基-4-(4-((E)-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(157mg，0.42mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝9mL/4.5mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，110℃，2.5h)获得白色固体状标题化合物(284mg，57％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.74(d，J＝8.4Hz，1H)，7.58(d，J＝8.0Hz，2H)，7.47(d，J＝7.6Hz，2H)，7.40-7.28(m，3H)，6.96-6.99(m，2H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.40(t，J＝7.4Hz，1H)，5.89(d，J＝7.6Hz，1H)，4.28(s，2H)，3.93-3.80(m，2H)，3.34(d，J＝13.6Hz，2H，与MeOH残基部分重叠)，3.24(t，J＝7.6Hz，1H)，2.70(t，J＝7.4Hz，2H)，2.08(p，J＝7.6Hz，2H)，1.18(d，J＝6.0Hz，6H)；MSESI 505.3[M+H]+，计算值[C32H32N4O2+H]+505.3。
旋光度[α]23 D＝-134°(c 0.27，MeOH)。
实施例A199.(1R，2S)-(E)-2-(3-(3-氟-4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201461
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(172mg，0.4mmol)和(E)-4-(2-氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(145mg，0.42mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝6mL/6mL，2.5mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得白色固体状标题化合物(154mg，60％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.78(d，J＝8.4Hz，1H)，7.52(t，J＝7.4Hz，1H)，7.45-7.35(m，4H)，7.29(d，J＝16.4Hz，1H)，6.87(d，J＝8.4Hz，1H)，6.80(d，J＝8.4Hz，1H)，6.54(d，J＝8.4Hz，1H)，5.56(s，1H)，4.40(s，2H)，4.10-3.90(m，4H)，3.50-3.20(m，5H)，3.18(s，3H)，2.18-2.08(m，2H)；MS ESI 525.3[M+H]+，计算值[C31H29FN4O3+H]+525.2。
旋光度[α]23 D＝88°(c 0.27，MeOH)。
实施例A200.(1R，2S)-(E)-2-(3-(3-氟代-4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201462
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(200mg，0.5mmol)和(E)-4-(2-氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(190mg，0.55mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝7mL/7mL，2mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得白色固体状标题化合物(228mg，75％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.50(d，J＝8.4Hz，1H)，7.49(t，J＝7.6Hz，1H)，7.40-7.30(m，4H)，7.24(d，J＝16.8Hz，1H)，6.97-6.82(m，3H)，6.42(t，J＝7.4Hz，1H)，5.90(d，J＝7.6Hz，1H)，4.36(s，2H)，4.10-3.70(m，4H)，3.50-3.15(m，5H)，2.12-2.03(m，2H)；MS ESI 495.3[M+H]+，计算值[C30H27FN4O2+H]+495.2。
旋光度[α]23 D＝-130°(c 0.40，MeOH)。
实施例A201.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((顺式-2，6-二甲基哌啶-1-基)甲 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
Figure BPA00001624093201471
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(80.2mg，0.2mmol)和顺式-2，6-二甲基-1-(4-((E)-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(78.5mg，0.22mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝1.5mL/3mL，2mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(91mg，74％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.90(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68-7.60(s，1H于7.51ppm和d，J＝16.8Hz，于7.50ppm处重叠的1H，1H)，7.64(d，J＝8.8Hz，1H，与7.66ppm处的峰部分重叠)，7.55-7.38(m，5H)，7.00(t，J＝7.6Hz，1H)，6.96-6.90(m，2H)；6.50(t，J＝7.6Hz，1H)，5.96(d，J＝7.2Hz，1H)，4.54(s，1.2H)，4.26(s，0.8H)，3.60-3.50(m，0.7H)，3.28(t，J＝8.0，1H，与MeOH残基部分重叠)，3.20-3.10(m，1.2H)，2.20-2.08(m，2H)，1.96-1.35(m，12H)；MS ESI503.3[M+H]+，计算值[C33H34N4O+H]+503.3。
旋光度[α]23 D＝-133°(c 0.22，MeOH)。
实施例A203.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((顺式-2，6-二甲基哌啶-1-基)甲 基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201481
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(86.2mg，0.2mmol)和顺式-2，6-二甲基-1-(4-((E)-2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(78.5mg，0.22mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝1.5mL/3mL，2mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得白色固体状标题化合物(78mg，60％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.91(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68-7.63(s，1H于7.66ppm和d，J＝16.4Hz，在7.66ppm处重叠的1H；2H)，7.53(d，J＝7.6Hz，1H)，7.50-7.40(m，4H)，6.96(d，J＝8.0Hz，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.57(d，J＝8.4Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.56(s，1.2H)，4.28(s，0.8H)，3.60-3.50(m，0.7H)，3.31(t，1H，与MeOH残基重叠)，3.23-3.13(m，4.3H；OMe和1.3H)，2.22-2.12(m，2H)，2.00-1.35(m，12H)；MS ESI 533.4[M+H]+，计算值[C34H36N4O2+H]+533.3。
旋光度[α]23 D＝-93°(c 0.27，MeOH)。
实施例A204.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(2-吗啉代乙氧基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201482
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(80mg，0.2mmol)和(E)-4-(2-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯氧基)乙基)吗啉(72mg，0.2mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝1.5mL/3mL，2mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(94mg，74％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.83(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47(d，J＝8.0Hz，2H)，7.38(s，1H)，7.32(d，J＝16.8Hz，1H)，7.19(d，J＝16.4Hz，1H)，7.02-6.93(m，3H)，6.91(d，J＝7.2Hz，1H，与6.89ppm处的峰部分重叠)，6.89(d，J＝8.0Hz，1H，与6.91ppm处的峰部分重叠)，6.48(t，J＝7.2Hz，1H)，5.93(d，J＝7.6Hz，1H)，4.36(t，J＝4.0Hz，2H)，4.10-3.76(m，4H)，3.65-3.50(m，4H)，3.30-3.18(m，3H)，2.15-2.05(m，2H)；MS ESI 507.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O3+H]+507.2。
旋光度[α]23 D＝-139°(c 0.29，MeOH)。
实施例A205.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-(2-吗啉代乙基)苯乙烯基)-1H- 吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201491
由(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(80mg，0.2mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯乙基)吗啉(69mg，0.2mmol)采用制备实施例A51B的方法(PhCH3/EtOH＝1.5mL/3mL，2mol％Pd(PPh3)4，110℃，2h)获得浅黄色固体状标题化合物(89mg，74％，TFA盐)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.86(d，J＝8.4Hz，1H)，7.50(d，J＝7.6Hz，2H)，7.37(d，J＝16.4Hz，2H)，7.34(s，1H)，7.26(d，J＝7.6Hz，2H)，6.97(t，J＝7.2Hz，1H)，6.91(d，J＝7.2Hz，2H)，6.49(t，J＝7.4Hz，1H)，5.94(t，J＝7.6Hz，1H)，4.04(d，J＝12.0Hz，2H)，3.80(t，J＝11.8Hz，2H)，3.54(d，J＝12.0Hz，2H)，3.36(t，J＝8.8Hz，2H)，3.27(t，J＝8.6Hz，1H)，3.15(t，J＝11.0Hz，2H)，3.05(t，J＝8.4Hz，2H)，2.16-2.06(m，2H)；MS ESI491.3[M+H]+，计算值[C31H30N4O2+H]+491.2。
旋光度[α]23 D＝-141°(c 0.22，MeOH)。
实施例A206.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟 乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(700mg，1.62mmol)和(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)乙胺(588.5mg，1.86mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(448mg，46％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.02(d，J＝8.4Hz，1H)，7.75(d，J＝8.0Hz，2H)，7.54-7.49(m，5H)，7.04(s，J＝8.4Hz，1H)，6.82(d，J＝8.0Hz，1H)，6.60(d，J＝8.4Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.36(s，2H)，3.36(t，J＝8.4Hz，1H)，3.31-3.18(bm，7H)，2.26-2.23(m，1H)，2.20-2.17(m，1H)，1.37(t，J＝7.2Hz，6H)；MS ESI 493.4[M+H]+，计算值[C31H32N4O2+H]+493.26。
旋光度：[α]22 D＝-80°(c 0.286，甲醇)。
实施例A208.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)-5′-氟代螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201511
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R*，2S*)-5′-氟代-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(75mg，0.178mmol)和(E)-N，N-二甲基-1(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)甲胺(63.9mg，0.222mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(42mg，41.4％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.04(d，J＝8.4Hz，1H)，7.77(d，J＝8.0Hz，2H)，7.57(s，2H)，7.56-7.50(m，3H)，7.05(d，J＝8.4Hz，1H)，6.91-6.88(m，1H)，6.82-6.77(m，1H)，5.77(dd，J＝8.8Hz，J＝2.4Hz，1H)，4.33(s，2H)，3.42-3.38(m，1H)，2.88(s，6H)，2.32-2.29(m，1H)，2.24-2.20(m，1H)；MS ESI 453.2[M+H]+，计算值[C28H25FN4O+H]+453.2。
实施例A211.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺-[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201512
A.N-乙基-N-(4-乙炔基苄基)乙胺
室温下将三乙酰氧基硼氢化钠(1.22g，5.76mmol)加入4-乙炔基苯甲醛(0.50g，3.84mmol)的1，2-二氯乙烷(18.75mL)溶液中。然后在室温下在N2气氛下将二乙胺(0.61mL，5.76mmol)和醋酸(0.12mL，1.92mmol)加入混合物中，且将反应物搅拌18h。用饱和碳酸氢钠溶液(10mL)终止反应，将混合物搅拌15min。然后添加二氯甲烷(18.75mL)并分层。水层采用二氯甲烷(10mL)萃取，合并的有机层用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。然后在40℃/200毫巴下真空去除溶剂。所得油状残余物通过硅胶柱色谱采用二氯甲烷∶甲醇(100至90∶10)梯度纯化以获得浅黄色稠油状标题化合物(0.455g，63.2％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.46(d，J＝8.0Hz，2H)，7.76(d，J＝7.6Hz，2H)，3.78(s，2H)，3.08(s，1H)，2.72-2.66(m，4H)，1.13(t，J＝7.2Hz，6H)；MS ESI187.9[M+H]+，计算值[C13H17N+H]+187.14。
B.(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)乙胺
根据实施例A42A的合成方法，采用N-乙基-N-(4-乙炔基苄基)乙胺(0.70g，3.73mmol)和4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(1.62mL，11.21mmol)获得微黄橙色油状标题化合物(1.02g，86％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.43-7.35(m，3H)，7.30-7.27(m，2H)，6.12(d，J＝18.4Hz，1H)，3.56(s，2H)，2.54-2.49(m，4H)，1.32(s，12H)，1.04(t，J＝7.2Hz，6H)；MS ESI 316.1[M+H]+，计算值[C29H30BNO2+H]+316.24。
该中间体也可通过以下方法制备：
根据实施例A211A合成的方法，采用(E)-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲醛(1.93g，7.48mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(2.38g，11.22mmol)和二乙胺(1.16mL，11.22mmol)，以在SNAP 25g柱上用己烷∶乙酸乙酯(100至72∶25)梯度纯化后，获得浅黄色稠油状标题化合物(1.55g，66％)。
D.(1R*，2S*)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺-[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(70.0mg，0.174mmol)和(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)乙胺(68.76mg，0.218mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(29mg，29％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.01(d，J＝8.4Hz，1H)，7.76(d，J＝8.0Hz，2H)，7.56-7.52(m，4H)，7.48(s，1H)，7.04(d，J＝7.2Hz，2H)，6.93(d，J＝7.6Hz，1H)，6.58(t，J＝7.2Hz，1H)，5.98(d，J＝7.6Hz，1H)，4.36(s，2H)，3.29-3.17(m，5H)，2.25(t，J＝4.8Hz，1H)，2.21-2.17(m，1H)，1.37(t，J＝7.2Hz，6H)；MSESI 463.3[M+H]+，计算值[C30H30N4O+H]+463.25
实施例A212.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)苯乙烯 基)-1H-吲唑-6-基)螺-[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201531
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(600mg，1.50mmol)和(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)乙胺(589.3mg，1.87mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(360mg，42％)。光谱数据与实施例A211D获得的相同。
旋光度：[α]23 D＝-194°(c 0.577，甲醇)。
实施例A215.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)-3，5-二氟 代苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟醋酸盐
Figure BPA00001624093201532
将(1R*，2S*)-5′-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(50.0mg，0.15mmol)、1-(4-溴-2，6-二氟代苯基)-N，N-二甲基甲胺(41.51mg，0.165mmol)、Pd(OAc)2(1.69mg，0.0075mmol)、P(oTol)3(5.0mg，0.016mmol)和DIPEA(39.0mg，0.30mmol)于DMF(1.0mL)中的混合物密封并在搅拌下在125℃的微波辐射下加热2h。然后用乙酸乙酯(20mL)和水(5mL)稀释反应物并分层。水层采用乙酸乙酯(10mL)萃取，且合并的乙酸乙酯层用盐水(4.0mL)洗涤并经硫酸钠干燥，然后在40℃/100毫巴下真空浓缩以获得微黄色残留物。粗产物通过制备型HPLC纯化以获得浅黄色固体状标题化合物(9.5mg，10％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.80(d，J＝8.4Hz，1H)，7.47(s，1H)，7.43(d，J＝16.4Hz，1H)，7.30-7.25(m，3H)，6.87(d，J＝8.4Hz，1H)，6.79(d，J＝8.4Hz，1H)，6.53(d，J＝8.8Hz，1H)，5.56(s，1H)，4.43(s，2H)，3.28(t，J＝10.0Hz，1H)，3.19(s，3H)，2.96(s，6H)，2.18-21.2(m，2H)；MS ESI 501.3[M+H]+，计算值[C29H26F2N4O2+H]+501.21。
实施例A216.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)-3，5-二氟代 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮 2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201541
A.(E)-1-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)-N，N-二甲基甲胺
该中间体通过两种不同的合成方法制备。
方法1.
a.1-(4-溴-2，6-二氟代苯基)-N，N-二甲基甲胺
根据实施例A211A合成的方法，采用4-溴-2，6-二氟代苯甲醛(500mg，2.26mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(959mg，4.52mmol)和2M二甲胺溶液(2.626mL，4.52mmol)获得无色油状标题化合物(452mg，79％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.09(d，J＝6.8Hz，2H)，3.54(s，2H)，2.26(s，6H)；MS ESI 249.9[M+H]+，计算值[C9H10BrF2N+H]+249.0。
b.1-(4-乙炔基-2，6-二氟苯基)-N，N-二甲基甲胺
在氩气氛下将1-(4-溴-2，6-二氟苯基)-N，N-二甲基甲胺(0.45g，1.79mmol)、三甲基甲硅烷基乙炔(0.356mL，2.24mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(50.49mg，0.071mmol)、CuI(3.42mg，0.017mmol)和DIPEA(0.46mL，2.69mmol)于DMF(3.0mL)中的混合物密封，并在搅拌下在100℃的微波辐射下加热2h。用甲醇(9mL)稀释反应物，然后滤出所得沉淀。在45℃/75毫巴下真空浓缩母液以获得棕色稠油。残余物在Biotage上采用SNAP 25g柱用己烷∶乙酸乙酯(100至80∶20)梯度纯化以获得为三甲基甲硅烷基醚的黄色油状物(0.250g，52％)；MS ESI 268.0[M+H]+，计算值[C14H19F2NSi+H]+268.13。
上述三甲基甲硅烷基醚的脱保护在甲醇(10mL)和10％K2CO3溶液中(1.67mL)在室温下进行1.5h。40℃下真空去除溶剂，然后在室温下添加水(5mL)。采用二氯甲烷(2x15mL)萃取产物，合并的有机层用盐水洗涤并经硫酸钠干燥。40℃/200毫巴下真空去除溶剂以获得微褐色油状物，其在Biotage上用SNAP 25g柱用己烷∶乙酸乙酯(100至75∶75)梯度纯化以获得黄色油状物(98mg，54％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.04(d，J＝6.8Hz，2H)，3.68(s，2H)，3.17(s，1H)，2.35(s，6H)；MS ESI 195.8[M+H]+，计算值[C11H11F2N+H]+195.09。
c.(E)-1-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)-N，N-二甲基甲胺
根据实施例A42A合成的方法，采用1-(4-乙炔基-2，6-二氟苯基)-N，N-二甲基甲胺(97mg，0.496mmol)和4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.21mL，1.488mmol)，以在Biotage上采用KPNH SNAP 25gm柱用己烷∶乙酸乙酯(100至50∶50)梯度纯化后获得棕色半固体状标题化合物(67mg，41％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24(d，J＝18.4Hz，1H)，6.99(d，J＝7.6Hz，2H)，6.13(d，J＝18.4Hz，1H)，3.57(s，2H)，2.28(s，6H)，1.32(s，12H)；MS ESI 324.2[M+H]+，计算值[C17H24BrF2NO2+H]+323.19。
方法2
a.(E)-2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲醛
根据实施例A51A合成的方法，采用4-溴代-2，6-二氟代苯甲醛(1.10g，4.98mmol)和4，4，5，5-四甲基-2-乙烯基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.97mL，5.72mmol)产生无色油状标题化合物(1.10g，76％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ10.31(s，1H)，7.05(d，J＝9.6Hz，2H)，7.22(d，J＝8.8Hz，1H)，6.28(d，J＝18.8Hz，1H)，1.33(s，12H)；MS ESI295.1[M+H]+，计算值[C15H17BF2O3+H]+295.13。
b.(E)-1-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)-N，N-二甲基甲胺
根据实施例A211A合成的方法，采用(E)-2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲醛(1.10g，3.74mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(1.19g，5.61mmol)和2M二甲胺溶液(3.74mL，7.48mmol)产生无色稠油状标题化合物(0.571g，47％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24(d，J＝18.4Hz，1H)，6.99(d，J＝7.6Hz，2H)，6.13(d，J＝18.4Hz，1H)，3.57(s，2H)，2.28(s，6H)，1.32(s，12H)；MS ESI 324.2[M+H]+，计算值[C17H24BrF2NO2+H]+323.19。
B.(1R，2S)-2-(3-(4-((二甲基氨基)甲基)-3，5-二氟代苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(500mg，1.15mmol)和(E)-1-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯基)-N，N-二甲基甲胺(393.4mg，1.21mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(400mg，56.1％)。光谱数据与实施例A215中获得的相同。
旋光度：[α]22 D＝-88°(c 0.354，甲醇)。
实施例A217.(1R * ，2S * )-(E)-2-(3-(3，5-二氟代-4-(吗啉代甲基)苯 乙烯基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2- 三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201571
A.1-(4-溴-2，6-二氟苯基)-吗啉
根据实施例A211A合成的方法，采用4-溴代-2，6-二氟代苯甲醛(1.0g，4.52mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(1.438g，6.78mmol)和吗啉(0.59mL，6.78mmol)获得浅黄色油状标题化合物(1.30g，98.4％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.09(d，J＝6.4Hz，2H)，3.69(d，J＝4.4Hz，4H)，3.63(s，2H)，2.49(bm，4H)；MS ESI 292.1[M+H]+，计算值[C11H12BrF2NO+H]+293.0。
B.1-(4-乙炔基-2，6-二氟代苯基)吗啉
根据实施例A216A方法1b的合成过程，采用1-(4-溴代-2，6-二氟代苯基)-吗啉(1.32g，4.51mmol)获得浅棕色油状标题化合物(0.65g，60％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.02(d，J＝7.2Hz，2H)，3.71-3.67(m，6H)，3.16(s，1H)，2.50(bm，4H)；MS ESI 238.0[M+H]+，计算值[C13H13F2NO+H]+238.10。
C.(E)-4-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉
根据实施例A42A的合成方法，采用1-(4-乙炔基-2，6-二氟代苯基)吗啉(0.97g，4.08mmol)和4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(1.78mL，12.24mmol)获得乳膏状固体标题化合物(1.21g，81％)。1HNMR(400MHz，CDCl3)δ7.23(d，J＝18.4Hz，1H)，6.99(d，J＝7.6Hz，2H)，6.13(d，J＝18.4Hz，1H)，3.59-3.66(m，6H)，2.51(bm，4H)，1.32(s，12H)；MS ESI 366.1[M+H]+，计算值[C19H26BF2NO3+H]+366.2。
D.(1R*，2S*)-2-(3-(3，5-二氟代-4-(吗啉代甲基)苯乙烯基-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R*，2S*)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(60mg，0.139mmol)和(E)-4-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(58.44mg，0.16mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(29mg，27％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.03(d，J＝8.8Hz，1H)，7.63(d，J＝16.8Hz，1H)，7.52-7.49(m，4H)，7.06(s，J＝8.4Hz，1H)，6.82(d，J＝8.4Hz，1H)，6.60(d，J＝8.8Hz，1H)，5.57(s，1H)，4.51(s，2H)，4.10-3.72(bm，4H)，3.47-3.42(bm，5H)，3.26(s，3H)，2.26-2.23(m，1H)，2.21-2.17(m，1H)；MS ESI 543.3[M+H]+，计算值[C31H28F2N4O3+H]+543.22。
实施例A218.(1R，2S)-(E)-2-(3-(3，5-二氟代-4-(吗啉代甲基)苯乙 烯基)-1H-吲唑-6-基)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三 氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201581
标题化合物根据实施例A51B的方法，通过用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基-)-5′-甲氧基螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(600mg，1.50mmol)和(E)-4-(2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(579.6mg，1.06mmol)替换来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(345mg，40％)。光谱数据与实施例A217中获得的相同。
旋光度：[α]22 D＝-74°(c 0.34，甲醇)。
实施例A219.(1R * ，2S * )-(E)-5′-氟代-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯 基-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R*，2S*)-5′-氟代-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(60.0mg，0.139mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(54.83mg，0.173mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(31.0mg，37％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.04(d，J＝8.8Hz，1H)，7.77(d，J＝7.2Hz，2H)，7.59-7.52(m，5H)，7.05(d，J＝8.0Hz，1H)，6.91-6.88(m，1H)，6.79(t，J＝8.0Hz，1H)，5.74(d，J＝8.8Hz，1H)，4.39(s，2H)，4.08-4.05(bm，2H)，3.76-3.70(bt，2H)，3.42-3.35(m，3H)，3.26-3.23(bm，2H)，2.30(t，J＝5.6Hz，1H)，2.24-2.20(m，1H)；MS ESI 495.3[M+H]+，计算值[C30H27FN4O2+H]+495.22。
实施例A220.(1R，2S)-(E)-5′-氟代-2-(3-(4-(吗啉代甲基)苯乙烯基 -1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
Figure BPA00001624093201592
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-5′-氟代-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(240mg，0.571mmol)和(E)-4-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)吗啉(216.7mg，0.658mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(230mg，66％)。光谱数据与实施例A219获得的相同。
旋光度：[α]22 D＝-136°(c 0.404，甲醇)。
实施例A221.(1R，2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)-3，5-二氟代 苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙 酸盐
Figure BPA00001624093201601
A.N-(4-溴代-2，6-二氟代苄基-)N-乙基乙胺
根据实施例A211A合成的方法，采用4-溴代-2，6-二氟代苯甲醛(610mg，2.76mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(883.35mg，4.15mmol)和二乙胺(425.21mmL，4.15mmol)获得无色油状标题化合物(660mg，86％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.06(d，J＝6.4Hz，2H)，3.61(s，2H)，2.55-2.50(m，4H)，1.07(t，J＝6.8Hz，6H)；MS ESI 279.9[M+H]+，计算值[C11H14BrF2N+H]+278.03。
B.N-乙基-N-(4-乙炔基-2，6-二氟代苄基)乙胺
根据实施例A216A方法1b的合成过程，采用N-(4-溴代-2，6-二氟代苄基-)N-乙基乙胺(660mg，2.37mmol)获得浅棕色油状标题化合物(252mg，48％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ6.99(d，J＝7.2Hz，2H)，3.67(s，2H)，3.13(s，1H)，2.57-2.51(m，4H)，1.08(t，J＝7.2Hz，6H)；MS ESI 224.0[M+H]+，计算值[C13H15F2N+H]+224.12。
C：(E)-N-(2，6-二氟代-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)N-乙基乙胺
根据实施例A42A合成的方法，采用N-乙基-N-(4-乙炔基-2，6-二氟代苄基)乙胺(252mg，1.12mmol)和4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环(0.493mL，3.36mmol)获得乳膏状半固体标题化合物(410mg，90％)。1H NMR(400MHz，CDCl3)δ7.24(d，J＝13.2Hz，1H)，6.97(d，J＝7.6Hz，2H)，6.12(d，J＝17.6Hz，1H)，3.67(s，2H)，2.58-2.52(m，4H)，1.32(s，12H)，1.08(t，J＝6.8Hz，6H)；MS ESI 352.2[M+H]+，计算值[C27H26N6O2+H]+351.22。
该中间体也可通过以下方法制备：
根据实施例A211A合成的方法，采用(E)-2，6-二氟代-4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苯甲醛(1.10g，3.74mmol)、三乙酰氧基硼氢化钠(1.19g，5.61mmol)和二乙胺(0.58mL，5.61mmol)获得奶油色固体标题化合物(0.54g，41％)。
C.(1R，2S)-2-(3-(4-((二乙基氨基)甲基)-3，5-二氟代苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮2，2，2-三氟乙酸盐
标题化合物根据实施例A51B的方法，采用(1R，2S)-2-(3-碘代-1H-吲唑-6-基)-螺[环丙烷-1，3′-吲哚啉]-2′-酮(125mg，0.311mmol)和(E)-N-(2，6-二氟代-(4-(2-(4，4，5，5-四甲基-1，3，2-二氧杂硼戊环-2-基)乙烯基)苄基)-N-乙基乙胺(131.4mg，0.373mmol)来合成。通过制备型HPLC纯化获得乳膏状固体标题化合物(54mg，28.4％)。1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.98(d，J＝8.0Hz，1H)，7.59(d，J＝16.4Hz，1H)，7.55-7.45(m，4H)，7.04(d，J＝8.0Hz，2H)，6.92(d，J＝8.0Hz，1H)，6.55(t，J＝7.6Hz，1H)，5.96(d，J＝7.6Hz，1H)，4.46(s，2H)，3.35-3.28(m，5H)，2.24-2.21(m，1H)，2.19-2.15(m，1H)，1.42(t，J＝6.8Hz，6H)；MS ESI 499.4[M+H]+，计算值[C30H28F2NO4+H]+499.23。
旋光度：[α]22 D＝-126°(c 0.46，甲醇)。
实施例B：PLK4抑制试验
活性PLK4由大肠杆菌表达系统作为人PLK4的残基1-391的氨基末端GST的融合体来纯化。在采用谷胱甘肽琼脂糖、凝胶渗透色谱和离子交换(Resource Q)在15℃下诱导过夜后，蛋白质由澄清的细胞提取物纯化。所得蛋白质用λ磷酸酶(NEB cat#P0753)脱磷酸，并采用谷胱甘肽琼脂糖与磷酸酶分离。将脱磷酸的GST-PLK4以等分试样储存在-80℃下直到使用。
PLK4活性采用间接ELISA检测系统来测定。在15μMATP(Sigmacat#A7699)、50mM HEPES-Na2+pH 7.4、10mM MgCl2、0.01％Brij 35(Sigma cat#03-3170)的存在下，脱磷酸的GST-PLK4(4nM)在预先涂覆MBP(Millipore cat#30-011)的96孔微滴定板中孵育。使该反应进行30分钟，然后用洗涤缓冲液(50mM TRIS-Cl pH 7.4和0.2％Tween 20)洗涤5次，并用1∶3000稀释度的初级抗体(Cell Signaling cat#9381)孵育30分钟。板用洗涤缓冲液洗涤5次，在与辣根过氧化物酶(BioRad cat#1721019，1∶3000浓度)偶联的次级抗体存在下孵育30分钟，再用洗涤缓冲液洗涤5次，并在TMB底物(Sigma cat#T0440)的存在下孵育。使比色反应持续5分钟，然后添加终止溶液(0.5N硫酸)，并用单色或基于过滤器的读板仪(分别是Molecular Devices M5或Beckman DTX880)通过在450nm处的检测来定量。
化合物抑制作用或者以固定浓度(10μM)或者以可变抑制剂浓度(通常在10点剂量反应滴定中50μM到0.1μM)测定。化合物在酶存在下预孵育15分钟，然后添加ATP，并采用上述活性试验定量剩余活性。化合物的抑制率％采用以下公式测定：抑制率％＝100x(1-(实验值-背景值)/(高活性对照-背景值))。IC50值采用非线性4点逻辑曲线拟合(XLifit4，IDBS)来测定，采用以下公式：(A+(B/(1+((x/C)^D))))，其中A＝背景值，B＝范围，C＝拐点，D＝曲线拟合参数。
实施例C-E省略
实施例F：极光A抑制试验
极光A抑制采用来自Invitrogen的Z-Lyte分析试剂盒测定。该试验采用制造商推荐的指示以20μM ATP和12nM极光A(Invitrogen cat#PV3612)进行。抑制率值％根据制造商的指示测定，且IC50值采用非线性4点逻辑曲线拟合(XLifit4，IDBS)获得。
实施例G：极光B抑制试验
极光B抑制采用来自Invitrogen的Z-Lyte分析试剂盒测定。该试验采用制造商推荐的指示以128μM ATP和28nM极光B(Invitrogen cat#PV3970)进行。抑制率值％根据制造商的指导测定，且IC50值采用非线性4点逻辑曲线拟合(XLifit4，IDBS)获得。
表1中，那些小于或等于0.1μM、那些大于0.1μM且小于或等于1μM以及那些大于1μM的PLK4、极光A和极光B激酶IC50值分别表示为″A″、″B″和″C″。1μM剂量下那些抑制率等于或大于50％以及那些抑制率小于50％的相对抑制百分比分别表示为″X″和″Y″。如表1所示，本发明的众多化合物是有效的PLK4抑制剂。关于PLK1、PLK2和PLK3，实施例A22和A23不显示在10μM下大于50％的抑制率。另外，本发明的许多化合物也抑制极光激酶，特别是极光B激酶。
表1：PLK4、极光A和极光B激酶的抑制率数据
Figure BPA00001624093201631
Figure BPA00001624093201661
实施例H：FLT3抑制试验
FLT3的酶活性采用来自Invitrogen的Z-Lyte分析试剂盒(Invitrogencat#PV3191)来测定。该试验采用制造商推荐的指示以117.5μM ATP和1nM FLT3(Invitrogen cat#PV3182)进行。抑制率值％根据制造商的指导测定，IC50值采用非线性4点逻辑曲线拟合(XLfit4，IDBS)获得。在表2中，本发明选定化合物中那些小于或等于0.1μM、那些大于0.1μM且小于或等于1μM以及那些大于1μM的FLT3抑制剂的IC50值分别表示为″A″、″B″和″C″。
表2：Flt3的抑制率数据
  化合物#   IC50范围   化合物#   IC50范围
  实施例A24   A   实施例A131   C
  实施例A42   A   实施例A132   A
  实施例A56   A   实施例A134   A
  实施例A58   A   实施例A175   A
  实施例A71   B   实施例A185   B
  实施例A112   B   实施例A217   A
实施例I：激酶选择性试验
本发明选定化合物的抑制活性通过针对法国CEREP公司的45种不同的激酶的组来评估。该试验采用抗以下激酶的人同源物(orthologues)的CEREP记录的标准HTRF试验方法来进行：Abl激酶、Akt1/PKBa、AMPKa、BMX激酶(Etk)、Brk、CaMK2a、CaMK4、CDC2/CDK1(cycB)、CHK1、CHK2、c-Met激酶、CSK、EphB4激酶、ERK1、ERK2(P42mapk)、FGFR2激酶、FGFR4激酶、FLT-1激酶(VEGFR1)、FLT-3激酶、Fyn激酶、IGF1R激酶、IRK(InsR)、JNK 2、KDR激酶(VEGFR2)、Lck激酶、Lyn激酶、MAPKAPK2、MEK1/MAP2K1、p38a激酶、p38d激酶、p38g激酶、PDGFRb激酶、PDK1、PKA、PKCa、PKCb1、PKCb2、PKCg、Ret激酶、ROCK2、RSK2、Src激酶、Syk和TRKA(表3)。抑制率％通过以下公式测定：抑制率％＝100x(1-(实验值-背景值)/(高活性对照-背景值))。
表3：10μM浓度下实施例A2和A26的抑制率值百分比
Figure BPA00001624093201681
上述表3显示10μM浓度下实施例A2和A24获得的抑制率值百分比。从该抑制率数据，很明显某些激酶，例如Abl、CSK、FLT-3、Lck、Lyn、Ret和TRKA激酶被本发明化合物抑制。这些活性可能赋予这些化合物额外的治疗效果。
本发明选定化合物的抑制活性通过针对Millipore公司的284种不同的激酶的组来评估。抑制率％通过以下公式测定：抑制率％＝100x(1-(实验值-背景值)/(高活性对照-背景值))。
表4：0.1μM浓度下实施例A42的抑制率百分比值
Figure BPA00001624093201691
Figure BPA00001624093201701
上述表4显示0.1μM浓度下实施例A42获得的抑制率百分比值。284种激酶组中，仅在0.1μM下显示大于50％的抑制率的实施例报告于表4中。从该抑制率数据，很明显某些激酶，例如Abl、Arg、AurA、AurB、FGFR3、TrkA和TRKB激酶被本发明化合物抑制。这些活性可能赋予这些化合物额外的治疗效果。
实施例J：本发明化合物的癌细胞系数据
将乳腺癌细胞(MCF-7、MDA-MB-468、HCC1954)、结肠癌细胞(SW620)和肺癌细胞(A549)以及人乳腺上皮原代细胞(HMEC)接种入96孔板中(每孔每80μl中1000到4000个，取决于细胞生长速度)，24小时后覆盖上化合物。将化合物制备成100％DMSO中的10mM原液，其用含有10％FBS(胎牛血清)的DMEM(Dulbecco′s Modified Eagle′sMedium)细胞生长培养基(Invitrogen，Burlington，ON，Canada)稀释至浓度为50nM到250μM。将来自各浓度的等分试样(20μl)覆盖到96孔板中80μl的预接种细胞上，以使最终浓度为10nM到50μM。细胞培养5天，然后进行磺酰罗丹明B试验(SRB)以测定化合物的细胞生长抑制活性。
磺酰罗丹明B(购自Sigma，Oakville，ON，Canada)是水溶性染料，其结合至细胞蛋白质的碱性氨基酸上。因此，该结合的染料的比色测量提供与细胞数量有关的蛋白总质量的评估。通过轻柔地吸去培养基并每孔添加50μl冰冷的10％三氯乙酸(TCA)将细胞原位固定，并在4℃下培养30-60分钟，将板用水洗涤五次，使其风干5分钟。将50μl 0.4％(w/v)SRB于1％(v/v)乙酸中的溶液添加到各孔中并在室温下孵育30分钟使染色反应完全。染色后，将板用1％乙酸洗涤四次以去除未结合染料，然后使其风干5分钟。将染色斑用每孔100μl的10mM Tris(pH 10.5)溶解。在570nm处读出吸光率。
相对生长抑制率百分比(％)通过与仅由DMSO处理的细胞(100％)比较来计算。测定具有细胞毒活性的化合物的GI50。GI50采用GraphPadPRISM软件(GraphPad Software，Inc.，San Diego，CA，USA)来计算。GI50(生长抑制)是引起50％细胞生长抑制的化合物浓度。
在下表5中，给出了若干化合物实施例对抗管腔型乳腺癌细胞系(MCF-7)、两种基底乳腺癌细胞系(MDA-MB-468、HCC1954)、肺癌细胞系(A549)、结肠癌细胞系(SW-620)和原发性乳腺癌细胞(HMEC)的GI50值范围。实施例化合物表明改变了对抗管腔型乳腺癌和基底乳腺癌细胞、肺癌和结肠癌的癌细胞的生长抑制/细胞杀灭活性。通常，这些化合物显示对抗标准细胞的较小或少许活性，如由HMEC例证。对于小于或等于0.1μM、那些大于0.1μM且小于或等于1μM、那些大于1μM且小于或等于10μM以及那些大于10μM的值的GI50范围分别表示为″A″、″B″、″C″和″D″。
表5：细胞生长抑制数据
Figure BPA00001624093201721
Figure BPA00001624093201731
Figure BPA00001624093201741
除如上所述测试的细胞系之外，已经对于扩展的组测试了选定的化合物。这些包括：乳腺癌细胞系(T47D、MDA-MB-231、HS578T、BT474、SKBR3、HCC1954)、肺癌细胞系(H358)、脑癌细胞系(A172、Hs683、SK-N-SH)、结肠癌细胞系(Colo 205、CT-15、HCT116+/-、HCT116+/+)、卵巢癌细胞系(OVCAR-3、SK-OV-3、SW 626)、黑素瘤细胞系(518A2)、前列腺癌细胞系(PC-3)和永生化乳腺癌细胞系(184A1)。上面描述的磺酰罗丹明B试验(SRB)用于对于扩展组分析测试化合物(表6)。对于小于或等于0.1μM、那些大于0.1μM且小于或等于1μM、那些大于1μM且小于或等于50μM以及那些大于50μM的值的GI50范围分别表示为″A″、″B″、″C″和″D″。
表6：细胞生长抑制数据
Figure BPA00001624093201742
Figure BPA00001624093201751
实施例K：体外血管生成试验
本发明的某些化合物显示对抗受体酪氨酸激酶(RTK)例如FGFR2、VEGFR1、VEGFR2和PDGFDβ的微摩尔和亚微摩尔活性。对抗这些RTK的活性可能导致与减缓的肿瘤生长和/或肿瘤退缩有关的抗血管生成活性。为测定本发明化合物的抗血管生成作用，将选定的实施例在如下所述的血管生成试验中进行测试。注意到化合物实施例A23显示在亚微摩尔浓度下的抗血管生成效应(附图)。
HUV-EC-C细胞从American Type Culture Collection(ATCC，CRL-1730)获得并用于该试验的早期传代。根据制造商的建议使用体外血管生成分析试剂盒(Chemicon)。将ECMatrix的冰冷混合物转移入预冷的96孔板中。基质溶液固化后(在37℃下孵育＞1小时)，8000细胞与适宜的抑制剂浓度(在100微升EGM-2中)混合并接种到各孔中。索坦(Sutent)用作阳性对照与本发明化合物A13比较。在37℃下孵育4小时后，检查管形成。两种方法，模式识别和分支点计数，用于定量血管生成的进展并表示为对照管计数的百分比(附图)。
尽管本发明具体显示并描述了其示例性实施方式，本领域技术人员应理解在不脱离所附权利要求书所涵盖的本发明范围的情况下，可进行形式和细节的各种变化。

Claims (23)

1.由以下结构式代表的化合物：
Figure FPA00001624093100011
或其药学可接受的盐，其中：
Ra是-F、甲氧基、甲基或乙基；
R4是-H、甲基、乙基、2-甲氧基乙基或-CH2CONH2；和
R6是-C＝C-(任选取代的苯基)。
2.如权利要求1的化合物，其中所述化合物由以下结构式代表：
或其药学可接受的盐。
3.如权利要求1或2的化合物，其中：
-CH＝CH-(苯基)中的苯基任选被一个或多个独立选自下组的取代基取代：卤素、C1-6烷基、C1-6卤代烷基、(C1-6氨基烷基)、(C1-6烷基氨基)C1-6烷基、(C1-6二烷基氨基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、氨基、C1-6烷基氨基、C1-6二烷基氨基、-(CH2)0-3-N-哌啶基、-(CH2)0-3-N-吗啉基、-(CH2)0-3-N-吡咯烷基、-(CH2)0-3-N-哌嗪基和-(CH2)0-3-N-氧杂氮杂环庚烷基，其中所述N-哌嗪基任选被C1-6烷基或C1-6酰基N’-取代；且
R4是-H或甲基。
4.如权利要求1的化合物，其中所述化合物由以下结构式代表：
Figure FPA00001624093100021
或其药学可接受的盐。
5.如权利要求1的化合物，其中所述化合物由以下结构式代表：
Figure FPA00001624093100022
或其药学可接受的盐。
6.如权利要求1的化合物，其中所述化合物由以下结构式代表：
Figure FPA00001624093100023
或其药学可接受的盐。
7.药物组合物，含有药学可接受的载体和如权利要求1-6任一项的化合物或其药学可接受的盐。
8.如权利要求7的药物组合物，还含有另外的治疗剂。
9.如权利要求8的药物组合物，其中所述另外的治疗剂是抗癌药。
10.治疗患有癌症的受试者的方法，包括施用治疗有效量的如权利要求1-6任一项的化合物或其药学可接受的盐。
11.如权利要求10的方法，其中所述癌症选自肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌、神经母细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性胶质母细胞瘤、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、肉瘤、副肿瘤综合征、骨肉瘤、生殖细胞瘤、神经胶质瘤和间皮瘤。
12.如权利要求11的方法，其中所述癌症选自肺癌、乳腺癌或结肠癌。
13.如权利要求12的方法，其中所述癌症是乳腺癌。
14.如权利要求13的方法，其中所述癌症是基底亚型乳腺癌或管腔B亚型乳腺癌。
15.如权利要求14的方法，其中所述癌症是过表达PLK4的基底亚型乳腺癌。
16.如权利要求13的方法，其中所述癌症是基底亚型乳腺癌，其是ER、HER2和PR阴性乳腺癌。
17.如权利要求10的方法，其中所述癌症是软组织癌。
18.如权利要求17的方法，其中所述软组织癌是选自下组的肉瘤：纤维肉瘤、胃肠道肉瘤、平滑肌肉瘤、去分化脂肪肉瘤、多形性脂肪肉瘤、恶性纤维组织细胞瘤、圆形细胞肉瘤和滑膜肉瘤。
19.如权利要求10的方法，其中所述癌症是HPV相关癌症。
20.如权利要求19的方法，其中所述HPV相关肿瘤是宫颈癌、肛门与生殖器癌、头颈癌和口咽癌。
21.如权利要求10-18任一项所述方法，还包括共同施用另外的治疗剂。
22.有效量的如权利要求1-6任一项的化合物或其药学可接受的盐用于治疗患有癌症的受试者的用途。
23.有效量的如权利要求1-6任一项的化合物或其药学可接受的盐在制备用于治疗患有癌症的受试者的药物中的用途。
CN201180018148.2A 2010-04-06 2011-04-06 激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法 Active CN102892766B (zh)

Applications Claiming Priority (7)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US32132910P 2010-04-06 2010-04-06
US32133210P 2010-04-06 2010-04-06
US61/321,332 2010-04-06
PCT/CA2010/000518 WO2010115279A1 (en) 2009-04-06 2010-04-06 Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
CAPCT/CA2010/000518 2010-04-06
US61/321,329 2010-04-06
PCT/CA2011/000386 WO2011123946A1 (en) 2010-04-06 2011-04-06 Kinase inhibitors and method of treating cancer with same

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN102892766A true CN102892766A (zh) 2013-01-23
CN102892766B CN102892766B (zh) 2015-05-20

Family

ID=44761967

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201180018148.2A Active CN102892766B (zh) 2010-04-06 2011-04-06 激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法

Country Status (25)

Country Link
US (9) US8921545B2 (zh)
EP (2) EP2556070B1 (zh)
JP (1) JP5442906B2 (zh)
KR (1) KR101782668B1 (zh)
CN (1) CN102892766B (zh)
AU (1) AU2011238384B2 (zh)
BR (1) BR112012025496B1 (zh)
CY (1) CY1118610T1 (zh)
DK (1) DK2556071T3 (zh)
EA (1) EA023173B1 (zh)
ES (2) ES2639757T3 (zh)
HR (1) HRP20161498T1 (zh)
HU (1) HUE030651T2 (zh)
IL (1) IL221556A (zh)
LT (1) LT2556071T (zh)
ME (1) ME02545B (zh)
MX (1) MX2012011516A (zh)
NZ (1) NZ602350A (zh)
PL (1) PL2556071T3 (zh)
PT (1) PT2556071T (zh)
SG (1) SG183875A1 (zh)
SI (1) SI2556071T1 (zh)
SM (1) SMT201600430B (zh)
TW (1) TWI516262B (zh)
WO (2) WO2011123947A1 (zh)

Cited By (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN104130175A (zh) * 2014-06-13 2014-11-05 天津科技大学 不同位置取代吲哚酮类衍生物及其应用
CN105764515B (zh) * 2013-10-18 2020-02-28 大学健康网络 对胰腺癌的治疗
CN111225670A (zh) * 2017-09-08 2020-06-02 大学健康网络 抑制Polo样激酶4的组合疗法
CN105764899B (zh) * 2013-10-18 2021-06-01 大学健康网络 Plk-4抑制剂的盐和晶型
CN113966330A (zh) * 2019-04-24 2022-01-21 大学健康网络 PLK4抑制剂(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((顺式-2,6-二甲基吗啉)甲基)苯乙烯基)-1H-咪唑-6-基)-5’-甲氧基螺[环丙烷-l,3’-吲哚啉]-2’-酮富马酸盐的晶型S4
WO2022184049A1 (zh) * 2021-03-02 2022-09-09 上海齐鲁制药研究中心有限公司 Plk4抑制剂及其用途
CN115677682A (zh) * 2021-07-30 2023-02-03 上海齐鲁制药研究中心有限公司 螺环类plk4抑制剂及其用途

Families Citing this family (13)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
EP2235004A4 (en) 2007-12-21 2011-05-04 Univ Health Network INDAZOLYL, BENZIMIDAZOLYL, BENZOTRIAZOLYL-SUBSTITUTED INDOLUND DERIVATIVES AS A KINASE-HEMMER FOR CANCER TREATMENT
WO2010115279A1 (en) 2009-04-06 2010-10-14 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
US8921545B2 (en) 2010-04-06 2014-12-30 University Health Network Synthesis of chiral 2-(1H-indazol-6-yl)-spiro[cyclopropane-1,3′-indolin]-2′-ones
US8933070B2 (en) 2010-07-02 2015-01-13 University Health Network Methods of targeting PTEN mutant diseases and compositions therefor
WO2012048411A1 (en) * 2010-10-13 2012-04-19 University Health Network Plk-4 inhibitors and method of treating cancer with same
KR102226489B1 (ko) * 2012-07-27 2021-03-11 사토 파머슈티컬 가부시키가이샤 디플루오로메틸렌 화합물
WO2018145525A1 (zh) 2017-02-08 2018-08-16 中国医药研究开发中心有限公司 吡咯并芳杂环类化合物及其制备方法和医药用途
CN108947970B (zh) * 2017-05-18 2022-04-05 四川大学 吲唑类衍生物及其制备方法和用途
WO2021226261A1 (en) 2020-05-06 2021-11-11 Ajax Therapeutics, Inc. 6-heteroaryloxy benzimidazoles and azabenzimidazoles as jak2 inhibitors
CN112250614B (zh) * 2020-10-20 2022-02-01 苏州大学 3-螺三元环吲哚酮衍生物的合成方法
EP4337198A1 (en) 2021-05-11 2024-03-20 Oric Pharmaceuticals, Inc. Polo like kinase 4 inhibitors
AU2022388555A1 (en) 2021-11-09 2024-05-02 Ajax Therapeutics, Inc. 6-he tero aryloxy benzimidazoles and azabenzimidazoles as jak2 inhibitors
WO2024006379A1 (en) * 2022-06-30 2024-01-04 Axonis Therapeutics, Inc. Methods and compounds for inhibiting mkk7 enzymes

Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2709536A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-02 University Health Network Indazolyl, benzimidazolyl, benzotriazolyl substituted indolinone derivatives as kinase inhibitors useful in the treatment of cancer
WO2010115279A1 (en) * 2009-04-06 2010-10-14 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same

Family Cites Families (45)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
DE3310891A1 (de) 1983-03-25 1984-09-27 Boehringer Mannheim Gmbh, 6800 Mannheim Neue indolinon-(2)-derivate, verfahren zu ihrer herstellung, diese verbindungen enthaltende arzneimittel und zwischenprodukte
US5182397A (en) * 1990-05-31 1993-01-26 American Cyanamid Company Aryloxyspiroalkylindolinone herbicides
GB9507298D0 (en) 1995-04-07 1995-05-31 Pharmacia Spa Substituted indolylmethylene-oxindale analogues as tyrosine kinase inhibitors
US5880141A (en) 1995-06-07 1999-03-09 Sugen, Inc. Benzylidene-Z-indoline compounds for the treatment of disease
WO1998007695A1 (en) 1996-08-23 1998-02-26 Sugen, Inc. Indolinone combinatorial libraries and related products and methods for the treatment of disease
GB9716557D0 (en) 1997-08-06 1997-10-08 Glaxo Group Ltd Benzylidene-1,3-dihydro-indol-2-one derivatives having anti-cancer activity
US6133305A (en) * 1997-09-26 2000-10-17 Sugen, Inc. 3-(substituted)-2-indolinones compounds and use thereof as inhibitors of protein kinase activity
CA2383623A1 (en) 1998-08-04 2000-02-17 Sugen, Inc. 3-methylidenyl-2-indolinone modulators of protein kinase
JP2002540096A (ja) 1999-03-24 2002-11-26 スージェン・インコーポレーテッド キナーゼ阻害剤としてのインドリノン化合物
YU54202A (sh) 2000-01-18 2006-01-16 Agouron Pharmaceuticals Inc. Jedinjenja indazola, farmaceutske smeše i postupci za stimulisanje i inhibiranje ćelijske proliferacije
CA2410509A1 (en) 2000-06-02 2001-12-13 Sugen, Inc. Indolinone derivatives as protein kinase/phosphatase inhibitors
US6897231B2 (en) 2000-07-31 2005-05-24 Signal Pharmaceuticals, Inc. Indazole derivatives as JNK inhibitors and compositions and methods related thereto
IL164209A0 (en) 2002-05-31 2005-12-18 Eisai Co Ltd Pyrazole derivatives and pharmaceutical compositions containing the same
US7148249B2 (en) 2002-09-12 2006-12-12 Boehringer Ingelheim Pharma Gmbh & Co. Kg Indolinones substituted by heterocycles, the preparation thereof and their use as medicaments
AU2003286604A1 (en) * 2002-10-21 2004-05-13 Irm Llc Oxindoles with anti-hiv activity
EP1696906A1 (en) 2003-12-16 2006-09-06 Leo Pharma A/S Novel therapeutic use of indolinone derivatives
US20050211590A1 (en) 2004-03-26 2005-09-29 Mcclure George K Protective cover for medical devices
DE102005005395A1 (de) 2005-02-03 2006-08-10 Schering Aktiengesellschaft Thiazolidinone, deren Herstellung und Verwendung als Arzneimittel
US7309787B2 (en) 2005-07-13 2007-12-18 Allergan, Inc. Kinase inhibitors
WO2007058626A1 (en) * 2005-11-16 2007-05-24 S*Bio Pte Ltd Indazole compounds
US20070135509A1 (en) 2005-12-09 2007-06-14 Blackburn Thomas P Indolone compounds useful to treat cognitive impairment
FR2896503B1 (fr) 2006-01-23 2012-07-13 Aventis Pharma Sa Nouveaux derives soufres d'uree cyclique, leur preparation et leur utilisation pharmaceutique comme inhibiteurs de kinases
WO2007109026A2 (en) 2006-03-15 2007-09-27 The Trustees Of Columbia University In The City Of New York Pten compositions and methods for detecting breast cancer
GB0606234D0 (en) 2006-03-29 2006-05-10 Pliva Istrazivanje I Razvoj D Pharmaceutically acceptable salts and polymorphic forms
US8207179B2 (en) * 2007-06-12 2012-06-26 Boehringer Ingelheim International Gmbh Substituted indolines as tyrosine kinase inhibitors
MX2010003249A (es) 2007-09-25 2010-11-09 Takeda Pharmaceutical Inhibidores de quinasas símil polo.
CA2706075A1 (en) 2007-11-20 2009-05-28 University Health Network Cancer diagnostic and therapeutic methods that target plk4/sak
JP2009173629A (ja) * 2007-12-21 2009-08-06 Banyu Pharmaceut Co Ltd Ｒｓｋ１阻害作用を有する新規スピロインダン誘導体
US8765791B2 (en) * 2008-03-11 2014-07-01 University Health Network Method of treating cancer using a neuropeptide Y 5R (NP Y5R) antagonist
EP2108641A1 (en) * 2008-04-11 2009-10-14 Laboratorios Almirall, S.A. New substituted spiro[cycloalkyl-1,3'-indo]-2'(1'H)-one derivatives and their use as p38 mitogen-activated kinase inhibitors
EP2113503A1 (en) * 2008-04-28 2009-11-04 Laboratorios Almirall, S.A. New substituted indolin-2-one derivatives and their use as p39 mitogen-activated kinase inhibitors
JP2011524374A (ja) 2008-06-16 2011-09-01 ティグリス ファーマスーティカルズ，インク． アミノフラボンに対する感応性を判定する方法
DE102008040187A1 (de) 2008-07-04 2010-01-07 Robert Bosch Gmbh Sensorelement, Verfahren zu seiner Herstellung sowie Verwendung
JP2011530511A (ja) 2008-08-05 2011-12-22 メルク・シャープ・エンド・ドーム・コーポレイション 治療用化合物
WO2011069298A1 (en) * 2009-12-11 2011-06-16 F. Hoffmann-La Roche Ag Novel cyclopropane indolinone derivatives
JP5056876B2 (ja) 2010-03-19 2012-10-24 Ｊｆｅスチール株式会社 冷間加工性と焼入れ性に優れた熱延鋼板およびその製造方法
US8921545B2 (en) * 2010-04-06 2014-12-30 University Health Network Synthesis of chiral 2-(1H-indazol-6-yl)-spiro[cyclopropane-1,3′-indolin]-2′-ones
US8933070B2 (en) 2010-07-02 2015-01-13 University Health Network Methods of targeting PTEN mutant diseases and compositions therefor
WO2012048411A1 (en) 2010-10-13 2012-04-19 University Health Network Plk-4 inhibitors and method of treating cancer with same
CN103476770B (zh) 2010-11-25 2017-02-15 拉蒂欧制药有限责任公司 阿法替尼盐和多晶型物
WO2012118812A2 (en) * 2011-02-28 2012-09-07 Epizyme, Inc. Substituted 6,5-fused bicyclic heteroaryl compounds
GB201109966D0 (en) 2011-06-10 2011-07-27 Cancer Res Inst Royal Materials and methods for treating pten mutated or deficient cancer
CA2850394C (en) 2011-10-12 2019-05-21 University Health Network Indazole compounds as kinase inhibitors and method of treating cancer with same
KR102195494B1 (ko) 2013-10-18 2020-12-28 유니버시티 헬스 네트워크 췌장암 치료
HUE043194T2 (hu) 2013-10-18 2019-08-28 Univ Health Network PLK-4 inhibitor sója és kristályformái

Patent Citations (2)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CA2709536A1 (en) * 2007-12-21 2009-07-02 University Health Network Indazolyl, benzimidazolyl, benzotriazolyl substituted indolinone derivatives as kinase inhibitors useful in the treatment of cancer
WO2010115279A1 (en) * 2009-04-06 2010-10-14 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same

Cited By (10)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN105764515B (zh) * 2013-10-18 2020-02-28 大学健康网络 对胰腺癌的治疗
CN105764899B (zh) * 2013-10-18 2021-06-01 大学健康网络 Plk-4抑制剂的盐和晶型
CN113248486A (zh) * 2013-10-18 2021-08-13 大学健康网络 Plk-4抑制剂的盐和晶型
CN104130175A (zh) * 2014-06-13 2014-11-05 天津科技大学 不同位置取代吲哚酮类衍生物及其应用
CN111225670A (zh) * 2017-09-08 2020-06-02 大学健康网络 抑制Polo样激酶4的组合疗法
CN113966330A (zh) * 2019-04-24 2022-01-21 大学健康网络 PLK4抑制剂(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((顺式-2,6-二甲基吗啉)甲基)苯乙烯基)-1H-咪唑-6-基)-5’-甲氧基螺[环丙烷-l,3’-吲哚啉]-2’-酮富马酸盐的晶型S4
WO2022184049A1 (zh) * 2021-03-02 2022-09-09 上海齐鲁制药研究中心有限公司 Plk4抑制剂及其用途
CN116964046A (zh) * 2021-03-02 2023-10-27 上海齐鲁制药研究中心有限公司 Plk4抑制剂及其用途
CN116964046B (zh) * 2021-03-02 2024-04-19 上海齐鲁制药研究中心有限公司 Plk4抑制剂及其用途
CN115677682A (zh) * 2021-07-30 2023-02-03 上海齐鲁制药研究中心有限公司 螺环类plk4抑制剂及其用途

Also Published As

Publication number Publication date
IL221556A (en) 2015-04-30
US8921545B2 (en) 2014-12-30
US8481533B2 (en) 2013-07-09
MX2012011516A (es) 2013-03-08
DK2556071T3 (en) 2016-12-12
BR112012025496B1 (pt) 2021-02-23
EP2556070A4 (en) 2013-10-23
US20130096301A1 (en) 2013-04-18
SG183875A1 (en) 2012-10-30
WO2011123947A8 (en) 2011-12-22
EP2556071A4 (en) 2013-09-04
KR20130108065A (ko) 2013-10-02
CN102892766B (zh) 2015-05-20
US20150133677A1 (en) 2015-05-14
US9907800B2 (en) 2018-03-06
EP2556070B1 (en) 2017-06-07
EA023173B1 (ru) 2016-04-29
EA201270752A1 (ru) 2013-04-30
WO2011123946A1 (en) 2011-10-13
US20120264800A1 (en) 2012-10-18
SI2556071T1 (sl) 2016-12-30
ES2639757T3 (es) 2017-10-30
NZ602350A (en) 2014-05-30
US20180282306A1 (en) 2018-10-04
WO2011123947A1 (en) 2011-10-13
EP2556071B1 (en) 2016-08-17
BR112012025496A2 (pt) 2020-08-18
TWI516262B (zh) 2016-01-11
JP5442906B2 (ja) 2014-03-19
US20180105511A1 (en) 2018-04-19
US8263596B2 (en) 2012-09-11
AU2011238384B2 (en) 2015-02-19
HRP20161498T1 (hr) 2016-12-16
JP2013523784A (ja) 2013-06-17
SMT201600430B (it) 2017-01-10
US10358436B2 (en) 2019-07-23
US20110263598A1 (en) 2011-10-27
EP2556070A1 (en) 2013-02-13
CY1118610T1 (el) 2017-07-12
EP2556071A1 (en) 2013-02-13
US10077255B2 (en) 2018-09-18
AU2011238384A1 (en) 2012-09-27
US9139563B2 (en) 2015-09-22
ME02545B (me) 2017-02-20
US9579327B2 (en) 2017-02-28
US20160045511A1 (en) 2016-02-18
US20140045838A1 (en) 2014-02-13
US9796703B2 (en) 2017-10-24
HUE030651T2 (en) 2017-05-29
LT2556071T (lt) 2017-01-25
TW201134471A (en) 2011-10-16
WO2011123946A8 (en) 2011-12-08
PL2556071T3 (pl) 2017-02-28
US20170226088A1 (en) 2017-08-10
PT2556071T (pt) 2016-11-22
KR101782668B1 (ko) 2017-09-27
ES2603613T3 (es) 2017-02-28

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN102892766B (zh) 激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法
USRE47731E1 (en) Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
CN109219604B (zh) 四氢异喹啉雌激素受体调节剂及其用途
CN105102451B (zh) N-苯基-氨甲酰衍生物及其作为药物用于治疗乙型肝炎的用途
TW202115089A (zh) 喹唑啉酮類衍生物、其製備方法及其在醫藥上的應用
CN103619817A (zh) 新颖的二环含氮杂芳基tgr5受体调节剂
JP2023541612A (ja) Ｅｇｆｒ突然変異癌の抑制用化合物及びその医薬用途
US20220064117A1 (en) Pan-kit kinase inhibitor having quinoline structure and application thereof
WO2024140653A1 (zh) 选择性cdk12/13抑制剂及其应用
CN113493407A (zh) 一种吡啶类化合物及其制法和药物用途
CA2791324A1 (en) Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
SAMPSON et al. Patent 2756568 Summary

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
C14 Grant of patent or utility model
GR01 Patent grant