CN105764899B - Plk-4抑制剂的盐和晶型 - Google Patents

Plk-4抑制剂的盐和晶型 Download PDF

Info

Publication number
CN105764899B
CN105764899B CN201480064037.9A CN201480064037A CN105764899B CN 105764899 B CN105764899 B CN 105764899B CN 201480064037 A CN201480064037 A CN 201480064037A CN 105764899 B CN105764899 B CN 105764899B
Authority
CN
China
Prior art keywords
compound
cancer
fumarate
salt
maleate
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201480064037.9A
Other languages
English (en)
Other versions
CN105764899A (zh
Inventor
P·B·桑普森
M·费赫
H·W·鲍尔斯
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
University Health Network
Original Assignee
University Health Network
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by University Health Network filed Critical University Health Network
Priority to CN202110510808.4A priority Critical patent/CN113248486A/zh
Publication of CN105764899A publication Critical patent/CN105764899A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN105764899B publication Critical patent/CN105764899B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Images

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D413/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms
    • C07D413/14—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having nitrogen and oxygen atoms as the only ring hetero atoms containing three or more hetero rings
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
    • A61K31/00—Medicinal preparations containing organic active ingredients
    • A61K31/33—Heterocyclic compounds
    • A61K31/395—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins
    • A61K31/535—Heterocyclic compounds having nitrogen as a ring hetero atom, e.g. guanethidine or rifamycins having six-membered rings with at least one nitrogen and one oxygen as the ring hetero atoms, e.g. 1,2-oxazines
    • A61K31/5375—1,4-Oxazines, e.g. morpholine
    • A61K31/5377—1,4-Oxazines, e.g. morpholine not condensed and containing further heterocyclic rings, e.g. timolol
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P1/00—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system
    • A61P1/04—Drugs for disorders of the alimentary tract or the digestive system for ulcers, gastritis or reflux esophagitis, e.g. antacids, inhibitors of acid secretion, mucosal protectants
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P11/00—Drugs for disorders of the respiratory system
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P15/00—Drugs for genital or sexual disorders; Contraceptives
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P35/00—Antineoplastic agents
    • A61P35/02—Antineoplastic agents specific for leukemia
    • A—HUMAN NECESSITIES
    • A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
    • A61P—SPECIFIC THERAPEUTIC ACTIVITY OF CHEMICAL COMPOUNDS OR MEDICINAL PREPARATIONS
    • A61P43/00—Drugs for specific purposes, not provided for in groups A61P1/00-A61P41/00
    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07B—GENERAL METHODS OF ORGANIC CHEMISTRY; APPARATUS THEREFOR
    • C07B2200/00—Indexing scheme relating to specific properties of organic compounds
    • C07B2200/13—Crystalline forms, e.g. polymorphs

Landscapes

  • Health & Medical Sciences (AREA)
  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • General Health & Medical Sciences (AREA)
  • Veterinary Medicine (AREA)
  • Public Health (AREA)
  • Medicinal Chemistry (AREA)
  • Animal Behavior & Ethology (AREA)
  • Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
  • Pharmacology & Pharmacy (AREA)
  • General Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Nuclear Medicine, Radiotherapy & Molecular Imaging (AREA)
  • Chemical Kinetics & Catalysis (AREA)
  • Bioinformatics & Cheminformatics (AREA)
  • Engineering & Computer Science (AREA)
  • Epidemiology (AREA)
  • Hematology (AREA)
  • Oncology (AREA)
  • Endocrinology (AREA)
  • Reproductive Health (AREA)
  • Pulmonology (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)
  • Organic Low-Molecular-Weight Compounds And Preparation Thereof (AREA)
  • Plural Heterocyclic Compounds (AREA)
  • Acyclic And Carbocyclic Compounds In Medicinal Compositions (AREA)

Abstract

公开了由以下结构式表示的化合物(I)的富马酸盐和马来酸盐以及它们对应的药物组合物。1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的特定单晶型通过多种性质和物理测量表征。还公开了制备1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的特定晶型的方法。本发明还提供了治疗患有癌症的受试者的方法。
Figure DDA0000997493880000011

Description

PLK-4抑制剂的盐和晶型
相关申请
本申请要求2013年10月18日提交的美国临时申请第61/892,564号的权益，该临时申请的全部教导特此援引加入。
发明背景
丝氨酸/苏氨酸激酶的polo样激酶(PLK)家族包括至少四种已知成员：PLK1、PLK2(也称为Snk)、PLK3(也称为Fnk或Prk)和PLK4(也称为Sak)。抑制PLK4的试剂具有治疗癌症的潜能。美国专利第8,263,596、8,481,525和8,481,533号中公开了大量的强力PLK4抑制剂(这些专利的全部教导特此援引加入)。这些专利中公开的一种抑制剂的结构在下文中显示为化合物(I)：
Figure BDA0000997493860000011
存在对于这种化合物的盐形式的需要，所述盐形式是晶体且在其它方面具有适合于大规模制造的物理性质。还存在对于其中该药物候选物是稳定的且有效地递送至患者的药物制剂的需要。
发明内容
已经发现化合物(I)的1:1富马酸盐和1:1马来酸盐可以在明确的条件下结晶以提供非吸湿性的晶型。标识“1:1”是酸(富马酸或马来酸)与化合物(I)之间的摩尔比率。由于富马酸和马来酸上的两个羧酸基团，也可能形成化合物(I)的1:2富马酸盐和1:2马来酸盐，其中酸(富马酸或马来酸)与化合物(I)之间的摩尔比率是1:2。化合物(I)的1:1富马酸盐在本文中称为“1:1化合物(I)富马酸盐”；和1:1马来酸盐在本文中称为“1:1化合物(I)马来酸盐”。
1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐在与化合物(I)的其他盐相比时具有几种有利性质。如实施例1和2中所示，化合物(I)的许多盐，包括盐酸盐、磷酸盐、硫酸盐和柠檬酸盐，未能以晶体形式获得。尤其是，1:2化合物(I)富马酸盐和1:2化合物(I)马来酸盐也未能以晶体形式获得。1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐都是不吸湿的，并且比游离碱和其他盐更容易配制。因此，这些有利性质使得1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐适合于大规模制造和作为药物候选物配制。
在一个方面，本发明提供了化合物(I)的富马酸盐，其中化合物(I)与富马酸之间的摩尔比率是1:1。如上文所述，这种盐在本文中也称为“1:1化合物(I)富马酸盐”。
在另一方面，本发明提供了化合物(I)的马来酸盐，其中化合物(I)与马来酸之间的摩尔比率是1:1。如上文所述，这种盐在本文中也称为“1:1化合物(I)马来酸盐”。
在另一方面，本发明提供了药物组合物，其包含1:1化合物(I)富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)和药学上可接受的载体或稀释剂。
在又一方面，本发明提供了治疗患有癌症的受试者的方法，其包括将有效量的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐施用于受试者。
本发明提供了在需要抑制PLK4活性的受试者中抑制PLK4活性的方法，其包括将有效量的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐施用于受试者。
本发明还提供了用于医学疗法中的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐。在一个实施方式中，该医学疗法是用于治疗患有癌症的受试者。或者，该疗法是用于在需要抑制PLK4活性的受试者中抑制PLK4活性。
本发明的另一方面是1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐在制造用于治疗患有癌症的受试者的药物中的用途。
本发明的另一方面是用于治疗患有癌症的受试者的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐。
本发明的另一方面是1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐在制造用于在需要抑制PLK4活性的受试者中抑制PLK4活性的药物中的用途。
本发明的另一方面是用于在需要抑制PLK4活性的受试者中抑制PLK4活性的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐。
附图说明
图1示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型A的差示扫描量热法分析(DSC)热谱图。
图2示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型B的DSC热谱图。
图3示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型C的DSC热谱图。
图4示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型D的DSC热谱图。
图5示出了1:1化合物(I)马来酸盐的晶型A的DSC热谱图。
图6示出了化合物(I)的磷酸盐的DSC热谱图。
图7示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型A的X射线粉末衍射(XRPD)图谱。
图8示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型B的XRPD图谱。
图9示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型C的XRPD图谱。
图10示出了1:1化合物(I)富马酸盐的晶型D的XRPD图谱。
图11示出了1:1化合物(I)马来酸盐的晶型A的XRPD图谱。
具体实施方式
本发明提供了1:1化合物(I)富马酸盐、1:1化合物(I)马来酸盐、其独特晶型和它们的对应药物组合物。本发明还提供了治疗患有癌症的受试者的方法。此外，本发明提供了用于制备1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的特定晶型的方法。
1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的晶型
在特定实施方式中，至少特定重量％的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐是晶体。特定重量％包括70％、72％、75％、77％、80％、82％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.9％，或者70％-75％、75％-80％、80％-85％、85％-90％、90％-95％、95％-100％、70-80％、80-90％、90-100％的重量％。例如，在一个实施方式中，至少80重量％(例如，至少90重量％或99重量％)的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐是晶体。应理解这些值和范围之间的所有值和范围都意图为本发明所包括。
在另一个特定实施方式中，至少特定重量％的1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐是单晶型。特定重量％包括70％、72％、75％、77％、80％、82％、85％、86％、87％、88％、89％、90％、91％、92％、93％、94％、95％、96％、97％、98％、99％、99.5％、99.9％，或者70％-75％、75％-80％、80％-85％、85％-90％、90％-95％、95％-100％、70-80％、80-90％、90-100％的重量％。例如，在一个实施方式中，至少80重量％(例如，至少90重量％或99重量％)的1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐是单晶型。应理解这些值和范围之间的所有值和范围都意图为本发明所包括。
如本文所用，“晶体”是指具有晶体结构的固体，其中单个分子具有高度均一的规则的锁定(locked-in)化学构型。晶体1:1化合物(I)富马酸盐和晶体1:1化合物(I)马来酸盐可以是1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的单晶型的晶体，或者不同的单晶型的晶体的混合物。单晶型意思是作为单晶或其中各晶体具有相同晶型的多个晶体的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐。
当特定重量％的1:1化合物(I)富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)是单晶型时，富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)的其余部分是无定形富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)和/或排除单晶型的1:1化合物(I)富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)的一种或多种其他晶型的一些组合。当晶体1:1化合物(I)富马酸盐(或晶体1:1化合物(I)马来酸盐)限定为指定百分比的1:1化合物(I)富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)的一种特定晶型时，其余部分由无定形形式和/或指定的一种或多种特定形式以外的晶型构成。单晶型的实例包括由如本文所述的一种或多种性质表征的1:1化合物(I)富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)的晶型A。
1:1化合物(I)富马酸盐(或1:1化合物(I)马来酸盐)相对于其他立体异构体是至少60重量％、70重量％、80重量％、90重量％、99重量％或99.9重量％纯的，即立体异构体的重量相对于所有立体异构体的重量的比率。
制备1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的晶型
1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐的特定固体形式可以例如通过缓慢蒸发、缓慢冷却和抗溶剂(antisolvent)沉淀来制备。
如本文所用，“抗溶剂”是指其中1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐具有低溶解度并导致富马酸盐或马来酸盐以细粉末或晶体形式从溶液沉淀出来的溶剂。
或者，1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐然后可以在加入或不加入晶种的情况下从适合的溶剂重结晶。
1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐的各特定固体形式的制备在下文的实验部分中描述。
1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的晶型的表征
样品用铜K-αX射线辐照，X射线管在40kV/30mA下操作。在一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐是单晶型—晶型A。在特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐的晶型A通过图7中示出的X射线粉末衍射图谱表征。在更特定的实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型A通过包括以下处的峰(2θ角)的X射线粉末衍射图谱表征：
a)2θ为9.7°、16.7°和20.1°±0.2(主要峰)；或
b)2θ为8.2°、9.7°、16.7°和20.1°±0.2；或
c)2θ为8.2°、9.7°、10.7°、11.5°、14.9°、16.7°、20.1°和23.5°±0.2；或
d)2θ为8.2°、9.7°、10.7°、11.5°、13.6°、14.9°、16.7°、18.1°、18.8°、20.1°、23.5°和24.5°±0.2。
本文描述的主要峰在晶型A中具有超过50％的相对强度。应理解指定的2θ角表示指定值±0.2°。
在另一个特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型A通过112℃和158℃的差示扫描量热(DSC)峰相变温度表征。
在另一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐是单晶型—晶型B。在特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐的晶型B通过图8中示出的X射线粉末衍射图谱表征。在更特定的实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型B通过包括以下处的峰的X射线粉末衍射图谱表征：
a)2θ为11.9°和14.9°±0.2(主要峰)；或
b)2θ为11.9°、14.9°、18.7°和21.5°±0.2；或
c)2θ为5.5°、5.9°、11.9°、14.9°、16.7°、17.4°、18.7°、21.5°和23.4°±0.2。
本文所述的主要峰在晶型B中具有超过75％的相对强度。
在另一个特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型B通过58℃和162℃的差示扫描量热(DSC)峰相变温度表征。
在另一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐是单晶型—晶型C。在特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型C通过图9中示出的X射线粉末衍射图谱表征。在更特定的实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型C通过包括以下处的峰的X射线粉末衍射图谱表征：
a)2θ为16.8°、16.9°和19.9°±0.2(主要峰)；或
b)2θ为9.8°、16.8°、16.9°、19.9°和23.5°±0.2；或
c)2θ为9.7°、9.8°、11.7°、15.1°、16.8°、16.9°、19.9°、23.5°和23.7°±0.2。
本文所述的主要峰在晶型C中具有超过75％的相对强度。
在另一个特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐晶型C通过62℃和156℃的差示扫描量热(DSC)峰相变温度表征。
在另一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐是单晶型—晶型D。在特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐的晶型D通过图10中示出的X射线粉末衍射图谱表征。在更特定的实施方式中，晶型D的X射线衍射图谱包括以下处的峰：
a)2θ为9.6°、12.8°、16.0°和22.0°±0.2(主要峰)；或
b)2θ为9.6°、12.8°、16.0°、16.9°、21.2°和22.0°±0.2；或
c)2θ为9.6°、12.8°、16.0°、16.9°、20.8°、21.2°、21.5°和22.0°±0.2；
d)2θ为9.6°、11.7°、12.0°、12.8°、16.0°、16.6°、16.9°、18.1°、19.2°、19.8°、20.7°、20.8°、21.2°、21.5°、22.0°、22.5°、24.0°、26.0°和29.8°±0.2。
本文所述的主要峰在晶型D中具有超过85％的相对强度。
在另一个特定实施方式中，至少90重量％的1:1化合物(I)富马酸盐晶型D通过219℃的差示扫描量热(DSC)峰相变温度表征。
在另一个实施方式中，1:1化合物(I)马来酸盐是单晶型—晶型A。在特定实施方式中，1:1化合物(I)马来酸盐的晶型A通过图11中示出的X射线粉末衍射图谱表征。在更特定的实施方式中，1:1化合物(I)马来酸盐的晶型A通过包括以下处的峰的X射线粉末衍射图谱表征：
a)2θ为11.5°、12.6°、14.9°和15.1°±0.2；或
b)2θ为10.8°、11.5°、12.4°、12.6°、14.9°、15.1°和17.1°±0.2；或
c)2θ为5.8°、10.8°、11.5°、12.4°、12.6°、14.9°、15.1°、17.1°、18.6°、23.5°和26.1°±0.2；或
d)2θ为5.5°、5.8°、10.8°、11.5°、12.4°、12.6°、14.1°、14.9°、15.1°、16.7°、17.1°、17.8°、18.6°、19.5°、19.9°、21.9°、22.2°、23.0°、23.3°、23.5°、23.9°和26.1°±0.2。
本文所述的主要峰在晶型A中具有超过90％的相对强度。
在另一个特定实施方式中，1:1化合物(I)马来酸盐晶型A通过219℃的差示扫描量热(DSC)峰相变温度表征。
本文所述的化合物(I)的富马酸盐或化合物(I)的马来酸盐是无定形形式或者是晶体形式。本发明中所述的化合物(I)的富马酸盐或化合物(I)的马来酸盐包括非溶剂化形式和溶剂化物形式。
“溶剂化物形式”是指化合物(I)的富马酸盐或化合物(I)的马来酸盐的固体或晶体形式，其中溶剂作为固体或晶体的组成部分与化合物(I)的富马酸盐或化合物(I)的马来酸盐以确定比率(例如1:1或1:2的摩尔比率)组合。
“非溶剂化形式”是指溶剂分子与化合物(I)的富马酸盐或化合物(I)的马来酸盐之间没有确定比率，并且溶剂分子基本上(例如，少于10重量％)不存在于化合物(I)的富马酸盐或化合物(I)的马来酸盐中。广为人知的溶剂分子包括水、甲醇、乙醇、正丙醇和异丙醇。
在本发明中，1:1化合物(I)富马酸盐的晶型A是异丙醇溶剂化物，其在化合物(I)富马酸盐与异丙醇之间的摩尔比率为2:1。本文所述的1:1化合物(I)富马酸盐的晶型B-D和1:1化合物(I)马来酸盐的晶型A不是溶剂化物，即各自是非溶剂化形式。
使用化合物(I)富马酸盐和化合物(I)的马来酸盐的治疗方法
1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐可以抑制各种激酶，包括PLK4。因此，本发明的1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐可用于治疗与这种激酶相关的疾病或病症。例如，PLK4据信涉及细胞有丝分裂进程。因此，这种酶的小分子抑制剂可以是潜在的抗肿瘤剂。
在特定实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐是PLK4抑制剂，并可用于治疗与这种激酶相关的疾病，如癌症。
本发明的另一方面涉及治疗患有癌症的受试者的方法，其包括将有效量的1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐施用于受试者。在一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐抑制肿瘤生长。具体而言，1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐抑制过表达PLK4的肿瘤的生长。在另一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐通过诱导肿瘤细胞的凋亡或通过抑制肿瘤细胞的增殖来抑制肿瘤生长。
可以通过本发明方法治疗或预防的癌症包括肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌、成神经细胞癌、前列腺癌、黑素瘤、多形性成胶质细胞瘤(glioblastoma multiform)、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、肉瘤、伴肿瘤(paraneoplasia)、骨肉瘤、生殖细胞瘤、神经胶质瘤和间皮瘤。在一个特定实施方式中，癌症是肺癌、乳腺癌、结肠癌、成神经细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性成胶质细胞瘤、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、骨肉瘤、生殖细胞瘤、神经胶质瘤、纤维肉瘤、胃肠肉瘤、纤维性组织细胞瘤、圆形细胞肉瘤、滑膜肉瘤、宫颈癌、肛门生殖器癌(anogenital cancer)、头颈癌和口咽癌。在一个特定实施方式中，癌症是肺癌、结肠癌、脑癌、成神经细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性成胶质细胞瘤或卵巢癌。在另一个特定实施方式中，癌症是肺癌、乳腺癌、结肠癌、脑癌、成神经细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性成胶质细胞瘤或卵巢癌。在另一个特定实施方式中，癌症是肺癌、乳腺癌和结肠癌。在又一个特定实施方式中，癌症是乳腺癌。在又一个特定实施方式中，癌症是基底亚型乳腺癌或管腔(Luminal)B亚型乳腺癌。在一个实施方式中，基底亚型乳腺癌是ER(雌激素受体)、HER2和PR(孕酮受体)阴性乳腺癌。在又一个特定实施方式中，癌症是软组织癌症。“软组织癌症”是本领域公认的术语，其包括源于身体的任何软组织的肿瘤。这样的软组织连接、支撑或围绕身体的各种结构和器官，所述结构和器官包括但不限于平滑肌、骨骼肌、腱、纤维组织、脂肪组织、血管和淋巴管、血管周围组织、神经、间充质细胞和滑膜组织(synovial tissue)。因此，软组织癌症可以是脂肪组织、肌肉组织、神经组织、关节组织、血管、淋巴管和纤维组织。软组织癌症可以是良性或恶性的。通常，恶性软组织癌症称为肉瘤或软组织肉瘤。存在许多类型的软组织肿瘤，包括脂肪瘤、成脂细胞瘤、蛰伏脂肪瘤、脂肪肉瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、横纹肌瘤、横纹肌肉瘤、神经纤维瘤、许旺氏细胞瘤(神经鞘瘤)、神经瘤、恶性许旺氏细胞瘤、神经纤维肉瘤、神经原性肉瘤、结节性腱鞘炎、滑膜肉瘤、血管瘤、血管球瘤、血管外皮细胞瘤、血管内皮瘤、血管肉瘤、卡波西肉瘤、淋巴管瘤、纤维瘤、弹力纤维瘤、浅表性纤维瘤病、纤维性组织细胞瘤、纤维肉瘤、纤维瘤病、隆凸性皮肤纤维肉瘤(DFSP)、恶性纤维性组织细胞瘤(MFH)、粘液瘤、颗粒细胞瘤、恶性间质瘤、肺泡软组织肉瘤、上皮样肉瘤、透明细胞肉瘤和促纤维增生性小细胞肿瘤。在特定实施方式中，软组织癌症是选自纤维肉瘤、胃肠肉瘤、平滑肌肉瘤、去分化脂肪肉瘤、多形性脂肪肉瘤、恶性纤维性组织细胞瘤、圆形细胞肉瘤和滑膜肉瘤的肉瘤。
本发明进一步涉及治疗具有肿瘤细胞的受试者的方法，其包括将在受试者中有效降低PLK4活性的一定量的本文公开的化合物施用于受试者。
术语“有效量”是指在施用于受试者时导致有益或期望的结果的量，包括临床结果，例如与对照相比，在受试者中抑制、阻抑或减轻癌症(例如，如通过临床症状或癌细胞的量来确定的)。
如本文所用，“治疗患有癌症的受试者”包括部分或基本上实现以下的一种或多种：阻止癌症生长、减轻癌症程度(例如，减小肿瘤大小)、抑制癌症生长速率、改善或改进与癌症相关的临床症状或指征(如组织或血清组分)或增加受试者寿命；和减小癌症复发的可能性。
如本文所用，术语“减小癌症复发的可能性”是指抑制或推迟在缓解期之后在原发位点处或附近和/或第二位点处的癌症回归。它还表示在本文所述的治疗存在时相比于其不存在时，癌症较少可能回归。
如本文所用，术语“缓解”是指癌症的状态，其中通常在受试者已经用抗癌疗法成功治疗之后，与癌症相关的临床症状或指征已经消失或者不可以被检测到。
通常，本发明的化合物的有效量根据各种因素而变化，所述因素例如给定的药物或化合物、药学制剂、给药途径、疾病或病症的类型、被治疗的受试者或宿主的身份(identity)等等，但仍然可以由本领域技术人员常规地确定。本发明的化合物的有效量可以由本领域技术人员通过本领域已知的常规方法容易地确定。
在一个实施方式中，1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的有效量在约0.01至约1000mg/kg体重、或者约0.05至约500mg/kg体重、或者约0.1至约100mg/kg体重、或者约0.1至约15mg/kg体重、或者约1至约5mg/kg体重，和在另一个替代方式中，约2至约3mg/kg体重的范围内。本领域技术人员将意识到某些因素可以影响有效治疗患有癌症的受试者所需要的剂量，且这些因素包括但不限于疾病或病症的严重性、早先的治疗、受试者的一般健康和/或年龄及存在的其他疾病。
此外，使用有效量的本发明化合物的受试者的“治疗”方案可以由单次施用组成，或者包括一系列施用。例如，1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐可以每周至少施用一次。然而，在另一个实施方式中，对于给定治疗，化合物可以从约每周一次至每天一次施用于受试者。治疗期的长度取决于多种因素，如疾病的严重性、患者年龄、本发明的化合物的浓度和活性、或其组合。还将意识到，用于治疗或预防的化合物的有效剂量可以在特定治疗或预防方案的过程中增加或减少。剂量的变化可以通过本领域已知的标准诊断试验产生和变得明显。在一些情况中，可能需要长期施用。
“受试者”是哺乳动物，优选人，但也可以是需要兽医治疗的动物，例如宠物(例如狗、猫等)、农畜(例如牛、羊、猪、马等)和实验室动物(例如大鼠、小鼠、豚鼠、猪等)。
如本领域技术人员所理解的，本发明的化合物可以根据所选择的给药途径以多种形式施用于患者。本发明的化合物可以例如通过口服、非消化道、含服、舌下、鼻腔、直肠、贴片、泵或经皮给药和相应配制的药物组合物来施用。非消化道给药包括静脉内、腹膜内、皮下、肌内、经上皮、鼻腔、肺内、鞘内、直肠和局部给药模式。非消化道给药可以在选择的时间段内通过连续输注进行。
包含1:1化合物(I)富马酸盐和1:1化合物(I)马来酸盐的药物组合物
本文公开的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐或任何一种或多种晶型可以适当地配制成用于施用于受试者的药物组合物。
在一个实施方式中，本发明提供了包含如上文所述的1:1化合物(I)富马酸盐或1:1化合物(I)马来酸盐和药学上可接受的载体或稀释剂的药物组合物，其中至少80重量％(优选90重量％，更优选99重量％)的盐是晶体。
本教导的药物组合物任选地包含用于其中的一种或多种药学上可接受的载体和/或稀释剂，如乳糖、淀粉、纤维素和右旋糖。也可以包含其他赋形剂，如调味剂、甜味剂和防腐剂，如尼泊金甲酯、尼泊金乙酯、尼泊金丙酯和尼泊金丁酯。适合的赋形剂的更完整列表可见于Handbook of Pharmaceutical Excipients(第5版，Pharmaceutical Press(2005))中。本领域技术人员知晓如何制备适合于各种类型的给药途径的制剂。用于选择和制备适合的制剂的常规程序和成分描述在例如Remington’s Pharmaceutical Sciences(2003-第20版)和1999年公布的The United States Pharmacopeia:The National Formulary(USP24 NF19)中。载体、稀释剂和/或赋形剂从与药物组合物的其他成分相容且对其受体无害的意义上来说是“可接受的”。
通常，对于口服治疗性给药，本教导的化合物中可以加入赋形剂，并以可摄食片剂、口含片剂、锭剂(troche)、胶囊、酏剂、悬浮剂、糖浆剂、圆片(wafer)等形式使用。
通常对于非消化道给药，本教导的化合物的溶液一般可以在与表面活性剂如羟丙基纤维素适合地混合的水中制备。分散剂也可以在有或没有醇的甘油、液体聚乙二醇、DMSO及其混合物中，以及在油中制备。在普通的储存和使用条件下，这些制剂含有防止微生物生长的防腐剂。
通常，对于注射用途，本文描述的化合物的无菌水溶液或分散剂或者用于临时制备无菌注射溶液或分散液的无菌粉末是适合的。
对于鼻腔给药，本教导的化合物可以配制成气雾剂、滴剂、凝胶剂和粉剂。气雾剂制剂通常包含在生理学上可接受的水性或非水性溶剂中的活性物质的溶液或细悬浮液，并且通常以单剂或多剂的量以无菌形式存在于密封容器中，其可以采取用于喷雾装置的药筒(cartridge)或再填充容器的形式。或者，密封容器可以是单一的(unitary)分配装置，如旨在用后丢弃的配备有计量阀的单剂鼻腔吸入器或气雾剂分配器。在剂型包括气雾剂分配器时，其将含有推进剂，所述推进剂可以是压缩气体如压缩空气或有机推进剂如氯氟烃。气雾剂剂型也可以采用泵-喷雾器的形式。
对于口含或舌下给药，本教导的化合物可以用载体如糖、阿拉伯树胶、黄芪胶或明胶和甘油配制成片剂、糖锭剂(lozenge)或软锭剂(pastille)。
对于直肠给药，本文所述的化合物可以配制成含有常规栓剂基质如可可脂的栓剂形式。
本发明通过以下实施例进行说明，所述实施例并非旨在以任何方式进行限制。
实验
缩写：
BSA 苯磺酸
d 天
EtOAc 乙酸乙酯
EtOH 乙醇
h 小时
HPLC 高效液相色谱
IPA 异丙醇
IBAc 乙酸异丁酯
MeOH 甲醇
MIBK 甲基异丁基酮
min 分钟
MTBE 甲基叔丁基醚
NMR 核磁共振
pTSA 对甲苯磺酸
RBF 圆底烧瓶
RH 相对湿度
Rel.Int. 相对强度
rt 室温
temp 温度
TGA 热重分析
THF 四氢呋喃
wt％ 重量％
XRPD X射线粉末衍射
分析条件
差示扫描量热分析(DSC)
DSC分析在Mettler 822e差示扫描量热计或TA仪Q2000上进行。样品在铝盘中称重，盖上穿孔盖，然后卷边。分析条件是30-120、30-200、30-300℃和40-300℃，以10℃/min上升。
热重分析(TGA)
在Mettler 851e SDTA热重分析仪上进行TGA分析。样品在氧化铝坩埚中称重，并在30-230、30-300和30-350℃分析，上升速率为10℃/min。
X射线粉末衍射(XRPD)
在Panalytical CubiX-Pro X射线粉末衍射仪或Bruker AXS/Siemens D5000衍射仪上分析样品。
Panalytical条件：样品放置在硅归零(zero-return)超微样品支架上。样品用铜K-αX射线辐照，X射线管在40kV/30mA下操作。样品沿3至45°范围以连续模式扫描。
Bruker AXS/Siemens D5000条件：高功率Cu靶被用来以50kV/35mA运行。次级束通过固态Kevex检测器单色化。样品沿2-35°(2σ)范围扫描，在此处出现大多数有机晶体化合物的代表性峰。
重量水分吸附(sorption)分析
在Hiden动态蒸汽吸附分析仪上通过以下步骤进行重量水分吸附实验：首先将样品保持在40％RH和25℃下直到达到平衡重量或者最多4小时。然后使样品以10％的步进从40至90％RH进行等温(25℃)吸附扫描。使样品平衡到每个点的渐进(asymptotic)重量，最多4小时。在吸附后，以-10％的步进从85至5％RH(25℃)再次运行解吸扫描，允许最多4小时以平衡到渐进重量。然后以+10％RH的步进从0％RH至40％RH进行吸附扫描。
拉曼光谱法
在具有PhAT探头的Kaiser RXN1 Macroscope上分析样品以进行拉曼分析。使用以下条件分析从96孔板结晶获得的固体：
拉曼源：785nm激光
显微镜物镜：1.2mm
单次曝光时间：12sec
Co-添加：12
生效曝光选项：宇宙射线过滤，暗减法(Dark Subtraction)，强度校准
光学显微术
样品用与数字照相机(1600×1200分辨率)组合的Leica DMRB偏振光显微镜检查。少量样品分散在带盖玻片的载玻片上的矿物油中，并用100x或更高放大率进行观察。
双折射
在Coleman Technologies双折射成像仪上分析样品以用于双折射分析。使用以下条件分析从96孔板结晶获得的固体：
照明：37
曝光：57.9
偏振：0.0
孔掩模直径：6.2
目标强度：80
目标百分位：90.0
最大平均强度：100
核磁共振
使用Bruker 400MHz波谱仪分析样品以用于质子NMR。
实施例1：组合盐筛选
使用6种溶剂(IPA、THF、丙酮、乙腈、EtOH和EtOAc)和28种药学上可接受的酸(HCl、HBr、H3PO4、H2SO4、CH3SO3H、pTSA、BSA、萘磺酸、乙磺酸、甲磺酸、己二酸、乙二磺酸、马来酸、苯甲酸、L-苹果酸、柠檬酸、L-乳酸、马尿酸、L-焦谷氨酸、琥珀酸、L-酒石酸、甲酸、富马酸、戊二酸、L-抗坏血酸、山梨酸、苯甲酸和丙二酸)进行盐筛选。将200μL的化合物(I)在MeOH中的20mg/mL溶液装载到96孔板的每个孔中。然后在氮气流下蒸发溶剂，每个孔中留有大约4mg的起始材料。然后将感兴趣的主要溶剂加入到每个孔(500μL)中。将板加热到50℃并磁力搅拌10min以确保A的完全溶解。然后每个孔中以对应于1.05当量的每种酸的量装载指定抗衡离子溶液并使其在温度下平衡10min。然后将板以20℃/h冷却到25℃，在该点处通过从每个孔转移200μL到蒸发板中来使主板(master plate)传代(daughter)。然后将板冷却到环境温度，5℃下储存过夜，并检查固体物质的存在。然后来自主板的溶剂通过用吸附纸芯吸(wick)除去。然后主板和蒸发板在氮气下干燥过夜。然后对含有固体材料的孔按照双折射、独特的拉曼光谱和阈值溶解度进行评分和分级。然后针对增大规模的A的盐形成再评价适合的溶剂与抗衡离子组合。
实施例2：中等规模的盐形成
在含有磁性搅拌棒的8mL小瓶中称重约40mg化合物(I)。将主要溶剂加入到该小瓶中以确保在升高的温度下溶解。溶解后，滴加1.05当量的酸，成为0.125、0.25或0.5M溶液。使所有的混合物在升高的温度下搅拌15min，之后以10℃/h的速率冷却到室温并搅拌过夜。用刮刀刮擦在冷却后不表现出沉淀的样品以诱导成核，并储存在-10至-20℃的冷藏箱中。1h后，检查小瓶中的晶体成长。在氮气下离心、过滤或蒸发来自提供固体的条件的样品。使所有其他样品在-20℃下平衡72h。然后在氮气下干燥未显示沉淀的小瓶。然后所得固体物质用IPA浆化(slurry)5天。从这些实验，对于全部抗衡离子仅鉴别出无定形固体物质，除富马酸盐以外。下文描述了化合物(I)的富马酸盐的独特多晶型(polymorphic form)。
制备化合物(I)的晶体盐
实施例3：制备1:1化合物(I)富马酸盐的晶型A
将化合物(I)(42mg，0.078mmol)溶解到乙腈(0.5mL)中并加热到50℃。加入富马酸(0.33mL的0.25M IPA溶液)并搅拌混合物15min。过滤沉淀物并确定为是无定形的，因为缺乏可观察到的双折射。然后无定形固体用IPA(0.5mL)浆化5天。从浆料获得的固体显示出双折射并进一步通过XRPD、DSC、1H NMR和TGA表征为IPA溶剂合物并标记为富马酸盐晶型A。
表1.富马酸盐晶型A的XRPD
Figure BDA0000997493860000181
实施例4：制备1:1化合物(I)富马酸盐的晶型B
通过60℃下真空干燥2天使富马酸盐晶型A去溶剂化而产生具有DSC热谱图和XRPD的晶体材料，命名为晶型B。晶型B也可以通过将无定形单富马酸盐溶解到EtOAc中并用晶型B晶体作为种晶来直接制备。重量水分吸附表明该盐形式是吸湿的并在90％RH下形成四水合物。
表2.富马酸盐晶型B的XRPD
Figure BDA0000997493860000182
Figure BDA0000997493860000191
实施例5：制备1:1化合物(I)富马酸盐的晶型C
第三种富马酸盐多晶型物可以通过将无定形富马酸盐溶解到THF中，并用富马酸盐晶型B晶体作为种晶来获得。溶剂缓慢蒸发到表现出不同于晶型B的XRPD图谱和拉曼光谱的白色固体并命名为富马酸盐晶型C。
表3.富马酸盐晶型C的XRPD
Figure BDA0000997493860000192
实施例6：制备1:1化合物(I)富马酸盐的晶型D
用乙腈在室温下浆化富马酸盐晶型C 10天导致转化成新晶型，标记为晶型D，其显示出不同的拉曼光谱和XRPD图谱。通过DSC的相转变比其他晶型高得多，并显示出所识别的四种多晶型物中最高的稳定性。晶型D可以如下直接制备：将化合物(I)(6.01g，11mmol)和富马酸(1.41g，12mmol)装入到配有搅拌棒的250ml三颈RBF中。加入丙酮(50mL)并将浆料加热到50℃直到溶液变得澄清。10min后观察到沉淀，并再继续搅拌30min。加入MTBE(25mL)，且溶液冷却至室温并搅拌过夜。过滤固体并在60℃下真空干燥2天以产生为白色固体的标题化合物(I)(6.65g，91％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ8.00(d，J＝8.4Hz，1H)，7.68(d，J＝8.0Hz，2H)，7.50-7.45(m，5H)，7.03(d，J＝8.1Hz，1H)，6.83(d，J＝8.4Hz，1H)，6.73(s，2H)，6.60(dd，J＝8.4，2.5Hz，1H)，5.58(s，1H)，4.00(s，2H)，3.82-3.78(m，2H)，3.36(t，J＝8.4Hz，1H)，3.26(s，3H)，3.13-3.10(m，2H)，2.34(t，J＝11.4Hz，2H)，2.25-2.16(m，2H)，1.01(d，J＝6.0Hz，6H)。
表4.晶型D的XRPD
Figure BDA0000997493860000201
富马酸盐可以在各种条件下产生为晶型D。该晶型可以通过用如表5中所示的晶型B或D的晶体作为种晶来产生。如表6中所示，可以通过将母体化合物(I)溶解在极性溶剂如乙酸乙酯、丙酮或乙醇中，并在极性溶剂如甲醇、乙醇、THF和异丙醇中递送富马酸来直接结晶该盐。在加入抗溶剂如MTBE时，收率一般提高。不产生晶型D的条件包括当化合物(I)溶解到较低极性的溶剂如乙腈、2-甲基四氢呋喃和甲基异丁基酮中时。另外，加入己烷作为抗溶剂并不促进晶型D。
如表7中所见，也可以通过将化合物(I)溶解到适合的溶剂如甲醇、乙醇、THF或丙酮中，并将富马酸直接作为固体递送来产生优选的晶型D。在加入抗溶剂如MTBE或IBAc时，收率增加。当主要溶剂极性较低时，通过该方法不形成晶型D，正如使用乙酸乙酯和MTBE的情况一样。
未能产生2:1化合物(I)/富马酸晶体盐。将两当量的化合物(I)溶解到主要溶剂如EtOAc、EtOH、THF、IPA中，并将一当量的富马酸作为固体加入，或者在具有IPA或EtOH的溶液中加入。得到的溶液加热到50℃达30min并冷却到室温。加入MTBE，并且浆化混合物24h。通过1H NMR进行的固体和过滤物二者的表征揭示了仅获得1:1化合物(I)/富马酸盐。
表5.利用种晶的富马酸盐结晶
Figure BDA0000997493860000211
表6.富马酸盐的结晶
Figure BDA0000997493860000212
Figure BDA0000997493860000221
表7.富马酸作为固体加入的结晶
Figure BDA0000997493860000222
组合盐筛选结果的再评分
从初始组合过程，仅富马酸盐鉴别为晶体。对来自高通量筛选的结果进行再评价，并针对每种抗衡离子产生与溶剂无关的新的评分。通过组合所有溶剂的过往评分(固体形成的目视检查、双折射、拉曼光谱的独特性和阈值溶解度)，并针对主板和蒸发板二者将它们加和而对不同的盐进行这种再评分。
两种最高再评分的酸—马来酸和甲磺酸—在另外的溶剂和抗溶剂条件下作进一步评价。从甲磺酸获得的盐表现出吸湿性。然而，鉴别了与马来酸的晶体盐。化合物A的马来酸盐的制备和表征在下文中描述。
实施例7：制备1:1化合物(I)马来酸盐的晶型A
将化合物(I)(4.96g，9.3mmol)装入到配有搅拌棒的250mL三颈圆底烧瓶中。加入丙酮(55mL)并加热到50℃。加入马来酸(20mL的0.5M丙酮溶液)，产生在1min后变得混浊的澄清溶液。将该溶液冷却到室温并搅拌24h成为浓浆料。过滤固体、用MTBE洗涤并在60℃下真空干燥30h以产生白色固体(5.52g，91％)。该盐通过XRPD表征为晶体，并标记为晶型A。
1H NMR(CD3OD)δ:8.04(d，J＝8.5Hz，1H)，7.77(d，J＝8.0Hz，2H)，7.45-7.61(m，5H)，7.07(d，J＝8.8Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.62(dd，J＝8.5，2.5Hz，1H)，6.27(s，2H)，5.59(d，J＝2.5Hz，1H)，4.30(s，2H)，3.86-3.82(m，2H)，3.34-3.43(m，2H)，3.27(s，3H)，2.74-2.68(m，2H)，2.32-2.10(m，2H)，1.23(d，J＝6.3Hz，6H)。
表8.马来酸盐晶型A的XRPD
Figure BDA0000997493860000231
Figure BDA0000997493860000241
马来酸盐晶型A可以在加入或不加入非极性抗溶剂如MTBE的情况下从极性溶剂如EtOH、丙酮、乙酸异丙酯、乙酸乙酯、异丙醇或THF产生。未能产生2:1化合物(I)/马来酸晶体盐。
制备化合物(I)的无定形盐
实施例8：制备化合物(I)的HCl盐
将化合物(I)(6.7g，12.5mmol)溶解到THF(25mL)中，将醚中的1M HCl(13.8mL，13.8mmol)在室温下加入，并用醚(200mL)稀释该溶液。混合物在室温下储存1h，并过滤所得固体。该固体在静置时形成凝胶并被溶解到水(100mL)中和冷冻干燥成黄色粉末(5.8g，81％)。
1H NMR(400MHz，CD3OD)δ7.75(d，J＝8.4Hz，1H)，7.57(d，J＝8.0Hz，2H)，7.46(d，J＝8.0Hz，2H)，7.42(s，1H)，7.35(d，J＝16.8Hz，1H)，7.30(d，J＝16.4Hz，1H)，6.82(d，J＝9.2Hz，1H)，6.80(d，J＝8.8Hz，1H)，6.51(d，J＝8.4Hz，1H)，5.19(s，1H)，4.28(s，2H)，3.92-3.80(m，2H)，3.40-3.30(m，2H)，3.27(t，J＝8.4Hz，1H)，3.15(s，3H)，2.70(t，J＝11.4Hz，2H)，2.15-2.05(m，2H)，1.18(d，J＝6.0Hz，6H)。
实施例9：制备化合物(I)的磷酸盐
将化合物(I)(148mg，0.27mmol)溶解到EtOAc(0.5mL)中，在50℃加入EtOAc中的0.5M磷酸(0.58mL，0.28mmol)，并搅拌溶液15min和冷却到室温。过滤固体并在60℃下干燥4天以产生为白色固体的标题化合物(I)(149mg，85％)。
1H NMR(CD3OD)δ8.00(d，J＝8.5Hz，1H)，7.72(d，J＝8.2Hz，2H)，7.49-7.58(m，5H)，7.04(d，J＝8.0Hz，1H)，6.84(d，J＝8.5Hz，1H)，6.61(dd，J＝8.5，2.5Hz，1H)，5.58(d，J＝2.5Hz，1H)，4.21(s，2H)，3.97-3.89(m，2H)，3.34-3.39(m，1H)，3.26(s，3H)，2.55(t，J＝11.8Hz，2H)，2.16-2.26(m，2H)，1.19(d，J＝6.0Hz，6H)。
溶解度测试和药代动力学分析
方法：
将(I)的HCl盐、富马酸盐晶型D和马来酸盐晶型A在溶液中的单次口服剂量和作为胶囊中的粉末以5mg/kg施用于雌性Sprague-Dawley大鼠。在肝素锂的存在下收集血液样品，并离心以产生血浆。然后通过LC/MS分析血浆的化合物(I)血浆水平。
制备用于大鼠给药的胶囊测试制品：
称重给药方案中涉及的所有动物并分配编号。用细尖记号笔认真编号对应于给药的每个动物的所有胶囊(9号的猪硬明胶胶囊，Torpac)。将小的塑料称重盘放在天平上，将一个胶囊盖放在该盘上，将胶囊装填器的基部和胶囊的另一部分装载到储器中。将天平去皮。将漏斗放在胶囊装填设备的顶部上，并认真记录总质量。将一片4”x4”蜡纸对半折叠，在中间向下产生折痕。将少量细磨化合物(如果需要，使用研钵和研杵研磨化合物)放置在蜡纸的折痕中，并再折叠。将折叠的蜡纸轻轻地在胶囊装填器漏斗设备上形成角度。用细的药勺(scapula)将一定量的化合物粉末扫(tease)出折痕到漏斗上，使它流到进料台(loadingbay)中并最终到胶囊中。记录与总质量的质量差异。移走胶囊装填漏斗并关闭天平门以确认化合物的绝对重量在胶囊内。将漏斗放回到胶囊装填设备，并持续装填直到期望的药物量在胶囊内。注意：在将微小量加入到胶囊时，简单地将沉积在漏斗上的细粉状药物刷到装填柱中。移走漏斗并记录重量。通过用称重的材料乘以生物等效性比率来计算实际药物的量。记录实际药物的量。使用称量盘上的胶囊盖紧紧封闭胶囊直到其卡扣定位。
对所有的动物(n＝3/组)以5mL/kg体积口服给药。给药后，使每只大鼠在每个指定时间点放血。对于对照动物，通过相同程序收集血液。从侧隐静脉收集血液。将血液等分试样(～50μL)收集到用肝素锂涂布的管中，轻轻混合，然后保持在冰上，并在收集1小时内在2500xg下室温离心15分钟。收集血浆层，保持在冰上，并最后在-80℃下维持冷冻直到进一步处理。
生物分析方法
使用HPLC/串联四极质谱(HPLC-MS)进行生物分析定量。计算并报告血浆浓度和T1/2。
血浆分析：
将DMSO中的5mg/mL标准溶液稀释100倍，随后在50％DMSO中连续稀释。将连续稀释的等分试样(2μL)与18μL对照血浆混合(总计20μL)以用作标准曲线。然后用含有100ng/mL戊脉安(verapamil)的冰冷乙腈将血浆样品(20μL)和标准样品稀释5x作为内标(80％(体积/体积)乙腈)。乙腈沉淀的样品和标准品通过0.22μm膜过滤到96孔格式中。过滤物然后用水稀释到30％乙腈。
剂量分析：
给药溶液(100μL)用DMSO(900μL)稀释以确保样品均一性。然后一式三份使所得溶液稀释到30％乙腈(含有内标)中，以使名义浓度小于500ng/mL，适合于LC-MS分析。从5mg/mL DMSO原液连续稀释到30％乙腈(含有内标)中提供了适合的标准曲线。将样品和标准品(10μL)注射到如下所述的LC-MS系统中。给药溶液的浓度以mg/mL报告。
LC-MS分析：
LC：每个样品和标准品的10μL通过Acquity UPLC以0.6mL/min注射到WatersAcquity CSH 1.7μm 2.1x100mm柱中。C18柱用10％乙腈平衡。化合物用至99％乙腈的梯度洗脱。所有的流动相都含有0.1％(体积/体积)甲酸。
色谱洗脱：
t(min) ％B
0 5
0.75 5
1 20
4.5 99.9
5 99.9
5.4 5
6 5
MS：柱洗脱物通过电喷雾离子化到串联四极质谱系统(Waters Xevo TQ)中来进行分析。针对对于内标特异性的三个离子对和对于分析物特异性的三种离子对来分析洗脱物的组成。
药代动力学分析
比较实验样品与标准曲线样品以测定化合物浓度。针对每个时间点报告平均化合物浓度(μg/mL+/-标准偏差)。检测限(LLOQ)报告为显示出小于20％的名义浓度变异的最低标准曲线样品。通过Excel插件PKfit进行PK分析；Cmax确定为在给定时间点观察到的最大平均浓度；报告t0至t最后小时的曲线下面积(AUC)。当最少3个终末时间点显示r2>0.8的一阶消除(first order elimination)时，报告血浆半衰期。
如表9所示，化合物(I)的晶体盐在去离子水中显示出与无定形磷酸盐和HCl盐相比更少溶解。在许多报告的案例中，无定形盐的增加的溶解度导致相对于更稳定的晶体形式，血浆浓度提高(Hancock and Parks(2000)Pharm.Res.17:397-404；Pudipeddi andSerajuddin(2005)J.Pharm.Sci.94:929-39)。然而，当比较无定形与晶体盐在作为胶囊中的粉末(PIC)口服给药至雌性Sprague-Dawley大鼠之后的血浆浓度-时间分布和药代动力学参数时，药代动力学参数中的差异是最小的(表10)。
表9：化合物(I)盐的表征总结
Figure BDA0000997493860000281
Figure BDA0000997493860000291
表10：在化合物(I)盐(胶囊中的粉末)PO施用至Sprague-Dawley大鼠后的药代动力学参数
Figure BDA0000997493860000292

Claims (8)

1.由以下结构式表示的化合物（I）的富马酸盐：
Figure 550640DEST_PATH_IMAGE002
，
化合物（I）
其中化合物（I）与富马酸之间的摩尔比率是1:1，
其中所述富马酸盐是晶体，其中所述盐的至少90重量%是单晶型，而且其中所述单晶型是单晶型D，所述单晶型D通过包括2θ为9.6°、12.8°、16.0°、16.9°、20.8°、21.2°、21.5°和22.0°±0.2处的峰的X射线粉末衍射图谱表征。
2.权利要求1所述的富马酸盐，其中所述单晶型是单晶型D，所述单晶型D通过包括2θ为9.6°、11.7°、12.0°、12.8°、16.0°、16.6°、16.9°、18.1°、19.2°、19.8°、20.7°、20.8°、21.2°、21.5°、22.0°、22.5°、24.0°、26.0°和29.8° ± 0.2处的峰的X射线粉末衍射图谱表征。
3.权利要求1所述的富马酸盐，其中所述单晶型是单晶型D，所述单晶型D通过219°C的差示扫描量热（DSC）峰相变温度表征。
4.一种药物组合物，其包含权利要求1-3中任一项所述的富马酸盐以及药学上可接受的载体或稀释剂。
5.有效量的权利要求1-3中任一项所述的盐或其药物组合物在制备用于治疗患有癌症的受试者的药物中的用途。
6.权利要求5所述的用途，其中所述癌症选自肺癌、乳腺癌、结肠癌、成神经细胞瘤、前列腺癌、黑素瘤、多形性成胶质细胞瘤、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、骨肉瘤、生殖细胞瘤、神经胶质瘤、纤维肉瘤、胃肠肉瘤、纤维性组织细胞瘤、圆形细胞肉瘤、滑膜肉瘤、宫颈癌、肛门生殖器癌、头颈癌和口咽癌。
7.权利要求6所述的用途，其中所述癌症选自肺癌、乳腺癌和结肠癌。
8.权利要求7所述的用途，其中所述癌症是乳腺癌。
CN201480064037.9A 2013-10-18 2014-10-17 Plk-4抑制剂的盐和晶型 Active CN105764899B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN202110510808.4A CN113248486A (zh) 2013-10-18 2014-10-17 Plk-4抑制剂的盐和晶型

Applications Claiming Priority (3)

Application Number Priority Date Filing Date Title
US201361892564P 2013-10-18 2013-10-18
US61/892,564 2013-10-18
PCT/CA2014/051001 WO2015054793A1 (en) 2013-10-18 2014-10-17 Salt and crystal forms of plk-4 inhibitor

Related Child Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110510808.4A Division CN113248486A (zh) 2013-10-18 2014-10-17 Plk-4抑制剂的盐和晶型

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN105764899A CN105764899A (zh) 2016-07-13
CN105764899B true CN105764899B (zh) 2021-06-01

Family

ID=52827507

Family Applications (2)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110510808.4A Pending CN113248486A (zh) 2013-10-18 2014-10-17 Plk-4抑制剂的盐和晶型
CN201480064037.9A Active CN105764899B (zh) 2013-10-18 2014-10-17 Plk-4抑制剂的盐和晶型

Family Applications Before (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN202110510808.4A Pending CN113248486A (zh) 2013-10-18 2014-10-17 Plk-4抑制剂的盐和晶型

Country Status (26)

Country Link
US (5) US9884855B2 (zh)
EP (1) EP3057965B1 (zh)
JP (1) JP6492072B2 (zh)
KR (3) KR20220063299A (zh)
CN (2) CN113248486A (zh)
AU (1) AU2014336929B9 (zh)
CA (1) CA2926845C (zh)
CY (1) CY1121484T1 (zh)
DK (1) DK3057965T3 (zh)
EA (1) EA031569B1 (zh)
ES (1) ES2718603T3 (zh)
HR (1) HRP20190564T1 (zh)
HU (1) HUE043194T2 (zh)
IL (1) IL245038B (zh)
LT (1) LT3057965T (zh)
ME (1) ME03377B (zh)
MX (1) MX359069B (zh)
NZ (1) NZ718744A (zh)
PL (1) PL3057965T3 (zh)
PT (1) PT3057965T (zh)
RS (1) RS58413B1 (zh)
SG (1) SG11201602783SA (zh)
SI (1) SI3057965T1 (zh)
TR (1) TR201902875T4 (zh)
TW (1) TWI659952B (zh)
WO (1) WO2015054793A1 (zh)

Families Citing this family (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US8481525B2 (en) 2009-04-06 2013-07-09 University Of Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
SG183875A1 (en) 2010-04-06 2012-10-30 Univ Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
SG11201602783SA (en) 2013-10-18 2016-05-30 Univ Health Network Salt and crystal forms of plk-4 inhibitor
AU2018328773B2 (en) * 2017-09-08 2023-11-16 University Health Network Combination therapies for inhibition of Polo-like Kinase 4
MX2021012993A (es) 2019-04-24 2021-12-10 Univ Health Network Forma cristalina s4 del inhibidor de plk4 fumarato de (1r,s2)-(e)-2-(3-(4-((cis-2,6-dimetilmorfolino)metil)estiril)- 1 h-imidazol-6-il)-5'-metoxispiro[ciclopropan-1,3'-indolin]-2'-ona.
BR112022011052A2 (pt) * 2019-12-06 2022-08-16 Univ Health Network Tratamento para leucemia mieloide aguda ou síndrome mielodisplásica
EP4337198A1 (en) 2021-05-11 2024-03-20 Oric Pharmaceuticals, Inc. Polo like kinase 4 inhibitors

Citations (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
WO2007110559A1 (en) * 2006-03-29 2007-10-04 Pliva Hrvatska D.O.O. Pharmaceutically acceptable salts and polymorphic forms of sildenafil
CN101155791A (zh) * 2005-02-03 2008-04-02 拜耳先灵医药股份有限公司 作为极体样激酶（plk）抑制剂药剂的噻唑烷酮
WO2012048411A1 (en) * 2010-10-13 2012-04-19 University Health Network Plk-4 inhibitors and method of treating cancer with same
US8263596B2 (en) * 2010-04-06 2012-09-11 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
WO2012121764A1 (en) * 2010-11-25 2012-09-13 Ratiopharm Gmbh Novel salts and polymorphic forms of afatinib
CN103122001A (zh) * 2007-09-25 2013-05-29 武田药品工业株式会社 Polo样激酶抑制剂
US8481525B2 (en) * 2009-04-06 2013-07-09 University Of Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same

Family Cites Families (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
US2483323A (en) * 1945-08-01 1949-09-27 Kay Fries Chemicals Inc Method of preparing phenyl ethyl alcohol
AU2003286604A1 (en) 2002-10-21 2004-05-13 Irm Llc Oxindoles with anti-hiv activity
US8227640B2 (en) * 2007-03-23 2012-07-24 Institute Of Bioengineering And Nanotechnology Palladium catalysts
US8765748B2 (en) 2007-12-21 2014-07-01 University Health Network Indazolyl, benzimidazolyl, benzotriazolyl substituted indolinone derivatives as kinase inhibitors useful in the treatment of cancer
JP5801285B2 (ja) * 2009-04-29 2015-10-28 ネルビアーノ・メデイカル・サイエンシーズ・エツセ・エルレ・エルレ Ｃｄｋ阻害物質の塩
CA2803446C (en) 2010-07-02 2019-06-04 University Health Network Use of plk4 antagonists for treating pten mutant diseases
WO2013053051A1 (en) * 2011-10-12 2013-04-18 University Health Network Indazole compounds as kinase inhibitors and method of treating cancer with same
SG11201602783SA (en) 2013-10-18 2016-05-30 Univ Health Network Salt and crystal forms of plk-4 inhibitor
EA030089B1 (ru) 2013-10-18 2018-06-29 Юниверсити Хелс Нетуорк Лечение рака поджелудочной железы

Patent Citations (9)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101155791A (zh) * 2005-02-03 2008-04-02 拜耳先灵医药股份有限公司 作为极体样激酶（plk）抑制剂药剂的噻唑烷酮
WO2007110559A1 (en) * 2006-03-29 2007-10-04 Pliva Hrvatska D.O.O. Pharmaceutically acceptable salts and polymorphic forms of sildenafil
CN103122001A (zh) * 2007-09-25 2013-05-29 武田药品工业株式会社 Polo样激酶抑制剂
US8481525B2 (en) * 2009-04-06 2013-07-09 University Of Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer with same
US8263596B2 (en) * 2010-04-06 2012-09-11 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
CN102892766A (zh) * 2010-04-06 2013-01-23 大学健康网络 激酶抑制剂和用其治疗癌症的方法
US8481533B2 (en) * 2010-04-06 2013-07-09 University Health Network Kinase inhibitors and method of treating cancer
WO2012048411A1 (en) * 2010-10-13 2012-04-19 University Health Network Plk-4 inhibitors and method of treating cancer with same
WO2012121764A1 (en) * 2010-11-25 2012-09-13 Ratiopharm Gmbh Novel salts and polymorphic forms of afatinib

Non-Patent Citations (1)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Functional Characterization of CFI-400945,a Polo-like Kinase 4 Inhibitor,as a Potential Anticancer Agent;Jacqueline M. Mason et al.;《Cancer Cell》;20140811;第26卷;163-176 *

Also Published As

Publication number Publication date
CA2926845A1 (en) 2015-04-23
JP2016537326A (ja) 2016-12-01
AU2014336929B9 (en) 2019-03-21
EA201690755A1 (ru) 2016-09-30
ES2718603T3 (es) 2019-07-03
US20180155335A1 (en) 2018-06-07
EA031569B1 (ru) 2019-01-31
AU2014336929B2 (en) 2018-11-22
SG11201602783SA (en) 2016-05-30
CY1121484T1 (el) 2020-05-29
US20190248775A1 (en) 2019-08-15
US20210269428A1 (en) 2021-09-02
KR20220063299A (ko) 2022-05-17
KR102395737B1 (ko) 2022-05-10
US11667627B2 (en) 2023-06-06
DK3057965T3 (en) 2019-04-01
CA2926845C (en) 2023-06-13
TWI659952B (zh) 2019-05-21
JP6492072B2 (ja) 2019-03-27
EP3057965A4 (en) 2017-05-24
RS58413B1 (sr) 2019-04-30
TR201902875T4 (tr) 2019-03-21
CN113248486A (zh) 2021-08-13
KR20160070106A (ko) 2016-06-17
NZ718744A (en) 2021-07-30
PL3057965T3 (pl) 2019-08-30
IL245038B (en) 2019-11-28
EP3057965A1 (en) 2016-08-24
MX359069B (es) 2018-09-12
US10472353B2 (en) 2019-11-12
IL245038A0 (en) 2016-05-31
EP3057965B1 (en) 2019-01-02
KR20210137251A (ko) 2021-11-17
US10919886B2 (en) 2021-02-16
MX2016004963A (es) 2016-06-28
TW201609717A (zh) 2016-03-16
US20200140428A1 (en) 2020-05-07
HRP20190564T1 (hr) 2019-05-17
HUE043194T2 (hu) 2019-08-28
PT3057965T (pt) 2019-04-23
US20160264559A1 (en) 2016-09-15
ME03377B (me) 2020-01-20
US10392374B2 (en) 2019-08-27
SI3057965T1 (sl) 2019-04-30
LT3057965T (lt) 2019-03-12
WO2015054793A1 (en) 2015-04-23
US9884855B2 (en) 2018-02-06
CN105764899A (zh) 2016-07-13

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN105764899B (zh) Plk-4抑制剂的盐和晶型
AU2014336929A1 (en) Salt and crystal forms of PLK-4 inhibitor
US11878980B2 (en) Solid forms of TTK inhibitor
WO2020215155A1 (en) Crystal form s4 of the plk4 inhibitor (lr,2s)-(e)-2-(3-(4-((cis-2,6-dimethylmorpholino)methyl)styryl)- 1 h-imidazol-6- yl)-5'-methoxyspiro[cyclopropane-l,3'-indolin]-2'-one fumarate
EA044843B1 (ru) Кристаллическая форма ингибитора plk4

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant