TWI516262B - 激酶抑制劑及以其治療癌症的方法 - Google Patents

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Description

激酶抑制劑及以其治療癌症的方法 相關專利申請案之交叉參考
本申請案主張2010年4月6日申請之美國臨時申請案第61/321,332號及2010年4月6日申請之美國臨時申請案第61/321,329號的權益。本申請案亦主張2010年4月6日申請之國際申請案第PCT/CA2010/000518號的權益。該兩個申請案之全部教示內容均以引用的方式併入本文中。
本發明係關於新穎的激酶抑制劑、包含其的醫藥組成物、與使用其治療患有癌症的個體的方法。
在各種疾病(例如癌症)之新穎治療劑的搜尋中，蛋白質激酶已成為廣泛研究之對象。已知蛋白質激酶藉由實現磷醯基自三磷酸核苷轉移至參與信號傳導路徑之蛋白質受體來介導細胞內信號轉導。存在多種激酶及路徑，經由該等激酶及路徑，細胞外及其他刺激引起細胞內部發生多種細胞反應。
絲胺酸/蘇胺酸激酶之polo樣激酶(PLK)家族包含至少4個已知成員：PLK1、PLK2(亦稱為Snk)、PLK3(亦稱為Fnk或Prk)及PLK4(亦稱為Sak)。PLK4為PLK家族中瞭解最少且最具多樣性的成員。PLK4之N端催化域具有與PLK1-3之N端催化域不同的受質特異性。PLK4亦具有僅包含單一polo盒序列，而不包含PLK1-3中之串聯PB序列的相異C端，其似乎充當均二聚結構域，而非局部化結構域(Lowery等人,(2005) Oncogene 24: 248-259)。
PLK4已知參與控制有絲分裂進入及退出，且為中心體複製之調節劑(Habedanck等人,Nature Cell Biology 7: 1140-1146,2005)。PLK4轉錄物在S期至M期中增加，且蛋白質泛素化且被後期促進複合物(APC)破壞(Hudson等人,Curr. Biol. 11: 441-446,2001；Fode等人,Mol. Cell. Biol. 16: 4665-4672,1996)。PLK4為以下者所需：後期有絲分裂進程(Fode等人,PNAS. 91: 6388-6392,1994；Hudson等人,Curr. Biol. 11: 441-446,2001)、細胞存活及囊胚形成後胚胎發育(Hudson等人,Curr. Biol. 11: 441-446,2001)。PLK4基因剔除小鼠為胚胎致死型(E7.5)，其中有絲分裂細胞及凋亡細胞明顯增加(Hudson等人,Curr. Biol. 11: 441-446,2001)。PLK4之轉錄受p53抑制(Li等人,Neoplasia 7: 312-323,2005)。此抑制作用可能經由組蛋白脫乙醯基酶(HDAC)抑制因子之募集介導，且抑制作用似乎促成p53誘導之細胞凋亡(Li等人,Neoplasia 7: 312-323,2005)。
已報導PLK4在結腸直腸腫瘤中過度表現，而在鄰近正常腸黏膜中據報導表現較低(Macmillian等人，Ann.Surg.Oncol.8：729-740,2001)。另外，已報導PLK4 mRNA在一些腫瘤細胞株中過度表現(Hitoshi等人，美國專利申請案第US 2003/0027756號)。另外，申請人在2007年11月20日申請之同在申請中之美國臨時申請案第61,003,825號中描述PLK4在基底樣腫瘤中過度表現(該案之全部教示內容以引用的方式併入本文中)。
人類乳頭狀瘤病毒(HPV-16)E7致癌蛋白在HPV相關性會陰及口咽癌中過度表現。E7致癌蛋白經由涉及在單一母體中心粒上同時形成多個子體的路徑引發中心體過度複製。HPV-16 E7致癌蛋白已用作剖析異常中心粒生體合成的工具，且多條證據認定PLK4在此過程中起關鍵作用(Duensing等人，Environ.Mol.Mutagen.50：741-747,2009)。另外，在穩定表現HPV-16 E7的角質化細胞中發現PLK4轉錄量增加。已發現HPV-16 E7上調PLK4 mRNA的能力依賴於其降解視網膜母細胞瘤(pRb)蛋白質的能力，說明E2F介導之基因轉錄在PLK4之調節解除中具有作用(Korzeniewski等人，AACR會議(AACR Meeting),Washington,2010，摘要5354)。此等結果確認PLK4為可供小分子抑制以防止HPV相關性癌症中之中心粒異常、有 絲分裂失真及惡性疾病進展的目標。
因此，抑制蛋白質激酶、尤其PLK4的藥劑具有治療癌症的潛力。對於可充當蛋白質激酶抑制劑、尤其PLK4抑制劑的其他藥劑存在需要。
申請人現已發現，某些螺環丙基吲哚啉酮化合物為有效激酶抑制劑，諸如polo樣激酶4(PLK4)及Aurora激酶(參見實施例B-F)。申請人現亦已發現，此等螺環丙基吲哚啉酮化合物具有有效抗癌活性(參見實施例J)且展現抗血管生成活性(實施例K)。根據此等發現，本文中揭示螺環丙基吲哚啉酮化合物、其醫藥組成物及用螺環丙基吲哚啉酮化合物治療癌症的方法。
本發明之一具體實例為由結構式(I)或(II)表示之化合物： 結構式(I)及(II)之化合物的醫藥學上可接受之鹽亦包括於本發明中。此等結構式中之變數定義如下：Ra為-F、甲氧基、甲基或乙基；R4為-H、甲基、乙基、2-甲氧基乙基或-CH2CONH2；及 R6為-C=C-(視情況經取代之苯基)。結構式(I)及(II)中之變數的替代值提供如下：Ra為-F、甲氧基、甲基或乙基；R4為-H或甲基；及R6為-C=C-(苯基)，其中-CH=CH-(苯基)中的苯基視情況經一或多個獨立地選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、(C1-6胺基烷基)、(C1-6烷基胺基)C1-6烷基、(C1-6二烷基胺基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、胺基、C1-6烷基胺基、C1-6二烷基胺基、-(CH2)0-3-N-哌啶基、-(CH2)0-3-N-嗎啉基、-(CH2)0-3-N-吡咯啶基、-(CH2)0-3-N-哌基及-(CH2)0-3-N-吖基，其中N-哌基視情況在N'上經C1-6烷基或C1-6醯基取代。
在另一具體實例中，本發明為實施例部分中所揭示之呈中性化合物或其醫藥學上可接受之鹽形式的化合物中之任一者。
在另一具體實例中，本發明為一種醫藥組成物，其包含：i)由結構式(I)表示之化合物、結構式(II)表示之化合物、實施例中所描繪之化合物或任何上述化合物之醫藥學上可接受之鹽；及ii)醫藥學上可接受之載劑或稀釋劑。
本發明之另一具體實例為一種治療患有癌症之個體的方法，其包含向該個體投予治療有效量之結構式(I)表示之化合物、結構式(II)表示之化合物、實施例中所描繪之化合物或任何上述化合物之醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一具體實例為一種抑制需要抑制Aurora B 及/或PLK-4之個體之Aurora B及/或PLK-4的方法，其包含向該個體投予治療有效量之結構式(I)表示之化合物、結構式(II)表示之化合物、實施例中所描繪之化合物或任何上述化合物之醫藥學上可接受之鹽。
本發明之另一具體實例為結構式(I)表示之化合物、結構式(II)表示之化合物、實施例中所描繪之化合物或任何上述化合物之醫藥學上可接受之鹽的用途。或者，療法係用於抑制需要抑制Aurora B及/或PLK-4之個體之Aurora B及/或PLK-4。
本發明之另一具體實例為結構式(I)表示之化合物、結構式(II)表示之化合物、實施例中所描繪之化合物或任何上述化合物之醫藥學上可接受之鹽的用途。
本發明之另一具體實例為結構式(I)表示之化合物、結構式(II)表示之化合物、實施例中所描繪之化合物或任何上述化合物之醫藥學上可接受之鹽的用途，其係用於製造用於抑制需要抑制Aurora B及/或PLK-4之個體之Aurora B及/或PLK-4的醫藥品。
本發明之化合物之特定實例包括下文實施例中所例示者、其立體異構體及其醫藥學上可接受之鹽。
在本文所述的結構式中，當氫原子描繪位於結構式之芳族環的特定位置時，在彼(彼等)特定位置不允許取代。
當化合物為兩種或兩種以上不同結構化合物處於快速 平衡狀態下的混合物時，存在互變異構體形式。本發明之某些化合物可以互變異構體形式存在。舉例而言，結構式(I)所涵蓋的以下化合物包括至少以下互變異構體形式： 應瞭解，當用名稱或結構描繪化合物之一種互變異構體形式時，包括該化合物之所有互變異構體形式。
本發明之化合物含有至少兩個手性中心及環丙烷，且因此以立體異構體形式存在，諸如關於環丙烷的異構體(亦即順/反式異構體)、對映異構體及/或非對映異構體。當在未指示立體化學下描繪或命名本發明之化合物時，應瞭解，涵蓋兩種立體異構性純形式(例如純順式或純反式、對映異構性純或非對映異構性純)及立體異構體混合物。舉例而言，結構式(I)表示之化合物具有下文所示之「順式」及「反式」異構體：
環A與環B為順式；及
環A與環B為反式。
片語「環A與環B為順式」意謂環A與環B均位於環丙烷之同側，而片語「環A與環B為反式」意謂環A與環B位於環丙烷之不同側。順式/反式種類之立體異構體亦稱作幾何異構體。相應地，由結構式(I)描繪的本發明之化合物包括純順式異構體、純反式異構體、及其混合物，包括富含順式幾何異構體的順式/反式混合物及富含反式幾何異構體的順式/反式混合物。舉例而言，結構式(II)描繪環A與環B之間的順式關係。應瞭解，結構式(I)關於環A及B的順式與反式形式均涵蓋於本發明內。
當用名稱或結構描繪幾何異構體時，應瞭解，所命名或所描繪幾何異構體的幾何異構體純度為至少60 wt%、70 wt%、80 wt%、90 wt%、99 wt%或99.9 wt%純。幾何異構體純度係藉由將混合物中所命名或所描繪幾何異構體之重量除以混合物中兩種幾何異構體之總重量來確定。
外消旋混合物意謂一種對映異構體佔50%且相應的對映異構體佔50%。本發明涵蓋本發明之所有對映異構性純化合物、對映異構性增濃化合物、非對映異構性純化合物、非對映異構性增濃化合物、及外消旋混合物、及非對映異構體混合物。
對映異構體及非對映異構體混合物可利用熟知方法解析為其組分對映異構體或立體異構體，熟知方法諸如手性相氣相層析、手性相高效液相層析、化合物以手性鹽錯合物形式結晶、或化合物於手性溶劑中結晶。對映異構體及非對映異構體亦可利用熟知的不對稱合成方法自非對映異構性或對映異構性純中間物、試劑及催化劑獲得。
除非另有說明，否則當用指示單一對映異構體的名稱或結構表示化合物時，該化合物為至少60%、70%、80%、90%、99%或99.9%光學純(亦稱作「對映異構性純」)。光學純度為混合物中所命名或所描繪對映異構體之重量除以混合物中兩種對映異構體之總重量。
當用結構命名或描繪所揭示化合物之立體化學且所命名或所描繪結構涵蓋一種以上立體異構體(例如，如在非對映異構體對中)時，應瞭解，包括所涵蓋立體異構體之一或所涵蓋立體異構體之任何混合物。此外應瞭解，所命名或所描繪立體異構體之立體異構體純度為至少60 wt%、70 wt%、80 wt%、90 wt%、99 wt%或99.9 wt%。在此情況下，立體異構體純度係藉由將混合物中該名稱或結構所涵蓋之立體異構體的總重量除以混合物中所有立體異構體的總重量來確定。
本發明包括本文中所揭示之化合物的醫藥學上可接受之鹽。所揭示化合物具有鹼性胺基且因此可與醫藥學上可接受之酸形成醫藥學上可接受之鹽。本發明之化合物之適合的醫藥學上可接受之酸加成鹽包括無機酸(諸如鹽酸、氫溴酸、磷酸、偏磷酸、硝酸及硫酸)之鹽及有機酸(諸如乙酸、苯磺酸、苯甲酸、檸檬酸、乙烷磺酸、反丁烯二酸、葡萄糖酸、乙醇酸、羥乙基磺酸、乳酸、乳糖酸、順丁烯二酸、蘋果酸、甲烷磺酸、丁二酸、對甲苯磺酸及酒石酸)之鹽。具有酸性基團(諸如羧酸)的本發明之化合物可與醫藥學上可接受之鹼形成醫藥學上可接受之鹽。適合的醫藥學上可接受之鹼鹽包括銨鹽、鹼金屬鹽(諸如鈉鹽及鉀鹽)及鹼土金屬鹽(諸如鎂鹽及鈣鹽)。具有四級銨基的化合物亦含有相對陰離子，諸如氯離子、溴離子、碘離子、乙酸根、過氯酸根及其類似離子。此等鹽之其他實例包括鹽酸鹽、氫溴酸鹽、硫酸鹽、甲烷磺酸鹽、硝酸鹽、順丁烯二酸鹽、乙酸鹽、檸檬酸鹽、反丁烯二酸鹽、酒石酸鹽[例如(+)-酒石酸鹽、(-)-酒石酸鹽或其混合物，包括外消旋混合物]、丁二酸鹽、苯甲酸鹽、及與胺基酸(諸如麩胺酸)形成的鹽。
如本文中所使用的術語「鹵基」意謂鹵素且包括氯、氟、溴及碘。
「脂族基團」為僅由碳及氫組成的非環狀非芳族基團，且視情況可含有一或多個不飽和單元，例如雙鍵及/或參鍵。脂族基團可為直鏈或分支鏈。脂族基團典型地含有約1個與約20個之間的碳原子，典型地含有約1個與約10個之間的碳原子，更典型地含有約1個與約6個之間的碳原子。「經取代之脂族基團」在任一或多個「可取代碳原子」上經取代。脂族基團中之「可取代碳原子」為脂族基團中鍵結至一或多個氫原子的碳。一或多個氫原子視情況可經適合取代基置換。「鹵基脂族基團」為經一或多個鹵原子取代的如上所定義之脂族基團。
術語「烷基」單獨或作為較大部分(諸如「烷氧基」、「鹵烷基」、「芳基烷基」、「烷基胺」、「二烷基胺」、「烷基胺基」、「二烷基胺基」、「烷基羰基」、「烷氧基羰基」及其類似基團)之一部分使用時意謂飽和直鏈或分支鏈脂族基團。如本文中所使用，C1-C6烷基稱為「低碳烷基」。類似地，術語「低碳烷氧基」、「低碳鹵烷基」、「低碳芳基烷基」、「低碳烷基胺」、「低碳二烷基胺」、「低碳烷基胺基」、「低碳二烷基胺基」、「低碳烷基羰基」、「低碳烷氧基羰基」包括含有1至6個碳原子的飽和直鏈及分支鏈。
術語「烯基」意謂具有至少一個雙鍵的直鏈或分支鏈脂族基團。
術語「炔基」意謂具有至少一個參鍵的直鏈或分支鏈脂族基團。
術語「烷氧基」意謂-O-烷基；「羥基烷基」意謂經羥基取代的烷基；「芳烷基」意謂經芳基取代的烷基；「烷氧基烷基」意謂經烷氧基取代的烷基；「烷基胺」意謂經烷基取代的胺；「環烷基烷基」意謂經環烷基取代的烷基；「二烷基胺」意謂經2個烷基取代的胺；「烷基羰基」意謂-C(O)-R，其中R為烷基；「烷氧基羰基」意謂-C(O)-OR，其中R為烷基；且其中烷基如上文所定義。
術語「鹵烷基」及「鹵烷氧基」意謂烷基或烷氧基，其視情況經一或多個鹵素原子取代。術語「鹵素」意謂F、Cl、Br或I。鹵烷基或鹵烷氧基中之鹵素較佳為F。
術語「醯基」意謂-C(O)R，其中R為視情況經取代之烷基或芳基(例如視情況經取代之苯基)。R較佳為未經取代之烷基或苯基。
「伸烷基」由-[CH2]z-表示，其中z為正整數，較佳為1至8，更佳為1至4。
「伸烯基」為其中一個亞甲基已經雙鍵置換的伸烷基。
術語「芳基」單獨或作為較大部分(如「芳烷基」、「芳烷氧基」或「芳氧基烷基」)之一部分使用時意謂碳環芳族環。術語「芳基」可與術語「芳基環」「碳環芳族環」「芳基」及「碳環芳族基」互換使用。芳基典型地具有6至14個環原子。實例包括苯基、萘基、蒽基、1,2-二氫萘基、1,2,3,4-四氫萘基、茀基、二氫茚基、茚基及其類似基團。「經取代之芳基」在任一或多個可取代環原子上經取代，該環原子為鍵結至氫的環碳原子。
術語「環烷基」係指單環或多環飽和烴環系統。舉例而言，C5-7環烷基包括(但不限於)環戊基、環己基或環戊基，其各自視情況經取代。
術語「雜芳基」、「雜芳族」、「雜芳基環」、「雜芳基團」、「雜芳族環」及「雜芳族基團」單獨或作為較大部分(如「雜芳烷基」或「雜芳基烷氧基」)之一部分使用時係指具有5個至14個選自碳及至少1個(典型地為1至4個，更典型地為1或2個)雜原子(例如氧、氮或硫)之環原子的芳族環基團。「雜芳基」包括單環及多環，其中單環雜芳族環與一或多個其他碳環芳族或雜芳族環稠合。因此，「5-14員雜芳基」包括單環、雙環或三環系統。
單環5-6員雜芳基之實例包括呋喃基(例如2-呋喃基、3-呋喃基)、咪唑基(例如N-咪唑基、2-咪唑基、4-咪唑基、5-咪唑基)、異唑基(例如3-異唑基、4-異唑基、5-異唑基)、二唑基(例如2-二唑基、5-二唑基)、唑基(例如2-唑基、4-唑基、5-唑基)、吡唑基(例如3-吡唑基、4-吡唑基)、吡咯基(例如1-吡咯基、2-吡咯基、3-吡咯基)、吡啶基(例如2-吡啶基、3-吡啶基、4-吡啶基)、嘧啶基(例如2-嘧啶基、4-嘧啶基、5-嘧啶基)、嗒基(例如3-嗒基)、噻唑基(例如2-噻唑基、4-噻唑基、5-噻唑基)、三唑基(例如2-三唑基、5-三唑基)、四唑基(例如四唑基)、噻吩基(例如2-噻吩基、3-噻吩基)、嘧啶基、吡啶基及嗒基。多環芳族雜芳基之實例包括咔唑基、苯并咪唑基、苯并噻吩基、苯并呋喃基、吲哚基、喹啉基、苯并三唑基、苯并噻唑基、苯并唑基、苯并咪唑基、異喹啉基、吲哚基、異吲哚基、吖啶基或苯并異唑基。「經取代之雜芳基」在任一或多個可取代環原子上經取代，該環原子為鍵結至氫的環碳或環氮原子。
術語「雜環基」或「雜環基團」意謂含有1-3個環雜原子之具有3至10個成員的單環非芳族環，或具有含7至20個成員及1至4個環雜原子的多環，其中該多環為具有一或多個單環非芳族雜環與一或多個芳族或雜芳族環稠合之多環。在一具體實例中，雜環基為具有單環非芳族雜環與苯基稠合的雙環。例示性多環雜環基團包括四氫異喹啉基(諸如1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基、2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基、1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基及2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)、異吲哚啉基(諸如2-乙基異吲哚啉-5-基、2-甲基異吲哚啉-5-基)、吲哚啉基、四氫苯并[f]氮呯基(諸如2,3,4,5-四氫苯并[f][1,4]氮呯-7-基)。
術語「非芳族雜環基團」意謂含有1-3個環雜原子之具有3至10個成員的單環非芳族環，或具有含7至20個成員及1至4個環雜原子的多環非芳族環。各雜原子獨立地選自氮、四級氮、氧化型氮(例如NO)；氧；及硫，包括亞碸及碸。經取代之非芳族雜環基可經由適合雜原子或碳原子連接。代表性非芳族雜環基包括嗎啉基、硫嗎啉基、吡咯啶酮基、吡咯啶基、哌啶基、哌基、乙內醯脲基、戊內醯胺基、環氧乙烷基、氧雜環丁烷基、四氫呋喃基、四氫哌喃基、四氫吡啶基、四氫嘧啶基、四氫噻吩基、四氫硫哌喃基及其類似基團。「經取代之非芳族雜環基」在任一或多個可取代環原子上經取代，該環原子為鍵結至氫的環碳或環氮原子。
除非另有說明，否則適於經取代脂族基團、芳基、雜芳基及非芳族雜芳基的取代基包括：i)鹵素、-C(O)OR1、-C(O)R1、-C(S)R1、-OC(O)R1-、-C(O)NR1R2、-C(S)NR1R2、-OC(O)NR1R2、-S(O)R1、-S(O)2R1、-SO3R1、-SO2NR1R2、-OR1、-SR1、-NR1R2、-NR2C(O)R1、-NR2S(O)R1、-NR2C(O)OR1、-NR2C(O)ONR1R2、-N(R2)C(O)NR1R2、-NR2SO2NR1R2、-NR2SO2R1、-NO2、-CN、-NCS；或兩個鄰位取代基一起形成-O-[CH2]p-O-、-S-[CH2]p-S-或-[CH2]q-；或ii) C1-10脂族基團、視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、硝基、氰基、-N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-NR21C(O)R21、-SO2R22、-SO2N(R21)2、-NR21SO2R22、-NR21C(O)OR21、-OC(O)N(R21)2、-NR21C(O)N(R21)2、-NRC(O)ON(R)2、-NR21SO2N(R21)2、-OR21、-SR21、C1-10鹵烷氧基、-C(O)R21、-C(O)OR21及-OC(O)R21；或iii)(C0-10伸烷基)-Ar1、(C2-10伸烯基)-Ar1，其中Ar1為C6-14芳基或5-14員雜芳基，各自視情況且獨立地經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、硝基、氰基、C1-10烷基、C1-10鹵烷基、(C1-10鹵烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羥基烷基、C1-10胺基烷基、(C1-10烷基胺基)C1-10烷基、(C1-10二烷基胺基)C1-10烷基、-N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-NR21C(O)R21、-SO2R22、-SO2N(R21)2、-NR21SO2R22、-NR21C(O)N(R21)2、-NRC(O)ON(R)2、-NR21SO2N(R21)2、-OR21、-SR21、C1-10鹵烷基、-C(O)R21、-C(O)OR21、-OC(O)R21、苯基及5-6員雜芳基，其中該苯基及該5-6員雜芳基各自獨立地且視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；各R1獨立地為：i)氫；ii)C6-14芳基或5-14員雜芳基，各自視情況且獨立地經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、-NO2、-CN、-NCS、C1-C10脂族基、(C1-10伸烷基)-Ar10、(C2-10伸烯基)-Ar10、-C(O)OR10、-C(O)R10、-C(S)R10、-OC(O)R10、-C(O)N(R11)2、-C(S)N(R11)2、-OC(O)N(R11)2、-S(O)R12、-S(O)2R12、-SO3R12、-SO2N(R11)2、-OR10、-SR10、-N(R11)2、-NR11C(O)R10、-NR11S(O)R12、-NR11C(O)OR12、-N(R11)C(O)N(R11)2、-NR11SO2N(R11)2及-NR11SO2R12；或iii)C1-10脂族基團，視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、-NO2、-CN、-NCS、Ar10、-C(O)OR10、-C(O)R10、-C(S)R10、-OC(O)R10、-C(O)N(R11)2、-C(S)N(R11)2、-OC(O)N(R11)2、-S(O)R12、 -S(O)2R12、-SO3R12、-SO2N(R11)2、- OR10、-SR10、-N(R11)2、-NR11C(O)R10、- NR11S(O)R12、-NR11C(O)OR12、-N(R11)C(O)N(R11) 2、-NR11SO2N(R11)2及- NR11SO2R12，其限制條件為，當取代基為-S(O)R1、-S(O) 2R1、-SO3R1、-NR2S(O)R1或- NR2SO2R1時，R1不為氫；各R2獨立地為-H或C1- C6烷基，或者與NR1一起形成視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組之取代基取代的非芳族雜環基：=O、=S、鹵素、硝 基、氰基、羥基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6羥基烷基、胺基、C1-6烷基胺基、C1- 6二烷基胺基、C1-6胺基烷基、(C1-6烷基胺基)C1-6烷基、(C1-6二烷基胺基)C1- 6烷基、(苯基)C1-6烷基、(5-6員雜芳基)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵烷氧基、 C1-6烷基羰氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基、苯基及5-6員雜芳基；i)氫；ii)C6-14芳基或 5-14員雜芳基，各自視情況且獨立地經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-10烷基、C1- 10鹵烷基、(C1-10鹵烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1- 10羥基烷基、C1-10胺基烷基、(C1-10烷基胺基)C1-10烷基、(C1-10二烷基胺基) C1-10烷基、(苯基)C1-10烷基、(5-6員雜芳基)C1-10烷基、胺基、C1-10烷基胺基、C1- 10二烷基胺基、C1-10烷氧基、C1-10鹵烷氧基、C1-10烷基羰氧基、C1-10烷氧基羰基及C1-10烷基羰基；或iii)C1-10烷基，視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-10.鹵烷基、C1-10烷氧基、C1-10鹵烷氧基、胺基、C1-10烷基胺基、C1-10二烷基胺基、C1-10烷基羰氧基、C1-10烷氧基羰基、C1-10烷基羰基及苯基，該苯基視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；各R11獨立地為R10、-CO2R10、-SO2R10或-C(O)R10，或-N(R11)2合起來為非芳族雜環基，視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：=O、=S、鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6羥基烷基、胺基、C1-6烷基胺基、C1-6二烷基胺基、C1-6胺基烷基、(C1-6烷基胺基)C1-6烷基、(C1-6二烷基胺基)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵烷氧基、C1-6烷基羰氧基、C1-6烷氧基羰基及C1-6烷基羰基；且各R12獨立地為R10，其限制條件為R12不為氫；各R21獨立地為氫、C1-6烷基、苯基或5-6員雜芳基，其中R21所表示之苯基及雜芳基各自獨立地且視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基，且其中R21所表示之烷基視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；或N(R21)2形成非芳族雜環基，視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、=O、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基、C1-3鹵烷氧基及胺基；及各R22獨立地為C1-6烷基、苯基或5-6員雜芳基，其中R22所表示之苯基及雜芳基各自獨立地且視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基，且其中R22所表示之烷基視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；各R獨立地為氫、C1-10脂族基、苯基或5-6員雜芳基，其中R所表示之脂族基團視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、苯基、5-6員雜芳基、C1-6烷氧基、C1-6鹵烷氧基，且其中R所表示之各苯基及雜芳基，以及R所表示之脂族基團的苯基及雜芳基取代基視情況且獨立地經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵烷氧基，或N(R)2形成非芳族雜環基團，視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：=O、=S、鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、C1-6羥基烷基、胺基、C1-6烷基胺基、C1-6二烷基胺基、C1-6胺基烷基、(C1-6烷基胺基)C1-6烷基、(C1-6二烷基胺基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、(5-6員雜芳基)C1-6烷基、C1-6烷氧基、C1-6鹵烷氧基、C1-6烷基羰氧基、C1-6烷氧基羰基、C1-6烷基羰基、苯基及5-6員雜芳基；Ar1為C6-14芳基或5-14員雜芳基，各自視情況且獨立地經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、硝基、氰基、C1-10烷基、C1-10鹵烷基、(C1-10鹵烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羥基烷基、C1-10胺基烷基、(C1-10烷基胺基)C1-10烷基、(C1-10二烷基胺基)C1-10烷基、-N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-C(O)N(R21)2、-NR21C(O)R21、-SO2R22、-SO2N(R21)2、-NR21SO2R22、-NR21C(O)N(R21)2、-NRC(O)ON(R)2、-NR21SO2N(R21)2、-OR21、-SR21、C1-10鹵烷氧基、-C(O)R21、-C(O)OR21、-OC(O)R21、苯基及5-6員雜芳基，其中該苯基及該5-6員雜芳基各自獨立地且視情況經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、羥基、硝基、氰基、胺基、C1-3烷基、C1-3鹵烷基、C1-3烷氧基及C1-3鹵烷氧基；各Ar10獨立地為C6-14芳基或5-14員雜芳基，各自視情況且獨立地經一或多個選自由以下者所組成之群組的取代基取代：鹵素、硝基、氰基、-OH、-SH、-O(C1-10烷基)、-S(C1-10烷基)、C1-10烷基、C1-10鹵烷基、(C1-10鹵烷氧基)C1-10烷基、(C1-10烷氧基)C1-10烷基、C1-10羥基烷基、(C1-10胺基烷基、(C1-10烷基胺基)C1-10烷基、(C1-10二烷基胺基)C1-10烷基、(苯基)C1-10烷基、(5-6員雜芳基)C1-10烷基、胺基、C1-10烷基胺基、C1-10二烷基胺基、C1-10鹵烷氧基、C1-10烷基羰氧基、C1-10烷氧基羰基及C1-10烷基羰基；各p為1、2或3；且各q為2、3、4或5。
適於脂族基團、芳基、雜芳基及非芳族雜芳基之取代基的其他實例包括鹵素、硝基、氰基、羥基、C1-20烷基、C2-20烯基、C2-20炔基、胺基、C1-20烷基胺基、C1-20二烷基胺基、C1-20烷氧基、(C1-10烷氧基)C1-20烷基、C1-20鹵烷氧基、(C1-10鹵烷氧基)C1-20烷基及C1-20鹵烷基。
本發明之螺環丙基吲哚啉酮可抑制各種激酶，包括PLK4、PLK1、PLK2、Aurora A、Aurora B及FLT-3(參見實施例B-G)。因此，一般而言，本發明之螺環丙基吲哚啉酮化合物適用於治療與此等激酶相關的疾病或病狀。舉例而言，咸信PLK4、PLK1、Aurora A及Aurora B參與細胞有絲分裂進程。因此，此等酶之小分子抑制劑可為潛在抗腫瘤劑。
在一特定具體實例中，本發明之化合物為PLK、Aurora A、Aurora B及/或FLT-3抑制劑，且適用於治療與此(等)激酶相關的疾病，諸如癌症。在另一特定具體實例中，本發明之化合物為PLK抑制劑且適用於治療與PLK相關的疾病，諸如癌症。典型地，PLK為PLK4、PLK2及PLK1。在一實例中，PLK為PLK1及PLK4。在另一實例中，PLK為PLK4。在另一特定具體實例中，本發明之化合物為Aurora A及/或Aurora B抑制劑且適用於抑制Aurora A及/或Aurora B活性以便治療各種病狀，諸如癌症。在另一特定具體實例中，本發明之化合物為FLT-3抑制劑且適用於抑制FLT-3活性以便治療各種病狀，諸如癌症。
本發明之另一態樣係關於一種治療患有癌症之個體的方法，包含向該個體投予有效量的本發明之化合物。在一具體實例中，本發明之化合物抑制腫瘤生長。特定而言，本發明之化合物抑制過度表現PLK、Aurora A、Aurora B及FLT-3中之至少一者之腫瘤的生長。更特定而言，本發明之化合物抑制過度表現PLK(例如PLK1、PLK2及/或PLK4)之腫瘤的生長。甚至更特定而言，本發明之化合物抑制過度表現PLK4之腫瘤的生長。在另一具體實例中，本發明之化合物藉由誘導腫瘤細胞之細胞凋亡或藉由抑制腫瘤細胞增殖來抑制腫瘤生長。
可用本發明方法治療或預防的癌症包括肺癌、乳癌、結腸癌、腦癌、神經母細胞瘤、前列腺癌、黑色素瘤、多形性神經膠母細胞瘤、卵巢癌、淋巴瘤、白血病、黑色素瘤、肉瘤、副腫瘤(paraneoplasia)、骨肉瘤、胚細胞瘤、神經膠質瘤及間皮瘤。在一特定具體實例中，癌症為肺癌、結腸癌、腦癌、神經母細胞瘤、前列腺癌、黑色素瘤、多形性神經膠母細胞瘤或卵巢癌。在另一特定具體實例中，癌症為肺癌、乳癌、結腸癌、腦癌、神經母細胞瘤、前列腺癌、黑色素瘤、多形性神經膠母細胞瘤或卵巢癌。在又一特定具體實例中，癌症為乳癌。在又一特定具體實例中，癌症為基底亞型乳癌或內腔B亞型乳癌。在一具體實例中，基底亞型乳癌為ER(雌激素受體)、HER2及PR(孕酮受體)陰性乳癌。在另一特定具體實例中，癌症為軟組織癌症。「軟組織癌症」為業內公認之術語，其涵蓋來源於身體任何軟組織的腫瘤。此軟組織連接、支撐或包圍身體之各種結構及器官，包括(但不限於)平滑肌、骨骼肌、腱、纖維組織、脂肪組織、血液及淋巴管、血管周圍組織、神經、間葉細胞及滑膜組織。因此，軟組織癌症可為脂肪組織、肌肉組織、神經組織、關節組織、血管、淋巴管及纖維組織之癌症。軟組織癌症可為良性或惡性。一般而言，惡性軟組織癌症稱為肉瘤或軟組織肉瘤。軟組織腫瘤有多種類型，包括脂肪瘤、脂母細胞瘤、蟄伏脂瘤、脂肉瘤、平滑肌瘤、平滑肌肉瘤、橫紋肌瘤、橫紋肌肉瘤、神經纖維瘤、神經鞘瘤(schwannoma；neurilemoma)、神經瘤、惡性神經鞘瘤、神經纖維肉瘤、神經原性肉瘤、結節性腱鞘炎、滑膜肉瘤、血管瘤、血管球瘤、血管外皮瘤、血管內皮瘤、血管肉瘤、卡波氏肉瘤(Kaposi sarcoma)、淋巴管瘤、纖維瘤、彈性纖維瘤、淺表性纖維瘤病、纖維組織細胞瘤、纖維肉瘤、纖維瘤病、隆凸性皮膚纖維肉瘤(DFSP)、惡性纖維組織細胞瘤(MFH)、黏液瘤、顆粒細胞腫瘤、惡性間葉瘤、肺泡軟部肉瘤、上皮樣肉瘤、透明細胞肉瘤及促結締組織增生性小細胞腫瘤(desmoplastic small cell tumor)。在一特定具體實例中，軟組織癌症為選自由以下者所組成之群組的肉瘤：纖維肉瘤、胃腸肉瘤、平滑肌肉瘤、去分化脂肉瘤、多形性脂肉瘤、惡性纖維組織細胞瘤、圓形細胞肉瘤及滑膜肉瘤。
本發明此外係關於一種治療具有腫瘤細胞之個體的方法，包含向該個體投予有效量之本文中所揭示之化合物，以有效地降低該個體中之PLK活性，諸如PLK2或PLK4活性。在一特定具體實例中，PLK為PLK4。
術語「有效量」意謂投予個體時可得到有益或所要結果的量，包括臨床結果，例如與對照相比，降低發展癌症之可能性或抑制、壓制或減小個體之癌症(例如，如依據臨床症狀或癌細胞量所判定)。特定而言，「治療患有癌症之個體」包括部分地或實質上達成以下一或多者：阻止癌症之生長或擴散、降低癌症之程度(例如減小腫瘤尺寸或減少受影響部位之數目)、抑制癌症生長速率、及改善或改良臨床症狀或與癌症相關的指標(諸如組織或血清組分)。其亦降低癌症復發之可能性。
一般而言，本發明之化合物之有效量根據多種因素而改變，諸如指定藥物或化合物、醫藥調配物、投藥途徑、疾病或病症類型、所治療個體或宿主的身分、及其類似因素，然而可由熟習此項技術者根據常規確定。本發明之化合物之有效量可容易由一般技術者利用此項技術中已知的常規方法確定。
在一具體實例中，本發明之化合物之有效量的範圍為每公斤體重約0.01至約1000 mg，或者每公斤體重約0.05至約500 mg，或者每公斤體重約0.1至約100 mg，或者每公斤體重約0.1至約15 mg，或者每公斤體重約1至約5 mg，且在另一替代具體實例中，為每公斤體重約2至約3 mg。熟習此項技術者將瞭解，某些因素可能會影響有效治療罹患癌症之個體所需的劑量，且此等因素包括(但不限於)疾病或病症之嚴重程度、先前治療、個體之一般健康狀況及/或年齡、及存在的其他疾病。
此外，用有效量之本發明之化合物「治療」個體的方案可由單次投藥組成，或者包含一系列施用。舉例而言，本發明之化合物可一週投予至少一次。然而，在另一具體實例中，化合物可依照指定療法投予個體，約每週一次至每日一次。治療期之長度視多種因素而定，諸如疾病嚴重程度、患者年齡、本發明之化合物之濃度及活性、或其組合。亦應瞭解，用於治療或預防的化合物之有效劑量可在特定治療或預防療法之過程中增加或減少。可改變劑量且利用此項技術中已知的標準診斷檢定確認。在一些情況下，可能需要長期投藥。
如本文中所使用，「治療」為一種獲得有益或所要結果(包括臨床結果)的方法。有益或所要臨床結果可包括(但不限於)舒緩或改善一或多種症狀或病狀、減輕疾病程度、穩定(亦即，不惡化)疾病病況、降低疾病擴散之可能性、延遲或減慢疾病進展、改善或緩和疾病病況，及緩解(不論部分抑或完全)，不論可偵測抑或不可偵測。「治療」亦可意謂與未接受治療之預期存活期相比，延長存活期。「治療」亦包括降低發展疾病之可能性或降低疾病復發之可能性。
「個體」為哺乳動物，較佳為人類，而且亦可為需要獸醫學治療之動物，例如伴侶動物(例如犬、貓及其類似動物)、農畜(例如奶牛、綿羊、豬、馬及其類似動物)及實驗室動物(例如大鼠、小鼠、天竺鼠及其類似動物)。
在一具體實例中，本發明方法為單一療法，其中單獨投予本發明之醫藥組成物。因此，在此具體實例中，本發明之化合物為醫藥組成物中的唯一醫藥活性成分或投予個體的唯一醫藥活性成分。
在另一具體實例中，本發明方法為聯合此項技術中已知之一或多種其他治療活性藥物或療法以治療預定疾病或適應症的協同療法(co-therapy)。在一實例中，一或多種其他抗增生或抗癌療法與本發明之化合物組合。在另一實例中，本文中所揭示之化合物與此項技術中已知的一或多種其他抗癌藥物共同投予。可與本發明之化合物組合使用的抗癌療法包括手術、放射線療法(包括(但不限於)γ輻射、中子束放射線療法、電子束放射線療法、質子療法、近距放射線療法(brachytherapy)、及全身性放射性同位素)及內分泌療法。可與本發明之化合物組合使用的抗癌劑包括生物反應調節劑(包括(但不限於)干擾素、介白素及腫瘤壞死因子(TNF))、高溫及冷凍療法、減弱任何副作用的藥劑(例如止吐藥)、及其他批准化學治療藥物(例如紫杉醇(taxol)及其類似物)。
當本發明之化合物與其他抗癌藥物組合時，其可同時投予。如本文中所使用，「同時投予」意謂兩種物質投予個體以使得其在個體中同時具有生物活性。投藥之確切詳情將視兩種物質在彼此存在下的藥物動力學而定，且可包括投予一種物質，彼此間隔一定時間(例如24小時)後投予另一物質(若藥物動力學適合)。適合給藥方案之設計對於熟習此項技術者而言為常規程序。在特定具體實例中，兩種物質實質上同時投予，亦即彼此在數分鐘內，或於包含兩種物質的單一組成物中投予。或者，兩種藥劑可分別投予，使得同時僅一者在個體中具有生物活性。
如熟習此項技術者所瞭解，本發明之化合物視所選投藥途徑而定可以多種形式投予患者。本發明之化合物可藉由例如經口、非經腸、頰內、舌下、鼻、直腸、貼片、泵或經皮投藥及相應調配之醫藥組成物投予。非經腸投藥包括靜脈內、腹膜內、皮下、肌肉內、經上皮、鼻、肺內、鞘內、直腸及局部投藥方式。非經腸投藥可為在所選時段內連續輸注。
本發明之化合物可適當調配成醫藥組成物以便投予個體。本發明醫藥組成物視情況包括一或多種其醫藥學上可接受之載劑及/或稀釋劑，諸如乳糖、澱粉、纖維素及右旋糖。亦可包括其他賦形劑，諸如調味劑；甜味劑；及防腐劑，諸如對羥基苯甲酸甲酯、對羥基苯甲酸乙酯、對羥基苯甲酸丙酯及對羥基苯甲酸丁酯。適合賦形劑之更完整清單可見於Handbook of Pharmaceutical Excipients(第5版,Pharmaceutical Press(2005))中。熟習此項技術者已知如何製備適於各種類型投藥途徑的調配物。選擇及製備適合調配物的習知程序及成分描述於例如Remington's Pharmaceutical Sciences(2003-第20版)及1999年出版之The United States Pharmacopeia: The National Formulary(USP 24 NF19)中。載劑、稀釋劑及/或賦形劑在與醫藥組成物之其他成分相容的意義上為「可接受的」且對其接受者無害。
典型地，對於經口治療性投予，本發明之化合物可與賦形劑合併且以可攝入錠劑、口腔錠、糖衣錠、膠囊、酏劑、懸浮液、糖漿、糯米紙形式及其類似形式使用。
典型地，對於非經腸投予，本發明之化合物之溶液一般可於與諸如羥丙基纖維素之界面活性劑適當混合的水中製備。分散液亦可於甘油、液體聚乙二醇、DMSO及其與或不與醇之混合物、及於油中製備。在普通儲存及使用條件下，此等製劑含有防腐劑以防止微生物生長。
典型地，對於注射使用，本發明之化合物可呈無菌水溶液或分散液形式，及供臨時製備無菌可注射溶液或分散液的無菌粉末形式。
對於經鼻投予，本發明之化合物可調配為氣霧劑、滴劑、凝膠劑及散劑。氣霧劑調配物典型地包含活性物質於生理上可接受之水性或非水性溶劑中的溶液或精細懸浮液，且通常於密封容器中以單劑量或多劑量無菌形式提供，密封容器可採取藥筒或再填充形式以供霧化裝置使用。或者，密封容器可為整體式分配裝置，諸如單劑量鼻吸入器或配備有為使用後處置而設計之計量閥的氣霧劑分配器。在劑型包含氣霧劑分配器的情況下，其將含有推進劑，推進劑可為壓縮氣體，諸如壓縮空氣或有機推進劑，諸如氟氯烴。氣霧劑劑型亦可採取泵霧化器形式。
對於頰內或舌下投予，本發明之化合物可用載劑(諸如糖、阿拉伯膠(acacia)、黃蓍膠(tragacanth)或明膠及甘油)調配為錠劑、口含劑或片劑。
對於直腸投予，本發明之化合物可調配為含有習知栓劑基質(諸如可可脂)的栓劑形式。
本發明之化合物可單獨調配或調配為與治療癌症的其他藥劑同時投予。因此，在另一態樣中，本發明醫藥組成物包含醫藥學上可接受之載劑或稀釋劑、本文中所揭示之化合物或其醫藥學上可接受之鹽及另一抗癌劑，例如(但不限於)葡萄糖代謝抑制劑或紫杉醇。
根據本發明之另一態樣，本發明之化合物可藉由與此項技術中已確立方法類似的方法製備。舉例而言，其中環A及B如本文中所定義的式(I)化合物可藉由流程1中所概述的方法製備。經適當取代之吲唑基亞甲基吲哚啉酮(其中環A如本文中所定義且環B與C一起為吲唑)之反應與適合亞甲基源(諸如碘化三甲鋶或碘化三甲基氧化鋶)在鹼(諸如氫化鈉、LDA或NaHMDS)存在下、於極性溶劑(諸如DMF、THF或DMSO)中反應。反應宜在適當溫度(一般在20℃至60℃範圍內)下實施。可在典型的海克反應條件(Heck reaction condition)下建立乙烯基鍵聯，其中Ar為如本文中所定義的苯基及雜芳基，且P1表示適合的吲唑保護基(諸如Boc、乙醯基或SEM)且X為鹵素。或者，在Ar為如本文中所定義的苯基及雜芳基，且P1表示適合的吲唑保護基(諸如Boc、乙醯基或SEM)且X為鹵素時，可在典型的鈴木反應條件(Suzuki reaction condition)下使用硼酸或硼酸酯建立乙烯基鍵聯。反應較佳在微波照射條件下，有利地在例如100至150℃範圍內或一般在約120℃下實施。保護基之移除可藉由已知可實現此種轉化的任何程序實現。舉例而言，當保護基P1為SEM時，可藉由在回流下於極性溶劑(諸如THF)中用氟化四丁基銨處理或藉由在乙醇中用醚合三氟化硼及2 N HCl逐步處理來實現轉化。
流程1
在本發明之另一態樣(流程2)中，可在典型的鈴木反應條件下使用硼酸或硼酸酯建立芳基鍵聯，其中R6如本文中所定義，P1為H或適合的吲唑保護基(諸如Boc、乙醯基或SEM)且X為鹵素。反應較佳在微波照射條件下，有利地在例如100至150℃範圍內或一般在約120℃下實施。保護基之移除可藉由已知可實現此種轉化的任何程序實現。舉例而言，當保護基P1為SEM時，可藉由在回流下於極性溶劑(諸如THF)中用氟化四丁基銨處理或藉由在乙醇中用醚合三氟化硼及2 N HCl逐步處理來實現轉化。
流程2
流程3(省略)在本發明之另一態樣(流程4)中，可對化合物實施環丙烷化反應，諸如使(I)(其中R5如本文中所定義且R6如本文中所定義)與適合的亞甲基源(諸如碘化三甲鋶或碘化三甲基氧化鋶)在鹼(諸如氫化鈉、LDA或NaHMDS)存在下於極性溶劑(諸如DMF、THF或DMSO)中反應。反應宜在適當溫度(一般在20℃至60℃範圍內)下實施。流程4
在本發明之另一態樣中，可藉由使在適合溶劑(諸如THF)中用強鹼(氫化鈉)處理經取代之羥吲哚1所產生的二價陰離子與雙親電子試劑2反應獲得吲唑基-螺-環丙烷-吲哚啉酮3(流程5)。在使用(S)二甲磺酸酯時，幾乎僅形成所要(1R,2S)對映異構體，而僅有極少或沒有可偵測的非所要(1S,2S)非對映異構體。流程5
含有Bn或PMB部分的吲唑基-螺-環丙烷-吲哚啉酮3可藉由利用適合反應條件來脫除保護基。含有一個以上此保護基的化合物3可於一鍋式反應中脫除兩個位點處的保護基而得到化合物4(流程6)。含有PMB或Bn基團的化合物3可藉由在適合溶劑(諸如THF，含DMSO或DMS)中用強鹼(諸如KO t Bu或 t BuLi)及氧供體(諸如O2、MoOPH或MoOPD)處理以使當場形成的氫過氧化物中間物還原來脫除保護基(A.A. Haddach,A. Kelleman,及M.V. Deaton-Rewolinski,Tetrahedron Lett, 2002,43,399-402；R.M. Williams及E. Kwast,Tetrahedron Lett., 1989,30,451-454)。或者，含有PMB基團的化合物3可藉由在50℃-130℃之間的溫度下用酸(諸如TFA、TfOH或此等酸之混合物)處理來脫除保護基，得到吲唑基-螺-環丙烷-吲哚啉酮4。
流程6
吲唑基-螺-環丙烷-吲哚啉酮4可藉由在含水或不存在水的適合溶劑(諸如丙酮、ACN、DMF、DMSO、二烷、NMP、THF)中在鹼(諸如Na2CO3、K2CO3、NaOH或KO t Bu)存在下用碘化劑(諸如碘或N-碘代丁二醯亞胺)處理來碘化而得到化合物5(流程7)。流程7
環丙烷環之相對立體化學可依據文獻(I. Moldvai,E. Gacs-Baitz,M. Balazs,M. Incze及C. Szantay;Arch. Pharm. Pharm. Med. Chem. 1996,329,541-549)，藉由使用HCOSY NMR實驗以便在1H NMR中指定各質子之信號，隨後進行NOESY實驗以測定環丙烷質子與吲哚啉酮位置4之質子之間的透過空間相互作用(through space interaction)，藉由與合成外消旋參考標準物時所產生的次要非對映異構體相比較而指定為(1R*,2S*)。基於應用Sharpless助記憶碼預測二醇構型為(S)且假定在維持e.e下SN2偶合過程形成環丙烷從而引起(S)立構中心反轉，可指定產物之絕對立體化學為(1R,2S)。本發明藉由以下實施例說明，不希望該等實施例以任何方式限制本發明。應注意，該等實施例未按序編號。
實施例
實施例
A.本發明之化合物之合成
一般實驗方法：
市售起始物質、試劑及溶劑可原樣使用，例外為N,N-二甲基-1-(4-乙烯基苯基)甲胺在用於海克反應之前藉由矽膠層析純化。一般而言，無水反應係在諸如氮氣或氬氣之惰性氛圍下進行。微波反應係用Biotage Initiator微波反應器進行。反應進程一般藉由TLC使用Merck矽膠板且利用UV在254 nm下觀測、藉由分析型HPLC或藉由LCMS(Bruker Exquire 4000)進行監測。中間物或最終產物之急驟管柱層析純化係使用來自EMD chemicals的230-400目矽膠60進行。最終產物有時藉由製備型逆相HPLC純化。在具有Varian Monochrom 10u C-18逆相管柱的Varian PrepStar SD-1型HPLC系統上，使用20-40分鐘內約5-30%乙腈/0.05% TFA水至70-100%乙腈/0.05% TFA水之梯度以30-50 mL/min之流速進行純化。將含有所要物質的溶離份濃縮且凍乾以獲得最終產物。質子NMR利用Bruker 400 MHz光譜儀記錄，且使用Bruker Esquire 4000光譜儀獲得質譜。使用來自Optical Activity有限公司的具有2.5×100 mm無夾套不鏽鋼管之AA-55偏光計在指定樣品濃度(c，單位為g/100 mL)下量測鈉D線(589.44 nM)處的旋光度。
化合物名稱使用嵌入ChemBioDraw Ultra 11.0版的軟體產生，除以下例外以外。具有已知相對立體化學的外消旋化合物使用如North(Principles and Applications of Stereochemistry,CRC Press,1998)所述的R*/S*系統命名，其中較低編號原子任意定義為R*，且較高編號原子相對於彼中心定義。因此，視已知的相對立體化學而定，具有兩個手性中心之化合物之對映異構體的外消旋混合物指定為(1R*,2S*)或(1R*,2R*)。標準R及S命名法或表示絕對的「abs」用於描述單一對映異構體或對映異構性增濃化合物大於95% e.e。
縮寫：
aq.　水性
BF3.OEt2　醚合三氟化硼
br.　寬峰
dba　二亞苄基丙酮
DCM　二氯甲烷
DCM　二氯甲烷
(DHQ)2PHAL　氫化奎寧1,4-酞二基二醚
(DHQD)2PHAL氫化奎尼定1,4-酞二基二醚
DME　1,2-二甲氧基乙烷
DMF　N,N-二甲基甲醯胺
DMSO　二甲亞碸
dppf　1,1'-雙(二苯膦基)二茂鐵
% e.e.　對映異構體過量%
Et2O　乙醚
Et3N　三乙胺
EtOAc　乙酸乙酯
EtOH　乙醇
h　小時
Hex　己烷
AcOH　乙酸
HPLC　高效液相層析
LC-MS　液相層析聯合質譜
MeCN　乙腈
MeOH　甲醇
min　分鐘
MsCl　甲烷磺醯氯
MS ESI　質譜，電噴霧電離
NMR　核磁共振
O/N　隔夜
Pd(OAc)2　乙酸鈀
PPh3　三苯膦
prepHPLC　製備型高壓液相層析
prepTLC．．．製備型薄層層析
RBF．．．圓底燒瓶
rt．．．室溫
sat.．．．飽和
SEM．．．2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基
t BuOOH．．．氫過氧化第三丁基
TBAF．．．氟化四丁基銨
t BuOK．．．第三丁醇鉀
temp.．．．溫度
THF．．．四氫呋喃
wt%．．．重量%
製備起始物質
合成5-甲氧基羥吲哚
歷經5分鐘向5-甲氧基靛紅(10.62 g，60 mmol)於DMSO(30 mL)中的溶液中逐滴添加N2H4‧xH2O(水合肼，6 mL，120 mmol)(放熱)。添加後，所得混合物在140℃(油溫)下加熱2小時，接著冷卻至室溫。用H2O(30 mL)稀釋後，添加6 M HCl(12 mL，72 mmol)且所得混合物在室溫下攪拌1小時。添加冰(30 mL)且反應混合物在室溫下攪拌隔夜。所形成的沈澱物藉由抽吸過濾收集，用H2O沖洗，接著脫水，得到呈褐色固體狀之5-甲氧基羥吲哚(6.523 g)(約10%雜質為來自起始物質5-甲氧基靛紅的肟)。1H NMR(400 MHz,d6-DMSO)6.78(s,1H),6.85(s,1H),6.72-6.79(m,2H),3.39(s,3H)；ESI 164.0[M+H]+,[C9H9NO2+H]+計算值：164.1。
合成(E及Z)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮
向3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(1.360 g，5 mmol)及5-甲氧基羥吲哚(1.06 g，6.5 mmol)於甲醇(50 mL)中的混合物中添加哌啶(0.1 mL，1 mmol)。所得混合物回流(油溫75℃)3小時，接著冷卻至室溫且在室溫下攪拌2小時。所得沈澱物藉由抽吸過濾收集且脫水，得到呈深磚紅色橙色固體狀之(E/Z)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(E/Z=2:1)(1.966 g，94%)。混合物用作中間物而不純化異構體。
此中間物亦使用此等條件製備：向圓底燒瓶中裝入5-甲氧基羥吲哚(購自Prime Organics之試劑，300 mg，1.84 mmol)、3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(500 mg，1.84 mmol)、哌啶(20μl，0.18 mmol)及MeOH(7 mL)。反應物接著加熱至60℃維持4小時。形成鮮紅色沈澱物，藉由冷卻至室溫使其進一步沈澱。接著過濾紅色粉末且用MeOH洗滌，得到658 mg 86%標題化合物。獲得(E)異構體與(Z)異構體之混合物(84:16，依據NMR)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 ) 13.78(br. s,1H),10.50(s,1H),9.01(s,1H),8.00(s,1H),8.00(d,J=8.3 Hz,1H),7.48(d,J=8.3 Hz,1H),7.45(d,J=2.1 Hz,1H),6.81(dd,J=4.1,2.2 Hz,1H),6.73(d,J=8.4 Hz,1H),3.77(s,3H)；MS ESI 418.0[M+H]+,[C17H12IN3O2+H]+之計算值418.00。
合成(E)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮
向3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(1.360 g，2 mmol)及2-羥吲哚(732 g，5.5 mmol)於MeOH(25 mL)中的混合物中添加哌啶(0.1 mL，1 mmol)。所得混合物回流(油溫75℃)90分鐘，接著冷卻至室溫。所得沈澱物藉由抽吸過濾收集且脫水，得到呈黃色固體狀之(E/Z)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-吲哚啉-2-酮(E:Z=5:1，1.86g)。混合物用作中間物而不純化異構體，或者可藉由在室溫下溶解於THF(1.57 g，46.85 mL)中純化純E異構體。在攪拌下向澄清溶液中添加己烷(146.8 mL)，得到黃色沈澱物。固體懸浮液加熱至70℃維持30分鐘，接著冷卻至室溫。過濾黃色固體且用己烷(3.14 mL)洗滌，得到標題化合物(1.22 g，79%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ13.71(s,1H),10.64(s,1H),7.88(s,1H),7.77(s,1H),7.57-7.46(m,3H),7.23(t,1H,J=7.6 Hz),6.87(d,1H,J=8.0 Hz),6.83(d,1H,J=7.6 Hz)；MS ESI 388.0[M+H]+,[C16H10IN3O+H]+之計算值387.99。
合成(E)-3-((3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-吲哚啉-2-酮
將羥吲哚(665 mg，5 mmol)及3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(2 g，5 mmol)溶解於乙醇(25 mL)中。添加哌啶(0.1 mL)且將溶液加熱至70℃維持2小時，冷卻至室溫且攪拌隔夜。在真空中移除溶劑，得到橙色固體，用乙醇濕磨，以定量產率得到標題化合物。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.95(s,1H),7.86(s,1H),7.62-7.55(m,3H),7.24(d,1H,J=7.8 Hz),6.91(d,1H,J=7.8 Hz),6.86(t,1H,J=7.6 Hz),5.75(s,2H),3.62-3.58(m,2H),0.93-0.89(m,2H),-0.04(s,9H)；MS ESI 518.0[M+H]+,[C22H24IN3O2Sii+H]+之計算值518.4。合成(1R*,2S*)-2-(3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在0℃下向碘化三甲基氧化鋶(1.89 g，8.6 mmol)於無水DMF(40 mL)中的溶液中添加氫化鈉(60%油分散液)(1.03 g，25.8 mmol)。混合物攪拌15分鐘，隨後添加(E)-3-((3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮(2.2 g，4.3 mmol)。在室溫下攪拌溶液隔夜。反應物用飽和NH4Cl溶液(50 mL)淬滅，用EtOAc(4×100 mL)萃取，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。藉由矽膠層析法(CH2Cl2/MeOH 98:2)分離得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.5 g，66%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.46(s,1H),7.39(d,1H J=8.3 Hz),7.09(t,1H,J=7.5 Hz),7.04(d,1H,J=8.0 Hz),6.92(d,1H,J=7.8 Hz),6.61(t,1H,J=8.0 Hz),5.90(d,1H,8.0 Hz),5.70(s,2H),3.57-3.53(m,2H),3.49-3.44(m,1h),2.31-2.28(m,1H),2.12-2.09(m,1H),0.89-0.84(m,2H),-0.05(s,9H)；MS ESI 532.1[M+H]+,[C23H26IN3O2Si+H]+之計算值532.4。合成(E)-5-氟-3-((3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮
向圓底燒瓶中裝入5-氟吲哚啉-2-酮(100 mg，0.661 mmol)、3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(266.18 mg，0.661 mmol)、哌啶(13μl，0.013 mmol)及甲醇(7.5 mL)。反應物接著加熱至55℃維持4小時，隨後冷卻反應物質至室溫。過濾且用甲醇(0.50 mL×2)洗滌，得到呈黃色固體狀之標題化合物(273 mg，77%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.14(s,1H),8.00(s,1H),7.85(s,1H),7.62(d,J=8.4 Hz,1H),7.50(d,J=8.4 Hz,1H),7.34(dd,J=8.0,2.4 Hz,1H),6.97(td,J=6.4,2.4 Hz,1H),6.85(dd,J=8.4,4.4 Hz,1H),5.80(s,2H),3.58(t,J=8.4 Hz,2H),0.92(t,J=8.4 Hz,2H),0.03(s,9H)。合成(1R*,2S*)-5-氟-2-(3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在室溫下，將碘化三甲基氧化鋶(164.4 mg，0.747 mmol)添加至氫化鈉(89.6 mg，2.24 mmol)(60%油分散液)於DMF(2.0 mL)中的懸浮液中。混合物攪拌15分鐘，隨後添加(E)-5-氟-3-((3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮(200 mg，0.373 mmol)於DMF(1.25 ml)中的溶液。溶液在55℃下攪拌7.0小時，隨後在室溫下用25% NH4Cl溶液(10 mL)淬滅反應物質。產物使用乙酸乙酯(15 mL×2)萃取且有機層經MgSO4脫水且在真空中蒸發。粗產物使用矽膠管柱層析(己烷：丙酮80:20作為溶離劑)純化，得到乳白色半固體，接著用己烷(2.0 mL)濕磨，得到呈灰白色粉末狀之標題化合物(94 mg，46%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.48(s,1H),7.46(s,1H),7.41(d,J=8.8 Hz,1H),7.03(d,J=8.8 Hz,1H),6.86(s,1H),6.78(m,1H),5.72(s,2H),5.68(d,J=8 Hz,1H),3.54-3.48(m,3H),2.34(br s,1H),2.13(br s,1H),0.88(m,2H),0.03(s,9H)。
合成3-碘-1H-吲唑-6-甲醛
向1H-吲唑-6-甲醛(2.00 g，13.7 mmol)、K2CO3(3.79 g，27.4 mmol)於DMF(15 mL)中的溶液中逐滴添加I2(5.91 g，23.3 mmol)於DMF(15 mL)中的溶液，且將反應物攪拌2小時。接著添加由Na2S2O4(3.30 g)/K2CO3(0.20 g)/H2O(30 mL)組成的水溶液且攪拌溶液1小時。接著藉由將溶液傾注於冰水(300 mL)上而使產物沈澱，且藉由真空過濾收集，乾燥之後得到3.02 g 81%米色粉末。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ10.11(s,1H),8.11(s,1H),7.74(d,J=8.34 Hz,1H),7.62(d,J=8.34 Hz,1H)；MS ESI 272.9[M+H]+,[C8H5IN2O+H]+之計算值272.95。合成3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛及3-碘-2-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-2H-吲唑-6-甲醛
向3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(3.01 g，11.1 mmol)於CH2Cl2(70 mL)及50% KOH水溶液(20 mL)中的懸浮液中添加溴化四丁基銨(36 mg，0.111 mmol)且將溶液冷卻至0℃。接著逐滴添加(2-(氯甲氧基)乙基)三甲基矽烷(2.3 mL，13.3 mmol)且反應物在0℃下攪拌3小時。接著將溶液轉移至含有CH2Cl2(200 mL)的分液漏斗中且有機層用鹽水(2×100 mL)洗滌，脫水(MgSO4)且在真空中移除溶劑。所得殘餘物藉由管柱層析法(100% CH2Cl2)純化，得到2.88 g 65%之N-1異構體(較高溶離斑點)及757 mg 17%之N-2異構體(較低溶離斑點)。N-1異構體：1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.18(s,1H),8.11(s,1H),7.81(d,J=8.4 Hz,1H),7.65(d,J=8.4 Hz,1H),5.82(s,2H),3.60(m,2H),0.91(m,2H),-0.042(s,9H)；MS ESI 425.0[M+Na]+,[C14H19IN2O2Si+Na]+之計算值425.02。N-2異構體：1H NMR(400 MHz,CD3OD)10.09(s,1H),8.31(s,1H),7.62(m,2H),5.91(s,2H),3.71(m,2H),0.92(m,2H),-0.039(s,9H)；MS ESI 425.0[M+Na]+,[C14H19IN2O2Si+Na]+之計算值425.02。合成3-甲醯基-1H-吲唑-6-甲腈
將6-氰基吲哚(5.68 g，40 mmol)以整份緩慢添加至NaNO2(11.04 g，160 mmol)於H2O(200 mL)中之溶液中。所得懸浮液在室溫下攪拌5分鐘。經由滴液漏斗歷經30分鐘逐滴添加HCl(32 mL，192 mmol，6 N)且pH值為約1。所得懸浮液在室溫下攪拌4.5小時，隨後添加EtOAc(400 mL)。再攪拌10分鐘以溶解沈澱物後，分離兩個層且水層用EtOAc(150 mL)萃取。合併的萃取物經Na2SO4脫水。移除溶劑，得到6.864 g(100%)呈褐色(咖啡色)固體狀之標題化合物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6)δ14.70(s,1H,NH),10.22(s,1H,CHO),8.38(s,1H),8.28(d,J=8.4 Hz,1H),7.69(d,J=8.4 Hz,1H)。MS ESI 172.0[M+H]+,[C9H5N3O+H]+之計算值172.0。合成(E)-3-((1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮
除使羥吲哚(67 mg，0.216 mmol)與1H-吲唑-6-甲醛(73 mg，0.238 mmol)反應之外，根據針對(E)-3-((1H-吲唑-5-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮所述的方法合成標題化合物，獲得32 mg，51%。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.14(s,1H),7.91(d,J=8.5 Hz,1H),7.89(s,2H),7.65(d,J=7.6 Hz,1H),7.47(d,J=8.4 Hz,1H),7.25(t,J=7.7 Hz,1H),6.93(d,J=7.8 Hz,1H),6.87(t,J=7.6 Hz,1H)；MS ESI 262.0[M+H]+,[C16H11N3O+H]+之計算值262.10。合成(E及Z)-3-((3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.(E)-3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛使用N,N-二甲基-1-(4-乙烯基苯基)甲胺(42 mg，0.26 mmol)及3-碘-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(70 mg，0.17 mmol)，經由在90℃下於密封管中加熱隔夜而非使用微波照射，根據WO2010/115279中實施例A22A之方法合成標題化合物。藉由prepTLC(SiO2 10% MeOH/DCM)純化，得到呈淺橙色膠狀之標題化合物(33.4 mg，44%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δppm 10.13(s,1 H),8.27(m,2 H),7.81(d,J=9.29 Hz,1 H),7.69(d,J=8.28 Hz,2 H),7.61(d,J=16.6 Hz,1 H),7.50(d,J=16.6 Hz,1 H),7.43(d,J=8.28 Hz,2 H),5.86(s,2 H),3.82(s,2 H),3.62(t,J=8.03 Hz,1 H),2.50(s,6 H),0.87(t,J=8.03 Hz,2 H),-0.09(s,9H)；MS ESI 436.3[M+H]+,[C25H33N3O2Si+H]+之計算值436.6。
B. (E)-3-((3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮向5-甲氧基羥吲哚(52 mg，0.32 mmol)及(E)-3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)-甲基)-1H-吲唑-6-甲醛(污染有來自先前脫除保護基試驗的TBAF)於EtOH(5 mL)中的溶液中添加哌啶(0.01 mL，0.1 mmol)。反應物接著加熱至75℃維持25小時。在真空中蒸發溶劑。層析(5 g二氧化矽SPE管，Silicycle，含5-10% MeOH之CH2Cl2)得到褐色油狀物(105 mg，依據NMR，其含有產物及TBAF)。殘餘物溶解於EtOAc(100 mL)中且用鹽水(3×15 mL)洗滌，經Na2SO4脫水且在真空中蒸發溶劑，得到呈褐色油狀之標題化合物(110 mg，不進一步純化即使用)。
C.(E及Z)-3-((3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮根據WO2010/115279中實施例A22B之方法，3-((3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(19 mg，0.033 mmol)用醚合三氟化硼處理，隨後用2 NHCl(水/EtOH)處理。在真空中移除溶劑，再使用EtOH共沸移除水。殘餘物溶解於MeOH/EtOAc中且過濾以移除固體，接著在真空中蒸發溶劑。藉由prep-HPLC純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(E異構體，首先溶離的溶離份，94%，依據HPLC)(11 mg，60%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ ppm 8.26(d,J=8.5 Hz,1 H),7.88(d,J=9.3 Hz,2 H),7.80(d,J=8.3 Hz,2 H),7.61(s,2 H),7.51-7.58(m,3 H),7.26(s,1 H),6.84(s,2 H),4.34(s,2 H),3.63(s,3 H),2.89(s,6 H)；MS ESI 451.2[M+H]+,[C28H26N4O2+H]+之計算值451.22。其次溶離的溶離份為Z異構體(5 mg，30%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ ppm 8.89(s,1 H),8.15(d,J=9.0 Hz,1 H),7.99(dd,J=9.0,1.3 Hz,1 H),7.90(s,1 H),7.81(d,J=8.3 Hz,2 H),7.57-7.61(m,2 H),7.53(d,J=8.3 Hz,2 H),7.33(d,J=2.0 Hz,1 H),6.85(dd,J=8.4,2.4 Hz,1 H),6.80(d,J=8.4 Hz,1 H),4.34(s,2 H),3.84(s,3 H),2.89(s,6 H)；MS ESI 451.2[M+H]+,[C28H26N4O2+H]+之計算值451.22。
合成1-(2-甲氧基乙基)吲哚啉-2-酮
在0℃下，向靛紅(2.94 g，20 mmol)於DMF(40 mL)中的溶液中逐份添加60% NaH(1.00 g，25 mmol)。添加後，所得混合物在0℃下攪拌15分鐘且歷經2分鐘逐滴添加1-溴-2-甲氧基乙烷(2.35 mL，25 mmol)。所得混合物在0℃下攪拌10分鐘，溫熱至室溫且攪拌隔夜。反應物接著冷卻至0℃，用飽和NH4Cl、冰、H2O淬滅，用EtOAc(150 mL×2)萃取，經Na2SO4脫水且濃縮，得到深橙紅色液體，再溶解於DMSO(10 mL)中。歷經7分鐘逐滴添加N2H4‧xH2O(2 mL)。添加後，反應混合物在室溫下攪拌5分鐘，接著在140℃(油溫)下攪拌2小時，隨後冷卻至室溫。添加冰/H2O(20 mL)，隨後添加6 M HCl(7 mL，42 mmol)且所得混合物在室溫下攪拌30分鐘。再添加冰/H2O(40 mL)且混合物用EtOAc(50 mL×3)萃取。粗產物藉由急驟層析法(梯度：EtOAc/hex 0至40%)純化，得到呈橙色液體狀之標題化合物(2.32 g，經2個步驟61%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ7.26-7.20(m,2H),7.03(d,J=8.0 Hz,1H),6.98(t,J=7.4 Hz,1H),3.82(t,J=5.6 Hz,2H),3.55(s,2H),3.52(t,J=5.8 Hz,2H),3.22(s,3H)；MS ESI 191.8[M+H]+,[C11H13NO2+H]+之計算值192.1。
合成2-(2-側氧基吲哚啉-1-基)乙醯胺
向100 mL燒瓶中靛紅(5.0 g，35 mmol)、K2CO3(5.5 g，40 mmol)及氯乙醯胺(3.74 g，40 mmol)之混合物中添加DMF(25 mL)。所得混合物在90℃(油溫)下加熱2小時。冷卻至室溫後，將其傾注於冰/H2O(200 mL)上且所得沈澱物藉由抽吸過濾收集，乾燥之後得到2-(2,3-二側氧基吲哚啉-1-基)乙醯胺(4.32 g)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ7.72(s,1H),7.65(t,J=7.6 Hz,1H),7.58(d,J=7.2 Hz,1H),7.30(s,1H),7.14(t,J=7.4 Hz,1H),7.02(d,J=8.0 Hz,1H),4.25(s,2H)。
將上述2-(2,3-二側氧基吲哚啉-1-基)乙醯胺(4.32 g)再溶解於DMSO(20 mL)中且歷經10分鐘逐滴添加N2H4‧xH2O(2.5 mL)。添加後，所得混合物在室溫下攪拌5分鐘，接著在140℃下攪拌2小時，隨後冷卻至室溫。反應物用冰(20 mL)及6 M HCl(8 mL)淬滅，接著在室溫下攪拌30分鐘。抽吸過濾，得到呈淡黃色固體狀之標題化合物(2.92 g)。產物懸浮於EtOAc(120 mL)中且添加H2O(60 mL)，隨後添加2 M HCl(30 mL)。分離混合物且抽吸過濾水層，乾燥之後得到呈淡米色固體狀之標題化合物(1.78 g，經2個步驟27%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ7.59(s,1H,NH),7.28-7.08(m,4H),6.99(t,J=7.4 Hz,1H),6.81(d,J=8.0 Hz,1H),4.22(s,2H),3.56(s,2H)；MS ESI 191.0[M+H]+,[C10H10N2O2+H]+之計算值191.1；MS ESI 174.0[M-NH2]+,[C10H10N2O2-NH2]+之計算值174.1；MS ESI 146.0[M-CONH2]+,[C10H10N2O2-CONH2]+之計算值146.1。
合成(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
向20 mL微波小瓶中(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(802 mg，2 mmol)與4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(462 mg，3 mmol)之混合物中添加PhCH3/EtOH(8 mL/4 mL)，隨後添加1 M Na2CO3(3 mL，3 mmol)及Ph(PPh3)4(46 mg，0.04 mmol，2 mol%)，且所得混合物用氬氣淨化，接著在120下微波處理3小時。水性處理後，溶液用EtOAc萃取且藉由急驟層析法(Hex/EtOAc 1:1)純化，得到呈淡黃色泡沫狀之粗標題化合物(512 mg)，其不進一步純化即使用。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.74(d,J=8.4 Hz,1H),7.35(s,1H),7.10-6.88(m,5H),6.54(t,J=7.4 Hz,1H),6.06(d,J=18.0 Hz,1H),5.92(d,J=7.6 Hz,1H),5.49(d,J=7.6 Hz,1H),3.46(d,J=8.2 Hz,1H),2.30-2.18(m,2H)；MS ESI 302.0[M+H]+,[C19H15N3O+H]+之計算值302.1。
合成(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
向20 mL微波小瓶中(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(1.00 g，2.32 mmol)與4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(500 mg，3.25 mmol)之混合物中添加PhCH3/EtOH(7 mL/3.5 mL)，隨後添加1 M Na2CO3(3 mL，3 mmol)。在室溫下攪拌1分鐘後，添加Ph(PPh3)4(50 mg，0.043 mmol，1.9 mol%)且所得混合物用氬氣淨化，且在120℃下微波處理3小時。此反應以相同規模重複兩次且合併所得混合物。水性處理得到呈深橙色固體/泡沫狀之粗標題化合物(3.10 g)，其不進一步純化即使用。藉由急驟層析法(Hex/EtOAc 1:1)可獲得純化合物樣品。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.89(d,J=8.4 Hz,1H),7.45(s,1H),7.01(dd,J=18.2 Hz,J=11.4 Hz,1H與d重疊,J=6.8 Hz,1H；共2H),6.83(d,J=8.4 Hz,1H),6.61(dd,J=8.4 Hz,J=2.4 Hz,1H),6.09(d,J=18.0 Hz,1H),5.56(d,J=1.6 Hz,1H),5.52(d,J=11.6 Hz,1H),3.56(t,J=7.6 Hz,1H,部分與MeOH殘餘物重疊),3.26(s,3H),2.24(dd,J=7.8 Hz,J=5.0 Hz,1H),2.18(dd,J=9.2 Hz,J=4.8 Hz,1H)；MS ESI 332.0[M+H]+,[C20H17N3O2+H]+之計算值332.1。
合成(1R*,2S*)-5'-乙基-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用製備(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮的方法，自5-乙基吲哚啉-2-酮(885 mg，5.5 mmol)及3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(1.36 g，5 mmol)獲得呈淡橙色固體狀之呈單一非對映異構體形式的標題化合物(710 g，經2個步驟33%，於hex/MeOH中濕磨)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6)δ13.44(s,1H),10.51(s,1H),7.44(s,1H),7.30(d,J=8.4 Hz,1H),6.99(d,J=8.8 Hz,1H),6.80(d,J=7.2 HZ1H),6.72(d,J=7.6 Hz,1H),5.76(s,1H),3.17(t,J=7.8 Hz,1H),2.29(dd,J=8.0 Hz,J=4.8 Hz,1H),2.18-2.04(m,2H),1.98(dd,J=8.6 Hz,J=4.8 Hz,1H),0.60(t,J=7.4 Hz,1H)；MS ESI 430.0[M+H]+,[C19H16IN3O+H]+之計算值430.0。
合成(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用製備(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮的方法，自5-甲基吲哚啉-2-酮(772 mg，5.25 mmoL)及3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(1.36 g，5 mmol)獲得呈黃色固體狀之粗標題化合物(2.06 g，經2個步驟99%)。NMR指示標題化合物與次要非對映異構體之6:1混合物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6)δ13.43(s,1H),10.51(s,1H),7.47(s,1H),7.32(d,J=8.4 Hz,1H),7.02(d,J=8.8 Hz,1H),6.81(d,J=8.4 Hz,1H),6.73(d,J=7.6 Hz,1H),5.86(s,1H),3.18(t,J=8.2 Hz,1H),2.30-2.20(m 1H),2.00-1.90(m,1H),1.85(s,3H)；MS ESI 416.1[M+H]+,[C18H14IN3O+H]+之計算值416.0。
合成2-((1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-2-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺
向2-(2-側氧基吲哚啉-1-基)乙醯胺(380 mg，2mmol)與3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(544 mg，2 mmol)於MeOH(20 mL)中的混合物中添加哌啶(0.04 mL)。所得混合物在75℃(油溫)下加熱90分鐘。冷卻至室溫後，所得沈澱物藉由抽吸過濾收集，得到黃色固體(850 mg)。
向100 mL燒瓶中碘化三甲基氧化鋶(880 mg，4 mmol)與60% NaH(486 mg，12 mmol)之混合物中添加DMF(5 mL)。所得混合物在室溫下攪拌5分鐘，隨後經由移液管添加上述黃色固體(850 mg)於DMF(20 mL)中之懸浮液。添加後，所得粉紅色混合物在室溫下攪拌2小時且冷卻至0℃。反應物用冰/H2O、飽和NH4Cl(15 mL)及隨後冰/H2O淬滅，直至總體積為100 mL。在室溫下攪拌2分鐘後，所得沈澱物藉由抽吸過濾收集，乾燥之後得到呈粉紅色固體狀之粗標題化合物(805 mg，經2個步驟88%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ13.50(s,1H),7.94(s,1H),7.70(s,1H,NH),7.49(s,1H),7.31(d,J=8.4 Hz,1H),7.26(s,1H),7.06(t,J=7.6 Hz,1H,部分與位於7.03 ppm之峰重疊),7.03(d,J=8.8 Hz,1H,部分與位於7.06 ppm之峰重疊),6.86(d,J=7.6 Hz,1H),6.60(t,J=7.6 Hz,1H),4.38(t,J=18.4 Hz,2H),3.26(t,J=8.8 Hz,1H),2.40-2.35(m,1H),2.10-2.04(m,1H)；MS ESI 459.1[M+H]+,[C19H15IN4O2+H]+之計算值459.0。
合成(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用製備(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮之方法，自1-(2-甲氧基乙基)吲哚啉-2-酮(382 mg，2 mmol)及3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(544 mg，2 mmol)獲得呈淡米色固體狀之粗標題化合物(750 mg，經2個步驟82%)。NMR指示標題化合物與次要非對映異構體之6:1混合物。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ13.48(s,1 H),7.47(s,1H),7.30(d,J=7.8 Hz,1H),7.10-7.05(m,2H),6.98(d,J=8.3 Hz,1H),6.64-6.56(m,1H),6.01(d,J=7.3 Hz,1H),3.98-3.92(m,2H),3.63-3.57(m,2H),3.25(s,3H及t,J=8.6 Hz,1H重疊；共4H),2.37(t,J=6.1 Hz,1H),2.05(dd,J=9.0 Hz,J=5.0 Hz,1H)；MS ESI 460.1[M+H]+,[C20H18IN3O2+H]+之計算值460.0。
合成(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺
將冰乙酸(3滴)添加至4-乙炔基苯甲醛(250.7 mg，1.93 mmol)、二甲胺(2 M，於THF中，1.5 mL，3.0 mmol)與NaBH(OAc)3(617 mg，2.91 mmol)於DCE(6.5 mL)中的混合物中。所得混合物在室溫下攪拌2.5小時。反應物用飽和NaHCO3水溶液(約40 mL)淬滅。產物萃取至CH2Cl2(100 mL，接著2×50 mL)中，且合併的有機層用鹽水(25 mL)洗滌，脫水(Na2SO4)且在真空中蒸發。利用Biotage Isolera(二氧化矽，0-3% 2 M NH3-甲醇/CH2Cl2)純化，得到1-(4-乙炔基苯基)-N,N-二甲基甲胺(280.1 mg，92%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.46(d,J=8 Hz,2H),7.28(d,J=8 Hz,2H),3.42(s,2H),3.07(s,1H),2.24(s,6H)。
向1-(4-乙炔基苯基)-N,N-二甲基甲胺(262 mg，1.65 mmol)與HRuCl(CO)(PPh3)3(104.1 mg，0.11 mmol)於甲苯(9.0 mL)中的經氬氣淨化之溶液中添加4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.20 mL，8.23 mmol)。所得混合物在50℃下加熱12小時。產物萃取至Et2O(250 mL)中，且有機層依序用水(3×20 mL)及鹽水(20 mL)洗滌，脫水(Na2SQ4)且在真空中蒸發。藉由管柱層析法(矽膠，含50-100% CH2Cl2之Et2O)純化，得到(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(402 mg，依據1H NMR，其含有20%四甲基乙二醇雜質，68%產率)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.46(d,J=8 Hz,2H),7.4(d,1H),7.28(d,2H),6.16(d,1H),3.42(s,2H),2.24(s,6H),1.32(s,12H)；MS ESI 288.0[M+H]+,[C17H26BNO2+H]+之計算值288.2。
合成((E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶
將冰乙酸(0.2 mL)添加至4-乙炔基苯甲醛(1 g，7.5 mmol)、吡咯啶(1.2 mL，15 mmol)及NaBH(OAc)3(2.5 g，11.5 mmol)於DCE(35 mL)中的混合物中。所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應物用飽和NaHCO3水溶液(50 mL)淬滅。產物萃取至CH2Cl2(2×100 mL)中，且合併的有機層用鹽水(25 mL)洗滌，脫水(MgSO4)且在真空中蒸發，以定量產率得到1-(4-乙炔基苯基)吡咯啶。1H NMR(CDCl3)δ: 7.45(d,J=7.8 Hz,2H),7.30(d,J=8.3 Hz,2H),3.62(s,2H),3.06(s,1H),2.51(bs,4H),1.80(bs,4H)。
在氬氣下向4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.9 g，15 mmol)於甲苯(20 mL)中的溶液中添加1-(4-乙炔基苯基)吡咯啶(1 g，5 mmol)及HRuCl(CO)(PPh3)3(120 mg，0.11 mmol)。所得混合物在50℃下加熱4小時。產物萃取至EtOAc(250 mL)中，且有機層依序用水(3×20 mL)及鹽水(20 mL)洗滌，脫水(MgSO4)且真空蒸發。藉由管柱層析法(矽膠，0-20% MeOH/EtOAc)純化，得到標題化合物(1.2 g，77%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3) δ 7.45(d,J=7.8 Hz,2H),7.39(d,J=18.6 Hz,1H),7.33-7.29(m,2H),6.15(d,J=18.6 Hz,1H),3.61(s,2H),2.51(bs,4H),1.79(bs,4H),1.32(s,12H)。
合成(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=30 mL，1 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，1小時)，自4-(4-溴苄基)嗎啉(4.18 g，16.3 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(3 mL，17.7 mmol，1.1當量)獲得呈白色至黃色固體狀之標題化合物(4.35 g，71%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3) δ 7.45(d,J=8.0 Hz,2H),7.40(d,J=18.4 Hz,1H),7.31(d,J=8.0 Hz,2H),6.16(d,J=18.0 Hz,1H),3.72(t,J=4.4 Hz,4H),3.50(s,2H),2.47-2.42(m,4H),1.32(s,12H)；MS ESI 330.1[M+H]+,[C19H28BNO3+H]+之計算值330.2。
合成(E)-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛
使用製備實施例A51A之方法(PhCH3=8 mL，2 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，隔夜)，自4-溴苯甲醛(500 mg，2.71 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(498 mg，71%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.01(s,1H),7.88(d,J=8.0 Hz,2H),7.64(d,J=8.4 Hz,2H),7.43(d,J=18.4 Hz,1H),6.34(d,J=18.4 Hz,1H),1.34(s,12H)；MS ESI 258.9[M+H]+,[C15H19BO3+H]+之計算值259.1。
合成(E)-4-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉
向3-乙炔基苯甲醛(650 mg，5 mmol)及嗎啉(0.87 mL，10 mmol)於DCE(15 mL)中的混合物中依序添加NaBH(OAc)3(1.325 g，6.25 mmol)、AcOH(0.2 mL)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。水性處理後，用EtOAc萃取，得到呈淺褐色油狀之粗4-(3-乙炔基苄基)嗎啉(0.98 g)。使用製備實施例A42A之方法(PhCH3=12 mL，1 mol%HRuCl(CO)(PPh3)3，50℃，2小時)獲得呈淺褐色油狀之標題化合物(1.75 g，經 2個步驟定量產率)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.47(s,1H),7.46-7.37(m,2H),7.35-7.27(m,2H),6.19(d,J=18.4 Hz,1H),3.78-3.68(m,4H),3.52(s,2H),2.52-2.42(m,4H),1.32(s,12H)；MS ESI 330.1[M+H]+,[C19H28BNO3+H]+之計算值330.2。
合成(E)-N,N-二甲基-1-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺
使用製備(E)-4-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉之方法(PhCH3=12 mL，2 mol% HRuCl(CO)(PPh3)3，50℃，2小時)，自3-乙炔基苯甲醛(520 mg，4 mmol)及Me2NH(2 M，於THF中，3 mL，6 mol)獲得呈黃色油狀之標題化合物(1.36 g，經2個步驟定量產率)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.47(s,1H),7.45-7.38(m,2H),7.35-7.27(m,2H),6.19(d,J=18.4 Hz,1H),3.68-3.58(m,4H),3.52(s,2H),2.53-2.43(m,4H),1.32(s,12H)；MS ESI 288.1[M+H]+,[C17H26BNO2+H]+之計算值288.2。
合成(E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌
使用製備實施例A51A之方法(PhCH3=12 mL，2 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，2小時)，自1-(4-溴苯基)哌(653 mg，2.71 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)獲得呈黃色固體狀之標題化合物(267 mg，68%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ7.41(d,J=8.0 Hz,2H),7.09(d,J=18.4 Hz,1H),6.89(d,J=8.0 Hz,2H),5.86(d,J=18.8 Hz,1H),3.17-3.11(m,4H),2.90-2.84(m,4H),1.22(s,12H)；MS ESI 315.0[M+H]+,[C18H27BN2O2+H]+之計算值315.2。
合成順-2,6-二甲基-4-(4-((E)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=25 mL，1 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，2小時)，自4-(4-溴苄基)-順-2,6-二甲基嗎啉(2.82 g，10 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.85 mL，11 mmol，1.1當量)獲得呈白色固體狀之標題化合物(2.52 g，71%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.46(d,J=8.0 Hz,2H),7.40(d,J=18.4 Hz,1H),7.30(d,J=7.6 Hz,2H),6.16(d,J=18.4 Hz,1H),3.75-3.65(m,2H),3.47(s,2H),2.70(d,J=10.8 Hz,2H),1.75(t,J=10.2 Hz,2H),1.32(s,12H),1.14(d,J=6.4 Hz,6H)；MS ESI 358.2[M+H]+,[C21H32BNO3+H]+之計算值358.2。
合成(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=10 mL，2 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，2小時)，自1-(4-溴苯基)-4-甲基哌(691 mg，2.71 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(674 mg，76%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.41(d,J=8.4 Hz,2H),7.34(d,J=18.4 Hz,1H),6.87(d,J=8.4 Hz,2H),5.99(d,J=18.4 Hz,1H),3.26-3.33(m,4H),2.65-2.59(m,4H),2.40(s,3H),1.31(s,12H)；MS ESI 329.1[M+H]+,[C19H29BN2O2+H]+之計算值329.2。
合成(E)-1-乙基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=12 mL，2 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，2小時)，自1-(4-溴苯基)-4-乙基哌(729 mg，2.71 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(601 mg，65%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.41(d,J=8.4 Hz,2H),7.34(d,J=18.0 Hz,1H),6.88(d,J=8.4 Hz,1H),6.99(d,J=18.0 Hz,1H),3.28(t,J=4.8 Hz,4H),2.61(t,J=4.8 Hz,4H),2.48(q,J=7.2 Hz,2H),1.32(s,12H),1.14(t,J=7.2 Hz,3H)；MS ESI 343.1[M+H]+,[C20H31BN2O2+H]+之計算值343.2。
合成(E)-1-異丙基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=10 mL，2 mol% Pd(P t Bu3)2，80℃，隔夜)，自1-(4-碘苯基)-4-異丙基哌(894 mg，2.71 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)獲得呈淡橙色固體狀之標題化合物(504 mg，52%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.41(d,J=8.4 Hz,2H),7.34(d,J=18.4 Hz,1H),6.87(d,J=8.4 Hz,2H),5.98(d,J=18.4 Hz,1H),3.26(t,J=4.8 Hz,4H),2.76-2.66(m,5H),1.32(s,12 H),1.10(d,J=6.4 Hz,6H)；MS ESI 357.2[M+H]+,[C21H33BN2O2+H]+之計算值357.3。
合成(E)-4-(2-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)乙基)嗎啉
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=12 mL，2 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，隔夜)，自4-(2-(4-溴苯氧基)乙基)嗎啉(1 g，3.50 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.6 mL，3.58 mmol，1.02當量)獲得呈白色固體狀之標題化合物(902 g，72%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.28(d,J=8.0 Hz,2H),7.22(d,J=18.4 Hz,1H),6.70(d,J=8.0 Hz,2H),5.88(d,J=18.4 Hz,1H),3.90(t,J=4.8 Hz,2H),3.60-3.50(m,4H),2.59(t,J=4.8 Hz,2H),2.42-2.32(m,4H),1.15(s,12 H)；MS ESI 360.2[M+H]+,[C20H30BNO4+H]+之計算值360.2。
合成(E)-2-氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=10 mL，1 mol%Pd(P t Bu3)2，80℃，1.5小時)，自4-溴-2-氟苯甲醛(812 mg，4 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.8 mL，4.8 mmol)獲得呈黃色固體狀之標題化合物(610 mg，55%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.34(s,1H),7.85(t,J=7.6 Hz,1H),7.36(d,J=8.8 Hz,1H,部分與位於7.35 ppm之峰重疊),7.35(d,J=17.2 Hz,1H,部分與位於7.36ppm之峰重疊),7.26(d,J=11.2 Hz,1H,部分與CDCl3殘餘物重疊),6.32(d,J=18.4 Hz,1H),1.33(s,12H)。
合成(E)-4-(2-氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉
向(E)-2-氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛(0.61 g，2.2 mmol)與嗎啉(0.3 mL)於DCE(20 mL)中的混合物中添加NaBH(OAc)3(636 mg，3 mmol)，隨後添加AcOH(0.5 mL)。所得混合物在室溫下攪拌2小時。反應物用飽和NaHCO3(10 mL)、H2O(10 mL)淬滅，且用EtOAc(2×30 mL)萃取。在真空中移除溶劑，得到呈白色固體狀之標題化合物(0.72 g，94%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.20-7.12(m,2H),7.04(d,J=7.6 Hz,1H),6.99(d,J=10.8 Hz,1H),5.98(d,J=18.4 Hz,1H),3.55-3.45(m,4H),3.36(s,2H),2.33-2.23(m,4H),1.14(s,12H)；MS ESI 348.2[M+H]+,[C19H27BFNO3+H]+之計算值348.2。
合成順-2,6-二甲基-1-(4-((E)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶
使用製備實施例A51A的方法(PhCH3=10 mL，2.5 mol% Pd(P t Bu3)2，80℃，75分鐘)，自4-(4-溴苄基)-順-2,6-二甲基哌啶(0.60 g，2.13 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.44 mL，2.6 mmol)獲得呈淡黃色油狀之標題化合物(0.45 g，55%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.43(d,J=8.0 Hz,2H,部分與位於7.40 ppm之峰重疊),7.40(d,J=18.8 Hz,1H,部分與位於7.43 ppm及7.36 ppm之峰重疊),7.36(d,J=8.4 Hz,2H,部分與位於7.40 ppm之峰重疊),6.14(d,J=18.4 Hz,1H),3.78(s,2H),2.53-2.44(m,2H),1.68-1.55(m,3H),1.40-1.28(m,3H),1.05(d,J=6.4 Hz,6H)；MS ESI 356.2[M+H]+,[C22H34BNO2+H]+之計算值356.3。
合成N-苄基-羥吲哚
根據文獻程序製備(C. Martin及E. M. Carreira,J. Am. Chem. Soc.,2005,127,11505-11515)。靛紅(10.0 g，68 mmol)於無水DMP(125 mL)中的經攪拌溶液於冰浴中冷卻，隨後分10份添加氫化鈉(60 wt%，於礦物油中，2.86 g，71.5 mmol)，橙色溶液快速變成紫色。當觀察到無氣體進一步逸出時，藉由注射器添加苄基溴(13.4 g，78.0 mmol)。觀察到在20分鐘內，顏色變回至橙色。在攪拌下添加水(300 mL)，且所得橙紅色沈澱物藉由過濾收集且用水及少量冷乙醇洗滌。接著固體於沸騰乙醇(300 mL)中再結晶，得到呈紅色長針狀之N-苄基靛紅(13.7 g，85%)。
將N-苄基靛紅(13.0 g，55 mmol)與水合肼(60 mL)混合且置於油浴中。混合物分階段加熱至125℃，首先變為綠色淤泥，接著變為黃色的黏性固體塊。在125℃下歷時總共5小時後，冷卻混合物且用EtOAc(2×100 mL)萃取。合併的有機部分用1.0 M H2SO4水溶液洗滌兩次，且用半飽和鹽水、接著鹽水各洗滌一次，經MgSO4脫水，過濾且濃縮，得到淺黃色固體。自乙醚/戊烷中再沈澱，得到呈灰白色固體狀之標題化合物(9.6 g，75%)。光譜資料與文獻值匹配(C. Martin及E. M. Carreira,J. Am. Chem. Soc.,2005,127,11505-11515)。
合成1-苄基-5-氟吲哚啉-2-酮
以類似於N-苄基靛紅方法的方式，5-氟靛紅(10.0 g，60.5 mmol)產生呈橙紅色粉末狀之5-氟-N-苄基靛紅(14.5 g，93%)。粗.產物不經純化即用於下一步驟。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.33-7.21(m,5H),6.95(d,J=7.6 Hz,1H),6.84(t,1H),6.60(m,1H),4.89(s,2H)；MS ESI 255.9[M+H]+,[C15H10FNO2+H]+之計算值255.07。
標題化合物以類似於N-苄基-羥吲哚方法的方式使用5-氟-N-苄基靛紅(14.5 g，56.8 mmol)製備。使用Et2O：己烷濕磨，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(10.3 g，75%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3) δ 7.30-7.26(m,5H),7.00(d,J=7.6 Hz,1H),6.87(t,1H),6.63(m,1H),4.91(s,2H),3.63(s,2H)；MS ESI 241.9[M+H]+,[C15H10FNO2+H]+之計算值241.09。
合成1-苄基-5-甲基吲哚啉-2-酮
歷經2分鐘向5-甲基靛紅(8.05 g，50 mmol)與K2CO3(8.16 g，60 mmol)於DMF(100 mL)中的混合物中逐滴添加BnBr(6.5 mL，55 mmol)。添加後，所得混合物於油浴中在75℃下加熱1.5小時。冷卻至室溫後，反應混合物傾注於冰/冷水(250 mL)上，用H2O(50 mL)沖洗且攪拌5分鐘。所得沈澱物藉由抽吸過濾收集且風乾，得到呈深紅色固體狀之1-苄基-5-甲基靛紅。MS ESI 252.0[M+H]+,[C16H13NO2+H]+之計算值252.1。
將1-苄基-5-甲基靛紅懸浮於DMSO(100 mL)中且冷卻至0℃。歷經5分鐘逐滴添加水合肼(5 mL)。添加後，所得澄清紅色溶液在120℃下加熱2小時，接著在140℃下加熱5小時。冷卻至室溫後，將其傾注至1 L錐形瓶(Erlenmeyer flask)中，用H2O(50 mL)沖洗且添加冰直至總體積為約300 mL。添加2 M HCl(50 mL)且混合物用EtOAc(200 mL×2，接著100 mL)萃取，且將有機層脫水(Na2SO4)。移除溶劑，隨後在高度真空下乾燥2天，得到呈深紅色固體狀之標題化合物(12.53 g，經2個步驟定量產率，含有一些DMSO殘餘物)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.35-7.29(m,5H),7.09(s,1H),6.97(d,J=7.6 Hz,1H),6.61(d,J=8.0 Hz,1H),4.91(s,2H),3.60(s,2H),2.31(s,3H)；MS ESI 238.0[M+H]+,[C16H15NO+H]+之計算值238.1。
合成1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2-酮
5-甲氧基靛紅(5.0 g，28 mmol)於無水DMF(40 mL)中的經攪拌溶液於冰浴中冷卻，隨後緩慢添加氫化鈉(60 wt%，於礦物油中，1.7 g，42 mmol)，深紅色溶液快速變成黑色。攪拌20分鐘後，藉由注射器向反應混合物中添加BnBr(3.7 mL，31 mmol)且所得混合物攪拌1小時。在攪拌下添加水(150 mL)，且所得深紅色沈澱物藉由過濾收集且用水洗滌，得到呈深紅色固體狀之1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2,3-二酮(6.1 g，81%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.39-7.31(m,5H),7.17(s,1H),7.03(d,J=8.1 Hz,1H),6.68(d,J=8.6 Hz,1H),4.92(s,2H),3.79(s,3H)。MS ESI 268.1[M+H]+,[C16H13NO3+H]+之計算值268.09。
1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2,3-二酮(6.1 g，23 mmol)與水合肼(50-60%級，2.9 mL，約2當量)於DMSO(15 mL)中的溶液於油浴中加熱至140℃。3小時後，冷卻混合物，用水及EtOAc稀釋，分離各層且水層用EtOAc萃取三次(30 mL)。合併的有機部分用2 M H2SO4、鹽水洗滌且經MgSO4脫水，過濾且濃縮，得到呈黏性褐色油狀之粗產物。粗產物藉由矽膠層析法(含20-50% EtOAc之己烷)純化，得到呈褐色油狀之標題化合物(5.0 g，85%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.34-7.23(m,5H),6.89(s,1H),6.69(d,J=8.3 Hz,1H),6.61(d,J=8.5 Hz,1H),4.91(s,2H),3.76(s,3H),3.62(s,2H)。MS ESI 254.0[M+H]+,[C16H15NO2+H]+之計算值254.1。
合成N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑
方法1：N1-苄基-6-溴-1H-吲唑(10.2 g，35.5 mmol)與NaOH(4.3 g，107 mmol)於THF/水(9:1，350 mL)中的混合物用氮氣淨化。在另一燒瓶中，Pd(OAc)2(0.16 g，0.7 mmol，2 mol%)與PPh3(0.37 g，1.4 mmol，4 mol%)一起於經氮氣淨化的無水THF(35 mL)中攪拌10分鐘，形成具有一些懸浮固體的紅色溶液。向反應混合物中添加乙烯基硼酸四甲基乙二醇酯(7.5 mL，44.4 mmol)及催化劑溶液，且所得溶液再一次用氮氣淨化。混合物於設定為65℃的油浴中升溫；TLC指示起始物質在7小時內耗盡。混合物在減壓下濃縮以移除大部分THF，接著用水(50 mL)、鹽水(50 mL)及EtOAc(250 mL)稀釋。分離各層且水相再用EtOAc(4×50 mL)萃取。合併的有機部分用鹽水洗滌，經Na2SO4脫水，過濾且濃縮(在70℃/20毫巴下)，得到粗產物。在二氧化矽上使用含10-20% EtOAc之環己烷層析，得到呈黃色油狀之標題化合物(7.5 g，90%)，其在靜置時固化。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.98(s,1H),7.63(d,J=8.4 Hz,1H),7.29-7.19(m,5H),7.18-7.13(m,J=7.0 Hz,,2H),6.75(dd,J=17.6,10.9 Hz,1H),5.76(d,J=17.5 Hz,1H),5.53(s,2H),5.26(d,J=10.9 Hz,1H)。MS(ES+): 235([M+H]+)；[C16H14N2+H]+之235.1。
方法2：使用4,4,6-三甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼：N1-苄基-6-溴-1H-吲唑(1.44 g，5.0 mmol)與NaOH(0.4 g，10.0 mmol)於THF/水(5:1，15 mL)中的混合物用氮氣淨化。在另一燒瓶中，Pd(OAc)2(11 mg，0.05 mmol，1 mol%)與PPh3(26 mg，0.1 mmol，2 mol%)一起於經氮氣淨化的THF(2.5 mL)中攪拌10分鐘，形成具有一些懸浮固體的紅色溶液。所用THF為HPLC級且不含抑制劑；低品級或穩定THF之影響未知。向反應混合物中添加4,4,6-三甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼(1.12 mL，6.5 mmol)及催化劑溶液，且所得溶液再一次用氮氣淨化。混合物於設定為65℃的油浴中升溫；連續加熱24小時，但反應有可能在不足8小時內完成。粗混合物接著與已使用較高稀釋度之同規模之第二平行反應物合併。混合物在減壓下濃縮以移除大部分THF，接著用水、鹽水及環己烷稀釋。分離各層且水相再用環己烷萃取，直至TLC指示全部所要產物已萃取(3-4次萃取)。合併的有機部分用鹽水洗滌，經MgSO4脫水，接著通過1 cm二氧化矽墊，以移除基線.物質。使用含10%EtOAc之環己烷(在此溶離劑中Rf.為0.15)溶離保留於二氧化矽上的任何產物。濃縮合併的溶離液，得到呈黃色油狀之標題化合物(2.05 g，88%)，其在靜置時固化且具有足以用於後續反應的純度。
方法3：N1-苄基-6-溴-1H-吲唑(一半上述方法3中所獲得之粗物質)分兩批如下處理：用氮氣淨化粗N1-苄基-6-溴-1H-吲唑(153 g，含有最多0.5 mol，假定苄基化/平衡時產率為100%)與NaOH(40 g，1.0 mol)於THF/水(5:1，1.5 L；HPLC級無抑制劑THF)中的混合物。在另一燒瓶中，Pd(OAc)2(1.13 g，5.0 mmol，1 mol%)與PPh3(2.6 mg，10.0 mmol，2 mol%)一起於經氮氣淨化的THF(250 mL)中攪拌10分鐘，形成具有一些懸浮固體的紅色溶液。向反應混合物中添加4,4,6-三甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼(112 mL，0.65 mol)及催化劑溶液，且所得溶液再一次用氮氣淨化。混合物於設定為60℃的油浴中加熱隔夜。樣品之1H NMR指示有一些起始物質殘留，且因此再添加乙烯基供體(30 mL)以促使反應完成。合併兩批混合物且混合物在減壓下濃縮以移除大部分THF，接著用水、鹽水及環己烷稀釋。分離各層且水相再用環己烷萃取直至TLC指示全部所要產物已萃取(總計3.5 L環己烷)。合併的有機部分用鹽水洗滌，經MgSO4脫水，接著通過2 cm二氧化矽墊，以移除基線物質。使用含10% EtOAc之環己烷(在此溶離劑中Rf.為0.15)溶離保留於二氧化矽上的任何產物。濃縮合併的溶離液，得到309 g粗油狀物，其包含標題化合物、少量來源於乙烯基供體的二醇及多種含苄基雜質。
方法4：使用經蒸餾的N1-苄基-6-溴-1H-吲唑(64.3 g，0.144莫耳)進行另一反應，完全轉化而無需額外份的乙烯基供體，且得到半粗N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(55.5 g，定量)，其不經進一步純化即用於下文中。
合成(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1,2-二醇
方法1：將K3Fe(CN)6(16.7 g，51.0 mmol)、K2CO3(7.05 g，51.0 mmol)、(DHQ)2PHAL(0.13 g，0.17 mmol，1 mol%)及K2OSO4.2H2O(12.8 mg，0.034 mmol，0.2 mol%)置於圓底燒瓶中。添加 t BuOH與水之混合物(1:1，160 mL)，攪拌時形成澄清雙相混合物。混合物於冰浴中冷卻，引起部分沈澱，隨後添加粉狀N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(4.0 g，17.1 mmol)。所得混合物於冰浴中劇烈攪拌5小時，此時固體不再可見且TLC指示起始物質耗盡。反應物藉由添加偏亞硫酸氫鈉(40 g)淬滅，同時引起發泡現象，導致反應混合物溢出至冰浴中。剩餘物質添加至冰浴中且所得混合物(含有約1 L水及冰)攪拌隔夜，緩慢升溫。添加矽藻土及CH2Cl2(200 mL)，充分攪拌混合物，接著過濾。固體再用CH2Cl2(2×50 mL)充分洗滌。分離雙相濾液，且水層用CHCl3(4×50 mL)萃取。合併的有機部分用鹽水洗滌，經MgSO4脫水，過濾且濃縮。將殘餘物溶解於EtOAc中且再用EtOAc溶離經由二氧化矽墊(1 cm深度×8 cm直徑)過濾，以移除基線物質。濃縮溶離液且用甲苯洗提以移除痕量的 t BuOH。最後，殘餘物自熱甲苯(10 mL/g)中再結晶，得到呈白色針狀之標題化合物(3.87 g，84%，98.8% ee)，其中主要(S)對映異構體在16.8分鐘時溶離(Daicel Chiralpak IB(250×4.6 mm)；含10% EtOH之正庚烷等度溶離；1 mL/min；周圍溫度(約22℃)；偵測：254、230、210 nm)；根據外消旋參考標準物，使用此方法時(R)對映異構體之滯留時間為14.8分鐘且N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑在5.4分鐘時溶離。1H NMR及質譜資料與以上獲得的外消旋1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1,2-二醇相同。旋光度：[α]22 D=13°(c 1.018,MeOH)。
方法2：半粗N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(上述方法4，55.5 g)以類似方式進行二羥基化反應，再結晶後得到2批固體純(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1,2-二醇(38 g，定量)。
方法3：將K3Fe(CN)6(0.98 kg，3 mol)、K2CO3(0.55 kg，3 mol)、(DHQ)2PHAL(3.9 g，5.0 mmol)及K2OSO4.2H2O(0.37 g，1 mmol)置於配備有頂置式攪拌器的10 L頂夾式(clamp-top)反應容器中。添加 t BuOH與水之混合物(1:1，7.5 L)，攪拌時形成澄清雙相混合物。使用Haake EK90冷卻器冷卻混合物，引起部分沈澱，隨後添加粗N1-苄基-6-乙烯基-1H-吲唑(約0.7-0.8 mol)。劇烈攪拌所得混合物，但因可供在冷卻浴中適當循環的空間不夠而凝固，且在擱置一個週末時，實際溫度下降至約-20℃。顯然轉化較少。為加快反應，再添加(DHQ)2PHAL(2.5 mmol)及K2OSO4.2H2O(0.5 mmol)，且將混合物升溫至約10℃；接著反應令人滿意地進行。藉由逐份添加偏亞硫酸氫鈉(1.5 kg)淬滅反應。混合物在室溫下攪拌1小時，變為幾乎澄清，接著經由矽藻土墊過濾以移除沈澱之OSO2。濾液用CH2Cl2萃取(4次萃取，最終體積7 L)，且合併的有機部分經MgSO4脫水，過濾且濃縮。粗產物自熱甲苯(10 mL/g)中再結晶；收集兩批標題化合物(98.7%及98.0% e.e.，總計163.7 g)(自6-溴-1H-吲唑起55%)。
合成(S)-甲烷磺酸2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲烷磺醯基氧基-乙酯
方法1：(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1,2-二醇(3.75 g，14.0 mmol，98.8%ee)及Et3N(4.9 mL，35.0 mmol)於無水CH2Cl2(350 mL)中的溶液於冰浴中冷卻，隨後歷經10分鐘逐滴添加MsCl(2.17 mL，28.0 mmol)。所得混合物攪拌30分鐘。再用CH2Cl2(250 mL)稀釋後，溶液用冷1.0 M HCl水溶液(2×50 mL)、飽和NaHCO3水溶液(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，接著經Na2SO4脫水。溶液在抽吸下傾注於短二氧化矽墊(1 cm深度×8 cm直徑)上。初始濾液不含任何產物；其隨後用1:1 Et2O/CH2Cl2溶離。在減壓下濃縮溶離液，得到呈白色固體狀之標題化合物(5.98 g，大致定量)。1H NMR及質譜資料與以上獲得的外消旋甲烷磺酸2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲烷磺醯基氧基-乙酯相同。此批物質之對映異構體過量在此階段未測定，而是繼續用於下一步驟。旋光度：[α]22 D=58°(c 0.73,CHCl3)。
方法2：(S)-1-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-乙烷-1,2-二醇(134 g，0.5 mol，約98% e.e.)及Et3N(174 mL，1.25 mol)於CH2Cl2(2.5 L)中的溶液於冰浴中冷卻，隨後歷經約1小時緩慢添加MsCl(81.3 mL，1.05 mol)。內部溫度增至最高11℃。所得混合物攪拌30分鐘。反應物用冷1.0 M HCl水溶液(400 mL)淬滅，分離各相，且有機相再用冷1.0 M HCl水溶液、NaHCO3水溶液及鹽水洗滌，接著經MgSO4脫水。溶液在抽吸下傾注於短二氧化矽墊上。在此過濾期間自二氧化矽溶離出一些產物，且其餘產物使用1:1 Et2O/CH2Cl2(2 L)溶離。溶離液在減壓下濃縮，得到白色硬固體。其用Et2O(800 mL)濕磨隔夜。藉由過濾收集白色細粉末且再用Et2O(2×100 mL)洗滌，得到標題化合物(184.2 g，87%，99% e.e.)，其中主要(S)對映異構體在13.4分鐘時溶離(Daicel Chiralpak IB(250×4.6 mm)；含30%EtOH之正庚烷等度溶離；1 mL/min；周圍溫度(約22℃)；偵測：254、230、210 nm)；根據外消旋參考標準物，使用此方法時(R)對映異構體之滯留時間為14.4分鐘。濾液僅含有少量低e.e.產物且丟棄。
合成(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
方法1：N-苄基-羥吲哚(3.57 g)於無水THP(120 mL)中的溶液於冰浴中冷卻，隨後分4份添加NaH(60 wt%，於礦物油中，1.92 g，48.0 mmol)；溶液快速變為深紫色。30分鐘後，藉由注射泵歷經1小時添加(S)-甲烷磺酸2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲烷磺醯基氧基-乙酯(6.79 g，16.0 mmol，約98.5%ee，預先用無水THF洗提兩次)於無水THF(80 mL)中的溶液。TLC指示快速轉化為Rf為0.45的單一化合物(含25% EtOAc之環己烷，溶離兩次；起始物質Rf 0.5及Rf 0.2)。攪拌2小時後，將混合物傾注至NH4Cl飽和水溶液(50 mL)中，用水(50 mL)及EtOAc(100 mL)稀釋。分離各相且水層再用多份EtOAc(4×50 mL)萃取。合併的有機部分用鹽水洗滌，經Na2SO4脫水，過濾且濃縮，得到粗產物，根據1H NMR，其似乎幾乎完全由標題化合物組成。粗產物用1:1 EtOAc/環己烷溶離下通過短二氧化矽墊(1 cm深度×5 cm直徑)。殘餘物用正庚烷(3×50 mL)濕磨以移除礦物油，且用甲苯洗提，得到含有一些溶劑之呈玻璃質固體狀之標題化合物(7.0 g，至多90%產率)。HPLC指示98% e.e.之光學純度，其中主要(1R,2S)對映異構體在13.3分鐘時溶離(Daicel Chiralpak IA,250×4.6 mm；含10% EtOH之正庚烷等度溶離；1 mL/min；周圍溫度(約22℃)；偵測：254、230、210 nm)；根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為12.1分鐘。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.99(s,1H),7.60(d,J=8.3 Hz,1H),7.36-7.20(m,8H),7.19(s,1H),7.15-7.10(m,J=6.4 Hz,2H),6.99(td,J=7.8,0.9 Hz,1H),6.92(d,J=8.3 Hz,1H),6.74(d,J=7.8 Hz,1H),6.50(t,J=7.4 Hz,1H),5.76(d,J=7.3 Hz,1H),5.61(d,J=15.8 Hz,1H),5.53(d,J=15.8 Hz,1H),5.08(d,J=15.6 Hz,1H),4.97(d,J=15.7 Hz,1H),3.48(t,J=8.5 Hz,1H),2.28(dd,J=9.0,4.5 Hz,1H),2.02(dd,J=8.0,4.6 Hz,1H)。MS(ES+): 456([M+H]+),[C31H25N3O+H]+之計算值456.2。
方法2：隨後在以類似於方法1的方式進行但不進行任何管柱層析的另一組個別實驗中，每批使用20-45 g之間的(S)-甲烷磺酸2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲烷磺醯基氧基-乙酯，總共使用133.8 g，315 mmol。合併一些批次且在使用前通過二氧化矽柱塞以移除痕量基線物質，但此舉對於後續反應似乎沒有任何影響。分離得到呈泡沫固體狀之粗產物(174.1 g，含有約佔各粗產物之10%的來自氫化鈉之礦物油以及不同量的EtOAc，根據估算的個別批次純度，估算平均產率>80%)。該物質不進一步純化即繼續使用。
合成(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
方法1：N-苄基-羥吲哚(3.57 g)於無水THF(120 mL)中的溶液於冰浴中冷卻，隨後分4份添加NaH(60 wt%，於礦物油中，1.92 g，48.0 mmol)；溶液快速變為深紫色。30分鐘後，藉由注射泵歷經1.小時添加(S)-甲烷磺酸2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)-2-甲烷磺醯基氧基-乙酯(6.79 g，16.0 mmol，約98.5%ee，預先用無水THF洗提兩次)於無水THF(80 mL)中的溶液。TLC指示快速轉化為Rf為0.45的單一化合物(含25% EtOAc之環己烷，溶離兩次；起始物質Rf 0.5及Rf 0.2)。攪拌2小時後，將混合物傾注至NH4Cl飽和水溶液(50 mL)中，用水(50 mL)及EtOAc(100 mL)稀釋。分離各相且水層再用多份EtOAc(4×50 mL)萃取。合併的有機部分用鹽水洗滌，經Na2SO4脫水，過濾且濃縮，得到粗產物，根據1H NMR，其似乎幾乎完全由標題化合物組成。粗產物用1:1 EtOAc/環己烷溶離下通過短二氧化矽墊(1 cm深度×5 cm直徑)。殘餘物.用正庚烷(3×50 mL)濕磨以移除礦物油，且用甲苯洗提，得到含有一些溶劑之呈玻璃質固體狀之標題化合物(7.0 g，至多90%產率)。HPLC指示98% e.e.之光學純度，其中主要(1R,2S)對映異構體在13.3分鐘時溶離(Daicel Chiralpak IA,250×4.6 mm；含10%EtOH之正庚烷等度溶離；1 mL/min；周圍溫度(約22℃)；偵測：254、230、210 nm)；根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為12.1分鐘。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.99(s,1H),7.60(d,J=8.3 Hz,1H),7.36-7.20(m,8H),7.19(s,1H),7.15-7.10(m,J=6.4 Hz,2H),6.99(td,J=7.8,0.9 Hz,1H),6.92(d,J=8.3 Hz,1H),6.74(d,J=7.8 Hz,1H),6.50(t,J=7.4 Hz,1H),5.76(d,J=7.3 Hz,1H),5.61(d,J=15.8 Hz,1H),5.53(d,J=15.8 Hz,1H),5.08(d,J=15.6 Hz,1H),4.97(d,J=15.7 Hz,1H),3.48(t,J=8.5 Hz,1H),2.28(dd,J=9.0,4.5 Hz,1H),2.02(dd,J=8.0,4.6 Hz,1H)。MS(ES+): 456([M+H]+),[C31H25N3O+H]+之計算值456.2。
合成(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-氟螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用二甲烷磺酸(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1,2-二基酯(501.4 mg，1.181 mmol)及1-苄基-5-氟吲哚啉-2-酮(285.0 mg，1.181 mmol)以類似於(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮之方法的方式製備標題化合物。使用Biotage Isolera(SNAP 25g管柱，含25-100% EtOAc之己烷)純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(352 mg，63%；97% ee)，其中主要(1R,2S)對映異構體在7.03分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5μ纖維素-1(150×4.6 mm)，1.0 mL/min，用含80% EtOH之己烷等度溶離1.0分鐘，接著為10分鐘內含80-90% EtOH之己烷梯度)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為5.95分鐘。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.04(s,1H),7.67(d,J=8.8 Hz,1H),7.40-7.27(m,8H),7.17(s,1H),7.11(d,J=7.2 Hz,2H),6.92(d,J=8.4 Hz,1H),6.67-6.62(m,2H),5.62(d,J=15.6 Hz,1H),5.55(d,J=15.6 Hz,1H),5.51(t,J=6.0 Hz,1H),5.10(d,J=15.6 Hz,1H),4.94(d,J=16.0 Hz,1H),3.53(t,J=8.4 Hz,1H),2.32(dd,J=9.2,4.4 Hz,1H),2.02(dd,J=8.0,3.2 Hz,1H)，MS ESI 474.3[M+H]+,[C31H24FN3O+H]+之計算值474.2。
合成(1R,2S)-5'-氟-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-氟螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(560 mg，1.18 mmol)以類似於實施例A4之手性合成方法的方式製備標題化合物。使用矽膠管柱層析以含5-95% EtOAc之己烷純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(179 mg，52%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.03(s,1H),7.71(d,J=8.0 Hz,1H),7.62-7.46(m,2H),6.94(d,J=8.4 Hz,1H),6.88(t,J=4.8 Hz,1H),5.69(d,J=9.2 Hz,1H),3.39(t,J=8.0 HZ,1H),2.30-2.71(m,1H),2.23-2.18(m,1H)；MS ESI 294.1[M+H]+,[C17H12FN3O+H]+之計算值294.10。
合成(1R,2S)-5'-氟-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用(1R,2S)-5'-氟-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(240 mg，0.818 mmol)以類似於實施例A10之手性合成方法的方式製備標題化合物。使用Biotage Isolera利用SNAP 25g管柱以含5-90% EtOAc之己烷純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(195 mg，57%；97% ee)，其中主要(1R,2S)對映異構體在3.7分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5 μ纖維素-2(150×4.6 mm)；含25% EtOH之正己烷等度溶離；1.5 mL/min；24℃；偵測：254 nm)。
根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為3.2分鐘。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.47(s,1H),7.38(d,J=8.4 Hz,1H),7.01(d,J=8.8 Hz,1H),6.88(dd,J=8.8,4.4 Hz,1H),6.79(t,J=8.8 Hz,1H),5.69(d,J=8.4 Hz,1H),3.38(t,J=8.8 HZ,1H),2.28(dd,J=8.8,4.2 Hz,1H),2.21(dd,J=9.2,4.4 Hz,1H)；MS ESI 420.0[M+H]+,[C17H11FIN3O+H]+之計算值420.0。
合成(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基).-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
向裝有60% NaH(1.20 g，30 mmol)的250 mL圓底燒瓶中添加無水THF(20 mL)且所得混合物冷卻至0℃。歷經2分鐘添加1-苄基-5-甲基吲哚啉-2-酮(2.37 g，10 mmol)於無水THF(25 mL)中的溶液，隨後用THF(5 mL)沖洗。在0℃下攪拌20分鐘後，經由滴液漏斗歷經40分鐘逐滴添加二甲烷磺酸(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1,2-二基酯(4.24 g，10 mmol)於無水THF(45 mL)中的溶液，隨後用THF(5 mL)沖洗。添加後，所得混合物在0℃下攪拌30分鐘(TLC顯示完成)，接著在室溫下擱置隔夜。冷卻至0℃後，將反應混合物傾注至含有冰(100 mL)及飽和NH4Cl(30 mL)的錐形瓶中且用EtOAc(150 mL×2)萃取，脫水(Na2SO4)。移除溶劑後，使用30 mL EtOAc將殘餘物轉移至100 mL RBF中且形成晶體。抽吸過濾，得到呈米色固體狀之標題化合物(1.537 g)。濃縮濾液且藉由Biotage Isolera(含20-30% EtOAc之己烷)純化且用EtOAc/己烷濕磨，得到第二批灰白色固體(1.560 g)。使用上述程序純化濾液，得到第三批米色固體(115 mg)。總共3.212 g(68%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.02(s,1H),7.63(d,J=8.0 Hz,1H),7.36-7.20(m,9H),7.14(d,J=6.0 Hz,2H),6.94(d,J=8.4 Hz,1H),6.80(d,J=8.0 Hz,1H),6.64(d,J=7.2 Hz,1H),5.62(d,J=16.8 Hz,1H,部分與位於5.59之單峰重疊),5.59(s,1H,部分與位於5.62之雙重峰重疊),5.55(d,J=16.8 Hz,1H),5.08(d,J=16.0 Hz,1H),4.97(d,J=15.6 Hz,1H),3.48(t,J=8.4 Hz,1H),2.30-2.25(m,1H),2.02-1.96(m,1H),1.85(s,3H)；MS ESI 470.3[M+H]+,[C32H27N3O+H]+之計算值470.2。
合成(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
向裝有(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(469 mg，1 mmol)的100 mL燒瓶中添加無水THF(2 mL)且所得混合物在0℃下攪拌，隨後歷經2分鐘添加KO t Bu(1 M，於THF中，18 mL，18 mmol)。添加後，所得混合物在0℃下攪拌15分鐘且添加DMSO(1.85 mL)。使氧氣鼓泡通過1小時且反應物由均質變為非均質。LC-MS顯示在50分鐘時轉化良好。其用飽和NH4Cl淬滅。
使用(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(1.41 g，3 mmol)以較大規模重複上述反應。。用飽和NH4Cl淬滅後，將兩種反應物合併，用H2O稀釋且用EtOAc(100 mL×2)萃取。藉由Biotage Isolera(含10-95% EtO Ac之己烷)純化，得到呈淡色固體狀之標題化合物(680 mg，53%。)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(s,1H),7.67(d,J=8.4 Hz,1H),7.46(s,1H),6.94(d,J=8.4 Hz,1H),6.85(d,J=8.0 Hz,1H),6.81(d,J=7.6 Hz,1H),5.78(s,1H),3.32(t,與MeOH殘餘物重疊),2.20-2.12(m,2H),1.87(s,3H)；MS ESI 290.1[M+H]+,[C18H15N3O+H]+之計算值290.1。
合成(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
向(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲
哚啉]-2-酮(680 mg，2.35 mmol)於DMF(16 mL)中的溶液中添加K2CO3(544 mg，4 mmol)，隨後添加碘(851 mg，3.2 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌3小時，冷卻至0℃，用飽和Na2S2O3淬滅，用H2O稀釋，用EtOAc(50 mL×3)萃取且脫水(Na2SO4)。蒸發溶劑且藉由Biotage Isolera(EtOAc/己烷梯度：10-90%)純化，得到呈淡黃色固體狀之標題化合物(794 mg，81%；>98% e.e.)。主要(1R,2S)對映異構體在9.6分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5 μ纖維素-2(150×4.6 mm)；含10% EtOH之正己烷等度溶離，1.75 L/min；周圍溫度；偵測：254、214 nm)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為7.7分鐘。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 ) δ 13.46(s,1H),10.51(s,1H),7.47(s,1H),7.32(d,J=8.8 Hz,1H),7.02(d,J=8.0 Hz,1H),6.81(d,J=7.6 Hz,1H),6.73(d,J=7.6 Hz,1H),5.86(s,1H),3.16(t,與痕量MeOH殘餘物重疊),2.32-2.25(m,1H),2.00-1.93(m,1H),1.85(s,3H)；MS ESI 416.0[M+H]+,[C18H14IN3O+H]+之計算值416.0。
合成(1R,2S)-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用二甲烷磺酸(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1,2-二基酯(6.70 g，15.8 mmol)及1-甲基吲哚啉-2-酮(2.33 g，15.8 mmol)以類似於(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮之方法的方式製備標題化合物。經由管柱層析法(矽膠，含25-50% EtOAc之己烷)純化，得到呈淺橙色結晶固體狀之標題化合物(5.01 g，84%)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.00(s,1H),7.60(d,J=8.3 Hz,1H),7.30-7.25(m,3H),7.18(s,1H),7.13-7.10(m,3H),6.92(d,J=8.6 Hz,1H),6.85(d,J=7.6 Hz,1H),6.55(t,J=7.0 Hz,1H),5.76(d,J=7.2 Hz,1H),5.63-5.49(m,2H),3.41(t,J=8.8 Hz,1H),3.33(s,3H),2.22-2.18(m,1H),2.00-1.96(m,1H)；MS ESI 380.2[M+H]+,[C25H21N3O+H]+之計算值380.18。
合成(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用(1R,2S)-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(1.16 g，3.06 mmol)以類似於實施例A4之手性合成方法的方式製備標題化合物。經由管柱層析法(矽膠，含3-6% MeOH之CH2Cl2)純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(656 mg，74%)；1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.06(br. s,1H),8.05(s,1H),7.64(d,1H,J=7.6 Hz),7.36(s,1H),7.14(t,J=8.7 Hz,1H),6.97(d,J=8.7 Hz,1H),6.87(d,J=8.2 Hz,1H),6.62(t,J=7.6 Hz,1H),5.91(d,J=7.9 Hz,1H),3.46(t,J=7.8 Hz,1H),3.34(s,3H),2.26-2.23(m,1H),2.08-2.04(m,1H)；MS ESI 290.1[M+H]+,[C18H15N3O+H]+之計算值290.13。
合成(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(930 mg，3.21 mmol)以類似於實施例A10之手性合成方法的方式製備標題化合物。利用EtOAc進行沈澱，隨後過濾且用EtOAc沖洗，得到標題化合物(970 mg，73%；>98% ee)，其中主要對映異構體在2.4分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5μ直鏈澱粉-2150×4.6 mm，2.5 mL/min，含20% EtOH之己烷等度溶離0.5分鐘，接著為2.5分鐘內含20-50% EtOH之己烷梯度，接著50%等度溶離1分鐘)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為3.0分鐘。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.96(br. s,1H),7.43-7.39(m,2H),7.16(t,J=7.6 Hz,1H),7.05(d,J=8.0 Hz,1H),6.89(d,J=7.8 Hz,1H),6.66(t,J=7.2 Hz,1H),5.91(d,J=8.0 Hz,1H),3.47(t,J=8.4 Hz,1H),3.35(s,3H),2.30-2.26(m,1H),2.08-2.04(m,1H)；MS ESI 416.0[M+H]+,[C18H14IN3O+H]+之計算值416.03。旋光度：[α]23 D=-210°(c 0.4,MeOH)°
合成(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用二甲烷磺酸(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1,2-二基酯(1.44 g，3.39 mmol)及5-甲氧基-1-甲基吲哚啉-2-酮(0.601 g，3.39 mmol)以類似於(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮之方法的方式製備標題化合物。使用Biotage Isolera(含1-50% EtOAc之己烷，SNAP 25g管柱)純化，得到標題化合物(淺褐色固體，1.05 g，76%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.03(s,1H),7.67(d,J=8.8 Hz,1H),7.50(s,1H),7.26-7.23(m,3H),7.11(d,J=7.6 Hz,2H),6.95(d,J=8.4 Hz,1H),6.89(d,J=8.4 Hz,1H),6.67(d,J=8.4 Hz,1H),5.63(d,J=16.4 Hz,1H),5.58(d,J=16.0 Hz,1H),5.41(s,1H),3.37(t,J=8.8 Hz,1H),3.15(s,3H),2.23-2.19(m,1H),2.18-2.14(m,1H),-OCH3質子被甲醇峰遮蔽。MS ESI 410.2[M+H]+,[C26H23N3O2+H]]+之計算值410.2。
合成(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在0℃下將第三丁醇鉀溶液(1 M，19.23 mL，0.19 mol)添加至(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(0.875 g，2.1 mmol)於無水THF(2.62 mL)中的溶液中且混合物在相同溫度下攪拌15分鐘。接著在0℃下經由注射器向混合物中添加無水DMSO(1.97 mL，27 mmol)且連續攪拌5分鐘。反應混合物在0℃下用O2氣體淨化1.5小時。在0℃下再攪拌15分鐘後，反應混合物用25% NH4Cl水溶液(20 mL)淬滅。使用EtOAc(40 mL×2)萃取產物，且合併的EtOAc層用水(10 mL)洗滌且脫水(Na2SO4)，且在真空下在40℃/125毫巴下濃縮。所得淺黃色殘餘物藉由矽膠管柱層析使用含5-10% EtOAc之己烷純化，得到呈灰白色固體狀之標題化合物(445 mg，65%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(s,1H),7.67(d,J=8.4 Hz,1H),7.47(s,1H),6.95-6.90(m,2H),6.68(d,J=8.8 Hz,1H),5.58(s,1H),3.38(t,J=8.4 Hz,1H),3.20(s,3H),2.28(dd,J=9.2,4.4 Hz,1H),2.06(dd,J=8.4,4.8 Hz,1H),-OCH3質子與甲醇峰合併。MS ESI 320.1[M+H]+,[C19H17N3O2+H]+之計算值320.2。
合成(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(1.34 g，4.19 mmol)以類似於實施例A10之手性合成方法的方式獲得呈乳白色固體狀之標題化合物(1.71 g，91%；98% ee)，其中主要(1R,2S)對映異構體在2.6分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5μ直鏈澱粉-2150×4.6 mm，2.5 mL/min，含20% EtOH之己烷等度溶離0.5分鐘，接著為2.5分鐘內含20-50% EtOH之己烷梯度，接著50%等度溶離1分鐘)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為3.25分鐘。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.38(s,1H),7.42(d,J=8.4 Hz,1H),7.35(s,1H),7.04(d,J=8.8 Hz,1H),6.77(d,J=8.4 Hz,1H),6.66(d,J=8.4 Hz,1H),5.53(s,1H),3.46(t,J=8.0 Hz,1H),3.38(s,3H),3.32(s,3H),2.24(dd,J=8.4,4.8 Hz,1H),2.04(dd,J=12.4,4.8 Hz,1H)；MS ESI 446.1[M+H]+,[C19H16IN3O2+H]+之計算值446.0。旋光度：[α]22 D=-134°(c 0.238,MeOH)。
合成(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用二甲烷磺酸(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1,2-二基酯(1.22 g，2.87 mmol)及1-(2-甲氧基乙基)吲哚啉-2-酮(550.0 mg，2.87 mmol)以類似於(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮之方法的方式製備標題化合物。利用Biotage Isolera(含0-60% EtOAc之己烷，SNAP 25g管柱)純化，得到呈淺褐色固體狀之標題化合物(774 mg，64%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.01(s,1H),7.60(d,J=8.0 Hz,1H),7.29-7.27(m,3H),7.19(s,1H),7.14-7.09(m,3H),6.98(d,J=7.6 Hz,1H),6.92(d,J=8.4 Hz,1H),6.54(t,J=7.2 Hz,1H),5.75(d,J=7.6 Hz,1H),5.60(t,J=16.0 Hz,1H),5.51(d,J=16.0 Hz,1H),4.08-4.03(m,1H),4.00-3.95(m,1H),3.69(t,J=5.6 Hz,2H),3.43(t,J=8.0 Hz,1H),3.38(s,3H),2.24(dd,J=9.2,4.8 Hz,1H),2.00(dd,J=8.4,5.6 Hz,1H)；MS ESI 424.2[M+H]+,[C27H25N3O2+H]+之計算值424.2。
合成(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在0℃下將KO t Bu溶液(1 M，11.97 mL，11.9 mmol)添加至(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(390 mg，0.92 mmol)於無水THF(1.95 mL)中的溶液中且混合物在相同溫度下攪拌15分鐘。接著在0℃下經由注射器向混合物中以一批添加無水DMSO(1.18 mL，16.6 mmol)且連續攪拌5分鐘。接著，反應混合物在0℃下用O2氣體淨化1.5小時。在0℃下再攪拌15分鐘後，反應混合物用25% NH4Cl水溶液(10 mL)淬滅。使用EtOAc(20 mL×2)萃取產物，且合併的EtOAc層用水(10 mL)洗滌且經硫酸鈉脫水，且在真空下在40℃/125毫巴下濃縮。所得淺黃色殘餘物藉由急驟層析法利用Biotage Isolera(使用含5-10% EtOAc之己烷，SNAP 25g管柱)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(205 mg，67%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.08(s,1H),7.65(d,J=8.4 Hz,1H),7.42(s,1H),7.12(t,J=7.6 Hz,1H),7.00(t,J=8.0 Hz,2H),6.60(t,J=7.6 Hz,1H),5.90(d,J=7.2 Hz,1H),4.10-3.97(m,2H),3.70(t,J=5.6 Hz,2H),3.47(t,J=8.4 Hz,1H),3.38(s,3H),2.29(dd,J=8.8,4.4 Hz,1H),2.08(dd,J=6.8,4.4 Hz,1H)；MS ESI 334.2[M+H]+,[C20H19N3O2+H]+之計算值334.2。
合成(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(260 mg，0.779 mmol)以類似於實施例A10之手性合成方法的方式製備標題化合物。在Biotage Isolera上利用SNAP 25g管柱使用含0-30% EtOAc之己烷純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(235 mg，66%；98% ee)，其中主要(1R,2S)對映異構體在2.6分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5 μ直鏈澱粉-2150×4.6 mm，2.5 mL/min，含20% EtOH之己烷等度溶離0.5分鐘，接著為2.5分鐘內含20-50% EtOH之己烷梯度，接著50%等度溶離1分鐘)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為3.2分鐘。1H NMR(400 MHz,CDCl3) δ 10.39(s,1H),7.40(d,J=8.8 Hz,1H),7.34(s,1H),7.14(t,J=7.6 Hz,1H),7.06-7.01(m,2H),6.63(t,J=7.2 Hz,1H),5.87(d,J=7.6 Hz,1H),4.14-3.97(bm,2H),3.70(t,J=5.6 Hz,2H),3.46(t,J=7.6 Hz,1H),3.39(s,3H),2.28-2.26(m,1H),2.05-2.01(m,1H)；MS ESI 460.1[M+H]+,[C20H18IN3O2+H]+之計算值460.0。旋光度：[α]22 D=-239°(c 0.243,MeOH)。
製備本發明之化合物
實施例A1.(1R*,2S*)-2-(1H-吲唑-5-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在0℃下向碘化三甲基氧化鋶(33 mg，0.15 mmol)於無水DMF(1 mL)中的溶液中添加氫化鈉(60%油分散液)(16 mg，0.4 mmol)。攪拌混合物15分鐘，隨後添加(E)-3-((1H-吲唑-5-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮(26 mg，0.1 mmol)。在室溫下攪拌溶液隔夜。反應物用飽和NH4Cl溶液(2 mL)淬滅，用EtOAc(50 mL)萃取，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。藉由製備型HPLC分離得到呈白色固體狀之標題化合物(5 mg，18%)。1H NMR(400 MHz,d6-DMSO)δ13.03(s,1H),10.58(d,1H,J=8.3 Hz),8.02(s,1H),7.74(s,1H),7.40(d,1H,J=8.9 Hz),7.11(d,1H,J=8.6 Hz),6.98(t,1H,J=7.7 Hz),6.83(d,1H,J=7.6 Hz),6.50(t,1H,J=7.3 Hz),5.94(d,1H,7.5 Hz),3.17-3.13(m,1H),2.27-2.23(m,1H),1.98-1.95(m,1H)；MS ESI 276.1[M+H]+,[C17H13N3O+H]+之計算值276.3。
實施例A2.(1R*,2S*)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在0℃下向碘化三甲基氧化鋶(264 mg，1.2 mmol)於無水DMF(40 mL)中的溶液中添加氫化鈉(60%油分散液)(140 mg，3.48 mmol)。攪拌混合物16分鐘，隨後添加(E)-3-((1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮(151 mg，0.58 mmol)。在室溫下攪拌溶液隔夜。反應物用飽和NH4Cl溶液(10 mL)淬滅，用EtOAc(4×50 mL)萃取，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。藉由矽膠層析法(EtOAc/Hex 1:1)分離得到呈米色固體狀之主要非對映異構體(44 mg，28%)。1H NMR(400 MHz,d6-DMSO)δ13.01(s,1H),10.61(d,1HJ=8.3 Hz),8.01(s,1H),7.63(d,1H,J=8.3 Hz),7.44(s,1H),6.99(t,1H,J=7.5 Hz),6.92(d,1H,J=8.0 Hz),6.84(d,1H,J=8.0 Hz),6.51(t,1H,J=7.0 Hz),5.98(d,1H,8.0 Hz),3.20-3.17(m,1H),2.30-2.26(m,1H),2.00-1.95(m,1H)；MS ESI 276.1[M+H]+,[C17H13N30+H]+之計算值276.3。
實施例A3.(1S,2R)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
使用手性HPLC：Chiralpak 1A(3×15 cm)(30%甲醇(0.1%DEA)/CO2，70 mL/min)分離外消旋(1R*,2S*)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮，得到白色固體(11.8 mg)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15×0.46 cm)(40%甲醇(0.1% DEA)/C02，3 mL/min)，98% e.e.，Rt=2.7分鐘。
實施例A4.(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
HPLC解析：使用手性HPLC：Chiralpak 1A(3×15 cm)(30%甲醇(0.1% DEA) /CO2，70 mL/min)分離外消旋(1R*,2S*)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮，得到白色固體(11.5 mg)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15×0.46 cm)(40%甲醇(0.1% DEA) /CO2，3 mL/min)，97% e.e.，Rt=5.2分鐘。
手性合成：(1R,2S)-2-(N1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[N-苄基-環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(6.5 g，至多14 mmol；含有一些溶劑)於DMSO(20 mL，286 mmol)與THF(200 mL)之混合物中的溶液於冰中冷卻，隨後添加KO t Bu(10.0 g，89 mmol)。混合物即刻變成深色。混合物用來自氣球之氧氣輕緩淨化，緩慢升溫至室溫。5小時後樣品之NMR顯示約30%轉化，且因此將混合物置於氧氣球下(不淨化)攪拌隔夜。未發生進一步轉化，且因此再添加KO t Bu(20.0 g，178 mmol)。顯然，氧氣即刻被吸收，說明有效脫除保護基需要此大量過量的鹼。再過5小時後，將混合物傾注至飽和NH4Cl水溶液(100 mL)中。在減壓下移除大部分THF，且所得混合物用多份EtOAc(4×50 mL)萃取。合併的有機部分用飽和硫代硫酸鈉水溶液(50 mL)及鹽水(50 mL)洗滌，經Na2SO4脫水，過濾且濃縮。殘餘物於CH2Cl2(100 mL)中製成漿液且在抽吸下傾注於短二氧化矽墊(2 cm深度×5 cm直徑)上。使用CH2Cl2(約1 L)溶離出主要副產物(1:1 EtOAc/環己烷中Rf 0.6，CH2Cl2中Rf 0.15)。相繼使用2%及5% MeOH/EtOAc溶離出產物(1:1 EtOAc/環己烷中Rf 0.25)。雜質隨產物共溶離，因為後者『拖影』嚴重。濃縮含有產物的溶離份，得到呈淺褐色固體狀之標題化合物(2.5 g，64%)，其污染有第二含環丙烷化合物(<10%；可能為單苄基化化合物)。HPLC指示光學純度為94% e.e.(但是懷疑存在共溶離雜質)，其中主要(1R,2S)對映異構體在14.3分鐘時溶離(Daicel Chiralpak AS-H(250×4.6 mm)；含40% EtOH之正庚烷等度溶離；1 mL/min；35℃；偵測：254、230、210 nm)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為9.9分鐘。分析資料與實施例A2中所獲得之資料相同。
實施例A5. (1R*,2R*)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
自實施例A2之反應物分離得到呈米色固體狀之次要非對映異構體(3.5 mg，2%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ12.97(s,1H),10.33(d,1HJ=8.3 Hz),7.99(s,1H),7.59(d,1H,J=8.2 Hz),7.41(s,1H),7.18-7.12(m,2H),6.99-6.94(m,2H),6.86(d,1H,J=7.8 Hz),3.32(t,1H,J=8.3 Hz),2.27-2.23(m,1H),2.18-2.15(m,1H)；MS ESI 276.1[M+H]+,[C17H13N3O+H]+之計算值276.3。
實施例A6. (1R*,2S*)-及(1R*,2R*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺-[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在0℃下，向NaH(380 mg，9.5 mmol)於DMF(8 mL)中的溶液中添加碘化三甲基氧化鋶(694 mg，3.15 mmol)。所得混合物在室溫下攪拌30分鐘，隨後添加含(E/Z)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(658 mg，1.6 mmol，E/Z比率84:16)之DMF(2 mL)。反應混合物在室溫下攪拌18小時。反應物冷卻至0℃且用飽和NH4Cl淬滅。混合物用EtOAc萃取且合併的有機萃取物用鹽水洗滌，經MgSO4脫水且濃縮，得到黃色黏性油狀物。粗產物藉由矽膠層析法(95:5 CH2Cl2/MeOH)純化，得到黃色固體，接著用己烷與EtOAc之1:1混合物濕磨，得到呈白色粉末狀之標題化合物(471 mg，69%)。獲得非對映異構體之混合物(7:1，依據NMR)。在重複操作中，非對映異構體之比率為6:1至10:1(有利於1R*,2S*非對映異構體)不等。該物質不進一步純化即作為中間物用於後續反應。或者，使該物質自甲醇中再結晶，得到呈12:1混合物(有利於1R*,2S*非對映異構體)形式之標題化合物。主要異構體之分析資料：1H NMR(400 MHz,d6-DMSO)δ13.48(s,1H),10.43(s,1H),7.49(s,1H),7.33(d,J=8.4 Hz,1H),7.02(d,J=8.4 Hz,1H),6.74(d,J=8.4 Hz,1H),6.57(dd,J=8.4 Hz,J=2.4 Hz,1H),5.62(d,J=2.4 Hz,1H),3.29(s,3H),3.18(t,J=8.2 Hz,1H),2.34(dd,J=7.8 Hz,J=4.6 Hz,1H),1.98(dd,J=9.2 Hz,J=4.8 Hz,1H)；MS ESI 432.1[M+H]+,[C18H14IN3O2+H]+之計算值432.0。
實施例A7.(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
HPLC解析：外消旋(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-酮(15 g，於實施例A6中製備)使用手性HPLC：Chiralcel OJ-H(3×15 cm)(30%甲醇(0.1%DEA) /CO2，75 mL/min)分離，得到白色固體(6.75 g)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15×0.46 cm)(40%異丙醇(0.1% DEA) /CO2，3 mL/min)，99% e.e.，Rt=2.1分鐘。
手性合成：A.　(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮使用二甲烷磺酸(S)-1-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)乙烷-1,2-二基酯(3.35 g，7.90 mmol)及1-苄基-5-甲氧基吲哚啉-2-酮(2.00 g，7.90 mmol)以類似於(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮之方法的方式製備標題化合物。粗產物藉由矽膠層析法(含15-40%EtOAc之己烷)純化，隨後濕磨(EtOAc)，得到呈白色固體狀之標題化合物(1.97 g，52%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ8.01(s,1H),7.64(d,J=8.2 Hz,1H),7.36-7.23(m,10H),7.14(d,J=7.2 Hz,2H),6.94(d,J=8.3 Hz,1H),6.63(d,J=8.3 Hz,1H),6.53(d,J=8.4 Hz,1H),5.61(d,J=15.1 Hz,1H),5.54(d,J=15.4 Hz,1H),5.37(s,1H),5.07(d,J=15.4 Hz,1H),4.95(d,J=15.7 Hz,1H),3.51(t,J=8.1 Hz,1H),3.18(s,3H),2.32-2.29(m,1H),2.09-2.00(m,1H)。MS ESI 486.3[M+H]+,[C32H27N3O2+H]+之計算值486.2。
B.　(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮使用(1R,2S)-1'-苄基-2-(1-苄基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(1.0 g，2.1 mmol)以類似於實施例A4之手性合成方法的方式製備標題化合物。經由管柱層析法(矽膠，含30-80% EtOAc之己烷)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(0.50 g，80%)。1H NMR(400MHz,DMSO-d 6 ) δ 13.02(br s,1H),10.42(br s,1H),8.02(s,1H),7.64(d,J=8.3 Hz,1H),7.45(s,1H),6.94(d,J=7.8 Hz,1H),6.73(d,J=8.2 Hz,1H),6.55(d,J=8.6 Hz,1H),5.62(s,1H),3.20(s,3H),3.18(t,J=8.7 Hz,1H),2.34-2.28(m,1H),1.98-1.95(m 1H)。MS ESI 306.1[M+H]+,[C18H15N3O2+H]+之計算值306.12。旋光度：[α]23 D=-225°(c 0.441,MeOH)。
C.(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮使用(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(0.40 g，1.3 mmol)以類似於實施例A10之手性合成方法的方式製備標題化合物。粗產物用EtOAc(5 mL)濕磨，得到呈白色固體狀之標題化合物(0.52 g，93%，>98% e.e.)，其中主要(1R,2S)對映異構體在8.5分鐘時溶離(Phenomenex Lux 5 μ,纖維素-2(150×4.6 mm)；1.0 mL/min；含10% iPrOH之正己烷等度溶離1.0分鐘，接著為10分鐘內含10-90% iPrOH之正己烷梯度，接著用含90%iPrOH之正己烷等度溶離2.0分鐘；1.0 mL/min；24℃；偵測：254 nm)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為6.2分鐘。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 ) δ 13.48(br s,1H),10.43(br s,1H),7.49(s,1H),7.31(d,J=8.6 Hz,1H),7.02(d,J=8.1 Hz,1H),6.73(d,J=8.4 Hz,1H),6.57(d,J=8.6 Hz,1H),5.62(s,1H),3.29(s,3H),3.19(t,J=8.4 Hz,1H),2.36-2.32(m,1H),1.99-1.96(m 1H)。MS ESI 432.1[M+H]+,[C18H14IN3O2+H]+之計算值432.0。旋光度：[α]22 D=-143°(c 0.399,MeOH)。
實施例A8.(1S,2R)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
外消旋(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-酮(15 g，於實施例A6中製備)使用手性HPLC：Chiralcel OJ-H(3×15 cm)(30%甲醇(0.1% DEA)/CO2，75 mL/min)分離，得到白色固體(6.6 g)。
分析型HPLC：Chiralpak 1A(15×0.46 cm)(40%異丙醇(0.1% DEA)/C02，3 mL/min)，99% e.e.，Rt=3.4分鐘。
實施例A9.(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
A.(1R*,2S*)-與(1R*,2R*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮化合物不經進一步純化即作為中間物使用，或以下列程序獲得純非對映異構體。在室溫下向無水DMF(2.5 mL)中添加氫化鈉(309.9 mg，7.75 mmol)(60%油分散液)。接著在相同溫度下向懸浮液中添加碘化三甲基氧化鋶(568.4 mg，2.58 mmol)。攪拌混合物15分鐘，隨後添加(E/Z)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-吲哚啉-2-酮(500 mg，1.29 mmol)於DMF(2.0 ml)中的溶液。溶液在55℃下攪拌5小時，隨後在室溫下歷時15分鐘用甲醇溶液(1 mL)淬滅反應，隨後添加水(50 mL)。產物用乙酸乙酯(2×50 mL)萃取，經無水Na2SO4脫水且濃縮至乾燥。固體懸浮於甲苯(21 mL)中且收集，得到標題化合物(331 mg，64%)，其為有利於R*,S*非對映異構體的9:1混合物。此白色固體不經進一步純化即作為中間物用於後續反應。1H NMR(400 MHz,d6-DMSO)δ13.47(s,0.9H),13.41(s,0.1H),10.62(s,0.9H),10.35(s,0.1H),7.47(s,0.9H),7.43(s,0.1H),7.30(d,J=8.0 Hz,0.9H),7.26(d,J=8.0 Hz,0.1H),7.23(m,0.1H),7.15(m,0.3H),7.05-6.98(m,2H),6.85(m,1H),6.53(t,J=7.6 Hz,0.9H),5.97(d,J=7.6 Hz,0.9H),3.33(m,0.1H,部分被水信號遮蔽),3.18(t,J=8.4 Hz,0.9H),2.31(dd,J=7.2,4.8 Hz,0.9H),2.26(m 0.1H),2.16(dd,J=8.8,4.0 Hz,0.1H),1.98(dd,J=8.8,4.8 Hz,0.9H)。
B.　(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮以上獲得的非對映異構體混合物(100 mg)在55℃下用THF(1 mL)處理15分鐘，接著冷卻至室溫維持30分鐘。藉由過濾收集灰白色固體，得到標題化合物(32 mg，32%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ13.47(s,1H),10.62(s,1H),7.47(s,1H),7.30(d,J=8.0 Hz,1H),7.02-6.98(m,2H),6.84(d,J=7.6 Hz,1H),6.53(t,J=7.6 Hz,1H),5.97(d,J=7.6 Hz,1H),3.18(t,J=8.4 Hz,1H),2.31(dd,J=7.2 Hz,J=4.8 Hz,1H),1.98(dd,J=8.8 Hz,J=4.8 Hz,1H)；MS ESI 402.0[M+H]+,[C17H12IN3O+H]+之計算值402.0。
實施例A10.(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
HPLC解析：外消旋(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(35 mg，於實施例A9中製備)使用手性HPLC：Lux纖維素AXIA(150×21.2 mm)(梯度：10%異丙醇/己烷至90%異丙醇/己烷，20 mL/min)分離，得到白色固體(8.8 mg)。
分析型HPLC：Lux纖維素AXIA(150×4.6 mm)(梯度：10%異丙醇/己烷至90%異丙醇/己烷，1 mL/min)，98%e.e.，Rt=7.8分鐘。
手性合成：(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(2.20 g，8.0 mmol，約94% ee)及K2CO3(2.21 g，16.0 mmol)於無水DMF(20 mL)中的混合物用I2(3.45 g，13.6 mmol)於無水DMF(15 mL)中的溶液處理(後者歷經45分鐘用注射器添加)。攪拌混合物1.5小時，接著傾注至水(400 mL)與飽和Na2S2O3水溶液之混合物中。所得混合物於超音波浴中濕磨30分鐘以使黏性固體塊碎裂，接著過濾。固體用水(2×50 mL)洗滌，在抽吸下部分乾燥，接著用丙酮洗提兩次以移除殘餘水。粗混合物之HPLC指示光學純度為95% e.e.，其中主要(1R,2S)對映異構體在14.1分鐘時溶離(Daicel Chiralpak AS-H(250×4.6 mm)；含40% EtOH之正庚烷等度溶離；1 mL/min；35℃；偵測：254、230、210 nm)。根據外消旋參考標準物，使用此方法時(1S,2R)對映異構體之滯留時間為8.4分鐘，且在6.0分鐘及6.9分鐘時亦偵測到次要非對映異構體產物之兩種對映異構體。藉由再用EtOAc溶離使產物之EtOAc溶液通過短二氧化矽墊(2 cm深度×4 cm直徑)來移除基線物質。接著藉由濕磨嘗試進一步純化。Et2O及甲苯移除一些雜質，但未觀察到光學純度增加。自THF/環己烷及EtOAc/環己烷中再結晶亦未成功，且因此藉由二氧化矽管柱層析(20 cm深度×4 cm直徑)使用1:1 EtOAc/環己烷純化物質，得到呈灰白色粉末狀之標題化合物(1.47 g，46%)。分析資料與實施例A9中所獲得之資料相同。
實施例A11.(1R,2S)-2-(1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
外消旋(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(35 mg，於實施例A9中製備)使用手性HPLC：Lux纖維素AXIA(150×21.2 mm)(梯度：10%異丙醇/己烷至90%異丙醇/己烷，20 mL/min)分離，得到白色固體(7.7 mg)。
分析型HPLC：Lux纖維素AXIA(150×4.6 mm)(梯度：10%異丙醇/己烷至90%異丙醇/己烷，1 mL/min)，98% e.e.，Rt=6.7分鐘。
實施例A23.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. (E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基矽烷基)乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮使用N,N-二甲基-1-(4-乙烯基苯基)甲胺(80 mg，0.15 mmol)根據WO2010/115279方法1A實施例A22之方法合成標題化合物。標題化合物藉由矽膠層析法(3:1 CH2Cl2/MeOH)分離，得到呈米色固體狀之標題化合物(38 mg，45%)。MS ESI 565.4[M+H]+,[C34H40N402Si+H]+之計算值565.7。
B.(1R*,2S*)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽使用(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1-((2-(三甲基矽烷基)-乙氧基)甲基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(38 mg，0.052 mmol)根據WO2010/115279方法1B實施例A22之方法合成標題化合物。粗反應混合物在減壓下濃縮至乾燥，且藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈白色固體狀且呈TFA鹽形式之標題化合物(11 mg，31%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δppm 8.02(d,J=8.3 Hz,1H),7.78(d,2H,J=8.3 Hz),7.56-7.48(m,5H),7.08-7.04(m,2H),6.94(d,1H,J=8.3 Hz),6.59(t,1H,J=7.8 Hz),6.00(d,1H,J=8.0 Hz),4.38(s,2H)3.39-3.33(m,1H),2.90(s,6H),2.28-2.22(m,1H),2.22-2.17(m,1H)；MS ESI 435.2[M+H]+,[C28H26N4O+H]+之計算值435.5。
實施例A24.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(20 mg，0.05 mmol)於DMF(0.4 mL)及水(0.1mL)中的溶液中添加(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(25 mg，0.08 mmol)、氟化鉀(6 mg，0.1 mmol)及Pd(PPh3)4(3 mg，0.002 mmol)。混合物在微波照射下加熱至120℃維持2小時。添加乙酸乙酯(50 mL)且溶液用水(2×5 mL)、鹽水(5 mL)洗滌且經MgSO4脫水。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(12 mg，44%)。
實施例A25. (1S,2R)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1S,2R)-2-(3-碘-1H-吲唑-螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(20 mg，0.05 mmol)於DMF(0.4 mL)及水(0.1 mL)中的溶液中添加(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(25 mg，0.08 mmol)、氟化鉀(6 mg，0.1 mmol)及Pd(PPh3)4(3 mg，0.002 mmol)。混合物在微波照射下加熱至120℃維持2小時。添加乙酸乙酯(50 mL)且溶液用水(2×5 mL)、鹽水(5 mL)洗滌且經MgSO4脫水。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(4 mg，15%)。
實施例A26.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
在實施例A23(獲得淺黃色固體，63 mg)之較大規模製備期間，藉由逆相製備型HPLC獲得呈白色固體狀之相應次要非對映異構體，亦即標題化合物(4.6 mg)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ ppm 8.00(d,1H,J=8.0 Hz),7.77(d,2H,J=8.4 Hz),7.56-7.50(m,5H),7.23(t,1H,J=7.6 Hz),7.16-7.05(m,3H),6.96(d,1H,J=7.6 Hz),4.33(s,2H)3.44-3.38(m,1H),2.88(s,6H),2.43-2.40(m,1H),2.25-2.23(m,1H)；MS ESI 435.2[M+H]+,[C28H26N4O+H]+之計算值435.5。
實施例A34.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
A.向NaH(60%，85.2 mg，2.1 mmol)與碘化三甲基氧化鋶(131.5 mg，0.60 mmol)之混合物中添加DMF(3 mL)。所得混合物在室溫下攪拌10分鐘，隨後添加(E)-3-((3-(4-((二甲基胺基)甲基)-苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮2,2,2-三氟乙酸鹽(163 mg，0.29 mmol)於DMF(6 mL，分數份以便轉移及小瓶沖洗)中的溶液。在室溫下攪拌24小時後，反應混合物未完成反應。混合物在55℃下加熱1小時，但仍未完成反應。冷卻至室溫後，添加NaH(60%，44 mg，1.1 mmol)及碘化三甲基氧化鋶(69.5 mg，0.31 mmol)且混合物在55℃下加熱1小時，隨後藉由添加水(25 mL)及鹽水(25 mL)來淬滅。混合物用EtOAc(300 mL)萃取且有機層用鹽水(2×25 mL)洗滌，經Na2SO4脫水且在真空中濃縮。粗產物藉由矽膠層析法(含5-7.5% 2 M NH3-MeOH之DCM)純化粗產物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(42.8 mg，32%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δppm 13.11(s,1H),10.43(s,1H),8.07(d,J=8.8Hz,1H),7.64(d,J=7.6Hz,2H),7.47(m,3H),7.29(d,J=8.0Hz,2H),7.03(d,J=8.8Hz,1H),6.74(d,J=8.4Hz,1H),6.57(dd,J=8.4,2.4Hz,1H),5.65(d,J=2.4Hz,1H),3.38(s,2H),3.28(s,3H),3.20(t,J=7.6Hz,1H),2.34(m,1H),2.14(s,6H),1.99(m,1H)；MSE SI[M+H]+ 465.2,[C29H28N4O2+H]+之計算值465.2。
B.較大規模，TFA鹽：NaH(60%，491 mg，12.29 mmol)分3份添加至碘化三甲基氧化鋶(959.3 mg，4.36 mmol)於DMF(12 mL)中之冰冷混合物中。所得混合物在0℃下攪拌10分鐘，隨後添加(E)-3-((3-(4-((二甲基胺基)甲基)-苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-5-甲氧基吲哚啉-2-酮鹽酸鹽(984.4 mg，2.02 mmol)於DMF(12 mL，分數份以便轉移及小瓶淨化)中的懸浮液。反應混合物經10分鐘溫熱至室溫，接著在55℃下加熱17小時，隨後藉由添加水(25 mL)及鹽水(25 mL)來淬滅。混合物相繼用約1:1 Et2O/DCM(250 mL，注意為乳液)及DCM(2×50 mL)萃取，且有機層用鹽水(25 mL)洗滌，經Na2SO4脫水且在真空中濃縮，且藉由矽膠層析法(含2-8% 2 M NH3-MeOH之DCM)純化。藉由製備型HPLC進一步純化，得到呈TFA鹽形式之主要非對映異構體(黃色固體，168.4 mg，18%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δppm 8.04(d,J=8.8 Hz,1 H),7.78(d,J=7.5 Hz,2 H),7.37-7.65(m,5 H),7.07(d,J=8.5 Hz,1 H),6.84(d,J=8.5 Hz,1 H),6.62(d,J=8.3 Hz,1 H),5.59(br. s.,1 H),4.33(s,2 H),3.37(m,1 H),3.27(s,3 H),2.89(s,6 H),2.26(m,1 H),2.19(m,1 H)；MS ESI[M+H]+ 465.3,[C29H28N4O2+H]+之計算值465.2。
實施例A35.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮鹽酸鹽
使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(251.3 mg，0.58 mmol)與(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(191.5 mg，0.67 mmol)以類似於實施例A51B的方式製備標題化合物。利用Varian 3 mL ChemElut濾芯使用EtOAc(40 mL)萃取產物。在真空中移除溶劑後，標題化合物藉由利用Biotage進行層析(二氧化矽，SNAP-25g，含5-20% MeOH之DCM)來純化。用1:1 Et2O/DCM濕磨，得到標題化合物(92.1 mg，34%)。HCl(1 M，於Et2O中，0.25 mL，0.25 mmol)以逐滴方式添加至游離鹼(92 mg，0.20 mmol)於THF(10 mL)中之冰冷溶液中，且所得混合物於冰中攪拌40分鐘，接著向混合物中添加Et2O(10 mL)。在真空下過濾，得到呈鹽酸鹽形式之標題化合物(橙紅色固體，79 mg，79%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δppm 8.05(d,J=8.5 Hz,1 H),7.77(d,J=8.0 Hz,2 H),7.48-7.63(m,5 H),7.09(d,J=8.3 Hz,1 H),6.84(d,J=8.5 Hz,1 H),6.61(dd,J=8.3,2.3 Hz,1H),5.61(d,J=2.3 Hz,1 H),4.36(s,2 H),3.35(m,1 H),3.28(s,3 H),2.89(s,6 H),2.26(dd,J=7.7,5.1 Hz,1H),2.18(dd,J=8.8,4.8 Hz,1H)；MS ESI[M+H]+ 465.3,[C29H28N4O2+H]+之計算值465.2。旋光度：[α]24 D=-70°(c 0.445,MeOH)。
實施例A36.(1S,2R)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用(1S,2R)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(40 mg，0.092 mmol)與(E)-N,N-二甲基-1(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)甲胺(33.3 mg，0.115 mmol)根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(22 mg，39%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.4 Hz,1H),7.75(d,J=7.6 Hz,2H),7.54-7.49(m,5H),7.04(d,J=8.4 Hz,1H),6.83(d,J=8.4 Hz,1H),6.60(d,J=8.4 Hz,1H),5.58(s,1H),4.33(s,2H),3.37(t,J=8.4 Hz,1H),3.26(s,3H),2.88(s,6H),2.25-2.23(m,1H),2.20-2.21(m,1H)；MS ESI 465.3[M+H]+,[C29H28N4O2+H]+之計算值465.2。旋光度：[α]23 D=85°(c 0.542,甲醇)。
實施例A40.(1R*,2S*)-5'-氟-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
在室溫下，將碘化三甲基氧化鋶(173.8 mg，0.789 mmol)添加至氫化鈉(94.76 mg，4.12 mmol)(60%油分散液)於THF(4.0 mL)中的懸浮液中。攪拌混合物15分鐘，隨後添加(Z)-5-氟-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮(160 mg，0.394 mmol)於THF(2.4 mL)中的溶液。溶液在50℃下攪拌7小時，隨後在室溫下用10% NH4Cl溶液(15 mL)淬滅反應物質。產物使用乙酸乙酯(15 mL×2)萃取且有機層經Na2SO4脫水且在真空中蒸發。用己烷(5 mL)濕磨，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(89 mg，54%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 ) δ 13.50(s,1H),10.65(s,1H),7.50(s,1H),7.31(d,1H,J=8.4 Hz),7.00(d,1H,J=8.4 Hz),6.85-6.81(m,2H),5.81(d,1H,J=8.4 Hz),3.22(m,1H),2.43(m,1H),2.01(m,1H)；MS ESI 420.0[M+H]+,[C17H11FIN3O+H]+之計算值420.0。
實施例A41.(1R*,2S*)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據WO2010/115279之實施例A45之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(30 mg,0.070 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(30 mg，0.091 mmol)。藉由管柱層析法(矽膠，CH2Cl2/MeOH，95：5至94：6)純化，得到粗物質，根據LC-MS，其為85%純。此物質藉由prep-HPLC進一步純化，得到白色固體(18 mg，51%)；光譜資料與實施例A42B中所獲得之資料相同。
實施例A42.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮鹽酸鹽
A. (E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉
烘乾的圓底燒瓶在N2(氣體)下冷卻，接著裝入4-(4-乙炔基苄基)嗎啉(120 mg，0.596 mmol)、甲苯(2.5 mL)及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.43 mL，2.98 mmol)。攪拌混合物15分鐘，同時用N2(氣體)淨化溶液。接著添加HRuCl(CO)(PPh3)3(29 mg，0.030 mmol)，且反應物加熱至50℃維持18小時。反應物用NaHCO3(飽和)(10 mL)淬滅，用EtOAc萃取，且有機層用鹽水(2次)洗滌，接著經MgSO4脫水。移除溶劑且所得殘餘物藉由管柱層析法(矽膠，己烷/EtOAc，2:3至1:2)純化，得到白色固體(155 mg，79%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.44(d,2H,J=8.0 Hz),7.38(d,1H,J=18.8 Hz),7.30(m,2H),6.15(d,1H,J=18.5 Hz),3.72(bs,4H),3.49(bs,2H),2.45(bs,4H),1.31(s,12H)；MS ESI 330.1[M+H]+,[C19H28BNO3+H]+之計算值330.22。
B.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮鹽酸鹽
向圓底燒瓶中裝入(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(255 mg，0.592 mmol)、(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(260 mg，0.710 mmol)、LiCl(75 mg，1.78 mmol)、二烷(6.0 mL)及Na2CO3(3.0 mL之1 M水溶液)。混合物用氬(氣體)氣球淨化15分鐘，接著添加Pd(PPh3)4(21 mg，0.0178 mmol)且反應物加熱至100℃維持18小時。冷卻反應物，添加EtOAc及NaHCO3(飽和)，且將混合物轉移至分液漏斗中。有機層用NaHCO3(飽和)、鹽水洗滌，接著經MgSO4脫水。移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(矽膠，CH2Cl2/MeOH 9:1)純化，得到固體，在Et2O下音波處理且過濾，得到183 mg 61%白色固體。藉由將游離鹼(183 mg，0.361 mmol)溶解於THF(2 mL)中來製備HCl鹽，接著添加HCl(0.72 mL之1 M Et2O溶液)。即刻形成沈澱物，利用Et2O(10 mL)進一步沈澱。快速過濾固體且用Et2O洗滌，乾燥之後得到灰白色固體(153 mg，78%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.04(d,1H,J=8.4 Hz),7.78(d,2H,J=8.2 Hz),7.57-7.50(m,5H),7.07(d,1H,J=8.6 Hz),6.83(d,1H,J=8.5 Hz),6.61(dd,1H,J1=8.5 Hz,J2=2.2 Hz),5.58(d,1H,J=2.2 Hz),4.39(s,2H),4.09-4.04(m,2H),3.78-3.72(m,2H),3.43-3.33(m,3H),3.27-3.20(m,5H),2.27-2.23(m,1H),2.21-2.16(m,1H)；MS ESI 507.3[M+H]+,[C31H30N4O3+H]+之計算值507.24。
實施例A51.合成(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯乙基)嗎啉向20 mL微波小瓶中之4-(4-溴苯乙基)嗎啉(731 mg，2.71 mmol)與4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)與甲苯(10 mL)之混合物中添加Et3N(0.76 mL，5.4 mmol，2當量)，隨後添加Pd(P t Bu3)2(14 mg，0.027 mmol，1 mol%)。所得混合物用氬氣淨化，接著封蓋且在80℃(油溫)下加熱2小時。冷卻至室溫後，其用飽和NaHCO3(10 mL)、H2O(10 mL)淬滅，用EtOAc(30 mL×2)萃取且脫水(Na2SO4)。溶劑蒸發後，殘餘物藉由Biotage管柱系統(EtOAc/hex梯度：0-100%)純化，得到呈白色固體狀之(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯乙基)嗎啉(714 mg，77%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.42(d,J=8.0 Hz,2H),7.38(d,J=19.0 Hz,1H),7.19(d,J=7.8 Hz,2H),6.13(d,J=18.3 Hz,1H),3.75(t,J=4.4 Hz,4H),2.84-2.77(m,2H),2.63-2.56(m,2H),2.53(br,假單峰,4H),1.32(s,12H)。
B.合成(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮向20 mL微波小瓶中之(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯乙基)嗎啉(138 mg，0.4 mmol)於PhCH3/EtOH(8 mL/4 mL)中的混合物中添加1 M Na2CO3(0.8 mL，0.8 mmol)，隨後添加Pd(PPh3)4(23 mg，0.02 mmol，5 mol%)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。冷卻至室溫後，混合物用H2O(20 mL)稀釋，用EtOAc(30 mL×2)萃取且脫水(Na2SO4)。移除溶劑後，殘餘物再溶解於DMF(4 mL)中且藉由製備型HPLC純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(TFA鹽，115 mg，45%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ 7.90(d,J=8.4 Hz,1H),7.53(d,J=7.2 Hz,2H),7.43(s,1H),7.37(d,J=6.4 Hz,2H),7.28(d,J=7.2 Hz,2H),6.95(d,J=7.6 Hz,1H),6.81(d,J=8.4 Hz,1H),6.57(d,J=7.6 Hz,1H),5.57(s,1H),4.06(d,J=11.2 Hz,2H),3.80(t,J=11.2 Hz,2H),3.56(d,J=11.2 Hz,2H),3.38(t,J=7.6 Hz,2H),3.27-3.12(m,5H),3.07(t,2H),2.20-2.10(m,2H)；MS ESI 521.4[M+H]+,[C32H32N4O3+H]+之計算值521.2。
實施例　A54. 4-((E)-2-(6-((1R*,2S*)-2-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯甲腈
A.6-甲醯基-1H-吲唑-3-甲腈向3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(3 g，10.8 mmol)於DMF(25 mL)中的溶液中添加氰化銅(1.9 g，21 mmol)。溶液藉由微波照射在185℃下加熱10分鐘。添加水(100 mL)且收集白色沈澱物。沈澱物溶解於EtOAc(250 mL)中，用水(2×25 mL)洗滌，經MgSO4脫水且濃縮，得到呈白色固體狀之標題化合物(1.1 g，73%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ14.92(bs,1H),10.17(s,1H),8.39(s,1H),8.06(d,J=8.3 Hz,1H),7.83(d,J=8.5 Hz,1H)。
B.(E)-6-((2-側氧基吲哚啉-3-亞基)甲基)-1H-吲唑-3-甲腈向6-甲醯基-1H-吲唑-3-甲腈(1.10 g，6.4 mmol)與2-羥吲哚(871 mg，6.5 mmol)於EtOH(25 mL)中的混合物中添加哌啶(0.1 mL，1 mmol)。所得混合物回流(油溫75℃)90分鐘，接著冷卻至室溫。所得沈澱物藉由抽吸過濾收集且乾燥，得到呈橙色固體狀之標題化合物(1.5 g，82%)。1H NMR(400 MHz,DMSO-d 6 )δ14.6(s,1H),10.66(s,1H),8.09(s,1H),8.01(d,J=8.5 Hz,1H) 7.78(s,1H),7.67(d,J=8.5 Hz,1H),7.48(d,1H,J=7.8 Hz),7.24(t,J=7.6 Hz,1H),6.88(d,J=7.8 Hz,1H),6.83(t,J=7.8 Hz,1H)。
C.　6-((1R*,2S*)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-甲腈使用(E)-6-((2-側氧基吲哚啉-3-亞基)甲基)-1H-吲唑-3-甲腈(1.5 g，5.2 mmol)根據實施例A1之方法合成標題化合物，得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.3 g，83%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.73(d,J=8.3 Hz,1H),7.61(s,1H),7.18(d,J=8.5 Hz,1H) 7.08-7.04(m,1H),6.94(d,J=8.0 Hz,1H),6.58(t,J=7.6 Hz,1H),5.93(d,J=7.8 Hz,1H),3.38-3.34(m,1H),2.27-2.18(m,1H)。
D.　6-((1R*,2S*)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-甲醛向6-((1R*,2S*)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-甲腈(1 g，3.3 mmol)於吡啶(30 mL)中的溶液中添加乙酸(8 mL)及水(8 mL)及阮尼鎳(Raney Nickel)(1 g)。將次磷酸鈉(1.8 g，21 mmol)溶解於水(10 mL)中且逐滴添加且攪拌反應物隔夜。產物萃取至乙酸乙酯(300 mL)中，用鹽水(50 mL)洗滌，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。殘餘物藉由矽膠層析法(95:5 CH2Cl2/MeOH)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(300 mg，30%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ10.17(s,1H),8.10(d,J=8.3 Hz,1H),7.55(s,1H),7.17(d,J=8.5 Hz,1H) 7.08-7.04(m,1H),6.94(d,J=8.3 Hz,1H),6.56(t,J=7.6 Hz,1H),5.93(d,J=7.5 Hz,1H),3.38-3.34(m,1H),2.27-2.17(m,1H)。
E.　4-((E)-2-(6-((1R*,2S*)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯甲腈在0℃下將4-氰基苄基膦酸二乙酯(600 mg，2.4 mmol)溶解於DMF(5 mL)中。添加第三丁醇鉀(540 mg，4.8 mmol)且攪拌混合物5分鐘。將化合物A54D(200 mg，0.66 mmol)溶解於DMF(5 mL)中且逐滴添加至溶液中且攪拌混合物90分鐘。用HCl(0.1 N)淬滅反應且收集所得沈澱物。將沈澱物溶解於EtOAc(100 mL)中且用H2O(2×10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。殘餘物藉由矽膠層析法純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(100 mg，38%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.04(d,J=8.5 Hz,1H),7.82(d,J=8.6 Hz,2H),7.74(d,J=8.6 Hz,2H),7.66-7.53(m,2H),7.48(s,1H),7.08-7.04(m,2H),6.94(d,J=8.3 Hz,1H),6.59(t,J=7.6 Hz,1H),5.99(d,J=7.5 Hz,1H),3.38-3.34(m,1H),2.27-2.18(m,2H)；MS ESI 403.1[M+H]+,[C26H18N4O+H]+之計算值403.1。
實施例A55.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　4-((E)-2-(6-((1R*,2S*)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯甲醛標題化合物根據實施例A54D之方法合成，例外為用4-((E)-2-(6-((1R*,2S*)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2-基)-1H-吲唑-3-基)乙烯基)苯甲腈(100 mg，0.25 mmol)替換。藉由矽膠層析法(99:1 CH2Cl2/MeOH)純化，得到呈橙色固體狀之標題化合物(95 mg，94%)。MS ESI 406.2[M+H]+,[C26H19N3O2+H]+之計算值406.2。
B.　(1R*,2S*)-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽向實施例A55A(40 mg，0.1 mmol)於THF(3 mL)中的溶液中添加嗎啉(43 mg，0.5 mmol)及異丙醇鈦(57 mg，0.2 mmol)且攪拌反應物30分鐘。添加硼氫化鈉(13 mg，0.2 mmol)且混合物加熱至50℃隔夜。反應物用水(2 mL)淬滅且用乙酸乙酯(25 mL)萃取，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。殘餘物藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈TFA鹽形式之標題化合物(5 mg，9%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.5 Hz,1H),7.78(d,J=8.6 Hz,2H),7.75-7.48(m,5H),7.08-7.05(m,2H),6.94(d,J=8.3 Hz,1H),6.59(t,J=7.6 Hz,1H),5.99(d,J=7.5 Hz,1H)4.39(s,2H)4.12-4.04(m,2H),3.79-3.68(m,2H)3.44-3.34(m,3H),3.30-3.19(m,2H)2.28-2.16(m,2H)；MS ESI 477.3[M+H]+,[C30H28N4O2+H]+之計算值477.2。
實施例A56.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(150 mg，0.37 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(160 mg，0.48 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(122 mg，58%)。=-79°(c 0.33,甲醇)。光譜資料與實施例A55中所獲得之資料相同。
實施例A57.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A55方法B之方法合成標題化合物，例外為用哌啶(43 mg，0.5 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(8 mg，28%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.8 Hz,1H),7.77(d,J=8.6 Hz,2H),7.75-7.48(m,5H),7.08-7.05(m,2H),6.94(d,J=7.5 Hz,1H),6.59(t,J=7.7 Hz,1H),5.99(d,J=7.3 Hz,1H)4.31(s,2H) 3.53-3.45(m,2H),3.39-3.34(m,1H),3.04-2.93(m,2H) 2.27-2.17(m,2H),2.02-1.95(m,2H),1.88-1.71(m,3H),1.57-1.45(m,1H)；MS ESI 475.3[M+H]+,[C31H30N4O+H]+之計算值475.2。
實施例A58.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(50 mg，0.12 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(59 mg，0.18 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(13 mg，20%)。[α]236 D=-109°(c 0.35,甲醇)。光譜資料與實施例A57中所獲得之資料相同。
實施例A59.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(59 mg，0.18 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(17 mg，23%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.3 Hz,1H),7.75(d,J=8.6H z,2H),7.53-7.49(m,5H),7.05(d,J=8.5 Hz,1H),6.84(d,J=8.5 Hz,1H),6.61(dd,J=8.4,2.3 Hz,1H),5.58(d,J=2.3 Hz,1H) 4.30(s,2H),3.52-3.44(m,2H),3.38-3.34(m,1H),3.26(s,3H),3.01-2.93(m,2H),2.26-2.17(m,4H),2.00-1.91(m,2H),1.89-1.67(m,3H),1.58-1.46(m,1H)；MS ESI 505.3[M+H]+,[C32H32N4O2+H]+之計算值505.3。[α]22 ‧ 6‧ D=-69°(c 0.29,甲醇)。
實施例A60.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-(吡咯啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A55之方法合成標題化合物，例外為用吡咯啶(71 mg，0.86 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(34 mg，35%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.6 Hz,1H),7.76(d,J=8.6 Hz,2H),7.55-7.48(m,5H),7.08-7.05(m,2H),6.94(d,J=7.8 Hz,1H),6.59(t,J=7.5 Hz,1H),5.99(d,J=7.5 Hz,1H)4.40(s,2H),3.55-3.46(m,2H),3.38-3.34(m,1H),3.27-3.16(m,2H),2.27-2.17(m,4H),2.06-1.98(m,2H)；MS ESI 461.3[M+H]+,[C30H28N4O+H]+之計算值461.2。
實施例A61.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(吡咯啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(175 mg，0.43 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶(225 mg，0.64 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(123 mg，51%)。光譜資料與實施例A60中所獲得之資料相同。
實施例A64.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. 7-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉向7-溴-1,2,3,4-四氫異喹啉(1 g，4.7 mmol)於甲酸(20 mL)中的溶.液中添加福馬林(formalin)(1.2 mL，15 mmol)。溶液在微波照射下加熱至150℃維持5分鐘。在真空中移除溶劑且殘餘物溶解於乙酸乙酯(100 mL)中，用飽和碳酸氫鈉(2×10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌且經MgSO4脫水。移除溶劑，得到呈白色固體狀之標題化合物(800 mg，78%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.73(d,J=8.3 Hz,1H),7.70(s,1H),7.50(d,J=8.0 Hz,1H),4.11(s,2H),3.37-3.34(m,2H),3.27-3.24(m,2H)2.95(s,3H)；MS ESI 225.9、227.9[M+H]+,[C10H12BrN+H]+之計算值226.0、228.0。
B.(E)-2-甲基-7-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用7-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(720 mg，3.2 mmol)替換。分離得到呈橙色油狀之標題化合物(700 mg，73%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.37(d,J=18.6 Hz,1H),7.29-7.26(m,1H),7.13(s,1H),7.08(d,J=7.3 Hz,1H),6.10(d,J=18.6 Hz,1H),3.57(s,2H),2.93-2.90(m,2H),2.70-2.67(m,2H),2.46(s,3H),1.32(s,12H)；MS ESI 300.2[M+H]+,[C18H26BNO2+H]+之計算值300.2。
C.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-2-甲基-7-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(80 mg，0.3 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(32 mg，38%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.3 Hz,1H),7.64-7.60(m,1H),7.49-7.45(m,4H),7.32(d,J=8.3 Hz,1H),7.05(d,J=8.5 Hz,1H),6.84(d,J=8.5 Hz,1H),6.63-6.59(m,1H),5.99-5.98(m,1H),4.65-4.58(m,1H) 4.42-4.34(m,1H),3.84-3.75(m,1H),3.49-3.40(m,1H),3.39-3.33(m,1H),3.27(s,3H),3.24-3.17(m,2H),3.09(s,3H),2.27-2.18(m,2H)；MS ESI 477.3[M+H]+,[C30H28N4O2+H]+之計算值477.2。[α]24.2. D=-85°(c 0.40,甲醇)。
實施例A65.(1R,2S)-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(150 mg，0.37 mmol)及(E)-2-甲基-7-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(150 mg，0.55 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(35 mg，17%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.97(d,J=8.3 Hz,1H),7.60(d,J=8.5 Hz,1H),7.45(bs,4H),7.30(d,J=8.0 Hz,1H),7.08-6.93(m,2H),6.94(d,J=7.8 Hz,1H),6.57(t,J=7.40 Hz,1H),5.98(d,J=7.3 Hz,1H),4.64-4.59(m.,1H),4.39-4.32(m,1H),3.82-3.77(m,1H),3.49-3.37(m,1H),3.37-3.33(m,1H),3.30-3.20(m,2H),3.08(s,3H),2.27-2.17(m,2H)；MS ESI 447.3[M+H]+,[C29H26N4O+H]+之計算值447.2。[α]23.4． D=-124°(c 0.25,甲醇)。
實施例A66.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-((E)-2-(1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　(E)-2,2,2-三氟-1-(7-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用1-(7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2,2,2-三氟乙酮(415 mg，1.32 mmol)替換。標題化合物藉由矽膠層析法(3:2己烷/EtOAC)純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(300 mg，58%)。MS ESI 382.2[M+H]+,[C19H23BF3NO3+H]+之計算值382.2。
B.　(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-((E)-2-(1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-2,2,2-三氟-1-(7-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(80 mg，0.21 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(26 mg，31%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.5 Hz,1H),7.60(d,J=8.8 Hz,1H),7.48(bs,4H),7.29(d,J=8.0 Hz,1H),7.05(d,J=8.8 Hz,1H),6.84(d,J=8.5 Hz,1H),6.62(d,J=7.8 Hz,1H),5.58(s,1H),4.41(s,2H),3.54(t,J=6.0 Hz,2H),3.40-3.33(m,1H),3.27(s,3H),3.19-3.11(m,2H),2.29-2.14(m,2H)；MS ESI 463.3[M+H]+,[C29H26N4O2+H]+之計算值463.2。
實施例A70(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉根據WO 2010/115279實施例A69方法A之方法合成標題化合物，例外為用7-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(450 mg，2 mmol)替換。用己烷濕磨，得到呈褐色固體狀之標題化合物(300 mg，55%)。MS ESI 274.1.1[M+H]+,[C16H26BNO3+H]+之計算值274.2。
B.　(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用2-甲基-7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(80 mg，0.29 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(32 mg，40%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.94(t,J=8.9 Hz,2H),7.79(s,1H),7.53(s,1H),7.44(d,J=8.0 Hz,1H),7.05(d,J=9.0 Hz,1H),6.84(d,J=9.3 Hz,1H),6.62(d,J=7.0 Hz,1H),5.60(s,1H),4.73-4.63(m,1H),4.47-4.42(m,1H),3.85-3.78(m,1H),3.52-3.42(m,1H),3.41-3.28(m,3H),3.27(s,3H),3.11(s,3H),2.29-2.18(m,2H)；MS ESI 451.3[M+H]+,[C28H26N4O2+H]+之計算值451.2。
實施例　A71.(1R,2S)-5-甲氧基-2-(3-(1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. 2,2,2-三氟-1-(7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮根據WO2010/115279實施例A69方法A之方法合成標題化合物，例外為用1-(7-溴-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)-2,2,2-三氟乙酮(450 mg，2 mmol)替換。矽膠層析(3:2己烷/EtOAc)得到白色標題化合物(320 mg，90%)。MS ESI 356.1[M+H]+,[C17H21BF3NO3+H]+之計算值356.2。
B.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-(1,2,3,4-四氫異喹啉-7-基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用2,2,2-三氟-1-(7-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-3,4-二氫異喹啉-2(1H)-基)乙酮(100 mg，0.2 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(18 mg，17%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.95(t,J=8.3 Hz,1H),7.90(d,J=6.78 Hz,1H),7.80(s,1H),7.53(s,1H),7.42(d,J=8.0 Hz,1H),7.05(d,J=8.0 Hz,1H),6.84(d,J=8.3 Hz,1H),6.62(d,J=8.3 Hz,1H),5.60(s,1H),4.48(s,2H),3.60-3.53(m,2H),3.41-3.33(m,1H),3.27(s,3H),3.20(t,J=6.6 Hz,2H),2.29-2.18(m,2H)；MS ESI 437.1[M+H]+,[C27H24N4O2+H]+之計算值437.2。
實施例A72.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. 4-(4-溴苄基)-1,4-氧雜氮雜環庚烷向4-溴苯甲醛(616 mg，3.3 mmol)於二氯乙烷(50 mL)中的溶液中添加高嗎啉鹽酸鹽(548 mg，4 mmol)及乙酸(0.1 mL)。添加三乙醯氧基硼氫化鈉(3.4 g，16 mmol)且攪拌反應物隔夜。用飽和NH4Cl(30 mL)淬滅反應。添加乙酸乙酯(250 mL)且溶液用飽和NaHCO3(2×50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。殘餘物經由二氧化矽柱塞用(5% MeOH/CH2Cl2)沖洗，得到白色固體(850 mg，85%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.28(d,J=7.3 Hz,2H),7.10(d,J=7.3 Hz,2H),3.66-3.57(m,2H),3.55-3.50(m,2H),3.46-3.42(m,2H),3.16-3.10(m,2H),2.55-2.45(m,4H),1.75-1.65(m,2H)。
B.(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)-1,4-氧雜氮雜環庚烷根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用4-(4-溴苄基)-1,4-氧雜氮雜環庚烷(500 mg，1.86 mmol)替換。分離得到呈橙色油狀之標題化合物(560 mg，88%)。MS ESI 344.2[M+H]+,[C20H30BNO3+H]+之計算值344.2。
C.(1R,2S)-2-(3-(4-((1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.25 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)-1,4-氧雜氮雜環庚烷(103 mg，0.30 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(38 mg，26%)。
1H NMR(400 MHz,MeOD)δ8.02(d,J=9.0 Hz,1H),7.78(d,J=8.3 Hz,2H),7.61-7.53(m,4H),7.48(s,1H),7.08-7.04(m,2H),6.94(d,J=7.5 Hz,1H),6.60-6.56(m,1H),5.99(d,J=7.8 Hz,1H),4.45(s,2H),4.02-3.80(m,4H),3.65-3.60(m,1H),3.57-3.35(m,4H),2.29-2.12(m,4H)；MS ESI 491.3[M+H]+,[C31H30N4O2+H]+之計算值490.2。[α]23.4. D=-146°(c 0.39,甲醇)。
實施例A73.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((1,4-氧雜氮雜環庚烷-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)-1,4-氧雜氮雜環庚烷(103 mg，0.30 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(48 mg，31%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.3 Hz,1H),7.76(d,J=7.8 Hz,2H),7.57-7.49(m,5H),7.05(d,J=8.28 Hz,1H),6.84(d,J=8.3 Hz,1H),6.61(d,J=8.3 Hz,1H),5.58(s,1H),4.44(s,2H),3.99-3.75(m,4H),3.69-3.55(m,1H),3.55-3.34(m,4H),3.26(s,3H) 2.28-2.11(m,4H)；MS ESI 521.3[M+H]+,[C32H32N4O3+H]+之計算值520.2。[α]22.8. D=-76°(c 0.33,甲醇)。
實施例A74. (1R,2S)-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　6-溴-2-甲基異喹啉鎓三氟甲烷磺酸鹽6-溴異喹啉(618 mg，3 mmol)於CH2Cl2(35 mL)中的溶液在氬氣下冷卻至0℃。逐滴添加三氟甲磺酸甲酯(0.38 mL，3.3 mmol)且使混合物升溫至室溫。過濾沈澱物，用乙醚濕磨且乾燥，得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.03 g，93%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ9.83(s,1H),8.64-8.56(m,2H),8.41(d,J=7.0 Hz,1H),8.36(d,J=8.8 Hz,1H),8.20(d,J=9.03 Hz,1H),4.53(s,3H)。
B.　6-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉向6-溴-2-甲基異喹啉鎓三氟甲烷磺酸鹽(371 mg，1 mmol)於甲醇(10 mL)中的溶液中添加溴甲酚綠指示劑。添加硼氫化鈉(93 mg，2.5 mmol)且在室溫下攪拌反應物。定期添加含HCl之乙酸(1 M)以維持顏色為黃色。1小時後，添加水(50 mL)且溶液用NaOH(1 M)鹼化，萃取至CH2Cl2(100 mL)中，經MgSO4脫水且濃縮，得到呈白色固體狀之標題化合物(200 mg，99%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.29-7,17(m,2H),6.88(d,J=8.0 Hz,1H),3.51(s,2H),2.93-2.82(m,2H),2.65(t,J=5.8 Hz,2H),2.45(s,3H)。
C.　(E)-2-甲基-6-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用6-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(720 mg，3.2 mmol)替換。分離得到呈褐色油狀之標題化合物(720 mg，75%)。MS ESI 300.2[M+H]+,[C18H26BNO2+H]+之計算值300.2。
D.(1R,2S)-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(122 mg，0.3 mmol)及(E)-2-甲基-6-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(110 mg，0.37 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(38 mg，14%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.99(d,J=8.3 Hz,1H),7.58(d,J=7.8 Hz,1H),7.54(s,1H),7.50-7.43(m,3H),7.23(d,J=8.0 Hz,1H),7.10-6.99(m,2H),6.94(d,J=7.8 Hz,1H),6.58(t,J=7.5 Hz,1H),5.99(d,J=7.8 Hz,1H),4.64-4.53(m,1H),4.41-4.27(m,1H),3.82-3.75(m,1H),3.51-3.33(m,2H),3.28-3.16(m,2H),3.08(s,3H),2.28-2.16(m,2H)；MS ESI 447.3[M+H]+,[C29H26N4O+H]+之計算值447.2。[α]23.6° D=-147°(c 0.30,甲醇)。
實施例A75.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-((E)-2-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-2-甲基-6-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(134 mg，0.45 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(42 mg，25%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.3 Hz,1H),7.58(d,J=8.3 Hz,1H),7.54(s,1H),7.48(bs,3H),7.23(d,J=8.0 Hz,1H),7.05(d,J=7.8 Hz,1H),6.84(d,J=8.5 Hz,1H),6.62(d,J=8.8 Hz,1H),5.58(s,1H),4.60-4.51(m,1H),4.37-4.33(m,1H),3.82-3.75(m,1H),3.51-3.33(m,2H),3.28-3.16(m,2H),3.27(s,3H),3.08(s,3H),2.28-2.15(m,2H)；MS ESI 477.3[M+H]+,[C29H26N4O+H]+之計算值477.2。
實施例A76.(1R,2S)-2-(3-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. 2-甲基-6-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉根據WO2010/115279實施例A69方法A之方法合成標題化合物，例外為用6-溴-2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉(450 mg，2 mmol)替換。用己烷濕磨，得到呈褐色固體狀之標題化合物(265 mg，49%)。MS ESI 274.1[M+H]+,[C16H26BNO3+H]+之計算值274.2。
B.(1R,2S)-2-(3-(2-甲基-1,2,3,4-四氫異喹啉-6-基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(64 mg，0.15 mmol)及2-甲基-6-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)-1,2,3,4-四氫異喹啉(80 mg，0.29 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(24 mg，31%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.95-7.81(m,3H),7.50(s,1H),7.35(d,J=8.3 Hz,1H),7.08-6.99(m,2H),6.94(d,J=7.5 Hz,1H),6.57(t,J=7.5 Hz,1H),6.00(d,J=7.5 Hz,1H),4.66-4.62(m,1H),4.43-4.38(m,1H),3.85-3.78(m,1H),3.52-3.42(m,1H),3.41-3.33(m,1H),3.32-3.20(m,2H),3.10(s,3H),2.27-2.14(m,2H)；MS ESI 421.3[M+H]+,[C27H24N4O+H]+之計算值421.2。
實施例A78.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(1-甲基哌啶-4-基氧基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　4-(4-溴苯氧基)-1-甲基哌啶根據WO2010/115279實施例A64方法A之方法製備，例外為用4-(4-溴苯氧基)哌啶(256 mg，1 mmol)替換。分離得到呈白色固體狀之標題化合物(270 mg，99%)。1H NMR(CDCl3)δ: 7.36(d,J=8.3 Hz,2H),6.79(d,J=8.3 Hz,2H),4.28(bs,1H),2.73-2.65(m,2H),2.32(s,3H),2.32-2.25(m,2H),2.05-1.95(m,2H),1.86-1.80(m,2H)。
B.　(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用4-(4-溴苯氧基)-1-甲基哌啶(270 mg，1 mmol)替換。分離得到呈橙色油狀之標題化合物(340 mg，99%)。MS ESI 344.2[M+H]+,[C20H30BNO3+H]+之計算值344.2。
C.　(1R,2S)-2-(3-(4-(1-甲基哌啶-4-基氧基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.25 mmol)及(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶(105mg，0.3 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(35 mg，25%)。1H NMR(CD3OD)δ: 7.99-7.97(m,1H),7.63-7.56(m,2H),7.50-7.42(m,2H),7.36-7.28(m,1H),7.10-7.01(m,4H),6.97-6.91(m,1H),6.59(t,J=7.7 Hz,1H),5.99(d,J=7.8 Hz,1H),4.84-4.79(m,0.5H),4.65-4.60(m,0.5H),3.65-3.62(m,1H),3.47-3.34(m,3H),3.25-3.13(m,1H),2.94(s,3H),2.44-2.40(m,1H),2.32-2.01(m,5H),1.96-1.81(m,1H)；MS ESI 491.2[M+H]+,[C31H30N4O2+H]+之計算值491.3。
[α]22 D=-154°(c 0.43,MeOH)。
實施例A79.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(1-甲基哌啶-4-基氧基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶(105 mg，0.3 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(36 mg，25%)。1H NMR(CD3OD)δ: 7.95(d,J=8.8 Hz,1H),7.56-7.53(m,2H),7.45-7.40(m,2H),7.30-7.26(m,1H),7.04-6.98(m,4H),6.83(d,J=8.3 Hz,1H),6.60(d,J=8.3 Hz,1H),5.58(s,1H),,4.81-4.54(m,1H)3.65-3.33(m,4H),3.24(s,3H),3.23-3.13(m,1H)2.92(s,3H),2.44-2.37(m,1H),2.32-2.01(m,5H),1.96-1.81(m,1H)；MS ESI 521.3[M+H]+,[C32H32N403+H]+之計算值521.2。
實施例　A80.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)丙-2-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　2-甲基-2-(N-嗎啉基)丙腈將丙酮氰醇(4.3 g，50 mmol)溶解於丙酮(5 mL)中。添加嗎啉(4.3 g，50 mmol)且在室溫下攪拌溶液24小時。在真空中移除揮發性溶劑，以定量產率得到呈澄清液體狀之標題化合物。MS ESI 155.0[M+H]+,[C8H14N2O+H]+之計算值155.1。
B.　4-(2-(4-溴苯基)丙-2-基)嗎啉在氬氣下向無水THF(15 mL)中添加鎂旋屑(190 mg，7.4 mmol)。添加1,4-二溴苯(2.43 g，10.3 mmol)且溶液加熱至回流維持30分鐘。將2-甲基-2-(N-嗎啉基)丙腈(1 g，6.6 mmol)溶解於THF(30 mL)中且在回流下逐滴添加至溶液中。混合物攪拌2小時且冷卻至室溫。反應物用飽和K2CO3溶液淬滅且用CH2Cl2(200 mL)萃取，經MgSO4脫水且濃縮為橙色油狀物。粗混合物利用Biotage二氧化矽管柱(含2-15% MeOH之CH2Cl2)純化，得到呈黃色油狀之標題化合物(204 mg，10%)。MS ESI 284.0、286.0[M+H]+,[C13H18BrNO+H]+之計算值284.1、286.1。
C.　(E)-4-(2-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)丙-2-基)嗎啉根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用4-(2-(4-溴苯基)丙-2-基)嗎啉(200 mg，0.7 mmol)替換。分離得到呈橙色油狀之標題化合物(140 mg，40%)。MS ESI 358.1[M+H]+,[C21H32BNO3+H]+之計算值358.2。
D.　(1R,2S)-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)丙-2-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.25 mmol)及(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)哌啶(140 mg，0.4 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(51 mg，34%)。1H NMR(CD3OD)δ: 7.98(d,J=8.5 Hz,1H),7.80-7.76(m,2H),7.70(d,J=8.3 Hz,2H),7.52-7.46(m,3H),7.08-6.98(m,2H),6.94(d,J=7.8 Hz,1H),6.56(t,J=7.7 Hz,1H),5.98(d,J=7.5 Hz,1H),4.06-3.96(m,2H),3.83-3.73(m,2H),3.35-3.29(m,3H),3.13-3.08(m,2H),2.26-2.14(m,2H),1.90(s,6H)；MS ESI 418.2[M-C4H8NO]+,[C32H32N4O2-C4H8NO]+之計算值418.2。[α]22.8° D=-109°(c 0.32,甲醇)。
實施例　A81.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. 4-(4-溴苄基)哌啶-1-甲酸第三丁酯向4-亞甲基哌啶-1-甲酸第三丁酯(1 g，5.1 mmol)溶液中添加9-BBN溶液(10.2 mL之0.5 M溶液，5.1 mmol)且混合物在氬氣下加熱至回流維持1小時。溶液接著冷卻至室溫且添加1,4-碘溴苯(1.3 g，4.7 mmol)，隨後添加K2CO3(843 mg，6.1 mmol)、DMF(10 mL)、水(1 mL)及Pd(dppf)Cl2(114 mg，0.15 mmol)。溶液在氬氣下加熱至60℃維持3小時且冷卻至室溫。添加乙酸乙酯(250 mL)且溶液用水(2×50 mL)、鹽水(50 mL)洗滌.經MgSO4脫水且濃縮至乾燥。粗產物藉由Biotage矽膠管柱(50:50己烷/乙酸乙酯)純化，得到呈黃色固體狀之標題化合物(1.2 g，72%)。
B. 4-(4-溴苄基)哌啶向4-(4-溴苄基)哌啶-1-甲酸第三丁酯(780 mg，2.2 mmol)於CH2Cl2(15 mmol)中的溶液中添加TFA(0.5 mL)且混合物在室溫下攪拌1小時。在真空中移除溶劑且殘餘物溶解於CH2Cl2(50 mL)中，用NaOH(0.1 M，10 mL)、鹽水(10 mL)洗滌，經MgSO4脫水且濃縮至乾燥，得到呈米色固體狀之標題化合物(520 mg，93%)。
C. 4-(4-溴苄基)-1-甲基哌啶根據WO2010/115279實施例A69方法A之方法製備，例外為用4-(4-溴苄基)哌啶(520 mg，2 mmol)替換。分離得到呈褐色固體狀之標題化合物(490 mg，89%)。1H NMR(CDCl3)δ7.39(d,J=7.5 Hz,2H),7.01(d,J=7.8 Hz,2H),2.93(d,J=11.0 Hz,2H),2.50(d,J=6.8 Hz,2H),2.32(s,3H),1.99-1.94(m,2H),1.65-1.62(m,2H),1.50-1.35(m,3H)。
D.(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用4-(4-溴苄基)-1-甲基哌啶(267 mg，1 mmol)替換。分離得到呈橙色油狀之標題化合物(340 mg，99%)。MS ESI 342.2[M+H]+,[C21H32BNO2+H]+之計算值342.2。
E.(1R,2S)-2-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.25 mmol)及(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(105 mg，0.3 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(39 mg，27%)。1H NMR(CD3OD)δ: 7.97(d,J=8.8 Hz,1H),7.56(d,J=7.3 Hz,2H),7.51-7.37(m,3H),7.22(d,J=7.5 Hz,2H),7.08-7.01(m,2H),6.94(d,J=8.0 Hz,1H),6.57(t,J=7.5 Hz,1H),5.99(d,J=7.5 Hz,1H),3.50-3.47(m,2H),3.37-3.31(m,1H),2.97-2.92(m,2H),2.83(s,3H),2.63(d,J=6.0 Hz,2H),2.26-2.14(m,2H),1.96-1.81(m,3H),1.56-1.41(m,2H)；MS ESI 489.4[M+H]+,[C32H32N4O+H]+之計算值489.3。=-96°(c 0.26,甲醇)。
實施例A82.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-((1-甲基哌啶-4-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外為用(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(105 mg，0.3 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(24 mg，17%)。1H NMR(CD3OD)δ: 7.97(d,J=8.3 Hz,1H),7.54(d,J=7.8 Hz,2H),7.51-7.36(m,3H),7.20(d,J=7.5 Hz,2H),7.01(d,J=8.3 Hz,1H),6.83(d,J=8.8 Hz,1H),6.60(d,J=8.3 Hz,1H),5.59(s,1H),3.50-3.47(m,2H),3.37-3.31(m,1H),3.25(s,3H),2.97-2.92(m,2H),2.83(s,3H),2.62(d,J=6.0 Hz,2H),2.26-2.14(m,2H),1.96-1.81(m,3H),1.53-1.44(m,2H)；MS ESI 519.3[M+H]+,[C33H34N4O2+H]+之計算值519.3。[α]228‧ D=-100°(c 0.29,甲醇)。
實施例A83.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(吡咯啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法合成標題化合物，例外用(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶(50 mg，0.16 mmol)替換。藉由逆相製備型HPLC純化，得到呈黃色TFA鹽形式之標題化合物(19 mg，21%)。1H NMR(CD3OD)δ: 8.02(d,J=8.3 Hz,1H),7.75(d,J=7.8 Hz,2H),7.56-7.47(m,5H),7.05(d,J=8.5 Hz,1H),6.84(d,J=8.5 Hz,1H),6.61(d,J=8.5 Hz,1H),5.58(s,1H),4.39(s,2H),3.52(bs.,2H),3.37(t,J=8.5 Hz,1H),3.27(s,3H),3.25-3.16(m,2H),2.27-2.14(m,4H),2.03(bs.,2H)；MS ESI 491.3[M+H]+,[C31H30N4O2+H]+之計算值491.2。[α]24.2° D=-117°(c 0.52,甲醇)。
實施例A84.(1R*,2R*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮
自實施例A34B之反應物分離得到呈橙黃色固體膜狀之次要非對映異構體(36 mg，3%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δppm 7.99(d,J=8.5 Hz,1 H),7.75(d,J=8.0 Hz,2 H),7.56-7.46(m,5 H),7.15(d,J=8.5 Hz,1 H),6.87(d,J=8.3 Hz,1 H),6.82-6.72(m,2 H),4.31(s,2 H),3.81(s,3 H),3.39(t,J=8.8 Hz,1 H),2.87(s,6 H),2.41(dd,J=8.4,4.9 Hz,1 H),2.23(dd,J=8.8,4.8 Hz,1 H)；MS ESI[M+H]+465.2,[C29H28N4O2+H]+之計算值465.2。
實施例A87.(1R*,2S*)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　(E)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-1-甲基吲哚啉-2-酮根據針對(E)-3-((1H-吲唑-5-基)亞甲基)吲哚啉-2-酮所述之方法合成標題化合物，例外為用3-碘-1H-吲唑-6-甲醛(462 mg，1.70 mmol)及1-甲基吲哚啉-2-酮(250 mg，1.70 mmol)替換；獲得呈黃橙色固體狀之標題化合物(545 mg，80%)；MS ESI 402.2[M+H]+,[C17H12IN3O+H]+之計算值402.01。
B.　(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮根據實施例A6之方法合成標題化合物，例外為用(E)-3-((3-碘-1H-吲唑-6-基)亞甲基)-1-甲基吲哚啉-2-酮(545 mg，1.36 mmol)替換，得到呈非對映異構體之9:1混合物形式之標題化合物(405 mg，72%)；MS ESI 416.0[M+H]+,[C18H14IN3O+H]+之計算值416.03。
C.　(1R*,2S*)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽根據WO 2010/115279之實施例A45之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(30 mg，0.072 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(31 mg，0.094 mmol)。鈴木偶合反應後，移除溶劑且殘餘物藉由prep-HPLC純化，得到標題化合物(16 mg，45%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.00(d,J=8.4 Hz,1H),7.77(d,J=8.2 Hz,2H),7.54-7.46(m,5H),7.14(t,J=7.8 Hz,1H),7.02(d,J=8.1 Hz,2H),6.64(t,J=7.3 Hz,1H),6.02(d,J=7.2 Hz,1H),4.38(s,2H),4.08-4.04(m,2H),3.75-3.69(m,2H),3.43-3.34(m,6H),3.27-3.19(m,2H),2.29-2.25(m,1H),2.22-2.18(m,1H)；MS ESI[M+H]+491.3,[C31H30N4O2+H]+之計算值491.24。
實施例A89.(1R*,2S*)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-(哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　4-(4-乙炔基苯基)哌 -1-甲酸第三丁酯向微波小瓶中裝入4-(4-碘苯基)哌-1-甲酸第三丁酯(300 mg，0.773 mmol)、三甲基矽烷基乙炔(0.22 mL，1.54 mmol)、NEt3(3.0 mL)、DMF(1.5 mL)、CuI(15 mg，0.080 mmol)及PdCl2(PPh3)2(27 mg，0.039 mmol)。將小瓶封蓋且於微波中在100℃下加熱1小時。在真空中移除NEt3後，殘餘物用EtOAc(15 mL)萃取。有機層接著用NaHCO3(飽和)(5 mL)、H2O(5 mL)、鹽水(5 mL)洗滌，接著經MgSO4脫水。移除溶劑，接著將物質溶解於MeOH(4 mL)及THF(2 mL)中。添加K2CO3(1.0 mL之1 M溶液)且攪拌反應物3小時。移除溶劑且殘餘物用EtOAc(15 mL)萃取。有機層用鹽水(5 mL)洗滌，接著經MgSO4脫水。移除溶劑且產物在高度真空下乾燥，得到呈褐色固體狀之標題化合物(212 mg，96%)；MS ESI 287.0[M+H]+,[C17H22N2O2+H]+之計算值287.18.
B. (E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌 -1-甲酸第三丁酯根據實施例A42A之方法合成標題化合物，例外為用4-(4-乙炔基苯基)哌-1-甲酸第三丁酯(212 mg，0.740 mmol)替換；管柱層析(矽膠，己烷/EtOAc 6:1至5:1)後，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(137 mg，45%)；MS ESI 415.3[M+H]+,[C23H35BN2O4+H]+之計算值415.28。
C.　(1R*,2S*)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-(哌 -1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽根據WO2010/115279之實施例A45之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(37 mg，0.090 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌-1-甲酸第三丁酯(45 mg，0.109 mmol)。移除溶劑且經Boc保護之胺藉由管柱層析(矽膠，CH2Cl2/MeOH 95:5)純化，得到不純產物，該產物溶解於CH2Cl2(2.0 mL)中且添加TFA(200μl)。攪拌反應物2小時，移除溶劑且殘餘物藉由prep-HPLC純化，得到呈灰白色粉末狀之標題化合物(2.0 mg，4.0%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.97(d,J=8.5 Hz,1H),7.56(d,J=8.4 Hz,2H),7.46-7.41(m,2H),7.30(d,J=17 Hz,1H),7.15(t,J=7.2 Hz,1H),7.06-6.99(m,4H),6.65(t,J=8.0 Hz,1H),6.02(d,J=7.7 Hz,1H),3.49-3.44(m,4H),3.40-3.31(m,8H),2.28-2.25(m,1H),2.21-2.18(m,1H)；MS ESI[M+H]+476.2,[C30H29N5O+H]+之計算值476.25。
實施例A90.(1R,2S)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-(哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮鹽酸鹽
根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(218 mg，0.526 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌-1-甲酸第三丁酯(261 mg，0.631 mmol)。經Boc保護之中間物藉由管柱層析法(矽膠，CH2Cl2/MeOH 97:3至96:4)純化，得到218 mg(72%)。此物質溶解於CH2Cl2(6.0 mL)及TFA(1.0 mL)中且攪拌2小時，移除溶劑且殘餘物藉由prep-HPLC純化，得到TFA鹽。此物質藉由用NaHCO3(飽和)(10 mL)洗滌且用EtOAc(2×50 mL)萃取來除去鹼。根據A42B之方法製備HCl鹽，乾燥之後得到標題產物(48 mg，15%)；光譜資料與實施例A89中所獲得之資料相同。旋光度：[α]22 D=-100o(c 0.43,MeOH)。
實施例A91.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-(哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據WO2010/115279之實施例A45之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(72 mg，0.180 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌-1-甲酸第三丁酯(90 mg，0.217 mmol)。移除溶劑且殘餘物藉由管柱層析法(矽膠，己烷/EtOAc 2:1)純化，得到38 mg經Boc保護之胺，該胺溶解於CH2Cl2(2.0 mL)中且添加TFA(0.1 mL)。攪拌反應物3小時，移除溶劑且殘餘物藉由prep-HPLC純化，得到標題化合物(6.5 mg，6.0%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.97(d,J=8.1 Hz,1H),7.57(d,J=8.6 Hz,2H),7.47-7.42(m,2H),7.30(d,J=17 Hz,1H),7.06-7.01(m,4H),6.93(d,J=7.6 Hz,1H),6.58(t,J=7.6 Hz,1H),5.98(d,J=8.0 Hz,1H),3.49-3.44(m,4H),3.40-3.31(m,5H),2.26-2.22(m,1H),2.19-2.16(m,1H)；MS ESI[M+H]+462.2,[C29H27N5O+H]+之計算值462.23。
實施例A92.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A91之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(40 mg，0.1 mmol)替換。分離得到呈黃色固體狀之標題化合物(23 mg，40%)。光譜資料與實施例A91中所獲得之資料相同。
實施例A94.(1R,2S)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮鹽酸鹽
根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(594 mg，1.43 mmol)與(E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(563 mg，1.72 mmol)。藉由管柱層析法(矽膠，CH2Cl2/MeOH/含7 N NH3之MeOH，91:8:1)純化，得到443 mg 63%呈淺橙色固體狀之游離鹼。根據A42B之方法製備HCl鹽，乾燥之後得到標題產物(378 mg，50%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.1 Hz,1H),7.76(d,J=7.2 Hz,2H),7.54-7.47(m,5H),7.15(t,J=7.6 Hz,1H),7.05(d,J=7.9 Hz,2H),6.64(t,J=7.9 Hz,1H),6.02(d,J=6.6 Hz,1H),4.31(s,2H),3.48-3.45(m,2H),3.39(t,J=8.2 Hz,1H),3.36(s,3H),3.01-2.95(m,2H),2.29-2.26(m,1H),2.22-2.19(m,1H),1.99-1.72(m,5H),1.57-1.50(m,1H)；MS ESI[M+H]+489.3,[C32H32N4O+H]+之計算值489.27。旋光度：[α]22 D=-122°(c 0.49,MeOH)。
實施例A95.(1R*,2S*)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據WO2010/115279實施例A43之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1，3'-吲哚啉]-2'-酮(44 mg，0.106 mmol)與(E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(45 mg，0.138 mmol)。藉由prep-HPLC純化，得到標題化合物(6.5 mg，10%)；光譜資料與實施例A94中所獲得之資料相同。
實施例A102. (1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-1'-甲基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮鹽酸鹽
根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-5'-甲氧基-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(512 mg，1.15 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(454 mg，1.38 mmol)替換。藉由管柱層析法(矽膠，CH2Cl2/MeOH95:5至92:8)純化，得到呈黃色固體狀之游離鹼。根據A42B之方法製備HCl鹽，乾燥之後得到呈淺黃色固體狀之標題產物(346 mg，54%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.6 Hz,1H),7.77(d,J=8.0 Hz,2H),7.56-7.49(m,5H),7.04(d,J=8.4 Hz,1H),6.92(d,J=7.8 Hz,1H),6.69(d,J=8.6 Hz,1H),5.63(s,1H),4.39(s,2H),4.08-4.05(m,2H),3.77-3.71(m,2H),3.35-3.23(m,11H),2.27-2.25(m,1H),2.22-2.19(m,1H)；MS ESI[M+H]+521.3,[C32H32N4O3+H]+之計算值521.26。旋光度：[α]22 D=-85°(c 0.59,MeOH)。
實施例A106.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3-氟吡咯啶-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　(R)-1-(4-溴苄基)-3-氟吡咯啶根據WO 2010/115279實施例A105B之方法合成標題化合物，例外為用(R)-3-氟吡咯啶鹽酸鹽(576 mg，4.59 mmol)及4-溴苯甲醛(849 mg，4.59 mmol)替換，得到1.09 g 91%澄清無色油狀物；MS ESI[M+H]+258.0,[C11H13BrFN+H]+之計算值258.03。
B.　(3R)-3-氟-1-(4-((E)-2-(4,4,6-三甲基-1,3,2-二氧雜硼 -2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶根據實施例A51A之方法合成標題化合物，例外為用(R)-1-(4-溴苄基)-3-氟吡咯啶(1.07 g，4.15 mmol)及4,4,6-三甲基-2-乙烯基-1,3,2--二氧雜硼(0.77 mL，4.57 mmol)替換，得到1.40 g 91%淺橙色固體；MS ESI[M+H]+ 332.3,[C19H27BFNO2+H]+之計算值332.22。
C.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3-氟吡咯啶-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(630 mg，1.57 mmol)與(3R)-3-氟-1-(4-((E)-2-(4,4,6-三甲基-1,3,2-二氧雜硼-2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶(622 mg，1.88 mmol)。prep-HPLC純化後獲得呈淺黃色固體狀之標題產物(338 mg，48%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ 7.98(d,1H,J=8.3 Hz),7.73(d,2H,J=7.80 Hz),7.55-7.45(m,5H),7.06-7.00(m,2H),6.93(d,1H,J=7.7 Hz),6.56(t,1H,J=7.5 Hz),5.97(d,1H,J=7.5 Hz),5.46(d,1H,J=52.4 Hz),4.46(s,2H),3.73-3.31(m,5H),2.65-2.44(m,2H),2.26-2.15(m,2H)；MS ESI[M+H]+ 479.3,[C30H27FN4O+H]+之計算值479.22。旋光度：[α]22 D=-125°(c 0.44,MeOH)。
實施例　A109.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(134 mg，0.322 mmol)與(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(111 mg，0.386 mmol)。藉由prep-HPLC純化，得到淺黃色固體，在Et2O下音波處理且過濾，得到標題產物(42 mg，23%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.00(d,1H,J=8.0 Hz),7.76(d,2H,J=7.6 Hz),7.54-7.47(m,5H),7.15(t,1H,J=8.2 Hz),7.03(d,2H,J=7.8 Hz),6.64(t,1H,J=7.5 Hz),6.02(d,1H,J=7.0 Hz),4.33(s,2H),3.41-3.35(m,4H),2.88(s,6H),2.29-2.26(m,1H),2.22-2.19(m,1H)；MS ESI[M+H]+449.2,[C29H28N4O+H]+之計算值449.23。旋光度：[α]22 D=-152°(c 0.42,MeOH)。
實施例A112.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3-氟吡咯啶-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(125 mg，0.290 mmol)與(3R)-3-氟-1-(4-((E)-2-(4,4,6-三甲基-1,3,2-二氧雜硼-2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶(115 mg，0.348 mmol)。藉由prep-HPLC純化，得到64 mg 35%呈米色固體狀之標題化合物；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,1H,J=8.3 Hz),7.75(d,2H,J=7.9 Hz),7.55-7.48(m,5H),7.04(d,1H,J=8.5 Hz),6.82(d,1H,J=8.2 Hz),6.60(d,1H,J=8.5 Hz),5.58(s,1H),5.46(d,1H,J=53.2 Hz),4.46(bs,2H),3.80-3.48(m,4H),3.36(t,1H,J=8.8 Hz),3.26(s,3H),2.54-2.33(m,2H),2.27-2.24(m,1H),2.22-2.17(m,1H)；MS ESI[M+H]+509.3,[C31H29FN4O2+H]+之計算值509.24。旋光度：[α]22 D=-91°(c 0.58,MeOH)。
實施例A113.(1R,2S)-2-(3-((E)-2-(2,3,4,5-四氫苯并[f][1,4]氮呯-7-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(105 mg，0.27 mmol)及(E)-7-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)-2,3-二氫苯并[f][1,4]氮呯-4(5H)-甲酸第三丁酯(130 mg，0.32 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。反應之殘餘物溶解於CH2Cl2(5 mL)中且添加TFA(0.2 mL)，且攪拌混合物1小時且濃縮至乾燥。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(40 mg，30%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.97(d,J=8.2 Hz,1H),7.68-7.64(m,2H),7.50-7.39(m,3H),7.16(d,J=8.2 Hz,1H),7.07-7.01(m,2H),6.94(d,J=7.8 Hz,1H),6.57(t,J=7.6 Hz,1H),5.98(d,J=7.4 Hz,1H),4.45(s,2H),4.39(br. s,2H),3.68(br. s,2H),3.39-3.33(m,1H) 2.25-2.16(m,2H)；MS ESI 449.3[M+H]+,[C28H24N4O2+H]+之計算值449.2。
實施例A115.(1R,2S)-(E)-1'-甲基-2-(3-(4-(吡咯啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A42B之方法合成標題化合物，例外為用以下者替換：(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(147 mg，0.353 mmol)與(E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)吡咯啶(133 mg，0.424 mmol)。藉由prep-HPLC純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(46 mg，22%)；1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.98(d,1H,J=8.7 Hz),7.73(d,2H,J=7.4 Hz),7.53-7.44(m,5H),7.14(t,1H,J=7.2 Hz),7.01(d,2H,J=7.9 Hz),6.63(t,1H,J=7.4 Hz),6.01(d,1H,J=7.6 Hz),4.38(s,2H),3.55-3.45(m,2H),3.40-3.32(m,1H),3.34(s,3H),3.26-3.16(m,2H),2.28-2.17(m,4H),2.05-1.95(m,2H)；MS ESI[M+H]+ 475.4,[C31H30N4O+H]+之計算值475.25。旋光度：[α]22 D=-148°(c 0.40,MeOH)。
實施例A116. (1R,2S)-(E)-2-(3-(3,5-二氟-4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(125 mg，0.311 mmol)及(E)-4-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(130.9 mg，0.358 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(88 mg，45%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.94(d,J=8.4 Hz,1H),7.56(d,J=16.8 Hz,1H),7.46-7.42(m,4H),7.04-6.99(m,2H),6.92(d,J=7.6 Hz,1H),6.53(t,J=7.6 Hz,1H),5.95(d,J=7.6 Hz,1H),4.48(s,2H),4.08-3.84(bm,4H),3.49-3.35(bm,5H),2.26-2.23(m,1H),2.21-2.17(m,1H)；MS ESI 513.3[M+H]+,[C30H26F2N4O2+H]+之計算值513.21。
旋光度[α]23 D=-121°(c 0.34,MeOH)。
實施例A131.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(490 mg，1.07 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)甲胺(321.7 mg，1.12 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈灰白色固體狀之標題化合物(297 mg，46%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.90(d,J=8.0 Hz,1H),7.68(d,J=7.6 Hz,2H),7.50-7.42(m,5H),7.08-7.03(m,2H),6.93(d,J=8.4 Hz,1H),6.55(t,J=7.6 Hz,1H),5.96(d,J=7.6 Hz,1H),4.30(s,2H),4.01(t,J=4.8 Hz,2H),3.67(t,J=5.2 Hz,2H),3.35-3.31(m,4H),2.86(s,6H),2.21-2.20(m,1H),2.17-2.14(m,1H)；MS ESI 493.4[M+H]+,[C31H32N4O2+H]+之計算值493.26。
[α]23 D=-169°(c 0.36,MeOH)。
實施例A132.(1R,2S)-5'-甲氧基-2-(3-(3-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=8 mL/4 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)及(E)-4-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(184 mg，0.56 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(163 mg，67%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.89(d,J=8.4 Hz,1H),7.72(s,1H),7.67(d,J=7.6 Hz,1H),7.50-7.37(m,5H),6.93(d,J=8.4 Hz,1H),6.80(d,J=8.4 Hz,1H),6.56(dd,J=8.4 Hz,J=2.4 Hz,1H),5.56(d,J=2.0 Hz,1H),4.37(s,2H),4.10-4.08(m,2H),3.82-3.71(m,2H),3.45-3.35(m,2H),3.32(t,J=8.2 Hz,1H),3.25-3.15(m,5H：s,3H at 3.20 ppm及m,2H重疊),2.20-2.10(m,2H)；MS ESI 507.3[M+H]+,[C31H30N4O3+H]+之計算值507.2。
旋光度[α]22 D=-89°(c 0.34,MeOH)。
實施例A133.(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-(3-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(66 mg，0.2 mmol)、4-(3-溴苄基)嗎啉(56 mg，0.22 mmol)、Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL，0.4 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在150℃下微波處理30分鐘。粗混合物通過微濾器，接著藉由prep-HPLC純化，得到呈淡黃色泡沫狀之標題化合物(50 mg，40%)。NMR指示13%分支鏈異構體。光譜資料與實施例A132中所獲得之資料相同。
實施例A134. (1R,2S)-2-(3-(3-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=8 mL/4 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(161 mg，0.56 mmol)獲得呈淺黃色固體狀之標題化合物(89 mg，38%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.93(d,J=8.4 Hz,1H),7.73(s,1H,部分與位於7.70 ppm之峰重疊),7.70(d,J=8.0 Hz,1H,部分與位於7.73 ppm之峰重疊),7.52-7.45(m,4H),7.40(d,J=7.6 Hz,1H),7.96(d,J=8.4 Hz,1H),6.82(d,J=8.4 Hz,1H),6.58(dd,J=8.4 Hz,J=2.4 Hz,1H),5.57(d,J=2.4 Hz,1H),4.34(s,2H),3.33(t,J=8.8 Hz,部分與MeOH殘餘物重疊,1H),3.23(s,3H),2.89(s,6H),2.22-2.12(m,2H)；MS ESI 465.3[M+H]+,[C29H28N4O2+H]+之計算值465.2。
旋光度[α]22 D=-82°(c 0.38,MeOH)。
實施例A135. (1R*,2S*)-2-(3-(3-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向粗(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.2 mmol)、1-(3-溴苯基)-N,N-二甲基甲胺(43 mg，0.2 mmol)、Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL，0.4 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理30分鐘。使其通過微濾器，接著藉由prep-HPLC純化，得到呈淡黃色固體狀之標題化合物。NMR指示7%分支鏈異構體(43 mg，37%)。光譜資料與實施例A134中所獲得之資料相同。
實施例A146.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)-3,5-二氟苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(125 mg，0.289 mmol)及(E)-N-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)N-乙基乙胺(122.2 mg，0.347 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(59 mg，31.6%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.99(d,J=8.0 Hz,1H),7.59(d,J=16.8 Hz,1H),7.50-7.45(m,4H),7.03(s,J=8.4 Hz,1H),6.82(d,J=8.4 Hz,1H),6.59(d,J=8.8 Hz,1H),5.57(s,1H),4.46(s,2H),3.37-3.28(m,5H),3.25(s,3H),2.25-2.22(m,1H),2.19-2.17(m,1H),1.26(t,J=11.2 Hz,6H)；MS ESI 529.3[M+H]+,[C31H30F2N4O2+H]+之計算值529.2。
旋光度：[α]23 D=-80°(c 0.65,甲醇)。
實施例A147. (1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((4-甲基哌-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1.,3'-吲哚啉]-2'-酮雙-2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(60.2 mg，0.2 mmol)與1-(4-溴苄基)-4-甲基哌(53.8 mg，0.2 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL)，隨後添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在100℃下微波處理2小時。LC-MS顯示低轉化。再添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)且反應混合物用氬氣淨化且在125℃下微波處理2小時。藉由prep-HPLC純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(23 mg，16%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.99(d,J=8.4 Hz,1H),7.71(d,J=8.0 Hz,2H),7.53-7.46(m,5H),7.05(t,J=7.6 Hz,1H,部分與位於7.04 ppm之峰重疊),7.04(d,J=8.0 Hz,1H,部分與位於7.05 ppm之峰重疊),6.94(d,J=7.6 Hz,1H),6.58(t,J=7.4 Hz,1H),5.99(d,J=8.0 Hz,1H),4.19(s,2H),3.60-3.30(m,9H),2.95(s,3H),2.24(dd,J=7.6 Hz,4.8 Hz,1H),2.18(dd,J=9.0 Hz,J=4.6 Hz,1H)；MS ESI 490.3[M+H]+,[C31H31N5O+H]+之計算值490.3。
實施例A151.(1R,2S)-(E)-2-(3-(3-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=8 mL/4 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(160 mg，0.4 mmol)及(E)-4-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(184 mg，0.56 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(158 mg，67%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ 8.11(s,1H),7.88(d,J=8.4 Hz,1H),7.73(s,1H),7.67(d,J=8.0 Hz,1H),7.50-7.38(m,5H),6.98(t,J=7.8 Hz,1H),6.91(d,J=8.0 Hz,2H),6.48(t,J=7.6 Hz,1H),5.92(d,J=7.2 Hz,1H),4.36(s,2H),4.03(d,J=11.6 Hz,2H),3.76(t,J=12.0 Hz,2H),3.45-3.14(m,5H),2.17-2.08(m,2H)；MS ESI 477.3[M+H]+,[C30H28N4O2+H]+之計算值477.2。
旋光度[α]23 D=-144°(c 0.34,MeOH)。
實施例　A152.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(3-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(60.2 mg，0.2 mmol)與4-(3-溴苄基)嗎啉(51.2 mg，0.2 mmol)於DMF(1.5 mL)中的混合物中添加1Pr2NEt(0.07 mL)，隨後添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。藉由prep-HPLC純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(22 mg，19%)。NMR指示3%分支鏈異構體。光譜資料與實施例A151中所獲得之資料相同。
實施例A160. 2-((1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=8 mL/4 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自2-((1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺(183 mg，0.4 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(161 mg，0.56 mmol)獲得呈淺黃色固體狀之標題化合物(79 mg，33%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.92(d,J=8.4 Hz,1H),7.68(d,J=8.0 Hz,2H),7.50-7.43(m,5H),7.07(t,J=8.2 Hz,1H,部分與位於7.04 ppm之峰重疊),7.04(d,J=9.2 Hz,部分與位於7.07 ppm之峰重疊),6.90(d,J=8.0 Hz,1H),6.60(t,J=7.6 Hz,1H),6.02(d,J=7.6 Hz,1H),4.58-4.54(m,2H),4.30(s,2H),3.39(t,J=8.4 Hz,1H),2.86(s,6H),2.27-2.18(m,2H)；MS ESI 492.3[M+H]+,[C30H29N5O2+H]+之計算值492.2。
實施例A162.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(3-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1R*,2S*)-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(60.2 mg，0.2 mmol)與1-(3-溴苯基)-N,N-二甲基甲胺(42.8 mg，0.2 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL)，隨後添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。藉由prep-HPLC純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(24 mg，22%，TFA鹽)。NMR指示5%之分支鏈異構體。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.99(d,J=8.4 Hz,1H),7.78-7.75(m,2H),7.55-7.49(m,3H),7.47(s,1H),7.41(d,J=7.6 Hz,1H),7.08-7.00(m,2H),6.94(d,J=7.6 Hz,1H),6.57(t,J=7.4 Hz,1H),5.98(d,J=8.4 Hz,1H),4.36(s,2H),3.35(t,J=8.4 Hz,1H,部分與MeOH殘餘物重疊),2.90(s,6H),2.23(dd,J=8.0 Hz,J=4.8 Hz,1H),2.08(dd,J=9.2 Hz,J=4.8 Hz,1H)；MS ESI 435.2[M+H]+,[C28H26N4O+H]+之計算值435.2。
實施例A164.2-((1R*,2S*)-(E)-2-(3-(3-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=2 mL/1 mL，4 mol% Pd(PPh3)4，120℃，2小時)，自2-((1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺(22.9 mg，0.05 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(3-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(21.6 mg，0.075 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(6.9 mg，23%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.4 Hz,1H),7.80(s,1H,部分與位於7.79 ppm之峰重疊),7.79(d,J=9.2 Hz,1H,部分與位於7.80 ppm之峰重疊),7.57-7.52(m,4H),7.42(d,J=7.2 Hz,1H),7.15-7.08(m,2H),6.93(d,J=8.0 Hz,1H),6.64(t,J=7.8 Hz,1H),6.03(d,J=7.6 Hz,1H),4.60(d,J=16.4 Hz,1H),4.55(d,J=17.2 Hz,1H),4.37(s,2H),3.44(t,J=8.6 Hz,1H),2.91(s,6H),2.33-2.24(m,2H)；MS ESI 492.3[M+H]+,[C30H29N5O2+H]+之計算值492.2。
實施例A165. 2-((1R*,2S*)-(E)-2'-側氧基-2-(3-(4-(哌啶-1-基甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=2 mL/1 mL，4 mol% Pd(PPh3)4，120℃，2小時)，自2-((1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-2'-側氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-1'-基)乙醯胺(22.9 mg，0.05 mmol)及(E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(24.6 mg，0.075 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(12 mg，37%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.4 Hz,1H),7.76(d,J=8.4 Hz,2H),7.57-7.50(m,5H),7.15-7.08(m,2H),6.93(d,J=8.0 Hz,1H),6.64(t,J=7.4 Hz,1H),6.03(d,J=7.6 Hz,1H),4.60(d,J=16.8 Hz,1H),4.55(d,J=16.8 Hz,1H),4.30(s,2H),3.52-3.40(m,3H),2.98(t,-J=11.6 Hz,2H),2.32-2.22(m,2H),2.00-1.68(m,5H),1.60-1.46(m,1H)；MS ESI 532.4[M+H]+,[C33H33N5O2+H]+之計算值532.3。
實施例A167. (1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-乙基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=2 mL/l mL，2.5 mol% Pd(PPh3)4，120℃，2小時)，自(1*R,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-乙基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(42.9 mg，0.1 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(29 mg，0.1 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(19.5 mg，34%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.8 Hz,1H),7.76(d,J=8.0 Hz,2H),7.54-7.50(m,4H),7.44(s,1H),7.04(d,J=8.4 Hz,1H),6.86(d,J=8.0 Hz,1H),6.82(d,J=8.0 Hz,1H),5.77(s,1H),4.33(s,2H),3.34(t,J=8.0 Hz,1H,部分與MeOH殘餘物重疊),2.88(s,6H),2.25-2.10(m,4H),0.65(t,J=7.6 Hz,3H)；MS ESI 463.3[M+H]+,[C30H30N4O+H]+之計算值463.2。
實施例A169.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=2 mL/l mL，2.5 mol% Pd(PPh3)4，120℃，2小時)，自(1*R,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(41.5 mg，0.1 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(43 mg，0.15 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(27 mg，48%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.00(d,J=8.4 Hz,1H),7.75(d,J=8.0 Hz,2H),7.53(s,2H,部分與位於7.52 ppm之峰重疊),7.52(d,J=8.8 Hz,2H,部分與位於7.53 ppm之峰重疊),7.46(s,1H),7.03(d,J=8.4 Hz,1H),6.86(d,J=8.0 Hz,1H),6.82(d,J=7.6 Hz,1H),5.83(s,1H),4.33(s,2H),3.32(t,J=8.4 Hz,1H,部分與MeOH殘餘物重疊),2.88(s,6H),2.22-2.13(m,2H),1.88(s,3H)；MS ESI 449.2[M+H]+,[C29H28N4O+H]+之計算值449.2。
實施例A174.(1R*,2S*)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(4-甲基哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向粗(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(97 mg，0.2 mmol)與1-(4-溴苯基)-4-甲基哌(51 mg，0.2 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL)，隨後添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。藉由prep-HPLC純化，隨後於MeOH中濕磨，得到呈白色固體狀之標題化合物(4 mg，3%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD30D)δ8.00(d,J=8.0 Hz,1H),7.57(d,J=8.0 Hz,2H),7.46(s,1H,部分與位於7.44 ppm之峰重疊),7.44(d,J=16.4 Hz,1H,部分與位於7.46 ppm之峰重疊),7.31(d,J=16.8 Hz,1H),7.10-7.00(m,3H),6.84(d,J=8.4 Hz,1H),6.62(d,J=7.2 Hz,1H),5.59(s,1H),4.01-3.00(m,12H),2.99(s,3H),2.30-2.15(m,2H)；MS ESI 506.3[M+H]+,[C31H31N5O2+H]+之計算值506.2。
實施例A175.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(4-甲基哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(36.0 mg，0.083 mmol)與(E)-1-甲基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌(31.9 mg，0.097 mmol)以類似於實施例A51B的方式製備標題化合物。反應混合物用MeOH(3 mL)稀釋且傾注於20 cc PoraPak Rxn Cx濾芯上。用MeOH(20 mL)沖洗後，使用2 M NH3:MeOH(20 mL)溶離標題化合物。在真空中移除溶劑，藉由製備型HPLC純化標題化合物，得到呈TFA鹽形式之標題化合物(黃色固體，23.3 mg，45%)。1H NMR與實施例A174相同；MS ESI 506.3[M+H]+,[C31H31N5O2+H]+之計算值506.3。
實施例A177.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向20 mL微波小瓶中之4-(4-溴苯乙基)嗎啉(731 mg，2.71 mmol)與4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.5 mL，2.95 mmol，1.1當量)之混合物中添加Et3N(0.76 mL，5.4 mmol，2當量)，隨後添加Pd(P t Bu3)2(14 mg，0.027 mmol，1 mol%)。所得混合物用氬氣淨化，接著封蓋且在80℃(油溫)下加熱2小時。冷卻至室溫後，反應物用飽和NaHC03(10mL)、H2O(10 mL)淬滅，用EtOAc(30 mL×2)萃取且經Na2SO4脫水。蒸發溶劑後，殘餘物藉由Biotage管柱系統(EtOAc/hex梯度：0-100%)純化，得到呈白色固體狀之(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯乙基)嗎啉(714 mg，77%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.42(d,J=8.0 Hz,2H),7.38(d,J=19.0 Hz,1H),7.19(d,J=7.8 Hz,2H),6.13(d,J=18.3 Hz,1H),3.75(t,J=4.4 Hz,4H),2.84-2.77(m,2H),2.63-2.56(m,2H),2.53(br,假單峰,4H),1.32(s,12H)。
向20 mL微波小瓶中之(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)與(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯乙基)嗎啉(138 mg，0.4 mmol)於PhCH3/EtOH(8 mL/4 mL)中的混合物中添加1 M Na2CO3(0.8 mL，0.8 mmol)，隨後添加Pd(PPh3)4(23 mg，0.02 mmol，5 mol%)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。冷卻至室溫後，混合物用H2O(20 mL)稀釋，用EtOAc(30 mL×2)萃取且經Na2SO4脫水。移除溶劑後，殘餘物再溶解於DMF(4 mL)中且藉由prep-HPLC純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(115 mg，45%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.90(d,J=8.4 Hz,1H),7.53(d,J=7.2 Hz,2H),7.43(s,1H),7.37(d,J=6.4 Hz,2H),7.28(d,J=7.2 Hz,2H),6.95(d,J=7.6 Hz,1H),6.81(d,J=8.4 Hz,1H),6.57(d,J=7.6 Hz,1H),5.57(s,1H),4.06(d,J=11.2 Hz,2H),3.80(t,J=11.2 Hz,2H),3.56(d,J=11.2 Hz,2H),3.38(t,J=7.6 Hz,2H),3.27-3.12(m,5H),3.09-3.05(m,2H),,2.20-2.10(m,2H)；MS ESI 521.4[M+H]+,[C32H32N4O3+H]+之計算值521.2。
旋光度[α]23 D=-90°(c 0.67,MeOH)。
實施例A178. (1R*,2S*)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向粗(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.2 mmol)與4-(4-溴苯乙基)嗎啉(54 mg，0.2 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL)，隨後添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。混合物藉由prep-HPLC純化，得到呈白色固體狀之標題化合物(36 mg，28%，TFA鹽)。光譜資料與實施例A177中所獲得之資料相同。
實施例A179.(1R*,2S*)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(4-甲基哌-1-羰基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向粗(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(100 mg，0.2 mmol)與(4-溴苯基)(4-甲基哌-1-基)甲酮(56.6 mg，0.2 mmol)於DMF(2 mL)中的混合物中添加iPr2NEt(0.07 mL，0.4 mmol)，隨後添加Pd(OAc)2(2.2 mg，0.01 mmol)及P(o-tol)3(6.7 mg，0.022 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。LC-MS顯示反應不完全，且其在130℃下再微波處理90分鐘。藉由prep-HPLC純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(32 mg，25%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.97(d,J=8.4 Hz,1H),7.71(d,J=8.4 Hz,2H),7.55-7.45(m,5H),7.01(d,J=8.4 Hz,1H),6.83(d,J=8.4 Hz,1H),6.59(dd,J=8.4 Hz,2.4 Hz,1H),5.58(d,J=2.4 Hz,1H),3.65-3.10(m,12H),2.96(s,3H),2.25-2.14(m,2H)；MS ESI 534.4[M+H]+,[C32H31N5O3+H]+之計算值534.3。
實施例A180. (1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=3 mL/1.5 mL，2.5 mol% Pd(PPh3)4，120℃，2小時)，自(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-1'-(2-甲氧基乙基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(92 mg，0.2 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)甲胺(86 mg，0.3 mmol)獲得呈無色黏性油狀之標題化合物(30 mg，25%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.99(d,J=8.4 Hz,1H),7.75(d,J=8.0 Hz,2H),7.55-7.45(m,5H),7.13-7.07(m,2H),7.01(d,J=8.4 Hz,1H),6.61(dd,J=8.0 Hz,1H),6.01(d,J=7.2 Hz,1H),4.32(s,2H),4.05(t,J=5.4 Hz,2H),3.71(t,J=5.6 Hz,2H),3.41-3.35(m,4H),2.89(s,6H),2.28-2.18(m,2H)；MS ESI 493.4[M+H]+,[C31H32N4O2+H]+之計算值493.3。
實施例A182.(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=3 mL/1.5 mL，2.5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(86.2 mg，0.2 mmol)及(E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌(62.8 mg，0.2 mmol)獲得呈黃色固體狀之標題化合物(42 mg，35%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.89(d,J=8.8 Hz,1H),7.50(d,J=8.8 Hz,2H),7.47(s,1H),7.35(d,J=16.8 Hz,1H),7.22(d,J=16.8 Hz,1H),7.02(d,J=8.8 Hz,2H),6.96(d,J=8.4 Hz,1H),6.86(d,J=8.8 Hz,1H),6.60(dd,J=8.6 Hz,J=2.2 Hz,1H),5.58(s,1H),3.49-3.43(m,4H),3.40-3.30(m,5H),3.23(s,3H),2.25-2.15(m,2H)；MS ESI 492.3[M+H]+,[C30H29N5O2+H]+之計算值492.2。
實施例　A185.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-反-2,6-二甲基(N-嗎啉基))甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=9 mL/4.5 mL，2.5 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自三批相同的(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)及順-2,6-二甲基-4-(4-((E)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(150 mg，0.42 mmol)獲得呈帶淺黃色之白色固體狀之標題化合物(445 mg，57%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ 7.75(d,J=8.4 Hz,1H),7.57(d,J=8.0 Hz,2H),7.46(d,J=8.0 Hz,2H),7.42(s,1H),7.35(d,J=16.8 Hz,1H),7.30(d,J=16.4 Hz,1H),6.82(d,J=9.2 Hz,1H,部分與位於6.80 ppm之峰重疊),6.80(d,J=8.8 Hz,部分與位於6.82 ppm之峰重疊),6.51(d,J=8.4 Hz,1H),5.19(s,1H),4.28(s,2H),3.92-3.80(m,2H),3.40-3.30(m,2H),3.27(t,J=8.4 Hz,1H),3.15(s,3H),2.70(t,J=11.4 Hz,2H),2.15-2.05(m,2H),1.18(d,J=6.0 Hz,6H)；MS ESI 535.3[M+H]+,[C33H34N4O3+H]+之計算值535.3。
旋光度[α]23 D=-91°(c 0.31,MeOH)。
實施例A186.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-反-2,6-二甲基(N-嗎啉基))甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
向(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(431 g，1 mmol)、(E)-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-乙烯基)苯甲醛(284 mg，1.1 mmol)於PhCH3/EtOH(8 mL/4 mL)中之混合物中添加1 M Na2CO3(2 mL，2 mmol)，隨後添加Ph(PPh3)4(29 mg，0.025 mmol)。所得混合物用氬氣淨化，接著在125℃下微波處理2小時。水性處理(用EtOAc萃取)且移除溶劑後，將殘餘物再溶解DCE/THF(45 mL/15 mL)中。添加順-2,6-二甲基嗎啉(115 mg，1 mmol)及NaBH(OAc)3(254 mg，1.2 mmol)，隨後添加AcOH(0.2 mL)。所得混合物在室溫下攪拌3小時且用飽和NaHCO3(20 mL)、H2O(20 mL)、飽和鹽水(20 mL)淬滅。溶液用EtOAc(60 mL×2)萃取且經Na2SO4脫水。移除溶劑後，殘餘物藉由prep-HPLC純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(132 mg，經2個步驟20%)。光譜資料與實施例A185中所獲得之資料相同。
實施例A187.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(4-乙基哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=6 mL/6 mL，2.5 mol%Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自三批相同的(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)及(E)-1-乙基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌(不純，205 mg，0.6 mmol)獲得(prep-HPLC，隨後於MeOH中濕磨)呈白色固體狀之標題化合物(414 mg，55%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.96(d,J=8.4 Hz,1H),7.53(d,J=8.4 Hz,2H),7.45(s,1H),7.41(d,J=16.8 Hz,1H),7.28(d,J=16.8 Hz,1H),7.03-6.98(m,3H),6.83(d,J=8.4 Hz,1H),6.60(dd,J=8.4 Hz,2.0 Hz,1H),5.59(d,J=2.0 Hz,1H),3.91(d,J=12.8 Hz,2H),3.66(d,J=11.6 Hz,2H),3.35(t,J=8.4 Hz,1H,部分與MeOH殘餘物重疊),3.29(q,J=7.2 Hz,2H,部分與位於3.25 ppm之峰重疊),3.25(s,3H,部分與位於3.29 ppm及3.20 ppm之峰重疊),3.20(t,J=11.8 Hz,2H,部分與位於3.25 ppm之峰重疊),3.08(t,J=12.2 Hz,2H),2.25-2.15(m,2H),1.39(t,J=7.2 Hz,3H)；MS ESI 520.4[M+H]+,[C32H33N5O2+H]+之計算值520.3。
旋光度[α]23 D=-108°(c 0.37,MeOH)。
實施例A188.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-(4-乙基哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=3 mL/1.5 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(86.2 mg，0.2 mmol)及(E)-1-乙基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌(75 mg，0.22 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(53 mg，42%，TFA鹽)。光譜資料與實施例A187中所獲得之資料相同。
實施例A189.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-(4-異丙基哌-1-基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=3 mL/1.5 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(86.2 mg，0.2 mmol)及(E)-1-異丙基-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)哌(78.3 mg，0.22 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(85 mg，66%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.99(d,J=8.8 Hz,1H),7.57(d,J=8.0 Hz,2H),7.46(s,1H,部分與位於7.44 ppm之峰重疊),7.44(d,J=16.4 Hz,1H,部分與位於7.46 ppm之峰重疊),7.31(d,J=16.4 Hz,1H),7.08-7.00(m,3H),6.84(d,J=8.4 Hz,1H),6.61(d,J=8.0 Hz,1H),5.59(s,1H),3.96(d,J=13.6 Hz,2H),3.65-3.55(m,3H),3.40-3.30(m,6H),3.08(t,J=9.0 Hz,2H),2.26-2.15(m,2H),1.43(d,J=5.6 Hz,6H)；MS ESI 534.4[M+H]+,[C33H35N5O2+H]+之計算值534.3。
實施例A190. (1R*,2S*)-2-(3-((E)-2-(2-乙基異吲哚啉-5-基)乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=3 mL/1.5 mL，5 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(86.2 mg，0.2 mmol)及粗(E)-2-甲基-5-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)異吲哚啉(73.0 mg，0.24 mmol)獲得呈淺黃色半固體狀之標題化合物(54 mg，46%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.93(d,J=8.4 Hz,1H),7.61(s,1H,部分與位於7.60 ppm之峰重疊),7.60(d,J=8.0 Hz,1H,部分與位於7.61 ppm之峰重疊),7.48-7.37(m,4H),6.90(d,J=8.4 Hz,1H),6.83(d,J=8.4 Hz,1H),6.59(dd,J=8.4 Hz,1.6 Hz,1H),5.58(d,J=1.2 Hz,1H),4.95-4.80(m,2H),4.60-4.54(m,2H),3.50(q,J=7.2 Hz,2H),3.31(t,1H,與MeOH殘餘物重疊),3.24(s,3H),2.23-2.13(m,2H),1.44(t,J=7.2 Hz,1H)；MS ESI 477.3[M+H]+,[C30H28N4O2+H]+之計算值477.2。
實施例A194.(1R,2S)-(E)-5'-甲氧基-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙氧基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=4.5 mL/9 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，125℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(431 mg，1 mmol)及((E)-4-(2-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)乙基)嗎啉(359 mg，1 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(431 mg，66%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.72(d,J=8.4 Hz,1H),7.40-7.34(m,3H),7.22(d,J=16.4 Hz,1H),7.10(d,J=16.4 Hz,1H),6.89(d,J=8.0 Hz,2H),6.80(d,J=10.0 Hz,1H,部分與位於6.78 ppm之峰重疊),6.78(d,J=9.2 Hz,1H,部分與位於6.80 ppm之峰重疊),6.49(d,J=8.4 Hz,1H),5.55(s,1H),4.31(s,2H),4.05-3.97(m,4H),3.62-3.50(m,4H),3.30-3.15(m,3H；t,J=8.2 Hz,1H與m重疊,2H),3.12(s,3H),2.10-2.00(m,2H)；MS ESI 537.4[M+H]+,[C32H32N4O4+H]+之計算值537.2。
旋光度[α]23 D=-85°(c 0.24,MeOH)。
實施例A195.(1R,2S)-(E)-5'-甲基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=4.5 mL/9 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(415 mg，1 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(329 mg，1 mmol)獲得呈黃色固體狀之標題化合物(470 mg，78%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.73(d,J=8.4 Hz,1H),7.53(d,J=8.0 Hz,2H),7.44(d,J=8.0 Hz,2H),7.38(s,1H),7.32(d,J=16.8 Hz,1H),7.27(d,J=16.8 Hz,1H),6.82(d,J=8.4 Hz,1H),6.77(d,J=8.0 Hz,1H),6.73(d,J=8.0 Hz,1H),5.78(s,1H),4.29(s,2H),3.99(d,J=11.2 Hz,2H),3.75(t,J=11.6 Hz,2H),3.42-3.32(m,2H),3.21(t,J=8.4 Hz,1H),3.18-3.08(m,2H),2.09-2.01(m,2H),1.72(s,3H)；MS ESI 491.3[M+H]+,[C31H30N4O2+H]+之計算值491.2。
旋光度89°[α]23 D=-89°(c 0.28,MeOH)。
實施例A196.(1R*,2S*)-(E)-5'-甲基-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法，自(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(83 mg，0.2 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(66 mg，0.2 mmol)獲得呈黃色固體狀之標題化合物(27 mg，22%，TFA鹽)。光譜資料與實施例A195中所獲得之資料相同。
實施例A198. (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-順-2,6-二甲基(N-嗎啉基))甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=9 mL/4.5 mL，2.5 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自兩批(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(160 mg，0.4 mmol)及順-2,6-二甲基-4-(4-((E)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(157 mg，0.42 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(284 mg，57%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.74(d,J=8.4 Hz,1H),7.58(d,J=8.0 Hz,2H),7.47(d,J=7.6 Hz,2H),7.40-7.28(m,3H),6.96-6.99(m,2H),6.82(d,J=8.4 Hz,1H),6.40(t,J=7.4 Hz,1H),5.89(d,J=7.6 Hz,1H),4.28(s,2H),3.93-3.80(m,2H),3.34(d,J=13.6 Hz,2H,與MeOH殘餘物重疊),3.24(t,J=7.6 Hz,1H),2.70(t,J=7.4 Hz,2H),2.08(p,J=7.6 Hz,2H),1.18(d,J=6.0 Hz,6H)；MS ESI 505.3[M+H]+,[C32H32N4O2+H]+之計算值505.3。
旋光度[α]23 D=-134°(c 0.27,MeOH)。
實施例A199.(1R,2S)-(E)-2-(3-(3-氟-4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=6 mL/6 mL，2.5 mol%Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(172 mg，0.4 mmol)及(E)-4-(2-氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(145 mg，0.42 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(154 mg，60%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.78(d,J=8.4 Hz,1H),7.52(t,J=7.4 Hz,1H),7.45-7.35(m,4H),7.29(d,J=16.4 Hz,1H),6.87(d,J=8.4 Hz,1H),6.80(d,J=8.4 Hz,1H),6.54(d,J=8.4 Hz,1H),5.56(s,1H),4.40(s,2H),4.10-3.90(m,4H),3.50-3.20(m,5H),3.18(s,3H),2.18-2.08(m,2H)；MS ESI 525.3[M+H]+,[C31H29FN403+H]+之計算值525.2。
旋光度[α]23 D=88°(c 0.27,MeOH)。
實施例A200.(1R,2S)-(E)-2-(3-(3-氟-4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=7 mL/7 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R，2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(200 mg，0.5 mmol)及(E)-4-(2-氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(190 mg，0.55 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(228 mg，75%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.50(d,J=8.4 Hz,1H),7.49(t,J=7.6 Hz,1H),7.40-7.30(m,4H),7.24(d,J=16.8 Hz,1H),6.97-6.82(m,3H),6.42(t,J=7.4 Hz,1H),5.90(d,J=7.6 Hz,1H),4.36(s,2H),4.10-3.70(m,4H),3.50-3.15(m,5H),2.12-2.03(m,2H)；MS ESI 495.3[M+H]+,[C30H27FN4O2+H]+之計算值495.2。
旋光度[α]23 D=-130°(c 0.40,MeOH)。
實施例　A201.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((順-2,6-二甲基哌啶-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=1.5 mL/3 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(80.2 mg，0.2 mmol)及順-2,6-二甲基-1-(4-((E)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(78.5 mg，0.22 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(91 mg，74%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD) δ 7.90(d,J=8.4 Hz,1H),7.68-7.60(s,位於7.51 ppm之1H及d,J=16.8 Hz,位於7.50 ppm之1H重疊,1H),7.64(d,J=8.8 Hz,1H,部分與位於7.66 ppm之峰重疊),7.55-7.38(m,5H),7.00(t,J=7.6 Hz,1H),6.96-6.90(m,2H)；6.50(t,J=7.6 Hz,1H),5.96(d,J=7.2 Hz,1H),4.54(s,1.2H),4.26(s,0.8H),3.60-3.50(m,0.7H),3.28(t,J=8.0,1H,部分與MeOH殘餘物重疊),3.20-3.10(m,1.2H),2.20-2.08(m,2H),1.96-1.35(m,12H)；MS ESI 503.3[M+H]+,[C33H34N4O+H]+之計算值503.3。
旋光度[α]23 D=-133°(c 0.22,MeOH)。
實施例A203. (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((順-2,6-二甲基哌啶-1-基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=1.5 mL/3 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(86.2 mg，0.2 mmol)及順-2,6-二甲基-1-(4-((E)-2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)哌啶(78.5 mg，0.22 mmol)獲得呈白色固體狀之標題化合物(78 mg，60%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.91(d,J=8.4 Hz,1H),7.68-7.63(s,位於7.66 ppm之1H及d,J=16.4 Hz,位於7.66 ppm之1H重疊；2H),7.53(d,J=7.6 Hz,1H),7.50-7.40(m,4H),6.96(d,J=8.0 Hz,1H),6.82(d,J=8.4 Hz,1H),6.57(d,J=8.4 Hz,1H),5.58(s,1H),4.56(s,1.2 H),4.28(s,0.8H),3.60-3.50(m,0.7H),3.31(t,1H,與MeOH殘餘物重疊),3.23-3.13(m,4.3H；OMe及1.3H),2.22-2.12(m,2H),2.00-1.35(m,12H)；MS ESI 533.4[M+H]+,[C34H36N4O2+H]+之計算值533.3。
旋光度[α]23 D=-93°(c 0.27,MeOH)。
實施例A204. (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙氧基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=1.5 mL/3 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(80 mg，0.2 mmol)及(E)-4-(2-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯氧基)乙基)嗎啉(72 mg，0.2 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(94 mg，74%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.83(d,J=8.4 Hz,1H),7.47(d,J=8.0 Hz,2H),7.38(s,1H),7.32(d,J=16.8 Hz,1H),7.19(d,J=16.4 Hz,1H),7.02-6.93(m,3H),6.91(d,J=7.2 Hz,1H,部分與位於6.89 ppm之峰重疊),6.89(d,J=8.0 Hz,1H,部分與位於6.91 ppm之峰重疊),6.48(t,J=7.2 Hz,1H),5.93(d,J=7.6 Hz,1H),4.36(t,J=4.0 Hz,2H),4.10-3.76(m,4H),3.65-3.50(m,4H),3.30-3.18(m,3H),2.15-2.05(m,2H)；MS ESI 507.3[M+H]+,[C31H30N4O3+H]+之計算值507.2。
旋光度[α]23 D=-139°(c 0.29,MeOH)。
實施例A205. (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(2-(N-嗎啉基)乙基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
使用實施例A51B之製備方法(PhCH3/EtOH=1.5 mL/3 mL，2 mol% Pd(PPh3)4，110℃，2小時)，自(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(80 mg，0.2 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯乙基)嗎啉(69 mg，0.2 mmol)獲得呈淡黃色固體狀之標題化合物(89 mg，74%，TFA鹽)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.86(d,J=8.4 Hz,1H),7.50(d,J=7.6 Hz,2H),7.37(d,J=16.4 Hz,2H),7.34(s,1H),7.26(d,J=7.6 Hz,2H),6.97(t,J=7.2 Hz,1H),6.91(d,J=7.2 Hz,2H),6.49(t,J=7.4 Hz,1H),5.94(t,J=7.6 Hz,1H),4.04(d,J=12.0 Hz,2H),3.80(t,J=11.8 Hz,2H),3.54(d,J=12.0 Hz,2H),3.36(t,J=8.8 Hz,2H),3.27(t,J=8.6 Hz,1H),3.15(t,J=11.0 Hz,2H),3.05(t,J=8.4 Hz,2H),2.16-2.06(m,2H)；MS ESI 491.3[M+H]+,[C31H30N4O2+H]+之計算值491.2。
旋光度[α]23 D=-141°(c 0.22,MeOH)。
實施例A206.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(700 mg，1.62 mmol)及(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)乙胺(588.5 mg，1.86 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(448 mg，46%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.02(d,J=8.4 Hz,1H),7.75(d,J=8.0 Hz,2H),7.54-7.49(m,5H),7.04(s,J=8.4 Hz,1H),6.82(d,J=8.0 Hz,1H),6.60(d,J=8.4 Hz,1H),5.58(s,1H),4.36(s,2H),3.36(t,J=8.4 Hz,1H),3.31-3.18(bm,7H),2.26-2.23(m,1H),2.20-2.17(m,1H),1.37(t,J=7.2 Hz,6H)；MS ESI 493.4[M+H]+,[C31H32N4O2+H]+之計算值493.26。
旋光度：[α]22 D=-80°(c 0.286,甲醇)。
實施例　A208.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-氟螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R*,2S*)-5'-氟-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(75 mg，0.178 mmol)及(E)-N,N-二甲基-1(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)甲胺(63.9 mg，0.222 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(42 mg，41.4%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.04(d,J=8.4 Hz,1H),7.77(d,J=8.0 Hz,2H),7.57(s,2H),7.56-7.50(m,3H),7.05(d,J=8.4 Hz,1H),6.91-6.88(m,1H),6.82-6.77(m,1H),5.77(dd,J=8.8 Hz,J=2.4 Hz,1H),4.33(s,2H),3.42-3.38(m,1H),2.88(s,6H),2.32-2.29(m,1H),2.24-2.20(m,1H)；MS ESI 453.2[M+H]+,[C28H25FN4O+H]+之計算值453.2。
實施例A211.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. N-乙基-N-(4-乙炔基苄基)乙胺
在室溫下向4-乙炔基苯甲醛(0.50 g，3.84 mmol)於1,2-二氯乙烷(18.75 mL)中的溶液中添加三乙醯氧基硼氫化鈉(1.22 g，5.76 mmol)。接著在室溫下在N2氛圍下向混合物中添加二乙胺(0.61 mL，5.76 mmol)及乙酸(0.12 mL，1.92 mmol)，且攪拌反應物18小時。反應物用飽和碳酸氫鈉溶液(10 mL)淬滅且攪拌混合物15分鐘。接著添加二氯甲烷(18.75 mL)且分離各層。使用二氯甲烷(10 mL)萃取水層，且合併的有機層用鹽水洗滌且經硫酸鈉脫水。接著在40℃/200毫巴下在真空下移除溶劑。所得油狀殘餘物藉由矽膠管柱層析法使用二氯甲烷：甲醇(100至90:10)梯度純化，得到呈淺黃色黏稠油狀之標題化合物(0.455 g，63.2%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.46(d,J=8.0 Hz,2H),7.76(d,J=7.6 Hz,2H),3.78(s,2H),3.08(s,1H),2.72-2.66(m,4H),1.13(t,J=7.2 Hz,6H)；MS ESI 187.9[M+H]+,[C13H17N+H]+之計算值187.14。
B. (E)-N-乙基-N-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)乙胺
藉由使用N-乙基-N-(4-乙炔基苄基)乙胺(0.70 g，3.73 mmol)及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.62 mL，11.21 mmol)，根據實施例A42A之合成程序合成，得到呈橙黃色油狀之標題化合物(1.02 g，86%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.43-7.35(m,3H),7.30-7.27(m,2H),6.12(d,J=18.4 Hz,1H),3.56(s,2H),2.54-2.49(m,4H),1.32(s,12H),1.04(t,J=7.2 Hz,6H)；MS ESI 316.1[M+H]+,[C29H30BN02+H]+之計算值316.24。
此中間物亦可利用以下方法製備：藉由使用(E)-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛(1.93 g，7.48 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(2.38 g，11.22 mmol)及二乙胺(1.16 mL，11.22 mmol)，根據實施例A211A之合成程序合成，使用Biotage利用SNAP 25g管柱以己烷：乙酸乙酯(100至72:25)梯度純化之後，得到呈淺黃色黏稠油狀之標題化合物(1.55 g，66%)。
D.(1R*,2S*)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(70.0 mg，0.174 mmol)及(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)乙胺(68.76 mg，0.218 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(29 mg，29%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.01(d,J=8.4 Hz,1H),7.76(d,J=8.0 Hz,2H),7.56-7.52(m,4H),7.48(s,1H),7.04(d,J=7.2 Hz,2H),6.93(d,J=7.6 Hz,1H),6.58(t,J=7.2 Hz,1H),5.98(d,J=7.6 Hz,1H),4.36(s,2H),3.29-3.17(m,5H),2.25(t,J=4.8 Hz,1H),2.21-2.17(m,1H),1.37(t,J=7.2 Hz,6H)；MS ESI 463.3[M+H]+,[C30H30N4O+H]+之計算值463.25。
實施例A212.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(600 mg，1.50 mmol)及(E)-N-乙基-N-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)乙胺(589.3 mg，1.87 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(360 mg，42%)。光譜資料與實施例A211D所獲得之資料相同。
旋光度：[α]23 D=-194°(c 0.577,甲醇)。
實施例A215.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)-3,5-二氟苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
將(1R*,2S*)-5'-甲氧基-2-(3-乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(50.0 mg，0.15 mmol)、1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-N,N-二甲基甲胺(41.51 mg，0.165 mmol)、Pd(OAc)2(1.69 mg，0.0075 mmol)、P(oTol)3(5.0 mg，0.016 mmol)及DIPEA(39.0 mg，0.30 mmol)於DMF(1.0 mL)中的混合物密封，且在攪拌下在微波照射下在125℃下加熱2小時。反應物接著用乙酸乙酯(20 mL)及水(5 mL)稀釋且分離各層。水層使用乙酸乙酯(10 mL)萃取，且合併的乙酸乙酯層用鹽水(4.0 mL)洗滌且經硫酸鈉脫水，接著在40℃/100毫巴下真空濃縮，得到淺黃色殘餘物。粗產物藉由prep. HPLC純化，得到呈淺黃色固體狀之標題化合物(9.5 mg，10%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.80(d,J=8.4 Hz,1H),7.47(s,1H),7.43(d,J=16.4 Hz,1H),7.30-7.25(m,3H),6.87(d,J=8.4 Hz,1H),6.79(d,J=8.4 Hz,1H),6.53(d,J=8.8 Hz,1H),5.56(s,1H),4.43(s,2H),3.28(t,J=10.0 Hz,1H),3.19(s,3H),2.96(s,6H),2.18-21.2(m,2H)；MS ESI 501.3[M+H]+,[C29H26F2N4O2+H]+之計算值501.21。
實施例A216.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二甲基胺基)甲基)-3,5-二氟苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.(E)-1-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)-N,N-二甲基甲胺
此中間物經由2種不同的合成方法製備：
方法1. a. 1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-N,N-二甲基甲胺
藉由使用4-溴-2,6-二氟苯甲醛(500 mg，2.26 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(959 mg，4.52 mmol)及2 M二甲胺溶液(2.626 mL，4.52 mmol)，根據實施例A211A之合成程序合成，得到呈無色油狀之標題化合物(452 mg，79%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.09(d,J=6.8 Hz,2H),3.54(s,2H),2.26(s,6H)；MS ESI 249.9[M+H]+,[C9H10BrF2N+H]+之計算值249.0。
b. 1-(4-乙炔基-2,6-二氟苯基)-N,N-二甲基甲胺
在氬氣氛圍下將1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-N,N-二甲基甲胺(0.45 g，1.79 mmol)、三甲基矽烷基乙炔(0.356 mL，2.24 mmol)、Pd(PPh3)2Cl2(50.49 mg，0.071 mmol)、CuI(3.42 mg，0.017 mmol)及DIPEA(0.46 mL，2.69 mmol)於DMF(3.0 mL)中的混合物密封，且在攪拌下在微波照射下在100℃下加熱2小時。反應物用甲醇(9 mL)稀釋且濾出所得沈澱物。在真空下在45℃/75毫巴下濃縮母液，得到褐色黏稠油狀物。殘餘物利用Biotage使用SNAP 25g管柱以己烷：乙酸乙酯(100至80:20)梯度純化，得到呈黃色油狀之三甲基矽烷基醚(0.250 g，52%)；MS ESI 268.0[M+H]+,[C14H19F2NSi+H]+之計算值268.13。
在室溫下，在甲醇(10 mL)及10% K2CO3溶液(1.67 mL)中脫除上述三甲基矽烷基醚之保護基歷時1.5小時。在低於40℃下在真空中移除溶劑，接著在室溫下添加水(5 mL)。使用二氯甲烷(2×15 mL)萃取產物，且合併的有機層用鹽水洗滌且經硫酸鈉脫水。在40℃/200毫巴下在真空下移除溶劑，得到淡褐色油狀物，利用Biotage使用SNAP 25g管柱以己烷：乙酸乙酯(100至75:75)梯度)純化，得到黃色油狀物(98 mg，54%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.04(d,J=6.8 Hz,2H),3.68(s,2H),3.17(s,1H),2.35(s,6H)；MS ESI 195.8[M+H]+,[C11H11F2N+H]+之計算值195.09。
c.　(E)-1-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)-N,N-二甲基甲胺
藉由使用1-(4-乙炔基-2,6-二氟苯基)-N,N-二甲基甲胺(97 mg，0.496 mmol)及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.21 mL，1.488 mmol)，根據實施例A42A之合成程序合成，利用Biotage使用KPNH SNAP 25 gm管柱以己烷：乙酸乙酯(100至50:50)梯度純化之後得到呈褐色半固體狀之標題化合物(67 mg，41%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.24(d,J=18.4 Hz,1H),6.99(d,J=7.6 Hz,2H),6.13(d,J=18.4 Hz,1H),3.57(s,2H),2.28(s,6H),1.32(s,12H)；MS ESI 324.2[M+H]+,[C17H24BrF2NO2+H]+之計算值323.19。
方法2 a.　(E)-2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛
藉由使用4-溴-2,6-二氟苯甲醛(1.10 g，4.98 mmol)及4,4,5,5-四甲基-2-乙烯基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.97 mL，5.72 mmol)，根據實施例A51A之合成程序合成，得到呈無色油狀之標題化合物(1.10 g，76%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ10.31(s,1H),7.05(d,J=9.6 Hz,2H),7.22(d,J=8.8 Hz,1H),6.28(d,J=18.8 Hz,1H),1.33(s,12H)；MS ESI 295.1[M+H]+,[C15H17BF2O3+H]+之計算值295.13。
b.　(E)-1-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)-N,N-二甲基甲胺
藉由使用(E)-2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛(1.10 g，3.74 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(1.19 g，5.61 mmol)及2 M二甲胺溶液(3.74 mL，7.48 mmol)，根據實施例A211A之合成程序合成，得到呈無色黏稠油狀之標題化合物(0.571 g，47%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.24(d,J=18.4 Hz,1H),6.99(d,J=7.6 Hz,2H),6.13(d,J=18.4 Hz,1H),3.57(s,2H),2.28(s,6H),1.32(s,12H)；MS ESI 324.2[M+H]+,[C17H24BrF2NO2+H]+之計算值323.19。
B.　(1R,2S)-2(3-(4-((二甲基胺基)甲基)-3,5-二氟苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(500 mg，1.15 mmol)及(E)-1-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯基)-N,N-二甲基甲胺(393.4 mg，1.21 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(400 mg，56.1%)。光譜資料與實施例A215中所獲得之資料相同。
旋光度：[α]22 D=-88°(c 0.354,甲醇)。
實施例A217.(1R*,2S*)-(E)-2-(3-(3,5-二氟-4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A. 1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-嗎啉
藉由使用4-溴-2,6-二氟苯甲醛(1.0 g，4.52 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(1.438 g，6.78 mmol)及嗎啉(0.59 mL，6.78 mmol)，根據實施例A211A之合成程序合成，得到呈淺黃色油狀之標題化合物(1.30 g，98.4%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.09(d,J=6.4 Hz,2H),3.69(d,J=4.4 Hz,4H),3.63(s,2H),2.49(bm,4H)；MS ESI 292.1[M+H]+,[C11H12BrF2NO+H]+之計算值293.0。
B. 1-(4-乙炔基-2,6-二氟苯基)-嗎啉
藉由使用1-(4-溴-2,6-二氟苯基)-嗎啉(1.32 g，4.51 mmol)，根據實施例A216A方法1b之合成程序合成，得到呈淡褐色油狀之標題化合物(0.65 g，60%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.02(d,J=7.2 Hz,2H),3.71-3.67(m,6H),3.16(s,1H),2.50(bm,4H)；MS ESI 238.0[M+H]+,[C13H13F2NO+H]+之計算值238.10。
C.　(E)-4-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉
藉由使用1-(4-乙炔基-2,6-二氟苯基)嗎啉(0.97 g，4.08 mmol)及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(1.78 mL，12.24 mmol)，根據實施例A42A之合成程序合成，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(1.21 g，81%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.23(d,J=18.4 Hz,1H),6.99(d,J=7.6 Hz,2H),6.13(d,J=18.4 Hz,1H),3.59-3.66(m,6H),2.51(bm,4H),1.32(s,12H)；MS ESI 366.1[M+H]+,[C19H26BF2NO3+H]+之計算值366.2。
D.　(1R*,2S*)-2-(3-(3,5-二氟-4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R*,2S*)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(60 mg，0.139 mmol)及(E)-N-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(58.44 mg，0.16 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(29 mg，27%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.03(d,J=8.8 Hz,1H),7.63(d,J=16.8 Hz,1H),7.52-7.49(m,4H),7.06(s,J=8.4 Hz,1H),6.82(d,J=8.4 Hz,1H),6.60(d,J=8.8 Hz,1H),5.57(s,1H),4.51(s,2H),4.10-3.72(bm,4H),3.47-3.42(bm,5H),3.26(s,3H),2.26-2.23(m,1H),2.21-2.17(m,1H)；MS ESI 543.3[M+H]+,[C31H28F2N4O3+H]+之計算值543.22。
實施例A218.(1R,2S)-(E)-2-(3-(3,5-二氟-4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
根據實施例A51B之方法，藉由用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-5'-甲氧基螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(600 mg，1.50 mmol)及(E)-N-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(579.6 mg，1.06 mmol)替換，合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(345 mg，40%)。光譜資料與實施例A217中所獲得之資料相同。
旋光度：[α]22 D=-74°(c 0.34,甲醇)。
實施例A219.(1R*,2S*)-(E)-5'-氟-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R*,2S*)-5'-氟-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(60.0 mg，0.139 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(54.83 mg，0.173 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(31.0 mg，37%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ8.04(d,J=8.8 Hz,1H),7.77(d,J=7.2 Hz,2H),7.59-7.52(m,5H),7.05(d,J=8.0 Hz,1H),6.91-6.88(m,1H),6.79(t,J=8.0 Hz,1H),5.74(d,J=8.8 Hz,1H),4.39(s,2H),4.08-4.05(bm,2H),3.76-3.70(bt,2H),3.42-3.35(m,3H),3.26-3.23(bm,2H),2.30(t,J=5.6 Hz,1H),2.24-2.20(m,1H)；MS ESI 495.3[M+H]+,[C30H27FN4O2+H]+之計算值495.22。
實施例A220.(1R*,2S*)-(E)-5'-氟-2-(3-(4-((N-嗎啉基)甲基)苯乙烯基-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-5'-氟-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(240 mg，0.571 mmol)及(E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)嗎啉(216.7 mg，0.658 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(230 mg，66%)。光譜資料與實施例A219所獲得之資料相同。
旋光度：[α]22 D=-136°(c 0.404,甲醇)。
實施例A221.(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)-3,5-二氟苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
A.　N-(4-溴-2,6-二氟苄基-)N-乙基乙胺
藉由使用4-溴-2,6-二氟苯甲醛(610 mg，2.76 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(883.35 mg，4.15 mmol)及二乙胺(425.21 mmL，4.15 mmol)，根據實施例A211A之合成程序合成，得到呈無色油狀之標題化合物(660 mg，86%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.06(d,J=6.4 Hz,2H),3.61(s,2H),2.55-2.50(m,4H),1.07(t,J=6.8 Hz,6H)；MS ESI 279.9[M+H]+,[C11H14BrF2N+H]+之計算值278.03。
B.　N-乙基-N-(4-乙炔基-2,6-二氟苄基)乙胺
藉由使用N-(4-溴-2,6-二氟苄基-)N-乙基乙胺(660 mg，2.37 mmol)，根據實施例A216A方法1b之合成程序合成，得到呈淡褐色油狀之標題化合物(252 mg，48%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ6.99(d,J=7.2 Hz,2H),3.67(s,2H),3.13(s,1H),2.57-2.51(m,4H),1.08(t,J=7.2 Hz,6H)；MS ESI 224.0[M+H]+,[C13H15F2N+H]+之計算值224.12。
C .　(E)-N-(2,6-二氟-(4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)N-乙基乙胺
藉由使用N-乙基-N-(4-乙炔基-2,6-二氟苄基)乙胺(252 mg，1.12 mmol)及4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊烷(0.493 mL，3.36 mmol)，根據實施例A42A之合成程序合成，得到呈乳白色半固體狀之標題化合物(410 mg，90%)。1H NMR(400 MHz,CDCl3)δ7.24(d,J=13.2 Hz,1H),6.97(d,J=7.6 Hz,2H),6.12(d,J=17.6 Hz,1H),3.67(s,2H),2.58-2.52(m,4H),1.32(s,12H),1.08(t,J=6.8 Hz,6H)；MS ESI 352.2[M+H]+,[C27H26N6O2+H]+之計算值351.22。
此中間物亦可利用以下方法製備：藉由使用(E)-2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苯甲醛(1.10 g，3.74 mmol)、三乙醯氧基硼氫化鈉(1.19 g，5.61 mmol)及二乙胺(0.58 mL，5.61 mmol)，根據實施例A211A之合成程序合成，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(0.54 g，41%)。
C.　(1R,2S)-2-(3-(4-((二乙基胺基)甲基)-3,5-二氟苯乙烯基)-1H-吲唑-6-基)螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮2,2,2-三氟乙酸鹽
藉由使用(1R,2S)-2-(3-碘-1H-吲唑-6-基)-螺[環丙烷-1,3'-吲哚啉]-2'-酮(125 mg，0.311 mmol)及(E)-N-(2,6-二氟-4-(2-(4,4,5,5-四甲基-1,3,2-二氧雜硼雜環戊-2-基)乙烯基)苄基)-N-乙基乙胺(131.4 mg，0.373 mmol)，根據實施例A51B之方法合成標題化合物。藉由製備型HPLC純化，得到呈乳白色固體狀之標題化合物(54 mg，28.4%)。1H NMR(400 MHz,CD3OD)δ7.98(d,J=8.0 Hz,1H),7.59(d,J=16.4 Hz,1H),7.55-7.45(m,4H),7.04(d,J=8.0 Hz,2H),6.92(d,J=8.0 Hz,1H),6.55(t,J=7.6 Hz,1H),5.96(d,J=7.6 Hz,1H),4.46(s,2H),3.35-3.28(m,5H),2.24-2.21(m,1H),2.19-2.15(m,1H),1.42(t,J=6.8 Hz,6H)；MS ESI 499.4[M+H]+,[C30H28F2NO4+H]+之計算值499.23。
旋光度：[α]22 D=-126°(c 0.46,甲醇)。
實施例B：PLK4抑制檢定
活性PLK4以人類PLK4之殘基1-391的胺基端GST融合物形式自大腸桿菌表現系統純化。經澄清之細胞萃取物在15℃下誘導隔夜後，使用麩胱甘肽瓊脂糖凝膠滲透層析及離子交換(Resource Q)自其純化蛋白質。所得蛋白質用λ磷酸酶(NEB目錄號P0753)去磷酸化，且使用麩胱甘肽瓊脂糖凝膠自磷酸酶解析。去磷酸化GST-PLK4在使用前以等分試樣儲存於-80℃下。
使用間接ELISA偵測系統量測PLK4活性。去磷酸化GST-PLK4(4 nM)於預先塗佈MBP的96孔微量滴定板(Millipore目錄號30-011)中，在15μM ATP(Sigma目錄號A7699)、50 mM HEPES-Na2+ pH 7.4、10 mM MgCl2、0.01% Brij 35(Sigma目錄號03-3170)存在下培育。讓反應進行30分鐘，隨後板用洗滌緩衝液(50 mM TRIS-Cl pH 7.4及0.2% Tween 20)洗滌5次，且與一次抗體(Cell Signaling目錄號9381)之1:3000稀釋液一起培育30分鐘。板用洗滌緩衝液洗滌5次，在與辣根過氧化酶偶合的二次抗體(BioRad目錄號1721019，1:3000濃度)存在下培育30分鐘，用洗滌緩衝液再洗滌5次，且在TMB受質(Sigma目錄號T0440)存在下培育。讓比色反應持續5分鐘，隨後添加停止溶液(0.5 N硫酸)，且使用單色板讀取器或基於濾光片之板讀取器(分別為Molecular Devices M5或Beckman DTX880)藉由在450 nm下偵測來定量。
在固定濃度(10μM)下或在可變的抑制劑濃度(在10點劑量反應滴定中典型地為50μM至0.1μM)下測定化合物抑制作用。化合物在酶存在下預培育15分鐘，隨後添加ATP，且利用上述活性檢定定量保留之活性。利用下式測定化合物抑制%：抑制%=100×(1-(實驗值-背景值)/(高活性對照-背景值))。使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)使用下式確定IC50值：(A+(B/(1+((x/C)^D))))，其中A=背景值，B=範圍，C=拐點，D=曲線擬合參數。
實施例C：PLK1抑制檢定
使用來自Invitrogen之Z-Lyte檢定套組(目錄號PV3802)測定PLK1抑制。使用製造商說明書之建議，使用25μM ATP及8 nM PLK1(Invitrogen目錄號PV3501)執行檢定。根據製造商之說明測定抑制%值，且使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)獲得IC50值。
實施例D：PLK2抑制檢定
使用來自Invitrogen之Z-Lyte檢定套組(目錄號PV3802)測定PLK2抑制。使用製造商說明書之建議，使用60μM ATP及133 nM PLK2(Invitrogen目錄號PV4204)執行檢定。根據製造商之說明測定抑制%值，且使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)獲得IC50值。
實施例E：PLK3抑制檢定
使用來自Invitrogen之Z-Lyte檢定套組(目錄號PV3802)測定PLK3抑制。使用製造商說明書之建議，使用100 μM ATP及21 nM PLK3(Invitrogen目錄號PV3812)執行檢定。根據製造商之說明測定抑制%值，且使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)獲得IC50值。
實施例F：Aurora A抑制檢定
使用來自Invitrogen之Z-Lyte檢定套組測定Aurora A抑制。使用製造商說明書之建議，使用20μM ATP及12 nM Aurora A(Invitrogen目錄號PV3612)執行檢定。根據製造商之說明測定抑制%值，且使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)獲得IC50值。
實施例G：Aurora B抑制檢定
使用來自Invitrogen之Z-Lyte檢定套組測定Aurora B抑制。使用製造商說明書之建議，使用128 μM ATP及28 nM Aurora B(Invitrogen目錄號PV3970)執行檢定。根據製造商之說明測定抑制%值，且使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)獲得IC50值。
在表1中，PLK4、Aurora A及Aurora B激酶之IC50值分別以「A」表示IC50值小於或等於0.1 μM；以「B」表示IC50值大於0.1μM且小於或等於1μM；及以「C」表示IC50值大於1μM。在1μM劑量下的相對抑制百分比分別以「X」表示相對抑制百分比等於或大於50%抑制及以「Y」表示相對抑制百分比小於50%抑制。如表1中所示，本發明之諸多化合物為有效的PLK4抑制劑。對於PLK1、PLK2及PLK3，實施例A22及A23在10μM下未顯示大於50%抑制。另外，本發明之諸多化合物亦抑制Aurora激酶，尤其Aurora B激酶。
實施例H：FLT3抑制檢定
使用來自Invitrogen之Z-Lyte檢定套組(Invitrogen目錄號PV3191)測定FLT3之酶活性。使用製造商說明書之建議，使用117.5μM ATP及1 nM FLT3(Invitrogen目錄號PV3182)執行檢定。根據製造商之說明測定抑制%值，且使用非線性4點邏輯曲線擬合(XLfit4，IDBS)獲得IC50值。在表2中，所選本發明之化合物抑制FLT3之IC50值分別以「A」表示IC50值小於或等於0.1μM；以「B」表示IC50值大於0.1μM且小於或等於1μM；及以「C」表示IC50值大於1μM。
實施例I：激酶選擇性檢定
所選本發明之化合物針對一組45種不同激酶的抑制活性由CEREP(France)評估。使用如由CEREP所記錄之標準HTRF檢定方法針對以下激酶之人類直系同源物執行檢定：Abl激酶、Akt1/PKBa、AMPKa、BMX激酶(Etk)、Brk、CaMK2a、CaMK4、CDC2/CDK1(cycB)、CHK1、CHK2、c-Met激酶、CSK、EphB4激酶、ERK1、ERK2(P42mapk)、FGFR2激酶、FGFR4激酶、FLT-1激酶(VEGFR1)、FLT-3激酶、Fyn激酶、IGF1R激酶、IRK(InsR)、JNK2、KDR激酶(VEGFR2)、Lck激酶、Lyn激酶、MAPKAPK2、MEK1/MAP2K1、p38a激酶、p38d激酶、p38g激酶、PDGFRb激酶、PDK1、PKA、PKCa、PKCb1、PKCb2、PKCg、Ret激酶、ROCK2、RSK2、Src激酶、Syk及TRKA(表3)。利用下式確定抑制%：抑制%=100×(1-(實驗值-背景值)/(高活性對照-背景值))。
上表3顯示實施例A2及A24在10μM濃度下所獲得之抑制百分比值。自此抑制資料中顯而易見，本發明之化合物抑制某些激酶，例如Abl、CSK、FLT-3、Lck、Lyn、Ret及TRKA激酶。此等活性可使此等化合物具有治療效益。
所選本發明之化合物針對一組284種不同激酶的抑制活性由Millipore公司評估。利用下式確定抑制%：抑制%=100×(1-(實驗值-背景值)/(高活性對照-背景值))。
上表4顯示實施例A42在0.1 μM濃度下所獲得之抑制百分比值。在該組284種激酶中，表4中僅報導顯示在0.1 μM下大於50%抑制的實施例。自此抑制資料中顯而易見，本發明之化合物抑制某些激酶，例如Abl、Arg、AurA、AurB、FGFR3、TrkA及TRKB激酶。此等活性可使此等化合物具有治療效益。
實施例J：本發明之化合物之癌細胞株資料
乳癌細胞(MCF-7，MDA-MB-468，HCC1954)、結腸癌細胞(SW620)及肺癌細胞(A549)連同人類乳腺上皮原生細胞(HMEC)一起接種(視細胞生長速率而定，每孔每80μl接種1000至4000個)於96孔板中，24小時後以化合物覆蓋。化合物於100% DMSO中製備為10 mM儲備溶液，用含有10% FBS(胎牛血清)的DMEM(杜貝科氏改良型伊格爾氏培養基(Dulbecco's Modified Eagle's Medium))細胞生長培養基(Invitrogen,Burlington,ON,Canada)稀釋至50 nM至250μM範圍內之濃度。各濃度之等分試樣(20μl)覆蓋於預先接種於96孔板中之80μl細胞上，形成10 nM至50μM之最終濃度。細胞培養5天，隨後執行磺醯羅丹明B(Sulforhodamine B；SRB)檢定，以測定化合物之細胞生長抑制活性。
磺醯羅丹明B(購自Sigma,Oakville,ON,Canada)為一種水溶性染料，其結合細胞蛋白質之鹼性胺基酸。因此，對所結合染料進行比色量測可估算與細胞數目有關的總蛋白質質量。藉由輕緩抽吸出培養基且每孔添加50μl冰冷10%三氯乙酸(TCA)且在4℃下培育30-60分鐘來使細胞原位固定。板用水洗滌五次且風乾5分鐘。向各孔中添加50μl SRB於1%(v/v)乙酸中的0.4%(w/v)溶液且在室溫下培育30分鐘，完成染色反應。染色之後，板用1%乙酸洗滌4次以移除未結合染料，且接著風乾5分鐘。染色劑用每孔100μl之10mM Tris pH 10.5溶解。在570 nm下讀取吸光度。
藉由與僅以DMSO處理之細胞(100%)比較來計算相對生長抑制百分比(%)。測定具有細胞毒性活性之化合物的GI50。使用GraphPad PRISM軟體(GraphPad Software公司,San Diego,CA,USA)計算GI50。GI50(生長抑制)為引起細胞生長50%抑制的化合物濃度。
在下表5中，提供若干化合物實施例針對內腔乳癌細胞株(MCF-7)、兩種基底乳癌細胞株(MDA-MB-468，HCC1954)、肺癌細胞株(A549)、結腸癌細胞株(SW-620)及原生乳房細胞(HMEC)的GI50值範圍。實施例化合物針對內腔乳癌及基底乳癌細胞、肺癌及結腸癌之癌細胞顯示不同生長抑制/細胞殺傷活性。一般而言，此等化合物針對正常細胞顯示較低或極低活性，如HMEC所例示。GI50範圍分別以「A」表示GI50值小於或等於0.1μM；以「B」表示GI50值大於0.1μM且小於或等於1μM；以「C」表示GI50值大於1μM且小於或等於10μM；及以「D」表示GI50值大於10μM。
除如上所述測試之細胞株外，已針對擴展組檢定所選化合物。此等細胞株包括：乳癌細胞株(T47 D，MDA-MB-231，HS578T，BT474，SKBR3，HCC1954)、肺癌細胞株(H358)、腦癌細胞株(A172，Hs683，SK-N-SH)、結腸癌細胞株(Colo 205，CT-15，HCT116+/-，HCT116+/+)、卵巢癌細胞株(OVCAR-3，SK-OV-3，SW 626)、黑色素瘤細胞株(518A2)、前列腺癌細胞株(PC-3)及永生化乳房細胞株(184A1)。使用上述磺醯羅丹明B檢定(SRB)來針對擴展組檢定測試化合物(表6)。GI50範圍分別以「A」表示GI50值小於或等於0.1μM；以「B」表示GI50值大於0.1μM且小於或等於1μM；以「C」表示GI50值大於1μM且小於或等於50μM；及以「D」表示GI50值大於50μM。
實施例K：試管內血管生成檢定
本發明之某些化合物針對受體酪胺酸激酶(RTK)(諸如FGFR2、VEGFR1、VEGFR2及PDGFDβ)展現微莫耳濃度及亞微莫耳濃度活性。針對此等RTK的活性可產生與腫瘤生長減緩及/或腫瘤消退相關的抗血管生成活性。為量測本發明之化合物之抗血管生成作用，在如下所述的血管生成檢定中測試所選實施例。應注意，化合物實施例A23在亞微莫耳濃度下顯示抗血管生成作用(圖1)。
自美國菌種保藏中心(American Type Culture Collection)獲得HUV-EC-C細胞(ATCC，CRL-1730)，且在早期繼代時用於檢定。根據製造商建議使用試管內血管生成檢定套組(Chemicon)。將ECMatrix之冰冷混合物轉移至預先冷卻的96孔板中。基質溶液凝固後(在37℃下培育>1小時)，將8,000個細胞與適當濃度的抑制劑(於100微升EGM-2中)混合且塗鋪於各孔中。對於臨床抗血管生成作用，使用Sutent作為與本發明之化合物A13相比較的陽性對照物。在37℃下培育4小時後，檢查管形成。使用圖案識別與分支點計數兩種方法定量血管生成進展且表示為對照管計數之百分比(圖1)。
雖然本發明已參考其例示性具體實例詳細展示並描述，但熟習此項技術者應瞭解，可在不背離隨附申請專利範圍所涵蓋之本發明範疇下於其中作出形式及細節上的不同改變。
圖1展示化合物A23在HUV-EC細胞管形成檢定中之抗血管生成作用。

Claims (14)

  1. 一種化合物，其係由以下結構式表示： 或係其醫藥學上可接受之鹽，其中：Ra為甲氧基、甲基或乙基；R4為-H、甲基、乙基、2-甲氧基乙基或-CH2CONH2；及R6為-CH=CH-(未經取代或經取代之苯基)；其中該-CH=CH-(苯基)中的苯基是未經取代的或經一或多個獨立地選自由以下者所組成的群組的取代基取代：鹵素、C1-6烷基、C1-6鹵烷基、(C1-6胺基烷基)、(C1-6烷基胺基)C1-6烷基、(苯基)C1-6烷基、胺基、C1-6烷基胺基、-(CH2)0-3-N-哌啶基、-(CH2)0-3-N-嗎啉基、-(CH2)0-3-N-吡咯啶基、-(CH2)0-3-N-哌基與-(CH2)0-3-N-吖基，其中該N-哌基在N’上是未經取代的或是經C1-6烷基或C1-6醯基取代。
  2. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係由以下結構式表示： 或係其醫藥學上可接受之鹽。
  3. 如申請專利範圍第1項之化合物，其中該化合物係由以下結構式表示： 或係其醫藥學上可接受之鹽。
  4. 一種化合物，其係由以下結構式表示： 或係其醫藥學上可接受之鹽。
  5. 一種化合物，其係由以下結構式表示： 或係其醫藥學上可接受之鹽。
  6. 一種醫藥組成物，其包含醫藥學上可接受之載劑及如申請專利範圍第1至5項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽。
  7. 如申請專利範圍第6項之醫藥組成物，其進一步包含另一治療劑，其中該另一治療劑為抗癌藥物。
  8. 一種如申請專利範圍第1至5項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製備用以治療癌症的醫藥品，其中該癌症係選自由肺癌、乳癌或結腸癌所組成之群組。
  9. 如申請專利範圍第8項之用途，其中該癌症為乳癌。
  10. 如申請專利範圍第9項之用途，其中該癌症為基底(basal)亞型乳癌或內腔(luminal)B亞型乳癌。
  11. 如申請專利範圍第10項之用途，其中該癌症為過度表現PLK4的基底亞型乳癌。
  12. 如申請專利範圍第9項之用途，其中該癌症為基底亞型乳癌，其為ER、HER2及PR陰性乳癌。
  13. 如申請專利範圍第8至12項中任一項之用途，其進一步包含共投予另一治療劑，其中該另一治療劑為抗癌藥物。
  14. 一種有效量之如申請專利範圍第1至5項中任一項之化合物或其醫藥學上可接受之鹽之用途，其係用於製備用以治療患有癌症之個體的醫藥品，其中該癌症係選自由肺癌、乳癌或結腸癌所組成之群組。
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