BR112012025496A2 - composto inibidor quinase, composição farmacêutica que o compreende e seu uso - Google Patents

composto inibidor quinase, composição farmacêutica que o compreende e seu uso Download PDF

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Abstract

COMPOSTO INIBIDORES QUINASE, COMPOSIÇÃO FARMACÊUTICA QUE O COMPREENDE E SEU USO. A presente invenção refere-se a um composto representado pela seguinte fórmula estrutural e seus sais farmaceuticamente aceitáveis: Os compostos representados por esta fórmula estrutural são inibidores da quinase e, por conseguinte, são aqui divulgados para o tratamento de câncer. Definições para as variáveis da fórmula estrutural são aqui proporcionadas. A presente invenção também se refere a uma composição farmacêutica que compreende o referido composto, bem como aos usos do referido composto para tratar câncer e para fabricar um medicamento para tratar câncer.

Description

* Relatório Descritivo da Patente de Invenção para "INIBIDO-
RES QUINASE E MÉTODOS PARA TRATAR CÂNCER COM OS MESMOS". Referência Cruzada a Pedidos de Patente Relacionados Este pedido reivindica o benefício dos Pedidos Provisórios U.S. Nº 61/321.332, depositado em 06 de abril de 2010 e 61/321.329, depositado em 06 de abril de 2010. Este pedido também reivindica o benefício do Pedi- do Internacional Nº. PCT/CAZ010/000518, depositado em 06 de abril de
2010. Os ensinamentos inteiros destes três pedidos estão aqui incorporados porreferência. * Fundamentos da Invenção ' A proteína quinase tem sido objeto de estudo extensivo na pes- ' quisa de novos agentes terapêuticos em várias doenças, por exemplo, o câncer. Proteínas quinases são conhecidas para mediar a transdução de sinalintracelular, efetuando uma transferência de fosforila de um trifosfato de nucleosídeo para um aceitador de proteína que está envolvido em um per- curso de sinalização. Há um número de quinases e percursos através dos quais estímulos extracelulares e outros provocam uma variedade de respos- tas celulares para ocorrem no interior da célula.
A família da quinase tipo pólo (PLK) de serina/treonina quinases compreende pelo menos quatro membros conhecidos: PLK1, PLK2 (também conhecido como Snk), PLK3 (também conhecido como Fnk ou Prk) e PLK4 (também conhecido como Sak). PLKA é o membro menos compreendido e mais divergente da família PLK. O domínio catalítico N-terminal de PLKA4 tem uma especificidade de substrato diferente de PLK1-3. PLKA4 também tem um C-terminal divergente compreendendo apenas uma sequência caixa de polo, e não as sequências de PB em tandem em PLK1-3, que parece atuar como um domínio de homodimerização em vez de um domínio de localização (Lowery et ai,, (2005) Oncogene 24: 248-259).
PLK4 é conhecida por estar envolvida no controle de entrada e saída de mitose, e um regulador de duplicação de centrossoma (Habedanck et al. Nature Cell Biology 7: 1140-1146, 2005). Transcrições de PLK4 au-
- mentam da fase S a M, e a proteina é ubiquitilada e destruída pelo complexo de promoção da anafase (APC) (Hudson et al. Curr. Biol. 11: 441-446, 2001; Fode et al. Mol. Cell. Biol. 16: 4665-4672, 1996). PLKA é necessária para a progressão mitótica tardia (Fode et al., PNAS 91: 6388-6392, 1994; Hudson etal Curr. Biol. 11: 441-446, 2001), a sobrevivência das células e o desen- volvimento embrionário pós-gastrulação (Hudson et al. Curr. Biol. 11: 441- 446, 2001). Camundongos knockout PLK4 são letais embrionários(E7.5), com um aumento acentuado na mitose e células apoptóticas(Hudson et al. Curr. Biol. 11: 441-446, 2001). PLK4 é transcricionalmente reprimida por p53 (Lietal. Neoplasia 7: 312-323, 2005). A repressão é provavelmente mediada através do recrutamento de repressores de histona desacetilase (HDAC) e repressão parece contribuir para a apoptose induzida por p53 (Li et al. Neo- ' plasia 7: 312-323, 2005). PLK4 tem sido relatada como sendo sobre-expressa em tumores —colorretais com expressão relatada como baixa na mucosa intestinal adja- cente normal (Macmillian et al. Ann. Surg. Oncol. 8: 729-740, 2001). Além disso, MRNA PLK4 tem sido relatada como sendo sobre-expressa em algu- mas linhagens celulares tumorais(Hitoshi, et al., Pedido de Patente U.S. Nº. US 2003/0027756). Além disso, as requerentes descreveram sobre- expressão de PLK4 em tumores tipo basais em um Pedido Provisório co- pendente US Nº. 61.003.825, depositado em 20 de novembro, 2007 (todos os ensinamentos dos quais são aqui incorporados por referência).
PLKA tem sido relatada como sendo sobre-expressa em tumores colorretais com expressão relatada como baixa em mucosa intestinal adja- cente normal (Macmillian et al. Ann. Surg. Oncol. 8: 729-740, 2001). Além disso, MRNA PLKA4 tem sido relatada como sendo sobre-expressa em algu- mas linhagens celulares tumoraiS(Hitoshi, et al., Pedido de Patente US Nº. US 2003/0027756) Além disso, as requerentes descreveram Sobre- expressão de PLKA4 em tumores tipo basais em um Pedido Provisório co- pendente US Nº. US 61.003.825, depositado em 20 de novembro, 2007 (to- dos os ensinamentos dos quais são aqui incorporados por referência). As oncoproteinas do papilomavírus humano (HPV-16) E7 são
* sobre-expressas em cânceres anogenitais e de orofaringe associados ao HPV. A oncoproteina E7 desencadeia sobre-duplicação de centrossoma através de uma via que envolve a formação simultânea de múltiplos filhos em um único centríolo materno. A oncoproteína E7 do HPV-16 tem sido utili- zadacomo uma ferramenta para dissecar biogênese de centríolo anormal e várias linhagens de evidência identificam PLK4 como um jogador crucial neste processo (Duensing et al. Environ. Mol. Mutagen. 50: 741-747, 2009) Além disso, um aumento do nível de transcrição de PLK4 é encontrado em queratinócitos que expressam estavelmente a E7 de HPV-16. À capacidade de E7 DE HPV-16 para sobrerregular MRNA PLKA4 foi encontrada depen- . dendo da sua capacidade para degradar a proteina do retinoblastoma (pRb), sugerindo um papel de transcrição do gene mediado por E2F na desregula- ' ção do PLKA (Korzeniewski et al, AACR Meeting, Washington, 2010, Resu- mo. 5354). Estes resultados identificam PLK4 como um alvo para uma inibi- ção de molécula pequena para evitar anormalidades de centríolos, infideli- dade mitótica e progressão maligna de cânceres associados a HPV.
Assim, os agentes que inibem a proteína quinase, em particular em PLKA, têm o potencial para o tratamento do câncer. Há uma necessidade de agentes adicionais que podem atuar como inibidores da proteína quinase, em bparticular os inibidores de PLKA. Sumário da Invenção As requerentes descobriram agora que certos compostos espiro ciclopropil indolinona são potentes inibidores da quinase, tais como quinase tipo pólo 4 (PLK4) e quinases Aurora (ver Exemplo B e F). As requerentes também agora descobriram que estes compostos espiro ciclopropil indolino- na têm potente atividade anticancerígena (ver Exemplo J) e exibem atividade anti-angiogênica (exemplo K). Com base nestas descobertas, os compostos espiro ciclopropil indolinona, suas composições farmacêuticas e métodos de tratamento do câncer com os compostos espiro ciclopropil indolinona são — aquidivulgados.
Uma modalidade da invenção é um composto representado pela fórmula estrutural (1) ou (II):
- R$
NS ns C=N a , RENDA R E" | eme HH H DD X Sm nO HH Pr 2 YR N Rº Rº o o o (a. Os sais farmaceuticamente aceitáveis do composto de fórmula estrutural (1) e (II) também são incluídos na invenção. As variáveis nestas - fórmulas estruturais são a seguir definidas: Rº é -F, metóxi, metila ou etila; ii 5 Rº é —H, metila, etila, 2-metoxietila ou -CHXCONH;z; e R$ é -C=C-(fenila opcionalmente substituída). Valores alternativos para as variáveis nas fórmulas estruturais (1) e (II) são fornecidos abaixo: Rº é -F, metóxi, metila ou etila; Rº é -H ou metila; e Rº é —C=C-(fenila), em que a fenila em -CH=CH-(fenila) é opcionalmente substituída por um ou mais substituintes independentemente selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio C1.6 alquila, C1.6 haloalquila, (C1.5s aminoalquila), (C1-.5 alquilamino)C1.6 alquila, (C1.6 dialquila- mino)C;« alquila, (fenil)C,.6 alquila, amino, C1.6 alquilamino, C1.6 dialquilami- no, -(CH)).a-N-piperidinila, -(CH2)o.a-N-morfolinila, -(CH2)o.a-N-pirrolidinila, -(CH2)o.a-N-piperazinila e (CH2)a.3-N-oxazepanila, em que a N-piperazinila é opcionalmente N'-substituída por C1.5 alquila ou C1.5 acila. Em outra modali- dade, a invenção é qualquer um dos compostos descritos na seção de e- xemplificação como um composto neutro ou um sal farmaceuticamente acei- tável do mesmo. Em outra modalidade, a presente invenção é uma composição farmacêutica compreendendo: |) um composto representado pela fórmula estrutural (1), um
> composto representado pela fórmula estrutural (II), um composto descrito na exemplificação ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de qual- quer um dos anteriores, e ii) um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável.
Uma outra modalidade da invenção é um método de tratamento de um indivíduo com câncer que compreende à administração à pessoa de uma quantidade terapeuticamente eficaz de um composto representado pela fórmula estrutural (1), um composto representado pela fórmula estrutural (11), um composto representado na exemplificação ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de qualquer um dos anteriores. - Uma outra modalidade da invenção é um método para inibir a Aurora B e/ou PLKA4, em um indivíduo com necessidade de inibição de Au- ' rora B e/ou PLK-4, que compreende a administração à pessoa de uma quan- tidade terapeuticamente eficaz de um composto representado pela fórmula estrutural (1), um composto representado pela fórmula estrutural (11), um composto descrito na exemplificação ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo de qualquer um dos anteriores. Uma outra modalidade da invenção é o uso de um composto re- presentado pela fórmula estrutural (1), um composto representado pela fór- mula estrutural (Il), um composto descrito na exemplificação ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo de qualquer um dos anteriores. Alter- nativamente, a terapia é para inibir Aurora B e/ou PLK-4, em um indivíduo com necessidade de inibição de Aurora B e/ou PLKA. Uma outra modalidade da invenção é o uso de um composto re- presentado pela fórmula estrutural (1), um composto representado pela fór- mula estrutural (II), um composto descrito na exemplificação ou um sal far- Mmaceuticamente aceitável do mesmo de qualquer um dos anteriores. Uma outra modalidade da invenção é o uso de um composto re- presentado pela fórmula estrutural (1), um composto representado pela fór- mula estrutural (II), um composto descrito na exemplificação ou um sal far- maceuticamente aceitável do mesmo de qualquer dos precedentes para a fabricação de um medicamento para inibir Aurora B e/ou PLKA, em um indi-
* víduo com necessidade de inibição de Aurora B e/ou PLKA. Breve Descrição dos Desenhos A figura mostra o efeito antiangiogênese de compostos A23.
Descrição Detalhada da Invenção Exemplos específicos de compostos da invenção incluem os e- xemplificados nos exemplos abaixo, seus estereoisômeros e sais farmaceu- ticamente aceitáveis.
Nas fórmulas estruturais aqui descritas, quando um átomo de hi- drogênio (s) está representado em uma posição específica (s) do anel aro- mático(s)da fórmula estrutural (s), nenhuma substituição é permitida nessa - (naquela) posição particular (s). Formas tautoméricas existem quando um composto é uma mis- ' tura de dois ou mais compostos estruturalmente distintos que estão em equi- líbrio rápido. Certos compostos da presente invenção existem como formas tautoméricas. Por exemplo, o seguinte composto englobado dentro fórmula estrutural (1) incluí, pelo menos, as seguintes formas tautoméricas: Rh ui s Ro Ss H x H NH H. H (O (O H le o e ou . (Forma indolinona) (forma indolo!) Deve ser entendido que quando uma forma tautomérica de um composto é descrita pelo nome ou estrutura, todas as formas tautoméricas dos compostos estão incluídas.
Os compostos da invenção contêm pelo menos dois centros qui- rais e um ciclopropano e, portanto, existem como estereoisômeros, tais co- mo isômeros sobre o ciclopropano (isto é, isômeros cis/trans), os enanciô- meros e/ou diastereômeros. Quando os compostos da invenção são repre-
sentados ou nomeados sem indicar a estereoquímica, deve ser entendido que ambas as formas estereoquimicamente puras(por exemplo, cis puro ou trans puro, enanciomericamente puro ou diastereomericamente puro) e mis- turas estereoisoméricas estão abrangidas. Por exemplo, os compostos re- presentados pela fórmula estrutural (1) possuem isômeros "cis" e "trans" mostrados abaixo: ú ú Pa ou > Eloi D " d OS " (=) = d a " (=) . | A | A É
Z É . Vos h PANA é o o anel A e anel B são cis; e (Roor1 (R)oor1t “e o “ o
A A H We, Ná iv, á a (e) R o (e) CR 2e-Re
ANS HANS anel A e anel B são trans. A expressão "anel A e anel B são cis" significa que o anel A e anelB estão ambos no mesmo lado do ciclopropano enquanto que a ex- pressão "anel A e anel B são trans" significa que o anel A e anel B estão em diferentes lados do ciclopropano. Os estereoisômeros da variedade cis/trans são também referidos como isômeros geométricos. Por conseguinte, os compostos da presente invenção representados pela fórmula estrutural (1) incluem o isômero cis puro, o isômero trans puro e as suas misturas, incluin- do misturas cis/trans enriquecidas no isômero cis geométrico e misturas
* cis/ftrans enriquecidas no isômero geométrico trans. Por exemplo, a fórmula estrutural (11) representa uma relação cis entre o anel A e B. Deve ser enten- dido que ambas as formas cis e trans de fórmulas estruturais (1) em relação a anéis A e B estão englobadas no âmbito da invenção.
Quando um isômero geométrico é descrito pelo nome ou estrutu- ra, deve ser entendido que a pureza isomérica geométrica do isômero geo- métrico representado ou nomeado é, pelo menos, 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ou 99,9% puro em peso. Pureza isomérica geométrica é determinada dividindo-se o peso do isômero geométrico nomeado ou ilustrado na mistura como peso totalde ambos os isômeros geométricos na mistura. - A mistura racêmica significa 50% de um enanciômero e 50% é correspondente do enanciômero. A invenção abrange todos os enanciôme- ' ros puros, enantiomericamente enriquecidos, diastereômeroicamente puros, isômero enriquecido diastereomericamente, e as misturas racêmicas, e mis- turas diastereoméricas dos compostos da invenção.
As misturas enantioméricas e diastereoméricas podem ser re- solvidas nos seus componentes enanciômeros ou estereoisômeros, por mé- todos bem conhecidos, tais como cromatografia de fase quiral, cromatografia de gás quiral em fase líquida de alta eficiência, cristalizando o composto co- moum complexo de sal quiral ou cristalizando o composto em um solvente quiral. Os enanciômeros e diastereômeros podem também ser obtidos a par- tir de intermediários diastereomérica ou enantiomericamente puros, reagen- tes e catalisadores bem conhecidos por métodos sintéticos assimétricos.
Quando um composto é designado por um nome ou estrutura que indica um único enanciômero, a menos que indicado de outra forma, o composto é, pelo menos, 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ou 99,9% opticamente puro (também referido como "enantiomericamente puro”). A pureza óptica é o peso, na mistura do enanciômero nomeado ou ilustrado dividido pelo peso total da mistura de ambos os enanciômeros.
Quando a estereoquímica de um composto divulgado é nomea- da ou ilustrada pela estrutura, e a estrutura nomeada ou representada a- brange mais do que um estereoisômero (por exemplo, como em um par di-
* astereomérico), deve ser entendido que um dos estereoisômeros engloba- dos ou qualquer mistura dos estereoisômeros abrangidos estão incluídos. Deve ser ainda entendido que a pureza estereoisomérica dos estereoisôme- ros nomeados ou representados, pelo menos, 60%, 70%, 80%, 90%, 99% ou99,9% em peso. A pureza estereoisomérica, neste caso, é determinada dividindo-se o peso total da mistura dos estereoisômeros abrangidos pelo nome ou a estrutura pelo peso total da mistura de todos os estereoisômeros. Incluídos na invenção estão os sais fammaceuticamente aceitá- veis dos compostos aqui divulgados. Os compostos divulgados têm grupos amino básicos e, consequentemente, podem formar sais farmaceuticamente - aceitáveis com ácidos farmaceuticamente aceitáveis (s). Os sais de adição de ácido farmaceuticamente aceitável dos compostos da invenção incluem : sais de ácidos inorgânicos (tais como ácido clorídrico, bromídrico, fosfórico, metafosfórico, nítrico e sulfúrico) e ácidos orgânicos(tais como, ácido acéti- co, benzenossulfônico, benzóico, cítrico, etanossulfônico, fumárico, glucôni- co, glicólico, málico, isetiônico, láctico, lactobiônico, maléico, metanossulfô- nico, succínico, p-toluenossulfônico, e tartárico). Os compostos da invenção com grupos ácidos, tais como ácidos carboxílicos, podem formar sais farma- ceuticamente aceitáveis com uma base farmaceuticamente aceitável(s). Os sais de base farmaceuticamente aceitáveis adequados incluem sais de a- mônio, sais de metais alcalinos(tais como sais de sódio e potássio) e sais de metais alcalino terrosos(tais como sais de magnésio e de cálcio). Os com- postos com um grupo amônio quaternário também contêm um contra-ion tal como cloreto, brometo, iodeto, acetato, perclorato e similares. Outros exem- plosdetaissais incluem cloridratos, bromidratos, sulfatos, metanossulfona- tos, nitratos, maleatos, acetatos, citratos, fumaratos, tartaratos [por exemplo, (+)-tartaratos, (-)-tartaratos ou suas misturas incluindo misturas racêmicas], succinatos, benzoatos e sais com aminoácidos, tais como ácido glutâmico. O termo "halo", tal como aqui utilizado, designa halogênio e in- — cluiflúor, cloro, bromo e iodo.
Um "grupo alifático" é acíclico, não aromático, consiste exclusi- vamente em carbono e hidrogênio e pode opcionalmente conter uma ou
* mais unidades de insaturação, por exemplo, ligações duplas e/ou triplas. Um grupo alifático pode ser de cadeia linear ou ramificada. Um grupo alifático contém tipicamente entre cerca de um e cerca de vinte átomos de carbono, tipicamente entre cerca de um e cerca de dez átomos de carbono, mais tipi- camente entre cerca de um e cerca de seis átomos de carbono. Um "grupo alifático substituído" é substituído em qualquer um ou mais "átomos de car- bono substituíveis". Um "átomo de carbono substituível", em um grupo alifá- tico é um átomo de carbono no grupo alifático que é ligado a um ou mais átomos de hidrogênio. Um ou mais átomos de hidrogênio podem ser opcio- —nalmente substituídos por um grupo substituinte adequado. Um "grupo halo- - alifático” é um grupo alifático, tal como definido acima, substituído por um ou mais átomos de halogênio. ' O termo "alquila" utilizado sozinho ou como parte de uma porção maior, tal como "alcóxi", "haloalquila", “arilalquil", "alguilamina", "dialquiami- na", "alquilamino”, "dialquiamino”", "alquilcarbonila", "alcóxicarbonila" e seme- lhantes, significa grupo saturado de cadeia reta e alifático ramificado. Como usado aqui, um grupo C1-C6 alquila é referido como "alquila inferior". Simi- larmente, os termos "alcóxi inferior", "haloalquila inferior", "arilalquila inferior", "alquilamina inferior", "dialquiamina inferior", "alguilaminoinferior", "dialquia- mino inferior", "alquilcarbonila inferior”, "alcoxicarbonila inferior" incluem ca- deias saturadas, retas ou ramificadas contendo um a seis átomos de carbo- no.
O termo "alquenila" significa grupo alifático de cadeia linear ou ramificada, possuindo pelo menos uma ligação dupla.
O termo "alquinila" significa um grupo alifático de cadeia linear ou ramificada possuindo pelo menos uma ligação tripla.
O termo "alcóxi" significa -O-alquila; "hidroxialquila" significa um grupo alquila substituido por hidroxila; "aralquila" significa um grupo alquila substituído por um grupo arila; "alcoxialquila" significa um grupo alquila subs- tituído por um grupo alcóxi, "alquilamína" significa amina substituída por um grupo alquila; "cicloaiquitalquila" significa um grupo alquila substituído por cicloalquila; "dialquilamina" significa amina substituída por dois grupos alqui-
s * la; "alguilcarbonila" significa -C(O)-R, em que R é um grupo alquila; "alcoxi- carbonila" significa C(O)OR, em que R é alquila, e em que alquila é como definida acima.
Os termos "haloalquila" e "haloalcóxi" significa um grupo alquila oualcóxi, conforme o caso, substituído por um ou mais átomos de halogê- nio. O termo "halogênio" significa F, CI, Br ou |. De preferência, o halogênio em uma haloalquila ou haloalcóxi é F. O termo "grupo acila" significa -C(O)R, em que R é um grupo al- quila opcionalmente substituído ou um grupo arila (por exemplo, fenila op- cionalmente substituída). R é de preferência um grupo alquita não substituí- , da ou fenila. Um "grupo alquileno" é representado por - [CH3]z, em que z é ] um número inteiro positivo, de preferência um a oito, mais preferivelmente um a quatro. Um "alquenileno" é um grupo alquileno em que um metileno foi substituído por uma ligação dupla.
O termo "grupo arila", usado por si só ou como parte de uma porção maior como em "aralquila", "aralcóxi" ou "arilaxialquila", significa um anel carbocíclico aromático. O termo "arila" pode ser utilizado alternadamen- tecomo termo "anel arila" “anel aromático carbocíclico", "grupo arila" e “grupo aromático carbocíclico". Um grupo arila tem tipicamente 6-14 átomos de anel. Exemplos incluem fenila, naftila, antracenila, 1,2-di-hidronafítila, 1,2,3,4-tetra-hidronaftila, fluorenila, indanila, indenila e semelhantes. Um "grupo arila substituído" é substituído em qualquer um ou mais átomo de anel substituível, que é um átomo de carbono do anel ligado a um hidrogê- nio.
O termo "cicloalquila" refere-se a um sistema de anel de hidro- carboneto monocíclico ou policíclico saturado. Por exemplo, um grupo ciclo- alquila Cs.7 inclui, mas não se limita a ciclopentila, ciclo-hexila ou ciclopentila, cadaumdos quais é opcionalmente substituído.
Os termos "heteroarila", "heteroaromático", "anel heteroarila", "grupo heteroarila”, "anel heteroaromático", e "grupo heteroaromático", utili
« * zados isoladamente ou como parte de uma porção maior como em "heteroa- ralquila" ou "heteroarilalcóxi", refere-se a grupos aromáticos tendo 5-14 áto- mos de anel selecionados a partir de carbono e pelo menos um (tipicamente 1 a4, mais tipicamente 1 ou 2) heteroátomoS(por exemplo, nitrogênio, oxi- gênioou enxofre). "Heteroarila" inclui anéis monocíclicos e anéis policíclicos em que um anel heteroaromático monocíclico é fundido a um ou mais outros anéis aromáticos carbocíclicos ou heteroaromáticos. Como tal, a "heteroarila de 5-14 membros" inclui sistemas de anéis monocíclicos, bicíclicos ou tricí- clicos.
Exemplos de grupos heteroarila de 5-6 membros, monocíclicos - incluem furanila (por exemplo, 2-furanila, 3-furanila), imidazolila (por exem- plo, N-imidazolila, 2-imidazolila, 4-imidazolila, 5-imidazolila), isoxazolila (por ' exemplo, 3-isoxazolila, 4-isoxazolila, S-isoxazolila), oxadiazolila (por exem- plo, 2-oxadiazolila, S-oxadiazolila), oxazolila (por exemplo, 2-oxazolila, 4-oxazolila, S-oxazolila), pirazolila (por exemplo, 3-pirazolila, 4-pirazolila), pirrolila (por exemplo, 1-pirrolila, 2-pirrolila, 3-pirrolila), pirídila (por exemplo, 2-piridila, 3-piridila, 4-piríidila), pirimidinila (por exemplo, 2-pirimidinila, 4-pirimidinila, S-pirimidinila), piridazinila (por exemplo, 3-piridazinila), tiazolila (por exemplo, 2-tiazolila, 4-tiazolila, 5-tiazolila), triazolila (por exemplo, 2- triazolila, S-triazolila), tetrazolila (por exemplo, tetrazolila), tienila (por exem- plo, 2-tienila, 3-tienila), pirimidinila, piridinila e piridazinila. Exemplos de gru- pos heteroarila aromáticos policíclicos incluem carbazolila, benzimidazolila, benzotienila, benzofuranila, indolila, quinolinila, benzotriazolila, benzotiazoli- la, benzoxazolila, benzimidazolila, isoquinolínila, indolila, isoindolila, acridini- la, ou benzisoxazolila. Um "grupo heteroarila substituído" é substituído em quaisquer um ou mais átomo do anel substituíveis, que é um átomo de car- bono do anel ou de nitrogênio do anel ligado a um átomo de hidrogênio.
O termo "grupo heterociclila" ou o termo "grupo heterocíclico” significa um anel monocíclico, não aromático com 3 a 10 membros contendo de 1-3 heteroátomos no anel ou um anel policícliico com anel com 7 a 20 membros e 14 heteroátomos no anel, onde o anel policíclico tendo um ou mais anéis heterocíclicos monocíclicos não aromáticos fundidos com um ou mais anéis aromáticos ou heteroaromáticos.
Em uma modalidade, o grupo heterocíclico é um anel bicíclico tendo um anel heterocíclico monocíclico não aromático fundido com um grupo fenila.
Grupo heterocíclico policíclico exemplar inclui hidroisoquinolínita (tal como 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-7- ila,2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-7-ila, 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6- ila e 2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-S-ila), isoindolinila (tal como 2- etilisoindolin-S-ila, 2-metilisoindolin-5-il), indolinila, tetra-hidrobenzo [f] oxa- zepinila (tais como 2,3,4,5-tetra-hidrobenzo [f] [1,4] oxazepin-7-ila). O termo "grupo heterocíclico não aromático" significa um anel monocíclico, não aromático com 3 à 10 membros contendo de 1-3 heteroá- - tomos no anel ou um anel policíclico não aromática com 7 a 20 membros e de 1 a 4 heteroátomos no anel.
Cada heteroátomo selecionado independen- : temente a partir de nitrogênio, átomo de nitrogênio quaternário, nitrogênio oxidado (por exemplo, NO); oxigênio; e enxofre, incluindo o sulfóxido e sul- fona.
O grupo heterocíclico não aromático não substituído pode ser ligado através de um heteroátomo adequado ou átomo de carbono.
Grupos hetero- cíclicos não aromáticos representativos incluem morfolinila, tiomorfolinila, pirrolidinonila, pirrolidinila, piperidinila, piperazinila, hidantoila, valerolactami- la, oxiranila, oxetanila, tetra-hidrofuranila, tetra-hidropiranila, tetra-hidropirin- dinila, tetra-hidropirimidinila, tetra-hidrotiofenila, tetra-hidrotiopiranila e seme- lhantes.
Um "grupo heterocíclico não aromático substituído" é substituído em qualquer um ou mais átomo de anel substítuível, que é um átomo de carbo- no do anel ou anel de nitrogênio ligado a um átomo de hidrogênio.
A menos que de outro modo indicado, os substituintes adequa- dos paraum grupo alifático substituído, grupo arila, grupo heteroarila, e gru- pos heteroarila não aromáticos incluem: à) halogênio -C(OJOR', -C(OJR', -C(S)R', -OC(OJR"-, -C(OINR'R?, -C(SINRIR?, -OC(O)NRIR?, -S(OJR', -S(OLR', -SOsR', -SO2NR'R?, -OR', -SR', -NR'R?, -NR2C(O)R', -NRºS(O)R', -NRºC(O)OR!, -NRºC(O)JONR'R?, -N(RIC(OINRIR?, -NRASOWNRIR?, -NRºSO2R'; -NO>, -CN, -NCS; ou dois substituintes orto tomados em conjunto, formam —O- [CH3]p-O-, SICH2]pS- ou -[CH2]g-; ou ii) um grupo alifático C1.19 opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, -N(R2)2, -C(O)N(R?))2, -C(OIN(R?)2, -NR?C(O)R?', -SO2R”, -SOaN(R)2, -NR?Ú'SO.R”, -NR?C(0)OR?, -OC(O)N(RÓ)>, -NREC(OIN(RZ)2, -NRC(O)ON(R)2, -NRSO2N(RZ)2, -OR?!, -SRº, Cro haloalcóxi, -C(O)R?', -C(0)OR? e -OC(O)R?'; ou iii) (Co-so alquileno) AR', (C2:15 alquenileno)-AR', em que AR é um grupo C6-14 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 membros, cada um opcional e independentemente substituído por um ou mais substituintes se- lecionados de entre o grupo que consiste em halogênio, nitro, ciano, alquila - Cr1109 alquila, C119 haloalquila, (C1109 haloalcóxi) alquila C1-10, (C1-10 alcóxi) alquila C1.19 alquila, C1-,0 hidroxialquila, C119 aminoalquila, (C1-19 alquilamino) ' alquila Crio (Cro dialguilamino) alquila Ciio N(RO)o C(OINIR?), CIOINIR), — NRGC(OIR?, —SORY, SOAN(IR) — NRÚSOR”, NREC(OIN(RZ)2, NRC(O) ON(R)2, NR? SO2N(R?)a, OR?*', SR”', Cr.10 halo- alcóxi, C(O)R2!, C(O)OR?! -OC(O)R?', fenila e heteroarila de 5-6 membros, em que a referida fenila e a referida heteroarila de 5-6 membros são cada uma independente e opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo que consiste em halogênio, hidroxila, nitro, ciano, amino, C,;3 alquila, C13 haloalquila, C1.3, alcóxi e C1.3 haloalcóxi; Cada R' independentemente é: i) hidrogênio; ii) um grupo Ce..4 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 mem- bros, cada um opcional e independentemente substituído por um ou mais —substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, NO>, CN, NCS, Cr-Co alifático, (C1.15 alquileno)-AR', (Ca.,5 alguenileno) AR“º, CIO)ORY, C(OR, C(SIR", “COR, CIOINIR), C(S) NR), CI(OINIR')2, S(OIR?, S(O)LR?, SO3R"?, SO2N(R"')a, OR", SR", N(R"')>, NRUC(OR", — NRUS(O)RE-NRUC(IOOR?, — NR) — CIOINIR!)s, NRSON(R')> e NR SO2R?; ou iii) um grupo C1.19 alifático opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio,
NO>, CN, NCS, AR”, C(0)OR", C(O)R", C(S)R", C(O)R", CIOINIR"")2, C(S) N(R)a, C(OINIR)2, S(OJR”?, S(O0)2R"?, SOsR”?, SO2N(R'')o, OR"º, SR", NR), NRUCIOIR, NRUS(OIR?, NRUC(O)OR?, N(R) C(OINIR")2a, NR 'SON(R'*); e “NRSO2R”, desde que R' seja diferente de hidrogênio, quando o substituinte é S(O)R!-S(O)2R', SOsR', NR2S(O)R' ou NR2SO,R'; e Cada R? é, independentemente, -H ou C1-C6 alquila, ou, toma- dos em conjunto com NR, formam um grupo heterocíclico não aromático, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir - do grupo consistindo em = O, S =, halogênio, nitro, ciano, hidróxi, C1.6 alqui- la, C1.6 haloalquila, C1.6 hidroxialquila, amino, C1.6 alquilamino, C1.6 dialqui- ' lamino, C1. alquila, (C1.6 alquil) C1.6 alquila, (C1.6 dialquilamino) alquila C1.6, (fenil)-C 1.6 alquila, (heteroarila de 5-6 membros) C1.6 alquila, C1.6 alcóxi, C1.6 haloalcóxi, Ci. alquilcarbonilóxi, C,.6 alcóxi, C1.6 alquilcarbonila, fenila e he- teroarila de 5-6 membros; 1) hidrogênio; ii) um grupo Ce.14 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 mem- bros, cada opcional e independentemente substituído por um ou mais substi- tuintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi C1-,9 alquila, C1-19 haloalquila, (C1.10 haloalcóxi) C1.,9 alquila, (alcóxi C1.19) alquila C1.,9 alguila, C1-19 hidroxialquita, aminoalquila C1.10, (C1- 10 alquilamino) alguila Ci-109, (Ci-10 dialquilamino) C1.19 alquila, (fenil)-C1-10 alquila, (heteroarila de 5-6 membros) C1.19 alquila, amino, alquilamino C1.10, Cio dialquilamino, Ci10 alcóxi, C1-109 haloalcóxi, alquilcarbonilóxi C1.10, C1-10 alcoxicarbonila e C1.19 alquilcarbonila, ou iii) um grupo C1-19 alquila opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi Cr.109, haloalquila Cy-109 alcóxi, C1-19 haloalcóxi, a- mino, alquitamino C1-109, C1-10 dialquilamino, C1.19 carbonilóxi, C1-109, alcoxicar- bonila C1-16 alquilcarbonila e fenila, a referida fenila sendo opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo con-
sistindo em halogênio, hidroxila, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloal- quila, C1.3, alcóxi C1.3 e haloalcóxi; Cada R'' é, independentemente, R'º, COSR"º, SOXR'º ou C(O)R", ou NR): tomados em conjunto é um grupo heterocíclico não aro- múático, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em = O, S =, halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi C1.6 alquila, C1.6 haloalquila, C1.5 hidroxialquila, amino, C1.5 alquilami- no, C1.: dialquilamino, C1.. alquila, aminoalquila (Cs alquil) C1.5 alquila, (C1.6 dialquilamino) alquila C1.6, alcóxi Ci.6, C1.6 haloalcóxi, C1.6 alquilcarbonilóxi, - Ca1.6 alcoxicarbonila, e C,.; alguila; e Cada R'? é, independentemente, é R'º, desde que R'? não seja ' hidrogênio; Cada R?' é independentemente hidrogênio, C 1. alquila, fenila ou heteroarila de 5-6 membros, em que cada um dos grupos fenila e heteroarila representados por R?' é independente e opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogê- nio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3, alcóxi C1.3 e haloalcóxi, e em que o grupo alquila representado por R?' é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo que consiste em halogênio, hidróxi, nítro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloal- quila, C1.3 alcóxi e C1.3 alquila, ou N(R?')2 forma um grupo heterocíclico não aromático opcional- mente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do gru- —poconsistindo em halogênio, hidróxi, nítro, ciano, = O, C1.3 alguila, C1.3 halo- alquila, C1.3 alcóxi, C1.3 haloalcóxi e amino; e Cada R* independentemente Cs; alquila, fenila ou heteroarila de 5-6 membros, em que cada um dos grupos fenila e heteroarila represen- tados por Rº? é independente e opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, hidró- xi, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3, alcóxi C,.3 e haloal- cóxi, e em que o grupo alquila representado por R% é opcionalmente substi-
tuído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3, alcóxi C,.3 e haloalcóxi;
cada R independentemente é hidrogênio, C1x05 alifático, fenila ou heteroarilade 5-8 membros, em que o grupo alifático representado por R é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, fenila, hete- roarila de 5-6 membros, C1.6 alcóxi, C1.6 haloalcóxi, e em que cada um dos grupos fenila e heteroarila representados por R, e os substituintes fenila e heteroarila no grupo alifático representados por R são, independentemente, - são opcional e independentemente substituídos por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano,
' amino, C1. alquila, C1.6 haloalquita, C1.6 alcóxi, C1.6 haloalcóxi, ou N(R)2 forma um grupo heterocíclico não aromático opcionalmen- te substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em =O, =S, halogênio, nitro, ciano, hidróxi, C1.6 alquila, C1.e ha- loalquila, C1.6 hidroxialquila, amino, C1.6 alquilamino, C1.5 dialquilamino, C1- C6 aminoalquila, (C1.s alqguilamino) C16 alquila, (C165 dialquilamino) C1.6 alqui- la, (fenil)-C1.5 alquila, (heteroarila de 5-6 membros) C1.5 alquila, C1.e alcóxi, Ci6 haloalcóxi, Cais alquilcarbonilóxi, C1.6 alcóxicarbonilóxi, C1.s alquilcarbo-
nila, fenila, e heteroarila de 5-6 membros;
Ar' é um grupo arila C6-14 ou um grupo heteroarila de 5-14 membros, cada um opcional e independentemente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio,
nitro, ciano, Cyi19 alquila, C1.,9 haloalquila (C1-109 haloalcóxi) C1-19 alquila, (C1- 10 alcóxi) C1.19 alquila, C1.19 hidroxialquila, C1.19 aminoalquila, (C1-109 alquila- mino) Cr.10 alquita, (C1-19 dialquilamino) C110 alquita, N(R2')o, COIN(R")>, CIOINIRZ')a, NR2C(O)RZ, SOR, SON(R?))a, NRSOR?, NRP'C(O) N(R2)2, NRC(0) ON(R)2, NR2'SO2N(R?')o, OR”, SR, Cro haloalcóxi,
C(O)R?!, C(O)OR?!-OC(O)R”', fenila e heteroarila de 5-6 membros, em que a referida fenila e a heteroarila de 5-6 membros, cada um independente e opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a par-
tir do grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C1.3 alqui- la, C13 haloalquila, C1.3 alcóxi e C1.3 haloalcóxi; Cada Ar“, independentemente é um grupo C6-14 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 membros, cada opcional e independentemente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo con- sistindo em halogênio, nitro, ciano, -OH, -SH, -O(C1-10 alquita), -S(C1.109 algui- la), C1-109 alquila, C1-19 haloalquila, (C1-109 haloalcóxi) C1-19 alquila, (C1-10 alcóxi) C1-10 alquila, C1-:9 hidroxialquila, (C1-16 aminoalquila (C1-19 alguilamino) C1.10 alquila, (C1-16 dialquilamino) C1.19 alquila, (fenil)C1.:9 alquila, (heteroarila de 5- 6 membros) C1.,9 alquila, amino, alquitamino C1.109, C1-19 dialquilamino, C1.10 - haloalcóxi, C1-:6 carbonilóxi, C1-:9 alcoxicarbonila, e C;-,9 alquilcarbonila; cada pé 1,2o0u3;e ' cada q é 2, 3,4 ou 5. Outros exemplos de substituintes adequados para um grupo ali- fático, grupo arila, grupo heteroarila e grupos heteroarila não aromáticos in- cluem halogênio, nitro, ciano, hidróxi, C1.206 alquila, C2.25 alquenila, C2.20 al- quinila, amino, C1.26 alquilamino, dialquitamino C1-209, C1-209 alcóxi, (C1-109 alcó- xi), C1:209 alquila, C1-29 haloalcóxi, (C1-19 haloalcóxi) C1.209 alquila e C1.29 halo- alquila.
Os compostos espiro ciclopropil indolinona da invenção podem inibir quinases diferentes, incluindo PLK4, PLK1, PLK2, Aurora A, Aurora B e FLT-3 (ver Exemplos B-G). Assim, em geral, os compostos espiro ciclopropil indolinona da invenção são úteis no tratamento de doenças ou condições associadas com tais quinases. Por exemplo, acredita-se que PLK4, PLK1, Aurora Ae Aurora B estão envolvidos em progressão miótica celular. Assim, os inibidores de moléculas pequenas destas enzimas podem ser potenciais agentes antitumores.
Em uma modalidade específica, os compostos da presente in- venção são inibidores de PLK, Aurora A, Aurora B e/ou FLT-3, e são úteis paraotratamento de doenças, tais como câncer, associados com tais quina- se A (s). Em uma outra modalidade específica, os compostos da invenção são inibidores de PLK e são úteis para o tratamento de doenças associadas com PLK, tais como o câncer. Tipicamente, PLK é PLKA4, PLK2 e PLK 1. Em um exemplo, PLK é PLK1 e PLKA. Em outro exemplo, PLK é PLK4. Em uma outra modalidade específica, os compostos da invenção são Aurora A e/ou B e os inibidores são úteis na inibição de atividade de Aurora A e/ou B para o tratamento de várias condições tais como cânceres. Ainda em uma outra modalidade específica, os compostos da invenção são inibidores de FLT-3 e são úteis para inibir a atividade de FLT-3 para o tratamento de várias condi- ções tais como cânceres. Um outro aspecto da presente invenção se refere a um método detratamento de um indivíduo com câncer que compreende a administração - ao indivíduo de uma quantidade eficaz de um composto da invenção. Em uma modalidade, os compostos da invenção inibem o crescimento de um " tumor. Especificamente, os compostos da presente invenção inibem o cres- cimento de um tumor que sobre-expressa pelo menos uma das PLK, Aurora A, Aurora B, e FLT-3. Mais especificamente, os compostos da invenção ini- bem o crescimento de um tumor que sobre-expressa PLK, por exemplo, PLK1, PLK2 e/ou PLKA. Ainda mais especificamente, os compostos da pre- sente invenção inibem o crescimento de um tumor que sobre-expressa PLKA4. Em uma outra modalidade, os compostos da presente invenção ini- bemo crescimento do tumor por indução de apoptose das células tumorais, ou por inibição da proliferação de células tumorais.
Os cânceres que podem ser tratados ou prevenidos pelos méto- dos da presente invenção incluem o câncer de pulmão, câncer da mama, câncer do cólon, câncer do cérebro, neuroblastoma, câncer da próstata, me- lanoma, glioblastoma multiforme, câncer do ovário, linfoma, leucemia, mela- noma, sarcoma, paraneoplasia, osteossarcoma, germinoma, glioma e meso- telioma. em uma modalidade específica, o câncer é o câncer do pulmão, câncer do cólon, câncer do cérebro, neuroblastoma, câncer da próstata, me- lanoma, glioblastoma mutiforme ou câncer do ovário. em uma outra modali- dade especifica, o câncer é o câncer do pulmão, câncer da mama, câncer do cólon, câncer do cérebro, neuroblastoma, câncer da próstata, melanoma, glioblastoma multiforme ou câncer do ovário. Ainda em uma outra modalida-
de específica, o câncer é um câncer da mama.
Ainda em uma outra modali- dade específica, o câncer é um câncer da mama sub-tipo basal ou um cân- cer da mama sub-tipo B luminal.
Em uma modalidade, o câncer de mama sub-tipo basal é ER (receptor de estrogênio), câncer de mama negativo HER2e PR (receptor de progesterona). Ainda em uma outra modalidade específica, o câncer é um câncer dos tecidos moles.
Um "câncer dos tecidos moles" é um termo reconhecido na área que inclui tumores derivados a partir de qualquer dos tecidos moles do corpo.
Tais tecidos moles, ligam, supor- tam, ou envolvem várias estruturas e órgãos do corpo, incluindo, mas não limitado a, o músculo liso, músculo esquelético, tendões, tecidos fibrosos, - tecido adiposo, vasos sanguíneos e linfáticos, tecido perivascular, nervos, células mesenquimais e tecidos sinoviais.
Assim, o câncer dos tecidos moles : pode ser de tecido adiposo, tecido muscular, tecido nervoso, tecido comum, vasos sanguíneos, vasos linfáticos e os tecidos fibrosos.
Câncer de tecidos moles pode ser benigno ou maligno.
Geralmente, os cânceres malignos dos tecidos moles são referidos como sarcomas, ou sarcomas de tecidos moles.
Existem muitos tipos de tumores dos tecidos moles, incluindo o lipoma, lipo- blastoma, hibernoma, lipossarcoma, leiomioma, leiomiossarcoma, rabdomi- oma, rabdomiossarcoma, neurofibroma, schwannoma (neurilemoma), neu- roma, schwannoma maligno, neurofibrossarcoma, sarcoma neurogênico, tenossinovite nodular, sarcoma sinovial, hemangioma, tumor glômico, he- mangiopericitoma, hemangioendotelioma, angiossarcoma, sarcoma de Ka- posi, linfangioma, fibroma, elastofibroma, fibromatose superfícial, histiocito- ma fibroso, fibrossarcoma, fibromatose, dermatofibrossarcoma protuberante (DFSP), histiocitoma fibroso maligno (HFM), mixoma, tumor de células gra- nulares, mesenquimomas malignos, sarcoma de parte alveolar macia, sar- coma epitelióide, sarcoma de células claras, e tumor de células desmoplási- cas pequenas.
Em uma modalidade particular, o câncer do tecido mole é um sarcoma selecionado a partir do grupo que consiste em um fibrossarcoma, um sarcoma gastrointestinal, leiomiossarcoma, lipossarcoma desdiferencia- das, um lipossarcoma pleomórfico, histiocitoma fibroso maligno, sarcoma das células redondas, e um sarcoma sinovial.
A invenção se refere a um método de tratamento de um indiví- duo com células tumorais, que compreende a administração ao indivíduo, de uma quantidade de um composto aqui descrito que é eficaz para reduzir efi- cazmente a ativídade de PLK, tais como atividade de PLK2 ou PLKA, no in- divíduo. Em uma modalidade específica, o PLK é PLKA.
O termo "quantidade eficaz" significa uma quantidade, quando administrada ao indivíduo que resulta em resultados benéficos ou desejados, incluindo resultados clínicos, como por exemplo, reduz a probabilidade de desenvolver o câncer ou inibe, suprime ou reduz o câncer (por exemplo, co- mo determinado pelos sintomas clínicos ou a quantidade de células de cân- - cer), em um indivíduo, em comparação com um controle. Especificamente, "tratamento de um indivíduo com um câncer" ínclui alcançar, parcial ou subs- 7 tancialmente, um ou mais dos seguintes: deter o crescimento ou dissemina- ção de um câncer, reduzir a dimensão de um câncer (por exemplo, a redu- ção do tamanho do tumor ou diminuir a número de sítios afetados), inibir a taxa de crescimento de um câncer, e amenizar ou melhorar um sintoma cli- nico ou indicador associado a um câncer (por exemplo, tecido ou componen- tes do soro). Também reduz a probabilidade de recorrência do câncer.
Em geral, uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção varia dependendo de vários fatores, tais como a fármaco ou com- posto, a formulação farmacêutica, a via de administração, o tipo de doença ou distúrbio, a identidade do indivíduo ou hospedeiro a ser tratado, e seme- lhantes, mas pode contudo ser rotineiramente determinada por um versado na técnica. Uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção pode ser facilmente determinada por um versado na técnica pelos métodos de rotina conhecidos na técnica.
Em uma modalidade, uma quantidade eficaz de um composto da presente invenção varia de cerca de 0,01 a cerca de 1000 mg/kg de peso corporal, em alternativa, cerca de 0,05 a cerca de 500 peso corporal mg/kg, em alternativa, cerca de 0,1 a cerca de 100 mg/kg o peso corporal, alternati- vamente cerca de 0,1 a cerca de 15 peso corporal mg/kg, em alternativa, cerca de 1 a cerca de 5 peso corporal mg/kg, e em uma outra alternativa, a partir de cerca de 2 a cerca de 3 peso corporal mg/kg. O versado na técnica irá apreciar que alguns fatores podem influenciar a dosagem necessária pa- ra tratar eficazmente um indivíduo que sofre de câncer, e estes fatores inclu- em, mas não estão limitados a, a gravidade da doença ou distúrbio, trata- mentos anteriores, o estado geral de saúde e/ou a idade do indivíduo e ou- tras doenças presentes.
Além disso, um regime de "tratamento" de um indivíduo com uma quantidade eficaz do composto da presente invenção pode consistir em uma única administração, ou, alternativamente, compreender uma série de aplicações. Por exemplo, o composto da presente invenção pode ser admi- - nistrado pelo menos uma vez por semana. No entanto, em uma outra moda- lidade, o composto pode ser administrado a um indivíduo por cerca de uma " Vez por semana a uma vez por dia durante um dado tratamento. A duração do período de tratamento depende de uma variedade de fatores, tais como a gravidade da doença, a idade do paciente, a concentração e a atividade dos compostos da presente invenção, ou uma combinação destes. Também será apreciado que a dosagem eficaz do composto utilizado para o tratamento ou profilaxia pode aumentar ou diminuir ao longo do curso de um tratamento particular ou regime de profilaxia. Alterações na dosagem podem resultar e tornar-se aparente por ensaios padrão de diagnóstico conhecidas na técnica. Em alguns casos, a administração crônica pode ser necessária.
Tal como aqui utilizado, "tratamento" é uma abordagem para a obtenção de resultados benéficos ou desejados, incluindo resultados clini- cos. Resultados clínicos benéficos ou desejados podem incluir, mas não es- tão limitados a, alívio ou melhora de um ou mais sintomas ou condições, di- minuição da extensão da doença, estabilização (ou seja, não piora) do esta- do de doença, redução da probabilidade da disseminação da doença, atraso ou retardamento da progressão da doença, melhoria ou paliação do estado da doença, e remissão (quer parcial ou total), seja detectável ou indetectá- vel "Tratamento" também pode significar prolongar a sobrevivência em comparação com a sobrevivência esperada se não receber o tratamento. "Tratamento" inclui também a redução do risco de desenvolver a doença ou reduzir a probabilidade de recorrência da doença.
Um "indivíduo" é um mamífero, preferencialmente um humano, mas pode também ser um animal com necessidade de tratamento veteriná- rio, por exemplo, animais domésticos (por exemplo, cães, gatos, e outros), animais de fazenda (por exemplo, vacas, carneiros, porcos, cavalos, e se- melhantes) e animais de laboratório (por exemplo, ratos, camundongos, por- quinhos da índia, e semelhantes).
Em uma modalidade, o método da presente invenção é uma monoterapia em que as composições farmacêuticas da presente invenção são administradas isoladamente. Por conseguinte, nesta modalidade, o - composto da presente invenção é o único ingrediente farmaceuticamente ativo nas composições farmacêuticas ou o único ingrediente farmaceutica- ' mente ativo administrado ao indivíduo.
Em outra modalidade, o método da invenção é uma coterapia com uma oumaisdos outros fármacos terapeuticamente ativos ou terapias conheci- das na técnica para o tratamento das doenças ou indicações desejadas. Em um exemplo, uma ou mais outras terapias antiproliferativas ou anticancerigenas são combinadas com os compostos da presente invenção. Em outro exemplo, os compostos aqui descritos são coadministrados com um ou mais de outros fármacos anticancerigenos conhecidos na técnica. As terapias anticâncer que podem ser utilizadas em combinação com o composto da presente invenção incluem cirurgia, radioterapia (incluindo, mas não limítado a, radiação gama, radioterapia por feixe de neutrons, radioterapia por feixe de elétrons, terapia de prótons, braquiterapia, e isótopos radioativos sistêmicos) e terapia endócrina. Agentes anticancerígenos que podem ser utilizados em combinação com os compostos da presente invenção incluem modificadores de resposta biológica (incluindo, mas não limitado a, interferons, interleucinas, e o fator de necrose tumoral (TNF)), hipertermia e crioterapia, agentes para atenuar quaisquer efei- tos adversos (por exemplo, antieméticos), e outros fármacos quimioterapêuticos aprovados (por exemplo, taxol e seus análogos).
Quando os compostos da presente invenção são combinados com outros fármacos anticancerígenos, podem ser administrados contempo-
raneamente, Como usado aqui, “administrado contemporaneamente" signifi- ca que duas substâncias são administradas a um indivíduo de tal modo que ambas são biologicamente ativas no indivíduo ao mesmo tempo. Os deta- lhes exatos da administração dependerão da farmacocinética das duas substâncias na presença uma da outra e podem incluir a administração de uma substância dentro de um período de tempo um do outro, por exemplo, 24 horas após a administração do outro, se as farmacocinéticas forem apro- priadas. Modelos de regimes de dosagem adequados são rotina para os versados na técnica. Em modalidades específicas, duas substâncias serão administradas substancialmente em simultâneo, isto é, dentro de minutos - uma da outra, ou em uma única composição que compreende ambas as substâncias. Alternativamente, os dois agentes podem ser administrados ' separadamente, de tal forma que apenas um é biologicamente ativo no indi- víduo ao mesmo tempo. .
Os compostos da presente invenção podem ser administrados a um paciente em uma variedade de formas, dependendo da via de adminis- tração escolhida, como será entendido pelos versados na técnica. Os com- postos da presente invenção podem ser administrados, por exemplo, por via oral, parentérica, bucal, sublingual, nasal, retal, bomba, adesivo, ou adminis- tração transdérmica e as composições farmacêuticas formuladas adequa- damente. A administração parentérica inclui administração por modos de administração intravenosa, intraperitoneal, subcutânea, intramuscular, tran- sepítelial, nasal, intrapulmonar, intratecal, retal e tópica. A administração pa- rentérica pode ser por infusão contínua ao longo de um período de tempo selecionado.
Os compostos da invenção podem ser convenientemente formu- lados em composições farmacêuticas para administração a um indivíduo. As composições farmacêuticas da presente invenção incluem opcionalmente um ou mais veículos farmaceuticamente aceitáveis e/ou diluentes, tais como lactose, amido, celulose e dextrose. Outros excipientes, tais como agentes aromatizantes, edulcorantes, conservantes, e, tal como metila, etila, propila e butil parabeno, podem também ser incluídos. Listagens mais completas de excipientes adequados podem ser encontradas no Handbook of Pharmaceu- tical Excipients (5th ed., Pharmaceutical Press (2005)). Um versado na téc- nica saberá como preparar formulações adequadas para vários tipos de vias de administração. Procedimentos e ingredientes convencionais para a sele- çãoe preparação de formulações adequadas são descritos, por exemplo, em Remington's Pharmaceutical Sciences (2003 - 20 ? edição) e em The United States Pharmacopeia: The National Formulary (USP 24 NF19), publi- cado em 1999. Os veículos, diluentes e/ou excipientes são "aceitáveis" no sentido de serem compatíveis com os outros ingredientes da composição farmacêutica, e não deletérios para o seu recipiente.
- Em geral, para a administração terapêutica oral, um composto da invenção pode ser incorporado com excipientes e utilizado na forma de " comprimidos ingeríveis, comprimidos bucais, trociscos, cápsulas, elixires, suspensões, xaropes, bolachas, e similares.
Em geral, para administração parentérica, soluções de um com- posto da presente invenção podem geralmente ser preparadas em água a- dequadamente misturada com um surfactante tal como hidroxipropilcelulose. As dispersões podem também ser preparadas em glicerol, polietilenoglicóis líquidos, DMSO e suas misturas com ou sem álcool, e em óleos. Sob condi- çõesnormaisde armazenamento e uso, estas preparações contêm um con- servante para evitar o crescimento de míicro-organismos.
Em geral, para utilização injetável, soluções aquosas estéreis ou de dispersão, e pós-esterilizados, um composto da invenção para a prepara- ção extemporânea de soluções injetáveis estéreis ou dispersões.
Para a administração nasal, os compostos da presente invenção podem ser formulados como aerossóis, gotas, geles e pós. As formulações de aerossol compreendem tipicamente uma solução ou suspensão fina da substância ativa em um solvente fisiologicamente aceitável aquoso ou não aquoso e são geralmente apresentadas em quantidades únicas ou multidose em forma estéril em um recipiente selado, que pode tomar a forma de um cartucho ou refil para utilização com um dispositivo de atomização. Alternati- vamente, o recipiente selado pode ser um dispositivo dispensador unitário tal como um inalador nasal de dose única ou um dispensador de aerossol equi- pado com uma válvula doseadora que se destinam a eliminação após utili zação. Quando a forma de dosagem compreende um dispensador de aeros- sol, este conterá um propulsor que pode ser um gás comprimido tal como ar comprimido ou um propulsor orgânico tal como fluoroclorohidrocarbono. As formas de dosagem de aerosol também podem tomar a forma de um atomi- zador de bomba.
Para administração bucal ou sublingual, os compostos da pre- sente invenção podem ser formulados com um veículo tais como acácia, açúcar, tragacanto, ou gelatina e glicerina, como comprimidos, losangos ou - pastilhas. Para administração retal, os compostos da presente invenção ] podem ser formulados sob a forma de supositórios contendo uma base de supositório convencional tal como manteiga de cacau.
Os compostos da invenção podem ser formulados para adminis- tração isolada ou simultânea com outros agentes para tratar o câncer. Por- tanto, em outro aspecto, uma composição farmacêutica da presente inven- ção compreende um veículo ou diluente farmaceuticamente aceitável, um composto aqui descrito ou um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo e outro agente anticâncer, por exemplo, mas não se limitando a um inibidor do metabolismo da glicose ou taxol.
De acordo com outro aspecto da presente invenção, os compos- tos da presente invenção podem ser preparados por processos análogos aos estabelecidos na técnica. A título de ilustração, os compostos de Fórmu- la(l), em que anéis A e B são como aqui definidos, podem ser preparados pelos métodos delineados no Esquema 1. Reação de uma Indazolilmetileno- indolinona apropriadamente substituída 1 (em que o anel A é como definido aqui e o anel B e C em conjunto, são um indazol) é reagida com uma fonte de metileno adequado, tal como iodeto de trimetilsulfônio, ou o iodeto de tri- metilsulfoxônio na presença de uma base (tal como hidreto de sódio, LDA ou NaHMDS), em um solvente polar (tal como DMF, THF ou DMSO). A reação é convenientemente efetuada a uma temperatura apropriada (geralmente na faixa de 20º a 60ºC). A ligação de vínila, em que Ar é um grupo fenila ou he- teroarila tal como aqui definido, e P1 representa um grupo indazol protetor adequado (tal como Boc, acetila ou SEM) e X é um haleto que pode ser ins- talado sob condições de reação de Heck típicas. Em alternativa, na qual Ar é um grupo fenila ou heteroarila, tal como aqui definido, e P1 representa um grupo indazol protetor adequado (tal como Boc, acetila ou SEM) e X é um haleto que pode ser instalado em condições de reação de Suzuki típicas, utilizando um ácido borônico ou éster de boronato. A reação é preferencial mente efetuada sob condições de irradiação de micro-ondas, com vantagem, nagama, por exemplo de 100 a 150ºC, ou de um modo geral em cerca de - 120ºC. A remoção do grupo protetor pode ser efetuada por qualquer dos processos conhecidos para efetuar tal transformação. Por exemplo, quando ' o grupo de proteção P1 é SEM, a transformação pode ser efetuada por tra- tamento com fluoreto de tetrabutilamônio no seio de um solvente polar, tal como THF, à temperatura de refluxo, ou por tratamento passo a passo com eterato de trifluoreto de boro e de 2N HCl em etanol.
Esquema 1 [O S Fº meSO, ro CE D> Tr SE = TOS = UE O ada Rr uz O ah condições Em outro aspecto da presente invenção (Esquema 2), a ligação de arila, em que R$ é como definido aqui, P1 é H ou um grupo indazol prote- tor adequado (tal como Boc, acetila ou SEM) e X é um haleto, pode ser ins- talado sob condições reacionais típicas de Suzuki, utilizando um ácido borô- nico ou um éster de boronato. A reação é preferencialmente efetuada sob condições de irradiação de mícro-ondas, vantajosamente na faixa, por e- xemplo de 100 a 150ºC, ou de um modo geral em cerca de 120ºC. A remo- —çãodo grupo protetor pode ser efetuada por qualquer dos processos conhe- cidos para efetuar tal transformação. Por exemplo, quando o grupo de prote- ção P1 é SEM, a transformação pode ser efetuada por tratamento com fluo-
reto de tetrabutilamônio no seio de um solvente polar, tal como THF, à tem- peratura de refluxo, ou por tratamento passo a passo com eterato de trifluo- reto de boro e de HCI 2N em etanol.
Esquema 2 9 o o FPA Suzuki FR FPA Cro, x condições ES Roh he Esquema3 (omitido) Em outro aspecto da presente invenção (Esquema 4), a ciclo- ' propanação pode ser efetuada em compostos, tais como (1), em que R5 é - como definido aqui e Rº é como definido aqui, é reagido com uma fonte de metileno adequado, tal como iodeto de trimetilsulfônio, ou o iodeto de trime- tilsulfoxônio na presença de uma base (tal como hidreto de sódio, LDA ou NaHMDS), em um solvente polar (tal como DMF, THF ou DMSO). A reação é convenientemente efetuada a uma temperatura apropriada (geralmente no intervalo de 20º a 60ºC). Esquema 4 g Rs S > Rs “SE NMesSO), base ES > Ra PR eo, Rs Em outro aspecto da invenção, indazolil-espiro-ciclopropano- indolinonas 3 pode ser obtida a partir da reação dos diânions gerados tra- tando oxindols substituídos 1 com uma base forte tal como hidreto de sódio em um solvente adequado tal como THF, com bis eletrófilos-2 (Esquema 5). Quando o dimesilato (S) é utilizado, o encanciômero (1R, 2S) desejado se forma enantiomérica, quase exclusivamente, com pouco ou nenhum do dias- tereômero indesejado (18, 2S) detectável.
Esquema 5 o A + E 2 O RN TIO R,=Bn, PMB RN 3 OS 1 Pr Ss R3=H, F, OMe Ra = Bn, CHCH2OMe, Me Ele E E OM R, = Bn, Me, CH,CHÇOMe Indazolil-espiro-ciclopropano-indolinonas 3, que contêm um Bn ou porção PMB pode ser desprotegido empregando condições de reação - adequadas.
Os compostos 3, que contêm mais do que um grupo de prote- ção podem ser desprotegidos em ambos os locais, em uma reação em um ' só reator para proporcionar compostos 4 (Esquema 6). Os compostos 3, contendo um PMB ou grupo Bn podem ser desprotegidos tratando com uma base forte, tal como KO'Bu ou 'BuLi, e doador de oxigênio, tais como O,, MoOPH MoOPD ou, em um solvente adequado tal como THF, com DMSO ou DMS para reduzir o hidroperóxido intermediário formado in sítu (A.A.
Haddach, A.
Kelleman, e M.V.
Deaton-Rewolinski, Tetrahedron Lett., 2002, 43, 399402, RM.
Williams e E.
Kwast, Tetrahedron Lett, 1989, 30, 451- 454). Os compostos 3, contendo um grupo PMB podem, alternativamente, ser desprotegidos tratando com um ácido tal como TFA, TIOH ou uma mistu- radetais ácidos, a temperaturas entre 50ºC - 130ºC para proporcionar inda- zolil-espiro-ciclopropano-indolinonas 4. Esquema 6 Ro Re Le — La TD 4 TP N R,=Bn, PMB R2=H, F, OMe R2=H, F, OMe Ra = Bn, Me, CHCH,OMe Ra = H, Me, CH;CH,OMe indazolil-espiro-ciclopropano-indolinonas 4 podem ser iodadas para prover compostos de 5 (Esquema 7), por tratamento com um agente de iodação tal como iodo ou N-iodo-succinimida, na presença de uma base tal como NasCO;, K2COs3, NaOH ou KOtBu, em um solvente adequado tal como acetona, ACN, DMF, DMSO, dioxano, NMP, THF, com ou na ausência de água.
Esquema7 Ra Re js.
S 2X SOS DÁ O: e yYD N Re yYD> N o Õ 4 5 Ra =H, F, OMe Ra =H, F, OMe Rs = H, Me, CH;CH;OMe Ra =H, Me, CH;CH,OMe : A estereoquímica relativa do anel de ciclopropano pode ser de- . signada por (1R*, 28*) por comparação com o menor diastereômero produ- zido na síntese dos padrões de referência racêmica através do uso de expe- rimento de RMN HCOSY para atribuir os sinais de cada próton no 1H RMN seguido por experimento NOESY para determinar a interacção através do espaço entre os prótons ciclopropano e o próton na posição 4 da seguinte indolinona (1. Moldvai, E. gacS-Baitz, M.
Balazs, M.
Incze e C.
Szantay; Arch.
Pharm.
Pharm.
Med.
Chem. 1996, 329, 541-549). A estereoquímica absoluta do produto, pode ser designada como (1R, 28), com base na aplicação do mnemônico-SHarpless para prever configuração diol como (S), e assumindo um processo de acoplamento para formar o SN, ciclopropano resultando em inversão do estereocentro (S) do diol com preservação de e.e.
A invenção é ilustrada pelos seguintes exemplos que não se destinam a ser limitativos de qualquer forma.
Note-se que os exemplos não sãonumerados sequencialmente.
Exemplificação A.
Sínteses de Compostos da Invenção Métodos Experimentais Gerais: Materiais de partida comercialmente disponíveis, reagentes e solventes foram utilizados como recebidos, com exceção da N,N-dimetil-1- (4-vinilfenil) metanamina, que foi purificado por cromatografia em sílica gel antes de seu uso em reações de Heck.
De um modo geral, as reações ani-
dras foram realizadas sob uma atmosfera inerte tal como nitrogênio ou argô- nio. As reações foram realizadas com micro-ondas em um reator de micro- ondas Biotage Initiator. O progresso da reação foi monitorizado por TLC em geral utilizando placas de sílica gel Merck com visualização por UV a 254 nm, ouporHPLC analítico por LCMS (Bruker Exquire 4000). Purificação cromatográfica de em coluna flash de intermediários e produtos finais foi rea- lizada utilizando 230-400 mesh sílica gel 60 a partir de produtos químicos de DME. Os produtos finais foram, por vezes, purificados por cromatografia preparativa HPLC em fase reversa. A purificação foi realizada em um siste- ma HPLC modelo Varian PrepStar SD-1 com um coluna de fase reversa - Monochrom Varian C-18 10u utilizando um gradiente de cerca de 5-30% de acetonitrila/água 0,05% de TFA a 70-100% de TFA acetonitrila/0,05% água ' ao longo de um período de 20-40 min, a um taxa de fluxo de 30-50 mL/min. As frações contendo o material desejado foram concentradas e liofilizadas para se obter os produtos finais. RNMs do próton foram registrados em um espectrômetro Bruker de 400 MHz, e os espectros de massa foram obtidos utilizando um espectrômetro de Bruker Esquire 4000. Rotações ópticas fo- ram medidas na linha de sódio D- (589.44nM) usando um Polarímetro AA-55 da Optical Activity Ltd. com um tubo de aço inoxidável 2.5x100mm desenca- —padoem concentrações da amostra (c, unidades de 9g/100mL).
Nomes dos compostos foram gerados usando o software embu- tido no ChemBioDraw Ultra versão 11.0 com a seguinte exceção. Compos- tos racêmicos com estereoquímica relativa conhecida foram nomeados com o sistema R*/S* como descrito por North (Princípios e Aplicações da este- —reoquímica, CRC Press, 1998), onde o menor átomo de numeração é arbi- trariamente definido como R*, e os átomos de maior numeração são defini- dos em relação ao centro. Assim, uma mistura racêmica dos enanciômeros de um composto com dois centros quirais é designada como (1R“, 28”) ou (1R*, 2R*), dependendo da estereoquímica relativa conhecida. O padrão de nomenclatura R e S ou "abs" representando absoluto é usado para descre- ver enanciômeros individuais ou enantiomericamente enriquecidos de com- postos de mais do que 95% e.e.
Abreviaturas: aq. aquoso BF3.0Et? eterato de borontrifluoreto br.
Amplo dba dibenzilidenoacetona
DCM diclorometano DCM diclorometano (DHO)=PHAL *hidroquinina 1,4-fthalazinediil diéter (DHQD),PHAL hidroquinidina 1,4-ftalazinediil diéter
DME 1,2-dimetoxietano
- DMF N N-dimetilformamida DMSO dimetilsulfóxido , dppf 1,1'-bis(difenitfosfino)ferroceno
%“ee. % de excess enantiomérico
Ebto éter dietílico Et;N trietilamina EtoAc acetato de etila EtoH etanol h horas
Hex hexano AcOH ácido acético HPLC cromatografia líquida de alta performance LC-MS cromatografia líquida acoplada a espectroscopia de massa MeCN acetonitrila
MeOH metanol min minutos MsCI cloreto de metanossulfonila MS ES! espectro de massa, ionização por eletrospray NMR ressonância magnética nuclear
ON durante a noite Pd(OAc)2 acetato de paládio PPhz trifenilfosfina prepHPLC cromatografia liquida de alta pressão de alta escala preparativa prepTLC cromatografia de camada fina de alta escala preparativa RBF frasco de fundo redondo Rn temperatura ambiente sat saturado SEM 2-(trimetilsili)etóxi)Mmetila tBuOOH hidroperóxido de terc-butila TBAF fluoreto de tetrabutilamônio 'BuOK terc-butóxido de potássio temp. temperatura : THF tetra-hidrofurano % em peso pocentagem em peso ' Preparação de Materiais de Partida Síntese de 5-metoxioxindo]
Í TO
NH A uma solução de 5-metoxiisatin (10,62 g, 60 mmols) em DMSO (30 mL) foi adicionado N2H4 + xH>: (hidrato de hidrazina, 6 mL, 120 mmois) gota a gota durante 5 min (exotérmica). Após a adição, a mistura resultante foi aquecida a 140ºC (temperatura do óleo). Durante duas horas e depois arrefecida até a temperatura ambiente. Após diluição com H2O (30 mL), HC! a6M(12mL,72 mmolis) foi adicionado e a mistura resultante foi agitada durante uma hora à temperatura ambiente. Gelo (30 mL) foi adicionado e a mistura de reação foi agitada O/N à temperatura ambiente. O precipitado formado foi recolhido por filtração por sucção, lavado com H2O, em seguida, seco para se obter o 5-metoxioxindo! (6,523 g) como um sólido castanho.
(Cerca de 10% de impurezas sendo a oxima de material de partida 5- metoxiisatin) *H RMN (400 MHz, ds-DMSO) 6,78 (s, 1H), 6,85 (s, 1H), 6,72- 6,79 (m, 2H), 3,39 (s, 3H); ESI 164,0 [M + HJ”, calculado para [C]HaNO, + HJ* 164,1.
Síntese de (E e Z) -3-((3-iodo-1H-indazol-6-il)-metileno)-S-metoxiindolin-2- ona b CS 1 Dt
H o A uma mistura de 3-iodo-1H-indazol-S6-carbaldeído (1,360 g, 5 mmois) e 5-metoxioxindol (1,06 g, 6,5 mmols) em metanol (50 mL) adicio- nou-se piperídina (0,1 mL, 1 mmol). A mistura resultante foi submetida a re- fluxo (temperatura do óleo, 75ºC) durante 3 horas, depois arrefecida até a 7 temperatura ambiente e agitada durante duas horas à temperatura ambiente. Os precipitados resultantes foram recolhidos por filtração por sucção e secos Ú para se obter (E/Z) -3-((3-lodo-1H-indazol-6-il)-metileno)-5-metoxiindolin-2- ona(E/Z=2:1) como tijolo escuro sólido cor de laranja (1,966 g, 94%). A mistura foi usada como um intermediário, sem purificação dos isômeros. Este intermediário foi também preparado usando as seguintes condições: Um frasco de fundo redondo foi carregado com S-metoxioxindol (reagente comercial de Prime Organics, 300 mg, 1,84 mmol), 3-lodo-1H- indazol-6-carbaldeído (500 mg, 1,84 mmol), piperidina (20 uL, 0,18 mmol) e MeOH (7 mL). A reação foi então aquecida a 60ºC durante 4 horas. Um pre- cipitado vermelho brilhante se formou que foi ainda precipitado por arrefeci- mento até a temperatura ambiente. O pó vermelho foi então filtrado e lavado com MeOH para dar 658 mg, 86% do composto do título. Uma mistura de isômeros isômeros (E) - e (Z)- (84:16 por RMN) foi obtida. 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 13,78 (s largo, 1H), 10,50 (s, 1H), 9,01 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 8,00 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,48 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,45 (d, J = 2,1 Hz, 1H), 6,81 (dd, J = 4,1, 2,2 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,77 (s, 3H), MS ES! 418,0 [M + HJ*, calculado para [Ci7H12IN3O, + HJ" 418,00. —Síntesede (E)-3-((3-lodo-1H-indazol-6-il) metileno) indolin-2-ona O |
H o
A uma mistura de 3-iodo-1H-indazol-6-carbaldeiído (1,360 9, 5 mmolis) e 2-oxindol (732 g, 5,5 mmols) em MeOH (25 mL) adicionou-se pipe- ridina (0,1 mL, 1 mmol). A mistura resultante foi submetida a refluxo (tempe- ratura do óleo. 75ºC) durante 90 minutos, depois arrefecida até a temperatu- ra ambiente.
Os precipitados resultantes foram recolhidos por filtração por sucção e secos para se obter (E/Z)-3 -((3-iodo-1H-indazol-6-il)-metileno)- indolin-2-ona como um sólido amarelo (E: Z = 5:1, 1,86 g). A mistura foi usa- da como um intermediário, sem purificação dos isômeros, ou, alternativa- mente, o isômero E puro pode ser purificado por dissolução em THF (1,57 9, em46,85 mL) à temperatura ambiente.
Hexano (146,8 ml) foi adicionado à - solução clara, com agitação, para dar um precipitado amarelo.
A suspensão de sólido foi aquecida a 70ºC durante 30 minutos e depois arrefecida até a ] temperatura ambiente.
O sólido amarelo foi filtrado e lavado com hexano (3,14 mL) para dar o composto do título (1,22 9, 79%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 513,71 (s, 1H), 10,64 (s, 1H), 7,88 (s, 1H), 7,77 (s, 1H), 7,57-7,46 (m, 3H), 7,23 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 6,87 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,83 (d, 1H, J=7,6 Hz), EM ES! 388,0 [M + HJ", calculado para [C1sH10IN;3O + H]J* 387,99. Síntese de ácido (E)-3-((3-iodo-1-((2-metileno (trimetilsilil) etóxi) metil)-1H- indazol-6-il))-indolin-2-ona O 1 8 SEM Oxindol (665 mg, 5 mmois) e 3-iodo-1-((2-(trimetilsili) etóxi) me- ti)-IH-indazol-6-carbaldeido (2 g, 5 mmolis) foram dissolvidos em etanol (25 mL). Piperidina (0,1 mL) foi adicionada e a solução foi aquecida a 70ºC du- rante duas horas, arrefecida até a temperatura ambiente e agitada durante a noite.
O solvente foi removido sob vácuo para dar um sólido laranja que foi triturado com etanol para dar o composto do título com um rendimento quan- titativo. '*H RMN (400 MHz, CDCI5) 5 7,95 (s, 1H), 7,86 (s, 1H), 7,62-7,55 (m, 3H), 7,24 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 6,91 (d, 1H, J =7,8 Hz), 6,86 (t, 1H, J=7,6 Hz), 5,75 (s, 2H), 3,62-3,58 (m, 2H), 0,93-0,89 (m, 2H), 0,04 (s, 9H); ES| MS 518,0 [M + HJ”, calculado para [C22H24IN;30O,Sii + HF 518,4.
Síntese de (1R“”, 28*)-2-(3-iodo-1-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)-1H-indazol-6- iespiro[ciclo-propano-1,3"-indolin)-2-ona ' o R$, S*, racemate A uma solução de iodeto de t rimetilsulfoxônio (1,89 g, 8,6 mmols) em DMF anidro (40 mL) foi adicionado hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo) (1,03 g, 25,8 mmois) a 0ºC. A mistura foi agitada durante 15 min, após este tempo (E)-3-((3-lodo-1-((2-metileno (trimetilsílil) etóxi) metil)- " 1H-indazol-6-il)) indolin-2-ona (2,2 g, 4,3 mmols) foi adicionado. A solução foi . agitada durante a noite à temperatura ambiente. A reação foi arrefecida com solução Sat. NH,CI (50 mL), extraída com EtOAC (4 x 100 mL), seca sobre MgSO,. e concentrada até a secura. O composto do título foi isolado por cromatografia em sílica gel (CHClz/MeOH 98:2) como um sólido amarelo (1,5 g, 66%). 7H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 7,46 (s, 1H), 7,39 (d, 1H, J =8,3 Hz), 7,09 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 7,04 (d, 1H, J=8,0 Hz), 6,92 (d, 1H, J=7,8 Hz), 6,61 (t, 1H, J = 8,0 Hz), 5,90 (d, 1H, 8,0 Hz), 5,70 (s, 2H), 3,57-3,53 (m, 2H),3,49-3,44 (m, 1H), 2,31-2,28 (m, 1H), 2,12-2,09 (m, 1H), 0,89-0,84 (m, 2H), -0,05 (s, 9H); ESI| MS 532,1 [M + HJ”, calculado para [CosH26s]N302Si + HF 532,4. Síntese de ácido (E)-5-fluoro-3-((3-iodo-1-((2-(trimetilsilil) etóxi) metil)-1H- indazol-6-il) metileno) indolin-2-ona
F (DD ; De É Õ x
SEM Um frasco de fundo redondo foi carregado com 5-fluoroindolin-2- ona (100 mg, 0,661 mmol), 3-iodo-1-((2-(trimetilsílil) etóxi) metil)-1 H-indazol- 6-carbaldeído (266,18 mg, 0,661 mmol), piperidina (13 ul, 0,013 mmol) e metanol (7,5 mL). A reação foi então aquecida a 55ºC durante 4 h antes do arrefecimento da massa de reação para a temperatura ambiente. A filtração e lavagem com metanol (0,50 mL x 2) deu o composto do título como um sólido amarelo (273 mg, 77%). 'H RMN (400 MHz, CDCIs) à 8,14 (s, 1H), 8,00 (s, 1H), 7,85 (s, 1H), 7,62 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 7,34 (dd, J = 8,0, 2,4 Hz, 1H), 6,97 (td, J = 6,4, 2,4 Hz, 1H), 6,85 (dd, J=8A, 4,4 Hz, 1H), 5,80 (s, 2H), 3,58 (t,J = 8,4 Hz, 2H), 0,92 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 0,03 (s, 9H). Síntese de (1R*2S”-5'-fluoro-2-(3-iodo-1-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)-1H- indazol-6-il)espirofciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona Sox HN, i LÓ ' YY SEM R”, S* mistura racêmica lodeto de trimetilsulfoxônio (164,4 mg, 0,747 mmol) foi adiciona- doauma suspensão de hidreto de sódio (89,6 mg, 2,24 mmois) (dispersão a 60% em óleo) em DMF (2,0 mL) à temperatura ambiente.
A mistura foi agi- tada durante 15 min, após o que se adicionou uma solução de (E)-5-fluoro-3- ((3-iodo-1-((2-(trimetilsilil) etóxi) metil)-1H-indazol-6-il) metileno) indolin-2-ona (200 mg, 0,373 mmol) em DMF (1,25 mil) foi adicionado.
A solução foi agita- daa55ºC durante 7,0 h antes de arrefecer a massa de reação sobre 25% de solução de NH,CI (10 mL) à temperatura ambiente.
O produto foi extraído utilizando acetato de etila (15 mL x 2) e a camada orgânica foi seca sobre MgSO, e evaporada em vácuo.
O produto bruto foi purificado utilizando cro- matografia em coluna de sílica gel (hexano: acetona 80:20 como eluente) parase obter um semissólido cremoso, o qual foi então triturado com hexa- nos (2,0 mL) para dar o composto do título como um pó esbranquiçado (94 mg, 46%). *H RMN (400 MHz, CDC) 5 8,48 (s, 1H), 7,46 (s, 1H), 7,41 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,03 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,86 (s, 1H), 6,78 (m, 1H), 5,72 (s, 2H), 5,68 (d, J = 8 Hz, 1H), 3,54-3,48 (m, 3H), 2,34 (br s, 1H), 2,13 (br s, 1H) 0,88(m,2H),0,03(s, 9H).
Síntese de 3-iodo-1 H-indazot-6-carbaldeído 3 H A uma solução de 1H-indazol-6-carbaldeído (2,00 g, 13,7 mmotis), K2CO;z (3,79 g, 27,4 mmols) em DMF (15 mL) foi adicionada gota a gota uma solução de | (5,91 g, 23,3 mmols) em DMF (15 mL) e a reação foi deixadaa agitar durante duas horas.
Uma solução aquosa que consiste em NazS20, (3,30 g)/K2CO; (0,20 9)/H2O (30 mL) foi então adicionada e a solu- ção foi agitada durante uma hora.
O produto foi então precipitado vertendo à - solução sobre água com gelo (300 mL) e recolhido por filtração sob vácuo para dar, após secagem 3,02 9, 81% de um pó bege. 17H RMN (400 MHz, : 10 CD30D) 10,11 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,74 (d, J = 8,34 Hz, 1H), 7,62 (d, J= 8,34 Hz, 1H); ES| MS 272,9 [M + HJ', calculado para [C;HsINO + HJ* 272,95. Síntese de 3-iodo-1-((2-(trimetilsilil) etóxi) metil)-1H-indazol-6-carbaldeo e 3- iodo-2-((2-(trimetilsilil) etóxi) meti-2H-indazol-6-carbaldeído à l % OO A UA x é Õ s A uma suspensão de 3-iodo-1H-indazol-6-carbaldeído (3,01 g, 11,1 mmols) em CH2Clz (70 mL) e uma solução aquosa a 50%. KOH (20 mL) foi adicionado brometo de tetrabutilamônio (36 mg, 0,111 mmol) e a solução foi arrefecida a 0ºC. (2-(clorometóxi)-etil) trimetilsilano (2,3 mL, 13,3 mmois) foi então adicionado gota a gota e a reação foi agitada a 0ºC durante 3 ho- ras.
A solução foi então transferida para um funil sep. contendo CH2Cl2 (200 mL) e a camada orgânica foi lavada com salmoura (2 x 100 mL), seca (Mg- SO4) e o solvente foi removido sob vácuo.
O resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (100% CH2Cl2) para dar 2,88 g, 65% do isôme- ro N-1 (ponto mais alto de eluição) e 757 mg, 17% do isômero N-2 (mancha menor de eluição). isômero N-1: *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 10,18 (s, 1H), 8,11 (s, 1H), 7,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,82 (s, 2H), 3,60 (m, 2H), 0,91 (m, 2H), -0,042 (s, 9H), MS ESI 425,0 [M + Na], calcula- do para [C14HislN2O0,Si + Na]* 425,02. isômero N-2: '*H RMN (400 MHz, CD3O0D) 10,09 (s, 1H), 8,31 (s, 1H), 7,62 (m, 2H), 5,91 (s, 2H), 3,71 (m, 2H), 0,92 (m, 2H), -0,039 (s, 9H), MS ES1I 425,0 [M + Nal”, calculado para [C14HioIN202Si + Na]* 425,02 Síntese de 3-formil-1H-indazol-6-carbonitrila cHO e
N Ú A uma solução de NaNO,> (11.04g, 160 mmols) em H2O (200 mL) - 10 adicionou-se 6-cianoindol (5,68 9, 40 mmols) em uma só porção lentamente. A suspensão resultante foi agitada durante 5 minutos à temperatura ambien- te. HCI (32 mL mmol, 192 6N) foi adicionado gota a gota através de um funil de gotejamento durante 30 min e o pH foi de cerca de 1. A suspensão resul- tante foi agitada durante 4,5 h à temperatura ambiente antes de EtOAC (400 mL) foi adicionado. Depois de se agitar durante mais 10 min para dissolver o precipitado, as duas camadas foram separadas e a camada aquosa foi ex- traída com EtOAC (150 mL). Os extratos combinados foram secos sobre Na72SO,. A remoção dos solventes proporcionou 6,864 g (100%) do compos- to do título como sólido marrom (cores do café). 'H RMN (400 MHz, DMSO- ds)514,70(s, 1H, NH), 10,22 (s, 1H, CHO), 8,38 (s, 1H), 8,28 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,69 (d, J = 84 Hz, 1H). MS ESI 172,0 [M + HJ*, calculado para [CoHsN5O + HJ" 172,0. Síntese de (E) -3-(metileno (1H-indazol-6-il)) indolin-2-ona
AN
Q Q / Ny o O composto do título foi sintetizado de acordo com o método descrito para (E)-3-((1H-indazol-5-il) metileno) indolin-2-ona, exceto reagir oxindol (67 mg, 0,216 mmol) com 6-1H-indazol -carbaldeído (73 mg, 0,238 mmol) para se obter 32 mg, 51%. *H RMN (400 MHz, CD30D) 5 8,14 (s, 1H), 7,91 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,89 (s, 2H), 7,65 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,47 (dy J =84Hz 1H),7,25(tJ=7,7 Hz, 1H), 6,98 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,87 (tl J = 7,6 Hz, 1H), MS ES! 262,0 [M + HJ", calculado para [C;sH4N3O + HJ* 262,10. Síntese de (E e 2)-3-((3-(4-((dimetilamino) metil) estiril)-1H-indazol-6-il)- metileno)-5-metoxiindolin-2-0na 2,2,2-trifluoroacetato CFJ;COH N x 2 O CS X OQ Ny CFACOH ' HN O bo o. zh nº SS N 7 o HP ó E H 0 N
H A. (E)-3-(4((dimetilamino)metil)estiril)-1-((2-(trimetilsili)etóxi)metil)- 1Hindazol-6-carbaldeído O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A22A em WO,2010/115279, utilizando N,N-dimetil-1-(4-vinilfenil) metanamina (42 mg, 0,26 mmol) e 3-iodo-1-((2-(trimetilsílil) etóxi) metil)-1H- indazol-6-carbaldeído (70 mg, 0,17 mmol) com aquecimento em um tubo selado a 90ºC durante a noite em vez de, com irradiação de micro-ondas. Purificado por TLC prep (SiO2 10% de MeOH/DCM) para fornecer o compos- to do título como uma goma cor de laranja pálido (33,4 mg, 44%). ppm 10,13 (s, 1 H), 8,27 (m, 2 H), 7,81 (d, J = 9,29 Hz, 1 H), 7,69 (d, J = 8,28 Hz, 2 H5'H RMN (400 MHz, CD30OD)), 7,61 (d, J = 16,6 Hz, 1 H), 7,50 (d, J= 16,6 Hz, 1H) 7,43 (d,J=8,28Hz,2H), 5,86 (s, 2H), 3,82 (s, 2H), 362 (t, J = 8,03 Hz, 1 H), 2,50 (s, 6 H), 0,87 (t, J = 8,03 Hz, 2 H), -0,09 (s, 9H); MS ESI 436,3 [M + HJ*, calculado para [C25H33N;O,Si + HJ* 436,6. B. (E)-3-((3-(4-((dimetilamino)metil)estiril)-1-((2-(trimetilsili)etó- xi)metil)-1H-indazol-6-il netileno)-S-metoxiindolin-2-ona Piperidina (0,01 mL, 0,1 mmol) foi adicionado a uma solução de
5-metoxioxindol (52 mg, 0,32 mmolis) e (E)-3-(4-((dimetilamino)metil)estiril)- 1-((2-(trimetilsili)etóxi)-metil)- 1H-indazol-6-carbaldeido — (contaminado — com TBAF da tentativa de desproteção anterior, 95,5 mg, 0,22 mmol) em EtoH (5 mL). A reação foi então aquecida a 75ºC durante 25 horas.
O solvente foi evaporado sob vácuo.
A cromatografia (5 g de tubo SPE de sílica, Silicycle, 5-10% de MeOH em CH2Cl2) deu origem a um óleo castanho (105 mg, pro- duto contido e TBAF por RMN). O resíduo foi dissolvido em EtOAC (100 mL) e lavado com salmoura (3 x 15 mL), seco sobre Na>SO, e o solvente foi e- vaporado sob vácuo para dar o composto do título como um óleo castanho (110mg, usado sem purificação adicional). x C. (E e Z) -3-((3-(4((dimetilamino) metil) estiril)-1H-indazol-6-i)- metileno)-5-metoxiindolin-2-ona , De acordo com o método do Exemplo A22B em WOz2010/115279, — 3((3-(4-((dimetilamino)metil)estiril)- 1-((2-(trimetilsilil)etó- xi)metil)-IH-indazol-6-il)metileno)-S-metoxiindolin-2-o0na (19 mg, 0,033 mmol) foi tratada com eterato de trifluoreto de boro, seguido por tratamento com HCI a 2 N (água/EtOH). Os solventes foram removidos sob vácuo usando EtOH adicional para remover azeotropicamente a água.
O resíduo foi dissol- vido em MeOH/EtOAc e filtrado para remover o sólido, em seguida, o solven- te foievaporado sob vácuo.
A purificação por HPLC prep produziu o com- posto do título (isômero E, primeiro eluindo fração, 94% por HPLC) como um sólido cor de laranja (11 mg, 60%). ppm 8,26 (d, J = 8,5 Hz, 1 H), 7,88 (d, J = 9,3 Hz, 2H), 7,80 (d, J = 8,3Hz, 2H), 7,615'H RMN (400 MHz, CD30D) (s, 2H), 7,51 - 7,58 (m, 3 H), 7,26 (s, 1 H), 6,84 (s, 2H), 4,34 (s, 2H), 3,63 (s, 3 H) 2,89(s,6H); MS ESI 451,2 [M + HJ”, calculado para [C28H23;N40, + HJ* 451,22. A fração de eluição segundo foi o isômero Z (5 mg, 30%). ppm 8,89 (s, 1 H), 8,15 (d, J = 9,0 Hz, 1 H), 7,99 (dd, J = 9,0, 1,3 Hz, 1 H), 7,90 (s,5'H RMN (400 MHz, CD30D) 1 H), 7,81 (d, J = 8,3 Hz, 2 H), 7,57-7,61 (m, 2H), 7,53 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 7,33 (d, J = 2,0 Hz, 1 H), 6,85 (dd, J = 8,4, 2,4 Hz, 1 H) 6,80(d,J=84Hz,1H), 4,34 (s, 2H), 3,84 (s,3H),2,89(s,6H), MS ESI 451,2 [M + HJ", calculado para [C28H26N40,2 + HJ" 451,22.
Síntese de 1-(2-metoxietil)-indolin-2-ona
8.
NS A uma solução de isatina (2,94 g, 20 mmols) em DMF (40 mL) a 0ºC foi adicionado NaH a 60% (1,00 g, 25 mmois) em porções. Após a adi- ção, a mistura resultante foi agitada durante 15 minutos a 0ºC e 1-bromo-2- metoxietano (2,35 mL, 25 mmols) foi adicionado gota a gota ao longo de 2 minutos. A mistura resultante foi agitada durante 10 min a 0ºC, aquecida até a temperatura ambiente e agitada O/N. A reação foi então arrefecida a 0ºC, - resfriada bruscamente com NH,CI sat., gelo, H2O, extraída com EtOAC (150 mL x 2), seca sobre Na-SO, e concentrada para dar um líquido cor de laran- : 10 ja vermelha escura que foi re-dissolvido em DMSO (10 mL). NaH4-xH2O (2 mL) foi adicionada gota a gota ao longo de 7 min. Após a adição, a mistura de reação foi agitada durante 5 minutos à temperatura ambiente, em segui- da, duas horas a 140ºC (temperatura do óleo). Antes de se arrefecer até a temperatura ambiente. Gelo/H2O (20 mL) foi adicionado, seguido de 6 M de HCI(7mL,42 mmols) e a mistura resultante foi agitada durante 30 minutos à temperatura ambiente. Gelo/H,O adicional (40 mL) foi adicionado e a mistura foi extraída com EtOAC (50 mL x 3). O produto bruto foi purificado por cro- matografia flash (gradiente: EtOAc/Hex O a 40%) para proporcionar o com- posto do título como um líquido cor de laranja (2,32 g, 61% em duas etapas). 7,26-7,20(m,2H),7,03(d,J=8,0 Hz, 1H), 6,98 (t, J=7,4 Hz, 1H), 3,82 (t J 5'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) = 5,6 Hz, 2H), 3,55 (s, 2H), 3,52 (tl J = 5,8 Hz, 2H), 3,22 (s, 3H), MS ES! 191,8 [M + HJ”, calculado para [C11H13NO, + HJ 192,1. Síntese de 2-(2-oxoindolin-1-iI) acetamida x Ne fe) A uma mistura de isatina (5,0 g, 35 mmols), K2CO; (5,5 g, 40 mmols) e de cloro-acetamida (3,74 g, 40 mmois) em um frasco de 100 mL de
DMF foi adicionado (25 mL). A mistura resultante foi aquecida a 90ºC (tem- peratura do óleo). Durante duas horas. Após arrefecimento até a temperatu- ra ambiente, foi vertida sobre gelo/H2O (200 mL) e o precipitado resultante foi recolhido por filtração por sucção para dar origem a 2-(2,3-dioxoindolin-1- il) acetamida (4,32 g) após a secagem. 7,72 (s, 1H), 7,65 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,30 (s, 1H), &'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 7,14 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,25 (s, 2H). A 2 - (2,3-dioxoindolin-1-il) acetamida acima (4,32 g) foi dissolvi- da em DMSO (20 mL) e NaH4-xH2O (2,5 mL) foi adicionado gota a gota du- rante 10 min. Após a adição, a mistura resultante foi agitada durante 5 minu- - tos à temperatura ambiente, em seguida, duas horas a 140ºC antes de se arrefecer até a temperatura ambiente. A reação foi resfriada bruscamente ' com gelo (20 mL) e HCl a 6 M (8 mL), em seguida, agitada durante 30 minu- tos à temperatura ambiente. Filtração por sucção produziu o composto no título em bruto (2,92 g) como um sólido amarelo claro. O produto foi suspen- so em EtOAC (120 mL) e HzO (60 mL) foi adicionado, seguido de HCl a 2 M (30 mL). A mistura foi separada e filtração de sucção da camada aquosa forneceu o composto do título como um sólido bege claro (1,78 g, 27% em duas etapas) após a secagem. 7,59 (s, 1H, NH), 7,28-7,08 (m, 4H), 6,99 (t, J =7,4Hz,1H),6,81(dJ=8,0 Hz &8'H RMN (400 MHz, DMSO-ds), 1H), 4,22 (s, 2H), 3,56 (s, 2H). MS ES! 191,0 [M + HJ”, calculado para [C10H10N,O, + HI* 191,1; ESI MS 174,0 [M - NH]*, calculado para [C10H10N20>2 - NH" 174,1; ESL MS 146,0 [M - CONH]*, calculado para [C10H10N20; - CONH]* 146,1. Síntese de (1R“2S)2-(3-vinil-1H-indazol-S-il)-espiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona O os
É N o A uma mistura de (1R*, 28*) -2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3'-indolin]-2"-ona (802 mg, 2 mmols) e 4,4,5,5-tetrametil-2- vinil-1,3,2-dioxaborolano (462 mg, 3 mmols) em um frasco de micro-ondas de 20 mL adicionou-se PhCH3/EtoH (8 mL/4 mL), seguido de Na2CO; a 1 M (3 mL, 3 mmols) e Ph (PPh3) 4 (46 mg, 0,04 mmol, 2% em mol) foi adiciona- do e a mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida colocada no micro-ondas por 3 horas, a 120ºC. Após tratamento aquoso, a solução foi extraídacom EtOAc e foi purificada por cromatografia flash (Hex/EtOAc 1:1) para dar o composto do título em bruto como uma espuma amarelo claro (512 mg) que foi utilizada sem purificação adicional. 7,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,10-6,88 (m, 5H), 6,54 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 6H RMN (400 MHz, CDCI3) 6,06 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 5,92 (d, J =7,6 Hz, 1H), 5,49 (d, J= 7,6 Hz, 1H),3,46(d,J=8,2 Hz, 1H), 2,30- 2,18 (m, 2H), MS ESI 302,0 [M + HJ*, cal- - culado para [C19H15N;3O0 + HJ* 302,1. Síntese de (1R*, 28*)-5-metóxi-2-(3-vinil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropa- as = / RN
Ô H A uma mistura de (1R“, 2S8*) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-i1)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1,3-indolin])-2'-ona (1,00 g, 2,32 mmois) e 4,4,5,5- tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (500 mg, 3,25 mmols) em um frasco de micro-ondas de 20 mL adicionou-se PRCH3/EtoH (7 mL/3,5 mL), seguido de NasCO;3 1 M (3 mL, 3 mmol). Depois de se agitar durante 1 minuto à tempe- ratura ambiente, Ph(PPh3)4 (50 mg, 0,043 mmol, 1,9% em mol) foi adiciona- doea mistura resultante foi purgada com argônio, e colocada em micro- ondas por 3 horas, a 120ºC. Esta reação foi repetida duas vezes na mesma escala, e as misturas resultantes foram combinadas. Processamento aquoso deu o composto do título em bruto como uma espuma cor de laranja escu- ra/sólido (3,10 g) que foi utilizado sem purificação adicional, Uma amostra do composto puro pode ser obtida por cromatografia flash (Hex/EtOAc 1:1). 1H 7,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 7,01 3RMN (400 MHz, CDCIs) (dd, J = 18,2 Hz, J = 11,4 Hz, 1H sobreposição com d, J = 6,8 Hz, 1H, 2H total), 6,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,61 (dd, J = 8,4 Hz, J = 2,4 Hz, 1H), 6,09 (d, J = 18,0
Hz, 1H), 5,56 (d, J = 1,6 Hz, 1H), 5,52 (d, J = 11,6 Hz, 1H), 3,56 (t J = 7,6 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o resíduo MeOH), 3,26 (s, 3H), 2,24 (dd, J = 7,8 Hz, J = 5,0 Hz, 1H), 2,18 (dd, J = 9,2 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), MS ES! 332,0 [M + HJ", calculado para [C20H17N5O, + HJ* 332,1. Síntesede(1R”,28*)-5-etil-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1 3'-indolin)-2-ona So
O OS d H Í O composto do título, como um diastereômero simples, (710 g, . 33% em duas etapas, triturado a partir de hexanos/MeOH) foi obtido como um sólido cor de laranja claro a partir de 5-etilindolin-2-ona (885 mg, 5,5 mmols) e 3-iodo-1H-indazol-6-carbaldeído (1,36 g, 5 mmois), usando o mé- todo para a preparação de (1R*, 28*)-2-(3-vinil-1AH-indazol-6-il)-espiro [ciclo- propano-1,3"-indolin)-2'-ona. 13,44 (s, 1H), 10,51 (s, 1H), 7,44 (s, 1H), 7,380 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 6,99 (d, J 5'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) = 8,8 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 6,72 (d, J =7,6 Hz, 1H), 5,76 (s, 1H), 3,17 (t J=7,8 Hz,1H) 2,29 (dd, J=8,0 Hz, J=4,8 Hz, 1H), 2,18-2,04 (m, 2H), 1,98 (dd, J = 8,6 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), 0,60 (t, J = 7,4 Hz, 1H), MS ESI 430,0 [M + HJ", calculado para [C19H16IN;3O0 + HJ* 430,0. Síntese de (1R*, 28*) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metilespiro [ciclopropano- 1, 3indolin]-2"-ona
S A N
E 3 H O composto do título em bruto (2,06 g, 99% em duas etapas) foi obtido como um sólido amarelo a partir de 5-metilindolin-2-0na (772 mg, 5,25 mmols) e 3-iodo-1H-indazol-S-carbaldeído (1,36 g, 5 mmois), usando o mé- todo para a preparação de (1R*, 28*) -2-(3-vinil-1H-indazol-6-il)-espiro [ci- clopropano-1,3'-indolin])-2"-ona. A RMN indicou uma mistura 06:01 do com-
posto do título e o diasterômero menor. 13,43 (s, 1H), 10,51 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,32 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,02 (d, J 5'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) = 8,8 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,73 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 5,86 (s, 1H), 3,18 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 2,30-2,20 (m, 1H), 2,00-1,90 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), MSESI416,1[M+H]', calculado para [C18H14IN5O + HJ" 416,0. Síntese de 2-((1R*, 28º) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-iI)-2"-oxoespiro [ciclopropa- no-1,3-indolina]-1'-i) acetamida
SD NÃ Cós : VD na 8 H S A uma mistura de 2-(2-oxoindolin-1-il) acetamida (380 mg, 2 mmols) e 3-iodo-1H-indazol-6-carbaldeído (544 mg, 2 mmols) em MeOH (20 mL) foi adicionada piperidina (0,04 mL). A mistura resultante foi aquecida a 75ºC (temperatura do óleo). Durante 90 minutos. Após arrefecimento até a temperatura ambiente, o precipitado resultante foi recolhido por filtração de sucção para dar um sólido amarelo (850 mg). A uma mistura de iodeto de trimetilsulfoxônio (880 mg, 4 mmolis) e60%de NaH (486 mg, 12 mmois) em um frasco de 100 mL foi adicionado DMF (5 mL). A mistura resultante foi agitada durante 5 minutos à temperatu- ra ambiente, antes uma suspensão do sólido amarelo acima (850 mg) em DMF (20 mL) foi adicionado através de uma pipeta. Após a adição, a mistura resultante cor de rosa foi agitada durante duas horas à temperatura ambien- tee arrefecida a 0ºC. A reação foi resfriada bruscamente com gelo/H2O, NH,CI sat. (15 mL), seguido por gelo/H;O para um volume total de 100 mL. Após agitação durante 2 minutos à temperatura ambiente, o precipitado re- sultante foi recolhido por filtração por sucção para dar o composto do título em bruto como um sólido cor de rosa (805 mg, 88% em duas etapas) após a secagem. 13,50 (s, 1H), 7,94 (s, 1H), 7,70 (s, 1H, NH), 7,49 (s, 1H), 7,31 (d, J=8,4 Hz 3'H RMN (400 MHz, DMSO-ds), 1H), 7,26 (s, 1H), 7,06 (t J =7,6 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o pico a 7,03 ppm), 7,03 (d, J = 8,8
Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o pico a 7,06 ppm), 6,86 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,60 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 4,38 (t, J = 18,4 Hz, 2H), 3,26 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 2,40-2,35 (m, 1H), 2,10-2,04 (m, 1H); ESI MS 459,1 [M + HJ”, calculado para [C19H15IN40, + HJ* 459,0. Síntese de (IR, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"-(2-metoxietil)-spiro [ciclo- propano-1, 3-indolin]-2"-ona O 1
SO OR Po ' O composto do título em bruto (750 mg, 82% em duas etapas) : foi obtido como um sólido bege claro a partir de 1-(2-metoxietil)-indolin-2-ona : (382 mg, 2 mmols) e 3-lodo-1H- indazol-6-carbaldeído (544 mg, 2 mmol), usandoo método para a preparação de (1R*, 28*) -2-(3-vinil-1AH-indazol-6-il)- espiro [ciclopropano-1,3'indolin---2-ona. A RMN indicou uma mistura 06:01 do composto do título e diastereômero menor. 13,48 (s, 1 H), 7,47 (s, 1H), 7,30 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 7,10-7,05 (m, 2H), 6,98 ( 5'H RMN (400 MHz, DM- SO-ds) d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,64-86,56 (m, 1H), 6,01 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 3,98- 3,92 (m,2H),3,63-3,57 (m, 2H), 3,25 (s, 3H et, J = 8,6 Hz, 1H sobreposição; 4H total), 2,37 (t, J = 6,1 Hz, 1H), 2,05 (dd, J] = 9,0 Hz, J = 5,0 Hz, 1H); ESI 460,1 [M + HJ”, calculado para [C20H18IN;3O, + HJ* 460,0. Síntese de ácido E)-N, N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) metanamina o NX
DE O N Ácido acético glacial (3 gotas) foi adicionado a uma mistura de 4- etinilbenzaldeído (250,7 mg, 1,93 mmol), dimetilamina (2 M em THF, 1,5 mL, 3,0 mmols) e NaBH(OAc)3 (617 mg, 2,91 mmols) em DCE (6,5 mL). A mistu- ra resultante foi agitada durante 2,5 h à temperatura ambiente. A reação foi desativada com solução saturada de NaHCO; aquoso (- 40 mL). O produto foiextraíido com CH2Clz (100 mL, depois 2 x 50 mL), e a fase orgânica com-
binada foi lavada com salmoura (25 mL), seca (Na2SO,) e evaporada sob vácuo.
A purificação sobre Biotage Isolera (sílica, 0-3% de NH3 2M - meta- nolCH2Cb) deu 1-(4-etinitfenil)-N, N-dimetilmetanamina (280,1 mg, 92%). H RMN (400 MHz, CDCI;3) 5 7,46 (d, J= 8 Hz, 2H), 7,28 (d, J = 8 Hz, 2H), 342 (s 2H) 3,07 (s,1H),2,24(s,6H). 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,20 mL, 8,23 mmois) foi adicionado a uma solução purgada com argônio de 1-(4-etinilfenil)-N, N- dimetilmetanamina (262 mg, 1,65 mmol) e HRuUCKCO)(PPh3)3 (104,1 mg, 0,11 mmol) em tolueno (9,0 mL). A mistura resultante foi aquecida a 50ºC durante 12 horas.
O produto foi extraído com Et20 (250 mL), e a camada - orgânica foi lavada sequencialmente com água (3x 20 mL) e salmoura (20 mL), seca (NazSO.) e evaporada in vácuo.
A purificação por cromatografia ' em coluna (sílica gel, 50-100% CH2Cl; em Et20) deu (E)-N,N-dimetil-1-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vínil)-fenil) metanamina (402 mg, contendo 20% de impureza de pinacol por 'H RMN, 68% de rendimento). *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,46 (d, J = 8 Hz, 2H), 7,4 (d, 1H), 7,28 (d, 2H), 6,16 (d, 1H), 3,42 (s, 2H), 2,24 (s, 6H), 1,32 (s, 12H), MS ES) 288,0 [M + HI", calculado para [C17H26BNO, + H]” 288,2. Síntese de ácido ((E) -1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- vini)-benzil)-pirrolidina o * ó DI O ácido acético glacial (0,2 mL) foi adicionado a uma mistura de 4-etinilbenzaldeído (1 9, 7,5 mmolis), pirrolidina (1,2 mL, 15 mmois) e NaBH (OAc) 3 (2,5 g, 11,5 mmois) em DCE (35 mL). A mistura resultante foi agita- da durante duas horas à temperatura ambiente.
A reação foi resfriada brus- —camentecom NaHCO; aquoso saturado (50 mL). O produto foi extraído com CH2Chb (2 x 100 mL), e a fase orgânica combinada foi lavada com salmoura (25 mL), seca (MgSO,s) e evaporada em vácuo para dar 1-(4-etinilfenil)- pirrolidina com um rendimento quantitativo: ?H RMN (CDCI3) 5: 7,45 (d, J =
7,8 Hz, 2H), 7,30 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 3,62 (s, 2H), 3,06 (s, 1H), 2,51 (bs, 4H), 1,80 (bs, 4H). A uma solução de 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,9 9, 15 mmols) em tolueno (20 mL) adicionou-se 1-(4-etinilfenil)-pirrolidina (1 g, 5 mmols)eHRuCIl(CO(PPh3)3 (120 mg, 0,11 mmol) sob atmosfera de argô- nio. A mistura resultante foi aquecida a 50ºC durante 4 horas. O produto foi extraído em EtOAC (250 mL), e a camada orgânica foi lavada sequencial- mente com água (3x 20 mL) e salmoura (20 mL), seca (MgSO,) e evaporada in vácuo. A purificação por cromatografia em coluna (sílica gel, 0-20% de MeOH/EtOAc) deu o composto do título (1,2 9, 77%). 'H RMN (400 MHz, - CDCI3) 5 7,45 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,39 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 7,33-7,29 (m, 2H), 6,15 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 3,61 (s, 2H), 2,51 (bs, 4H), 1,79 (bs, 4H), 1,32 : (s, 12H). Síntese de (E) -4-(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzil)-morfolina Nemo
AS
NE O composto do título (4,35 g, 71%) foi obtido como um sólido amarelo cor branca a partir de 4-(4-bromobenzil) morfolina (4,18 9, 16,3 mmolis) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (3 mL, 17,7 mmois, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = 30mL,1% em mol de Pd(P'Bus)2, 80ºC, 1 h). *H RMN (400 MHz, CDCI;) à 7,45 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,40 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 7,31 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,16 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 3,72 (t, y = 4,4 Hz, 4H), 3,50 (s, 2H), 2,47-2,42 (m, 4H), 1,32 (s, 12H); MS ES! 330,1 [M + HJ”, calculado para [C19H2sBNO; + HJ* 330,2. Síntese de (E) -4-(2(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzaldeído
HO Oo o
O composto do título (498 mg, 71%) foi obtido como um sólido amarelo claro a partir de 4-bromobenzaldeido (500 mg, 2,71 mmols) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmols, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = 8 mL, 2%emmolde Pd(P'Bus)s, 80ºC, O/N). 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 10,01 (s, 1H), 7,88 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,64 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,43 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 6,34 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 1,34 (s, 12H); MS ESI 258,9 [M + HJ*, calcu- lado para [C1sH;sBO; + HJ* 259,1. Síntese de (E) -4-(3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzil)-morfolina
AAA - o A uma mistura de 3-etinilbenzaldeído (650 mg, 5 mmolis) e mor- folina (0,87 mL, 10 mmois) em DCE (15 mL) foi adicionado NaBH (OAc) 3 (1,325 g, 6,25 mmois), seguido por ACOH (0,2 mL). A mistura resultante foi agitada durante duas horas à temperatura ambiente. Tratamento aquoso seguido de extração com EtOAc deu 4-(3-etinilbenzil) morfolina (0,98 g) co- mo um óleo castanho claro. O composto do título (1,75 g, rendimento quanti- tativo, em duas etapas) foi obtido como um óleo castanho claro com o méto- do (PhCH3 = 12 mL, 1% em mol HRuCI (CO) (PPh3)3, 50ºC, duas horas) para a preparação do Exemplo A42A. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5: 7,47 (s, 1H) 7,46-7,37 (m, 2H), 7,35-7,27 (m, 2H), 6,19 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,78- 3,68 (m, 4H), 3,52 (s, 2H), 2,52-2,42 (m, 4H), 1,32 (s, 12H), MS ESI 330,1 IM + HJ”, calculado para [C19H2.8BNO; + HJ* 330,2. Síntese de (E)-N, N-dimetil-1-(3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2- iD-vinil)-fenil) metanamina
A Oo O composto do título (1,36 g, rendimento quantitativo, em duas etapas) foi obtido como um óleo amarelo a partir de 3-etinilbenzaldeido (520 mg, 4 mmois) e Me2NH (2 M em THF, 3 mL, 6 moles), utilizando o método (PhCH3 = 12 mL, 2% em mol de HRuCI (CO) (PPh3)3, 50ºC, 2 h) para a preparação de (E)4-(3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzil)-morfolina. *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,47 (s, 1H), 7,45-7,38 (m, 2H) 7,385-7,27 (m, 2H), 6,19 (d,J=18,4 Hz, 1H), 3,688-3,58 (m, 4H), 3,52 (s, 2H), 2,53-2,43 (m, 4H), 1,32 (s, 12H); MS ES! 288,1 [M + HJ, calculado para [CirH2xsBNO, + HJ" 288,2. Síntese de (E) -1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina o . 10 O composto do título (267 mg, 68%) foi obtido como um sólido amarelo a partir de 1-(4-bromofenil) piperazina (653 mg, 2,71 mmois) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmois, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = 12 mL, 2% em mol de Pa(P'Bus)2, 80ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 7,41 (djJ=8,0Hz,2H),7,09 (d, J= 18,4 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,86 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 3,17-3,11 (m, 4H), 2,90-2,84 (m, 4H), 1,22 (s, 12H); MS ES! 315,0 [IM + HJ*, calculado para [C1gH2;BN20, + HJ 315,2. Síntese de cis-2,6-dimetil-4-(4-((E) -2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-iI)-vini)-benzil)-morfolina Nenos nº > Dá o O composto do título (2,52 g, 71%) foi obtido como um sólido branco a partir de 4-(4-bromobenzil)-cis-2,6-dimetilmorfolina (2,82 g, 10 mmolis) e 4,4,5,5- tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (1,85 mL, 11 mmois, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = mL, 1% em mol de Pd(P'Bus)», 80ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CDC) 25 7A46(d,J=8,0Hz,2H),7,40(d, J=18,4 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,16 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,75-3,65 (m, 2H), 3,47 (s, 2H), 2,70 (d, J = 10,8
Hz, 2H), 1,75 (t, J = 10,2 Hz, 2H), 1,32 (s, 12H), 1,14 (d, J = 6,4 Hz, 6H); MS ES! 358,2 [M + HJ*, calculado para [C21H32BNO; + HJ* 358,2 Síntese de (E)-1-metil-4-(4-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- fenil - (2) piperazina O. o VA No O composto do título (674 mg, 76%) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de 1-(4-bromofenil)-4-metilpiperazina (691 mg, 2,71 - mmois) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmois, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = ' 10 mL, 2% em mol de Pd(P'Buz)2, 80ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CDCI;) ô 7,41(d,J=8,4Hz, 2H), 7,34 (d, J=18,4 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 84 Hz, 2H), 5,99 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,26-3,33 (m, 4H), 2,65-2,59 (m, 4H), 2,40 (s, 3H), 1,31 (s, 12H); MS ESI 329,1 [M + HJ, calculado para [CisH26BN2O, + HJ* 329,2. Síntese de (E)-1-etil-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- fenil) piperazina o
VOO O composto do título (601 mg, 65%) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de 1-(4-bromofenil)-4-etil-piperazina (729 mg, 2,71 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmois, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = 12mL, 2% em mol de Pd(P'Bus)s, 80ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CDC) & 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 18,0 Hz, 1H), 3,28 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 2,61 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 2,48 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 1,32 (s, 12H), 1,14 (t, J = 7,2 Hz, 3H); MS ESI 343,1 [M + HJ”, calculado para [CaoH3:BN2O> + HJ” 343,2.
Síntese de ácido (E)-1-isopropil-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaboro- lan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina o.
BIO O composto do título (504 mg, 52%) foi obtido como um sólido cor de laranja claro a partir de 1-(4-lodo-fenil)-4-isopropilpiperazina (894 mg, 2,71 mmols) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmols, 1,1 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A ' (PRCH3 = 10 mL, 2% em mol! de Pd(P'Bus)2, 80ºC, O/N). *H RMN (400 MHz, . CDCI3) 8 7,41 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,34 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 6,87 (d J=8,4 Hz, 2H), 5,98 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,26 (t, J = 4,8 Hz, 4H), 2,76-2,66 (m, 5H), 1,32 (s,12H),1,10(d,J=6,4 Hz, 6H); MS ESI 357,2 [M + HJ”, calculado para [C2;H33BN2O, + HJ* 357,3 Síntese de (E)-4-(2-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- fenóxi)-etil)-morfolina Ness .º > "E Oo O composto do título (902 g, 72%) foi obtido como um sólido branco a partir de 4-(2-(4-bromofenóxi) etil)-morfolina (1 g, 3,50 mmois) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,6 mL, 3,58 mmois, 1,02 eq). utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = 12 mL, 2% em mol de Pd(P'Buz)2, 80ºC, O/N). 1H RMN (400 MHz, CDC13) ô 7,28 (d, J=8,0 Hz, 2H), 7,22 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 6,70 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 5,88 (d, J =184 Hz, 1H), 3,90 (t,J=4,8 Hz, 2H), 3,60-3,50 (m, 4H), 2,59 (t, J= 4,8 Hz, 2H), 2,42-2,32 (m, 4H), 1,15 (s, 12 H); MS ES! 360,2 [M + HJ”, calculado para [CooH3oBNO, + HJ* 360,2.
Sintese de ácido (E)-2-fluoro-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- vinil)-benzaldeído
HO
NE O composto do título (610 mg, 55%) foi obtido como um sólido amarelo a partir de 4-bromo-2-fluorobenzaldeído (812 mg, 4 mmois) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,8 mL, 4,8 mmols), usando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PRCH3 = 10 mL, 1% em mol 7 de Pd(P'Bu3)2, 80ºC, 1,5 h). 1H RMN (400 MHz, CDCIa) à 10.34 (s, 1H), 7,85 . (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,36 (d, J = 8,8 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o pico a 7,35 ppm), 7,35 (d, J = 17,2 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o picoa7,36ppm),7,26 (d,J=11,2 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o resíduo CDCIa), 6,32 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 1,33 (s, 12H). Síntese de (E) -4-(2-fluoro-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-11)- vinil)-benzil)-morfolina nes o-g& É Lo
NE A uma mistura de (E)-2-fluoro4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzaldeído (0,61 9, 2,2 mmol) e morfolina (0,3 mL) em DCE (20 mL) foi adicionado NaBH (OAc) 3 (636 mg, 3 mmolis), seguido por AcOH (0,5 mL). A mistura resultante foi agitada durante duas horas à temperatura ambiente. A reação foi interrompida com solução aq. de NaH- CO; (10 mL), HO (10 mL), e extraída com EtOAC (2 x 30 mL). Os solventes foram removidos em vácuo para dar o composto do título como um sólido branco (0,72 g, 94%). *H RMN (400 MHz, CDCIs) ô 7,20-7,12 (m, 2H), 7,04 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 10,8 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,55- 3,45 (m, 4H), 3,36 (s, 2H), 2,33-2,23 (m, 4H), 1,14 (s, 12H); MS ES1 348,2 [M + HJ”, calculado para [C1sH2;BFNO; + HJ* 348,2.
Síntese de cis-2,6-dimetil-1-(4-((E) -2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3 2-dioxaborolan- 2-il)-vinil)-benzil)-piperidina
DO ont.
XE O composto do título (0,45 g, 55%) foi obtido como um óleo a- marelo claro a partir de 4-(4-bromobenzil)-cis-2,6-dimetilpiperidina (0,60 g, 2,13 mmois) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,44 mL, 2,6 mmols), usando o método para a preparação do Exemplo AS1A (PhCH3 = - 10 mL, 2,5% em mol de Pd(P'Bus)2, 80ºC, 75 min). *H RMN (400 MHz, CD- Cla) 8 7.43 (d, J = 8,0 Hz, 2H, sobrepostos com o pico a 7,40 ppm), 7,40 (d, J 7 = 18,8 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com os picos a 7,43 ppm e 7,36 ppm),7,36(d,J=8,4Hz, 2H, parcialmente sobrepostos com o pico a 7,40 ppm), 6,14 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,78 (s, 2H), 2,53-2,44 (m, 2H), 1,68-1,55 (m, 3H), 1,40-1,28 (m, 3H), 1,05 (d, J = 6,4 Hz, 6H); MS ESI 356,2 [M + HT, calculado para [C22H34BNO, + H ]º 356,3. Síntese de N-Benzil-oxindol
E
N “O Preparado de acordo com o procedimento da literatura (C. Mar- tin and E. M. Carreira, J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 11505-11515). Uma solução agitada de isatina (10,0 g, 68 mmois) em DMF seco (125 mL) foi arrefecida em um banho de gelo antes da adição de hidreto de sódio (60% em peso em óleo mineral, 2,86 9, 71,5 mmols) em 10 porções, a solução laranja transformando-se rapidamente em roxo. Quando não houve mais evolução de gás sendo observada, brometo de benzila (13,4 g, 78,0 mmolis) foi adicionado por meio de seringa. Uma mudança de cor de volta para la- ranja foi observada dentro de 20 min. Água (300 mL) foi adicionada com agi- tação, e o precipitado resultante laranja-vermelho foi recolhido por filtração e lavado com água e um pouco de etanol frio. O sólido foi depois recristalizado a partir de etanol em ebulição (300 mL) para dar N-benzilisatin (13,7 g, 85%) como agulhas longas e vermelhas. N-benzilisatin (13,0 g, 55 mmols) foi misturado com hidrato de hidrazina (60 mL) e colocado em um banho de óleo. A mistura foi aquecida poretapas até 125ºC, tornando-se primeiro uma lama verde, depois amare- la, com tufos de um sólido pegajoso. Após um total de 5 horas a 125ºC, a mistura foi arrefecida e extraída com EtOAC (2 x 100 mL). As porções orgâ- nicas combinadas foram lavadas duas vezes com 1,0 M aq. H2SO,, e uma vez cada, com salmoura semissaturada e depois com salmoura, seca sobre MgSO,, filtrada e concentrada para dar um sólido amarelo pálido. Re- - precipitação a partir de éter/pentano deu o composto do título como um sóli- do esbranquiçado (9,6 g, 75%). Dados espectrais combinam com os valores ' da literatura (C. Martin and E. M. Carreira, J. Am. Chem. Soc., 2005, 127, 11505-11515). Síntese de 1-benzil-S-fluoroindolin-2-ona “Og
SO De uma maneira semelhante ao método de N-benzilisatin, 5- fluoroisatina (10,0 g, 60,5 mmois) produziu 5-fluoro-N-benzilisatin como um pó vermelho laranja (14,5 g, 93%). O produto bruto foi usado na etapa se- guinte sem purificação. *H RMN (400 MHz, CDCI;) 8 7,33-7,21 (m, 5H), 6,95 (d,J=7,6Hz, 1H), 6,84 (t 1H), 6,60 (m, 1H), 4,89 (s, 2H); MS ESI 255,9 [M + HJ”, calculado para [CisH;oFNO>2+ H]J* 255,07. O composto do título foi preparado de uma maneira semelhante ao método de N-benzil-oxindol, utilizando 5-fluoro-N-benzilisatin (14,5 g, 56,8 mmois). A trituração com Et20: hexano proporcionou o composto do título como um sólido amarelo pálido (10,3 g, 75%). *H RMN (400 MHz, CDCI3) 7,30-7,26 (m, 5H), 7,00 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 6,87 (t, 1H), 6,683 (m, 1H), 4,91 (s, 2H), 3,63 (s, 2H); MS ESI 241,9 [M + HJ”, calculado para [CisHioFNO23+ HJ" 241,09.
Síntese de 1-benzil-5-metilindolin-2-ona
OE
N “O A uma mistura de 5-metilisatina (8,05 9, 50 mmols) e K.CO; (8,16 g, 60 mmols) em DMF (100 mL) adicionou-se BnBr (6,5 mL, 55 mmois) gota a gota durante 2 minutos. Após a adição, a mistura resultante foi aque- cidaem um banho de óleo a 75ºC durante 1,5 h. Após arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura de reação foi vertida em gelo/água fria (250 mL), lavada com H2O (50 mL) e agitada durante 5 min. Os precipitados resul- . tantes foram recolhidos por filtração com sucção e secos ao ar para dar 1- benzil-5-metilisatina como sólido vermelho escuro. MS ES! 252,0 [M + HJ”, Í 10 calculado para [Ci'sH13NO, + HJ* 252,1. 1-Benzil-5-metilisatina foi suspenso em DMSO (100 mL) e arre- fecido a 0ºC. Hidrato de hidrazina (5 mL) foi adicionado gota a gota ao longo de 5 min. Após a adição, a solução vermelha límpida resultante foi aquecida a 120ºC durante duas horas, em seguida, 140ºC durante 5 horas. Após arre- fecimento até a temperatura ambiente, foi vertida para um frasco de Erlen- meyer de 1 L, lavada com H2O (50 mL) e foi adicionado gelo até um volume total de cerca de 300 mL. HCl a 2 M (50 mL) foi adicionado e a mistura foi extraída com EtOAC (200 mL x 2, em seguida, 100 ml), e a camada orgânica foi seca (Na;SO;y). A eliminação dos solventes seguida por secagem sob alto vácuo durante 2 dias deu o composto do título como um sólido vermelho es- curo (12,53 g, rendimento quantitativo, ao longo de duas etapas, continha algum resíduo de DMSO). *H RMN (400 MHz, CDC) 8 7,35-7,29 (m, 5H), 7,09 (s, 1H), 6,97 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4.91 (s, 2H), 3,60 (s, 2H), 2,31 (s, 3H); MS ES! 238,0 [M + HJ”, calculado para [CisH;sNO +H 2381. Sintese de 1-benzil-5-metoxiindolin-2-ona o.
O TO
Uma solução agitada de 5-metoxiisatin (5,0 g, 28 mmols) em DMF seco (40 mL) foi arrefecida em um banho de gelo antes da adição de hidreto de sódio (60% em peso em óleo mineral, 1,7 9, 42 mmols) lentamen- te, a solução vermelha escura se tornando rapidamente preto, Após agitação durante 20 minutos, BnBr (3,7 mL, 31 mmois) foi adicionado à mistura de reação através de uma seringa e a mistura resultante foi agitada durante uma hora.
Água (150 mL) foi adicionada com agitação, e o precipitado ver- melho escuro resultante foi recolhido por filtração e lavado com água para se obter 1-benzil-S-metoxiindolina-2,3-diona como um sólido vermelho escuro (6,1 g, 81%). 'H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 7,39-7,31 (m, 5H), 7,17 (s, 1H), .: 7,03 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 6,68 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 4,92 (s, 2H), 3,79 (s, 3H). MS ES! 268,1 [M + HJ", calculado para [C;sH13NO; + H]* 268,09. Í Uma solução de 1-benzil-5-metoxiindolina-2,3-diona (6,1 g, 23 mmois) e hidrato de hidrazina (50-60% de grau, 2,9 mL, ca. 2 eq) em DMSO (15 mL) é aquecida a 140ºC em um banho de óleo.
Após 3 h, a mistura foi arrefecida, diluída com água e EtOAc, as camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com EtOAc três vezes (30 mL). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com H;SO, a 2 M, salmoura, e foi seca sobre MgSO:;, filtrada e concentrada para dar o produto bruto na forma de um óleo viscoso castanho.
O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (20-50% de EtOAc em hexano) para dar o composto do título como um óleo castanho (5,0 g, 85%). '*H RMN (400 MHz, CDCI;) 5 7,34-7,23 (m, 5H), 6,89 (s, 1H), 6,69 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 4,91 (s, 2H), 3,76 (s, 3H), 3,62 (s, 2H). MS ESI 254,0 [M + HJ', calculado para [CiH1I5NO,+ HJ 254,1. Síntese de N1-benzil-S-vinil-1H-indazol Método 1: Uma mistura de N1i-benzil-S-bromo-1H-indazol (10,2 9, 35,5 mmois) e NaOH (4,3 g, 107 mmoils) em THF/água (9:1, 350 mL) foi purgada com nitrogênio.
Em um frasco separado, Pd(OAc)> (0,16 9,
0,7 mmol, 2% em mol) e PPh3 (0,37 g, 1,4 mmol, 4% em mol) foram agita- dos em conjunto em THF seco purgado com nitrogênio (35 mL) durante 10 min, formando uma solução vermelha com alguns sólidos em suspensão.
Pinacol éster de ácido vinilborônico (7,5 mL, 44,4 mmolis) e a solução de ca- talisador foram adicionados à mistura de reação, e a solução resultante foi mais uma vez purgada com nitrogênio.
A mistura foi aquecida em um banho de óleo ajustado a 65ºC, TLC indicou o consumo do material de partida a 7 h.
A mistura foi concentrada sob pressão reduzida para remover a maior par- te do THF, em seguida, diluída com água (50 mL), salmoura (50 mL) e EtO- AC (250 mL). As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída . com EtOAc adicional (4 x 50 mL). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre Na7zSO;, filtradas e concentradas (a ] 70ºC/20 mbar) para dar o produto bruto.
Este foi cromatografado sobre sílica gel usando EtOAc 10-20% em ciclo-hexano para dar o composto do título (7,59, 90%) como um óleo amarelo que solidificou em repouso. *H RMN (400 MHz, CDCIs) 8 7,98 (s, 1H), 7,63 (d, J = 84 Hz, 1H), 7,29 — 7,19 (m, 5H), 7,18 = 7,13 (m, J = 7,0 Hz,, 2H), 6,75 (dd, J = 17,6, 10,9 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 17,5 Hz, 1H), 5,53 (s, 2H), 5,26 (d, J = 10,9 Hz, 1H), MS (ES+): 235
(IM+H]+); calculado para [CisH14aN2+ H]* 235,1. Método 2: usando 4,4, 6-trimetil-2-vinil-1,3,2-dioxaborinano: Uma mistura de N1i-benzil-6-bromo-1H-indazol (1,44 9, 5,0 mmois) e NaOH (0,4 g, 10,0 mmolis) em THF/água (5:1, 15 mL) foi purgada com nitrogênio.
Em um frasco separado, Pd(OAc)> (11 mg, 0,05 mmol, 1% em mol) e PPh3 (26 mg, 0,1 mmol, 2% em mol) foram agitados em conjunto em THF purgado com nitrogênio (2,5 mL) durante 10 min, formando uma solução vermelha com alguns sólidos em suspensão.
O THF usado foi de grau HPLC e livre de ini- bidor, o efeito do grau inferior ou THF estabilizado não é conhecido. 4,4,6- trimetil-2-vinil-1,3,2-dioxaborinano (1,12 mL, 6,5 mmols) e a solução de cata- lisador foram adicionados à mistura de reação, e a solução resultante foi maisuma vez purgada com nitrogênio.
A mistura foi aquecida em um banho de óleo ajustado a 65ºC, o aquecimento foi continuado durante 24 horas, mas a reação está completa, provavelmente, em menos de 8 horas.
A mistu-
ra em bruto foi, então, combinada com uma reação, o segundo paralelo da mesma escala em que a diluição mais elevada tivesse sido utilizada. A mis- tura foi concentrada sob pressão reduzida para remover a maior parte do THF, em seguida, diluída com salmoura, água e ciclohexano. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com ciclohexano adicional até que TLC indicou que todo o produto desejado foi extraído (3-4 extratos). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO;, e depois passadas através de uma almofada de 1 cm de sílica para remover o material de base. Qualquer produto restante na sílica foi eluído com EtOAca 10% em ciclohexano (Rf. 0,15 neste eluente). O eluato combi- - nado foi concentrado para dar o composto do título (2,05 g, 88%) como um óleo amarelo que solidificou em repouso e era de pureza suficiente para uso ' nas reações subsequentes.
Método 3: Ni-benzil-6-bromo-1iH-indazol (metade do material bruto obtido no método 3 acima) foi processado em duas bateladas como se segue: uma mistura de N1i-benzil-6-bromo-1H-indazol bruto (153 g, contendo um máximo de 0,5 mol assumindo 100% de rendimento em benzila- ção/equilíbrio) e NaOH (40 9, 1,0 mol) em THF/água (5:1, 1,5 L; THF isento de inibidor de grau HPLC) foi purgado com nitrogênio. Em um frasco sepa- rado, Pd(OAc)2 (1,139, 5,0 mmolis, 1% em mol) e PPh3 (2,6 g, 10,0 mmois, 2% em mol) foram agitados em conjunto em THF purgado com nitrogênio (250 ml), durante 10 min, formando uma solução vermelha com alguns sóli- dos em suspensão. 4,4,6-trimetil-2-vinil-1,3,2-dioxaborinano (112 mL, 0,65 mol) e a solução de catalisador foram adicionados à mistura de reação, e a solução resultante foi mais uma vez purgada com nitrogênio. A mistura foi aquecida durante a noite em um banho de óleo ajustado a 60ºC. *H RMN de uma amostra indicou que algum material de partida permaneceu, e assim doador de vinila adicional (30 mL) foi adicionado para empurrar até a conclu- são. Ambas as bateladas de mistura foram combinadas e a mistura foi concentrada sob pressão reduzida para remover a maior parte do THF, em seguida, foi diluida com salmoura, água e ciclohexano. As camadas foram separadas e a fase aquosa foi extraída com ciclohexano adicional até que a
TLC indicou que todo o produto desejado foi extraído (3,5 L de ciclohexano total). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO4, e depois passadas através de uma almofada de 2 cm de sílica para remover o material de base. Qualquer produto restante na sílica foi eluído com EtOAc a 10% em ciclohexano (Rf. 0,15 neste eluente). O eluato combinado foi concentrado para dar 309 g de um óleo bruto contendo o composto do título, um pouco do diol obtido a partir do dador de vinila, e um número de impurezas contendo benzila. Método 4: Uma outra reação realizada utilizando N1i-benzil-6- bromo1H-indazol destilado (64,3 g, 0,144 mol) forneceu uma conversão to- - tal, sem a necessidade de uma porção adicional de doador de vinila, e deu 1-benzil-6-vinil-1H-indazol semibruto (55,5 g, quantitativo) que foi utilizado ' sem purificação adicional abaixo. Síntese de (S) -1-(Ni-benzil-1H-indazol-6-il)-etano-1,2-diol
A
ADO õn ) Método 1: K3Fe (CN) 6 (16,7 g, 51,0 mmolis), K2CO;s (7,05 9, 51,0 mmols), (DHQ)2PHAL (0,13 g, 0,17 mmol, 1% em mol) e K20s0,.2H;0 (12,8 mg, 0,034 mmol, 0,2% em mol) foram colocados em um frasco de fun- do redondo. Uma mistura de tBuOH e água (1:1, 160 mL) foi adicionada, formando uma mistura clara, bifásica em agitação. A mistura foi arrefecida emum banho de gelo, resultando na precipitação parcial, antes da adição do pó de N1-benzil-6-vinil-1H-indazol (4,0 g, 17,1 mmolis). A mistura resultante foi vigorosamente agitada em um banho de gelo durante 5 h, altura em que nenhum sólido ainda era visível e TLC indicou o consumo do material de partida. A reação foi resfriada bruscamente por adição de metabissulfito de sódio (409), com a efervescência resultante fazendo com que a mistura de reação se alastrasse para o banho de gelo. O material remanescente foi adi- cionado ao banho de gelo e a mistura resultante (contendo cerca de 1 L de água e de gelo), foi agitada durante a noite, aquecendo lentamente. Celite e CH2Cl2 (200 mL) foram adicionados, a mistura bem agitada e, em seguida, filtrada. Os sólidos foram cuidadosamente lavados com CH2Cl> adicional (2 x 50 mL). O filtrado bifásico foi separado, e a camada aquosa foi extraída com CHCI3(4x50 mL). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas sobre MgSO;, filtradas e concentradas. O resíduo foi reto- mado em EtOAc e filtrado através de uma almofada de sílica (1 cm de pro- fundidade x 8 cm de diâmetro), eluindo com EtOAc adicional, para remover o material de base. O eluato foi concentrado e extraído com tolueno para re- mover vestígios de tBuOH. Finalmente, o resíduo foi recristalizado a partir de - tolueno quente (10 ml/g) para dar o composto do título mencionado na for- ma de agulhas brancas (3,87 g, 84%, ee 98,8%) com o maior enanciômero : (S) eluindo a 16,8 min (Daicel Chiralpak IB (250 x 4,6 mm); EtOH isocrática a 10% em n-heptano, 1 mL/min, temperatura ambiente (ca. 22ºC); detecção: 254,230,210 nm), a partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (R) era de 14,8 min usando este método e N1- benzil-6-vinil-1H-indazol eluiu a 5,4 min. *H RMN e dados de massa espec- tral foram idênticos a 1-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-etano-1,2-diol racêmico ob- tido acima. [a]? = 13º (c 1,018, MeOH).
Método 2: N1i-benzil-6-vinil-1H-indazol semibruto (Método 4 aci- ma, 55,5 g) foi dihidroxilado de uma maneira semelhante, para se obter, a- pós recristalização para obter duas colheitas de sólido puro, (S) -1-(N1- benzil-1H-indazol-6-il)-etano-1,2-diol (38 g, quantitativo).
Método 3: K3Fe (CN)6 (0,98 kg, 3 mois), K2CO; (0,55 kg, 3 mois), (DHQ)2PHAL (3,9 g, 5,0 mmois) e K20s0,.2H20 (0,37 9, 1 mmol) fo- ram colocados em um vaso de reação de 10 L com uma tampa de fixação equipado com agitador mecânico. Uma mistura de 'BuOH e água (1:1, 7,5L) foi adicionada, formando uma mistura clara, bifásica em agitação. A mistura foi arrefecida utilizando um refrigerador Haake EK90, resultando na precipi- tação parcial, antes da adição de N1-benzil-6-vinil-1H-indazol bruto (ca. 0,7- 0,8 mol). A mistura resultante foi agitada vigorosamente, mas sólido ajustado como espaço insuficiente estava disponível para a circulação adequada no banho de arrefecimento e a temperatura real caíu para cerca de -20ºC, quando deixada durante o fim de semana. Pouca conversão era evidente. Para acelerar a reação, (DHQ)-PHAL adicional (2,5 mmols) e K20sO,.2H0 (0,5 mmol) foram adicionados, e a mistura deixada aquecer a aprox. 10ºC; a reação, em seguida procedeu satisfatoriamente. A reação foi parada pela adição em porções de metabissulfito de sódio (1,5 kg). A mistura foi agitada durante uma hora à temperatura ambiente, tornando-se quase transparente, depois foi filtrada através de uma almofada de celite para remover o precipi- tado OSO;». O filtrado foi extraído com CH2Cl7 (4 extratos, volume final 7 L), e as porções orgânicas combinadas foram secas sobre MgSO;, filtradas e . concentradas. O produto bruto foi recristalizado a partir de tolueno quente (10 mL/g); duas colheitas do composto do título foram recolhidas, de 98,7% Í e 98,0% ee, totalizando 163,7 g (55% a partir de 6-bromo-1H-indazol).
Síntese de (S)-ácido metanossulfônico de 2-(N1i-benzil-1H-indazol-6-iN)-2- metano-sulfonilóxi-etil éster te SO "
ASS N oi ox o OO | Método 1: Uma solução de (S) -1-(Ni-benzil-1H-indazol-6-il)- etano-1,2-diol (3,75 g, 14,0 mmois, 98,8% ee) e EtSN (4,9 mL, 35,0 mmois) em CH2Cl; seco (350 mL) foi arrefecida em um banho de gelo antes da adi- ção gota a gota de MsCI (2,17 mL, 28,0 mmols) ao longo de 10 min. A mistu- ra resultante foi deixada a agitar durante 30 min. Após diluição com mais CH;Ch (250 mL), a solução foi lavada com HCl a 1,0 M frio aq. (2 x 50 mL), NaHCO; sat. aq. (50 mL) e salmoura (50 mL), depois seca sobre Na2SO,. A solução foi vertida em uma almofada de 'sílica curta (1 cm de profundidade x 8 cm de diâmetro), sob sucção. O filtrado inicial não continha nenhum produ- to, que foi subsequentemente eluído com 1:1 de Et20/CH2Cb. O eluato foi concentrado sob pressão reduzida para produzir o composto mencionado em título (5,98 9, quant). Como um sólido branco. 1H RMN e dados de mas- sa espectral foram idênticos ao 2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-2-metano-
sulfonilóxi-etil éster de ácido metanossulfônico racêmico obtido anteriormen- te. O e.e. desta batelada de material não foi determinado nesta fase, mas foi transportado para a etapa seguinte. Rotação óptica: [al = 58º (c 0,73, CHCI3).
Método 2: Uma solução de (S) -1-(Ni-benzil-1H-indazol-6-il)- etano-1,2-diol (134 g, 0,5 mol, ee — 98%) e Et3N (174 mL, 1,25 mol) em CH2Ch (2,5 L) foi arrefecida em um banho de gelo antes da adição lenta de MSC! (81,3 mL, 1,05 mol) ao longo de aproximadamente uma hora. A tempe- ratura interna aumentou para um máximo de 11ºC, A mistura resultante foi deixadaa agitar durante 30 min. A reação foi resfriada bruscamente com 1,0 - M frio aq. HCl (400 mL), as fases foram separadas, e a fase orgânica foi la- vada com 1,0 M de HCI aq., NaHCO; aq. frio adicional e salmoura, em se- ' guida seca sobre MgSO,. A solução foi vertida em uma almofada de sílica curta com sucção. Algum do produto fluido a partir da sílica, durante a filtra- ção, eo restante foi eluído utilizando 1:1 Et20/CH;Ckb (2 L). O eluato foi concentrado sob pressão reduzida para dar um sólido branco duro. Este foi triturado com Et20 (800 mL) durante a noite. O pó fino branco foi recolhido por filtração e lavado com Et20 adicional (2 x 100 mL) para produzir o com- posto do título (184,2 g, 87%, ee 99%), com o maior enanciômero (S) eluin- doa134A min (Daicel Chiralpak IB (250 x 4,6 mm); EtOH isocrático a 30% em n-heptano, 1 mUmin, temperatura ambiente (ca. 22ºC); Detecção: 254, 230, 210 nm), a partir do padrão de referência racêmico, o tempo de reten- ção do enanciômero (R) era de 14,4 min, utilizando este método. O filtrado continha apenas uma pequena quantidade de produto de ee baixo e foi des- cartado Síntese de (1R, 2S)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropa- no-1,3-indolin)-2"-ona
AO d (S AO Método 1: Uma solução de N-benzil-oxindol (3,57 g) em THF se-
co (120 mL) foi arrefecida em um banho de gelo antes da adição de NaH (60% em peso em óleo mineral, 1,92 g, 48,0 mmols) em quatro porções, a solução tornou-se rapidamente um roxo profundo.
Após 30 min, uma solução de 2-(N1-benzil-1H-indazol-6-il)-2-metano-sulfonilóxi-etil éster de ácido (S)- metanossulfônico (6,79 g, 16,0 mmolis, -98,5% ee, previamente purificado duas vezes com THF seco) em THF seco (80 mL) foi adicionado por meio de bomba de seringa durante um período de 1 h.
O TLC indicou uma conversão rápida para um único composto com Rf 0,45 (EtOAc a 25% em ciclo-hexano, eluído por duas vezes, os materiais de partida Rf 0,5 e Rf 0,2). Depois de se agitar durante duas horas, a mistura foi vertida em NH,4CI aq. sat. (50 mL), - diluída com água (50 mL) e EtOAC (100 mL). As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com porções adicionais de EtOAC (4 x 50 mL). ' As porções orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura, secas so- bre Na7zSO;, filtradas e concentradas para dar um produto em bruto que, por 'H RMN, pareceu consistir quase exclusivamente no composto do título.
O produto bruto foi passado através de uma almofada de sílica curta (1 cm de profundidade x 5 cm de diâmetro), eluindo com 1:1 de EtOAc em ciclo- hexano.
O resíduo foi triturado com n-heptano (3 x 50 mL) para remover o óleo mineral, e removido com tolueno para se obter o composto do título (7,0 g,cercade 90% de rendimento) como um sólido vítreo, que continha algum solvente.
HPLC indicou uma pureza óptica de 98% e.e. com o maior enanci- ômero (1R, 2S)- eluindo a 13,3 min (Daicel Chiralpak IA, 250 x 4,6 mm; EtoH a 10% isocrático em n-heptano, 1 mLUmin, temperatura ambiente (ca. 22ºC); Detecção: 254, 230, 210 nm), a partir do padrão de referência racêmi- co,otempo de retenção do enanciômero (18, 2R) foi de 12,1 min, utilizando este método. *H RMN (400 MHz, CDCIs) à 7,989 (s, 1H), 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,36 — 7,20 (m, 8H), 7,19 (s, 1H), 7,15 — 7,10 (m, J = 6,4 Hz, 2H), 6,99 (td, J =7,8, 0,9 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,74 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 6,50 (t J = 7,4 Hz, 1H), 5,76 (d, J =7,3 Hz, 1H), 5,61 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 5,53 (d, J=15,8Hz,1H),5,08(d,J=15,6 Hz, 1H), 4,97 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 348 (t J =8,5 Hz, 1H), 2,28 (dd, J = 9,0, 4,5 Hz, 1H), 2,02 (dd, J = 8,0, 4,6 Hz, 1H). MS
(ES+): 456 ([M+H]”), calculado para [C3,H2sN3O + HJ” 456,2.
Método 2: em uma série separada de experimentos individuais realizados de uma maneira semelhante ao Método 1, mas sem realizar qual- quer cromatografia em coluna, utilizando-se entre 20 a 45 g de 2KN1-benzil- 1H-indazol-6-il)-2-metano-sulfonilóxi-etil éster de ácido (S)-metanossulfônico por batelada, um total de 133,89, 315 mmolis foi levado para a frente. Algu- mas bateladas foram combinadas e passadas através de um tampão de síli- ca para remover os vestígios de material de linha de base antes de seu uso, mas isto não parece fazer qualquer diferença nas reações subsequentes. O produto em bruto foi isolado como um sólido espumoso (174,1g de óleo mi- neral, contendo de contabilização de hidreto de sódio a aproximadamente . 10% de cada produto em bruto, bem como quantidades variáveis de EtOAc, rendimento estimado médio > 80% com base na estimativa de batelada pu- 7 rezas individuais). O material foi levado avante sem purificação adicional.
Síntese de (1R, 28S)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropa- no-1,3-indolin)-2"-ona
AZ 4 fe) OO Método 1: Uma solução de N-benzil-oxindo! (3,57 g) em THF se- co (120 mL) foi arrefecida em um banho de gelo antes da adição de NaH (60% em peso em óleo mineral, 1,92 g, 48,0 mmols) em quatro porções, a solução tornou-se rapidamente um roxo profundo. Após 30 min, uma solução de 2-(Ni-benzil-1H-indazol-6-il)-2-metano-sulfonilóxi-etil éster de ácido (S)- metanossulfônico (6,79 g, 16,0 mmolis, -98,5% ee, previamente purificada duas vezes com THF seco) em THF seco (80 mL) foi adicionado por meio de bomba de seringa durante um período de uma hora. O TLC indicou uma conversão rápida para um único composto com Rf 0,45 (EtOAc a 25% em ciclo-hexano, eluído duas vezes, os materiais de partida Rf 0,5 e Rf 0,2). Depois de se agitar durante duas horas, a mistura foi vertida em NH,CI aq. sat. (50 mL), diluída com água (50 mL) e EtOAC (100 mL). As fases foram separadas e a camada aquosa foi extraída com porções adicionais de EtO-
AC (4 x 50 mL). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com sal- moura, secas sobre NasSO;,, filtradas e concentradas para dar um produto em bruto que, por 1H RMN, apareceu a consistem quase exclusivamente do composto do título. O produto bruto foi passado através de uma almofada de sílica curta (1 cm de profundidade x 5 cm de diâmetro), eluindo com 1:1 de EtOAc em ciclo-hexano. O resíduo foi triturado com n-heptano (3 x 50 mL) para remover o óleo mineral, e removeu-se com tolueno para se obter o composto do título (7,0 g, cerca de 90% de rendimento) como um sólido ví- treo, que continha algum solvente. HPLC indicou uma pureza óptica de 98% ee como maior enanciômero (1R, 2S)-eluindo a 13,3 min (Daicel Chiralpak : IA, 250 x 4,6 mm; EtOH a 10% isocrático em n-heptano, 1 mL/min, tempera- tura ambiente (ca. 22ºC); Detecção: 254, 230, 210 nm), a partir do padrão de Í referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (18, 2R) foi de 12,1 min, utilizando este método. *H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 7,99 (s, 1H), 7,60(d,J=8,3Hz, 1H), 7,36- 7,20 (m, 8H), 7,19 (s, 1H), 7,15—7,10 (m, J= 6,4 Hz, 2H), 6,99 (td, J = 7,8, 0,9 Hz, 1H), 6,92 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,74 (d, J =7,8 Hz, 1H), 6,50 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 5,61 (d J = 15,8 Hz, 1H), 5,53 (d, J = 15,8 Hz, 1H), 5,08 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 4,97 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 3,48 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 2,28 (dd, J = 9,0, 4,5 Hz, 1H), 2,02 (dd, J=8,0,46 Hz, 1H), MS (ES+): 456 ([M+HJ”), calculado para [Ca:H2sN3O + HJ" 456,2.
Síntese de (1R, 2S)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-S"-fluorospiro [ciclo- propano-1, 3"-indolin)-2"-ona r
AÍ
TELE ds OO O composto do título foi preparado de uma maneira semelhante ao método de dimetanossulfonato (1R, 2S)-1'-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol- 6-il)-espiro [ciclopropano-1,3'indolin-]-2-ona utilizando (S)-1-(1-benzil-1H-
indazol-6-il) etano-1,2-di ila (501,4 mg, 1,181 mmol) e 1-benzil-5- fluoroindo- lin-2-ona (285,0 mg, 1,181 mmol). A purificação utilizando Biotage Isolera (coluna SNAP 259, 25-100% de EtOAc em hexano) obteve o composto do título como um sólido creme (352 mg, 63% de 97% de ee) com o maior e- nanciômero (IR, 2S)-eluindo a 7,03 min (Phenomenex Lux Sp Cellulose-1 (150 x 4,6 mm), 1,0 mL/min isocrático a 80% de EtOH em hexano durante 1,0 min, depois 80-90% e EtOH gradiente em hexano ao longo de 10 min). À partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciôme- ro (18, 2R) foi 5,95 min utilizando este método. 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 8,04 (s, 1H), 7,67 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,40-7,27 (m, 8H), 7,17 (s, 1H), 7,11 - (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 84 Hz, 1H), 6,67-6,62 (m, 2H), 5,62 (dJ= 15,6 Hz, 1H), 5,55 (d, J = 15,6 Hz, 1H), 5,51 (t, J = 6,0 Hz, 1H), 5,10 (d, J= ' 15,6 Hz, 1H), 4,94 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 3,53 (t, J= 8,4 Hz, 1H), 2,32 (dd, J = 9,2, 4,4 Hz, 1H), 2,02 (dd, J = 8,0, 3,2 Hz, 1H), MS-ESI 474,3 [M + HF, cal culado para [C31H74FN;3O + HJ* 474,2. Síntese de (1R, 2S)-5-fluoro-2-(1H-indazol-6-i)-espiro [ciclopropano-1, 3'- indolin--2-ona
F
S O Yes > O composto do título foi preparado de um modo similar ao méto- do de síntese quiral de Exemplo A4 usando (1R, 28S)-1"-benzil-2-(1-benzil- iHindazol-6-il) -5-fluorospiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2-ona (560 mg, 1,18 mmois). A purificação por cromatografia em coluna usando sílica gel com 5-95% EtOAc em hexano para dar o composto do título como um sólido creme (179 mg, 52%). *H RMN (400 MHz, CD30D) 5 8,03 (s, 1H), 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,62-7,46 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,88 (t J= 4,8 Hz, 1H), 5,69 (d,J=92 Hz, 1H), 3,39 (tJ = 8,0 Hz, 1H), 2,30-2,71 (m, 1H), 2,23-2,18 (m, 1H); ESI| MS 294,1 [M + HI, calculado para [C17H12FN3O0 + HJ* 294,10.
Síntese de (1R, 2S)-5'-fluoro-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano- 1, 3"-indolin)-2--ona
F S&S
ELI à (8 O composto do título foi preparado de um modo similar ao méto- do de síntese quiral do Exemplo A10 usando (1R, 2S)-5'-fluoro-2-(1H- —indazol6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3 "indolin-|-2-ona (240 mg, 0,818 mmol). A purificação utilizando Isolera Biotage com coluna SNAP 25g com EtOAc 5- ' 90% em hexano produziu o composto do título como um sólido creme (195 . mg, 57% de 97% de ee) com o enanciômero principal (1R, 28), por eluição com 3,7 min (Phenomenex Lux 5u Cellulose-2 (150 x 4,6 mm); EtOH isocrá- ticoa25% em n-hexano; 1,5 mL/min, 24ºC; Detecção: 254 nm). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (18, 2R) foi de 3,2 min, utilizando este método. 'H RMN (400 MHz, CD30D) à 7,47 (s, 1H), 7,38 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,01 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 6,88 (dd, J= 8,8, 4,4 Hz, 1H), 6,79 (t, J = 8,8 Hz, 1H), 5,69 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 3,38 (, J= 8,8Hz,1H),2,28 (dd, J=8,8,4,2 Hz, 1H), 2,21 (dd, J = 9,2, 4,4 Hz, 1H), MS ES! 420,0 [M + HJ", calculado para [C;7H FINO + HJ" 420,0. Síntese de (1R, 2S)-1'-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-5'-metilespiro [ci clopropano-1, 3"-indolin)-2"-ona
AS 1 AO A um frasco de 250 mL de fundo redondo carregado com 60% de NaH(1,20g,30 mmolis) foi adicionado THF anidro (20 mL) e a mistura resultante foi arrefecida a 0ºC. Uma solução de 1-benzil-S-metilindolin-2-ona (2,37 g, 10 mmois) em THF seco (25 mL) foi adicionada ao longo de 2 min, seguido de lavagem com THF (5 mL). Após agitação durante 20 min a 0ºC,
uma solução de dimetanossulfonato de (S) -1-(1-benzil-1H-indazol-6-il) eta- no-1,2-di ila (4,24 g, 10 mmois) em THF seco (45 mL) foi adicionada gota a gota através de um funil de adição durante 40 minutos, seguido de lavagem com THF (5 mL). Após a adição, a mistura resultante foi agitada durante 30 minabC(aTLC mostrou a conclusão), em seguida, deixada O/N à tempe- ratura ambiente.
Após arrefecimento até 0ºC, a mistura de reação foi vertida para um frasco de Erlenmeyer contendo gelo (100 mL) e NH,CI sat. (30 mL) e extraída com EtOAC (150 mL x 2), seca (Na;SO,). Após a remoção dos solventes, o resíduo foi transferido para 100 mL de RBF utilizando 30 mL de EtOAce cristais se formaram, Filtração por sucção produziu o composto do - título como um sólido bege (1,537 g). O filtrado foi concentrado e purificado por Biotage Isolera (EtOAc 20-30% em hexano) e triturado com EtO- 7 Aclhexano para dar 20 cultura como sólido esbranquiçado (1,560 g). O filtra- do foi purificado utilizando o procedimento descrito acima para dar 3 ºcultura como um sólido bege (115 mg). Total 3,212 g (68%). 8,02 (s, 1H), 7,63 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,36-7,20 (m, 9H), 7,14 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 5'H RMN (400 MHz, CDCI;) 6,94 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,64 (d J = 7,2 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 16,8 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com s a 5,59), 5.59 (s, 1H, parcialmente sobrepostos com d a 5,62), 5,55 (d, J = 16,8 Hz 1H) 5,08 (d,J=16,0 Hz, 1H), 4,97 (d, J= 15,6 Hz, 1H), 348 (LJ = 84 Hz, 1H), 2,30-2,25 (m, 1H), 2,02-1,96 (m, 1H), 1,85 (s, 3H), MS ESI 470,3 [M
+ HJ”, calculado para [C32H,7N;O + HJ* 470,2. Síntese de (1R, 2S) -2-(1H-indazol-6-il)-S'-metilespiro [ciclopropano-1, 3'-
indolin)-2-ona Sm As p
A um frasco de 100 mL carregado com (1R, 28)-1"-benzil-2-(1- benzil-1H-indazol-6-il)-S'-metilespiro [ciclopropano-1, 3"-indolin 1-2-ona (469 mg, 1 mmol) foi adicionado THF seco (2 mL) e à mistura resultante foi agita- da a 0ºC antes de KOtBu (1 M em THF, 18 mL, 18 mmois) foi adicionado ao longo de 2 min. Após a adição, a mistura resultante foi agitada durante 15 min a 0ºC e DMSO (1,85 mL) foi adicionado. Oxigênio foi borbulhado duran- te uma hora e a reação de homogênea se tornou heterogênea. LC-MS mos- trou uma boa conversão de 50 min. Ele foi resfriada bruscamente com NH,CI sat.
A reação anterior foi repetida em maior escala usando (1R, 2S)- 1'-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-S'-metilespiro [ciclopropano-1,3"indolin-]- 2'-ona (1,41 g, 3 mmois). Depois de esfriar bruscamente com NH,CI satura- do, duas reações foram combinadas, diluídas com H2zO e extraídas com EtOAC (100 mL x 2). Purificação por Biotage Isolera (10-95% de EtOAc em ' hexano) deu o composto do título como um sólido leve (680 ma, 53%). 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 8,02 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,46 (s, Í 1H), 6,94 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,85 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,78 (s, 1H), 3,32 (t, sobrepondo-se ao resíduo de MeOH), 2,20-2,12
15. (m, 2H), 1,87 (s, 3H); MS ES! 290,1 [M + HJ*, calculado para [CisHisN3O0 + HJ* 290,1. Síntese de (1R, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-S"-metilespiro [ciclopropano-1 3"-indolin)-2'-ona
ÁS o N YO " A uma solução de (1R, 2S) -2-(1H-indazol-6-il)-S'-metilespiro [ci- —clopropano-1, 3-indolin)-2-ona (680 mg, 2,35 mmols) em DMF (16 mL) foi adicionado K2CO; (544 mg, 4 mmolis), seguindo de iodo (851 mg, 3,2 mmois). A mistura resultante foi agitada durante 3 horas à temperatura am- biente, arrefecida a 0ºC, resfriada bruscamente com Na7S20; aq, diluída com H2O, extraída com EtOAC (50 mL x 3) e seca (Na;SO,). A evaporação dos solventes e purificação por Biotage Isolera (EtOAc/hexano gradiente: 10- 90%) produziu o composto do título como um sólido amarelo claro (794 mg, 81%,> 98% ee). O maior enanciômero (1R, 2S)- eluiu aos 9,6 min (Pheno-
menex Lux 5u Cellulose-2 (150 x 4,6 mm); EtOH isocrático a 10% em n- hexano 1,75 L/min, temperatura ambiente, Detecção: 254, 214 nm). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (18, 2R)- foi de 7,7 min, utilizando este método. *H RMN (400 MHz, DMSO-d6) ô 13,46(s,1H), 10,51 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,32 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 7,02 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 8,81 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,86 (s, 1H), 3,16 (t, sobreposição com traço resíduo MeOH), 2,32-2,25 (m, 1H), 2,00- 1,93 (m, 1H), 1,85 (s. 3H); MS ESI 416,0 [M + HJ”, calculado para [C1sHi4lN3O + H]* 416,0. Síntesede(1R,2S)-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-1"-metilespiro Iciclopropano- : 11, 3-indolin)-2"-ona Dx
AB LI o TS AD O composto do título foi preparado de uma maneira semelhante ao método de (1R, 28)-1'-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano-1, 3'indolin-]-2-ona utilizando dimetanossulfonato de (S) -1-(1-benzil- 1Hindazol-6-il) etano-1,2-di ila (6,70 g, 15,8 mmois) e 1-metilindolin-2-ona (2,33 g, 15,8 mmolis). A purificação através de cromatografia em coluna (síli- ca gel, EtOAc 25-50% em hexano) deu o composto do título como um sólido cristalino cor de laranja pálido (5,01 g, 84%), *H RMN (400 MHz, CDC) 5 8,00 (s, 1H), 7,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,30-7,25 (m, 3H), 7,18 (s, 1H), 7,13- 7,10 (m, 3H), 6,92 (d,J=8,6Hz, 1H), 6,85 (d, J=7,6 Hz, 1H), 6,55 (L J= 7,0 Hz, 1H), 5,76 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 5,63-5,49 (m, 2H), 3,41 (t J = 8,8 Hz, 1H), 3,33 (s, 3H), 2,22-2,18 (m, 1H), 2,00-1,96 (m, 1H); ESI MS 380,2 [M + HJ*, calculado para [C25H21N;3O + HJ* 380,18.
Síntese de (1R, 2S) -2-(1H-indazol-6-il)-1'-metilespiro [ciclopropano-1,3"- indolin)-2-ona
SO O a O composto do título foi preparado de um modo similar ao méto- do de síntese quiral de Exemplo A4 usando (1R, 2S)-2-(1-benzil-1H-indazol- 6) 1'-metilespiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (1,16 g, 3,06 mmois). A purificação através de cromatografia em coluna (sílica gel, 3-8% MeOH em CH2Chb) deu o composto do título como um sólido amarelo pálido (656 mg, . 74%), *H RMN (400 MHz, CDC) 5 10,06 (br. s, 1H), 8,05 (s, 1H), 7,64 (d, . 1H, J = 7,6 Hz), 7,36 (s, 1H), 7,14 (t J = 8,7 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 8,7 Hz, 1H), 6,87 (d,J=8,2 Hz, 1H), 6,62 (t J = 7,6 Hz, 1H), 5,91 (d, J=7,9 Hz, 1H), 3,46 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 3,34 (s, 3H), 2,26-2,23 (m, 1H), 2,08-2,04 (m, 1H); ESL MS 290,1 [M + HJ”, calculado para [C18H15N;3O + HJ* 290,13. Síntese de (1R, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)- 1'-metilespiro [ciclopropano-1 3'-indolin)-2'-ona O 1
Z N
PAS OO o Ts La O composto do título foi preparado de um modo similar ao méto- do de síntese quiral do Exemplo A10 usando (1R, 2S) -2-(1H-indazol-6-11)-1"- metilespiro [ciclopropano-1, 3'indolin-)-2"-ona (930 mg, 3,21 mmolis). Precipi- tação com EtOAc seguido de filtração e lavagem com EtOAc deu o compos- to do título (970 mg, 73%, >98% ee) com o enanciômero principal eluindo a 2,4minutos (Phenomenex Lux 5p Amilose-2 150 x 4,6 mm, 2,5 mL /min com isocrática em EtOH a 20% em hexano durante 0,5 min, depois 20-50% EtoH gradiente em hexano ao longo de 2,5 minutos, em seguida isocrático a 50% durante 1 min). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de reten- ção do enanciômero (18, 2R) foi de 3,0 minutos, utilizando este método. H —RMN (400 MHz, CDCI3) 5 10,96 (br. s, 1H), 7,43-7,39 (m, 2H), 7,16 (t J= 7,6 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,89 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,66 (t, J = 7,2 Hz,
1H), 5,91 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,47 (t, ) = 8,4 Hz, 1H), 3,35 (s, 3H), 2,30-2,26 (m, 1H), 2,08-2,04 (m, 1H); ESI MS 416,0 [M + HJ”, calculado para [C18H14IN3O + HJ* 416,03. ] 23D = -210º (c 04, MeOH).Rotação óptica: [ajn = -210º (c 0.4, MeOH). Síntese de (1R,28S)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-iI)-S'-metóxi-1"- metilespiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona b £ Oo YZ “AN 6 XD O composto do título foi preparado de uma maneira semelhante í ao método de (1R, 28)-1"-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano-1,3'indolin-]-2'-ona utilizando dimetanossulfonato de (S)-1-(1-benzil-1H- indazol-6-il) etano-1,2-di ila (1,44 g, 3,39 mmols) e 5-metóxi-1-metilindolin-2- ona (0,601 g, 3,39 mmolis). A purificação utilizando Biotage Isolera (1-50% de EtOAc em hexano, coluna SNAP 25g) originou o composto do título (sóli- do castanho claro, 1,05 g, 76%). 7H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 8,03 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,26-7,23 (m, 3H), 7,11 (d, J =7,6 Hz, 2H) 6,95(d,J=84Hz, 1H), 6,89 (d,J=84 Hz, 1H), 6,67 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 5,63 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 5,41 (s, 1H), 3,37 (t, J=8,8 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 2,23-2,19 (m, 1H), 2,18-2,14 (m, 1H) -OCH3 prótons está obscurecido pelo pico de metanol.
MS ESI 410,2 [M + HJ”, cal- culado para [C26H23N3O> + H]J* 410,2. Síntese de (IR, 28)-2-(1H-indazol-6-il)-5'-metóxi-1"-metilespiro [ciclopropa- no-1, 3'-indolin)-2"-ona b 8 OS hs “A Uma solução de t-butóxido de potássio (1M, 19,23 ml, 0,19 mol) foi adicionado a uma solução de (1R, 2S)-1'-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-
il)-5"-metóxi-1-metilespiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2-ona (0,875 g, 2,1 mmols) em THF anidro (2,62 mL) a 0ºC e a mistura foi agitada durante 15 minutos à mesma temperatura.
Em seguida, DMSO anidro (1,97 mL, 27 mmols) foi adicionado através de uma seringa à mistura a 0ºC e a agitação foicontinuada durante 5 minutos.
A mistura de reação foi purgada com gás O, durante 1,5 hora a 0ºC.
Depois de se agitar a 0ºC durante mais 15 minu- tos, a mistura de reação foi parada com 25% de NH,CI aq. (20 mL). O produ- to foi extraído utilizando EtOAC (40 mL x 2), e a camada de EtOAc combina- da foi lavada com água (10 mL) e seca (Na>SO,) e concentrada sob vácuo a 40ºC/125 mbar.
O resíduo pálido amarelo resultante foi purificado por cro- . matografia em coluna de sílica gel utilizando EtOAc a 5-10% em hexano pa- ra dar o composto do título como um sólido quase branco (445 mg, 65%). H ' RMN (400 MHz, CD30D) 5 8,02 (s, 1H), 7,67 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 6,95-6,90 (m, 2H), 6,68 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 3,38 (t J = 8,4 Hz, 1H),3,20 (s, 3H), 2,28 (dd, J = 9,2, 4,4 Hz, 1H), 2,06 (dd, J = 8,4, 4,8 Hz, 1H),-OCH3 próton combina-se com o pico de metanol.
MS ESI 320,1 [M +
HJ”, calculado para [C19H17N30O, + HJ* 320,2. Síntese de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metóxi-1'-metilespiro [ciclo-
propano-1, 3'-indolin)-2--ona b O ' AN i8 oo Tha “A
De uma maneira semelhante ao método de síntese quiral do Exemplo A10 usando (1R, 28)-2-(1H-indazol-6-il)-S'-metóxi-1'-metilespiro [ciclopropano-1,3"-indolin-]--2'-ona (1,34 9, 4,19 mmois), o composto do título foi obtido sob a forma de um sólido de cor creme (1,71 g, 91%, 98% ee) com o maior enanciômero (1R, 28)- eluindo a 2,6 min (Phenomenex Lux Sp Ami- lose-2150x4,6mm,2,5 mL/min com isocrática em EtOH a 20% em hexano durante 0,5 min, depois 20-50% de EtOH gradiente em hexano ao longo de 2,5 min, em seguida isocrático a 50% durante 1 min). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (18, 2R) foi de
3,25 min, utilizando este método. *H RMN (400 MHz, CDCI;) 5 10,38 (s, 1H), 7,42 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,35 (s, 1H), 7,04 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,77 (d J = 8,4 Hz, 1H), 6,66 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,53 (s, 1H), 3,46 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 3,32 (s, 3H), 2,24 (dd, J = 8,4, 4,8 Hz, 1H), 2,04 (dd, J= 12,4, 48Hz, 1H), MS ESI 446,1 [M + HJ*, calculado para [C19H16IN;O0, + HJ* 446,0. Rotação óptica: [alo =-134º (c 0,238, MeOH). Síntese de (1R,28)-1"-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-i1)-1"-(2- metoxieti)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2'-ona | DNofes Ps AD O composto do título foi preparado de uma maneira semelhante ao método de (IR, 2S)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano-1,3'indolin-]-2'-ona utilizando dimetanossulfonato de (S)-1-(1-benzil-1]H- indazol-6-il) etano-1,2-di ila (1,22 g, 2,87 mmols) e 1-(2-metoxietil) indolin-2- ona (550,0 mg, 2,87 mmolis). A purificação sobre Biotage Isolera (0-80% de EtOAc em hexano, coluna 25g SNAP) originou o composto do título como um sólido castanho pálido (774 mg, 64%). *H RMN (400 MHz, CDC) 5 8,01 (s, 1H), 7,60 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,29-7,27 (m, 3H), 7,19 (s, 1H), 7,14-7,09 (m, 3H), 6,98 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,92 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 6,54 (t J=7,2 Hz, 1H), 5,75 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 5,60 (t, J = 16,0 Hz, 1H), 5,51 (d, J = 16,0 Hz, 1H), 4,08-4,03 (m, 1H), 4,00-3,95 (m, 1H), 3,69 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,43 (t, J =8,0Hz,1H),3,38(s, 3H), 2,24 (dd, J = 9,2, 4,8 Hz, 1H), 2,00 (dd, J= 8,4, 5,6 Hz, 1H); ES| MS 424,2 [M + HJ”, calculado para [C27H25N;O02 + HJº 424,2. Síntese de (1R, 28) -2-(1H-indazol-6-iN)-1"-(2-metoxietil)-spiro [ciclopropano- 1, 3'-indolin)-2"-ona AO, OS Ss “
Uma solução de KO'Bu (1M, 11,97 ml, 11,9 mmois) foi adiciona- do a uma solução de (1R, 28) -2-(1H-indazol-6-il)-1'-(2-metoxietil)-espiro [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2-ona (390 mg, 0,92 mmol) em THF anidro (1,95 mL) a 0ºC e a mistura foi agitada durante 15 min à mesma temperatura. Em seguida, DMSO anidro (1,18 mL, 16,6 mmols) foi adicionado através de uma seringa à mistura em batelada única a 0ºC e a agitação foi continuada du- rante 5 min. Em seguida, mistura de reação foi purgada com gás Oz durante 1,5 hora a 0ºC. Depois de se agitar a 0ºC durante mais 15 min, a mistura de reação foi resfriada bruscamente com 25% de NH,CI aq. (10 mL). O produto foiextraído utilizando EtOAC (20 mL x 2), e a camada de EtOAc combinada . foi lavada com água (10 mL) e seca sobre sulfato de sódio e concentrada sob vácuo a 40ºC/125 mbar. O resíduo amarelado pálido resultante foi puri- : ficado por cromatografia flash sobre Biotage Isolera (utilizando EFtOAc a 5- 10% em hexano, coluna SNAP 25g) para dar o composto do título como um sólido branco (205 mg, 67%). 'H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 8,08 (s, 1H), 7,65 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,42 (s, 1H), 7,12 (t J = 7,6 Hz, 1H), 7,00 (t J = 8,0 Hz, 2H), 6,60 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,10-3,97 (m, 2H), 3,70 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,47 (t J = 8,4 Hz, 1H), 3,38 (s, 3H), 2,29 (dd, J=8,8,4,4 Hz, 1H), 2,08 (dd, J = 6,8, 4,4 Hz, 1H); ES| MS 334,2 [M + HJ*, calculado para [C20H;.N;3O>+H]" 334,2. Síntese de (1R, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"-(2-metoxietil)-spiro [ciclo propano-1, 3-indolin)-2-ona
SA NOÃ8 Nó Pa H O composto do título foi preparado de um modo similar ao méto- do de síntese quiral do Exemplo A10 usando (1R, 28)-2-(1H-indazol-6-i1)-1"- (2-metoxietil)-espiro-[ciclopropano-1,3'-indolin])-2'-ona (260 mg, 0,779 mmol). Purificação usando EtOAc 0-30% em hexano sobre Biotage Isolera com co- luna SNAP 25g produziu o composto do título como um sólido branco (235 mg, 66%, 98% ee) com o maior enanciômero (1R, 2S)- eluindo em 2,6 min
(Phenomenex Lux 5 Amilose-2 150 x 4,6 mm, 2,5 mL/min com isocrática em EtOH a 20% em hexano durante 0,5 min e, em seguida 20-50% de EtOH gradiente em hexano ao longo de 2,5 min, em seguida isocrático a 50% du- rante 1 min). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (1S, 2R) foi de 3,2 min, utilizando este método. '*H RMN (400 MHz, CDCIa) 5 10,39 (s, 1H), 7,40 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,34 (s, 1H), 7,14 (t J =7,6 Hz, 1H), 7,06-7,01 (m, 2H), 6,63 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 5,87 (d, J= 7,6 Hz, 1H), 4,14-3,97 (bm, 2H), 3,70 (t, J = 5,6 Hz, 2H), 3,46 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 3,39 (s, 3H), 2,28-2,26 (m, 1H), 2,05-2,01 (m, 1H); ES! MS 460,1 [M + HT, calculado para [C20H18IN;O, + HJ* 460,0. Rotação óptica: [alo = -239º (c - 0,243, MeOH). Preparação de Compostos da Invenção ] Exemplo A1. (1R*, 28*)-2-(1H-indazol-S5-il)-espiro [ciclopropano-1, 3"-indolin)- 2-ona
QD HN. 2 AV; S' mistura racêmica A uma solução de iodeto de trimetilsulfoxônio (33 mg, 0,15 mmol) em DMF anídro (1 mL) foi adicionado hidreto de sódio (dispersão a 60% em óleo) (16 mg, 0,4 mmol) a 0ºC. A mistura foi agitada durante 15 min, após o que (E) -3-(metileno (1H-indazol-S-il)) indolin-2-ona (26 mg, 0,1 mmol) foi adicionado. A solução foi agitada durante a noite à temperatura ambiente. À reação foi interrompida com solução aq. de NHCI (2 mL), extra- ida com EtOAC (50 mL), seca sobre MgSO, e concentrada até a secura. O composto do título foi isolado por HPLC preparativa) como um sólido branco (5 mg, 18%). *H RMN (400 MHz, ds-DMSO) 5 13,03 (s, 1H), 10,58 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,02 (s, 1H), 7,74 (s, 1H), 7,40 (d, 1H, J = 8,9 Hz), 7,11 (d, 1H,J=8,6H2),6,98(t 1H,J=7,7 Hz), 6,83 (d, 1H, J=7,6 Hz), 6,50 (t, 1H, J =7,3 Hz), 5,94 (d, 1H, 7,5 Hz), 3,17-3,13 (m, 1H), 2,27-2,23 (m, 1H), 1,98- 1,95 (m, 1H); ES| MS 276,1 [M + HJ”, calculado para [CyH13N;O0 + HJ* 276,3.
Exemplo A2. (1R*, 28*) -2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3-indolin]- 2-ona Ç&
H te R”, Sº, mistura racêmica A uma solução de iodeto de trimetilsulfoxônio (264 mg, 1,2 mmol) em DMF anidro (40 mL) foi adicionado hidreto de sódio (dispersão a 60% emdóleo) (140 mg, 3,48 mmolis) a 0ºC. A mistura foi agitada durante 15 minutos, após o que (E) -3-((1H-indazol-6-il) metileno) indolin-2-ona (151 mg, Ú 0,58 mmol) foi adicionado. A solução foi agitada durante a noite à temperatu- - ra ambiente. A reação foi interrompida com solução aq. de NH,CI (10 mL), extraída com EtOAC (4 x 50 mL), seca sobre MgSO, e concentrada até a secura. O diastereômero principal foi isolado por cromatografia em sílica gel (EtOAc/Hex 1:1) como um sólido bege (44 mg, 28%). *H RMN (400 MHz, ds- DMSO) 5 13,01 (s, 1H), 10,61 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 8,01 (s, 1H), 7,63 (d, 1H,J = 8,3 Hz), 7,44 (s, 1H), 6,99 (t, 1H, J = 7,5 Hz), 6,92 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,84 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 6,51 (t, 1H, J = 7,0 Hz), 5,98 (d, 1H, 8,0 Hz), 3,20-3,17 (m,1H) 2,30-2,26 (m, 1H), 2,00-1,95 (m, 1H); ESI| MS 276,1 [M + HJ”, Análi- se calculada para [C1y7H13N30 + HJ* 276,3. Exemplo A3. (18, 2R) -2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2"-ona e À Prá nn | (1Rº, 28”) -2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]- 2'-ona racêmico (25 mg, preparado no exemplo A2) foi separado através de HPLC quiral: Chiralpak 1A (3 x 15 cm), (30% de metanol (0,1% de DE- AICO;z, 70 mL/min) para dar um sólido branco (11,8 mg). HPLC analítico: Chiralpak 1A (15 x 0,46 cm), (40% de metanol (0,1% de DEA)/CO>, 3 mL/min) 98% ee, Rt = 2,7 min.
Exemplo A4. (1R, 2S)-2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2"- ona &
NH o. o Resolução HPLC: (1R*, 28*) -2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)- 2'-onaracêmico (25 mg, preparado no exemplo A2) foi separado através de HPLC quiral : Chiralpak 1A (3 x 15 cm), (30% de metanol (0,1% de DE- ' AVICO>, 70 mL/min) para dar um sólido branco (11,5 mg). - HPLC analítico: Chiralpak 1A (15 x 0,46 cm), (40% de metanol (0,1% de DEAYCO,, 3 mL/min) 97% ee, Rt = min 5.2). Síntese quiral: Uma solução de (1R, 2S) -2-(N1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro- [N-benzil-ciclopropano-1,3-indolin)-2'-ona (6,5 9, até 14 mmois; contém al- gum solvente) em uma mistura de DMSO (20 mL, 286 mmols) e THF (200 mL) foi arrefecida em gelo antes da adição de KOtBu (10,0 g, 89 mmols). À mistura escureceu imediatamente. A mistura foi purgada suavemente com oxigênio a partir balões, aquecendo lentamente até a temperatura ambiente. RMN de uma amostra após 5 horas mostrou aproximadamente 30% de con- versão, e assim a mistura foi deixada agitar durante a noite sob um frasco de oxigênio (sem purga). Sem posterior conversão ter ocorrido, e assim KOtBu adicional (20,0 g, 178 mmols) foi adicionado. A absorção de oxigênio foi i- mediatamente evidente, o que sugere que este grande excesso de base é necessário para a desproteção eficaz. Após um adicional de 5 horas, a mis- tura foi vertida em NH,CI aq. sat. (100 mL). A maior parte do THF foi removi- da sob pressão reduzida, e a mistura resultante foi extraída com porções de EtOAC(4x50 mL). As porções orgânicas combinadas foram lavadas com tiossulfato de sódio sat. aq. (50 mL) e salmoura (50 mL), secas sobre Na>2SO;, filtradas e concentradas. O resíduo foi suspenso em CH2Clz (100 mL) e vertido sobre uma almofada de sílica curta (2 cm de profundidade x 5 cm de diâmetro), sob sucção.
O subproduto principal (Rf 0,6 em 1:1 EtO- Aclhexano, Rf 0,15 em CH2Cl2) foi eluído utilizando CH2Cl> (ca. 1 L). O pro- duto (Rf 0,25 em 1:1 EtOAcfciclo-hexano) foi eluído usando 2% a 5% de MeOH/EtOAc.
Uma impureza coeluída com o produto, como o último mal'iscado". Concentrando as frações que contêm o produto proporcionou o composto do título (2,5 g, 84%) como um sólido castanho pálido, contamina- do com um segundo composto contendo ciclopropano (<10%; possivelmente um composto monobenzilado). HPLC indicou uma pureza óptica de 94% e.e. (embora a presença de uma impureza de coeluição é suspeito), com o maior enanciômero (IR, 2S)- eluindo 14,3 min (Daicel Chiralpak AS-H (250 x 4,6 . mm); EtOH isocrático a 40% em n-heptano, 1 mL/min, 35ºC; Detecção: 254, 230, 210 nm). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de reten- 7 ção do enanciômero (18, 2R) foi de 9,9 min, utilizando este método.
Os da- dos analíticos foram idênticos para o obtido no exemplo A2. Exemplo A5. (1R*, 2R*) -2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3'-indolin]- 2-ona á > O R”, S”, místura racêmica e R*.R* mistura racêmica O diastereômero menor da reação do Exemplo A2 foi isolado como um sólido bege (3,5 mg, 2%). '*H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 12,97 (s, 1H), 10,33 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,99 (s, 1H), 7,59 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 741 (s,1H) 7,18-7,12 (m, 2H), 6,99-6,94 (m, 2H), 6,86 (d, 1H, J = 7,8 Hz), 3,32 (t, 1H, J = 8,3 Hz), 2,27-2,23 (m, 1H), 2,18-2,15 (m, 1H); ES| MS 276,1 [M + HJ”, calculado para [C;;?H13N;O0 + HJ* 276,3.
Exemplo A6. (1R%, 28) - e (1IR%2R*) 2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'- metoxispiro-[ciclopropano-1,3"-indolin])-2'-ona ' =N o Ô NH
C : : HN Rr”, Sº, mistura racêmica e O R*;Rº mistura racêmica A uma solução de NaH (380 mg, 9,5 mmols) em DMF (8 mL) a 0ºC foi adicionado iodeto de trimetilsulfoxônio (694 mg, 3,15 mmois). A mis- . 5 tura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 30 min seguido pela adição de (E/Z)-3-((3-lodo-1H-indazol-6-il)-metileno)-5-metoxiindolin-2- ' ona (658 mg, 1,68 mmol, E/Z 84:16) em DMF (2 mL). A mistura de reação foi agitada à temperatura ambiente durante 18 h. A reação foi arrefecida a 0ºC e resfriada bruscamente com NH,CI saturado. A mistura foi extraída com EtOAce os extratos orgânicos combinados foram lavados com salmoura, secos sobre MgSO, e concentrados para dar um óleo viscoso amarelo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (95:5 CH2Cl/MeOH) para se obter um sólido amarelo, que foi então triturado com uma mistura 1:1 de hexano e EtOAc para dar o composto do título como um pó branco (471 mg, 69%). Uma mistura de diastereômeros (7:1 por RMN) foi obtida. Em ensaios repetidos, a razão de diastereômeros varreu 6:01-10:01 a favor do 1R*, 28” diastereômero. O material foi utilizado sem qualquer pu- rificação adicional como um intermediário para as reações subsequentes. Alternativamente, o material foi recristalizado a partir de metanol para dar o composto do título como uma mistura 00:01 a favor do 1Rº*, 2S* diastereô- mero. Os dados analíticos para o isômero principal: 1H RMN (400 MHz, des- DMSO) 5 13,48 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,33 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,02 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 6,74 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 6,57 (dd, J= 8,4 Hz, J= 2,4 Hz, 1H), 5,62 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,29 (s, 3H), 3,18 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 2,34 (ddjJ=7,8Hz,J=46 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 9,2 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), MS ESI 432,1 [M + HJ", calculado para [C18H14IN30, + HJ* 432,0.
Exemplo A7. (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro [ciclopropano- 1, 3-indolin)-2'-ona
V o | O o HN abs; o N YO N/aos H
O Resoluçãode HPLC: . (1Rº*, 28*)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro racêmico es- piro [ciclopropano-1,3-indolin)-2-ona (15 g, preparado no exemplo A6) foi Í separado através de HPLC quiral: Chiralcel OJ-H (3 x 15 cem), (30% de me- tanol! (0,1% de DEAYCO;>, 75 mL/min) para dar um sólido branco (6,75 g). HPLC analítico: Chiralpak 1A (15 x 0,46 cm), (40% de isopropa- nol (0,1% de DEAY/CO>, 3 mL/min) 99% ee, Rt = min 2.1). Síntese quiral: A. (1R 28)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-i)-S"-metoxispiro fciclopropano-1, 3-indolin)-2-ona O composto do título foi preparado de uma maneira semelhante ao método de (1R, 28)-1-benzil-2-(1-benzil-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano-1,3indolin-|l-2'-ona utilizando dimetanossulfonato de (S)-1-(1-benzil-1H- indazol-6-il) etano-1,2-di ila (3,35 9, 7,90 mmois) e 1-benzil-5-metoxiindolin- 2-ona (2,00 g, 7,90 mmols). O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (15-40% de EtOAc em hexano) seguido por trituração (EtOAc) para dar o composto do título como um sólido branco (1,97 9, 52%). 'H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 8,01 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,36-7,23 (m, 10H), 7,14 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,63 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,53 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,61 (d, J = 15,1 Hz, 1H), 5,54 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 5,37 (s, 1H), 5,07 (d, J = 15,4 Hz, 1H), 4,95 (d, J = 15,7 Hz, 1H), 3,51 (t, J=81 Hz, 1H), 3,18 (s, 3H), 2,32-2,29 (m, 1H), 2,09-2,00 (m, 1H). MS ESI 486,3[M+H]”, calculado para [C32H;7N;3O, + HJ" 486,2.
B. (1R, 2S)-2-(1H-indazol-6-il)-5-metoxispiro [ciclopropano-1,3"- indolinJ--2-ona O composto do título foi preparado de um modo similar ao méto- do de síntese quiral de Exemplo A4 usando (1R, 2S)-1"-benzil-2-(1-benzil- 1H-indazol-6-il)-S'-metóxi-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2'-ona (1,0 g, 2,1 mmois). A purificação através de cromatografia em coluna (sílica gel, EtOAc 30-80% em hexano) obteve-se o composto do título como um sólido branco (0,50 g, 80%). *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 13,02 (br s, 1H), 10,42 (br s, 1H), 8,02 (s, 1H), 7,64 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,45 (s, 1H), 6,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,73 (d,J=8,2Hz, 1H), 6,55 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 3,20 (s, . 3H), 3,18 (t, J = 8,7 Hz, 1H), 2,34-2,28 (m, 1H), 1,98-1,95 (m, 1H). MS ESI 306,1 [M + HJ”, calculado para [C18H15N;3O> + HJ* 306,12. ] 23D =-225º (c í 0,441, MeOH)Rotação óptica: C. (1R, 28S)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5-metoxispiro [ciclopropa- no1,3-indolin)-2-ona O composto do título foi preparado de um modo similar ao mé- todo de síntese quiral para o exemplo A10 utilizando (1R, 28)-2-(1H- indazol-6B-il)-5'-metoxispiro [ciclopropano-1,3'indolin-]-2"-ona (0,40 g, 1,3 mmol). O produto em bruto foi triturado com EtOAC (5 mL) para dar o com- postodo título como um sólido branco (0,52 g, 93%, ee> 98%) com o maior enanciômero (1R, 2S)- eluindo 8,5 min (Phenomenex Lux 5u Celulose-2 (150 x 4,6 mm), 1,0 mL/min; isocrática a 10% de iPrOH em n-hexano du- rante 1,0 min, depois iPrOH gradiente de 10-90% de n-hexano ao longo de 10 min, em seguida isocrático a 90% de iPrOH em n-hexano durante 2,0 min 1,0ml/min,24ºC; Detecção: 254 nm). A partir do padrão de referência racêmico, o tempo de retenção do enanciômero (1S, 2R) foi de 6,2 min, utilizando este método. *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 13,48 (br s, 1H), 10,43 (br s, 1H), 7,49 (s, 1H), 7,31 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,02 (d, J= 8,1 Hz, 1H), 6,73 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,62 (s, 1H), 3,29 (s, 3H) 3,19(tJ=8,4Hz, 1H) 2,36-2,32 (m, 1H), 1,99-1,96 (m, 1H). MS ESI 432,1 [M + HJ”, calculado para [C18H14IN;3O, + HJ* 432,0. Rotação óptica: [a]º?n = 143º O-(c 0,399, MeOH).
Exemplo A8. (18, 2R) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro [ciclopropa- no-1, 3-indolin)-2"-ona » )
DL NENE Nx o (1R*, 287) -2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-5S'-metoxispiro racêmico espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2'-ona (15 g, preparado no exemplo A6) foi separado através de HPLC quiral: Chiralcel OJ-H (3 x 15 cm), (30% de me- tanol (0,1% de DEAVCO», 75 mL/min) para dar um sólido branco (6,6 9). ' HPLC analítico: Chiralpak 1A (15 x 0,46 cm), (40% de isopropa- é nol (0,1% de DEA)/CO,, 3 mL/min) 99% ee, Rt = min 3.4). Exemplo A9. (1R*, 28") -2-(3-iodo- 1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3"- indolin)-2'-ona O ) a O d H Rº, S*, mistura racêmica A. (1R*, 287) - e (1R*, 2Rº) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [oi clopropano-1, 3-indolinJ-2-ona O composto foi utilizado sem qualquer purificação adicional co- mo um intermediário, ou o diastereômero puro foi obtido com o seguinte pro- cedimento. Hidreto de sódio (309,9 mg, 7,75 mmols) (dispersão a 60% em óleo) adicionado a DMF anidro (2,5 mL) à temperatura ambiente. Em segui- da iodeto de trimetilsulfoxônio (568,4 mg, 2,58 mmolis) foi adicionado à sus- pensão, à mesma temperatura. A mistura foi agitada durante 15 minutos, após o que se adicionou uma solução de (E/Z) -3-((3-iodo-1H-indazol-6-il)- metileno)-indolin-2-ona (500 mg, 1,29 mmol) em DMF (2,0 ml) foi adicionado. A solução foi agitada a 55ºC durante 5 horas antes de resfriar bruscamente a reação em relação à solução de metanol (1 mL) à temperatura ambiente durante 15 min antes da adição de água (50 mL). O produto foi extraído com acetato de etila (2 x 50 mL), seco sobre NazSO, anidro e concentrado até a secura.
O sólido foi suspenso em tolueno (21 mL) e recolhido para dar o composto do título (331 mg, 64%). Como uma mistura 9:1 em favor do R*, S* diastereômero.
Este sólido branco foi utilizado sem qualquer purificação adi- cionalcomo um intermediário em reações subsequentes. '?H RMN (400 MHz, ds-DMSO) 5 13,47 (s, 0,9 H), 13,41 (s, 0,1 H), 10,62 (s, 0,9 H), 10,35 (s, 0,1 H), 7,47 (s, 0,9 H), 7,43 (s, 0,1 H), 7,30 (d, J= 8,0 Hz, 0,9 H), 7,26 (d, J= 8,0 Hz, 0,1 H), 7,23 (m, 0,1 H), 7,15 (m, 0,3 H), 7,05-6,98 (m, 2H), 6,85 (m, 1H), 6,53 (t, J = 7,6 Hz, 0,9 H), 5,97 (d, J = 7,6 Hz, 0,9 H), 3,33 (m, 0,1 H, parci- almente obscurecido por sinal de água), 3,18 (t, J = 8,4 Hz, 0,9 H), 2,31 (dd, . J=7,2,4,8 Hz, 0,9 H), 2,26 (m 0,1 H), 2,16 (dd, J = 8,8, 4,0 Hz, 0,1 H), 1,98 (dd, J = 8,8, 4,8 Hz, 0,9 H). ' B. (1R*, 28”) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2-ona A mistura diastereomérica (100 mg) obtido acima foi tratada com THF (1 mL) a 55ºC durante 15 minutos depois arrefecida até a temperatura ambiente, durante 30 min.
O sólido esbranquiçado foi recolhido por filtração para dar o composto do título (32 mg, 32%). 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 13,47 (s, 1H), 10,62 (s, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,30 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,02-6,98 (m, 2H) 6,84(d,J=7,6Hz,1H),6,53(tJ=7,6Hz, 1H), 5,97 (d, J=7,6 Hz, 1H), 3,18 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 2,31 (dd, J =7,2 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), 1,98 (dd, J = 88 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), MS ESI 402,0 [M + HJ]*, calculado para [Ci7rH2lIN30 + HJ]* 402,0. Exemplo A10. (1R, 28) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'- indolinl-2-ona O 1 HN avÉ OO O NTabs H o Resolução HPLC: (1R”, 28*)-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"- indolin])-2'-ona racêmico (35 mg, preparado no exemplo de A9) foi separado utilizando HPLC quiral: Lux Celulose AXIA (150 x 21,2), (gradiente de 10% de isopropanol/hexano a 90% de isopropanol/hexano a 20 mL/min) para dar um sólido branco (8,8 mg). HPLC Analítico: Lux Celulose AXIA (150 x 4,6 mm), (gradiente de 10% de isopropanol/hexano a 90% de isopropanol/hexano, 1 mL/min) 98% ee, Rt = min 7.8).
Síntese quiral: Uma mistura de (1R, 28S)-2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropa- no-1,3-indolin)-2'-ona (2,20 g, 8,0 mmols, 94% ca. ee) e K;CO; (2,21 g, 16,0 mmois) em DMF seco (20 mL) foi tratada com uma solução de 12 (3,45 9, . 13,6 mmols) em DMF seco (15 mL), adicionando a esta última por meio de bomba de seringa durante 45 min. A mistura foi agitada durante 1,5 hora e ' depois vertida sobre uma mistura de água (400 mL) e Na;S20; sat. aq. A mistura resultante foi triturada em um banho de ultrassom durante 30 mi- —nutos para dispersar os aglomerados pegajosos de sólidos, em seguida, fil- trada. Os sólidos foram lavados com água (2 x 50 mL), secos sob sucção parcialmente, em seguida, purificados duas vezes com acetona para remo- ver a água residual. HPLC da mistura em bruto indicou uma pureza ideal de 95% ee com o maior enanciômero (1R, 2S)-eluindo 14,1 min (Daicel Chiral- pakAS-H(250x46 mm); EtOH isocrático a 40% em n-heptano, 1 mLmin, 35ºC; Detecção: 254, 230, 210 nm). A partir do padrão de referência racêmi- co, o tempo de retenção do enanciômero (1S, 2R) foi de 8,4 min, utilizando este método, e ambos os enanciômeros do produto do diastereômero menor foram também detectados em 6,0 min e 6,9 min. O material da linha de base foiremovido por passagem de uma solução do produto de EtOAc através de uma almofada de sílica curta (2 cm de profundidade x 4 cm de diâmetro), eluindo com EtOAc adicional. A purificação adicional foi então tentada por trituração. Et2O e tolueno removeu algumas impurezas, mas sem aumento da pureza óptica foi observada. A recristalização a partir de THF/cíclo- hexanoe de AcOEtfciclo-hexano foi também bem sucedida, e por isso o ma- terial foi purificado por cromatografia em coluna de sílica (20 cm de profundi- dade x 4 cm de diâmetro) utilizando 1:1 EtOAc/hexano para dar o composto
. 88/188 do título (1,47 g, 46%) como um pó esbranquiçado. Os dados analíticos fo- ram idênticos aos obtidos no exemplo A9. Exemplo A11. (1S, 2R) -2-(1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3"-indolin)- 2-ona 1
RLL PE os RN o (1R*, 28*)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro — [ciclopropano-1,3"- indolin)-2-ona racêmico (35 mg, preparado no exemplo de A9) foi separado utilizando HPLC quiral: Lux Celulose AXIA (150 x 21,2), (gradiente de 10% ] de isopropanol/hexano a 90% de isopropanol/hexano a 20 mL/min) para dar . um sólido branco (7,7 mg). HPLC analítico: Lux Celulose AXIA (150 x 4,6 mm), (gradiente de 10% de isopropanol/hexano a 90% de isopropanol/hexano, 1 mL/min) 98% ee, Rt = min 6.7). Exemplo A23. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*,28)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- no)metil)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2'-ona
SN n O * “TFA R$, S*, mistura racêmica o . 15 A (E)2-(3-(4-((dimetilamino)metil)estiril)-1-((2-(trimetilsili) etóxi) ” metil)-1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]-2-ona 7 O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A22 em WO,2010/115279, Método 1A, utilizando N, N-dimetil-1-(4- vinilfenil) metanamina (80 mg, 0,15 mmol). O composto do título foi isolado por cromatografia em sílica gel (3:1 CHCIl/MeOH) para dar o composto do título como um sólido bege (38 mg, 45%). MS ESI 565,4 [M + HJ”, calculado para [C34H40N40,Si + HJ* 565,7.
. 89/188 B. 2,2,2-triluoroacetato de (1R*, 28") -2-(3-(4-((dimetilamino) metil) estiril)- 1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin]-2"- ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A22 em WO2010/115279, Método 1B, usando (38 mg, 0,052 mmol) A mistura de reação em bruto foi concentrada sob pressão reduzida até a secura e purificada por HPLC preparativa de fase reversa para dar o composto do título como um sólido branco e como o sal de TFA (11 mg, 31%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 ppm 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7.78 (d, 2H, J = 8,3 Hz), 7,56-7,48 (m, 5H), 7,08-7,04 (m, 2H), 6,94 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 6,59 (t1H,J=7,8Hz),6,00 (d, 1H, J=8,0 Hz), 4,38 (s, 2H) 3,39-3,33 : (m, 1H), 2,90 (s, 6H), 2,28-2,22 (m, 1H), 2,22-2,17 (m, 1H); MS ES| 435,2 [M + HJ”, calculado para [CosH26N4O + HJ” 435,5. ' Exemplo A24. 2,2,2-trifluoroacetato de 1R,28)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- no)metil)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona ra NÓ
O O PAO) Q7 wo A uma solução de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-spiro [ciclopro- pano-1,3"-indolin)-2'-ona (20 mg, 0,05 mmol) em DMF (0,4 mL) e água (0,1 mL) adicionou-se (E)-N N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2- il)-vinil)-fenil) metanamina (25 mg, 0,08 mmol) de fluoreto de potássio (6 mg, 0,1 mmol) e Pd(PPh3)4 (3 mg, 0,002 mmol). A mistura foi ” 20 aquecida a120ºC durante duas horas sob irradiação de micro-ondas. Aceta- 2 to de etila (50 mL) foi adicionado e a solução foi lavada com água (2 x 5 mL), ' salmoura (5 mL) e seca sobre MgSOa,. Purificação por HPLC preparativa de fase inversa originou o composto do título como um sólido amarelo (12 mg, 44%). :
. 90/188 Exemplo A25. 2,2 2-trifluoroacetato de (18,2R)(E)-2-(3-(4-((dimetilamino)me- tiestiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona
NO *TFA HN O o PA (> Y
À wo A uma solução de (18, 2R) -2-(3-iodo-1H-indazol-spiro [ciclopro- pano-1, 3-indolin)-2"-ona (20 mg, 0,05 mmol) em DMF (0,4 mL) e água (0,1 - 5 mL) adicionou-se (E)-N, N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2- il)-vinil)-fenil) metanamina (25 mg, 0,08 mmol) de fluoreto de potássio (6 mg, 0,1 mmol) e Pd (PPh3)4 (3 mg, 0,002 mmol). A mistura foi aquecida a 120ºC durante duas horas sob irradiação de micro-ondas. Aceta- to de etila (50 mL) foi adicionado e a solução foi lavada com água (2 x 5 mL), salmoura (5 mL) e seco sobre MgSO,. Purificação por HPLC preparativa de fase inversa originou o composto do título como um sólido amarelo (4 mg, 15%). Exemplo A2Z6. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R*,2R*)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- no)metil)estiril)- 1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin]-2"-ona nO *TFA
O -=0 é R*, S*, mistura racêmica W Durante uma preparação em maior escala do Exemplo A23 (obtido como um sólido amarelo pálido, 63 mg), do diastereoisômero menor correspondente, isto é, o composto do título, foi obtido como um sólido bran- co por HPLC preparativa de fase reversa (4,6 mg). 1H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 ppm 8,00 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,77 (d, 2H, y = 8,4 Hz), 7,56-7,50
. 91/188 (m, 5H), 7,23 (t, 1H, J = 7,6 Hz), 7,16-7,05 (m, 3H), 6,96 (d, 1H, J=7,6 Hz), 4,33 (s, 2H) 3,44-3,38 (m, 1H), 2,88 (s, 6H), 2,43-2,40 (m, 1H), 2,25-2,23 (m, 1H): MS ESI 435,2 [M + HJ", calculado para [CosH26N4O + H]* 435,5.
Exemplo A34. (1R“2S8*-(E)-2-(3-(4-((dimetilamino)meti)estiril)-1H-indazol-6- il-5S-metoxiespiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona
NÃ one O
AP AS - IDO b R”, Sº, mistura racêmica N A. DMF (3 mL) foi adicionado a uma mistura de NaH (60%, 85,2 mg, 2,1 mmolis) e iodeto de trimetilsulfoxônio (131,5 mg, 0,60 mmol). A mis- tura resultante foi agitada à temperatura ambiente durante 10 min seguido pela adição de 2,2,2-trifluoroacetato de (E)-3-((3-metileno ((dimetilamino) metil)-estiril)-1H-indazol-6-11)-(4)-S-metoxiindolin-2-ona (163 mg, 0,29 mmol) como uma solução em DMF (6 mL, dividido por transferência e lavagem de frasco). A mistura de reação não estava completa após agitação à tempera- tura ambiente durante 24 horas. A mistura foi aquecida a 55ºC durante uma hora, mas ainda não estava completa. Após arrefecimento até a temperatura ambiente, NaH (60%, 44 mg, 1,1 mmol) e iodeto de trimetilsuifoxônio (69,5 mg, 0,31 mmol) foram adicionados e a mistura foi aquecida a 55ºC durante 7 uma hora antes de resfriar bruscamente pela adição de água (25 m/) e sal- moura (25 mL). A mistura foi extraída com EtOAC (300 mL) e a camada or- ' gânica foi lavada com salmoura (2 x 25 mL), seca sobre Na2SO, e concen- tradain vácuo. O produto bruto foi purificado por cromatografia em sílica gel (5-7,5% de NH3 a 2M em MeOH-DCM) para dar o composto do título como um sólido amarelo (42,8 mg, 32%). 'H RMN (400 MHz, DMSO-ds) à ppm 13,11 (s, 1H), 10,43 (s, 1H), 8,07 (d, J = 8,8Hz, 1H), 7,64 (d, J = 7,6Hz, 2H),
. 92/188 7,47 (m, 3H), 7,29 (d, J = 8,0Hz, 2H), 7,03 (d, J = 8,8Hz, 1H), 6,74 (d J= 8,4Hz, 1H), 6,57 (dd, J = 8,4, 2,4Hz, 1H), 5,65 (d, J = 2,4Hz, 1H), 3,38 (s, 2H), 3,28 (s, 3H), 3,20 (t, J =7,6Hz, 1H), 2,34 (m, 1H), 2,14 (s, 6H), 1,99 (m, 1H); MS ESI [M+ H]* 465,2, calculado para [Co9H>8N,O02+ H]* 465.2.
B. Escala maior, sal de TFA: NaH (60%, 491 mg, 12,29 mmois) foi adicionado, em três porções, a uma mistura arrefecida em gelo de iodeto de trimetilsulfoxônio (959,3 mg, 4,36 mmols) em DMF (12 mL). A mistura resultante foi agitada a 0ºC durante 10 min seguido pela adição de (E)-3-((3- metileno ((dimetilamino) metil)-estiril)-1H-indazol-6-1I)-(4) -5 -metoxiindolin-2- ona(984,4mg, 2,02 mmols) como uma suspensão em DMF (12 mL, dividido . por transferência e lavagem do frasco). A mistura de reação foi aquecida até a temperatura ambiente ao longo de 10 min, em seguida, aquecida a 55ºC : durante 17 horas antes da extinção por adição de água (25 ml) e salmoura (25 mL). A mistura foi extraída com Et2O — 01:01/DCM (250 mL, emulsão observada), seguido de DCM (2 x 50 mL) e a camada orgânica foi lavada com salmoura (25 mL), seca sobre Na;SO, e concentrada in vácuo, e purifi- cada por cromatografia em sílica gel (2-8% de NH3 2M-MeOH em DCM). A purificação adicional por HPLC preparativa para produziu o diastereômero principal como o sal de TFA (sólido amarelo, 168,4 mg, 18%). 'H RMN (400 MHz, CD;OD)ô ppm 38,04 (d, J=8,8 Hz, 1 H), 7,78 (d, J=7,5 Hz, 2 H), 7,37 - 7,65 (m, 5 H), 7,07 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 6,84 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 6,62 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 5,59 (br, s., 1 H), 4,33 (s, 2 H), 3,387 (m, 1 H), 3,27 (s, 3 H), 2,89 (s, 6 H), 2,26 (m, 1 H), 2,19 (m, 1 H); MS ESI [M+ HJ* 465,3, calculado para [CooH2sN.4O2+ HJ" 465,2. Exemplo A35. cloridrato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-((dimetilamino)metiNestiril)- ' 1H-indazol-6-il)-S"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona . A . Ho OMe O Tr "e é» N Õ 8
: 93/188 O composto do título foi preparado de um modo semelhante ao Exemplo AS1B usando (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-S'-metoxispiro [ci- clopropano-1,3'-indolin)-2'-ona (251,3 mg, 0,58 mmol) e (E)-N,N-dimetil-1-(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) metanamina (191,5 mg, 067 mmol). O produto foi extraído utilizando EtOAC (40 mL) com um cartucho de 3 mL de Varian Chemelut. Após a remoção dos solventes in vá- cuo, o composto do título foi purificado por cromatografia em Biotage (sílica, SNAP-25 g, 5-20% de MeOH em DCM). A trituração com 1:1 ELI2O/DCM rendeu o composto do título (92,1 mg, 34%). HCI (IM em Et20, 0,25 mL, 0,25mmol)foi adicionado de um modo gota a gota, a uma solução arrefeci- da em gelo de uma base livre (92 mg, 0,20 mmol) em THF (10 mL), e a mis- tura resultante foi deixada agitar em gelo durante 40 minutos, em seguida, ' Et20 (10 mL) foi adicionado à mistura. A filtração sob vácuo rendeu o com- posto do título como o sal de cloridrato (sólido laranja-vermelho, 79 mg, 79%). 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 ppm 8,05 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,77 (d, J=8,0 Hz, 2 H), 7,48 - 7,63 (m, 5 H), 7,09 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 6,84 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 6,61 (dd, J=8,3, 2,3 Hz, 1 H), 5,61 (d, J=2,3 Hz, 1 H), 4,36 (s, 2H), 3,35 (m, 1 H), 3,28 (s, 3 H), 2,89 (s, 6 H), 2,26 (dd, J=7,7, 5,1 Hz, 1 H), 2,18 (dd, J=8,8, 4,8 Hz, 1 H); MS ESI [M+ HJ* 465,3, calculado para [Co9H2sN,4O2+ HJ 465,2, Rotação Óptica: talo =-70º (c 0,445, MeOH). Exemplo A36. 2,2,2-trifluoroacetato de (18,2R)-(E)-2-(3(4-((dimetilami- no)metiNestiril)-1H-indazol-6-il)-S"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"-indolin])-2"- ona é ; O «TFA N . " O Meo : 8.
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1B, utilizando (18, 2R) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro [ciclopropano-1,3'-indolin]-2'-ona (40 mg, 0,092 mmol) e (E)-N,N-dimetil-1(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxa borolan-2-il)-vinil)-benzil)-metanamina
. 94/188 (33,3 mg, 0,115 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (22 mg, 39%). *H RMN (400 MHz, CD30D) à 8,02 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J=7,6 Hz, 2H), 7,54-7,49 (m, 5H), 7,04 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H) 433(s,2H),3,37 (tJ=84Hz, 1H), 3,26 (s, 3H), 2,88 (s, 6H), 2,25- 2,23 (m, 1H), 2,20-2,21 (m, 1H); ES! MS 465,3 [M + HJ*, calculado para [C29H,8N40, + HJ* 465,2. Rotação óptica: [a] 5 =85º (c 0,542, Metanol). Exemplo A40. (1R*, 28*)-5"-fluoro-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano-1, 3-indolin)-2"-ona 1
NH . F . R*, Sº, mistura racêmica o lodeto de trimetilsulfoxônio (173,8 mg, 0,789 mmol) foi adiciona- do a uma suspensão de hidreto de sódio (94,76 mg, 4,12 mmols) (dispersão a 60% em óleo) em THF (4,0 mL) à temperatura ambiente. A mistura foi agi- tada durante 15 min, após o que se adicionou uma solução de (Z)-5-fluoro-3- ((3-iodo-1H-indazol-6-il) metileno) indolin-2-ona (160 mg, 0,394 mmol) em THF (24 mL) foi adicionado. A solução foi agitada a 50ºC durante 7 horas antes de resfriar bruscamente a massa de reação sobre 10% de solução de - NH,CI (15 mL) à temperatura ambiente. O produto foi extraído utilizando a- cetato de etila (15 mL x 2) e a camada orgânica foi seca sobre Na;SO, e ' evaporada em vácuo. A trituração com hexano (5 mL) deu o composto do título como um sólido creme (89 mg, 54%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-d;s) 5 13,50 (s, 1H), 10,65 (s, 1H), 7,50 (s, 1H), 7,31 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,00 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 6,85-6,81 (m, 2H), 5,81 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 3,22 (m, 1H), 2,43 (m, 1H), 2,01 (m, 1H); ES! 420,0 [M + H]*, calculado para [CH FINO + HJ 420,0.
: 95/188 Exemplo A41. 2,2 2-trifluoroacetato de 2,2,2-trifluoroacetato de.(1R“,28*)- E)-5'-metóxi-2-(3-(4-(morfolinometil)estiril)- 1H-indazol-6-i)espiro[ciclopro- pano-1,3"-indolin)-2"-ona
N CO
FÊ NH 2 - TFA / o, T Dl o
H ' O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do * 5 Exemplo A45 em WO2010/115279, exceto que substituindo (1R*, 28”) -2-(3- iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro [ciclopropano-1,3'-indolin)-2'--ona (30 mg, 0,070 mmol) e (E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1, 3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzil)-morfolina (30 mg, 0,091 mmol). A purificação por cromatografia em coluna (sílica gel, CH2Cl/MeOH, 95:5 a 94:6) deu um material bruto que foi 85% puro por LC-MS. Este material foi adicionalmente purificado por HPLC prepa. para dar um sólido branco (18 mg, 51%); Dados espectrais foram i- dênticos aqueles obtidos no Exemplo A42B. Exemplo A42. cloridrato de (1R,28)-(E)-5'-metóxi-2-(3-(4-(morfolinometil)es- tiri)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2--ona Hc! N Om ? o. v O: o
H
- 96/188 A. (E)-4-(4-(2-(4,4,5, 5-tetrametil-1,3, 2-dioxaborolan-2-il) vinil) benzil)morfolina
ON o) ROO
JF º Um frasco de fundo redondo seco em forno foi arrefecido sob atmosfera de Na, e, em seguida, carregado com 4-(4-etinilbenzil) morfolina (120 mg, 0,598 mmol), tolueno (25 mL), e 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolano (0,43 mL, 2,98 mmolis)., A mistura foi agitada durante 15 min enquanto se purga da solução com Na. HRuCI (CO) (PPh3)3 (29 mg, 0,030 ' mmol) foi em seguida adicionado e a reação foi aquecida a 50ºC durante 18 . h. A reação foi resfriada bruscamente com NaHCO; (sat). (10 mL), extraída com EtOAc, e a camada orgânica foi lavada com salmoura (2X) e, em segui- da, seca sobre MgSO,. O solvente foi removido e o resíduo resultante foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel, hexanos/EtOAc, 2:3 a 1:2) para dar um sólido branco (155 mg, 79%). 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,44 (d, 2H, J = 8,0 Hz), 7,38 (d, 1H, J = 18,8 Hz), 7,30 (m, 2H), 6,45 (d, 1H, J = 18,5 Hz), 3,72 (bs, 4H), 3,49 (bs, 2H), 2,45 (bs, 4H), 1,31 (s, 12H), MS ES! 330,1 [M + HJ*, calculado para [C19H,8BNO; + HJ* 330,22. B. Cloridrato de (1R,28)-5-metóxi-2-(3-(4-(morfolinometil)estiril)- 1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3-indolin--2-0na
ON O JAN o OO e Um frasco de fundo redondo foi carregado com (1R, 28)-2-(3- iodo-1H-indazol-B-il)-5'-metoxispiro [ciclopropano-1,3"--indolin)-2'-ona (255 mg, 0,592 mmol), (E) 4-(4-(24,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzil)-morfolina (260 mg, 0,710 mmol), LiCI (75 mg, 1,78 mmol), dioxano (6,0 mL), e Na;CO; (3,0 m! de uma solução aquosa a 1M). A mistura foi purgada
. 97/188 com um frasco de Ar, durante 15 min e, em seguida, Pd(PPh3)4 (21 mg, 0,0178 mmol) foi adicionado e a reação foi aquecida a 100ºC durante 18 ho- ras. A reação foi arrefecida, EtOAc e NaHCO; (sat) foram adicionados, e a mistura foi transferida para um funil de separação. A camada orgânica foi la- vadacom NaHCO; (sat), salmoura e depois seca sobre MgSO,. O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel, CH;Cl/MeOH, 9:1) para dar um sólido que foi sonicado com Et20O e filtrado para dar 183 mg, 81% de um sólido branco. O sal de HCI foi preparado por dissolução da base livre (183 mg, 0,361 mmol) em THF (2 mL) e em seguida HCI(0,72mL de uma solução 1 M em Et20) foi adicionado. Um precipitado BR formado imediatamente que foi adicionalmente precipitado com Et2O0 (10 mL). O sólido foi filtrado e lavado rapidamente com Et2O para dar, após secagem, ' um sólido esbranquiçado (153 mg, 78%). ?H RMN (400 MHz, CD30D) õ 8,04 (d, 1H, J = 8,4 Hz), 7,78 (d, 2H, J = 8,2 Hz), 7,57-7,50 (m, SH), 7,07 (d, 1H, J= 86Hz),6,83(d, 1H, J=8,5 Hz), 6,61 (dd, 1H, J1 = 8,5 Hz, J2 =2,2 Hz), 5,58 (d, 1H, J = 2,2 Hz), 4,39 (s, 2H), 4,09-4,04 (m, 2H), 3,78-3,72 (m, 2H), 3,43- 3,33 (m, 3H), 3,27-3,20 (m, 5H), 2,27-2,23 (m, 1H), 2,21-2,16 (m, 1H); ES| MS 507,3 [M + HJ*, calculado para [C31H30N40; + HJ* 507,24. Exemplo A51. Síntese de 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-S-metóxi-2- (3-(4-(2-morfolinoetil)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]- 2-ona o
S
ANT À RoaçO á : a A. (E)-4- (4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) vinil) fe- netil)-morfolina A uma mistura de 4-(4-bromofenetil) morfolina (731 mg, 2,71 mmol) e 44,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmois, 1,1 eq). e tolueno (10 mL) em um frasco para micro-ondas de 20 mL foi adi-
. 98/188 cionado Et3N (0,76 mL, 5,4 mmois, 2 eq.), seguido de Pd(P'Bus)> (14 mg, 0,027 mmol, 1% em mol). A mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida tampada e aquecida a 80ºC (temperatura do óleo) durante duas ho- ras.
Após arrefecimento até a temperatura ambiente, resfriada bruscamente com NaHCO; aq. (10 mL), HO (10 mL), extraída com EtOAC (30 mL x 2) e seca (Na2SO,). Após evaporação dos solventes, o resíduo foi purificado por meio de sistema de coluna Biotage (EtOAc/hex gradiente: 0-100%) para dar (E) -4-(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil- 1,3,2-dioxaborolan-2-il) vinif)- fenetil) morfoli- na como um sólido branco (714 mg, 77%). 'H RMN (400 MHz, CDC) 57.42 (djJ=80Hz, 2H),7.38(d,J=19.0 Hz, 1H), 7.19 (d, J= 7,8 Hz, 2H), 6.13 : (d, J=18.3 Hz, 1H), 3.75 (1, J = 4.4 Hz, 4H), 2.84-2.77 (m, 2H), 2.63-2.56 (m, 2H), 2.53 (br, pseudo s, 4H), 1.32 (s, 12H). , B.
Síntese de (1R,2S)-5-"metóxi-2-(3-(4-(2-morfolinoetil)estiril)- T1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]-2-ona A uma mistura de (1R, 2S8)2-(3-iodo-1H-indazol-6B-il)-S"- metoxispiro [ciclopropano-1,3'-indolin)-2'-ona (172 mg, 0,4 mmol) e (E) 4-(4- (2-(4 4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) vinil) fenetil)-morfolina (138 mg, 0,4 mmois) em PRCH3/EtoH (8 mL/4 mL) em um frasco para micro-ondas de 20 mL adicionou-se 1 M de NazCO; (0,8 mL, 0,8 mmolis), seguido de Pd (PPh3)4 (23 mg, 0,02 mmol, 5% em mol). A mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida, micro-ondas durante duas horas, a 125ºC.
Após arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com HzO (20 mL), extraída com EtOAC (30 mL x 2) e seca (Na;SO,). Após à remoção dos solventes, o resíduo foi redissolvido em DMF (4 mL) e purificado por HPLC preparativa para dar o composto do título (sal de TFA, 115 mg, 45%) como ' um sólido amarelo pálido. *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 7,90 (d, J = 8,4 Hz, . 1H), 7,53 (d, J =7,2 Hz, 2H), 7,43 (s, 1H), 7,37 (d, J= 6,4 Hz, 2H), 7,28 (d, J =7,2 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,57 (d J = 7,6 Hz, 1H), 5,57 (s, 1H), 4,06 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,80 (t J = 11,2 Hz, 2H), 3,56(d,J=11,2Hz, 2H), 3,38 (t J=7,6Hz, 2H), 3,27-3,12 (m, 5H), 3,07 (t, 2H), 2,20-2,10 (m, 2H); MS ESI 521,4 [M + HJ”, calculado para [Ca2H32N2O; + HJ 521,2.
. 99/188 Exemplo A54. 4-((E)-2-(6-((1R*,28*)-2'-oxospiro[ciclopropano-1,3"-indolina]- 2-i)-1H-indazol-3-i)vini)benzonitrila 28
O O PAO) “C > ; R*, S", mistura racêmica NO A. 6-formil-1H-indazol-3-carbonitrita A uma solução de 3-iodo-1H-indazol-6-carbaldeído (3 g, 10,8 - 5 mmols)em DMF (25 mL) foi adicionado cianeto de cobre (1,9 9, 21 mmois). A solução foi aquecida por micro-ondas a 185ºC durante 10 min. Água (100 ] mL) foi adicionada e um precipitado branco foi recolhido. O precipitado foi dissolvido em EtOAC (250 mL), lavado com água (2 x 25 mL), seco sobre MgSO, e concentrado para dar o composto do título como um sólido branco (119/73%). 1H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 14,92 (bs, 1H), 10,17 (s, 1H), 8,39 (s, 1H), 8,06 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,83 (d, J = 8,5 Hz, 1H). B. (E)-6-((2-0xoindolin-3-ilideno)-metil)- 1H-indazol-3-carbonitrila A uma mistura de 6-formil-1lH-indazol-3-carbonitrila (1,10 g, 6,4 mmols) e 2-oxindol (871 mg, 6,5 mmols) em EtoH (25 mL) adicionou-se pi- 15 . peridina (0,1 mL, 1 mmol). A mistura resultante foi submetida a refluxo (tem- peratura do óleo. 75ºC) durante 90 minutos, depois arrefecida até a tempe- ratura ambiente. O precipitado resultante foi recolhido por filtração por suc- ção e seco para dar o composto do título como um sólido cor de laranja (1,5 - g, 82%) *H RMN (400 MHz, DMSO-ds) 5 14,6 (s, 1H), 10,66 (s, 1H), 8,09 (s, 1H) 8,01 (d,J=8,5Hz,1H),7,78 (s, 1H), 7,67 (d, J= 8,5 Hz, 1H), 7,48 (d, ' 1H, J = 7,8 Hz), 7,24 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,88 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,83 (t J= 7,8 Hz, 1H). C. 6-((1R*, 28*)-2-oxospiro [ciclopropano-1,3"-indolina]--2-il)-1H- indazol-3-carbonitrila O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A1, utilizando (E)-6-((2-oxoindolin-3-ilideno)-metil)-1H-indazol-3-
. 100/188 carbonitrila (1,5 g, 5,2 mmois) para dar o composto do título como um sólido amarelo (1,3 g, 83%). '*H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7.61 (s, 1H), 7,18 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,08-7,04 (m, 1H), 6,94 (d J=8,0 Hz, 1H), 6,58 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,93 (d, J =7,8 Hz, 1H), 3,38-3,34 (m, 1H), 2,27-218(m, 1H). D. 6-((1R*, 28*) -2-oxospiro [ciclopropano-1,3"-indolina]-2-i)-1H- indazol-3-carbaldeído A uma solução de 6-((1R“, 28*)-2'-oxospiro [ciclopropano-1,3"- indolina]-2-11)-1H-indazol-3-carbonitrila (1 9, 3,3 mmols) em piridina (30 mL) em ácido acético (8 mL) e água (8 mL) e níquel de Raney (1 g). Hipofosfito . de sódio (1,8 g, 21 mmois) foi dissolvido em água (10 mL) e adicionado gota a gota e a reação foi agitada durante a noite.
O produto foi extraído em ace- 7 tato de etila (300 mL), lavado com salmoura (50 mL), secos sobre MgSO, e concentrado até a secura.
O resíduo foi purificado por cromatografia em síli- ca gel(95:5 CHCI/MeOH) para dar o composto do título como um sólido amarelo (300 mg, 30%). 1H RMN (400 MHz, CD30D) à 10,17 (s, 1H), 8,10 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,55 (s, 1H), 7,17 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,08-7,04 (m, 1H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,56 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,38-3,34 (m, 1H), 2,27-2,17 (m, 1H). E. 4((E)-2-(6-((1R*2S8*)-2-oxospirofciclopropano-1,3"-indoline]- 2-i)-1H-indazol-3-il) vinil)benzonitrila Dietil-4 cianobenzilfosfonato (600 mg, 2,4 mmolis) foi dissolvido em DMF (5 mL) a 0ºC.
Terc-butóxido de potássio (540 mg, 4,8 mmolis) foi adicionado e a mistura foi agitada durante 5 min.
Composto ASA4D (200 mg, 0,66mmol)foidissolvido em DMF (5 mL) e adicionado gota a gota à solução ] e a mistura foi agitada durante 90 min.
A reação foi parada com HC! (0,1 N) . E o precipitado resultante recolhido.
O precipitado foi dissolvido em EtoAC (100 mL) e lavado com HzO (2 x 10 mL), salmoura (10 mL), seco sobre Mg- SO, e concentrado até a secura.
O resíduo foi purificado por cromatografia emsílicagel para se obter o composto do título como um sólido branco (100 mg, 38%). *H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 8,04 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,82 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,74 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,66-7,53 (m, 2H), 7,48 (s, 1H), 7,08-
. 101/188 7,04 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,59 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,99 (d, J= 7,5 Hz, 1H), 3,38-3,34 (m, 1H), 2,27-2,18 (m, 2H), MS ESI 403,1 [M + Hr, calculado para [C26H18N40 + HJ* 403,1. Exemplo AS5. 2,22-trifluoroacetato de (1R*, 28) - (E) 2(3-(4 (morfolinometil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2"- ona
C mn ) -TFA »
PA O 7 R*, S*, mistura racêmica É ) . HNA A. 4((E)-2-(6-((1R*,28*)-2-oxospirofciclopropano-1,3"-indolina]- 2-il)-1H-indazol-3-il) vinil)benzaldeído O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo ASAD, exceto substituindo (100 mg, 0,25 mmol). A purificação por cromatografia em sílica gel (99:1 CH.Cl/MeOH) forneceu o composto do título como um sólido cor de laranja (95 mg, 94%). MS ES! 406,2 [M + HF, calculado para [C26H;.N;3O, + HJ* 406,2. B. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*, 28*)-2-(3-(4-(morfolinometil) es- tiri)-1H-indazol-6-i)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)--2-ona A uma solução do exemplo A55A (40 mg, 0,1 mmol) em THF (3 mL) foi adicionada morfolina (43 mg, 0,5 mmol) e isopropóxido de titânio (57 mg, 0,2 mmol) e a reação foi agitada durante 30 min. Borohidreto de sódio , (13 mg, 0,2 mmol) foi adicionado e a mistura foi aquecida a 50ºC durante a * 20 noite A reação foi resfriada bruscamente com água (2 mL) e extraída com acetato de etila (25 mL), seca sobre MgSO, e concentrada até a secura, O resíduo foi purificado por HPLC de fase reversa preparatória para dar o composto do título como o sal TFA (5 mg, 9%). ?H RMN (400 MHz, CD30D) 5 8,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,78 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,75-7,48 (m, SH), 7,08- 7,05(m,2H),6,94 (d,J=8,3Hz, 1H), 6,59 (tJ=7,6 Hz, 1H), 5,99 (d J=
- 102/188 7,5 Hz, 1H), 4,39 (s, 2H), 4,12-4,04 (m, 2H), 3,79-3,68 (m, 2H), 3,44-3,34 (m, 3H), 3,30-3,19 (m, 2H), 2,28-2,16 (m, 2H), MS ESI 477,3 [M + HJ”, calculado para [C30H28N40, + HJ* 477,2. Exemplo A56. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R, 2S)-(E)-2-(3-(4-(morfolinometil) estiri)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1 so |-2-ona
Q mA) * TFA ó e “e | o
HNAN 7 O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do . Exemplo AS1B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (150 mg, 0,37 mmol) e (E) -4-(4-(2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil) morfolina (160 mg, 0,48 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (122 mg, 58%). [a]. =- 79º (c 0,33, metanol). Dados espectrais foram idênticos ao obtido no exem- plo A55. Exemplo A57. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*, 28*)-(E)-2-(3-(4-(piperidin-1-il- metil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2"-ona 4“) - TFA * HN'
MO ] Hd - O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A55, método B, com a exceção de piperidina (43 mg, 0,5 mmolis). À purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (8 mg, 28%). '*H RMN (400 MHz, CD30D)õ 38,02 (d,J=8,8 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,75-7,48 (m, 5H), 7,08-7,05 (m, 2H), 6,94 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,59 (t, J = 7,7 Hz, 1H), 5,99
. 103/188 (d, J =7,3 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), 3,53-3,45 (m, 2H), 3,39-3,34 (m, 1H), 3,04- 2,93 (m, 2H), 2,27-2,17 (m, 2H), 2,02-1,95 (m, 2H), 1,88-1,71 (m, 3H), 1,57- 1,45 (m, 1H), MS ESI 475,3 [M + HJ*, calculado para [C31H30N40 + HJ 475,2. Exemplo AS58.2,2,2-trifluoroacetato de (1R, 28) - (E) -2-(3-(4-(piperidin-1-il- metil) estíril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin] -2' -ona O" Q
SD O E. O /
Ú : HNN O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do 1 Exemplo AS1B, exceto substituindo (1R, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1, 3"-indolin)-2-ona (50 mg, 0,12 mmol) e (E)-4-(4-(2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil) piperídina (59 mg, 0,18 mmois). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (13 mg, 20%). [AJ =- 109º (c 0,35, metanol). Dados espectrais foram idênticos ao obtido no E- xemplo A57.
Exemplo AS9. sal de 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-5S-metóxi-2-(3-(4- (piperidin-1-ilmeti)estíril)- 1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"- ona * TFA / "NH
STE 8 ES o Oz O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS51B, exceto substituindo (E)4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2 -il)-vinil)-benzil)-piperidina (59 mg, 0,18 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título co-
. 104/188 mo um sal de TFA amarelo (17 mg, 23%). *H RMN (400 MHz, CD30D) à 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,53-7,49 (m, 5H), 7,05 (d, J=8,5 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,61 (dd, J = 8,4, 2,3 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 2,3 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,52- 3,44 (m, 2H), 3,38-3,34 (m, 1H), 3,26 (s,3H) 3,01-2,93 (m, 2H), 2,26-2,17 (m, 4H), 2,00-1,91 (m, 2H), 1,89-1,67 (m, 3H), 1,58-146 (m, 1H); ESI MS 505,3 [M + HJ”, calculado para [C32H32N40, + H]J* 505,3. [a]26º7 -69º (c 0,29, metanol). Exemplo A60. 2,2, 2-trifluoroacetato de (1R*, 28*) - (E) -2(3-(4-(pirrolidin-1- ilmetil) estiril)- 1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin])-2"-ona Om CO - > O : "Ox Hi O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A55, exceto substituindo pirrolidina (71 mg, 0,86 mmol). A purifica- ção por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (34 mg, 35%). *H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 8,02 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,55-7,48 (m, 5H), 7,08- 7,05 (m, 2H), 6,94 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,59 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 5,99 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,40 (s, 2H), 3,55-3,46 (m, 2H), 3,38-3,34 (m, 1H), 3,27-3,16 (m, 2H), 2,27-2,17 (m, 4H), 2,06-1,98 (m, 2H), MS ESI 461,3 [M + HJ”, calculado para [C30H,8N40 + HJ* 461,2. Exemplo A61. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R, 2S) - (E) -2-(3-(4-(pyrolidin-1- ilmeti) estiri)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin] -2' -ona
Q Ú * TFA CS So
YW O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do
. 105/188 Exemplo AS51B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (175 mg, 0,43 mmol) e (E) -4-(4-(2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-pirrolidina (225 mg, 0,64 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (123 mg, 51%). Dados es- pecírais foram idênticos ao obtido no exemplo A60. Exemplo A64. Sal de 2,2,2 trifluoroacetato de (1R,28S)-5'-metóxi-2-(3-((E)-2- 2-metil-1,2,3,4-tetrahidroisoquinolin-7-iDvinil)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopro- pano-1,3"-indolin)-2"-ona ó ! O DO ' TD ' ) . TFA
NO A. 7-bromo-2-metil-1,2,3, 4-tetra-hidroisoquinolina A uma solução de 7-bromo-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (1 g, 4,7 mmols) em ácido fórmico (20 mL) adicionou-se formalina (1,2 mL, 15 mmois). A solução foi aquecida a 150ºC durante 5 min sob irradiação de mi- cro-ondas. O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em acetato de etila (100 mL), lavado com bicarbonato de sódio sat. (2 x 10 mL), salmoura (10 mL) e seco sobre MgSO,. A remoção do solvente deu o com- posto do título como um sólido branco (800 mg, 78%). ?H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,73 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,70 (s, 1H), 7,50 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 4,11 (s, 2H). 3,37-3,34 (m, 2H), 3,27-3,24 (m, 2H), 2,95 (s, 3H), MS ESI 225,9, 227,9[M+H]”, calculado para [C10H;2BrN + HJ” 226,0, 228,0. ' B, (E)-2-metil-7-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- - vinil) -1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1IA, exceto substituindo 7-bromo-2-metil-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina (720 mg, 3,2 mmols). O composto do título isolado como um óleo cor de laranja (700 mg, 73%). 1H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 7,37 (d, J=18,6 Hz, 1H), 7,29-7,26 (m, 1H), 7,13 (s, 1H), 7,08 (d, J = 7,3 Hz, 1H),
. 106/188 6,10 (d, J = 18,6 Hz, 1H), 3,57 (s, 2H), 2,93-2,90 (m, 2H), 2,70-2,67 (m, 2H), 2,46 (s, 3H), 1,32 (s, 12H); MS ESI 300,2 [M + HJ”, calculado para [C18H2sBNO, + HJ* 300,2. C. (1R2S)-5-metóxi-2-(3-((E)-2-(2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoqui- nolin-7-il)vinil)-1H-indazol-6-il)espirofciclopropano-1,3"-indolin])-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, exceto substituindo (E)-2-metil-7-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-vinil)-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina A purificação (80 mg, 0,3 mmol) por HPLC preparativa de fase inversa originou o composto do títu- lo como um sal de TFA amarelo (32 mg, 38%). 1H RMN (400 MHz, CD30D) . 5 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,64-7,60 (m, 1H), 7,49-7,45 (m, 4H), 7,32 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,63-6,59 (m, : 1H), 5,99-5,98 (m, 1H), 4,65-4,58 (m, 1H) 4,42-4,34 (m, 1H), 3,84-3,75 (m, 1H), 3,49-3,40 (m, 1H), 3,39-3,33 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,24-3,17 (m, 2H), 3,09 (s, 3H), 2,27-218 (m, 2H), MS ESI 477,3 [M + HJ”, calculado para [C30H;8N40, + HJ* 477,2. [a] 2º = -85º (c 0,40, metanol). Exemplo A65. Sal de 2,2,2 trifluoroacetato de (1R,28)-2-(3-((E)-2-(2-metil- 1,2,3 4-tetrahydroisoquinolin-7-il)vinil)-1 H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano- 1,3-indolin)-2'-ona Q Or
HNOS FA. (> À - TFA
À
N O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Ú Exemplo AS51B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2-ona (150 mg, 0,37 mmol) e (E)-2-metil-7-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)vinil)-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (150 mg, 0,55 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (35 mg, 17%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,60 (d, J= 8,5
. 107/188 Hz, 1H), 7,45 (bs, 4H), 7,30 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,08-6,93 (m, 2H), 6,94 (d, J =7,8 Hz, 1H), 6,57 (t, J = 7,40 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 7,3 Hz, 1H), 4,64-4,59 (m,, 1H), 4,39-4,32 (m, 1H), 3,82-3,77 (m, 1H), 3,49-3,37 (m, 1H), 3,37-3,33 (m, 1H), 3,30-3,20 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 2,27-2,17 (m, 2H); MS ES1 447,3 [IM +HJ*, calculado para [CosH2sN4O + H]" 447,2, [a] p =-124º (c 0,25, meta- nol). Exemplo A66. Sal de 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,2S)-5"-metóxi-2-(3-((E)-2- 1,2,3 4-tetra-hidroisoquinolin-7-il)vinil)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano- 1,3"-indolin)-2"-ona : | O NH es mé N -TFA
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N A. (E)-2,2,2-trifluoro-1-(7-(2-(4,4,5, 5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)vinil)-3, 4-dihidroisoquinolin-2(1H)-i)etanona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1A, exceto substituindo o 1-(7-bromo-3,4-di-diidroisoquinolin-2 (1H)-iI)-2,2,2-trifluoroetanona (415 ma, 1,32 mmol). O composto do título foi purificado por cromatografia em sílica gel (3:2 hexano/EtOAc) para dar o composto do título como um sólido branco (300 mg, 58%). MS ES! 382,2 [M + HJ”, calculado para [C19H2;BF3NO; + HJ* 382,2 ' B. (1R,28)-5-metóxi-2-(3-((E)-2-(1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-7- - ilvinil)-1H-indazol-6-il)espirofciclopropano-1,3"-indolinJ)-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, exceto substituindo (80 mg, 0,21 mmol) Purificação por H- PLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (26 mg, 31%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) õ 8,02 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,60 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,48 (bs, 4H), 7,29 (d, J = 8,0 Hz, 1H),
. 108/188 7,05 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,41 (s, 2H), 3,54 (t, J = 6,0 Hz, 2H), 3,40-3,33 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,19-3,11 (m, 2H), 2,29-2,14 (m, 2H); MS ESI 463,3 [M + HJ”, calculado para [CaoH26N4O,2 + HJ* 463,2.
Exemplo A7O. Sal de 2,2,2 trifluoroacetato de (1R,28)-5S"-metóxi-2-(3-(2- metil-1,2,3 4-tetra-hidroisoquinolin-7-il)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano- 1,3'-indolin)-2"-ona i O *TFA . LO N o A 2-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-1)-1,2,3,4- tetra-hidro-isoquinolina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A69 em WO2010/115279 método A, exceto substituindo 7-bromo-2- metil-1,2,3 4-tetra-hidroisoquinolina (450 mg, 2 mmolis). A trituração com he- xano deu o composto do título como um sólido castanho (300 mg, 55%). MS ES! 274.1.1 [M + HJ, calculado para [CisH2sBNO; + HJ" 274,2.
B. (1R,28)-5-metóxi-2-(3-(2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin- 7-il)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]-2'-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo 2-metil-7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (80 mg, 0,29 mmol). A purifi- : 20 cação porHPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do títu- - lo como um sal de TFA amarelo (32 mg, 40%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 7,94 (t, J = 8,9 Hz, 2H), 7,79 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,44 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 9,3 Hz, 1H), 6,62 (d, J=7,0 Hz, 1H), 5,80 (s, 1H), 4,73-4,63 (m, 1H), 4,47-4,42 (m, 1H), 3,85-3,78 (m, 1H), 3,52-3,42 (m, 1H), 3,41-3,28 (m, 3H), 3,27 (s, 3H), 3,11 (s, 3H), 2,29-2,18 (m, 2H); MS ESI 451,3 [M + HJ”, calculado para [CosH26eN4O,2 + HJ 451,2.
R 109/188 Exemplo A71. sal de 2,22 triluoroacetato de (1R,28)-5-metóxi-2-(3-(1,2,3,4- tetra-hidroisoquinolin-7-il)-1H-indazol-S-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2-ona of O À “TFA Neo O No 8 H A. 2,2,2-trif luoro-1-(7-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) - 3,4-dihidro isoquinolin-2 (1H)-il) etanona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do : Exemplo A69 no método A WO2010/115279, exceto substituindo o 1-(7- bromo-3 4-di-diidroisoquinolin-2 (1H)-i)-2,2,2-trifluoroetanona (450 mg, 2 mmol). Cromatografia em sílica gel (3:2 hexano/EtOAc) deu o composto do título como um branco (320 mg, 90%). MS ES! 356,1 [M + HJ”, calculado pa- ra[CyH1BF3NO; + HJ* 356,2. B. (IR, 28)-5-metóxi-2-(3-(1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-7-il)-1H- indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'indolin---2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (100 mg, 0,2 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (18 mg, 17%). 7,95 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 1H RMN (400 MHz, CD30D) õ 7,95 (t, J = 8,3 Hz, 1H), 7,90 (d, J = 6,78 Hz, 1H), 7,80 (s, 1H), 7,53 (s, 1H), 7,42 (d, 1 = 8,0 Hz, 1H), 7,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,84 (d, J - = 8,3 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,60 (s, 1H), 4,48 (s, 2H), 3,60-3,53 (m, 2H), 3,41-3,33 (m, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,20 (t, J = 6,6 Hz, 2H), 2,29-2,18 7 (m, 2H); MS ES! 437,1 [M + HJ', calculado para [Co7H24N4O, + HJ 437,2.
' 110/188 Exemplo A72. sal de 2,2,2 trifluoroacetato de 1R,28)-(E)-2-(3-(4-((1,4-0xazepan- 4il)metil)estiril)- 1 H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona
ÃO PD (SA HT " A N
H A. 4-(4-bromobenzil)-1,4-0xazepano A uma solução de 4-bromobenzaldeído (616 mg, 3,3 mmois) em ' 5 dicloroetano (50 mL) foi adicionado cloridrato de homomorfolina (548 mg, 4 mmolis) e ácido acético (0,1 mL). Triacetoxiborohidreto de sódio (3,4 9, 16 ] mmols) foi adicionado e a reação foi agitada durante a noite. A reação foi interrompida com NH,CI sat. (30 mL). Acetato de etila (250 mL) foi adiciona- do e a solução foi lavada com solução NaHCO; sat. (2 x 50 mL), salmoura (50mL), seca sobre MgSO, e concentrada até a secura. O resíduo foi pas- sado através de um tampão de sílica com (5% MeOH/CH2Cl2) para dar um sólido branco (850 mg, 85%). *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,28 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,10 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 3,66-3,57 (m, 2H), 3,55-3,50 (m, 2H), 3,46- 3,42 (m, 2H), 3,16-3,10 (m, 2H), 2,55-2.,45 (m, 4H), 1,75-1,65 (m, 2H). B. (E)-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)vinil)ben- zil)-1,4-0xazepano O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A5S1A, exceto substituindo o 4-(4-bromobenzil)-1,4-o0xazepane (500 mg. 1,88 mmol). O composto do título isolado como um óleo cor de laranja ' 20 (560 mg, 88%). MS ESI 344,2 [M + HJ", calculado para [C20H30BNO; + HJ* - 344,2. C. (1R, 28) -2-(3-(4-((1,4-0xazepan-4-il) metil) estiril)-1H-indazol- 6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin--2"-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, exceto substituindo (1R, 28) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (100 mg, 0,25 mmol) e (E) 4-(4-(2-(4,4,5,5-
. 111/188 tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil) -1,4-oxazepano (103 mg, 0,30 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (38 mg, 26%).
1H RMN (400 MHz, MeOD) 5 8,02 (d, J = 9,0 Hz, 1H), 7,78 (d, J =8,3Hz 2H) 7,61-7,53 (m, 4H), 7,48 (s, 1H), 7,08-7,04 (m, 2H), 6,94 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,60-6,56 (m, 1H), 5,99 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 4,02- 3,80 (m, 4H), 3,65-3,60 (m, 1H), 3,57-3,35 (m, 4H), 2,29-2,12 (m, 4H); MS ES1 491,3 [M + H]J*, calculado para [Ca H3oN4O>2 + HJ* 490,2, [afPÉ'5 =-146"º (c 0,39, metanol), Exemplo A73. sal de 2,22 ftrifluoroacetato de(1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(11,4- ' oxazepan-4-vi)metil)estiril)- 1H-indazol-6-il)-5"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2-ona l LI *TFA Es O HN e FE-O nº
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS51B, exceto substituindo (E)4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-1,4-oxazepano (103 mg, 0,30 mmol). A purifi- cação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (48 mg, 31%). 1H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,57-7,49 (m, , 5H), 7,05 (d, J = 8,28 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 8,3 Hz, . 20 1H), 5,58 (s, 1H), 4,44 (s, 2H), 3,99-3,75 (m, 4H), 3,69-3,55 (m, 1H), 3,55- 3,34 (m, 4H), 3,26 (s, 3H) 2,28-2,11 (m, 4H); MS ESI 521,3 [M + HJ”, calcu- lado para [Ca2H32N4O; + HJ* 520,2. [a]? E'n = -76º (c 0,33, metanol).
. 112/188 Exemplo A74. sal de 2,2,2 trifluoroacetato de(1R,2S)-2-(3-((E)-2-(2-metil- 1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6-il)vinil)-1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano- 1,3-indolin)-2"-ona ,
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H A. 6-bromo-2-trif lIuvorometanossulfonato de metilisoquinolinio Uma solução de 6-bromoisoquinolina (618 mg, 3 mmols) em CH2Ck (35 mL) foi arrefecida a 0ºC sob atmosfera de argônio. Triflato de metila (0,38 mL, 3,3 mmolis) foi adicionado gota a gota e a mistura foi aque- “ cida até a temperatura ambiente. O precipitado foi filtrado, triturado com éter - e seco para dar o composto do título como um sólido amarelo (1,03 g, 93%). 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 35 9,83 (s, 1H), 8,64-8,56 (m, 2H), 841 (d J = 7,0 Hz, 1H), 8,36 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 8,20 (d, J = 9,03 Hz, 1H), 4,53 (s, 3H). B. 6-bromo-2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina A uma solução de 6-bromo-2-trifluorometanossulfonato de meti- lisoquinolinio (371 mg, 1 mmol) em metanol (10 mL) foi adicionado indicador de bromocresol verde. Borohidreto de sódio (93 mg, 2,5 mmols) foi adiciona- do e a reação foi agitada à temperatura ambiente. HCl em ácido acético (1M) foi adicionado periodicamente para manter uma cor amarela. Depois de uma hora, água (50 mL) foi adicionada e a solução foi basificada com NaOH (1M), extraída com CH2Clz (100 mL), seca sobre MgSO, e concentrada para daro composto do título como um sólido branco (200 mg, 99%). '*H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,29-7,17 (m, 2H), 6,88 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 3,51 (s, 2H), . 2,93-2,82 (m, 2H), 2,65 (t, J = 5,8 Hz, 2H), 2,45 (s, 3H). Cc. (E)-2-metil-6-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- ' vínil)-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo ASIA, exceto substituindo 6-bromo-2-metil-1,2,3,4-tetra- hidroisoquinolina (720 mg, 3,2 mmols). O composto do título foi isolado como um óleo castanho (720 mg, 75%). MS ESI 300,2 [M + HJ”, calculado para [C18H2:BNO, + H]J* 300,2.
. 113/188 D. (1R28)-2-(3-((E)-2-(2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6- ilvinil)-1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"'-indolin)-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS51B, exceto substituindo (1R, 2S)-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il) [ci- — clopropano-1,3-indolin)k2-ona (122 mg, 0,3 mmol) e (E)2-metil.6-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-iD)vinil)-1 ,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (110 mg, 0,37 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (38 mg, 14%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,99 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (d, J=7,8 Hz, 1H),7,54 (s, 1H), 7,50-7,43 (m, 3H), 7,23 (d. J = 8,0 Hz, 1H), 7,10-6,99 (m, 2H), 6,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,58 (t, J = 7,5 Hz, 1H), 5,99 (d, J=7,8 Hz, Ú 1H), 4,64-4,53 (m, 1H), 4,41-4,27 (m, 1H), 3,82-3,75 (m, 1H), 3,51-3,33 (m, ' 2H), 3,28-3,16 (m, 2H), 3,08 (s, 3H), 2,28-2,16 (m, 2H); MS ESI 447,3 [M + HJ*, calculado para [CooH26N4O + HJ" 447,2, [a]º'p=-147º (c 0,30, meta-
15. nol). Exemplo A75. Sal de 2,2,2 trifluoroacetato de (1R,2S)-5'-metóxi-2-(3-((E)-2-(2- metil-1,2,3 4-tetra-hidroisoquinolin-6-il)vinil)- 1H-indazol-6-i espiro[ciclopropano- 1,3=indolin)-2-ona ó 7 o y ms CS x = Rar Nº
H . O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1B, exceto substituindo (E)-2-metil-6-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- ] dioxaborolan- 2-il)-vinil) -1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (134 mg, 0,45 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (42 mg, 25%). *H RMN (400 MHz, CD;3OD) 5 8,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,54 (s, 1H), 7,48(bs,3H),7,23(d,J=8,0 Hz, 1H), 7,05 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,84 (d J= 8,5 Hz, 1H), 6,62 (d, J = 8, 8 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,604,51 (m, 1H), 4,37-
. 114/188 4,33 (m, 1H), 3,82-3,75 (m, 1H), 3,51-3,33 (m, 2H), 3,28-3,16 (m, 2H), 3,27 (s, 3H), 3,08 (s, 3H), 2,28-2,15 (m, 2H); MS ESI 477,3 IM + HJ”, calculado para [CooH26N4O + HJ* 477,2. Exemplo A76. sal de 2,2,2 trifluoroacetato de (1R,28)-23-(2-metil-1,2,3,4- tetra-hidroisoquinolin-6-il)-1H-indazol-6-iespiro[ciclopropano-1,3-indolin)-2"- ona
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O HN - . TFA TD O à
N - A 2-metil6-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-i)-1,2,3,4- tetra-hidro-isoquinolina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A69 método AWO»2010/115279, mas substituindo a 6-bromo-2- metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolina (450 mg, 2 mmois). A trituração com he- xano deu o composto do título como um sólido castanho (265 mg, 49%). MS ESI 274,1 [M + HJ”, calculado para [C1sH2sBNO; + HJ* 274,2. B. (1R, 28)-2-(3-(2-metil-1,2,3,4-tetra-hidroisoquinolin-6-il)-1H- indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 28) -2-(3-lodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (64 mg, 0,15 mmol) e 2-metil-6-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-1,2,3 4-hidroisoquinolina (80 mg, 0,29 . 20 mmol) A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (24 mg, 31%). *H RMN ' (400 MHz, CD3;OD) 5 7,95-7,81 (m, 3H), 7,50 (s, 1H), 7,35 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,08-6,99 (m, 2H), 6,94 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 6,57 (t, J=7,5 Hz, 1H), 6,00 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,66-4,62 (m, 1H), 4,43-4,38 (m, 1H), 3,85-3,78 (m, 1H) 3,52-342 (m, 1H), 3,41-3,33 (m, 1H), 3,32-3,20 (m, 2H), 3,10 (s, 3H), 2,27-2,14 (m, 2H); MS ES! 421,3 [M + HJ”, calculado para [Ca7H24N4O + HJ 421,2.
. 115/188 Exemplo A78. sal de 2,22 trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-(1- metilpiperídin-4-ilóxi)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]- 2'-ona ú mn) . TFA O A o C) Ss no
H A. 4-(4-bromof enóxi)-1-metilpiperídina ' 5 Preparado de acordo com o método do Exemplo A64 em ' WO2010/115279 método A, exceto substituindo o 4-(4-bromofenóxi) piperidi- na (256 mg, 1 mmol). O composto do título foi isolado como um sólido bran- co (270 mg, 99%). *H RMN (CDCI3) 5: 7,36 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 6,79 (d, J = 8,3 Hz, 2H), 4,28 (bs, 1H), 2,73-2,65 (m, 2H), 2,32 (s, 3H), 2,32-2,25 (m, 2H), 2,05-1,95(m, 2H), 1,86-1,80 (m, 2H). B. (E) 1-metil-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- vinil)-fenóxi)-piperidina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1A, exceto substituindo o 4-(4-bromofenóxi)-1I-metilpiperídina (270mg,1 mmol). O composto do título isolado como um óleo cor de laranja (340 mg, 99%). MS ES! 344,2 [M + HF”, calculado para [C20H30BNO; + HJ" 344,2. C. (1R, 28)-2-(3-(4-(1-metil-piperidin-4-ilóxi) estiril-1H-indazol-6- ' il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2-ona - 20 O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1, 3'-indolin)-2--ona (100 mg, 0,25 mmol) e (E)-1-metil-4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) vinil)-fenóxi)-piperidina (105 mg, 0,3 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (35 mg, 25%). 1H RMN
: 116/188 (CD30D) õ: 7,99-7,97 (m, 1H), 7,63-7,56 (m, 2H), 7,50-7,42 (m, 2H), 7,36- 7,28 (m, 1H), 7,10-7,01 (m, 4H), 6,97-6,91 (m, 1H), 6,59 (t, J =7,7 Hz, 1H), 5,99 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 4,84-4,79 (m, 0,5H), 4,65-4,60 (m, 0,5H), 3,65-3,62 (m, 1H), 3,47-3,34 (m, 3H), 3,25-3,13 (m, 1H), 2,94 (s, 3H), 2,44-2,40 (m, 1H) 2,32-2,01 (m, 5H), 1,96-1,81 (m, 1H): MS ES! 491,2 [M + HJ", calculado para [C3]HaoN4O,2 + HJ* 491,3. [alo =-154º (c 0,43, MeOH). Exemplo A79. sal de 2,22 trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-5'-metóxi-2-(3-(4- 1-metilpiperidin-4-ilóxi)destiril)-1H-indazol-6-iNespiro[ciclopropano-1,3"- indolin-2-ona h . / o É o º O 1
NN
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS51B, exceto substituindo (E)-1-metil-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1, 3,2 -dioxaborolan-2-il) vinil)-fenóxi)-piperidina (105 mg, 0,3 mmol). A purífica- ção por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um ;saldeTFA amarelo (36 mg, 25%). 1H RMN (CD3OD) 3: 7,95 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,56-7,53 (m, 2H), 7,45-7,40 (m, 2H), 7,30-7,26 (m, 1H), 7,04- 6,98 (m, 4H), 6,83 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,81-4,54 (m, 1H) 3,65-3,33 (m, 4H), 3,24 (s, 3H), 3,23-3,13 (m, 1H) 2,92 (s, ' 3H), 2,44-2,37 (m, 1H), 2,32-2,01 (m, 5H), 1,96-1,81 (m, 1H); MS ESI 521,3 . 20 [M+H]', calculado para [Cs2H32N,03 + HJ* 521,2.
. 117/188 Exemplo AS8O. Sal de 2,2 2-trifluoroacetato de (1R, 28)-(E)-2-(3-(4-(2- morfolinopropan-2-il)estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]- 2 -0na NO) O -TFA OS We HN = "o
FE Nº
H A. 2-metil-2-morfolinopropanonitrila A acetona cianidrina (4,3 g, 50 mmolis) foi dissolvida em acetona (5 mL). Morfolina (4,3 g, 50 mmois) foi adicionada e a solução foi agitada à ' temperatura ambiente durante 24 horas. Os solventes voláteis foram remo- ' vidos sob vácuo para dar o composto do título como um líquido límpido com um rendimento quantitativo. MS ESI 155,0 [M + HJ, calculado para [C;H1I4NO+ HF 155,1. B. 4-(2-(4-bromofenil) propan-2-il)-morfolina Adições de magnésio (190 mg, 7,4 mmols) foi adicionado a THF seco (15 mL) sob atmosfera de argônio. 1,4-dibromobenzeno (2,43 g, 10,3 mmols) foi adicionado e a solução foi aquecida em refluxo durante 30 min. 2-Metil-2-morfolinopropanonitrila (1 g, 6,6 mmolis) foi dissolvido em THF (30 mL) e adicionado gota a gota à solução à temperatura de refluxo. A mistura foi agitada durante duas horasoras e arrefecida até a temperatura ambiente. A reação foi interrompida com solução K.CO; sat. e estraída com CH3Clz (200 mL), seca sobre MgSO. e concentrada até um óleo cor de laranja. À mistura em bruto foi purificada em uma coluna de sílica Biotage (2-15% de , MeOH em CH>2Cl2z) para dar o composto do título como um óleo amarelo - (204 mg, 10%). MS ES! 284,0, 286,0 [M + HJ”, calculado para [C13H18BrNO + HJ]* 284,1,286,1. C. (E) -4-(2-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1, 3, 2-dioxaborolan-2-il)-vinil) fenil) propan-2-il) morfolina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1A, exceto substituindo o 4-(2(4-bromofenil) propan-2-il)-
. 118/188 morfolina (200 mg, 0,7 mmol). O composto do título isolado como um óleo cor de laranja (140 mg, 40%). MS ESI 358,1 [M + HJ”, calculado para [021H32BNO; + HJ* 358,2. D. (1R, 2S)-2-(3-(4-(2-morfolinopropan-2-il) estiril)-1H-indazol-6- il-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2"-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1, 3"-indolin)-2-ona (100 mg, 0,25 mmol) e (E)-1-metil-4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)vinil)-fenóxi)-piperidina (140 mg, 0,4mmols). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (51 mg, 34%). 1H RMN ' (CD30D) à: 7,98 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 7,80-7,76 (m, 2H), 7,70 (d, J = 8,3 Hz, ' 2H), 7,52 - 7,46 (m, 3H), 7,08-6,98 (m, 2H), 6,94 (d, J = 7,8 Hz, 1H), 6,56 (t, J=7,7 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 4,06-3,96 (m, 2H), 3,83-3,73 (m, 2H), 3,35-3,29 (m, 3H), 3,13-3,08 (m, 2H), 2,26-2,14 (m, 2H), 1,90 (s, 6H); MS ESI 418,2 [M — CaHÊNOJ”, calculado para [CaaH32N4O7 — CaHNOJ" 418,2, [a] 2 pn =-109º (c 0,32, metanol). Exemplo A81. sal de 2,22 trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((1- metilbiperidin-4-il)metil)estiril)-1 H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3- indolink-2-ona
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O Í - TFA Pon . wo
H A, 4-(4-bromobenzil)-piperidina-1-carboxilato de terc-butila A uma solução de 4-metileno-piperidina-1-carboxilato de terc- butila (1 g, 5,1 mmolis) foi adicionada solução de 9-BBN (10,2 mL de uma solução 0,5 M, 5,1 mmols) e a mistura foi aquecida a refluxo durante uma —horasob atmosfera de argônio. A solução foi então arrefecida até a tempera-
. 119/188 tura ambiente e 1,4-lodobromobenzeno (1,3 g, 4,7 mmols) foi adicionado, seguido de K2CO; (843 mg, 6,1 mmols), DMF (10 mL), água (1 mL) e Pd(dppfNClz (114 mg, 0,15 mmol). A solução foi aquecida a 60ºC sob atmos- fera de argônio durante 3 horas e arrefecida até a temperatura ambiente.
Acetato de etila (250 mL) foi adicionado e a solução foi lavada com água (2 x 50 mL), salmoura (50 mL), seca sobre MgSO, e concentrada até a secura.
O produto bruto foi purificado por coluna de sílica gel Biotage (50:50 hexa- no/acetato de etila) para dar o composto do título como um sólido amarelo (1,29, 72%). B. 4-(4-bromobenzil) piperidina A uma solução de 4-(4-bromobenzil)-piperidina-1-carboxilato de 1 terc-butila (780 mg, 2,2 mmois) em CH2Cl2 (15 mmois), foi adicionado TFA o (0,5 mL) e a mistura foi agitada à temperatura ambiente durante uma hora.
O solvente foi removido sob vácuo e o resíduo foi dissolvido em CH2Cl2 (50 mL), lavado com NaOH (0,1 M, 10 mL), salmoura (10 mL), seco sobre Mg- SO, e concentrado até a secura para dar o composto do título como um sóli- do bege (520 mg, 93%). C. 4-(4-bromobenzil)-1-metilpiperidina Preparado de acordo com o método do Exemplo A69 em WO2010/115279 método A, exceto substituindo o 4-(4-bromobenzil)- piperidina (520 mg, 2 mmolis). O composto do título foi isolado como um sóli- do castanho (490 mg, 89%). '*H RMN (CDCla) 5 7,39 (d, J = 7,5 Hz, 2H), 7,01 (d, Jy = 7,8 Hz, 2H), 2,93 (d, J= 11,0 Hz, 2H), 2,50 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 2,32 (s, 3H), 1,99-1,94 (m, 2H), 1,65-1,62 (m, 2H), 1,50-1,35 (m, 3H);. D. (E) 1-metil-4-(4-(2-(4,4,5, 5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- ' vinil)-benzil)-piperídina . O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51A, exceto substituindo o 4-(4-bromobenzil)-1-metilpiperidina (267 mg, 1 mmol). O composto do título isolado como um óleo cor de laranja (340 mg, 99%). MS ES! 342,2 [M + H]', calculado para [C21H32BNO, + HJ* 342,2.
* 120/188 E (IR 28)2-(3-(4-((1-metil-piperídin-4-) metil) estiril)-1H- indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2--ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) [ci- clopropano-1,3'-indolin)-2-ona (100 mg, 0,25 mmois) e (E)-1-metil-4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-piperidina (105 mg, 0,3 mmol). A purificação por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (39 mg, 27%). '*H RMN (CD3OD) 3: 7,97 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 7,3 Hz, 2H), 7,51-7,37 (m, 3H) 7,22 (d,J=7,5 Hz, 2H), 7,08-7,01 (m, 2H), 6,94 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,57 (t, J =7,5 Hz, 1H), 5,99 (d, J = 7,5 Hz, 1H), 3,50-3,47 (m, 2H), 3,37 - Ú 3,31 (m, 1H), 2,97 - 2,92 (m, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,63 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,26 - - 2,14 (m, 2H), 1,96 - 1,81 (m, 3H), 1,58 - 1,41 (m, 2H); MS ESI 489,4 [M + HJ”, calculado para [Ca2H32N4O + HJ” 489,3, [a]?*'n =-96º (c 0,26, Metanol). Exemplo AB2. sal de 2,22 trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-5'-metóxi-2-(3-(4- 1-metilpiperidin-4-i)metil)estiril)-1 H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona ú Oo HNÔN *TFA
É "CO e -. O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do ] Exemplo A5S1B, exceto substituindo (E)-1-metil-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1, . 20 3,2-dioxaborolan-2-il)-vínil)-benzil)-piperidina (105 mg, 0,3 mmol). A purifica- ção por HPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título como um sal de TFA amarelo (24 mg, 17%). 'H RMN (CD3OD) : 7,97 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,54 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,51-7,36 (m, 3H), 7,20 (d J = 7,5 Hz, 2H), 7,01 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,60 (d JU = 8,3 Hz 1H), 5,59 (s1H), 3,50-347 (m, 2H), 3,37-3,31 (m, 1H), 3,25 (s, 3H),
. 121/188 2,97-2,92 (m, 2H), 2,83 (s, 3H), 2,62 (d, J = 6,0 Hz, 2H), 2,26-2,14 (m, 2H), 1,96-1,81 (m, 3H), 1,53-1,44 (m, 2H); MS ES! 519,3 [M + HJ”, calculado para [CasH34N4O2 + HJ* 519,3, [a]2'n =-100º (c 0,29, Metanol). Exemplo A83. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-S-metóxi-2-(3-(4- (pirrolidin-1-ilmetiNestiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]-2"- on
Q * TFA OP ... X
N ' O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS51B, exceto substituindo (E) 4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-pirrolidina (50 mg, 0,416 mmol). A purificação porHPLC preparativa de fase reversa deu origem ao composto do título co- mo um sal de TFA amarelo (19 mg, 21%). *H RMN (CD3OD) 3: 8,02 (d, J = 8,3 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 7,56-7,47 (m, 5H), 7,05 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,84 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 6,61 (d, J = 8,5 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,39 (s, 2H), 3,52 (bs, 2H), 3,37 (t, J = 8,5 Hz, 1H), 3,27 (s, 3H), 3,25-3,16 (m, 2H), 2,27-2,14 (m, 4H), 2,03 (bs, 2H); MS ESI 491,3 [M + HJ”, calculado para [Cs1HaoN4O2 + HJ" 491,2, [a] 2op = -117º (c 0,52, Metanol). Exemplo A84. (1R*,2R*)-(E)-2-(3-(4-((dimetilamino)meti)estiri))-1H-indazol-6- i)-S"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona
FLA DS =o mistura racêmica — Nº O diastereômero menor da reação do Exemplo A34B foi isolado comofilme sólido amarelo-laranja (36 mg, 3%). 7H RMN (400 MHz, CD;OD)
- 122/188 õ ppm 7,99 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 7,75 (d, J=8,0 Hz, 2 H), 7,56-7,46 (m, 5 H), 7,15 (d, J=8,5 Hz, 1 H), 6,87 (d, J=8,3 Hz, 1 H), 6,82-6,72 (m, 2 H), 4,31 (s, 2 H), 3,81 (s, 3 H), 3,39 (t, J=8,8 Hz, 1 H), 2,87 (s, 6 H), 2,41 (dd, J=8,4, 4,9 Hz, 1 H), 2,23 (dd, J=8,8, 4,8 Hz, 1 H); MS ESI [M+ HJ] 465,2, calculado para [CooHoeN:sO2+ HJ 465,2. Exemplo A87. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R“,28”)-(E)1'-metil-2-(3-(4- (morfolinometi)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona O Om 2 - *TFA & aa R*, S&S, mistura racêmica - A y o A. (E)-3-((3-iodo-1H-indazol-6-il) metileno)-1-metilindolin-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método descrito para (E)-3-(metileno (1H-indazol-5-il)) indolin-2-0na, com a exceção de 3-iodo-1H-indazol-6-carbaldeído (462 mg, 1,70 mmol) e 1-metilindolin-2- ona (250 mg, 1,70 mmol), o composto do título foi obtido como um sólido amarelo-laranja (545 mg, 80%), MS ESI 402,2 [M + HJ”, calculado para [Ci7H12IN30 + HJ* 402,01. B. (1R”, 28*)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"-metilespiro [ciclopro- pano-1, 3-indolinJ)-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do ' Exemplo A6, exceto substituindo (E)-3-((3-iodo-1H-indazol-6-iI) metileno)-1- - metilindolin-2-ona (545 mg, 1,36 mmol) para dar o composto do título como uma mistura 9:1 de diastereoisômeros (405 mg, 72%), MS ESI 416,0 [M + HF”, calculado para [C18H14IN;30 + HJ* 416,03. C. 222trifluoroacetato de (1Rº28*-(E)-1-metil-2-(3-(4- (morfolinometil)estiril)- 1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do
. 123/188 Exemplo A45 em WO2010/115279, exceto substituindo (1R*, 28”) -2-(3-iodo- 1H-indazol-6-il)-1"-metilspiro [ciclopropano-1,3"'-indolin)-2'-ona (30 mg, 0,072 mmol) e (E) 4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)- morfolina (31 mg, 0,094 mmois). Após acoplamento de Suzuki, o solvente foi removido e o resíduo foi purificado por meio de HPLC prep para dar o com- posto do título (16mg, 45%); 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 8,00 (d, J = 84 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,2 Hz, 2H), 7,54-7,46 (m, 5H), 7,14 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 7,02 (d, Jy = 8,1 Hz, 2H), 6,64 (t, J = 7,3 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,38 (s, 2H), 4,08-4,04 (m, 2H), 3,75-3,69 (m, 2H), 3,43-3,34 (m, 6H), 3,27- 319(m,2H),2,29-2,25 (m, 1H), 2,22-2,18 (m, 1H); MS ES! [M + HJ 491,3, calculado para [C31H3oN4O2 + HJ 491,24.
' Exemplo A89. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*28”)(E)1-metil-2-(3-(4- : piperazin-1-i)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona “W O “TFA O OC"
AE 7 RS, mistura racêmica
AN A. terc-butil 4-(4-etinilfenil)-piperazina-1-carboxilato de etila Um frasco de micro-ondas foi carregado com 4-(4-iodo-fenil)- piperazina-1-carboxilato de terc-butil (300 mg, 0,773 mmol), trimetilsililaceti- leno (0,22 mL, 1,54 mmols), NEt3 (3,0 mL), DMF (1,5 mL), Cul (15 mg, 0,080 mmol), e PdCl2 (PPh3), (27 mg, 0,039 mmol). O frasco foi tapado e aquecido ' no micro-ondas a 100ºC durante uma hora. Após a remoção do NEt3 em - 20 vácuo, o resíduo foi extraído com EtOAC (15 mL). A camada orgânica foi então lavada com NaHCO; (sat). (5 mL), H2O (5 mL), salmoura (5 mL) e de- pois seca sobre MgSO,. O solvente foi removido e, em seguida, o material foi dissolvido em MeOH (4 mL) e THF (2 mL). K&CO;z (1,0 mL de uma solu- ção 1 M) foi adicionado e a reação foi agitada durante 3 horas. O solvente foi removido e o resíduo foi extraído com EtOAC (15 mL). A camada orgânica foi lavada com salmoura (5 ml) e depois seca sobre MgSO.. O solvente foi removido e o produto foi seco sob alto vácuo para dar o composto do título como um sólido castanho (212 mg, 96%); ESI MS 287,0 [M + HJ", calculado para [C17H>2N2O, + HJ* 287,18. B. 4(4(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina-1-carboxilato de (E)-terc-butila O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42A, exceto substituindo 4-(4-etinilfenil)-piperazina-1-carboxilato de terc-butila (212 mg, 0,740 mmol) para dar, após cromatografia em coluna (sílica gel, hexanos/EtOAc, 6:1 a 5:1), o composto do título como um sólido amarelo pálido (137 mg, 45%), MS ESI 415,3 [M + HJ”, calculado para [C2a3H35BN2O,4 + HJ” 415,28. C. 2,2,2-tifluoroacetato de (1R“2S8”)-(E)1-metil-2-(3-(4- (piperazin-1-il)estiril)- 1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]-2"-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A45 em WO,2010/115279, exceto substituindo (1R*, 28*)-2-(3- iodo-1H-indazol-6-il)-1'-metilspiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (37 mg, 0,090 mmol!) e 4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina-1-carboxilato de (E)-terc-butila (45 mg, 0,109 mmol). O solvente foiremovido e a amina protegida por Boc purificado por cromatografia em coluna (sílica gel, CH2Cl/MeOH a 95:5) para se obter um produto impuro que se dissolveu em CH2Cl> (2,0 mL) e TFA (200 uL) foi adicionado.
A rea- ção foi agitada durante duas horas, o solvente foi removido e o resíduo foi purificado por HPLC prep. para dar o composto do título como um pó es- —branquiçado (2,0 mg, 4,0%); *H RMN (400 MHz, CDs;0D) 5 7,97 (d, J=8,5 Hz, 1H), 7,56 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,46-7,41 (m, 2H), 7,30 (d, J = 17 Hz, 1H), 7,15 (t J = 7,2 Hz, 1H), 7,06-6,99 (m, 4H), 6,65 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 7,7 Hz, 1H), 3,49-3,44 (m, 4H), 3,40-3,31 (m, 8H), 2,28-2,25 (m, 1H), 2,21-2,18 (m, 1H); MS ESI [M + H]* 476,2, calculado para — [CaoHooNsO + HJ] 476,25.
too ] 125/188 Exemplo A920. cloridrato de (1R,28)-(E)-1'-metil-2-(3-(4-(piperazin-1-i)estiril)- 1H-indazol-6-il)espiro[ciciopropano-1,3'-indolin]-2'-ona
EN
OE HCl >? A. O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 2S) -2-(3-lodo-1H-indazol-6-i1)-1"- - 5 metilespiro [ciclopropano-1, 3 "indolin-]-2"-ona (218 mg, 0,526 mmol) e 4-(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan -2-il)-vinil)-fenil) piperazina-1- , carboxilato de (E)-terc-butila (261 mg, 0,631 mmol). O intermediário Boc- protegido foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel, CH;Cl/MeOH, 97:3 a 96:4) para dar 218 mg, 72%. Este material foi dissolvi- doem CHCkl(6,0mL)eTFA (1,0 mL) e agitado durante duas horas, o sol- vente foi removido e o resíduo foi purificado por meio de HPLC prep., que deu o sal de TFA. Este material foi livre de base por lavagem com NaHCO;z (sat). (10 mL) e extraindo com EtOAC (2 x 50 mL). O sal de HCI foi prepara- do de acordo com o método de A42B que deu origem, após a secagem, o produto do título (48 mg, 15%); Os dados espectrais foram idênticos aos ob- tidos no Exemplo AB9. Rotação óptica: [a]"%p =-1000 (c 0,43, MeOH). Exemplo A91. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R*, 28*) - (E) -2-(3-(4-(piperazin-1- i1)-estiril)- 1 H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3"-indolin)-2"-ona “TFA (RA : me (D CO PA. e. R*, S*, mistura racêmica O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A45 em WO;z2010/115279, exceto substituindo (1R*, 28*)-2(3-iodo- 1IH-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3'-indolin)-2'-ona (72 mg, 0,180 mmoi)
. 126/188 e 4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina-1- carboxilato de (E)-terc-butila (90 mg, 0,217 mmol). O solvente foi removido e o resíduo foi purificado por cromatografia em coluna (sílica gel, hexa- nos/EtOAc, 2:1) para dar 38 mg da amina Boc-protegida, que se dissolveu emCHCl (2,0mL)eTFA (0,1 mL) foi adicionado. A reação foi agitada du- rante 3 h, o solvente foi removido e o resíduo foi purificado por meio de H- PLC prep para produzir o composto do título (6,5 mg, 6,0%); 1H RMN (400 MHz, CD;0OD) 5 7,97 (d, J = 8,1 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 8,6 Hz, 2H), 7,47-7,42 (m, 2H), 7,30 (d, J = 17 Hz, 1H), 7,06-7,01 (m, 4H), 6,93 (d, J =7,6 Hz, 1H), 6,58(tJ=7,6Hz, 1H), 5,98 (d, J=8,0 Hz, 1H), 3,49-3,44 (m, 4H), 3,40-3,31 (m, 5H), 2,26-2,22 (m, 1H), 2,19-2,16 (m, 1H); MS ESI [M + H]* 462,2, calcu- Ú lado para [CosHo7NsO + HJ* 462,23. . Exemplo A92. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R, 28S)-(E)-2-(3-(4-(piperazin-1-il)- estíril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2"-ona « TFA O NH mo O no PÉ. Ano O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A91, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2'-ona (40 mg, 0,1 mmol). O composto do título foi isolado como um sólido amarelo (23 mg, 40%). Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos para o exemplo A91. ] 20 Exemplo A94 cloridrato de (1R28)-(E)1'-metil.2-(3-(4-(piperidin-1- ' ilmetiDestiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona AO HCl Q
AR O " O | Hd b 127/188 O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 28S)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"- metilespiro [ciclopropano-1, 3"-indolin-)-2'-ona (594 mg, 1,43 mmol) e (E)-1- (4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-piperidina (563 mg 1,72 mmol). A purificação por cromatografia em coluna (sílica gel, CHxCl/MeOH/7N NH3 em MeOH, 91:8:1) deu 443 mg, 63% da base livre como um sólido cor de laranja pálido. O sal de HCI foi preparado de acordo com o método para a A42B, que deu origem, após a secagem, o produto do título (378 mg, 50%), 'H RMN (400 8,01 (d, J = 8,1 Hz, 1H),5MHz, CD3OD) 7,76(d,J=7,2Hz,2H),7,54-7,47 (m, 5H), 7,15 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,05 (d, J =7,9 Hz, 2H), 6,64 (t, J = 7,9 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 6,6 Hz, 1H), 4,31 (s, 2H), ' 3,48-3,45 (m, 2H), 3,39 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,36 (s, 3H), 3,01-2,95 (m, 2H), . 2,29-2,26 (m, 1H), 2,22-2,19 (m, 1H), 1,99-1,72 (m, 5H), 1,57-1,50 (m, 1H); MS ESI [M + HJ* 489,3, calculado para [C32H32N40 + HJ* 489,27. Rotação óptica: [an =-122º (c 0,49, MeOH) Exemplo A95. 2,2,2-trifluoroacetato de 1R*,28”)-(E)-1'-metil-2-(3-(4-(piperidin- 1-ilmeti)estiriN)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona
SO E “TFA R*, S*, mistura racêmica &
Y ' O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do . Exemplo A43 em WOz2010/115279, exceto substituindo (1R”, 28")-2-(3-lodo- 1H-indazol-6-il)-1-metilspiro [ciclopropano-1,3'-indolin]-2'-ona (44 mg, 0,106 mmol) e (E) 1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)- piperidina (45 mg, 0,138 mmol). A purificação por HPLC prep produziu o composto do título (6,5 mg, 10%); Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no Exemplo A94 em.
. 128/188 Exemplo —A102. cloridiato de (1R,28)(E)S-metóxi1-metil-2-(3-(4- (morfolinometil)estiril)-1H-indazol-6-iNespiro| Sielopropano! 3 -indolin |--2-ona NÃo He! CÚ 2
A À N
ANA O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 2S)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5"- metóxil-metilespiro [ciclo-propano-1,3'-indolin)-2-ona/ (512 mg, 1,15 mmois) e (E)—4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)- o morfolina (454 mg, 1,38 mmol). A purificação por cromatografia em coluna (sílica gel, CH2CIly/MeOH, 95:5 a 92:8) deu a base livre como um sólido ama- ' relo. O sal de HCl foi preparado de acordo com o método de A42B, o que deu, após secagem, o produto em título como um sólido amarelo pálido (346 mg, 8,02 (d, J = 8,6554%), *?H RMN (400 MHz, CD30D) Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,56-7,49 (m, 5H), 7,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,92 (d, J=7,8 Hz, 1H), 6,69 (d, J = 8,6 Hz, 1H), 5,63 (s, 1H), 4,39 (s, 2H), 4,08-4,05 (m, 2H), 3,77-3,71 (m, 2H), 3,35-3,23 (m, 11H), 2,27-2,25 (m, 1H), 2,22-2,19 (m, 1H); ESIMS[M+ H]' 521,3, calculado para [C32H32N40; + HJ* 521,26. Rotação óptica: [a]ººn =-85º (c 0,59, MeOH). Exemplo —A106. 2,22-trifuoroacetato de (1R28)-(E)2-43-(4-(((R)-3- fluoropirrolidin-1-il)metil)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2--ona : ST OE ; ' - TFA * Das A. (R) -1-(4-bromobenzil)-3-fluoropirrolidina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A105B em WO2010/115279, exceto substituindo cloridrato de (R)-
. 129/188 3-fluoropirrolidina (576 mg, 4,59 mmols) e 4-bromobenzaldeído (849 mg, 4,59 mmolis), que deu 1,09 g, 91% de um óleo límpido, incolor; ES| MS [M + HJ* 258,0, calculado para [C11H13BrFN + HJ* 258,03. B. (3R)-3-fluoro-1-(4-((E) -2-(4,4,6-trimetil-1,3,2-dioxaborinan-2- il)-vinil)-benzil)-pirrolidina O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1A, exceto substituindo (R) -1-(4-bromobenzil)-3-fluoropirrolidina (1,07 g, 4,15 mmois) e 4,4,6-trimetil-2 -vinil-1,3,2-dioxaborinane (0,77 mL, 4,57 mmols) o que deu 1,40 g, 91% de um sólido cor de laranja pálido; ES| MSIM+H]* 332,3, calculado para [C19H,7BFNO, + HJ" 332,22. C. 2,2,2-triluoroacetato “de (1R28)-(E)2-(3-(4-(((R)-3- Ú fluoropirrolidin-1-il)metil)estiril)- 1H-indazol-6-il)espirof[ciclopropano-1,3"- - indolinJ)-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2--ona (630 mg, 1,57 mmol) e (3R)-3-fluoro-1-(4- ((E) -2-(4,4,6-trimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-vinil)-benzil)-pirrolidina (622 mg, 1,88 mmol). O produto do título foi obtido como um sólido amarelo pálido, após purificação por HPLC prep. (338 mg, 48%), 'H RMN (400 MHz, CD;OD) 57,98 (d, 1H, J=8,3 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 7,80 Hz), 7,55-7,45 (m, 5H), 7,06-7,00 (m, 2H), 6,93 (d, 1H, J =7,7 Hz), 6,56 (t 1H, J = 7,5 Hz), 5,97 (d, 1H, J = 7,5 Hz), 5,46 (d, 1H, J = 52,4 Hz), 4,46 (s, 2H), 3,73-3,31 (m, 5H), 2,65-2,44 (m, 2H), 2,26-2,15 (m, 2H); MS ESI [M + H]* 479,3, calculado para [CaoH27FN,4O+ HJ* 479,22. Rotação Óptica: [a]/2n = -125º (c 0,44, MeOH). Exemplo A109. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- ' no)metiDestiri))-1H-indazol-6-il)-1'-metilspiro[ciclopropano-1,3-indolin)-2"-ona : Ss O “TFA O " PAO | 1
HNAN O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-i1)-1"-
' 130/188 metilespiro [ciclopropano-1,3"indolin-]-2"-ona (134 mg, 0,322 mmol) e (E)-N, N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) meta- namina (111 mg, 0,386 mmol). A purificação por HPLC prep. resultou em um sólido amarelo pálido que foi sonicado com Et20O e filtrado para dar origem ao produto do título (42 ma, 23%); '*H RMN (400 MHz, CDsOD) 5 8,00 (d, 1H, J = 8,0 Hz), 7,76 (d, 2H, J = 7,6 Hz), 7,54-7,47 (m, 5H), 7,15 (t 1H, J = 8,2 Hz), 7,03 (d, 2H, J = 7,8 Hz), 6,64 (t, 1H, J =7,5 Hz), 6,02 (d, 1H, J=7,0 Hz), 4,33 (s, 2H), 3,41-3,35 (m, 4H), 2,88 (s, 6H), 2,29-2,26 (m, 1H), 2,22- 2,19 (m, 1H); MS ESI [M + HJ 449,2, calculado para [CaoH2s8N,O0+ HJ” 449,23. Rotação Óptica: [a]ººp = -152º (c 0,42, MeOH). : Exemplo A1l12. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-(((R)-3- - fluoropirrolidin-1-i)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano- 1,3-indolin)-2"-ona Ff TFA ; ? [o os = y o O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'- metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2'-ona (125 mg, 0,290 mmol) e (3R)-3- fluoro-1-(4-((E)-2-(4,4,6-trimetil-1,3,2-dioxaborinan-2-il)-vinil)-benzil)- pirrolidina (115 mg, 0,348 mmol). A purificação por HPLC prep. deu 64 mg, 35% do composto do título como um sólido bege; 'H RMN (400 MHz, ' CD;zOD) 5 8,01 (d, 1H, J = 8,3 Hz), 7,75 (d, 2H, J = 7,9 Hz), 7,55-7,48 (m, . 5H), 7,04 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 6,82 (d, 1H, J = 8,2 Hz), 6,60 (d, 1H, J = 8,5 Hz), 5,58 (s, 1H), 5,46 (d, 1H, J = 53,2 Hz), 4,46 (bs, 2H), 3,80-3,48 (m, 4H), 3,36 (t, 1H, J = 8,8 Hz), 3,26 (s, 3H), 2,54-2,33 (m, 2H), 2,27-2,24 (m, 1H), 2,22-2,17 (m, 1H); MS ESI [M + HJ” 509,3, calculado para [C3:H>9FN4O> + HJ* 509,24. Rotação Óptica: [a]? = -91º (c 0,58, MeOH).
' 131/188 Exemplo A113. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R, 2S) -2-(3-((E) -2-(2,3,4,5-tetra- hidrobenzo [f] [1,4] oxazepin-7-il)-vinil)- 1H-indazol-6 -il)-espiro [ciclopropano- 1, 3-indolin]-2'-ona A TF o QoS Ox HN = fr
IE 8 O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, usando (IR, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6B-il)-espiro [ciclopro- " pano-1,3"-indolin)-2'-ona (105 mg, 0,27 mmol) e7-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- . dioxaborolan-2-il)vinil)-2,3-dihidrobenzo[f[1,4)oxazepine-4(5H)-carboxilato de (E)-terc-butila (130 mg, 0,32 mmol). O resíduo da reação foi dissolvido em CH2Cl2 (5 mL) e TFA (0,2 mL) foi adicionado e a mistura foi agitada du- rante uma hora e concentrada até a secura. Purificação por HPLC preparati- va deu o composto do título como um sólido creme (40 mg, 30%). 1H RMN (400 MHz, CD30OD) 5 7,97 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,68-7,64 (m, 2H), 7,50-7,39 (m, 3H), 7.16 (d, J = 8,2 Hz, 1H), 7,07-7,01 (m, 2H), 6,94 (d, J= 7,8 Hz, 1H), 6,57 (t. J = 7,6 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 7,4 Hz, 1H), 4,45 (s, 2H), 439 (br. s, 2H) 3,68 (br. s, 2H), 3,39-3,33 (m, 1H), 2,25-2,16 (m, 2H), MS ESI 449,3 [M + HJ”, calculado para [C28H74N40, + HJ* 449.2. Exemplo A115. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)1-metil-2(3-(4- (pirrolidin-1-ilmetiestiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"- ona : - TFA Q ' O O Ô "
AN O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do
. 132/188 Exemplo A42B, exceto substituindo (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"- metilespiro [ciclopropano-1,3"-indolin-]-2-ona (147 mg, 0,353 mmol) e (E)-1- (4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-pirrolidina (133 mg, 0,424 mmol). A purificação por HPLC prep. produziu o composto do títu- locomo um sólido amarelo pálido (46 mg, 22%), *H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,98 (d, 1H, J = 8,7 Hz), 7,73 (d, 2H, J = 7,4 Hz), 7,53-7,44 (m, 5H), 7,14 (t, 1H,J =7,2 Hz), 7,01 (d, 2H, J=7,9 Hz), 6,63 (t, 1H, J =7,4 Hz), 6,01 (d, 1H, J=7,6 Hz), 4,38 (s, 2H), 3,55-3,45 (m, 2H), 3,40-3,32 (m, 1H), 3,34 (s, 3H), 3,26-3,16 (m, 2H), 2,28-2,17 (m, 4H), 2,05-1,95 (m, 2H); MS ESI [M + HF 475,4, calculado para [C3iH3oNsO + HJ” 475,25, Rotação Óptica: [a]? = - 148º (c 0,40, MeOH). ] Exemplo A116. 2,2 2-frifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(3,5-difluoro-4- - morfolinometil)estiril)-1H-indazol-6-il)espiro| diopropanoA 3"-indolin]-2'-ona O mx HN Y -TFA , QD Ss
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1IB, usando (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano-1, 3-indolin)-2'-ona (125 mg, 0,311 mmol) e (E)-4-(2,6-difluoro-4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (130,8 mg, 0,358 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título . como um sólido creme (88 mg, 45%). ?*H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,94 (d, . 20 J=84Hz,1H),7,56 (d, J=16,8 Hz, 1H), 7,46-7,42 (m, 4H), 7,04-6,99 (m, 2H), 6,92 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,53 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,95 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,48 (s, 2H), 4,08-3,84 (bm, 4H), 3,49-3,35 (bm, 5H), 2,26-2,23 (m, 1H), 2,21-2,17 (m, 1H); MS ESI 513,3 [M + HJ*, calculado para [CaoHa6sF2N4O,2 + HJ* 513,21. Rotação Óptica [a]n = -121º (c 0,34, MeOH)
Exemplo A131. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- no)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-1'-(2-metoxietil)spiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona
N RO mm DS NO Sm.
N O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, usando (IR, 28) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"-(2-metoxietil)- Ú espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2:-ona (490 mg, 1,07 mmol) e (E)-N,N- . dimetil-1 (4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil) meta- namina (321,7 mg, 1,412 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido esbranquiçado (297 mg, 46%). 1H RMN (400 MHz, CD3OD) õ 7,90 (d, J=8,0 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,50- 7,42 (m, 5H), 7,08-7,03 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,55 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 4,01 (t, J = 4,8 Hz, 2H), 3,67 (t J = 5,2 Hz, 2H), 3,35-3,31 (m, 4H), 2,86 (s, 6H), 2,21-2,20 (m, 1H), 2,17-2,14 (m, 1H); ESI MS 493,4 [M + HJ”, calculado para [C31H32N40, + HJ* 493,26, [a]lºp=-169º (c 0,36, MeOH), Exemplo A132. 2,2 ,2-trifluoroacetato de (1R, 2S)-5-metóxi-2-(3-(3 - (morfoli- nometil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2'-ona a. *TFA O
N Ea Q - o N O composto do título (163 mg, 67%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de (IR, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-11)-5"- —metoxispiro [ciclopropano-1,3'-indolin)-2'-ona (172 mg, 0,4 mmol) e (E) -4-(3- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1 3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (184 mg,
' 134/188 0,56 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1B (Ph- CH3/EtOH = 8 mi/4 ml, 5% em mol de Pd(PPh3)4, 125ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 7,89 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,72 (s, 1H), 7,67 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,50-7,37 (m, 5H), 6,93 (d, J = 84 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,56(dd,J=8,4Hz, J=2,4Hz, 1H), 5,56 (d,J=2,0 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 4,10-4,08 (m, 2H), 3,82-3,71 (m, 2H), 3,45-3,35 (m, 2H), 3,32 (t, J = 8,2 Hz, 1H), 3,25-3,15 (m, 5H; s, 3H at 3,20 ppm and m, 2H sobreposição), 2,20- 2,10 (m, 2H); MS ESI 507,3 [M + HJ”, calculado para [C31H3oN4O3 + HH 507,2. Rotação Óptica [a], = -89º (c 0,34, MeOH) Exemplo A133. 2,2,2-trifuoroacetato de (1R*,28)5-metóxi-2-(3-(3- Ú (morfolinometil)estiril)-1 H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona ê.
TFA ( TD A? E O o o No A uma mistura de (1R”, 28*)-5'-metóxi-2-(3-vinil-1H-indazol-6-i!)- espiro [ciclopropano-1, 3'indolin-2-ona (66 mg, 0,2 mmol), 4-3- bromobenzil) morfolina (56 mg, 0,22 mmol), Pd(OAc)2 (2,2 mg, 0,01 mmol) e Pí(o-tol)s (6,7 mg, 0,022 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado *PraNEt (0,07 mL, 0,4 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida, micro-ondas 30 min a 150ºC.
A mistura em bruto foi passado através de um - microfiltro, em seguida, purificado por meio de HPLC prep para dar o com- posto do título (50 mg, 40%) como uma espuma amarela clara.
RMN indicou ] 13% de isômero ramificado.
Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no Exemplo de A132.
* 135/188 Exemplo A134. 222-trifluoroacetato de (1R,28)-2-(3-(3-((dimetilami- no)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3'-indolin]-2"- ona ê LJ “TFA Px o > NY Á
N O composto do título (89 mg, 38%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo pálido a partir de (IR, 28) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-i1)-5"- ] metoxispiro [ciclopropano-1, 3'-indolin]-2'-ona (172 mg, 0,4 mmol) e (E)-N, N- dimetil-1-(3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) — meta- ' namina (161 mg, 0,56 mmol) utilizando o método para a preparação do E- xemplo A51B (PhCH3/EtoH = 8 mi/4 ml, 5% em mo! de Pd(PPh3),, 125ºC, 2 h).?H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,73 (s, 1H, parci- almente sobreposição com o pico em 7,70 ppm), 7,70 (d, J = 8,0 Hz, 1H, parcialmente sobreposição com o pico em 7,73 ppm), 7,52-7,45 (m, 4H), 7,40 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 84 Hz, 1H), 6,58 (dd, J = 8,4 Hz, J = 2,4 Hz, 1H), 5,57 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 4,34 (s, 2H), 3,33(tJ=8,8Hz, parcialmente sobreposição com resíduo MeOH, 1H), 3,23 (s, 3H), 2,89 (s, 6H), 2,22-2,12 (m, 2H); MS ESI 465,3 [M + HJ”, calculado para [CooH28N4O,> + H]” 465,2. Rotação Óptica [a] ?p = -82º (c 0,38, MeOH) Exemplo A1I13S5. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*7,28*)-2-(3-(3- 7 20 ((dimetilamino)metiD)estiril)-1H-indazol-6-il)-S'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3'- . indolin)-2"-ona e. *TFA h q = a o om Y No
" 136/188 A uma mistura de (1R*, 28*)-5'-metóxi-2-(3-vinil-1H-indazol-6-il)- espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2-0na bruto (100 mg, 0,2 mmol), 1-(3- bromofenil)-N, N-dimetilmetanamina (43 mg, 0,2 mmol), Pd(OAc)> (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado PraNEt(0,07 mL, 0,4 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida, micro-ondas 30 min, a 125ºC. Ele foi passado através de um microfiltro, em seguida, purificado por meio de HPLC prep para dar o com- posto do título como um sólido amarelo claro. RMN indicou 7% isômero ra- mificado (43 mg, 37%). Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no exemplo A134. Exemplo A146. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((dietilamino)Metil)- : 3,5-difluoroestiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"- . ona | R NO o LC e. -TFA F HN : —
ES N
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1B, usando (1R, 28S)-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-S'-metoxispioro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2-ona (125 mg, 0,289 mmol) e (122,2 mg, 0,347 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (59 mg, 31,6%). *H RMN (400 MHz, CD3OD) 3 7,99 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,50-7,45 (m, 4H), 7,03 (s, J = 8,4 Hz, ' 20 1H) 6,82(d,J=8/4Hz,1H),6,59(d, J=8,8 Hz, 1H), 5,57 (s, 1H), 446 (s, . 2H), 3,37-3,28 (m, 5H), 3,25 (s, 3H), 2,25-2,22 (m, 1H), 2,19-2,17 (m, 1H), 1,26 (t, J = 11,2 Hz, 6H); MS ESI 529,3 [M + HJ”, calculado para [C31H30F2N4O, + HJ* 529,2. Rotação óptica: [a] 23D = -80º (c 0,65, metanol).
. 137/188 Exemplo A147. bis 2,2 2-trifuoroacetato de (1R*2S8*)(E)-2-(3-(4-((4- metilpiperazin-1-il)metil)estiril)- 1 H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona " O *2TFA O =. AO =
À no A uma mistura de (1R*”, 28*) -2-(3-vinil-1AH-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2"-ona (60,2 ma, 0,2 mmol) e 1-(4-bromobenzil)-4- metilpiperazina (53,8 mg, 0,2 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado iPr2NEt - (0,07 mL), seguido por Pd(OAc)> (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, e depois coloca- ' da em micro-ondas por duas horas a 100ºC. LC-MS mostrou uma conversão baixa. Pd(OAc); adicional (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol) foram adicionados e a mistura de reação foi purgada com argônio e 2 h com micro-ondas a 125ºC. A purificação por HPLC prep. produziu o com- posto do título como um sólido branco (23 mg, 16%). ?H RMN (400 MHz, CD;5OD) 8 7,99 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,53-7,46 (m, 5H),7,05(tJ=27,6Hz, 1H, parcialmente sobreposição com o pico em 7,04 ppm), 7,04 (d, J = 8,0 Hz, 1H, parcialmente sobreposição com o pico em 7,05 ppm), 6,94 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,58 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 5,99 (d J= 8,0 Hz, 1H), 4,19 (s, 2H), 3,60-3,30 (m, 9H), 2,95 (s, 3H), 2,24 (dd, J=7,6 Hz, 4,8 Hz, 1H), 2,18 (dd, J = 9,0 Hz, J = 4,6 Hz, 1H); MS ES! 490,3 [M + Hr, calculado para [CaiH3NsO + H]* 490,3. . Exemplo A151. 2, 2,2-trifluoroacetato de (1R, 28) - (E) -2-(3-(3 - (morfolino- metil) estiri)-1 H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2"-ona ' O *TFA O
N Ra Q o AN
N O composto do título (158 mg, 67%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de (IR, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ci-
clopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (160 mg, 0,4 mmol) e (E) 4-(3-(2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (184 mg, 0,56 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo AS51B (Ph- CH3/EtOH = 8 mi4 ml, 5% em mol de Pd(PPh3)4, 125ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD;0D)$58,11(s,1H),7,88(d,J=84Hz,1H),7,73(s, 1H), 7,67 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,50-7,38 (m, 5H), 6,98 (t, J = 7,8 Hz, 1H), 6,91 (d J= 8,0 Hz, 2H), 6,48 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,92 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 4,03 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,76 (t, J = 12,0 Hz, 2H), 3,45-3,14 (m, 5H), 2,17-2,08 (m, 2H); MS ES! 477,3 [M + HJ*, calculado para [CaoH28N4O, + HJ 477,2 Rotação Óptica [a] p = -144º (c 0.34, MeOH). Exemplo A152. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R*, 28*) - (E) -2-(3-(3 - (morfoli- ' nometil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3"-indolin)-2'-ona ' O "TFA o HN'Z = N ROL <Q
N A uma mistura de (1R“, 28*)-2-(3-vinil-1H-indazol-6-il)-espiro [ci- clopropano-1, 3"-indolin)-2"-o0na (60,2 mg, 0,2 mmol) e 4-(3-bromobenzil) —morfolina (51,2 mg, 0,2 mmol) em DMF (1,5 mL) foi adicionado iPr2NEt (0,07 mL), seguido por Pd(OAc)2 (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, e depois colocada em micro-ondas por duas horas, a 125ºC. A purificação por HPLC prep. produ- . ziu o composto do título como um sólido branco (22 mg, 19%). RMN indicou 3% de isômero ramificado. Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos Í no Exemplo de A151.
' 139/188 Exemplo —“A160. 2,2 2-trifluoroacetato de 2-((1R*,28*)(E)2-(3-(4- (Udimetilamino)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-2"-oxospiro[ciclopropano-1,3"- indoline])-1'-i)acetamida / H; oro o Cs ú 2! :
ROL No O composto do título (79 mg, 33%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo pálido a partir de 2((1R”*, 28*)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)- - 2'-oxoespiro [ciclopropano-1,3"-indolina]-1"-il) acetamida (183 mg, 0,4 mmol) e (E)-N,N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- ' fenil) metanamina (161 mg, 0,56 mmol) utilizando o método para a prepara- ção do Exemplo AS1B (PhCH3/EtOH = 8 mL/4 mL, 5% em mol de Pd(PPh3)4,125ºC,2h). 1H RMN (400 MHz, CD;OD) ô 7,92 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,50-7,43 (m, 5H), 7,07 (t, J = 8,2 Hz, 1H, par- cialmente sobreposição com o pico em 7,04 ppm), 7,04 (d, J = 9,2 Hz, parci- almente sobreposição com o pico em 7,07 ppm), 6,90 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,60 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,02 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,58-4,54 (m, 2H), 4,30 (s, 2H) 3,39 (tJ=8,4 Hz, 1H), 2,86 (s, 6H), 2,27-2,18 (m, 2H); MS ESI 492,3 [IM + HJ”, calculado para [CaoHooNsO>2 + HJ* 492,2. Exemplo A162. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*,28*)-(E)-2-(3-(3-((dimetilamino; metil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3'-indolin]-2-ona . O *TFA q "x ar i o -Q N
N A uma mistura de (1R*,28”)-2-(3-vinil-1H-indazol6-il)-espiro [ci- clopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (60,2 mg, 0,2 mmol) e 1-(3-bromofenil)-N,N- dimetilmetanamina (42,8 mg, 0,2 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado iPr2NEt (0,07 mL), seguido por Pd(OAc)> (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3
Í 140/188 (6,7 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, e de- pois colocada em micro-ondas por duas horas, a 125ºC. A purificação por HPLC prep. produziu o composto do título (24 mg, 22%, sal de TFA) na for- ma de um sólido branco. O RMN indicou a 5% do isômero ramíficado. *H —RMN (400 MHz, CD;OD) 387,99 (d,J=8,4Hz, 1H), 7,78-7,75 (m, 2H), 7,55- 7,49 (m, 3H), 7,47 (s, 1H), 7,41 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,08-7,00 (m, 2H), 6,94 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,57 (t, J = 7,4 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,35 (t, J = 8,4 Hz, 1H, parcialmente sobreposição com resíduo MeOH), 2,90 (s, 6H), 2,23 (dd, J = 8,0 Hz, J = 4,8 Hz, 1H), 2,08 (dd, J = 9,2 Hz, J = 48Hz,1H); MS ESIA435,2[M + HJ", calculado para [CasH26N4O + HJ 435,2. Exemplo —A164. 222rifuoroacetato de —2-((1Rº7,28*)(E)-2-(3-(3- ' (Udimetilamino)metíil)estiril)-1 H-indazol-6-il)-2"-oxospiro[ciclopropano-1,3"- . indolina)-1"-i)acetamida “TFA O "” O O ” nn, TD" 8 O composto do título (6,9 mg, 23%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de 2((1Rº, 28”) -2-(3-lodo-1H-indazol-611)-2"- oxoespiro [ciclopropano-1,3"-indolina]-1'il) acetamida (22,9 mg, 0,05 mmol) e (E)-N,N-dimetil-1-(3-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) metanamina (21,6 mg, 0,075 mmol) utilizando o método para a preparação . do Exemplo A51B (PhCH3/EtOH = 2 mL/1 mL, 4% em mol de Pd(PPh3)4, 120ºC,2h).'*H RMN (400 MHz, CD3;0D) 3 8,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,80 (s, ' 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,79 ppm), 7,79 (d, J = 9,2 Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,80 ppm), 7,57-7,52 (m, 4H),
7.42 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 7,15-7,08 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,64 (t, J =7,8 Hz, 1H), 6,03 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 4,55 (d J= 17,2 Hz, 1H), 4,37 (s, 2H), 3,44 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 2,91 (s, 6H), 2,33-2,24 (m, 2H); MS ES! 492,3 [M + HJ”, calculado para [CaoH26NsO> + HJ” 492,2.
Exemplo A165. 2,2,2-trifluoroacetato de 2-((1Rº,28*)-(E)-2'-0x0-2-(3-(4- (piperidin-1-ilmetil)estíril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indoline]-1"- iNDacetamida “TFA O o O Hon: NOZ ==
A IDOL Nº O composto do título (12 mg, 37%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de 2((1R*, 28*) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-11)-2"- í oxoespiro [ciclopropano-1,3'-indolina]-1"-iI) acetamida (22,9 mg, 0,05 mmol) e . (E)-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-piperidina (24,6 mg, 0,075 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1B (PRCH3/EtoH = 2 mL/1 mL, 4% em mol de Pd(PPh3)4, 120ºC, 2 h). HRMN (400 MHz, CD;OD) 3 8,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 84 Hz, 2H), 7,57-7,50 (m, 5H), 7,15-7,08 (m, 2H), 6,93 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,64 (t, J =7,4 Hz, 1H), 6,03 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,60 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 4,55 (d J = 16,8 Hz, 1H), 4,30 (s, 2H), 3,52-3,40 (m, 3H), 2,98 (t, J = 11,6 Hz, 2H), 2,32- 2,22 (m, 2H), 2,00-1,68 (m, 5H), 1,60-1,46 (m, 1H); MS ES! 532,4 [M + HI, calculado para [Ca3H33NsO>2 + HJ” 532,3. Exemplo A167. 2,22-triluoroacetato de (1R*2S8*)(E)-2-3-(4-((dimetil- amino)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-S'-etilspirofciclopropano-1,3'-indolin)-2--ona
N : e. -TFA O À HN' E : O Nº O composto do título (19,5 mg, 34%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de (1 R*, 28*) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-i1)-5"- etilspiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2'-ona (42,9 mg, 0,1 mmol) e (E)-N, N-
“ ? 142/188 dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-iI)-vinil)-fenil) — meta- namina (29 mg, 0,1 mmol), usando o método para a preparação do exemplo AS1B (PRCH3/EtoH = 2 mL/1 mL, 2,5% em mol de Pd(PPh3)4, 120ºC, 2 h). ?H RMN (400 MHz, CD;OD) 8,01 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 2H),7,54-7,50 (m, 4H), 7,44 (s, 1H), 7,04 (d, J=8,4 Hz, 1H), 6,86 (d, J= 8,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 5,77 (s, 1H), 4,33 (s, 2H), 3,34 (tl J = 8,0 Hz, 1H, sobrepondo parcialmente com resíduo MeOH), 2,88 (s, 6H), 2,25- 2,10 (m, 4H), 0,65 (t, J = 7,6 Hz, 3H); MS ESi 463,3 [M + HJ”, calculado para [C3oH3oN4O + HJ" 463,2. Exemplo A1I69 2,22rifluoroacetto de (1R“2S8”)-(E)2-(3-(4- (dimetilamino)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metilspiro[ciclopropano-1,3"- S indolin)-2-ona QD x
CA CS = Nº O composto do título (27 mg, 48%, sal de TFA) foi obtido co- mo um sólido amarelo claro, a partir de (1 R*, 28*)-2-(3-lodo-1H-indazol- 6)-S'-metilespiro [ciclopropano-1,3'-indolin]-2-ona (41,5 mg, 0,1 mmol) e (E)-N,N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) metanamina (43 mg, 0,15 mmolis) utilizando o método para a preparação do Exemplo A51B (PRCHJyEtoH = 2 mL/1 mL, 2,5 mol% Pd(PPh3)4, . 120ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 8,00 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (djyJ=8,0Hz,2H) 7,53 (s, 2H, parcialmente sobreposto com o pico a ' 7,52 ppm), 7,52 (d, J = 8,8 Hz, 2H, parcialmente sobreposto com o pico à 7,53 ppm), 7,46 (s, 1H), 7,03 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 7,6 Hz,1H), 5,83 (s, 1H), 4,33 (s, 2H), 3,32 (t, J = 8,4 Hz, 1H, parcialmente sobrepondo com resíduo de MeOH), 2,88 (s, 6H), 2,22-2,13 (m 2H) 1,88(s,3H); MS ESI 449,2 [M + HF”, calculado para [CoaoH2gN4O + HJ* 449,2.
Exemplo A174. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*,28”)-(E)-5-metóxi-2-(3-(4-(4- metilpiperazin-1-iN)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin])-2"- ona O? a ES -TFA Í ” º "” Os 1 No A uma mistura de (1R*, 28*)-5'-metóxi-2-(3-vinil-AH-indazol-6-il)- espiro [ciclopropano-1,3'-indolin)-2"-ona bruto (97 mg, 0,2 mmol) e 1-(4- bromofenil)-4-metilpiperazina (51 mg, 0,2 mmol) em DMF (2 mL) foi adicio- : nado iPr2NEt (0,07 mL), seguido por Pd(OAc)2 (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o- . tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida colocada em micro-ondas por duas horas, a 125ºC. A purificação porHPLC prep-seguido por trituração a partir de MeOH deu origem ao com- posto do título (4 mg, 3%, sal de TFA) na forma de um sólido branco. H RMN (400 MHz, CD;OD) à 8,00 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,57 (d, J= 8,0 Hz, 2H), 7,46 (s, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,44 ppm), 7,44 (d, J = 16,4 Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,46 ppm), 7,31 (d, J = 16,8Hz,1H),7,10-7,00 (m, 3H), 6,84 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,62 (d, J =7,2 Hz, 1H), 5,59 (s, 1H), 4.01-3,00 (m, 12H), 2,99 (s, 3H), 2,30-2,15 (m, 2H); MS ESI 506,3 [M + HJ”, calculado para [C31H31N5O,2 + HJ* 506,2. Exemplo A175. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,28S)-(E)-5S'-metóxi-2-(3-(4-(4- metilpiperazin-1-i)estiril)-1H-indazol-6-iNespiro[ciclopropano-1,3'-indolin)-2"- ona 7 ' N . un rea ve *TFA O
PÁ OQ o : O composto do título foi preparado de um modo semelhante ao Exemplo A51B usando (1R,28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro [ci clopropano-1,3"-indolin)-2-ona (36,0 mg, 0,083 mmol) e (E)-1-metil-4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il)-vinil)-fenil) piperazina (31,9 mg, 0,097 mmol). A mistura de reação foi diluída com MeOH (3 mL) e vertida para um cartucho 20 cc Porapak Rxn Cx.
Depois da lavagem com MeOH (20 mL), o composto do título foi eluído utilizando NH3 a 2M : MeOH (20 mL). Após a remoção dos solventes in vácuo, o composto do título foi purificado por HPLC preparativa para se obter o composto do título como o sal de TFA (sólido amarelo, 23,3 mg, 45%). 7H RMN foi idêntico ao do Exemplo A174; ESI MS 506,3 [M + HJ”, calculado para [C31H31N50, + HJ* 506,3. Exemplo A177. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-5S'-metóxi-2-(3-(4-(2- morfolinoetiNestiril)-1 H-indazol-6-iNespiro] (ciclopropano-1,3'-indolin)-2-ona H AD +TFA o . A N 1 Ns A uma mistura de 4-(4-bromofenetil) morfolina (731 mg, 2,71 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1,3,2-dioxaborolano (0,5 mL, 2,95 mmois, 1,1 eq). Em um frasco para micro-ondas de 20 mL adicionou-se Et3N (0,76 mL, 54 mmois, 2 eq.), seguido de Pd(P'Bus)] (14 mg, 0,027 mmois, 1% em mol). A mistura resultante foi purgada com argônio, em seguida tapada e aquecida a 80ºC (temperatura do óleo). Durante duas horas.
Após arrefeci- mento até a temperatura ambiente, a reação foi resfriada bruscamente com NaHCO; sat. (10 mL), H2O (10 mL), extraída com EtOAC (30 mL x 2) e seca sobre NasSO,. Após evaporação dos solventes, o residuo foi purificado por ' meio de sistema de coluna Biotage (EtOAc/hex gradiente: 0-100%) para dar . (E) -4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) vinil)-morfolina fenetil) como um sólido branco (714 mg, 77%). 7'H RMN (400 MHz, CDCk) 3 7.42 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,38 (d, J = 19,0 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 7,8 Hz, 2H), 6,13 (dJ=183Hz,1H),3,75(t,J=4,4 Hz, 4H), 2,84-2,77 (m, 2H), 2,63-2,56 (m, - 2H), 2,53 (br, pseudo s, 4H), 1,32 (s, 12H). A uma mistura de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5"-
metoxispiro [ciclopropano-1,3-indolin)-2'-ona (172 mg, 0,4 mmol) e (E)-4-(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il) vinil) fenetil)-morfolina (138 mg, 0,4 mmol) em PhCH3/EtoH (8 mL/4 mL) em um frasco para micro-ondas de 20 mL adicionou-se 1 M de Na;CO;s (0,8 mL, 0,8 mmol), seguido de Pd(PPh3)4(23 mg, 0,02 mmol, 5% em mol). A mistura resultante foi purgada com argônio, e depois colocada em micro-ondas por duas horas, a 125ºC. Após arrefecimento até a temperatura ambiente, a mistura foi diluída com H2O (20 mL), extraída com EtOAC (30 mL x 2) e seca sobre Na2SO,. Após a remoção dos solventes, o resíduo foi redissolvido em DMF (4 mL) e purífica- do por meio de HPLC prep para dar o composto do título como um sólido amarelo pálido (115 mg, 45%). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 6 7,90 (d, J= 8,4 : Hz, 1H), 7,53 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 7,43 (s, 1H), 7,37 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 7,28 + (d, J=7,2 Hz, 2H), 6,95 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,81 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,57 (d, J=7,6 Hz, 1H), 5,57 (s, 1H), 4,06 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,80 (t, J = 11,2 Hz, 2H) 3,56(d,J=11,2 Hz, 2H), 3,38 (t, J = 7,6 Hz, 2H), 3,27-3,12 (m, 5H), 3,09-3,05 (m, 2H),, 2,20-2,10 (m, 2H); MS ESI 521,4 [M + HJ”, calculado para [CaoH32N4Os + HJ* 521,2.
Exemplo A178. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R*, 28”) - (E)-S"-metóxi-2-(3-(4-(2- morfolinoetil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona / o " LO O TEA GC yo ' 20 A uma mistura de (1R*, 28*)-S-metóxi-2-(3-vinil-1AH-indazol-6-il)- 7 espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona bruto (100 mg, 0,2 mmol) e 4-(4- bromofenetil) morfolina (54 mg, 0,2 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado 'PraNEt (0,07 mL), seguido por Pd(OAc), (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, e depois —colocadaem micro-ondas por duas horas, a 125ºC. A mistura foi a purifica ção por HPLC prep. produziu o composto do título como um sólido branco 36 mg, 28%, sal de TFA. Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no exemplo 177. Exemplo A179. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R*, 28*) - (E)-5'-metóxi-2-(3-(4-(4- mMetilpiperazina-1-carbonil)-estiril)- 1H-indazol-6-i)-espiro — [ciclopropano-1,3"- indolin-2-ona A ó -TFA S IJ ho DE 7 f O Nº A uma mistura de (1R*, 28*)-S'-metóxi-2-(3-vinil-1H-indazol-6-il)- ' espiro [ciclopropano-1,3-indolin)-2"-ona bruto (100 mg, 0,2 mmol) e (4- . bromofenil) (4-metilpiperazin-1-il)-metanona (56,6 mg, 0,2 mmol) em DMF (2 mL) foi adicionado IPr2NEt (0,07 mL), seguido de Pd (OAc)> (2,2 mg, 0,01 mmol) e P(o-tol)3 (6,7 mg, 0,022 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio, e depois colocada em micro-ondas por duas horas, a 125ºC. LC-MS mostrou incompleto e ele foi colocado em micro-ondas por um adi- cional de 90 minutos, a 130ºC. A purificação por HPLC prep. produziu o composto do título (32 mg, 25%) como um sólido amarelo pálido. 'H RMN (400 MHz, CDsOD) 37,97 (d, J=8,4 Hz, 1H), 7,71 (d, J = 8,4 Hz, 2H), 7,55- 7,45 (m, 5H), 7,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,59 (dd, J = 8,4 Hz, 2,4 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 2,4 Hz, 1H), 3,65-3,10 (m, 12H), 2,96 (s, 3H), 2,25-2,14 (m, 2H); MS ESI 534,4 [M + HJ*, calculado para [C32H3N5O;3 + HJ* 534,3 Exemplo A180. 2,2 ,2-trifluoroacetato de (1R*,28*)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- " no)metiN)estiri)-1H-indazol-6-il)-1'-(2-metoxietil)spiro[ciclopropano-1,3'- . indolin)-2-ona Q mr
PLN OS V PA. no O composto do título (30 mg, 25%, sal de TFA) foi obtido como um óleo incolor viscoso a partir de (1R*, 28") -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-1"- (2-metoxietil)-spiro [ciclopropano-1,3'-indolin])-2'-ona (92 mg, 0,2 mmol) e (E)- N,N-dimetil-1-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) me- tanamina (86 mg, 0,3 mmol), usando o método para a preparação do Exem- ploASIB(PNCH3/EtoH=3ml/1,5mL, 2,5% em mol de Pd(PPh3)4, 120ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD3;0D) 3 7,99 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,75 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,55-7,45 (m, 5H), 7,13-7,07 (m, 2H), 7,01 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,61 (dd, J =8,0 Hz, 1H), 6,01 (d, J =7,2 Hz, 1H), 4,32 (s, 2H), 4,05 (t, J = 5,4 Hz, 2H), 3,71 (t J = 5,6 Hz, 2H), 3,41-3,35 (m, 4H), 2,89 (s, 6H), 2,28-2,18 (m, 2H); MSESI493/4[M + H]”, calculado para [C31H32N4O, + HJ 493,3. Exemplo A182 22,2-trifluoroacetato de (1R“28*)S-metóxi-2-(3-(4- (piperazin-1-iN)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona ' d (OW
FAO AOS
QE Neo O composto do título (42 mg, 35%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo a partir de (1R”, 28*)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-i1)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2--ona (86,2 mg, 0,2 mmol) e (E)-1-(4- (2-(4,4 5,5-tetrametil-1, 3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina (62,8 mg, 0,2 mmol), usando o método para a preparação do Exemplo AS1B (Ph- CH3/EtoOH = 3 mL/1,5 mL, 2,5% em mol de Pd(PPh3)4, 125ºC, 2 h). *H RMN . (400 MHz, CD;OD) 8 7,89 (d, J=8,8 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 8,8 Hz, 2H), 7,47 (s, 1H), 7,35(d,J=16,8Hz, 1H), 7,22 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,02 (d J= 8,8 ' Hz, 2H), 6,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,86 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,60 (dd, J = 8,6 Hz, J =2,2 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 3,49-3,43 (m, 4H), 3.40-3,30 (m, 5H), 3,23 (s, 3H), 2,25-2,15 (m, 2H); MS ESI 492,3 [M + HJ”, calculado para [CaoH2oN5sO,2 + HJ 492,2.
Exemplo A185. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-trans-2,6- dimetilmorfolino)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano- 1,3'-indolin)-2"-ona ! A LL .TFA No HN o GW “
O no"
H O composto do título (445 mg, 57%, sal de TFA) foi obtido como um sólidobranco amarelado pálido a partir de três bateladas idênticas de (IR, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il) -S'-metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin])-2-ona 7 (172 mg, 04 mmol) e cis-2,6-dimetil4-(4-((E)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (150 mg, 0,42 mmol) utilizando o mé- todo para a preparação do exemplo AS1B (PhCH3/EtOH = 9 mL/4,5 mL, 2,5% emmolde Pd(PPh3)4,110ºC,2h). 1H RMN (400 MHz, CD;OD) 5 7.75 (d, J =
8.4 Hz, 1H), 7,57 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,46 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,42 (s, 1H),
7.35 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,30 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 9,2 Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 6,80 ppm), 6,80 (d, J = 8,8 Hz, parcial- mente sobreposto com o pico a 6,82 ppm), 6,51 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,19 (s, 1H) 4,28(s, 2H), 3,92-3,80 (m, 2H), 3,40-3,30 (m, 2H), 3,27(t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,15 (s, 3H), 2,70 (t, J = 11,4 Hz, 2H), 2,15-2,05 (m, 2H), 1,18 (d, J = 6,0 Hz, 6H); MS ES! 535,3 [M + HJ”, calculado para [Ca3H3aN403 + HJ” 535,3. Rotação Óptica [a]ºp =-91º (c 0,31, MeOH). . Exemplo A186. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*, 28*) - (E) -2-(3-(4-trans-2,6- . 20 dimetilmorfolino) metil) estíril)-1H-indazol-6-i)-5'-metoxispiro [ciclopropano-1 ' 3-indolin)-2"-ona |; QL -TFA Vad An CS + PA. 8
H
A uma mistura de (1R“º,28”)-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2-ona (431 mg, 1 mmol), (E) -4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1 ,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzaldeido (284 mg, 1,1 mmol) em PRCH3/EtoH (8 mL/4 mL), foi adicionado Na;COs 1 M (2 mL, 2 —mmols), seguido de Ph (PPh3) 4 (29 mg, 0,025 mmol). A mistura resultante foi purgada com argônio e depois colocada em micro-ondas por duas horas, a 125ºC. Após processamento aquoso (extração com EtOAc) e a remoção dos solventes, o resíduo foi redissolvido em DCE/THF (45 mi/15 ml). Cis-2,6- dimetilmorfolina (115 mg, 1 mmol) e NaBH (OAc) 3 (254 mg, 1,2 mmol) fo- ram adicionados, seguido por ACOH (0,2 mL). A mistura resultante foi agita- da durante 3 horas à temperatura ambiente e resfriada bruscamente com NaHCO; aq. (20 mL), HO (20 mL), salmoura sat. (20 mL). A solução foi ex- - traída com EtOAC (60 mL x 2) e seca sobre Na2SO,. Após a remoção do solvente, o resíduo foi purificado por HPLC prep para dar o composto do títu- locomo um sólido amarelo pálido (132 mg, 20% em duas etapas). Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no exemplo A185.
Exemplo A187. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-(4-etilpiperazin- 1-iNestiri)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro]| Felopienaros 3"-indolin)-2-ona Dm O an -TFA N
PA QE 1 No O composto do título (414 ma, 55%, sal de TFA) foi obtido como . 20 um sólido branco (HPLC prep, seguido por trituração a partir de MeOH) a BR partir de três bateladas idênticas de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2"-ona (172 mg, 0,4 mmol) e (E)-1-etil- 4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) piperazina (im- puro, 205 mg, 0,6 mmol), usando o método para a preparação do Exemplo AS51IB (PhCH3/EtoH = 6 mL/6mL, 2,5% em molar de PA(PPh3)A4, 110ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD;OD) ô 7,96 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 84 Hz, 2H), 7,45 (s, 1H), 7,41 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,28 (d, J = 16,8 Hz, 1H),
7,03-6,98 (m, 3H), 6,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,60 (dd, J = 8,4 Hz, 2,0 Hz, 1H), 5,59 (d, J = 2,0 Hz, 1H), 3,91 (d, J = 12,8 Hz, 2H), 3,66 (d, J = 11,6 Hz, 2H), 3,35 (t, J = 8,4 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos resíduo com MeOH), 3,29 (q, J = 7,2 Hz, 2H, parcialmente sobrepostos com o pico a 3,25 ppm), 3,25 (s,3H, parcialmente sobrepondo-se os picos a 3,29 ppm e 3,20 ppm), 3,20 (t J = 11,8 Hz, 2H, parcialmente sobrepostos com o pico a 3,25 ppm), 3,08 (t, J = 12,2 Hz, 2H), 2,25-2,15 (m, 2H), 1,39 (t, J= 7,2 Hz, SH); MS ESI 520,4 [M + HJ”, calculado para [Ca2H33NsO2 + H]” 520,3. Rotação Óptica [a] = -108º (c 0,37, MeOH). Exemplo A1I88 2,2 2-triflloroacetato de 1R*,28*)-(E)-2-(3-(4-(4- etilpiperazin-1-iN)estíril)-1H-indazol-6-i)-5S"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona : ; ” ) a ma AO
TEA 1 No O composto do título (53 mg, 42%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de (1R*, 28”) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2"-ona (86,2 mg, 0,2 mmol) e (E)-1- eti4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) — piperazina (75 mg, 0,22 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo AS51B (PRCH3/EtOH = 3 mL/1.5mL, 5% em mol de PA(PPh3)4, 125ºC, 2 h). Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no exemplo A1 87. . 20 Exemplo A189 2,2,2-trifluoroacetato de 1R*,28*)-(E)-2-(3-(4-(4- . isopropylpiperazin-1-il)estíril)-1H-indazol-6-il)-5"-metoxiespiro[ciclopropano- 1,3"-indolin)-2"-ona H LO $ O O Dx RA (O) (O) PA Ni
O composto do título (85 mg, 66%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de (1R*, 28*) -2-(3-lodo-1H-indazol-6-il) -5 ' -metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2--ona (86,2 mg, 0,2 mmol) e (E)-1- isopropil-4-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenil) — pipe- razina (78,3 mg, 0,22 mmol) utilizando o método para a preparação do E- xemplo AS1B (PRCH3/EtoH = 3 mU/1,5mL, 5% em mol de PdA(PPh3)A, 125ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD;0D) 5 7,99 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 7,57 (d, J =8,0 Hz, 2H), 7,46 (s, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,44 ppm), 7,44 (d, J = 16,4 Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,46 ppm), 7,31(d,J=16,4 Hz, 1H), 7,08-7,00 (m, 3H), 6,84 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,61 (d, J=8,0 Hz, 1H), 5,59 (s, 1H), 3,96 (d, J = 13,6 Hz, 2H), 3,65-3,55 (m, 3H), 3,40-3,30 (m, 6H), 3,08 (t, J = 9,0 Hz, 2H), 2,26-2,15 (m, 2H), 1,43 (d, J= 5,6 - Hz, 6H); MS ES! 534,4 [M + HJ", calculado para [C33H3sNsO,2 + HJ* 534,3. Exemplo —A190. 2,2,2-triluoroacetato —de 1R*,28*)-23-((E5)-2-(2- etilisoindolin-5-il)vinil)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2-ona es - TFA mA CFO
FEO
N O composto do título (54 mg, 46%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo pálido a partir de semisólido (1R*, 28") -2-(3-lodo-1H- indazol-6-il)-5"-metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (86,2 mg, 0,2 mmol) e (E) 2-metil-5-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- . isoindolina em bruto (73,0 mg, 0,24 mmol) utilizando o método para a prepa- x ração do Exemplo A51B (PhCH3/EtoH = 3 mL/1,5ml, 5% em mol de Pd (PPh3) 4, 125ºC, 2 h). 1H RMN (400 MHz, CD;OD) 8 7,93 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,61 (s, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,60 ppm), 7,60 (d, J =8,0Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,61 ppm), 7,48-7,37 (m, 4H), 6,90 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,83 (d, J= 8,4 Hz, 1H), 6,59 (dd, J = 8,4 Hz, 1,6 Hz, 1H), 5,58 (d, J = 1,2 Hz, 1H), 4,954,80 (m, 2H), 4,60-4,54 (m,
2H), 3,50 (q, J = 7,2 Hz, 2H), 3,31 (t, 1H, sobrepondo com resíduo de Me- OH), 3,24 (s, 3H), 2,23-2,13 (m, 2H), 1,44 (t, J = 7,2 Hz, 1H); MS ESI 477,3 [IM + HJ”, calculado para [CagH2ogN4O2 + HJ" 477,2. Exemplo A194. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-5'-metóxi-2-(3-(4-(2- — morfolinoetoxi) estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona ó nN AX -TFA ATL
PÁ OQ no O composto do título (431 mg, 66%, sal de TFA) foi obtido como B um sólido branco a partir de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6B-il)-5"- - metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (431 mg, 1 mmol) e ((E)-4-(2- (4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-fenóxi)-etil)-morfolina (359mg,1mmol), utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1B (PhCH3/EtOH = 4,5 mL/9mL, 2% em mol de Pd (PPh3 7,72 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,40-7,34 (m, 3H), 7,22 (d, J = 16,4 Hz, 5) 4, 125ºC, 2h). 7H RMN (400 MHz, CD30D) 1H), 7,10 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,89 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,80 (d, J = 10,0 Hz, 1H, parcialmente sobrepostos com o pico a 6,78 ppm), 6,78 (d,J=9,2Hz,1H, parcialmente sobrepostos com o pico a 6,80 ppm), 6,49 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,55 (s, 1H), 4,31 (s, 2H), 4,05-3,97 (m, 4H), 3,62-3,50 (m, 4H), 3,30-3,15 (m, 3H, t, J = 8,2 Hz, 1H sobreposição com m, 2H), 3,12 (s, 3H), 2,10-2,00 (m, 2H); ES! MS 537,4 [M + HJ”, calculado para [C32H32N40, + HJ* 537,2. Rotação Óptica [a]"ºp = -85º (c 0.24, MeOH). Í Exemplo A195. 2,2,2-trifuoroacetato de (1R,28S)-(E)-S-metil-2-(3-(4- - (morfolinometil)estiril)-1 H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona O * TFA > HN = e
PD Ã
H O composto do título (470 mg, 78%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo a partir de (IR, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5"- metilespiro [ciclopropano-1, 3'-indolin]-2"-ona (415 mg, 1 mmol) e (E) 4-(4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (329 mg, 1 mmol), utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1B (Ph- CH3/EtoH =4,5ml/9mL, 2% em mol de Pd(PPh3)4, 110ºC, 2 h). 7H RMN (400 MHz, CD;O0D) 8 7,73 (d, J = 84 Hz, 1H), 7,53 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,44 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,32 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,27 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,77 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,73 (d J= 8,0 Hz, 1H), 5,78 (s, 1H), 4.29 (s, 2H), 3,99 (d, J = 11,2 Hz, 2H), 3,75 (t J = 11,6 Hz, 2H),3,42-3,32 (m, 2H), 3,21 (t, J = 8,4 Hz, 1H), 3,18-3,08 (m, 2H), 2,09- 2,01 (m, 2H), 1,72 (s, 3H; MS ESI 491,3 [M + HJ”, calculado para ] [CsiH3oNO2 + HJ' 491,2. . Rotação Óptica 89º [a]n = -89º (c 0,28, MeOH). Exemplo A196. 2,2 2-trifluoroacetato de (1Rº,28*)-(E)-S-metil-2-(3-(4- (morfolinometil)estiril)-1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2--ona O. oO O A -TFA
QAS Hi O composto do título (27 mg, 22%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo a partir de (1R“, 28”)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-1)-5"- metilespiro [ciclopropano-1,3'-indolin]-2'-ona (83 mg, 0,2 mmol) e (E)-4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1, 3,2-dioxaborolan-2-iI)-vinil)-benzil)-morfolina (66 mg, 0,2 : 20 mmol), usando o método para a preparação do Exemplo AS1B. Os dados ” espectrais foram idênticos aos obtidos no exemplo A195.
Exemplo A198. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-cis-2,6- dimetilmorfolino)Metil)estíril)-1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano-1,3"-indolin]- 2'-o0na Om TÉO = o O composto do título (284 mg, 57%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de duas bateladas de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H- indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin])-2-ona (160 mg, 0,4 mmol) e : cis-2,6-dimetil-4-(4-((E)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)- benzil)-morfolina (157 mg, 0,42 mmol) utilizando o método para a prepara- ' ção do Exemplo AS1B (PhCH3/EtoH = 9 mL/4.5ml, 2,5% em mol de Pa(PPh3)4,110ºC,2,5h). 1H RMN (400 MHz, CD;OD) 8 7,74 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,58 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,47 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,40-7,28 (m, 3H), 6,96-6,99 (m, 2H), 6,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,40 (t, J =7,4 Hz, 1H), 5,89 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,28 (s, 2H), 3,93-3,80 (m, 2H), 3,34 (d, J = 13,6 Hz, 2H, so- brepondo com resíduo de MeOH), 3,24 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 2,70 (t J= 7,4 Hz 2H) 2,08(p,J=7,6Hz, 2H), 1,18 (d, J=6,0 Hz, 6H); MS ESI 505,3 [M + HJ*, calculado para [Ca2H32N4O2 + H]J* 505,3. Rotação Óptica [a]º*p = -134º (c 0,27, MeOH) Exemplo A199. 2,22-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(3-fluoro4- (morfolinometil)estiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin-2-ona ê * TFA (> IT D+
FER " O composto do título (154 mg, 60%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de (1R, 28) -2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2'-ona (172 mg, 0,4 mmol) e (E) 4-(2-
fluoro-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (145 mg, 0,42 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1B (PRhCH3/EtoH = 6 mL/6mL, 2,5% em molar de Pd(PPh3)4, 110ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD3;OD) 8 7,78 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,52 (t, J=7,4 Hz, 1H), 7,45-7,35 (m, 4H), 7,29 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 6,87 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,80 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,54 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,56 (s, 1H), 4.40 (s, 2H), 4,10-3,90 (m, 4H), 3,50-3,20 (m, 5H), 3,18 (s, 3H), 2,18-2,08 (m, 2H); MS ES! 525,3 [M + HJ", calculado para [Ca:H29FN4O3 + HJ* 525,2. Rotação Óptica [a]"*p = 88º (c 0,27, MeOH). Exemplo AZ200. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R, 2S) - (E)-2-(3-(3-fluoro-4- morfolinometil) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"- | ona - NO Oo -TFA CS ve HN = F
EO
Y O composto do título (228 mg, 75%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclo- propano-1,3-indolinl-2-ona (200 mg, 0,5 mmol) e (E)-4(2-fluoro-4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (190 mg, 0,55 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo AS1B (Ph- CH3/EtoH = 7 mU7mL, 2% em mol de Pd(PPh3)4, 110ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD3OD) 3 7,50 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,49 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 7,40- 7,30(m,4H),7,24(d,J=16,8Hz, 1H), 6,97-6,82 (m, 3H), 6,42 (t, J=7,4 Hz, 1H), 5,90 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 4,10-3,70 (m, 4H), 3,50-3,15 (m, 5H), 2,12-2,03 (m, 2H); MS ES! 495,3 [M + HJ”, calculado para [CaoH27FN4O, + HI 495,2. Rotação Óptica [a]*p = -130º (c 0,40, MeOH).
Exemplo A201. 2,22-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-((cis-2.6- dimetilpiperídin-1-i)metil)estiril)- 1H-indazol-6-i)espiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona O -TFA O
ANN O N Poço O composto do título (91 mg, 74%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de (IR, 28) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)- espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2-ona (80,2 mg, 0,2 mmol) e cis-2,6- ' dimetil-1-(4-((E) -2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)- . piperidina (78,5 mg, 0,22 mmol) utilizando o método para a preparação do exemplo AS1B (PhCH3/EtOH = 1,5 mL/3mL, 2% em mol de Pd(PPh3)A, 110ºC, 2h). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 7,90 (d, J = BA Hz, 1H), 7,68- 7,60 (s, 1H at 7,51 ppm e d, J = 16,8 Hz, 1H em 7,50 sobreposição ppm, 1H), 7,64 (d, J = 8,8 Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 7,66 ppm), 7,55-7,38 (m, 5H), 7,00 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 6,96-6,90 (m, 2H); 6,50 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,96 (d, J = 7,2 Hz, 1H), 4,54 (s, 1,2H), 4,26 (s, 0,8H), 3,60- 3,50 (m,0,7H), 3,28 (t,J=8,0, 1H, parcialmente sobrepondo com resíduo de MeOH), 3,20-3,10 (m, 1,2 H), 2,20-2,08 (m, 2H), 1,96-1,35 (m, 12H); MS ESI 503.3 [M + HJ”, calculado para [Ca3H34N4O + HJ* 503.3. Rotação Óptica [a]ººn =-133º (c 0.22, MeOH) Exemplo —A203. 222trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4í((cis-2,6- dimetilpiperidin-1-i)metiN)estiri)-1H-indazol-6-i)-5'-metoxiespiro[ciclopropano- 1,3-indolin)-2--ona e -TFA oO ms O
IDO no O composto do título (78 ma, 60%, sal de TFA) foi obtido como um sólido branco a partir de (IR, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6B-il)-5"- metoxispiro [ciclopropano-1,3-indolin]-2-ona (86,2 mg, 0,2 mmol) e cis-2,6- dimetil-1-(4-((E)-2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)- piperidina (78,5 mg, 0,22 mmol) utilizando o método para a preparação do Exemplo ASIB (PhCH3/EtoH = 1,5 ml/3mL, 2% em mol de PA(PPh3)A, 110ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD;OD) 3 7.91 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,68- 7,63 (s, 1H at 7,66 ppm and d, J = 16,4 Hz, 1H at 7,66 sobreposição ppm; 2H), 7,53 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 7,50-7,40 (m, 4H), 6,96 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,57 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,56 (s, 1,2 H) 4,28(s,0,8H),3,60-3,50 (m, 0,7H), 3,31 (t, 1H, sobrepondo com resíduo de MeOH), 3,23-3,13 (m, 4,3H; OMe and 1,3H), 2,22-2,12 (m, 2H), 2,00-1,35 Ú (m, 12H); MS ES| 533,4 [M + HJ”, calculado para [C34H36N4O,2 + HJ” 533,3.
. Rotação Óptica [a]**n = -93º (c 0,27, MeOH) Exemplo AZ204. 2,2,2-triflloroacetato de (1R 28) - (E)-2(3-(4-(2- — morfolinoetóxi) estiril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3'-indolin)-2-ona us O TFA 6 SNL Ko” yo O composto do título (94 mg, 74%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3t-indolin]-2"-ona (80 mg, 0,2 mmol) e (E)-4-(2-(4-(2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)vinil)-fenóxi)-etil)-morfolina (72 mg, 0,2 mmol), usando o método para a preparação do Exemplo AS51B (Ph- CH3/EtoH = 1,5 mL/3mL, 2% em mol de Pd(PPh3)4, 110ºC, 2 h). '?H RMN (400 MHz, CD3;OD) 3 7,83 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,38 (s, 1H), 7,32 (d, J = 16,8 Hz, 1H), 7,19 (d, J = 164 Hz, 1H), 7,02-6,93 (m, 3H), 6,91 (d, J = 7.2 Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 6,89 ppm),6,89(d,J=8,0Hz, 1H, parcialmente sobreposto com o pico a 6,91 ppm), 6,48 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 5,93 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,36 (t J = 4,0 Hz,
2H), 4,10-3,76 (m, 4H), 3,65-3,50 (m, 4H), 3,30-3,18 (m, 3H), 2,15-2,05 (m, 2H); MS ES! 507,3 [M + HJ”, calculado para [C31H3oN4O;3 + HJ* 507.2. Rotação Óptica [a]"*p = -139º (c 0.29, MeOH). Exemplo A205. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,28)-(E)-2-(3-(4-(2-morfolinoetil estiri)-IH-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3"indolin)-2"-ona PA. no . O composto do título (89 mg, 74%, sal de TFA) foi obtido como um sólido amarelo claro, a partir de (1R, 2S) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)- espiro [ciclopropano-1,3'-indolin)-2-ona (80 mg, 0,2 mmol) e (E) 4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-il) vinil) fenetil)-morfolina (69 mg, 0,2 mmol), usando o método para a preparação do Exemplo AS1B (Ph- CH3/EtOH = 1,5 mL/3mL, 2% em mol de Pd(PPh3)4, 110ºC, 2 h). *H RMN (400 MHz, CD3;OD) 5 7,86 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,50 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 7,37 (d, J = 16,4 Hz, 2H), 7,34 (s, 1H), 7,26 (d, J=7,6 Hz, 2H), 6,97 (t, J=7,2 Hz, 1H), 6,91 (d, J=7,2 Hz, 2H), 6,49 (t, J =7,4 Hz, 1H), 5,94 (t, J= 7,6 Hz, 1H), 4,04(d,J=12,0 Hz, 2H), 3,80 (t, J= 11,8 Hz, 2H), 3,54 (d, J= 12,0 Hz, 2H), 3,36 (t, J = 8,8 Hz, 2H), 3,27 (t, J = 8,6 Hz, 1H), 3,15 (t, J = 11,0 Hz, 2H), 3,05 (t, J = 8,4 Hz, 2H), 2,16-2,06 (m, 2H); MS ES!1 491,3 [M + HJ”, calculado para [C31H3oN4O,2 + HJ* 491,2,] Rotação Óptica [a] = -141º (c 0,22, MeOH).
Exemplo A206. 2,2 ,2-trifluoroacetato de (1R, 2S) - (E)-2-(3-(4-((dietilamino) metil) estiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metóxi-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin 1-2"- ona 1 Na f -TFA O — HN p= IDA *
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1IB, usando (IR, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro : [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (700 mg, 1,62 mmol) e (E)-N-etil-N-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-etanamina (588,5 mg, 1,868 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título co- mo um sólido creme (448 mg, 46%). *H RMN (400 MHz, CD30D) à 8,02 (d, J=8A4Hz, 1H), 7,75 (d, J=8,0 Hz, 2H), 7,54-7,49 (m, 5H), 7,04 (s, J= 8,4 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 5,58 (s, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,36 (t J = 84 Hz, 1H), 3,31-3,18 (bm, 7H), 2,26-2,23 (m, 1H), 2,20- 2,17 (m, 1H), 1,37 (t, J = 7,2 Hz, 6H); MS ES! 493,4 [M + H ]º, calculado para [C31H32N40, + H]* 493,26. Rotação óptica: [afa]”p = -80º (c 0,286, Metanol). Exemplo — A2OB. 2,2,2-trifluoroacetato — de (1R*289-(E)-2-(3-(4- ((dimetilamino)metil)estiril)-1H-indazol-6-il)-S'-flurorospiro[ciclopropano-1,3'- indolin)-2"-ona /
F N SI -TFA GG HAN = IDA) à
N
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A5S1B, usando (1R*, 28*)-5'-fluoro-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin])-2'-ona (75 mg, 0,178 mmols) e (E)-N, N-dimetil-1 (4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-netanamina
(63,9 mg, 0,222 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (42 mg, 41,4%). 'H RMN (400 MHz, CD3O0D) 3 8,04 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,77 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,57 (s, 2H), 7,56-7,50 (m, 3H), 7,05 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,91-6,88 (m, 1H), 6,82-6,77 (m, 1H), 5,77 (ddjJ=88Hz, J=2,4Hz, 1H), 4,33 (s, 2H), 3,42-3,38 (m, 1H), 2,88 (s, 6H), 2,32-2,29 (m, 1H), 2,24-2,20 (m, 1H); ESI MS 453,2 [M + HJ”, calculado para [C28H,5FN4O + HJ* 453,2. Exemplo — A211. 2,2 ,2-trifluoroacetato de 1R%28-(E)-2-(3-(4- dietilamino)Meti)estiril)-1H-indazol-S-i) espiro-[ciclopropano-1,3"-indolin]-2"- ona -TFA no Pp "ot HANS . t FD nº
H A. N-etil-N-(4-etinilbenzil) etanamina Triacetoxiborohidreto de sódio (1,22 g, 5,76 mmols) foi adiciona- do a uma solução de 4-etinilbenzaldeído (0,50 g, 3,84 mmois) em 1,2- dicloroetano (18,75 mL) à temperatura ambiente. Dietilamina (0,61 mL, 5,76 —mmois)e ácido acético (0,12 mL, 1,92 mmol) foram então adicionados, sob atmosfera de N, à mistura à temperatura ambiente e a mistura de reação foi agitada durante 18 h. A reação foi interrompida com solução solução de bi- carbonato de sódio aq. (10 mL) e a mistura foi agitada durante 15 min. Diclo- rometano (18,75 mL) foi então adicionado e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída com diclorometano (10 mL), e as camadas orgânicas combinadas foram lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de sódio. O solvente foi então removido sob vácuo a 40ºC/200 mbar. O resíduo oleoso resultante foi purificado por cromatografia em coluna de sílica gel uti- lizando diclorometano: metanol (100 a 90:10) gradiente para dar o composto . 25 do título como um óleo amarelo pálido espesso (0,455 g, 63,2%). *H RMN (400 MHz, CDC) 5 7,46 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,76 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 3,78 (s, 2H), 3,08 (s, 1H), 2,72-2,66 (m, 4H), 1,13 (t J = 7,2 Hz, 6H); MS ESI 187,9 [M + H]*, calculado para [C13H17N + HJ* 187,14.
B. (E)-N-eti-N-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)- vinil)-benzil) etananamina De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo A42A, utilizando N-etil-N-(4-etinilbenzil) etanamina (0,70 g, 3,73 mmois) e 4A4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (1,62 mL, 11,21 mmolis) para dar o composto do título como um óleo laranja amarelado (1,02 g, 86%). 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,43-7,35 (m, 3H), 7,30-7,27 (m, 2H), 6,12 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,56 (s, 2H), 2,54-2,49 (m, 4H), 1,32 (s, 12H), 1,04 (tl J = 7,2 Hz, 6H); MS ESI 316,1 [M + HJ”, calculado para [C29H30BNO, + HJ* 316,24. Este intermediário pode ser preparado pelo método seguinte: De acordo com o procedimento para a síntese do Exemplo A211A, utilizando (E)-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dooxaborolan-2-il)-vinil)- benzaldeído (1,93 g, 7,48 mmols), triacetoxiboro-hidreto de sódio (2,38 g, 11,22 mmois) e dietilamina (1,16 mL, 11,22 mmols) para dar o composto do título após purificação usando Biotage sobre coluna 259 SNAP com hexano: acetato de etila (100 a 72:25) gradiente, como um óleo amarelo pálido es- pesso (1,55 g, 66%). D. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*, 28*)-2-(3-(4-((dietilamino) meti) estiri)-IH-indazol-6-il)-espiro [ciciopropano-1,3"-indolin)-2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1B, usando (1R*, 28*)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [cíclo- propano-1,3"-indolin---2-o0na (70,0 mg, 0,174 mmol) e (E)-N-etil-N-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-etanamina (68,76 mg, 0,218 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (29 mg, 29%). *H RMN (400 MHz, CD30D) 5 8,01 (d, J=84 Hz, 1H), 7,76 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 7,56-7,52 (m, 4H), 7,48 (s, 1H), 7,04 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 6,93 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 6,58 (t, J = 7,2 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 4,36 (s, 2H), 3,29-3,17 (m, SH), 2,25 (t, J = 4,8 Hz, 1H), 2,21-2,17 (m, 1H), 1,37 (t J = 7,2 Hz, 6H); MS ES! 463,3 [ M + HJ*, cal- culado para [C3OH30N40O + HJ* 463,25,
Exemplo A212. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,2S)-(E)-2-(3-(4-((dietilamino)me- tiDestiril)-1H-indazol-6-iespiro-[ciclopropano-1 Sindolniaana O -TFA ES No HN US " FE-O+
NE
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1B, usando (1R, 28)-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- panot1,3-indolin)-2-ona (600 mg, 1,50 mmol) e (E)-N-etil-N-(4-(2-(4,4,5,5- tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2 -il)-vinil)-benzil)-etanamina (589,3 mg, 1,87 7 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um . sólido creme (360 mg, 42%). Os dados espectrais foram idênticos aos obti- dos para o exemplo A211D. Rotação óptica: [a] pn = -194º (c 0,577, Metanol). Exemplo A215. (1R7,28*-(E)-2-(3-(4-((dimetilamino)metil)-3, 5-difluoroestiril)- 1H-indazol-6-il)-S"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona 2,2,2- trifluoro acetato eu -TFA 5 N HN ST — CS F IE-OL Nº
H Uma mistura de (1R*, 28*)-5'-metóxi-2-(3-vinil-1H-indazol-6-il)- espiro (ciclopropano-1, 3'-indolin)-2-0na (50,0 mg, 0,145 mmol), 1-(4-bromo- 2,6-difluorofenil)-N, N-dimetilmetanamina (41,51 mg, 0,165 mmol), Pd(OAc), (1,69 mg, 0,0075 mmol), P(Otol)3 (5,0 mg, 0,016 mmol) e DIPEA (39,0 mg, 0,30 mmol) em DMF (1,0 mL) foi selada e aquecida com agitação sob irradi- ação de micro-ondas a 125ºC durante duas horas. A reação foi então diluída com acetato de etila (20 mL) e água (5 mL) e as camadas foram separadas. A camada aquosa foi extraída usando acetato de etila (10 mL), e a camada de acetato de etila combinada foi lavada com salmoura (4,0 mL) e foi seca sobre sulfato de sódio e depois concentrada sob vácuo a 40ºC/100 mbar para se obter um resíduo amarelado. O produto bruto foi purificado por meio de HPLC prep. para dar o composto do título como um sólido amarelo pálido (9,5 mg, 10%). *H RMN (400 MHz, CD30D) 5 7,80 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 7,47 (s, 1H), 7,48 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,30-7,25 (m, 3H), 6,87 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,79(d,J=8,4Hz,1H),6,53(d,J=8,8Hz, 1H), 5,56 (s, 1H), 4,43 (s, 2H), 3,28 (t, J = 10,0 Hz, 1H), 3,19 (s, 3H), 2,96 (s, 6H), 2,18-21,2 (m, 2H), MS ESI 501,3 [M + HJ”, calculado para [C29H2sF2N40, + H ]*º 501,21. Exemplo A216. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R2S)-(E)-2-(3-(4-((dimetilami- no)metil)-3,5-difluoroestiril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano- 1,3-indolin)l2"-ona | o F : em Ar -TFA ÍTDO = O F
Ã
H Este intermediário foi preparado por meio de dois diferentes mé- todos de síntese. Método 1. a.1-(4-bromo-2,6-difluorofenil)-N, N-dimetilmetanamina De acordo com o procedimento para a síntese do Exemplo A211A, usando 4-bromo-2 6-difluorobenzaldeído (500 mg, 2,26 mmois), tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (959 mg, 4,52 mmols) e uma solução de dimeti- lamina 2 M (2,626 mL, 4,52 mmolis) para dar o composto do título como um óleo incolor (452 mg, 79%). *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,09 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,54 (s, 2H), 2,26 (s, 6H); MS ESI 249,9 [M + HI”, calculado para [CsH10BrF2N + HJ* 249,0. b.1-(4-etilnil-2, 6-difluorofenil)-N, N-dimetilmetanamina Uma mistura de 1-(4-bromo-2,6-difluorofenil)-N,N- dimetilmetanamina (0,45 g, 1,79 mmol), trimetilsililacetileno (0,356 mL, 2,24 mmolis), Pd(PPh3),Cl, (50,49 mg, 0,071 mmol), Cul (3,42 mg, 0,017 mmol) e
DIPEA (0,46 mL, 2,69 mmois) em DMF (3,0 mL) foi selada sob atmosfera de argônio e aquecida com agitação e sob irradiação de micro-ondas a 100ºC durante duas horas.
A reação foi diluída com metanol (9 mL) e o precipitado s resultante foi separado por filtração.
O licor mãe foi concentrado sob vácuo a 45ºC/75mbar para se obter um óleo, castanho espesso.
O resíduo foi purificado em coluna Biotage utilzando SNAP 25 g com hexano: acetato de etila (100 a 80:20) gradiente para se obter um óleo amarelo como um éter de trimetilsilila (0,250 9, 52%) ESI| MS 268,0 [M + H] +, calculado para [CiaHioF2NSi + H] + 268,13. A desproteção do éter de trimetilsilla acima, foi realizada em metanol (10 mL) e solução de K2CO; a 10% (1,67 mL) à temperatura ambi- | ente durante 1,5 h.
Os solventes foram removidos em vácuo abaixo de 40ºC - e, em seguida, água (5 mL) foi adicionado à temperatura ambiente.
O produ- to foi extraído com diclorometano (2 x 15 mL) e as camadas orgânicas com- binadas foram lavadas com salmoura e secas sobre sulfato de sódio.
O sol- vente foi removido sob vácuo a 40ºC/200 mbar para se obter um óleo acas- tanhado, que foi purificado em coluna Biotage utilizando SNAP 25g com he- xano: acetato de etila (100 a 75:75) gradiente se obter um óleo amarelo (98 mg, 54%). *H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,04 (d, J = 6,8 Hz, 2H), 3,68 (s, 2H) 3.17 (s, 1H), 2,35 (s, 6H); MS ESI 195,8 [M + HJ”, calculado para [CuHyF2N + HJ* 195,09, Cc. (E) -1-(2,6-difluoro-4-(2-(4,4,5, 5-tetrametil-1,3, 2-dioxaorolan-2- il)-vinil)-fenil)-N, N-dimetilmetanamina De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo —A42A, utilizando 1-(4-etilnil-2,6-difluorofenil)-N, N-dimetilmetanamina (97 mg, 0,496 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,21 mL, 1,488 mmol) para dar o composto do título após purificação sobre Biotage utilizando colu- na SNAP KPNH 25 gm com hexano: acetato de etila (100 a 50:50) gradiente como um semi sólido castanho (67 mg, 41%). *H RMN (400 MHz, CDC) 5 7,24(d,J=18,4Hz,1H),6,99(d,J=7,6Hz,2H),6,13(d,J=184 Hz, 1H), 3,57 (s, 2H), 2,28 (s, 6H), 1,32 (s, 12H), MS ESI 324,2 [M + HJ, calculado para [C,;H4BrF2NO, + HJ* 323,19,
Método 2 a (E) 2,6-difluoro4-benzaldeido (2(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2- dioxaborolan-2-il) vinil) De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo ASIA, usando 4-bromo-2,6-difluorobenzaldeído (1,10 g, 4,98 mmois) e 4,4,5,5-tetrametil-2-vinil-1, 3, 2-dioxaborolano (0,97 mL, 5,72 mmolis) para dar o composto do título como um óleo incolor (1,10 g, 76%). 1H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 10,31 (s, 1H), 7,05 (d, J = 9,6 Hz, 2H), 7,22 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 6,28 (d, J = 18,8 Hz, 1H), 1,33 (s, 12H), MS ESI 295,1 [M + HJ”, calcu- ladopara[C15H17BF20O; + HJ* 295,13. b. (E)-1-(2,6-difluoro-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaorolan-2- il) vinil)phenil)-N, N-dimetilmetanamina . De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo A211A, usar (E) -2,6-difluoro-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-1)- vinil)-benzaldeído (1,10 g, 3,74 mmolis), triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,19 9, 5,61 mmois) e uma solução de dimetilamina 2 M (3,74 mL, 7,48 mmolis) para dar o composto do título como um óleo incolor espesso (0,571 g, 47%). 1H RMN (400 MHz, CDC) 5 7,24 (d, J = 184 Hz, 1H), 6,99 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,13 (d, J = 18,4 Hz, 1H), 3,57 (s, 2H), 2,28 (s, 6H), 1,32 (s, 12H), MS ESI324,2[M+ HJ], calculado para [C1i7H>4BrF2NO, + HJ* 323,19.
B. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,28)-2-(3-(4-((dimetilamino)metil)- 3,5-difluoroestiril)-1H-indazol-6-il)-5-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"-indolinJ- 2-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1IB, usando (1R, 28)-2-(3-ilodo-1H-indazol-6-il)-S'-metoxispioro [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (500 mg, 1,15 mmol) e (393.4mg, 1,21 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (400 mg, 56,1%). Os dados espectrais foram idênticos aos ob- tidos no exemplo A215.
Rotação óptica: [a]? pn = -88º (c 0,354, Metanol).
Exemplo A217. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*2S%-(E)-2-(3-(3,5-difluoro4- (morfolinometiDestiril-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"ona ; AO 4 ea " O -TFA ES >
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H A. 1-(4-bromo-2, 6-difluorofenil)-morfolina De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo A211A usando 4-bromo-2,6-difluorobenzaldeído (1,0 g, 4,52 mmois), triace- : toxiborohidreto de sódio (1,438 g, 6,78 mmols) e morfolina (0,59 mL, 6,78 . mmols) para dar o composto do título como um óleo amarelo pálido (1,30 g, 98,4%). *H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 7,09 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,69 (d J = 4,4 Hz, 4H), 3,63 (s, 2H), 2,49 (bm, 4H); ESI MS 292,1 [M + HJ”, calculado para [C11H,2BrF2NO + HJ* 293,0. B 0,1-(4-etilnil-2, 6-difluorofenil) morfolina De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo 1b método A216A, utilizando 1-(4-bromo-2 6-difluorofenil)-morfolina (1,32 g, 451 mmois) para dar o composto do título como um óleo castanho claro (0,65 g, 60%). *H RMN (400 MHz, CDCIs) 5 7,02 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,71- 3,67 (m, 6H), 3,16 (s, 1H), 2,50 (bm, 4H), MS ES! 238,0 [M + HJ”, calculado para [C13H13F2NO + H]* 238,10. C. (E) -4-(2,6-difluoro-4-(2-(4,4,5, 5-tetrametil-1,3, 2-dioxaborolan- 2-i)-vinil)-benzil)-morfolina De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo AA42A, utilizando 1-(4-etilnil-2,6-difluoro-fenil)-morfolina (0,97 g, 4,08 mmolis) e 4,4,5,5-tetrametil-1, 3,2-dioxa borolano (1,78 mL, 12,24 mmols) para dar o composto do título como um sólido creme (1,21 g, 81%) 1H RMN (400 MHz, CDCl)57.23(d,J=18.4 Hz, 1H), 6.99 (d, J = 7.6 Hz, 2H), 6.13 (d J = 184 Hz, 1H), 3.59-3.66 (m, 6H), 2.51 (bm, 4H), 1.32 (s, 12H); MS ES! 366.1 [M + HJ”, calculado para [CisH>xsBF.NO; + HJ* 366.2.
D. 2,2,2-triluoroacetato de (1R*28*)-2-(3-(3,5-difluoro-4 (morfolinometil)estiril-1H-indazol-6-il)-5"-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A5S1IB, usando (1R*, 28”) -2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-5'-metoxispiro [ciclopropano- 1,3"-indolin)-2-ona (60 mg, 0,139 mmol) e (E)-4-(2,6-difluoro- 4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (58,44 mg, 0,16 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (29 mg, 27%). *'H RMN (400 MHz, CD30D) 5 8,03 (d, J=8,8Hz,1H),7,63 (d, J=16,8 Hz, 1H), 7,52-7,49 (m, 4H), 7,06 (s, J= 8,4 Hz, 1H), 6,82 (d, J = 8,4 Hz, 1H), 6,60 (d, J = 8,8 Hz, 1H), 5,57 (s, 1H), 4,51 ] (s, 2H), 4,10-3,72 (bm, 4H), 3,47-3,42 (bm, 5H), 3,26 (s, 3H), 2,26-2,23 (m, “ 1H), 2,21-2,17 (m, 1H); ES! MS 5433 [M + HJ”, calculado para [C31H;8F2N40O; + HJ" 543,22. Exemplo A218. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R,28S)-(E)-2-(3-(3,5-difluoro-4- morfolinometil)estíril)-1H-indazol-6-il)-5'-metoxiespiro[ciclopropano-1,3"- indolin)-2"-ona é R im Ly -TFA CS to mN > F TD) “
NA
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, substituindo (1R,28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-S'-metoxispiro [ciclopropano-1,3'-indolin])-2"-ona (600 mg, 1,50 mmol) e (E)-4-(2,6-difluoro-4- (2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2-il)-vinil)-benzil)-morfolina — (579,6 mg, 1,06 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (345 mg, 40%). Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos no exemplo A217. Rotação óptica: [a[a]ºn = -74º (c 0,34, metanol).
Exemplo A219. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R*, 28*)-(E)-5'-fluoro-2-(3-(4- (morfolinometil) estiril-1H-indazol-6-il)-espiro - [ciclopropano-1,3"-indolin]-2"- ona 2,2, 2-trifluoroacetato
QD TO = e
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo AS1IB, usando (1R*, 28*)-S'-fluoro-2-(3-lodo-1H-indazol-6-il)-espiro - [ciclopropano-1,3"-indolin)-2"-ona (60,0 mg, 0,139 mmol) e (E) 4-(4-(2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan -2-il)-vinil)-benzil)-morfolina (54,83 mg, i 0,173 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (31,0 mg, 37%). *H RMN (400 MHz, CD3O0D) 5 8,04 (djJ=8,8Hz,1H),7,77(d,J=7,2 Hz, 2H), 7,59-7,52 (m, 5H), 7,05 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,91-6,88 (m, 1H), 6,79 (t, J = 8,0 Hz, 1H), 5,74 (d, J= 8,8 Hz, 1H), 4,39 (s, 2H), 4,08-4,05 (bm, 2H), 3,76-3,70 (bt, 2H),3.42-3 0,35 (m, 3H), 3,26-3,23 (bm, 2H), 2,30 (t, J = 5,6 Hz, 1H), 2,24-2,20 (m, 1H); ESI| MS 495,3 [IM + HJ*, calculado para [C30H;7FN40, + HJ" 495,22.
Exemplo A220. 2,2 2-trifluoroacetato de (1R, 28) - (E)-5-fluoro-2-(3-(4- (morfolinometil) estiril-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin) -2' - ona
F Roo O ÍDAO o e
H O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, usando (1R, 2S)-5-fluoro-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1, 3-indolin)-2-ona (240 mg, 0,571 mmol) e (E) 4-(4- (2- (4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan-2 -il)-vinil)-benzil)-morfolina (216,7 mg,
0,658 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (230 mg, 66%). Os dados espectrais foram idênticos aos obtidos para o exemplo A219. Rotação óptica: [alfa] n = -136º (c 0,404, Metano!). Exemplo A221. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R,28)-(EÉ)-2-(3-(4- dietilamino)metil)-3,5-difluoroestiril)-1H-indazol-6-il)espiro[ciclopropano- 1,3'-indolin)-2"-ona “ O -TFA 5 nO
INS Rot 7 - o A.N-(4-bromo-2, 6-difluorobenzil-) N-etiletanamina : De acordo com o procedimento para a síntese do Exemplo A2Z11A, usando 4-bromo-2,6-difluorobenzaldeído (610 mg, 2,76mmois), tria- cetoxiboro-hidreto de sódio (883,35 mg, 4,15 mmolis) e dietilamina (425,21 MML, 4,15 mmolis) para dar o composto do título como um óleo incolor (660 mg, 86%). *H RMN (400 MHz, CDC) 5 7,06 (d, J = 6,4 Hz, 2H), 3,61 (s, 2H), 2,55-2,50 (m, 4H), 1,07 (t, J = 6,8 Hz, 6H); MS ES 279,9 [M + HJ", cal- —culado para [C11H14BrF2N + HJ* 278,03. B. N-etil-N-(4-etinil-2, 6-dif luorobenzil)-etanamina De acordo com o procedimento para a síntese do Exemplo A216A método 1b, usando N-(4-bromo-2,6-dif luorobenzil)-N-etiletanamina (660 mg, 2,37 mmols) para dar o composto do título como um castanho claro óleo (252 mg, 48%). 'H RMN (400 MHz, CDCI3) 5 6,99 (d, J = 7,2 Hz, 2H), 3,67 (s, 2H), 3,13 (s, 1H), 2,57-2,51 (m, 4H), 1,08 (t, J = 7,2 Hz, 68H); MS ES| 224,0 [M + HJ", calculado para [C13H15F2N + H]* 224,12 C:(E)-N-(2,6-Difluoro-(4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 2-i)vinil)benzil) N-etiletanamina De acordo com o procedimento para a síntese do exemplo A42A, utilizando N-etil-N-(4-etinil-2, 6-dif luorobenzil)-etanamina (252 mg, 1,12 mmol) e 4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolano (0,493 mL, 3,36 mmolis) para dar o composto do título como um creme semi sólido (410 mg, 90%) *H
RMN (400 MHz, CDCI3) 5 7,24 (d, J = 13,2 Hz, 1H), 6,97 (d, J = 7,6 Hz, 2H), 6,12 (d, J = 17,6 Hz, 1H), 3,67 (s, 2H), 2,58-2,52 (m, 4H), 1,32 (s, 12H), 1,08 (t, J = 6,8 Hz, 6H); MS ES! 352,2 [M + HJ”, calculado para [Ca;H26NsO>2 + HJ" 351,22. Este intermediário pode ser preparado pelo método seguinte: De acordo com o procedimento para a síntese do Exemplo A211A, utilizando (E) -2,6-difluoro-4-(2-(4,4,5,5-tetrametil-1,3,2-dioxaborolan- 7 2 -il)-vinil)-benzaldeído (1,10 g, 3,74 mmois), triacetoxiboro-hidreto de sódio (1,19 g, 5,81 mmois) e dietilamina (0,58 mL, 5,61 mmolis) para dar o com- posto do título como um sólido de cor creme (0,54 g, 41%). C. 2,2,2-trifluoroacetato de (1R, 28)-2-(3-(4-((dietilamino) metil) - 3, 5-difluoroestíril)-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopropano-1,3"-indolin]-2-ona - O composto do título foi sintetizado de acordo com o método do Exemplo A51B, usando (1R, 28)-2-(3-iodo-1H-indazol-6-il)-espiro [ciclopro- pano1,3-indolink-2--ona (125 mg, 0,311 mmol) e (131,4 mg, 0,373 mmol). Purificação por HPLC preparativa deu o composto do título como um sólido creme (54 mg, 28,4%). 7H RMN (400 MHz, CD3OD) 5 7,98 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 7,59 (d, J = 16,4 Hz, 1H), 7,55-7,45 (m, 4H), 7,04 (d, J = 8,0 Hz, 2H), 6,92 (d, J = 8,0 Hz, 1H), 6,55 (t, J = 7,6 Hz, 1H), 5,98 (d, J = 7,6 Hz, 1H), 446(s,2H),3,35-3,28 (m, 5H), 2,24-2,21 (m, 1H), 2,19-2,15 (m, 1H), 1,42 (t, J=6,8 Hz, 6H); MS ES! 499,4 [M + HJ", calculado para [C30H38F2NO, + HTº 499,23. Rotação óptica: [ala] ?p = -126º (c 0,46, metano!). Exemplo B: Ensaio de Inibição de PLK4 PLKA ativa foi purificada a partir de um sistema de expressão em E. coli como uma fusão de GST amino terminal de resíduos 1-391 de PLK4 humano.
A proteina foi purificada a partir de extratos celulares clarificados após indução a 15ºC durante a noite utilizando glutationa sepharose, croma- tograffa de permeação em gel, permuta iônica e (Resource OQ). A proteina resultante foi desfosforilado com fosfatase lambda (NEB cat f PO0753) e resolvida a partir da fosfatase utilizando glutiona sepharose.
A GST PLKA desfosforilado foi armazenada em alíquotas a -80ºC até seu uso.
Atividade de PLKA4 foi medida utilizando um sistema de detecção ELISA indireta.
GST-PLKA4 desfosforilado (4 nM) foi incubado na presença de 15 uM de ATP (Sigma cat % A7699), 50 mM de HEPES-Na?* pH 7,4, 10 mM de MgClb, 0,01% de Brij 35 (Sigma cat % 03-3170), em uma placa de — microfitulação de 96 poços pré-revestidas com MBP (Millipore cat % 30-011). A reação foi deixada prosseguir durante 30 minutos, seguida de 5 lavagens da placa com tampão de lavagem (50 MM de TRIS pH-CI 7,4 e 0,2% de Tween 20), e incubação durante 30 minutos com uma diluição de 1:3000 de anticorpo primário (sinalização celular cat % 9381). A placa foi lavada 5 vezes com tampão de lavagem, incubada durante 30 minutos na presença de anti- corpo secundário acoplado a peroxidase de rábano silvestre (BioRad cat ' 1721019, 1:3000 concentração), lavada mais 5 vezes com tampão de lava- . gem e incubada na presença de substrato TMB (Sigma cat ft TO440). A rea- ção colorimétrica foi deixada continuar durante 5 minutos, seguido pela adi- çãode solução parada (0,5 N de ácido sulfúrico), e quantificada por detec- ção a 450 nm com um leitor de placas de um filtro com base em ou mono-
cromática (Molecular Devices M5 ou Beckman DTX880, respectivamente). Inibição do composto foi determinada em cada concentração fixa (10 UM) ou em uma concentração variável de inibidor (tipicamente de 50 uM a014Mem uma titulação de 10 pontos de dose-resposta). Os compostos foram pré-incubados na presença de enzima durante 15 minutos antes da adição de ATP e a atividade remanescente quantificada utilizando o ensaio de atividade acima descrito.
A % de inibição de um composto foi determina- da usando a seguinte fórmula: % de inibição = 100 x (1-(valor experimental - —valorde fundo)/(controle de atividade elevada - valor de fundo)). O valor de 1IC59 foi determinado usando um ajuste de curva logística de 4 pontos (XLfita, IDBS) com a fórmula, (A + (B/(1 + (C/C) * D)))), onde A = valor de fundo, B = faixa, C = ponto de inflexão, D = parâmetro de ajuste de curva.
Exemplos C-E omitidos: Exemplo E: Ensaio de Inibição de Aurora À Inibição de Aurora A foi determinada usando o kit de ensaio Z- Lyte de Invitrogen.
O ensaio foi realizado utilizando as instruções do fabri- canterecomendadas com 20 uM de ATP e 12 nM de Aurora A (Invitrogen cat é PV3612). Os valores de inibição em % foram determinados de acordo com as instruções do fabricante e os valores de ICs59 foram obtidos por meio de um ajuste de curva logística de 4 pontos não linear (XLfit4, IDBS) Exemplo G: Ensaio de Inibição de Aurora B Inibição de Aurora B foi determinada usando o kit de ensaio Z- Lyte da Invitrogen.
O ensaio foi realizado utilizando as instruções do fabri- ' cante recomendadas com 128 uM de ATP e 28 uM de Aurora B (Invitrogen . cat f PV3970). Os valores de inibição em % foram determinados de acordo com as instruções do fabricante e os valores de ICs9 foram obtidos por meio deum ajuste de curva logística de 4 pontos não linear (XLfit4, IDBS) Na tabela 1, os valores de ICs9 para PLKA4, Aurora A e Aurora B quinases são indicados como "A", "B" e "C”, para aqueles que menos do que ou igual a 0,1 uM; aqueles maiores que 0,1 UM e menores que ou iguais a 1 UM; e aqueles maiores que 1 uM respectivamente.
As percentagens de inibi- ção relativas ade uma dose de 1 uM são indicadas como "X" e "Y" para a- queles iguais ou maiores do que 50% de inibição e aqueles inferiores a 50% de inibição, respectivamente.
Como mostrado na tabela 1, os vários compos- tos da invenção são inibidores de PLKA4 eficazes.
Com relação a PLKI1, PLK2 e PLK3, Exemplos A22 e A23 não mostraram mais do que 50% de inibição a 10 UM.
Além disso, um certo número de compostos da invenção também inibi Aurora quinases, em particular Aurora B quinase.
Tabela 1: Dados de Inibição de PLKA4, Aurora A e Aurora B quinases Composto ft Faixas ICS0 PLK4 Aurora À Aurora B
Exemplo A1 c — -—- Exemplo A2 Cc Y Cc Exemplo A3 Cc - .-—- Exemplo A4 B = -—- Exemplo A5 Cc -— -—- Exemplo A6 A Y B Exemplo A7 A Y B Exemplo A8 c -— - Exemplo A9 B Y B Exemplo A10 B Y B Exemplo A11 Cc Y Cc Exemplo A23 A A A Exemplo A24 A x A Exemplo A25 B x B Exemplo A26 A x A Exemplo A34 A x A Exemplo A35 A B A Exemplo A36 A XxX A Exemplo A40 B Y B Exemplo A41 A x A Exemplo A42 A x A Exemplo A51 A A A Exemplo A54 A : x B Exemplo A55 A x A Exemplo AS6 A A A Exemplo A57 A x B Exemplo A58 A x A Exemplo A59 A x A Exemplo A60 A x B
Composto É Faixas IC50 PLK4 Aurora À Aurora B
Exemplo A61 A x A Exemplo A64 A x A Exemplo A65 A x A Exemplo A66 A x A Exemplo A70 A Y A Exemplo A71 A Y A Exemplo A72 A x A Exemplo A73 A x A Exemplo A74 A x A Exemplo A75 A x A . Exemplo A76 A Y A Exemplo A78 A x A Exemplo A79 A x A Exemplo A80 A x B Exemplo A81 A x A Exemplo A82 A x A Exemplo A83 A x A Exemplo A84 A x B Exemplo A87 A x A Exemplo AB9 A x A Exemplo AS90 A x A Exemplo A91 A x A Exemplo A92 A x A Exemplo A94 A XxX A Exemplo A95 A x A Exemplo A102 A x A Exemplo A106 A x A Exemplo A109 A x A Exemplo A112 A x A Exemplo A113 A x =
Composto À Faixas IC50 PLK4 Aurora À Aurora B Exemplo A115 A Y - Exemplo A116 A x A Exemplo A131 A XxX A Exemplo A132 A B A Exemplo A133 A x A Exemplo A134 A B A Exemplo A135 A XxX A Exemplo A146 A Y A Exemplo A147 A x B l Exemplo AI51 A A A . Exemplo A152 A x B Exemplo A160 A x A Exemplo A162 A x A Exemplo A164 A x A Exemplo A165 A x A Exemplo A167 A XxX A Exemplo A169 A x A Exemplo A174 A x A Exemplo A175 A Y A Exemplo A177 A x A Exemplo A178 A A A Exemplo A179 A A A Exemplo A180 A A A Exemplo A182 A x A Exemplo A185 A x A Exemplo A186 A x A Exemplo A187 A x A Exemplo A188 A x A Exemplo A189 A x A Exemplo A190 A x A
Composto tt Faixas IC50 PLK4 Aurora À Aurora B Exemplo A194 A x A Exemplo A195 A x -—- Exemplo A196 A x A Exemplo A198 A x A Exemplo A199 A x A Exemplo A200 A x A Exemplo A201 A x A Exemplo A203 A x A Exemplo A204 A x A Exemplo A205= A x A : Exemplo A206 A x A Exemplo A208 A x A Exemplo A211 A x A Exemplo A212 A x A Exemplo A215 A A A Exemplo A216 A x A Exemplo A217 A x A Exemplo A218 A x A Exemplo A219 A x A Exemplo A220 A x A Exemplo A221 A x A Exemplo H: Ensaio de Inibição de FLT3 A atividade enzimática de FLT3 foi determinada utilizando o Kit de ensaio Z-Lyte da Invitrogen (Invitrogen cat % PV3191). O ensaio foi reali- zado utilizando as instruções do fabricante recomendadas com 117,5 uM de ATPe1nM de FLT3 (Invitrogen cat & PV3182). Os valores de inibição em % foram determinados de acordo com as instruções do fabricante e os valores de ICso foram obtidos por meio de um ajuste de curva logística de 4 pontos - não lineares (XLfit4, IDBS). Na tabela 2, os valores de ICs,5 para a inibição FLT3 são indicados como "A", "B" e "C", para aqueles menores ou iguais a
0,1 UM; aqueles maiores do que 0,1 yuM e aqueles menores ou iguais a 1 UM; e aqueles maiores do que 1 uM, respectivamente, para os compostos selecionados da presente invenção.
Tabela 2. Dados de Inibição de FIt3 [Exemplo 2a a => fexempoaist je = [exemplo Art e = [exempoatss |B == : [exemplo ati2 de = |exemploazi7 Exemplol: Ensaios de Seletividade Quinase " A atividade inibidora dos compostos selecionados da invenção foi avaliada contra um painel de 45 diferentes enzimas quinases por CEREP, França.
Os ensaios foram realizados utilizando métodos de ensaio HTRF padrão conforme documentado por CEREP contra os ortólogos humanos de Ablquinase, Akt1/PKBa, AMPKa, BMX quinase (Etk), Brk, CaMK2a, CaMKA4, CDC2/CDK1 (cycB), CHK1, CHK2, c-Met quinase, CSK, quinase EphB4, ERK1, ERK2 (P42mapk), FGFR2 quinase, quinase FGFRÍ, FLT-1-quinase (VEGFR'), FLT-3 quinase, Fyn quinase, IGF1R quinase, IRK (InsR), JNK 2, quinase KDR (VEGFR2), quinase Lck, Lyn quinase, MAPKAPK2, MEKI/MAP2K1, p38a quinase, p38d quinase, p38g quinase, pdgfrb quinase, PDK1, PKA, PKCa, PKCb1, PKCb2, PKCg, quinase Ret, rock2, RSK2, Src quinase, Syk, e TRKA (tabela 3). A % de inibição foi determinada pela fórmu- la; % de inibição = 100 x (1-(valor experimental - valor de fundo)/(controle de atividade elevada - valor de fundo)).
Tabela 3: Valores de Inibição em Porcentagem Percentagem para os Exemplos A2 e A26 a 10 uM de Concentração.
Kinase Exemplo A2 Exemplo A26 % Inibição Q 10uUM %lInibição (QD 10 uM AbI 3 100 AKkt1/PKBalpha 2 4 AMPKalpha 57 69 BMX (Etk) 3 39 Brk 1 53 CaMHK2alpha 41 9 CaMK4 7 4 CDC2/CDK1 57 60 . CcHK1 4 43 cHK2 -10 -B3 c-Met 15 61 CcsK 9 75 EphB4 n 65 ERK1 4 1 ERK (P42mapk) 9 2 FGF R4 o 12 FLT-1 (VEGF R1) 1 30 FLT-3 62 102 Fyn 7 55 IGFIR 20 o IRK (InsR) 4 5 JINK2 2 5 KDR (VEGFR2) 14 58 Lek 117 100 Lyn 26 86 MAPKAPK2 4 2 MEK1/MAP2K1 4 2 p38alpha 6 -22
Kinase Exemplo A2 Exemplo A26 % Inibição & 10uM %lnibição(& 10 uM p38Bdelta 10 5 p38gamma 4 -5 PDGFRbeta 4 59 PDK1 4 2 PKA o 7 PKCalpha -2 6 PKCbeta 1 1 2 PKCbeta 2 4 26 PKCgamma 7 10 Ret 14 86 . ROCK2 39 32 RSK2 7 22 Sre -10 51 Syk -—- -— TRKA 54 101 A tabela 3 acima mostra os valores de percentagem de inibição obtidos para os exemplos A2 e A24, a 10 uM de concentração.
A partir des- tes dados de inibição, é evidente que certas quinases, por exemplo, Abl, CSK, FLT-3, Lck, Lyn, Ret e TRKA quinase são inibidas pelos compostos da invenção.
Estas atividades podem conferir benefícios terapêuticos adicionais a estes compostos.
A atividade inibidora dos compostos selecionados da invenção foi avaliada contra um painel de 284 diferentes enzimas quinases pela Milli- pore Corporation.
À % de inibição foi determinada pela fórmula; % de inibi- ção=100 x (1-(valor experimental - valor de fundo)/(controle de atividade elevada - valor de fundo)).
Tabela 4: Valores de Inibição em Porcentagem para o Exemplo A42 a 0,1 UM de Concentração Kinase % de Inibição & 0.1 uM Abl 77 Ablim) 92 Abl (H396P) 93 AbI (M351T) s1 Abl (Q252H) 83 AbIT3151) 98 AbI(Y253F) 75 ALK 64 - Arg 89 Arg(m) 90 ARK5 86 Aurora-A 100 Aurora-B 101 Bmx 92 EphA1 61 EphB1 54 FGF R1 96 FGFR1 (V561M) 91 FGFR2 88 FGFR2(N549H) 87 FGFR3 90 FIs 54 GCK 80 IRAK1 52 Itk 82 Lek 77 Lek activated go MuSK 90
Kinase % de Inibição (& 0.1 uM Ret (V804L) 60 Ron 62 Ros EX) Tie2 98 Tie2(R849W) 83 Tie2(Y897S) 92 THkA 100 TrkB 101 A tabela 4 acima mostra os valores de percentagem de inibição ' obtidos no Exemplo A42 a 0,1 uM de concentração.
A partir do painel de 284 - quinases, apenas exemplos que apresentaram mais do que 50% de inibição a 0,1 uM são relatados na tabela 4. A partir destes dados de inibição, é evi- dente que certas quinases, por exemplo, Abl, Arg, aurA, AurB, FGFR3, TrkA e TrkB quinase sejam inibidas pelos compostos da invenção.
Estas ativida- des podem conferir benefícios terapêuticos adicionais a estes compostos.
Exemplo J: Dados de Linhagem de Célula do Câncer de Compostos da In- venção Células do câncer da mama (MCF-7, MDA-MB-468, HCC1954), células de câncer do cólon (SW620) e células de câncer do pulmão (AS49), em conjunto com as células epiteliais mamárias humanas primárias (HMEC) foram semeadas (1000 a 4000 por 80 ul por poço, dependendo da taxa de crescimento de células) em placas de 96 poços, 24 horas antes da sobrepo- siçãode composto.
Os compostos foram preparados como soluções de re- serva de 10 mM em DMSO a 100%, as quais foram diluídas com Meio de crescimento celular DMEM (Meio Eagle modificado da Dulbecco) (Invitrogen, Burlington, ON, Canadá) contendo 10% de FBS (Soro Fetal Bovino) a con- centrações que variam de 50 nM a 250 UM.
Aliquotas (20 ul) de cada con- centração foram sobrepostas com 80 ul de células pré-semeadas em placas de 96 poços para fazer uma concentração final de 10 nM a 50 pM.
As célu- las foram cultivadas durante 5 dias antes do ensaio de Sulforodamina B (S-
RB) ser realizado para determinar o composto de atividade de inibição de crescimento celular.
Sulforodamina B (adquirido da Sigma, Oakville, ON, Canada) é um corante solúvel em água que se liga aos aminoácidos básicos das prote- inas celulares. Assim, a medição colorimétrica do corante ligado, fornece uma estimativa da massa de proteína total que está relacionada com o nú- mero de células, as células são fixadas in situ por aspiração suave para fora do meio de cultura e adição de 50 ul de 10% ácido tricloroacético (TCA) frio com gelo por poço e incubar a 4ºC durante 30 a 60 minutos, as placas são lavadas com água cinco vezes e deixadas o ar secar durante 5 min. A adi- ção de 50 ul de solução SRB a 0,4% (p/v) em ácido acético a 1% (v/v) para : cada poço e incubação durante 30 min à TR completa a reação de colora- ' ção. Após coloração, as placas são lavadas quatro vezes com 1% de ácido acético para remover o corante não ligado e depois deixado secar ao ar du- rante5 min. À mancha é solubilizado com 100 pl de 10 mM de Tris pH 10,5 por poço. A absorvância é lida a 570 nm.
A percentagem (%) de inibição do crescimento relativo foi calcu- lada por comparação com DMSO tratado apenas por células (100%). Glso foram determinados para os compostos com atividade citotóxica. A Glso foi calculada utilizando o software GraphPad Prism (GraphPad Software, Inc., San Diego, CA, EUA). Glso (inibição de crescimento) é a concentração de composto que provoca 50% de inibição do crescimento celular.
A tabela 5 abaixo, valores Gls55 variam para diversos exemplos de compostos contra uma linhagem celular do câncer da mama luminal (MCF-7), duas linhagens celulares do câncer da mama basal (MDA-MB-468, HCC1954), uma linha celular de câncer de pulmão (AS549), uma linhagem celular de câncer do cólon (SW-620) e células da mama primário (HMEC) são dadas. Os compostos exemplares demonstraram variação em variação de inibição de crescimento/morte celular contra células de câncer de câncer demama luminale células de câncer de mama basal, câncer de pulmão e de cólon. Em geral, estes compostos mostraram atividade menor ou pouco contra células normais, como exemplificado por HMEC. As faixas de Glso são indicadas como "A", "B", "C" e "D", para valores menores ou iguais a 0,1 EM; aqueles maiores que 0,1 uM; aqueles maiores do que 1 uM ou menores do que ou igual a 10 uM, e aqueles maiores do que 10 uM, respectivamente.
Tabela 5: Dados de inibição do Crescimento de Células asao Hcc-1954 le pb jo bh bp o | | Ee MEI E 8 E 8 az de de je Be | e | | : lex da da ja lá le jo | lã e da a da | o | ' les e de e le do | | Eco AAA aaa do e e | | laws ja da da a le o | lar ja da ja le e | | le a fa la da fe o | last a da la da da = | las de da ja dB e | - AME RA AA E e 8 EE de te— = las do fla a Ato las 1 la a ja e laso a là da dB | | | 2 e a A a a e AE A AA E - lag a ja a a de | | las “8 à da la fa lo | laws da fa a da la | | la e e de le e mos Te e eo de a a lee de A73 Cc A 2 ta Ee eos TE a ae E e e a ds le te fe e Te e as TE laro E — la da le e — e e a e de EA e fa la a e EE Boo a da fa da e E eo a da la da de de Be fa fa Tae e eo e da fa da Te E oe fe da fa de o de aos a da fa la da fe fa la la da le E fans fe la a da le de ame da fa la e de e me a aa e e a a e se a a de e
EA AEE use a da a da a de [ass la a fa de de e e le Ta da la le EE ara dae de A e a a a de de e aee a da ade e TE ue Te Ta a da da de aee le fa la le te 1 Paes e Ta fada e EE aero de Ta la la e e ae a Ta la e E Rm Roe e E o Eee RE Ee — BP TE ae Ta a a da de e a lada e E [ae a e la a e E ae a Ta la da dade Buss Ta fa la la da de ais — 8 la a eo E Bra a da e E Fase la fa lada de de [es 2 la la la la e | ua Ta a a dade e a fa a a TRE Fase fa a da fa e E a a a a e [a Te la la da de
Exemplo + A-549 HMEC aos e a la fa de | | | ae e la | A la E E [azos = e da la a Ee en e à ja je jo laie a da la da de | es a à a fa fa | leis de da fla la e = | lanzo la | la la | E e — = : ae a a da de da | | leis e a da da de | | [azar | e de | | Em adição às linhagens celulares testadas, como descrito aci- ma, os compostos selecionados foram testados contra um painel estendido.
Estes incluem: linhagens celulares de câncer da mama (T47 D, MDA-MB- 231, HS578T, BT474, SKBR3, HCC 1954), uma linhagem cellar de câncer do pulmão(H358), linhagens celulares de câncer do cérebro (A172, Hs683, SK- N-SH), linhagens celulares do câncer de colon (Colo 205, CT-15, HCT116 +/-, HCT116 +/+), linhagens celulares de câncer de ovário (OVCAR-3, SK- OV-3, SW 626), uma linhagem celular de melanoma (518A2), uma linhagem celular de câncer da próstata (PC-3) e uma linhagem celular de mama imor- talizada (184A1). O ensaio de sulforrodamina B (SRB) acima descrito foi uti- lizado para os compostos de teste de ensaio em relação ao painel estendido (tabela 6). As faixas de Gls9 são indicadas como "A", "B", "C" e "D”, para va- lores menores do que ou iguais a 0,1 UM; aqueles maiores do que 0,1 uM e menores do que ou iguais a 1 uM; aqueles maiores do que | UM e menores doque ou iguais a 50 uM; e aqueles maiores do que 50 UM, respectivamen-
te.
Tabela 6: Dados de Inibição do Crescimento Celular Linhagem Celular jaz — MDA-MB-231 HSs7eT A c : : Exemplo K: Ensaio de Angiogênese in vitro.
Certos compostos da presente invenção exibiram uma atividade micromolar e submicromolar contra receptor de tirosina quinase (RTKs), tais como FGFR2, VEGFR', VEGFR2 e PDGFDbeta.
Atividade contra estes RTKs pode resultar em atividade antiangiogênica que está associada com o crescimento tumoral retardado e/ou regressão do tumor.
Para medir os efei- tos antiangiogênicos de compostos da invenção, os exemplos selecionados foram testados em um ensaio de angiogênese, tal como descrito abaixo.
No- te-se que o composto do Exemplo A23 mostrou efeitos antiagiogênicos em concentrações submicromolares (figura).
Células HUV-EC-C foram obtidas a partir da American Type Cul- ture Collection (ATCC, CRL-1730), e foram utilizadas em passagem precoce para o ensaio. O Kit de ensaio de angiogênese in vitro (Chemicon) foi utiliza- do de acordo com a recomendação do fabricante. Uma mistura arrefecida com gelo de ECMatrix foi transferida para uma placa de 96 poços pré- arrefecida. Após a solução de matriz ter se solidificado (> uma hora de incu- bação a 37ºC), 8.000 células foram misturadas com a concentração inibidora adequada (em 100 microlitros de EGM-2) e plaqueadas em cada poço. O clínico antiangiogênico, Sutent foi usado como um controle positivo em rela- ção a um composto da invenção, A13. Após incubação a 37ºC durante 4 : horas, a formação do tubo foi inspecionada. Dois métodos, reconhecimento - de padrão, e contagem de pontos de ramificação, foram utilizados para quantificar a progressão da angiogênese e expressa como uma percenta- gemda contagem de tubo de controle (figura).
Embora esta invenção tenha sido particularmente ilustrada e descrita com referência a modalidades exemplares da mesma, deverá ser entendido por aqueles versados na técnica que várias alterações na forma e detalhes podem ser feitas sem se sair do escopo da invenção abrangido pe- lasreivindicações anexas.

Claims (1)

  1. REIVINDICAÇÕES
    1. Composto caracterizado pelo fato de que é representado pela seguinte fórmula estrutural: H io ã | Ss =" . CRº Q A, X S a a o ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo, em que: Rº é -F, metóxi, metila ou etila; Rº é -H, metila, etila, 2-metoxietila ou -CHxCONH>; e Rô é -CH=CH-(fenila opcionalmente substituída); em que a fenila é opcionalmente substituída com um ou mais substituintes independente- mente selecionados a partir de: i) halogênio, — -C(O)JOR', -C(O)RI, -C(SIR, -OC(OJR|-, -C(O)NR'R?, -C(SINRRI, —-OC(O)NRIR?, -S(OJR', -S(O).R', -SO3R', -SO2NR'R?, -OR!, -SR', -NRIR?, -NRºC(O)R', -NRºS(OJ)R', -NRºC(O)OR!, -NR?C(O)JONR'R?, -N(RIC(OINRIR?, -NRASOANR'R?, -NRºSO2R'; -NO,, -CN, -NCS; ou dois orto substituintes tomados em conjunto a partir de
    15. -O-[CH2],-O-, -S-[CH2],-S- ou -[CH2]4y-; ou ii) grupo alifático C1i.19 opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados do grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, -N(R2))a, -C(OIN(RZ)o, -C(OIN(RZ),, -NRZC(O)R?', -SOR”, -SO2N(R')2, -NR?ÚSO2R”, -NRºC(0)OR?, -OC(O)N(R)>, -NRUC(OIN(IR)o, -NRC(O)JON(R)2, -NRSO2aN(R")2, -OR”", -SRº, Cio haloalcoxi, -C(O)R?*, -C(0)OR? e -OC(O)R?'; ou ili) (Co10 alquileno)-Ar', (C2.10 alquileno)-Ar', em que Ar' é um grupo arila Cg.14 ou um grupo heteroarila de 5 a 14 membros, cada um op- cionalmente e independentemente substituído com um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, C1-10 aquila, C1-10 haloalquila, (C1-109 haloalcoxi)C1-10 alquila, (C1-109 alcoxi)C1-109 alqui-
    la, C1109 hidroxialquila, C1.19 aminoalquila, (C1-106 aquilamino)C1-105 alquila, (C1-10 dialguilamino)C1.16 — alguila, — -N(R2), — -C(OIN(RÚ)s, — -C(O)IN(RZ')>, “NREC(O)R?', -SOR?, -SOaN(Rd)o, -NRISOR?, -NRZC(O)N(R")>, -NRC(O)JON(R)2, -NR2SO2N(R2")2, -OR?!, -SR21, C1-105 haloalcoxi, -C(O)R?,
    -C(O0)JORP, -OC(O)R”, fenila e heteroarila de 5 a 6 membros, em que a refe- rida fenila e a referida heteroarila de 5 a 6 membros são cada uma indepen- dentemente e opcionalmente substituídas com um ou mais substituintes se- lecionados do grupo consistindo em halogênio, hidroxi, nitro, ciano, amino, C1-3 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3 alcoxi e C1.3 haloalcoxi;
    cada R' independentemente é:
    i) hidrogênio;
    ii) um grupo Cçs.14 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 mem- bros, cada um opcional e independentemente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, NO,>,
    CN, NCS, Cr-Cio alifático, (C110 alquileno)-AR'º, (C210 alquenileno) AR”º, C(O)OR", C(O)R*º, C(SR", “C(oR, C(OINIRI)a C(S) N(R), CI(OIN(IR*)2, S(O)R?, S(O)2R'?, SO3R?, SO2N(R)a, OR”, SR", N(R"")>, NR C(OR, — NRUS(OJR-NRC(OJOR?, —“N(R) C(OIN(IR), NRISO2N(R'!)> e NR SO2R"?; ou iii) um grupo C1105 alifático opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, NO», CN, NCS, AR”, C(O)JOR"”, C(Oo)R”, C(S)R*, c(o)R", C(o)N(R!)>, C(S) N(R)a, "C(OINIR"!)2, S(OJR?, S(O)LR"?, SOsR”?, SO2aN(R')s, OR”, SR", N(R), NRUC(OR, NRUS(O)R?, NR C(OJOR?, N(RÚ)
    C(OINIR!)o, NR SOAN(R!); e
    -NRUSO2R”,
    desde que R' seja diferente de hidrogênio, quando o substituinte é S(O)RI,-S(O)2R', SO3R', NR2S(O)R' ou NR2SO2R'; e
    Cada R? é, independentemente, -H ou C1-C6 alquila, ou, toma-
    dos em conjunto com NR', formam um grupo heterocíclico não aromático, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em = O, S =, halogênio, nitro, ciano, hidróxi, C1-6 alqui-
    la, C1.6 haloalquila, C1.6 hidroxialquila, amino, C1.6 alquilamino, C1.6 dialqui- lamino, C1.6 alquila, (C1.6 alquil) C1.6 alquila, (C1.6 dialquilamino) alquila C1.6, (fenil)-C1.6 alquila, (heteroarila de 5-6 membros) C1.6 alquila, C1.6 alcóxi, C1-6 haloalcóxi, C1.6 alquilcarbonilóxi, C1.6 alcóxi, C1.6 alquilcarbonila, fenila e he- teroarilade 5-6 membros; Cada R*º independentemente é: i) hidrogênio; ii) um grupo Cçe.14 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 mem- bros, cada opcional e independentemente substituído por um ou mais substi- tuintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi C1-19 alquila, C1-19 haloalquila, (Ci-109 haloalcóxi) C1-15 alquila, (alcóxi C1-109) alquila C1-105 alquila, C1-19 hidroxialquila, aminoalquila C1-10, (C1- 10 alquilamino) alquila C1-10, (C1-16 dialquilamino) C1-106 alquila, (fenil)-C1-10 alquila, (heteroarila de 5-6 membros) C1106 alquila, amino, alquilamino C110,
    15. Ci1o dialquilamino, C1-19 alcóxi, C1-19 haloalcóxi, alquilcarbonilóxi C1-109, C1-10 alcoxicarbonila e C1-16 alquilcarbonila, ou ili) um grupo C1-15 alquila opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxi C1-10, haloalquila C1.109 alcóxi, C1-109 haloalcóxi, a- mino, alquilamino C1-10, C1-109 dialquilamino, C1-19 carbonilóxi, C1-109, alcoxicar- bonila C1-195 alquilcarbonila e fenila, a referida fenila sendo opcionalmente substituída por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo con- sistindo em halogênio, hidroxila, nitro, ciano, amino, C1-3 alquila, C1-3 haloal- quila, C1.3, alcóxi C1.3 e haloalcóxi; Cada R" é, independentemente, R", COR", SOR ou C(O)R", ou N(R*!)2 tomados em conjunto é um grupo heterocíclico não aro- múático, opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em = O, S =, halogênio, nitro, ciano, hidróxi, alcóxiCis alquila, Ci6 haloalquila, C1.6 hidroxialquila, amino, C1.6 alquilami- no, C1.6 dialquilamino, C1.« alquila, aminoalquila (C1.6 alquil) C1.6 alquila, (C1-6 dialquilamino) alquila C1.6, alcóxi C1-.6, C1.6 haloalcóxi, C1-.6 alquilcarbonilóxi,
    C1.6 alcoxicarbonila, e C1.6 alquila; e Cada R'*? é, independentemente, é R'º, desde que R'? não seja hidrogênio; Cada R?' é independentemente hidrogênio, fenila ou heteroarila de5-6membros, em que cada um dos grupos fenila e heteroarila represen- tados por R?* é independente e opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, hidró- xi, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3, alcóxi C1.3 e haloal- cóxi, e em que o grupo alquila representado por R?* é opcionalmente substi- tuído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo que con- siste em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloalquila, C1-3 alcóxi e C1.3 alquila, ou N(R)2 forma um grupo heterocíclico não aromático opcional- mente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do gru- po consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, = O, C1.3 alquila, C1.3 halo- alquila, C1.3 alcóxi, C1-.3 haloalcóxi e amino; e Cada Rº independentemente Ci. alquila, fenila ou heteroarila de 5-6 membros, em que cada um dos grupos fenila e heteroarila represen- tados por Rº? é independente e opcionalmente substituído por um ou mais —substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, hidró- xi, nitro, ciano, amino, C1.3 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3, alcóxi C1.3 e haloal- cóxi, e em que o grupo alquila representado por R** é opcionalmente substi- tuído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C13 alquila, C1.3 haloalquila, C1.3, alcóxiCige haloalcóxi; cada R independentemente é hidrogênio, C1-106 alifático, fenila ou heteroarila de 5-6 membros, em que o grupo alifático representado por R é opcionalmente substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, fenila, hete- roarila de 5-6 membros, C1.6 alcóxi, C1.6 haloalcóxi, e em que cada um dos grupos fenila e heteroarila representados por R, e os substituintes fenila e heteroarila no grupo alifático representados por R são, independentemente,
    são opcional e independentemente substituídos por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C1.6 alquila, C1.6 haloalquila, C1-6 alcóxi, C1.6 haloalcóxi, ou
    N(R)2 forma um grupo heterocíclico não aromático opcionalmen-
    te substituído por um ou mais substituintes selecionados a partir do grupo consistindo em =O, =S, halogênio, nitro, ciano, hidróxi, C1.6 alquila, C1.6 ha- loalquila, C1-6 hidroxialquila, amino, C1.6 alquilamino, C1.6 dialquilamino, C1- C6 aminoalquila, (C1.6 alquilamino) C1.6 alquila, (C16 dialquilamino) C1.6 alqui- la, (fenil)-C1.6 alquila, (heteroarila de 5-6 membros) C1-6 alquila, C1-.6 alcóxi,
    Cie haloalcóxi, Ci. alquilcarbonilóxi, C1.6 alcóxicarbonilóxi, C1.6 alquilcarbo- nila, fenila, e heteroarila de 5-8 membros;
    Ar' é um grupo arila C6-14 ou um grupo heteroarila de 5-14 membros, cada um opcional e independentemente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo consistindo em halogênio,
    nitro, ciano, C1-19 alguila, C1-19 haloalquila (C1-10 haloalcóxi) C1-106 alquila, (C1- 10 alcóxi) C1-19 alquila, C1-19 hidroxialquila, C1-19 aminoalquila, (C1-19 alquila- mino) C1-10 alquila, (C1.109 dialquilamino) C1.16 alquila, N(R2))2a, C(O)N(RZ')>, CIOIN(R))a, NRUC(O)RA, SOR, SO2N(RZ)o, NRISO2R?, NR2C(O) N(R2)2a, NRC(O) ON(R)a, NR SO2N(RZ), OR?, SR, Ci115 haloalcóxi,
    C(O)R?, C(O)ORÁ!-OC(O)R?, fenila e heteroarila de 5-6 membros, em que a referida fenila e a heteroarila de 5-6 membros, cada um independente e opcionalmente substituído com um ou mais substituintes selecionados a par- tir do grupo consistindo em halogênio, hidróxi, nitro, ciano, amino, C1-3 alqui- la, C13 haloalquila, C1.3 alcóxi e C1.3 haloalcóxi;
    Cada Ar", independentemente é um grupo C6-14 arila ou um grupo heteroarila de 5-14 membros, cada opcional e independentemente substituído por um ou mais substituintes selecionados de entre o grupo con- sistindo em halogênio, nitro, ciano, -OH, -SH, -O(C1-19 alquila), -S(C1-19 alqui- la), C1-10 alquila, C1-109 haloalquila, (C1-109 haloalcóxi) C1-10 alquila, (C1-10 alcóxi)
    Ci110 alquila, Ci1o hidroxialquila, (Cio aminoalquila (C110 alquilamino) C1.10 alquila, (C1-109 dialquilamino) C1-15 alquila, (fenil)JC1-10 alquila, (heteroarila de 5- 6 membros) C1.-16 alquila, amino, alquilamino C1-10, C1-16 dialquilamino, C1-10 haloalcóxi, C1-109 carbonilóxi, C1-109 alcoxicarbonila, e C1-19 alquilcarbonila; cada pé 1,20uU3;e cada q é 2,3,4ou5.
    2. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- lofatode que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural: Rô Len Rº So
    H H
    E ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    3. Composto, de acordo com a reivindicação 1 ou 2, caracteriza- do pelo fato de que: em que a fenila em -CH = CH-(fenila) opcionalmente substituída porum ou mais substituintes selecionados independentemente do grupo consistindo em halogênio, C1.6 alquila, C1-.6 haloalquila, (C1.6 aminoalquila), (C1-.6 alquilamino)C1-6 alquila, (fenil)JC1.6 alquila, amino, C1.6 alquilamino, C1.6 dialquilamino, -(CH>2)o.3-N-piperidinila, -(CH2)o-a-N-morfolinila, -(CH2)o-3-N- pirrolidinila, -(CH2)o-3-N-piperazinila e -(CH2)o-a-N-oxazepanila, em que a N- piperazinila é opcionalmente N'-substituído por C1-.6 alquila ou C1.6 acila; e Rº é-H ou metila.
    4. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- lo fato de que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural:
    Q
    TO
    NÃ O Wo HN-N ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    5. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- lo fato de que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural: Nha mA Do O PE “O | HN-N ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    6. Composto, de acordo com a reivindicação 1, caracterizado pe- lofatode que o composto é representado pela seguinte fórmula estrutural:
    DOS > O PE “O | HN-N ou de um sal farmaceuticamente aceitável do mesmo.
    7. Composição farmacêutica caracterizada pelo fato de que compreende um veículo farmaceuticamente aceitável, e um composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou um sal farmaceutica- mente aceitável do mesmo.
    8. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 7, caracterizada pelo fato de que compreende adicionalmente um agente tera- pêutico adicional.
    9. Composição farmacêutica de acordo com a reivindicação 8, caracterizada pelo fato de que o agente terapêutico adicional é um fármaco anticâncer.
    10. Uso de uma quantidade efetiva do composto como definido em qualquer uma das reivindicações 1 a 6 ou um sal farmaceuticamente a- ceitável do mesmo, caracterizado pelo fato de ser para a preparação de um medicamento para tratar um indivíduo com câncer.
    11. Uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer do pulmão, câncer da mama, câncer do cólon, câncer do cérebro, neuroblas- toma, câncer da próstata, melanoma, glioblastoma multiforme, câncer do ovário, linfoma, leucemia, melanoma, sarcoma, paraneoplasia, osteossar- coma, germinoma, glioma e mesotelioma.
    12. Uso, de acordo com a reivindicação 11, caracterizado pelo fato de que o câncer é selecionado a partir do grupo consistindo em câncer do pulmão, câncer da mama ou câncer do cólon.
    13. Uso, de acordo com a reivindicação 12, caracterizado pelo fatode que o câncer é o câncer da mama.
    14. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o câncer é o câncer da mama subtipo basal ou de um câncer da mama subtipo B luminal.
    15. Uso, de acordo com a reivindicação 14, caracterizado pelo fato de que o câncer é um câncer da mama subtipo basal que superexpres- sa PLKA.
    16. Uso, de acordo com a reivindicação 13, caracterizado pelo fato de que o câncer é o câncer da mama subtipo basal que é câncer da mama negativo ER, HER2 e PR.
    17. Uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o câncer é um câncer dos tecidos moles.
    18. Uso, de acordo com a reivindicação 17, caracterizado pelo fato de que o câncer do tecido mole é um sarcoma selecionado a partir do grupo que consiste em um fibrossarcoma, um sarcoma gastrointestinal, lei- omiossarcoma, lipossarcoma desdiferenciadas, um lipossarcoma pleomórfi- co, histiocitoma fibroso maligno, sarcoma das células redondas, e um sar- coma sinovial.
    19. Uso, de acordo com a reivindicação 10, caracterizado pelo fato de que o câncer é um câncer associado a HPV.
    20. Uso, de acordo com qualquer uma das reivindicações 10 a 18, caracterizado pelo fato de que o medicamento contem um agente tera- pêutico adicional.
    ' 1
    120 seas EEEETENTTEÇETE: Gs SA Rama [us pa SAE A PIA Es DR RARO ARS D melada dr E eta AARIRISE TS ANANES EA ATS lcapãe SER PANA O A 2 199 Ba AO a A A ST O = ERICO RO o atado o cer NEAR o SERES Ro REINO - Ss FE CANA o A EENEIEA A E uno . S Ein i RSA A REA ASA A & E Ao a a DT E AL TDAA AEE SE A ADA: . à “ICO Eee rc & CU Moo e É QE à OS coco Ss ESSE EDTA oa E To A NEO 3 QE E eo aaa rea AMME ER ras SERIE AR E TENER ra aaa
    E ESCORE Ao a EO NA 3 E 3º cc o O E neo Ea EA Ss boo EE E e ATE CRER 8 IF E À | Pg: o RAE Cp ado Es É DpMSO A23 (0.05uM) A23 (0.5UM)
    O composto exemplar A23 da figura em Ensaio de Formação de Tubo de Célula HUV-EC
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