CN102721773A - 地榆皂苷i的含量测定方法 - Google Patents
地榆皂苷i的含量测定方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN102721773A CN102721773A CN2011100302883A CN201110030288A CN102721773A CN 102721773 A CN102721773 A CN 102721773A CN 2011100302883 A CN2011100302883 A CN 2011100302883A CN 201110030288 A CN201110030288 A CN 201110030288A CN 102721773 A CN102721773 A CN 102721773A
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- sanguisorbin
- methanol
- water
- solution
- reference substance
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Pending
Links
Images
Landscapes
- Other Investigation Or Analysis Of Materials By Electrical Means (AREA)
Abstract
本发明公开了一种地榆皂苷Ⅰ的含量测定方法，所述方法包括：1）分别取地榆皂苷I的标准品和含有地榆皂苷I的供试品溶于乙醇水溶液中，分别制成标准溶液和供试品溶液；2）分别取等体积的标准溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，然后测量标准品溶液和供试品溶液的峰面积并进行计算，即得供试品中的地榆皂苷I的含量。本发明为地榆药材及其提取物或制剂中地榆皂苷Ⅰ含量的测定提供了快速、准确的方法。
Description
本发明为分案申请，原案申请号为201010170728.0，原案申请日为2010年4月30日，原案名称为地榆皂苷I的含量测定方法。
技术领域
本发明涉及一种中药地榆药材及其提取物和制剂中地榆皂苷I的含量测定方法，属于中药技术领域。
背景技术
中药地榆为蔷薇科植物地榆Sanguisorba officinalis L.或长叶地榆Sanguisorba officinalis L.var.longifolia(Bert.)YüetLi的干燥根。
中国药典2005版收载该品种，其中记载了鞣质的含量测定方法，具体含量测定项下内容为：“取本品粉末(过四号筛)约0.4g，精密称定，照鞣质含量测定法(附录X B)测定，即得。按干燥品计算，不得少于10.0％。”。
中华人民共和国国家药品监督管理局WS-11020(ZD-1020)-2002地榆升白片标准(试行)记载了地榆升白片中的没食子酸的含量的测定方法：“照高效液相色谱法(中国药典2000年版一部附录VID)测定。色谱条件与系统适用性试验用十八烷基硅烷键合硅胶为固定相；甲醇-乙腈-0.05mol/L磷酸溶液(5∶6∶89)为流动相；检测波长为270nm。理论塔板数按没食子酸峰计算应不低于6000。对照品溶液的制备精密称取没食子酸对照品适量，加50％甲醇制成每1ml含20μg的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品20片，除去包衣，精密称定，研细，取适量(约相当于10片的重量)，精密称定，精密加入50％甲醇25ml，称定重量，加热回流1小时，放冷至室温，再称定重量，用50％甲醇补足减失的重量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液各5μl～10μl，注入液相色谱仪，测定，即得。本品每片含地榆以没食子酸(C7H5O5)计，不得少于24μg。”以上标准分别公开了地榆药材及地榆制剂——地榆升白片中鞣质和没食子酸的含量测定。
而地榆药材应用广泛、适应症较多，而不同的适应症其所发挥作用的有效成分也是不同的，特别是针对地榆在升高白细胞水平的适应症方面，仅通过检测地榆制剂中的鞣质或没食子酸来判定制剂的是否合格是不适宜的，原因为现有研究已证明：地榆皂苷是地榆发挥升高白细胞作用的活性成分，特别是地榆皂苷I，而鞣质和没食子酸并不起升高白细胞水平的主要作用【高小平等，地榆促造血作用的有效部位筛选.中国天然药物，2006(2)：137-140；成都地奥制药集团有限公司.地榆总皂苷提取物及其制备方法和用途[P].中国专利：200310119248.1，2004-11-25；成都地奥制药集团有限公司.乌索烷型三萜皂苷在制备升高白细胞和/或血小板药物中的应用[P].中国专利：03135776.8，20030908ZL 03135776.8】，因此，通过检测地榆制剂中地榆皂苷I的含量则更为合理，也更能反应产品的质量。然而实践中发现，现有的鞣质和/或没食子酸含量的检测方法并不适于地榆皂苷I的检测。
邹盛勤等公开了地榆中的乌索酸和齐墩果酸含量的高效液相色谱测定法【邹盛勤，陈武.地榆中乌索酸和齐墩果酸含量的高效液相色谱测定，时珍国医国药，2006，17(8)：1373～1374】；解军波等公开了用HPLC-ELSD法四季青中3种三萜及其皂苷，包括地榆皂苷I的含量测定方法【解军波，毕志明，李萍.HPLC-ELSD法测定四季青中三萜及其皂苷的含量】，虽然四季青中也含有地榆皂苷I，但是由于四季青与地榆为不同的植物，除地榆皂苷I外，二者含有的其他化学成分不同，因此适用于四季青中地榆皂苷I的含量测定方法并不适用于地榆药材、地榆提取物或地榆制剂中地榆皂苷I的含量测定；沙明等公开了地榆皂苷类成分、黄酮类成分的HPLC指纹图谱，其中地榆皂苷类成分的HPLC色谱条件为：色谱柱：Shim-pack CLC ODS柱(6.0mm×150mm，5μm)，流动相：乙腈-水(30∶70)检测波长：206nm，流速：1.0ml/min，柱温：25℃。【沙明，张东方，孟宪生等.DNA指纹谱与HPLC指纹谱对中药地榆质量评价研究，中国药学杂志，2002，37(11)：815～818】，但使用该方法出峰时间过长(20min)，分析效率较低，且不能将地榆皂苷I与其结构相近的皂苷类成分有效的分离。以上报道的分析方法均存在出峰时间长达20min，分析效率较低，且不能将地榆皂苷I与其结构相近的皂苷类成分有效分离的技术缺陷
因此，到目前为止，国内外尚无能够快速、准确测定地榆药材及其提取物或制剂中地榆皂苷I含量的方法。
发明内容
针对以上技术缺陷，本发明的目的在于提供一种能够快速、准确测定地榆药材、其提取物或制剂中地榆皂苷I的含量的方法，具体地提供一种用高效液相色谱法测定地榆药材、其提取物或制剂中地榆皂苷I的含量的方法。
本发明所述方法包括：
1)分别取地榆皂苷I的标准品和含有地榆皂苷I的供试品溶于乙醇水溶液中，分别制成标准溶液和供试品溶液；
2)分别取等体积的标准溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，然后测量标准品溶液和供试品溶液的峰面积并进行计算，即得供试品中的地榆皂苷I的含量；
其中，所述高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶；流动相为甲醇-水溶液。
本发明方法中，作为优选的实施方案，所述碳十八烷基键合硅胶的粒径为≤5μm；进一步优选所述碳十八烷基键合硅胶的粒径为5μm、4μm或3.5μm。
本发明所述流动相为甲醇-水的溶液，优选为：以体积百分比计，60％～80％甲醇的水溶液的梯度溶液、或为50％～80％甲醇的水溶液的等度溶液。
本发明方法中，当所述流动相采用60％～80％甲醇的水溶液的梯度溶液时；优选所述梯度溶液组成为：以体积百分比计，0～17min 60％→70％甲醇的水溶液、17～25min 70％→80％甲醇的水溶液、25～35min 80％甲醇的水溶液；或
0～7min 60％→64％甲醇的水溶液、7～12min 64％→66％甲醇的水溶液、12～17min 66％→80％甲醇的水溶液，17～25min 80％甲醇的水溶液；或
0～7min 60％→64％甲醇的水溶液、7～15min 64％甲醇的水溶液、15～20min64％→80％甲醇的水溶液、20～25min 80％甲醇的水溶液；或
0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～12min 64％甲醇的水溶液，12～20min64％→80％甲醇的水溶液，20～27min 80％甲醇的水溶液；或
0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液。
作为优选的实施方案，所述等度溶液为：以体积百分比计，64％甲醇的水溶液。
作为优选的实施方案，本发明所述乙醇水溶液的浓度为以体积计50％-60％乙醇的水溶液。
本发明所述地榆皂苷I的测定方法可以用于医药领域的各个方面，本发明包括但不限于地榆药材中、地榆皂苷提取物中，以及各种药物制剂，如片剂、胶囊、颗粒剂、注射剂等各种胃肠道或非胃肠道途径给药的制剂中的地榆皂苷I的含量及纯度的测定。
地榆皂苷I标准品可参考现有技术中的方法制备地榆皂苷I：曹爱民，张东方，沙明等，地榆中皂苷类化合物分离、鉴定及其含量测定.中草药，2003，5(34)：397～399进行制备。
作为优选的实施方案，所述地榆药材中地榆皂苷I的含量测定方法包括：
1)供试品溶液的制备：取地榆药材，粉碎，过四号筛，约0.4g，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇的水溶液80ml，摇匀，超声15mi n，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进样分析或离心取上清液即得；
对照品溶液的制备：取地榆皂苷I对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液稀释定容至刻度，摇匀，即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
2)含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷I的含量；
其中，高效液相色谱以碳十八烷基键合硅胶为固定相粒径小于或等于5μm，流动相为甲醇与水体积为64％∶36％的等度洗脱液或为甲醇体积浓度为60-64％的甲醇-水溶液的梯度洗脱液，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液流速0.8ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为80℃，气体流速2.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103。
作为优选的实施方案，所述地榆皂苷提取物中地榆皂苷I的含量测定方法包括：
1)供试品溶液的制备：取地榆总皂苷粉末50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇的水溶液60ml，摇匀，超声5min，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液或离心取上清液进样分析；
对照品溶液的制备：取地榆皂苷I对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液稀释定容至刻度，摇匀即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
2)含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷I的含量；
其中，高效液相色谱仪用碳十八烷基键合硅胶为固定相粒径小于或等于5μm，以甲醇体积浓度为60-64％的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液，流速1.2ml/min，柱温25℃，ELSD(Alltech 2000ES)漂移管温度为100℃，气体流速3.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103。
作为优选的实施方案，所述地榆片剂中地榆皂苷I的含量测定方法包括：
1)供试品溶液的制备：取地榆升白片20片，精密称定，研细，精密称取相当于2mg地榆皂苷I的量，置150ml具塞锥形瓶中，准确加入50％乙醇20ml，摇匀，称重，超声10min，放至室温，用50％乙醇的水溶液补足减失的重量，摇匀，离心取上清液即得；
对照品溶液的制备：取在105℃干燥至恒重的地榆皂苷I对照品适量，加50％乙醇的水溶液溶解并定容制成每1ml含0.05mg和0.2mg的对照品溶液；
2)含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷I的含量；
其中，高效液相色谱仪，用粒径小于或等于5μm的碳十八烷基键合硅胶为固定相，以甲醇-水体积比为64∶36的混合溶液为等度洗脱液，或以甲醇体积浓度为60-64％的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液，流速1.0ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为85℃，气体流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103。
作为优选的实施方案，所述地榆皂苷I的纯度测定方法包括：
1)样品溶液的制备：取地榆皂苷I适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，即得；
2)纯度测量：精密吸取样品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，按峰面积归一化法计算地榆皂苷I的纯度；
其中，所述高效液相色谱仪用碳十八烷基键合硅胶为固定相，粒径小于或等于5μm，以甲醇体积浓度为60-64％的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～12min 64％甲醇的水溶液，12～20min 64％→80％甲醇的水溶液，20～27min 80％甲醇的水溶液，流速1.0ml/min，柱温25℃，ELSD(Alltech 2000ES)漂移管温度为85℃，气体(空气)流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103；
与现有技术相比，本发明为地榆药材及其提取物或制剂中地榆皂苷I含量的测定提供了快速、准确的方法，能够将地榆皂苷I与其前面紧邻的一色谱峰(结构非常相近的同分异构体3β-0-α-L-吡喃阿拉伯糖-28-β-D吡喃葡萄糖酯-19α-羟基-齐墩果酸)实现基线分离；且出峰时间短，仅为10min。
根据本发明的上述内容，按照本领域的普通技术知识和惯用技术手段，在不脱离本发明上述基本技术思想的前提下，还可以做出其他多种形式的修改、替换和变更。
附图说明
图1a：实施例1等度洗脱，(Synergi Hydro-RP C18柱(150×4.6mm，4μm)，乙腈-水(30∶70)，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长210nm，分析时间30min)；
图1b：实施例1梯度洗脱，(Synergi Hydro-RP C18柱(150×4.6mm，4μm)，乙腈-水梯度洗脱(洗脱程序：0～20min，30％乙腈→50％乙腈；20～25min，50％乙腈→80％乙腈)，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长210nm，分析时间30min)；
图2-1：实施例2色谱柱选择(YMC-Pack proC18柱(150×4.6mm，3.5μm)；
图2-2：实施例2色谱柱选择Synergi Hydro-RP C18柱(150×4.6mm，4μm)；
图3-1：实施例3地榆药材62％甲醇水溶液等度洗脱；
图3-2：实施例3地榆总苷62％甲醇水溶液等度洗脱；
图3-3：实施例3地榆药材80％甲醇水溶液等度洗脱；
图3-4：实施例3地榆总苷80％甲醇水溶液等度洗脱；
图3-5：实施例3地榆总苷50％甲醇水溶液等度洗脱；
图3-6：实施例3地榆药材50％甲醇水溶液等度洗脱；
图4-1：实施例4乙腈-水系统分离地榆药材中地榆皂苷I；
图4-2：实施例4甲醇-水系统分离地榆药材中地榆皂苷I；
图5-1：实施例5药材专属性考察(溶剂)；
图5-2：实施例5药材专属性考察(地榆皂苷I对照溶液)；
图5-3：实施例5药材专属性考察(药材提取液)；
图6-1：实施例6地榆升白片专属性考察(空白辅料)；
图6-2：实施例6地榆升白片专属性考察(地榆皂苷I对照溶液)；
图6-3：实施例6地榆升白片专属性考察(地榆升白片样品液)；
图7：实施例7地榆升白片中地榆皂苷I的含量均匀度测定；
图8：实施例8地榆总苷提取物中地榆皂苷I的含量测定；
图9：实施例9地榆皂苷I对照品纯度测定。
具体实施方式
以下通过实施例对本发明再做进一步的详细说明，但不应将此理解为本发明仅限于以下实例，凡基于本发明上述内容所实现的技术均属于本发明的范围。
实施例1高效液相色谱色谱柱、流动相和洗脱程序的选择
地榆皂苷属于三萜皂苷，极性较大，实验表明其在C18色谱柱上有保留，因此选用C18分析柱。
流动相的选择：地榆皂苷I系中性化合物，流动相中无需添加酸碱附加剂或离子对试剂。因此选择甲醇-水、乙腈-水等流动相系统对比筛选，在紫外检测中乙腈-水系统较甲醇-水系统基线平直，峰形尖锐，但经多次调整分离色谱峰仍然较甲醇-水系统少，且无论采用等度洗脱还是梯度洗脱地榆皂苷I前面紧邻的杂质峰完全无法检出(见图1a和1b)，而地榆皂苷I峰面积较甲醇-水系统明显增加，而在甲醇-水系统中两者能得到一定的分离(R＝1.2)，因此选择甲醇-水系统。根据分离度变化趋势，将流动相调整为梯度洗脱，详见表1。
表1流动相梯度洗脱程序
结果表明，在洗脱程序B、C、D中，地榆皂苷I与前面紧邻的杂质峰分离效果基本一致(R＝1.2)，地榆皂苷I在等度洗脱的7～12min(64％甲醇的水溶液)出峰，保留时间10min，因此洗脱条件优化调整为：0～7min60％→64％甲醇的水溶液，7～12min 64％甲醇的水溶液，12～20min 64％→80％甲醇的水溶液，20～27min 80％甲醇的水溶液。而对于含量测定而言，待测主峰洗脱出来即可，因此在对样品中的地榆皂苷I进行含量测定时，洗脱条件可简化为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液。
地榆皂苷I分析条件选择的关键在于将其与前面紧邻的一色谱峰实现基线分离，而不同来源的样品分离难易程度不一，药材样品较好、地榆总苷及制剂次之、地榆皂苷I对照品最难；在前面流动相的选择中都是以C18柱(4.6×150mm，5μm)为基础，在选定的洗脱条件下又分别考察了常规分析柱ZORBAX XDB-C18柱(4.6×150mm，5μm)、Luna C18柱(4.6×150mm，5μm)、和小粒径柱YMC-Pack proC18柱(4.6×150mm，3.5μm)、Synergi Hydro-RP C18柱(4.6×150mm，4μm)对地榆皂苷I的分离效果。结果表明，在粒径较小的3.5μm和4μm C18分析柱上对照品中地榆皂苷I与该杂质峰均能达到基线分离(R＞1.5)。在上述研究确定的条件下，地榆皂苷I色谱峰保留时间约10min；地榆样品中各成分可在27min内全部流出色谱柱(纯度检查)，地榆皂苷I色谱峰拖尾因子1.1，理论塔板数大于1×104，峰分离度大于1.5，符合HPLC测定方法要求。
在用于含量测定时，常规分析柱(直径4.6mm×150mm/250mm，5μm)和50～80％甲醇等度洗脱，通过改变色谱柱长度、流速或柱温，都可满足分离要求。
实施例2色谱柱粒径对地榆皂苷I对照品的分离效果的影响
(1)样品溶液制备：取地榆皂苷I粗品适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，即得；
(2)色谱条件：以甲醇-水系统为流动相梯度洗脱，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～12min 64％甲醇的水溶液，12～20min 64％→80％甲醇的水溶液，20～27min 80％甲醇的水溶液，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长210nm，ELSD：85℃，2.8L/min，gain1；考察了YMC-Pack proC18柱(150×4.6mm，3.5μm)(紫外检测)和SynergiHydro-RP C18柱(150×4.6mm，4μm)(ELSD检测)对地榆皂苷I的分离效果，结果见图2。
图2结果表明，在粒径小于或等于5μm的色谱柱上地榆皂苷I主峰与前面紧邻杂质峰峰能得到完全分离。
实施例3甲醇-水系统等度洗脱对地榆药材和地榆总苷中地榆皂苷I的分离
(1)药材样品溶液制备：取地榆药材粉末(过四号筛)约0.4g，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇的水溶液80ml，摇匀，超声15mi n，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过取续滤液进样分析或离心取上清液即得。
(2)地榆总苷样品溶液的制备：取地榆药材粗粉适量，加10倍体积水煎煮，每次1h，共煮三次，过滤，合并滤液，上大孔吸附树脂，蒸馏水充分洗涤，后用体积浓度70％乙醇的水溶液洗脱，合并洗脱液并浓缩，干燥即得地榆总皂苷粉末。取地榆总苷粉末约50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇60ml，摇匀，超声5min，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过取续滤液进样分析或离心取上清液即得；
(3)色谱条件：以甲醇-水系统为流动相等度洗脱，流速0.8～1.5ml/min，柱温25℃～40℃，ELSD：85℃，2.8L/min，gain1；分别考察了Synergi Hydro-RP C18柱(150×4.6mm，4μm)、GeminiC18柱(150×4.6mm，5μm)和1una C18柱(250×4.6mm，5μm)对地榆皂苷I与其前面紧邻杂质峰的分离效果，结果见图3。
结果表明，对于地榆药材和地榆总皂苷提取物等样品，在粒径小于5μm的色谱柱上50％～80％甲醇的水溶液等度洗脱能将地榆皂苷I与前面紧邻的杂质峰实现基线分离，常规的5μm的色谱柱上甲醇-水等度洗脱也同样可以实现基线分离。
实施例4地榆药材中地榆皂苷I的分离
(1)样品溶液制备：取地榆药材，粉碎，过四号筛，约0.4g，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇的水溶液80ml，摇匀，超声15mi n，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过取续滤液进样分析或离心取上清液即得。
(2)色谱条件：ZORBAX XDB-C18柱(4.6×150mm，5μm)上，流速1.0ml/min，柱温25℃，检测波长210nm，分别用甲醇-水系统梯度洗脱(洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～12min 64％甲醇的水溶液，12～20min 64％→80％甲醇的水溶液，20～27min 80％甲醇的水溶液)和乙腈-水系统对药材中地榆皂苷I进行分离，结果见图4。
图4结果表明，甲醇-水系统能够将地榆药材中地榆皂苷I与其紧邻的杂峰完全分离开，而乙腈-水则不能将二者分开。
实施例5地榆药材中地榆皂苷I的含量测定及方法验证
含量测定方法：
(1)色谱条件与系统适应性试验：用碳十八烷基键合硅胶为固定相(4.6×150mm，粒径4μm)，甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为(0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液)，流速0.8ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为80℃，气体(空气)流速2.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103；
(2)供试品溶液的制备：取地榆药材粉末(过四号筛)约0.4g，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇的水溶液80ml，摇匀，超声15min，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过取续滤液进样分析或离心取上清液即得。
(3)对照品溶液的制备：取地榆皂苷I对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液稀释定容至刻度，摇匀即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
(4)含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷I的含量为(以干燥品计)3.340％。
方法验证：
(1)在选定的色谱条件下，地榆药材中地榆皂苷I有较强的色谱峰和较好的分离度，溶剂不干扰测定，见图5。结果表明，本方法具有较高的专属性。
(2)线性
精密配制浓度为0.0998mg/ml、0.1996mg/ml、0.2A mg/ml、0.3992mg/ml、0.4990mg/ml的地榆皂苷I对照品溶液各10ml，准确吸取10μl注入液相色谱仪，按上述条件进行测定，以峰面积积分值的常用对数为纵坐标，地榆皂苷I溶液浓度的常用对数为横坐标进行直线回归，线性方程为logA＝1.5846logC+7.1419(r＝0.9998)，表明地榆皂苷I在0.998μg～4.990μg范围内具有良好线性关系。
表2线性关系测定结果
(3)精密度
重复性
分别取地榆药材粉末(过四号筛)0.4g，精密称定，按供试品制备方法配制6份，精密吸取续滤液10μl进样，测定地榆皂苷I的峰面积，将峰面积积分值和浓度取常用对数后以外标两点法计算含量，结果见表3。
表3重复性测定结果
结果表明，本法重复性良好。
日内精密度
取地榆皂苷I对照溶液A(0.0998mg/ml)、B(0.499mg/ml)和地榆药材供试品溶液，按0，2，4，6，8小时时间间隔，分别测定地榆皂苷I峰面积，将峰面积积分值和浓度取常用对数后以外标两点法计算含量，结果见表4。
表4日内精密度测定结果
结果表明，本法日内精密度良好。
日间精密度
取日内精密度的对照液和供试液分别在第0、1、2、3天(d)进样，测定地榆皂苷I峰面积，将峰面积积分值和浓度取常用对数后以外标两点法计算含量，结果见表5。
表5日间精密度测定结果
结果表明，本法的日间精密度良好。
(4)加样回收试验
取已知含量的地榆药材粉末(过四号筛)0.2g，精密称定，置100ml的量瓶中，分别精密加入5.020mg/ml的地榆皂苷I对照品溶液1、2、3ml，再用60％乙醇的水溶液补足到80ml，按3.7项下供试品溶液制备方法制备，即得。精密量取续滤液10μl进样，记录峰面积，将峰面积积分值和浓度取常用对数后以外标两点法计算含量，结果见表6。
表6回收率测定结果
结果表明本法加样回收率符合要求，准确度较高。
实施例6地榆升白片中地榆皂苷I的含量测定
含量测定方法：
(1)色谱条件与系统适应性试验：用碳十八烷基键合硅胶为固定相(4.6×150mm，粒径小于5μm)，甲醇-水(64∶36)等度洗脱，流速1.0ml/min，柱温25℃，ELSD(Alltech 2000)漂移管温度为85℃，气体(空气)流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103；
(2)供试品溶液的制备：取地榆升白片(成都地奥制药集团天府药业生产，批号070301)20片，精密称定，研细，精密称取适量(约相当于地榆皂苷I2mg)，置150ml具塞锥形瓶中，准确加入50％乙醇20.00ml，摇匀，称重，超声10min，放至室温，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，离心取上清液即得；
(3)对照品溶液的制备：取地榆皂苷I对照品约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加50％乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和20.00ml至50ml量瓶中，加50％乙醇的水溶液稀释定容至刻度，摇匀即制成每1ml含0.05mg和0.2mg的对照品溶液；
(4)含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷I的含量为0.18mg/片。
方法验证：
(1)专属性：在选定的色谱条件下，地榆升白片中地榆皂苷I有较强的色谱峰和较好的分离度，溶剂和辅料不干扰测定，见图6。结果表明，本方法具有较高的专属性。
(2)线性
精密配制浓度为0.05014mg/ml、0.1003mg/ml、0.2006mg/ml、0.4011mg/ml、0.5014mg/ml的地榆皂苷I对照品溶液各10ml，准确吸取20μl注入液相色谱仪，按上述条件进行测定，以峰面积积分值的常用对数为纵坐标，地榆皂苷I溶液浓度的常用对数为横坐标进行直线回归，线性方程为logA＝1.6549logC+7.0118(r＝1)，表明地榆皂苷I在1.003μg～10.03μg范围内具有良好线性关系。
表7线性关系测定结果
(3)重复性
分别取地榆药材升白片粉末(批号070301，约相当于地榆皂苷I 2mg)约1g，精密称定，按供试品制备方法配制5份，精密吸取续滤液20μl进样，测定地榆皂苷I的峰面积，将峰面积积分值和浓度取常用对数后以外标两点法计算含量，结果见表8。
表8重复性测定结果
结果表明，本法重复性良好。
(4)加样回收试验
取已知含量(地榆皂苷I 0.18％)的地榆升白片粉末(批号070301，约相当于地榆皂苷I 1mg)0.5g，精密称定，置150ml的锥形瓶瓶中，分别精密加入0.3008mg/ml的地榆皂苷I对照品溶液1、3、10ml，再用50％乙醇补足到20ml，按供试品溶液制备方法制备，即得。精密量取续滤液20μl进样，记录峰面积，将峰面积积分值和浓度取常用对数后以外标两点法计算含量，结果见表9。
表9回收率测定结果
结果表明本法加样回收率符合要求，准确度较高。
实施例7地榆升白片中地榆皂苷I的含量均匀度测定
(1)色谱条件与系统适应性试验：用碳十八烷基键合硅胶为固定相(4.6×150mm，粒径小于5μm)，甲醇-水(64∶36)等度洗脱，流速1.0ml/min，柱温25℃，ELSD(Alltech 2000)漂移管温度为85℃，气体(空气)流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103；
(2)供试品溶液的制备：取地榆升白片(成都地奥制药集团天府药业生产，批号070301)10片，分别精密称定，置5ml离心管中，准确加入50％乙醇2.00ml，摇匀，称重，超声10min，放至室温，用50％乙醇补足减失的重量，摇匀，离心取上清液即得；
(3)对照品溶液的制备：取地榆皂苷I对照品约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加50％乙醇溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和20.00ml至50ml量瓶中，加50％乙醇稀释定容至刻度，摇匀即制成每1ml含0.05mg和0.2mg的对照品溶液；
(4)含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液20μl和供试品溶液20μl，注入液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法分别计算10片中地榆皂苷I的含量，其RSD值应不超过7.0％(表10，图7)。
表10含量均匀度测定结果
实施例8地榆总皂苷提取物中地榆皂苷I的含量测定
(1)色谱条件与系统适应性试验：用碳十八烷基键合硅胶为固定相(4.6×150mm，粒径小于3.5μm)，甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～13min 64％甲醇的水溶液，流速1.2ml/min，柱温25℃，ELSD(Alltech 2000ES)漂移管温度为100℃，气体(空气)流速3.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于4×103；
(2)供试品溶液的制备：取地榆药材粗粉适量，加10倍体积水煎煮，每次1h，共煮三次，过滤，合并滤液，上大孔吸附树脂，蒸馏水充分洗涤，后用70％乙醇洗脱，合并洗脱液并浓缩，干燥即得地榆总皂苷粉末(080604)。取地榆总苷粉末约50mg，精密称定，置100ml量瓶中，加入60％乙醇60ml，摇匀，超声5min，放至室温，定容至刻度，摇匀，滤过取续滤液进样分析或离心取上清液即得；
(3)对照品溶液的制备：取地榆皂苷I对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中，加60％乙醇的水溶液稀释定容至刻度，摇匀即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
(4)含量测定方法：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷I的含量为50％(图8)。
实施例9地榆皂苷I对照品的纯度测定
(1)色谱条件与系统适应性试验：用碳十八烷基键合硅胶为固定相(4.6×150mm，粒径小于5μm)，甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0～7min 60％→64％甲醇的水溶液，7～12min 64％甲醇的水溶液，12～20min64％→80％甲醇的水溶液，20～27min 80％甲醇的水溶液，流速1.0ml/min，柱温25℃，ELSD(Alltech 2000ES)漂移管温度为85℃，气体(空气)流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷I计算应不低于9000；
(2)样品溶液的制备：取地榆皂苷I适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，即得；
(3)纯度检查方法：精密吸取样品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，按峰面积归一化法计算地榆皂苷I的纯度大于99.0％(图9)。
实施例10地榆皂苷I对照品的制备
取地榆药材粗粉适量，加10倍体积水煎煮，每次1h，共煮三次，过滤，合并滤液，上大孔吸附树脂，蒸馏水充分洗涤，后用70％乙醇洗脱，合并洗脱液并浓缩，干燥即得地榆总皂苷粉末。用甲醇(1g∶5ml)加热回流10min，趁热过滤，待滤液冷至室温，搅拌下滴加水，至出现浑浊，且不消失，停止，静置12h，抽滤，用30％乙醇洗涤沉淀，收集，真空干燥，粉碎，得第一次重结晶产物。再反复重结晶一至两次，得地榆皂苷I。
Claims (9)
1.一种地榆皂苷Ⅰ的含量测定方法，其特征在于，所述方法包括：
1）分别取地榆皂苷I的标准品和含有地榆皂苷I的供试品溶于乙醇水溶液中，分别制成标准溶液和供试品溶液；
2）分别取等体积的标准溶液和供试品溶液注入高效液相色谱仪中，然后测量标准品溶液和供试品溶液的峰面积并进行计算，即得供试品中的地榆皂苷I的含量；
其中，所述高效液相色谱仪的固定相为碳十八烷基键合硅胶, 所述碳十八烷基键合硅胶的粒径为≤5μm；流动相为甲醇-水溶液，所述甲醇－水的溶液为：以体积百分比计， 50-80％甲醇的水溶液的等度溶液。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述的碳十八烷基键合硅胶的粒径为5μm、4μm或3.5μm。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，所述乙醇的水溶液为以体积计50%-60%乙醇的水溶液。
4.一种利用权利要求1-3任一所述的方法测量地榆药材中地榆皂苷Ⅰ的含量的方法，其特征在于，所述方法包括：
1）供试品溶液的制备：取地榆药材，粉碎，过四号筛，约0.4g，精密称定，置100ml量瓶中,加入60%乙醇的水溶液80ml,摇匀,超声15min,放至室温,定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液进样分析或离心取上清液即得；
对照品溶液的制备：取地榆皂苷Ⅰ对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶液稀释定容至刻度,摇匀即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
2）含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷Ⅰ的含量；
其中，高效液相色谱以碳十八烷基键合硅胶为固定相，粒径小于或等于5μm，流动相为体积浓度为50%~80%的甲醇水等度洗脱液或甲醇体积浓度为60-64%的甲醇水混合溶液的梯度洗脱液，洗脱程序为0~7min 60%→64%甲醇的水溶液，7~13min 64%甲醇的水溶液，流速0.8 ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为80℃，气体流速2.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷Ⅰ计算应不低于4×103。
5.一种利用权利要求1-3任一所述的方法测量地榆皂苷提取物中地榆皂苷Ⅰ的含量的方法，其特征在于，所述方法包括：
1）供试品溶液的制备：取地榆总皂苷粉末50mg，精密称定，置100ml量瓶中,加入60%乙醇60ml,摇匀,超声5min,放至室温,定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液或离心取上清液进样分析；
对照品溶液的制备：取地榆皂苷Ⅰ对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶液稀释定容至刻度,摇匀即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
2）含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷Ⅰ的含量；
其中，高效液相色谱仪用碳十八烷基键合硅胶为固定相，粒径小于或等于5μm，流动相为体积浓度为50%~80%的甲醇水等度洗脱液或以甲醇体积浓度为60-64%的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0~7min 60%→64%甲醇的水溶液，7~13min 64%甲醇的水溶液，流速1.2 ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为100℃，气体流速3.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷Ⅰ计算应不低于4×103。
6.如权利要求5所述的方法，其特征在于，所述方法包括：
1）供试品溶液的制备：取地榆总皂苷粉末50mg，精密称定，置100ml量瓶中,加入60%乙醇60ml,摇匀,超声5min,放至室温,定容至刻度，摇匀，滤过，取续滤液或离心取上清液进样分析；
对照品溶液的制备：取地榆皂苷Ⅰ对照品约50mg，精密称定，置50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶液溶解并定容至刻度，摇匀；分别精密量取5.00ml和25.00ml至50ml量瓶中,加60%乙醇的水溶液稀释定容至刻度,摇匀即制成每1ml含0.1mg和0.5mg的对照品溶液；
2）含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液10μl，注入高效液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷Ⅰ的含量；
其中，高效液相色谱仪用碳十八烷基键合硅胶为固定相，粒径小于或等于5μm，以甲醇-水体积比为64：36的混合溶液为等度洗脱液，或以甲醇体积浓度为60-64%的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0~7min 60%→64%甲醇的水溶液，7~13min 64%甲醇的水溶液，流速1.2 ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为100℃，气体流速3.5L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷Ⅰ计算应不低于4×103。
7.一种利用权利要求1-3任一所述的方法测量地榆片剂中地榆皂苷Ⅰ的含量的方法，其特征在于，所述方法包括：
1）供试品溶液的制备：取地榆升白片20片，精密称定，研细，精密称取相当于2mg地榆皂苷Ⅰ的量，置150ml具塞锥形瓶中，准确加入50%乙醇的水溶液20ml，摇匀，称重，超声10min，放至室温，用50%乙醇的水溶液补足减失的重量，摇匀，离心取上清液即得；
对照品溶液的制备：取在105℃干燥至恒重的地榆皂苷Ⅰ对照品适量，加50%乙醇的水溶液溶解并定容制成每1ml含0.05mg和0.2mg的对照品溶液；
2）含量测定：分别精密吸取对照品溶液和供试品溶液20μl，注入高校液相色谱仪，测定对照品溶液及供试品溶液的峰面积，将峰面积积分值及浓度分别取常用对数后，按外标两点法计算地榆皂苷Ⅰ的含量；
其中，高效液相色谱仪，用粒径小于或等于5μm的碳十八烷基键合硅胶为固定相，流动相为体积浓度为50%~80%的甲醇水等度洗脱液或以甲醇体积浓度为60-64%的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0~7min 60%→64%甲醇的水溶液，7~13min 64%甲醇的水溶液，流速1.0 ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为85℃，空气流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷Ⅰ计算应不低于4×103。
8.一种地榆皂苷Ⅰ的纯度测定方法，其特征在于，所述方法包括：
1）样品溶液的制备：取地榆皂苷Ⅰ适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，即得；
2）纯度测量：精密吸取样品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，按峰面积归一化法计算地榆皂苷Ⅰ的纯度；
其中，所述高效液相色谱仪用碳十八烷基键合硅胶为固定相，粒径小于或等于5μm，流动相为体积浓度为50%~80%的甲醇水等度洗脱液或甲醇体积浓度为60-64%的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0~7min 60%→64%甲醇的水溶液，7~12min 64%甲醇的水溶液，12~20min 64%→80%甲醇的水溶液，20~27min 80%甲醇的水溶液，流速1.0 ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为85℃，气体（空气）流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷Ⅰ计算应不低于4×103。
9.如权利要求8所述的方法，其特征在于，所述方法包括：
1）样品溶液的制备：取地榆皂苷Ⅰ适量，加甲醇溶解并稀释成每1ml含0.5mg的溶液，即得；
2）纯度测量：精密吸取样品溶液10μl，注入液相色谱仪，测定，按峰面积归一化法计算地榆皂苷Ⅰ的纯度；
其中，所述高效液相色谱仪用碳十八烷基键合硅胶为固定相，粒径小于或等于5μm，以甲醇-水体积比为64：36的混合溶液为等度洗脱液，或甲醇体积浓度为60-64%的甲醇-水混合溶剂梯度洗脱，洗脱程序为0~7min 60%→64%甲醇的水溶液，7~12min 64%甲醇的水溶液，12~20min 64%→80%甲醇的水溶液，20~27min 80%甲醇的水溶液，流速1.0 ml/min，柱温25℃，ELSD漂移管温度为85℃，气体（空气）流速2.8L/min，不分流模式，理论塔板数按地榆皂苷Ⅰ计算应不低于4×103。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN2011100302883A CN102721773A (zh) | 2009-05-26 | 2010-04-30 | 地榆皂苷i的含量测定方法 |
Applications Claiming Priority (3)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN200910059428.2 | 2009-05-26 | ||
| CN200910059428 | 2009-05-26 | ||
| CN2011100302883A CN102721773A (zh) | 2009-05-26 | 2010-04-30 | 地榆皂苷i的含量测定方法 |
Related Parent Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2010101707280A Division CN101810705B (zh) | 2009-05-26 | 2010-04-30 | 地榆皂苷ⅰ的含量测定方法 |
Publications (1)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN102721773A true CN102721773A (zh) | 2012-10-10 |
Family
ID=46947593
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN2011100302883A Pending CN102721773A (zh) | 2009-05-26 | 2010-04-30 | 地榆皂苷i的含量测定方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN102721773A (zh) |
Cited By (6)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103913522A (zh) * | 2013-01-06 | 2014-07-09 | 成都中医药大学 | 从地榆中分离三种鞣质单体组分的方法 |
| CN107064322A (zh) * | 2016-12-01 | 2017-08-18 | 成都中医药大学 | 同时测定地榆或地榆类制剂中没食子酸和地榆皂苷i含量的hplc波长切换法 |
| CN109975437A (zh) * | 2017-12-27 | 2019-07-05 | 四川科瑞德制药股份有限公司 | 地榆或含有地榆的产品中地榆皂苷i的分析方法 |
| CN112649534A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-13 | 株洲市食品药品检验所 | 一种无患子三萜类皂苷成分的指纹图谱检测方法 |
| CN113189211A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-07-30 | 株洲市食品药品检验所 | 一种无患子三萜类皂苷成分含量测定方法 |
| CN116359355A (zh) * | 2021-12-27 | 2023-06-30 | 江阴天江药业有限公司 | 地榆皂苷i在枸骨叶样品质量检测中的应用以及相应的质量检测方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101810705B (zh) * | 2009-05-26 | 2011-05-18 | 成都地奥制药集团有限公司 | 地榆皂苷ⅰ的含量测定方法 |
-
2010
- 2010-04-30 CN CN2011100302883A patent/CN102721773A/zh active Pending
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101810705B (zh) * | 2009-05-26 | 2011-05-18 | 成都地奥制药集团有限公司 | 地榆皂苷ⅰ的含量测定方法 |
Non-Patent Citations (4)
| Title |
|---|
| 张东方等: "HPLC法测定不同地区地榆中地榆苷-Ⅰ的含量", 《云南中医学院学报》, vol. 32, no. 1, 28 February 2009 (2009-02-28), pages 37 - 2 * |
| 沙明等: "DNA指纹谱与HPLC指纹谱对中药地榆质量评价研究", 《中国药学杂志》, vol. 37, no. 11, 30 November 2002 (2002-11-30), pages 815 - 818 * |
| 罗艳等: "地榆中三萜类成分及其抗炎活性研究", 《中国药物化学杂志》, vol. 18, no. 2, 30 April 2008 (2008-04-30), pages 138 - 141 * |
| 解军波等: "HPLC-ELSD法测定四季青中三萜及其皂苷的含量", 《药学学报》, vol. 38, no. 7, 31 December 2003 (2003-12-31), pages 535 * |
Cited By (7)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN103913522A (zh) * | 2013-01-06 | 2014-07-09 | 成都中医药大学 | 从地榆中分离三种鞣质单体组分的方法 |
| CN107064322A (zh) * | 2016-12-01 | 2017-08-18 | 成都中医药大学 | 同时测定地榆或地榆类制剂中没食子酸和地榆皂苷i含量的hplc波长切换法 |
| CN107064322B (zh) * | 2016-12-01 | 2019-12-31 | 成都中医药大学 | 同时测定地榆或地榆类制剂中没食子酸和地榆皂苷i含量的hplc波长切换法 |
| CN109975437A (zh) * | 2017-12-27 | 2019-07-05 | 四川科瑞德制药股份有限公司 | 地榆或含有地榆的产品中地榆皂苷i的分析方法 |
| CN112649534A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-04-13 | 株洲市食品药品检验所 | 一种无患子三萜类皂苷成分的指纹图谱检测方法 |
| CN113189211A (zh) * | 2020-12-30 | 2021-07-30 | 株洲市食品药品检验所 | 一种无患子三萜类皂苷成分含量测定方法 |
| CN116359355A (zh) * | 2021-12-27 | 2023-06-30 | 江阴天江药业有限公司 | 地榆皂苷i在枸骨叶样品质量检测中的应用以及相应的质量检测方法 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN101167788B (zh) | 一种用于久病虚损,气阴不足的贞芪扶正中药制剂质控方法 | |
| CN105606734A (zh) | 一种快速高分离度液相色谱检测金银花和山银花药材的方法 | |
| CN102721773A (zh) | 地榆皂苷i的含量测定方法 | |
| CN108802255B (zh) | 测定复方制剂中灵芝三萜类成分含量的方法 | |
| CN101810705B (zh) | 地榆皂苷ⅰ的含量测定方法 | |
| CN107643345A (zh) | 一种天麻药材及其饮片与提取物的质量控制方法 | |
| CN103235050A (zh) | 三七总皂苷注射剂的质量控制方法 | |
| Xie et al. | Simultaneous determination of six main components in Bushen Huoxue prescription by HPLC-CAD | |
| CN104597139B (zh) | Hplc同时测定裸花紫珠制剂中三种苯乙醇苷类成分的方法 | |
| CN107064322A (zh) | 同时测定地榆或地榆类制剂中没食子酸和地榆皂苷i含量的hplc波长切换法 | |
| CN101513467A (zh) | 皮肤病血毒制剂的质量控制方法 | |
| CN110231412A (zh) | 绞股蓝中皂苷含量的检测方法 | |
| CN101502549B (zh) | 一种三七总皂苷胶囊及其制备方法和含量测定方法 | |
| CN103063789A (zh) | 同时检测大叶蒟中12个酰胺类生物碱的液相分析方法 | |
| CN103575821A (zh) | 一种糖敏灵制剂中14种化学成分的检测方法 | |
| CN105954432B (zh) | 一种银杏内酯b含量的检测方法 | |
| CN108490083A (zh) | 苏黄止咳胶囊的质量检测方法 | |
| CN102749407B (zh) | 一种中药组合物中知母皂苷bⅱ的含量测定方法 | |
| CN104849384B (zh) | 建立健肝乐制剂指纹图谱的方法及其应用 | |
| CN103344738A (zh) | 九味镇心颗粒的检测方法 | |
| CN101482543B (zh) | 一种谷维素的高效液相色谱分析方法 | |
| CN100445730C (zh) | 中药的柱分离洗脱液洗脱起始点或终点的快速监控方法 | |
| CN103293261A (zh) | 白及药材的含量测定方法 | |
| CN108918721A (zh) | 一种款冬花中绿原酸含量的测定方法 | |
| CN105334273B (zh) | 一种地枫皮的检测方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| C10 | Entry into substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| C02 | Deemed withdrawal of patent application after publication (patent law 2001) | ||
| WD01 | Invention patent application deemed withdrawn after publication |
Application publication date: 20121010 |