CN102321128A - 何首乌多种活性成分联合提取纯化技术 - Google Patents
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Abstract
本发明何首乌多种活性成分联合提取纯化技术,涉及药用植物多种活性成分的联合提取纯化技术。以70-80%的乙醇作为提取溶剂可将何首乌中的二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚最大限度地从何首乌中提取到溶剂中来,并与残渣中淀粉分离。利用二苯乙烯苷与大黄素和大黄酚的水溶性差异,以水作为溶剂可使二苯乙烯苷自醇提物中与大黄素和大黄酚分离,得到其粗品。先后以5%NaCO3和5%NaOH溶液作为溶剂,可将大黄素和大黄酚分别自醇提物中分离出来,经酸沉,可得大黄素与大黄酚粗品。对何首乌醇提残渣用水清洗,水洗液经沉淀可得纯度为85%-87%的淀粉。本发明具有成本低、效率高、无污染、产品纯度高的特点。
Description
技术领域
本发明涉及药用植物多种活性成分的联合提取纯化技术,具体为一种何首乌中二苯乙烯苷、大黄素、大黄酚和淀粉的联合提取纯化技术。
技术背景
对何首乌中不同活性成分进行单一成分提取纯化的方法多有报道,但对何首乌中多种活性成分进行联合提取和分离纯化的综合方法未见报道。在已报道的何首乌单一成分提取纯化方法中,传统的提取方式是采用溶剂浸取法或辅助超声法,提取后用酯或醚萃取并浓缩为浸膏,最后用柱层析方法对浸膏混合物进行纯化。除了传统技术或和传统技术类似的醇提后直接柱层析技术外,还包括超临界流体萃取技术、高速逆流色谱技术等。显然,在已报道的提取纯化方法中,只针对何首乌中的某一成分进行提取,忽略了其它成分,提取溶剂的利用率低。而纯化步骤采用柱分离技术,在工业化制备时成本较高,不易实现大量制备。
发明内容
本发明所要解决的技术问题是提供一种可同时提取纯化何首乌中二苯乙烯苷、大黄素、大黄酚和淀粉的成本低、产品纯度高可用于大量生产并且环境友好的联合制备技术。
本发明采用技术方案如下,何首乌多种活性成分联合提取纯化技术,按照下述步骤进行:
(1)将何首乌粉碎为70-80目的颗粒,按照何首乌与乙醇的比例1/10-14(g /mL)的比例加入质量浓度为70-80%乙醇,在38-42℃温度下以1kW超声功率回流提取1.8-2.2h;
(2)提取液过滤,残渣用乙醇洗一次,洗液合并到提取液中;在40-50℃温度下将提取液减压浓缩为稠膏并回收提取溶剂,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可被无损耗地浓缩到稠膏中;用8-10倍体积的蒸馏水溶解稠膏并过滤,滤渣待用。滤液减压浓缩为原体积的1/4-1/6,即为二苯乙烯苷粗品;
(3)向水提液滤渣中加入适量乙醚溶解滤渣,过滤后用等体积乙醚再次冲洗滤渣,合并滤液;将滤液体积2-3倍的5% NaHCO3溶液分2-3次加入滤液除杂后,将乙醚层体积2-3倍的5% Na2CO3溶液分2-3次加入其中萃取;取出水层,加入HCl调pH为3-4,滤出沉淀,即为大黄素粗品;取出乙醚层,将其体积2-3倍的5% NaOH溶液分2-3次加入萃取;取出水层,加入HCl调pH为3-4,滤出沉淀,即为大黄酚粗品,乙醚可回收再利用;
(4)将何首乌乙醇提取后的残渣用清水反复清洗3次,静置清洗液,待溶液完全澄清后倒出上清液,将沉淀于45℃烘干,过100目筛即得到何首乌淀粉产品;
(5)按照何首乌的二苯乙烯苷粗品与乙醚的比例为1/18-20(g /mL)的比例将乙醚分2-3次加入何首乌的二苯乙烯苷粗品中除杂,乙醚层可回收再利用;向水相溶液加入2-3倍其体积的乙酸乙酯,回流提取4-4.5h;将乙酸乙酯层在40-50℃温度下浓缩至原体积的1/4-1/6,加热使浓缩液中结晶溶解并过滤,滤液放冷析晶,滤出晶体;用热乙酸乙酯溶解晶体,重复析晶、滤晶,如此反复2次以上,挥干溶剂,得到纯度为76.5%-78.9%的二苯乙烯苷产品。
(6)将大黄素和大黄酚粗品用乙酸乙酯进行加热溶解,放冷析晶,滤晶的重结晶处理2次以上,挥去溶剂,得到纯度为80.7%-82.9%的大黄素产品和78.2%-83.0%的大黄酚产品;提纯过程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
本发明的积极效果如下:在一个提取过程中可同时提取出何首乌中的4种成分,并实现了二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚与何首乌淀粉的分离;通过优化的浓缩条件使得二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚无损耗地被浓缩到稠膏中并回收溶剂;利用二苯乙烯苷与大黄素和大黄酚水溶性的差异,采用水提何首乌乙醇提取物的方法实现了二苯乙烯苷与大黄素和大黄酚的分离;利用大黄素与大黄酚pKa值的差异,以5% NaCO3和5% NaOH溶液作为溶剂先后萃取二苯乙烯苷水提残渣乙醚提取液的方法实现了大黄素与大黄酚的分离。用乙酸乙酯对各粗品进行加热溶解、放冷析晶和滤晶的重结晶处理得到纯度高的产品;整个流程无有机溶剂排放,环境友好。
具体实施方式
实施例1
将何首乌粉碎为70目的颗粒,按照1g何首乌14mL的比例加入80%乙醇,在42℃温度下以1kW超声功率回流提取2h。二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚的提取率分别为90.6%、88.2%和86.4%。提取液过滤,残渣用乙醇洗一次,洗液合并到提取液中。在40℃温度下将提取液减压浓缩为稠膏并回收提取溶剂,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可被无损耗地浓缩到稠膏中。用8倍体积的蒸馏水溶解稠膏并过滤,滤渣待用。滤液减压浓缩为原体积的1/6,即为二苯乙烯苷粗品。向水提液滤渣中加入10mL乙醚溶解滤渣,过滤后用等体积乙醚再次冲洗滤渣,合并滤液。将滤液体积2倍的5% NaHCO3溶液分2次加入滤液除杂后,将乙醚层体积2倍的5% Na2CO3溶液分2次加入其中萃取。取出水层,加入HCl调pH为3,滤出沉淀,即为大黄素粗品。取出乙醚层,将其体积2倍的5% NaOH溶液分2次加入萃取。取出水层,加入HCl调pH为3,滤出沉淀,即为大黄酚粗品,乙醚可回收再利用。将何首乌乙醇提取后的残渣用清水反复清洗3次,静置清洗液,待溶液完全澄清后倒出上清液,将沉淀于45℃烘干,过100目筛即得到纯度为86%的何首乌淀粉产品。将20mL乙醚分2次加入得自1g何首乌的二苯乙烯苷粗品中除杂,乙醚层可回收再利用。向水相溶液加入2倍其体积的乙酸乙酯,回流提取4h。将乙酸乙酯层在40℃温度下浓缩至原体积的1/6,加热使浓缩液中结晶溶解并过滤,滤液放冷析晶,滤出晶体。用热乙酸乙酯溶解晶体,重复析晶、滤晶,如此反复2次,挥干溶剂,得到纯度为77.6%的二苯乙烯苷产品。将大黄素和大黄酚粗品用乙酸乙酯进行加热溶解,放冷析晶,滤晶的重结晶处理2次,挥去溶剂,得到纯度为80.7%的大黄素产品和79.7%的大黄酚产品。提纯过程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
实施例2
将何首乌粉碎为80目的颗粒,按照1g何首乌12mL的比例加入80%乙醇,在40℃温度下以1kW超声功率回流提取2.2h。二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚的提取率分别为91.2%、88.3%和85.7%。提取液过滤,残渣用乙醇洗一次,洗液合并到提取液中。在45℃温度下将提取液减压浓缩为稠膏并回收提取溶剂,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可被无损耗地浓缩到稠膏中。用10倍体积的蒸馏水溶解稠膏并过滤,滤渣待用。滤液减压浓缩为原体积的1/4,即为二苯乙烯苷粗品。向水提液滤渣中加入8mL乙醚溶解滤渣,过滤后用等体积乙醚再次冲洗滤渣,合并滤液。将滤液体积3倍的5% NaHCO3溶液分3次加入滤液除杂后,将乙醚层体积2倍的5% Na2CO3溶液分2次加入其中萃取。取出水层,加入HCl调pH为3.5,滤出沉淀,即为大黄素粗品。取出乙醚层,将其体积3倍的5% NaOH溶液分3次加入萃取。取出水层,加入HCl调pH为3.5,滤出沉淀,即为大黄酚粗品,乙醚可回收再利用。将何首乌乙醇提取后的残渣用清水反复清洗3次,静置清洗液,待溶液完全澄清后倒出上清液,将沉淀于45℃烘干,过100目筛即得到纯度为85%的何首乌淀粉产品。将19mL乙醚分2次加入得自1g何首乌的二苯乙烯苷粗品中除杂,乙醚层可回收再利用。向水相溶液加入3倍其体积的乙酸乙酯,回流提取4.5h。将乙酸乙酯层在45℃温度下浓缩至原体积的1/4,加热使浓缩液中结晶溶解并过滤,滤液放冷析晶,滤出晶体。用热乙酸乙酯溶解晶体,重复析晶、滤晶,如此反复2次,挥干溶剂,得到纯度为78.2%的二苯乙烯苷产品。将大黄素和大黄酚粗品用乙酸乙酯进行加热溶解,放冷析晶,滤晶的重结晶处理2次,挥去溶剂,得到纯度为82.9%的大黄素产品和80.6%的大黄酚产品。提纯过程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
实施例3
将何首乌粉碎为80目的颗粒,按照1g何首乌10mL的比例加入80%乙醇,在38℃温度下以1kW超声功率回流提取1.8h。二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚的提取率分别为88.3%、86.7%和84.3%。提取液过滤,残渣用乙醇洗一次,洗液合并到提取液中。在50℃温度下将提取液减压浓缩为稠膏并回收提取溶剂,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可被无损耗地浓缩到稠膏中。用9倍体积的蒸馏水溶解稠膏并过滤,滤渣待用。滤液减压浓缩为原体积的1/5,即为二苯乙烯苷粗品。向水提液滤渣中加入9mL乙醚溶解滤渣,过滤后用等体积乙醚再次冲洗滤渣,合并滤液。将滤液体积3倍的5% NaHCO3溶液分2次加入滤液除杂后,将乙醚层体积3倍的5% Na2CO3溶液分2次加入其中萃取。取出水层,加入HCl调pH为4,滤出沉淀,即为大黄素粗品。取出乙醚层,将其体积3倍的5% NaOH溶液分2次加入萃取。取出水层,加入HCl调pH为4,滤出沉淀,即为大黄酚粗品,乙醚可回收再利用。将何首乌乙醇提取后的残渣用清水反复清洗3次,静置清洗液,待溶液完全澄清后倒出上清液,将沉淀于45℃烘干,过100目筛即得到纯度为87%的何首乌淀粉产品。将18mL乙醚分3次加入得自1g何首乌的二苯乙烯苷粗品中除杂,乙醚层可回收再利用。向水相溶液加入2.5倍其体积的乙酸乙酯,回流提取4.3h。将乙酸乙酯层在50℃温度下浓缩至原体积的1/5,加热使浓缩液中结晶溶解并过滤,滤液放冷析晶,滤出晶体。用热乙酸乙酯溶解晶体,重复析晶、滤晶,如此反复2次,挥干溶剂,得到纯度为76.5%的二苯乙烯苷产品。将大黄素和大黄酚粗品用乙酸乙酯进行加热溶解,放冷析晶,滤晶的重结晶处理2次,挥去溶剂,得到纯度为81.4%的大黄素产品和78.2%的大黄酚产品。提纯过程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
实施例4
将何首乌粉碎为80目的颗粒,取40g何首乌,加入80%乙醇480mL,在40℃温度下以1kW超声功率回流提取2h。二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚的提取率分别为92.3%、89.6%和87.2%。提取液过滤,残渣用乙醇洗一次,洗液合并到提取液中。在50℃温度下将提取液减压浓缩为30mL稠膏并回收提取溶剂,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可被无损耗地浓缩到稠膏中。用300mL蒸馏水溶解稠膏并过滤,滤渣待用。滤液减压浓缩为原体积的1/5,即为二苯乙烯苷粗品。向水提液滤渣中加入350mL乙醚溶解滤渣,过滤后用等体积乙醚再次冲洗滤渣,合并滤液。将5% NaHCO3溶液2100mL分3次加入滤液除杂后,将5% Na2CO3溶液2100mL分3次加入乙醚层萃取。取出水层,加入HCl调pH为4,滤出沉淀,即为大黄素粗品。将5% NaOH溶液2100mL分3次加入乙醚层萃取。取出水层,加入HCl调pH为4,滤出沉淀,即为大黄酚粗品,乙醚可回收再利用。将何首乌乙醇提取后的残渣用清水反复清洗3次,静置清洗液,待溶液完全澄清后倒出上清液,将沉淀于45℃烘干,过100目筛即得到纯度为85%的何首乌淀粉产品9.49g。将750mL乙醚分3次加入上述二苯乙烯苷粗品中除杂,乙醚层可回收再利用。向水相溶液加入150mL乙酸乙酯,回流提取4.5h。将乙酸乙酯层在50℃温度下浓缩至原体积的1/5,加热使浓缩液中结晶溶解并过滤,滤液放冷析晶,滤出晶体。用热乙酸乙酯溶解晶体,重复析晶、滤晶,如此反复2次,挥干溶剂,得到纯度为78.9%的二苯乙烯苷产品0.114g。将大黄素和大黄酚粗品用乙酸乙酯进行加热溶解,放冷析晶,滤晶的重结晶处理2次,挥去溶剂,得到纯度为81.9%的大黄素产品11.1mg和83.2%的大黄酚产品0.9mg。提纯过程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
Claims (1)
1.何首乌多种活性成分联合提取纯化技术,其特征在于按照下述步骤进行:
(1)将何首乌粉碎为70-80目的颗粒,按照何首乌与乙醇的比例1/10-14的比例加入质量浓度为70-80%乙醇,在38-42℃温度下以1kW超声功率回流提取1.8-2.2h;
(2)提取液过滤,残渣用乙醇洗一次,洗液合并到提取液中;在40-50℃温度下将提取液减压浓缩为稠膏并回收提取溶剂,二苯乙烯苷、大黄素和大黄酚可被无损耗地浓缩到稠膏中;用8-10倍体积的蒸馏水溶解稠膏并过滤,滤渣待用,
滤液减压浓缩为原体积的1/4-1/6,即为二苯乙烯苷粗品;
(3)向水提液滤渣中加入适量乙醚溶解滤渣,过滤后用等体积乙醚再次冲洗滤渣,合并滤液;将滤液体积2-3倍的5% NaHCO3溶液分2-3次加入滤液除杂后,将乙醚层体积2-3倍的5% Na2CO3溶液分2-3次加入其中萃取;取出水层,加入HCl调pH为3-4,滤出沉淀,即为大黄素粗品;取出乙醚层,将其体积2-3倍的5% NaOH溶液分2-3次加入萃取;取出水层,加入HCl调pH为3-4,滤出沉淀,即为大黄酚粗品,乙醚可回收再利用;
(4)将何首乌乙醇提取后的残渣用清水反复清洗3次,静置清洗液,待溶液完全澄清后倒出上清液,将沉淀于45℃烘干,过100目筛即得到何首乌淀粉产品;
(5)按照何首乌的二苯乙烯苷粗品与乙醚的比例为1/18-20的比例将乙醚分2-3次加入何首乌的二苯乙烯苷粗品中除杂,乙醚层可回收再利用;向水相溶液加入2-3倍其体积的乙酸乙酯,回流提取4-4.5h;将乙酸乙酯层在40-50℃温度下浓缩至原体积的1/4-1/6,加热使浓缩液中结晶溶解并过滤,滤液放冷析晶,滤出晶体;用热乙酸乙酯溶解晶体,重复析晶、滤晶,如此反复2次以上,挥干溶剂,得到纯度为76.5%-78.9%的二苯乙烯苷产品;
(6)将大黄素和大黄酚粗品用乙酸乙酯进行加热溶解,放冷析晶,滤晶的重结晶处理2次以上,挥去溶剂,得到纯度为80.7%-82.9%的大黄素产品和78.2%-83.0%的大黄酚产品;提纯过程使用的乙酸乙酯可回收再利用。
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