CN101558803A - 一种苦丁提取物的提取纯化方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种苦丁提取物的提取纯化方法，它包括下列步骤：第一步：溶剂萃取。茶叶粉碎，目筛；用乙醇作为溶剂，加入苦丁茶叶重量2－8倍的乙醇加热70～80℃，三次搅拌，过滤，收集滤液；第二步：减压浓缩。合并三次滤液，减压浓缩至比重为1～2，得到乙醇提取浸膏；第三步：水沉。加入浸膏重量的20～50倍的水，搅拌，静置，过滤，去除沉淀和油脂层，得含苦丁提取物的水溶液；第四步：大孔树脂分离纯化。每次操作，洗脱至馏分中不含标志成分阿克苷和异阿克苷成分为止；第五步：浓缩及喷雾干燥。包装，成品。本发明的有益效果是：用水沉法除脂，减少有机溶剂的用量，缩短工艺步骤，节约成本。适用于工业化生产。

Description

一种苦丁提取物的提取纯化方法

技术领域

本发明属于饮料技术领域，具体地说，涉及一种高效低成本的苦丁提取物的提取纯化方法。

背景技术

本发明中的苦丁提取物是指以阿克苷和异阿克苷为标志性物质的一类苷类化合物，是一类重要的活性物质。

已有的植物中苷类物质的提取纯化方法一般有以下几种

1)溶剂萃取法；2)金属离子沉淀法；3)柱层析法(氧化铝，硅胶，大孔吸附树脂等)。

在以上的几种方法中，溶剂萃取法多用于实验室，在进行溶剂处理时，容易出现乳化现象，并需要长时间的稳定才能分层分离，提取物纯度不高，此法不宜对大量样品进行处理。

柱层析法中如果采用氧化铝或者硅胶作填料，其重复利用性差，再生困难。

在提取纯化苷类化合物方面，无论实验室还是生产中，大孔树脂吸附法是最常用的。但是植物中的油脂和亲脂成分或者低极性成分与大孔树脂结合，树脂表面会被涂上一层油脂层，而大孔树脂的洗脱溶剂为水或亲水溶剂，因此当树脂与油脂结合时，就会大大降低大孔树脂的吸附量，严重影响分离效果。

因此在进行树脂处理前，必须用低极性的有机溶剂除去亲脂性成分后方可进行树脂色谱纯化；这样，给工业化生产带来很多问题：1)有机溶剂残留；2)有些有机溶剂为易燃液体，会带来严重的安全问题；3)延长生产时间造成成本上升。

发明内容

本发明在现有技术基础上综合了溶剂萃取和大孔树脂吸附法的优点提出一种新的苦丁提取物的提取纯化方法，大大提高了苦丁提取物的纯度和得率。

本发明的技术方案是：一种苦丁提取物的提取纯化方法，提取纯化方法包括

下列步骤：

第一步：溶剂萃取

(1)、茶叶粉碎，过20目筛；

(2)、用80％～～90％的乙醇作为溶剂，加入苦丁茶叶重量2-8倍的乙醇加热70～80℃，搅拌1.5-8小时，过滤，收集滤液；

(3)、滤渣再加入所述滤渣重量1-6倍的乙醇加热70～80℃，搅拌1-6小时，过滤，收集滤液；

(4)、滤渣再加入所述滤渣重量1-3倍的乙醇加热70～80℃，搅拌1-3小时，过滤，收集滤液；

第二步：减压浓缩

合并三次滤液，减压浓缩至比重为1～2，得到乙醇提取浸膏；

第三步：水沉

加入浸膏重量的20～50倍的水，搅拌，静置一段时间，取上清液过滤，取上清液过滤，去除沉淀和油脂层，得含苦丁提取物的水溶液；

第四步：大孔树脂分离纯化

每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不含标志成分阿克苷和异阿克苷成分为止；

(1)、所述大孔分离柱，以水洗脱至馏分中不再含糖成分为止；

(2)、用50％的乙醇水溶液洗脱所述大孔吸附柱，至馏分中不含标志成分阿克苷和异阿克苷成分为止；

第五步：浓缩及喷雾干燥

(1)、将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽；

(2)、喷雾干燥；

(3)、包装，成品。

本发明的有益效果是：

(1)、整个过程采用乙醇和纯净水，使获取的苦丁提取物安全无污染。

(2)、用水沉法除脂，减少有机溶剂的用量，缩短工艺步骤，节约成本。

(3)、适用于工业化生产。

具体实施方式

下面结合实施例对本发明进一步说明。

实施例1：

苦丁提取物的提取纯化方法，提取纯化方法包括下列步骤：将茶叶粉碎，过20目筛，加5倍量90％乙醇于70℃搅拌加热2小时，过滤，收集滤液。滤液再用3倍量90％乙醇提取，加热1.5小时，过滤，收集滤液。滤液再用2倍量90％乙醇提取，加热1小时，过滤，收集滤液。合并三次滤液，减压浓缩至比重1.2，得到乙醇提取浸膏。以20倍量的水加入提取浸膏中，搅拌，静置；取上清液并过滤，得到含苦丁提取物的水溶液。所述水溶液上大孔树脂吸附柱，每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不再含有标志成分阿克苷和异阿克苷为止，然后用50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱之馏分中不含阿克苷和异阿克苷为止。合并洗脱液，将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽，并喷雾干燥，包装，成品，得到纯度在95％以上的苦丁提取物。

实施例2

苦丁提取物的提取纯化方法，提取纯化方法包括下列步骤：将茶叶粉碎，过20目筛，加5倍量90％乙醇于85℃，搅拌加热2小时，过滤，收集滤液。滤液再用3倍量90％乙醇提取，加热1.5小时，过滤，收集滤液。滤液再用2倍量90％乙醇提取，加热1小时，过滤，收集滤液。合并三次滤液，减压浓缩至比重1.2，得到乙醇提取浸膏。以30倍量的水加入提取浸膏中，搅拌，静置；取上清液并过滤，得到含苦丁提取物的水溶液。所述水溶液上大孔树脂吸附柱，每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不再含有标志成分阿克苷和异阿克苷为止，然后用50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱之馏分中不含阿克苷和异阿克苷为止。合并洗脱液，将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽，并喷雾干燥，包装，成品，得到纯度在95％以上的苦丁提取物。

实施例3

苦丁提取物的提取纯化方法，提取纯化方法包括下列步骤：将茶叶粉碎，过20目筛，加5倍量90％乙醇于80℃，搅拌加热2小时，过滤，收集滤液。滤液再用3倍量90％乙醇提取，加热1.5小时，过滤，收集滤液。滤液再用2倍量90％乙醇提取，加热1小时，过滤，收集滤液。合并三次滤液，减压浓缩至比重1.2，得到乙醇提取浸膏。以50倍量的水加入提取浸膏中，搅拌，静置；取上清液并过滤，得到含苦丁提取物的水溶液。所述水溶液上大孔树脂吸附柱，每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不再含有标志成分阿克苷和异阿克苷为止，然后用50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱之馏分中不含阿克苷和异阿克苷为止。合并洗脱液，将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽，并喷雾干燥，包装，成品，得到纯度在95％以上的苦丁提取物。

实施例4

苦丁提取物的提取纯化方法，提取纯化方法包括下列步骤：将茶叶粉碎，过20目筛，加8倍量90％乙醇于70℃，搅拌加热8小时，过滤，收集滤液。滤液再用3倍量90％乙醇提取，加热6小时，过滤，收集滤液。滤液再用3倍量90％乙醇提取，加热3小时，过滤，收集滤液。合并三次滤液，减压浓缩至比重2，得到乙醇提取浸膏。以50倍量的水加入提取浸膏中，搅拌，静置；取上清液并过滤，得到含苦丁提取物的水溶液。所述水溶液上大孔树脂吸附柱，每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不再含有标志成分阿克苷和异阿克苷为止，然后用50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱之馏分中不含阿克苷和异阿克苷为止。合并洗脱液，将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽，并喷雾干燥，包装，成品，得到纯度在95％以上的苦丁提取物。

实施例5

苦丁提取物的提取纯化方法，提取纯化方法包括下列步骤：将茶叶粉碎，过20目筛，加2倍量80％乙醇于70℃，搅拌加热1.5小时，过滤，收集滤液。滤液再用1倍量80％乙醇提取，加热1小时，过滤，收集滤液。滤液再用1倍量80％乙醇提取，加热1小时，过滤，收集滤液。合并三次滤液，减压浓缩至比重1，得到乙醇提取浸膏。以20倍量的水加入提取浸膏中，搅拌，静置；取上清液并过滤，得到含苦丁提取物的水溶液。所述水溶液上大孔树脂吸附柱，每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不再含有标志成分阿克苷和异阿克苷为止，然后用50％的乙醇水溶液洗脱，洗脱之馏分中不含阿克苷和异阿克苷为止。合并洗脱液，将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽，并喷雾干燥，包装，成品，得到纯度在95％以上的苦丁提取物。

Claims (1)

1、一种苦丁提取物的提取纯化方法，其特征在于：提取纯化方法包括下列步骤：

第一步：溶剂萃取

(1)、茶叶粉碎，过20目筛；

(2)、用80％～～90％的乙醇作为溶剂，加入苦丁茶叶重量2-8倍的乙醇加热70～80℃，搅拌1.5-8小时，过滤，收集滤液；

(3)、滤渣再加入所述滤渣重量1-6倍的乙醇加热70～80℃，搅拌1-6小时，过滤，收集滤液；

(4)、滤渣再加入所述滤渣重量1-3倍的乙醇加热70～80℃，搅拌1-3小时，过滤，收集滤液；

第二步：减压浓缩

合并三次滤液，减压浓缩至比重为1～2，得到乙醇提取浸膏；

第三步：水沉

加入浸膏重量的20～50倍的水，搅拌，静置一段时间，取上清液过滤，取上清液过滤，去除沉淀和油脂层，得含苦丁提取物的水溶液；

第四步：大孔树脂分离纯化

每次操作，均用TLC方法检测，洗脱至馏分中不含标志成分阿克苷和异阿克苷成分为止；

(1)、所述大孔分离柱，以水洗脱至馏分中不再含糖成分为止；

(2)、用50％的乙醇水溶液洗脱所述大孔吸附柱，至馏分中不含标志成分阿克苷和异阿克苷成分为止；

第五步：浓缩及喷雾干燥

(1)、将洗脱液在＜70℃条件下减压浓缩，然后泵入喷雾高位槽；

(2)、喷雾干燥；

(3)、包装，成品。