CN102174041B

CN102174041B - 一种水飞蓟宾及其制备方法

Info

Publication number: CN102174041B
Application number: CN201110071508.7A
Authority: CN
Inventors: 戴军; 武俊明; 徐冰
Original assignee: JIANGSU ZHONGXING PHARMACEUTICAL CO Ltd
Current assignee: JIANGSU ZHONGXING PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date: 2011-03-24
Filing date: 2011-03-24
Publication date: 2016-06-29
Anticipated expiration: 2031-03-24
Also published as: CN102174041A

Abstract

本发明公开了一种高纯度水飞蓟宾及其制备方法，该高纯度水飞蓟宾含量为97%～101%。其制备方法是以水飞蓟壳为原材料，加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮，再将总黄酮经溶解、萃取、过滤、干燥即得所述高纯度水飞蓟宾。本发明的优点是以水飞蓟籽壳仁分离技术为基础，将水飞蓟壳作为制备水飞蓟宾的原料，提取总黄酮，再用不同浓度的乙醇分离纯化，并采用重结晶技术制得高纯度水飞蓟宾；由于水飞蓟油99%存在于水飞蓟仁中，因此以水飞蓟壳提取总黄酮，油脂很少，无需传统方法中的使用汽油、石油醚等有机溶剂进行脱脂，减少杂质干扰和分离纯化难度以及环境污染；本发明制备方法相对简单，高纯度水飞蓟宾产品质量及得率大大提高。

Description

一种水飞蓟宾及其制备方法

技术领域

本发明涉及一种水飞蓟宾及其制备方法，特别是一种高纯度水飞蓟宾及其制备方法。

背景技术

水飞蓟宾，化学名称：2α-［2,3-反式-2,3-二氢-3-（4-羟基-3-甲氧基苯基）-2-羟甲基-1,4-苯并二氧六环-6-基］-2,3-二氢-3β,5,7-三羟基-4H-1-苯并吡喃-4-酮-水合物，分子式：C₂₅H₂₂O₁₀·H₂O，分子量：500.47。

水飞蓟宾通常作为原料药，以水飞蓟宾为原料制成的系列产品具有保肝护肝、修复肝细胞膜的作用，经过多年的临床证明该类产品疗效确切，至今未发现有任何毒副作用。随着研究的不断深入，水飞蓟宾的更多重要活性逐步被揭示，现代研究证明，高纯度水飞蓟宾不仅具有保肝护肝作用，还具有抗氧化、抗辐射、抗胃溃疡、抗肿瘤以及预防糖尿病并发症等功效。

水飞蓟宾为多年来一直沿用的活性成分，其来源于水飞蓟籽，而水飞蓟籽中99%以上的水飞蓟宾分布在壳中。由于水飞蓟籽的壳、仁分离技术至今仍是难以实现的技术难题，所以制备水飞蓟宾的方法还是只能采用传统的从水飞蓟籽全籽压榨后的饼粕中提取有效成分，该传统方法的后续分离纯化困难，制备得的水飞蓟宾含量通常为96%左右，始终不能突破98%。高纯度水飞蓟宾只能在实验室中少量获得，其含量远远高于传统工艺生产的水飞蓟宾，价格昂贵。

发明内容

发明目的：针对上述问题，本发明的目的是提供一种高纯度水飞蓟宾。

本发明的另一目的是提供一种高纯度水飞蓟宾制备方法，该制备方法简单，解决了传统水飞蓟宾制备方法中的脱脂困难、分离纯化困难的难题，提高了制得的水飞蓟宾含量。

技术方案：一种高纯度水飞蓟宾，所述高纯度水飞蓟宾质量百分含量为97%～101%。

所述高纯度水飞蓟宾含量是以HPLC法、以干燥品检测得出的质量百分含量。以HPLC法检测本发明产品水飞蓟宾含量，专属性强，检测得的产品含量更准确，

一种高纯度水飞蓟宾的制备方法，该方法包括以下步骤：

（1）以水飞蓟壳为原材料，加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮；所述水飞蓟壳与所述醋酸乙酯的质量比为1∶3～1∶3.2；

（2）总黄酮经溶解、萃取、过滤、干燥即得所述高纯度水飞蓟宾，包括以下步骤：

（A）总黄酮加水溶解后，取沉淀物加入乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品Ⅰ；

（B）取水飞蓟宾粗品Ⅰ加入乙醇溶液，溶解后析晶得水飞蓟宾粗品Ⅱ；

（C）取水飞蓟宾粗品Ⅱ加入无水乙醇，溶解后微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20%～30%，析晶、过滤、干燥即得所述高纯度水飞蓟宾。

步骤（1）中醋酸乙酯的加入和总黄酮的提取均先后分两次进行，第一次时加入的水飞蓟壳与醋酸乙酯的质量比为1∶1.7～1∶1.8，提取总黄酮2小时；第二次时加入的水飞蓟壳与醋酸乙酯的质量比为1∶1.3～1∶1.4，提取总黄酮16～18小时。

第一次提取总黄酮，提取设备采用自循环方式；第二次提取总黄酮，提取设备采用大循环方式；自循环、大循环每隔20～30分钟循环一次，每次10～15分钟。

步骤（1）中收酮的温度为91℃～92℃。

步骤（1）中作为原材料的水飞蓟壳先经过粉碎，以利于溶解提取总黄酮。

步骤（A）中乙醇溶液的浓度为50%，步骤（B）中乙醇溶液的浓度为65%；以上均为质量百分含量。

步骤（A）中乙醇溶液的加入量为所述总黄酮质量的3倍，步骤（B）中乙醇溶液的加入量为所述水飞蓟宾粗品Ⅰ质量的3倍，步骤（C）中无水乙醇的加入量为所述水飞蓟宾粗品Ⅱ质量的10～12倍。

有益效果：与现有技术相比，本发明的优点是：1、以水飞蓟籽壳仁分离技术为基础，将水飞蓟壳作为制备水飞蓟宾的原料，提取总黄酮，再用不同浓度的乙醇分离纯化，并采用重结晶技术制得高纯度水飞蓟宾，UV法检测得水飞蓟宾含量≥99%，HPLC法检测得水飞蓟宾含量≥97%，均超过国家规定标准；2、由于水飞蓟油99%存在于水飞蓟仁中，因此以水飞蓟壳提取总黄酮，油脂很少，无需传统方法中的使用汽油、石油醚等有机溶剂进行脱脂，减少杂质干扰和分离纯化难度以及环境污染，本发明方法中醋酸乙酯在溶解水飞蓟壳的同时即可将其中的极少量油脂去除；3、本发明制备方法相对简单，适用于工业化大量生产，高纯度水飞蓟宾产品质量及得率大大提高，产能相比于传统方法增加了一倍。

具体实施方式

下面结合具体实施例，进一步阐明本发明，应理解这些实施例仅用于说明本发明而不用于限制本发明的范围，在阅读了本发明之后，本领域技术人员对本发明的各种等价形式的修改均落于本申请所附权利要求所限定的范围。

实施例1：取600g经16目粉碎后的水飞蓟壳粗粉投料，加入1020g醋酸乙酯将其溶解，回流提取总黄酮2小时，然后再加入780g醋酸乙酯，回流提取总黄酮16小时，合并两次提取的总黄酮液体，真空收酮得82g总黄酮。

加入为总黄酮质量5倍量的纯化水将82g总黄酮溶解，搅拌水浴放冷静置1小时，取沉淀物加入246g浓度为50%的乙醇溶液将其溶解，得到水飞蓟宾粗品Ⅰ70g；在水飞蓟宾粗品Ⅰ中加入210g浓度为65%的乙醇溶液溶解，析晶24小时得到水飞蓟宾粗品Ⅱ52g；在水飞蓟宾粗品Ⅱ中加入520g无水乙醇溶解，待完全溶解后，趁热微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20%左右，室温放置22小时析晶、过滤，取滤饼于80℃真空干燥得到高纯度水飞蓟宾8.4g，HPLC法测得其含量为99.6%。

实施例2：取600g水飞蓟壳投料，加入1020g醋酸乙酯将其溶解，回流提取总黄酮2小时，然后再加入780g醋酸乙酯，回流提取总黄酮16小时，合并两次提取的总黄酮液体，真空收酮得78g总黄酮。

加入为总黄酮质量5倍量的纯化水将78g总黄酮溶解，搅拌水浴放冷静置1小时，取沉淀物加入234g浓度为50%的乙醇溶液将其溶解，得到水飞蓟宾粗品Ⅰ65g；在水飞蓟宾粗品Ⅰ中加入210g浓度为65%的乙醇溶液溶解，析晶24小时得到水飞蓟宾粗品Ⅱ48g；在水飞蓟宾粗品Ⅱ中加入480g无水乙醇溶解，待完全溶解后，趁热微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20%左右，室温放置22小时析晶、过滤，取滤饼于80℃真空干燥得到高纯度水飞蓟宾7.8g，HPLC法测得其含量为99.2%。

实施例3：取300g经16目粉碎后的水飞蓟壳粗粉投料，加入510g醋酸乙酯将其溶解，回流提取总黄酮2小时，然后再加入390g醋酸乙酯，回流提取总黄酮16小时，合并两次提取的总黄酮液体，真空收酮得45g总黄酮。

加入为总黄酮质量3倍量的纯化水将45g总黄酮溶解，搅拌水浴放冷静置1小时，取沉淀物加入135g浓度为50%的乙醇溶液将其溶解，得到水飞蓟宾粗品Ⅰ34g；在水飞蓟宾粗品Ⅰ中加入102g浓度为65%的乙醇溶液溶解，析晶24小时得到水飞蓟宾粗品Ⅱ25g；在水飞蓟宾粗品Ⅱ中加入250g无水乙醇溶解，待完全溶解后，趁热微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20%左右，室温放置22小时析晶、过滤，取滤饼于80℃真空干燥得到高纯度水飞蓟宾3.8g，HPLC法测得其含量为98.5%。

本发明一种高纯度水飞蓟宾及其制备方法，是建立在水飞蓟籽壳仁分离技术的基础之上的，特别是对于工业化、大规模生产，通过研制出的有效的水飞蓟籽壳仁分离设备，首先获得水飞蓟壳。

表1：

提取物料	水飞蓟壳	水飞蓟仁
			投料量	300g	300g
水飞蓟宾	26.7g	无
			水飞蓟宾得率	8.9%
水飞蓟宾含量（HPLC）	98.28%

表1所列数据，为用水飞蓟壳和水飞蓟仁分别提取水飞蓟宾的得率和含量，可见：水飞蓟仁中提取不出水飞蓟宾，进一步证明水飞蓟籽中的水飞蓟宾存在于水飞蓟壳中。

采用水飞蓟壳提取水飞蓟宾，理论上醋酸乙酯的消耗量相比于采用水飞蓟籽提取水飞蓟宾，每吨提取物料平均降低醋酸乙酯消耗约20kg，节约成本，同时减少对环境的影响。

表2：

表2所列数据，为分别采用1000g水飞蓟籽为原料获得表中投料量的水飞蓟壳和水飞蓟饼，采用同样的提取方法和提取时间，以不同产地的水飞蓟籽，将其水飞蓟壳和由水飞蓟籽全籽压榨而成的水飞蓟饼分别提取水飞蓟宾的得率和含量，可见：同一产地的水飞蓟籽，虽然属性成分一致，但是用水飞蓟壳提取的水飞蓟宾的得率和含量均较高于由水飞蓟籽全籽压榨而成的水飞蓟饼提取的水飞蓟宾的得率和含量。

表3：

表3所列数据，为用未粉碎的水飞蓟壳和经16目粉碎的水飞蓟壳分别提取水飞蓟宾的得率和含量，可见：用未粉碎的水飞蓟壳提取水飞蓟宾的得率在10‰左右，而用经16目粉碎的水飞蓟壳提取水飞蓟宾的得率在12‰左右，两种提取物料得到的水飞蓟宾的含量差不多，说明水飞蓟壳粉碎成粗粉更有利于提取水飞蓟宾。

表4：

滤液浓缩液的体积比	22小时析晶量	水飞蓟宾含量（HPLC）
			50%	0.62g	100.2%
40%	0.84g	100.0%
			30%	1.26g	99.8%
20%	1.68g	99.6%
			10%	2.12g	92.7%

表4所列数据，为以实施例1中的水飞蓟宾粗品Ⅱ52g，加入520g无水乙醇溶解后的滤液，分为五份，在不同参数下进行浓缩、析晶后得到的水飞蓟宾的含量比较，表中“滤液浓缩液的体积比”是指滤液浓缩后的体积与水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积之比，可见：浓缩后的滤液中，乙醇量的多少影响到析晶的速度，乙醇量大，水飞蓟宾不易析晶、析晶速度慢，但水飞蓟宾纯度高；乙醇量过少，水飞蓟宾易析晶、析晶速度快，但水飞蓟宾纯度达不到高纯度。因此，综合考虑，选择滤液浓缩液的体积比20%～30%为最佳。

Claims

1.一种水飞蓟宾的制备方法，其特征在于该方法包括以下步骤：

(1)以水飞蓟壳为原材料，加入醋酸乙酯将水飞蓟壳溶解，提取总黄酮，真空收酮，收酮的温度为91℃～92℃，其中醋酸乙酯的加入和总黄酮的提取均先后分两次进行，第一次时加入的水飞蓟壳与醋酸乙酯的质量比为1∶1.7～1∶1.8，提取总黄酮2小时，提取设备采用自循环方式；第二次时加入的水飞蓟壳与醋酸乙酯的质量比为1∶1.3～1∶1.4，提取总黄酮16～18小时，提取设备采用大循环方式；自循环、大循环每隔20～30分钟循环一次，每次10～15分钟；

(2)总黄酮经溶解、萃取、过滤、干燥即得所述水飞蓟宾，包括以下步骤：

(A)总黄酮加水溶解后，取沉淀物加入所述总黄酮质量3倍的质量浓度为50％乙醇溶液，溶解得水飞蓟宾粗品Ⅰ；

(B)取水飞蓟宾粗品Ⅰ加入所述水飞蓟宾粗品Ⅰ质量3倍的质量浓度为65％乙醇溶液，溶解后析晶得水飞蓟宾粗品Ⅱ；

(C)取水飞蓟宾粗品Ⅱ加入所述水飞蓟宾粗品Ⅱ质量10～12倍无水乙醇，溶解后微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20％～30％，析晶、过滤、干燥即得所述水飞蓟宾。

2.根据权利要求1所述的一种水飞蓟宾的制备方法，其特征在于：步骤(1)中作为原材料的水飞蓟壳先经过粉碎。