CN105693708A - 水飞蓟素的提取方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供一种水飞蓟素的提取方法，它包括：（1）粗提取：将无油脂的水飞蓟种子及有机溶剂置入提取容器中；边切割边搅拌所述无油脂的水飞蓟种子以破碎所述无油脂的水飞蓟种子，并形成负压使水飞蓟素提取物从破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中快速渗出，且均匀分散在所述有机溶剂中；然后过滤得到水飞蓟素粗提取滤液；（2）粗提取滤液浓缩：对所述水飞蓟素粗提取滤液进行浓缩得到水飞蓟素总提物；（3）精提取：从所述水飞蓟素总提物中分离出水飞蓟素成品。该提取方法具有快速高效、常温提取、不破坏水飞蓟素的有效成分、节能降耗、方法简单等优点。
Description
技术领域
本发明涉及一种从植物水飞蓟中提取水飞蓟素的提取方法。
背景技术
菊科植物水飞蓟（SilybumMarianumGaertn）或称为乳蓟（MilkThistle）、朝鲜蓟（Artichoke），原产于印度和巴基斯坦，而后在欧洲、美洲及澳洲多地区有种植。1972年由德国引入我国，现东北、陕西等地有大量栽培。水飞蓟瘦果呈长卵圆形或长倒卵形，表面颜色浅褐色至深褐色，有线状的深褐色斑点。水飞蓟种子中含油约26%，另外含有大量难溶于水的黄酮类化合物，主要为水飞蓟素。水飞蓟素为黄酮类化合物、木质素类化合物的混合物，包括水飞蓟宾（silybin）、脱氢水飞蓟宾（dehydrosi-silybin）、聚水飞蓟宾（silybinomer）、异水飞蓟宾（isosilybin）、水飞蓟亭（silychristin）、水飞蓟宁（silydianin）等化合物，其中水飞蓟宾是其主要活性成分，含量最高。
水飞蓟素中的主要物质水飞蓟宾为含1分子水的晶体，熔点167摄氏度，180摄氏度分解；水飞蓟宾溶于丙酮、乙酸乙酯、甲醇、乙醇，微溶于氯仿，不溶于水。水飞蓟素在水中的溶解度为0.0401mg/ml。水飞蓟素临床广泛用于治疗急、慢性肝炎，肝硬化及肝损伤。近年来，随着药理学实验方法的发展和完善，发现其还具有抗肿瘤、抗炎、降血脂、治疗糖尿病等作用。
目前从水飞蓟中提取水飞蓟素常用的方法大多采用有机溶剂浸取热回流的提取方法，主要有醇提法和乙酸乙酯提法等。此外，在有机溶剂浸取条件下还有利用索氏提取法、超声提取法进行水飞蓟素提取的研究，但这些方法普遍存在操作复杂、能耗高、生产周期长、产率低、产生大量有机废液等问题。利用碱提酸沉法提取水飞蓟素则容易导致水飞蓟宾结构发生变化，导致有效成分含量降低，提取物杂质增多，不宜适用。
发明内容
由鉴于此，确有必要提供一种水飞蓟素的新的提取方法，该提取方法具有快速高效、不破坏水飞蓟素的有效成分、节能降耗、方法简单、操作简便等优点。
本发明提供一种水飞蓟素的提取方法，该方法包括以下步骤：
粗提取：将无油脂的水飞蓟种子及有机溶剂置入提取容器中；边切割边搅拌所述无油脂的水飞蓟种子以破碎所述无油脂的水飞蓟种子，并形成负压使水飞蓟素提取物从破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中快速渗出，且均匀分散在所述有机溶剂中；然后过滤得到水飞蓟素粗提取滤液；
粗提取滤液浓缩：对所述水飞蓟素粗提取滤液进行浓缩得到水飞蓟素总提物；
精提取：从所述水飞蓟素总提物中分离出水飞蓟素成品。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述粗提取步骤包括：将所述无油脂的水飞蓟种子及所述有机溶剂置入所述提取容器中；在常温下，切割所述无油脂的水飞蓟种子，同时以大于等于1×104转/分钟的搅拌速度搅拌所述无油脂的水飞蓟种子，形成粒径为40～60目的所述破碎的无油脂的水飞蓟种子；在所述切割及搅拌的作用下，所述提取容器内产生负压使所述水飞蓟素提取物从所述破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中快速渗出，并均匀分散到所述有机溶剂中。其中，所述常温为20摄氏度～40摄氏度，优选地，所述常温为25摄氏度～35摄氏度。所述搅拌速度优选为1×104转/分钟～3.5×104转/分钟，如1×104转/分钟、1.5×104转/分钟、2×104转/分钟、2.5×104转/分钟、3×104转/分钟、3.5×104转/分钟等。优选地，所述搅拌速度为1.5×104转/分钟～3×104转/分钟。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述负压为0.4兆帕~0.6兆帕；优选地，所述负压为0.5兆帕。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述粗提取步骤包括采用内、外双刀刃切割破碎法对所述水飞蓟种子进行切割破碎处理。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述粗提取步骤包括：在所述常温下，使所述内刀刃和所述外刀刃维持0.2毫米～1.0毫米的间隔，所述内刀刃以大于等于1×104转/分钟的速度绕其中心旋转切割并搅拌所述提取容器内的无油脂的水飞蓟种子，且产生涡流负压使所述水飞蓟素提取物从所述破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中快速渗出并均匀分散到所述有机溶剂中。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述粗提取的步骤包括：将8～20倍所述无油脂的水飞蓟种子质量的有机溶剂加到所述提取容器中。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮和醋酸乙酯等可溶解水飞蓟素的溶剂。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述粗提取的步骤包括至少两次过滤所述破碎的无油脂的水飞蓟种子得到所述水飞蓟素粗提取滤液。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述粗提取滤液浓缩的步骤还包括回收所述有机溶剂的步骤。其中，在所述粗提取滤液浓缩的步骤中，通过采用减压浓缩法浓缩所述水飞蓟素粗提取滤液得到所述水飞蓟素总提物，并回收所述有机溶剂。
基于上述水飞蓟素的提取方法，所述精提取的步骤包括联合萃取法和结晶法从所述水飞蓟素总提物中分离出所述水飞蓟素成品。
与现有技术相比，本发明提供的水飞蓟素的提取方法通过在对所述无油脂的水飞蓟种子进行切割处理的同时对所述无油脂的水飞蓟种子进行搅拌以破碎所述无油脂的水飞蓟种子，并且在该切割和搅拌的过程中会产生负压发生分子渗透现象，使所述水飞蓟素提取物在该负压的作用下，其有效成分不被破坏且被所述有机溶剂包围、解离、替代，最后脱离所述破碎的水飞蓟种子进入到所述有机溶剂中，因此，该提取方法比较简单，而且所述水飞蓟素进入到所述有机溶剂中被所述有机溶剂溶解，不易被氧化变质变色、色泽好、品质优良；所述粗提取的步骤是在常温下进行的，可以节约、降低能耗；所述粗提取的步骤可以在1~5分钟内得到所述水飞蓟素粗提取滤液，因此，本发明提供的提取方法的速度比较快。另外，在所述粗提取的过程中，以大于等于1×104转/分钟的旋转速度搅拌所述无油脂的水飞蓟素种子，会产生强力涡流引起涡流负压，而且也可以产生相当于超声波1/60的振动，强力涡流带动已破碎的物料内外翻动，使整个系统处于快速的浓度变换之中，且振动作用强力促进所述水飞蓟素在被破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞内外的溶解平衡，以上这些促使在所述有机溶剂中溶解比较多的水飞蓟素，使得所述水飞蓟素粗提取滤液中的水飞蓟素的含量比较高，从而可以得到14.2～17.5g/100g种子的所得水飞蓟素总提取物得率，最终得到420～550mg/g的水飞蓟素成品的提取率，其中，所述水飞蓟素成品中的水飞蓟宾含量达到200～240mg/g，水飞蓟宾的纯度为97～98.5%。
具体实施方式
下面通过具体实施方式，对本发明的技术方案做进一步的详细描述。
实施例1
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：将无油脂的水飞蓟种子及该无油脂的水飞蓟种子8倍量的甲醇置入提取容器中，所述提取容器为直径20厘米、高度40厘米的不锈钢圆桶；在25摄氏度条件下，采用内、外双刀刃切割破碎所述无油脂的水飞蓟种子，且所述内刀刃和所述外刀刃维持0.5毫米～1.0毫米的间隔，同时所述内刀刃以1.5×104转/分钟的速度绕其中心旋转切割并搅拌所述提取容器内的无油脂的水飞蓟种子，形成粒径为40～60目的所述破碎的无油脂的水飞蓟种子，并产生大约0.4兆帕的涡流负压使水飞蓟素提取物从破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中快速渗出并均匀分散在所述有机溶剂中；合并两次或三次过滤所述破碎的无油脂的水飞蓟种子得到水飞蓟素粗提取滤液；
（2）粗提取滤液浓缩：对所述粗提取滤液进行减压浓缩，回收甲醇，得到水飞蓟素总提物；
（3）精提取：加入所述水飞蓟素总提物15倍量的纯净水，加热至30摄氏度，搅拌成混悬液，再加入等量氯仿，搅拌均匀，静置使之分成氯仿层和水层，分离出所述氯仿层，对所述水层进行过滤、结晶处理得到水飞蓟素成品。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为16.1g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到479mg/g,水飞蓟宾含量达到223mg/g,水飞蓟宾的纯度为97.4%。
实施例2
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为14倍量所述无油脂的水飞蓟种子，所述内刀刃的旋转速度为2×104转/分钟，并产生大约0.45兆帕的涡流负压；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述纯净水的加入量为18倍量的所述水飞蓟素总提物。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为16.4g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到496mg/g，水飞蓟宾含量达到227mg/g，水飞蓟宾的纯度为98.1%。
实施例3
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为20倍量所述无油脂的水飞蓟种子，所述内刀刃的旋转速度为2.5×104转/分钟，并产生大约0.5兆帕的涡流负压；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述纯净水的加入量为16倍量的所述水飞蓟素总提物。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为15.9g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到541mg/g，水飞蓟宾含量达到228mg/g，水飞蓟宾的纯度为97.9%。
实施例4
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为8倍量所述无油脂的水飞蓟种子，所述温度为30摄氏度，所述内刀刃的旋转速度为2.5×104转/分钟，并产生大约0.5兆帕的涡流负压；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例3中粗提取滤液浓缩步骤的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取的具体实施方式。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为17.0g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到530mg/g，水飞蓟宾含量达到237mg/g，水飞蓟宾的纯度为98.0%。
实施例5
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例4中粗提取的具体实施方式方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为14倍量所述无油脂的水飞蓟种子；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例3中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取步骤中的具体实施方式相同。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为17.5g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到525mg/g，水飞蓟宾含量达到240mg/g，水飞蓟宾的纯度为98.2%。
实施例6
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例4中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为20倍量所述无油脂的水飞蓟种子；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例3中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例5中精提取的具体实施方式相同。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为16.4g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到510mg/g，水飞蓟宾含量达到219mg/g，水飞蓟宾的纯度为98.3%。
实施例7
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述温度为35摄氏度，所述内刀刃的旋转速度为3×104转/分钟，并产生大约0.55兆帕的涡流负压；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述纯净水的加入量为20倍量的所述水飞蓟素总提物。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为15.3g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到484mg/g，水飞蓟宾含量达到210mg/g，水飞蓟宾的纯度为97.3%。
实施例8
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例7中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为14倍量所述无油脂的水飞蓟种子，所述内刀刃的旋转速度为2.5×104转/分钟，并产生大约0.5兆帕的涡流负压；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述纯净水的加入量为18倍量的所述水飞蓟素总提物。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为15.6g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到490mg/g，水飞蓟宾含量达到207mg/g，水飞蓟宾的纯度为97.9%。
实施例9
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，包括以下步骤：
（1）粗提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例8中粗提取的具体实施方式基本相同，其区别在于：所述甲醇的加入量为20倍量所述无油脂的水飞蓟种子；
（2）粗提取滤液浓缩：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中粗提取滤液浓缩的具体实施方式相同；
（3）精提取：本实施例该步骤的具体实施方式同实施例1中精提取的具体实施方式相同。
步骤（2）中所得水飞蓟素总提取物得率为14.7g/100g种子，步骤（3）中所得水飞蓟素得率达到464mg/g，水飞蓟宾含量达到200mg/g，水飞蓟宾的纯度为97.0%。
实施例10
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，本实施例该提取方法的具体实施方式与实施例5提供的水飞蓟素的提取方法的具体实施方式基本相同，不同之处在于：粗提取步骤所采用的有机溶剂为乙醇。
采用上述方法可以得到水飞蓟素总提取物得率为16.3g/100g种子，水飞蓟素得率达到550mg/g，水飞蓟宾含量达到206mg/g，水飞蓟宾的纯度为98.5%。
实施例11
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，本实施例该提取方法的具体实施方式与实施例5提供的水飞蓟素的提取方法的具体实施方式基本相同，不同之处在于：粗提取步骤所采用的有机溶剂为丙酮。
采用上述方法可以得到水飞蓟素总提取物得率为14.2g/100g种子，水飞蓟素得率达到474mg/g，水飞蓟宾含量达到215mg/g，水飞蓟宾的纯度为97.6%。
实施例12
本实施例提供一种水飞蓟素的提取方法，本实施例该提取方法的具体实施方式与实施例5提供的水飞蓟素的提取方法的基本实施例该相同，不同之处在于：粗提取步骤所采用的有机溶剂为醋酸乙酯。
采用上述方法可以得到水飞蓟素总提取物得率为14.6g/100g种子，水飞蓟素得率达到420mg/g，水飞蓟宾含量达到221mg/g，水飞蓟宾的纯度为98.4%。
最后应当说明的是：以上实施例仅用以说明本实施例该发明的技术方案而非对其限制；尽管参照较佳实施例对本实施例该发明进行了详细的说明，所属领域的普通技术人员应当理解：依然可以对本实施例该发明的具体实施方式进行修改或者对部分技术特征进行等同替换；而不脱离本实施例该发明技术方案的精神，其均应涵盖在本实施例该发明请求保护的技术方案范围当中。
Claims (10)
1.一种水飞蓟素的提取方法，该方法包括以下步骤：
（1）粗提取：将无油脂的水飞蓟种子及有机溶剂置入提取容器中；边切割边搅拌所述无油脂的水飞蓟种子以破碎所述无油脂的水飞蓟种子，并形成负压使水飞蓟素提取物从破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中渗出，且分散在所述有机溶剂中；然后过滤得到水飞蓟素粗提取滤液；
（2）粗提取滤液浓缩：对所述水飞蓟素粗提取滤液进行浓缩得到水飞蓟素总提物；
（3）精提取：从所述水飞蓟素总提物中分离出水飞蓟素成品。
2.根据权利要求1所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述粗提取步骤包括：将所述无油脂的水飞蓟种子及所述有机溶剂置入所述提取容器中；在常温下，切割所述无油脂的水飞蓟种子，同时以大于等于1×104转/分钟的速度搅拌所述无油脂的水飞蓟种子，形成粒径为40～60目的所述破碎的无油脂的水飞蓟种子；在所述切割及搅拌的作用下，所述提取容器内产生负压使所述水飞蓟素提取物从所述破碎的无油脂的水飞蓟种子细胞中渗出，并分散到所述有机溶剂中。
3.根据权利要求2所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述负压为0.4兆帕~0.6兆帕。
4.根据权利要求1~3任一项所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述粗提取步骤包括采用内、外双刀刃切割破碎法对所述水飞蓟种子进行切割破碎处理。
5.根据权利要求4所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述粗提取步骤包括：在所述常温下，使所述内刀刃和所述外刀刃维持0.2毫米～1.0毫米的间隔，所述内刀刃以大于等于1×104转/分钟的速度绕其中心旋转切割并搅拌所述无油脂的水飞蓟种子，且产生涡流负压使所述水飞蓟素提取物从所述破碎的水飞蓟种子细胞中渗出并分散到所述有机溶剂中。
6.根据权利要求1所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述粗提取的步骤包括：将8～20倍所述无油脂的水飞蓟种子质量的有机溶剂加到所述提取容器中。
7.根据权利要求1或6所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述有机溶剂为甲醇、乙醇、丙酮或醋酸乙酯。
8.根据权利要求1所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述粗提取的步骤包括至少两次过滤所述破碎的无油脂的水飞蓟种子得到所述水飞蓟素粗提取滤液。
9.根据权利要求1所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述粗提取滤液浓缩的步骤还包括回收所述有机溶剂的步骤。
10.根据权利要求1所述的水飞蓟素的提取方法，其特征在于：所述精提取的步骤包括采用萃取法从所述水飞蓟素总提物中分离出所述水飞蓟素成品。
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|---|---|---|---|
| C06 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
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| CB02 | Change of applicant information | ||
| CB02 | Change of applicant information |
Address after: 450001, No. three West Ring Road, Zhengzhou hi tech Zone, Henan, 289 Applicant after: Zhi Jing biotech inc, Henan Address before: 450000 National University of West Sanhuan, Zhengzhou, Henan Province, science and Technology Park Applicant before: Zhi Jing biotech inc, Henan |
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| RJ01 | Rejection of invention patent application after publication | ||
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Application publication date: 20160622 |