CN106083834B - 一种水飞蓟宾分离纯化方法 - Google Patents

一种水飞蓟宾分离纯化方法 Download PDF

Info

Publication number
CN106083834B
CN106083834B CN201610453396.4A CN201610453396A CN106083834B CN 106083834 B CN106083834 B CN 106083834B CN 201610453396 A CN201610453396 A CN 201610453396A CN 106083834 B CN106083834 B CN 106083834B
Authority
CN
China
Prior art keywords
silibinin
crude product
membrane
silymarin
fine work
Prior art date
Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
Active
Application number
CN201610453396.4A
Other languages
English (en)
Other versions
CN106083834A (zh
Inventor
武俊明
吴春芳
付廷明
Current Assignee (The listed assignees may be inaccurate. Google has not performed a legal analysis and makes no representation or warranty as to the accuracy of the list.)
JIANGSU ZHONGXING PHARMACEUTICAL CO Ltd
Original Assignee
JIANGSU ZHONGXING PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority date (The priority date is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the date listed.)
Filing date
Publication date
Application filed by JIANGSU ZHONGXING PHARMACEUTICAL CO Ltd filed Critical JIANGSU ZHONGXING PHARMACEUTICAL CO Ltd
Priority to CN201610453396.4A priority Critical patent/CN106083834B/zh
Publication of CN106083834A publication Critical patent/CN106083834A/zh
Application granted granted Critical
Publication of CN106083834B publication Critical patent/CN106083834B/zh
Active legal-status Critical Current
Anticipated expiration legal-status Critical

Links

Classifications

    • C—CHEMISTRY; METALLURGY
    • C07—ORGANIC CHEMISTRY
    • C07D—HETEROCYCLIC COMPOUNDS
    • C07D407/00—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00
    • C07D407/02—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings
    • C07D407/04—Heterocyclic compounds containing two or more hetero rings, at least one ring having oxygen atoms as the only ring hetero atoms, not provided for by group C07D405/00 containing two hetero rings directly linked by a ring-member-to-ring-member bond

Landscapes

  • Chemical & Material Sciences (AREA)
  • Organic Chemistry (AREA)
  • Pharmaceuticals Containing Other Organic And Inorganic Compounds (AREA)

Abstract

本发明公开了一种高纯度水飞蓟宾分离纯化方法，通过独创性地采用水飞蓟素双相萃取技术分离水飞蓟宾粗品I，采用膜分离技术分离水飞蓟宾粗品I得到水飞蓟宾粗品II，通过重结晶技术结晶水飞蓟宾粗品II得到水飞蓟宾精品I，最后采用等离子重结晶法结晶水飞蓟宾精品I得到高纯度水飞蓟宾，通过工艺的改良，最终实现项目研究的产业化生产工艺。本发明大幅度的降低了提取过程中有机溶剂的使用，避免了有机溶剂的大量使用对环境造成的污染，在减低生产成本的同时，减少有机溶剂的使用给人类健康带来的不可估量的毒副影响。

Description

一种水飞蓟宾分离纯化方法
技术领域
本发明属于中药制备领域，具体涉及一种高纯度水飞蓟宾分离纯化方法。
背景技术
水飞蓟素(Silymarin)是从水飞蓟的种子中提取出来的一种黄酮木质素类混合物，它包括水飞蓟宾(Silibinin，或Sylibin)、异水飞蓟宾(isosylibinin)、水飞蓟亭(silicristin)、水飞蓟宁(silidianin)等成分。水飞蓟宾(Figure1)本身也是由等比例水飞蓟宾A和水飞蓟宾B构成的两个非对映体混合物。体外和动物实验研究结果表明水飞蓟宾有很好的保护肝细胞免受毒素损伤的作用。水飞蓟宾有四个手性中心，水飞蓟宾A(2R,3R,10R,11R)和水飞蓟宾B(2R,3R,10S,11S)，约占水飞蓟素总量的60％-70％，是主要活性成分。目前，水飞蓟宾作为保肝药物被广泛应用于治疗肝炎、肝硬化及代谢中毒性肝损伤等疾病，其机制是抗氧化、抗脂质过氧化、抗纤维化、细胞膜稳定和免疫调节作用，并能增强肝再生能力等，被称为“天然的保肝药”；同时，大量的研究表明水飞蓟宾还具有降血脂、保护心肌及抗糖尿病的作用。在动物研究实验中表明其没有明显的慢性毒副作用。近些年来的研究发现，水飞蓟宾还具有较强的抗肿瘤活性，使其越来越受到国内外研究者的关注。
目前，水飞蓟宾有多种提取分离方法，但主要方法包括：(1)先将水飞蓟种子去油，再以乙醇、甲醇、丙酮、乙酸乙酯等有机溶剂加热回流，经过多次萃取、洗脱，提取分离得到水飞蓟宾产品，该方法利用甲醇、丙酮、乙酸乙酯等对人体有害溶剂提取的产品存在着有害溶剂残留，残留量超标等问题，而且该方法操作时间长，能耗大，污染环境；(2)使用超临界二氧化碳萃取法提取分离水飞蓟宾，该方法虽然改善了有机溶剂残留问题，但是操作时间较长，对操作温度、压力有一定要求；(3)国外也有研究用高温高压热水代替有机溶剂提取水飞蓟宾，但是高温高压生产难度大，危险性高，不利于工业生产。目前在生产中采用的较多的提取和纯化方法，依然为有机溶剂提取法，采用这种方法不仅会对人体产生毒害作用，而且还会造成很大开销。因此，在保证水飞蓟宾纯度的前提下，研究如何降低水飞蓟宾提取过程中有机溶剂的使用，对于环境保护和提高生产效率方面都非常有意义，同时也是本项目的研究目的和意义。
随着水飞蓟的广泛应用，对其有效成分水飞蓟宾的提取和纯化方法的研究也越来越多，但是大多数都局限于传统方法，本申请独创性地采用水飞蓟素双向萃取技术分离水飞蓟宾粗品Ⅰ，采用膜分离技术分离水飞蓟宾粗品Ⅰ得到水飞蓟宾粗品Ⅱ，通过重结晶技术结晶水飞蓟宾粗品Ⅱ得到水飞蓟宾精品Ⅰ，最后采用等离子重结晶法结晶水飞蓟宾精品Ⅰ得到高纯度水飞蓟宾，通过工艺的改良，最终实现项目研究的产业化生产工艺。
发明内容
发明目的：为解决上述技术问题，本发明提出一种水飞蓟宾分离纯化方法。
技术方案：为实现上述技术目的，本发明提出一种水飞蓟宾分离纯化方法，包括如下步骤：
(1)双相萃取水飞蓟素：首先用甲醇加热溶解水飞蓟素，滤去不溶物，抽滤，将得到的固体用石油醚洗三次，将烘干得到的固体以25％PEG2000、12％(NH4)2SO4和3％NaCl双水相体系剂型萃取，得到水飞蓟宾粗品Ⅰ，经HPLC检测，含量指标在80％以上；
(2)将得到的水飞蓟宾粗品Ⅰ通过膜分离得到水飞蓟宾粗品Ⅱ，经HPLC检测，含量指标在90％以上；
(3)将得到的水飞蓟宾粗品Ⅱ解析重结晶得到水飞蓟宾精品Ⅰ，经HPLC检测，含量指标在96％以上；
(4)将得到的水飞蓟宾精品Ⅰ中加入等摩尔量的水进行重结晶，水中的H离子与水飞蓟宾中的阴离子结合，有效地促进了水飞蓟宾的重结晶，形成得到高纯度水飞蓟宾经HPLC检测，含量指标在99％以上。
具体地，步骤(2)中，膜分离首先以膜孔径0.30～0.5μm的滤膜进行一级膜分离，然后再用应用0.15～0.3μm的滤膜进行二级膜分离，最后进行喷雾干燥成水飞蓟宾粗品Ⅱ。
步骤(3)中，用无水乙醇溶解水飞蓟宾粗品Ⅱ，溶解后微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20％～30％，析晶、过滤、干燥得到水飞蓟宾精品Ⅰ。
有益效果：本项目通过采用双相萃取技术、膜分离技术以及重结晶技术相结合的方式提纯水飞蓟宾，大幅度的降低了提取过程中有机溶剂的使用，避免了有机溶剂的大量使用对环境造成的污染，在减低生产成本的同时，减少有机溶剂的使用给人类健康带来的不可估量的毒副影响。
具体实施方式
提出一种高纯度水飞蓟宾分离纯化方法，包括如下步骤：
(1)双相萃取水飞蓟素：首先用甲醇加热溶解水飞蓟素，滤去不溶物，抽滤，将得到的固体用石油醚洗三次，将烘干得到的固体以25％PEG2000、12％(NH4)2SO4和3％NaCl双水相体系剂型萃取，得到水飞蓟宾粗品Ⅰ，经HPLC检测，含量指标在80％以上；
(2)将得到的水飞蓟宾粗品Ⅰ通过膜分离得到水飞蓟宾粗品Ⅱ：首先以膜孔径0.30的滤膜进行一级膜分离，然后再用应用0.15的滤膜进行二级膜分离，最后进行喷雾干燥成水飞蓟宾粗品Ⅱ，经HPLC检测，含量指标在90％以上；
(3)将得到的水飞蓟宾粗品Ⅱ解析重结晶得到水飞蓟宾精品Ⅰ，具体地用无水乙醇溶解水飞蓟宾粗品Ⅱ，溶解后微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的20％～30％，析晶、过滤、干燥得到水飞蓟宾精品Ⅰ，经HPLC检测，含量指标在96％以上；
(4)将得到的水飞蓟宾精品Ⅰ加入等摩尔量的水进行重结晶，水中的H离子与水飞蓟宾中的阴离子结合，有效地促进了水飞蓟宾的重结晶，形成得到高纯度水飞蓟宾经HPLC检测，含量指标在99％以上。
本发明的方法通过独创性地采用水飞蓟素双向萃取技术分离水飞蓟宾粗品Ⅰ，采用膜分离技术分离水飞蓟宾粗品Ⅰ得到水飞蓟宾粗品Ⅱ，通过重结晶技术结晶水飞蓟宾粗品Ⅱ得到水飞蓟宾精品Ⅰ，最后采用等离子浓度的水进行重结晶法结晶水飞蓟宾精品Ⅰ得到高纯度水飞蓟宾，通过工艺的改良，最终实现项目研究的产业化生产工艺。本项目的实施大幅度的降低了提取过程中有机溶剂的使用，避免了有机溶剂的大量使用对环境造成的污染，在减低生产成本的同时，减少有机溶剂的使用给人类健康带来的不可估量的毒副影响。

Claims (2)

1.一种水飞蓟宾分离纯化方法，其特征在于，包括如下步骤：
（1）双相萃取水飞蓟素：首先用甲醇加热溶解水飞蓟素，滤去不溶物，抽滤，将得到的固体用石油醚洗三次，将烘干得到的固体以25%PEG2000、12%(NH4)2SO4和3%NaCl双水相体系剂型萃取，得到水飞蓟宾粗品Ⅰ；
（2）将得到的水飞蓟宾粗品Ⅰ通过膜分离得到水飞蓟宾粗品Ⅱ；
（3）将得到的水飞蓟宾粗品Ⅱ解析重结晶得到水飞蓟宾精品Ⅰ，所述解析重结晶具体地用无水乙醇溶解水飞蓟宾粗品Ⅱ，溶解后微孔过滤，将滤液浓缩至水飞蓟宾粗品Ⅱ与加入的无水乙醇的总体积的 20% ～ 30%， 析晶、 过滤、 干燥得到水飞蓟宾精品Ⅰ，经HPLC检测，含量指标在96%以上；
（4）将得到的水飞蓟宾精品Ⅰ中加入等摩尔量的水进行重结晶，得到含量指标在99%以上的水飞蓟宾。
2.根据权利要求1所述的 水飞蓟宾分离纯化方法，其特征在于，步骤（2）中，膜分离首先以膜孔径0.30~0.5μm的滤膜进行一级膜分离，然后再应用0.15~0.3μm的滤膜进行二级膜分离，最后进行喷雾干燥成水飞蓟宾粗品Ⅱ。
CN201610453396.4A 2016-06-21 2016-06-21 一种水飞蓟宾分离纯化方法 Active CN106083834B (zh)

Priority Applications (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610453396.4A CN106083834B (zh) 2016-06-21 2016-06-21 一种水飞蓟宾分离纯化方法

Applications Claiming Priority (1)

Application Number Priority Date Filing Date Title
CN201610453396.4A CN106083834B (zh) 2016-06-21 2016-06-21 一种水飞蓟宾分离纯化方法

Publications (2)

Publication Number Publication Date
CN106083834A CN106083834A (zh) 2016-11-09
CN106083834B true CN106083834B (zh) 2018-07-17

Family

ID=57238663

Family Applications (1)

Application Number Title Priority Date Filing Date
CN201610453396.4A Active CN106083834B (zh) 2016-06-21 2016-06-21 一种水飞蓟宾分离纯化方法

Country Status (1)

Country Link
CN (1) CN106083834B (zh)

Families Citing this family (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN107098892A (zh) * 2017-06-07 2017-08-29 江苏天晟药业股份有限公司 一种水飞蓟宾的提纯方法
CN108640908A (zh) * 2018-07-16 2018-10-12 武汉轻工大学 高纯度低溶剂残留的水飞蓟宾及其制备方法
CN109438428A (zh) * 2018-10-18 2019-03-08 江苏中兴药业有限公司 一种水飞蓟宾的循环式分离纯化方法

Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101817816A (zh) * 2009-12-23 2010-09-01 南京泽朗医药科技有限公司 一种水飞蓟宾的制备方法
CN102174041A (zh) * 2011-03-24 2011-09-07 江苏中兴药业有限公司 一种高纯度水飞蓟宾及其制备方法
CN103408539A (zh) * 2013-08-28 2013-11-27 天津泰阳制药有限公司 高纯度水飞蓟宾的生产方法

Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
CN101817816A (zh) * 2009-12-23 2010-09-01 南京泽朗医药科技有限公司 一种水飞蓟宾的制备方法
CN102174041A (zh) * 2011-03-24 2011-09-07 江苏中兴药业有限公司 一种高纯度水飞蓟宾及其制备方法
CN103408539A (zh) * 2013-08-28 2013-11-27 天津泰阳制药有限公司 高纯度水飞蓟宾的生产方法

Non-Patent Citations (3)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Title
Application of aqueous two-phase flotation in the separation and concentration of puerarin from Puerariae extract;Peng-yu Bi等;《Separation and Purification Technology》;20101231;第75卷;402-406 *
双水相萃取在中药活性成分提取分离中的应用进展;刘磊磊等;《中草药》;20150331;第46卷(第5期);766-773 *
聚乙二醇-硫酸铵双水相体系分离纯化黄花蒿黄酮的研究;欧阳文等;《食品工业科技》;20141231;第35卷(第15期);196-199 *

Also Published As

Publication number Publication date
CN106083834A (zh) 2016-11-09

Similar Documents

Publication Publication Date Title
CN101016328B (zh) 一种分离纯化熊果酸、齐墩果酸的方法
CN102228514B (zh) 一种从油橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法
CN108339086A (zh) 一种姜黄提取物的制备方法
CN106083834B (zh) 一种水飞蓟宾分离纯化方法
CN101830849A (zh) 一种简化高纯度草乌甲素的制备方法
CN101007797B (zh) 一种从枳椇子中提取二氢杨梅素的方法
CN102993154A (zh) 一种紫薯花青素的提取方法
CN104666427A (zh) 桑叶主要活性成分的提取方法
CN107955017A (zh) 一种青蒿素超声回流提取工艺
CN103044442B (zh) 一种从银杏叶提取物中分离纯化ga、gb和白果内酯的方法
CN102250164A (zh) 一种天麻素的提纯方法
CN205740840U (zh) 一种高纯度水飞蓟宾分离纯化装置
CN104825523A (zh) 一种野菊花总黄酮提取工艺
CN102180852A (zh) 一种从芫花中提取芫花素的方法
CN102464683A (zh) 一种从橄榄叶中提取橄榄苦苷的方法
CN101554394A (zh) 一种从油菜蜂花粉中提取总黄酮类的工艺
CN104231011B (zh) 一种毛蕊花糖苷的制备方法
CN102311467A (zh) 一种从结香中提取分离高纯度银椴苷的新方法
CN105541626B (zh) 一种从金银花露残液中提取和分离绿原酸与木犀草苷的方法
CN106350220A (zh) 利用洋甘菊提取精油的方法
CN102285976A (zh) 从竹叶黄酮中提取异荭草素的方法
CN102391232B (zh) 从甘草中提取甘草素的方法
CN102188465A (zh) 一种常春藤属植物提取物的制备方法及其用途
CN101879265A (zh) 一种虎眼万年青总皂苷、多糖的联产工艺
CN108653369A (zh) 一种金银花总黄酮提取物的制备方法及其在蜜炼余甘子枇杷膏中的应用

Legal Events

Date Code Title Description
C06 Publication
PB01 Publication
C10 Entry into substantive examination
SE01 Entry into force of request for substantive examination
GR01 Patent grant
GR01 Patent grant