CN102180852A

CN102180852A - 一种从芫花中提取芫花素的方法

Info

Publication number: CN102180852A
Application number: CN2011100291484A
Authority: CN
Inventors: 刘东锋; 郭琴; 杨成东
Original assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Current assignee: Nanjing Zelang Medical Technology Co Ltd
Priority date: 2011-01-24
Filing date: 2011-01-24
Publication date: 2011-09-14

Abstract

本发明提供了一种从芫花中提取芫花素的方法。该方法是以芫花为原料，粉碎后加入60-85％乙醇溶液微波辅助提取，浓缩提取液，乙醚萃取多次，弃去乙醚层，水层加入大孔吸附树脂吸附，水醇梯度洗脱，洗脱液浓缩得浓缩物，再经高速逆流色谱分离纯化，环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，分离液浓缩干燥，再以环己烷-丙酮重结晶得到产品。采用本方法生产芫花素纯度高、制备量大、成本低，且是一种环保型提纯方法。

Description

一种从芫花中提取芫花素的方法

技术领域：

本发明涉及一种从芫花中提取芫花素的方法，具体而言，是涉及一种利用大孔吸附树脂和高速逆流色谱提取纯化芫花素的方法。

背景技术：

芫花素(genkwanin)别名芫花黄素，化学名称为4’，5-二羟基-7-甲氧基黄酮。分子式C₁₆H₁₂O₅，分子量284.26，黄色针状结晶(甲醇)，mp.286℃。具有抗炎、抗氧化、抗衰老、抗肿瘤、抗诱变等多种生物活性，其在化妆品、医药、食品等工业中有广泛的应用，杨小凤等人研究其还可作为一种理想的无公害农药，对环境、人、畜友好。

芫花为瑞香科植物芫花(Daphne genkwa Sieb.et Zucc.)的干燥花蕾，收载于2010年版中国药典(一部)，味苦、辛、性温，有毒。归肺、脾、肾经。用于治疗水肿胀满，胸腹积水，痰饮积聚，气逆咳喘，二便不利；外用治疗疥癣秃疮，痈肿，冻疮。芫花中主要含有黄酮、香豆素等酚苷类成分及二萜原酸酯类、绿原酸类成分，其中黄酮类成分含量较大，且芫花素，羟基芫花素等多种黄酮类成分为其镇咳祛痰的有效成分。

现有技术中，有人以南岭荛花根皮为原料，乙醚冷浸，残渣挥尽乙醚后，乙醇回流提取，减压浓缩，得浆状物，冰箱放置，过滤，得无色方晶，水洗，不溶物真空干燥，乙醇重结晶，氯仿洗去絮状物，得黄色针状结晶，乙醇重结晶2次，得淡黄色针状结晶，但该法收率很低。李娆娆等采用SP850、SP825大孔树脂吸附处理，50％乙醇洗脱，考察大孔树脂处理对芫花药材HPLC指纹图谱的影响；王彩芳等在发表的文献“芫花叶的黄酮类化学成分分析”中，采用乙酸乙酯萃取，石油醚脱脂，硅胶柱层析，氯仿-甲醇(20∶1-1∶1)梯度洗脱，再反复柱层析，经多次Toyopearl HW-40柱层析，水-甲醇(1∶0-4∶6)梯度洗脱，最终得到芫花素，该方法提取率低，且使用大量有机溶剂，生产周期短，不适用于工业生产。初文毅等以2，4，6-三羟基苯乙酮为起始物，全合成芫花素，该方法杂质多，所得产品纯度低，环境污染较大。

发明内容：

本发明要解决的技术问题是提供一种从芫花中提取芫花素的方法，该方法简单易操作、提取率高、快速、环保。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案如下：

一种从芫花中提取芫花素的方法，其特征在于包括：将芫花粉碎投入提取罐中，加入6-12倍的60-85％乙醇微波提取2-3次，提取液减压浓缩至无醇味，用乙醚萃取多次，弃去乙醚层，水层加入大孔吸附树脂吸附，水醇洗脱，洗脱液浓缩得浓缩物，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离得到分离液，回收试剂，再以环己烷-丙酮(3∶1)重结晶得高含量芫花素。

所述大孔吸附树脂是HPD600、AB-8、HPD100，上样浓度为0.4-0.8g/ml，流速为1-3BV/h，柱径高比为1∶3-8，乙醇浓度为30％、60％、90％。

所述高速逆流色谱溶剂系统环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体积比为(9-11)∶(8-12)∶(4-6)∶(3-5)。

本发明的特点是：

(1)微波提取能耗低、提取率高；

(2)采用大孔树脂柱层析，吸附效果好，生产周期短；

(3)采用高速逆流色谱分离纯化，无产品损失，分离高效、制备量大、分离系统可重复使用，对环境污染小。

下面将结合具体实施例进一步说明本发明，但本发明要求保护的范围并不局限于下列实施方式。

具体实施方式：

实施例1：

取芫花药材粉碎过40目筛，取1kg投入微波提取罐中，加入8L的60％乙醇溶液，提取1小时，抽出提取液，再加入6L60％乙醇提取20分钟，合并提取液减压浓缩至无醇味，加入等体积的乙醚萃取3次，弃去乙醚层，得到水层；将水层调节浓度至0.4g/ml，加入HPD600大孔吸附树脂吸附，上样流速为2BV/h，采用柱径高比为1∶4，依次用30％、60％、90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱部分，减压浓缩得浓缩物36g，取环己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比10∶10∶6∶3混合，置于分液漏斗中分层，取上相作流动相，下相作固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节750r/min，取乙酸乙酯溶解浓缩物注入色谱仪，分离芫花素，收集芫花素流分，减压浓缩得粗晶，再以环己烷-丙酮(3∶1)重结晶2次，滤出晶体，干燥得淡黄色芫花素3.2g，HPLC法检测其含量为98.6％。

实施例2：

取芫花药材粉碎过40目筛，取1kg投入微波提取罐中，加入6L的70％乙醇溶液，提取1小时，抽出提取液，然后加入6L70％乙醇提取30分钟，抽提出提取液，再加入4L70％乙醇提取20分钟，合并提取液减压浓缩至无醇味，加入等体积的乙醚萃取5次，弃去乙醚层，得到水层；将水层调节浓度至0.6g/ml，加入HPD600大孔吸附树脂吸附，上样流速为1BV/h，采用柱径高比为1∶6，依次用30％、60％、90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱部分，减压浓缩得浓缩物34g，取环己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比8∶11∶3∶5混合，置于分液漏斗中分层，取上相作流动相，下相作固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节750r/min，取乙酸乙酯溶解浓缩物注入色谱仪，分离芫花素，收集芫花素流分，减压浓缩得粗晶，再以环己烷-丙酮(3∶1)重结晶2次，滤出晶体，干燥得淡黄色芫花素2.8g，HPLC法检测其含量为98.8％。

实施例3：

取芫花药材粉碎过40目筛，取1kg投入微波提取罐中，加入10L的85％乙醇溶液，提取1.5小时，抽出提取液，然后加入5L85％乙醇提取50分钟，抽提出提取液，再加入3L85％乙醇，合并提取液减压浓缩至无醇味，加入等体积的乙醚萃取3次，弃去乙醚层，得到水层；将水层调节浓度至0.5g/ml，加入AB-8大孔吸附树脂吸附，上样流速为2BV/h，采用柱径高比为1∶3，依次用30％、60％、90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱部分，减压浓缩得浓缩物29g，取环己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比12∶9∶4∶4混合，置于分液漏斗中分层，取上相作流动相，下相作固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节750r/min，取乙酸乙酯溶解浓缩物注入色谱仪，分离芫花素，收集芫花素流分，减压浓缩得粗晶，再以环己烷-丙酮(3∶1)重结晶2次，滤出晶体，干燥得淡黄色芫花素2.4g，HPLC法检测其含量为98.5％。

实施例4：

取芫花药材粉碎过40目筛，取2kg投入微波提取罐中，加入24L的80％乙醇溶液，提取1小时，抽出提取液，再加入16L80％乙醇提取30分钟，合并提取液减压浓缩至无醇味，加入等体积的乙醚萃取4次，弃去乙醚层，得到水层；将水层调节浓度至0.8g/ml，加入HPD100大孔吸附树脂吸附，上样流速为3BV/h，采用柱径高比为1∶8，依次用30％、60％、90％乙醇洗脱，收集90％乙醇洗脱部分，减压浓缩得浓缩物67g，取环己烷、乙酸乙酯、甲醇、水按体积比9∶10∶3∶4混合，置于分液漏斗中分层，取上相作流动相，下相作固定相，开启高速逆流色谱仪，调节转速调节750r/min，取乙酸乙酯溶解浓缩物注入色谱仪，分离芫花素，收集芫花素流分，减压浓缩得粗晶，再以环己烷-丙酮(3∶1)重结晶2次，滤出晶体，干燥得淡黄色芫花素5.5g，HPLC法检测其含量为98.3％。

Claims

1.一种从芫花中提取芫花素的方法，其特征在于包括：将芫花粉碎投入提取罐中，加入6-12倍的60-85％乙醇微波提取2-3次，提取液减压浓缩至无醇味，用乙醚萃取多次，弃去乙醚层，水层加入大孔吸附树脂吸附，水醇洗脱，洗脱液浓缩得浓缩物，以环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水为溶剂系统，采用高速逆流色谱分离得到分离液，回收试剂，再以环己烷-丙酮(3∶1)重结晶得高含量芫花素。

2.根据权利要求1所述提取芫花素的方法，其特征在于所述大孔吸附树脂是HPD600、AB-8、HPD100，上样浓度为0.4-0.8g/ml，流速为1-3BV/h，柱径高比为1∶3-8，乙醇浓度为30％、60％、90％。

3.根据权利要求1所述提取芫花素的方法，其特征在于所述高速逆流色谱溶剂系统环己烷-乙酸乙酯-甲醇-水体积比为(9-11)∶(8-12)∶(4-6)∶(3-5)。