CN112028865A - 一种从藤茶中提取制备高含量二氢杨梅素的方法 - Google Patents

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Abstract

本发明公开了一种从藤茶中提取制备高含量二氢杨梅素的方法，通过提取、分离、乙醇重结晶等步骤，制备高含量二氢杨梅素。本发明只使用溶剂水和乙醇，具有无污染、工艺简单、操作方便、效益高等特点，适合用于二氢杨梅素的生产。

Description

一种从藤茶中提取制备高含量二氢杨梅素的方法
技术领域
本发明涉及生物质提取技术领域，具体涉及一种高含量二氢杨梅素的提取方法。
背景技术
藤茶，属葡萄科蛇葡萄属中的一种野生藤本植物，学名为显齿蛇葡萄,主要分布于湖北、湖南、江西、云南、贵州等省，在少数民族地区多用于治疗感冒发热、咽喉肿痛、黄疸型肝炎等疾病。
藤茶中含有大量的黄酮类化合物，主体物质为二氢杨梅素，在有效部位含量甚至高达27％。黄酮类含量较高使得其对心律失常、心肌缺血、高血压、冠心病、动脉粥样硬化等心血管疾病有较好的预防作用。同时藤茶中富含的膳食纤维、胡萝卜素和维生素E，所以其对癌症有较好的预防作用。藤茶水浸出物中含有丰富的糖和氨基酸，包括人体必需的8种氨基酸，具有一定的营养保健作用。
用作茶饮，藤茶在我国民间饮用历史非常悠久，例如湘西土家族应用历史已有700多年，迄今仍被广泛应用。藤茶已在民间不仅作为保健茶被长期饮用，且内服外洗能够治疗多种疾病。但其临床观察及疗效物质基础研究均不够深入。例如，现代化学成分研究表明，藤茶主要含有二氢杨梅素等黄酮类成分，其有望被作为添加剂，用于药物、食品以及化妆品中，前景广阔，因此有必要对藤茶进行深入研究，以进一步明确其疗效物质基础。
藤茶中含有丰富的黄酮类物质，是目前所被发现黄酮含量最高的植物之一，被称为“黄酮之王”。这些物质具有明显的保肝护肝作用，同时也可以抑制脂肪肝的形成，还具备抗菌、消炎止痛的效果，是由于藤茶中的黄酮所具有的基本生物学作用之一。另外黄酮的清咽润喉功能，主要是通过消炎止痛和促进组织再生作用实现的，适宜作为咽喉保健产品。藤茶清热解毒力强，是天然的抗生素，有极强的消炎作用，其富含的二氢杨梅素消炎效果是青霉素的30倍，对于由于抽烟、喝酒、熬夜等引起的慢性咽炎有良好的效果，且适当饮用时无明显毒副作用。二氢杨梅素在高纯度时为白色或类白色粉末，具有清除自由基、抗氧化、抗血栓、抗肿瘤、消炎等多种奇特功效；还具有解除醇中毒、预防酒精肝、脂肪肝、抑制肝细胞恶化、降低肝癌的发病率等作用；易溶于热水，热乙醇及丙酮，溶于乙醇、甲醇，极微溶于乙酸乙酯，不溶于氯仿、石油醚。
目前，高含量二氢杨梅素的制备方法有大孔树脂纯化、水相重结晶等工艺，分离纯化周期长，且提取制备过程容易造成二氢杨梅素的收率偏低。
发明内容
本发明的目的是提供一种方便直接、工艺简单、产品稳定、收率高、可作为多种研究及功能食品原料的高含量二氢杨梅素的提取制备方法。本发明通过提取，一步反相重结晶技术进行纯化，得到一种高含量的二氢杨梅素。
本发明提供了如下技术方案：
一种提取制备高含量二氢杨梅素的工艺方法，包括如下步骤：
(1)提取：取藤茶药材，加10～20倍量水，70℃～90℃下提取2～3次，每次1～2小时；
(2)过滤：通过40～60目过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)冷却：待提取滤液冷却后进入下一步；
(4)固液分离：将冷却液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物；
(5)一步反相重结晶：将藤茶粗提物用25～35倍60％～80％乙醇加热溶解1～2小时，20nm～50nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到10％～20％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置8～10小时。
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过80～100目离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素。
优选地，步骤(3)中冷却6-9小时，温度冷至20℃～40℃。
优选地，步骤(4)中经固液分离后二氢杨梅素含量为80wt％以上。
优选地，步骤(5)中将藤茶粗提物用25～30倍70％～80％乙醇加热溶解1～2小时，30nm～50nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到10％～15％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置8～10小时。
作为本发明的另一项发明目的，本发明还提供了采用上述制备方法得到的二氢杨梅素提取物，其中二氢杨梅素含量在98wt％以上。
作为本发明的另一项发明目的，本发明还提供了二氢杨梅素提取物作为功能性食品原料的用途，其添加量为5-10wt％。
作为本发明的另一项发明目的，本发明还提供了二氢杨梅素提取物作为原料生产保健酒的用途，其添加量为0.02-0.10wt％。
本发明与现有技术相比，本发明具有以下优点：
(一)工艺简单，生产周期短，产品收率高，易推广：与常见的二氢杨梅素提取工艺相比，本发明除了利用水溶剂提取二氢杨梅素完全的特点，同时利用卧螺离心实现固液分离，收集粗提物，再用一步反相溶剂重结晶法得到高含量二氢杨梅素，产品收率高，且可缩短生产周期、降低生产成本。
(二)条件温和、环境友好：本发明采用的水提一步反相溶剂重结晶方法，只有水和乙醇溶剂，不会对环境造成污染，且提取条件温和，各工序之间无剧烈温差变化，减少了能源浪费，有利于进一步降低成本、节约资源。
(三)可作为研究样品以及功能食品原料，扩大应用范围：本专利发明制备的高含量二氢杨梅素可作为工作对照品、天然植物添加剂等使用，亦可在酒体中按照0.02-0.10％的添加量应用，还可作为功能食品原料，按照5-10％的添加量应用，开发相关的保肝护肝产品。
附图说明
图1是本发明的制备工艺流程图。
具体实施方式
为了使本发明的目的、技术方案及优点更加清楚明白，下面结合附图和具体实施例对本发明做进一步说明。应当理解，此处所描述的具体实施例仅用以解释本发明，并不用于限定本发明。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
(1)提取：取20千克藤茶药材，加10倍量水，70℃下提取2次，每次1小时；
(2)过滤：趁热通过40目双联过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)冷却：待提取滤液冷却6小时，温度冷至20℃进入下一步；
(4)固液分离：将冷却液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物，二氢杨梅素含量为82％，收率为32％；
(5)一步反相重结晶：将82％含量的藤茶粗提物用25倍70％乙醇加热溶解1小时，30nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到10％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置8小时；
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过80目下卸料离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素，二氢杨梅素含量98.2％，收率为21％。
实施例2
(1)提取：取30千克藤茶药材，加15倍量水，80℃下提取2次，每次1.5小时；
(2)过滤：趁热通过50目双联过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)冷却：待提取滤液冷却8小时，温度冷至30℃进入下一步；
(4)固液分离：将冷却液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物，二氢杨梅素含量为83％，收率为31％；
(5)一步反相重结晶：将83％含量的藤茶粗提物用28倍75％乙醇加热溶解1.5小时，40nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到13％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置9小时；
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过80目下卸料离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素，二氢杨梅素含量98.5％，收率为20％。
实施例3
(1)提取：取40千克藤茶药材，加20倍量水，90℃下提取3次，每次2小时；
(2)过滤：趁热通过60目双联过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)冷却：待提取滤液冷却9小时，温度冷至40℃进入下一步；
(4)固液分离：将冷却液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物，二氢杨梅素含量为83％，收率为33％；
(5)一步反相重结晶：将83％含量的藤茶粗提物用30倍80％乙醇加热溶解2小时，50nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到15％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置10小时；
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过100目下卸料离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素，二氢杨梅素含量98.4％，收率为24％。
对比例1
(1)提取：取40千克藤茶药材，加20倍量水，90℃下提取3次，每次2小时；
(2)过滤：趁热通过60目双联过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)冷却：待提取滤液冷却9小时，温度冷至40℃进入下一步；
(4)固液分离：将冷却液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物，二氢杨梅素含量为83％，收率为33％；
(5)水相重结晶：将83％含量的藤茶粗提物用30倍纯净水加热溶解完全，趁热用滤纸过滤，滤液冷却后静置10小时待析晶；
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过100目下卸料离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素，二氢杨梅素含量为91.5％，收率为13％。
对比例2
(1)提取：取40千克藤茶药材，加20倍量40％乙醇，90℃下提取3次，每次2小时；
(2)过滤：趁热通过60目双联过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)浓缩：将过滤清液在65℃下进行减压浓缩至无醇；
(4)固液分离：将浓缩液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物，二氢杨梅素含量为75％，收率为25％；
(5)水相重结晶：将75％含量的藤茶粗提物用25倍纯净水加热溶解完全，趁热用滤纸过滤，滤液冷却后静置8小时待析晶；
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过100目下卸料离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素，二氢杨梅素含量为88.2％，收率为15％。
对比例3
(1)提取：取30千克藤茶药材，加20倍量水，90℃下提取3次，每次2小时；
(2)过滤：趁热通过60目双联过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)大孔树脂纯化：将沉淀析出之前的清液通过大孔树脂进行分离纯化，收集50％乙醇洗脱液；
(4)浓缩：将50％乙醇洗脱液在65℃下进行减压浓缩；
(5)干燥：将浓缩液进行板式真空干燥，即得二氢杨梅素，二氢杨梅素含量为85.6％，收率为18％。
以上所述实施例仅表达了本发明的实施方式，其描述较为具体和详细，但并不能因此而理解为对本发明专利范围的限制。应当指出的是，对于本领域的普通技术人员来说，在不脱离本发明构思的前提下，还可以做出若干变形和改进，这些都属于本发明的保护范围。因此，本发明专利的保护范围应以所附权利要求为准。

Claims (7)

1.一种提取制备高含量二氢杨梅素的工艺方法，包括如下步骤：
(1)提取：取藤茶药材，加10～20倍量水，70℃～90℃下提取2～3次，每次1～2小时。
(2)过滤：通过40～60目过滤器将提取液从药渣中过滤出来，收集清液；
(3)冷却：待提取滤液冷却后进入下一步。
(4)固液分离：将冷却液通过卧螺离心机进行固液分离，收集沉淀，为藤茶粗提物；
(5)一步反相重结晶：将藤茶粗提物用25～35倍60％～80％乙醇加热溶解1～2小时，20nm～50nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到10％～20％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置8～10小时。
(6)过滤：将重结晶后的溶液和沉淀通过80～100目离心机进行过滤分离，收集沉淀；
(7)干燥：将沉淀干燥后，即得二氢杨梅素。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中冷却6-9小时，温度冷至20℃～40℃。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(4)中经固液分离后二氢杨梅素含量为80wt％以上。
4.根据权利要求1-3所述的方法，其特征在于，步骤(5)中将藤茶粗提物用25～30倍70％～80％乙醇加热溶解1～2小时，30nm～50nm陶瓷膜过滤，滤液加水稀释到10％～15％乙醇浓度进行一步反相重结晶，静置8～10小时。
5.根据权利要求1-4任一项所述的方法制备得到的二氢杨梅素提取物，其特征在于，二氢杨梅素含量大于98wt％。
6.权利要求5所述的二氢杨梅素提取物作为功能性食品原料的用途，其特征在于，添加量为5-10wt％。
7.权利要求5所述的二氢杨梅素提取物作为原料生产保健酒的用途，其特征在于，添加量为0.02-0.10wt％。
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