CN116987056A - 一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法。包括下述步骤：冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3‑8倍的水中，0‑10℃搅拌20‑40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；热水提取；萃取；乙酸乙酯萃取；浓缩萃取液；析出晶体。本发明利于鞭质和糖类等水溶性物质较易溶解于冷水中而二氢槲皮素不易溶解于冷水，新增冷水去杂步骤，有效解决落叶松中鞭质和多糖等水溶性多羟基物质会对二氢槲皮素提取进行干扰的技术问题，从而提高二氢槲皮素的提取率和纯度。
Description
技术领域
本发明涉及一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法。
背景技术
二氢槲皮素(dihydroquercetin,3,5,7,3',4'-5hydrordihydrogenflavonol)是一种广泛应用的二氢黄酮醇类化合物，也称为紫杉叶素。它具有抗辐射和抗氧化特性，能够抑制细胞膜的病变，阻碍自由基的破坏作用，防止细胞老化和各种疾病的发展。它具有多种医学用途，也可用作食品添加剂，可延长食品的保存期限，赋予食品珍贵的药用价值。其4',7-OH及3',4'邻位二羟基的存在使其抗氧化能力优于一般的生物类黄酮，具有极大的研究、开发、利用价值和广阔的市场前景。
二氢槲皮素是自然界中存在的一种重要的二氢黄酮醇类化合物，又称花旗松素、双氢栎精等。它具有许多重要的生物学活性，能够抑制或激活多种酶，产生不同的生理效应。由于其含有较多的酚羟基，具有抗氧化、抗辐射、抗病毒和抗肿瘤的活性。二氢槲皮素的抗氧化特性可以同合成的或天然的抗氧化剂相媲美，且优于许多现有的抗氧化剂。此外，二氢槲皮素对胎儿无毒、无致畸、无致过敏和无致突变性。它可以作为抗氧剂，应用于植物油、动物油、奶粉及含脂糕点等食品，也可用于药学领域中的氧化胁迫类疾病(如心血管病和野马肺)等。二氢槲皮素的提取可采用热水提取、丙酮和乙醇回流提取，或采用乙醇从黄芪叶中提取，其中落叶松是其主要工业来源。
二氢槲皮素具有很高的开发、利用价值和广阔的市场前景。然而，由于目前对二氢槲皮素的研究还比较有限，因此需要进一步深入的研究来揭示其更多的生物学功能和应用价值。一些研究表明，二氢槲皮素可能具有抗氧化、抗炎和抗肿瘤等多种生物学活性，因此有望成为一种具有广泛应用价值的天然药物。
此外，二氢槲皮素在医药、化妆品、食品、饲料和环境治理等领域都有着广泛的应用前景。例如，在医药领域，二氢槲皮素可能被用作抗癌药物或辅助治疗心血管疾病；在化妆品领域，二氢槲皮素可能被用作天然抗氧化剂和美白剂；在食品和饲料领域，二氢槲皮素可能被用作天然防腐剂和增强营养素的添加剂；在环境治理领域，二氢槲皮素可能被用作一种有效的废水处理剂。
总的来说，二氢槲皮素作为一种天然的生物活性物质，具有广泛的应用前景和开发利用价值，但其在不同领域的应用还需要进一步的研究和开发。随着人们对其认识的不断深入和技术的不断进步，相信二氢槲皮素未来将会有更多的应用和发展空间。
落叶松(Larix)是一种针叶树，分布于北半球温带和寒带地区，特别是欧洲、亚洲和北美洲的森林中。它们通常高大挺拔，叶子呈针形，而且会在秋季变黄并脱落，因此得名落叶松。落叶松具有很高的经济和生态价值，它们的木材被广泛用于建筑、家具和造船等领域。除了其木材，落叶松的树皮也是它们重要的资源之一。树皮中富含二氢化槲皮素。落叶松的树皮含量较高的二氢化槲皮素可以通过水提取、超声波提取、微波辅助提取等多种方法进行提取。
落叶松中含有一些多羟基物质，例如鞭质和多糖等水溶性物质。在对落叶松进行二氢槲皮素提取时，这些水溶性物质会与目标化合物二氢化槲皮素混合在一起，从而对提取产生干扰，导致二氢槲皮素的降解、氧化等不良反应的发生。
现有技术中并未关注到这一问题，更未有效解决这一技术问题。
发明内容
针对现有技术中存在的不足，本发明所要解决的技术问题是提供一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法。
本发明利于鞭质和糖类等水溶性物质较易溶解于冷水中而二氢槲皮素不易溶解于冷水，新增冷水去杂步骤，有效解决落叶松中鞭质和多糖等水溶性多羟基物质会对二氢槲皮素提取进行干扰的技术难题。进而，实现如下发明内容：
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
冷水去杂：将落叶松粉加入冷水中搅拌；
热水提取；
萃取；
浓缩萃取液；
析出晶体。
优选地，落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取；
萃取；
浓缩萃取液；
析出晶体。
优选地，一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的水，加热至80-90℃，搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩得到浓缩提取液；乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩；
析出晶体：浓缩萃取液再加入水中，低温冷却，析出晶体，干燥。
优选地，一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至20-80目，烘干，控制水分在5-10wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的水，加热至80-90℃，50-500转/分钟搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液重量2-6倍的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其重量2-4倍的水中，在5-10℃冷却，析出晶体，60-80℃干燥40-100分钟，得到二氢槲皮素。
优选地，一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至20-80目，烘干，控制水分在5-10wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
酶处理：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的加酶水溶液中，调节pH为4.5-6.5，50-500转/分钟25-40℃搅拌60-120分钟；
所述加酶水溶液为0.1-0.3mg/mL的木质素酶和0.1-0.3mg/mL纤维素酶的水溶液；
热水提取：加热至80-90℃，50-500转/分钟搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液重量2-6倍的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其重量2-4倍的水中，在5-10℃冷却，析出晶体，60-80℃干燥40-100分钟，得到二氢槲皮素。
本发明提供的落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，本发明利于鞭质和糖类等水溶性物质较易溶解于冷水中而二氢槲皮素不易溶解于冷水，新增冷水去杂步骤，有效解决落叶松中鞭质和多糖等水溶性多羟基物质会对二氢槲皮素提取进行干扰的技术问题，从而提高二氢槲皮素的提取率和纯度。
具体实施方式
本发明提供一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
1)预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至20-80目，烘干，控制水分在5-10wt％，得到落叶松粉；
在本步骤中，落叶松的树皮中含有一定的杂质，如树脂和树胶等，这些杂质会影响提取的纯度和质量，甚至可能导致提取过程中的操作问题。去除树皮可以减少这些杂质的含量，从而提高提取物的纯度和质量。将落叶松材料粉碎可以增加的表面积，从而有利于后续的提取过程。此外，粉碎也可以使材料更加均匀地处理，从而提高提取效率。落叶松的含水量会影响提取过程的效率和稳定性。烘干可以将落叶松的含水量降低到一定水平，使其更加稳定，同时也可以减少后续处理中的水分干扰。
2)冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
冷水去杂的主要作用是去除落叶松粉中的多羟基物质，如鞭质和糖类等水溶性物质，以减少对提取二氢槲皮素的干扰。具体而言，这些多羟基物质的存在会对二氢槲皮素的提取造成干扰，因此需要将它们从落叶松粉中除去。
在冷水去杂的过程中，落叶松粉与水的混合物在0-10℃的低温条件下搅拌20-40分钟，鞭质和糖类等水溶性物质会溶解于水中，而二氢槲皮素的溶解度较低，所以在此条件下二氢槲皮素溶解很少。通过筛网分离，可以得到去除了大部分多羟基物质的水洗后的落叶松粉。
实验发现，如果使用温度高于10℃的水或者搅拌时间过长，会导致二氢槲皮素的溶解度增加，从而导致损失。同时，如果搅拌时间不足，则鞭质和糖类等多羟基物质不易较多溶出，影响后续提取过程。
3)酶处理：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的加酶水溶液中，调节pH为4.5-6.5，50-500转/分钟25-40℃搅拌60-120分钟；
所述加酶水溶液为0.1-0.3mg/mL的木质素酶和0.1-0.3mg/mL纤维素酶的水溶液；
本发明中，在冷水去杂步骤之后，加入酶进行处理，可以有效促进目标活性成分二氢槲皮素的提取。
具体的，所述酶为纤维素酶和木质素酶中的至少一种。
纤维素酶：落叶松中纤维素是细胞壁的主要成分之一，难以被水解和提取。加入纤维素酶可以降解纤维素，使其变成易于溶解的低聚糖，从而提高二氢槲皮素的释放度和溶解度。
木质素酶：落叶松中木质素是另一个主要的细胞壁成分，与纤维素一起构成了细胞壁的主要结构。加入木质素酶可以降解木质素，使其变成易于溶解的低聚酚类物质，从而增加植物中二氢槲皮素的释放度和溶解度。
此外，由于落叶松中蛋白质和果胶，含量较低，不是落叶松中的主要成分之一。所以在酶制剂的选择中放弃使用蛋白酶和果胶酶。
4)热水提取：加热至80-90℃，50-500转/分钟搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
二氢槲皮素在高温下的溶解度更高，加热可以帮助二氢槲皮素从落叶松粉中更充分地溶解到提取液中。此外，搅拌有助于加快二氢槲皮素与水的混合和传质，从而提高提取效率。
5)萃取：将提取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液重量2-6倍的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
在这个步骤中，将提取液减压浓缩，以减少体积并浓缩萃取液中的二氢槲皮素。然后，使用乙酸乙酯作为有机溶剂，对二氢槲皮素进行萃取，二氢槲皮素会在水相和有机相之间进行分配，富集在有机相中。最后，通过减压浓缩，可以获得浓缩萃取液，其中包含了富集的二氢槲皮素，为下一步的提纯打下基础。
6)浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩萃取液；
在这个步骤中，通过浓缩样品，使得其中的目标化合物更加富集。
7)析出晶体：浓缩萃取液再加入其重量2-4倍的水中，在5-10℃冷却，析出晶体，60-80℃干燥40-100分钟，得到二氢槲皮素。
该步骤的作用是将浓缩萃取液中的二氢槲皮素结晶出来，并通过干燥使其转化为固态物质，便于后续的分离和纯化。具体而言，该步骤中将浓缩萃取液中的二氢槲皮素进行结晶，是通过在低温下加入水使其析出晶体。随后，晶体经过过滤和干燥处理，使其转化为固态的二氢槲皮素物质。
下述具体实施例及对比例中：落叶松，采用长白落叶松。木质素酶，酶活力为10000u，山东诺杰生物科技有限公司提供。纤维素酶，酶活力为50u/mg，货号为S10041，上海源叶生物科技有限公司提供。
对比例1
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
热水提取：将落叶松粉加入其10倍重量的水，加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，
70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例1
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，5℃搅拌30分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的水，加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例2
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，10℃搅拌30分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的水，加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例3
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，15℃搅拌30分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的水，加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例4
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，5℃搅拌50分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的水，加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例5
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，5℃搅拌30分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
酶处理：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的加酶水溶液中，调节pH为6.0，200转/分钟30℃搅拌90分钟；
所述加酶水溶液为0.4mg/mL的木质素酶的水溶液；
热水提取：加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例6
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，5℃搅拌30分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
酶处理：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的加酶水溶液中，调节pH为6.0，200转/分钟30℃搅拌90分钟；
所述加酶水溶液为0.4mg/mL纤维素酶的水溶液；
热水提取：加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
实施例7
一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，具体步骤如下：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至50目，50℃烘干，控制水分在8wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其5倍重量的水中，5℃搅拌30分钟，过100目筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
酶处理：将水洗后的落叶松粉加入其10倍重量的加酶水溶液中，调节pH为6.0，200转/分钟30℃搅拌90分钟；
所述加酶水溶液为0.2mg/mL的木质素酶和0.2mg/mL纤维素酶的水溶液；
热水提取：加热至85℃，200转/分钟搅拌90分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液5倍重量的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的10％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其3倍重量的水中，在8℃冷却，析出晶体，70℃干燥60分钟，得到二氢槲皮素。
测试例1
表1：二氢槲皮素提取的测试结果表
| 二氢槲皮素提取率，％ | 二氢槲皮素纯度，％ | |
| 实施例1 | 0.36 | 94.2 |
| 实施例2 | 0.35 | 94.0 |
| 实施例3 | 0.29 | 90.3 |
| 实施例4 | 0.30 | 90.5 |
| 实施例5 | 0.48 | 98.1 |
| 实施例6 | 0.47 | 97.8 |
| 实施例7 | 0.48 | 99.3 |
| 对比例1 | 0.21 | 85.3 |
二氢槲皮素提取率：落叶松中二氢槲皮素的提取效果以提取率指标来衡量。
k＝m1/m×100％
式中：k--二氢槲皮素提取率，％；
m1--最终得到的二氢槲皮素的质量，g；
m---原料中落叶松粉的质量，g。
二氢槲皮素纯度测试：采用HPLC法测定二氢槲皮素纯度；
HPLC色谱条件如下：色谱柱：AgilentZORBAXSB-C18色谱柱(250mm×9.4mm，5μm)及AgilentZORBAXSB-C18保护柱(12.5mm×4.6mm，5μm)；流动相：甲醇(A)-0.1％甲酸溶液(B)，梯度洗脱：0-5min：20-25％A；5-15min：25-40％A；15-30min：40-90％A；30-35min：90％A；柱温：35℃；流速：1.0mL/min；检测波长：290nm；进样体积：10μL。
上述实施方式仅为本发明的优选实施方式，不能以此来限定本发明保护的范围，本领域的技术人员在本发明的基础上所做的任何非实质性的变化及替换均属于本发明所要求保护的范围。
Claims (6)
1.一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
冷水去杂：将落叶松粉加入冷水中搅拌；
热水提取；
萃取；
浓缩萃取液；
析出晶体。
2.如权利要求1所述的落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取；
萃取；
浓缩萃取液；
析出晶体。
3.如权利要求1所述的落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的水，加热至80-90℃，搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩得到浓缩提取液；乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩；
析出晶体：浓缩萃取液再加入水中，低温冷却，析出晶体，干燥。
4.如权利要求1所述的落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至20-80目，烘干，控制水分在5-10wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
热水提取：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的水，加热至80-90℃，50-500转/分钟搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液重量2-6倍的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其重量2-4倍的水中，在5-10℃冷却，析出晶体，60-80℃干燥40-100分钟，得到二氢槲皮素。
5.如权利要求1所述的落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，包括下述步骤：
预处理：将干燥落叶松去除树皮后，粉碎至20-80目，烘干，控制水分在5-10wt％，得到落叶松粉；
冷水去杂：将落叶松粉加入其重量3-8倍的水中，0-10℃搅拌20-40分钟，过筛自然沥去水分，得到水洗后的落叶松粉；
酶处理：将水洗后的落叶松粉加入其重量5-15倍的加酶水溶液中，调节pH为4.5-6.5，50-500转/分钟25-40℃搅拌60-120分钟；
热水提取：加热至80-90℃，50-500转/分钟搅拌60-120分钟，过滤掉落叶松粉，得到提取液；
萃取：将提取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩提取液；再用浓缩提取液重量2-6倍的乙酸乙酯萃取，得到萃取液；
浓缩萃取液：将萃取液减压浓缩至原体积的5-15％，得到浓缩萃取液；
析出晶体：浓缩萃取液再加入其重量2-4倍的水中，在5-10℃冷却，析出晶体，60-80℃干燥40-100分钟，得到二氢槲皮素。
6.如权利要求1所述的落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法，其特征在于：所述酶为纤维素酶和木质素酶中的至少一种。
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