CN116370517B - 一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法 - Google Patents
一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法 Download PDFInfo
- Publication number
- CN116370517B CN116370517B CN202310176041.5A CN202310176041A CN116370517B CN 116370517 B CN116370517 B CN 116370517B CN 202310176041 A CN202310176041 A CN 202310176041A CN 116370517 B CN116370517 B CN 116370517B
- Authority
- CN
- China
- Prior art keywords
- solution
- cranberries
- extracting
- extraction
- enrichment
- Prior art date
- Legal status (The legal status is an assumption and is not a legal conclusion. Google has not performed a legal analysis and makes no representation as to the accuracy of the status listed.)
- Active
Links
- 238000000605 extraction Methods 0.000 title claims abstract description 54
- 240000001717 Vaccinium macrocarpon Species 0.000 title claims abstract description 47
- 235000021019 cranberries Nutrition 0.000 title claims abstract description 31
- 229930003935 flavonoid Natural products 0.000 title claims abstract description 27
- 150000002215 flavonoids Chemical class 0.000 title claims abstract description 27
- 235000017173 flavonoids Nutrition 0.000 title claims abstract description 27
- 239000000126 substance Substances 0.000 title claims abstract description 23
- LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N Ethanol Chemical compound CCO LFQSCWFLJHTTHZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 53
- 229910021538 borax Inorganic materials 0.000 claims abstract description 26
- 239000004328 sodium tetraborate Substances 0.000 claims abstract description 26
- 235000010339 sodium tetraborate Nutrition 0.000 claims abstract description 26
- HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N flavonol Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C(O)=C1C1=CC=CC=C1 HVQAJTFOCKOKIN-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 24
- 235000011957 flavonols Nutrition 0.000 claims abstract description 24
- XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N water Substances O XLYOFNOQVPJJNP-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 21
- QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N Sulfuric acid Chemical compound OS(O)(=O)=O QAOWNCQODCNURD-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 20
- VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N Hydrochloric acid Chemical compound Cl VEXZGXHMUGYJMC-UHFFFAOYSA-N 0.000 claims abstract description 18
- 235000012545 Vaccinium macrocarpon Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 235000002118 Vaccinium oxycoccus Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 235000004634 cranberry Nutrition 0.000 claims abstract description 17
- 238000002156 mixing Methods 0.000 claims abstract description 17
- 239000012065 filter cake Substances 0.000 claims abstract description 16
- 238000001035 drying Methods 0.000 claims abstract description 15
- 239000002244 precipitate Substances 0.000 claims abstract description 15
- 239000000284 extract Substances 0.000 claims abstract description 14
- 235000011389 fruit/vegetable juice Nutrition 0.000 claims abstract description 14
- 238000010992 reflux Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000967 suction filtration Methods 0.000 claims abstract description 13
- 238000000034 method Methods 0.000 claims abstract description 12
- 238000000498 ball milling Methods 0.000 claims abstract description 11
- 238000001914 filtration Methods 0.000 claims abstract description 11
- 239000000843 powder Substances 0.000 claims abstract description 10
- 238000005406 washing Methods 0.000 claims abstract description 9
- 238000010438 heat treatment Methods 0.000 claims abstract description 8
- 150000007946 flavonol Chemical class 0.000 claims abstract description 7
- 239000000243 solution Substances 0.000 claims description 70
- 230000000694 effects Effects 0.000 claims description 19
- 108090000790 Enzymes Proteins 0.000 claims description 16
- 102000004190 Enzymes Human genes 0.000 claims description 16
- 229940088598 enzyme Drugs 0.000 claims description 16
- 239000007864 aqueous solution Substances 0.000 claims description 12
- 108010059892 Cellulase Proteins 0.000 claims description 7
- 229940106157 cellulase Drugs 0.000 claims description 7
- 239000000203 mixture Substances 0.000 claims description 7
- 230000007935 neutral effect Effects 0.000 claims description 7
- 230000001105 regulatory effect Effects 0.000 claims description 7
- 238000000227 grinding Methods 0.000 claims description 6
- 238000009210 therapy by ultrasound Methods 0.000 claims description 6
- 239000012153 distilled water Substances 0.000 claims description 5
- 238000001816 cooling Methods 0.000 claims description 4
- 239000000047 product Substances 0.000 claims description 4
- 238000009835 boiling Methods 0.000 claims description 3
- 238000001704 evaporation Methods 0.000 claims description 3
- 238000002481 ethanol extraction Methods 0.000 claims 1
- 239000002253 acid Substances 0.000 abstract description 7
- 239000004480 active ingredient Substances 0.000 abstract description 2
- 239000003513 alkali Substances 0.000 abstract description 2
- 238000003809 water extraction Methods 0.000 abstract description 2
- 150000002216 flavonol derivatives Chemical class 0.000 description 17
- 210000002421 cell wall Anatomy 0.000 description 8
- 229930003944 flavone Natural products 0.000 description 8
- 235000011949 flavones Nutrition 0.000 description 8
- GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N Thermopsosid Natural products O(C)c1c(O)ccc(C=2Oc3c(c(O)cc(O[C@H]4[C@H](O)[C@@H](O)[C@H](O)[C@H](CO)O4)c3)C(=O)C=2)c1 GAMYVSCDDLXAQW-AOIWZFSPSA-N 0.000 description 7
- 239000003480 eluent Substances 0.000 description 7
- 150000002212 flavone derivatives Chemical class 0.000 description 7
- VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N vitamin p Natural products O1C2=CC=CC=C2C(=O)C=C1C1=CC=CC=C1 VHBFFQKBGNRLFZ-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 7
- 229930182486 flavonoid glycoside Natural products 0.000 description 5
- 150000007955 flavonoid glycosides Chemical class 0.000 description 5
- 241000756042 Polygonatum Species 0.000 description 4
- 239000000835 fiber Substances 0.000 description 4
- 230000008569 process Effects 0.000 description 4
- 239000013543 active substance Substances 0.000 description 3
- CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N Acetone Chemical compound CC(C)=O CSCPPACGZOOCGX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 241000196324 Embryophyta Species 0.000 description 2
- 206010028980 Neoplasm Diseases 0.000 description 2
- REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N Quercetin Chemical compound C=1C(O)=CC(O)=C(C(C=2O)=O)C=1OC=2C1=CC=C(O)C(O)=C1 REFJWTPEDVJJIY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000944 Soxhlet extraction Methods 0.000 description 2
- 239000003929 acidic solution Substances 0.000 description 2
- 230000009471 action Effects 0.000 description 2
- 230000001476 alcoholic effect Effects 0.000 description 2
- 239000012670 alkaline solution Substances 0.000 description 2
- 230000015556 catabolic process Effects 0.000 description 2
- 210000004027 cell Anatomy 0.000 description 2
- 210000000170 cell membrane Anatomy 0.000 description 2
- 230000000052 comparative effect Effects 0.000 description 2
- 230000006378 damage Effects 0.000 description 2
- 230000007547 defect Effects 0.000 description 2
- 238000006731 degradation reaction Methods 0.000 description 2
- IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N ethanol;hydrate Chemical compound O.CCO IDGUHHHQCWSQLU-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 230000008020 evaporation Effects 0.000 description 2
- IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N kaempferol Chemical compound C1=CC(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 IYRMWMYZSQPJKC-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N kaempferol Natural products OC1=C(C(=O)c2cc(O)cc(O)c2O1)c3ccc(O)cc3 MWDZOUNAPSSOEL-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 2
- 238000000746 purification Methods 0.000 description 2
- 230000002195 synergetic effect Effects 0.000 description 2
- -1 ABTS free radical Chemical class 0.000 description 1
- 208000024827 Alzheimer disease Diseases 0.000 description 1
- 208000024172 Cardiovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 208000017667 Chronic Disease Diseases 0.000 description 1
- UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N Demethoxycapillarisin Natural products C1=CC(O)=CC=C1OC1=CC(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2O1 UBSCDKPKWHYZNX-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-IDRAQACASA-N Hirsutrin Natural products O([C@H]1[C@H](O)[C@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O1)C1=C(c2cc(O)c(O)cc2)Oc2c(c(O)cc(O)c2)C1=O OVSQVDMCBVZWGM-IDRAQACASA-N 0.000 description 1
- FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N Hyperosid Natural products OC1C(O)C(O)C(CO)OC1OC1C(=O)C2=C(O)C=C(O)C=C2OC1C1=CC=C(O)C(O)=C1 FVQOMEDMFUMIMO-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 208000008589 Obesity Diseases 0.000 description 1
- ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N Quercetagetin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=C(O)C(O)=C(O)C=C2O1 ZVOLCUVKHLEPEV-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 241000245165 Rhododendron ponticum Species 0.000 description 1
- HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N Rhynchosin Natural products C1=C(O)C(O)=CC=C1C1=C(O)C(=O)C2=CC(O)=C(O)C=C2O1 HWTZYBCRDDUBJY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 206010039966 Senile dementia Diseases 0.000 description 1
- 244000291414 Vaccinium oxycoccus Species 0.000 description 1
- 239000004410 anthocyanin Substances 0.000 description 1
- 235000010208 anthocyanin Nutrition 0.000 description 1
- 229930002877 anthocyanin Natural products 0.000 description 1
- 150000004636 anthocyanins Chemical class 0.000 description 1
- 239000003963 antioxidant agent Substances 0.000 description 1
- 230000003078 antioxidant effect Effects 0.000 description 1
- 235000006708 antioxidants Nutrition 0.000 description 1
- 230000009286 beneficial effect Effects 0.000 description 1
- 235000021028 berry Nutrition 0.000 description 1
- 208000026106 cerebrovascular disease Diseases 0.000 description 1
- 238000004440 column chromatography Methods 0.000 description 1
- 230000006866 deterioration Effects 0.000 description 1
- 201000010099 disease Diseases 0.000 description 1
- 208000037265 diseases, disorders, signs and symptoms Diseases 0.000 description 1
- 238000004821 distillation Methods 0.000 description 1
- 235000013399 edible fruits Nutrition 0.000 description 1
- 230000002526 effect on cardiovascular system Effects 0.000 description 1
- 239000000706 filtrate Substances 0.000 description 1
- 150000002213 flavones Chemical class 0.000 description 1
- 230000036541 health Effects 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-QCKGUQPXSA-N isoquercetin Natural products OC[C@@H]1O[C@@H](OC2=C(Oc3cc(O)cc(O)c3C2=O)c4ccc(O)c(O)c4)[C@H](O)[C@@H](O)[C@@H]1O OVSQVDMCBVZWGM-QCKGUQPXSA-N 0.000 description 1
- 235000008777 kaempferol Nutrition 0.000 description 1
- 239000007788 liquid Substances 0.000 description 1
- 239000000463 material Substances 0.000 description 1
- 230000004048 modification Effects 0.000 description 1
- 238000012986 modification Methods 0.000 description 1
- UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N morin Natural products OC1=CC(O)=CC(C2=C(C(=O)C3=C(O)C=C(O)C=C3O2)O)=C1 UXOUKMQIEVGVLY-UHFFFAOYSA-N 0.000 description 1
- 235000020824 obesity Nutrition 0.000 description 1
- 238000013386 optimize process Methods 0.000 description 1
- 238000006864 oxidative decomposition reaction Methods 0.000 description 1
- 239000003415 peat Substances 0.000 description 1
- 230000000149 penetrating effect Effects 0.000 description 1
- 238000001556 precipitation Methods 0.000 description 1
- 238000002360 preparation method Methods 0.000 description 1
- 230000002265 prevention Effects 0.000 description 1
- 235000005875 quercetin Nutrition 0.000 description 1
- 229960001285 quercetin Drugs 0.000 description 1
- OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N quercetin 3-O-beta-D-glucopyranoside Chemical compound O[C@@H]1[C@@H](O)[C@H](O)[C@@H](CO)O[C@H]1OC1=C(C=2C=C(O)C(O)=CC=2)OC2=CC(O)=CC(O)=C2C1=O OVSQVDMCBVZWGM-QSOFNFLRSA-N 0.000 description 1
- 238000001953 recrystallisation Methods 0.000 description 1
- 239000011347 resin Substances 0.000 description 1
- 229920005989 resin Polymers 0.000 description 1
- 238000002791 soaking Methods 0.000 description 1
- 239000002689 soil Substances 0.000 description 1
- 238000001179 sorption measurement Methods 0.000 description 1
- YMBCJWGVCUEGHA-UHFFFAOYSA-M tetraethylammonium chloride Chemical compound [Cl-].CC[N+](CC)(CC)CC YMBCJWGVCUEGHA-UHFFFAOYSA-M 0.000 description 1
- 230000001052 transient effect Effects 0.000 description 1
Classifications
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K36/00—Medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicines
- A61K36/18—Magnoliophyta (angiosperms)
- A61K36/185—Magnoliopsida (dicotyledons)
- A61K36/45—Ericaceae or Vacciniaceae (Heath or Blueberry family), e.g. blueberry, cranberry or bilberry
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/10—Preparation or pretreatment of starting material
- A61K2236/19—Preparation or pretreatment of starting material involving fermentation using yeast, bacteria or both; enzymatic treatment
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/31—Extraction of the material involving untreated material, e.g. fruit juice or sap obtained from fresh plants
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/33—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones
- A61K2236/333—Extraction of the material involving extraction with hydrophilic solvents, e.g. lower alcohols, esters or ketones using mixed solvents, e.g. 70% EtOH
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/30—Extraction of the material
- A61K2236/39—Complex extraction schemes, e.g. fractionation or repeated extraction steps
-
- A—HUMAN NECESSITIES
- A61—MEDICAL OR VETERINARY SCIENCE; HYGIENE
- A61K—PREPARATIONS FOR MEDICAL, DENTAL OR TOILETRY PURPOSES
- A61K2236/00—Isolation or extraction methods of medicinal preparations of undetermined constitution containing material from algae, lichens, fungi or plants, or derivatives thereof, e.g. traditional herbal medicine
- A61K2236/50—Methods involving additional extraction steps
- A61K2236/51—Concentration or drying of the extract, e.g. Lyophilisation, freeze-drying or spray-drying
Landscapes
- Health & Medical Sciences (AREA)
- Natural Medicines & Medicinal Plants (AREA)
- Life Sciences & Earth Sciences (AREA)
- Chemical & Material Sciences (AREA)
- Engineering & Computer Science (AREA)
- Alternative & Traditional Medicine (AREA)
- Biotechnology (AREA)
- Botany (AREA)
- Medical Informatics (AREA)
- Medicinal Chemistry (AREA)
- Microbiology (AREA)
- Mycology (AREA)
- Pharmacology & Pharmacy (AREA)
- Epidemiology (AREA)
- Animal Behavior & Ethology (AREA)
- General Health & Medical Sciences (AREA)
- Public Health (AREA)
- Veterinary Medicine (AREA)
- Extraction Or Liquid Replacement (AREA)
- Coloring Foods And Improving Nutritive Qualities (AREA)
Abstract
本发明公开了一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，包括：将蔓越莓抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣干燥后球磨粉碎，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；将S1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液；将滤饼加入含醇溶液，调节pH至碱性，得到第三富集液；将多种富集液混合后，加入浓盐酸溶液，调节pH至4～5，再次加入2％硫酸溶液，抽滤得到沉淀；将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。该方法利用了预处理、水提取、醇提取、酸提取、浓缩干燥的工艺步骤，按照一定的步骤和严格pH的控制，利用黄酮类物质对于冷热、酸碱的溶解性的不同，实现对对于蔓越莓中活性成分的依次提取，提取过程极大简化。
Description
技术领域
本发明涉及黄酮类物质提取技术领域，尤其涉及一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法。
背景技术
蔓越莓是杜鹃花科越橘属红莓苔子亚属常绿灌木，主要生长在北半球凉爽地带酸性泥炭土壤中。蔓越莓是一种高活性功能型小浆果，鲜红色果实中富含黄酮类物质、花青素、原花青素等物质。黄酮类物质作为重要的抗氧化剂，还具有重要的生理及保健功能,对包括癌症、肥胖、肿瘤、心脑血管疾病及老年痴呆等的多种慢性疾病及老年疾病均具有重要的预防和治疗作用。因此，开发从蔓越莓中提取高含量黄酮的工艺非常重要。
现有技术一种玉竹叶黄酮苷提取物及其制备方法和用途，公告号为：CN105663670A，公开记载了从玉竹叶中提取黄酮苷的方法，该方法中，直接将玉竹叶进行回流提取，未将玉竹叶进行一定的处理，导致从玉竹叶中提取黄酮苷的量不高。又如现有技术中，关于黄酮的提取中采用乙醇溶液浸泡和索氏提取相结合的方法，先通过乙醇溶液将植物样品中的黄酮逐渐萃取出来，然后在利用索氏提取进行反复蒸馏和收集，这样的做法可以提高黄酮的得率，但是溶于乙醇溶液的不只是黄酮，因此，上述方法虽然提取出了较多量的黄酮，但是黄酮的纯度较差。
发明内容
本发明克服了现有技术的不足，提供一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法。
为达到上述目的，本发明采用的技术方案为：一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，包括以下步骤：
S1、将蔓越莓去籽后，抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣干燥后球磨粉碎，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；
S2、将S1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液；
S3、将滤饼加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，调节pH至7.5～8.0，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，重复若干次后，得到第三富集液；
S4、将第一富集液、第二富集液和第三富集液混合后，加入浓盐酸溶液，调节pH至4～5，再次加入2％硫酸溶液，抽滤得到沉淀；
S5、将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。
本发明一个较佳实施例中，在S3中，在滤饼中加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，提取温度为40℃～60℃。
本发明一个较佳实施例中，含醇溶液的体积分数为75％的乙醇。
本发明一个较佳实施例中，在所述S3中，利用含醇溶液进行醇提的数量至少为2次。
本发明一个较佳实施例中，在所述S4中，将多种富集溶液混合后，在60℃～70℃下，采用37％的浓盐酸调节pH至4～5，静置后抽滤，蒸馏水洗至中性后抽滤；再采用体积为10倍量的2％的硫酸溶液，调节pH至2～3，加热微沸1～2h后，冷却静置后过滤。
本发明一个较佳实施例中，在所述S2中，向硼砂水溶液中加入酶，其中酶是纤维素酶和果胶酶；纤维素酶和果胶酶的酶活力比值为1：1.5，其中，硼砂水溶液和酶的比例不小于500U/mg。
本发明一个较佳实施例中，在所述S2中，粉末和硼砂的质量比为20～30：1，硼砂水溶液为每100ml水与0.5～1g的硼砂制备形成。
本发明一个较佳实施例中，在所述S1中，球磨为使用平均直径为4～6mm的研磨球,用量为每升溶液中加入60～80颗研磨球，300～350rpm的转速下球磨，时间为2～3h
本发明一个较佳实施例中，使用三效浓缩器浓缩，并使用低温真空干燥机，干燥重结晶得到黄酮类物质纯品，其中三效浓缩器中各效的真空度和蒸发温度分别为：一效：0.04MPa，70℃；二效：0.06MPa，60℃；三效：0.08MPa，50℃。
本发明一个较佳实施例中，在所述S5中，95％乙醇回流提取的温度为75～85℃，回流时间为0.5～1h。
本发明解决了背景技术中存在的缺陷，本发明具备以下有益效果：
(1)本发明提供了一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，该方法利用了预处理、水提取、醇提取、酸提取、浓缩干燥的工艺步骤，按照一定的步骤和严格pH的控制，利用黄酮类物质对于冷热、酸碱的溶解性的不同，实现对蔓越莓中活性成分的依次提取；采用一套提取工艺路线，提取过程极大简化，成本也极大降低。
(2)本发明中将pH调节至碱性，一方面可以活化细胞壁上的纤维，使得舒展后的纤维具有更大的比表面积，使得含醇溶液的提取效率提高，另一方面碱性容易使得细胞壁中的黄酮类物质溶解，进一步加速提取效率。
(3)本发明采用两种复合酶的协同酶解作用，同时配合低PH和较低温度的提取，减少了活性物质的降解；利用黄酮类物质溶于碱性溶液，不溶于酸性溶液的特性，采用两次阶梯酸进行提取，可以快速将富集液中的黄酮类物质沉淀。
(4)本发明在硼砂水溶液中加入酶，其中酶可以是纤维素酶、果胶酶等，其主要作用为：促进细胞壁的变形或破坏，使得以结合态形式存在于细胞壁中的黄酮类物质容易在后续中析出。
附图说明
为了更清楚地说明本发明实施例或现有技术中的技术方案，下面将对实施例或现有技术描述中所需要使用的附图作简单地介绍，显而易见地，下面描述中的附图仅仅是本发明中记载的一些实施例，对于本领域普通技术人员来讲，在不付出创造性劳动的前提下，还可以根据这些附图获得其他的附图；
图1是本发明的优选实施例的流程图。
具体实施方式
下面将结合本发明实施例中的附图，对本发明实施例中的技术方案进行清楚、完整地描述，显然，所描述的实施例仅仅是本发明一部分实施例，而不是全部的实施例。基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
在下面的描述中阐述了很多具体细节以便于充分理解本发明，但是本发明还可以采用其他不同于在此描述的其他方式来实施，因此，本发明的保护范围并不受下面公开的具体实施例的限制。
如图1所示，本发明提供了一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，包括以下步骤：
S1、将蔓越莓去籽后，抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣干燥后球磨粉碎，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；
S2、将S1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液；
S3、将滤饼加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，调节pH至7.5～8.0，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，重复若干次后，得到第三富集液；
S4、将第一富集液、第二富集液和第三富集液混合后，加入浓盐酸溶液，调节pH至4～5，再次加入2％硫酸溶液，抽滤得到沉淀；
S5、将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。
本发明S1中球磨为使用平均直径为4～6mm的研磨球,用量为每升溶液中加入60～80颗研磨球，300～350rpm的转速下球磨，时间为2～3h。
本发明在S2中，粉末和硼砂的质量比为20～30：1，硼砂水溶液为每100ml水与0.5～1g的硼砂制备形成。加热0.5～1h，在高温的过程中可以破坏蔓越莓的细胞结构的细胞膜，使得细胞膜中的黄酮醇类物质得到释放。
本发明中硼砂可以起到缓冲pH，防止氧化分解变质，可使溶解度增加的作用,从而提高产率及产品质量。按照优化的工艺,在其它参数不变的前提下,将硼砂水溶液换成水溶液进行提取，计算提取率仅为82.35％，这表明加入硼砂对提取率具有影响。
本发明中S2中通过多次水提取，实现将黄酮醇类物质中溶于水的物质，如黄酮苷类成分，其在热水中溶解度大大增加。
本发明S2中，可以在硼砂水溶液中加入酶，其中酶可以是纤维素酶、果胶酶等，其主要作用为：促进细胞壁的变形或破坏，使得以结合态形式存在于细胞壁中的黄酮醇类物质容易在后续中析出。
本发明中的S2中，可以辅以微波，以瞬时穿透式加热方式在微波场的作用下破碎植物细胞破碎，协同超声作用，从而强化对黄酮类物质的提取。
本发明中优选纤维素酶和果胶酶的酶活力比值为1：1.5，其中，硼砂水溶液和酶的比例不小于500U/mg。本发明中采用两种复合酶的协同酶解作用，同时配合低PH和较低温度的提取，减少了活性物质的降解。
在S3中，在滤饼中加入其体积8～10倍量的体积分数为50～80％含醇溶液，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1.5～2h，提取温度为40℃～60℃。
本发明中含醇溶液能够在保证提取出蔓越莓中异槲皮素、槲皮素和山奈酚等黄酮醇类组分的同时，避免溶出水溶性物质使活性偏低以及增加提纯难度。
若醇的体积分数过低时，提取物中水溶性物质溶出过多，提取物活性偏低，并且给提纯造成困难；若醇的体积分数过高时，提取物中的物质结构容易被破坏，使得活性物质减少。因此，本发明中含醇溶液的体积分数为75％的乙醇。
本发明S3中，利用含醇溶液进行醇提的数量至少为2次。
本发明中将pH调节至碱性，一方面可以活化细胞壁上的纤维，使得舒展后的纤维具有更大的比表面积，使得含醇溶液的提取效率提高，另一方面碱性容易使得细胞壁中的黄酮醇类物质溶解，进一步加速提取效率。
本发明S4中，将多种富集溶液混合后，在60℃～70℃下，采用37％的浓盐酸调节pH至4～5，静置后抽滤，蒸馏水洗至中性后抽滤；再采用体积为10倍量的2％的硫酸溶液，调节pH至2～3，加热微沸1～2h后，冷却静置后过滤。
本发明利用黄酮醇类物质溶于碱性溶液，不溶于酸性溶液的特性，采用两次阶梯酸进行提取，可以快速将富集液中的黄酮醇类物质沉淀。
在S5中，95％乙醇回流提取的温度为75～85℃，回流时间为0.5～1h。回流后，将滤液经过大量蒸馏水稀释，并静置24h过滤后，得到结晶物质。
本发明中通过将S4中得到的产物加入95％乙醇，加热使得沉淀全部溶解，在加热后抽滤，从而制得黄酮醇类物质纯品。
在S5后，使用三效浓缩器浓缩，并使用低温真空干燥机，干燥重结晶得到黄酮醇类物质纯品。其中三效浓缩器中各效的真空度和蒸发温度分别为一效：0.04MPa，70℃；二效：0.06MPa，60℃；三效：0.08MPa，50℃，并使用低温真空干燥机，干燥得到重结晶的提取物，所述低温干燥在真空环境下连续干燥60min，干燥温度45℃，干燥压强0.05MPa。
实施例1
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，包括以下步骤：
S1、将新鲜蔓越莓去籽后，抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣在-80℃环境下干燥后球磨粉碎，粉末为60目，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；
S2、将S1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液，粉末和硼砂的质量比为30：1；
S3、将滤饼加入其体积8倍量的体积分数为75％含醇溶液，调节pH至8.0，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取2h，重复若干次后，得到第三富集液；
S4、将多种富集溶液混合后，在65℃下，采用37％的浓盐酸调节pH至4.5，静置后抽滤，蒸馏水洗至中性后抽滤；再采用体积为10倍量的2％的硫酸溶液，调节pH至2.5，加热微沸2h后，冷却静置后过滤，抽滤得到沉淀；
S5、将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。
实施例2
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤S3中,加入其体积9倍量的体积分数为60％含醇溶液。
实施例3
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤S3中,加入其体积10倍量的体积分数为55％含醇溶液。
实施例4
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤S2中,硼砂水溶液换成等质量的水溶液。
实施例5
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，与实施例1的不同之处在于，步骤S4中,仅采用37％的浓盐酸进行沉淀，不使用2％的硫酸溶液。
实施例5
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，与实施例1的不同之处在于，采用体积为8倍量的2％的硫酸溶液。
对比例1
一种从蔓越莓中提取黄酮醇类物质的提取方法，
a)蔓越莓用0～100％乙醇或丙酮水溶液回流提取，滤过，提取液合并，提取液减压浓缩得提取物；b)将步骤a)获得的提取物加水溶解，经非极性或弱极性大孔吸附树脂柱色谱，用水洗脱至洗脱液近无色，弃去洗脱液；c)用10～20％乙醇水溶液至洗脱液近无色，弃去洗脱液；d)用30～50％乙醇水溶液洗脱至洗脱液近无色，收集洗脱液，洗脱液减压浓缩、干燥得黄酮苷提取物。
本发明采用ABTS自由基清楚测试，测试实施例1-5和对比例1中的黄酮醇类物质的TEAC(mg/g)
以上依据本发明的理想实施例为启示，通过上述的说明内容，相关人员完全可以在不偏离本项发明技术思想的范围内，进行多样的变更以及修改。本项发明的技术性范围并不局限于说明书上的内容，必须要根据权利要求范围来确定技术性范围。
Claims (8)
1.一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于，包括以下步骤：
S1、将蔓越莓去籽后，抽汁得到蔓越莓汁和残渣，并将残渣干燥后球磨粉碎，蔓越莓汁超滤后得到第一富集液；
S2、将S1中的粉末加入硼砂水溶液，加热过滤得到滤饼和第二富集液；
S3、将滤饼加入其体积8～10倍量的体积分数为75％的乙醇，调节pH至7 .5～8.0，充分混合后，置于超声波提取器中进行超声波处理，提取1 .5～2h，提取温度为40℃～60℃，重复若干次后，得到第三富集液；
S4、将第一富集液、第二富集液和第三富集液混合后，加入浓盐酸溶液，调节pH至4～5，再次加入2％硫酸溶液，抽滤得到沉淀；
S5、将沉淀水洗至中性，通过乙醇回流提取，得到黄酮醇提取物。
2.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述S3中，利用乙醇进行醇提的数量至少为2次。
3.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述S4中，将多种富集溶液混合后，在60℃～70℃下，采用37％的浓盐酸调节pH至4～5，静置后抽滤，蒸馏水洗至中性后抽滤；再采用体积为10倍量的2％的硫酸溶液，调节pH至2～3，加热微沸1～2h后，冷却静置后过滤。
4.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述S2中，向硼砂水溶液中加入酶，其中酶是纤维素酶和果胶酶；纤维素酶和果胶酶的酶活力比值为1：1.5，其中，硼砂水溶液和酶的比例不小于500U/mg。
5.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述S2中，粉末和硼砂的质量比为20～30：1，硼砂水溶液为每100ml水与0.5～1g的硼砂制备形成。
6.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述S1中，球磨为使用平均直径为4～6mm的研磨球,用量为每升溶液中加入60～80颗研磨球，300～350rpm的转速下球磨，时间为2～3h。
7.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：使用三效浓缩器浓缩，并使用低温真空干燥机，干燥重结晶得到黄酮类物质纯品，其中三效浓缩器中各效的真空度和蒸发温度分别为：一效：0.04MPa，70℃；二效：0.06MPa，60℃；三效：0.08MPa，50℃。
8.根据权利要求1所述的一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法，其特征在于：在所述S5中，95％乙醇回流提取的温度为75～85℃，回流时间为0.5～1h。
Priority Applications (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310176041.5A CN116370517B (zh) | 2023-02-28 | 2023-02-28 | 一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法 |
Applications Claiming Priority (1)
| Application Number | Priority Date | Filing Date | Title |
|---|---|---|---|
| CN202310176041.5A CN116370517B (zh) | 2023-02-28 | 2023-02-28 | 一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法 |
Publications (2)
| Publication Number | Publication Date |
|---|---|
| CN116370517A CN116370517A (zh) | 2023-07-04 |
| CN116370517B true CN116370517B (zh) | 2024-04-16 |
Family
ID=86979649
Family Applications (1)
| Application Number | Title | Priority Date | Filing Date |
|---|---|---|---|
| CN202310176041.5A Active CN116370517B (zh) | 2023-02-28 | 2023-02-28 | 一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法 |
Country Status (1)
| Country | Link |
|---|---|
| CN (1) | CN116370517B (zh) |
Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101716210A (zh) * | 2009-12-22 | 2010-06-02 | 内蒙古医学院 | 一种线叶菊黄酮及其提取分离的方法 |
| CN112314945A (zh) * | 2020-10-29 | 2021-02-05 | 安徽卡伦拜瑞健康科技有限公司 | 一种分段式提取法制备高活性蔓越莓萃取物的方法 |
| CN114917617A (zh) * | 2022-05-31 | 2022-08-19 | 浙江尖峰健康科技有限公司 | 一种蔓越莓分级提取方法 |
-
2023
- 2023-02-28 CN CN202310176041.5A patent/CN116370517B/zh active Active
Patent Citations (3)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101716210A (zh) * | 2009-12-22 | 2010-06-02 | 内蒙古医学院 | 一种线叶菊黄酮及其提取分离的方法 |
| CN112314945A (zh) * | 2020-10-29 | 2021-02-05 | 安徽卡伦拜瑞健康科技有限公司 | 一种分段式提取法制备高活性蔓越莓萃取物的方法 |
| CN114917617A (zh) * | 2022-05-31 | 2022-08-19 | 浙江尖峰健康科技有限公司 | 一种蔓越莓分级提取方法 |
Non-Patent Citations (1)
| Title |
|---|
| 蔓越莓生物活性物质及主要生理功能研究进展;魏燕等;食品研究与开发;20170531;38(第10期);219-224 * |
Also Published As
| Publication number | Publication date |
|---|---|
| CN116370517A (zh) | 2023-07-04 |
Similar Documents
| Publication | Publication Date | Title |
|---|---|---|
| CN106243172B (zh) | 一种提取黑果枸杞花色苷的方法 | |
| CN109645304B (zh) | 一种桑叶健康食品基料的制备方法 | |
| CN111440218A (zh) | 一种植物多酚的制备方法 | |
| CN110652013A (zh) | 一种高效制备具有缓解ⅱ型糖尿病的柑橘果胶的方法 | |
| CN113637038B (zh) | 一种从甜茶叶中提取无苦涩味甜茶苷和甜茶多酚的方法 | |
| CN110882285A (zh) | 桑黄中活性物质的高效制备方法 | |
| CN114699468A (zh) | 一种藤茶提取物的制备方法 | |
| CN1927857A (zh) | 荞麦苗总黄酮提取精制工艺 | |
| CN107857826B (zh) | 一种降血糖香蕉花多糖的分离纯化方法 | |
| CN110917240B (zh) | 一种从青钱柳中分离多种有效成分的连续化方法 | |
| CN112375153A (zh) | 一种利用多级逆流-酶解耦合技术提取人参花多糖的方法 | |
| CN116370517B (zh) | 一种从蔓越莓中提取黄酮类物质的提取方法 | |
| CN112137103A (zh) | 一种竹叶黄酮提取物、制备方法及其应用 | |
| CN104069191A (zh) | 一种水辣蓼总黄酮的提取工艺 | |
| CN116987056A (zh) | 一种落叶松中萃取二氢化槲皮素的方法 | |
| CN113694152B (zh) | 一种高稳定性酶解法获取薏苡仁提取液的方法 | |
| CN108992473A (zh) | 一种提取银杏叶黄酮的方法 | |
| CN114588225A (zh) | 一种延龄草中皂苷的提取及转化方法 | |
| CN115043889A (zh) | 一种从代代花中提取辛弗林、橙皮苷和柚皮苷的方法 | |
| CN112717009B (zh) | 一种栀子提取物的制备方法 | |
| CN113754626A (zh) | 一种酶法制备漆黄素的方法 | |
| CN112244185A (zh) | 一种富糖风味罗汉果浓缩汁的制备方法 | |
| CN112043733A (zh) | 一种水溶性银杏叶提取物的生产方法 | |
| CN112707880A (zh) | 一种黑枸杞干果的花青素提取工艺 | |
| CN111676264A (zh) | 一种从迷迭香中提取咖啡酸的方法 |
Legal Events
| Date | Code | Title | Description |
|---|---|---|---|
| PB01 | Publication | ||
| PB01 | Publication | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| SE01 | Entry into force of request for substantive examination | ||
| GR01 | Patent grant | ||
| GR01 | Patent grant |