CN102138985A - 一种白芍制剂的质量控制方法 - Google Patents
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Abstract
本发明提供了一种白芍总苷单方制剂的质量控制方法，该方法包括采用同一液相色谱条件建立了白芍药材、白芍总苷、白芍制剂中芍药苷和芍药内酯苷的含量同步测定方法；能准确测定芍药苷和芍药内酯苷的含量，控制白芍制剂的质量。该方法对样品的前处理方法简单，特征性成分保留完整，供试品溶液稳定；且精密度较高，重现性良好，具有一定的专属性；所得指纹图谱中各特征峰分离效果良好，白芍药材、白芍总苷、制剂的指纹图谱有良好的相关性；利用指纹图谱相关性研究从新角度建立白芍药材标准指纹图谱，可用于鉴别白芍药材的伪劣，提高白芍制剂在生产过程的可控性，有利于保证白芍制剂的质量稳定和临床疗效。
Description
技术领域
本发明属于药物质量控制技术领域，特别涉及一种白芍制剂的质量控制方法，质量控制方法包括含量测定方法、指纹图谱测定方法。
背景技术
中药指纹图谱是近年来中药质量控制的热点话题，与以往的中药质量检测方法相比，中药指纹图谱更具专属性，它不仅包括了对几个已知成分的分析，还包括了对已知成分与各未知成分之间的相对含量分析。因此中药指纹图谱体现了对中药内在质量的综合评价，尤其适用于有效成分不完全明确或不需要完全明确的情况下，对中药材及中药成品的质量控制。
中药指纹图谱必须以系统的化学成分和药理作用研究为基础，指纹图谱所反映的化学成分应包含中药有效部位所含大部分成分的种类。中药指纹图谱获得和评价方法主要通过以下途径实现的，在中医理论的指导下，选择能反映中药材药效的药理实验，获取药理数据；在此基础上用现代分析技术对样品进行分析，获取化学数据；采用化学计量学的数据处理方法，最终可以对上述选定的中药材质量作出客观评价，得出产地固定、品种明确的(必要时固定采收季节和炮制方法等)的优质中药材。在药效学知道下进行指纹图谱研究，能够保证指纹图谱反映的化学成分是中药材中有效部位所含绝大部分，或者有效成分的全部。
提取中药的特征性指纹信息严谨而科学的做法是以有效成分为指纹信息特征，从复杂体系中寻找与特定药效具有正相关的有效分子群。但是，由于中药的多成分性和复杂性，在不同处方中的作用各不相同，或者不同成分发挥着不同的药理作用，因此，我们必须建立与之相对应，能够反映有效成分的指纹图谱。
白芍为毛茛科植物芍药Paeonia Lacttiflora Pall.的干燥根。其味苦、酸，微寒，归肝、脾经。具有平肝止痛，养血调经，敛阴止汗功效，用于头痛眩晕，肋痛腹痛，四肢挛痛，血虚萎黄，月经不调，自汗，盗汗等病症。白芍根中主要含有芍药苷、芍药内酯苷、羟基芍药苷、苯甲酰芍药苷等苷类成分。邹华彬等采用系统溶剂氯仿、无水乙醇、水依次分别提取白芍不同极性区间的成分，测定了它们的紫外指纹图谱，根据其共有峰率和变异峰率双指标序列分析法对它们进行了分析，对不同产地、不同采集年份的白芍样品进行了定量评价，实验结果也表明相近产地的白芍具有最相近的关系，不同产地的白芍之间存在着较明显的差异，同一地区不同年份的白芍之间有较明显的差异。李越峰等、杨柳等、王巧等采用HPLD-DAD分别对多批白芍样品进行了指纹图谱研究，分别确定了共有峰14，11，8个，不同程度的说明白芍的指纹图谱特征性及专属性，对于全面控制白芍的质量提供了重要依据。李雅等采用HPLC十八烷基硅烷键合硅胶柱，乙腈-磷酸水溶液梯度洗脱，对10批白芍超微饮片进行研究，发现色谱峰20个，共有峰10个，建立了其高效液相指纹图谱，并用于白芍超微饮片的鉴别与评价。李冰岚等以外地产白芍为对照，对10批浙江磐安产杭白芍进行了系统的色谱指纹图谱与芍药苷含量分析，且对粉红花品种标定了19个共有指纹峰，建立了杭白芍的指纹图谱，并且发现杭白芍粉红花品种出现了明显的品种分化。
关于白芍药材的指纹图谱有一些报道，但很少用于生产中中药材的质量控制。同时近年来进一步的药理基础研究和临床研究表明，从其根中提取精制得到的白芍总苷(TGP)，有抗炎、抗溃疡及免疫调节等多种药理作用。因此我们有必要建立体现白芍总苷成分的指纹图谱。近年来，经过临床应用研究表明，以其为主要成分的白芍总苷胶囊用于治疗类风湿关节炎具有确切疗效。因此，为了保证其质量，我们对白芍总苷制剂建立指纹图谱，同时我们以有效成分群为指纹特征，采用同一液相色谱条件，建立与大生产中与之相对应的白芍总苷(中间体)、白芍药材的指纹图谱。通过对大量样品的测定，建立白芍药材、白芍总苷及制剂标准指纹图谱，并对三者指纹图谱相关性进行研究，确定三者指纹图谱相关联的特征指纹峰，以及特征指纹峰比值范围，建立特征指纹峰评价标准。
发明内容
本发明的目的就是针对上述白芍制剂的质量控制现状，提供一种基于高效液相色谱法的白芍制剂质量控制方法。本方法具体包括三种方法：(1)芍药苷和芍药内酯苷的含量测定方法；(2)建立白芍制剂标准指纹图谱；(3)建立白芍药材、白芍总苷(中间体)标准指纹图谱；(4)建立三者指纹图谱相关联的特征指纹峰评价标准体系；可以通过以上方法一种或几种对白芍制剂进行质量控制。
本发明解决其技术问题所采用的技术方案是：
(1)芍药苷和芍药内酯苷含量同步测定
①液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，比例为(12∶88)；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
②对照品溶液的制备
对照品溶液的制备：取芍药苷约23mg，精密称定，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；取芍药内酯苷约7.5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷各2ml，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀即得。
③供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得。
白芍总苷(制剂)供试品溶液的制备：取白芍总苷(制剂)粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
④测定法
测定法：精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定。
⑤测定结果
测定结果：白芍药材按干燥品计算，含芍药苷不少于2.0％，芍药内酯苷不少于0.5％；
白芍总苷每克含芍药苷不少于410mg，芍药内酯苷不少于110mg；
白芍制剂每粒含芍药苷不少于104mg，芍药内酯苷不少于30mg。
(2)一种白芍制剂指纹图谱测定
①液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见表1；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
表1液相系统洗脱程序
②供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得。
白芍总苷(制剂)供试品溶液的制备：取白芍总苷(制剂)粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
③以芍药苷为参照峰的标准指纹图谱的制定
测定法：精密吸取上述对照品和供试品溶液各20μl，分别注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图；依据所得的10批样品的指纹图谱，制定标准指纹图谱。
④指纹图谱的质量控制
测定结果：将白芍待测样品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定样品是否合格。其中待测品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度应为0.99～1.00。
将白芍总苷(制剂)待测产品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定产品是否合格。其中待测品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度应为0.90～1.00。
本发明所述的含量测定方法：采用同一液相色谱条件对白芍药材、白芍总苷(中间体)、白芍制剂中芍药苷和芍药内酯苷含量同步测定，建立从药材到制剂的整体的质量控制体系，进一步保证制剂的质量和疗效。该测定方法另一特别之处是将药材中芍药内酯苷与旁小峰分离，并达到分离度要求，能够准确测定药材中芍药内酯苷的含量。通过测定，制定含量要求标准：白芍药材按干燥品计算，含芍药苷不少于2.0％，芍药内酯苷不少于0.5％；白芍总苷每克含芍药苷不少于410mg，芍药内酯苷不少于110mg；白芍制剂每粒含芍药苷不少于104mg，芍药内酯苷不少于30mg。
本发明所述的指纹图谱研究：通过建立白芍药材、白芍总苷(中间体)、白芍制剂标准指纹图谱，将待测样品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，通过共有峰的数量和相似度确定产品是否合格，全面的控制白芍药材、白芍总苷(中间体)、白芍制剂的质量，建立从药材到制剂的整体的质量控制体系，进一步保证制剂的质量和疗效。该指纹图谱测定方法另一特别之处是在对白芍药材、白芍总苷(中间体)、白芍制剂指纹图谱相关性研究的基础上，发现白芍药材发挥药效作用成分集中指纹图谱25分钟以后部分，因此在对白芍药材制定了标准指纹图谱；可以运用国家药典委员会制定《中药指纹图谱相似度计算软件》(2004)，通过谱图处理中的数据剪切，保留20～80分钟之间的峰，建立白芍药材标准指纹图谱(见图7)，科学的严格的控制药材质量，同时也可以白芍药材优选进一步提供依据。该指纹图谱测定方法第三要点是在对白芍药材、白芍总苷(中间体)、白芍制剂指纹图谱相关性研究的基础上，对三者进行指纹图谱研究，并通过软件分析，确定白芍药材、白芍总苷及制剂指纹谱相关联的特征指纹峰，以及特征峰指纹峰比值范围，建立特征指纹峰评价标准(见表2)。
表2特征指纹峰评价体系表
与现代技术相比，本发明的有益效果：
a.利用高效液相色谱同步检测技术，建立芍药苷和芍药内酯苷含量同步测定方法，进一步控制白芍药材、白芍总苷及制剂的质量，此方法相对于文献方法，特别是芍药内酯苷含量测定，更为准确。
b.本发明采用高效液相建立标准指纹图谱，通过指纹图谱主要峰的面积和比例的制定，能有效的控制药材、中间体及制剂的质量，最终保证制剂的质量的相对稳定。
c.本发明采用高效液相色谱指纹图谱，以白芍的有效成分特征为主的指纹图谱来全面控制白芍制剂的质量，更加完善了制剂的质量控制体系。
d.本发明所建立的白芍药材、白芍总苷和制剂的指纹图谱，有良好的相关性，从新的角度制定的白芍药材标准指纹图谱，白芍药材指纹图谱用于鉴别白芍药材的伪劣，为大生产中白芍药材的优选提供科学依据，同时通过控制药材的质量来严格控制制剂的质量。
e.通过实验证明，本发明质量控制方法对白芍制剂的质量控制更为有效，方法精密度较高、稳定性、重复性均良好。能有效控制产品的质量，确保产品质量的均一稳定，从而保证产品的安全有效。
f.本发明所建立的从药材到中间体，最终到制剂整体的质量控制体系模式，为为中药产业的现代化发展起推动作用。
附图说明
图1，白芍总苷胶囊含量测定图谱
图2，白芍总苷含量测定图谱
图3，白芍药材含量测定图谱
图4，白芍总苷胶囊标准指纹图谱
图5，白芍总苷标准指纹图谱
图6，白芍药材指纹图谱
图7，白芍药材标准指纹图谱
具体实施方式
为了更好的解释本发明的实施，提供下述测定方法的实施实例。这些实施实例仅仅是解释、而不是限制本发明的范围。下面通过典型的实例对本发明做进一步的说明。实施例1白芍制剂中芍药苷和芍药内酯苷的含量测定(以白芍总苷胶囊为例)
①供试品溶液的制备
供试品溶液的制备：取白芍总苷胶囊内容物约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
②对照品溶液的制备
对照品溶液的制备：取芍药苷约23mg，精密称定，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；取芍药内酯苷约7.5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷各2ml，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀即得。
③液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，比例为(12∶88)；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
④测定法
测定法：精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，色谱图见图1。
⑤方法学考察
线性关系考察：取对照品溶液，分别精密吸取2、5、8、10、15、20μl注入高效液相色谱仪，记录色谱峰面积，以对照品浓度(X)为横坐标对峰面积(Y)为纵坐标绘制标准曲线，得芍药内酯苷线性回归方程y＝1071317.3162x-368.7278R＝0.99985，芍药苷线性回归方程y＝1254357.0949x-14041.2859R＝0.99995。
精密度试验：取对照品溶液，重复进样6次，每次进样10μL，按色谱条件测定，计算，结果芍药内酯苷、芍药苷峰面积平均值的RSD值为0.54％、0.58％，表明仪器的精密度良好。
稳定性试验：按上述制备供试品溶液一份，于配制后0、2、4、6、8、12、24小时进样，测定，记录峰面积，计算。结果芍药内酯苷、芍药苷峰面积的RSD值为1.00％、1.58％，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
重复性试验：取白芍总苷胶囊内容物约0.1g，精密称定，共六份，置50ml量瓶中，按上述方法制备供试品溶液，测定，以芍药内酯苷、芍药苷峰面积平均值计算含量，结果含量的RSD值分别为为0.81％、0.16％，表明该方法重复性较好。
加样回收试验：取白芍总苷胶囊内容物6份，每份约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加芍药内酯苷对照品0.3199mg，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。依法测定，计算含量。结果芍药内酯苷平均回收率为100.50％，RSD为0.64％。
取白芍总苷胶囊内容物6份，每份约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加芍药苷对照品1.0045mg，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。依法测定，计算含量。结果芍药苷平均回收率为99.65％，RSD为1.21％。
⑥测定结果
测定结果：白芍制剂每粒含芍药苷不少于104mg，芍药内酯苷不少于30mg。
实施例2白芍总苷中芍药苷和芍药内酯苷的含量测定
①供试品溶液的制备
白芍总苷供试品溶液的制备：取白芍总苷粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
②对照品溶液的制备
对照品溶液的制备：取芍药苷约23mg，精密称定，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；取芍药内酯苷约7.5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷各2ml，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀即得。
③液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，比例为(12∶88)；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
④测定法
测定法：精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，色谱图见图2。
⑤方法学考察
稳定性试验：按上述制备供试品溶液一份，于配制后0、2、4、6、8、12、24小时进样，测定，记录峰面积，计算。结果芍药内酯苷、芍药苷峰面积的RSD值为0.70％、0.37％，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
重复性试验：取白芍总苷原料约0.1g，精密称定，共六份，置50ml量瓶中，按上述方法制备供试品溶液，测定，以芍药内酯苷、芍药苷峰面积平均值计算含量，结果含量的RSD值分别为为0.78％、0.49％，表明该方法重复性较好。
加样回收试验：取白芍总苷原料6份，每份约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加芍药内酯苷对照品0.3199mg，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。依法测定，计算含量。结果芍药内酯苷平均回收率为99.50％，RSD为1.00％，
取白芍总苷原料6份，每份约25mg，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加芍药苷对照品1.0045mg，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。依法测定，计算含量。结果芍药苷平均回收率为99.65％，RSD为1.21％。
⑥测定结果
测定结果：白芍总苷每克含芍药苷不少于410mg，芍药内酯苷不少于110mg。
实施例3白芍药材中中芍药苷和芍药内酯苷的含量测定
①供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得
②对照品溶液的制备
对照品溶液的制备：取芍药苷约23mg，精密称定，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；取芍药内酯苷约7.5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷各2ml，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀即得。
③液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，比例为(12∶88)；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
④测定法
测定法：精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定，色谱图见图3。
⑤方法学考察
稳定性试验：按上述制备供试品溶液一份，于配制后0、2、4、6、8、12、24小时进样，测定，记录峰面积，计算。结果芍药内酯苷、芍药苷峰面积的RSD值为0.60％、0.42％，表明供试品溶液在24h内基本稳定。
重复性试验：取本品中粉约0.1g，精密称定，共六份，置50ml量瓶中，按上述方法制备供试品溶液，测定，以芍药内酯苷、芍药苷峰面积平均值计算含量，结果含量的RSD值分别为为0.65％、0.46％，表明该方法重复性较好。
加样回收试验：取本品中粉6份，每份约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加芍药内酯苷对照品0.2833mg，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。依法测定，计算含量。结果芍药内酯苷平均回收率为99.62％，RSD为0.81％，
取本品中粉6份，每份约50mg，精密称定，置50ml量瓶中，加芍苷对照品1.3224mg，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得供试品溶液。依法测定，计算含量。结果芍药内酯苷平均回收率为99.83％，RSD为0.73％
⑥测定结果
测定结果：白芍药材按干燥品计算，含芍药苷2.64％，芍药内酯苷0.57％。
实施例4一种白芍制剂标准指纹图谱制定(以白芍总苷胶囊为例)
①供试品溶液的制备
供试品溶液的制备：取白芍总苷胶囊内容物约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
②液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见表1；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
③方法学验证
精密度试验：取同一份白芍总苷胶囊供试品溶液，在上述液相色谱条件，重复进样6次，每次进样20μl，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果峰面积在5％以上的主要色谱峰，其色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于1％，峰面积在5％以下的主要色谱峰峰，其色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于4％，表明精密度良好。结果见表3。
表3精密度试验结果
溶液稳定性试验：取同一份白芍总苷胶囊供试品溶液，在上述液相色谱条件，分别在0、2、4、8、12、24小时检测指纹图谱，每次进样20μl，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于4％，表明供试品溶液基本稳定。结果见表4。
表4溶液稳定性试验结果
重复性试验：取同一批白芍总苷胶囊样品，按供试品制备方法制备6份供试品溶液，在上述液相色谱条件下，进样分析，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果峰面积在5％以上的共有色谱峰，其色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于2％，峰面积在5％以下的几个共有峰，其色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于3％，表明重复性良好。结果见表5。
表5重复性试验结果
④白芍制剂标准指纹图谱的制定
测定法：精密吸取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图。
依据所得的10批样品的指纹图谱，制定标准指纹图谱，色谱图见图4(色谱峰编号参照白芍药材)。依据《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》，以芍药苷为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积，面积在5％以下的色谱峰不做峰面积要求，制定了白芍制剂的标准指纹图谱技术参数，见表6。
表6共有峰相对保留时间和峰面积表
⑤样品验证
测定结果：将21批白芍制剂待测产品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定产品是否合格。其中待测白芍制剂样品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度都大于0.90。
实施例5白芍总苷标准指纹图谱制定
①供试品溶液的制备
供试品溶液的制备：取白芍总苷粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得。
②液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见表1；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
③方法学验证
精密度试验：取同一份白芍总苷原料供试品溶液，在上述液相色谱条件下，重复进样6次，每次进样20μl，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果峰面积在5％以上的主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于1％，峰面积在5％以下的主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于3％，表明精密度良好，结果见7。
表7精密度试验结果
溶液稳定性：取同一份白芍总苷原料供试品溶液，在上述液相色谱条件系下，分别在0、2、4、8、12、24小时检测指纹图谱，每次进样20μl，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果主要峰面积的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于4％。结果见8。
表8溶液稳定性试验结果
重复性试验：取同一批白芍总苷原料样品，按供试品制备方法制备6份供试品溶液，在上述液相色谱条件下，进样分析，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果峰面积在5％以上的主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于2％，峰面积在5％以下的主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的比值RSD小于3％，表明重复性良好。结果见9。
表9重复性试验结果
④白芍总苷标准指纹图谱的制定
测定法：精密吸取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图。
依据所得的10批样品的指纹图谱，制定标准指纹图谱，色谱图见图5(色谱峰编号参照白芍药材)。依据《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》，以芍药苷为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积，面积在5％以下的色谱峰不做峰面积要求，制定了白芍总苷的标准指纹图谱技术参数，见表10。
表10共有峰相对保留时间和峰面积表
⑤样品验证
测定结果：将30批白芍总苷待测产品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定产品是否合格。其中待测白芍总苷样品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度都大于0.90。
实施例6白芍药材标准指纹图谱制定
①供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得
②液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂(4.6mm×250mm，5μm)；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见表1；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃。
③方法学验证
精密度试验：取同一份白芍药材供试品溶液，在上述液相色谱条件下，重复进样6次，每次进样20μl，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果峰面积在5％以上的主要色谱峰，其色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD小于3％，峰面积在5％以下的几个共有峰，其色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD小于4％，表明精密度良好。结果见表11。
表11精密度试验结果
溶液稳定性试验：取同一份白芍药材供试品溶液，在上述液相色谱条件下，分别在0、2、4、8、12、24小时检测指纹图谱，每次进样20μl，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果峰主要色谱峰相对保留时间和相对峰面积的RSD小于4％，表明供试品溶液相对稳定。结果见表12。
表12溶液稳定性试验结果
重复性试验：取同一批白芍药材样品，按供试品制备方法制备6份供试品溶液，在上述液相色谱条件下，进样分析，考察主要色谱峰的相对保留时间、峰面积比值的一致性。结果主要色谱峰的相对保留时间和相对峰面积的RSD小于3％，表明该方法重复性好。结果见表13。
表13重复性试验结果
④白芍药材标准指纹图谱的制定
测定法：精密吸取上述供试品溶液20μl，注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图。
依据所得的6批样品的指纹图谱，制定标准指纹图谱，色谱图见图6。但在白芍药材、白芍总苷(中间体)、白芍制剂指纹图谱相关性研究的基础上，运用国家药典委员会制定《中药指纹图谱相似度计算软件》(2004)，通过谱图处理中的数据剪切，保留25～80分钟之间的峰，以新角度制定了白芍药材标准指纹图谱，色谱图见7。依据《中药注射剂指纹图谱研究的技术要求》，以芍药苷为参照峰，计算各共有峰的相对保留时间、相对峰面积，面积在5％以下的色谱峰不做峰面积要求，制定了白芍总苷的标准指纹图谱技术参数，见表14。
表14共有峰相对保留时间和峰面积表
Claims (6)
1.一种白芍制剂的质量控制方法，其特征在于步骤和条件如下：
(1)芍药苷和芍药内酯苷含量同步测定
①液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，比例为12∶88；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃；
②对照品溶液的制备
对照品溶液的制备：取芍药苷约23mg，精密称定，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；取芍药内酯苷约7.5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷各2ml，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀即得；
③供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得；
白芍总苷供试品溶液的制备：取白芍总苷粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；
④测定法
测定法：精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定；
⑤测定结果
测定结果：白芍药材按干燥品计算，含芍药苷不少于2.0％，芍药内酯苷不少于0.5％；
白芍总苷每克含芍药苷不少于410mg，芍药内酯苷不少于110mg；
白芍制剂每粒含芍药苷不少于104mg，芍药内酯苷不少于30mg；
(2)一种白芍制剂指纹图谱测定
①液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，洗脱程序见表1；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃；
②供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得；
白芍总苷供试品溶液的制备：取白芍总苷粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀；精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；
③以芍药苷为参照峰的标准指纹图谱的制定
测定法：精密吸取上述对照品和供试品溶液各20μl，分别注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图；依据所得的10批样品的指纹图谱，制定标准指纹图谱；
④指纹图谱的质量控制
测定结果：将白芍待测样品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定样品是否合格，其中待测品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度应为0.99～1.00；
将白芍总苷待测产品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定产品是否合格，其中待测品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度应为0.90～1.00。
2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
(1)芍药苷和芍药内酯苷含量同步测定
①液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，比例为12∶88；流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃；
②对照品溶液的制备
对照品溶液的制备：取芍药苷约23mg，精密称定，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；取芍药内酯苷约7.5mg，精密称定，置25ml容量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀；分别精密吸取芍药苷和芍药内酯苷各2ml，置25ml量瓶中，用甲醇定容至刻度，摇匀即得；
③供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；
白芍总苷供试品溶液的制备：取白芍总苷粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理15min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀。精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；
④测定法
测定法：精密吸取对照品和供试品溶液各10μl，注入高效液相色谱仪，测定；
⑤测定结果
测定结果：白芍药材按干燥品计算，含芍药苷不少于2.0％，芍药内酯苷不少于0.5％；
白芍总苷每克含芍药苷不少于410mg，芍药内酯苷不少于110mg；
白芍制剂每粒含芍药苷不少于104mg，芍药内酯苷不少于30mg。
3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：
①液相色谱条件
液相色谱条件：色谱柱用十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；流动相：乙腈(A)-0.1％磷酸水溶液(B)，梯度洗脱，流速：1.0mL/min；检测波长：230nm；柱温：25℃；
②供试品溶液的制备
白芍药材供试品溶液的制备：取本品中粉约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45um的微孔滤膜滤过，即得；
白芍总苷供试品溶液的制备：取白芍总苷(制剂)粉末约0.1g，精密称定，置50ml量瓶中，加稀乙醇约35ml，超声处理30min，取出，放冷，加稀乙醇至刻度，摇匀，精密吸取5ml，置50ml量瓶中，加稀乙醇至刻度，摇匀，经0.45μm的微孔滤膜滤过，即得；
③以芍药苷为参照峰的标准指纹图谱的制定
测定法：精密吸取上述对照品和供试品溶液各20μl，分别注入高效液相色谱仪，照上述色谱条件测定，记录色谱图；依据所得的10批样品的指纹图谱，制定标准指纹图谱；
④指纹图谱的质量控制
测定结果：将白芍待测样品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定样品是否合格，其中待测品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度应为0.99～1.00；
将白芍总苷待测产品指纹图谱与制定的标准指纹图谱进行比较，计算相似度，识别两者所具有的共同吸收峰的数量，以确定产品是否合格，其中待测品指纹图谱与标准指纹图谱比对，其相似度应为0.90～1.00。
4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的含量同步测定方法中，白芍药材中芍药内酯苷与旁小峰的分离度应大于1.5。
5.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：所述的白芍药材标准指纹图谱的制定，是运用国家药典委员会制定《中药指纹图谱相似度计算软件》，通过谱图处理中的数据剪切，保留20～80分钟之间的峰，建立白芍药材标准指纹图谱。
6.根据权利要求1所述的方法，其特征在于：在对白芍药材、白芍总苷、白芍制剂指纹图谱相关性研究的基础上，对三者进行指纹图谱研究，并通过软件分析，确定白芍药材、白芍总苷及制剂指纹谱相关联的特征指纹峰，以及特征峰指纹峰比值范围，建立特征指纹峰评价标准。
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|---|---|
| CN (1) | CN102138985B (zh) |
Cited By (15)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102998386A (zh) * | 2012-11-22 | 2013-03-27 | 宁波立华制药有限公司 | 一种用高效液相色谱测定白芍愈伤组织中白芍双苷的方法 |
| CN105116086A (zh) * | 2015-08-18 | 2015-12-02 | 辽宁大学 | 一种赤芍中芍药苷和芍药内酯苷的hplc-elsd含量测定方法 |
| CN105486760A (zh) * | 2014-09-19 | 2016-04-13 | 惠州市九惠制药股份有限公司 | 一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法 |
| CN105866296A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-08-17 | 华润三九医药股份有限公司 | 一种建立白芍的药物制剂的指纹图谱的方法 |
| CN109541066A (zh) * | 2018-12-11 | 2019-03-29 | 四川农业大学 | 一种中江芍药hplc指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
| CN109541099A (zh) * | 2018-11-27 | 2019-03-29 | 山东省食品药品检验研究院 | 一种白芍根茎或其提取物的鉴别方法 |
| CN109917044A (zh) * | 2019-04-10 | 2019-06-21 | 成都中医药大学 | 桂枝芍药知母汤的检测方法 |
| CN110007020A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-07-12 | 安徽济人药业有限公司 | 一种白芍配方颗粒基准物质的制备及质量控制方法 |
| CN111337580A (zh) * | 2018-12-19 | 2020-06-26 | 神威药业集团有限公司 | 一种四物制剂hplc特征图谱及其构建方法和应用 |
| CN113588825A (zh) * | 2021-07-30 | 2021-11-02 | 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 | 一种白芍道地药材指纹图谱的快速鉴别方法 |
| CN113820422A (zh) * | 2021-09-24 | 2021-12-21 | 宁波立华制药有限公司 | 一种白芍总苷指纹图谱检测方法 |
| CN114252545A (zh) * | 2021-12-22 | 2022-03-29 | 国药集团冯了性（佛山）药业有限公司 | 白灵片中芍药苷含量的hplc检测方法 |
| CN114660204A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-06-24 | 安徽中医药大学 | 三白汤指纹图谱的建立方法 |
| CN115201393A (zh) * | 2022-07-08 | 2022-10-18 | 湖南中医药大学第一附属医院((中医临床研究所)) | 一种黄精芡实汤的质量检测方法 |
| CN115420816A (zh) * | 2022-07-21 | 2022-12-02 | 广东万年青制药股份有限公司 | 一种滋阴凉血的中药组合物的含量测定方法 |
Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101474263A (zh) * | 2007-12-18 | 2009-07-08 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种白芍配方颗粒及其制备方法和质量控制方法 |
-
2011
- 2011-03-22 CN CN 201110072539 patent/CN102138985B/zh active Active
Patent Citations (1)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN101474263A (zh) * | 2007-12-18 | 2009-07-08 | 北京康仁堂药业有限公司 | 一种白芍配方颗粒及其制备方法和质量控制方法 |
Cited By (17)
| Publication number | Priority date | Publication date | Assignee | Title |
|---|---|---|---|---|
| CN102998386A (zh) * | 2012-11-22 | 2013-03-27 | 宁波立华制药有限公司 | 一种用高效液相色谱测定白芍愈伤组织中白芍双苷的方法 |
| CN105486760A (zh) * | 2014-09-19 | 2016-04-13 | 惠州市九惠制药股份有限公司 | 一种小儿连番止泻颗粒的质量检测方法 |
| CN105116086A (zh) * | 2015-08-18 | 2015-12-02 | 辽宁大学 | 一种赤芍中芍药苷和芍药内酯苷的hplc-elsd含量测定方法 |
| CN105866296A (zh) * | 2016-06-15 | 2016-08-17 | 华润三九医药股份有限公司 | 一种建立白芍的药物制剂的指纹图谱的方法 |
| CN109541099A (zh) * | 2018-11-27 | 2019-03-29 | 山东省食品药品检验研究院 | 一种白芍根茎或其提取物的鉴别方法 |
| CN109541066A (zh) * | 2018-12-11 | 2019-03-29 | 四川农业大学 | 一种中江芍药hplc指纹图谱的建立方法及其标准指纹图谱 |
| CN111337580A (zh) * | 2018-12-19 | 2020-06-26 | 神威药业集团有限公司 | 一种四物制剂hplc特征图谱及其构建方法和应用 |
| CN110007020A (zh) * | 2019-04-03 | 2019-07-12 | 安徽济人药业有限公司 | 一种白芍配方颗粒基准物质的制备及质量控制方法 |
| CN109917044A (zh) * | 2019-04-10 | 2019-06-21 | 成都中医药大学 | 桂枝芍药知母汤的检测方法 |
| CN113588825A (zh) * | 2021-07-30 | 2021-11-02 | 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 | 一种白芍道地药材指纹图谱的快速鉴别方法 |
| CN113588825B (zh) * | 2021-07-30 | 2023-03-10 | 山东明仁福瑞达制药股份有限公司 | 一种白芍道地药材指纹图谱的快速鉴别方法 |
| CN113820422A (zh) * | 2021-09-24 | 2021-12-21 | 宁波立华制药有限公司 | 一种白芍总苷指纹图谱检测方法 |
| CN114252545A (zh) * | 2021-12-22 | 2022-03-29 | 国药集团冯了性（佛山）药业有限公司 | 白灵片中芍药苷含量的hplc检测方法 |
| CN114660204A (zh) * | 2022-04-08 | 2022-06-24 | 安徽中医药大学 | 三白汤指纹图谱的建立方法 |
| CN114660204B (zh) * | 2022-04-08 | 2023-12-22 | 安徽中医药大学 | 三白汤指纹图谱的建立方法 |
| CN115201393A (zh) * | 2022-07-08 | 2022-10-18 | 湖南中医药大学第一附属医院((中医临床研究所)) | 一种黄精芡实汤的质量检测方法 |
| CN115420816A (zh) * | 2022-07-21 | 2022-12-02 | 广东万年青制药股份有限公司 | 一种滋阴凉血的中药组合物的含量测定方法 |
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