CN102123712A - 使用igf1r抑制剂治疗癌症的方法 - Google Patents

Abstract

本发明涉及用于治疗各种癌症的组合物和方法。本申请还包括治疗组合及其使用方法。

Description

使用IGF1R抑制剂治疗癌症的方法

本申请要求2006年12月13日申请的美国临时专利申请号60/874,589、2006年12月20日申请的美国临时专利申请号60/870,937、2007年6月25日申请的美国临时专利申请号60/946,011和2007年10月11日申请的美国临时专利申请号60/979,274的权益；所述各临时专利申请均通过引用全部结合到本文中。 

发明领域

本发明涉及用于治疗或预防癌症的组合物和方法。

发明背景

胰岛素样生长因子，亦称生长调节素，包括胰岛素样生长因子-I(IGF-I)和胰岛素样生长因子-II(IGF-II)(Klapper等(1983)Endocrinol.112：2215和Rinderknecht等(1978)Febs.Lett.89：283)。这些生长因子通过与称为胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R或IGFR1)的普通受体结合，对包括肿瘤细胞(Macaulay，(1992)Br.J.Cancer 65：311)在内的各种细胞类型发挥促有丝分裂活性(Sepp-Lorenzino，(1998)Breast CancerResearch and Treatment 47：235)。IGF与IGF1R的相互作用通过引发受体酪氨酸残基的自身磷酸化而激活受体(Butler等(1998)ComparativeBiochemistry and Physiology 121：19)。IGF1R一旦被激活，随即便使胞内靶标磷酸化以激活细胞信号转导途径。该受体的活化对刺激肿瘤细胞生长和存活十分重要。因此，抑制IGF1R活性代表着治疗或预防人类癌生长和其它增殖性疾病的颇具价值的潜在方法。

因此，抑制IGF1R的疗法可用于治疗或预防某些癌症。抗IGF1R抗体是用于治疗或预防癌症有效疗法。本领域已知有若干种抗IGF1R 抗体(参见例如WO 03/100008、WO 2002/53596、WO 04/71529、WO03/106621、US2003/235582、WO 04/83248、WO 03/59951、WO 04/87756或WO 2005/16970)。其它小分子IGF 1R抑制剂亦为本领域所知。

虽然存在本领域已知的可用于治疗或预防某些癌症的IGF1R抑制剂，但是本领域仍然需要用于治疗或预防诸如头颈部癌、鳞状细胞癌、孤立性浆细胞瘤、多发性骨髓瘤和肾细胞癌等其它癌症的治疗组合物和方法。

发明概述

本发明通过提供有效治疗或预防以下疾病的IGF1R抑制剂及其组合产品，部分满足了这个需要：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤(EwingSarcoma)、软骨肉瘤、任何血液恶性肿瘤(例如慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病(例如T细胞谱系、B细胞前体谱系)、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病(Hodgekin’sdisease)、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、边缘区淋巴瘤(marginal zone lymphoma)、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征(seary syndrome)、皮肤T细胞淋巴瘤、外周T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病、骨髓纤维变性、髓样化生、系统性肥大细胞增生病)和中枢神经系统肿瘤(例如脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤)、骨髓增殖性疾病(例如真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性)、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、 类癌、生殖细胞肿瘤或肝癌。

本发明提供用于治疗或预防受治疗者的选自以下医学病症的方法，该方法包括给予所述受治疗者治疗有效量的一种或多种IGF1R抑制剂或其药物组合物：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、任何血液恶性肿瘤(例如慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病(例如T细胞谱系、B细胞前体谱系)、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病)和中枢神经系统肿瘤(例如脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤)、骨髓增殖性疾病(例如真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性)、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤和肝癌。在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂选自 

和与IGF1R(例如人IGF1R)或其抗原结合片段特异性结合的分离抗体。在本发明 的一个实施方案中，抗体包含：(a)包含SEQ ID NO：2的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；(b)包含SEQ ID NO：4的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；(c)包含SEQ ID NO：6的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；(d)包含SEQ ID NO：8的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；或者本文所示的任何其它IGF1R抑制剂，例如在下面的“IGF1R抑制剂”部分中所示的任何其它IGF1R抑制剂。在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂与一种或多种另外的抗癌化疗药物或其药物组合物联合给予。在本发明的一个实施方案中，另外的抗癌化疗药物选自替尼泊苷(teniposide) 

顺铂(cisplatin) 

沙铂(satraplatin)、卡铂(carboplatin) 

依托泊苷(etoposide) 

多柔比星 (doxorubicin) 

其任何脂质体剂型例如楷莱(Caelyx)或 

环磷酰胺(cyclophosphamide) 

13-顺式维甲酸(13-cis-retinoic acid) 异环磷酰胺(ifosfamide) 

吉西他滨(gemcitabine) 

伊立替康(irinotecan) 

长春新碱 (vincristine) 

放线菌素D(dactinomycin) 

甲氨蝶呤(methotrexate) 

和本文所述的任何另外的化疗药物，例如下面的“另外的化学疗法”部分所述的任何另外的化疗药物。在本发明的一个实施方案中，本文所示的任何抗IGF1R抗体的剂量范围约为0.3-20mg/kg体重或约为40-1200mg/m²。在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂与另外的抗癌治疗药物同时给予。在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂与另外的抗癌治疗药物非同时给予。在本发明的一个实施方案中，抗体包含IgG恒定区。在本发明的一个实施方案中，受治疗者是人(例如儿童)。在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂与抗癌疗法联合给予。在本发明的一个实施方案中，抗癌疗法是外科肿瘤切除术和/或抗癌放射治疗。

附图简述

图1.原发性头颈部肿瘤样品中的IGF1 RmRNA表达，使用Taqman测定。每个点代表单个组织样品中IGF1R的归一化表达水平。从中获取各样品的患者的头颈部癌的病期用I、II、III或IV表示。对应于正常组织样品的值用“正常”表示，对应于位于肿瘤细胞附近但却不具有正常特性的正常附近组织的值用“NAT”表示。

图2.各个细胞系中总IGF1R、IGF-I和IGF-II的蛋白质表达水平的蛋白质印迹分析(上图)。由各个细胞系分泌到生长培养基周围的IGF1和IGF2的量(ng IGF1或IGF2蛋白/10⁶个细胞)(下图)。

图3(a)-3(c).体外细胞系中不同浓度的抗IGF1R抗体LCF/HCA对鳞状细胞癌的抑制。(a)：细胞系SCC 15；(b)：细胞系SCC 25；(c)：细胞系SCC 9。

图4.相对于正常组织原发性胃腺癌肿瘤组织中IGF2的表达水平。

图5.若干胃癌和卵巢癌细胞系中不同蛋白质的表达水平，用蛋白质印迹分析测定。

图6.不同浓度的抗IGF1R抗体LCF/HCA对鳞状细胞癌细胞(细胞系SNU-16)的体外生长抑制。

图7.暴露于抗IGF1R抗体LCF/HCA或对照免疫球蛋白后，小鼠异种移植物模型中随时间变化的肾细胞癌肿瘤生长。

图8.当暴露于不同浓度的抗IGF1R抗体LCF/HCA时黑素瘤细胞系A375-SM的体外生长抑制。

图9.当暴露于抗IGF1R抗体LCF/HCA时小鼠中鳞状细胞癌细胞系SCC15的体内生长抑制。

图10.EW5(尤因肉瘤)、OS-1(骨肉瘤)和OS-9(骨肉瘤)异种移植物肿瘤模型中对肿瘤体积随时间变化的评价。

发明详述

本发明包括用于治疗或预防包括以下非癌医学病症和癌症在内 的组合物和方法：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、任何血液恶性肿瘤(例如慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病(例如T细胞谱系、B细胞前体谱系)、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病)和中枢神经系统肿瘤(例如脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤)、骨髓增殖性疾病(例如真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性)、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤、肝癌、胃癌、巨人症、垂体腺瘤、银屑病和肾横纹肌样瘤。可以通过给予IGF1R抑制剂(例如抗IGF1R抗体)治疗或预防癌症。抗体可与另外的化疗药物联用，例如诸如本文所述抗癌化疗药物中的任一种抗癌化疗药物。

术语IGF1R、IGFR1和IGF-1R是同义词，均表示胰岛素样生长因子1受体。

IGF1R抑制剂

术语“IGF1R抑制剂”或“IGF1R拮抗剂”等包括降低表达、配体结合(例如与IGF-1和/或IGF-2结合)、激酶活性(例如自身磷酸化活性)或IGF1R的任何其它生物活性(例如介导不依赖贴壁细胞生长)和磷酸-IRS-1水平的任何物质，它可引起由实施者(例如研究人员、医生或兽医)确定的组织、系统、受治疗者或患者的任何生物学反应或医学 反应，所述反应包括任何可测量的在任何程度上减轻非癌医学病症和癌症(例如肿瘤生长)的体征、症状和/或临床标志和/或预防、减缓或停止所述癌症的进程和转移，例如头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、任何血液恶性肿瘤(例如慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病(例如T细胞谱系、B细胞前体谱系)、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病)和中枢神经系统肿瘤(例如脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤)、骨髓增殖性疾病(例如真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性)、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤、肝癌、胃癌、巨人症、垂体腺瘤、银屑病和肾横纹肌样瘤。

在本发明的一个实施方案中，按照本发明的方法给予患者的IGF1R抑制剂是与胰岛素样生长因子-1受体(例如人IGF1R)特异性结合的分离抗体或其抗原结合片段(例如单克隆抗体(例如完全人单克隆抗体)、多克隆抗体、双特异性抗体、Fab抗体片段、F(ab)₂抗体片段、Fv抗体片段(例如VH或VL)、单链Fv抗体片段、dsFv抗体片段、人源化抗体、嵌合抗体或抗独特型抗体)，例如Burtrum等，CancerResearch 63：8912-8921(2003)；法国专利申请FR2834990、FR2834991和FR2834900和PCT申请公布号WO 03/100008、WO 03/59951、WO2006/13472、WO 04/71529、WO 03/106621、WO 04/83248、WO 04/87756、WO 05/16970和WO 02/53596中所公开的任何抗体或抗体片段。

在本发明的一个实施方案中，根据本发明的方法给予患者的IGF1R抑制剂是分离的抗胰岛素样生长因子-1受体(IGF1R)抗体，所述抗体包含成熟的19D12/15H12轻链C、轻链D、轻链E或轻链F(LCC、LCD、LCE或LCF)和成熟的19D12/15H12重链A或重链B(HCA或HCB)。在本发明的一个实施方案中，抗体包含成熟的LCF和成熟的HCA(LCF/HCA)。在本发明的一个实施方案中，按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂是与IGF1R特异性结合的分离抗体，其包含19D12/15H12轻链C、轻链D、轻链E或轻链F和/或19D12/15H12重链A或重链B的一个或多个互补决定区(CDR)(例如所有3个轻链CDR和所有3个重链CDR)。

本发明某些抗体链的氨基酸序列和核苷酸序列见下文。带有虚线下划线的类型表示信号肽。带有实线下划线的类型表示CDR。普通类型表示表示构架区。成熟片段缺乏信号肽。

修饰的19D12/15H12轻链C(SEQ ID NO：1)

GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GAC TCT CTG TCT GTG ACT  CCA

GGC GAG AGA GTC ACC ATC ACC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC

TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG TCT CCA AAG CTT CTC ATC AAG

TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG GTC CCC TCG AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGC CTC GAG GCT GAA GAT GCT

GCA GCG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA

GGG  ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACG

(SEQ ID NO：2)

E    I    V    L    T    Q    S    P    D    S    L    S    V    T    P

G    E    R    V    T    I    T    C    R    A    S    Q    S    I    G    S    S

L    H    W    Y    Q    Q    K    P    G    Q    S    P    K    L    L    I    K

Y    A    S    Q    S    L    S    G    V    P    S    R    F    S    G    S    G

S    G    T    D    F    T    L    T    I    S    S    L    E    A    E    D    A

A    A    Y    Y    C    H    Q    S    S    R    L    P    H    T    F    G    Q

G    T    K    V    E    I    K    R    T

修饰的19D12/15H12轻链D(SEQ ID NO：3)

GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GAC TCT CTG TCT GTG ACT  CCA

GGC GAG AGA GTC ACC ATC ACC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC

TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG TCT CCA AAG CTT CTC ATC AAG

TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG GTC CCC TCG AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGC CTC GAG GCT GAA GAT TTC

GCA GTG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA

GGG  ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACG

(SEQ ID NO：4)

E    I    V    L    T    Q    S    P    D    S    L    S    V    T    P

G    E    R    V    T    I    T    C    R    A    S    Q    S    I    G    S    S

L    H    W    Y    Q    Q    K    P    G    Q    S    P    K    L    L    I    K

Y    A    S    Q    S    L    S    G    V    P    S    R    F    S    G    S    G

S    G    T    D    F    T    L    T    I    S    S    L    E    A    E    D    F

A    V    Y    Y    C    H    Q    S    S    R    L    P    H    T    F    G    Q

G    T    K    V    E    I    K    R    T

修饰的19D12/15H12轻链E(SEQ ID NO：5)

GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GGT ACC CTG TCT GTG TCT CCA

GGC GAG AGA GCC ACC CTC TCC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC

TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG GCT CCA AGG CTT CTC ATC AAG

TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG ATC CCC GAT AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGA CTG GAG CCT GAA GAT GCT

GCA GCG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA

GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACA

(SEQ ID NO：6)

E    I    V    L    T    Q    S    P    G    T    L    S    V    S    P

G    E    R    A    T    L    S    C    R    A    S    Q    S    I    G    S    S

L    H    W    Y    Q    Q    K    P    G    Q    A    P    R    L    L    I    K

Y    A    S    Q    S    L    S    G    I    P    D    R    F    S    G    S    G

S    G    T    D    F    T    L    T    I    S    R    L    E    P    E    D    A

A    A    Y    Y    C    H    Q    S    S    R    L    P    H    T    F    G    Q

G    T    K    V    E    I    K    R    T

修饰的19D12/15H12轻链F(SEQ ID NO：7)

GAA ATT GTG CTG ACT CAG AGC CCA GGT ACC CTG TCT GTG TCT CCA

GGC GAG AGA GCC ACC CTC TCC TGC CGG GCC AGT CAG AGC ATT GGT AGT AGC

TTA CAC TGG TAC CAG CAG AAA CCA GGT CAG GCT CCA AGG CTT CTC ATC AAG

TAT GCA TCC CAG TCC CTC TCA GGG ATC CCC GAT AGG TTC AGT GGC AGT GGA

TCT GGG ACA GAT TTC ACC CTC ACC ATC AGT AGA CTG GAG CCT GAA GAT TTC

GCA GTG TAT TAC TGT CAT CAG AGT AGT CGT TTA CCT CAC ACT TTC GGC CAA

GGG ACC AAG GTG GAG ATC AAA CGT ACA

(SEQ ID NO：8)

E    I    V    L    T    Q    S    P    G    T    L    S    V    S    P

G    E    R    A    T    L    S    C    R    A    S    Q    S    I    G    S    S

L    H    W    Y    Q    Q    K    P    G    Q    A    P    R    L    L    I    K

Y    A    S    Q    S    L    S    G    I    P    D    R    F    S    G    S    G

S    G    T    D    F    T    L    T    I    S    R    L    E    P    E    D    F

A    V    Y    Y    C    H    Q    S    S    R    L    P    H    T    F    G    Q

G    T    K    V    E    I    K    R    T

修饰的19D12/15H12重链A(SEQ ID NO：9)

GAG GTT CAG CTG GTG CAG TCT GGG GGA GGC TTG GTA AAG CCT GGG

GGG TCC CTG AGA CTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACC TTC AGT AGC TTT

GCT ATG CAC TGG GTT CGC CAG GCT CCA GGA AAA GGT CTG GAG TGG ATA TCA

GTT ATT GAT ACT CGT GGT GCC ACA TAC TAT GCA GAC TCC GTG AAG GGC CGA

TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC TCC TTG TAT CTT CAA ATG AAC

AGC CTG AGA GCC GAG GAC ACT GCT GTG TAT TAC TGT GCA AGA CTG GGG AAC

TTC TAC TAC GGT ATG GAC GTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC

TCA

(SEQ ID NO：10)

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Lys Pro Gly

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser

Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg

Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn

Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn

Phe Tyr Tyr Gly Met Asp Val Trp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

Ser

修饰的19D12/15H12重链B(SEQ ID NO：11)

GAG GTT CAG CTG GTG CAG TCT GGG GGA GGC TTG GTA CAG CCC GGG

GGG TCC CTG AGA CTC TCC TGT GCA GCC TCT GGA TTC ACC TTC AGT AGC TTT

GCT ATG CAC TGG GTT CGC CAG GCT CCA GGA AAA GGT CTG GAG TGG ATA TCA

GTT ATT GAT ACT CGT GGT GCC ACA TAC TAT GCA GAC TCC GTG AAG GGC CGA

TTC ACC ATC TCC AGA GAC AAT GCC AAG AAC TCC TTG TAT CTT CAA ATG AAC

AGC CTG AGA GCC GAG GAC ACT GCT GTG TAT TAC TGT GCA AGA CTG GGG AAC

TTC TAC TAC GGT ATG GAC GTC TGG GGC CAA GGG ACC ACG GTC ACC GTC TCC

TCA

(SEQ ID NO：12)

Glu Val Gln Leu Val Gln Ser Gly Gly Gly Leu Val Gln Pro Gly

Gly Ser Leu Arg Leu Ser Cys Ala Ala Ser Gly Phe Thr Phe Ser Ser Phe

Ala Met His Trp Val Arg Gln Ala Pro Gly Lys Gly Leu Glu Trp Ile Ser

Val Ile Asp Thr Arg Gly Ala Thr Tyr Tyr Ala Asp Ser Val Lys Gly Arg

Phe Thr Ile Ser Arg Asp Asn Ala Lys Asn Ser Leu Tyr Leu Gln Met Asn

Ser Leu Arg Ala Glu Asp Thr Ala Val Tyr Tyr Cys Ala Arg Leu Gly Asn

Phe Tyr Tyr Gly Met Asp ValTrp Gly Gln Gly Thr Thr Val Thr Val Ser

Ser

本发明包括其中本文所述抗体链被一个或多个突变保守取代但不显著影响抗体结合活性的实施方案。

包含与15H12/19D12轻链和重链有效连接的CMV启动子的质粒已于2003年5月21日保藏在美国典型培养物保藏中心(American TypeCulture Collection，ATCC)；10801University Boulevard；Manassas，Virginia 20110-2209。质粒的保藏名称和ATCC保藏号如下：

(i)CMV启动子-15H12/19D12HCA(γ4)-

保藏名称：“15H12/19D12HCA(γ4)”；

ATCC保藏号：PTA-5214；

(ii)CMV启动子-15H12/19D12HCB(γ4)-

保藏名称：“15H12/19D12HCB(γ4)”；

ATCC保藏号：PTA-5215；

(iii)CMV启动子-15H12/19D12HCA(γ1)-

保藏名称：“15H12/19D12HCA(γ1)”；

ATCC保藏号：PTA-5216；

(iv)CMV启动子-15H12/19D12LCC(κ)-

保藏名称：“15H12/19D12LCC(κ)”；

ATCC保藏号：PTA-5217；

(v)CMV启动子-15H12/19D12LCD(κ)-

保藏名称：“15H12/19D12LCD(κ)”；

ATCC保藏号：PTA-5218；

(vi)CMV启动子-15H12/19D12LCE(κ)-

保藏名称：“15H12/19D12LCE(κ)”；

ATCC保藏号：PTA-5219；和

(vii)CMV启动子-15H12/19D12LCF(κ)-

保藏名称：“15H12/19D12LCF(κ)”；

ATCC保藏号：PTA-5220；

本发明包括包含抗IGF1R抗体及其抗原结合片段的方法和组合物(例如本文所公开的方法和组合物)，所述抗IGF1R抗体及其抗原结合片段包含位于保藏于ATCC的任何前述质粒上的免疫球蛋白轻链和/或免疫球蛋白重链或其成熟片段。

在本发明的一个实施方案中，与人IGF1R“特异性”结合的抗体，结合的Kd约为10^-8M或10^-7M或更小数值；或者，在本发明的一个实施方案中，结合的Kd约为1.28×10^-10M或更小数值(Biacore测定法)，或者结合的Kd约为2.05×10^-12M或较低数值(KinExA测定法)。在另一个实施方案中，与人IGF1R“特异性”结合的抗体按任何规定量只与人IGF1R结合，而不与其它蛋白结合。

在本发明的一个实施方案中，按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂包含已公开的国际申请号WO 2002/53596中所示的任何轻链免 疫球蛋白和/或重链免疫球蛋白，该申请通过引用全部结合到本文中。

例如，在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链可变区和/或重链可变区，该轻链可变区包含选自WO 2002/53596中所示的SEQ ID NO：2、6、10、14、18、22、47和51的氨基酸序列，该重链可变区包含选自WO 2002/53596中所示的SEQ ID NO：4、8、12、16、20、24、45和49的氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，抗体包含选自WO 2002/53596的抗体2.12.1、2.13.2、2.14.3、3.1.1、4.9.2和4.17.3的重链和/或轻链。

在本发明的一个实施方案中，可按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂包含已公开的国际申请号WO 2003/59951中所示的任何轻链免疫球蛋白和/或重链免疫球蛋白，该申请通过引用全部结合到本文中。例如，在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链可变区和/或重链可变区，该轻链可变区包含WO 2003/59951中所示的SEQ IDNO：54、61和65的氨基酸序列，该重链可变区包含选自WO2003/59951中所示的SEQ ID NO：69、75、79和83的氨基酸序列。

在本发明的一个实施方案中，可按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂包含已公开的国际申请号WO 2004/83248中所示的任何轻链免疫球蛋白和/或重链免疫球蛋白，该申请通过引用全部结合到本文中。例如，在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链可变区和/或重链可变区，该轻链可变区包含选自WO 2004/83248中所示的SEQID NO：109、111、113、115、117、119、121、123、125、127、129、131、133、135、137、139、141和143的氨基酸序列，该重链可变区包含选自WO 2004/83248中所示的SEQ ID NO：108、110、112、114、116、118、120、122、124、126、128、130、132、134、136、138、140和142的氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链和/或重链，该轻链和/或重链选自WO 2004/83248中的PINT-6A1、PINT-7A2、PINT-7A4、PINT-7A5、PINT-7A6、PINT-8A1、PINT-9A2、PINT-11A1、PINT-11A2、PINT-11A3、PINT-11A4、PINT-11A5、 PINT-11A7、PINT-12A1、PINT-12A2、PINT-12A3、PINT-12A4和PINT-12A5的轻链和/或重链。

在本发明的一个实施方案中，可按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂包含已公开的国际申请号WO 2003/106621中所示的任何轻链免疫球蛋白和/或重链免疫球蛋白，该申请通过引用全部结合到本文中。例如，在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链可变区和/或重链可变区，该轻链可变区包含选自WO 2003/106621中所示的SEQ ID NO：8-12、58-69、82-86、90、94、96、98的氨基酸序列，该重链可变区包含选自WO 2003/106621中所示的SEQ ID NO：7、13、70-81、87、88、92的氨基酸序列。

在本发明的一个实施方案中，可按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂包含已公开的国际申请号WO 2004/87756中所示的任何轻链免疫球蛋白和/或重链免疫球蛋白，该申请通过引用全部结合到本文中。例如，在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链可变区或重链可变区，该轻链可变区包含WO 2004/87756中所示的SEQ ID NO：2的氨基酸序列，该重链可变区包含WO 2004/87756中所示的SEQ IDNO：1的氨基酸序列。

在本发明的一个实施方案中，可按照本发明方法给予患者的IGF1R抑制剂包含已公开的国际申请号WO 2005/16970中所示的任何轻链免疫球蛋白和/或重链免疫球蛋白，该申请通过引用全部结合到本文中。例如，在本发明的一个实施方案中，抗体包含轻链可变区和/或重链可变区，该轻链可变区包含WO 2005/16970中所示的SEQ IDNO：6或10的氨基酸序列，该重链可变区包含WO 2005/16970中所示的SEQ ID NO：2的氨基酸序列。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含免疫球蛋白重链可变区，其包含选自以下的氨基酸序列：

1 grlgqawrsl rlscaasgft fsdyymswir qapgkglewv syisssgstr

51 dyadsvkgrf tisrdnakns lylqmnslra edtavyycvr dgvettfyyy

101 yygmdvwgqg ttvtvssast kgpsvfplap csrstsesta algclvkdyf

151 pepvtvswns galtsgvhtf psca

(SEQ ID NO：13)

1 vqllesgggl vqpggslrls ctasgftfss yamnwvrqap gkglewvsai

51 sgsggttfya dsvkgrftis rdnsrttlyl qmnslraedt avyycakdlg

101 wsdsyyyyyg mdvwgqgttv tvss

(SEQ ID NO：14)

1 gpglvkpset lsltctvsgg sisnyywswi rqpagkglew igriytsgsp

51 nynpslksrv tmsvdtsknq fslklnavta adtavyycav tifgvviifd

101 ywgqgtlvtv ss

(SEQ ID NO：15)

1 evqllesggg lvqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsa

51 isgsggityy adsvkgrfti srdnskntly lqmnslraed tavyycakdl

101 gygdfyyyyy gmdvwgqgtt vtvss

(SEQ ID NO：16)

1 pglvkpsetl sltctvsggs issyywswir qppgkglewi gyiyysgstn

51 ynpslksrvt isvdtsknqf slklssvtaa dtavyycart ysssfyyygm

101 dvwgqgttvt vss

(SEQ ID NO：17)

1 evqllesggg lvqpggslrl scaasgftfs  syamswvrqa pgkglewvsg

51 itgsggstyy adsvkgrfti srdnskntly lqmnslraed tavyycakdp

101 gttvimswfd pwgqgtlvtv ss

(SEQ ID NO：18)

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含免疫球蛋白轻链可变区，其包含选自以下的氨基酸序列：

1 asvgdrvtft crasqdirrd lgwyqqkpgk apkrliyaas rlqsgvpsrf

51 sgsgsgteft ltisslqped fatyyclqhn nyprtfgqgt eveiirtvaa

101 psvfifppsd eqlksgtasv vcllnnfypr eakvqw

(SEQ ID NO：19)

1 diqmtqfpss lsasvgdrvt itcrasqgir ndlgwyqqkp gkapkrliya

51 asrlhrgvps rfsgsgsgte ftltisslqp edfatyyclq hnsypcsfgq

101 gtkleik

(SEQ ID NO：20)

1 sslsasvgdr vtftcrasqd irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv

51 psrfsgsgsg teftltissl qpedfatyyc lqhnnyprtf gqgteveiir

(SEQ ID NO：21)

1 diqmtqspss lsasvgdrvt itcrasqgir sdlgwfqqkp gkapkrliya

51 asklhrgvps rfsgsgsgte ftltisrlqp edfatyyclq hnsypltfgg

101 gtkveik

(SEQ ID NO：22)

1 gdrvtitcra sqsistflnw yqqkpgkapk llihvasslq ggvpsrfsgs

51 gsgtdftlti sslqpedfat yycqqsynap ltfgggtkve ik

(SEQ ID NO：23)

1 ratlscrasq svrgrylawy qqkpgqaprl liygassrat gipdrfsgsg

51 sgtdftltis rlepedfavf ycqqygsspr tfgqgtkvei k

(SEQ ID NO：24)

在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体包含轻链免疫球蛋白或其成熟片段(即缺乏信号序列)或其可变区，它包含以下氨基酸序列：

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqg

51 irndlgwyqq kpgkapkrli yaasslqsgv psrfsgsgsg teftltissl

101 qpedfatyyc lqhnsypwtf gqgtkveikr tvaapsvfif ppsdeqlksg

151 tasvvcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst

201 ltlskadyek hkvyacevth qglsspvtks  fnrgec  ；

(SEQ ID NO：25)

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvgdr vtftcrasqd

51 irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv psrfsgsgsg teftltissl

101 qpedfatyyc lqhnnyprtf gqgteveiir tvaapsvfif ppsdeqlksg

151 tasvvcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst

201 ltlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec   ；

(SEQ ID NO：26)

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqg

51 irndlgwyqq kpgkapkrli yaasslqsgv psrfsgsgsg teftltissl

101 qpedfatyyc lqhnsypytf gqgtkleikr tvaapsvfif ppsdeqlksg

151 tasvvcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst

201 ltlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec   ；

(SEQ ID NO：27)

或

1 mdmrvpaqll gllllwfpga rcdiqmtqfp sslsasvgdr vtitcrasqg

51 irndlgwyqq kpgkapkrli yaasrlhrgv psrfsgsgsg teftltissl

101 qpedfatyyc lqhnsypcsf gqgtkleikr tvaapsvfif ppsdeqlksg

151 tasvvcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst

201 ltlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec

(SEQ ID NO：28)。

在本发明的一个实施方案中，信号序列为SEQ ID NO：25-28的氨基酸1-22。在本发明的一个实施方案中，成熟可变区有下划线。在本发明的一个实施方案中，CDR为粗体字/斜体字。在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含一个或多个如上所示的CDR(例如3个轻链CDR)。

在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体包含重链免疫球蛋白或其成熟的片段(即缺乏信号序列)或其可变区，它包含以下的氨基酸序列：

1 mefglswvfl vaiikgvqcq vqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd

51 yymswirqap gkglewvsyi sssgstiyya dsvkgrftis rdnaknslyl

101 qmnslraedt avyycarvlr flewllyyyy yygmdvwgqg ttvtvssast

151 kgpsvfplap csrstsesta algclvkdyf pepvtvswns galtsgvhtf

201 pavlqssgly slssvvtvps snfgtqtytc nvdhkpsntk vdktverkcc

251 vecppcpapp vagpsvflfp pkpkdtlmis rtpevtcvvv dvshedpevq

301 fnwyvdgvev hnaktkpree qfnstfrvvs vltvvhqdwl ngkeykckvs

351 nkglpapiek tisktkgqpr epqvytlpps reemtknqvs ltclvkgfyp

401 sdiavewesn gqpennyktt ppmldsdgsf flyskltvdk srwqqgnvfs

451 csvmhealhn hytqkslsls pgk   ；

(SEQ ID NO：29)

1 mefglswvfl vaiikgvqcq aqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd

51 yymswirqap gkglewvsyi sssgstrdya dsvkgrftis rdnaknslyl

101 qmnslraedt avyycvrdgv ettfyyyyyg mdvwgqgttv tvssastkgp

151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav

201 lqssglysls svvtvpssnf gtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec

251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw

301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg

351 lpapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc lvkgfypsdi

401 avewesngqp ennykttppm ldsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv

451 mhealhnhyt qkslslspgk     ；

(SEQ ID NO：30)

1 mefglswlfl vailkgvqce vqllesgggl vqpggslrls caasgftfss

51 yamswvrqap gkglewvsai sgsggstyya dsvkgrftis rdnskntlyl

101 qmnslraedt avyycakgys sgwyyyyyyg mdvwgqgttv tvssastkgp

151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav

201 lqssglysls svvtvpssnf gtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec

251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw

301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg

351 lpapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc lvkgfypsdi

401 avewesngqp ennykttppm ldsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv

451 mhealhnhyt qkslslspgk          ；

(SEQ ID NO：31)

或

1 mefglswlfl vailkgvqce vqllesgggl vqpggslrls ctasgftfss

51 yamnwvrqap gkglewvsai sgsggttfya dsvkgrftis rdnsrttlyl

101 qmnslraedt avyycakdlg wsdsyyyyyg mdvwgqgttv tvssastkgp

151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav

201 lqssglysls svvtvpssnf gtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec

251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw

301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg

351 lpapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc lvkgfypsdi

401 avewesngqp ennykttppm ldsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv

451 mhealhnhyt qkslslspgk

(SEQ ID NO：32)。

在本发明的一个实施方案中，信号序列为SEQ ID NO：29-32的氨基酸1-19。在本发明的一个实施方案中，成熟可变区有下划线。在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含一个或多个如上所示的CDR(例如3个轻链CDR)。

在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体分别包含轻链可变区与重链可变区配对，该轻链可变区包含SEQ ID NO：19-24中任一个的氨基酸序列，该重链可变区包含SEQ ID NO：13-18中任一个的氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体包含成熟轻链可变区与重链可变区配对，该成熟轻链可变区包含SEQ ID NO：25或26中任一个的氨基酸序列，该重链可变区包含SEQ ID NO：29或30中任一个的氨基酸序列。在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体包含成熟轻链可变区与重链可变区配对，该成熟轻链可变区包含SEQ IDNO：27或28中任一个的氨基酸序列，该重链可变区包含SEQ ID NO：31或32中任一个的氨基酸序列。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含2.12.1fx的免疫球蛋白重链或成熟片段或可变区(SEQ IDNO：33)(在本发明的一个实施方案中，前导序列有下划线；在本发明的一个实施方案中，CDR为粗体字/斜体字)：

1 mefglswvfl vaiikgvqcq vqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd

51 yymswirqap gkglewvsyi sssgstrdya dsvkgrftis rdnaknslyl

101 qmnslraedt avyycardgv ettfyyyyyg mdvwgqgttv tvssastkgp

151 svfplapcsr stsestaalg clvkdyfpep vtvswnsgal tsgvhtfpav

201 lqssglysls svvtvpssnf gtqtytcnvd hkpsntkvdk tverkccvec

251 ppcpappvag psvflfppkp kdtlmisrtp evtcvvvdvs hedpevqfnw

301 yvdgvevhna ktkpreeqfn stfrvvsvlt vvhqdwlngk eykckvsnkg

351 lpapiektis ktkgqprepq vytlppsree mtknqvsltc lvkgfypsdi

401 avewesngqp ennykttppm ldsdgsffly skltvdksrw qqgnvfscsv

451 mhealhnhyt qkslslspgk

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含2.12.1fx的氨基酸20-470(SEQ ID NO：33)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含2.12.1fx的成熟免疫球蛋白重链可变区(SEQ ID NO：33的氨基酸20-144；SEQ ID NO：34)：

q vqlvesgggl vkpggslrls caasgftfsd yymswirqap gkglswvsyi sssgstrdya

dsvkgrftis rdnaknslyl qmnslraedt avyycardgv ettfyyyyyg mdvwgqgttv tvss

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含2.12.1fx的免疫球蛋白轻链或成熟片段或可变区(SEQ IDNO：35)(在本发明的一个实施方案中，前导序列有下划线；在本发明 的一个实施方案中，CDR为粗体字/斜体字)：

1 mdmrvpaqll qllllwfpga rcdiqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqd

51 irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv psrfsgsgsg teftltissl

101 qpedfatyyc lqhnnyprtf gqgtkveikr tvaapsvfif ppsdeqlksg

151 tasvvcllnn fypreakvqw kvdnalqsgn sqesvteqds kdstyslsst

201 ltlskadyek hkvyacevth qglsspvtks fnrgec

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含2.12.1fx的氨基酸23-236(SEQ ID NO：35)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含2.12.1fx的成熟免疫球蛋白轻链可变区(SEQ ID NO：35的氨基酸23-130；SEQ ID NO：36)：

diqmtqsp sslsasvgdr vtitcrasqd irrdlgwyqq kpgkapkrli yaasrlqsgv psrfsgsgsg

teftltissl qpedfatyyc lqhnnyprtf gqgtkveikr

在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含轻链免疫球蛋白链和重链免疫球蛋白链或者由轻链免疫球蛋白链和重链免疫球蛋白链组成，该轻链免疫球蛋白链包含2.12.1fx的氨基酸23-236(SEQ ID NO：35)或由2.12.1fx的氨基酸23-236(SEQ ID NO：35)组成，该重链免疫球蛋白链包含2.12.1fx的氨基酸20-470(SEQ IDNO：33)或由2.12.1fx的氨基酸20-470(SEQ ID NO：33)组成。

在本发明的一个实施方案中，抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含一个或多个如上所示的2.12.1fxCDR(例如3个轻链CDR和/或3个重链CDR)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段或其抗原结合片段包含人源化7C10免疫球蛋白轻链可变区；形式1(SEQ ID NO：37)：

1 dvvmtqspls lpvtpgepas iscrssqsiv hsngntylqw ylqkpgqspq

51 lliykvsnrl ygvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedvgv yycfqgshvp

101 wtfgqgtkve ik

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含人源化7C10免疫球蛋白轻链可变区；形式2(SEQ ID NO：38)：

1 divmtqspls lpvtpgepas iscrssqsiv hsngntylqw ylqkpgqspq

51 lliykvsnrl ygvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedvgv yycfqgshvp

101 wtfgqgtkve ik

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含人源化7C10免疫球蛋白重链可变区；形式1(SEQ ID NO：39)：

1 qvqlqesgpg lvkpsetlsl tctvsgysit ggylwnwirq ppgkglewmg

51 yisydgtnny kpslkdriti srdtsknqfs lklssvtaad tavyycaryg

101 rvffdywgqg tlvtvss

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含人源化7C10免疫球蛋白重链可变区；形式2(SEQ ID NO：40)：

1 qvqlqesgpg lvkpsetlsl tctvsgysit ggylwnwirq ppgkglewig

51 yisydgtnny kpslkdrvti srdtsknqfs lklssvtaad tavyycaryg

101 rvffdywgqg tlvtvss

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含人源化7C10免疫球蛋白重链可变区；形式3(SEQ ID NO：41)：

1 qvqlqesgpg lvkpsetlsl tctvsgysis ggylwnwirq ppgkglewig

51 yisydgtnny kpslkdrvti svdtsknqfs lklssvtaad tavyycaryg

101 rvffdywgqg tlvtvss

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含A12免疫球蛋白重链可变区(SEQ ID NO：42)：

1 evqlvqsgae vkkpgssvkv sckasggtfs syaiswvrqa pgqglewmgg

51 iipifgtany aqkfqgrvti tadkststay melsslrsed tavyycarap

101 lrflewstqd hyyyyymdvw gkgttvtvss

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含A12免疫球蛋白轻链可变区(SEQ ID NO：43)：

1 sseltqdpav svalgqtvri tcqgdslrsy yaswyqqkpg qapvlviygk

51 nnrpsgipdr fsgsssgnta sltitgaqae deadyycnsr dnsdnrllfg

101 ggtkltvls

或

(SEQ ID NO：105)：

1 sseltqdpav svalgqtvri tcqgdslrsy yatwyqqkpg qapilviyge

51 nkrpsgipdr fsgsssgnta sltitgaqae deadyycksr dgsgqhlvfg

101 ggtkltvlg

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含IA免疫球蛋白重链可变区(SEQ ID NO：44)：

1 evqlvqsggg lvhpggslrl scagsgftfr nyamywvrqa pgkglewvsa

51 igsgggtyya dsvkgrftis rdnaknslyl qmnslraedm avyycarapn

101 wgsdafdiwg qgtmvtvss    ；

任选包括一个或多个下列突变：R30、S30、N31、S31、Y94、H94、D104、E104。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含1A免疫球蛋白轻链可变区(SEQ ID NO：45)：

1 diqmtqspss lsasvgdrvt itcrasqgis swlawyqqkp ekapksliya

51 asslqsgvps rfsgsgsgtd ftltisslqp edfatyycqq ynsypptfgp

101 gtkvdik                                               ；

任选包括一个或多个下列突变：P96、I96、P100、Q100、R103、K103、V104、L104、D105、E105。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含单链抗体(fv)8A1(SEQ ID NO：46)：

1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgpgynff nywigwvrqm pgkglewmgi

51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay lqwsslkasd tamyycarsi

101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtmvtvssgg ggsggggsgg ggsseltqdp

151 avsvalgqtv ritcqgdslr syyaswyqqk pgqapvlviy gknnrpsgip

201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhvv fgggtkltvl

251 g

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含单链抗体(fv)9A2(SEQ ID NO：47)：

1 qvqlvqsgae vrkpgasvkv scktsgytfr nydinwvrqa pgqglewmgr

51 isghygntdh aqkfqgrftm tkdtststay melrsltfdd tavyycarsq

101 wnvdywgrgt lvtvssgggg sggggsgggg salnfmltqp hsvsespgkt

151 vtisctrssg siasnyvqwy qqrpgssptt vifednrrps gvpdrfsgsi

201 dtssnsaslt isglktedea dyycqsfdst nlvvfgggtk vtvlg

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含单链抗体(fv)11A4(SEQ ID NO：48)：

1 evqllesggg lvqpggslrl scaasgftfs syamswvrqa pgkglewvsa

51 isgsggstyy adsvkgrfti srdnskntly lqmnslraed tavyycassp

101 yssrwysfdp wgqgtmvtvs sggggsgggg sggggsalsy eltqppsvsv

151 spgqtatitc sgddlgnkyv swyqqkpgqs pvlviyqdtk rpsgiperfs

201 gsnsgniatl tisgtqavde adyycqvwdt gtvvfgggtk ltvlg

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含单链抗体(fv)7A4(SEQ ID NO：49)：

1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgsgynff nywigwvrqm pgkdlewmgi

51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay lqwsslkasd tamyycarsi

101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtmvtvssgg gssggggsgg ggsseltqdp

151 avsvalgqtv ritcrgdslr nyyaswyqqk pgqapvlviy gknnrpsgip

201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhmv fgggtkltvl

251 g

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结 合片段包含单链抗体(fv)11A1(SEQ ID NO：50)：

1 evqlvesggg vvqpgrslrl scaasgftfs dfamhwvrqi pgkglewlsg

51 lrhdgstayy agsvkgrfti srdnsrntvy lqmnslraed tatyycvtgs

101 gssgphafpv wgkgtlvtvs sggggsgggg sggggsalsy vltqppsasg

151 tpgqrvtisc sgsnsnigty tvnwfqqlpg tapklliysn nqrpsgvpdr

201 fsgsksgtsa slaisglqse deadyycaaw ddslngpvfg ggtkvtvlg

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含单链抗体(fv)7A6(SEQ ID NO：51)：

1 evqlvqsgae vkkpgeslti sckgsgynff nywigwvrqm pgkglewmgi

51 iyptdsdtry spsfqgqvti svdksistay lqwsslkasd tamyycarsi

101 rycpggrcys gyygmdvwgq gtlvtvssgg ggsggggsgg ggsseltqdp

151 avsvalgqtv ritcqgdslr syytnwfqqk pgqapllvvy aknkrpsgip

201 drfsgsssgn tasltitgaq aedeadyycn srdssgnhvv fgggtkltvl

251 g

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段(例如重链或轻链免疫球蛋白)包含一个或多个选自以下的互补决定区(CDR)：

sywmh(SEQ ID NO：52)；

einpsngrtnynekfkr(SEQ ID NO：53)；

grpdyygsskwyfdv(SEQ ID NO：54)；

rssqsivhsnvntyle(SEQ ID NO：55)；

kvsnrfs(SEQ ID NO：56)；和

fqgshvppt(SEQ ID NO：57)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段包含选自以下的重链免疫球蛋白可变区：

1 qvqlvqsgae vvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nqkfqgkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgqgttv tvs

(SEQ ID NO：58)；

1 qvqfqqsgae lvkpgasvkl sckasgytft sylmhwikqr pgrglewigr

51 idpnnvvtkf nekfkskatl tvdkpsstay melssltsed savyycarya

101 ycrpmdywgq gttvtvss

(SEQ ID NO：59)；

1 qvqlqqsgae lvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nekfkrkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgagttv tvs

(SEQ ID NO：60)；

1 qvqlqqsgae lmkpgasvki sckatgytfs sfwiewvkqr pghglewige

51 ilpgsggthy nekfkgkatf tadkssntay mqlssltsed savyycargh

101 syyfydgdyw gqgtsvtvss

(SEQ ID NO：61)；

1 qvqlqqpgsv lvrpgasvkl sckasgytft sswihwakqr pgqglewige

51 ihpnsgntny nekfkgkatl tvdtssstay vdlssltsed savyycarwr

101 ygspyyfdyw gqgttltvss

(SEQ ID NO：62)；

1 qvqlqqpgae lvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgrglewigr

51 idpnsggtky nekfkskatl tvdkpsstay mqlssltsed savyycaryd

101 yygssyfdyw gqgttltvss

(SEQ ID NO：63)；

1 qvqlvqsgae vvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nqkfqgkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgqgttv tvs

(SEQ ID NO：64)；

1 qvqlqqsgae lvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nekfkrkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgagttv tvss

(SEQ ID NO：65)；

1 qvqlvqsgae vvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nqkfqgkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgqgttv tvss

(SEQ ID NO：66)；

1 qvqlqqsgae lvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgrglewigr

51 idpnsggtky nekfkskatl tvdkpsstay mqlssltsed savyycaryd

101 yygssyfdyw gqgttvtvss

(SEQ ID NO：67)；

1 qiqlqqsgpe lvrpgasvki sckasgytft dyyihwvkqr pgeglewigw

51 iypgsgntky nekfkgkatl tvdtssstay mqlssltsed savyfcargg

101 kfamdywgqg tsvtvss

(SEQ ID NO：68)；

1 qvqlqqsgae lvkpgasvkl sckasgytft sywmhwvkqr pgqglewige

51 inpsngrtny nekfkrkatl tvdkssstay mqlssltsed savyyfargr

101 pdyygsskwy fdvwgagttv tvss

(SEQ ID NO：69)；

1 qiqlqqsgpe lvkpgasvki sckasgytft dyyinwmkqk pgqglewigw

51 idpgsgntky nekfkgkatl tvdtssstay mqlssltsed tavyfcarek

101 ttyyyamdyw gqgtsvtvsa

(SEQ ID NO：70)；

1 vqlqqsgael mkpgasvkis ckasgytfsd ywiewvkqrp ghglewigei

51 lpgsgstnyh erfkgkatft adtssstaym qlnsltseds gvyyclhgny

101 dfdgwgqgtt ltvss

(SEQ ID NO：71)；和

1 qvqllesgae lmkpgasvki sckatgytfs sfwiewvkqr pghglewige

51 ilpgsggthy nekfkgkatf tadkssntay mqlssltsed savyycargh

101 syyfydgdyw gqgtsvtvss

(SEQ ID NO：72)；

和/或选自以下的轻链免疫球蛋白可变区：

1 dvlmtqipvs lpvslgdqas iscrssqiiv hnngntylew ylqkpgqspq

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 ftfgsgtkle ikr

(SEQ ID NO：73)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：74)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：75)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：76)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr

51 1liykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：77)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrssqxiv hsngntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 xtfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：78)；

1 dvvmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：79)；

1 dvvmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：80)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：81)；

1 dvlmtqipvs lpvslgdqas iscrssqiiv hnngntylew ylqkpgqspq

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 ftfgsgtkle ikr

(SEQ ID NO：82)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrfsqsiv hsngntylew ylqksgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 rtfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：83)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：84)；

1 dvvmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：85)；

1 elvmtqtpls lpvslgdqas iscrssqtiv hsngdtyldw flqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：86)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：87)；

1 dvvmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：88)；

1 dvlmtqtpvs lsvslgdqas iscrssqsiv hstgntylew ylqkpgqspk

51 lliykisnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqashap

101 rtfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：89)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas isckssqsiv hssgntyfew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgship

101 ftfgsgtkle ikr

(SEQ ID NO：90)；

1 dieltqtpls lpvslgdqas iscrssqsiv hsngntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 ytfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：91)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：92)；

1 dvvmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspr

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：93)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：94)；

1 dvvmtqtpls lpvslgdpas iscrssqsiv hsnvntylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gagtdftlri srveaedlgi yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：95)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrsnqtil lsdgdtylew ylqkpgqspk

51 lliykvsnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgshvp

101 ptfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：96)；

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrssqtiv hsngntylew ylqkpgqspk

51 lliykvtnrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srveaedlgv yycfqgthap

101 ytfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：97)；和

1 dvlmtqtpls lpvslgdqas iscrssqsiv hsngntylew ylqkpgqspk

51 lliysissrf sgvpdrfsgs gsgtdftlki srvqaedlgv yycfqgshvp

101 ytfgggtkle ikr

(SEQ ID NO：98)。

本发明的范围包括其中给予患者抗胰岛素样生长因子受体-1(IGF1R)抗体的方法，其中抗体可变区与任何免疫球蛋白恒定区连接。在本发明的一个实施方案中，轻链可变区与κ链恒定区连接。在本发明的一个实施方案中，重链可变区与γ1、γ2、γ3或γ4链恒定区连接。在本发明的实施方案中，本文所示任何免疫球蛋白可变区可与前述任何恒定区连接。

此外，本发明的范围包括含有一个或多个CDR(3个轻链CDR和/或3个重链CDR)和/或本文所示任何轻链免疫球蛋白或重链免疫球蛋白的构架区的任何抗体或抗体片段，通过以下任何方法鉴定：Chothia等，J.Mol.Biol.186：651-663(1985)；Novotny和Haber，Proc.Natl.Acad.Sci.USA 82：4592-4596(1985)或Kabat，E.A.等，Sequences ofProteins of Immunological Interest，美国国立卫生研究院(NationalInstitutes of Health)，Bethesda，Md.，(1987))。

在本发明的一个实施方案中，本文所用术语“单克隆抗体”是指由一群基本均质的抗体中获得的抗体，也就是说除可能存在少量可能天然存在的突变以外，该群包含的各个抗体是相同的。如上所述，按照本发明使用的单克隆抗体可通过最先由Kohler等人披露的杂交瘤方法制备(Kohler等(1975)Nature 256：495)。

在本发明的一个实施方案中，双特异性或双功能抗体是一种人工杂合抗体，具有两对不同的重链/轻链和两个不同的结合位点。双特异性抗体可通过各种方法(包括杂交瘤的融合或Fab′片段的连接)产生。参见例如Songsivilai等(1990)Clin.Exp.Immunol.79：315-321，Kostelny等(1992)J Immunol.148：1547-1553。另外，双特异性抗体可制成“双 链抗体(diabody)”(Holliger等(1993)PNAS USA 90：6444-6448)或者制成“Janusins”(Traunecker等(1991)EMBO J.10：3655-3659和Traunecker等(1992)Int.J.Cancer Suppl.7：51-52)。

在本发明的一个实施方案中，术语“完全人抗体”是指仅包含人免疫球蛋白蛋白质序列的抗体。完全人抗体如果是由小鼠、小鼠细胞或衍生自小鼠细胞的杂交瘤产生的，则可含有非人类(例如鼠)糖链。同样，“小鼠抗体”是指仅包含小鼠免疫球蛋白蛋白质序列的抗体。

本发明包括“嵌合抗体”——一种包含本发明的可变区与得自其它人或非人物种(例如小鼠、马、兔、狗、牛、鸡)的抗体区(例如恒定区)融合或嵌合的抗体。这些抗体可在非人物种中调节IGF1R的表达或活性。

“单链Fv”或“sFv”抗体片段具有抗体V_H区和V_L区，其中这些区存在于单条多肽链上。sFv多肽一般还包含V_H区和V_L区之间的多肽接头，它能够使sFv形成所需的抗原结合的结构。可采用文献中所述的用于产生单链抗体的技术(美国专利号5,476,786、5,132,405和4,946,778)来产生抗IGF1R特异性单链抗体。有关sFv的综述可参见Pluckthun，The Pharmacology of Monoclonal Antibodies，第113卷，Rosenburg和Moore主编，Springer-Verlag，N.Y.，第269-315页(1994)。

在本发明的一个实施方案中，“二硫键稳定的Fv片段”和“dsFv”是指包含可变重链(V_H)和可变轻链(V_L)通过二硫键连接而成的免疫球蛋白。

本发明范围内抗体的抗原结合片段还包括通过例如胃蛋白酶酶促切割IgG所产生的F(ab)₂片段。Fab片段可通过例如F(ab)₂用二硫苏糖醇或巯基乙胺还原产生。Fab片段是V_L-C_L链通过二硫键与V_H-CH1链连接。F(ab)₂片段是依次通过两个二硫键连接的两个Fab片段。F(ab)₂分子的Fab部分包括二硫键所在位置之间F_c区的部分。

Fv片段是V_L区或V_H区。

根据免疫球蛋白重链恒定区的氨基酸序列，免疫球蛋白可被分成 不同的类别。免疫球蛋白至少有五大类：IgA、IgD、IgE、IgG和IgM，这些中有几个还可进一步分成亚类(同种型)，例如IgG-1、IgG-2、IgG-3和IgG-4；IgA-1和IgA-2。本文所论述的任何这类抗体或其抗原结合片段都落入本发明的范围内。

本发明的抗IGF1R抗体和片段还可与化学部分缀合。该化学部分尤其可以是聚合物、放射性核素或细胞毒性因子。在本发明的一个实施方案中，该化学部分是增加抗体分子在受治疗者体内的半寿期的聚合物。合适的聚合物包括但不限于聚乙二醇(PEG)(例如分子量为2kDa、5kDa、10kDa、12kDa、20kDa、30kDa或40kDa的PEG)，葡聚糖和聚乙二醇单甲醚(mPEG)。Lee等人(1999)(Bioconj.Chem.10：973-981)公开了PEG缀合单链抗体。Wen等人(2001)(Bioconj.Chem.12：545-553)公开了使抗体与放射性金属螯合剂(radiometal chelator)(二亚乙基三胺五乙酸(DTPA))连接的PEG缀合。

本发明的抗体和抗体片段还可与例如以下标记缀合：⁹⁹Tc、⁹⁰Y、 ¹¹¹In、³²P、¹⁴C、¹²⁵I、³H、¹³¹I、¹¹C、¹⁵O、¹³N、¹⁸F、³⁵S、⁵¹Cr、⁵⁷To、 ²²⁶Ra、⁶⁰Co、⁵⁹Fe、⁵⁷Se、¹⁵²Eu、⁶⁷CU、²¹⁷Ci、²¹¹At、²¹²Pb、⁴⁷Sc、¹⁰⁹Pd、 ²³⁴Th和⁴⁰K、¹⁵⁷Gd、⁵⁵Mn、⁵²Tr和⁵⁶Fe。

本发明的抗体和抗体片段还可与包括以下的荧光标记或化学发光标记缀合：荧光团例如稀土元素螯合物、荧光素及其衍生物、罗丹明及其衍生物、异硫氰酸盐、藻红蛋白、藻蓝蛋白、别藻蓝蛋白、邻苯二醛、荧光胺、¹⁵²Eu、丹酰、伞形酮、萤光素、鲁米诺标记、异鲁米诺标记、芳族吖啶酯标记(acridinium ester label)、咪唑标记、吖啶鎓盐(acridimium salt)标记、草酸酯标记、水母发光蛋白标记、2，3-二氢酞嗪二酮、生物素/抗生物素蛋白、自旋标记和稳定的自由基。

抗体和抗体片段还可与例如以下的细胞毒性因子缀合：白喉毒素、绿脓杆菌(Pseudomonas aeruginosa)外毒素A链、蓖麻毒蛋白A链、相思豆毒蛋白A链、塑莲根毒蛋白II A链、α-帚曲霉素(alpha-sarcin)、油桐(Aleurites fordii)蛋白和化合物(例如脂肪酸)、香石竹毒蛋白、美洲 商陆(Phytolacca americana)蛋白PAPI、PAPII和PAP-S、苦瓜抑制物(Momordica charantia inhibitor)、麻风树毒蛋白、巴豆毒蛋白、肥皂草(Saponaria officinalis)抑制物、mitogellin、局限曲菌素、酚霉素和伊诺霉素。

可以应用本领域已知的使本发明的抗体分子和片段与不同部分缀合的任何方法，包括以下文献所述方法：Hunter等(1962)Nature144：945；David等(1974)Biochemistry 13：1014；Pain等(1981)J.Immunol.Meth.40：219；和Nygren，J.，(1982)Histochem.and Cytochem.30：407。用于缀合抗体的方法是本领域常用和众所周知的。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为BMS-577098 

或AEW-541 

或 

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/48133中所述的例如包含以下核心结构的任何嘧啶衍生物：

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/35614中所述的例如包含以下核心结构的任何酪氨酸激酶抑制剂：

(例如 

)。通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/35615中所述的例如包含以下核心结构的任何酪氨酸激酶抑制剂：

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/35616中所述的例如包含以下核心结构的任何酪氨酸激酶抑制剂：

(例如 

)。通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/35619中所述的例如包含以下核心结构的任何酪氨酸激酶抑制剂：

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为还抑制例如VEGF-2R、Kit、FLT3和/或PDGFR的多靶向激酶抑制剂，例如SU-11248(例如苹果酸舒尼替尼(sunitinib malate))或Bay43-9006(索拉非尼(sorafenib))。通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/24967中所 述的例如包含以下核心结构的任何化合物：

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 04/30625中所述的例如包含以下核心结构的任何化合物：

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 04/30627中所述的例如包含以下核心结构的任何化合物：

通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 00/35455中所述的例如包含以下核心结构的任何杂芳基-芳基脲类化合物：

通过给予这些药物来治疗 或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为WO 03/27246中所述的任何肽。通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂为

或PCT申请公布号WO02/92599中所公开的任何4-氨基-5-苯基-7-环丁基-吡咯并[2，3-d]嘧啶衍生物。通过给予这些药物来治疗或预防本文所述任何医学病症的方法均落入本发明的范围内。

抗体的产生

可应用任何合适的方法诱导具有所需的抑制IGF1R的生物学特性的抗体。适宜从各种哺乳动物宿主(例如小鼠、啮齿动物、灵长类、人等)中制备单克隆抗体(mAb)。对制备这类单克隆抗体的技术的描述可参见例如Stites等(主编)BASIC AND CLINICAL IMMUNOLOGY(第四版)，Lange Medical Publications，Los Altos，CA及其中所引用的参考文献；Harlow和Lane(1988)ANTIBODIES：A LABORATORYMANUAL CSH Press；Goding(1986)MONOCLONAL ANTIBODIES：PRINCIPLES AND PRACTICE(第二版)Academic Press，New York，NY。因此，可通过本领域研究人员熟知的各种技术获得单克隆抗体。一般使经合乎要求的抗原免疫的动物脾细胞无限增殖化，通常通过与骨髓瘤细胞融合。参见Kohler和Milstein(1976)Eur.J.Immunol.6：511-519。无限增殖化的替代方法包括用EB病毒、癌基因或反转录病毒或本领域已知的其它方法转化。参见例如Doyle等(主编，1994和定期增刊)CELL AND TISSUE CULTURE：LABORATORY PROCEDURES，John Wiley and Sons，New York，NY。由单个无限增殖化细胞产生的集落筛选出产生的对抗原具有所需特异性和亲和力的抗体，并且可通过各种技术提高由这类细胞产生单克隆抗体的产量，包括注射入脊椎动物宿主腹膜腔。或者，可以按照例如Huse等人所述通用方案(Huse等(1989)Science 246：1275-1281)，由人B细胞筛选出DNA文库，来分离编码单克隆抗体或其结合片段的DNA序列。

其它合适的技术包括用噬菌体或类似载体对抗体文库进行选择。参见例如Huse等，Science 246：1275-1281(1989)；以及Ward等，Nature341：544-546(1989)。可以使用被修饰或未被修饰的本发明的多肽和抗体，包括嵌合抗体或人源化抗体。通常可通过与可提供可检测信号的物质共价或非共价连接，对多肽和抗体进行标记。各种标记和缀合技术是已知的，学术文献和专利文献中有大量报道。如上所述，合适的标记包括放射性核素、酶、底物、辅因子、抑制剂、荧光部分、化学发光部分、磁性粒子等。应用这类标记的专利指导包括美国专利号3,817,837、3,850,752、3,939,350、3,996,345、4,277,437、4,275,149和4,366,241。同样，制备重组免疫球蛋白可参见Cabilly的美国专利号4,816,567和Queen等(1989)Proc.Nat’l Acad.Sci.USA86：10029-10033；或者制备转基因小鼠可参见Mendez等(1997)NatureGenetics 15：146-156。产生嵌合抗体、人源化抗体和人抗体的更多方法是本领域众所周知的，参见例如授权予Queen等人的美国专利号5,530,101，授权予Winter等人的美国专利号5,225,539，授权予Boss等人的美国专利号4,816,397，所述所有专利均通过引用全部结合到本文中。

可用作表达本发明抗体的宿主的哺乳动物细胞系是本领域众所周知的，包括可获自美国典型培养物保藏中心(ATCC)的许多无限增殖化细胞系。这些尤其包括中国仓鼠卵巢(CHO)细胞、NSO、SP2细胞、HeLa细胞、幼仓鼠肾(BHK)细胞、猴肾细胞(COS)、人肝细胞癌细胞(例如Hep G2)、A549细胞、3T3细胞、HEK-293细胞和多种其它细胞系。 哺乳动物宿主细胞包括以下动物的细胞：人、小鼠、大鼠、狗、猴、猪、山羊、牛、马和仓鼠。通过测定具有高表达水平的细胞系选出特别优选的细胞系。可以使用的其它细胞系为昆虫细胞系，例如Sf9细胞、两栖动物细胞、细菌细胞、植物细胞和真菌细胞。当将编码重链或其抗原结合部分、轻链和/或其抗原结合部分的重组表达载体导入哺乳动物宿主细胞时，通过在足以使抗体在宿主细胞内表达，更优选抗体分泌到宿主细胞生长的培养基中的一段时间内，培养宿主细胞以产生抗体。

可采用标准蛋白质纯化方法从培养基中回收抗体。另外，可应用多种已知技术提高由生产细胞系表达的本发明抗体(或由其获得的其它部分)。例如，谷氨酰胺合成酶基因表达系统(GS系统)是在某些条件下提高表达的常用方法。在有关欧洲专利号0 216 846、0 256 055和0 323 997和欧洲专利申请号89303964.4中，整体或部分论述了GS系统。

很可能通过不同细胞系或在转基因动物中表达的抗体具有彼此间不同的糖基化作用。然而，本文提供的由核酸分子编码的所有抗体，或者包含本文提供的氨基酸序列的所有抗体是本发明的组成部分，不论抗体是否糖基化。

用于产生抗IGF1R抗体或其抗原结合片段的适宜的质粒系统可参见已公布的美国专利申请号US2005/0176099(另参见WO2005/47512)。

另外的化疗药物

本发明提供用于治疗或预防任何本文所述医学病症的方法，该方法通过给予治疗可接受剂量或治疗可接受量的例如本文所述的本发明抗IGF1R抗体或其抗原结合片段与另外的化疗药物(例如抗癌化疗药物和/或止吐化疗药物)联用。例如，另外的化疗药物包括埃罗替尼(erlotinib)、达沙替尼(dasatanib)、尼洛替尼(nilotinib)、decatanib、帕尼 单抗(panitumumab)、氨柔比星(amrubicin)、奥戈伏单抗(oregovomab)、Lep-etu(“易用型脂质体包封紫杉醇(paclitaxel)”)、诺拉曲塞(nolatrexed)、azd2171、巴他布林(batabulin)、奥法木单抗(ofatumumab)、扎木单抗(zanolimumab)、艾特咔林(edotecarin)、粉防己碱(tetrandrine)、卢比替康(rubitecan)、替米利芬(tesmilifene)、奥利美生(oblimersen)、替西木单抗(ticilimumab)、伊匹木单抗(ipilimumab)、棉酚(gossypol)、Bio 111、131-I-TM-601、ALT-110、BIO 140、CC 8490、西仑吉肽(cilengitide)、吉马替康(gimatecan)、IL13-PE38QQR、INO 1001、IPdR、KRX-0402、硫蒽酮(lucanthone)、LY 317615、碘[¹³¹I]抗肌腱蛋白单抗81C6(neuradiab)、vitespan、Rta 744、Sdx 102、他仑帕奈(talampanel)、阿曲生坦(atrasentan)、Xr 311、依维莫司(everolimus)、曲贝替定(trabectedin)、紫杉醇纳米粒注射混悬液(abraxane)、TLK 286、AV-299、DN-101、帕唑帕尼(pazopanib)、GSK690693、RTA 744、ON 0910.Na、AZD 6244(ARRY-142886)、AMN-107、TKI-258、GSK461364、AZD1152、恩扎啕林(enzastaurin)、凡德他尼(vandetanib)、ARQ-197、MK-0457、MLN8054、PHA-739358、R-763或AT-9263。

紫杉醇纳米粒注射混悬液(abraxane)是包含白蛋白结合形式的紫杉醇的紫杉醇蛋白结合粒子的注射混悬液，平均粒径约为130纳米。紫杉醇纳米粒注射混悬液的用法是在静脉内输注前，将白色至黄色无菌冻干粉用20mL 0.9％氯化钠注射液USP重配。每个单次使用的小瓶装有100mg紫杉醇和约900mg人白蛋白。每毫升(mL)重配的混悬液中含有5mg紫杉醇。紫杉醇纳米粒注射混悬液不含溶剂，不含乳浮(cremophor)(聚氧乙烯蓖麻油)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供：罗米地新(romidepsin)(FK-228； )、 ADS-100380、 

CG-781 

CG-1521 

SB-556629 

chlamydocin 

JNJ-16241199 

或伏林司他(vorinostat)(SAHA； 

)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与依托泊苷(VP-16； 

)联合提供。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与 吉西他滨 联合提供。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与已公布的美国专利申请号U.S.2004/0209878A1中所公开的任何化合物(例如包含由 

表示的核心结构)或多柔比星 联合提供，包括楷莱或 

(盐酸多柔比星脂质体注射剂；Ortho Biotech Products L.P；Raritan，NJ)。 

包含 

脂质体载体中的多柔比星，其中脂质体载体由N-(羰基-甲氧基聚乙二醇2000)-1，2-二硬脂酰-sn-甘油基-3-磷酸乙醇胺钠盐(MPEG-DSPE)、完全氢化的大豆磷脂酰胆碱(HSPC)和胆固醇组成。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与5′-脱氧-5-氟尿嘧啶核苷 

联合提供。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与长春新碱 

联合提供。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供：替莫唑胺(temozolomide) 

任何CDK抑制剂，例如ZK-304709，塞利西利(Seliciclib)(R-洛斯可维汀(R-roscovitine)) 

)；任何MEK抑制剂，例如PD0325901 

AZD-6244；卡培他滨(capecitabine)(5′-脱氧-5-氟-N-[(戊氧基)羰基]-胞苷)；或者N-[4-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-L- 谷氨酸二钠盐七水合物( 

培美曲塞二钠七水合物(pemetrexed disodium heptahydrate))。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供：喜树碱(camptothecin)( 

Stork等，J.Am.Chem.Soc.93(16)：4074-4075(1971)；Beisler等，J.Med.Chem.14(11)：1116-1117(1962))；伊立替康( 

以 

销售；Pharmacia&Upjohn Co.；Kalamazoo，MI)；伊立替康、5-氟尿嘧啶(5-fluorouracil)和亚叶酸(leucovorin)组合；或者PEG标记的伊立替康。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与FOLFOX方案(奥沙利帕(oxaliplatin) 

连同输注氟尿嘧啶 

和亚叶酸(folinic acid) 

)联合提供(Chaouche等，Am.J.Clin.Oncol.23(3)：288-289(2000)；de Gramont等，J.Clin.Oncol.18(16)：2938-2947(2000))。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与例如以下抗雌激素联合提供： 

(他莫昔芬(tamoxifen)；由AstraZeneca Pharmaceuticals LP Wilmington，DE以 

销售；)或 

(枸橼酸托瑞米芬(toremifene citrate)；由Shire US，Inc.；Florence，KY以 

销售)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与例如以下芳香酶抑制剂联合提供： 

(阿那曲唑(anastrazole)；由AstraZeneca Pharmaceuticals LP；Wilmington， DE以 

销售)， 

(依西美坦(exemestane)；由Pharmacia Corporation；Kalamazoo，MI以 

销售)或 

(来曲唑(letrozole)；由Novartis Pharmaceuticals Corporation；East Hanover，NJ以 

销售)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与例如以下雌激素联合提供：DES(己烯雌酚(diethylstilbestrol))、 

(雌二醇(estradiol)；由Warner Chilcott，Inc.；Rockaway，NJ以 

销售)或结合雌激素(conjugated estrogen)(由Wyeth Pharmaceuticals Inc.；Philadelphia，PA以 

销售)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供：抗血管生成药，包括贝伐单抗(bevacizumab)(Avastin^TM；Genentech；San Francisco，CA)；抗VEGFR-2抗体IMC-1C11；其它VEGFR抑制剂，例如CHIR-258 

以下国际公布号中所公开的任何抑制剂：WO2004/13145(例如包含核心结构式： 

WO2004/09542(例如包含核心结构式： 

WO00/71129(例如包含核心结构式： 

WO2004/09601(例如包含核心结构式： 

WO2004/01059(例如包含核心结构式： 

WO01/29025(例如包含核心结构 式： WO02/32861(例如包含核心结构式： )或WO03/88900(例如包含核心结构式 

)；3-[5-(甲基磺酰基哌啶甲基)-吲哚基]-喹诺酮；伐他拉尼(Vatalanib)( 

PTK/ZK、CPG-79787、ZK-222584)；AG-013736 

以及VEGF trap(AVE-0005)，为一种包含VEGF受体1和VEGF受体2部分的可溶性诱杀型受体。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供：LHRH(促黄体激素释放激素(Lutenizinghormone-releasing hormone))激动剂，例如[D-Ser(Bu t)6，Azgly 10] (pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bu t)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH₂醋酸盐；醋酸[C₅₉H₈₄N₁₈O₁₄·(C₂H₄O₂)_x，其中x＝1-2.4]； 

(醋酸戈舍瑞林(goserelinacetate)；由AstraZeneca UK Limited，Macclesfield，England以 

销售)； 

(醋酸亮丙立德(leuprolide acetate)；由Sanofi-Synthelabo Inc.；New York，NY以 

销售)或 

(双羟萘酸曲普瑞林(triptorelin pamoate)；由Pharmacia Company，Kalamazoo，MI以 销售)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与舒尼替尼或苹果酸舒尼替尼 

联合提供。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与例如以下的促孕剂(progestational agent)联合提供： 

(醋酸甲羟孕酮(medroxyprogesteroneacetate)；由Pharmacia&Upjohn Co.；Kalamazoo，MI以 

销售)、 (己酸羟孕酮(hydroxyprogesterone caproate)、17-((1-氧代己基)氧基)孕-4-烯-3，20-二酮)、醋酸甲地孕酮(megestrol acetate)或孕酮类药。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与例如以下选择性雌激素受体调节剂(SERM)联合提供： 

(雷洛昔芬(raloxifene)；由Eli Lilly andCompany；Indianapolis，IN以 

销售)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下抗雄激素药联合提供，包括但不限于：

(比卡鲁胺(bicalutamide)；由 AstraZeneca Pharmaceuticals LP；Wilmington，DE以 

销售)； 

(氟他胺(flutamide)；2-甲基-N-[4-硝基-3(三氟甲基)苯基]丙酰胺；由Schering Corporation，Kenilworth，NJ以 

销售)； 

(尼鲁米特(nilutamide)；由Aventis Pharmaceuticals Inc.，Kansas City，MO以 

销售)和 

(醋酸甲地孕酮；由Bristol-Myers Squibb以 销售)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与一种或多种拮抗EGF受体或HER2作用的抑制剂联合提供，包括但不限于CP-724714 

TAK-165 

HKI-272 

OSI-774( 

埃罗替尼，Hidalgo等，J.Clin.Oncol.19(13)：3267-3279(2001))；拉帕替尼(Lapatanib)( 

GW2016；Rusnak等，Molecular Cancer Therapeutics 1：85-94(2001)；N-{3-氯-4-[(3-氟苄基)氧基]苯基}-6-[5-({[2-(甲基磺酰基)乙基]氨基}甲基)-2-呋喃基]-4-喹唑啉胺，PCT申请号WO99/35146)；卡纳替尼(Canertinib)(CI-1033； 

Erlichman等，Cancer Res.61(2)：739-48(2001)；Smaill等，J.Med.Chem.43(7)：1380-97(2000))；ABX-EGF抗体(Abgenix，Inc.；Freemont，CA；Yang等，Cancer Res.59(6)：1236-43(1999)；Yang等，Crit Rev Oncol Hematol.38(1)：17-23(2001))；爱必妥(erbitux)(美国专利号6,217,866；IMC-C225、西妥昔单抗(cetuximab)；Imclone；New York，NY)；EKB-569(

Wissner等，J.Med.Chem.46(1)：49-63 (2003))；PKI-166( 

CGP-75166)；GW-572016；任何抗EGFR抗体和任何抗HER2抗体。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供：

(氯那法尼(lonafarnib)；Sarasar^TM；Schering-Plough；Kenilworth，NJ)。在另一个实施方案中，下列FPT抑制剂之一与本发明的抗体或其抗原结合片段一起联合提供：

可与本发明的抗体或其抗原结合片段联合提供的其它FPT抑制 剂包括BMS-214662( 

Hunt等，J.Med.Chem.43(20)：3587-95(2000)；Dancey等，Curr.Pharm.Des.8：2259-2267(2002)；(R)-7-氰基-2，3，4，5-四氢-1-(1H-咪唑-4-基甲基)-3-(苯基甲基)-4-(2-噻吩基磺酰基)-1H-1，4-苯并二氮杂 ))和R155777(替匹法尼(tipifarnib)，Garner等，Drug Metab.Dispos.30(7)：823-30(2002)；Dancey等，Curr.Pharm.Des.8：2259-2267(2002)；(B)-6-[氨基(4-氯苯基)(1-甲基-1H-咪唑-5-基)-甲基]-4-(3-氯苯基)-1-甲基-2(1H)-喹啉酮]；

以Zarnestra^TM销售；Johnson&Johnson；New Brunswick，NJ)。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下药物联合提供： 

(氨磷汀(Amifostine))； 

(NVP-LAQ824；Atadja等，Cancer Research 64：689-695(2004))； 

(N-辛二酰苯胺异羟肟酸(suberoyl analide hydroxamic acid))； 

(丙戊酸；Michaelis等，Mol.Pharmacol.65：520-527(2004))； 

(曲古抑菌素A(trichostatin A))； 

(FK-228；Furumai等，Cancer Research62：4916-4921(2002))； (SU11248；Mendel等，Clin.Cancer Res.9(1)：327-37(2003))； (BAY43-9006；索拉非尼)； (KRN951)； (氨鲁米特(Aminoglutethimide))； 

(安吖啶(Amsacrine))； 

(阿那格雷(Anagrelide))； 

(阿那曲唑；由AstraZeneca PharmaceuticalsLP；Wilmington，DE以Arimidex销售)；天冬酰胺酶；卡介苗(BacillusCalmette-Guerin，BCG)疫苗(Garrido等，Cytobios.90(360)：47-65(1997))； 

(博来霉素 (Bleomycin))； 

(布舍瑞林(Buserelin))； 

(白消安(Busulfan)；二甲磺酸1，4-丁二醇；由ESP Pharma，Inc.；Edison，New Jersey以 

销售)； 

(卡铂；由Bristol-Myers Squibb；Princeton，NJ以 

销售)； 

(卡莫司汀(Carmustine))； 

(苯丁酸氮芥(Chlorambucil))； 

(顺铂)； 

(克拉屈滨(Cladribine))； 

(氯膦酸盐(Clodronate))； 

(环磷酰胺)； 

(环丙孕酮(Cyproterone))； 

(阿糖胞苷(Cytarabine))； 

(达卡巴嗪(Dacarbazine))； 

(放线菌素D)； 

(柔红霉素(Daunorubicin))； 

(己烯雌酚)； 

(表柔比星(表柔比星))； 

(氟达拉滨(Fludarabine))； 

(氟氢可的松(Fludrocortisone))； 

(氟甲睾酮 (Fluoxymesterone))； 

(氟他胺)； 

(羟基脲(Hydroxyurea))； 

(伊达比星(Idarubicin))； 

(异环磷酰胺)； 

(伊马替尼(Imatinib)；由Novartis PharmaceuticalsCorporation；East Hanover，NJ以 

销售)； 

(亚叶酸)； 

(亮丙立德)； 

(左旋咪唑(Levamisole))； 

(洛莫司汀(Lomustine))； 

(氮芥(Mechlorethamine))； 

(美法仑(Melphalan)；由Celgene Corporation；Warren，NJ以 

销售)； 

(巯基嘌呤(Mercaptopurine))； 

(美司钠(Mesna))； 

(甲氨蝶呤)； 

(丝裂霉素(Mitomycin))； 

(米托坦(Mitotane))； 

(米托蒽醌(Mitoxantrone))； 

(尼鲁米特)；奥曲肽(octreotide)( 

Katz等，Clin Pharm.8(4)：255-73(1989)；Sandostatin 

长效制剂；Novartis Pharm.Corp；E.Hanover，NJ)；依度曲肽(edotreotide)(钇-90标记或未标记的)；奥沙利帕( 

Sanofi-Synthelabo Inc.；New York，NY以Eloxatin^TM由销售)； 

(帕米膦酸盐(Pamidronate)；由Novartis Pharmaceuticals Corporation；East Hanover， NJ以 

销售)； 

(喷司他丁(Pentostatin)；由Supergen；Dublin，CA以 

销售)； 

(普卡霉素(Plicamycin))； 

(卟吩姆(Porfimer)；由Axcan Scandipharm Inc.；Birmingham，AL以 

销售)； 

(丙卡巴肼(Procarbazine))； 

(雷替曲塞(Raltitrexed))；利妥昔单抗(Rituximab)(由Genentech，Inc.；South San Francisco，CA以 

销售)； 

(链佐星(Streptozocin))； 

(替尼泊苷)； 

(睾酮(Testosterone))； 

(沙利度胺(Thalidomide))； 

(硫鸟嘌呤(Thioguanine))； 

(塞替派(Thiotepa))； 

(维A酸(Tretinoin))； 

(长春地辛(Vindesine))或13-顺式维甲酸 

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下任一种或多种药物联合提供：苯丙氨酸氮芥(phenylalaninemustard)、乌拉莫司汀(uracil mustard)、雌莫司汀(estramustine)、六甲蜜胺(altretamine)、氟尿苷(floxuridine)、5-脱氧尿苷(5-deooxyuridine)、阿糖胞苷(cytosine arabinoside)、6-巯基嘌呤(6-mecaptopurine)、脱氧考福霉素(deoxycoformycin)、骨化三醇(calcitriol)、戊柔比星(valrubicin)、光神霉素(mithramycin)、长春碱(vinblastine)、长春瑞滨(vinorelbine)、托泊替康(topotecan)、razoxin、马立马司他(marimastat)、COL-3、新伐司他(neovastat)、BMS-275291、司夸胺(squalamine)、内皮生长抑素(endostatin)、SU5416、SU6668、EMD121974、白介素-12(interleukin-12)、IM862、血管生长抑素(angiostatin)、αVβ3人源化抗单抗(vitaxin)、屈洛昔芬(droloxifene)、吲哚西芬(idoxyfene)、螺内酯(spironolactone)、非那雄胺(finasteride)、西米替丁(cimitidine)、曲妥珠单抗(trastuzumab)、地尼白介素(denileukin)、白喉毒素跨膜片段(diftitox)、吉非替尼(gefitinib)、硼替佐米(bortezimib)、紫杉醇、多西他赛(docetaxel)、埃坡霉素B(epithilone B)、BMS-247550(参见例如Lee等，Clin.Cancer Res.7：1429-1437(2001))、BMS-310705、屈洛昔芬(3-羟基他莫昔芬(3-hydroxytamoxifen))、4-羟基他莫昔芬、哌喷昔芬 (pipendoxifene)、ERA-923、阿佐昔芬(arzoxifene)、氟维司群(fulvestrant)、阿考比芬(acolbifene)、拉索昔芬(lasofoxifene)(CP-336156)、艾多昔芬(idoxifene)、TSE-424、HMR-3339、ZK186619、托泊替康、PTK787/ZK 222584(Thomas等，Semin Oncol.30(第3期增刊6)：32-8(2003))、人源化抗VEGF抗体贝伐单抗、VX-745(Haddad，Curr Opin.Investig.Drugs 2(8)：1070-6(2001))、PD 184352(Sebolt-Leopold等，Nature Med.5：810-816(1999))、任何mTOR抑制剂、雷帕霉素(rapamycin)( 

西罗莫司(sirolimus))、40-O-(2-羟乙基)-雷帕霉素、CCI-779(

坦罗莫司(temsirolimus)；Sehgal等，Med.Res.Rev.，14：1-22(1994)；Elit，Curr.Opin.Investig.Drugs 3(8)：1249-53 (2002))、AP-23573 

RAD001 

ABT-578 BC-210 

LY294002、LY292223、LY292696、LY293684、LY293646(Vlahos等，J.Biol.Chem.269(7)：5241-5248(1994))、渥曼青霉素(wortmannin)、BAY-43-9006(Wilhelm等，Curr.Pharm.Des.8：2255-2257(2002))、ZM336372、L-779,450、Lowinger等人公开的任何Raf抑制剂(Curr.Pharm Des.8：2269-2278(2002))、黄酮吡多(flavopiridol)(L86-8275/HMR1275；Senderowicz，Oncogene 19(56)：6600-6606(2000)) 或UCN-01(7-羟基星形孢菌素(7-hydroxy staurosporine)；Senderowicz，Oncogene 19(56)：6600-6606(2000))。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下专利中所述的任一种或多种化合物联合提供：美国专利5,656,655，它公开了苯乙烯基取代的杂芳基EGFR抑制剂；美国专利5,646,153，它公开了双单环和/或二环芳基杂芳基碳环和杂碳环EGFR抑制剂和PDGFR抑制剂；美国专利5,679,683，它公开了抑制EGFR的三环嘧啶化合物；美国专利5,616,582，它公开了具有受体酪氨酸激酶抑制活性的喹唑啉衍生物；Fry等，Science 2651093-1095(1994)，它公开了具有抑制EGFR的结构的化合物(参见Fry等人的图1)；美国专利5,196,446，它公开了抑制EGFR的杂芳基乙烯二基或杂芳基乙烯二基芳基化合物；Panek等，Journal of Pharmacology and ExperimentalTherapeutics 283：1433-1444(1997)，它公开了化合物被鉴定为抑制受体EGFR、PDGFR和FGFR家族的PD166285——PD166285被鉴定为6-(2，6-二氯苯基)-2-(4-(2-二乙氨基乙氧基)苯基氨基)-8-甲基-8H-吡啶并(2，3-d)嘧啶-7-酮。

在本发明的一个实施方案中，本发明的抗体或其抗原结合片段与以下任一种或多种药物联合提供：聚乙二醇化或未聚乙二醇化干扰素α-2a、聚乙二醇化或未聚乙二醇化干扰素α-2b、聚乙二醇化或未聚乙二醇化干扰素α-2c、聚乙二醇化或未聚乙二醇化干扰素αn-1、聚乙二醇化或未聚乙二醇化干扰素αn-3和聚乙二醇化、未聚乙二醇化复合α干扰素或白蛋白干扰素-α。

本文所用术语“干扰素α”是指抑制细胞增殖和调节免疫应答的高度同源的种特异性蛋白家族。合适的干扰素-α通常包括但不限于重组干扰素α-2b、重组干扰素α-2a、重组干扰素α-2c、α2干扰素、干扰素α-n1(INS)、纯的天然α干扰素混合物、复合α干扰素(参见例如美国专利号4,897,471和4,695,623(尤其是其中的实施例7、8或9))、干扰素α-n3或天然α干扰素的混合物。

干扰素α-2a  由Hoffmann-La Roche(Nutley，N.J.)以 销售。

干扰素α-2b由Schering Corporation(Kenilworth，NJ)以 

销售。干扰素α2b的制备参见例如美国专利号4,530,901。

干扰素α-n3是天然干扰素的混合物，由Hemispherx Biopharma，Inc.(Philadelphia，PA)以 

销售。

干扰素α-n1(INS)是天然干扰素的混合物，由Glaxo-Smith-Kline(Research Triangle Park，NC)以 

销售。

复合α干扰素由Intermune，Inc.(Brisbane，CA)以 

销售。

干扰素α-2c由Boehringer Ingelheim Pharmaceutical，Inc.(Ridgefield，CT)以 

销售。

纯的天然干扰素的混合物由Sumitomo；Tokyo，Japan以 

销售。

本文所用术语“聚乙二醇化干扰素α”是指聚乙二醇修饰的干扰素α缀合物，优选干扰素α-2a和干扰素α-2b。优选的聚乙二醇干扰素α-2b缀合物为PEG 12000-干扰素α-2b。本文所用术语“12,000分子量聚乙二醇缀合干扰素α”和“PEG 12000-IFNα”包括例如按照国际申请号WO95/13090和EP1039922的方法制备并且干扰素α-2a或干扰素α-2b氨基之间含有氨基甲酸乙酯键以及聚乙二醇平均分子量为12000的缀合物。聚乙二醇化干扰素α、PEG 12000-IFN-α-2b可获自Schering-Plough Research Institute，Kenilworth，N.J.。

优选的PEG 12000-干扰素α-2b可通过将PEG聚合物与干扰素α-2b分子上的组氨酸残基连接来制备。单个PEG 12000分子可通过氨基甲酸乙酯键与IFNα-2b分子上的游离氨基缀合。该缀合物的特征是连接有分子量为12000的PEG。可将PEG 12000-IFNα-2b缀合物制成用于注射的冻干粉针剂。

聚乙二醇化干扰素α-2b由Schering Corporation(Kenilworth，NJ) 以 

销售。

聚乙二醇化干扰素-α-2a由Hoffmann-La Roche(Nutley，N.J.)以 

销售。

其它干扰素α缀合物可通过使干扰素α与水溶性聚合物偶联来制备。这类聚合物的非限制性例子包括其它聚环氧烷均聚物，例如聚丙二醇、聚氧乙烯化多元醇、其共聚物和其嵌段共聚物。作为基于聚环氧烷的聚合物的替代化合物，可以使用有效的非抗原性材料，例如葡聚糖、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酰胺、聚乙烯醇、基于糖的聚合物等。这类干扰素α-聚合物缀合物可参见例如美国专利号4,766,106、美国专利号4,917,888、欧洲专利申请号0 236 987或0 593 868或国际公布号WO 95/13090。优选的PEG12000-IFNα2b可通过将PEG聚合物与干扰素α-2b分子上的组氨酸残基连接来制备。

适于胃肠外给药的聚乙二醇化干扰素α的药物组合物可与合适的缓冲液(例如Tris-HCl、乙酸盐或磷酸盐，例如磷酸氢钠/磷酸二氢钠缓冲液)、药学上可接受的赋形剂(例如蔗糖)、载体(例如人血浆白蛋白)、毒性剂(例如NaCl)、防腐剂(例如硫柳汞(thimerosol)、甲酚或苯甲醇)和溶于注射用无菌水的表面活性剂(例如吐温(tween)或聚山梨酯)一起配制。聚乙二醇化干扰素α可以冻干粉针剂冷藏保存在2℃-8℃下。重配水溶液当保存在2℃和8℃之间时并在重配的24小时内使用是稳定的。参见例如美国专利号4,492,537、5,762,923和5,766,582。重配水溶液还可以在预灌装多剂量的注射器，例如用于递送胰岛素等药物的注射器中保存。合适的注射器通常包括这样的系统，该系统包括与笔型注射器连接的预灌装小瓶，例如可获自Novo Nordisk的 

Novo Pen或可获自Schering Corporation，Kenilworth，NJ的 其它注射器系统包括装有玻璃针筒的笔型注射器，在针筒独立的隔室中装有稀释剂和冻干聚乙二醇化干扰素α粉末。

本发明的范围还包括治疗或预防本文所述医学病症或疾病的方法，该方法通过给予包含本发明的抗IGF1R抗体或其抗原结合片段以 及一种或多种另外的抗癌化疗药物(例如本文所述抗癌化疗药物)和/或一种或多种止吐药的组合物，止吐药包括但不限于卡索匹坦(casopitant)(GlaxoSmithKline)、奈妥匹坦(Netupitant)(MGI-Helsinn)和其它NK-1受体拮抗剂、帕洛诺司琼(palonosetron)(由MGI Pharma以Aloxi销售)、阿瑞吡坦(aprepitant)(由Merck and Co.；Rahway，NJ以Emend销售)、苯海拉明(diphenhydramine)(由Pfizer；New York，NY以 

销售)、羟嗪(hydroxyzine)(由Pfizer；New York，NY以 

销售)、甲氧氯普胺(metoclopramide)(由AH Robins Co，；Richmond，VA以 

销售)、劳拉西泮(lorazepam)(由Wyeth；Madison，NJ以 

出售)、阿普唑仑(alprazolam)(由Pfizer；New York，NY以 

销售)、氟哌啶醇(haloperidol)(由Ortho-McNeil；Raritan，NJ以 

销售)、氟哌利多(droperidol) 

屈大麻酚(dronabinol)(由Solvay Pharmaceuticals，Inc.；Marietta，GA以 

销售)、地塞米松(dexamethasone)(由Merck and Co.；Rahway，NJ以 

销售)、甲泼尼龙(methylprednisolone)(由Pfizer；New York，NY以 

销售)、普鲁氯嗪(prochlorperazine)(由Glaxosmithkline；Research Triangle Park，NC以 销售)、格拉司琼(granisetron)(由Hoffmann-La Roche Inc.；Nutley，NJ以 

销售)、昂丹司琼(ondansetron)(由Glaxosmithkline；Research Triangle Park，NC以 

销售)、多拉司琼(dolasetron)(由Sanofi-Aventis；New York，NY以 

销售)、托烷司琼(tropisetron)(由Novartis；EastHanover，NJ以 

销售)。

包含止吐药的组合物可用于预防或治疗恶心；这是抗癌化学疗法常见的副作用。因此，本发明包括用于治疗或预防受治疗者的癌症的方法，该方法通过给予任选与一种或多种另外的化疗药物(例如本文所述的)联用和/或任选与一种或多种止吐药联用的本发明的抗体或其抗原结合片段。

癌症治疗的其它副作用包括红细胞和白细胞缺乏症。因此，本发 明包括包含抗IGF1R抗体或其抗原结合片段任选与治疗或预防这类缺乏症的药物联用的组合物，例如诸如非格司亭(pegfilgrastim)、红细胞生成素(erythropoietin)、阿法依泊汀(epoetin alfa)或达贝泊汀α(darbepoetin alfa)。

抗癌疗法的另一个副作用是粘膜炎。因此，本发明提供用于治疗或预防本文所述医学病症或疾病的方法和组合物，该方法通过联合给予抗IGF1R抗体或其抗原结合片段与抗粘膜炎治疗。例如，粘膜炎的治疗包括含漱麻醉用黏性凝胶(anesthetic gel viscous) 

(利多卡因(lidocaine))2％或漱口剂，漱口剂包括别嘌醇(allopurinol)、盐酸苄达明(benzydamine hydrochloride)、皮质类固醇类(corticosteroids)和/或春黄菊(chamomile)。

本发明还包括用于治疗或预防本文所述任何医学病症的任何病期或类型的方法，该方法通过给予本发明的抗体或其抗原结合片段与治疗手术例如外科肿瘤切除术或抗癌放射治疗联用；任选与如上所述的另外的化疗药物和/或止吐药联用。

术语“与......联用或与......联合”是指可将本发明组合物的各组分(例如抗IGF1R抗体或其抗原结合片段连同多西他赛一起)配制成单一组合物用于同时递药，或者分别配制成两种或更多种组合物(例如药盒)。此外，可以在与给予其它组分不同的时间内给予受治疗者各组分；例如，每次给药可以在给定时间内按若干间隔非同时(例如分开或序贯)给予。而且，单独的组分可通过相同或不同的途径给予受治疗者(例如其中抗IGF1R抗体经胃肠外给予，吉非替尼经口服给予)。

治疗方法和给药

本发明包括使用IGF1R抑制剂任选与另外的化疗药物或其药物剂型联用的用于治疗或预防以下任何疾病的方法：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤 因肉瘤、软骨肉瘤、任何血液恶性肿瘤(例如慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病(例如T细胞谱系、B细胞前体谱系)、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病)和中枢神经系统肿瘤(例如脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤)、骨髓增殖性疾病(例如真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性)、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤、肝癌、胃癌、巨人症、垂体腺瘤、银屑病和肾横纹肌样瘤。

包含IGF1R抑制剂与另外的化疗药物(例如如上所述)联用以及药学上可接受的载体的药物组合物均落入本发明的范围内(例如单一组合物或分别装在药盒中)。药物组合物可以通过制药领域众所周知的任何方法制备；参见例如Gilman等(主编)(1990)，The PharmacologicalBases of Therapeutics，第8版，Pergamon Press；A.Gennaro(主编)， Remington’s Pharmaceutical Sciences，第18版，(1990)，Mack PublishingCo.，Easton，Pennsylvania.；Avis等(主编)(1993)Pharmaceutical DosageForms：Parenteral MedicationsDekker，New York；Lieberman等(主编)(1990)Pharmaceutical Dosage Forms：TabletsDekker，New York；和Lieberman等(主编)(1990)，Pharmaceutical Dosage Forms：DisperseSystems Dekker，New York。在本发明的一个实施方案中，抗体作为药物组合物的组成部分给予受治疗者，该药物组合物包含抗体，例如LCF/HCA(例如1mg/ml、5mg/ml、10mg/ml、15mg/ml、20mg/ml或25mg/ml)；三水乙酸钠(例如1.8mg/ml、2.3mg/ml或3.1mg/ml)； 冰醋酸(例如0.5mg/ml、0.18mg/ml或2.2mg/ml)；蔗糖(例如50mg/ml或70mg/ml)和水(pH约5.5)。

术语“头颈部癌”等包括发生在身体头颈部位的任何癌症，包括口腔、咽、鼻窦、鼻腔、喉和涎腺(例如腮腺、下额下腺、舌下腺)的癌症。头颈部癌的一个普通类型为发生在头颈部位的鳞状细胞癌。头颈部癌的其它类型包括涎腺肿瘤、黑素瘤、淋巴瘤和肉瘤。

术语“鳞状细胞癌”(SCC)等包括累及皮肤鳞状细胞的任何癌症。该术语包括鳞状细胞癌的任何亚型，包括例如角化棘皮瘤、穿掘性癌(carcinoma cuniculatum)、侵袭性SCC、原位SCC或转移性SCC。

术语“多发性骨髓瘤”和“孤立性浆细胞瘤”等包括血浆细胞癌。孤立性浆细胞瘤是体内单一部位的骨髓瘤。术语“多发性骨髓瘤”包括例如其中发生在体内多个部位(例如骨髓部位)的骨髓瘤细胞的实施方案。该术语包括多发性骨髓瘤的任何亚型，包括例如轻链型骨髓瘤、非分泌型骨髓瘤。

术语“肾细胞癌”等亦称为肾部癌症或肾腺癌，包括其中存在于肾的任何组织中的癌细胞的实施方案。该术语包括例如肾细胞癌的任何亚型，包括例如透明细胞癌(不论是否与粒细胞混合)、嗜染细胞癌(chromophobic cancer)、肾横纹肌样肿瘤、嫌色细胞癌、嗜酸细胞癌、集合管癌、移行细胞癌和肉瘤样肿瘤。

术语“受治疗者”或“患者”包括任何生物，优选哺乳动物(例如灵长类、狗、马、大鼠、小鼠、猫、兔)，最优选为人。在本发明的一个实施方案中，“受治疗者”或“患者”为成人(例如18岁或以上)或儿童(例如18岁以下，例如1岁以下、1岁、2岁、3岁、4岁、5岁、6岁、7岁、8岁、9岁或10岁)。

可以使用常规的药学上可接受的赋形剂和添加剂及常规技术制备含有IGF1R抑制剂任选与另外的化疗药物联用的药物组合物。这类药学上可接受的赋形剂和添加剂包括无毒可相容的填充剂、粘合剂、崩解剂、缓冲剂、防腐剂、抗氧化剂、润滑剂、矫味剂、增稠剂、着 色剂、乳化剂等。本发明包括所有的给药途径，包括但不限于胃肠外(例如皮下、静脉内、腹膜内、肌内、局部、腹膜内、吸入、颅内)和非胃肠外(例如口服、经皮、鼻内、眼内、舌下、直肠和局部)。

注射剂可以常规形式制备，如液体溶液剂或混悬剂、适于注射前溶于液体的溶液剂或混悬剂的固体形式或如乳剂。注射剂、溶液剂和乳剂还可含有一种或多种赋形剂。赋形剂包括例如水、盐水、葡萄糖、甘油或乙醇。另外，如有需要，则待给予的药物组合物还可含有少量的无毒辅助物质，例如润湿剂或乳化剂、pH缓冲剂、稳定剂、增溶剂和其它成分，例如乙酸钠、月桂山梨坦、油酸三乙醇胺和环糊精。

在本发明的一个实施方案中，用于胃肠外制剂的药学上可接受的载体包括含水溶媒、非水溶媒、抗微生物剂、等渗剂、缓冲剂、抗氧化剂、局部麻醉剂、悬浮分散剂、乳化剂、多价螯合剂或螯合剂以及其它药学上可接受的物质。

含水溶媒的实例包括氯化钠注射液、林格氏注射液、等渗葡萄糖注射液、无菌水注射液、葡萄糖和乳酸盐林格氏注射液。非水胃肠外溶媒包括植物源的固定油、棉籽油、玉米油、芝麻油和花生油。必须向包装在多剂量容器中的胃肠外制剂中加入抑制细菌浓度或抑制真菌浓度的抗微生物剂，包括苯酚或甲酚、汞制剂、苯甲醇、三氯叔丁醇、对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸丙酯、硫柳汞、苯扎氯铵和苄索氯铵。等渗剂包括氯化钠和葡萄糖。缓冲剂包括磷酸盐和柠檬酸盐。抗氧化剂包括硫酸氢钠。局部麻醉剂包括盐酸普鲁卡因。悬浮分散剂包括羧甲基纤维素钠、羟丙基甲基纤维素和聚乙烯吡咯烷酮。乳化剂包括聚山梨酯80(TWEEN-80)。金属离子的多价螯合剂或螯合剂包括EDTA。药物载体还包括用于水混溶性溶媒的乙醇、聚乙二醇和丙二醇；以及用于pH调节的氢氧化钠、盐酸、柠檬酸或乳酸。

在本发明的一个实施方案中，用于胃肠外给药的制剂可以包括现成用于注射的无菌溶液剂、临用前易与溶剂混合的无菌无水可溶性产品(例如冻干粉针剂)，包括皮下注射片、现成用于注射的无菌混悬剂、 临用前易与溶媒混合的无菌无水不溶性产品和无菌乳剂。溶液剂可为水溶液剂或非水溶液剂。

本文还包括植入缓释(slow-release/sustained-release)系统以使剂量水平保持恒定。简单地讲，使活性剂(例如IGF1R抑制剂，任选与另外的化疗药物联用)分散于固体内部基质中，内部基质被不溶于体液的外部聚合膜内包围，固体内部基质例如聚甲基丙烯酸甲酯、聚甲基丙烯酸丁酯、塑化或未塑化聚氯乙烯、塑化尼龙、塑化聚对苯二甲酸乙二酯、天然橡胶、聚异戊二烯、聚异丁烯、聚丁二烯、聚乙烯、乙烯-乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、硅氧烷碳酸酯共聚物、亲水聚合物(例如丙烯酸酯和甲基丙烯酸酯的水凝胶)、胶原、交联聚乙烯醇和交联部分水解聚乙酸乙烯酯，外部聚合膜例如聚乙烯、聚丙烯、乙烯/丙烯共聚物、乙烯/丙烯酸乙酯共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯共聚物、硅橡胶、聚二甲基硅氧烷、氯丁橡胶、氯化聚乙烯、聚氯乙烯、氯乙烯与乙酸乙烯酯/1，1-二氯乙烯/乙烯和丙烯的共聚物、离聚物聚对苯二甲酸乙二酯、丁基橡胶表氯醇橡胶、乙烯/乙烯醇共聚物、乙烯/乙酸乙烯酯/乙烯醇三元共聚物和乙烯/乙烯氧基乙醇共聚物。在释放速率控制步骤中，化合物通过外层聚合膜扩散开。该胃肠外组合物中所包含的活性化合物的百分比在很大程度上取决于其特定性质，以及任选与另外的化疗药物联用的IGF1R抑制剂的活性和受治疗者的需要。

可以调节任选与另外的化疗药物联用的IGF1R抑制剂的浓度，使得一次注射能提供产生所需药理作用的有效量。正如下面的论述，确切的剂量取决于患者或动物的年龄、体重和一般状况，正如本领域所知的一样。

在本发明的一个实施方案中，单位剂量胃肠外制剂装在安瓿、小瓶或带针注射器中。用于胃肠外给药的所有制剂必须是无菌的，正如本领域所知并实施的一样。

在本发明的一个实施方案中，将IGF1R抑制剂任选与另外的化疗 药物联用并配制成冻干粉针剂，该冻干粉针剂可以重配以作为溶液剂、乳剂和其它合剂给药。粉针剂还可重配制成固体或凝胶。

在本发明的一个实施方案中，通过将任选与另外的化疗药物联用的IGF1R抑制剂(例如抗IGF1R抗体)或其药学上可接受的衍生物溶于合适的溶剂中来制备无菌冻干粉针剂。该溶剂可含有改善稳定性的赋形剂或粉针剂的其它药物组分或由粉针剂制备的重配溶液。可以使用的赋形剂包括但不限于葡萄糖、山梨醇、果糖、玉米糖浆、木糖醇、甘油、葡萄糖、蔗糖或其它合适的成分。该溶剂还可含有缓冲剂，例如柠檬酸盐、磷酸钠或磷酸钾或本领域已知的其它这类缓冲剂，在一个实施方案中，约为中性pH。随后在本领域技术人员已知标准条件下，使该溶液剂过滤除菌后冻干，得到所需制剂。在一个实施方案中，将所得溶液剂分装到小瓶中以冻干。各小瓶可装有单剂量或多剂量的任选与另外的化疗药物联用的IGF1R抑制剂。小瓶过量灌装少量超过所需的剂量或剂量组(例如约10％)是可接受的，使得有利于精确抽取样品和精确给药。可在合适的条件(例如约4℃至室温)下保存冻干粉针剂。

冻干粉针剂与注射用水重配得到用于胃肠外给药的剂型。在本发明的一个实施方案中，重配时，将冻干粉针剂加到无菌水或其它合适的载体中。精确用量取决于所选定有待提供的疗法。该用量可凭经验确定。

可以使用例如含有三油酸山梨坦或油酸的气雾剂与例如三氯氟甲烷、二氯氟甲烷、二氯四氟乙烷或任何其它生物相容性抛射气体一起提供通过吸入的给药法；还有可能利用粉针剂形式的系统，该系统含有IGF1R抑制剂本身任选与另外的化疗药物联用或与赋形剂联用。

在本发明的一个实施方案中，IGF1R抑制剂任选与另外的化疗药物联用，被制成用于口服给药的固体剂型，在一个实施方案中，制成胶囊剂或片剂。片剂、丸剂、胶囊剂、含片(troch)等可含有一种或多种下列成分或有类似性质的化合物：粘合剂、润滑剂、稀释剂、助流 剂、崩解剂、着色剂、甜味剂、矫味剂、润湿剂、肠溶包衣(emetic coating)和薄膜包衣。粘合剂的实例包括微晶纤维素、西黄蓍胶、葡萄糖溶液、阿拉伯胶浆剂、明胶溶液、糖蜜、聚乙烯吡咯烷、聚维酮、交联聚维酮、蔗糖和淀粉浆。润滑剂包括滑石粉、淀粉、硬脂酸镁、硬脂酸钙、lycopodium和硬脂酸。稀释剂包括例如乳糖、蔗糖、淀粉、高岭土、盐、甘露醇和磷酸二钙。助流剂包括但不限于胶态二氧化硅。崩解剂包括交联羧甲基纤维素纳、羟基乙酸淀粉钠、海藻酸、玉米淀粉、马铃薯淀粉、皂土、甲基纤维素、琼脂和羧甲基纤维素。着色剂包括例如任何经验证获准的水溶性FD和C染料、其混合物以及悬浮于水化氧化铝中的水不溶性FD和C染料。甜味剂包括蔗糖、乳糖、甘露醇和人工甜味剂(例如糖精和多种喷雾干燥香料)。矫味剂包括从植物(例如水果)中提取的天然香料和产生舒适感的合成化合物的混合物，例如但不限于薄荷油和水杨酸甲酯。润湿剂包括丙二醇单硬脂酸酯、失水山梨醇单油酸酯、月桂酸二甘醇酯和聚氧乙烯十二烷酸醚。肠溶包衣包括脂肪酸、脂肪、蜡、虫胶、氨化虫胶和醋酸纤维素邻苯二甲酸酯。薄膜包衣包括羟乙基纤维素、羧甲基纤维素钠、聚乙二醇4000和醋酸纤维素邻苯二甲酸酯。

本文所述的任何成分可配制成缓释剂型包括脂质体剂型，例如单层脂质体(ULV)、多层脂质体(MLV)和DepoFoam^TM颗粒(Kim等，Biochim.Biophys.Acta(1983)728(3)：339-348；Kim，Methods Neurosci.(1994)21：118-131；Kim等，Anesthesiology(1996)85(2)：31-338；Katre等，J.Pharm.Sci.(1998)87(11)：1341-1346)。DepoFoam系统的特征是，在每个DepoFoam颗粒内有被非同心连续网的脂质体膜分隔的不连续的内部含水室，提供较高的含水体积/脂质比以及与MLV相比大得多的颗粒直径。

剂量和给药

本发明的方法包括给予任选与另外的化疗药物联用的IGF1R抑 制剂或其药物组合物。如有可能，通常便按照Physicians′DeskReference 2003(Physicians′Desk Reference，第57版)；MedicalEconomics Company；ISBN：1563634457；第57版(2002年11月)中核准药物的产品说明书中所列出的方案以及本领域众所周知的治疗方案，实施这类药物的给药和剂量。

术语“治疗有效量”或“治疗有效剂量”是指由实施者(例如研究人员、医生或兽医)确定的可以诱导组织、系统、受治疗者或宿主的生物反应或医学反应的本发明组合物(例如IGF1R抑制剂，例如抗IGF1R抗体)的量或剂量，所述反应包括任何可测量的在任何程度上减轻例如以下癌症的体征、症状和/或临床标志(包括例如抑制任何IGF 1R活性，例如IGF-I或IGF-II结合活性或激酶活性)和/或预防、减缓或停止所述癌症的进程或转移：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、任何血液恶性肿瘤(例如慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病(例如T细胞谱系、B细胞前体谱系)、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病)和中枢神经系统肿瘤(例如脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤和脉络丛乳头状瘤)、骨髓增殖性疾病(例如真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性)、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤和肝癌(例如肿瘤生长或癌细胞增殖)。例如，在一个实施方案中，任何 抗IGF1R抗体的“治疗有效剂量”，例如包含以下可变区的抗体或其抗原结合片段或者本文所述的任何其它抗IGF1R抗体的“治疗有效剂量”为每周两次、每周一次、每两周一次、每三周一次或一月一次，每次用量介于约0.3mg/kg体重和约20mg/kg体重之间(例如约0.5mg/kg体重、约1mg/kg体重、约2mg/kg体重、约3mg/kg体重、约4mg/kg体重、约5mg/kg体重、约6mg/kg体重、约7mg/kg体重、约8mg/kg体重、约9mg/kg体重、约10mg/kg体重、约11mg/kg体重、约12mg/kg体重、约13mg/kg体重、约14mg/kg体重、约15mg/kg体重、约16mg/kg体重、约17mg/kg体重、约18mg/kg体重、约19mg/kg体重、约20mg/kg体重)：(a)包含SEQ ID NO：2的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；(b)包含SEQ ID NO：4的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；(c)包含SEQ ID NO：6的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；或者(d)包含SEQ ID NO：8的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区。

可以调整剂量方案以提供最理想的反应(例如治疗反应)。例如，可以给予单剂量，或者可以在一段时间内给予若干分剂量，或者可以根据紧急治疗状况按规定适当地减少或增加剂量。例如，本领域普通技术从业人员(例如医师或兽医)可以根据患者年龄、体重、身高、过往病史、现用药物和潜在的交叉反应、变态反应、敏感性和毒副作用来确定或调整剂量。尤其有利的是配制成胃肠外组合物的单位剂型，以易于给药和剂量均一性。

具有本领域普通技术的从业人员(例如医师或兽医)可容易地确定有效量的所需药物组合物并开出处方。例如，医师或兽医可以按低于达到理想治疗效果所需要的水平开始给予用于药物组合物的本发明抗体或抗原结合片段的剂量，逐渐增加剂量直到达到所需效果。可以 通过例如测定受治疗者体内待治疗的肿瘤是否缩小或停止生长，来确定本发明抗体或组合的给定剂量或治疗方案的疗效。可容易地测定肿瘤的大小，例如通过X射线、磁共振成像(MRI)、手术过程中目测或用手触诊。肿瘤大小和增殖还可应用胸苷PET扫描(thymidine PETscan)测量(参见例如Wells等，Clin.Oncol.8：7-14(1996))。胸苷PET扫描一般包括注射放射性示踪物(例如[2-¹¹C]-胸苷)，然后对患者身体进行PET扫描(Vander Borght等，Gastroenterology 101：794-799，1991；Vander Borght等，J.Radiat.Appl.Instrum.第A部分，42：103-104(1991))。可以使用的其它示踪物包括[¹⁸F]-FDG(18-氟脱氧葡萄糖)、[¹²⁴I]IUdR(5-[124I]碘-2′-脱氧尿苷)、[⁷⁶Br]BrdUrd(溴脱氧尿苷)、[¹⁸F]FLT(3′-脱氧-3′氟胸苷)或[¹¹C]FMAU(2′-氟-5-甲基-1-β-D-呋喃阿糖尿嘧啶)。

例如，可以由医师或兽医通过各种方法监测头颈部癌的进程，并可由此改变剂量方案。监测头颈部癌的方法包括例如身体检查(例如目测检查或触摸检查)、难以观察部位的内镜检查(例如电鼻咽镜检查、咽镜检查或喉镜检查)、计算机化X光断层扫描(CT)、核磁共振成像扫描(MRI)、超声检查、正电子发射断层成像(PET)扫描、panorex(颌X射线)、吞钡检查、牙齿X射线、胸部X射线和放射性核素骨扫描。

例如，可以由医师或兽医通过各种方法监测鳞状细胞癌的进程，并可由此改变剂量方案。监测鳞状细胞癌的方法包括例如通过患者问诊或身体检查(例如目测检查和任何病变大小、形状或其它外观质量的资料记录)。

例如，可由医师或兽医通过各种方法监测多发性骨髓瘤的进程，并可由此改变剂量方案。监测多发性骨髓瘤的方法包括例如用全血计数(CBC)检测例如低血细胞比容(贫血症)、低红细胞计数、低血小板和/或低白细胞计数、骨髓活检、血清蛋白电泳、鉴定骨折的骨X射线和钻出骨病变物或检测血清钙、总蛋白质增加的化学谱或肾功能异 常。

例如，可由医师或兽医通过各种方法监测肾细胞癌的进程，并可由此改变剂量方案。监测肾细胞癌的方法包括例如检测疱块的腹部触诊、全血计数(CBC)、检测红细胞的尿检、检测血清钙水平升高的实验、检测血清谷丙转氨酶(SGPT)和碱性磷酸酶升高的实验、尿液细胞学实验、肝功能试验、腹和肾超声检查、肾X射线、静脉肾盂X线片(IVP)或肾动脉造影片。

本发明的组合物和方法包括IGF1R抑制剂任选与一种或多种化疗药物“联用或联合”。术语“联用或联合”是指本发明组合产品的组分可以配制成用于同时递送的单一组合物，或者分别配制成两种或更多种组合物(例如药盒)。此外，给予受治疗者本发明组合产品的各个组分的时间可不同于给予其它组分的时间；例如，每次给药可以在给定时间内按若干间隔非同时进行(例如分开或序贯)。而且，可以通过相同或不同的途径(例如口服、静脉内、皮下)给予受治疗者单独的组分。

实施例

本发明用下述实施例举例说明本发明，而不是限制本发明。下面所公开的任何方法或组合物均落入本发明的范围内。

实施例1：头颈部癌细胞中表达IGF1R和IGF-II。

在本实施例中，对头颈部癌细胞进行了分析以测定IGF1R或IGF-2的表达水平。分析了原发性肿瘤组织样品(得自2期、3期或4期癌症)、正常附近组织样品和正常组织样品的IGF1RRNA表达水平。此外，还分析了各种细胞系中IGF1R、IGF-1和IGF-2的水平。

由肿瘤样品制备RNA，并由其合成了cDNA。采用ABI Prism 7700序列检测系统9(Applied Biosystems；Foster City，CA)，在荧光团5’-核酸酶PCR实验中使用特异性探针和引物，用20ng cDNA样品对 IGF1R表达进行了分析。将所有样品的CT数针对泛蛋白或肌动蛋白mRNA表达归一化。

所用引物和探针如下：

IGF1R/正向引物：GAAAGTGACGTCCTGCATTTCA(SEQ ID NO：106)

IGF1R/反向引物：CCGGTGCCAGGTTATGATG(SEQ ID NO：107)

探针序列：CACCACCACGTCGAAGAATCGCA(SEQ ID NO：108)

H322是非小细胞肺癌细胞系；CAL27、SCC25、SCC15、SCC9和HS802是鳞状细胞癌细胞系。

在这些方法中所获得的数据见图1和图2。图1证实在原发性头颈部肿瘤样品中以高于正常组织的水平表达IGF1R。而且，正常附近组织(NAT)的IGF1R表达水平大于正常组织的水平。头颈部肿瘤病期升级时(由I至IV)，IGF1R水平的表达略有提高。每个点代表了单个组织样品中IGF1R的归一化水平。

图2同样证实了IGF1R、IGF-I和IGF-II在各种肺和鳞状细胞癌细胞系中进行表达。上图为数个细胞系的蛋白质印迹分析，表明细胞中总IGF1R(tIGF-1R)的表达水平。肌动蛋白表达还可作为内部对照。下图表示自受测细胞分泌的IGF1和IGF2水平(ng分泌的蛋白质/106个细胞)。

实施例2：抗IGF1R(LCF(κ)/HCA(γ1))体外抑制鳞状细胞癌细胞系的增殖

本实施例证实了抗IGF1R抗体LCF/HCA抑制不同鳞状细胞癌(SCC)细胞系的增殖。

应用Cell-Titer Glo实验(Promega Corp.；Madison，WI)测定了细胞增殖。在来自活细胞的ATP存在下，Cell-titer glo实验产生“辉光”发荧光信号，这可以使用读板仪发光计(plate reader luminometer)或CCD成像装置检测。

在本项实验中，对鳞状细胞癌细胞SCC9、SCC25和SCC15进行 了胰蛋白酶消化、计数，并以25,000个细胞/ml重新悬浮于含有NEAA、L-Glu、MEM维生素和PS的10％HI-FBS RPMI中。将100ml细胞悬液(2500个细胞)加到BD Falcon经TC处理的透明底黑色96孔板的各孔中。使细胞贴壁，并在37℃下增殖过夜。次日，10％RPMI培养基用含有合适浓度的LCF/HCA抗体的100ml 2％RPMI替换。各项实验中所用的抗IGF1R抗体浓度为100nM、20nM、5nM、0.8nM、0.16nM、0.032nM、0.0064nM、0.00128nM和0.000256nM。在2％RPMI中以20倍浓度制备所有治疗样品，并进行连续稀释。每个试验点按一式三份在单独的测定板中制备。如上所述，在治疗后96小时，应用CellTiter-Glo发光细胞活力测定法(CellTiter-Glo Luminescent CellViability Assay)(Promega)对细胞增殖进行了测定。用配有受板盒(stacker)的Wallac 420读板仪检测发光。

本项研究的结果见图3a-3c，图中表明通过暴露于不同浓度的LCF/HCA，鳞状细胞癌细胞系的增殖受到抑制(图中以19D12表示)。图(a)、图(b)和图(c)的数据对应的上述细胞系如下：(a)：细胞系SCC 15；(b)：细胞系SCC 25；(c)：细胞系SCC 9。

实施例3：IGF2和IGF1R在胃癌和卵巢癌细胞系中高表达。

在本实施例中，证实了与正常样品和正常细胞系相比，IGF2mRNA在原发性胃肿瘤样品和胃腺癌细胞系中以较高水平表达。肿瘤样品中IGF2的高表达是通过IGF1R生长途径的自分泌刺激的标记，表示通过抗IGF1R(LCF(κ)/HCA(γ1))抗体治疗可抑制肿瘤生长。

基本上按如上所述方法进行了待测定表达水平的细胞系的生长、制备和测定。通过蛋白质印迹对蛋白质水平进行了分析，通过Taqman分析法对mRNA水平进行了分析。应用Bangs Laboratories，Inc.的定量简单细胞系统(Quantitative Simply Cellular system)，使用用抗IGF1R抗体、抗IR(胰岛素受体)抗体、抗EGFR(表皮生长因子受体)抗体或抗HER2抗体标记的细胞，进行了定量流式细胞术(Fishers，IN)。

A2780是人卵巢癌细胞系，NCI-N87、SNU-16、SNU-1和Hs746T是人胃癌细胞系。

本项研究的结果见图4和图5。图4证实了与正常细胞和正常附近细胞相比，IGF2在原发性胃肿瘤细胞中以较高水平表达。每个点是在单个肿瘤组织样品表达的IGF2mRNA的归一化水平(针对泛蛋白的表达水平归一化)。

图5中的上图是有关几个细胞系的定量流式细胞术数据，表示对于IGF1R、IR、EGFR和HER2的受体/细胞数。图5中的下图是几个细胞系的蛋白质印迹数据，表示pIRS-1(磷酸化胰岛素受体底物-1(IRS-1))、pAKT(磷酸化AKT(亦称蛋白激酶-B)(非同种型特异性))、tIRS-1(总IRS-1)、pERK1、pERK2(磷酸化ERK1(胞外信号调节激酶1)和ERK2(胞外信号调节激酶2))、tIGR1R(总IGFR1)和肌动蛋白的表达水平。在t IRS-1排NCI N87泳道3中的条带的迁移比预期的略慢，这表明了它就是与用于本实验的抗IRS-1抗体发生交叉反应的HER2。

实施例4：抗IGF1R(LCF(κ)/HCA(γ1))抗体体外抑制胃癌和骨髓瘤细胞系的增殖。

本实施例证实了抗IGF1R抗体LCF/HCA抑制胃癌细胞系SNU-16细胞和骨髓瘤细胞系RPMI8226的增殖。基本上按如上所述方法，应用Cell-Titer Glo实验进行了细胞生长、制备和测定。用于每项实验的抗IGF1R抗体浓度为100nm、20nm、5nm、0.8nm、0.16nm、0.032nm、0.0064nm、0.00128nm和0.000256nM。

本项研究的结果见图6。图6表明在几个浓度的抗体下SNU-16细胞系的体外生长抑制。还观察到骨髓瘤细胞系40％-45％水平的体外生长抑制。

实施例5：抗IGF1R(LCF(κ)/HCA(γ1))抗体在体内抑制肾细胞癌，在 体外抑制黑素瘤肿瘤细胞的生长。

本实施例证实了用于治疗或预防肾细胞癌或黑素瘤的抗IGF1R疗法的功效。

将A498人肾癌肿瘤细胞与基质胶(Matrigel)(1∶1细胞∶凝胶)一起接种到无胸腺裸小鼠右胁皮下。在这些实验中，将5x10⁶个细胞/小鼠按1∶1与常用的基质胶混合。将LCF/HCA抗IGF1R抗体接种到腹膜内(ip)(0.1mg/注射)。每周两次通过腹膜内注射给予小鼠抗体，从第12天开始共7次。用测径器测量肿瘤大小，将数据录入LABCAT实验数据采集和分析程序(Innovative Programming Associates，Inc.；Princeton，NJ)。将平均大小为100mm³的小鼠分组。每周两次测量肿瘤大小和体重。

还对人黑素瘤细胞(A375-SM)对浓度为100nM、20nM、5nM、0.8nM、0.16nM、0.032nM、0.0064nM、0.00128nM和0.000256nM的抗IGF1R抗体的反应进行了体外测定。通过Cell-Titer Glo测定法按如上所述方法进行了测定。

本项研究的结果见图7和图8。图7表示当给予LCF/HCA抗体时随时间变化对肾细胞癌细胞系的体内生长抑制。图8表示在不同的LCF/HCA抗体浓度下对黑素瘤细胞系的体外生长抑制。

实施例6：抗IGF1R(LCF(κ)/HCA(γ1))抗体体内抑制鳞状细胞癌细胞生长。

本实施例证实了用于治疗或预防头颈部癌(例如鳞状细胞癌)的抗IGF1R疗法的功效。

将SCC15人鳞状细胞癌肿瘤细胞与基质胶(1∶1细胞∶凝胶)一起接种到免疫缺陷型SCID小鼠(品系SCID)右胁皮下。在这些实验中，将5x10⁶个细胞/小鼠按1∶1与常用的基质胶混合后接种。将LCF/HCA抗IGF1R抗体接种到腹膜内(ip)(0.1mg/注射)。每周两次通过腹膜内注射给予小鼠抗体，从第10天开始共7次，第31天时最后一次给药。 用测径器测量肿瘤大小，将数据录入labcat程序。将平均大小为100mm³的小鼠分组。每周两次测量肿瘤大小和体重。

由这些实验所获得的数据见图9。接种过LCF/HCA抗体的小鼠的肿瘤生长(图中用“19D12”表示)比仅接受无抗体对照注射小鼠中所观察到的慢。

实施例7：LCF(κ)/HCA(γ1)抗IGF1R抗体的PPTP小组测试。

LCF/HCA为针对胰岛素样生长因子1受体(IGF1R)的完全人抗体，它意味着大范围恶性肿瘤的生长和转移性表型。IGF1R信号转导在儿童癌症情况下特别重要，例如与儿科癌症例如成神经细胞瘤、尤因肉瘤、横纹肌肉瘤、维尔姆斯瘤(Wilms tumor)和骨肉瘤有关。针对儿科临床前测试程序(Pediatric Preclinical Testing Program，PPTP)的体外和体内小组对抗体活性进行了评价。PPTP包括由美国国家癌症研究所(National Cancer Institute，NCI)创建成立的体外细胞系小组和体内小鼠异种移植物小组，供测试最常见的儿科癌症的疗法(参见例如Houghton等，Pediatric Blood&Cancer(2007)49(7)：928-40)。

PPTP包括从分子上表征的体外细胞系小组(n＝27)和体内异种移植物小组(n＝61)，它们代表了儿童实体肿瘤最常见的类型和儿童ALL(急性成淋巴细胞白血病)。在0.01nM～100nM的浓度范围内，针对PPTP体外小组对LCF/HCA抗IGF1R抗体进行了测定；并在剂量为0.5mg/小鼠、通过腹膜内注射每周两次给药达四周的情况下，针对PPTP体内小组进行了测定。对抗肿瘤活性进行了三次测量：1)在临床定位(clinical setting)后设定反应标准；2)第21天时治疗与对照(T/C)的肿瘤体积；和3)根据治疗系和对照系的中位值EFS测定时间/事件(肿瘤体积增加4倍)(中等活性需要EFS(无事件生存率(Event-freesurvival))T/C＞2，高活性另外需要在实验结束时中位值肿瘤体积净减小)。

方法

体外测定。应用DIMSCAN进行体外测定，DIMSCAN是一种定量测定活细胞数的基于荧光的半自动数字图像显微镜系统(在组织培养多孔板中使用二乙酸荧光素[FDA])(Keshelava等，Methods Mol.Med.(2005)110：139-153)。在自0.01nM至0.1mM的浓度下进行了96小时的测定，每数据点6个一式两份。应用Kaleidagraph软件(Synergy Software；Reading，PA)、非线性回归拟合、对于反应的S形剂量反应模型、相对荧光值与浓度，对数据进行了分析。PPTP体外小组包括成神经细胞瘤(4)、尤因肉瘤(4)、横纹肌肉瘤(4)、急性成淋巴细胞白血病(5)、NHL(2)细胞系等等。

1期测定涉及使用成人临床前模型，根据PK/PD(药代动力学/药效动力学)研究，测定在其最大耐受剂量(MTD)或在选定剂量下遍及儿童癌症异种移植物系的整个PPTP小组的药物。

体内实体肿瘤测定：对于每个异种移植物系，当肿瘤体积介于0.2-0.5cm³之间时，开始对带有皮下(SC)肿瘤的10只小鼠进行治疗。用数码游标测径器按每周一次的间隔测量两个垂直的肿瘤直径。假设肿瘤是球形的，由式(π/6)×d3计算出体积，其中d表示平均直径。

体内急性成淋巴细胞白血病测定：对于每个异种移植物系，用由继发性受体(secondary recipient)小鼠的脾脏纯化出来的3-5x10⁶个单核细胞给8只小鼠接种。用流式细胞术每周监测植入情况，当外周血中人CD45⁺细胞的比例达到1％时开始治疗。在整个治疗过程中每周监测外周血中人CD45⁺细胞的比例。

药物：将LCF/HCA溶于含有150mM氯化钠的20mM乙酸钠(pH5)缓冲液，按0.5mg/动物的剂量经腹膜内每周两次连续四周给药。按照PPTP标准操作程序，将编号小瓶中的抗体供给各个测定部位用于盲测。

实体肿瘤反应标准：

反应	定义	评分
			PD1(进行性疾病1)	肿瘤体积↑＞25％，TGD值≤1.5	0
PD2(进行性疾病2)	肿瘤体积↑＞25％，TGD值＞1.5	2
			SD(稳定性疾病)	肿瘤体积↑＜25％，消退＜50％	4
PR(部分反应)	消退≥50％，但非CR	6
			CR(完全反应)	肿瘤体积＜0.1cm3	8
MCR(维持CR)	研究结束时肿瘤体积＜0.1cm3	10

白血病反应标准：

反应	定义	评分
			PD1(进行性疾病1)	无PR，TGD值≤1.5，EOS方面的事件	0
PD2(进行性疾病2)	无PR，TGD值＞1.5，EOS方面的事件	2
			SD(稳定性疾病)	无PR，无EOS方面的事件	4
PR(部分反应)	CD45％＜1％仅一周	6

CR(完全反应)	CD45％＜1％连续2周	8
			MCR(维持CR)	CD45％＜1％直到研究的最后3周	10

中位值组的反应：赋予各治疗组中每只小鼠反应评分(参见上表)，计算出治疗组的中位值评分，然后按照下表确定各治疗组的总体反应。

如果(1)中的中位值评分(MS)：	总体组反应
		0≤MS≤1	PD1
1＜MS≤3	PD2
		3＜MS≤5	SD
5＜MS≤7	PR
		7＜MS≤9	CR
9＜MS	MCR

统计学方法：应用精确log rank检验，对各治疗组的无事件生存率(EFS)分布与相应对照组的EFS分布进行了对比。P-值是两侧的，出于本研究给定的探索性质，未对多重比较进行调整。P-值＜0.05被视为显著。

结果

表1.LCF/HCA体内活性汇总

*p值栏表示治疗组和对照组之间有统计显著性。EFS栏的符号表示具有高活性(！)、中等活性(#)或不确定活性(^)的异种移植物。RTV是相对肿瘤体积。

另参见图10，表示不同细胞类型的体内肿瘤体积随时间变化的图解分析。

另用Affymetrix U133Plus2阵列对IGF-1R表达进行了评价。

IGF1R表达非常低的5个异种移植物未对抗体作出反应(即PD1)。例如，OS-33的表达非常低，是未对抗体产生反应的两个骨肉瘤异种移植物中的一个。具有CR或MCR反应的3个异种移植物IGF1R的表达很高。具有中等到高IGF1R表达的一些异种移植物未对抗体(例如Rh41)产生反应。

体外测定法中达到的最大生长抑制为30％，并观察了T细胞ALL系，MOLT-4。在最高测试浓度下，体外小组的中位值生长抑制为5％。

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本发明的范围不受本文所述具体实施方案的限制。实际上，本发明的范围包括本文具体公开的实施方案以及本文未具体公开的其它实施方案；本文具体公开的实施方案不一定是穷尽性的。从前述描述来看，除本文所述内容以外，本发明的各种修改对本领域技术人员而言都是显而易见的。这类修改也都落入所附权利要求书的范围内。

本申请全文中引用了专利、专利申请、出版物、产品说明书和方案，其公开内容都通过引用全部结合到本文中用于所有目的。 

权利要求书(按照条约第19条的修改)

1.一种用于治疗或预防哺乳动物受治疗者的选自以下医学病症的方法，该方法包括给予所述受治疗者治疗有效量的包含重链免疫球蛋白的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3或轻链免疫球蛋白的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3或两者的分离抗体或其抗原结合片段，所述重链免疫球蛋白包含SEQ ID NO：10所示的氨基酸序列，所述轻链免疫球蛋白包含SEQ ID NO：8所示的氨基酸序列：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、血液恶性肿瘤、慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病、T细胞谱系的急性成淋巴细胞白血病、B细胞前体谱系的急性成淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病、中枢神经系统肿瘤、脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤、骨髓增殖性疾病、真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤和肝癌。

2.权利要求1的方法，其中所述医学病症选自：

B细胞前体谱系的急性成淋巴细胞白血病；

T细胞谱系的急性成淋巴细胞白血病；

急性淋巴细胞白血病；

急性原始粒细胞白血病；

多形性成胶质细胞瘤；

星形细胞瘤；

伯基特淋巴瘤；

类癌；

中枢神经系统肿瘤；

软骨肉瘤；

脉络丛乳头状瘤；

慢性成淋巴细胞白血病；

慢性淋巴细胞白血病；

慢性原始粒细胞白血病；

慢性髓细胞白血病；

慢性粒-单核细胞白血病；

慢性骨髓增殖性疾病；

皮肤T细胞淋巴瘤；

弥漫性大细胞淋巴瘤；

子宫内膜癌；

室管膜瘤；

滤泡性淋巴瘤；

生殖细胞肿瘤；

生殖细胞肿瘤；

成胶质细胞瘤；

毛细胞白血病；

头颈部癌；

肝胚细胞瘤；

肝细胞癌；

霍奇金病；

特发性骨髓纤维变性；

套细胞淋巴瘤；

肥大细胞白血病；

肥大细胞瘤；

成神经管细胞瘤；

黑素瘤；

脑膜瘤；

蕈样霉菌病；

骨髓增殖性疾病；

非成胶质细胞瘤脑癌；

非霍奇金淋巴瘤；

少突神经胶质瘤；

垂体腺瘤；

真性红细胞增多；

原始神经外胚层肿瘤；

肾横纹肌样瘤；

西扎里综合征；

软组织肉瘤；

孤立性浆细胞瘤；

鳞状细胞癌；

血小板增多；

甲状腺癌；和

前庭神经鞘瘤。

3.权利要求1的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段是包含以下CDR的抗体：

(i)

CDR-L1，包含氨基酸序列：RASQSIGSSLH；和

CDR-L2，包含氨基酸序列：YASQSLS；和

CDR-L3，包含氨基酸序列：HQSSRLPHT；

或者

(ii)

CDR-H1，包含氨基酸序列：SFAMH；和

CDR-H2，包含氨基酸序列：VIDTRGATYYADSVKG；和

CDR-H3，包含氨基酸序列：LGNFYYGMDV；

或者(i)和(ii)两者。

4.权利要求1的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段是包含轻链免疫球蛋白可变区和重链免疫球蛋白可变区的单克隆抗体，所述轻链免疫球蛋白可变区包含SEQ ID NO：8的氨基酸20-128；所述重链免疫球蛋白可变区包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137。

5.权利要求1的方法，其中所述抑制剂是抗体，其中所述抗体包含：

(a)包含SEQ ID NO：2的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；或者

(b)包含SEQ ID NO：4的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；或者

(c)包含SEQ ID NO：6的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；或者

(d)包含SEQ ID NO：8的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区。

6.权利要求1的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段与一种或多种另外的化疗药物或其药物组合物联合给予。

7.权利要求6的方法，其中所述另外的化疗药物是抗癌药、止吐药、抗贫血药或抗粘膜炎药。

8.权利要求6的方法，其中所述另外的化疗药物是一种或多种选自以下的药物：依维莫司；曲贝替定；紫杉醇纳米粒注射混悬液；TLK286；AV-299；DN-101；帕唑帕尼；GSK690693；RTA 744；ON 0910.Na；AZD 6244(ARRY-142886)；AMN-107；TKI-258；GSK461364；AZD 1152；恩扎啕林；凡德他尼；ARQ-197；MK-0457；MLN8054；PHA-739358；R-763；AT-9263；FLT-3抑制剂；VEGFR抑制剂；EGFRTK抑制剂；aurora激酶抑制剂；PIK-1调节剂；Bcl-2抑制剂；HDAC抑制剂；c-MET抑制剂；PARP抑制剂；Cdk抑制剂；EGFR TK抑制剂；IGFR-TK抑制剂；抗HGF抗体；PI3激酶抑制剂；AKT抑制剂；JAK/STAT抑制剂；限制点-1抑制剂；限制点-2抑制剂；黏着斑激酶抑制剂；Map激酶激酶(mek)抑制剂；VEGF trap抗体；培美曲塞；埃罗替尼；达沙替尼；尼洛替尼；地西他滨；帕尼单抗；氨柔比星；奥戈伏单抗；Lep-etu；诺拉曲塞；azd2171；巴他布林；奥法木单抗；扎木单抗；艾特咔林；粉防己碱；卢比替康；替米利芬；奥利美生；替西木单抗；伊匹木单抗；棉酚；Bio 111；131-I-TM-601；ALT-110；BIO 140；CC 8490；西仑吉肽；吉马替康；IL13-PE38QQR；INO 1001；IPdR；KRX-0402；硫蒽酮；LY 317615；碘[¹³¹I]抗肌腱蛋白单抗81C6；vitespan；Rta 744；Sdx 102；他仑帕奈；阿曲生坦；Xr 311；罗米地新；ADS-100380；

CG-781；CG-1521；

SB-556629；chlamydocin；JNJ-16241199；

伏林司他；依托泊苷；吉西他滨；多柔比星；脂质体多柔比星；5′-脱氧-5-氟尿苷；长春新碱；替莫唑胺；ZK-304709；塞利西利；PD0325901；AZD-6244；卡培他滨；L-谷氨酸；N-[4-[2-(2-氨基-4，7--二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-二钠盐七水合物；喜树碱；伊立替康；伊立替康、5-氟尿嘧啶和亚叶酸组合产品；PEG标记的伊立替康；FOLFOX方案；他莫昔芬；枸橼酸托瑞米芬；阿那曲唑；依西美坦；来曲唑；DES(己烯雌酚)；雌二醇；雌激素；结合雌激素；贝伐单抗；IMC-1C11；CHIR-258；

3-[5-(甲基磺酰基哌啶甲基)-吲哚基]-喹诺酮；伐他拉尼；AG-013736；AVE-0005；[D-Ser(Bu t)6，Azgly 10](pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(But)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH₂乙酸盐[C₅₉H₈₄N₁₈O₁₄·(C₂H₄O₂)_x；其中x＝1-2.4]；醋酸戈舍瑞林；醋酸亮丙立德；双羟萘酸曲普瑞林；舒尼替尼；苹果酸舒尼替尼；醋酸甲羟孕酮；己酸羟孕酮；醋酸甲地孕酮；雷洛昔芬；比卡鲁胺；氟他胺；尼鲁米 特；醋酸甲地孕酮；CP-724714；TAK-165；HKI-272；埃罗替尼；拉帕替尼；卡纳替尼；ABX-EGF抗体；爱必妥；EKB-569；PKI-166；GW-572016；氯那法尼；

BMS-214662；替匹法尼；氨磷汀；NVP-LAQ824；N-辛二酰苯胺异羟肟酸；丙戊酸；曲古抑菌素A；FK-228；SU11248；索拉非尼；KRN951；氨鲁米特；安吖啶；阿那格雷；L-天冬酰胺酶；卡介苗(BCG)疫苗；博来霉素；布舍瑞林；白消安；卡铂；卡莫司汀；苯丁酸氮芥；顺铂；克拉屈滨；氯膦酸盐；环磷酰胺；环丙孕酮；阿糖胞苷；达卡巴嗪；放线菌素D；柔红霉素；己烯雌酚；表柔比星；氟达拉滨；氟氢可的松；氟甲睾酮；氟他胺；羟基脲；伊达比星；异环磷酰胺；伊马替尼；亚叶酸；亮丙立德；左旋咪唑；洛莫司汀；氮芥；美法仑；6-巯基嘌呤；美司钠；甲氨蝶呤；丝裂霉素；米托坦；米托蒽醌；尼鲁米特；奥曲肽；奥沙利帕；沙铂帕米膦酸盐；喷司他丁；普卡霉素；卟吩姆；丙卡巴肼；雷替曲塞；利妥昔单抗；链佐星；替尼泊苷；睾酮；沙利度胺；硫鸟嘌呤；塞替派；维A酸；长春地辛；13-顺式维甲酸；苯丙氨酸氮芥；乌拉莫司汀；雌莫司汀；六甲蜜胺；氟尿苷；5-脱氧尿苷；阿糖胞苷；6-巯基嘌呤；脱氧考福霉素；骨化三醇；戊柔比星；光神霉素；长春碱；长春瑞滨；托泊替康；razoxin；马立马司他；COL-3；新伐司他；BMS-275291；司夸胺；内皮生长抑素；SU5416；SU6668；EMD121974；白介素-12；IM862；血管生长抑素；αVβ3人源化抗单抗；屈洛昔芬；吲哚西芬；螺内酯；非那雄胺；西米替丁；曲妥珠单 抗；地尼白介素白喉毒素跨膜片段；吉非替尼；硼替佐米；紫杉醇；无乳浮紫杉醇；多西他赛；埃坡霉素B；BMS-247550；BMS-310705；屈洛昔芬；4-羟基他莫昔芬；哌喷昔芬；ERA-923；阿佐昔芬；氟维司群；阿考比芬；拉索昔芬；艾多昔芬；TSE-424；HMR-3339；ZK186619；托泊替康；PTK787/ZK 222584；VX-745；PD 184352；雷帕霉素；40-O-(2-羟基乙基)-雷帕霉素；坦罗莫司；AP-23573；RAD001；ABT-578；BC-210；LY294002；LY292223；LY292696；LY293684；LY293646；渥曼青霉素；ZM336372；L-779,450；PEG-非格司亭；达贝泊汀；5-氟尿嘧啶；红细胞生成素；粒细胞集落刺激因子；唑来膦酸盐；泼尼松；西妥昔单抗；粒细胞巨噬细胞集落刺激因子；组氨瑞林；聚乙二醇化干扰素α-2a；干扰素α-2a；聚乙二醇化干扰素α-2b；干扰素α-2b；阿扎胞苷；PEG-L-天冬酰胺酶；来那度胺；吉妥珠单抗；氢化可的松；白介素-11；右雷佐生；阿仑珠单抗；全反式维甲酸；酮康唑；白介素-2；甲地孕酮；免疫球蛋白；氮芥；甲泼尼龙；替伊莫单抗；雄激素；地西他滨；六甲基蜜胺；贝沙罗汀；托西莫单抗；三氧化二砷；可的松；editronate；米托坦；环孢菌素；脂质体柔红霉素；Edwina-天冬酰胺酶；锶89；卡索匹坦；奈妥匹坦；NK-1受体拮抗剂；帕洛诺司琼；阿瑞吡坦；苯海拉明；羟嗪；甲氧氯普胺；劳拉西泮；阿普唑仑；氟哌啶醇；氟哌利多；屈大麻酚；地塞米松；甲泼尼龙；普鲁氯嗪；格拉司琼；昂丹司琼；多拉司琼；托烷司琼；非格司亭；红细胞生成素；阿法依泊汀；和达贝泊汀α。

9.权利要求6的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段和另外的化疗药物同时给予。

10.权利要求6的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段和另外的化疗药物非同时给予。

11.权利要求4的方法，其中所述轻链免疫球蛋白与κ免疫球蛋白恒定区连接；所述重链免疫球蛋白与γ-1免疫球蛋白恒定区连接。

12.权利要求1的方法，其中所述受治疗者是人。

13.权利要求12的方法，其中所述受治疗者是儿童。

14.权利要求1的方法，其中所述抗体或其抗原结合片段与抗癌疗法联合给予。

15.权利要求14的方法，其中所述抗癌疗法是外科肿瘤切除术和/或抗癌放射治疗。

16.权利要求1的方法，其中所述抗体或片段以药物组合物形式给予所述受治疗者，所述药物组合物包含20mg/ml抗体或片段、2.3mg/ml三水乙酸钠、0.18mg/ml冰醋酸、70mg/ml蔗糖和水，pH为5.5。

17.权利要求1的方法，其中所述抗体或片段按剂量为10mg/kg体重/两周给予所述受治疗者。

18.权利要求4的方法，其中所述受治疗者是所述抗体或片段以药物组合物形式给予的人，所述抗体或片段是单克隆抗体，所述药物组合物包含20mg/ml抗体、2.3mg/ml三水乙酸钠、0.18mg/ml冰醋酸、70mg/ml蔗糖和水，pH为5.5；静脉内用药；剂量为10mg/kg体重/两周；其中所述医学病症是尤因肉瘤。

Claims (15)

1.一种用于治疗或预防哺乳动物受治疗者的选自以下医学病症的方法，该方法包括给予所述受治疗者治疗有效量的一种或多种IGF1R抑制剂或其药物组合物：头颈部癌、鳞状细胞癌、多发性骨髓瘤、孤立性浆细胞瘤、肾细胞癌、成视网膜细胞瘤、生殖细胞肿瘤、肝胚细胞瘤、肝细胞癌、黑素瘤、肾横纹肌样瘤、尤因肉瘤、软骨肉瘤、血液恶性肿瘤、慢性成淋巴细胞白血病、慢性粒-单核细胞白血病、急性成淋巴细胞白血病、T细胞谱系的急性成淋巴细胞白血病、B细胞前体谱系的急性成淋巴细胞白血病、急性淋巴细胞白血病、急性髓细胞白血病、急性原始粒细胞白血病、慢性原始粒细胞白血病、霍奇金病、非霍奇金淋巴瘤、慢性淋巴细胞白血病、慢性髓细胞白血病、骨髓增生异常综合征、毛细胞白血病、肥大细胞白血病、肥大细胞瘤、滤泡性淋巴瘤、弥漫性大细胞淋巴瘤、套细胞淋巴瘤、伯基特淋巴瘤、蕈样霉菌病、西扎里综合征、皮肤T细胞淋巴瘤、慢性骨髓增殖性疾病、中枢神经系统肿瘤、脑癌、成胶质细胞瘤、非成胶质细胞瘤脑癌、脑膜瘤、垂体腺瘤、前庭神经鞘瘤、原始神经外胚层瘤、成神经管细胞瘤、星形细胞瘤、多形性成胶质细胞瘤、少突神经胶质瘤、室管膜瘤、脉络丛乳头状瘤、骨髓增殖性疾病、真性红细胞增多、血小板增多、特发性骨髓纤维变性、软组织肉瘤、甲状腺癌、子宫内膜癌、类癌、生殖细胞肿瘤和肝癌。

2.权利要求1的方法，其中所述IGF1R抑制剂选自 

和与人IGF1R或其抗原结合片段特异性结合的分离抗体。 

3.权利要求2的方法，其中所述抑制剂是包含轻链免疫球蛋白的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3和/或重链免疫球蛋白的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3的抗体或其抗原结合片段，所述轻链免疫球蛋白包含SEQ ID NO：2、4、6或8的氨基酸序列，所述重链免疫球蛋白包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸序列。

4.权利要求2的方法，其中所述抑制剂是包含轻链免疫球蛋白的CDR-L1、CDR-L2和CDR-L3和/或重链免疫球蛋白的CDR-H1、CDR-H2和CDR-H3的抗体或其抗原结合片段，所述轻链免疫球蛋白包含SEQ ID NO：25、26、27或28的氨基酸序列，所述重链免疫球蛋白包含SEQ ID NO：29、30、31、32或33的氨基酸序列。

5.权利要求2的方法，其中所述抑制剂是抗体，其中所述抗体包含：

(a)包含SEQ ID NO：2的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；

(b)包含SEQ ID NO：4的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；

(c)包含SEQ ID NO：6的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区；或者

(d)包含SEQ ID NO：8的氨基酸20-128的轻链可变区和包含SEQ ID NO：10或12的氨基酸20-137的重链可变区。

6.权利要求1的方法，其中所述IGF1R抑制剂与一种或多种另外的化疗药物或其药物组合物联合给予。

7.权利要求6的方法，其中所述另外的化疗药物是抗癌药、止吐药、抗贫血药或抗粘膜炎药。

8.权利要求6的方法，其中所述另外的化疗药物是一种或多种选自以下的药物：依维莫司；曲贝替定；紫杉醇纳米粒注射混悬液；TLK286；AV-299；DN-101；帕唑帕尼；GSK690693；RTA 744；ON 0910.Na；AZD 6244(ARRY-142886)；AMN-107；TKI-258；GSK461364；AZD 1152；恩扎啕林；凡德他尼；ARQ-197；MK-0457；MLN8054；PHA-739358；R-763；AT-9263；FLT-3抑制剂；VEGFR抑制剂；EGFRTK抑制剂；aurora激酶抑制剂；PIK-1调节剂；Bcl-2抑制剂；HDAC抑制剂；c-MET抑制剂；PARP抑制剂；Cdk抑制剂；EGFR TK抑制剂；IGFR-TK抑制剂；抗HGF抗体；PI3激酶抑制剂；AKT抑制剂；JAK/STAT抑制剂；限制点-1抑制剂；限制点-2抑制剂；黏着斑激酶抑制剂；Map激酶激酶(mek)抑制剂；VEGF trap抗体；培美曲塞；埃罗替尼；达沙替尼；尼洛替尼；地西他滨；帕尼单抗；氨柔比星；奥戈伏单抗；Lep-etu；诺拉曲塞；azd2171；巴他布林；奥法木单抗；扎木单抗；艾特咔林；粉防己碱；卢比替康；替米利芬；奥利美生；替西木单抗；伊匹木单抗；棉酚；Bio 111；131-I-TM-601；ALT-110；BIO 140；CC 8490；西仑吉肽；吉马替康；IL13-PE38QQR；INO 1001；IPdR；KRX-0402；硫蒽酮；LY 317615；碘[¹³¹I]抗肌腱蛋白单抗81C6；vitespan；Rta 744；Sdx 102；他仑帕奈；阿曲生坦；Xr 311；罗米地新；ADS-100380； CG-781；CG-1521； 

SB-556629；chlamydocin；JNJ-16241199； 

伏林司他；依托泊苷；吉西他滨；多柔比星；脂质体多柔比星；5′-脱氧-5-氟尿苷；长春新碱；替莫唑胺；ZK-304709；塞利西利；PD0325901；AZD-6244；卡培他滨；L-谷氨酸；N-[4-[2-(2-氨基-4，7-二氢-4-氧代-1H-吡咯并[2，3-d]嘧啶-5-基)乙基]苯甲酰基]-二钠盐七水合物；喜树碱；伊立替康；伊立替康、5-氟尿嘧啶和亚叶酸组合产品；PEG标记的伊立替康；FOLFOX方案；他莫昔芬；枸橼酸托瑞米芬；阿那曲唑；依西美坦；来曲唑；DES(己烯雌酚)；雌二醇；雌激素；结合雌激素；贝伐单抗；IMC-1C11；CHIR-258； 

)；3-[5-(甲基磺酰基哌啶甲基)-吲哚基]-喹诺酮；伐他拉尼；AG-013736；AVE-0005；[D-Ser(Bu t)6，Azgly 10](pyro-Glu-His-Trp-Ser-Tyr-D-Ser(Bu t)-Leu-Arg-Pro-Azgly-NH₂乙酸盐[C₅₉H₈₄N₁₈O₁₄·(C₂H₄O₂)_x；其中x＝1-2.4]；醋酸戈舍瑞林；醋酸亮丙立德；双羟萘酸曲普瑞林；舒尼替尼；苹果酸舒尼替尼；醋酸甲羟孕酮；己酸羟孕酮；醋酸甲地孕酮；雷洛昔芬；比卡鲁胺；氟他胺；尼鲁米 特；醋酸甲地孕酮；CP-724714；TAK-165；HKI-272；埃罗替尼；拉帕替尼；卡纳替尼；ABX-EGF抗体；爱必妥；EKB-569；PKI-166；GW-572016；氯那法尼； 

BMS-214662；替匹法尼；氨磷汀；NVP-LAQ824；N-辛二酰苯胺异羟肟酸；丙戊酸；曲古抑菌素A；FK-228；SU11248；索拉非尼；KRN951；氨鲁米特；安吖啶；阿那格雷；L-天冬酰胺酶；卡介苗(BCG)疫苗；博来霉素；布舍瑞林；白消安；卡铂；卡莫司汀；苯丁酸氮芥；顺铂；克拉屈滨；氯膦酸盐；环磷酰胺；环丙孕酮；阿糖胞苷；达卡巴嗪；放线菌素D；柔红霉素；己烯雌酚；表柔比星；氟达拉滨；氟氢可的松；氟甲睾酮；氟他胺；羟基脲；伊达比星；异环磷酰胺；伊马替尼；亚叶酸；亮丙立德；左旋咪唑；洛莫司汀；氮芥；美法仑；6-巯基嘌呤；美司钠；甲氨蝶呤；丝裂霉素；米托坦；米托蒽醌；尼鲁米特；奥曲肽；奥沙利帕；沙铂帕米膦酸盐；喷司他丁；普卡霉素；卟吩姆；丙卡巴肼；雷替曲塞；利妥昔单抗；链佐星；替尼泊苷；睾酮；沙利度胺；硫鸟嘌呤；塞替派；维A酸；长春地辛；13-顺式维甲酸；苯丙氨酸氮芥；乌拉莫司汀；雌莫司汀；六甲蜜胺；氟尿苷；5-脱氧尿苷；阿糖胞苷；6-巯基嘌呤；脱氧考福霉素；骨化三醇；戊柔比星；光神霉素；长春碱；长春瑞滨；托泊替康；razoxin；马立马司他；COL-3；新伐司他；BMS-275291；司夸胺；内皮生长抑素；SU5416；SU6668；EMD121974；白介素-12；IM862；血管生长抑素；αVβ3人源化抗单抗；屈洛昔芬；吲哚西芬；螺内酯；非那雄胺；西米替丁；曲妥珠单 抗；地尼白介素白喉毒素跨膜片段；吉非替尼；硼替佐米；紫杉醇；无乳浮紫杉醇；多西他赛；埃坡霉素B；BMS-247550；BMS-310705；屈洛昔芬；4-羟基他莫昔芬；哌喷昔芬；ERA-923；阿佐昔芬；氟维司群；阿考比芬；拉索昔芬；艾多昔芬；TSE-424；HMR-3339；ZK186619；托泊替康；PTK787/ZK 222584；VX-745；PD 184352；雷帕霉素；40-O-(2-羟基乙基)-雷帕霉素；坦罗莫司；AP-23573；RAD001；ABT-578；BC-210；LY294002；LY292223；LY292696；LY293684；LY293646；渥曼青霉素；ZM336372；L-779，450；PEG-非格司亭；达贝泊汀；5-氟尿嘧啶；红细胞生成素；粒细胞集落刺激因子；唑来膦酸盐；泼尼松；西妥昔单抗；粒细胞巨噬细胞集落刺激因子；组氨瑞林；聚乙二醇化干扰素α-2a；干扰素α-2a；聚乙二醇化干扰素α-2b；干扰素α-2b；阿扎胞苷；PEG-L-天冬酰胺酶；来那度胺；吉妥珠单抗；氢化可的松；白介素-11；右雷佐生；阿仑珠单抗；全反式维甲酸；酮康唑；白介素-2；甲地孕酮；免疫球蛋白；氮芥；甲泼尼龙；替伊莫单抗；雄激素；地西他滨；六甲基蜜胺；贝沙罗汀；托西莫单抗；三氧化二砷；可的松；editronate；米托坦；环孢菌素；脂质体柔红霉素；Edwina-天冬酰胺酶；锶89；卡索匹坦；奈妥匹坦；NK-1受体拮抗剂；帕洛诺司琼；阿瑞吡坦；苯海拉明；羟嗪；甲氧氯普胺；劳拉西泮；阿普唑仑；氟哌啶醇；氟哌利多；屈大麻酚；地塞米松；甲泼尼龙；普鲁氯嗪；格拉司琼；昂丹司琼；多拉司琼；托烷司琼；非格司亭；红细胞生成素；阿法依泊汀；和达贝泊汀α。

9.权利要求6的方法，其中所述IGF1R抑制剂和另外的抗癌治疗药物同时给予。

10.权利要求6的方法，其中所述IGF1R抑制剂和另外的抗癌治疗药物非同时给予。

11.权利要求2的方法，其中所述抗体包含IgG恒定区。

12.权利要求1的方法，其中所述受治疗者是人。

13.权利要求12的方法，其中所述受治疗者是儿童。 

14.权利要求1的方法，其中所述IGF1R抑制剂与抗癌疗法联合给予。

15.权利要求14的方法，其中所述抗癌疗法是外科肿瘤切除术和/或抗癌放射治疗。 

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