CN102106463B - 一种微生物饲料添加剂及其制备方法 - Google Patents
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Abstract
本发明属于微生物发酵领域，涉及一种含有干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌及上述菌种相应的吸附载体的复合微生物饲料添加剂及其制备方法。本发明的复合微生物饲料添加剂能够短期内大量补充活性微生物来平衡禽畜肠道菌群，能有效缓解因病理或服用药物等造成的肠道菌群失衡，同时提高禽畜机体免疫力；并能够作为有机生产资料添加至饲料中，可部分甚至完全替代抗生素及化学物品，直接降低养殖成本，同时提高禽畜对饲料的消化吸收率，降低料肉比，提高饲料报酬率，其制备工艺简单，适合产业化应用。
Description
技术领域
本发明属于微生物发酵领域，涉及一种含有干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌及相应的吸附载体的复合微生物饲料添加剂及其制备方法。
背景技术
目前养殖业所面临的一个比较重要的问题就是：众多生长素类及药物类饲料添加剂的使用造成大量药物残留，从而造成禽畜肉类品种下降，同时由于药物的富集作用，造成位于食物链上层的食用者食用后药物大量富集，从而引起细菌耐药性增强，直接或间接地影响人类的健康。如何采用一些新型的饲料添加剂以减少药物型饲料添加剂的副作用，同时又能在一定程度上替代部分药物型饲料添加剂，是当前以及将来较长一段时间内的研究方向。
发明内容
本发明的目的是提供一种由多菌种组成的复合型微生物饲料添加剂。
本发明的另一个目的是提供一种由多菌种组成的复合型微生物饲料添加剂的制备方法。
本发明是由如下技术方案实现的：
一种微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
(1)在厌氧操作箱中通过选择性培养基对干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌及植物乳杆菌进行纯化分离操作，各菌株纯化分离条件为：
干酪乳杆菌：选用LC培养基作为选择性培养基，其成分为：0.1％酵母膏、1％蛋白胨、0.4％Lab Lemco(牛肉膏)、0.2％磷酸二氢钾、0.3％乙酸钠、0.02％结晶硫酸镁、0.005％结晶硫酸锰、0.1％吐温80、0.1％柠檬酸铵、0.1％干酪素酸性水解物、1.2％琼脂，以上为质量百分含量；调节pH值6.0～6.4；115℃，45min灭菌；培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h。
嗜酸乳杆菌：选用改良TJA培养基作为选择性培养基，其成分为：5％番茄汁、0.5％酵母膏、1％牛肉浸膏、2％乳糖、0.2％葡萄糖、0.1％吐温80、0.5％乙酸钠、1.2％琼脂，以上为质量百分含量；调节调节pH值6.6～7.0；115℃，45min灭菌；培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h。
植物乳杆菌：选用MRS肉汤作为选择性培养基，其成分为：1％蛋白胨、1％肉膏、0.5％酵母膏、2％葡萄糖、0.2％磷酸二氢钾、0.2％柠檬酸氢二铵、0.5％乙酸钠、0.058％结晶硫酸镁、0.025％结晶硫酸锰、0.05％半胱氨酸、0.1％吐温80、1.2％琼脂，以上为质量百分含量；调节pH值6.1～6.5；115℃，45min灭菌；培养温度为25℃～30℃；培养时间20～24h。
(2)在厌氧操作箱中将步骤(1)中经分离纯化的菌种分别转入酵母膏蛋白胨培养基(液体)中进行扩容培养，其成分为：0.5％酵母膏、0.5％蛋白胨、0.05％氯化钠、0.05％磷酸氢二钾、0.05％硫酸镁、0.05％碳酸钙、0.1％吐温-80、10％红糖，以上为质量百分含量；调节pH值6.0～6.4；115℃，45min灭菌；培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h。
(3)将步骤(2)中经过纯化扩容后的各菌种分别接种入工业发酵罐中进行发酵，各微生物组分的发酵条件为：
干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌，培养基成分以质量百分比计为：0.5％酵母膏、0.5％蛋白胨、0.05％氯化钠、0.05％磷酸氢二钾、0.05％硫酸镁、0.05％碳酸钙、0.1％吐温-80、10％红糖(C12H22O11)，调节pH值6.0～6.4，培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h。
植物乳杆菌，培养基成分以质量百分比计为：0.5％酵母膏、0.5％蛋白胨、0.05％氯化钠、0.05％磷酸氢二钾、0.05％硫酸镁、0.05％碳酸钙、0.1％吐温-80、10％红糖(C12H22O11)，调节pH值6.0～6.4，培养温度为23℃～28℃；培养时间20～24h。
(4)将步骤(3)中获得的各个菌种组分培养液按照1∶0.8～1∶1.2～1.4的体积比进行混合后，再用吸附载体进行吸附，各菌种组分培养液总量与吸附载体的体积质量比为1(L)∶1.3～1.5(kg)。
(5)步骤(4)中所述的吸附载体是食品级玉米淀粉，或以食品级玉米淀粉为主，并辅以红糖、白糖或赤砂糖等糖类(包括以糖浆形式存在的糖类)的一种或数种的混合物。其中糖类所占质量百分比为8％～15％。
(6)用低温干燥设备对步骤(4)中的混合物进行干燥，干燥环境温度控制在28℃～35℃，经低温连续干燥后，使含水率为10％以下，粉碎至细度40～60目，即为成品。
一种微生物饲料添加剂，其特征在于包含：干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌及相应的吸附载体；其中，各菌种组分培养液的体积比为1∶0.8～1∶1.2～1.4；菌种组分培养液总量与吸附载体的体积质量比为1(L)∶1.3～1.5(kg)。
本发明具有以下的积极效果：
1.通过短期内大量补充活性微生物来平衡禽畜肠道菌群，能有效缓解因病理或服用药物等造成的肠道菌群失衡，同时提高禽畜机体免疫力。
2.可作为有机生产资料添加至饲料中，可部分甚至完全替代抗生素及化学物品，最终的肉蛋奶产品中无残留，符合有机产品的要求。
3.使用本发明的产品可以在饲料中少添加甚至不添加抗生素及其他药品，直接降低养殖成本。
4.提高禽畜对饲料的消化吸收率，降低料肉比，提高饲料报酬率。
具体实施方式
以下结合具体实例对本发明作进一步描述(实施例中各菌种组分的分离纯化及发酵条件参照上述发明内容中步骤(1)～(3))：
实施例1
(1)将各菌种组分分离纯化及发酵完成，制成相应培养液备用；
(2)取干酪乳杆菌发酵液970mL，嗜酸乳杆菌发酵液920mL，植物乳杆菌发酵液1160mL进行充分混合，制成总量为3050mL的混合发酵液，三者比例为1∶0.95∶1.20；
(3)取3850g食品级玉米淀粉，200g白糖，350g红糖进行充分混合，制成总量为4400g的载体，其中糖类所占比例为(200+350)/(3850+200+350)＝12.5％；
(4)将(2)的混合发酵液及(3)的吸附载体进行充分混合，发酵液与吸附载体的体积质量比为3050∶4400＝1∶1.44；
(5)将上述混合物放入低温烘干设备中进行低温连续干燥，经8小时23分后取出，测得含水率为8.93％，符合要求，粉碎至细度40～60目，即为成品。
实施例2
(1)将各菌种组分分离纯化及发酵完成，制成相应培养液备用；
(2)取干酪乳杆菌发酵液1125mL，嗜酸乳杆菌发酵液1000mL，植物乳杆菌发酵液1425mL进行充分混合，制成总量为3550mL的混合发酵液，三者比例为1∶0.89∶1.27；
(3)取4150g食品级玉米淀粉，350g白糖，350g红糖进行充分混合，制成总量为4850g的载体，其中糖类所占比例为(350+350)/(4150+350+350)＝14.43％；
(4)将(2)的混合发酵液及(3)的吸附载体进行充分混合，发酵液与吸附载体的体积质量比为3550∶4850＝1∶1.366；
(5)将上述混合物放入低温烘干设备中进行低温连续干燥，经7小时51分后取出，测得含水率为9.63％，符合要求，粉碎至细度40～60目，即为成品。
实施例3
(1)将各菌种组分分离纯化及发酵完成，制成相应培养液备用；
(2)取干酪乳杆菌发酵液1000mL，嗜酸乳杆菌发酵液1125mL，植物乳杆菌发酵液1350mL进行充分混合，制成总量为3475mL的混合发酵液，三者比例为1∶1.13∶1.35；
(3)取3980g食品级玉米淀粉，410g糖浆进行充分混合，制成总量为4390g的载体，其中糖类所占比例为410/(3980+410)＝9.34％；
(4)将(2)的混合发酵液及(3)的吸附载体进行充分混合，发酵液与吸附载体的体积质量比为3475∶4390＝1∶1.263；
(5)将上述混合物放入低温烘干设备中进行低温连续干燥，经8小时43分后取出，测得含水率为8.24％，符合要求，粉碎至细度40～60目，即为成品。
实施例4
(1)将各菌种组分分离纯化及发酵完成，制成相应培养液备用；
(2)取干酪乳杆菌发酵液1050mL，嗜酸乳杆菌发酵液980mL，植物乳杆菌发酵液1420mL进行充分混合，制成总量为3450mL的混合发酵液，三者比例为1∶0.93∶1.35；
(3)取4030g食品级玉米淀粉，250g白糖，250g红糖，200g糖浆进行充分混合，制成总量为4730g的载体，其中糖类所占比例为(250+250+200)/(4030+250+250+200)＝14.8％；
(4)将(2)的混合发酵液及(3)的吸附载体进行充分混合，发酵液与吸附载体的体积质量比为3450∶4730＝1∶1.37；
(5)将上述混合物放入低温烘干设备中进行低温连续干燥，经7小时55分后取出，测得含水率为9.89％，符合要求，粉碎至细度40～60目，即为成品。
对上述各实施例进行检测后获得数据如下：
从上表可以看出，以该工艺生产出的产品在各项数值上均十分稳定。
实施例的应用
将上述实施例应用于实际中，特别是猪仔的养殖，取得了良好的效果。养殖试验按猪仔体重不同设三个试验组，分别为：10-15kg，16-21kg，22-29kg；每组设试验对象15-17头，另设对照组一组。
试验组与对照组所用的基础预混料完全一致，配方如下：玉米63％，豆粕24％，鱼粉4％，麦麸9％；对照组在此基础预混料中添加0.055‰的吉他霉素及0.1‰的喹乙醇；试验组不添加任何药物类饲料添加剂，同时在基础预混料基础上添加以本说明书所述方法配置成的微生物饲料添加剂2％。其对比结果如下表所列。
试验组数据汇统计表
对照组数据统计表
从上述两表的数据对比上可以看出本发明对于药物类饲料添加剂有明显的替代作用，而且完全绿色环保，对仔猪副作用小，并且由于其中微生物的作用大大促进了仔猪对饲料的消化吸收，提高吸收率，从而降低料肉比，不管在养殖的品质及养殖的成本上都大大优于传统配料。
Claims (6)
1.一种微生物饲料添加剂的制备方法，其特征在于包括以下步骤：
（1）在厌氧操作箱中通过选择性培养基对干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌及植物乳杆菌进行纯化分离操作，各菌株纯化分离条件为：
干酪乳杆菌：选用LC培养基作为选择性培养基，其成分以质量百分比计为：0.1%酵母膏、1%蛋白胨、0.4%Lab Lemco牛肉膏、0.2%磷酸二氢钾、0.3%乙酸钠、0.02%结晶硫酸镁、0.005%结晶硫酸锰、0.1%吐温80、0.1%柠檬酸铵、0.1%干酪素酸性水解物、1.2%琼脂；调节pH值6.0～6.4；115℃，45min灭菌；培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h；
嗜酸乳杆菌：选用改良TJA培养基作为选择性培养基，其成分以质量百分比计为：5%番茄汁、0.5%酵母膏、1%牛肉浸膏、2%乳糖、0.2%葡萄糖、0.1%吐温80、0.5%乙酸钠、1.2%琼脂；调节调节pH值6.6～7.0；115℃，45min灭菌；培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h；
植物乳杆菌：选用MRS肉汤作为选择性培养基，其成分以质量百分比计为：1%蛋白胨、1%肉膏、0.5%酵母膏、2%葡萄糖、0.2%磷酸二氢钾、0.2%柠檬酸氢二铵、0.5%乙酸钠、0.058%结晶硫酸镁、0.025%结晶硫酸锰、0.05%半胱氨酸、0.1%吐温80、1.2%琼脂；调节pH值6.1～6.5；115℃，45min灭菌；培养温度为25℃～30℃；培养时间20～24h；
（2）在厌氧操作箱中将步骤（1）中经分离纯化的各菌种分别转入液体酵母膏蛋白胨培养基中进行扩容培养，其成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钙、0.1%吐温-80、10%红糖；调节pH值6.0～6.4；115℃，45min灭菌；培养温度为28℃～35℃；培养时间20～24h；
（3）将步骤（2）中经过纯化扩容后的各菌种分别接种入发酵罐中进行发酵，各微生物组分的发酵条件为：
干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌，其培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钙、0.1%吐温-80、10%红糖，调节pH值6.0～6.4，发酵培养温度为28℃～35℃，培养时间20～24h；
植物乳杆菌，其培养基成分以质量百分比计为：0.5%酵母膏、0.5%蛋白胨、0.05%氯化钠、0.05%磷酸氢二钾、0.05%硫酸镁、0.05%碳酸钙、0.1%吐温-80、10%红糖，调节pH值6.0～6.4，发酵培养温度为23℃～28℃，培养时间20～24h；
（4）将步骤（3）中获得的各个菌种组分的培养液按照1:0.8～1:1.2～1.4的体积比进行混合后，再用吸附载体进行吸附，各菌种组分培养液总量与吸附载体的体积质量比为1:1.3～1.5，体积单位为升，质量单位为千克，所述吸附载体是以食品级玉米淀粉为主，并辅以一种或数种糖类的混合物，其中糖类所占质量百分比为8%～15%;
（5）用低温干燥设备对步骤（4）中的混合物进行干燥，干燥环境温度控制在28℃～35℃，经低温连续干燥后，使含水率为10%以下，粉碎至细度40～60目，即为成品，得到微生物饲料添加剂。
2.根据权利要求1所述的制备方法，其特征在于：步骤（4）中的糖类优选自红糖、白糖或赤砂糖。
3.一种根据权利要求1的制备方法获得的微生物饲料添加剂，其特征在于：包含干酪乳杆菌、嗜酸乳杆菌、植物乳杆菌及上述菌种相应的吸附载体，其中各菌种组分培养液的体积比为1:0.8～1:1.2～1.4；各菌种组分培养液总量与吸附载体的体积质量比为1:1.3～1.5，其中体积单位为升，质量单位为千克。
4.根据权利要求3所述的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述的吸附载体是以食品级玉米淀粉为主，并辅以一种或数种糖类的混合物。
5.根据权利要求4所述的微生物饲料添加剂，其特征在于：所述糖类优选自红糖、白糖或赤砂糖。
6.根据权利要求4所述的微生物饲料添加剂，其特征在于：其中糖类所占质量百分比为8%～15%。
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