CN102746997B - 一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基 - Google Patents

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Abstract

本发明涉及一种真菌杀虫剂培养基，特别是一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，由葡萄糖、干酪素、磷酸氢二钾、硫酸镁、维生素B6和水组成，其中葡萄糖31.0g～32.0g，干酪素2.95g～3.05g，磷酸氢二钾0.95g～1.05g，硫酸镁0.6g～0.7g，维生素B6为0.011g～0.012g，用水定容至1L。该培养基组成成分明确、稳定，解决了天然培养基成分复杂以及成分含量不稳定而导致发酵过程和产品质量不易控制的问题，而且菌丝体产量较高，菌丝干重可达26.1g/L以上，为等量PDB培养基产量的3.8倍。该培养基可以进行连续化、批量化大规模发酵生产，对于该菌的大规模应用提供了必要的前提条件。

Description

一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基
技术领域
本发明涉及一种真菌杀虫剂培养基，特别是一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基。
背景技术
虫生真菌的重要成员扁座壳孢菌(Aschersonia placenta)，其有性型为莫勒菌(Moelleriella)，目前认为该菌隶属于子囊菌门、粪菌纲、肉座菌目、麦角菌科。扁座壳孢菌及其有性型莫勒菌能引起粉虱和介壳类昆虫群体性流行病的发生，这使得它成为有用的生物防治剂。座壳孢菌及其有性型的代谢产物呈现较好的抗菌、杀疟原虫活性，并对昆虫和肿瘤细胞有较强的毒性，这预示该菌在生物农药或医药上存在很大应用价值。若要对其进行大规模生产应用，首先要考虑明确其对培养基各营养成分的需求从而对其进行控制。
发明内容
本发明的目的在于提供一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，该培养基组成成分明确、稳定，使得发酵过程和产品质量易于控制，菌丝产量高。
为实现上述目的，本发明的技术方案是：一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，由葡萄糖、干酪素、磷酸氢二钾、硫酸镁、维生素B6和水组成，其中葡萄糖31.0g～32.0g，干酪素2.95g～3.05g，磷酸氢二钾0.95g～1.05g，硫酸镁0.6g～0.7g，维生素B6 为0.011g～0.012g，用水定容至1L。
上述扁座壳孢菌菌丝生长培养基为液体发酵培养基。
上述扁座壳孢菌菌丝生长培养基可按常规方法配制，灭菌条件为：温度121℃，压力范围0.1MPa～0.15MPa，时间为30min。
上述扁座壳孢菌菌丝生长培养基在接种前需将其冷却至35℃以下。
上述扁座壳孢菌菌丝生长培养基在接种时接种量要控制在培养基重量比的10%以内。
上述扁座壳孢菌菌丝生长培养基中，碳源为葡糖糖，氮源为干酪素，添加微量元素为维生素B6，其最优配比为：葡萄糖31.4g，干酪素3g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁0.64g，维生素B6为0.0115g，用水定容至1L。
本发明的有益效果是该培养基配方成分明确，解决了天然培养基成分复杂以及成分含量不稳定而导致发酵过程和产品质量不易控制的问题，而且菌丝体产量高，菌丝干重可达26.1 g/L以上，为等量PDB培养基产量的3.8倍。该培养基可以进行连续化、批量化大规模发酵生产，对于该菌的大规模应用提供了必要的前提条件。
附图说明
图1是本发明扁座壳孢菌菌丝生长培养基的构成示意图。
图2是通过响应面法优化本发明培养基所得glucose(X1)和vitamin B6(X2)两因素对菌丝生长的影响的响应曲面图。
图3是通过响应面法优化本发明培养基所得glucose(X1)和vitamin B6(X2)两因素对菌丝生长的影响的等高线图。
图4是通过响应面法优化本发明培养基所得glucose(X1)和MgSO4·7H2O(X3)两因素对菌丝生长的影响的响应曲面图。
图5是通过响应面法优化本发明培养基所得glucose(X1)和MgSO4·7H2O(X3)两因素对菌丝生长的影响的等高线图。
图6是通过响应面法优化本发明培养基所得vitamin B6(X2)和MgSO4·7H2O(X3)两因素对菌丝生长的影响的响应曲面图。
图7是通过响应面法优化本发明培养基所得vitamin B6(X2)和MgSO4·7H2O(X3)两因素对菌丝生长的影响的等高线图。
具体实施方式
本发明的扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，由葡萄糖、干酪素、磷酸氢二钾、硫酸镁、维生素B6和水组成，其中葡萄糖31.0g～32.0g，干酪素2.95g～3.05g，磷酸氢二钾0.95g～1.05g，硫酸镁0.6g～0.7g，维生素B6 为0.011g～0.012g，用水定容至1L。
上述扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基为液体发酵培养基。
上述扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基可按常规方法配制，灭菌条件为：温度121℃，压力范围0.1MPa～0.15MPa，时间为30min。
上述扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基在接种前需将其冷却至35℃以下。
上述扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基在接种时接种量要控制在培养基重量比的10%以内。
上述扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基中，碳源为葡糖糖，氮源为干酪素，添加微量元素为维生素B6，其最优配比为：葡萄糖31.4g，干酪素3g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁0.64g，维生素B6为0.0115g，用水定容至1L。
下面结合具体实施例对利用本发明的扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基生产该菌菌丝的过程及效果作进一步的说明。
实施例1：从自然侵染扁座壳孢菌的粉虱虫尸上分离纯化获得该菌，并借助形态特征及分子生物学证据对其进行鉴定。将其接种至上述培养基和对照PDB培养基中，分别按照常规方法进行菌丝发酵生产。结果表明扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基的菌丝干重达26.1 g/L，为对照培养基菌丝干重6.86g/L的3.8倍。其中，扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基按最优配比进行配制。
实施例2：从自然侵染扁座壳孢菌的粉虱虫尸上分离纯化获得该菌，并借助形态特征及分子生物学证据对其进行鉴定。将其接种至上述培养基和对照PDB培养基中，分别按照常规方法进行菌丝发酵生产。结果表明扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基的菌丝干重达24.12 g/L，为对照培养基菌丝干重6.61g/L的3.65倍。其中，扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基配方为：葡萄糖32.0g，干酪素3g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁0.7g，维生素B6 0.012g，用水定容至1L。
实施例3：从自然侵染扁座壳孢菌的粉虱虫尸上分离纯化获得该菌，并借助形态特征及分子生物学证据对其进行鉴定。将其接种至上述培养基和对照PDB培养基中，分别按照常规方法进行菌丝发酵生产。结果表明扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基的菌丝干重达23.7 g/L，为对照培养基菌丝干重6.59g/L的3.6倍。其中，扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基配方为：葡萄糖31.0g，干酪素2.95g，磷酸氢二钾0.95g，硫酸镁0.6g，维生素B6 0.011g，用水定容至1L。
以上是本发明的较佳实施例，凡依本发明技术方案所作的改变，所产生的功能作用未超出本发明技术方案的范围时，均属于本发明的保护范围。

Claims (3)

1.一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，其特征在于：由葡萄糖、干酪素、磷酸氢二钾、硫酸镁、维生素B6和水组成，其中葡萄糖31.0g～32.0g，干酪素2.95g～3.05g，磷酸氢二钾0.95g～1.05g，硫酸镁0.6g～0.7g，维生素B6为0.011g～0.012g，用水定容至1L。
2.根据权利要求1所述的一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，其特征在于：所述扁座壳孢菌菌丝生长培养基为液体发酵培养基。
3.根据权利要求1所述的一种扁座壳孢菌菌丝快速生长培养基，其特征在于：所述扁座壳孢菌菌丝生长培养基中，碳源为葡萄糖，氮源为干酪素，添加微量元素为维生素B6，其最优配比为：葡萄糖31.4g，干酪素3g，磷酸氢二钾1g，硫酸镁0.64g，维生素B6为0.0115g，用水定容至1L。
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王震.扁座壳孢菌生理特性及乳悬剂的初步研究.《中国优秀硕士学位论文全文数据库 农业科技辑》.2009,(第12期),论文的第24页第2.1.3节、第25页第2.1.5节、第26-27页第2.2节.

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