CN113215051A - 一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法 - Google Patents
一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法 Download PDFInfo
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Abstract
本发明涉及微生物发酵技术领域，且公开了一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，所使用的米粉废水为以米粉生产过程中产生的废弃物，百香果皮为食品加工过程中的废弃物，处理方法为将果皮进行物理粉碎处理，使其颗粒均匀，利用米粉废水和百香果果皮生产饲用益生菌剂，并且利用生产的饲用益生菌剂进行仔猪的饲养试验，饲料中的乳酸菌的活菌数达到4.3*108cfu/mL。该乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，与其他制备饲用益生菌剂相比，经济上成本低、生产效率高、使用方便、生产周期短等优势，可用于仔猪的饲养，从而提高猪的食物消化率，更利于畜禽肠道吸收，改善畜禽的肠道环境，有促进动物生长的明显效果。
Description
技术领域
本发明涉及微生物发酵技术领域，具体为一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法。
背景技术
益生菌是指维持肠道微生物平衡的有机体，是存在于自然界的有益微生物。益生菌替代抗菌素做为兽药和饲料添加剂受到广泛重视和应用。可用来代替饲用抗生素,增强免疫力促进动物的健康和生长，提高饲养效率，降低饲养成本，用其代替饲用抗生素，可降低动物产品抗生素残留，抑制耐药性病原菌。广西是米粉和百香果生产大省，每年会产生大量的米粉废水及百香果皮。据不完全统计，我国每年米粉的生产量较大，但其生产过程中的米粉废水的利用率却极低，大部分米粉废水和百香果果皮被当做废弃物直接排出、扔掉，造成环境污染和资源浪费。
乳酸菌可以在动物肠道内大量定植，帮助食物消化和代谢，促进营养物质的吸收和利用；同时它还能与致病菌竞争，抑制有害菌的繁殖，改善肠道内环境，调整胃肠道菌群平衡，提高动物健康水平。在养猪生产中，应用乳酸菌制剂可以达到提高日增重、改善料重比、增强机体抗病力、提高成活率、降低腹泻率、提高经济效益的效果。因此，近几年有关乳酸菌制剂及其在养猪方面的应用研究越来越多，越来越深入。同时还能分解蛋白、淀粉、纤维素等组分，分解成小分子蛋白、小肽、游离氨基酸等易消化的成分，更利于畜禽肠道吸收。长期使用富含益生菌的饲料，能够改善畜禽的肠道环境，增强动物免疫力，促进动物生长的明显效果，有效地保障家畜产品的食用安全性。
目前的报道中米粉废水和百香果皮尚未出现将两者混合一起用益生菌进行发酵生产饲用益生菌剂的先例。将二者共同发酵处理，能提高处理效率，改善处理效果，降低成本，进一步实现资源化利用的需求，具有广阔的市场前景，为此我们提出了一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，与其他制备饲用益生菌剂相比，经济上成本低、生产效率高、使用方便、生产周期短等优势，可用于仔猪的饲养，从而提高猪的食物消化率，更利于畜禽肠道吸收，改善畜禽的肠道环境，增强动物免疫力，有促进动物生长的明显效果，解决了上述背景技术中所提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，所使用的米粉废水为以米粉生产过程中产生的废弃物，百香果皮为食品加工过程中的废弃物，处理方法为将果皮进行物理粉碎处理，使其颗粒均匀；
所述液态发酵培养基中将米粉废水和处理粉碎后的百香果皮分别作为发酵过程中重要原料。
所述乳酸菌液态发酵的方法，包括如下步骤，
(1)菌株固体、液体培养基
乳酸菌液体培养基：蛋白胨10.0克、牛肉浸取物(牛肉膏)10.0克、酵母提取液(酵母膏或酵母粉)5.0克、葡萄糖20.0克、乙酸钠5.0克、柠檬酸氢二胺2.0克、吐温-80 1.0ml、磷酸氢二钾2.0克、七水硫酸镁0.2克、七水硫酸锰0.05克，定容至1000ml，pH 6.2-6.4。培养时间为18-20小时；
固体培养基为液体培养基加20％琼脂。
灭菌方法：进行高压蒸汽灭菌，其中糖类灭菌条件为115℃，15min，其余成分灭菌条件为121℃，20min。
(2)菌株固体平板培养
从-80℃冰箱中取出乳酸菌的甘油管，在超净台中用100ml移液枪吸取100微升菌液，在固体培养基平板上涂布，将乳酸菌置于37℃细菌培养箱培养24h，在平板上刮取一环菌群，三区划线划到平板上，将置于37℃培养箱培养24h，取单菌落在平板上进行密集划线。
(3)菌株液体种子液培养
将乳酸菌接入含100ml培养基的500ml摇瓶放入37℃培养箱，200rpm，培养24-36h。
所述乳酸菌液体发酵的方法，将乳酸菌进行液体菌种按照2％～10％(W/W)接入发酵培养基中，进行发酵，温度30℃～42℃，发酵时间为24h-48h，获得饲用益生菌剂。
所述液体发酵制备得到的饲用益生菌剂中，总活菌数≥4.3*108cfu/mL。
本发明中检测菌剂中活菌数的方法为平板计数法。
有益效果如下：
该乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，产品中总活菌数最高可达4.3*108cfu/mL，利于畜禽肠道吸收，改善畜禽的肠道环境，增强动物免疫力，有促进动物生长的明显效果，生产废弃物变废为宝，实现废弃资源的再利用，减少废弃材料对环境的污染，大大降低生产成本，经济可行，具有广阔的市场应用价值。
具体实施方式
基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1：
本实施例对乳酸菌的接种比例进行了考察，分别按照不同(W/W)接种量将接入米粉废水和百香果果皮的培养基中进行发酵实验，发酵时间为24-36h。接种比例分别为2％、4％、6％、8％、10％，测定发酵产物的总菌落数，结果见表1。由表1所知，最佳种子液比例为6％。
表1不同菌种比例对发酵产物各理化指标的影响
实施例2：
本发明对发酵时间进行了考察，将乳酸菌接种比例为6％的液体种子液接入米粉废水和百香果果皮的液体培养基中，发酵温度37℃，见下表2。
表2不同发酵时间对发酵产物各理化指标的影响
实施例3：
本发明对饲用益生菌剂在仔猪饲养进行了考察。将乳酸菌按照6％(W/W)接种量加入米粉废水和百香果果皮的液体培养基中，发酵温度37℃，发酵时间36h，即得饲用益生菌剂。将普通的猪饲料作为空白对照组，以本发明的发酵饲料作为试验组进行试验。仔猪自由采食，饲喂1个月天，饲喂结果如表3。
表3本发明动物饲料对断奶仔猪的影响
由表3可以看出：和空白对照组相比，喂食本发明的饲料的试验组断奶仔猪日增重提高23.63％，料肉比降低12.24％，腹泻率降低73.5％，成活率提高4.34％。
以上对本发明实施例所提供的技术方案进行了详细介绍，本文中应用了具体个例对本发明实施例的原理以及实施方式进行了阐述，以上实施例的说明只适用于帮助理解本发明实施例的原理同时，对于本领域的一般技术人员，依据本发明实施例，在具体实施方式以及应用范围上均会有改变之处，综上所述，本说明书内容不应理解为对本发明的限制。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (8)
1.一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所使用的米粉废水为以米粉生产过程中产生的废弃物，百香果皮为食品加工过程中的废弃物；
所述乳酸菌液态发酵的方法，包括如下步骤，
步骤1、菌株固体、液体培养基
乳酸菌液体培养基：蛋白胨10.0克、牛肉浸取物(牛肉膏)10.0克、酵母提取液(酵母膏或酵母粉)5.0克、葡萄糖20.0克、乙酸钠5.0克、柠檬酸氢二胺2.0克、吐温-80 1.0ml、磷酸氢二钾2.0克、七水硫酸镁0.2克、七水硫酸锰0.05克，定容至1000ml，pH 6.2-6.4，培养时间为18-20小时；
步骤2、菌株固体平板培养
从-80℃冰箱中取出乳酸菌的甘油管，在超净台中用100ml移液枪吸取100微升菌液，在固体培养基平板上涂布，将乳酸菌置于37℃细菌培养箱培养24h，在平板上刮取一环菌群，三区划线划到平板上，将置于37℃培养箱培养24h，取单菌落在平板上进行密集划线；
步骤3、菌株液体种子液培养
将乳酸菌接入含100ml培养基的500ml摇瓶放入37℃培养箱，200rpm，培养24-36h。
2.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述步骤1中的灭菌方法为：进行高压蒸汽灭菌，其中糖类灭菌条件为115℃，15min，其余成分灭菌条件为121℃，20min。
3.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述步骤1中固体培养基为液体培养基加20％琼脂。
4.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述步骤3中乳酸菌液体发酵的方法，将乳酸菌进行液体菌种按照2％～10％(W/W)接入发酵培养基中，进行发酵，温度30℃～42℃，发酵时间为24h-48h，获得饲用益生菌剂。
5.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述步骤3中液体发酵制备得到的饲用益生菌剂中，总活菌数≥4.3*108cfu/mL。
6.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述检测菌剂中活菌数的方法为平板计数法。
7.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述百香果皮的处理方法为将果皮进行物理粉碎处理，使其颗粒均匀。
8.根据权利要求1所述的一种乳酸菌利用米粉废水和百香果果皮制备饲用益生菌剂的方法，其特征在于：所述液态发酵培养基中将米粉废水和处理粉碎后的百香果皮分别作为发酵过程中重要原料。
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Cited By (3)
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2021
- 2021-05-26 CN CN202110576418.7A patent/CN113215051A/zh active Pending
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