CN113773974A - 一种饲用酵母菌及其应用 - Google Patents
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Abstract
本发明公开了一种饲用酵母菌及其应用，涉及微生物饲料添加剂及制备技术领域，将酵母菌利用特有的水果皮进行晒干、进行粉碎过筛进行固态发酵后进行装袋包装；其中，将酵母菌在固态发酵中种子液的接种量2％～10％(V/V)接入培养基中，温度25℃～42℃，发酵20h～72h，菌落数在2.8*109cfu/g以上，所用于固态发酵培养基中特色水果果皮包括百香果果皮、火龙果果皮、香蕉果皮、荔枝皮等，使用废弃物作为发酵的原料，从而显著降低固态发酵生产成本。本发明所用的酵母菌属于饲用益生菌，维持肠道健康，提高动物免疫力，促进动物生长的明显效果，同时将广西特色水果果皮这类废弃物变废为宝，实现废弃资源的再利用，减少废弃材料对环境的污染，实现良好的生态效益。
Description
技术领域
本发明涉及微生物饲料添加剂及制备技术领域，具体为一种饲用酵母菌及其应用。
背景技术
目前，常见的饲料中添加各种益生菌制剂，不仅能够提高动物的免疫力和抗病，在生产性能上也得到了提高，一定程度上实现了养殖效益的增值，减少了抗生素与各种化学兽药误用、滥用，避免了对环境造成的污染，达到良好的生态效益。因此，益生菌制剂在动物生产中的应用越来越广泛。饲用益生菌在肠道发挥作用的物质基础就是通过维持肠道健康，以发挥营养调控作用；维持肠道健康，提高饲料利用率与机体免疫力，降低用药成本。
酵母菌作为益生菌制剂，由于其含有维生素、多种氨基酸，添加到饲料中，既能为动物提供多种营养，提高消化酶活性，改善胃肠道微生态平衡，提高动物采食量及其对矿物质、维生素的消化吸收率，又能增强免疫力。
广西是各类特色水果生产大省，每年会产生大量的水果果皮，包括百香果皮、荔枝果皮、火龙果皮和香蕉果皮。据不完全统计，我国每年水果食品制品生产加工量较大，但其生产过程中的各类果皮的利用率却极低，大部分水果果皮被当做废弃物直接处理、扔掉，造成环境污染和资源浪费。目前的报道中各类果皮尚未出现将其一起用酵母菌进行发酵生产饲料的先例。将其采用固态发酵的处理方式，能提高处理效率，改善处理效果，降低成本，进一步实现资源化利用的需求，具有广阔的市场前景，为此我们提出了新型的便捷的饲料生产方法。
发明内容
针对现有技术的不足，本发明提供了一种饲用酵母菌及其应用，所提供的酵母菌益生菌剂能够大大降低生产成本，提高经济效益，增强动物免疫力，改善畜禽的肠道环境，促进动物生长的明显效果，解决了上述背景技术中所提出的问题。
为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：一种饲用酵母菌及其应用，所述酵母菌(Yeast)，保藏号CGMCC No.22877，保藏于北京微生物菌种保藏中心。
该菌株在发酵过程中种子液的接种量2％～10％(V/V)接入发酵培养基中，温度25℃～42℃，发酵20h～72h，固态发酵酵母菌的菌落数在2.8*109cfu/g以上。
(1)菌株平板、液体培养
酵母YPD固体培养基：蛋白胨20g，葡萄糖20g，酵母浸膏10g，琼脂20g，加蒸馏水至1000ml，110℃灭菌20分钟；
酵母YPD液体培养基：蛋白胨20g，葡萄糖20g，酵母浸膏10g，加蒸馏水至1000ml，110℃灭菌20分钟；
种子液培养基：蛋白胨20g，葡萄糖20g，酵母浸膏10g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，加米粉废水至1000ml，110℃灭菌20分钟；
所述酵母菌，首先用固体培养基进行平板培养，接着用液体培养基进行摇瓶培养，接着按照5％(V/V)接种量接入液体培养基作为一级种子液，然后按照5％(V/V)接种量接入固体培养基作为二级种子液。
(2)固体发酵培养基：百香果皮40～50g/Kg，香蕉皮20～30g/Kg，火龙果皮30～40g/Kg，荔枝皮4～5g/Kg，浓缩玉米浆6～7g/Kg，玉米皮10～20g/Kg，小麦麸皮1～5g/Kg，糖渣20～30g/Kg，柠檬酸渣5～10g/Kg、硫酸锰0.01～0.1g/Kg，FeSO4 0.01～1g/Kg，磷酸氢二钾1～5g/Kg，氢氧化钙0.01～2g/Kg，添加10％～20％米粉废水。首先将百香果皮、香蕉皮、火龙果皮及荔枝皮进行晒干，将其和柠檬酸渣、小麦麸皮、处理后的糖渣进行混合进行粉碎，过2mm筛，混合搅拌。
(3)酵母菌固态发酵工艺
将步骤(1)种子液培养后的酵母菌采用比浊法调整浓度，按照接种量2％～10％(V/V)接入步骤(2)中制备的发酵培养基中，将其装入饲料专用的耗氧袋中，温度25℃～42℃，发酵24h～60h，即得饲料添加剂成品。
有益效果如下：
该饲用酵母菌及其应用，在发酵菌株上进行创新，选择酵母菌为饲用益生菌剂，适应多种条件，具有调整动物肠道微生物平衡、提高动物饲料转化率并同时有效的提高机体免疫力等作用；然后在发酵培养基上做出了改进，利用特色水果果皮进行固态发酵培养，大大降低生产成本，变废为宝，提高生产的综合效益，整个发酵工艺简单、易操作。
具体实施方式
基于本发明中的实施例，本领域普通技术人员在没有做出创造性劳动前提下所获得的所有其他实施例，都属于本发明保护的范围。
实施例1
本实施例对酵母菌的接种比例进行了考察，分别将酵母菌的种子液不同的接种量比例的接入固体发酵培养基，进行发酵实验，接种比例分别为2％、4％、6％、8％、10％，测定菌剂的菌落数及粗蛋白(干基计)，结果见表1。
表1不同菌种比例对酵母菌剂中活菌数的影响
| 种子液比例 | 总菌落数，cfu/g | 粗蛋白(干基计)，％ |
| 2％ | 1.34×10<sup>7</sup> | 22.68±0.01 |
| 4％ | 5.90×10<sup>8</sup> | 23.35±0.02 |
| 6％ | 2.30×10<sup>9</sup> | 25.11±0.04 |
| 8％ | 6.80×10<sup>8</sup> | 22.68±0.03 |
| 10％ | 8.40×10<sup>7</sup> | 20.26±0.01 |
实施例2
本发明对一种饲用酵母菌及其应用进行了考察，将酵母菌按照接种量6％(V/V)的接种量接入发酵培养基，发酵温度为25℃、30℃、32℃、35℃、37℃、40℃，测定总菌落数，cfu/g、粗蛋白(干基计)，％，结果见表2。因此，最佳发酵温度为35℃。
表2不同发酵温度对发酵产物各理化指标的影响
| 发酵温度，℃ | 总菌落数，cfu/g | 粗蛋白(干基计)，％ |
| 25 | 6.70×10<sup>7</sup> | 21.56±0.02 |
| 30 | 2.75×10<sup>9</sup> | 26.45±0.04 |
| 32 | 7.80×10<sup>8</sup> | 23.08±0.03 |
| 35 | 2.56×10<sup>8</sup> | 21.23±0.02 |
| 37 | 1.52×10<sup>8</sup> | 20.85±0.01 |
| 40 | 2.13×10<sup>7</sup> | 19.53±0.01 |
实施例3
本发明对一种饲用酵母菌及其应用进行了考察，对以下三种培养基进行比较：(1)培养基A：百香果皮40～50g/Kg，香蕉皮2.0～30g/Kg，火龙果皮30～40g/Kg，荔枝皮4～5g/Kg，浓缩玉米浆6～7g/Kg，玉米皮10～20g/Kg，小麦麸皮1～5g/Kg，糖渣20～30g/Kg，柠檬酸渣5～10g/Kg、硫酸锰0.01～0.1g/Kg，FeSO4 0.01～1g/Kg，磷酸氢二钾1～5g/Kg，氢氧化钙0.01～2g/Kg，添加10％～20％米粉废水；(2)培养基B：木薯渣30～40g/Kg，浓缩玉米浆6～7g/Kg，玉米皮10～20g/Kg，小麦麸皮1～5g/Kg，糖渣20～30g/Kg，柠檬酸渣5～10g/Kg、硫酸锰0.01～0.1g/Kg，FeSO4 0.01～1g/Kg，磷酸氢二钾1～5g/Kg，氢氧化钙0.01～2g/Kg，添加10％～20％米粉废水；(3)培养基C：火龙果皮30～40g/Kg，荔枝皮4～5g/Kg，浓缩玉米浆6～7g/Kg，玉米皮10～20g/Kg，小麦麸皮1～5g/Kg，糖渣20～30g/Kg，柠檬酸渣5～10g/Kg、硫酸锰0.01～0.1g/Kg，FeSO4 0.01～1g/Kg，磷酸氢二钾1～5g/Kg，氢氧化钙0.01～2g/Kg，添加10％～20％水；测定发酵产物的总菌落数，cfu/g、粗蛋白(干基计)，％，结果见表3。加入适量的百香果皮和米粉废水，一定程度上能够降低了生产成本，提高了生产的综合效益。
表3不同发酵培养基对发酵产物各理化指标的影响
| 发酵培养基 | 总菌落数，cfu/g | 粗蛋白(干基计)，％ |
| A | 2.50×10<sup>9</sup> | 25.56±0.02 |
| B | 2.45×10<sup>8</sup> | 21.46±0.04 |
| C | 6.78×10<sup>8</sup> | 22.55±0.03 |
实施例4
本发明对一种饲用酵母菌及其应用进行了考察。将酵母菌的种子液以6％的接种量接入发酵培养基，在30℃下培养48h。对其进行装袋发酵，即得饲料。将所制得饲料喂养的奶牛作为试验组，同时以未添加本发明饲料作为空白对照组，进行试验。奶牛自由采食，饲喂50天(预采食和正常采食)，饲喂结果如表4。
表4本发明益生菌剂饲料添加剂对奶牛的影响
由表4可以看出：和空白对照组相比，在饲料中添加本发明酵母菌生菌剂饲料的试验组奶牛日增重提高54.76％，平均产奶量提高了6.047％。
总菌落数的测定
参考国标GB 4789.2食品安全国家标准食品微生物学检验菌落总数测定。
粗蛋白质(干基计)的测定
参考国标GB/T 6432饲料中粗蛋白测定方法。
需要说明的是，在本文中，诸如第一和第二等之类的关系术语仅仅用来将一个实体或者操作与另一个实体或操作区分开来，而不一定要求或者暗示这些实体或操作之间存在任何这种实际的关系或者顺序。而且，术语“包括”、“包含”或者其任何其他变体意在涵盖非排他性的包含，从而使得包括一系列要素的过程、方法、物品或者设备不仅包括那些要素，而且还包括没有明确列出的其他要素，或者是还包括为这种过程、方法、物品或者设备所固有的要素。
尽管已经示出和描述了本发明的实施例，对于本领域的普通技术人员而言，可以理解在不脱离本发明的原理和精神的情况下可以对这些实施例进行多种变化、修改、替换和变型，本发明的范围由所附权利要求及其等同物限定。
Claims (7)
1.一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：所述酵母菌(Yeast)，保藏号CGMCCNo.22877，保藏于北京微生物菌种保藏中心，所述酵母菌的培养包括以下步骤：
S1、菌株平板、液体培养
酵母YPD固体培养基：蛋白胨20g，葡萄糖20g，酵母浸膏10g，琼脂20g，加蒸馏水至1000ml，110℃灭菌20分钟；
酵母YPD液体培养基：蛋白胨20g，葡萄糖20g，酵母浸膏10g，加蒸馏水至1000ml，110℃灭菌20分钟；
种子液培养基：蛋白胨20g，葡萄糖20g，酵母浸膏10g，硫酸镁0.5g，磷酸氢二钾1g，加米粉废水至1000ml，110℃灭菌20分钟；
S2、固体发酵培养基
百香果皮40～50g/Kg，香蕉皮20～30g/Kg，火龙果皮30～40g/Kg，荔枝皮4～5g/Kg，浓缩玉米浆6～7g/Kg，玉米皮10～20g/Kg，小麦麸皮1～5g/Kg，糖渣20～30g/Kg，柠檬酸渣5～10g/Kg、硫酸锰0.01～0.1g/Kg，FeSO4 0.01～1g/Kg，磷酸氢二钾1～5g/Kg，氢氧化钙0.01～2g/Kg，添加10％～20％米粉废水；
S3、酵母菌固态发酵工艺
将步骤S1种子液培养后的酵母菌采用比浊法调整浓度，按照接种量2％～10％(V/V)接入步骤S2中制备的发酵培养基中，将其装入饲料专用的耗氧袋中，温度25℃～42℃，发酵24h～60h，即得饲料添加剂成品。
2.根据权利要求1所述的一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：步骤S1中，所述酵母菌首先用固体培养基进行平板培养，接着用液体培养基进行摇瓶培养，接着按照5％(V/V)接种量接入液体培养基作为一级种子液，然后按照5％(V/V)接种量接入固体培养基作为二级种子液。
3.根据权利要求1所述的一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：步骤S2中首先将百香果皮、香蕉皮、火龙果皮及荔枝皮进行晒干，将其和柠檬酸渣、小麦麸皮、处理后的糖渣进行混合进行粉碎，过2mm筛，混合搅拌。
4.根据权利要求1所述的一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：所述步骤S3中发酵培养基中有香蕉皮、火龙果皮、百香果皮和荔枝果皮等，实现废弃资源的再利用，减少废弃材料对环境的污染，实现良好的生态效益。
5.根据权利要求1所述的一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：所述酵母菌菌株在发酵过程中种子液的接种量2％～10％(V/V)接入发酵培养基中，温度25℃～42℃，发酵20h～72h。
6.根据权利要求1所述的一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：所述固态发酵酵母菌的菌落数在2.8*109cfu/g以上。
7.根据权利要求1所述的一种饲用酵母菌及其应用，其特征在于：该酵母菌可在奶牛养殖中进行应用。
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