CN103181461A - 复合饲用微生态制剂及其制备方法 - Google Patents

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莫少华
张江
王晓娟
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Abstract

本发明提供了复合饲用微生态制剂及其制备方法,包括芽孢杆菌、酵母菌和乳酸菌。针对当前养殖中抗生素的滥用、抗药性的产生等问题,新型抗生素替代产品——益生菌的应用是现代养殖的趋势;本复合益生菌采用单菌深层液态发酵,生产成本低廉、活菌数高,是稳定高效的绿色饲料添加剂。

Description

复合饲用微生态制剂及其制备方法
技术领域
本发明涉及一种绿色饲料添加剂微生态制剂及其生产方法。 
技术背景
抗生素的应用在畜牧业产生了巨大的经济效益。调查表明,抗生素在畜牧业中的应用可使猪肉产量提高4%。但抗生素的大量使用所伴随的负面效应也日益突出,主要表现为病原微生物耐药性的产生以及药物在动物体内中残留,从而对人类的健康产生直接或者潜在的危害。抗生素在饲料中的应用遇到严峻的挑战。因此抗生素替代品(益生菌和酸制剂等)的研究与开发成为近年来绿色饲料添加剂的热点,其中益生菌的应用备受关注。作为益生菌的一种,复合益生菌制剂在动物生产中的作用是动物营养专家以及广大养殖生产人员所关注的焦点。复合益生菌是由乳酸菌(乳杆菌和粪肠球菌)、枯草芽孢菌和酿酒酵母菌组成,其中,乳酸菌可以产生大量乳酸,抑制病原菌的生长,而芽孢菌进入肠道,孢子萌发,同时在生长的过程中能够产生细菌素,消耗氧气,抑制好氧性病原菌的生长,酵母菌和芽孢杆菌可以分泌大量消化酶如蛋白酶、淀粉酶等,促进消化,提高饲料转化率,提高采食量。四种益生菌通过改善动物肠道的微生态环境和提高动物的免疫力而提高动物的生产性能,而且在动物产品中无残留。 
发明内容
本发明目的在于针对当前抗生素的滥用而发明的抗生素替代物,本产品无残留,无毒害,是绿色的健康的新型饲料添加剂。 
本发明提供一种用于微生态制剂的制备方法,其包括如下步骤: 
1)配制种子培养基500ml,121℃灭菌15分钟; 
2)将相应的冻存的菌种接种与种子培养基,乳酸菌静止培养18小时,芽孢菌和酵母菌摇床培养200rpm条件下培养18小时; 
3)配制发酵培养基500L,121℃灭菌15分钟; 
4)将2)培养得到的种子加入发酵罐中,发酵24小时; 
5)发酵结束后,收集发酵液,加入50%沸石粉,50%的稻壳粉低温干燥,各单菌混合后即制的复合微生态制剂。 
下面对本发明的技术内容做进一步说明。 
1)乳酸菌种子培养基为MRS肉汤,芽孢菌和酵母菌种子培养基为YPD。 
2)乳酸菌发酵培养基成分如下 
乳酸菌在发酵过程中,补氨水使pH值保持7.0左右。 
  原料   比例   500L用量(kg)
  红糖   3%   15
  豆粕   1%   5
  酵母粉   1%   5
  硫酸镁   0.05%   2.5
  硫酸锰   0.05%   2.5
芽孢菌发酵培养基成分如下: 
  原料   比例   500L用量(kg)
  玉米粉   3%   15
  豆粕   1%   5
  硫酸镁   0.05%   2.5
  硫酸锰   0.05%   2.5
酵母菌发酵培养基成分如下: 
  原料   比例   500L用量(kg)
  糖蜜   3%   15
  豆粕   1%   5
  酵母粉   1%   5
  硫酸铵   0.05%   2.5
  尿素   0.05%   2.5
发酵终止后,乳酸菌活菌数为1010CFU/ml,酵母菌为108CFU/ml,芽孢菌为109CFU/ml。 
加入载体干燥后,粉末中乳酸菌是乳酸菌活菌数为109CFU/g,酵母菌为108CFU/g,芽孢菌为109CFU/g。 
本发明发酵成本低廉,原料为糖蜜、红糖、玉米粉、豆粕及酵母粉等低成本原料及工业下脚料。发酵周期为36-42小时,周期短,耗能低。 
本微生态制剂可在仔猪、生长育肥猪、禽类及其它养殖动物中使用,添加量如下表所示: 
  动物类型   添加量%   g/吨
  仔猪   0.05   500
  生长育肥猪   0.02-0.05   200-500
  鸡鸭等家禽   0.02-0.05   200-500
  奶牛肉牛等   0.05-0.1   500-1000
  鹌鹑等特种动物   0.01-0.03   100-500
由本发明制备的复合微生态制剂室一种绿色的安全的饲料添加剂,是以菌制菌的方式来解决养殖动物腹泻、死亡及生长性能下降造成养殖效益下降等问题。 
下面在实施例中进一步说明本发明。 
实施例1复合益生菌在断奶仔猪的应用 
1.材料及方法 
1.1实验动物及分组:三元杂交猪(父本:杜洛克、母本:长大),28日龄断奶仔猪40头,随机分为两组,每组2个重复,每个重复10头,公母各半。试验组仔猪料中分别添加1000ppm复合益生菌;对照组,为空白日粮。饲料为采用4%的预混料(不含抗生素)自配而成,配方采用资源配方师软件制作 
1.2试验产品  复合益生菌 
1.3试验时间及地点 
试验时间:2010年6月9日-2010年7月9日 
试验地点:北京市资源亚太种猪有限公司 
1.4试验方法 
饲养管理:圈舍饲养,自由采食,自由饮水,通风换气良好,按常规程序进行防疫接种,日清圈2次。 
试验记录:试验期内由专人负责,认真记录试验猪饲料消耗情况、体重等。 
1.5数据处理与分析 
本试验的数据结果用SPSS12.0统计软件中的单因素方差分析法进行统计分析,若经F检验差异显著者再用邓肯法(Ducan)进行多重比较。 
2、结果与讨论 
2.1试验结果见下表 
注:试验期间无重大疾病发生 
同一列中肩标小写字母完全相同者表示差异不显著(P>0.05);小写字母完全不同者表示差异显著(P<0.05)。 
2.2结果分析 
2.2.1平均采食量方面,试验组比对照组提高1.8%,差异不显著(P>0.05)。 
2.2.2平均增重方面,试验组比对照组提高了6.4%,差异显著(p<0.05); 
2.2.3料肉比方面,试验组比对照组降低了4.3%,差异显著(p<0.05)。 
结果说明,复合益生菌可以较好促进仔猪生长。 
实施例2复合菌在家禽中的应用 
1.材料及方法 
1.1试验动物及分组试验动物和日粮试验鸡用1日龄AA商品代肉用公母混合雏鸡’1000只;试验日粮参照美国国家研究委员会标准(NRC,1994)和AA鸡饲养标准,自配饲料。 
1.2试验产品  复合益生菌 
将1000只试验用AA肉鸡鸡随机分成5组,每组200只,5个重复,每个重复40只,自由饮水和采食。对照组:空白对照组,饲喂基础日粮;抗生素组:基础  日粮+抗生素(10mg/kg):基础日粮中分别添加0,0.01%,0.05%,0.1%的益生菌组。 
2、结果与讨论 
2.1试验结果见下表 
Figure DEST_PATH_GSB00000783093900051
同一列中肩标小写字母完全相同者表示差异不显著(P>0.05);小写字母完全不同者表示差异显著(P<0.05)。 
注:试验期间无重大疾病发生 
2.2结果分析 
畜禽的生产性能包括增重、饲料转化效率和成活率,这是反映饲料添加剂有效性、安全性和经济性的重要指标。上表试验表明,空白对照组鸡的成活率显著低于其他各组(p<0.05),且0.05%组和0.1%组显著高于抗生素组,空白对照组和0.01%组(p<0.05),0.05%组和0.1%组42日龄的平均活体重和增重均显著高于其他各组(p<0.05),平均总增重比空白对照组分别增加6.6%(119.1g/只)和7.0%(127.4g/只),差异显著(p<0.05)。益生菌对饲料转化效率的改善幅度较大,其中,添加0.01,0.05,0.1%比空白对照组组提高8.8%,10.5%和11.6%,差异极显著(p<0.05),其中0.05%组和0.1%组显著高于抗生素组。从各项指标看,益生菌添加0.1%组>0.05%组>0.01组>抗生素组>空白对照组,说明益生菌能极显著提高饲料利用率(p<0.05)、增重和成活率(p<0.05),添加益生菌的效果好于抗生素。 
附图说明
图1是乳酸杆菌图;图2是粪肠球菌图;图3是形成芽孢的枯草芽孢杆菌图;图4是酵母菌图。 

Claims (6)

1.本发明提供一种用于微生态制剂的制备方法,其包括如下步骤:
1)配制种子培养基500ml,121℃灭菌15分钟;
2)将相应的冻存的菌种接种与种子培养基,乳酸菌静止培养18小时,芽孢菌和酵母菌摇床培养200rpm条件下培养18小时;
3)配制乳酸菌、芽孢菌及酵母菌发酵培养基500L,121℃灭菌15分钟;
4)将2)培养得到的种子加入发酵罐中,发酵约24小时;
5)发酵结束后,收集发酵液,加入50%沸石粉,50%的稻壳粉低温干燥,各单菌混合后即制的复合微生态制剂。
2.根据权利要求1的制备方法,其中所述的乳酸菌发酵培养基为红糖3%,豆粕1%,酵母粉1%,硫酸镁0.05%,硫酸锰0.05%;芽孢菌发酵培养基为玉米粉3%,豆粕1%,硫酸镁0.05%,硫酸锰0.05%;酵母菌发酵培养基为糖蜜3%,豆粕1%,酵母粉1%,硫酸铵0.05%,尿素0.05%。
3.根据权利要求1所述的制备方法,其中所述的乳酸菌种子培养基为MRS肉汤,酵母菌和芽孢菌为YPD。
4.根据权利要求1所述的制备方法,其中所述的复合微生物制剂包括酿酒酵母,乳酸杆菌,粪肠球菌,枯草芽孢杆菌。
5.根据权利要求1所述的制备方法,其特征在于将步骤4)判断乳酸菌发酵终点为pH不再下降,芽孢菌发酵终点为大量芽孢形成,酵母菌发酵终点为活菌数高于108CFU/ml。
6.一种饲用微生态制剂的制备方法,其根据权利要求1-5的方法制备而成。
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