CN103315139A - 一种单胃动物用复合微生态制剂及其制备方法 - Google Patents

Abstract

本发明公开了一种单胃动物的微生态制剂及其制备方法。本发明的组成为，植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌四种益生菌，四种益生菌的菌种之比为植物乳杆菌∶双歧杆菌∶枯草芽孢杆菌∶啤酒酵母菌=（3～1）∶（4～6）∶（2～1）∶（4～2）。四种益生菌的浓度范围为植物乳杆菌浓度范围为2×10⁷-10¹⁰cfu/ml、双歧杆菌浓度范围为5×10⁷-10¹⁰cfu/ml，啤酒酵母菌浓度范围为1×10⁷-10¹⁰cfu/ml，枯草芽孢杆菌浓度范围为3×10⁷-10¹⁰cfu/ml。该微生态制剂可以有效、快速的在单胃动物体内建立微生态平衡，减少抗生素的使用，缩短单胃动物对饲料的适应期，降低单胃动物幼仔的死亡率，提高单胃动物免疫力和饲料利用率，增加养殖效益。

Description

一种单胃动物用复合微生态制剂及其制备方法

技术领域

本发明属于畜禽饲料领域，尤其是一种单胃动物用植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌和枯草芽孢杆菌混合微生态制剂及其制备方法。 

背景技术

饲料添加剂对强化饲料营养价值、改善饲料品质、节约饲料成本以及促进动物健康生长有非常重要的作用。自上世纪50年代开始，在动物饲料中添加抗生素显著促进了动物生产，并对集约化畜牧业的发展做出了重大贡献，然而随着时间的推移，饲料中添加抗生素的危害日益显现，表现为病原微生物的抗药性逐渐增强，动物产品药物残留，对人类的健康和生态环境的安全带来了潜在的威胁。因此，抗生素替代品益生菌制剂、酸制剂、酶制剂以及一些复合生态制剂等的研究与应用，逐渐成为了畜牧工作者关注的热点。 

植物乳杆菌：乳酸菌的一种，革兰氏染色阳性、厌氧、无芽孢、耐酸、耐胆盐。植物乳杆菌能通过动物胃肠并定植于肠道发挥有益作用。 

双歧杆菌：可以合成多种消化酶类和B族维生素，参与机体的能量与维生素代谢,提高饲料转化率加强动物体的营养代谢。另外,双歧杆菌与其他厌氧菌产生的有机酸能使肠道环境的PH值和氧化还原电势下降,有利于某些矿物质如钙、铁、镁、锌等的吸收作用,从而起到促进畜禽生长和提高生长性能的作用。双歧杆菌还可以向宿主提供蛋白质早在世纪年代就有报道说双歧杆菌能够合成维生素和蛋白质,促进消化和吸收。 

枯草芽孢杆菌：调节肠道菌群，维持微生态平衡，能耐高温、高压和酸碱、生命力强，能够耐受胃酸和消化道上段胆碱盐和消化液破坏，芽孢杆菌能够产生维生素B1、B2、B6 等B 族维生素，维生素C、蛋白酶、淀粉酶和脂肪酶等酶以及多种代谢产物，对饲料的降解消化吸收和动物的营养代谢起到促进作用。 

啤酒酵母菌：改善胃肠道的菌群比例，促进有益菌的生长繁殖，排斥病原菌在肠黏膜表面的吸附定植，防止毒素和废物的吸收。酵母细胞壁富含蛋白质和B族维生素，可直接作为营养，提供动物多种营养成分，且富含甘露寡糖。因此，增加胃肠对铁锌镁钙元素的吸收利用，提高饲料利用率，可以增加动物的免疫力，提高动物血液免疫球蛋白的水平。 

发明内容

本发明的目的在于克服现有技术的不足之处，提供一种单胃动物用植物乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和啤酒酵母菌混合微生态制剂及其制备方法，本微生态制剂具有活菌含量高、保质期长、能替代抗生素用于动物饲料，用以维持动物肠道正常的微生物区系，从而促进动物生长、提高饲料报酬。 

本发明实现目的的技术方案是： 

一种单胃动物用植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌和枯草芽孢杆菌混合微生态制剂及其制备方法，包括植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌和枯草芽孢杆菌，所述植物乳杆菌终浓度为2×10⁷-10¹⁰ cfu/ml、双歧杆菌终浓度为5×10⁷-10¹⁰ cfu/ml，啤酒酵母菌终浓度为1×10⁷-10¹⁰ cfu/ml，枯草芽孢杆菌终浓度为3×10⁷-10¹⁰ cfu/ml，且植物乳杆菌：双歧杆菌：啤酒酵母菌：枯草芽孢杆菌=（3～1）：（4～6）：（2～1）：（4～2），采用以下制备方法：

    从健康的单胃动物——健康仔猪的肠道内容物中分离拟杆菌属的菌株，经过纯化、鉴定，安全性实验后，经发酵、离心得到湿菌体，和植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌根据肠道微生物好氧菌和厌氧菌的比例混合，接种于培养基上形成制剂。通过添加饮水的方式喂养，帮助单胃动物建立肠道微生态平衡，提高免疫力，从而增强单胃动物提高胃肠功能，防止单胃动物腹泻的发生。

    本发明所说的混合微生态制剂的制备方法包括以下步骤： 

（1）制备混合微生态制剂的培养液；

（2）植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌用活菌数计数法进行计数，得到活菌的数量，然后按比例混合置于培养液中；

（3）将含有混合微生物的培养液分装，即的混合微生态制剂。

本发明中，植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌均为已知菌种，市场可以购得，或采用常规方法制备即可。 

本发明的优点和有益效果为： 

1、本发明制备的混合微生态制剂具有耐酸、耐碱、耐热、抑制肠道有害菌群（如大肠杆菌）的生长和繁殖，该混合微生态制剂作为动物饲料添加剂，可替代现有动物饲料中的抗生素，可改善动物胃肠道微生物区系、促进动物健康生长、增强动物免疫机能、提供营养因子、提高饲料转化率、促进营养物质的吸收、降低动物腹泻率，可提高仔猪、仔鸡的生产性能。

2、本发明中含有四种高质量的有效菌，各菌种严格按微生态学规律进行选种、育种，保证菌种的优良，活菌含量高，其保质期长达24个月，具有良好的微生态调节和增强免疫力、促生长作用，且质量稳定，安全，可靠，绿色、环保、无污染。 

具体实施方式

下面，举实施例说明本发明，但是，本发明并不限于下述的实施例。 

实施例： 

一种单胃动物用植物乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和啤酒酵母菌混合微生态制剂及其制备方法。

步骤是： 

（1）培养基的制备（g/L）

植物乳杆菌、双歧杆菌：蛋白胨10，牛肉膏10，酵母浸膏5，葡萄糖5，磷酸氢二钾2，乙酸钠5，柠檬酸铵2，硫酸镁0.2，硫酸锰0.05，吐温801，琼脂20，pH 6.8，121℃高压灭菌20min。

枯草芽孢杆菌：氯化钠0.05，牛肉膏 0.1，蛋白胨0.1，琼脂20，pH 7.2，121℃高压灭菌20min。 

啤酒酵母菌：麦芽浸粉0.1，葡萄糖0.1，琼脂20，121℃高压灭菌20min。 

混合菌培养基：糖蜜40，蛋白胨10，葡萄糖1，磷酸氢二钾0.5，硫酸镁0.2，pH7.0~7.2，121℃高压灭菌25min。 

（2）种子培养液的制备 

用1ml无菌水将各菌菌体从斜面上洗下，接种于装有100ml各菌种子培养基的250ml三角瓶中，分别培养，至植物乳杆菌终浓度为10⁸cfu/ml、双歧杆菌终浓度为10⁸cfu/ml、啤酒酵母菌终浓度为10⁸cfu/ml、枯草芽孢杆菌终浓度为10⁸ cfu/ml。

（3）混合菌的培养：将检测合格的种子培养液按植物乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和啤酒酵母菌为2:5:1:3的比例，以10%的接种量接种于混合培养基中于30℃摇床上，前48小时振荡培养，后48小时静置培养。 

检测培养后的混合液，植物乳杆菌终浓度为2×10⁸cfu/ml、双歧杆菌终浓度为5×10⁸-10¹⁰ cfu/ml、啤酒酵母菌终浓度为1×10⁸cfu/ml、枯草芽孢杆菌终浓度为3×10⁸cfu/ml，将含有混合微生物的培养液分装，即的混合微生态制剂。 

Claims (6)

1.一种单胃动物用植物乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和啤酒酵母菌混合微生态制剂及其制备方法，其步骤是：（1）制备混合微生态制剂的培养液；（2）植物乳杆菌、双歧杆菌、啤酒酵母菌、枯草芽孢杆菌用活菌数计数法进行计数，得到活菌的数量，然后按比例混合置于培养液中；（3）将含有混合微生物的培养液分装，即的混合微生态制剂。

2.根据权利要求1所述的步骤（1）中，菌种培养基和混合微生物培养基配方为：植物乳杆菌、双歧杆菌：蛋白胨10，牛肉膏10，酵母浸膏5，葡萄糖5，磷酸氢二钾2，乙酸钠5，柠檬酸铵2，硫酸镁0.2，硫酸锰0.05，吐温801，琼脂20，pH 6.8，121℃高压灭菌20min；枯草芽孢杆菌：氯化钠0.05，牛肉膏 0.1，蛋白胨0.1，琼脂20，pH 7.2，121℃高压灭菌20min；啤酒酵母菌：麦芽浸粉0.1，葡萄糖0.1，琼脂20，121℃高压灭菌20min；混合菌培养基：糖蜜40，蛋白胨10，葡萄糖1，磷酸氢二钾0.5，硫酸镁0.2，pH7.0~7.2，121℃高压灭菌25min。

3.根据权利要求1所述的步骤（2）中，其特征在于：所述的植物乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和啤酒酵母菌的重量份数之比为植物乳杆菌∶双歧杆菌∶枯草芽孢杆菌∶啤酒酵母菌=（3～1）∶（4～6）∶（2～1）∶（4～2）。

4.根据权利要求3所述的植物乳杆菌、双歧杆菌、枯草芽孢杆菌和啤酒酵母菌的重量份数最佳比例为植物乳杆菌∶双歧杆菌∶枯草芽孢杆菌∶啤酒酵母菌=2∶5∶1∶3。

5.根据权利要求1所述的步骤（2）中，其特征在于：培养后的混合液中，植物乳杆菌浓度范围为2×10⁷-10¹⁰ cfu/ml、双歧杆菌浓度范围为5×10⁷-10¹⁰ cfu/ml，啤酒酵母菌浓度范围为1×10⁷-10¹⁰ cfu/ml，枯草芽孢杆菌浓度范围为3×10⁷-10¹⁰ cfu/ml。

6.根据权利要求5中植物乳杆菌的最佳浓度为2×10⁸cfu/ml、双歧杆菌最佳浓度为5×10⁸-10¹⁰ cfu/ml、啤酒酵母菌最佳浓度为1×10⁸cfu/ml、枯草芽孢杆菌最佳浓度为3×10⁸cfu/ml。