CN101836979A

CN101836979A - 4-叔丁基-5-(1,2,4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途

Info

Publication number: CN101836979A
Application number: CN200910226728A
Authority: CN
Inventors: 胡艾希; 夏曙; 覃智; 向建南; 李珺姊
Original assignee: Hunan University
Current assignee: Hunan University
Priority date: 2009-12-25
Filing date: 2009-12-25
Publication date: 2010-09-22
Anticipated expiration: 2029-12-25
Also published as: CN101836979B

Abstract

本发明公开了一类化学结构式(I)所示的4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途。

其中，I式中X₁选自：氢，羟基，甲氧基，硝基，氨基和氯；X₂选自：氢，硝基，氨基，氯，溴和碘；X₃选自：氢，甲基，乙基，硝基，甲氧基，氯，溴，氨基和二甲氨基；X4选自：氢，硝基，氨基，氯，溴和碘。4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑(I)对于人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人鼻咽癌细胞等具有良好的抑制活性，可用于制备抗肿瘤药物。

Description

4-叔丁基-5-(1,2,4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途

技术领域

本发明涉及一类化合物的医药用途，具体是4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途。

背景技术

专利(CN101602761)描述了4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的制备与杀菌活性。4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途没有研究报道。

发明内容

本发明的目的在于提供一类化学结构式(I)所示的4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途。

其中，I式中X₁选自：氢，羟基，甲氧基，硝基，氨基和氯；X₂选自：氢，硝基，氨基，氯，溴和碘；X₃选自：氢，甲基，乙基，硝基，甲氧基，氯，溴，氨基和二甲氨基；X₄选自：氢，硝基，氨基，氯，溴和碘。

本发明的目的还在于提供所述4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑对于人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人鼻咽癌细胞等具有良好的抑制活性，在制备抗肿瘤药中应用。

本发明与现有技术相比具有如下优点：

首次发现4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑对于人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人鼻咽癌细胞等具有良好的抑制活性，可用于制备抗肿瘤药物。

具体实施方式

以下实施例旨在说明本发明而不是对本发明的进一步限定。

实施例1～94-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑抗肿瘤活性

本发明优选化合物：4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(2-羟基苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(2-羟基-5-溴苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(2-羟基-3，5-二溴苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(2-羟基-3，5-二氯苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(2-羟基-3，5-二碘苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(4-二甲氨基苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(4-甲氧基苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(4-乙氧基苄亚氨基)噻唑；4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-(2，4-二氯苄亚氨基)噻唑。

1.抗肿瘤活性原理

MTT法生物活性测试又称MTT比色法，是一种检测细胞存活和生长的方法。MTT分析法以活细胞代谢物还原剂噻唑蓝[3-(4，5-二甲基-2-噻唑)-2，5-二苯基溴化四氮唑；3-(4，5-dimethylthiazol-2-yl)-2，5-diphenyl-tetrazolium bromide，MTT]为基础。MTT为黄色化合物，是一种接受氢离子的染料，可作用于活细胞线粒体中的呼吸链，在琥珀酸脱氢酶和细胞色素C的作用下四氮唑环(tetrazolium)开裂，生成蓝色水不溶性的甲瓒(Formazan)结晶并沉积在细胞中，甲瓒结晶的生成量仅与活细胞数目成正比(死细胞中琥珀酸脱氢酶消失，不能将MTT还原)。二甲基亚砜(DMSO)能溶解细胞中的甲瓒，用酶联免疫检测仪在570nm波长处测定其光吸收值，可间接反映活细胞数量。在一定细胞数范围内，MTT结晶形成的量与细胞数成正比。

2.抗肿瘤活性实验

试样：4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑。

细胞系：宫颈癌细胞系HeLa；肝癌细胞系Bel 7402；鼻咽癌细胞系CNE 2(中南大学湘雅医学院细胞库提供)。

试剂：噻唑蓝(MTT)、RPMI 1640培养液、新生牛血清、抗生素(美国英杰生命技术公司)；胰酶(美国AMRESCO公司)；96孔培养板(美国英杰生命技术公司)；二甲基亚砜(美国Sigma公司)。

仪器：HFsafe-1500型超净工作台、HF151UV型CO₂培养箱(上海力申科学仪器有限公司)；XSP-15C型倒置显微镜(上海长方光学仪器有限公司)；Multiskan MK3型酶标仪(美国Thermo公司)；超纯水制备仪(美国Milli-Q公司)。

实验操作：试样对于hela细胞、Bel 7402细胞和CNE 2细胞的测试。每种细胞的实验操作过程相同，一次实验过程中，每种试样设置5个浓度梯度，每个浓度四个平行试样，并通过空白组对照得出结论。

1)倒掉长满癌细胞的培养瓶中的培养基，加入5mL PBS清洗，倒掉PBS，加入1mL胰酶，放入37℃、5％CO₂培养箱。

2)取出培养瓶，加入RPMI 1640培养基，用吸管反复吸打吹散细胞。

3)细胞悬液接种于96孔培养板，第1孔不加细胞悬液，其余每板100μL(约10000个细胞)，放入37℃、5％CO₂培养箱中培养中48小时。

4)试样配置。用DMSO作为溶剂，配置浓度梯度为0.5μmol/mL、0.25μmol/mL、0.1μmol/mL、0.05μmol/mL、0.0025μmol/mL的溶液。

5)吸取每孔内的悬浮液，加入试样，放入37℃、5％CO₂培养箱中培养中48小时。每组实验平行3次。

6)取出上药48小时的96孔培养板，吸出每孔培养液，每孔120μL PBS清洗一次，加入每孔20μL 5mg/mLMTT液，放入37℃、5％CO₂培养箱中培养中3～4小时。

7)吸出孔内MTT后，加入每孔150μL DMSO液(包括第1空)，将培养板置于微孔板扳荡器上振荡，使结晶物溶解。

8)酶标仪检测各孔OD值(检测波长570nm)。

3.抗肿瘤活性评价

1)细胞抑制率计算：

细胞抑制率(％)＝(正常OD值-加药OD值)/正常OD值×100％

2)IC₅₀值计算

试样浓度对数值与细胞抑制率线性回归，计算试样对细胞的半数抑制浓度IC₅₀值。试样对于hela细胞、Bel 7402细胞和CNE 2细胞的IC₅₀见表1。

表1 4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑

对于hela细胞、Bel 7402细胞和CNE 2细胞的抑制活性

测试结果显示，被测试的4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑对于人宫颈癌细胞(hela细胞)、人肝癌细胞(Bel 7402细胞)、人鼻咽癌细胞(CNE 2细胞)等具有良好的抑制活性，可用于制备抗肿瘤药物。

Claims

1.一类化学结构式(I)所示的4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑的医药用途。

其特征在于，其中，I式中X₁选自：氢，羟基，甲氧基，硝基，氨基和氯；X₂选自：氢，硝基，氨基，氯，溴和碘；X₃选自：氢，甲基，乙基，硝基，甲氧基，氯，溴，氨基和二甲氨基；X₄选自：氢，硝基，氨基，氯，溴和碘。4-叔丁基-5-(1，2，4-三唑-1-基)-2-苄亚氨基噻唑(I)对于人宫颈癌细胞、人肝癌细胞、人鼻咽癌细胞等具有良好的抑制活性，可用于制备抗肿瘤药物。