CN101703776B - 一种抗感染剂长效注射液的制备方法 - Google Patents

Abstract

一种抗感染剂长效注射液的制备方法，涉及一种抗感染剂长效注射液；所述成分以1000mL注射液中包含；抗感染剂10～500g；助溶剂100～900g；阻滞剂、局麻剂或稳定剂0～100g；余量为油溶剂；所述注射液的制备方法为：①取10～500g抗感染剂先溶解于100～900g助溶剂中，混合均匀；②加入0～100g阻滞剂和/或局麻剂、稳定剂；③油溶剂加至全量，并充分搅拌形成均一体系；本发明采用将抗菌药先溶解于助溶剂中，再均匀分散于能与抗菌药互溶的油溶剂中以延长机体对药物的吸收速率，从而较长时间维持了药物在机体内的有效浓度，达到长效的作用，同时可以降低药物的毒性作用。

Description

一种抗感染剂长效注射液的制备方法

【技术领域】

本发明涉及一种抗感染剂长效注射液，尤其是涉及一种有效延长抗感染剂的释放时间并降低其毒性的抗感染剂长效注射液的制备方法和应用。

【背景技术】

目前，随着畜牧业集约化程度的不断提高，传染病大规模爆发的可能性也在不断的增加；传统药物制剂由于给药后药物消除快，药效维持时间短，但是需定时给药，工作量大，疗效也相应的受到限制。已知泰乐菌素(tylosin)注射液主要用于治疗支原体等感染，如猪气喘病等，在实际应用中需1日肌内注射2次，连用7日，工作量大，给养猪场实际操作带来不便，且成本高。在畜禽体内寄生的各种寄生虫，通常是通过畜禽的血液、粪、尿及其他分泌物、排泄物，将寄生虫生活史的“如虫体、虫卵或幼虫”带到外界环境中，再经过间接接触或直接接触等的途径侵入到另一个宿主体内寄生，并不断循环下去，形成传染链，由于寄生虫对宿主的危害一般是贯彻于移行和寄生的全部过程中，因此，寄生虫感染具有反复性，常规的抗寄生虫药给药后药效不持久，所以导致反复感染需反复给药，长效注射液一次给药，药物的缓慢释放，给药后血药浓度平稳，可以减少用药总剂量，正好解决了工作量大，需反复给药，且成本高的问题。

替米考星(tilmicosin)主要用于防治胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌、支原体等感染引起的肺炎、禽支原体病及泌乳动物乳腺炎，然而替米考星对心脏的毒性作用较大，可引起负性心力效应，导致心动过速和收缩力减弱，临床上用于牛，禁止用于猪、灵长动物和马，所以使用受到极大限制，在实际临床使用中或相关文献报道中均有替米考星注射液打死猪的案例发生。因此，有效提高药物的疗效和长效性已成为迫切需求，已知缓控释制剂可明显增大给药周期，降低给药次数，减小对动物的应激，给药后血药浓度平稳，有效避免峰谷现象，可以减少用药总剂量，从而减少毒性反应。由于长效注射液给药方便，用量准确，给药后峰浓度较传统注射液小，药物的缓慢释放极大的降低了毒副作用，提高了药物的安全性。

另外，一些在水中溶解度较低的药物，不易配制成注射液，并且在水中不稳定，水溶液型注射液随时间放置药物可发生水解，影响临床使用。

对于替米考星的参考文献(文件来源-互联网-检索关键词＝替米考星+死猪)：

1)、替米考星对猪传染性胸膜肺炎的治疗试验(周绪正，张继瑜，李剑勇，李宏胜，李金善，徐忠赞)，(中国农业科学院兰州畜牧与兽药研究所新兽药重点工程实验室，甘肃兰州730050)；

2)、替米考星-山东鲁抗舍里乐，山东鲁抗舍里乐药业有限公司(文件来源-互联网-检索关键词＝替米考星+山东鲁抗舍里乐)。

3)、中国专利申请(文件来源-国家知识产权局)；专利申请号200810017814.0申请了一种替米考星长效注射液的制备方法，该方法首先将10g替米考星溶解于10mL无水乙醇中，再均匀分散于蓖麻油中；专利200810017813.6申请了一种伊维菌素长效注射液的制备方法，方法与替米考星长效注射液配制方法相同，该方法配制出的注射液粘度大，给药剂量不准确，经过试验发现使用该药操作不方便，给临床带来极大不便，替米考星在无水乙醇中溶解度小，替米考星在无水乙醇中溶解度为7.8％，配制注射液困难。

【发明内容】

为了克服背景技术中的不足，本发明提出一种抗感染剂长效注射液的制备方法，本发明所述方法采用将抗菌药先溶解于助溶剂中，再均匀分散于能与抗菌药互溶的油溶剂中，注射进入宿主体内后，油便在注射部位暂时聚集并被宿主缓慢吸收，由于溶解于油中的抗菌药在局部形成药物贮库，所以可实现药物的缓慢分配并进入水性的间隙液，最终吸收进入血液；公知的抗感染剂在水中溶解度越低，吸收进入血液的速率越慢，因此本发明尤其适合于水中溶解度低的抗感染剂；根据本方法制备的注射液能在3d～40d甚至可在更长一段时间提供活性化合物的可控剂量施用。

为了实现上述发明目的，本发明采用如下技术方案：

一种抗感染剂长效注射液的制备方法，所述注射液的成分，1000mL注射液中包含“全部以重量计量”；

抗感染剂10～500g

助溶剂100～900g

阻滞剂、局麻剂或稳定剂0～100g

余量为油溶剂“也就是将油溶剂加至1000mL的全量”；

一种抗感染剂长效注射液的制备方法，包括如下步骤：

①取10～500g抗感染剂先溶解于100～900g助溶剂中，混合均匀；

②加入0～100g阻滞剂和/或局麻剂、稳定剂；

③油溶剂加至全量，并充分搅拌形成均一体系。

所述的抗感染剂长效注射液的抗感染剂为：β-内酰胺类抗生素类，氨基糖苷类，四环素类，氯霉素类，大环内酯类，林可霉素类，多肽类，磺胺类，喹诺酮类，抗寄生虫药的任一或两种或两种以上组合。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，其中所述β-内酰胺类抗生素类为青霉素G钾或钠盐、青霉素V、苯唑西林、氯唑西林、氨苄西林、阿莫西林、羧苄西林或头孢菌素的任一；其中所述的氨基糖苷类为链霉素、庆大霉素、卡那霉素、新霉素、阿米卡星、大观霉素或安普霉素的任一；其中所述四环素类为如土霉素、四环素、金霉素、多西环素、米诺环素或美他环素的任一；其中所述氯霉素类为甲砜霉素或氟苯尼考的任一；其中所述大环内酯类为如红霉素、泰乐菌素、替米考星、吉他霉素、螺旋霉素、竹桃霉素或泰拉霉素的任一；其中所述林可霉素类为林可霉素、克林霉素的任一；其中所述多肽类为多粘菌素B、黏菌素、多粘菌素M的任一；其中所述磺胺类为磺胺嘧啶、磺胺对甲氧嘧啶、磺胺间甲氧嘧啶、磺胺噻唑或磺胺氯吡嗪的任一；其中所述喹诺酮类为恩诺沙星、诺氟沙星、环丙沙星或达氟沙星的任一。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，其中所述抗寄生虫药包括伊维菌素、阿维菌素、多拉菌素、甲苯咪唑、芬苯达唑、康苯达唑、丁苯达唑、阿苯达唑、奥芬达唑、三氯苯咪唑、尼托比明、左咪唑、四咪唑、噻嘧啶、甲噻嘧啶、吡喹酮、氯硝柳胺、硫双二氯酚、硝氯酚、氯生太尔、莫能菌素、拉沙菌素、那拉菌素、马杜菌素、地克珠利或托曲珠利的任一。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，所述的助溶剂为乙醇、吡咯烷酮、N-甲基吡咯烷酮、N、N-二甲基甲酰胺、N、N-二甲基乙酰胺或四氢糠醇的任一或混合溶剂。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，所述油溶剂为油酸乙酯、蓖麻油、苯甲酸苄酯、肉豆蔻酸异丙酯、二甲硅油、中链甘油三酯或癸二酸二乙酯的任一或两种或两种以上组合。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，所述注射液的成分中添加的阻滞剂、局麻剂或稳定剂的任一或或两种或两种以上组合。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，所述阻滞剂为乙基纤维素或硬脂酸铝的任一。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，所述局麻剂为利多卡因、盐酸普鲁卡因、苯甲醇、三氯叔丁醇、丁卡因的任一。

所述的抗感染剂长效注射液的成分，所述稳定剂为氢化蓖麻油、脂肪酸甘油酯、聚乙烯吡咯烷酮、固体PEG、甘油脂肪酸酯、聚甘油脂肪酸酯、蔗糖酯、Span、Tween、Myrjs、Brijs、Paregal、聚氧乙烯蓖麻油、聚氧乙烯氢化蓖麻油、泊洛沙姆的任一。

本方法将抗菌药先溶解于助溶剂中，再均匀分散于能与其互溶的、药学可接受的油溶剂中。“助溶剂”是指能对该感染剂有较高的溶解度，在特定范围内，该成分可溶解制剂中的所有感染剂，形成稳定、澄清透明的溶液。“互溶”是指感染剂溶解于助溶剂形成的溶液与油以任何比例均匀混合后形成澄清透明的均一体系，不发生两相分离。感染剂在该体系中不析出。“药学可接受的油溶剂”是指该成分稳定不与感染剂相互作用产生有毒物质，脂肪油不能有恶臭味，不能含有液体石蜡等机体不能代谢的物质，并且成分惰性、无毒、无抗原、无刺激性、无热原、生物相容、给药后可从组织吸收，可完全排出体外。该制剂注射进入体内后，油在注射部位吸收缓慢，溶解于油中的抗菌药在局部形成药物贮库，缓慢分配进入水性的间隙液，最后吸收进入血液。抗感染剂在水中溶解度较低时，抗感染剂从油相扩散至水相后在给药部位析出，缓慢溶解于水性间隙液，因此本发明尤其适合于水中溶解度低的抗感染剂。

本发明有数个优点。依据本方法可显著延长机体对药物的吸收速率，从而较长时间维持了药物在机体内的有效浓度，达到长效的作用。

同时由于机体对药物的吸收速率减缓，药物在体内的峰浓度下降，有效降低了由于药物进入机体后迅速吸收达到中毒浓度引起的毒副作用。本发明的优点还在于其可溶解在水中溶解度较低的药物，制成含量为2～50％的注射液，由于本方法不含水，可解决药物在水中不稳定，水溶液随时间放置药物水解的问题。

本发明提供了调整药物释放速率和释放时间的功能。通过选择不同的油和油的不同用量来调整药物释放速率。制剂的黏度、溶剂与的亲脂性、溶剂在体内的代谢速率对药物的释放速率影响较大，同时不同的药物存在形式对药物的释放速率有不同的影响。药物的难溶性盐或酯的油溶液较其水溶性盐或原形有较慢的释放速率，选择合适的药物形式对制剂的缓释性非常重要。

由于采用了上述技术方案，本发明具有如下有益效果：

本发明同时也提供了一种降低抗感染剂毒性的方法，由于药物的缓慢释放，药物吸收进入机体的速率显著降低，导致药物在体内的达峰浓度也显著降低，因此，由于药物引起的对动物组织、器官的毒副作用显著减小。如通过由本发明所述的制备方法制备出的替米考星长效注射液有效降低了替米考星注射液对猪的毒性作用，可用于胸膜肺炎放线杆菌、巴氏杆菌、支原体等感染引起的猪呼吸道感染等疾病。

【附图说明】

图1实例1体外评价结果；

图2实例6体外评价结果；

图3丙氨酸氨基转移酶浓度测定结果；

图4门冬氨酸氨基转移酶浓度测定结果；

图5丙二醛浓度测定结果；

图6血药浓度测定结果。

【具体实施例】

实施例1替米考星长效注射液

100g替米考星(折纯后)加入至580g N-甲基吡咯烷酮中搅拌溶解，加入100g苯甲醇，搅拌均匀后蓖麻油定容至1000mL。

实施例2氟苯尼考长效注射液

400g N，N-二甲基甲酰胺和127g无水乙醇混匀后加入500g氟苯尼考(折纯后)，溶解后肉豆蔻酸异丙酯定容至1000mL，搅拌均匀即得。

实施例3泰妙菌素长效注射液

253g无水乙醇和96g苯甲醇、290g N-甲基吡咯烷酮搅拌均匀，加入100g泰妙菌素和10g硬脂酸铝，搅拌溶解，癸二酸二乙酯定容至1000mL。

实施例4泰乐菌素长效注射液

100g替米考星(折纯后)加入至580g N-甲基吡咯烷酮中搅拌溶解，加入96g苯甲醇，蓖麻油定容至1000mL即得。

实施例5伊维菌素长效注射液：

30g伊维菌素(折纯后)加入至100g N-甲基吡咯烷酮中搅拌溶解，加入96g苯甲醇，蓖麻油定容至1000mL。

实施例6盐酸多西环素长效注射液

100g盐酸多西环素、900gN-甲基吡咯烷酮，加入5g聚乙烯吡咯烷酮溶解后，用二甲硅油定容至1000mL。

实施例7体外评价

取实例1和6各1mL，密封在透析袋中，放置于500mLpH7.4PBS液中，在温度37℃、转速100rpm条件下透析。一定时间取出1mL透析液并补充等量新鲜透析液，紫外分光光度法测定透析液中的药物浓度。实施例1制备的替米考星长效注射液和实施例5制备的伊维菌素长效注射液的体外评价结果如图1和图2所示，结果表明，二种长效注射液在体外释放分别达5d和20d以上，体外评价半衰期分别为15.75h和4.81d。

实施例8安全性试验

4头猪臀部分点肌肉注射50mg/kg按实例1制备的替米考星长效注射液，分别于给药后4h、24h、48h、72h、96h前腔静脉采血5mL，37℃放置30min，4500rpm离心15min取血清，血样于-20℃保存备用，测定门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶、丙二醛的浓度。给药后动物精神状态正常，无呼吸急促、呕吐、惊厥的不良反应。门冬氨酸氨基转移酶、丙氨酸氨基转移酶浓度用改良赖氏法测定，丙二醛浓度用TBA法测定。测定结果如图3～图5所示。

替米考星对动物的毒性作用靶器官是心脏，引起负性心力效应，临床表现为心动过速和收缩力减弱，同时呼吸增数、呕吐、惊厥，最终心脏代偿不能导致死亡。替米考星能攻击生物膜中的多不饱和脂肪酸，引发脂质过氧化作用，并因此形成脂质过氧化物，如醛基(丙二醛，MDA)、酮基、羟基、羰基、氢过氧基或内过氧基，以及新的氧自由基等。脂质过氧化作用不仅把活性氧转化成活性化学剂，而且通过链式或链式支链反应，放大活性氧的作用。因此，初始的一个活性氧能导致很多脂类分解产物的形成，这些分解产物中，一些是无害的，另一些则能引起细胞代谢及功能障碍，甚至死亡。MDA的量常常反映机体内脂质过氧化的程度，间接反映出细胞损伤的程度。图5显示了给药后4头猪血液中MDA的平均浓度变化，结果表明随血药浓度升高伴随MDA浓度升高(与图6血药浓度测定结果比较)，但仍然处于正常范围内，说明依据本发明制备的替米考星长效注射液能有效降低替米考星对机体的脂质过氧化作用。替米考星同时具有肝毒性。图3和图4显示了给药后血液中丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶浓度的变化，结果表明，丙氨酸氨基转移酶和门冬氨酸氨基转移酶浓度均在正常范围内波动。

上述结果表明，采用本发明制备出的替米考星长效注射液使用于猪的呼吸道疾病的治疗是安全的。

实例9磷酸替米考星注射液和替米考星长效注射液在猪体内的血药浓度比较

8头猪随机分成两组，每组4只，第一组臀部10mg/kg肌肉注射实例1，第二组臀部10mg/kg肌肉注射Micotil注射液(30％磷酸替米考星注射液)，分别于15min、30min、1h、2h、4h、8h、12h、24h、36h、48h、72h、96h、120h前腔静脉采血5mL，37℃放置30min，4500rpm离心15min取血清，血样于-20℃保存备用。血药浓度测定：取10.0mL甲醇预洗SPE柱，10.0mL水平衡，精确吸取2.0mL血清样品过柱(流速1滴/s)，依次分别用35％乙腈-水5.0mL、纯水10.0mL、35％乙腈-水5.0mL洗涤，吹干，用2.5mL洗脱液洗脱，收集洗脱液，氮气吹至近干，流动相定容至1.0mL，涡动混合1min，静置10min，0.2μm的针筒式滤膜过滤，取100μL进样，HPLC分析。测定结果如图6，显示了给药后替米考星在体内的血药浓度变化趋势，替米考星长效注射液较磷酸替米考星注射液在猪体内峰浓度较小，血药浓度维持时间长。

Claims (1)

1.一种抗感染剂长效注射液的制备方法，其特征在于：折纯后的100g替米考星加入至580g N-甲基吡咯烷酮中搅拌溶解，加入100g苯甲醇，搅拌均匀后蓖麻油定容至1000mL。

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