CH672489A5 - - Google Patents

Description

BESCHREIBUNG Die Erfindung betrifft neue Isochinolin-Derivate, deren Herstellungsverfahren und diese enthaltende, pharmazeutische Zusammensetzungen.

Isochinolin-Verbindungen wurden z.B. in EP-A-108620 und EP-A-161102 hinsichtlich ihrer Antikrebs-Aktivität beschrieben. Es wurde nun eine neue Gruppe von Isochinolin-Verbindungen aufgefunden, die eine gute Antikrebs-Aktivität aufweisen. Die neuen Verbindungen der Erfindung besitzen auch besonders vorteilhafte physiko-chemische Eigenschaften.

Die Erfindung betrifft somit Verbindungen der allgemeinen Formel (1)

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worin R1 und R2, die gleich oder voneinander verschieden sein können, jeweils ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) [worin R4 für ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe (die gegebenenfalls durch eine Hydroxyl-, Alkoxy-, cyclische Ether- oder Cycloalkylgruppe substituiert sein kann), eine Alkenyl-, Çycloalkyl-, Ajyl-, Aralkyl-oder Aroylalkylgruppe steht] bedeuten, mit der Massgabe, dass zumindest einer der Reste R1 und R2 eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) darstellt; und R3 für ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Methylgruppe steht; sowie deren Salze, insbesondere deren physiologisch verträgliche Salze.

Die Verbindungen der Formel (1) können als Stereoisomere und/oder Tautomere vorliegen, und die Erfindung soll auch sämtliche dieser Isomeren der Verbindungen der Formel (1) einschliesslich deren Mischungen umfassen.

Die Verbindungen der Formel (1) können mit Basen Salze bilden. Es versteht sich, dass für die pharmazeutische Verwendung diese Salze physiologisch verträglich sein sollten, jedoch finden auch andere Salze, beispielsweise bei der Herstellung der Verbindungen der Formel (1) sowie von deren physiologisch verträglichen Salzen, Verwendung. Beispiele für Salze der Verbindungen der allgemeinen Formel (1) umfassen Alkalimetallsalze, wie Lithium-, Natrium- und Kaliumsalze, Aminsalze, z.B. Ammonium- und mono-, di- oder trisubstituierte Ammonium-, z.B. Triethylammoniumsalze, und Aminosäuresalze, z.B. Arginin-salze. Natriumsalze sind besonders wertvoll.

Nachfolgende Bezugnahmen auf die Verbindungen der Formel (1) und deren Verwendung und Herstellung sollten, soweit der Zusammenhang nichts anderes vorschreibt, als Bezugnahmen auf die Verbindungen und deren Salze, z.B. deren physiologisch verträgliche Salze, zu verstehen sein.

In den Verbindungen der Formel (1) kann, wenn die Gruppe R4 eine Alkylgruppe ist, diese beispielsweise eine geradkettige oder verzweigte C^g-Alkylgruppe oder insbesondere eine geradkettige oder verzweigte C^-Alkylgruppe, wie eine Methyl-,

Ethyl-, n-Propyl-, Isopropyl-, n-Butyl- oder n-Pentylgruppe, sein. Derartige Alkylgruppen können substituiert sein, beispielsweise durch eine Hydroxyl-, C^-Alkoxy-, z.B. Methoxy- oder Ethoxy-, 3- bis 7gliedrige cyclische Ether, z.B. Tetrahydrofuranyl-, oder C3_7-Cycloalkyl-, z.B. Cyclohexyl-, Gruppen.

Stellt R4 in den Verbindungen der Formel (1) eine Alkenyl-gruppe dar, kann sie z.B. eine C3_8-Alkenylgruppe, wie eine Allyl-gruppe, sein.

Steht in den Verbindungen der Formel (1) R4 für eine Cycloalkylgruppe, kann es sich beispielsweise um eine C3_7-Cycloalkyl-gruppe, wie eine Çyclohexylgruppe, handeln.

Bedeutet in den Verbindungen der Formel (1) R4 eine Aiyl-gruppe, kann diese z.B. eine Phenylgruppe sein, die gegebenenfalls durch eine Gruppe R5 substituiert ist, wobei R5 eine Hdroxy-, Ci_4-Alkoxy-, z.B. Methoxy-, oder eine Nitrogruppe darstellt.

Ist R4 eine Aralkylgruppe, kann diese beispielsweise eine Phen-Cj^-alkylgruppe, in der der Phenylteil gegebenenfalls durch eine Gruppe R5, wie vorstehend definiert, substituiert ist, sein, und vor allem kann sie eine Benzylgruppe sein.

Steht R4 in den Verbindungen der Formel (1) für eine Aroylalkylgruppe, kann es sich bei dieser z.B. um eine Benzoyl-Ci_3-Alkylgruppe handeln, in der der Benzoylteil gegebenenfalls an dem Phenylring durch eine Gruppe R5, wie vorstehend definiert,

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substituiert ist, und insbesondere kann es sich um eine Benzoyl-methylgruppe handeln.

Ist die Gruppe R3 in den Verbindungen der Formel (1) ein Halogenatom, kann sie ein Fluor-, Chlor-, Brom- oder Jodatom sein.

Gemäss einer Ausfuhrungsform betrifft die Erfindung Verbindungen der Formel (1), worin R1 und R2, die gleich oder voneinander verschieden sein können, jeweils ein WasserstofFatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) darstellen [worin R4 für ein Wasserstoffatom oder eine Alkylgruppe (die gegebenenfalls durch eine Hydroxyl-, Alkoxy- oder Cycloalkyl-gruppe substituiert sein kann), eine Aiyl- oder Aralkylgruppe steht], mit der Massgabe, dass zumindest einer der Reste R1 und R2 für eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) steht; und R3 ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Methylgruppe bedeutet, sowie deren Salze.

In den Verbindungen der Formel (1) stellt R3 bevorzugt eine Methylgruppe oder insbesondere ein Wasserstoffatom dar.

Spezielle Beispiele für die Gruppe R4 umfassen ein Wasserstoffatom, eine geradkettige oder verzweigte Q_5-Alkylgruppe, eine C^-Alkoxyethylgruppe (wie 2-Methoxyethyl), eine Tetrahy-drofuranylmethylgruppe (z.B. 2-Tetrahydrofiiranylmethyl), eine C5_7-Cycloalkylmethylgrappe (z.B. Çyclohexylmethyl), eine C^-Alkenylgruppe (z.B. Allyl), eine C5_7-Cycloalkylgruppe (z.B. Çyclohexyl), Phenyl, Phenyl-Ci_3-alkyl (z.B. Benzyl), wobei der Phenylteil gegebenenfalls durch eine Nitro- (z.B. p-Nitro-Gruppe substituiert sein kann, oder eine Benzoyl-C1_3-alkylgruppe (z.B. Benzoylmethyl).

In den Verbindungen der Formel (1) steht R4 vorzugsweise für eine geradkettige Ci_5-Alkylgruppe (z.B. Methyl oder n-Propyl), eine Tetrahydrofuranylmethylgruppe, eine Phenyl-Ci_3-alkyl-gruppe (z.B. Benzyl) oder eine Benzoyl-Ci_3-alkylgruppe (z.B. Benzoylmethyl).

Verbindungen der Formel (1), worin R1 ein Wasserstoffatom bedeutet und R2 eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) darstellt [worin R4 wie vorstehend definiert und insbesondere Benzyl oder Benzoylmethyl ist), und deren Salze sind bevorzugt.

Eine bevorzugte Gruppe der Verbindungen der Formel (1) sind diejenigen, worin R1 ein Wasserstoffatom bedeutet, R2 eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) darstellt und R3 für ein Wasserstoffatom steht, sowie deren Salze. Derartige Verbindungen, bei denen R4 für eine geradkettige Ci_5-Alkylgruppe (z.B. Methyl oder n-Propyl), eine Tetrahydrofuranylmethylgruppe, eine Phenyl-Ci_3-alkylgruppe (z.B. Benzyl) oder eine Benzoyl-Ci_3-alkylgruppe (z.B. Benzoylmethyl) steht, sind besonders bevorzugt.

Eine besonders wichtige erfindungsgemäse Verbindung ist Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure und deren Salze, insbesondere das Natriumsalz.

Eine weitere wichtige erfindungsgemässe Verbindung ist 2-Oxo-2-phenylethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]phosphorsäure und deren Salze, insbesondere das Natriumsalz.

Die Verbindungen der Formel (1) besitzen Antikrebs-Aktivität, insbesondere gegenüber Tumoren, wie Karzinomen, Sarkomen und Hepatomen.

Wird somit eine Verbindung der Formel (1) intraperitoneal oder intravenös an Mäuse mit einem subkutanen Tumor, der einer Implantation von S180-Zellen entstammt, verabreicht, zeigt die anschliessende Untersuchung, dass das Tumorwachstum signifikant vermindert worden ist und in einigen Fallen eine vollständige Rückbildung des Tumors stattgefunden hat. Aktivitäten gegenüber HT29 Human Colon Xenograft bei Nude-Mäusen und Maus Adenokarzinomen MAC30T wurden auch gezeigt.

Die erfindungsgemässen Verbindungen besitzen auch besonders günstige physiko-chemische Eigenschaften. So zeigten beispielsweise gegenüber den in der EP-A-108620 und EP-A-161102 beschriebenen Isochinolin-Verbindungen die erfindungsgemässen Verbindungen eine verbesserte Wasserlöslichkeit nahe bei dem physiologischen pH (z.B. pH 6,0 bis pH 8,0), der sie besonders für die Formulierung für die parenterale Verabreichung geeignet macht.

Gemäss einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung sind daher Verbindungen der Formel (1) oder deren physiologisch verträgliche Salze als Mittel zur Bekämpfung von Krebs, insbesondere Tumoren, vorgesehen.

Gemäss einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung ist die Verwendung einer Verbindung der Formel (1) oder eines physiologisch verträglichen Salzes derselben für die Herstellung eines therapeutischen Mittels zur Behandlung des menschlichen oder nicht-menschlichen, tierischen Körpers zur Bekämpfung von Krebs, insbesondere Tumoren, vorgesehen.

Es versteht sich, dass die erfindungsgemässen Verbindungen mit Vorteil in Verbindung mit einem oder mehreren anderen therapeutischen Mitteln, wie z.B. anti-emetischen Mitteln, immuno-suppressiven Mitteln oder verschiedenen Antikrebs-Mitteln, verwendet werden können.

Gemäss einem weiteren Aspekt der vorliegenden Erfindung ist eine pharmazeutische Zusammensetzung vorgesehen, die als aktiven Bestandteil eine Verbindung der Formel (1) oder ein physiologisch verträgliches Salz derselben gemeinsam mit einem oder mehreren pharmazeutischen Trägern oder Exzipienten umfasst.

Die erfindungsgemässen Verbindungen können für die Verabreichung auf jede geeignete Art formuliert werden, und die Erfindung schliesst daher auch pharmazeutische Zusammensetzungen ein, die eine Verbindung der Formel (1) oder ein physiologisch verträgliches Salz derselben, angepasst fur die Verwendung in der Human- oder Veterinärmedizin, umfassen. Solche Zusammensetzungen können für die Verwendung in herkömmlicher Weise in Mischung mit einem oder mehreren physiologisch annehmbaren Trägern oder Exzipienten vorliegen. Die Zusammensetzungen können gegebenenfalls weiterhin ein oder mehrere andere therapeutische Mittel, wie ein andersartiges Antikrebs-Mittel oder ein anti-emetisches Mittel oder ein immunosuppressives Mittel, enthalten.

Somit können die erfindungsgemässen Verbindungen für die orale, bukkale, topische, rektale oder, vorzugsweise, parenterale Verabreichung (z.B. durch Bolus-Injektion oder intravenöse Infusion) formuliert werden.

Injektionen sind sterile Produkte und können in Einheitsdo-sisfoim, z.B. als Ampullen, Phiolen, Infusionen mit kleinem Volumen odervorgefüllte Spritzen, oder in Mehrfachdosisbehältern, z.B. mit einem zugefügten Konservierungsmittel, formuliert werden. Die Zusammensetzungen können in Form von Lösungen, Suspensionen oder Emulsionen in wässrigen oder nicht-wässrigen Trägern vorliegen und können Formulierungsmittel, wie Antioxidantien, Puffer, Quellmittel, Chelatisierungsmittel, Antimikrobenmittel, die Löslichkeit verbessernde Mittel, oberflächenaktive Mittel und/oder die Spannkraft einstellende Mittel, enthalten. Alternativ kann der Wirkstoff (mit oder ohne zugefügten Substanzen) in trockener Form für die Zubereitung mit einem geeigneten Träger, z.B. sterilem, pyrogenfreiem Wasser oder Dextrose, vor der Verwendung vorliegen. Die Zubereitung in trockener form kann hergestellt werden, indem man ein steriles Pulver aseptisch in einzelne sterile Behältnisse füllt oder indem man eine sterile Lösung aseptisch in den jeweiligen Behälter abfüllt und gefriertrocknet.

Die erfindungsgemässen Verbindungen können auch als Zusammensetzungen für die orale Verabreichung formuliert werden. In Form von Tabletten oder Kapseln können sie übliche Exzipienten, wie Bindemittel, Füllstoffe, Gleitmittel, Desintegrationsmittel oder Netzmittel, enthalten. Die Tabletten können nach üblichen, im Stand der Technik bekannten Methoden überzogen werden. Orale, flüssige Präparate können in Form von beispielsweise wässrigen oder öligen Suspensionen, Lösungen, Emulsionen, Sirupen oder Elixieren vorliegen oder sie können als trocke4

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nes Produkt fur die Zubereitung mit Wasser oder einem anderen geeigneten Träger vor der Verwendung vorliegen. Solche flüssigen Präparate können übliche Additive, wie Suspendiermittel, oberflächenaktive Mittel, nicht-wässrige Träger, Konservierungsmittel, Zucker, süssende Mittel, Puffer, farbgebende Mittel, Antioxidantien und/oder geschmacksverleihende Mittel enthalten. Die Verbindungen können auch als Suppositorien formuliert werden, die z.B. übliche Suppositorienbasen, wie Kakaobutter oder andere Glyceride, enthalten.

Für die bukkale Verabreichung können die Zusammensetzungen die Form von Tabletten oder Pastillen annehmen, die auf übliche Weise formuliert werden.

Für die topische Verabreichung können die erfindungsgemässen Verbindungen als Salben, Cremes, Lotionen, Pulver, Pessare, Sprays, Aerosole oder Tropfen (z.B. Augen- oder Nasentropfen) formuliert werden. Salben und Cremes können z.B. mit einer wässrigen oder öligen Basis unter Zusatz eines geeigneten Verdik-kungs- und/oder Geliermittels formuliert werden. Solche Basen können somit z.B. Wasser und/oder ein Öl, wie flüssiges Paraffin oder ein pflanzliches Öl, wie Erdnussöl oder Rizinusöl, umfassen. Lotionen können mit einer wässrigen oder öligen Basis formuliert werden und enthalten im allgemeinen auch ein oder mehrere Emulgiermittel, Stabilisierungsmittel, Dispergiermittel, Suspendiermittel, Verdickungsmittel und/oder farbgebende Mittel. Pulver bzw. Puder können mit Hilfe jeder geeigneten Puderbasis, z.B. Talk, Lactose oder Stärke, gebildet werden. Tropfen können mit einer wässrigen oder nicht-wässrigen Basis, die auch ein oder mehrere Dispergiermittel, die Löslichkeit fördernde Mittel oder Suspendiermittel umfasst, formuliert werden. Aerosolsprays werden zweckmässig von unter Druck stehenden Packungen unter Verwendung eines geeigneten Treibmittels, z.B. Dichlordifluor-methan, Trichlorfluormethan, Dichlortetrafluorethan, Kohlendioxid oder eines anderen geeigneten Gases, freigegeben.

Die Zusammensetzungen können 0,1 bis 100% Wirkstoff enthalten.

Es ist möglich, eine erfindungsgemässe Verbindung gezielt auf einen Tumor anzuwenden, indem man in die Zusammensetzung spezielle Wirkstoffträgersysteme, wie Liposome, Albumin-Mikro-kügelchen oder monoklonale Antikörper, einschliesst.

Für die systemische Verabreichung wird die Tagesdosis, die für die Behandlung eines erwachsenen Menschen verwendet wird, im allgemeinen im Bereich von 5 mg bis 5000 mg, vorzugsweise 50 mg bis 2000 mg, liegen, die in 1 bis 5 aufgeteilten Tagesdosen, z.B. in Abhängigkeit vom Verabreichungsweg und dem Zustand des Patienten, verabreicht werden können. Umfassen die Zusammensetzungen Dosiseinheiten, wird jede Einheit vorzugsweise 10 mg bis 2000 mg Wirkstoff, z.B. 50 bis 1000 mg, enthalten.

Für die topische Verabreichung wird die Tagesdosis, die für die Behandlung des erwachsenen Menschen verwendet wird, im allgemeinen 0,1 mg bis 1000 mg in Abhängigkeit vom Zustand des Patienten betragen.

Die gemäss der Erfindung verwendbaren Verbindungen können mit Hilfe zahlreicher, im folgenden beschriebener Verfahren hergestellt werden, bei denen die verschiedenen Gruppen und Symbole, sofern nicht anders angegeben, wie für Formel (1) definiert sind.

Somit kann gemäss einem Verfahren (A) eine Verbindung der Formel (1) hergestellt werden, indem man eine Verbindung der Formel (2)

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worin einer der Reste R6 und R7 eine Gruppe -0P(0)(X')(X2) darstellt, worin X1 ein in eine Hydroxylgruppe überfuhrbares Atom oder eine in eine Hydroxylgruppe überführbare Gruppe ist und X2 eine Hydroxylgruppe oder X1 darstellt, und der andere ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(X1)(X2), wie bereits definiert, darstellt, um X1 zur Bildung einer Verbindung der Formel (1), z.B. durch Hydrolyse oder Etherspaltung, in Hydroxy zu überführen, umsetzt.

Beispiele fur X1 als Atome, die befähigt sind, in Hydroxy übergeführt zu werden, umfassen Halogenatome, wie Chlor- oder Bromatome.

Beispiele für X1 als Gruppen, die befähigt sind, in Hydroxy übergeführt zu werden, umfassen die Gruppe OX3[worin X3 beispielsweise eine Alkylgruppe (gegebenenfalls durch eine Hydroxyl-, Alkoxy-, cyclische Ether- oder Cycloalkylgruppe substituiert) oder eine Alkenyl-, Cycloalkyl-, Aiyl-, Aralkyl- oder Aroylalkylgruppe darstellt].

Die Umwandlung von X1 in Hydroxy kann unter Anwendung üblicher Verfahren durchgeführt werden. Somit kann z.B. ein Halogenatom durch eine Hydroxylgruppe durch Hydrolyse, z.B. basische Hydrolyse unter Verwendung einer geeigneten Base, wie eines Alkalimetallhydroxids in einem geeigneten Lösungsmittel, z.B. wässrigem Tetrahydrofuran, verdrängt werden.

Die Umwandlung von OX3 in Hydroxy kann unter Verwendung eines nukleophilen, z.B. eines Halogenid-Ions, wie eines Jodidions (erhalten z.B. aus einem alkalimetallhalogenid, wie Natriumjodid) oder eines quaternären Ammoniumhalogenids, wie Triethylaminhydrojodid, in einem inerten Lösungsmittel, wie einem Keton (z.B. Aceton oder Butan-2-on) oder einem substituierten Amid (z.B. Dimethylformamid), oder durch Umsetzung mit einem Trialkylsilyljodid, wie Trimethylsilyljodid, in einem Lösungsmittel, wie einem halogenierten Kohlenwasserstoff (z.B. Tetrachlorkohlenstoff) und anschliessende Hydrolyse, z.B. basische Hydrolyse, unter Verwendung einer geeigneten Base, wie eines Alkalimetallhydroxids, durchgeführt werden.

Die Umsetzung kann bei jeder geeigneten Temperatur, z.B. im Bereich von - 10 bis + 100 ° C, erfolgen.

Es versteht sich, dass entsprechend der herkömmlichen Praxis die Umsetzung derart gestaltet werden kann, dass, wenn -0P(0)(X1)(X2) die Gruppe -0P(0)(0X3)(0X3) darstellt, lediglich eine der beiden OX3-Gruppen in eine Hydroxylgruppe umgewandelt wird. Unter diesen Umständen werden sekundäre Phosphate der Formel (1) [d.h. worin R4 eine alkylgruppe (gegebenenfalls substituiert durch eine Hydroxyl-, alkoxy-, cyclische Ether- oder Cycloalkylgruppe) oder eine Alkenyl-, Cycloalkyl-, Aiyl-, Aralkyl- oder Aroylalkylgruppe darstellt] hergestellt. Alterntiv können beide Gruppen OX3 in Hydroxylgruppen unter Verwendung von Trimethylsilyljodid übergeführt werden. Unter diesen Umständen werden primäre Phosphate der Formel (1) [d.h. worin R4 ein Wasserstoffatom darstellt] hergestellt.

Es versteht sich weiter, dass die Umsetzung derart gestaltet werden kann, dass, wenn ein Alkalimetallhalogenid (wie Lithium-, Natrium- oder Kaliumjodid) verwendet wird, das geeignete Alkalimetallsalz einer Verbindung der Formel (1) hergestellt wird.

Gemäss einem weiteren Verfahren (B) kann eine Verbindung der Formel (1) hergestellt werden, indem man eine Verbindung der Formel (3)

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worin R3 wie in Anspruch 1 definiert ist und einer der Reste R8 und R9 eine Hydroxylgruppe darstellt und der andere ein Wasser-stoffatom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet, zur Umwandlung einer Hydroxylgruppe in der 9- und/oder 12-Stellung in eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4), in der R4 wie in Formel (1) definiert ist, oder eine -OP(O)(X1)(X2)-Gruppe, worin X1 und X2 wie vorstehend definiert sind, verestert und sofern eine 0P(0)(X1)(X2)-Gruppe eingeführt wurde, X1 in Hydroxyl überführt.

Die Umwandlung kann mit Hilfe herkömmlicher Mittel erfolgen, beispielsweise durch Umsetzung einer Verbindung der Formel (3) mit einem Halophosphat HalP(0)(0H)(0R4) oder HalP(0)pC')(X2) [worin Hai ein Halogenatom, z.B. Chlor, darstellt und X1 und X2 die vorstehend angegebene Bedeutung besitzen] oder einem Pyrophosphat (R40)(H0)(0)P-0-P(0)(0H)(0R4) oder (XO^CO^P-O-PCOXXOCX2) [worin X1 und X2 wie vorstehend definiert sind], erforderlichenfalls gefolgt von einer Umwandlung von X1 in Hydroxy gemäss der bei dem vorstehenden Verfahren (A) beschriebenen Arbeitsweise. Die Umsetzung mit dem Phosphorylierungsmittel kann zweckmässig in Anwesenheit einer Base, z.B. eines Alkalimetallhydrids, wie Natriumhydrid, oder eines Alkali- oder Erdalkalimetallcarbonats, z.B. Kaliumcarbonat, in einem inerten Lösungsmittel, wie einem Ether, z.B. Tetrahydrofuran, einem aromatischen Kohlenwasser-toff, wie Toluol, oder einem Keton, z.B. Aceton, oder einer Mischung derartiger Lösungsmittel erfolgen. Die Umsetzung kann zweckmässig bei einer Temperatur im Bereich von 0 bis 100 °C, z.B. bei 20 °C, durchgeführt werden. Es versteht sich, dass die Umsetzung mit einem Halophosphat HalP(0)(X')(X2) oder einem Pyrophosphat (X1)(X2)(0)P-0-P(0)(X1)(X2) zunächst zur Bildung einer Verbindung der Formel (2) führt, die gewünschtenfalls isoliert werden kann.

Gemäss einem weiteren Verfallen (C) kann eine Verbindung der Formel (1), in der R3 ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe darstellt, hergestellt werden, indem man ein Chinon der Formel (4)

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CO

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worin einer der Reste R10 und R11 eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) oder-OPCOXX'XX2) darstellt (worin X1 und X2 die vorstehende Bedeutung besitzen) und der andere ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) oder eine Gruppe -OPjtCOßC'XX2) darstellt (worin X1 und X? wie vorteilend definiert sind), mit einer Verbindung der Formel (5)

CH,

OCr

COOH

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worin R12 ein Wasserstoffatom oder eine Gruppe -CHO oder -COCH3 darstellt, kondensiert und sofern man von Verbindungen der Formel (4) ausgegangen ist, worin R10oder R11 -0P(0)(X')(X2) darstellt, X1 in Hydroxyl überführt.

Die Umsetzung zwischen den Verbindungen der Formeln (4) und (5) kann in Gegenwart eines Alkansäureanhydrids, wie Essigsäureanhydrid, bei erhöhter Temperatur, z.B. 100 °C, erfolgen. Die Umwandlung eines oder mehrerer X^Teile in Hydroxy kann unter Anwendung der bei dem vorstehenden Verfahren (A) beschriebenen Bedingungen erfolgen.

Die Verbindungen der Formeln (1), (2) und (3), worin R3 ein Halogenatom darstellt, können hergestellt werden, indem man 5 eine entsprechende Verbindung, in der R3 ein WasserstofFatom bedeutet, halogeniert. Es können Standard-Halogenierungsverfa-hen angewandt werden, beispielsweise durch l/msetzung mit einem N-Chlor-, N-Brom- oder N-Jodimid, z.B. N-Chlor-, N-Brom- oder N-Jodsuccinimid, oder Perchloiylfluorid in einem 10 inerten Lösungsmittel, wie Methylenchlorid, bei Raumtemperatur.

Die Verbindungen der Formel (2) können aus den Verbindungen der Formel (3) wie vorstehend bei dem Verfahren (B) beschrieben hergestellt werden. Alternativ können die Verbindun-15 gen der Formel (2), worin R3 für ein Wasserstoffatom oder eine Methylgruppe steht, hergestellt werden, indem man eine Verbindung der Formel (4), in der einer der Reste R10 und Ru eine Gruppe -0P(0)(X')(X2) darstellt und der andere für ein Wasser-stoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe 20 -0P(0)(X')(X2) steht, mit einer Verbindung der Formel (5) gemäss der Arbeitsweise des vorstehenden Verfahrens (C) kondensiert.

Die Verbindungen der Formel (3), in denen R3 für ein Was-serstoffatom oder eine Methylgruppe steht, können hergestellt 25 werden, indem man ein Chinon der Formel (6)

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(6)

(4)

35 in der einer der Reste R13 und R14 eine Hydroxylgruppe oder eine geschützte Hydroxylgruppe, wie eine Acyloxygruppe, z.B. Ace-toxy- oder Halomethylcarbonyloxygruppe, darstellt und der andere für ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine geschützte Hydroxygruppe, die bereits definiert, steht, mit einer 4o Verbindung der Formel (5) gemäss der Arbeitsweise des vorstehenden Verfahrens (C) kondensiert, woran sich erforderlichenfalls eine Entfernung der Schutzgruppe, z.B. unter sauren Bedingungen unter Verwendung von beispielsweise Chlorwasserstoffsäure in einem Lösungsmittel, wie Tetrahydrofuran, anschliesst. 45 Die Verbindungen der Formel (4) können hergestellt werden durch Phosphorylierung einer Verbindung der Formel (7)

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(7)

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in der einer der Reste R15 und R16 für eine Hydroxylgruppe und der andere für ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe steht, gemäss der bei dem vorstehenden Verfahren (B) beschriebenen Arbeitsweise.

60 Die Verbindungen der Formeln (5), (6) und (7) sind bekannte Verbindungen, die in der EP-A-161102 und der GB-A-2175587 beschrieben werden.

Die Zwischenprodukte der Formel (2) sind neue Verbindungen und bilden einen weiteren Bereich der Erfindung. Schlüssel-65 Zwischenprodukte der Formel (2) sind diejenigen, bei denen R3 ein WasserstofFatom bedeutet, R6 für ein WasserstofFatom steht und R7 eine Gruppe -0P(0)(X1)(X2) darstellt, in der X1 und X2 beide für OX3 stehen. Solche Zwischenprodukte, in denen X3 für

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eine Benzoylmetìiylgmppe oder, insbesondere, Benzyl steht, sind von besonderem Interesse.

Wird ein Salz einer Verbindung der Formel (1) gebildet, kann die entsprechende Säure mit Hilfe herkömmlicher Mittel durch Zugabe einer geeigneten Säure, z.B. einer Mineralsäure, wie Chlorwasserstoffsäure, erhalten werden.

Wird eine Verbindung der Formel (1) in der sauren Form gebildet, kann ein entsprechendes Salz mit Hilfe herkömmlicher Mittel, z.B. durch Zugabe einer Base, die das erforderliche Kation liefert, z.B. von Natriumhydroxid, oder eines Alkalimetallcarbo-xylats, wie Natriumcarboxylat (z.B. Natrium-2-ethylhexanoat), erhalten werden. Somit kann ein Salz einer Verbindung der Formel (1) hergestellt werden, indem man eine Verbindung der Formel (1) in saurer Form mit einer geeigneten Base in einem Lösungmittel, wie Wasser, einem Ether, z.B. Tetrahydrofuran,

oder einem Alkohol, z.B. Isopropylalkohol, oder einer Mischung hiervon, behandelt. Die Umsetzung kann zweckmässig bei Raumtemperatur erfolgen. Alternativ kann ein Salz einer Verbindung der Formel (1) erhalten werden, indem man eine geeignete Verbindung der Formel (2) mit einem Alkalimetallhalogenid (z.B. Lithiumjodid, Natriumjodid oder Kaliumjodid) in einem geeigneten Lösungsmittel, wie Wasser oder einem Keton (z.B. Aceton oder Butan-2-on) oder einem Gemisch davon, zweckdienlich bei Raumtemperatur behandelt. Ein Aminosäuresalz einer Verbindung der Formel (1) kann erhalten werden, indem man eine Verbindung der Formel (1) in saurer Form mit einer Aminosäure, z.B. L-Arginin-monohydrat, in Wasser bei Raumtemperatur behandelt.

Ein Salz einer Verbindung der Formel (1) kann in ein anderes Salz, z.B. ein physiologisch verträgliches Salz, durch Ionenaustausch unter Verwendung herkömmlicher Methoden übergeführt werden.

Wünscht man ein spezielles Enantiomeres der Formel (1), kann dies nach herkömmlichen Aufspaltungsmethoden, die per se bekannt sind, hergestellt werden. Somit können z.B. racemische Verbindungen der Erfindung als Salze mit optisch aktiven Basen, z.B. (+)-Dehydroabietylamin oder (R)-( + )- oder (S)-(—)-cx-Methylbenzylamin, gespalten werden. Alternativ können optisch aktive Verbindungen der Formel (1) aus optisch aktiven Zwischenprodukten, z.B. optisch aktiven Zwischenprodukten der Formel (5), hergestellt werden. Racemische Verbindungen der Formel (5), worin R12 für ein Wasserstoffatom steht, können z.B. als Salze mit optisch aktiven Basen, wie vorstehend, oder mit optisch aktiven Säuren, z.B. (L)-( + )- oder (D)-( —)-Weinsäure, gespalten werden. Verbindungen der Formel (5), worin R12 für CHO oder COCH3 steht, können ähnlich als Salze mit optisch aktiven Basen gespalten werden.

Die folgenden Beispiele erläutern die Erfindung. Sämtliche Temperaturen sind in °C angegeben. Sofern nicht anders angegeben, beziehen sich sämtliche UV-Spektrendaten auf Lösungen in Ethanol der jeweiligen Verbindungen.

Zwischenprodukt 1

Juglon-5-bis-(phenylmethyl)-phosphat

Man gab eine Lösung von 3,48 g Sulfuiylchlorid in 25 ml Toluol zu einer gerührten Lösung von dibenzylphosphit (6,08 ml) in 75 ml toluol unter Stickstoff. Die Mischung wurde 75 min unter Stickstoff gerührt, mit 75 ml 8%iger Natriumbicarbonatlö-sung gewaschen und die organische Schicht abgetrennt und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Nach Filtrieren wurde das Ritrat eingedampft und getrocknet, um 7,75 g Dibenzylchlor-phosphat in Form eines farblosen Öls zu ergeben. Man gab 1,81 g Kaliumcarbonat zu einer Lösung von 2,18 g 5-Hydroxy-1,4-naphthalindion in 300 ml Acetonitril unter Rühren bei Raumtemperatur. Es wurden 7,75 g frisch hergestelltes Dibenzylchlorphos-phat (siehe vorstehend) in 50 ml Acetonitril zugegeben und die Mischung 20 h gerührt. Hiernach gab man 907 mg Kaliumcarbonat und eine weitere Menge von 907 mg Kaliumcarbonat nach weiteren 24 h zu. Die Mischung wurde zur Trockene eingedampft und im Vakuum getrocknet, um ein Öl zu ergeben. Das Öl wurde einer Säulenchromatographie (Siliciumdioxid, 500 g, 0,062 bis 0,210 mm = 70 bis 230 mesh) unter Elution mit Methylenchlo-rid-Aceton (96/4) unterzogen. Man sammelte 250-ml-Fraktionen und vereinigte die Fraktionen 4-12 und verdampfte das Lösungsmittel. Nach dem Trocknen im Vakuum erhielt man 3,18 g litel-verbindung als orangefarbenen Feststoff; 8 (CDC13) 5,28 (OCH2), 7,38 (Ph).

Zwischenprodukt 2

Bis-(phenylmethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyI-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphat

Man gab 12 ml Essigsäureanhydrid zu einer Mischung von 625 mg N-Formyl-l,2,3,4-tetrahydroisochinolin-4-methyl-3-car-bonsäure und 3,165 g Zwischenprodukt 1. Die Reaktionsmischung wurde 30 min unter Rühren auf 100° erhitzt, dann abgekühlt und unter vermindertem Druck zur Trockene eingedampft. Das entstandene Öl wurde in 5 ml Methylenchlorid gelöst und Ether zugegeben und die Lösung in einem Aceton-Trockeneis-Bad gekühlt. Der entstandene, gelbe Feststoff wurde durch Filtrieren gesammelt und bei Raumtempertur getrocknet, um 1,16 g Titelverbindung zu ergeben.

8 (CDC13) 5,2-5,4 (OCH2), 5,23 + 5,13 (5H), 4,95 (14H), 1,55 (14CH3).

Zwischenprodukt 3

5,8,13,14-Tetrahydro-9-hydroxy-14-methylbenz[5,6]isoindolo [2, l-b]isochinolin-8,13-dion

312 ml Wasser und 169 ml konz. Chlorwasserstoffsäure wurden zu einer Suspension von 80,0 g 5,8,13,14-Tetrahydro-9-[joda-cetoxy]- 14-methylbenz[5,6] isoindolo[2, l-b]isochinolin-8,13-dion (Zwischenprodukt 9 in GB-A 2175587) in 1,3351 Tetrahydrofuran gegeben. Diese Mischung wurde gerührt und 18 h unter Stickstoff zum Rückfluss erhitzt und ein 550 ml-Anteil des Lösungsmittels wurde durch Destillieren bei Atmosphärendruck entfernt. Die entstandene Suspension wurde gerührt und während 4,5 h auf ca. 5° gekühlt, der Feststoff wurde durch Filtrieren gesammelt, mit kaltem Tetrahydrofuran gewaschen und im Vakuum getrocknet, um 48,8 g Titelverbindung zu ergeben;

Xmax 243 nm (MeOH), E}1022;

S (CDCI3) 12,98 (OH, s, 1H), 5,27 (5H, d, 16Hz, 1H), 5,16 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,98 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,55 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Zwischenprodukt 4

Dimethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochino!in-9-yI]-phosphat

(a) Eine 60%ige Dispersion von Natriumhydrid in Öl (200 mg) wurde mit 40-60° Petrolspirit (2x10 ml) unter einer Stickstoffatmosphäre ölfrei gewaschen. Man gab 25 ml trockenes Tetrahydrofuran zu dem Natriumhydrid und anschliessend 1,5 g Zwischenprodukt 3 in 150 ml trockenem Tetrahydrofuran. Die entstandene Lösung wurde 15 min bei 20° unter Stickstoff gerührt und dann mit einer Lösung von 723 mg frisch destilliertem Dimethylchlorphosphat in 5 ml trockenem Tetrahydrofuran behandelt. Nach 1 h wurde die Reaktionsmischung mit 500 ml Wasser verdünnt und mit 3 x 250 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem grünen Schaum eingedampft, der dann durch Säulenchromatographie an 100 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlorid-Methanol (29/1) gereinigt wurde, um 1,539 g Titelverbindung als grünen Schaum zu ergeben;

Ama* 241,6 nm, E{ 1052, 369,4 nm, E{ 158

8 (CDC13) 5,26 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,14 (5-H, d, 17H, 1H), 4,96 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,02 (OCH3, m, 6H), 1,57 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

672 489

8

Die folgenden Verbindungen wurden auf analoge Weise unter Verwendung von Zwischenprodukt 3 und des geeigneten Halo-phosphats hergestellt.

(b) Diethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6] isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]phosphat

(5,609 g) aus Zwischenprodukt 3 (4,0 g) und 2,305 g Diethyl-chlorphosphat;

JW 243,5 nm, E{ 1007, 372 nm, E{ 155;

8 (CDC13) 5,23 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,13 (5-H, d,. 16Hz, 1H), 4,93 CÏ4-H, q, 7Hz, 1H), 4,37 (OCH2CH3, m, 4H), 1,55 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,38 (QCH2CH3, m, 6H).

(c) Dipropyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphat

(2,068 g) aus 2,0 g Zwischenprodukt 3 und 1,339 g Dipropyl-chlorphosphat;

kwl 242,4 nm, E{ 940, 369,6 nm, E} 132;

8 (CDCI3) 5,25 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H),

4.95 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,27 (OCH2CH2CH3, m, 4H), 1,76 (OCH2CH2CH3, m, 4H), 1,56 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 0,97 (OCH2CH2CH3, m, 6H).

(d) Bis-(l-methylethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphat

(1,563 g) aus 1,5 g Zwischenprodukt 3 und 1,003 g Diisopro-pylchlorphosphat;

Timax 241,8 nm, Ef 880, 369,6 nm, E{ 132;

8 (CDCI3) 5,25 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,85-5,10 (14-H+ OCH(CH3)2, m, 3H), 1,56 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,30-1,45 (OCH(CH3)2, m, 12H).

(e) Dibutyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]phosphat

(1,628 g) aus 1,5 g Zwischenprodukt 3 und 1,143 g Dibutyl-chlorphosphat;

Àmax 241,8 nm, E} 956, 369,8 nm, Ej 129;

8 (CDC13) 5,25 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H),

4.96 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,31 (OCH2CH2CH2CH3, m, 4H), 1,62-1,80 (OCH2CH2CH2CH3, m, 4H), 1,56 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,32-1,52 (OCH2CH2CH2CH3, m, 4H), 0,92 (OCH2CH2CH2CH3, m, 6H).

(f) Bis-(tetrahydro-2-furanylmethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,1 -b]-isochinolin -9-yl]-phosphat

(1,00 g) aus 2,0 g Zwischenprodukt 3 und 6,78 g Bis-(tetrahy-dro-2-furanylmethyl)-chlorphosphat (frisch hergestellt aus Phosphortrichlorid und Tetrahydrofurfuiylalkohol), mit dem Unterschied, dass die Reinigung zunächst durch Säulenchromatographie an 650 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlo-rid-Aceton (4/1) erfolgte und der entstandene, gelbe Schaum weiter durch Säulenchromatographie an 70 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlorid-Methanol (96/4) gereinigt wurde; A,max 242,2 nm, E} 809, 369,8 nm, E' 117 ;

8 (CDClj) 5,24 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,16 (5-H, d, 17Hz, 1H), 4,96 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,30 (POCH2, m, 4H), 4,21 (OCH2CHO, m, 2H), 1,56 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

(g) Çyclohexylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-di-oxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphat

(1,409 g) aus 3,0 g Zwischenprodukt 3 und 2,9 g Çyclohexyl-methylchlorphosphat (frisch hergestellt aus Methyldichlorphos-phatund Cyclohexanol);

242,4 nm, E} 899, 369,6 nm, EJ50;

8 (CDC13) 5,23 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,13 (5-H, d, 16Hz, 1H),

4,95 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,64 (OCH, m, 1H), 4,01 (OCH3, m, 3H), 1,54 (14-CH3, d, 7H3, 3H).

(h) Bis-(2-propenyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxo-5 benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphat

(3,554 g) aus 3,0 g Zwischenprodukt 3 und 2,68 g Diallyl-chlorphosphat, mit dem Unterschied, dass die Reinigung durch Säulenchromatographie an 300 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlorid-Aceton (94/4) erfolgte;

10 Aroax 242,2 nm, E| 973, 371,8 nm, E{ 148;

8 (CDC13) 5,90-6,10 (CH, m, 2H), 5,20-5,45 (CH2, m, 4H), 5,25 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 17Hz, 1H), 4,94 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,75-4,90 (OCH2, m, 4H), 1,58 (14-CH3, d, 7H3, 3H).

15 (i) Dipentyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphat

(2,07 g) aus 2,0 g Zwischenprodukt 3 und 1,715 g Dipentyl-chlorphosphat (frisch hergestellt aus Phosphortrichlorid und Pen-tan-l-ol), mit dem Unterschied, dass nach Verdampfen das Öl in 20 50 ml Diethylether gelöst, 30 min bei 20° gerührt und der entstandene, gelbe Feststoff filtriert und mit Diethylether gewaschen wurde;

Ama* 242,4 nm, E} 913, 369,4 nm, E\ 137;

8 (CDC13) 5,24 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,14 (5-H, d, 17Hz, 1H), 25 4,96 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,20-4,40 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m, 4H), 1,65-1,85 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m, 4H), 1,56 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,20-1,45 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m, 8H), 0,88 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m, 6H).

30 (j) Bis-(2-methoxyethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin-9-yl]-phosphat

(2,07 g) aus 2,0 g Zwischenprodukt 3 und 1,55 g Bis-(2-methoxyethyl)-chlorphosphat (frisch hergestellt aus 2-Methoxyet-hanol und Phosphoroxychlorid), mit dem Unterschied, dass die 35 Säule mit Methylenchlorid-Aceton (4/1) eluiert wurde;

Xmax 242,2 nm, E} 920, 371,6 nm, E{ 142;

8 (CDC13) 5,23 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,13 (5-H, d, 17Hz, 1H),

4.95 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,48 (POCH2, m, 4H), 3,68 (POCH2CH2, m, 4H), 3,39 (OCH3, s, 3H), 3,40 (OCH3, s,

40 3H),1,57 (I4-CH3, d, 7Hz, 3H).

(k) Bis-(cyclohexylmethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphat (5,302 g) aus 4,0 g Zwischenprodukt 3 und 8,22 g Bis-(cyclo-45 hexylmethyl)-chlorphospaht (frisch hergestellt aus Phosphortrichlorid und Çyclohexylmethanol), mit dem Unterschied, dass nach Verdampfen der Feststoffe mit 100 ml Ether trituriert und aus Ethylacetat/Chloroform kristallisiert wurde;

Kzx 242,4 nm, Ei 778, 369,6 nm, Ei 119;

50 8 (CDC13), 5,25 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H),

4.96 /14-H, q, 7Hz, 1H), 4,09 (OCH2, m, 4H), 1,54 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

55 Zwischenprodukt 5 (a) Bis-(phenylmethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-di-oxobenz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphat

Man gab 1,017 g N-chlorsuccinimid zu einer gerührten Lösung von Dibenzylphosphit (3,3 ml) in 30 ml trockenem Ben-60 zol und rührte die entstandene Lösung bei 20°. Das Succinimid wurde durch Filtration entfernt und das Filtrat auf ein geringes Volumen (etwa 5 bis 10 ml) eingeengt. Diese Lösung wurde dann bei der folgenden Herstellung verwendet.

Eine 60%ige Dispersion von Natriumhydrid in Öl (134 mg) 65 wurde mit 40-60° Petrolspirit (2x15 ml) unter einer Stickstoffatmosphäre ölfrei gewaschen. Man gab 25 ml trockenes Tetrahydrofuran zu dem Natriumhydrid, gefolgt von einer Zugabe von 1,0 g Zwischenprodukt 3 in 100 ml trockenem Tetrahydrofuran. Die

9

672 489

entstandene, rote Lösung wurde in einem Eisbad auf 10° gekühlt und mit frisch hergestelltem Dibenzylchlorphosphat in Benzol (etwa 5 bis 10, siehe vorstehend) behandelt. Nach 2 h bei 10°

liess man die Reaktionsmischung sich auf 20° erwärmen und hielt sie 3 h bei dieser Temperatur. Die Reaktionsmischung wurde mit 500 ml Wasser verdünnt und mit 3 x 250 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem grünen Öl eingedampft, das in Methylenchlorid gelöst und auf eine Säule von 300 g Siliciumdioxid, hergestellt unter Verwendung von Methylenchlorid-Aceton (96/4), aufgebracht wurde. Die Säule wurde mit Methylenchlorid-Aceton (96/4) eluiert, und man sammelte 25 ml-Fraktionen. Die das Produkt enthaltenden Fraktionen wurden vereinigt und eingedampft, um 1,211 g Titelverbindung als grünen Schaum zu ergeben;

W 244 nm, E{ 743, 374 nm, El 112;

8 (CDC13) 5,20-5,40 (OCH2C6H5, m, 4H), 5,23 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,13 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,95 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,55 (14-CHa, d, 7Hz, 3H).

Die folgende Verbindung wurde auf ähnliche Weise hergestellt.

(b) Bis-[(4-nitrophenyl)-methyl]-[5,8,13,14-tetrahydro-14-

methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-

phosphat

(3,662 g) aus 2,0 g Zwischenprodukt 3 und 2,582 g Di-(p-nitrobenzyl)-chlorphosphat;

^ 244 nm, E} 330;

8 (d6-DMSO) 5,48 (OCH2, d, 8Hz, 4H), 5,42 (5-H, d, 18Hz, 1H), 5,32 (5-H, d, 18Hz, 1H), 4,79 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,48 (I4-CH3, d, 7Hz, 3H).

Zwischenprodukt 6

5,8,13,14-Tetrahydro- 12-hydroxy- 14-methylbenz[5,6]isoindolo [2,l-b]isochinolin-8,13-dion

Man gab 160 ml Essigsäureanhydrid zu einer Mischung von 20 g N-Formyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-4-methyl-3-carbon-säure und 31,78 g 5-Hydroxy-l,4-naphthochinon. Die Reaktionsmischung wurde 30 min auf 100 ° C erhitzt und über Nacht auf 4° abkühlen gelassen. Es bildete sich ein Niederschlag, der filtriert, mit Ether gewaschen, unter Vakuum getrocknet und durch Säulenchromatographie auf Silikagel unter Elution mit Methylenchlorid gereinigt wurde, um die Titelverbindung zu ergeben;

Xmax243 nm, Ej 1103, 397 nm, E{ 381.

Zwischenprodukt 7

Bis-(phenylmethyl)-[7-brom-5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]phosphat

Zu einer Lösung von 1,0 g Zwischenprodukt 5(a) in 50 ml Methylenchlorid gab man 0,604 g N-Bromsuccinimid in 50 ml Methylenchlorid. Nach 1 h bei 20° wurde die Reaktionsmischung eingedampft und der Rückstand durch Säulenchromatographie gereinigt, zuerst auf 150 g Siliciumdioxid unter Elution mit Chlo-roform-Aceton (96/4), gefolgt von 40 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlorid-Aceton (96/4), um 0,81 g Titelverbin-dung als braunen Schaum zu ergeben;

Xmax 242,0 nm, Ej 760, 378,0 nm, E{ 108;

8 (d6-DMSO) 5,42 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,34-5,17 (5-H+OCH2, m, 5H), 4,89 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,49 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Zwischenprodukt 8

Bis-(phenylmethyl)-[7-chlor-5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinoIin-9-yI]-phosphat

Zu einer Lösung von 1,0 g Zwischenprodukt 5(a) in 200 ml Chloroform gab man 0,226 g N-Chlorsuccinimid und danach eine gestättigte Lösung von Chlorwasserstoff in 0,5 ml Chloroform. Nach 30 min bei 20° wurde die Reaktionsmischung eingedampft, um einen gelben Schaum zu ergeben, der durch Säulenchromatographie an 100 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlorid-Aceton (96/4) gereinigt wurde, um 0,943 g gel-5 ben Schaum zu ergeben. Die Kristallisation dieses Schaums aus Aceton ergab 0,697 g Titelverbindung als gelben Feststoff;

241,6 nm, E{, 820, 377,2 nm, E} 125;

8 (d6-DMSO) 5,43 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,32-5,16 (5-H + OCH2, m, 5H), 4,87 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,49 (14-CH3, d, 10 7Hz, 3H).

Zwischenprodukt 9

Bis-(2-oxo-2-phenylethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphat 15 Man tropfte eine Lösung von 3,03 g Dicyclohexylcarbodimid in 125 ml Methylenchlorid während 3 h zu einer gerührten Lösung von 8,93 g Phosphorsäure-bis-(2-oxo-2-phenylethyl)-ester in 500 ml Methylenchlorid bei 20 °C. Die Reaktionsmischung wurde auf ein geringes Volumen (ca. 100 ml) eingedampft und 20 der ausgefallene Feststoff wurde durch Fütrieren entfernt. Das Filtrat wurde 1 h bei 20° gerührt und dann eingedampft, um rohes Phosphoiylierungsreagens als farbloses Öl zu ergeben.

Eine 60%ige Dispersion von Natirumhyrid in Öl (534 mg) wurde mit 40-60° Petrolether (2 x 25 ml) unter Stickstoffatmo-25 sphäre ölfrei gewaschen. Man gab 100 ml trockenes tetrahydrofuran zu dem Natriumhydrid und danach eine Lösung von 4 g Zwischenprodukt 3 in 400 ml trockenem Tetrahydrofuran. Die entstandene Lösung wurde 30 min bei 20° gerührt und dann mit rohem Phosphoiylierungsreagens behandelt. Nach 15 min bei 30 20° wurde die Reaktionsmischung mit 2,51 Wasser verdünnt und mit 3 x 600 ml Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu 8,96 g gelben Feststoff eingedampft. Zu diesem Feststoff (7,96 g) gab man 200 ml Aceton und entfernte unlösliche Verun-35 reinigungen durch Filtrieren. Das Filtrat wurde eingedampft und der Rückstand einer Säulenchromatographie an 270 g Siliciumdioxid unter Elution mit Methylenchlorid-Methanol (96/4) unterzogen, um einen gelben Schaum zu ergeben. Dieser Schaum wurde durch weitere Säulenchromatographie auf 100 g Siliciumdi-40 oxid unter Elution mit Methylenchlorid-Aceton (96/4) gereinigt, um 1,14 g Titelverbindung als gelben Schaum zu ergeben;

IR (CHBr3) 1710 und 1659 cm"1;

ô (CDCI3) 5,68-7,81 (OCH2, m, H), 5,22 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,95 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,55 (14-CH3, « d, 7Hz, 3H).

Zwischenprodukt 10

(a) Diethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-12-yl]-phosphat 50 Man wusch eine 50%ige Dispersion von Natriumhydrid in Öl (158 mg) mit 40-60° Petrolspirit (2 x 10 ml) unter einer Stickstoffatmosphäre ölfrei. Man gab 25 ml trockenes Tetrahydrofuran zu dem Natirumhydrid und anschliessend 1,0 g Zwischenprodukt 6 in 100 ml trockenem Tetrahydrofuran. Die entstandene Lösung 55 wurde 15 min bei 20° unter Stickstoff gerührt und dann mit einer Lösung von 569 mg frisch destilliertem Diethylchlorphosphat in 5 ml trockenem Tetrahydrofuran behandelt. Nach 1,5 h wurde die Reaktionsmischung mit 500 ml Wasser verdünnt und mit 3 x 250 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten, organi-60 sehen Extrakte wurden über wasserfreiem Natirumsulfat getrocknet und zu 1,484 g grünem Feststoff eingedampft, der duch Säulenchromatographie an 150 g Siliciumdioxid unter Elution mit Chloroform-Ethanol (49/1) gereinigt wurde, um 1,254 g grünen Feststoff zu ergeben. Die Kristallisation dieses Feststoffs aus einer 65 Mischung von Chloroform und Ethylacetat ergab 904 mg Titelverbindung in Form grüner, federartiger Kristalle;

TW 243 nm, E} 1005, 372 nm, E} 146;

(CDCI3) 5,25 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H),

672 489

10

5,01 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,39 (OCH2CH3, m, 4H), 1,54 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,42 (OCH2CH3, m, 6H).

Die folgende Verbindung wurde auf ähnliche Weise hergestellt.

(b) Bis-(phenylmethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-di-oxobenz[5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin- 12-yl]-phosphat

(1,5 g) aus 3,0 g Zwischenprodukt 6 und Dibenzylchlorphos-phat (frisch hergestellt aus 9,9 ml Dibenzylphosphat und N-Chlorsuccinimid) in Benzol (ca. 20 ml), wobei jedoch die Elution unter Verwendung von Methylenchlorid-Aceton (96/4) durchgeführt wurde, um ein Öl zu ergeben, das beim Stehenlassen kristallisierte und aus Ethylacetat/Chloroform umkristallisiert wurde; Amax 242,6 nm, E} 733, 371,4 nm, Ej 109;

5 (CDC13) 5,20-5,45 (OCH2 + 5-H, m, 5H, 5,15 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,97 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,53 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Zwischenprodukt 11

Dipropyl-[l,4-dioxonaphthalin-5,8-diyl]-phosphat

Man suspendierte 1 g 5,8-Dihydroxy-l,4-naphthalindion in 100 ml Aceton und gab 4 g Kaliumcarbonat und 5 ml Dipropyl-chlorphosphat zu. Die Reaktionsmischung wurde 90 min bei 40-50° gerührt, zur Entfernung überschüssigen Kaliumcarbonats filtriert und zur Trockene eingedampft. Man löste den Rückstand in Methylenchlorid und reinigte durch Säulenchromatographie an Siliciumdioxid unter Verwendung von Methylenchlorid und Methylenchlorid-Methanol (99/1) als Eluierungsmittel, um 2,31 g Titelverbindung als gelbes Öl zu erhalten;

8 (CDC13) 4,23 (CH2), 1,78 (CH2,1,01 (CH3).

Zwischenprodukt 12

Dipropyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9,12-diyl]-phosphat

Man gab 10 ml Essigsäureanhydrid zu einer Mischung von 440 mg N-Formyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinolin-4-methyl-3-car-bonsäure und 2,16 g Zwischenprodukt 11. Die Reaktionsmischung wurde 30 min bei 10° gehalten und dann zur Trockene eingedampft, um ein brauns Öl zu ergeben. Die Chromatographie an Siliciumdioxid unter Verwendung von Petrol(60-80°)-Ethyl-acetat (1/1,1/2 und 1/3) als Eluierungsmittel ergab 984 mg Titelverbindung;

Amax 237,6 nm, EJ 609, 371 nm, Et 94;

8 (CDC13) 5,13 + 5,23 (5H), 4,93 (14H), 4,20-4,35 (CH2), 1,60-1,90 (CH2), 0,8-1,05 (CH3).

Beispiel 1

[5,8,13,14-Tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo [2, l-b]isochinolin-9-yl]-dihydrogenphosphat, Dinatriumsalz

Eine auf 0 bis 5° gekühlte Lösung von 465 mg Zwischenprodukt 4(b) in 3 ml Tetrachlorkohlenstoff wurde unter einer Stickstoffatmosphäre mit 0,32 ml Trimethylsilyljodid behandelt. Nach 5 min wurde die Reaktionsmischung zur Trockene eingedampft und das verbliebene Öl mit 5 ml Methanol behandelt. Die Mischung wurde bei 20° gerührt und nach etwa 5 min erhielt man eine klare, braune Lösung. Nach 20 min wurde die Lösung zu einem dunklen Schaum eingedampft, der in 20 ml Wasser suspendiert wurde, und die Suspension wurde mit 4,00 ml 1M-Natriumhydroxidlösung auf pH 7,5 eingestellt. Die entstandene Mischung wurde mit 25 ml Chloroform extrahiert und durch ein vorgewaschenes Kieselgurbett unter Verwendung von 50 ml Wasser filtriert, um das Produkt durchzuwaschen. Die entstandenen Schichten wurden getrennt und die wässrige Phase mit weiteren 10 ml Chloroform gewaschen. Die vereinigten, wässrigen Extrakte wurden durch ein Milliporenfilter filtriert, entgast und gefriergetrocknet. Der gefriergetrocknete Feststoff wurde erneut in 100 ml Wasser gelöst, durch ein Milliporenfilter filtriert und gefriergetrocknet, um 0,398 g Titelverbindung als hellgelben Feststoff zu ergeben;

Amax 246 nm, E{ 667, 388 nm, E} 165.

5 Beispiel 2

(a) Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxo-benz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

]0 Man gab 1,551 g Natriumjodid zu einer Lösung von 5,546 g Zwischenprodukt 5(a) in 100 ml Aceton und erhitzte die entstandene Lösung 1,5 h unter Rückfluss. Die Reaktionsmischung wurde zur Trockene eingedampft und der Rückstand mit 100 ml Ether trituriert, um einen gelben Feststoff zu ergeben. Dieser

! Feststoff wurde in 200 ml Wasser gelöst und die pH der Lösung durch Zugabe von 2M Chlorwasserstoffsäure auf 1 bis 2 eingestellt. Die entstandene Mischung wurde mit 200 ml Wasser verdünnt und mit 2 x 400 ml Methylenchlorid extrahiert. Während des Extraktionsverfahrens wurde Salzlösung zugegeben, um die

20 Emulsion, die sich gebildet hatte, zu dispergieren. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem grünen Feststoff eingedampft. Dieser Feststoff wurde in 300 ml Wasser suspendiert und die Suspension durch tropfenweise Zugabe von IM Natirumhydroxidlösung auf

25 pH 7,0 eingestellt. Die entstandene Lösung wurde filtriert und das Filtrat zu einem Feststoff gefriergetrocknet, der mit 400 ml Aceton behandelt und unter Bildung von 4,49 g Feststoff zur Trockene eingedampft wurde. Das Triturieren dieses Feststoffs mit 200 ml Ether ergab 4,232 g Titelverbindung als gelben Fest-

30 stoff;

Amax 243,8 nm, El 679, 367,2 nm, Ej 132;

8 (d6-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,93 (OCH2, d, 6Hz, 2H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,47 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

35 Die folgenden Verbindungen wurden auf ähnliche Weise hergestellt.

(b) Propyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

40 (1,256 g) aus 1,5 g Zwischenprodukt 4(c) und 1,367 g Natriumjodid unter Verwendung von 35 ml Butan-2-on anstelle von Aceton;

Xmax 243,6 nm, E' 963, 360,0 nm, El 265;

8 (dg-DMSO), 5,42 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,32 (5-H, d, 16Hz,

45 1H), 4,81 14-H, m, 1H), 3,78 (OCH2CH2CH3, m, 2H), 1,40-1,60 (14-CH3 + OCH2CH2CH3, m, 3H), 0,82 (OCH2CH2CH3, m,

3H).

(c) (l-Methylethyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxo-

50 benz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

(910 mg) aus 1,2 g Zwischenprodukt 4(d) und 1,094 g Natriumjodid unter Verwendung von 25 ml Butan-2-on anstelle von Aceton;

55 Amax 243,4 nm, EJ 943, 366,8 nm, E{ 199;

8 (dß-DMSO) 5,40 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,30 (5-H, d, 16H, 1H), 4,81 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,43 (OÇH(CH3)2, m, 1H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,11 (OCHCH3)2, d, 5Hz, 6H).

so (d) Phenylmethyl-[7-brom-5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphor-säure, Natriumsalz

(338 mg) aus 705 mg Zwischenprodukt 7 und 174 mg Natriumjodid;

65 Amax 243,6 nm, Ej 601, 367, 8 nm, Ej 120;

8 (dß-DMSO) 5,40 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,21 (5-H, d, 17Hz, 1H), 4,97-4,82 (14-H + OCH2, m, 3H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

11

672 489

(e) Phenylmethyl-[7-chlor-5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-

8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphor-säure, Natirumsalz

(674 mg) aus 1,068 g Zwischenprodukt 8 udn 282 mg Natriumjodid;

/L„v 243,0 nm, E{ 688, 374,0 nm, E} 98;

8 (d6-DMSO) 5,40 (5-H, d, 17Hz, IH), 5,23 (5-H, d, 17Hz, IH), 5,00-4,79 (14-H + OCH2, m, 3H), 1,50 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

(f) Pentyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,l 3-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

(0,836 g) aus 1,207 g Zwischenprodukt 4(i) und 724 mg Natriumjodid unter Verwendung von 30 ml Butan-2-on anstelle von Aceton;

Amax 244,0 nm, E} 899, 366,8 nm, E{ 190;

8 (d6-DMSO) 5,40 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,32 (5-H, d, 17Hz, 1H), 4,81 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,80 (POCH2CH2CH2CH2CH3, 4et 7Hz, 2H7, 1,35-1,55 (POCH2CH2CH2CH2CH3 + 14-CH3, m, 5H), 1,10-1,30 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m, 4H), 0,79 (POCH2CH2CH2CH2CH3, t, 7Hz, 3H).

(g) Cyclohexylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-di-oxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]-isochinoün-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

(1,017 g) aus 1,5 g Zwischenprodukt 4(k) und 411 mg Natriumjodid unter Verwendung von 40 ml Butan-2-on anstelle von Aceton;

Xmax 244,0 nm, E{ 849, 366,8 nm, E[ 198;

8 (de-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,81 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,62 (OCH2, t, 6Hz, 2H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

(h) Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahyro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin- 12-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

(781 mg) aus 1,2 g Zwischenprodukt 10(b) und 336 mg Natriumjodid, wobei jedoch nach Einstellung des pH-Wertes mit Chlorwasserstoffsäure die entstandene Mischimg mit Methylenchlorid-Methanol (3/2,400 ml und 2 x 200 ml) extrahiert wurde;

Ama* 244,0 nm, E} 842, 265,8 nm, El 295, 356,0 nm, E} 97;

8 (d6-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,93 (OCH2, d, 7Hz, 2H), 4,88 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,47 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 3

(a) Methyl-[5,8,13,14-tetrahyyro- 14-methyl-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Eine Mischung von 1,0 g Zwischenprodukt 4(a) und 377 mg Natriumjodid in 35 ml Aceton wurde 5 h unter Rückfluss erhitzt. Hiernach wurde ein zweiter Anteil von 189 mg Natriumjodid zugesetzt und die Reaktionsmischung 1 h unter Rückfluss gehalten. Die Reaktionsmischung wurde auf 20° gekühlt und das ausgefallene Produkt durch Filtrieren gesammelt, mit Aceton und Ether gewaschen und getrocknet, um einen grünen Feststoff zu ergeben, der in 50 ml Wasser gelöst wurde, wobei der pH der entstandenen Lösung durch Zugabe von 2M Chlorwasserstoffsäure auf pH 1 bis 2 eingestellt wurde. Die entstandene Mischung wurde mit 50 ml Wasser verdünnt und mit 2 x 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Während des Extraktionsverfahrens wurde Salzlösung zugegeben, um die Emulsion, die sich gebildet hatte, zu dispergieren. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem grünen Feststoff eingedampft, der in 70 ml Wasser suspendiert wurde, wobei die entstandene Suspension durch tropfenweise Zugabe von IM Natriumhydroxidlösung auf pH 7,0 eingestellt wurde. Die entstandene Lösung wurde filtriert und das Filtrat zu einem Feststoff gefriergetrocknet, der in 100 ml Aceton suspendiert und unter Erzielung eines Feststoffs zur Trockene eingedampft wurde.

5 Das Triturieren dieses Feststoffs mit 100 ml Ether ergab 858 mg Titelverbindung als gelben Feststoff;

Amax 243,4 nm, E[ 991, 365,4 nm, E[ 199;

8 (d6-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,50 (OCH3, d, 11Hz, 3H), 1,47 io (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Die folgenden Verbindungen wurden auf ähnliche Weise hergestellt.

(b) Butyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz-[5,6] 15 isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

(1,041 g) aus 1,255 g Zwischenprodukt 4(e) und 1,082 g Natriumjodid;

Ama* 243,2 nm, E} 984, 366,6 nm, E{ 189;

8 (dg-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d, 16Hz, 20 1H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,81 (OCH2CH2CH2CH3, q, 6Hz, 2H), 1,15-1,60 (OCH2CH2CH2CH3 + 14-CH3, m, 7H), 0,83 (OCH2CH2CH2CH3, t, 6Hz, 3H).

(c) Cyclohexyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz 25 [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

(686 mg) aus 1,0 g Zwischenprodukt 4(g), wobei jedoch die letzte Triturierstufe nicht erforderlich war;

L». 244,0 nm, E{ 850, 367,0 nm, E| 182;

8 (d6-DMSO) 5,42 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,32 (5-H, d,16Hz, 30 1H), 5,48 (14-H, q, 7Hz, 1H), 4,13 (OCH, m, 1H), 1,46 (14-CH3j d, 7Hz, 1H).

Beispiel 4

35 Ethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoin-dolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Man gab 3,0 g Natriumjodid zu einer Lösung von 3,0 g Zwischenprodukt 4(b) in 150 ml Aceton und erhitzte die Mischung "4 h unter Rückfluss. Hiernach wurde ein zweiter Anteil von 3,0 g 40 Natirumjodid zugesetzt und die Reaktionsmischung 16 h unter Rückfluss geerhalten. Die Reaktionsmischung wurde auf 20° abgekühlt und das ausgefallene Produkt durch Filtrieren gesammelt, mit 3 x 30 ml Aceton gewaschen und getrocknet, um 2,37 g Titelverbindung als grünen Feststoff zu ergeben;

45 Kiax 244,5 nm, E} 1050, 368,5 nm, E{ 222;

8 (d6-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,30 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,90(OCH2CH3,m,2H), 1,49 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,14 (OCH2CH3,t, 8Hz, 3H).

so Beispiel 5

Phenyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoin-dolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Eine 60%ige Dispersion von 67 mg Natriumhyrid in Öl wurde mit 2 x 10 ml 40-60° Petrolspirit unter Sickstoffatmosphäre ölfrei 55 gewaschen. Es wurden 10 iiil trockenes Tetrahydrofuran zu dem Natirumhydrid und anschliessend 500 mg Zwischenprodukt 3 in 50 ml trockenem Tetrahydrofuran zugegeben. Die entstandene Lösung wurde 15 min bei 20° unter Stickstoff gerührt und dann mit 381 mg Phenyldichlorphosphat behandelt. Nach 1 h wurde 60 die Reaktionsmischung mit 250 ml Wasser verdünnt und mit 3 x 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Man gab während des Extraktionsverfahrens Salzlösung zu, um die gebildete Emulsion zu dispergieren. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu 769 mg öligen 65 Schaum eingedampft. Dieser Schaum wurde in einer Mischung von 15 ml Tetrahydrofuran und 5 ml Wasser gelöst und mit IM Natriumhydroxidlösung basisch gemacht. Nach 2 h bei pH 9 und 2 h bei pH 12 wurde die Reaktionsmischung auf 50 bis 55°

672 489

12

erwärmt und mit 5 ml Wasser und 5 ml Tetrahydrofuran verdünnt. Nach 20 min wurde die Reaktionsmischung im Vakuum eingeengt, mit 150 ml Wasser verdünnt und mit 2M Chlorwasserstoffsäure auf pH 1 bis 2 angesäuert. Die entstandene Mischung wurde mit 3 x 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Während des Extraktionsverfahren s wurde Salzlösung zugegeben, um die gebildete Emulsion zu dispergieren. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu 705 mg dunkelgrünem Schaum eingedampft. Dieser Schaum wurde in 100 ml Wasser suspendiert und die Suspension durch tropfenweise Zugabe von IM Natriumhydroxidlösung auf pH 7,1 eingestellt. Die entstandene Mischung wurde filtriert und das Filtrat zu einem Schaum gefriergetrocknet, der mit 100 ml Aceton behandelt und unter Erzielung von 440 mg Feststoff zur Trockene eingedampft wurde. Das Triturieren dieses Feststoffs mit 100 ml Ether ergab 341 mg Titelverbindung als dunkelgrünen Feststoff;

Xmax 243,8 nm, E{ 918, 369,2 nm, Ei 174;

8 (d6-DMSO), 5,42 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,32 (5-H, d,16Hz, 1H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 6

(4-Nitrophenyl)-methyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphor-säure, Natriumsalz

Man gab 330 mg Natriumjodid zu einer Suspension von 1,359 g Zwischenprodukt 5(b) in 100 ml Butan-2-on und erhitzte die Mischung 1,5 h unter Rückfluss. Die Reaktionsmischung wurde zur Trockene eingedampft und der Rückstand mit 3 x 100 ml Ether trituriert, um 1,055 g grünen Feststoff zu ergeben. Der Feststoff wurde durch Filtrieren gewonnen, um 911 mg Titelverbindung als grünen Feststoff zu ergeben;

A^ 243,8 nm, El 837,265,2 nm, E} 438, 368,8 nm, Ei 142;

8 (d6-DMSO) 5,39 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,29 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,09 (OCH2, d, 7Hz, 2H), 4,80 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,46 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 7

[5,8,13,14-Tetrahydro-8,13-dioxo- 14-methylbenz[5,6]isoindolo [2,1 -b]isochinolin-9-yl]-dihydrogenphosphat, Dinatriumsalz

Man löste 1,6 g Zwischenprodukt 5(a) in 5 ml trockenem Tetrachlorkohlenstoff und kühlte die entstandene Lösung in einem Eisbad auf 0 bis 5°. Man liess die Mischung sich auf 20° erwärmen und gab 8 ml trockenen Tetrachlorkohlenstoff und anschliessend 5 ml Methylenchlorid zu. Die entstandene Lösung wurde unter Stickstoff auf 0 bis 5° abgekühlt und mit 0,54 ml Trimethylsilyljodid behandelt. Nach 5 min bei 0 bis 5° wurde die Reaktionsmischung zur Trockene eingedampft und das verbliebene Öl mit 10 ml Methanol behandelt. Die Mischung wurde bei 20° gerührt und nach etwa 5 min erhielt man eine klare, braune Lösung. Nach 10 min wurde die Lösung zu einem Öl eingedampft, das dann mit 4 x 25 ml Diethylether trituriert wurde, um einen dunkelgelben Feststoff zu ergeben, der in 70 ml sterilem Wasser suspendiert wurde. Der pH wurde durch Zugabe von 0,1 M Natriumhydroxidlösung auf 8,0 eingestellt, um eine Lösung zu ergeben, die durch ein Glasfaserfilter zur Entfernung einer geringen Menge grober Feststoffe und dann zweimal durch grosses (5 cm) Milliporenfilter filtriert wurde. Das Filtrat wurde gefriergetrocknet, um 0,738 mg Titelverbindung als dunkelgelben Feststoff zu ergeben;

Xnax 246 nm, E} 667, 388 nm, E{ 165.

Beispiel 8

2-Oxo-2-phenylethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Man gab 243 mg Natriumjodid zu einer Lösung von 1,12 g Zwischenprodukt 9 in 25 ml Aceton. Die entstandene Lösung wurde 10 min am Rückfluss gekocht und dann eingedampft. Der Rückstand wurde mit 3 x 30 ml Ether trituriert, um einen Feststoff zu ergeben. 140 ml Wasser wurden zu diesem Feststoff zugegeben und unlösliche Verunreinigungen wurden durch Filtrieren entfernt. Die entstandene Lösung wurde durch Zugabe von 2M Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,5 angesäuert und mit 3 x 300 ml Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem Feststoff eingedampft. Der Feststoff wurde in 40 ml Wasser suspendiert und man gab 0,1 M Natriumhydroxidlösung bis zu einem pH-Wert von 7,0 zu. Die entstandene Lösung wurde filtriert und zu einem Schaum gefriergetrocknet. Die Behandlung dieses Schaums mit 100 ml Aceton ergab eine Lösung, die filtriert und eingedampft wurde. Der Rückstand wurde mit 50 ml Ether trituriert, um 500 mg Titelverbindung als gelben Feststoff zu ergeben;

Aniax 243,6 nm, E{ 955, 366,4 nm, E} 147;

8 (d6-DMSO) 5,39 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,30 (5-H, d,17Hz, 1H), 5,23 (OCH2, d, 8Hz, 2H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 9

Tetrahydro-2-furanylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoindolo [2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Man gab 272 mg Natriumjodid zu einer Lösung von 952 mg Zwischenprodukt 4(f) in 50 ml Butan-2-on. Die entstandene Lösung wurde 75 min am Rückfluss gehalten, man gab weitere 272 mg Natriumjodid zu und setzte das Kochen am Rückfluss 24 h fort. Die Reaktionsmischung wurde auf ein geringes Volumen (ca. 25 ml) eingedampft und weitere 24 h am Rückfluss gehalten. Der ausgefallene Feststoff wude filtriert und mit 2 x 40 ml Ether gewaschen. Dieser Feststoff wurde in 75 ml Wasser gelöst und die Lösung auf pH 1,5 durch Zugabe von 2M Chlorwasserstoffsäure angesäuert und mit 5 x 750 ml Methylenchlorid extrahiert. Die organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem Schaum eingedampft. Dieser Schaum wurde in 50 ml Wasser suspendiert, und man gab 0,1 M Natriumhydroxidlösung bis zu einem pH-Wert von 7,0 zu. Die entstandene Lösung wurde filtriert und zu einem Schaum gefriergetrocknet. Dieser Schaum wurde mit 50 ml Aceton behandelt und die entstandene Suspension eingedampft. Der Rückstand wurde mit 50 ml Ether trituriert, um 588 mg Titelverbindung als gelben Feststoff zu ergeben;

A™* 244,0 nm, E} 867, 366,2 nm, E} 178;

8 (d6-DMSO) 5,40 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,30 (5-H, d, 17Hz, 1H), 4,80 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,50-4,00 (POCH2 + OCH2CHO + CH2CH20(unklar), m, 5H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 10

(2-Propenyl)-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Man gab 697 mg Natriumjodid zu einer Lösung von 1,5 g Zwischenprodukt 4(h) in 30 ml Aceton, und die Mischung wurde unter Rückfluss erhitzt. Nach 3 h wurde die Reaktionsmischung auf 20° abgekühlt und das ausgefallene Produkt durch Filtrieren gesammelt, mit 10 ml Aceton und 10 ml Ether gewaschen und zu einem gelben Festtoff getrocknet. Dieser Festtoff wurde in 300 ml Wasser gelöst und der pH der Lösung durch Zugabe von 2M Chlorwasserstoffsäure auf 1,5 eingestellt. Die entstandene Mischung wurde mit Methylenchlorid-Ethanol (4/1, 300 ml) und dann mit 300 ml Methylenchlorid extrahiert. Man gab während des Extraktionsverfahrens Salzlösung zu, um die gebildete Emulsion zu dispergieren. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und dann zu einem grünen Schaum eingedampft. Dieser Schaum wurde in 150 ml Wasser suspendiert und die Suspension durch Zugabe von IM Natriumhydroxidlösung auf pH 7,0 eingestellt. Die entstandene Lösung wurde filtriert und das Filtrat zu einem gelben Schaum gefriergetrocknet. Das Triturieren dieses Schaums mit 100 ml Ether ergab 1,214 g Titelverbindung als gelben Festtoff;

Amax 244,0 nm, E} 883,367,4 nm, E{ 183;

5

10

15

20

25

30

35

40

45

50

55

60

65

13

672 489

8 (d6-DMSO) 5,85-6,00 (CH, m, IH), 4,95-5,30 (CH2, m, 2H), 5,39 (5-H, d, 17Hz, IH), 5,30 (5-H, d, 17Hz, IH), 4,82 (14-H, q, 7Hz, IH), 4,30-4,50 (OCH2, m, 2H), 1,48 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 11

Ethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz-[5,6] isoin-dolo[2, l-b]isochinolin- 12-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Man gab 2,0 g Natriumjodid zu einer Lösung von 2,0 g Zwischenprodukt 10(a) in 100 ml Aceton und erhitzte die Mischimg 5 h unter Rückfluss. Hiernach wurde ein zweiter Anteil von 2,0 g Natriumjodid zugesetzt und die Reaktionsmischung 16 h unter Rückfluss gehalten. Die Reaktionsmischung wurde auf 20° abgekühlt und das ausgefallene Produkt durch Filtrieren gesammelt, mit 2 x 20 ml Aceton gewaschen und zu 1,75 g grünem Feststoff getrocknet. Die Kristallisation dieses Festtoffs (1,75 g) aus einer Mischung von 20 ml Wasser und 800 ml Aceton ergab 1,125 g Titelverbindung als grünen Festtoff;

Àmax 243,6 nm, E}, 973, 367,2 nm, Ei 173;

8 (d6-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d, 16Hz, ' 1H), 4,87 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,88 (OCH2CH3, m, 2H), 1,45 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,10 (OCH2CH3, t, 6Hz, 3H).

Beispiel 12

2-MethoxyethyI-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxo benz[5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

0,637 g Natriumjodid wurden zu einer Lösung von 2,03 g Zwischenprodukt 4(j) in 40 ml Aceton gegeben. Die entstandene Lösung wurde 3 h am Rückfluss gehalten und man gab weitere 1,274 g Natriumjodid zu. Das Rückflusskochen wurde 20 h fortgesetzt. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und der Rückstand in 40 ml 2-Butanon erneut gelöst. Die entstandene Lösung wurde 2 h am Rückfluss gehalten und dann eingedampft. Der Rückstand wurde mit 3 x 25 ml Ether trituriert, um einen Feststoff zu ergeben. Man gab 200 ml Wasser zu und säuerte die entstandene Suspension mit 2M Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,5 an und extrahierte mit 3 x 300 ml Methylenchlorid. Wahrend der Extraktion gab man Salzlösung zu, um gebildete Emulsion zu dispergieren. Die organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem Feststoff eingedampft. Dieser Feststoff wurd ein 200 ml Wasser suspendiert, und man gab 0,1 M Natriumhydroxidlösung bis zu einem pH-Wert von 7,0 zu. Die Mischung wurde filtriert und das Filtrat zu einem Schaum gefriergetrocknet. Die Behandlung des Schaums mit 120 ml Aceton ergab eine Lösung, di filtriert und eingedampft wurde. Der Rückstand wurde mit 40 ml Ether trituriert, um 1,34 g litelverbin-dung als gelben Feststoff zu ergeben;

244,0 nm, E{ 1034, 366,8 nm, E} 208;

8 (d6-DMSO) 5,40 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,30 (5-H, d, 17Hz, 1H), 4,80 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,96 (POCH2, m, 2H), 3,44 (POCH2CH2, q, 5Hz, 2H), 3,22 (OCH3, s, 3H), 1,47 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 13

Propyl-f 5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz-[5,6] isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9,12-diyl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Man gab 2,5 g Natriumjodid zu einer Lösung von Zwischenprodukt 12 in 50 ml Butan-2-on und rührte die Reaktionsmischung 4 h unter Rückfluss und dampfte zur Trockene ein. Der Rückstand wurde in Methanol gelöst und an Sephadex LH 20 in Methanol zweimal chromatographiert, um 595 mg Titelverbindung als dunkelgelben Feststoff zu ergeben;

Àmax (Wasser) 244,8 nm, E{ 637, 356,4 nm, E{ 140;

8 (DMSO) 5,28 + 5,38 (5H), 4,82 (14H), 3,65-3,85 (CH2), 1,35-1,6 (14CH3 + CH2), 0,70-0,90 (CH3).

Beispiel 14

4-Nitrophenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-di-

oxobenz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Triethylaminsalz

278 mg Triethylaminhydrojodid wurden zu einer Lösung von 750 mg Zwischenprodukt 5(b) in 75 ml Aceton gegeben. Die ent-5 standene Lösung wurde 4 h am Rückfluss gehalten. Man gab weitere 278 mg Triethylaminhydrojodid zu und setzte den Rückfluss weitere 17 h fort. Die Reaktionsmischung wurde eingedampft und das verbliebene Öl mit Ether gewaschen. Das Öl wurde in 100 ml Wasser gelöst und mit 2 x 100 ml Methylenchlorid, hiernach mit io 100 ml Methylenchlorid-Methanol (1/1) und dann mit 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten, organischen Extrakte wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und eingedampft. Man gab 250 ml Wasser zu dem Rückstand zu und filtrierte die entstandene Lösung und führe unter Bildung eines 15 Schaums eine Gefriertrocknung durch. Dieser Schaum wurde in 50 ml Wasser gelöst und die Lösung filtriert. Das Filtrat wurde mit 2M Chlorwasserstoffsäure auf pH 1,5 angesäuert und mit 450 ml Methylenchlorid-Methanol (2/1) und hiernach mit 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Die vereinigten, organischen Extrakte 20 wurden mit Wasser gewaschen und über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet. Man gab 0,1 ml (0,7 g) Triethylamin zu und dampfte die Lösung ein. Das verbliebene Öl wurde in 30 ml Wasser gelöst, die Lösung filtriert und das Filtrat gefriergetrocknet, um 256 mg Utelverbindung als gelben Schaum zu ergeben; 25 Xmax 244,2 nm, E{ 739, 365,8 nm, E} 129;

8 (d6-DMSO) 5,39 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,29 (5-H, d, 17Hz, 1H), 5,10 (POCH2, d, 8Hz, 2H), 4,80 (14-H, q, 7Hz, 1H), 2,98-3,13 (N+-CH2CH3, m, 6H), 1,47 (14-CH3, d, 7Hz, 3H), 1,18 (N+-CH2CH3, t, 7Hz, 9H).

30

Beispiel 15

Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure 35 Man gab 285 mg Natirumjodid zu einer Lösung von 1,019 g Zwischenprodukt 5(a) in 25 ml Aceton und erhitzte die Mischung unter Rückfluss. Nach 1,5 h wurde die Reaktionsmischung zur Trockene eingedampft und der Rückstand mit 100 ml Wasser verdünnt, mit 2M Chlorwasserstoffsäure auf pH 2 bis 3 angesäuert 40 und mit 3 x 100 ml Methylenchlorid extrahiert. Während des Extraktionsverfahrens gab man Salzlösung zu, um die gebildete Emulsion zu dispergieren. Die vereinigten, organischen Extrake wurden über wasserfreiem Natriumsulfat getrocknet und zu einem grünen Öl eingedampft, welches sich verfestigte. Der Feststoff 43 wurde in 50 ml Ether 10 min gerührt und dann durch Filtrieren gesammelt, um einen grünen Feststoff zu ergeben. Die Kristallisation des Feststoffs aus einer Michung von eine Spur Ethanol enthaltendem Chloroform und Ether ergab 427 mg Utelverbindung in Form grüner Kristalle;

50 Amax 245,0 nm, E{ 979, 369,0 nm, E{ 193;

8 (d6-DMSO) 5,44 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,36 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,23 (OCH2, d, 8Hz, 2H), 4,86 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,51 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

55 Beispiel 16

Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Natriumsalz

Eine Lösung von 1,55 g Natrium-2-ethylhexanoat in 14 ml Tetrahydrofuran wurde während 2 min zu einer gerührten Sus-60 pension von 4 g Produkt des Beispiels 15 unter Stickstoff zugegeben. Man fügte 0,4 ml Wasser zu der entstandenen, klaren Lösung zu, die dann 40 min mit 215 ml Propan-2-ol verdünnt wurde. Die entstandene Suspension wurde 20 min gerührt und der Feststoff durch Filtrieren gesammelt, mit 3 x 30 ml Propan-65 2-ol gewaschen, unter Stickstoff trockengesaugt und im Vakuum unter Erzielung von 3,19 g Utelverbindung in Form eines gelbgrünen, amorphen Feststoffs getrocknet;

A,max 244 nm (MeOH), E} 843, der ein ähnliches 'H-NMR-Spektrum besitzt wie die in Beispiel 2(a) erhaltene Probe.

672 489

14

Beispiel 17

Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,1 -b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Kaliumsalz

Man gab 1,83 g Kaliumjodid zu einer Suspension von 5,90 g Zwischenprodukt 5(a) in einer Mischung von 118 ml Aceton und 2,93 ml Wasser. Diese Mischung wurde gerührt und unter Stickstoff 2,5 h zum Rückfluss erhitzt, wobei sich ein kristalliner Niederschlag nach 40 min bildete. Die Suspension wurde auf 21° abgekühlt und 1 h gerührt und der Feststoff wurde durch Filtrieren gesammelt, mit 2 x 25 ml Aceton gewaschen und im Vakuum getrocknet, um 4,32 g Titelverbindung zu ergeben;

U 244 nm (MeOH), E} 813;

S (d6-DMSO), 5,36 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,24 (5-H, d, 16Hz, IH), 4,96 (OCH2, d, 6Hz, 2H), 4,80 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,48 (14-CHj, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 18

Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, Lithiumsalz

Man gab 1,88 g Lithiumjodid-trihydrat zu einer Suspension von 5,90 g Zwischenprodukt 5(a) in einer Mischung von 118 ml Aceton und 2,3 ml Wasser. Diese Mischung wurde gerührt und unter Stickstoff 2,7 h zum Rückfluss erhitzt, wobei sich nach 20 min ein kristalliner Niederschlag bildete. Die Suspension wurde auf ca. 20° abgekühlt und 2 h gerührt und der Feststoff wurde durch Filtrieren gesammelt, mit 3 x 50 ml Aceton gewaschen und im Vakuum bei 21° getrocknet, um 4,72 g Titelverbindung zu ergeben;

K& 244 nm (MeOH), E} 847;

8 (d6-DMSO) 5,43 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H, d,16Hz,lH), 5,04 (OCH2, d, 6Hz, 2H), 4,84 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,49 (14-CHs, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 19

Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2, l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure, L-Arginin-salz

Man rührte unter Stickstoff eine Suspension von 2 g Produkt von Beispiel 15 in 80 ml Wasser und gab tropfenweise im Verlauf von 15 min eine Lösung von 0,70 g L-Argininmonohydrat in 10 ml Wasser zu, um den pH auf 6,1 einzustellen. Durch Zugabe eines Teils von 2 ml einer Lösung von 0,1 g L-Arginin in 5 ml Wasser wurde der pH auf 7,0 erhöht und die enstandene, klare Lösung wurde filtriert. Das Filtrat wurde gefriergetrocknet, um 2,61 g Titelverbindung als gelb-grünen Feststoff zu ergeben;

JUax 244 nm (MeOH), E} 648;

5 (dß-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,29 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,02 (OCH2, d, 6Hz, 2H), 4,83 (14-H, q, 7Hz, 1H), 3,14 (NCH2, t, 6Hz, 2H), 1,50 (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

Beispiel 20

Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]phosphorsäure, Natriumsalz

(a) 5,94 g Natriumjodid wurden zu einer Suspension von 21,2 g Zwischenprodukt 5(a) in 420 ml Aceton gegeben. Diese Mischung wurde gerührt und 1,5 h unter Stickstoff zum Rückfluss erhitzt, und die entstandene Lösung wurde auf ca. 35° abgekühlt und filtriert. Das Filtrat wurde im Vakuum auf ca. 50 ml eingeengt und der Rückstand gerührt, während man 350 ml Diisopropyl-ether zugab. Die entstandene Suspension wurde 45 min gerührt und der grüne Feststoff durch Filtrieren gesammelt, mit 2 x 100 ml Diisopropylether gewaschen und bei 30° im Vakuum getrocknet. Ein Teil von 2,0 g dieses Feststoffs wurde in 20 g unter Rückfluss befindlichem Aceton suspendiert, und man gab 2,0 ml Wasser zu. Die entstandene Lösung wurde geimpft und 5 min unter Rückfluss gerührt, wobei eine Kristallisation eintrat. Die Mischung wurde während 30 min auf ca. 20° abgekühlt und

über Nacht im Kühlschrank gehalten, und der Feststoff wurde durch Filtrieren gesammelt, mit 2 x 5 ml eiskaltem Aceton gewaschen und im Vakuum getrocknet, um 1,77 g Titelverbindung in Form von Kristallen zu ergeben;

5 ;W 244 nm (MeOH), EJ 857;

Vmax (Nujol-Mull) 1662 (C = O), 1250 und 1110 cm"1 (Phosphat);

8 (dfi-DMSO) 5,41 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,29 (5-H, d, 16Hz, 1H), 4,96 (OCH2, d, 6Hz, 2H), 4,82 (14-H, q, 7Hz, 1H), 1,49 io (14-CH3, d, 7Hz, 3H).

(b) Man gab 1,65 g Natriumjodid zu einer Suspension von 5,90 g Zwischenprodukt 5(a) in einer Mischung aus 118 ml Aceton und 2,93 ml Wasser. Diese Mischung wurde gerührt und 2 h unter Stickstoff zum Rückfluss erhitzt, wobei sich nach 0,8 h ein 15 blassgelber, kristalliner Niederschlag bildete. Die Suspension wurde auf 21° abgekühlt und 1 h gerührt, und der Feststoff wurde durch Filtrieren gesammelt, mit 2 x 25 ml Aceton gewaschen und im Vakuum getrocknet, um 4,96 g Titelverbindung in Form von Kristallen zu ergeben;

20 hmax 244 nm (MeOH) EJ 842, die in IR- und ein ^-NMR-Spektrum besass, das demjenigen der in Beispiel 20(a) erhaltenen Probe ähnlich war.

Im folgenden werden Beispiele für pharmazeutische Zusammensetzungen gemäss der Erfindung gegeben. Der Ausdruck 25 «aktiver Bestandteil», wie er nachfolgend verwendet wird,

bedeuet eine erfindungsgemässe Verbindung und kann z.B. die Verbindungen der Beispiele 2(a) oder 8 sein.

Beispiel A - trockenes Pulver zur Injektion mg/ Phiole äquivalent 100 mg Säure 8,8 0,2

aktiver Bestandteil Trinatriumcitrat Citronensäure

35 Methode 1

Mischen der sterilen Bestandteile bis zur Homogenität. Aseptisches Abfüllen in Glasphiolen. Spülen des Freiraums mit Stickstoff und Verschliessen der Phiolen unter Verwendung von Gummiverschlüssen und Metallüberverschlüssen.

40

Methode 2

Auflösen der Bestandteile in Wasser für Injektionszwecke B.P. Sterilisieren der Lösung durch Membranfiltration. Aseptisches Abfüllen in Phiolen für die Gefriertrocknung und Anbringen

45 geeigneter Gummiverschlüsse für die Gefriertrocknung in Position. Gefriertrocknen, Füllen der Phiolen mit Stickstoff am Ende des Zyklus. Vollständiges Einsetzen der Verschlüsse und Anbringen von Metallüberverschlüssen.

50 Zubereitung

Zubereitung mit einem geeigneten, sterilen Träger, z.B. unter Verwendung von Wasser für Injektionszwecke oder unter Verwendung einer 5%igen Gew./Vol. Dextroselösung als Injektion (z.B. in einem 10-ml-Volumen) oder als Infusion (z.B. in einem

55 100-ml-Volumen).

Beispiel B - orale Tablette aktiver Bestandteil mikrokristalline Cellulose so Natriumstärkeglykolat Magnesiumstearat mg/Tablette äquivalent zu 250 mg Säure 213 6 2

Sieben der Bestandteile und Mischen bis zur Homogenität. Komprimieren mit geeigneten Stempeln. Die Tabletten können 65 mit einem dünnen Polymerisatüberzug versehen werden, der mit Hilfe üblicher Filmüberzugstechniken aufgebracht wird. Es kann in dem Filmüberzug ein Pigment mit eingeschlossen werden.

G

Claims (15)

1. 672 489

   2

   (1)

   PATENTANSPRÜCHE 1. Verbindungen der allgemeinen Formel (1)

   fH3 S f

   //\ A /*\ //\ Î ii i=ì i fi m m N • • •

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   LH I,

   R3 0 R2

   worin R1 und R2, die gleich oder voneinander verschieden sein können, jeweils ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) bedeuten, worin R4 ein Wasser-stoffatom oder eine Alkylgruppe, die gegebenenfalls durch eine Hydroxyl-, Alkoxy-, cyclische Ether- oder Cycloalkylgruppe substituiert ist, eine Alkenyl-, Cycloalkyl-, Aiyl-, Aralkyl- oder Aroy-lalkylgruppe darstellt, mit der Massgabe, dass zumindest einer der Reste R1 und R2 eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) bedeutet; und R3 für ein Wasserstoff- oder Halogenatom oder eine Methylgruppe steht, sowie deren Salze.
2. 2. Verbindungen gemäss Anspruch 1, worin R4 für ein Wasserstoffatom oder eine geradkettige oder verzweigte Ci_g-Alkyl-gruppe, gegebenenfalls substituiert durch eine Hydroxyl- j Q^r Alkoxy-, 3- bis 7gliedrige cyclische Ether- oder C3_7-Cycloalkyl-gruppe; C3_s-AIkenyl-, C^-Çycloalkyl-, Phenyl-, Phen-Ci_3-alkyl-oder Benzoyl-Ci_3-alkylgruppe steht, worin jeder Phenylteil gegebenenfalls durch eine Hydroxyl-, CM-Alkoxy- oder Nitrogruppe substituiert sein kann, sowie deren Salze.
3. 3. Verbindungen gemäss einem der Ansprüche 1 oder 2,

   worin R4 für eine geradkettige Ci_5-Alkylgruppe, eine Tetrahydro-furanylmethylgruppe, eine Phen-Ci_3-alkylgruppe oder eine Ben-zoyl- C !_3-alkylgrupp e steht, und deren Salze.
4. 4. Verbindungen gemäss einem der Ansprüche 1 bis 3, worin R3 für ein Wasserstoffatom steht, sowie deren Salze.
5. 5. Verbindungen gemäss einem der Ansprüche 1 bis 4, worin R1 für ein Wasserstoffatom steht, sowie deren Salze.
6. 6. Als Verbindung gemäss Anspruch 1 Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz [5,6]isoin-dolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure oder 2-Oxo-2-phenyl-ethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz[5,6]isoin-dolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure sowie ein Salz derselben.
7. 7. Als Verbindung gemäss Anspruch 1 das Natriumsalz der Phenylmethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]-phosphorsäure oder der 2-Oxo-2-phenylethyl-[5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13dioxo-benz[5,6]isoindolo[2,l-b]isochinolin-9-yl]phosphorsäure.
8. 8. Verbindungen gemäss einem der vorhergehenden Ansprüche oder ein physiologisch verträgliches Salz derselben als Mittel zur Bekämpfung von Krebs.
9. 9. Pharmazeutische Zusammensetzung, umfassend als Wirkstoff eine Verbindung der Formel (1), wie in Anspruch 1 definiert, oder ein physiologisch verträgliches Salz hiervon zusammen mit einem oder mehreren pharmazeutischen Trägern oder Exzipien-ten.
10. 10. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (1), wie in Anspruch 1 definiert, worin R4 ein Wasserstoffatom darstellt, und von deren Salzen, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel (2)

    ?> 8 f

    //"\ /'\ A /A • • • • • •

    I il I ! I II • • N • • •

    w / \ / \ // \ / w /

    (2)

    worin R3 wie in Anspruch 1 definiert ist; und einer der Reste R6 und R7 eine Gruppe -OP^CX^CX2) darstellt, worin X1 ein in eine Hydroxylgruppe überführbares Atom oder eine in eine Hydroxylgruppe überführbare Gruppe darstellt und X2 für eine 15 Hydroxylgruppe oder X1 steht, und der andere ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(X')(X2) darstellt, zur Überführung von X1 in Hydroxyl zur Bildung einer Verbindung der Formel (1) umsetzt und gegebenenfalls eine erhaltene freie Säure der Formel (1) in ein Salz derselben oder ein 20 erhaltenes Salz einer Verbindung der Formel (1) in die freie Säure überführt.
11. 11. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (1), wie in Anspruch 1 definiert, und von deren Salzen, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel (3)

    25

    f", |

    35

    //\/\ /~\//'\

    W / \ / \ // \ / \\ /

    i

    1 3 11 I c R3 0 R9

    (3)

    worin R3 wie in Anspruch 1 definiert ist; und einer der Reste R8 und R9 für eine Hydroxylgruppe steht und der andere ein Wasserstoffatom oder eine Hydroxylgruppe bedeutet, zur Überführung 40 einer Hydroxylgruppe in der 9- und/oder 12-Stellung in eine -0P(0)(0H)(0R4)-Gruppe, worin R4 wie in Anspruch 1 definiert ist, oder in eine -0P(0)(X1)(X2)-Gruppe, worin X1 und X2 wie vorstehend definiert sind, verestert und sofern eine 0P(0)(X1)(X2)-Gruppe eingeführt wurde, X1 in Hydroxyl über-45 fuhrt und gegebenenfalls eine erhaltene freie Säure der Formel (1) in ein Salz derselben oder ein erhaltenes Salz einer Verbindung der Formel (1) in die freie Säure überführt.
12. 12. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (1), wie in Anspruch 1 definiert, und von deren Salzen, dadurch so gekennzeichnet, dass man ein Chinon der Formel (4)

    55

    60

    0 R10

    ! !

    / \ / w

    ) Ii i • • •

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    (4)

    R

    11

    worin einer der Reste R10 und Ru eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) oder -OP^ÇX'XX2) darstellt, worin X1 und 65 X2 wie vorstehend definiert sind, und der andere für ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(0H)(0R4) oder -0P(0)(XI)(X2) steht, mit einer Verbindung der Formel (5)

    3

    672 489

    (p H 3

    COOH (5)

    / w / \ /

    Il I i i . N

    VV V»

    worin R12 fur ein Wasserstoffatom oder eine -CHO- oder -COCH3-Gruppe steht, kondensiert und sofern man von Verbindungen der Formel (4) ausgegangen ist, worin R10 oder R11 -0P(0)(X1)(X2) darstellt, X1 in Hydroxyl überführt und gegebenenfalls eine erhaltene freie Säure der Formel (1) in ein Salz derselben oder ein erhaltenes Salz einer Verbindung der Formel (1) in die freie Säure überfuhrt.
13. 13. Verfahren zur Herstellung der Verbindungen der Formel (1), wie in Anspruch 1 definiert, worin R3 ein Halogenatom darstellt, und von deren Salzen, dadurch gekennzeichnet, dass man eine Verbindung der Formel (1), worin R3 ein Wasserstoffatom bedeutet, halogeniert und gegebenenfalls eine erhaltene freie Säure der Formel (1) in ein Salz derselben oder ein erhaltenes Salz einer Verbindung der Formel (1) in die freie Säure überfuhrt.
14. 14. Verwendung einer Verbindung der Formel (1), wie in Anspruch 1 definiert, oder eines physiologisch verträglichen Salzes derselben für die Herstellung eines therapeutischen Mittels zur Behandlung des menschlichen oder nicht-menschlichen, tierischen Körpers zur Bekämpfung von Krebs.
15. 15. Verbindungen der Formel (2)

    .Tv ? f

    /A A A /A C2)

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    w / \ / \ // \ / w / • • • • •

    worin R3 wie in Anspruch 1 definiert ist; und einer der Reste R6 und R7 eine Gruppe -0P(0)(X')(X2) darstellt, worin X1 ein in eine Hydroxylgruppe überfuhrbares Atom oder eine in eine Hydroxylgruppe überführbare Gruppe darstellt und X2 für eine Hydroxylgruppe oder X1 steht, und der andere ein Wasserstoffatom, eine Hydroxylgruppe oder eine Gruppe -0P(0)(X1)(X2) darstellt, und deren Salze zur Herstellung von Verbindungen der Formel (1).