NL8701768A

NL8701768A - Isochinolinederivaten.

Info

Publication number: NL8701768A
Application number: NL8701768A
Authority: NL
Original assignee: Glaxo Group Ltd
Priority date: 1986-07-29
Filing date: 1987-07-27
Publication date: 1988-02-16
Also published as: DE3725185A1; FR2602233B1; US4851399A; IL83335A0; DK392187A; SU1676445A3; PL267063A1; FI873289A; PH25494A; JPH02187A; GB8717864D0; GR871208B; KR880001652A; PT85380B; HUT46011A; ES2007666A6; SE8702986D0; PT85380A; FR2602233A1; IT1211683B

Description

4 4 rf i ' - Isochinolinederivaten -

De uitvinding heeft betrekking op nieuwe isochinolinederivaten, op werkwijzen voor de bereiding ervan, op farmaceutische preparaten die ze bevatten, en op het gebruik ervan in de geneeskunde.

5 In bijvoorbeeld EP-A-108620 en EP-A-161102 zijn isochinolineverbindingen vermeld die werkzaam zijn tegen kanker. Gevonden is nu een nieuwe groep isochinoline-verbindingen die uitstekend werkzaam zijn tegen kanker . De nieuwe verbindingen volgens de uitvinding vertonen ook bijzonder 10 voordelige fysisch-chemische eigenschappen.

De uitvinding heeft derhalve betrekking op verbindingen met de algemene formule 1, waarin R,| en 1*2 , die hetzelfde of verschillend kunnen zijn,elk een waterstofatoom, een hydroxylgroep of een groep -0P(0)(0H) (OR^) voor-15 stellen /waarin R^ een waterstofatoom, of een alkyl (eventueel gesubstitueerd door een hydroxyl, alkoxy, cyclische ether of cycloalkyl) , alkenyl, cycloalkyl, aryl, aralkyl of aroylalkyl voorstelt .7 , met dien verstande dat tenminste één van de symbolen R.j en R2 een groep -0P(0)(OH)(OR^) voorstelt, en 20 R^ een waterstof- of halogeenatoom of een methylgroep is; en zouten, in het bijzonder fysiologisch aanvaardbare zouten daarvan.

Verbindingen met formule 1 kunnen voorkomen als stereoisomeren en/of tautomeren, en de uitvinding omvat al dergelijke isomeren van verbindingen met formule 1 en mengsels 25 daarvan.

Verbindingen met formule 1 kunnen zouten vormen met basen. Het zal duidelijk zijn, dat , voor farmaceutisch gebruik, deze zouten fysiologisch aanvaardbaar moeten zijn, maar andere zouten kunnen toegepast worden, bijvoorbeeld bij de bereiding 30 van verbindingen met formule 1 en van fysiologisch aanvaardbare zou ten daarvan. Voorbeelden van zouten van verbindingen met de algemene

87017üO

> 4 - 2 - formule 1 zijn alkalimetaalzouten zoals lithuim-, natrium- en kalium-zouten , aminezouten, bijvoorbeeld ammonium- en mono-, di- of trigesubstitueerde ammoniumzouten, bijvoorbeeld triethylammonium-zouten en aminozuurzouten, bijvoorbeeld argininezouten. Natrium-zouten zijn in het bijzonder bruikbaar.

Verwijzingen in deze beschrijving naar verbindingen met formule 1 en het gebruik en de bereiding ervan moeten, tenzij uit de context iets anders blijkt, opgevat worden als verwijzingen naar de verbindingen en de zouten ervan, bijvoor- 10 beeld de fysiologisch aanvaardbare zouten.

Wanneer R^ een alkylgroep is, kan het bijvoorbeeld een rechte of vertakte alkylgroep met 1-8 koolstofatomen zijn , in het bijzonder een rechte of vertakte alkylgroep met 1-6 koolstofatomen , zoals methyl, ethyl, n-propyl, i-propyl, 15 n-butyl of n-pentyl. Dergelijke alkylgroepen kunnen bijvoorbeeld gesubstitueerd zijn door hydroxyl , alkoxy met 1-4 koolstofatomen, bijvoorbeeld methoxy of ethoxy, 3-7-ledige cyclische ether, bijvoorbeeld tetrahydrofuranyl of cycloalkyl met 3-7 koolstofatomen, bijvoorbeeld cyclohexyl.

20

Wanneer een alkenylgroep voorstelt, kan het bijvoorbeeld een alkenylgroep met 3-8 koolstofatomen, bijvoorbeeld allyl zijn.

Wanneer R^ een cycloalkylgroep voorstelt, kan het bijvoorbeeld een cycloalkylgroep met 3-7 koolstofatomen, 25 bijvoorbeeld cyclohexyl zijn.

Wanneer R^ een arylgroep voorstelt, kan het bijvoorbeeld een fenylgroep zijn, eventueel gesubstitueerd door een groep R^, waarin R^ hydroxy, alkoxy met 1-4 koolstofatomen, bijvoorbeeld methoxy , of nitro is.

30

Wanneer R^ een aralkylgroep is, kan het bijvoorbeeld een fenCC^^)alkylgroep zijn , waarin het fenylgedeelte eventueel gesubstitueerd is door een groep R^ met de hierboven gedefinieerde betekenis ; in het bijzonder kan R^ een benzylgroep zijn.

35

Wanneer R^ een aroylalkylgroep voorstelt kan het bijvoorbeeld een benzoyl(c^^alkylgroep zijn , waarin het 87 0 1 7 6 8 4 i - 3 - benzoylgedeelte eventueel gesubstitueerd is in de fenylring door een groep zoals hierboven gedefinieerd; in het bijzonder kan een benzoylmethylgroep zijn.

Wanneer de groep R^ een halogeenatoom is, 5 kan het fluor, chloor, broom of jood zijn.

Volgens een uitvoeringsvorm heeft de uitvinding betrekking op verbindingen met formule 1 , waarin

Rj en R^ , die hetzelfde of verschillend kunnen zijn, elk een waterstofatoom, een hydroxylgroep of een jq groep -OP(0)(OH)(0R^) voorstellen L waarin R^ een waterstofatoom of alkyl (eventueel gesubstitueerd door een hydroxyl-, alkoxy-of cycloalkylgroep )aryl of aralkyl voorstelt_7, met dien verstande dat tenminste één van de symbolen en R^ een groep -OP(0)(OH)(0R^) voorstelt, en R^ een waterstof- of halogeenatoom |5 of een methylgroep is, en zouten daarvan.

R^ is bij voorkeur een methylgroep of in het bijzonder een waterstofatoom .

Bijzondere voorbeelden van de groep R^ zijn een waterstofatoom, een rechte of vertakte alkylgroep met 20 1-5 koolstofatomen , een (C^_^)alkoxyethylgroep (zoals 2- methoxyethyl), een tetrahydrofuranylmethylgroep (bijvoorbeeld 2-tetrahydrofuranylmethyl), een (C^_^)cycloalkylmethylgroep (bijvoorbeeld cyclohexylmethyl) , een alkenylgroep met 3-6 koolstofatomen (bijvoorbeeld allyl), een cycloalkylgroep met 5-7 koolstofatomen 25 (bijvoorbeeld cyclohexyl), fenyl, fenyl(C^_^)alkyl (bijvoorbeeld benzyl) waarbij het fenylgedeelte eventueel gesubstitueerd is door een nitrogroep (bijvoorbeeld p-nitro) of een benzoyl(C^_^)-alkylgroep (bijvoorbeeld benzoylmethyl).

In de verbindingen met formule 1 is R^ 3Q bij voorkeur een rechte alkylgroep met 1-5 koolstofatomen (bijvoorbeeld methyl of n-propyl) , een tetrahydrofuranylmethylgroep, een fenyl(C^ ^alkylgroep (bijvoorbeeld benzyl) of een benzoyl-(C|_g)alkylgroep (bijvoorbeeld benzoylmethyl).

Verbindingen met formule 1 waarin R^ een wa-35 terstofatoom is en R2 een groep -0P(0)(OH)(0R^) is ( waarin R^ de hierboven gedefinieerde betekenis heeft, in het bijzonder benzyl 8701768 * » - 4 - of benzoylmethyl) en zouten daarvan , hebben de voorkeur.

Een voorkeursgroep verbindingen met formule 1 zijn verbindingen waarin een waterstofatoom is, R2 een groep -0P(0)(OH)(OR^) is en R^ een waterstofatoom is en zouten 5 daarvan. Dergelijke verbindingen waarin R^ een rechte alkylgroep met 1-5 koolstofatomen ( bijvoorbeeld methyl of n-propyl) , een tetrahydrofuranylmethylgroep , een fenyl(C ^ _^)alkylgroep (bijvoorbeeld benzyl) of een benzoyl(C ) alkylgroep (bijvoorbeeld benzoylmethyl) is , hebben in het bijzonder de voorkeur.

10 Een bijzonder belangrijke verbinding volgens ✓ de uitvinding is fenylmethyl-^5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,6V~isoindolo/2,1-b7isochinolin-9~yl/fosforzuur en de zouten daarvan, in het bijzonder het natriumzout.

15 Een andere belangrijke verbinding volgens de uitvinding is 2-oxo-2-fenylethyl-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz-/5,6_7-isoindolo/2,1 -b/i sochino lin- 9-yl/~ fosforzuur en de zouten daarvan , in het bijzonder het natriumzout.

De verbindingen met formule 1 zijn 20 werkzaam tegen kanker, in het bijzonder tegen tumoren zoals carcinomen , sarcomen en hepatomen.

Wanneer een verbinding met formule 1 bijvoorbeeld intraperitoneaal of intraveneus toegediend wordt aan muizen met een subcutane tumor, veroorzaakt door een implant 25 van S180-cellen, is bij onderzoek daarna aangetoond, dat de tumorgroei in belangrijke mate afgenomen was en dat in sommige gevallen de tumor volledig verdwenen was. Aktiviteiten tegen HT29 Human Colon Xenograft in naakte muizen en muize-adenocarcinoom MAC30T zijn eveneens aangetoond.

30 Verbindingen volgens de uitvinding hebben ook bijzonder gunstige fysisch-chemische eigenschappen. Zo hebben verbindingen volgens de uitvinding bijvoorbeeld een betere oplosbaarheid in water in de buurt van de fysiologische pH (bijvoorbeeld pH 6,0 tot 8,0) ten opzichte van de isochinoline- 35 verbindingen die in de Europese octrooipublicaties 108620 en 161102 beschreven worden, waardoor zij bijzonder geschikt zijn voor verwerking tot preparaat voor parenterale toediening .

Volgens nog een aspekt heeft de uitvinding 8701768 - 5 - dan ook betrekking op een verbinding met formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan ten gebruike bij de bestrijding van kanker , in het bijzonder tumoren, bij mensen of dieren.

Volgens nog een aspekt heeft de uitvinding betrekking op het gebruik van een verbinding met formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan voor de vervaardiging van een therapeutisch middel voor de bestrijding van kanker, in het bijzonder tumoren, bij mensen of dieren.

10 · ♦ ♦

Volgens nog een aspekt heeft de uitvinding betrekking op een werkwijze voor de bestrijding van kankers , in het bijzonder tumoren , bij mensen of dieren, waarbij men aan het menselijk of dierlijk lichaam een doeltreffende hoeveelheid van een verbinding met formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar ^ zout daarvan toedient.

Het zal duidelijk zijn dat de verbindingen volgens de uitvinding geschikt gebruikt kunnen worden in combinatie met één of meer andere therapeutischesniddelen, zoals bijvoorbeeld middelen tegen braken, immunosuppressiva of andere middelen tegen 20 ....

kanker. Vanzelfsprekend heeft de uitvinding betrekking op het gebruik van een verbinding met formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan in combinatie met één of meer andere therapeutische middelen.

Volgens nog een aspekt heeft de uitvinding OC , # betrekking op een farmaceutisch preparaat dat als een werkzaam bestanddeel een verbinding met formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan in combinatie met één of meer farmaceutische dragers of excipienten omvat.

De verbindingen volgens de uitvinding ΟΛ , , J kunnen tot preparaat verwerkt worden voor toediening op elke geschikte wijze , en binnen het kader van de uitvinding vallen dan ook tevens farmaceutische preparaten die een verbinding met formule 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan omvatten en geschikt zijn voor gebruik in de humane of veterinaire geneeskunde.

J Dergelijke preparaten kunnen voor toepassing op conventionele wijze gepresenteerd worden in combinatie met één of meer fysiologisch aanvaardbare dragers of excipienten. De preparaten kunnen voorts eventueel één of meer andere therapeutische middelen bevatten, 8701768 » - 6 - zoals een ander middel tegen kanker of een middel tegen braken of een immunosuppressivum.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen derhalve tot preparaat verwerkt worden voor orale, buccale, 5 locale, rectale of, bij voorkeur, parenterale toediening, (bijvoorbeeld door bolus-injektie of intraveneuze infusie) ·

Preparaten voor injekties zijn steriele produkten en kunnen gepresenteerd worden in eenheidsdosisvorm, bijvoorbeeld als ampullen , fiolen, infusies met een klein volume 10 of tevoren gevulde spuiten, of in houders met een veelvoudige dosis, bijvoorbeeld met een toegevoegd conserveermiddel. De preparaten kunnen voorkomen als oplossingen, suspensies of emulsies in waterige of niet-waterige dragers , en kunnen verwerkingsmiddelen bevatten zoals anti-oxydanten, buffers, volumineus makende middelen, 15 cheleermiddelen, anti-microbiele middelen, solubiliseermiddelen , oppervlakteaktieve stoffen en/of middelen voor het instellen van de toniciteit. In plaats daarvan kan het werkzame bestanddeel (al dan niet met toevoegsels) gepresenteerd worden als een droge stof welke voor gebruik samengesteld moet worden met een geschikte 20 drager, bijvoorbeeld steriel pyrogeenvrij water of dextrose.

Deze droge vaste stof kan bereid worden door een steriel poeder aseptisch af te vullen in afzonderlijke steriele houders of door een steriele oplossing aseptisch af te vullen in elke houder en te vriesdrogen.

25 De verbindingen volgens de uitvinding kunnen eveneens verwerkt worden tot preparaten voor orale toediening.

Als tabletten of capsules kunnen zij conventionele excipienten bevatten zoals bindmiddelen, vulstoffen , glijmiddelen, middelen die het uiteenvallen bevorderen of bevochtigingsmiddelen. De tabletten 30 kunnen volgens algemeen in de techniek bekende methoden bekleed worden. Vloeibare preparaten voor oraal gebruik kunnen bijvoorbeeld gepresenteerd worden als waterige of olieachtige suspensies, oplossingen, emulsies, siropen of elixers , of als een droog produkt dat voor gebruik samengesteld moet worden met water of een andere 35 geschikte drager. Dergelijke vloeibare preparaten kunnen conventionele toevoegsels bevatten zoals suspendeermiddelen, oppervlakteaktieve stoffen, niet-waterige dragers, conserveermiddelen, suikers , zoetstoffen, buffers, kleurstoffen, anti-oxydanten en/of 8701768 4 - 7 - smaakstoffen . De verbindingen kunnen ook tot zetpillen verwerkt worden, bijvoorbeeld met conventionele zetpilbasis zoals cacaoboter of andere glyceriden.

Voor buccale toediening kunnen de preparaten 5 gepresenteerd worden als tabletten of tabletjes die op conventione le wijze vervaardigd worden.

Voor lokale toediening kunnen de verbindingen volgens de uitvinding verwerkt worden tot zalven, crèmes, lotions, poeders, pessariums, spray’s , aerosolen of druppels (bijvoorbeeld 10 oog- of neusdruppels). Zalven en crèmes kunnen bijvoorbeeld bereid worden met een waterige of olieachtige basis onder toevoeging van geschikte verdikkingsmiddelen en/of gelvormende middelen. Dergelijke bases kunnen bijvoorbeeld water en/of een olie zoals vloeibare paraffine of een plantaardige olie zoals arachideolie of ricinus-15 olie omvatten. Lotions kunnen met een waterige of olieachtige basis bereid worden en zullen in het algemeen ook één of meer emulgeermiddelen, stabiliseermiddelen, dispergeermiddelen, suspen-deermiddelen, verdikkingsmiddelen en/of kleurstoffen bevatten.

Poeders kunnen met behulp van een geschikte poederbasis , bijvoor-20 beeld talk, lactose of zetmeel, gevormd worden. Druppels kunnen bereid worden met een waterige of niet- waterige basis welke eveneens één of meer dispergeermiddelen, solubiliseermiddelen of suspendeermiddelen omvat. Aerosolspray's worden doelmatig uit drukvaten geleverd, met behulp van een geschikt drijfgas, bijvoorbeeld 25 dichloordifluormethaan, trichloorfluormethaan, dichloortetrafluor- ethaan, kooldioxyde of een ander geschikt gas.

De preparaten kunnen 0,1-100% van de werkzame stof bevatten.

Ook kan men een verbinding volgens de 30 uitvinding in het bijzonder bestemmen voor een tumor door opneming in het preparaat van specifieke dragersystemen voor geneesmiddelen zoals liposomen, albumen-microbollatjes of monoclonale anti lichamen.

Voor systemische toediening bedraagt de 35 dagelijkse dosering bij de behandeling van een volwassene in het algemeen 5-5000 mg, bij voorkeur 50-2000 mg , welke hoeveelheid 8701768 ί f - 8 - bijvoorbeeld in 1 tot 5 dagelijkse doses toegediend kan worden, afhankelijk van de toedieningsroute ends toestand van de patient. Wanneer de preparaten doseringseenheden bevatten , bevat elke eenheid bij voorkeur 10-2000 mg werkzaam bestanddeel, bijvoorbeeld 5 50-1000 mg.

Voor lokale toediening bedraagt de dagelijkse dosering bij de behandeling van een volwassene in het algemeen 0,1-1000 mg , afhankelijk van de toestand van de patient.

De verbindingen volgens de uitvinding kunnen 10 bereid worden volgens een aantal werkwijzen welke hierna beschreven worden, waarbij de verschillende groepen en symbolen de bij formule 1 gedefinieerde betekenis hebben,tenzij anders aangegeven wordt.

Zo kan een verbinding met formule 1 volgens werkwijze ( A) bereid worden door reaktie van een verbinding met i5 formule 2, waarin één van de symbolen R^ en Ry een groep -0P(0) (X^) voorstelt, waarbij een atoom of groep voorstelt welke omgezet kan worden in een hydroxylgroep,en een hydroxylgroep of een X^-rest voorstelt,en het andere symbool een waterstofatoom, een hydroxylgroep of een hierboven gedefinieerde groep -0P(0) (X^) 20 voorstelt, om tenminste één X^-rest om te zetten in een hydroxygroep ter verkrijging van een verbinding met formule 1, bijvoorbeeld door hydrolyse of ethersplitsing. Voorbeelden van als atomen dié omgezet kunnen worden in een hydroxygroep zijn halogeenatomen zoals chloor of broom.

25 Voorbeelden van X^ als groepen die omgezet kunnen worden in een hydroxygroep, zijn de groepen OX^, waarin X^ bijvoorbeeld een alkylgroep, eventueel gesubstitueerd door hydroxyl, alkoxy, cyclische ether of cycloalkyl , of een alkenyl-, cycloalkyl-, aryl-, aralkyl- of aroylalkylgroep kan zijn.

30 De omzetting van X^ in een hydroxygroep kan onder toepassing van conventionele methoden uitgevoerd worden. Zo kan bijvoorbeeld een halogeenatoom vervangen worden door een hydroxygroep door hydrolyse, bijvoorbeeld basische hydrolyse onder toepassing van een geschikte base zoals een alkalimetaalhydroxyde in 35 een geschikt oplosmiddel zoals waterig tetrahydrofuran.

8 7 0 Γ/ 6 8 4 - 9 -

De omzetting van OX^ in een hydroxygroep kan uitgevoerd worden onder toepassing van een nucleofiel , bijvoorbeeld een halogenideion zoals een jodideion ( bijvoorbeeld verkregen uit een alkalimetaalhalogenide zoals natriumjodide) of een kwatemair ammoniumhalogenide zoals triethylaminehydrojodide in een inert oplosmiddel zoals een keton (bijvoorbeeld aceton of butaan-2-on) of een gesubstitueerd amide (bijvoorbeeld dimethyl-formamide ) , of door reaktie met een trialkylsilyljodide zoals trimethylsilyljodide in een oplosmiddel zoals een halogeenkoolwater-stof (bijvoorbeeld tetrachloorkoolstof) gevolgd door hydrolyse, bijvoorbeeld basische hydrolyse onder toepassing van een geschikte base zoals een alkalimetaalhydroxyde.

De reaktie kan bij elke geschikte temperatuur, bijvoorbeeld -10 tot +100°C uitgevoerd worden.

^ Het zal duidelijk zijn dat de reaktie in overeenstemming met de conventionele praktijk zodanig uitgevoerd kan worden, dat , wanneer -0P(0)(X^)(X^) -0P(0)(OX^)(OX^) voorstelt, slechts één van de twee OX^-groepen omgezet wordt in een hydroxygroep. Onder deze omstandigheden worden secundaire 20 fosfaten met formule 1, waarin R^ een alkylgroep, eventueel gesubstitueerd door hydroxyl, alkoxy, cyclische ether of cycloalkyl of een alkenyl- , cycloalkyl-, aryl-, aralkyl- of aroylalkylgroep voorstelt , bereid. In plaats daarvan kunnen beide OX^-groepen met behulp van trimethylsilyljodide omgezet worden in hydroxygroepen.

25

Onder deze omstandigheden worden primaire fosfaten met formule 1, waarin R^ een waterstofatoom is, bereid.

Het zal voorts duidelijk zijn, dat de reaktie zodanig uitgevoerd kan worden , dat , wanneer een alkalimetaalhalogenide ( zoals lithium-, natrium - of kaliumjodide) 30 gebruikt wordt, het betreffende alkalimetaalzout van een verbinding met formule 1 bereid wordt.

Volgens werkwijze(B) kan een verbinding met formule 1 bereid worden door reaktie van een verbinding met formule 3 waarin ééivan de symbolen R„ en R0 een hydroxygroep 35 ö y voorstelt en het andere symbool een waterstofatoom of een hydroxygroep voorstelt, teneinde een hydroxygroep op de plaats 9 en/of 12 8701768 -10- om te zetten in een groep -OP(0)(OH)(OR^) waarin R^ de in formule 1 gedefinieerde betekenis heeft.

De omzetting kan op gebruikelijke wijze teweeg gebracht worden, bijvoorbeeld door reaktie van een verbinding 5 met formule 3 met een halogeenfosfaat BalP(O)(OH)(0R^) of

HalP(O) (X.j) (X^) , waarin Hal een halogeenatoom zoals chloor is en X.| en X£ de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, of een pyrofosfaat (R^O) (HO) (O)P-O-P(O) (OH) (0R4) of (Χ^ (X2) (O)P-O-P(O) (X )-(X2), waarin X^ en X2 de hiervoor gedefinieerde betekenis hebben, 10 zo nodig gevolgd door omzetting van één of meer X^-resten in een hydroxygroep volgens de in werkwijze (A) beschreven methode.

De reaktie met het fosforyleringsmiddel kan doelmatig uitgevoerd worden in aanwezigheid van een base, bijvoorbeeld een alkalimetaal-hydride zoals natriumhydride of een alkali- of aardalkalimetaal-15 carbonaat zoals kaliumcarbonaat in een inert oplosmiddel zoals een ether , bijvoorbeeld tetrahydrofuran, een aromatische koolwaterstof, zoals tolueen, of een keton zoals aceton , of een mengsel van dergelijke oplosmiddelen. De reaktie kan doelmatig uitgevoerd worden bij 0- 100°C,bijvoorbeeld 20°C.Het zal duidelijk 20 zijn, dat reaktie met een halogeenfosfaat HalP(O)(X^)(X2) of een pyro- ibsfaat (X^) (X2) (O)P-O-P(O) (X^) ^) aanvankelijk tot de vorming van een verbinding met formule 2 leidt, welke verbinding desgewenst geïsoleerd kan worden.

Volgens werkwijze (C) kan een verbinding met 25 formule 1 waarin R^ een waterstofatoom of een methylgroep is, bereid worden door condensatie van een chinon met formule 4, waarin één van de symbolen R^q en R^ een groep -0P(0)(OH)(OR^) of -0P(0) (X,j) (X2) voorstelt, waarbij X^ en X2 de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, en het andere symbool een waterstofatoom, een 30 hydroxygroep, een groep -OP(0)(OH)(OR^) of een groep -0P(0)(X^)(X2) voorstelt, waarbij X^ en X2 de hierboven gedefinieerde betekenis hebben, met een verbinding met formule 5, waarin R^2 een waterstofatoom of een groep -CH0 of -COCH^ voorstelt, en daarna desgewenst omzetting van één of meer X^-resten in een 35 hydroxygroep onder vorming van een verbinding met formule 1.

De reaktie tussen de verbindingen met formule 4 en 5 kan uitgevoerd worden in aanwezigheid van een alkaanzuur- 8701768 - 11 - 4 anhydride, zoals azijnzuuranhydride, bij een verhoogde temperatuur, bijvoorbeeld 100°C. De omzetting van één of meer X^-resten in een hydroxygroep kan teweeg gebracht worden onder omstandigheden zoals beschreven bij werkwijze (A).

5 De verbindingen met formules 1, 2 en 3 waarin R^ een halogeenatoom is, kunnen bereid worden door halogenering van een overeenkomstige verbinding waarin R^ een waterstofatoom is. Standaard halogeneringsmethoden kunnen gebruikt worden, zoals reaktie met een N-chloor-, N-broom- of N-joodimide, bijvoorbeeld 10 N-chloor- , N-broom- of N-joodsuccinimide, of perchlorylfluoride in een inert oplosmiddel zoals dichloormethaan bij omgevingstemperatuur.

De verbindingen met formule 2 kunnen bereid worden uit verbindingen met formule 3 zoals beschreven bij werkwijze 15 (B). In plaats daarvan kunnen de verbindingen met formule 2 waarin

Rg waterstof of methyl is, bereid worden door condensatie van een verbinding met formule 4 waarin één van de symbolen R^q en R^ een groep -0P(0)(X^)(X^) is en het andere symbool een waterstofatoom, een hydroxygroep of een groep -OP(O)(X^) 20 voorstelt, met een verbinding met formule 5 volgens de methode van werkwij ze (C).

De verbindingen met formule 3 waarin R^ waterstof of methyl is, kunnen bereid worden door condensatie van een chinon met formule 6, waarin één van de symbolen R^ en R^ 25 een hydroxygroep of een beschermde hydroxygroep zoals een acyloxy-groep, bijvoorbeeld acetoxy of halogeenmethylcarbonyloxy is,en. het andere symbool een waterstofatoom , een hydroxygroep of een hierboven gedefinieerde beschermde hydroxygroep is, met een verbinding met formule 5 volgens de methode van werkwijze (C), 30 zo nodig gevolgd door verwijdering van de beschermende groep, bijvoorbeeld onder zure omstandigheden met bijvoorbeeld zoutzuur in een oplosmiddel zoals tetrahydrofuran.

De verbindingen met formule 4 kunnen bereid worden door fosforylering van een verbinding met formule 7,waarin 35 één van de symbolen R^ en R^g een hydroxygroep is en het andere symbool een waterstofatoom of een hydroxygroep voorstelt, volgens 8701768 t - 12 - de methode van werkwijze (B) . De verbindingen met de formules 5, 6 en 7 zijn bekende verbindingen die in het Europese octrooi-scbrift 161102 en het Britse octrooischrift 2.175.587 beschreven worden.

^ > De tussenprodukten met formule 2 zijn nieuwe verbindingen en vormen nog een aspëct van de uitvinding. Sleuteltussenprodukten met formule 2 zijn die verbindingen waarin een waterstofatoom is, R^ een waterstofatoom is en R^ een groep -0P(0)(X.)(X„) is , waarin X. en X? beide 0X_ voorstellen.

10 ..1 1 1 . Δ ó

Dergelijke tussenprodukten waarin X^ benzoylmethyl of mhet bijzonder benzyl is , zijn van bijzonder belang.

Wanneer een zout van een verbinding met formule 1 gevormd wordt , kan het overeenkomstige zuur op gebruikelijke wijze verkregen worden door toevoegen van een geschikt zuur, 15 ..

bijvoorbeeld een anorganisch zuur zoals zoutzuur.

Wanneer een verbinding met formule 1 in de zure vorm verkregen wordt, kan een overeenkomstig zout op gebruikelijke wijze verkregen worden, bijvoorbeeld door toevoegen van een base welke het vereiste kation levert, bijvoorbeeld natrium- 20 hydroxyde of een alkalimetaalcarboxylaat zoals een natriumcarboxy-laat ( bijvoorbeeld natrium-2-ethylhexanoaat). Zo kan een zout van een verbinding met formule 1 bereid worden door een verbinding met formule 1 in de zuurvorm te behandelen met een geschikte base in een oplosmiddel zoals water, een ether, bijvoor-25 beeld tetrahydrofuran , of een alkohol zoals isopropylalkohol of een mengsel daarvan. De reaktie kan doelmatig bij omgevingstemperatuur uitgevoerd worden. In plaats daarvan kan een zout van een verbinding met formule 1 verkregen worden door een geschikte verbinding met formule 2 te behandelen met een alkalimetaalhalogenide 30 (bijvoorbeeld lithiumjodide, natriumjodide of kaliumjodide) in een geschikt oplosmiddel zoals water of een keton, bijvoorbeeld aceton of buüan-2-on , of een mengsel daarvan, doelmatig bij omgevingstemperatuur. Een aminozuurzout van een verbinding met formule 1 kan verkregen worden door een verbinding met formule 1 in 35 ... . .

de zuurvorm te behandelen met een aminozuur, bijvoorbeeld L-arginme- monohydraat in water bij omgevingstemperatuur.

8701768 - 13 -

Een zout van een verbinding met formule 1 kan op gebruikelijke wijze door ionenuitwisseling omgezet worden in een ander zout , bijvoorbeeld een fysiologisch aanvaardbaar zout.

Wanneer een specifiek enantiomeer met formule 1 vereist wordt, kan dit met gebruikelijke op zichzelf bekende scheidingsmethoden bereid worden. Zo kunnen bijvoorbeeld racemische verbindingen volgens de uitvinding als zouten met optisch aktieve basen, bijvoorbeeld (+)-dehydroabietylamine of (R)-(+)-of (S)-(-)-6<-methylbenzylamine gescheiden worden. In plaats daarvan 10 kunnen optisch aktieve verbindingen met formule 1 bereid worden uit optisch aktieve tussenprodukten, bijvoorbeeld optisch aktieve tussenprodukten met formule 5. Racemische verbindingen met formule 5 waarin waterstof is, kunnen bijvoorbeeld als zouten met optisch aktieve basen zoals hierboven beschreven of met optisch ^ aktieve zuren, bijvoorbeeld (L)-(+)- of (D)-(-)- wijnsteenzuur gescheiden worden. Verbindingen met formule 5 waarin R^ CHO of COCHg is , kunnen op soortgelijke wijze als zouten met optisch aktieve basen gescheiden worden.

In de volgende voorbeelden hebben alle 20 . . .

UV-gegevens betrekking op oplossingen van de betreffende verbindingen in ethanol, tenzij anders aangegeven wordt.

Tussenprodukt (1)

Juglon-5-bis(fenylmethyl)fosfaat 25 ; ;

Een oplossing van sulfurylchloride ( 3,48 g) in tolueen (25 ml) werd onder roeren en onder stikstof toegevoegd aan een oplossing van dibenzylfosfiet (6,08 ml) in tolueen.

Het mengsel werd 75 min onder stikstof geroerd, met 8% natriumbicarbo- naatoplossing (75 ml) uitgewassen , waarna de organische laag 30 . ...

afgescheiden en over watervnj natnumsulfaat gedroogd werd.

Na filtratie werd het filtraat ingedampt en gedroogd onder verkrijging van dibenzylchloorfosfaat ( 7,75 g) als een kleurloze olie.

Kaliumcarbonaat ( 1,81 g) werd onder roeren bij kamertemperatuur toegevoegd aan een oplossing van 5-hydroxy-1,4-naftaleendion (2,18 g) 35 in acetonitril ( 300 ml). Vers bereid dibenzylchloorfosfaat (7,75 g, zie boven) in acetonitril ( 50 ml) werd toegevoegd en het mengsel werd 20 uur geroerd. Kaliumcarbonaat ( 907 mg) werd vervolgens toege- 8701768 t - 14 - voegd en na nog eens 24 uur werd nog een hoeveelheid (907 mg) kaliumcarbonaat toegevoegd. Het mengsel werd drooggedampt en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van een olie. De olie werd onderworpen aan kolomchromatografie ( silica, 500 g, 70-230 mesh) met dichloormethaan:aceton ( 96:4) als elutiemiddel. Frakties (250 ml) werden verzameld en de frakties 4-12 werden gecombineerd en het oplosmiddel werd af gedampt. Na drogen onder vacuum werd de titelverbinding ( 3,18 g) als een oranje vaste stof verkregen ; 6 (CDC1J 5,28 (OCHJ, 7,38 (Ph).

10

Tussenprodukt (2)

Bis(fenylmethyl)—/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67~isoindolo/2,1-b7isochinolin-9-yl7fosfaat

Azijnzuuranhydride ( 12 ml) werd toegevoegd 15 ...

aan een mengsel van N-formyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinoline-4- methyl-3-carbonzuur (625 mg) en tussenprodukt (1) (3,165 g).

Het reaktiemengsel werd 30 min onder roeren verwarmd op 100°C , daarna afgekoeld en onder verminderde druk drooggedampt. De verkregen olie werd in dichloormethaan ( 5 ml) opgelost , waarna ether 20 toegevoegd werd en de oplossing m een aceton-droogijs-bad afgekoeld werd. De verkregen gele vaste stof werd door filtratie verzameld en bij kamertemperatuur gedroogd onder verkrijging van de titelver- binding (1,16 g); δ (CDC13) 5,2-5,4 (0CH2), 5,23 + 5,13 (5H) 4,95 (14H), 1,55 (14 CH,) 25 -5 7 Tussenprodukt (3) 5,6,13,14-Tetrahydro-9~hydroxy-14-methylbenz- Z5,67isoindoloZ2,1-b^-isochinoline-e,13-dion

Water ( 312 ml) en geconcentreerd zoutzuur 30 (169 ml) werden toegevoegd aan een suspensie van 5,8,13,14-tetrahydro-9-/j oodacetoxyJ-14-methylbenz/5, bj isoindolo/2,1-bJisochinoline- 8,13-dion ( 80,0 g , tussenprodukt 9 in het Britse octrooischrift 2.175.587 ) in tetrahydrofuran ( 1,335 1). Dit mengsel werd onder stikstof 18 uur geroerd en onder terugvloeiing verwarmd, en een 35 gedeelte ( 550 ml) van het oplosmiddel werd door destillatie bij atmosferische druk verwijderd. De verkregen suspensie werd 4,5 uur 8701768 t - 15 - geroerd en afgekoeld tot ca. 5°C , en de vaste stof werd door filtratie verzameld , met koude tetrahydrofuran uitgewassen en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding (48,8 g);X 243 nm (MeOH), e] 1022; b (CDClJ 12,98 (0H,s,1H), max I j 5 5,27 (5-H,d,l6Hz,1H), 5,16 (5-H, d,16Hz,1H), 4,98 (14-H,q,7Hz,1H), 1,55 (14-CH3,d,7Hz,3H).

Tus senprodukt(4)

Dimethyl-Z5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-10 8,13-dioxobenz/5,6/isoindolo/2,1-b7isochlnolin-9-yl7fosfaat a) Van een 60% dispersie van natriumhydride in olie ( 200 mg) werd de olie weggewassen met petroleumether met kookpunt 40-60°C (2 x 10 ml) onder een stikstofatmosfeer . Droge tetrahydrofuran ( 25 ml) werd aan het natriumhydride toegevoegd, 15 gevolgd door toevoegen van Tussenprodukt (3) (1,5 g) in droge tetrahydrofuran ( 150 ml). De verkregen oplossing werd bij 20°C 15 min onder stikstof geroerd en vervolgens met een oplossing van vers gedestilleerd dimethylchloorfosfaat ( 723 mg) in droge tetrahydrofuran ( 5 ml) behandeld. Na 1 uur werd het reaktie-20 mengsel met water ( 500 ml) verdund en met dichloormethaan ( 3 x 250 ml) geextraheerd. De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en ingedampt tot een groen schuim dat gezuiverd werd door kolomchromatografie op silica ( 100 g) met dichloormethaan-methanol ( 29:1) als elutiemiddel 25 onder verkrijging van de titelverbinding als een groen schuim (1,539 g);^^ 241,6 nm, eJ 1052, 369,4 nm, e] 158; S (CDC13) 5,26 (5-H,d,17Hz,1H), 5,14 (5-H,d,17Hz,1H), 4,96 (l4-H,q,7Hz,1H), 4,02 (OCH3,m,6H), 1,57 (14-CH3,d,7Hz,3H).

3q De volgende verbindingen werden op soort gelijke wijze bereid onder toepassing van Tussenprodukt (3) en het geschikte halogeenfosfaat.

b) Diethyl-/5,8,13,14~tetrahydro-14-methyl- 8,13-dioxobenz/5,67~isoindolo/2,1-b7isochinolin-9-yl7fosfaat, 35 (5,609 g) uit Tussenprodukt (3) ( 4,0 g) en diethylchloorfosfaat (2,305 g);\ 243,5 nm, e! 1007, 372 nm, E1155; S (CDCl ) 5,23 max 1 ^ v (5-H,d,16Hz,1H), 5,13 (5-H,d,16Hz,1H), 4,93 (14-H,q,7Hz,1H) , 8701768 - 16 - 4,37 (0CH2CH3,m,4H), 1,55 (14-CH3,d,7Hz,3H), 1,38 (OCH2CH3,m,6H).

c) Dipropy1-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67~isoindolo/2,1-b7isochinolin-9-yX7fos- 5 faat, (2,068 g) uit Tussenprodukt (3) ( 2,0 g) en dipropylchloor- fosfaat ( 1,339 g);λ 242,4 nm e] 940, 369,6 nm, e| 132; £) (CDC1-) 5.25 (5-H,d,16Hz,1H), 5,15 (5-H,d,16Hz,1H), 4,95 (14-H,q,7Hz,1H), 4,27 (OCH2CH2CH3,m,4H), 1,76 (OCH2CH2CH3, m,4H), 1,56 (14-CH3,d,7Hz, 3H), 0,97 (OCH2CH2CH3,m,6H).

10 d) Bis (1 -methylethyl) -£5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz-/5»67isoindolo/2,1-b7isochinolin-9-yl7~ fosfaat, ( 1,563 g) uit Tussenprodukt (3) (1,5 g) en diisopropylchloor-fosfaat (1,003 g);Λ 241,8 nm, e] 880, 369,6 nm, e! 132; IÏ1£L2£ 1 1 15 & (CDC13) 5,25 (5-H,d,16Hz,1H), 5,15 (5-H,d,16Hz,1H), 4,85-5,10 (14-‘ H+OCH(CH3)2,m,3H),1,56 (14-CH3,d,7Hz,3H), 1,30-1,45 (0CH(CH3)2,m,12H).

e) Dibutyl-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl- 8,13-dioxobenz/5,67-isoindoloZ2,1-h/isochinolin-9-yl7fosfaat, 20 (1,628 g) uit Tussenprodukt (3) (1,5 g) en dibutylchloorfosfaat (1,143 g);A 241,8 nm , e! 956, 369,8 nm, e] 129; 5(CDC1„) 5.25 (5-H,d,16Hz,1H), 5,15 (5-H,d, 16Hz, 1H), 4,96 (l4-H,q,7Hz, 1H), 4,31 (0CH2CH2CH2CH3,m,4H), 1,62-1,80 (0CH2CH2CH2CH3,m,4H), 1,56 (14-CH3,d,7Hz,3H), 1,32-1,52 (0CH2CH2ra2CH3,m,4H), 0,92 25 (OCH2CH2CH2CH3,m,6H).

f) Bis(tetrahydro-2-furanylmethyl)-Z5>8,13,14- ^ tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenzZS,67isoindolo/2,1-b7isochinolin- 9-yl7fosfaat, ( 1,00 g) uit Tussenprodukt (3) (2,0 g) en bis(tetra- 30 hydro-2-furanylmethyl)-chloorfosfaat (6,78 g , vers bereid uit fosfortrichloride en tetrahydrofurfurylalkohol ) ,behalve dat de zuivering eerst uitgevoerd werd door kolomchromatografie op silica (650 g) met dichloormethaan-aceton (4:1) als elutiemiddel, waarna het verkregen gele schuim verder gezuiverd werd door kolom- 35 chromatograf ie op silica (70 g) met dichloormethaan-methanol (96:4) als elutiemiddel; Λ 242,2 nm, e] 809, 369,8 nm, e] 117; ’ v max * 1 1 8701768 - 17 - & (CDC13), 5,24 (5-H, d, 17Hz,1H); 5,16(5-H,d, 17Hz, 1H) ; 4,96(14-H,q,7Hz,1H); 4,30(POCH2,m,4H), 4,21(0CH2CH0,m,2H); 1,56 (14-ffi3,d,7Hz,3H) g) Cyclohexylmethyl~/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz-/5,6jisoindolo/2,1-tt7isochinolin-9~yl/-fosfaat, (1,409 g) uit Tussenprodukt (3), (3,0g) en cyclohexylmethyl-chloorfosfaat (2,9 g, vers bereid uit methyldichloorfosfaat en • cyclohexanol) ? 242,4 nm, e| 899, 369,6 nm, eJ 150 ;S (CDCl^) 10 5,23 (5-H,d,16Hz,1H) 5,13 (5-H,d,16H,1H), 4,95 (14-H,q, 7Hz, 1H), 4,64 (0CH,m,1H), 4,01(OCH3,m,3H), 1,54(14-CH3,d,7H3,3H).

h) Bis(2-propeny1)-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1-\J isochinolin-9-yl7fosfaat, ^ (3,554 g) uit Tussenprodukt (3)(3,0 g) en diallylchloorfosfaat (2,68 g) , behalve dat de zuivering uitgevoerd werd door kolomchro-matograf ie op silica ( 300 g) met dichloormethaan-aceton (94: 4) als Λ. Λ elutiemiddel ; Λ 242,2 nm, E, 973, 371,8 nm, E, 148 jS (CDCl,), max i i o 5,90-6,10 (CH, m, 2H), 5,20-5,45 (CH2, m, 4H), 5,25 (5-H,d,17Hz,1H), 20 5,15 (5-H,d,17Hz,1H), 4,94 (14-H,q, 7Hz,1H) 4,75-4,90 (0CH2,m,4H), 1,58 (14-CH3,d,7H3,3H).

i) Dipenty1-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl- 8,13-dioxobenz/5,67~isoindolo/2,1-bJisochinolin-9-yl7fosfaat, (2,07 g) 2-* uit Tussenprodukt (3) (2,0 g) en dipentylchloorfosfaat ( 1,715 g, vers bereid uit fosfortrichloride en 1-pentanol), behalve dat de olie na indampen opgelost werd in diethylether ( 50 ml) en 30 min bij 20°C geroerd werd, waarna de verkregen gekraste stof gefil- treerd en met diethylether uitgewassen werd;Λ 242,4 nm, E. 913, . 1Q3X 7 30 369,4nm, Ej 137 ; S (CDC13) 5,24 (5-H,d,17Hz,1H), 5,14 (5-H,d,17Hz, 1H), 4,96 (14-H,q,7Hz,iH), 4,20-4,40 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m,4H), 1,65-1,85 (POCH2CH2CH2CH2CH3, m,4H), 1,56 (14-CH3, d, 7Hz,3H), 1,20-1,45 (P0CH2CH2CH2CH2CH3, m, 8H) , 0,88 (PQCH2CH2CH2CH2CH3, m, 6H).

35 j) Bis-(2-methoxyethyl)-/5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13-dioxobenz/3,6jisoindolo/2,1-h7isochinolin-9-yl7fosfaat (2,07 g) uit Tussenprodukt (3) (2,0 g) en bis(2-methoxyethyl)chloor- 8701768 - 18 - fosfaat (1,55 g, vers bereid uit 2-methoxyethanol en fosforoxy-chloride), behalve dat de kolom met dichloormethaan-aceton (4:1) geelueerd werd; \ 242,2 nm e] 920, 371,6 nm, e! 142; &(CDC13), 5,23(5-H,d,17Hz,1H), 5,13 (5-H,d,17Hz,1H), 4,95 (14-H,q, 5 7Hz,1H), 4,48 (P0CH2,m,4H), 3,68 (P0CH2CH2, m,4H), 3,39 (OCH3,s,3H), 3,40 (0CH3,s,3H), 1,57 (14-CH3,d,7Hz,3H).

k) Bis(cyclohexylmethyl)-/5,8,13,14-tetra- hydro-14-methyl-8,137dioxobenz/j,6j/isoindolo/2,1-h./isochinolin-9- 10 yj/fosfaat ( 5,302 g) uit Tussenprodukt (3) ( 4,0 g) en bis(cyclohexylmethyl)chloorfosfaat ( 8,22 g, vers bereid uit fosfor- trichloride en cyclohexylmethanol), behalve dat de vaste stof na het indampen aangewreven werd met ether ( 100 ml) en uit ethyl- acetaat/chloroform gekristalliseerd werd ;λ 242,4 nm, E 778,

j max I

15 369,6 nm, E,] 119; 6 (CDC13) 5,25 (5-H,d,16Hz, 1H), 5,15 (5-H,d, 16Hz,1H), 4,96(14-H,q,7Hz, 1H), 4,09 (0CH2,m,4H), 1,54 (14-CH3, d,7Hz,3H).

Tussenprodukt(5) 20 a) Bis(fenylmethyl)-/5,8,13,14-tetrahydro- 14-methyl-8,13~dioxobenz/5,6/isoindolo/2,1h7isochinolin-9-yl·/-fosfaat N-Chloorsuccinimide (1,017 g) werd onder roeren toegevoegd aan een oplossing van dibenzylfosfiet ( 3,3 ml)

25 in droge benzeen (30 ml) , en de verkregen oplossing werd bij 2Q°C

geroerd. Het succinimide werd door filtratie verwijderd en het filtraat werd tot een klein volume ( ongeveer 5-10 ml) geconcentreerd. Deze oplossing werd vervolgens bij de volgende bereiding gebruikt.

Van een 60% dispersie van natriumhydride 30 in olie ( 134 mg) werd onder een stikstofatmosfeer de olie weggewas sen met petroleumether met kookpunt 40-60°C (2x15 ml) .Droge tetrahydrofuran ( 25 ml) werd aan het natriumhydride toegevoegd, gevolgd door toevoegen van Tussenprodukt (3) (1,0 g) in droge tetrahydrofuran (100 ml) . De verkregen rode oplossing werd afgekoeld 35-·- tot 10°C in een ijsbad en behandeld met vers bereid dibenzylchloor-

fosfaat in benzeen ( ongeveer 5-10 ml, zie boven). Na 2 uur bij 10°C

8701766 - 19 - liet men het reaktiemengsel tot 20°C opwaraen, waarna men het mengsel 3 uurbij deze temperatuur hield. Het reaktiemengsel werd met water ( 500 ml) verdund en met dichloormethaan ( 3 x 250 ml) geextraheerd. De gecombineerde organische extracten werden 5 gedroogd over watervrij natriumsulfaat en ingedampt tot een groene olie. De olie werd in dichloormethaan opgelost en opgebracht op een silicakolom (300 g) die met dichloormethaan-aceton (96:4) gestort was. De kolom werd met dichloormethaan-aceton (96:4) geelueerd en frakties van 25 ml werden verzameld. De produktbevatten- 10 de frakties werden gecombineerd en ingedampt onder verkrijging van de titelverbinding als een groen schuim (1,211 g);A 244 nm, , . max

Ej 743, 374 nm, E.J 112; 6 (CDCl3) 5,20-5,40 (0CH2C6H5,m,4H), 5,23 (5-H,d,16Hz,1H), 5,13 (5-H,d, 16Hz, 1H), 4,95 (14-H,q,7Hz, 1H), 1,55 (14-CH3,d,7Hz,3H).

15

De volgende verbinding werd op een soortgelijke wijze bereid: b) Bis/(4-nitrofenyl)methyl7-j5,8,13,14— tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz./5,67isoindolo/2,1,h/isochinolin-9-yl/fosfaat, (3,662 g) uit Tussenprodukt (3) (2,0 g) en di(p-nitrobenzyl)chloorfosfaat (2,582 g);244 nm, e| 330; S (dg-DMS0) 5,48 (0CH2,d,8Hz,4H), 5,42 (5-H,d,18Hz,1H), 5,32 (5-H,d,18Hz,1H), 4,79 (14-H,q,7Hz,1H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

^ Tussenprodukt(6) 5,8,13,14-Tetrahydro-12-hydroxy-14-methylbenz-t5,67isoindolo^2,1-h/-isochinoline-8,13-dion

Azijnzuuranhydride (160 ml) werd toegevoegd aan een mengsel van N-formyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinoline-4-methyl-30 3-carbonzuur ( 20 g) en 5-hydroxy-1,4-naftochinon (31,78 g). Het reaktiemengsel werd 30 min. op 100°C verwarmd en daarna gedurende de nacht afgekoeld bij 4°C. Er vormde zich aan neerslag dat afgefiltreerd werd en daarna met ether uitgewassen, onder vacuum gedroogd en door kolomchromatografie op silicagel met dichloormethaan als 33 elutiemiddel gezuiverd werd onder verkrijging van de titelverbinding; A 243 nm , e! 1103, 397 nm, e] 381. max ’1 * * 1 87 0 1 7 0 8 - 20 -

Tussenprodukt (7)

Bis(fenylmethy1)-Z7-broom-5,8,13,14-tetra-hydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,6J isoindolo/2,1-h7isochinolin-9-yl/fosfaat 5 Aan een oplossing van Tussenprodukt (5a) (1,0 g) in dichloormethaan ( 50 ml) werd N-broomsuccinimide (0,604 g) in dichloormethaan ( 50 ml) toegevoegd. Na 1 uur bij 20°C werd het reaktiemengsel ingedampt. Het residu werd gezuiverd door kolomchromatografie, eerst op silica ( 150 g) met chloroform-aceton 10 (96:4) als elutiemiddel, gevolgd door silica (40 g) met dichloor methaan- aceton ( 96:4) als elutiemiddel onder verkrijging van de titelverbinding als een bruin schuim ( 0,81 g) ; λ 242,0 nm, λ a max

Ej 760 , 378,0 nm, E.j1Q8;6(d6-DMSO) 5,42 (5-H,d, 17Hz, 1H), 5,34-5,17 (5-H+OCH2,m,5H), 4,89 (14-H,q,7Hz,1H), 1,49 (14-CH3,d,7Hz,3H).

15

Tussenprodukt (8)

Bis(fenylmethyl)-/7-chloor-5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo_/2, l-l^isochinolin-9-yl/fosfaat 20 Aan een oplossing van Tussenprodukt (5a) (1,0 g) in chloroform ( 200 ml) werd N-chloorsuccinimide ( 0,226 g) toegevoegd, gevolgd door een verzadigde oplossing van waterstofchlo-ride in chloroform ( 0,5 ml). Na 30 min bij 20°C werd het reaktiemengsel ingedampt tot een geel schuim dat gezuiverd werd door 25 kolomchromatografie op silica (100 g) met dichloormethaan-aceton (96:4) als elutiemiddel onder verkrijging van een geel schuim (0,943 g). Door kristallisatie van dit schuim uit aceton werd de titelverbinding als een gele vaste stof ( 0,697 g) verkregen; λ 241,6 nm, e! 820, 377,2 nm, e] 125; & (d,-DMS0) 5,43 (5-H,d, 30 17Hz,1H), 5,32-5,16 (5-H+0CH2,m,5H), 4,87 (14-H,q,7Hz,1H), 1,49 (14-CH3,d,7Hz,3H).

Tussenprodukt (9)

Bis(2-oxo-2-fenylethy1)-/5,8,13,14-tetra-35 hydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,6/isoindolo/2,1-b7isochinolin-9-yl7~ fosfaat

Een oplossing van dicyclohexylcarbodiimide 8 7 0 1 7 8 & - 21 - (3,03 g) in dichloormethaan ( 125 ml) werd onder roeren bij 20°C in de loop van 3 uur toegedruppeld aan een oplossing van de bis(2-oxo-2-fenylethyl)ester van fosforzuur ( 8,93 g) in dichloormethaan ( 500 ml). Het reaktiemengsel werd tot een klein volume (ca. 100 ml) ingedampt en de neergeslagen vaste stof werd door filtratie verwijderd. Het filtraat werd 1 uur bij 20°C geroerd en vervolgens ingedampt onder verkrijging van het ruwe fosforyleringsreagens als een kleurloze olie.

Van een 60% dispersie van natriumhydride in olie ( 534 mg) werd de olie onder een stikstofatmosfeer weggewassen met petroleumether met kookpunt 40-60°C ( 2 x 25 ml) . Droge tetrahydrofuran ( 100 ml) werd aan het natriumhydride toegevoegd , gevolgd door een oplossing van Tussenprodukt (3) (4 g) in droge tetrahydrofuran ( 400 ml). De verkregen oplossing werd 30 min 15 bij 20°C geroerd en vervolgens met het ruwe fosforyleringsmiddel behandeld. Na 15 min bij 20°C werd het reaktiemengsel verdund met water (2,5 1) en geextraheerd met dichloormethaan ( 3 x 600 ml).

De organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een gele vaste stof ( 8,96 g) ingedampt. Aan deze vaste stof 20 (7,96 g) werd aceton (200 ml ) toegevoegd, waarna onoplosbare verontreinigingen door filtratie verwijderd werden. Het filtraat werd ingedampt en het residu werd onderworpen aan kolomchromatografie op silica ( 270 g) met dichloormethaan-methanol ( 96:4) als elutiemiddel onder verkrijging van een geel schuim. Dit schuim werd 25 gezuiverd door nog een kolomchromatografie op silica ( 100 g) met dichloormethaan-aceton (96:4) als elutiemiddel onder verkrijging van de titelverbinding als een geel schuim ( 1,14 g) ; I.R. (CHBr^) 1710 cm"1, 1659 cnf1; 5 (CDCl^' 5,68-7,81 (0CH2, m,H), 5,22 (5-H, d,16Hz,1H), 5,15 (5-H,d,16Hz,1H), 4,95(14-H,q,7Hz,1H), 1,55(14-CH_,d, 30 , 3 7Hz,3H) .

Tus senprodukt (10) a) Diethy !-ƒ)>,8,13,14-tetrahydro-14-methyl- 8,13-dioxobenz/5,67-isoindolo/2,1-b7isochinolin-12-yl7fosfaat 35 -“-*-*-

Van een 50% dispersie van natriumhydride in olie ( 158 mg) werd onder een stikstofatmosfeer de olie weggewassen met petroleumether met kookpunt 40-60°C ( 2 x 10 ml). Droge 8701768 -22- tetrahydrofuran ( 25 ml) werd aan het natriumhydride toegevoegd, gevolgd door toevoegen van Tussenprodukt (6) (1,0 g) in droge tetrahydrofuran ( 100 ml) . De verkregen oplossing werd 15 min bij 20°C onder stikstof geroerd en vervolgens met een oplossing van vers gedestilleerd diethylchoorfosfaat ( 569 mg) in droge tetrahydrofuran ( 5 ml) behandeld. Na 1,5 uur werd het reaktiemengsel verdund met water ( 500 ml) en geextraheerd met dichloormethaan ( 3 x 250 ml). De gecombineerde organische extracten werden gedroogd over watervrij natriumsulfaat en ingedampt tot een groene 10 vaste stof ( 1,484 g) , welke gezuiverd werd door kolomchromatografie op silica ( 150 g) met chloroform-ethanol ( 49:1) als elutiemiddel onder verkrijging van een groene vaste stof ( 1,254 g). Door kristallisatie van deze vaste stof uit een mengsel van chloroform en ethylacetaat werd de titelverbinding als groene veervormige 15 kristallen ( 904 mg) verkregen;Λ 243 nm, e] 1005, 372 nm, eJ 146; S(CDC13) 5,25 (5-H,d,16 Hz,1H) ,5,15 (5-H,d,16Hz,1H), 5,01 (14-H,q,7Hz,1H) 4,39 (0CH2CH3,m,4H), 1,54 (14-CH3,d,7Hz,3H), 1,42 (OCH2CH3,m,6H).

De volgende verbinding werd op een soort— ^ gelijke wijze bereid: b) Bis(fenylmethy1)-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl~8,13~dioxobenz-/5,67isoindolo/2,1-b7isochinolin-12-yl/-fosfaat ( 1,5 g) uit Tussenprodukt (6) (3,0 g) en dibenzylchloor-23 fosfaat ( vers bereid uit dibenzylfosfaat (9,9 ml) en N-chloor- succinimide) in benzeen ( ca* 20 ml), behalve dat geelueerd werd met dichloormethaan-aceton ( 96:4) onder verkrijging van een olie die kristalliseerde bij staan en herkristalliseerd werd uit ethylacetaat /chloroform; Λ 242,6 nm, e] 733, 371,4 nm, e] 109; 30 b (CDC13) 5,20-5,45 (0CH2 + 5-H, m,5H), 5,15 (5-H,d,16Hz,1H), 4,97(l4-H,q,7Hz,1H>, 1,53 (l4-CH3,d,7Hz,3H).

Tussenprodukt (11)

Dipropyl-/1,4-dioxonaftaleen-5,8-diyl/fosfaat 33 5,8-Dihydroxy-1,4-naftaleendion (1 g) werd gesuspendeerd in aceton (100 ml) en kaliumcarbonaat ( 4 g) , en dipropylchloorfosfaat ( 5 ml) werd toegevoegd. Het reaktiemengsel werd 90 min bij 40-50°C geroerd, gefiltreerd ter verwijdering van 8 7 0 1 7 (i 8 - 23 - overmaat kaliumcarbonaat en drooggedampt. Het residu werd in dichloormethaan opgelost en gezuiverd door kolomchromatografie op silica met dichloormethaan en dichloormethaan-methanol ( 99:1) als elütiemiddel onder verkrijging van de titelverbinding als 5 een gele olie (2,31 g); S(CDC13> 4,23 (CH2), 1,78 (CH2), 1,01(CH^:.

Tussenprodukt (12)

Dipropyl-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13- dioxobenz/5,6_7isoindolo-/2,1 -b_7 i s o chino 1 in- 9,12-diyl/ fosfaat ^ Azijnzuuranhydride ( 10 ml) werd toegevoegd aan een mengsel van N-formyl-1,2,3,4-tetrahydroisochinoline- 4-methyl-3-carbonzuur ( 440 mg) en Tussenprodukt (11) ( 2,16 g) .

Het reaktiemengsel werd 30 min op 10°C gehouden en vervolgens drooggedampt onder verkrijging van een bruine olie. Door ^ chromatografie op silica met petroleumether ( 60-80°C ) -ethylacetaat (1:1, 1:2 en 1:3) als elütiemiddel werd de titelverbinding (984 mg) 1 1 verkregen; 237,6 nm, 609, 371 nm, E* 94; S (CDCl^) 5,13 + 5,23 (5H), 4,93 (14H), 4,20 - 4,35 (CH^, 1,60-1,90 (CH2), 0,8-1,05 (CH3).

20

Voorbeeld I

Dinatriumzout van /5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/^,1-b/isochinolin-9-yl7di-waterstoffosfaat 25 Een oplossing van Tussenprodukt (4b) (465 mg) in tetrachloorkoolstof ( 3 ml) werd gekoeld tot 0-5°C en onder een stikstofatmosfeer behandeld met trimethylsilyljodide (0,32 ml). Na 5 min werd het reaktiemengsel drooggedampt, waarna de overblijvende olie met methanol ( 5 ml) behandeld werd. Het 5® mengsel werd bij 20°C geroerd en na ongeveer 5 min werd een heldere bruine oplossing verkregen . Na 20 min werd de oplossing ingedampt tot een donker schuim .Dit schuim werd in water ( 20 ml) gesuspendeerd en de suspensie werd met 1M natriumhydroxydeoplossing (4,00 ml) ingesteld op pH 7,5. Het verkregen mengsel werd met

OC

chloroform ( 25 ml) geextraheerd en gefiltreerd door een voorgewassen diatomeeenaardebed met water (50 ml) om het produkt uit te 8701768 - 24 - wassen. De verkregen lagen werden gescheiden en de waterfase werd met meer chloroform ( 10 ml) uitgewassen. De gecombineerde waterige extracten werden door een millipore-filter gefiltreerd, ontgast en gevriesdroogd. De gevriesdroogde vaste stof werd opnieuw 5 opgelost in water ( 100 ml) , door een millipore-filter gefiltreerd en gevriesdroogd onder verkrijging van de titelverbin-ding als een helder-gele vaste stof (0,398 g)jA 246 nm, λ λ in 3.x E, 667, 388 nm, E 165.

1 1

10 Voorbeeld II

a) Natriumzout van fenylmethyl-/5,8,13,14-tetra-hydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,6j-isoindolo/2,1-b/isochinolin-9-yljfosforzuur

Natriumjodide ( 1,551 g) werd toegevoegd 15 aan een oplossing van Tussenprodukt ( 5a) ( 5,546 g) in aceton ( 100 ml) en de verkregen oplossing werd 1,5 uur onder terugvloei-ing verwarmd. Het reaktiemengsel werd drooggedampt en het residu werd aangewreven met ether (100 ml) onder verkrijging van een gele vaste stof. Deze vaste stof werd in water ( 200 ml) opgelost 20 en de pH van de oplossing werd ingesteld op pH 1-2 door toevoeging van 2M zoutzuur. Het verkregen mengsel werd met water ( 200 ml) verdund en met dichloormethaan ( 2 x 400 ml) geextraheerd. Zoutoplossing werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde de gevormde emulsie te dispergeren.De gecombineerde organische extracten 25 werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een groene vaste stof ingedampt. Deze vaste stof werd in water ( 300 ml) gesuspendeerd en de suspensie werd ingesteld op pH 7,0 door toedruppelen van 1M natriumhydroxyde oplossing. De verkregen oplossing werd gefiltreerd en het filtraat werd gevriesdroogd tot een vaste 30 stof welke met aceton ( 400 ml) behandeld en tot een vaste stof ( 4,49 g) drooggedampt werd. Door aanwrijven van deze vaste stof met ether ( 200 ml) werd de titelverbinding verkregen als een gele vaste stof (4,232 g) 243,8 nm , e] 679, 367,2 nm,

λ IïlclX I

eJ 132 (dg-DMSO) 5,41 (5-H,d,16Hz,1H), 5,31 (5-H,d,16Hz,1H), 35 4,93 (0CÏ^,d,6Hz,2H), 4,82 (14-H,q,7Hz,1H), 1,47 (14-CH3,d,7Hz,3H).

De volgende verbindingen werden op een soortgelijke wijze bereid: 87 0 1 ;3 8

A

- 25 - b) Natriumzout van propy1-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methy 1/-8,13-dioxobenz/5,6/-isoindolo72,1-b/i sochinolin-9-yl/fosforzuur , (1,256 g) uit Tussenprodukt (4c) (1,5 g) en natriumjodide ( 1,367 g) met butarr-2-on (35 ml) in plaats van acetone 5 λ 243,6 nm, e] 963, 360,0 nm, e! 265; $> (d DMSO) 5,42 (5-H, d, 16Hz, 1H), 5,32 (5-H,d,16Hz,1H), 4,81 (14-H,m,1H), 3,78 (0ffl2CH2CH3,m,2H), 1,40-1,60 (14-CH3+0CH2CH2CH3,m,3H), 0,82 (0CH2CH2CH3,m,3H).

10 c)Natriumzout van 1-methylethy1)-/5,8,13,14- tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1-b/isochinolin-9-yl7fosforzuur, (910 mg) uit Tussenprodukt (4d) (1,2 g) en natriumjodide ( 1,094 g) met butan-2-on (25 ml) in plaats van aceton: \

λ λ IHSX

243,4 nm , Ej 943, 366,8 nm, E^ 199; 6 (dg-DMSO), 5,40 (5-H,d,16Hz, 15 1H), 5,30 (5-H,d,16Hz,1H), 4,81 (14-H,q,7Hz, 1H), 4,43 (OCHiCH^, m,1H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H), 1,11 (0CH(CH3)2,d,5Hz,6H).

d) Natriumzout van fenylmethyl-/7-broom- 5.8.13.14- tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenzi5,67isoindolo/2,\-bJ- 20 isochinolin-9-ylJfosforzuur, (338 mg) uit Tussenprodukt (7) (705 mg) 1 1 en natriumjodide ( 174 mg); Λ 243,6 nm, E' 367,8 nm, E* 120; ΠΙΗΧ I 1 δ (dg-DMSO) 5,40 (5-H,d,17Hz,1H), 5,21 (5-H,d,17Hz, 1H), 4,97-4,82 (l4-H+OCH2,m,3H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

25 e) Natriumzout van fenylmethyl-/7-chloor- 5.8.13.14- tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,6JLsoindolo/2,1-b/isochinolin-9-yl7fosforzuur, (674 mg) uit Tussenprodukt (8) (1,068 g) en natriumjodide (282 mg);A 243,0 nm, e! 688, 374,0 nm, 98; δ (dgDMSO) 5,40 (5-H,d,17Hz,1H), 5,23 (5-H,d,17Hz,lH), 5,00-30 4,79 (14-H+OCH2,m,3H), 1,50 (14-0^,d,7Hz,3H) .

f) Natriumzout van penty1-/5,8,13,14- tetrahydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,67-isoindolo/2,l-b/isochinolin-9-yl7fosforzuur, (0,836 g) uit Tussenprodukt (4i) (1,207 g) en 35 natriumjodide (724 mg) met butan-2-on ( 30 ml ) in plaats van aceton; 8701768 - 26 - ΐ Λ

Amax 244,0 nm, E1 899, 366,8 nm, E1 190; S (dgDMSO) 5,40 (5-H,d, 17Hz,1H) , 5,32 (5-H,d, 17Hz, 1H), 4,81 (14-H,q, 7Hz,1H), 3,80 (POCH2CH2CH2CI^CH3 , 4et, 7Hz,2H), 1,35-1,55 (POCH^CH^H^ + 14-CH3,m,5H), 1,10-1,30 (P0CH2CH2CH2CH2CH3,m,4H), 0,79 5 (POCH2CH2CH2CH2CH3, t, 7Hz,3H).

g) Natriumzout van cyclohexylmethyl-/5, 8,13,14r tetrahydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,6_/isoindolo/2,1-Tx/isochinolin-9-yl/fosforzuur, (1,017 g)uit Tussenprodukt (4k) (1,5 g) en 10 natriumjodide ( 411 mg) met butan-2-on ( 40 ml) in plaats van 1 1 aceton;λ 244,0 nm, E. 849, 366,8 nm, E, 198; S (d,DMS0) 5,41

II13.X 1 I O

(5-H,d,16Hz,1H), 5,31(5-H,d,16Hz,1H), 4,81 (14-H,q,7Hz,1H), 3,62 (0CH2,t,6Hz,2H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

15 . — h) Natriumzout van fenylmethyl~/5,8,13, 14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,(j7-isoindolo/j2,1-b7ïso-chinolin-12-yl/fosforzuur, (781 mg) uit Tussenprodukt (10b) (1,2 g) en natriumjodide ( 336 mg), behalve dat na instelling van de pH met zoutzuur, het verkregen mengsel geextraheerd werd 20 met dichloormethaan-methanol (3:2, 400 ml en 2 x 200 ml); \ 1 1 1 max 244,0 nm, E. 842, 265,8 nm, E^ 295, 356,0 nm, e] 97; S (D,-DMS0) I I 1 o 5,41 (5-H,d, 16Hz, 1H), 5,31 (5-H,d, 16Hz, 1H) , 4,93 (OCH2,d,7Hz,2H), 4,88 ( 14-H,q,7Hz,1H), 1,47 (14-CH3>d,7Hz,3H).

25 Voorbeeld III

a) Natriumzout van methyl-/5,8,13,14-tetra-hydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67-isoindolo/2,l-b/isochinolin-9-yl7fosforzuur

Een mengsel van Tussenprodukt (4a) (1,0 g) 30 en natriumjodide (377 mg) in aceton (35 ml) werd 5 uur onder terugvloeiing verwarmd. Hierna werd een tweede portie natriumjodide (189 mg) toegevoegd , waarna het reaktiemengsel 1 uur onder

terugvloeiing verwarmd werd. Het reaktiemengsel werd tot 20°C

afgekoeld en het neergeslagen produkt werd door filtratie verzameld, 35 met aceton en ether uitgewassen en gedroogd onder verkrijging van 8701768 * - 27 - een groene vaste stof. Deze vaste stof werd opgelost in water (50 ml) en de pH van de verkregen oplossing werd ingesteld op 1-2 door toevoeging van 2M zoutzuur. Het verkregen mengsel werd met water ( 50 ml) verdund en met dichloomethaan (2 x 100 ml) 5 geextraheerd. Zoutoplossing werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde de gevormde emulsie te dispergeren. De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een groene vaste stof ingedampt.Deze vaste stof werd in water ( 70 ml) gesuspendeerd en de verkregen suspensie werd inge-10 steld op pH 7,0 door toedruppelen van 1 M natriumhydroxydeoplossing.

De verkregen oplossing werd gefiltreerd en het filtraat werd gevriesdroogd tot een vaste stof welke in aceton ( 100 ml) gesuspendeerd en tot een vaste stof drooggedampt werd. Door aanwrijven van deze vaste stof met ether ( 100 ml) werd de titelver-15 binding verkregen als een gele vaste stof (858 mg); \ 243,4 nm,

4 λ IH3X

Ej 991, 365,4 nm, E^ 199; 6 ( d6-DMS0) 5,41 (5-H,d, 16Hz, 1H), 5,31 * (5-H,d,16Hz,1H), 4,82 (14-H,q,7Hz,1H) 3,50 (0CH3,d,11Hz,3H) 1,47 (14-CH3,d,7Hz,3H).

De volgende verbindingen werden op een soort- 20 gelijke wijze bereid: b) Natriumzout van butyl-,/5,8,13,14— tetrahydro-l4-methyl-8,13-dioxobenz/5,6y-isoindoloi2,1-b/- isochinolin-9-yl/fosforzuur, (1,041 g) uit Tussenprodukt (4e) (1,255 g) en natriumjodide ( 1,082 g);Λ 243,2 nm E* 984, os * max 1 366,6 nm, Ej 189; h (dg-DMSO) 5,41 (5-H,d,16Hz,1H), 5,31 (5-H,d, 16Hz, 1H) , 4,82 (14-H,q,7Hz, 1H), 3,81 (OCH^^C^C^ , q,6Hz,2H), 1,15-1,60 (OCH2CH2ra2CH3+14-CH3,m,7H), 0,83 (0CH2CH2CH2EH3,t,6Hz, 3H).

30 ^ c) Natriumzout van cyclohexy1-/5.8.13,14- tetrahydro-14-methyl~8,13-dioxobenz75,6/-isoindolo^2,1-b/isochinolin~ 9-yl/fosforzuur, ( 686 mg) uit Tussenprodukt (4g) (1,0 g), behalve dat het aanwrijven aan het eind niet nodig was; λ „ 1 1 ✓ ΙΠ3·Χ 244,0 nm, E. 850, 367,0 nm, E.' 182; b (d,-DMS0) 5,42 (5-H,d, 16Hz, 1H), 35 1 ib 5,32 (5-H,d,16Hz,1H), 5,48(14-Η^,7Hz, 1H), 4,13(0CH,m, 1H), 1,46 (14- CH3,d,7Hz,1H).

8701768 - 28 -

Voorbeeld IV

Natriumzout van ethyl-TS,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8, 13-dioxobenz/5,6_Jisoindolo/2,1-b2isochinolin-9-yl/-fosforzuur ^ Natriumjodide ( 3,0 g) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt (4b) ( 3,0 g) in aceton (150 ml) en het mengsel werd 4 uur onder terugvloeiing verwarmd. Hierna werd een tweede portie natriumjodide ( 3,0 g) toegevoegd, waarna het reaktiemengsel 16 uur onder terugvloeiing verwarmd werd. Het 10 reaktiemengsel werd tot 20°C afgekoeld en het neergeslagen produkt werd door filtratie verzameld, met aceton (3 x 30 ml ) uitgewassen en gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding als een groene vaste stof (2,37 g);A 244,5 nm, e] 10450, 368,5 nm, e] 222; m&x 1 Ί S (dg-DMSO) 5,41 (5-H,d,16Hz,1H), 5,30 (5-H,d,16Hz,1H), 4,82 (14-H, 15 q,7Hz,1H), 3,90 (0CH2CH3>m,2H), 1,49 (14-CH3>d,7Hz,3H), 1,14 (OCH2CH3,t,8Hz,3H).

Voorbeeld V

Natriumzout van fenyl-/5,8,13,14-tetrahydro- O Π 14-methyl-8,13-dioxobenz./5,67isoindola/2,1-b7isochinolin-9-yl7-fos-forzuur

Van een 60% dispersie van natriumhydride in olie ( 67 mg) werd de olie onder een stikstofatmosfeer weggewassen met petroleumether met kookpunt 40-60°C ( 2 x 10 ml). Droge 25 tetrahydrofuran ( 10 ml) werd aan het natriumhydride toegevoegd, gevolgd door toevoegen van Tussenprodukt (3) ( 500 mg) in droge tetrahydrofuran ( 50 ml). De verkregen oplossing werd 15 min onder stikstof bij 20°C geroerd en vervolgens met fenyldichloorfosfaat ( 381 mg) behandeld. Na 1 uur werd het reaktiemengsel met water 30 (250 ml) verdund en met dichloormethaan ( 3 x 100 ml) geëxtraheerd. Zoutoplossing werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde de gevormde emulsie te dispergeren. De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een olieachtig schuim ( 769 mg) ingedampt. Dit schuim werd opgelost in 05 een mengsel van tetrahydrofuran ( 15 ml) en water ( 5 ml) en met 1M natriumhydroxydeoplossing basisch gemaakt. Na 2 uur bij pH 9 8701768 - 29 - en 2 uur bij pH 12 werd het reaktiemengsel tot 50-55°C verwarmd en met water (5 ml) en tetrahydrofuran (5 ml) verdund.

Na 20 min. werd het reaktiemengsel onder vacuum ingedampt, met water ( 150 ml) verdund en aangezuurd tot pH 1-2 met 2 M zoutzuur.

5 Het verkregen mengsel werd met dichloormethaan ( 3 x 100 ml) geextraheerd. Zoutoplossing werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde de gevormde emulsie te dispergeren. De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en ingedampt tot een donkergroen schuim ( 705 mg) . Dit schuim 10 werd in water ( 100 ml) gesuspendeerd en de suspensie werd ingesteld op pH 7,1 door toedruppelen van 1M natriumhydroxydeoplossing. Het verkregen mengsel werd gefiltreerd en het filtraat werd gevriesdroogd tot een schuim dat met aceton ( 100 ml ) behandeld en tot een vaste stof ( 440 mg) drooggedampt werd. Door aanwrijven van deze 15 vaste stof met ether ( 100 ml) werd de titelverbinding verkregen als een donkergroene vaste stof (341 mg);A 0 243,8 nm e! 918, IQclX 1 369,2 nm, Ej 174; b (dg-DMSO) 5,42 (5-H,d,16Hz,1H), 5,32 (5-H,d, 16Hz,1H), 4,82 (14-H,q,7Hz,1H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

20 Voorbeeld VI

Natriumzout van (4-nitrofenyl)methyl-Z5,8, 13,14-tetrahydro-14-methyi-8,13-dioxobenzZ5,67isoindoloZ2,1-b/~ isochinolin-9-yl7fosforzuur

Natriumjodide ( 330 mg) werd toegevoegd ^ aan een suspensie van Tussenprodukt ( 5b) (1,359 g) in 2-butanon (100 ml), waarna het mengsel 1,5 uur onder terugvloeiing verwarmd werd. Het reaktiemengsel werd drooggedampt en het residu werd met ether ( 3 x 100 ml) aangewreven onder verkrijging van een groene vaste stof ( 1,055 g). De vaste stof werd door filtratie gewonnen * onder verkrijging van de titelverbinding als een groene vaste stof (911 mg) ; Λ 243,8 nm, e! 837, 265,2 nm, E} 438, 368,8 nm, E.1 142 ; niclX 111 6 (d^-DMSO) 5,39 (5-H,d,16Hz,1H), 5,29 (5-H,d,16Hz,1H), 5,09 (OCH2,d,7Hz,2H)T4,80 (14-H,q,7Hz,1H), 1,46 (14-CH3,d,7Hz,3H).

35 Voorbeeld VII

Dinatriumzout van /5,8,13,14-tetrahydro-8,13~dioxo-14-methylbenz/5,6jisoindolo-/2,1-b/isochinolin-9-yl/diwa-JLers tof fosfaat 8701768 - 30 -

Tussenprodukt (5a) (1,6 g) werd in droge tetrachloorkoolstof ( 5 ml) opgelost, en de verkregen oplossing werd in een ijsbad bij 0-5°C gekoeld. Men liet het mengsel tot 20°C opwarmen en voegde droge tetrachloorkoolstof (8 ml) 5 toe, gevolgd door dichloormethaan ( 5 ml). De verkregen oplossing werd onder stikstof bij 0-5°C afgekoeld en met trimethylsilyljodide (0,54 ml) behandeld. Na 5 min bij 0-5°C werd het reaktiemengsel drooggedampt waarna de overblijvende olie met methanol ( 10 ml) behandeld werd . Het mengsel werd bij 20°C geroerd en na ongeveer 10 5 min werd een heldere bruine oplossing verkregen. Na 10 min werd de oplossing ingedampt tot een olie,welke vervolgens met diethylether (4 x 25 ml) aangewreven werd onder verkrijging van een donkergele vaste stof die in steriel water ( 70 ml) gesuspendeerd werd. De pH werd ingesteld op 8,0 door toevoegen van 0,1 M natriumhydroxyde-15 oplossing onder verkrijging van een oplossing die door een glasvezelfilter gefiltreerd werd teneinde een kleine hoeveelheid groffe vaste stof te verwijderen en daarna twee maal door een groot ( 5cm) millipore-filter. Het filtraat werd gevriesdroogd onder verkrijging van de titelverbinding als een donkergele vaste stof 20 (0,738 g) 246 nm, e! 667, 388 nm, e] 165.

IUclX 1 1

Voorbeeld VIII

Natriumzout van 2-oxo-2-fenylethyl-/5,8, 13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1~h/-25 isochinolin--9-yl.7fosforzuur

Natriumjodide ( 243 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt (9) (1,12 g) in aceton ( 25 ml). De verkregen oplossing werd 10 min onder terugvloeiing verwarmd en daarna ingedampt. Het residu werd met ether (3 x 30 ml) 30 aangewreven onder verkrijging van een vaste stof. Water (140 ml) werd aan deze vaste stof toegevoegd en onoplosbare verontreinigingen werden door filtratie verwijderd. De verkregen oplossing werd aangezuurd tot pH 1,5 door toevoegen van 2M zoutzuur en daarna met dichloormethaan ( 3 x 300 ml) geextraheerd. De organische 35 extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een vaste stof ingedampt. De vaste stof werd in water ( 40 ml) 0701768

A

- 31 - gesuspendeerd en 0,1 M natriumhydroxyde oplossing werd toegevoegd tot de pH 7,0 bedroeg. De verkregen oplossing werd gefiltreerd en gevriesdroogd tot een schuim.Door behandeling van dit schuim met aceton ( 100 ml) werd een oplossing verkregen welke gefiltreerd en 5 ingedampt werd. Het residu werd met ether ( 50 ml) aangewreven onder verkrijging van de titelverbinding als een gele vaste stof (500 mg) ;λ 243,6 nm , e] 955, 366,4 nm, e! 147 ;& (d.-DMSO) max 1 ίο 5,39 (5-H,d,17Hz,1H), 5,30 (5-H,d,17Hz,1H), 5,23(0CH2>d,8Hz,2H), 4,82 (14-H,q,7Hz,1H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

10

Voorbeeld IX

Natriumzout van tetrahydro-2-furanylmethyl-/5.,.8,13,14-tetrahydro-14-methyl~8,13-dioxobenzZB, 6yisoindoloZ2,1~b7~ isochinolin-9-y3-7fosforzuur ^ Natriumjodide ( 272 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt ( 4f ) (952 mg) in 2 -butanon ( 50 ml) . De verkregen oplossing werd 75 min onder terugvloeiing verwarmd, nog meer natriumjodide ( 272 mg) werd toegevoegd en daarna werd nog 24 uur onder terugvloeiing verwarmd. Het reaktie- 20 mengsel werd ingedampt tot een klein volume ( ca. 25 ml) en daarna werd nog 24 uur onder terugvloeiing verwarmd. De neergeslagen vaste stof werd gefiltreerd en uitgewassen met ether ( 2 x 40 ml).

Deze vaste stof werd opgelost in water ( 75 ml) en de oplossing werd aangezuurd tot pH 1,5 door toevoegen van 2M zoutzuur en 2^ vervolgens geextraheerd met dichloormethaan ( 5 x 750 ml) . De organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en ingedampt tot een schuim. Dit schuim werd gesuspendeerd in water ( 50 ml) en 0,1M natriumhydroxyde oplossing werd toegevoegd tot de pH 7,0 bedroeg. De verkregen oplossing werd gefiltreerd 30 en gevriesdroogd tot een schuim. Dit schuim werd met aceton ( 50 ml) behandeld en de verkregen suspensie werd ingedampt. Het residu werd met ether ( 50 ml) aangewreven onder verkrijging van de titelverbinding als een gele vaste stof (588 mg) ;\ 244,0 nm, λ 4 mex

Ej 867, 366,2 nm, Ej 178; & (dg-DMSO) 5,40 (5-H,d,17Hz,1H), 5,30 35 (5-H,d,17Hz,1H), 4,80 04-H,q,7Hz,1H), 3,50-4,00 (P0CH2 + 0CH2CH0 + CH2CH20( verborgen), m,5H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

8701768 - 32 -

Voorbeeld X

Natriumzout van (2-propenyl)-£5,8,13,14-tetrahydro~14"methyl-8, 13-dioxobenz./5,6./isoindolo/2, 1-b_7isochinolin-9-yVfosforzuur 5 Natriumjodide ( 697 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt ( 4h) (1,5 g) in aceton ( 30 ml) en het mengsel werd onder terugvloeiing verwarmd. Na 3 uur werd het reaktiemengsel tot 20°C afgekoeld. Het neergeslagen produkt werd door filtratie verzameld, met aceton (10 ml) en ether (10 ml) 10 uitgewassen en tot een gele vaste stof gedroogd. Deze vaste stof werd in water (300 ml) opgelost en de pH van de oplossing werd ingesteld op pH 1,5 door toevoegen van 2M zoutzuur. Het verkregen mengsel werd geextraheerd met dichloormethaan-ethanol ( 4:1, 300 ml) en vervolgens met dichloormethaan ( 300 ml) . Zoutoplossing 15 werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde de gevormde emulsie te dispergeren. De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een groen schuim ingedampt. Dit schuim werd in water ( 150 ml) gesuspendeerd en de suspensie werd ingesteld op pH 7,0 door toevoegen van 1M natriumhydroxyde 20 oplossing. De verkregen oplossing werd gefiltreerd en het filtraat werd gevriesdroogd tot een geel schuim. Door aanwrijven van dit schuim met ether ( 100 ml) werd de titelverbinding verkregen als een gele vaste stof (1,214 g);X 244,0 nm, E^j 883, 367,4 nm,

Ej 183 ; δ (dg-DMSO), 5,85-6,00 (CH,m,1H), 4,95-5,30 (CH2,m,2H), 25 5,39(5-H,d,17Hz,1H), 5,30 (5-H,d,17Hz,1H), 4,82 (14-H,q,7Hz,1H), 4,30-4,50 (OCH2,m,2H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

Voorbeeld XI

Natriumzout van ethyl-,/5,8,13,14-tetrahydro-30 14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1-b7isochinolin-12-yl/- fosforzuur

Natriumjodide ( 2,0 g) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt ( 10a) (2,0 g) in aceton (100 ml) en het mengsel werd 5 uur onder terugvloeiing verwarmd . Hierna werd 35 een tweede portie natriumjodide ( 2,0 g) toegevoegd , waarna het reaktiemengsel nog 16 uur onder terugvloeiing verwarmd werd. Het 8701768 - 33 - reaktiemengsel werd tot 20°C afgekoeld en het neergeslagen produkt werd door filtratie verzameld,met aceton ( 2 x 20 ml) uitgewassen en tot een groene vaste stof ( 1,75 g) gedroogd. Door kristallisatie van deze vaste stof ( t,75 g) uit een mengsel van water ( 20 ml) 5 en aceton ( 800 ml) werd de titelverbinding verkregen als een groene vaste stof ( 1,125 g); \ 243,6 nm, e] 973, 367,2 nm, . QlclX 7 E 173; S(d -DMSO) 5,41 (5-H,d,16Hz,1H), 5,31 (5-H,d,16Hz ,1H), 4,87 1 o (14—H,q,7Hz,1H), 3,88 (0CH2CH3,m,2H), 1,45 (14-CH3,d,7Hz,3H), 1,10 (0CH2CH3,t, 6Hz,3H).

10

Voorbeeld XII

Natriumzout van 2-methoxyethy1/5,8,13,14-tetrahydro-14~methyl~8,13-dioxobenz/5,6] isoindolo/2,t-h/isochinolin-9-yl7fosforzuur 15 Natriumjodide (0,637 g) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt ( 4j) (2,03 g) in aceton ( 40 ml). De verkregen oplossing werd 3 uur onder terugvloeien verwarmd, waarna meer natriumjodide ( 1,274 g) toegevoegd werd. Er werd nog 20 uur verwarmd onder terugvloeiing. Het reaktiemengsel werd inge-20 dampt en het residu werd opnieuw opgelost in 2-butanon ( 40 ml).

De verkregen oplossing werd 2 uur onder terugvloeiing verwarmd en vervolgens ingedampt. Het residu werd aangewreven met ether (3 x 25 ml) ter verkrijging van een vaste stof. Water ( 200 ml) werd toegevoegd en de verkregen suspensie werd aangezuurd tot pH 1,5 25 met 2M zoutzuur en geëxtraheerd met dichloormethaan ( 3 x 300 ml).

Zoutoplossing werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde een emulsie te dispergeren. De organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en tot een vaste stof ingedampt.

Deze vaste stof werd gesuspendeerd in water ( 200 ml) en 0,1M 30 natriumhydroxyde oplossing werd toegevoegd tot de pH 7,0 bedroeg.

Het mengsel werd gefiltreerd en het filtraat werd tot een schuim gevriesdroogd. Door behandeling van het schuim met aceton ( 120 ml) werd een oplossing verkregen welke gefiltreerd en ingedampt werd.

Het residu werd aangewreven met ether ( 40 ml) onder verkrijging 35 van de titelverbinding als een gele vaste stof (1,34 g) 244,0 nm, Ej 1034, 366,8 nm, eJ 208; S (d^DMSO) 5,40 (5-H,d, 17Hz, 1H), 5,30 (5-H,d,17Hz,1H), 4,80 (14-H,q, 7Hz,1H), 3,96 (P0CH2,m,2H), ε 7 0 1 > ü 8 34 - 3,44 (POCH2CH2,q,5Hz,2H), 3,22 (0CH3,s,3H), 1,47(14-CH3,d,7Hz,3H).

Voorbeeld XIII

Natriumzout van propy1-/5,8,13,14-tetrahydro-5 14-methyl-8,13~dioxobenz/5,6/isoindo W2,1-h/isochinolin-9,12-diyl/- fosforzuur

Natriumjodide ( 2,5 g) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt (12) in 2-butanon (50 ml) en het reaktiemengsel werd 4 uur onder roeren tot terugvloeiing 10 verwarmd en vervolgens drooggedampt. Het residu werd in methanol opgelost en twee maal gechromatografeerd op Sephadex LH 20 in methanol onder verkrijging van de titelverbinding als een donkergele vaste stof (595 mg)sj^ (water) 244,8 nm, e] 637, λ iiicix Ί 356,4 nm, Ej 140; 6 (DMSO) 5,28 + 5,38 (5H), 4,82 (14H), 3,65-3,85 15 (CH2), 1,35-1,6 (14CH3 + CH2), 0,70-0,90 CH .

Voorbeeld XIV

Triethylaminezout van 4-nitrofenylmethyl-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1-bj-20 isochinolin-9-yl7'fosforzuur

Triethylaminehydrojodide (278 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt(5b) (750 mg) in aceton ( 75 ml). De verkregen oplossing werd 4 uur onder terugvloeiing verwarmd. Nog meer triethylaminehydrojodide ( 278 mg) 25 werd toegevoegd en er werd nog eens 17 uur onder terugvloeiing verwarmd. Het reaktiemengsel werd ingedampt en de overblijvende olie werd met ether uitgewassen. De olie werd in water ( 100 ml) opgelost en geextraheerd met achtereenvolgens dichloormethaan ( 2 x 100 ml) , dichloormethaan-methanol ( 1:1, 100 ml) en 30 dichloormethaan ( 100 ml) . De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en ingedampt.

Water (250 ml) werd aan het residu toegevoegd en de verkregen oplossing werd gefiltreerd en tot een schuim gevriesdroogd. Dit schuim werd opgelost in water ( 50 ml) en de oplossing werd gefil-35 treerd. Het filtraat werd aangezuurd tot pH 1,5 met 2M zoutzuur en 8701768 ïr - 35 - geextraheerd met dichloormethaan-methanol (2:1, 450 ml) en daarna metdichloormethaan ( 100 ml) . De gecombineerde organische extracten werden met water uitgewassen en over watervrij natriumsulfaat gedroogd. Triethylamine ( 0,1 ml, 0,7 g) werd toegevoegd en de 5 oplossing werd ingedampt. De overblijvende olie werd in water (30 ml) opgelost , de oplossing werd gefiltreerd en het filtraat werd gevriesdroogd onder verkrijging van de titelverbinding als 1 1 een geel schuim (256 mg);A 244,2 nm , E. 739, 365,8 nm, E, 129; 1DHX 1 1 & (dg-DMSO) 5,39 (5-H,d,17Hz,1H), 5,29 (5-H,d,17Hz,1H), 5,10(P0CH2,d, 10 8Hz,2H), 4,80 (14-H,q,7Hz,1H), 2,98-3,13 (N+-CH2CH3,m,6H), 1,47(14-(3^, d,7Hz,3H), 1,18(N+-CH2qi3,t, 7Hz,9H).

Voorbeeld XV

Fenylmethyl-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-15 8,13-dioxobenz/5,6/-isoindolo/2,1-byisochinolin-9-yl/fosforzuur

Natriumjodide ( 285 mg) werd toegevoegd aan een oplossing van Tussenprodukt ( 5a) (1,019 g) in aceton (25 ml) en het mengsel werd onder terugvloeiing verwarmd. Na 1,5 uur werd het reaktiemengsel drooggedampt. Het residu werd met water 20 (100 ml) verdund, met 2M zoutzuur aangezuurd tot pH 2-3 en met di chloormethaan ( 3 x 100 ml) geextraheerd. Zoutoplossing werd tijdens het extraheren toegevoegd teneinde de gevormde emulsie te dispergeren.

De gecombineerde organische extracten werden over watervrij natriumsulfaat gedroogd en ingedampt tot een groene olie welke stolde.

25 De vaste stof werd in ether (50 ml) 10 min geroerd en daarna door filtratie verzameld onder verkrijging van een groene vaste stof.

Door kristallisatie van de vaste stof uit een mengsel van chloroform (met een spoor ethanol) en ether werd de titelverbinding verkregen als groene kristallen(427 mg) ; 245,0 nm, e| 979, 369,0 nm, 30 e| 193; S (d^DMSO) 5,44 (5-H,d, 16Hz, 1H), 5,36(5-H,d, 16Hz, 1H) , 5,23 (0CH2,d,8Hz,2H), 4,86 (14-H,q,7Hz,1H), 1,51(14-CH3,d,7Hz,3H).

Voorbeeld XVI

Natriumzout van fenylmethyl-/5,8,13,14-35 tetrahydro-14~methyl-8,13-dioxobenz/5,6/isoindolo/2,1~h7isochinolin-9-yl7fosforzuur

Een oplossing van natrium-2-ethylhexanoaat 8701768 - 36 - (1,55 g) in tetrahydrofuran ( 14 ml) werd in de loop van 2 min onder roeren en onder stikstof toegevoegd aan een suspensie van het produktvan voorbeeld XV ( 4 g). Water ( 0,4 ml) werd toegevoegd aan de verkregen heldere oplossing welke vervolgens in de loop 5 van 40 min verdund werd met 2-propanol ( 215 ml) . De verkregen f suspensie werd 20 min geroerd en de vaste stof werd door filtratie verzameld, met 2-propanol ( 3 x 30 ml) uitgewassen, onder stikstof drooggezogen en onder vacuum gedroogd onder verkrijging van de titelverbinding als een geelgroene amorfe vaste stof ( 3,19 g); 10 Λ 244 nm (MeOH), e] 843 : NMR-spectrum was hetzelfde als van het produkt van voorbeeld Ha.

Voorbeeld XVII

Kaliumzout van fenylmethyl-/5,8,13,14-tetra-15 hydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,6jisoindolo/2,1-b/isochinolin-9-yl7- fosforzuur

Kaliumjodide ( 1,83 g ) werd toegevoegd aan een suspensie van Tussenprodukt ( 5a) ( 5,90 g) in een mengsel van aceton ( 118 ml) en water ( 2,93 ml) . Dit mengsel werd 2,5 uur 20 onder stikstof en onder roeren tot terugvloeiing verwarmd, waarbij een kristallijn neerslag na 40 min gevormd werd. De suspensie werd tot 21°C afgekoeld en 1 uur geroerd , waarna de vaste stof door filtratie verzameld, met aceton ( 2 x 25 ml) uitgewassen en onder vacuum gedroogd werd onder verkrijging van de titelverbinding (4,32 g) ; 25 ^max 244 1)111 (MeOH), eJ 813; é (dg-DMSO) 5,36 (5-H,d, 16Hz, 1H), 5,24 (5-H,d,16Hz,1H), 4,96 (0CH2>d,6Hz,2H), 4,80 (l4-H,q,7Hz,1H), 1,48 (14-CH3,d,7Hz,3H).

Voorbeeld XVIII

30 Lithiumzout van fenylmethylZ5,8,13,14-tetra~ hydro-14-methy1-8,13-dioxobenzZS,^/isoindolo/2,1-h7isochinolin-9- zit fosforzuur

Lithiumjodidetrihydraat ( 1,88 g) werd toegevoegd aan een suspensie van Tussenprodukt (5a) ( 5,90 g) in een 35 mengsel van aceton ( 118 ml) en water ( 2,3 ml). Dit mengsel werd 8701766 - 37 - ♦ 2,7 uur onder stikstof en onder roeren tot terugvloeiing verwarmd, waarbij na 20 min een kristallijn neerslag gevormd werd. De suspensie werd tot ongeveer 20°C afgekoeld en 2 uur geroerd, waarna de vaste stof door filtratie verzameld, met aceton ( 3 x 50 ml) uitgewassen 5 en onder vacuum bij 21°C gedroogd werd onder verkrijging van de titelverbinding (4,72 g);Amax 244 nm fMeOH), e| 847; S(d6-DMS0) 5,43 (5-H,d,16Hz,1H), 5,31 (5-H,d,l6Hz,1H), 5,04 (0CH2,d,6Hz,2H), 4,84 (14-H,q,7Hz,1H), 1,49 (14-CH3,d,7Hz,3H).

10 Voorbeeld XIX

L-ArgLnineaout van fenylmethyl~/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,6y-isoindolo/2,l-b7isochinolin-9-yl/fosforzuur

Een suspensie van het prodtkt van voorbeeld 15 XV (2 g) in water (80 ml) werd onder stikstof geroerd, en een oplossing van L-argininemonohydraat ( 0,70 g) in water (10 ml) werd in de loop van 15 min toegedruppeld zodat de pH op 6,1 gebracht werd. De pH werd verhoogd tot 7,0 door toevoegen van een gedeelte ( 2 ml) van een oplossing van L-arginine (0,1 g) in water (5 ml), 20 en de verkregen heldere oplossing werd gefiltreerd.Het filtraat werd gevriesdroogd onder verkrijging van de titelverbinding als een geelgroene vaste stof (2,61 g);\ 244 nm (MeOH), e! 648; ÏUcLX 1 £ (dg-DMSO) 5,41 (5-H,d,16Hz,1H), 5,29 (5-H,d, 16Hz, 1H), 5,02 (0CH2,d,6Hz,2H), 4,83 (14-H,q,7Hz,1H), 3,14 (NCH2,t,6Hz,2H), 1,50 25 (l4-CH3,d,7Hz,3H).

Voorbeeld XX

Natriumzout van fenylmethy1-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methyl-8,13-dioxobenz/5,6/isoindo1o/2,1-b7isochinolin-30 9-yl/fosforzuur a) Natriumjodide ( 5,94 g) werd toegevoegd aan een suspensie van Tussenprodukt (5a) (21,2 g) in aceton (420 ml). Dit mengsel werd 1,5 uur onder stikstof geroerd en onder terugvloeiing verwarmd, en de verkregen oplossing werd tot ongeveer 35 35°C afgekoeld en gefiltreerd. Het filtraat werd onder vacuum tot 8701768 - 38 - ongeveer 50 ml ingedampt, en het residu werd geroerd terwijl diiso- propylether ( 350 ml) toegevoegd werd. De verkregen suspensie werd 45 min geroerd, en de groene vaste stof werd door filtratie verzameld, met diisopropylether ( 2 x 100 ml) uitgewassen en 5 bij 30°C onder vacuum gedroogd. Een gedeelte ( 2,0 g) van deze vaste stof werd in kokend aceton ( 20 g ) gesuspendeerd en water (2,0 ml) werd toegevoegd. De verkregen oplossing werd geënt en onder terugvloeiing 5 min geroerd terwijl kristallisatie

optrad. Het mengsel werd in de loop van 30 min tot ongeveer 20°C

afgekoeld en gedurende de nacht gekoeld bewaard, waarna de vaste stof door filtratie verzameld, met gekoeld aceton (2x5 ml) uitgewassen en onder vacuum gedroogd werd onder verkrijging van de titelverbinding als kristallen (1,77 g) ;X 244 nm . max _.

(MeOH) , Ej 857;^max (in Nujol) 1662 (C=0), 1250 en 1110 cm 15 (fosfaat); S (d,-DMS0) 5,41 (5-H,d,16Hz,1H), 5,29 (5-H,d,16Hz,1H),

O

4,96 (0CH2,d,6Hz,2H), 4,82 (14-H,q,7Hz,1H), 1,49 (14-CH3,d,7Hz,3H).

b) Natriumjodide ( 1,65 g ) werd toegevoegd aan een suspensie van Tussenprodukt (5a) ( 5,90 g) in een mengsel 20 van aceton ( 118 mi) en water ( 2,93 ml) . Dit mengsel werd 2 uur onder stikstof geroerd en tot terugvloeiing verwarmd, waarbij na 0,8 uur een lichtgeel kristallijn neerslag gevormd werd. De suspensie werd tot 21°C afgekoeld en 1 uur geroerd, waarna de vaste stof door filtratie verzameld, met aceton (2 x 25 ml) 25 uitgewassen en onder vacuum gedroogd werd onder verkrijging van de titelverbinding als kristallen ( 4,96 g) ; λ 244 nm (MeOH)

j <j XÏ1SX

E.j 842 ; infrarood- en H NMR-spectra waren gelijk aan die van het produkt van voorbeeld XXa.

Met de inde volgende voorbeelden gebruikte 30 uitdrukking "werkzaam bestanddeel" wordt een verbinding volgens de uitvinding bedoeld, zoals de verbindingen van voorbeelden Ha of VIII.

Voorbeeld XXI - Droog poeder voor injektie 35 . .

mg / fiool

Werkzaam bestanddeel equivalent aan 100 mg zuur

Trinatriumcitraat 8,8

Citroenzuur 0,2 8701768 - 39 -

Methode 1

De steriele bestanddelen worden gemengd tot een homogeen mengsel. Het mengsel wordt aseptisch in glazen fiolen afgevuld. De ruimte bovenin wordt met stikstof doorgeblazen en 5 de fiolen worden gesloten met rubber stoppen en metalen afsluitingen.

Methode 2

De bestanddelen worden opgelost in water voor injekties B.P. De oplossing wordt gesteriliseerd door membraanfiltra-10 tie. De oplossing wordt aseptisch afgevuld in vriesdroog-fiolen en geschikte rubber vriesdroogstoppen worden daarop geplaatst. Er wordt gevriesdroogd, waarbij de fiolen aan het eind van de cyclus met stikstof gevuld worden. De stoppen worden volledig in de fiolen geplaatst en metalen afsluitingen worden aangebracht.

15

Samenstelling

Het droge poeder wordt samengesteld met een geschikte steriele drager, bijvoorbeeld water voor injekties of een 5% (gew/vol) dextrose oplossing, als een injektievloeistof (bij— 20 voorbeeld in een volume van 10 ml ) of een infusievloeistof ( bij voorbeeld in een volume van 100 ml).

Voorbeeld XXII - Tablet voor oraal gebruik mg / tablet 25 '

Werkzaam bestanddeel equivalent aan 250 mg zuur

Microkristallijne cellulose 231

Natrium-zetmeelglycolaat 6

Magnes iums te araat 2 20 De bestanddelen worden gezeefd en gemengd tot een homogeen mengsel. Het mengsel wordt met geschikte stans-stempels samengeperst. De tabletten kunnen met gebruikelijke methoden met een dunne polymeerlaag bekleed worden. Een pigment kan in de filmbekleding opgenomen worden.

87 0 1 7 68

Claims

1. Verbinding met de algemene formule 1, waarin en R£ , die hetzelfde of verschillend kunnen zijn, elk een waterstofatoom, een hydroxygroep of een groep -0P(0)(OH)(OR^) voorstellen, waarbij R^ waterstof of alkyl, eventueel gesubstitueerd 5 door een hydroxy-t alkoxy-, cyclische ether- of cycloalkylgroep, alkenyl, cycloalkyl, aryl, aralkyl of aroylalkyl voorstelt, met dien verstande dat tenminste één van de symbolen R^ en R£ een ;·; groep -0P(0)(OH)(OR^) voorstelt, en R^ een waterstof- of halogeen-atoom of een methylgroep voorstelt, en zouten daarvan.

2. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R^ een waterstofatoom of een alkylgroep met 1-8 kool-stofatomen met rechte of vertakte keten, eventueel gesubstitueerd door hydroxy, alkoxy met 1-4 koolstofatomen, cyclische ether met 3-7 ringatomen, of cycloalkyl met 3-7 koolstofatomen , een alkenyl- 15 groep met 3-8 koolstofatomen, een cycloalkylgroep met 3-7 koolstof atomen, een fenylgroep, een fen(C.j_g) alkylgroep of een benzoy 1(0.^)-alkylgroep voorstelt, waarbij een eventuele fenylrest eventueel gesubstitueerd kan zijn door een hydroxygroep, een alkoxygroep met 1-4 koolstofatomen of een nitrogroepr

3. Verbinding volgens conclusie 1 of 2, met het kenmerk, dat R^ een alkylgroep met 1-5 koolstofatomen met rechte keten, een tetrahydrofuranylmethylgroep, een fen(C^_^)alkylgroep of een benzoyl (C ,^) alkylgroep voorstelt.

4. Verbinding volgens één van de conclusies 25 1-3, met het kenmerk, dat R^ een waterstofatoom voorstelt.

5. Verbinding volgens één van de conclusies 1-4, met het kenmerk, dat R^ een waterstofatoom voorstelt.

6. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat R en R£ , die hetzelfde of verschillend kunnen zijn, 30 elk een waterstofatoom, een hydroxygroep of een groep -0P(0)(OH)(OR^) voorstellen, waarbij R^ waterstof of alkyl , eventueel gesubstitueerd door een hydroxy-, alkoxy- of cycloalkylgroep , aryl of aralkyl voorstelt,en R^ een waterstof- of halogeenatoom of een methylgroep voorstelt.

7. Verbinding volgens conclusie 1, met het 8701768 X -41 - kenmerk, dat de verbinding fenylmethyl/5,8,13,14-tetrahydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1-b/isochinolin-9-yl7fosfarzuur of 2-oxo-2-£enylethyl-/5,8,13,14-tetrahydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,6.7-isoindolo/2,1-b,/isochinolin-9-yl7fosforzuur of een zout daarvan is.

8. Verbinding volgens conclusie 1, met 5 het kenmerk, dat de verbinding het natriumzout van fenylmethyl- /5, 8 ,13,14-tetrahydro-14-methy 1-8,13-dioxobenz/*5,67-isoindolo/2,1 -hj-isochinolin-9-yl7fosforzuur is.

9. Verbinding volgens conclusie 1, met het kenmerk, dat de verbinding het natriumzout van 2-oxo-2-fenylethyΙ- ΙΟ /5,8,13,14-tetrahydro-14-methy1-8,13-dioxobenz/5,67isoindolo/2,1-b/- isochinolin-9-yl/fosforzuur is.

10. Verbinding volgens één van de voorgaande conclusies of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan, ten gebruike bij de bestrijding van kanker bij mensen of dieren.

11. Isochinolineverbinding zoals beschreven in één van de voorbeelden I-XX.

12. Farmaceutisch preparaat , met het kenmerk, dat het als een werkzaam bestanddeel een verbinding met formule 1 volgens conclusie 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout 20 daarvan , desgewenst gemengd met één of meer farmaceutisch aanvaardbare dragers of excipienten , omvat.

13. Farmaceutisch preparaat volgens conclusie 12, met het kenmerk, dat het geschikt is voor parenterale toediening.

14. Werkwijze voor de bereiding van verbindingen met formule 1 volgens conclusie 1 en zouten daarvan, met het kenmerk, dat men tenminste één van de volgende stappen toepast: (A) ieaktie van een verbinding met formule 2 , waarin R^ de in 30 conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft, en één van de symbo len Rg enRy een groep -0P(0)(X^)(X^) voorstelt , waarbij X1 een atoom of groep voorstelt welkë omgezet kan worden in een hydroxygroep , en X£ een hydroxygroep of een X^-rest voorstelt, en het andere symbool een waterstofatoom, een hydroxygroep of 35 een groep -0P(0)(X^)(X^) voorstelt,teneinde tenminste een X^-rest om te zetten in een hydroxygroep ter verkrijging van een verbinding met formule 1; 8701769 - 42 - (TB) reaktie van een verbinding met formule 3, waarin Rg de in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft, en één van de symbolen Rg en R^ een hydroxygroep voorstelt en het andere symbool een waterstofatoom of een hydroxygroep voorstelt, ten-5 einde een hydroxygroep op de positie 9 en/of 12 om te zetten in een groep -0P(0)(OH)(OR^), waarin R^ de in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft; (C) condensatie van een chinon met formule 4, waarin één van de symbolen R^q en R^ een groep -OP (0) (OH) (OR^) of -OP (0) (X^) (Xg) 10 voorstelt , waarbij en X2 hierboven gedefinieerde betekenis hebben , en het andere symbool een waterstofatoom, een hydroxygroep of een groep -0P(0)(OH)(0R^) of -0P(0)(X^)(X^) voorstelt, met een verbinding met formule 5, waarin R^ een waterstofatoom of een groep -CH0 of -COCHg voorstelt, en daarna 15 desgewenst omzetting van één of meer X^-resten in een hydroxy groep; (D) halogenering van een verbinding met formule 1 waarin Rg een waterstofatoom voorstelt ; en (E) omzetting van een vrij zuur met formule 1 in een zout daarvan 20 of omzetting van een zout van een verbinding met formule 1 in het vrije zuur.

15. Werkwijze volgens conclusie 14, met het kenmerk, dat stap (A) uitgevoerd wordt door hydrolyse of ethersplitsing.

16. Werkwijze volgens conclusie 14, met 25 het kenmerk, dat stap (B) uitgevoerd wordt door reaktie van de ver binding met formule 3 met een halogeenfosfaat of pyrofosfaat met formule HalP(0)(OH)(0R4), HalP(0)(X1)(X2\ 0(P(0)(OH)(0R4))2 of 0(P(0)(X^)(X2))2 » waarin R4 de in conclusie 1 gedefinieerde betekenis heeft en X^ en X^ de in conclusie 14 gedefinieerde betekenis hebben, 30 desgewenst gevolgd door omzetting van één of meer X^-resten in een hydroxygroep.

17. Werkwijze volgens conclusie 14, met het kenmerk, dat stap (C) uitgevoerd wordt in aanwezigheid van een alkaan-zuuranhydride en bij verhoogde temperatuur.

18. Gebruik van een verbinding met formule 1 volgens conclusie 1 of een fysiologisch aanvaardbaar zout daarvan 8 7 0 17 6 8 % - 43 - voor de bereiding van een therapeutisch middel voor de bestrijding van kanker bij mensen of dieren.

19. Verbinding met formule 2 zoals gedefinieerd in conclusie 14 en zouten daarvan. -o-o-o-o-o- 87 0 1 7 Γ, 8 A CHj 0 R, CHj 0 Rt R3 3 Re R3 0 2 CHj 0 Rs M ?“ cötS ΦΦ , 1 3 0 R,, * r3 0 r5 0 11 CHS 0 R«* cór (¾ NRi5. 5 II 1 6

0 Rrt

0 Rif « ,

0 R(fe t 8701768 Glaxo Group Limited, Londen, Groot Brittannië