CH650683A5 - Production de vaccin antivirus. - Google Patents

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CH650683A5
CH650683A5 CH556/82A CH55682A CH650683A5 CH 650683 A5 CH650683 A5 CH 650683A5 CH 556/82 A CH556/82 A CH 556/82A CH 55682 A CH55682 A CH 55682A CH 650683 A5 CH650683 A5 CH 650683A5
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Shunsaku Koyama
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Hayashibara Biochem Lab
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Description

La présente invention concerne un procédé pour la production de vaccin actif contre des virus.
Il est classique de préparer des vaccins contre des virus par inac-tivation et détoxification du virus au moyen de formaldéhyde ou de ß-propiolactone, sans diminution de son immunogénicité, ou bien par isolation d'une certaine souche de virus à toxicité plus faible; ces vaccins ont été utilisés pour des essais prophylactiques, thérapeutiques et/ou de diagnostic, des maladies virales. Cependant, ces vaccins de type classique contre les virus présentent l'inconvénient de pouvoir produire de l'immunoglobuline E, un anticorps qui provoque des allergies et/ou un choc anaphylactique avec, par rapport au virus intact, une possibilité de production plus faible des autres anticorps, par exemple Immunoglobuline G et immunoglobuline M, qui sont actifs pour la prévention des infections virales.
Le brevet français N° 1604982 révèle un procédé de fabrication d'articles à base de substances protéiniques actives, qui consiste à mettre un support en contact avec une solution de substances protéiniques et d'un agent de pontage. Les produits obtenus par ce procédé sont pourtant insolubles dans l'eau.
La présente invention a pour but d'éviter les inconvénients de l'art antérieur et de préparer un vaccin dont l'aptitude de produire de l'immunoglobuline E est remarquablement abaissée, sans diminution du pouvoir de production des immunoglobulines G et M, et qui est en particulier soluble dans l'eau.
Ce but est atteint par un procédé du genre mentionné au début et caractérisé, conformément à l'invention, par la partie caractérisante de la revendication 1.
Le procédé selon l'invention peut s'appliquer à tout virus responsable de maladies virales chez l'homme et/ou les animaux, et capable d'y stimuler la production d'anticorps: comme par exemple le virus de la vaccine, de la polio, de l'influenza, de l'encéphalite japonaise.
de la fièvre jaune, de la rougeole, de la rubéole, des oreillons, de l'hépatite B, d'Epstein-Barr, de la rage, de Sendaï, de la maladie de Newcastle, adéno-virus et distemper-virus. Le virus peut être soumis tel quel, ou éventuellement après traitement par acide, alcali, chauf-5 fage, irradiation aux UV et/ou solvant organique, à la réaction de conjugaison avec un saccharide activé.
Les saccharides utilisés conformément à l'invention sont des Polysaccharides, comme amidon, amylose, dextrane, polysucrose ou Ficoll (Pharmacia Fine Chemicals AB, Suède), pullulane, elsinane, io curdlane, gomme arabique, gomme adragante, gomme guar, gomme xanthane, carraghénane, pectine, cellulose, glucomannane et chitosane, ainsi que leurs dérivés et hydrolysats partiels, dont les poids moléculaires moyens sont généralement compris entre 1000 et 10000000, de préférence entre 10000 et 1000000. Conviennent plus 15 particulièrement pullulane, elsinane et leurs hydrolysats partiels, car la liaison de covalence entre le virus et ces produits accroît de façon remarquable leur pouvoir naturel à produire les immunoglobulines G et M, et diminue fortement l'aptitude à produire de l'immunoglobuline E, tout en inactivant et détoxifiant suffisamment le virus. 20 En ce qui concerne le procédé utilisé pour réaliser la liaison de covalence entre le virus et le saccharide, on peut, conformément à l'invention, utiliser tout procédé dans la mesure où il entraîne la formation de cette liaison de covalence, par exemple copulation par diazotation, peptidisation, alkylation, réticulation et disulfuration. 25 Dans le procédé de copulation par diazotation, un saccharide, doté par un procédé classique d'au moins un groupement aminoaro-matique, par exemple p-aminobenzyle, p-aminobenzoyle, m-amino-benzyle, m-aminobenzoyle, m-aminoamisoyle, m-aminobenzyloxy-méthyle, (p-aminophénoxy)-3 hydroxy-2 propionyle ou (p-amino m-30 méthylanilino)-3 et chloro-5 triazinyle, est soumis à une réaction de conjugaison avec le virus. Pour le procédé par peptidisation, le virus est soumis à la réaction de conjugaison avec un dérivé carbonaté, par exemple un azide d'acide, un chlorure d'acide, un carbodiimide ou un isocyanate, obtenu à partir d'un carboxylsaccharide, ou bien 35 un dérivé iminoester comme un saccharide activé par BrCN.
Dans le procédé par alkylation, le virus est soumis à ta réaction de conjugaison avec un dérivé de saccharide porteur de groupements halogénoalkyle comme chloro-, bromo-, iodoacétyle, ou chlorotri-azinyle.
40 Le procédé par réticulation implique une réaction de réticulation entre la protéine du virus et le saccharide, en présence d'un réactif polyfonctionnel comme glutaraldéhyde, glyoxal, succindialdéhyde, diisocanate d'hexaméthylène, diisocyanate de toluène-2,4, bisazo-benzidine ou N-N'-éthylènebismaléimide.
45 Les proportions pondérales préférées virus/saccharide, au cours de la réaction de conjugaison, sont comprises entre 1/1000 et 1000/1, de préférence entre 1/100 et 100/1.
Au cours de la réaction de conjugaison on peut utiliser plus d'une variété de virus et de saccharide: ainsi, il est possible d'obtenir 50 une prépartion mixte de vaccins, par conjugaison d'un virus avec deux, ou plus, variétés de saccharides, ou par conjugaison d'une variété de saccharide avec deux, ou plus, variétés de virus.
En ce qui concerne les conditions de la réaction de conjugaison, on peut appliquer toutes les conditions dans la mesure où la réaction 55 aboutit à l'inactivation et à la détoxification de virus, et diminue fortement le pouvoir de production de l'immunoglobuline E, qui provoque des maladies allergiques et/ou un choc anaphylactique, sans entraîner de diminution du pouvoir de production des immunoglobulines G et M, qui se révèlent efficaces quant à la prévention des 60 maladies virales: en général, on opère à une température de 0 à 1003C, à une valeur de pH comprise entre 3 et 12, pendant une durée de 5 min à 50 h.
Le vaccin antivirus ainsi obtenu peut être généralement soumis aux stades de séparation et/ou de purification, grâce à des modes 65 opératoires classiques comme filtration, lavage, centrifugation, relargage, dialyse, adsorption et désorption à l'aide d'un absorbant, filtration sur gel, Chromatographie par échange d'ions, Chromatographie par affinité et/ou électrophorèse, puis être concentré sous forme
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de liquide ou de pâte, qui peut être réduit par un séchage ultérieur à l'état de poudre.
Ce vaccin antivirus peut être avantageusement utilisé isolément ou, si nécessaire, en combinaison avec d'autres agents comme antiseptique ou adjuvant, comme agent prophylactique, thérapeutique ou de diagnostic, désensibiliseur ou inducteur d'interféron, au cours de la prévention et du traitement de maladies virales chez l'homme et l'animal.
En outre, conformément à l'invention, la détoxification du virus peut être réalisée dans un court intervalle de temps, c'est-à-dire généralement 1 à 2 d, et le vaccin antivirus résultant est très stable sur une longue période de temps, sans présenter de danger de retour de la toxicité, alors que le procédé classique utilisant le formaldéhyde nécessite plus de temps, c'est-à-dire 20 à 90 d, pour la détoxification du virus, et que le vaccin ainsi obtenu présente une tendance à retrouver sa toxicité; ainsi peut-on facilement réaliser, conformément à l'invention, une production et un entreposage adéquats de vaccin antivirus, pour maîtriser l'existence ou l'explosion de maladies virales.
En outre, ce procédé n'exige pas nécessairement une préparation de virus hautement purifiée, puisqu'il évite la contamination par d'autres protéines, par exemple celles du milieu de culture, qui provoquent des maladies allergiques fatales et/ou un choc anaphylactique. Conformément à l'invention, une préparation brute de virus peut être directement inactivée et détoxifiée, sans stades de purification compliqués, et donne une grande quantité de vaccin antivirus à faible coût.
On a en outre confirmation du fait qu'un vaccin antivirus obtenu à partir d'une préparation de virus brute présente une activité immu-nologïque comparable ou supérieure à celle que l'on obtient avec une préparation hautement purifiée.
Plusieurs formes de réalisation non limitatives de l'invention sont décrites'dans les exemples suivants.
Exemple 1 :
Vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise
A. Préparation du virus de l'encéphalite japonaise
Une souche de virus de l'encéphalite japonaise, Nakayama, est ensemencée dans des souris âgées de 4 semaines, et les animaux sont ensuite nourris pendant environ 80 h, jusqu'à ce qu'ils soient complètement paralysés. Leurs cerveaux sont enlevés par incision et mis en suspension dans 4 fois leur volume de sérum physiologique, contenant 1/15M de tampon phosphate (pH 8), et l'on homogénéise. Le produit résultant est alors centrifugé à 3000 x g pendant 20 min, et la partie surnageante est additionnée d'une solution aqueuse de sulfate de protamine, jusqu'à une concentration de 2 mg/ml. Ce mélange est ensuite agité pendant 2 h et centrifugé pour donner une partie surnageante contenant le virus de l'encéphalite japonaise, à raison de 0,8% en poids/volume.
B. Conjugaison du virus de l'encéphalite japonaise avec le pullulane
A une solution de pullulane, préparée par dissolution de 5,2 g de pullulane de poids moléculaire moyen de 100000, dans 110 ml de di-méthylformamide, avec chauffage suivi de refroidissement à température ambiante, on ajoute 10 ml de pyridine, puis on additionne ce mélange, sous agitation, avec 1 g de chlorure de p-nitrobenzoyle. On laisse reposer à température ambiante pendant 17 h. Ensuite, on ajoute au produit deux fois son volume de n-propanol et l'on recueille le précipité qui est redissous dans du diméthylformamide frais. L'opération ci-dessus de précipitation-dissolution est répétée à 3 reprises, et le précipité obtenu finalement est dissous dans une solution aqueuse à 5% en poids/volume de dithionite de sodium.
Après mise à incuber de ce mélange à 80° C pendant 30 min, on décolore le produit résultant avec du charbon activé, puis on y ajoute 2 volumes de n-propanol pour réaliser la précipitation. Le précipité obtenu est dissous dans l'eau et dialysé une nuit durant contre de l'eau courante provenant du robinet.
Après refroidissement de la solution dialysée à une température inférieure à 2°C, on y ajoute de l'acide chlorhydrique jusqu'à une concentration de l'ordre de 0,1N, et on additionne ultérieurement ce mélange avec du nitrite de sodium, sous agitation, jusqu'à une concentration de l'ordre de 1 % en poids/volume. Ce mélange est alors soumis à une réaction de diazotation à cette température, pendant 30 min. Lorsque la réaction est achevée, le mélange réactionnel est dialysé contre de l'eau distillée pendant 2 h à une température inférieure à 2°C, ce qui donne une solution de pullulane activé. On ajoute à cette solution 100 ml de solution de virus de l'encéphalite japonaise, obtenue en A du présent exemple, et préalablement inactivée par 3 h de chauffage à 60° C, et l'on ajuste le pH de ce mélange à 8,5 avec une solution de carbonate de sodium. Ce mélange est ensuite soumis à la réaction de diazocopulation, pendant 2 h, sous agitation, à une température inférieure à 4°C. On ajoute au mélange réactionnel 3 volumes d'acétone et on recueille le précipité résultant. Après dissolution du précipité dans du tampon phosphate 0,01 M (pH 7), la solution obtenue est centrifugée pour éliminer la substance insoluble. La partie surnageante est fractionnée par un mode de filtration sur gel, ce qui donne une fraction contenant le produit conjugué pullulane/virus de l'encéphalite japonaise, qui est alors soigneusement filtré, concentré et lyophilisé, donnant avec un rendement voisin de 60%, rapporté au virus introduit au départ, un vaccin en poudre contre le virus de l'encéphalite japonaise.
Le vaccin témoin est préparé comme suit: A 50 ml de solution de virus, obtenue en A du présent exemple, on ajoute 0,05% en poids/ poids de solution de formaldéhyde de la pharmacopée japonaise, et on laisse reposer ce mélange à 4°C pendant 60 d afin d'inactiver le virus. Le produit résultant est centrifugé à 3000 x g pendant 20 min, et la partie surnageante est successivement soigneusement filtrée, concentrée et lyophilisée, ce qui donne le vaccin témoin contre le virus de l'encéphalite japonaise, avec un rendement voisin de 50% rapporté au virus de départ.
C. Administration chez la souris du vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise
L'injection intraveineuse de la solution de virus obtenue en A du présent exemple, dans des souris (DDD x BALB/C) F1, à raison d'une dose de 5 x 10~8 g/animal, aboutit à leur mort par encéphalite japonaise.
Par contre, l'injection intraveineuse à des souris de même souche du vaccin selon cet exemple ou du vaccin témoin, à raison de jusqu'à 10 ~3 g de virus intact, n'aboutit pas à leur mort, ce qui confirme que les deux vaccins sont suffisamment inactivés et détoxifiés. Après avoir reçu, séparément, par voie intraveineuse, du vaccin antivirus selon cet exemple ou du vaccin témoin, à raison de 5 x 10_5 g exprimés en quantité de virus, des souris de même souche reçoivent une nouvelle injection du même vaccin, 7 d après la première. Ces animaux sont saignés 10 d après la première injection, et l'on dose la production d'anticorps dans leurs sérums; la production des immunoglobulines M et G est essayée par la réaction d'hémoagglutination passive (AHP), et celle de l'immunoglobuline E par la réaction d'anaphylaxie cutanée passive (ACP).
Les expérimentations ci-dessus confirment que l'on obtient une production d'immunoglobulines G et M environ 16 fois supérieure avec le vaccin selon l'invention, et qu'il n'y a pas simultanément de formation décelable d'immunoglobuline E. Par contre, on constate avec le vaccin témoin la formation d'une grande quantité d'immunoglobuline E, qui correspond à environ la moitié de la production des immunoglobulines G et M obtenue dans ce cas.
Un essai au cours duquel on met à incuber à 40e C dans du tampon phosphate 0,1 M (pH 7) contenant en tant qu'agent antiseptique 0,01% en volume/volume d'aldéhyde formique de la pharmacopée japonaise, du vaccin selon l'invention ou du vaccin témoin, et au cours duquel la quantité des immunoglobulines G et M formées sont dosées par réaction AHP, après administration du vaccin incubé chez la souris, confirme que la demi-durée de vie immunologique du vaccin selon l'invention est 8 fois plus longue que celle du vaccin témoin.
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En conséquence, le vaccin selon l'invention peut être avantageusement utilisé contre le virus de l'encéphalite japonaise, sans danger d'allergies et/ou de choc anaphylactique, en raison de sa stabilité satisfaisante.
Exemple 2:
Vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise
A une solution aqueuse d'elsinane, préparée par dissolution de 8 g d'elsinane de poids moléculaire moyen voisin de 700000, dans 200 ml d'eau chaude, suivie de refroidissement à température ambiante, on ajoute 10% de chlorure cyanurique dans 40 ml de dimé-thylformamide, puis on ajuste le pH à 7, et soumet ce mélange à la réaction d'activation pendant 2 h dans les conditions ambiantes,
avec maintien du pH à la même valeur par addition de solution IN de carbonate de sodium. Le mélange réactionnel est ensuite dialysé contre de l'eau à 4 C et même pH, une nuit durant, pour obtenir une solution d'elsinane activé.
A cette solution on ajoute 45 ml de solution de virus de l'encéphalite japonaise, obtenue comme en A de l'exemple 1, et préalablement inactivé par irradiation aux UV, puis le mélange est ajusté à pH 9 et abandonné pendant 2 h sous agitation et dans les conditions ambiantes, afin que s'effectue la réaction de conjugaison. Le produit résultant est ensuite purifié comme au B de l'exemple 1, ce qui donne une poudre de vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise, avec un rendement voisin de 60% rapporté au virus de départ.
L'injection intraveineuse du vaccin ainsi obtenu s'effectue comme au C de l'exemple 1, et confirme qu'il est suffisamment inactivé et détoxifié.
La production en immunoglobulines G et M est environ 10 fois supérieure à celle du vaccin témoin préparé en B de l'exemple 1, et il n'y a pas de formation simultanée décelable d'immunoglobuline E. La demi-durée de vie immunologique du présent vaccin est environ 4 fois plus longue que celle du témoin; aussi peut-on l'utiliser avantageusement comme vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise.
Exemple 3:
Vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise
On opère comme au B de l'exemple 1, mais avec remplacement du pullulane par du dextrane de poids moléculaire moyen de 70000. Le rendement en vaccin est d'environ 40% rapporté au virus de départ. L'essai d'administration de ce vaccin est réalisé comme au C de l'exemple 1, et confirme qu'il est suffisamment inactivé et détoxifié. La production d'immunoglobulines G et M, avec le présent vaccin, est environ 16 fois supérieure à celle du vaccin témoin préparé au B de l'exemple 1, tandis que la production d'immunoglobuline E ne représente que 1/64 de celle du vaccin témoin.
La demi-durée de vie immunologique du présent vaccin est le double de celle du vaccin témoin; aussi peut-il être avantageusement utilisé comme vaccin contre le virus de l'encéphalite japonaise.
Exemple 4:
Vaccin contre le virus de l'influenza
A. Préparation du virus de l'influenza
On ensemence des œufs embryonnés de 10 d avec une souche de virus de l'influenza A/Tokyo/6/73 (H3M2), et on les met à incuber à 36°C pendant 3 d, puis on recueille leur fluide allantoïque. Ce fluide est centrifugé à 2000 x g pendant 20 min, et la partie surnageante est filtrée au travers d'une membrane filtrante, dont les pores ont une dimension de 0,8 p., ce qui donne une solution contenant le virus de l'influenza.
B. Conjugaison du virus de l'influenza et d'un hydrolysat partiel de pullulane
Une solution aqueuse de pullulane est préparée par dissolution de 5 g d'hydrolysat partiel de pullulane, de poids moléculaire moyen voisin de 10000, dans 400 ml d'eau, et ce mélange est ajusté à pH 10,7 avec une solution d'hydroxyde de sodium IN. On ajoute progressivement à cette solution 3 g de BrCN, sous agitation, à pH constant, puis on abandonne dans ces conditions pendant 1 h, afin que s'effectue la réaction d'activation. Le mélange réactionnel est alors ajusté à pH 5 avec de l'acide chlorhydrique IN, et il est dialysé contre de l'eau glacée à ce même pH pour obtenir une solution de pullulane activé.
Après ajustement de cette solution à pH 8 au moyen de tampon carbonate 0,05M, on y ajoute 200 ml de la solution de virus de l'influenza obtenue en A du présent exemple, et on soumet le mélange à la réaction de conjugaison pendant 24 h dans les conditions ambiantes. Le mélange réactionnel est purifié, concentré, et lyophilisé comme au B de l'exemple 1, ce qui donne une poudre de vaccin contre le virus de l'influenza, avec un rendement voisin de 70% rapporté au virus de départ.
Le vaccin témoin est préparé comme suit: A la solution de virus de l'influenza obtenue au A du présent exemple, on ajoute 2 volumes d'éther, et l'on met à incuber ce mélange à 4°C pendant 2 d. Le produit résultant est filtré, et le filtrat est lyophilisé, ce qui donne une poudre de vaccin témoin avec un rendement voisin de 60% rapporté au virus de départ.
C. Administration à la souris du vaccin contre le virus de l'influenza
L'injection intraveineuse des vaccins ainsi obtenus s'opère comme au C de l'exemple 1, dans des souris de même souche, et confirme que les deux vaccins sont suffisamment inactivés et détoxifiés. La production des immunoglobulines G et M, dans le cas du présent vaccin, est environ 8 fois plus forte que dans le cas du vaccin témoin, et on n'observe pas de formation simultanée décelable d'immunoglobuline E.
Par contre, dans le cas du vaccin témoin, il y a formation d'une grande quantité d'immunoglobuline E, qui correspond à environ la moitié de la production des immunoglobulines G et M. En conséquence, le présent vaccin peut être avantageusement utilisé comme vaccin contre le virus de l'influenza.
Exemple 5:
Vaccin contre le virus de Sendaï
A. Préparation du virus de Sendaï
On ensemence du virus de Sendaï dans des œufs embryonnés de 10 d que l'on met à incuber ensuite comme au A de l'exemple 4. Le fluide allantoïque de ces œufs est récolté et purifié comme dans ce même exemple, ce qui donne une partie surnageante contenant le virus de Sendaï.
B. Conjugaison du virus de Sendaï et du pullulane
A une solution aqueuse de pullulane, préparée par dissolution de 10 g de pullulane de poids moléculaire moyen de 70000, dans 200 ml d'eau à chaud, suivie de refroidissement à température ambiante, on ajoute 5 g d'hexaméthylènediamine, et le mélange est ajusté à pH 11 avec une solution d'hydroxyde de sodium IN. Ce mélange est alors refroidi au-dessous de 20° C avec un bain de glace, et l'on additionne peu à peu avec 5 g de BrCN, sous agitation, avec maintien du même pH, puis on abandonne pendant 30 min dans ces conditions. Le mélange reactionnel est dialysé contre de l'eau distillée à 40°C pendant 1 h, ce qui donne une solution de pullulane activé.
A cette solution on ajoute 25% en poids/volume de glutaraldé-hyde dans 2 ml d'eau, 60 ml de solution de virus de Sendaï obtenue au A du présent exemple et 10 ml de tampon acétate IM (pH 5),
puis on soumet ce mélange à la réaction de conjugaison à 4°C pendant 24 h, sous agitation. La réaction de conjugaison est suspendue par addition de glycine jusqu'à une concentration 1M, et on abandonne le mélange à température ambiante pendant 24 h. Le produit résultant est centrifugé, et la partie surnageante est fractionnée par une technique de filtration sur gel, ce qui donne une fraction contenant le produit conjugué pullulane/virus de Sendaï. Cette fraction est ensuite concentrée, soigneusement filtrée, et finalement additionnée d'aldéhyde formique de la pharmacopée japonaise, en tant que agent antiseptique, jusqu'à une concentration de 0,01% en poids/
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poids, ce qui donne un vaccin liquide contre le virus de Sendaï avec un rendement de l'ordre de 50% rapporté au virus de départ.
Le vaccin témoin est préparé comme suit: A la solution de virus de Sendaï obtenue au A du présent exemple on ajoute de l'aldéhyde formique de la pharmacopée japonaise jusqu'à une concentration de 0,05% en poids/poids, et l'on met à incuber ce mélange pendant 60 h à 4 C, afin d'inactiver le virus. Le produit résultant est ensuite centrifugé à 3000 x g pendant 20 min, et la partie surnageante est soigneusement filtrée, ce qui donne un vaccin témoin liquide avec un rendement voisin de 40% rapporté au virus de départ.
C. Administration chez la souris du vaccin contre le virus de Sendaï
L'essai d'administration des vaccins obtenus plus haut est réalisé comme au C de l'exemple 1, et confirme que ces deux vaccins sont suffisamment inactivés et détoxifiés. La production des immunoglobulines G et M, dans le cas du présent vaccin, est environ 10 fois plus élevée que dans le cas du vaccin témoin, et on ne constate pas de formation simultanée, décelable, d'immunoglobuline E.
Par contre, dans le cas du vaccin témoin, on observe la formation d'une forte quantité d'immunoglobuline E, qui correspond à environ la moitié de la production d'immunoglobulines G et M obtenues dans ce cas. En conséquence, le présent vaccin peut être avantageusement utilisé comme vaccin contre le virus de Sendaï.
Exemple 6:
Vaccin contre le virus de la rougeole
A. Préparation du virus de la rougeole
Des vero cells, provenant de rein de singe vert, sont infectées avec du virus de la rougeole, souche Edmonston, dans du milieu de Eagle, additionné à 5% en volume/volume de sérum de veau, et on cultive à 37° C pendant 7 d. Lorsque la culture est achevée, on centrifuge à 3000 x g pendant 20 min, et la partie surnageante est à nouveau centrifugée à 110000 x g pendant 30 min. Le sédiment est mis en suspension dans du sérum physiologique au double de son volume total, ce qui donne une solution contenant le virus de la rougeole.
B. Conjugaison du virus de la rougeole et de carboxyméthylcellu-lose
A 200 ml d'une solution aqueuse à 1 % en poids/volume de carboxyméthylcellulose, de poids moléculaire moyen 20000, on ajoute 2 g d'éthyl-1 (diméthylamino)-3' propyl-3 carbodiimide, et on ajuste le pH du mélange à 4 avec de l'acide chlorhydrique, avant de l'abandonner sous agitation, à ce pH et à température ambiante, pendant 2 h, afin que s'effectue la réaction d'activation. Ce mélange réactionnel est ensuite dialysé contre de l'eau distillée, ce qui donne une solution de carboxyméthylcellulose activée.
On ajoute à cette solution 90 ml de la solution de virus de la rougeole, obtenu en A du présent exemple, et l'on soumet ce mélange à
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la réaction de conjugaison à température ambiante, une nuit durant, avec agitation et maintient du pH à 4,5. Le mélange réactionnel est ensuite centrifugé, et la partie surnageante est fractionnée par une technique de filtration sur gel, pour obtenir une fraction contenant un produit conjugué carboxyméthylcellulose/virus de la rougeole. Cette fraction est soigneusement filtrée, et le filtrat est additionné de thimérosal, un agent antiseptique, jusqu'à une concentration de 0,01 % en poids/volume, ce qui donne un vaccin liqliide contre le virus de la rougeole avec un rendement voisin de 50% par rapport au virus de départ.
Le vaccin témoin est préparé comme suit: La solution de virus de la rougeole, obtenue au A du présent exemple, est traitée comme en B de l'exemple 1, ce qui donne un vaccin témoin avec un rendement de l'ordre de 40% rapporté au virus de départ.
C. Administration chez la souris du vaccin contre le virus de la rougeole
L'essai d'injection intraveineuse des vaccins ainsi obtenus s'effectue comme au C de l'exemple 1, et confirme que les deux vaccins sont suffisamment inactivés et détoxifiés.
La production des immunoglobulines G et M dans le cas du présent vaccin est environ 4 fois supérieure à celle du vaccin témoin, alors qu'il n'y a pas de formation simultanée décelable d'immunoglobuline E. Par contre, dans le cas du vaccin témoin, il y a formation d'une grande quantité d'immunoglobuline E, qui correspond à environ Vt de la production d'immunoglobulines G et M. En conséquence, le présent vaccin peut être avantageusement utilisé contre le virus de la rougeole.
Exemple 7:
Vaccin contre le virus de la maladie de Newcastle
Un virus de la maladie de Newcastle de toxicité moindre (souche Ishii) est ensemencé dans des œufs embryonnés, âgés de 8 d, qui sont ensuite mis à incuber comme au A de l'exemple 4. Après l'incubation, on récolte le fluide allantoïque et le traite comme au A de l'exemple 6, ce qui donne une solution contenant le virus de la maladie de Newcastle.
A 100 ml de cette solution de virus on ajoute une solution de pullulane activé, préparé comme au B de l'exemple 1, et ce mélange est soumis à la réaction de conjugaison à pH 8, pendant 24 h, dans les conditions ambiantes. Le produit conjugué résultant est séparé, purifié et lyophilisé comme au B de l'exemple 1, ce qui donne un vaccin en poudre contre le virus de la maladie de Newcastle, avec un rendement voisin de 50% rapporté au virus de départ. Comme le présent vaccin prévient de façon remarquable l'infection virale, sans provoquer d'allergies ou de choc anaphylactique, on peut l'utiliser avantageusement comme vaccin contre le virus de la maladie de Newcastle.
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Claims (7)

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1. Procédé pour la production de vaccin contre des virus, caractérisé en ce que l'on forme une liaison de covalence entre un virus et un saccharide soluble dans l'eau pour obtenir un produit conjugué saccharide/virus soluble dans l'eau, puis l'on recueille ce produit pour sa mise en œuvre en tant que vaccin contre des virus.
2. Procédé selon la revendication 1, caractérisé en ce que le virus est un ou plusieurs des virus suivants: virus de la vaccine, de la polio, de l'influenza, de l'encéphalite japonaise, de la fièvre jaune, de la rougeole, de la rubéole, des oreillons, de l'hépatite B, d'Epstein-Barr, de la rage, de Sendaï, de la maladie de Newcastle, adéno-virus ou distemper-virus.
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REVENDICATIONS
3. Procédé selon l'une des revendications 1 ou 2, caractérisé en ce que le saccharide est constitué par un ou plusieurs des produits suivants: amidon, amylose, dextrane, polysucrose, pullulane, elsi-nane, curdlane, gomme arabique, gomme adragante, gomme guar, gomme xanthane, carraghénane, pectine, cellulose, glucomannane, chitosane et leurs dérivés et produits d'hydrolyse partielle.
4. Procédé selon la revendication 3, caractérisé en ce que le poids moléculaire moyen du saccharide est compris entre 1000 et 10000000, de préférence entre 10000 et 1000000.
5. Procédé selon l'une des revendications 1 à 4, caractérisé en ce que la liaison de covalence entre la saccharide et le virus est réalisée à pH compris entre 3 et 12, à température comprise entre 0 et 100JC et pendant une durée s'étalant entre 5 min et 50 h.
6. Procédé selon l'une des revendications 1 à 5, caractérisé en ce que le rapport pondéral virus/saccharide est compris dans l'intervalle entre 1/1000 et 1000, de préférence entre 1/100 et 100.
7. Procédé selon l'une des revendications 1 à 6, caractérisé en ce que la liaison de covalence est réalisée par copulation diazoïque, al-kylation, réticulation, peptidisation ou disulfuration.
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Families Citing this family (63)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
JPS57136528A (en) * 1981-02-09 1982-08-23 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of viral vaccine
JPS60258125A (ja) * 1984-06-06 1985-12-20 Hayashibara Biochem Lab Inc 蛋白性生理活性物質を含有する水溶性乾燥物
JPS6147186A (ja) * 1984-08-09 1986-03-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst インフルエンザウイルスの精製方法
JPS6147185A (ja) * 1984-08-09 1986-03-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst 日本脳炎ウイルスの精製方法
JPS6147187A (ja) * 1984-08-10 1986-03-07 Chemo Sero Therapeut Res Inst 狂犬病ウイルスの精製方法
JPH084508B2 (ja) * 1987-09-16 1996-01-24 国立予防衛生研究所長 組み換えワクチニアウイルス
EP0326111A3 (fr) * 1988-01-29 1989-12-27 New York Blood Center, Inc. Dérivés de peptide rendus immunogéniques lors de l'administration d'un alun comme adjuvant
JP2896580B2 (ja) * 1989-08-25 1999-05-31 チッソ株式会社 アミロース―リゾチームハイブリッドと活性化糖およびその製造法
US5397568A (en) * 1989-10-02 1995-03-14 Whitfill; Craig E. Method of treating infectious bursal disease virus infections
BR9007702A (pt) 1989-10-02 1992-08-18 Embrex Inc Metodo de tratamento
JP3522772B2 (ja) * 1991-05-21 2004-04-26 台糖株式会社 ワクチンの免疫効果増強剤
US5194280A (en) * 1991-07-15 1993-03-16 F & Mp Research & Development Laboratories, Inc. Method of manufacturing a juice concentrate
US6607727B1 (en) * 1991-08-26 2003-08-19 The Scripps Research Institute Peptides for inducing cytotoxic T lymphocyte responses to hepatitus B virus
US6235288B1 (en) * 1992-08-26 2001-05-22 The Scripps Research Institute Peptides for inducing cytotoxic T lymphocyte responses to hepatitis B virus
AUPM322393A0 (en) * 1993-12-24 1994-01-27 Austin Research Institute, The Mucin carbohydrate compounds and their use in immunotherapy
GB9419979D0 (en) * 1994-10-04 1994-11-16 Medeva Holdings Bv Vaccine compositions
US6309671B1 (en) * 1995-04-14 2001-10-30 Inhale Therapeutic Systems Stable glassy state powder formulations
GB9522351D0 (en) * 1995-11-01 1996-01-03 Medeva Holdings Bv Vaccine compositions
EP0914141A1 (fr) * 1996-04-22 1999-05-12 Peter R. Rothschild Comprimes de vaccin contre l'hepatite b stabilises
EP2316923B1 (fr) * 1998-06-12 2017-10-18 Icahn School of Medicine at Mount Sinai Virus atténués de la grippe dotés d'une activité antagoniste contre l'interféron altéré pour une utilisation en tant que vaccins et produits pharmaceutiques
WO1999064571A1 (fr) * 1998-06-12 1999-12-16 Mount Sinai School Of Medicine Of The City University Of New York Interferon induisant des virus attenues mis au point par genie genetique
US6544785B1 (en) 1998-09-14 2003-04-08 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Helper-free rescue of recombinant negative strand RNA viruses
US8715940B2 (en) 1999-04-06 2014-05-06 Wisconsin Alumni Research Foundation Method of making recombinant influenza virus
US6896881B1 (en) * 1999-09-24 2005-05-24 Mayo Foundation For Medical Education And Research Therapeutic methods and compositions using viruses of the recombinant paramyxoviridae family
WO2001077394A1 (fr) * 2000-04-10 2001-10-18 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Methodes de criblage destinees a l'identification de proteines virales au moyen de fonctions antagonistes d'interferons et d'agents antiviraux potentiels
US6524586B2 (en) * 2001-05-18 2003-02-25 Albany Medical College Enhancement of oligomeric viral immunogenicity
KR101229202B1 (ko) 2002-04-26 2013-02-01 메디뮨 엘엘씨 인플루엔자 바이러스의 생산을 위한 다중 플라스미드 시스템
US7465456B2 (en) 2002-04-26 2008-12-16 Medimmune, Llc Multi plasmid system for the production of influenza virus
MX342639B (es) * 2003-05-28 2016-10-07 Wisconsin Alumni Res Found Virus de la influenza recombinantes de alta titulacion para vacunas y terapia genica.
CA2529647C (fr) 2003-06-16 2013-08-13 Medimmune Vaccines, Inc. Hemagglutinine du virus de la grippe et variantes de la neuraminidase
JP4771959B2 (ja) 2003-12-23 2011-09-14 メディミューン，エルエルシー インフルエンザウイルス作製のための多重プラスミド系
EP1771552B1 (fr) * 2004-05-25 2012-08-01 MedImmune Vaccines, Inc. Variantes d'hémagglutinine influenza et de neuraminidase
CN1993140A (zh) 2004-06-01 2007-07-04 纽约大学西奈山医学院 遗传工程猪流感病毒及其应用
AU2005337178A1 (en) 2004-11-19 2007-04-19 Wisconsin Alumni Research Foundation Recombinant influenza vectors with tandem transcription units
WO2006088481A2 (fr) * 2005-02-15 2006-08-24 Mount Sinai School Of Medicine Of New York University Virus de la grippe equine genetiquement modifie et utilisations associees
EP2441471B1 (fr) 2005-03-08 2014-10-08 MedImmune, LLC Virus de la grippe réassortis
US20070111309A1 (en) * 2005-10-04 2007-05-17 Daelli Marcelo G Vero cell line adapted to grow in suspension
EP2010557B1 (fr) 2006-03-31 2014-02-26 Wisconsin Alumni Research Foundation Virus de la grippe recombinants à haut titre pour vaccins
US7601356B2 (en) * 2006-07-21 2009-10-13 Medimmune, Llc Methods and compositions for increasing replication capacity of an influenza virus
CN104278014A (zh) * 2006-08-09 2015-01-14 米迪缪尼有限公司 流感血凝素和神经氨酸酶变体
US9474798B2 (en) 2007-06-18 2016-10-25 Wisconsin Alumni Research Foundation Influenza M2 protein mutant viruses as live influenza attenuated vaccines
US8673613B2 (en) * 2007-06-18 2014-03-18 Medimmune, Llc Influenza B viruses having alterations in the hemaglutinin polypeptide
EP2227248B2 (fr) * 2007-11-26 2018-01-31 GlaxoSmithKline Biologicals SA Glucanes avec adjuvant
ES2599908T3 (es) * 2007-11-26 2017-02-06 Glaxosmithkline Biologicals Sa Glucanos beta-1,3-enlazados conjugados
US9028463B2 (en) * 2008-06-30 2015-05-12 Hisamitsu Pharmaceutical Co., Inc. Microneedle device, and method for enhancing the efficacy of influenza vaccine by using microneedle device
EP2318043A4 (fr) * 2008-07-11 2012-01-25 Medimmune Llc Variants de l'hémagglutinine et de la neuraminidase de la grippe
US8613935B2 (en) 2009-02-12 2013-12-24 Medimmune, Llc Influenza hemagglutinin and neuraminidase variants
ES2813347T3 (es) 2009-10-26 2021-03-23 Wisconsin Alumni Res Found Virus recombinantes de la influenza de alto título con replicación mejorada en células Vero
US10130697B2 (en) 2010-03-23 2018-11-20 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Vaccines comprising mutant attenuated influenza viruses
ES2556985T3 (es) 2011-01-11 2016-01-21 Capsugel Belgium Nv Nuevas cápsulas duras que comprenden pululano
CN102423304B (zh) * 2011-11-24 2013-03-13 黑龙江大学 N-2-羟丙基三甲基氯化铵壳聚糖/n,o-羧甲基壳聚糖新城疫减毒活疫苗纳米粒的制备方法
JP2016524915A (ja) 2013-07-15 2016-08-22 ウィスコンシン アルムニ リサーチ ファンデイション Ｍｄｃｋ、ベロ細胞又は卵内で増強された複製を有する高力価の組換えインフルエンザウイルス
US10053671B2 (en) 2014-06-20 2018-08-21 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Mutations that confer genetic stability to additional genes in influenza viruses
EA201791907A1 (ru) 2015-02-26 2018-02-28 Бёрингер Ингельхайм Ветмедика Гмбх Бивалентная вакцина против вируса свиного гриппа
US10633422B2 (en) 2015-06-01 2020-04-28 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Influenza virus replication by inhibiting microRNA lec7C binding to influenza viral cRNA and mRNA
WO2017007839A1 (fr) 2015-07-06 2017-01-12 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Réplication améliorée du virus de la grippe pour l'élaboration de vaccin
CN109477074B (zh) 2016-02-19 2023-01-24 威斯康星旧生研究基金会 用于疫苗开发的改进的乙型流感病毒复制
CA3059527A1 (fr) 2017-04-14 2018-10-18 Capsugel Belgium Nv Capsules de pullulane
BR112019021396A2 (pt) 2017-04-14 2020-04-28 Capsugel Belgium Nv processo para fabricação de pululano
US11241492B2 (en) 2019-01-23 2022-02-08 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Mutations that confer genetic stability to genes in influenza viruses
EP3921413A1 (fr) 2019-02-08 2021-12-15 Wisconsin Alumni Research Foundation (WARF) Lignée cellulaire humanisée
WO2020223699A1 (fr) 2019-05-01 2020-11-05 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Réplication améliorée du virus de la grippe pour l'élaboration de vaccin
US11807872B2 (en) 2019-08-27 2023-11-07 Wisconsin Alumni Research Foundation (Warf) Recombinant influenza viruses with stabilized HA for replication in eggs

Family Cites Families (7)

* Cited by examiner, † Cited by third party
Publication number Priority date Publication date Assignee Title
GB1174854A (en) * 1967-07-07 1969-12-17 Miles Lab New Biologically Active Conjugates
US4003792A (en) * 1967-07-01 1977-01-18 Miles Laboratories, Inc. Conjugates of acid polysaccharides and complex organic substances
FR1604982A (en) * 1968-03-29 1972-06-26 Active protein product - with polymeric carrier
JPS5035325A (fr) * 1973-07-30 1975-04-04
JPS5639022A (en) * 1979-09-05 1981-04-14 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of vaccine
JPS5823847B2 (ja) * 1981-02-06 1983-05-18 株式会社 林原生物化学研究所 抗ヒト蛋白質抗体の製造方法
JPS57136528A (en) * 1981-02-09 1982-08-23 Hayashibara Biochem Lab Inc Preparation of viral vaccine

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